JPH07277968A

JPH07277968A - 肝機能障害予防及び改善剤

Info

Publication number: JPH07277968A
Application number: JP23260393A
Authority: JP
Inventors: Kunio Suetsuna; 邦男末綱
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1993-08-12
Filing date: 1993-08-12
Publication date: 1995-10-24

Abstract

(57)【要約】【目的】魚類眼組織からのドコサヘキサエン酸を含む
脂質を有効成分とする肝機能障害予防及び改善剤を提供
する。【構成】ドコサヘキサエン酸を含む脂質は、肝機能障
害による血清トランスアミナーゼ（ＧＯＴ、ＧＰＴ）露
出を抑制し、蛋白合成能の障害を抑制、又は回復させ
た。更に、病理組織学的にも肝障害による脂肪変性を予
防、又は改善した。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、魚類眼組織からのドコ
サヘキサエン酸（以下、ＤＨＡと称す）を含む脂質を有
効成分とする肝機能障害予防及び改善剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】一般に肝障害は急性肝炎、慢性肝炎、脂
肋肝、肝硬変、劇症肝炎、薬物性肝炎更にウイルス性肝
炎、アルコール性肝炎等が有る。肝細胞の機能低下によ
って引き起こされるこのような肝障害の予防或は改善剤
は種々知られているが、治療効果、副作用等に多くの問
題点が有り、十分満足すべき状態に無い。

【０００３】一方、１９７１年以来のＢａｎｇとＤｙｅ
ｒｂｅｒｇらによるグリーンランドエスキモーについて
の疫学調査に端を発した、魚類脂質の生理学的役割に関
する多くの研究の中で、魚油に含まれるｎ−３系の多価
不飽和脂肪酸（以下、ＰＵＦＡと称す）であるエイコサ
ペンタエン酸とＤＨＡの生理活性機能が注目される様に
なった。ＤＨＡを含む脂質は健康食品、機能性食品、特
定保健用食品として利用できるほか、ＤＨＡエステル等
の医薬品原料としても利用できる。更に高純度ＤＨＡエ
ステルは、学習機能向上作用（記憶改善、健脳作用）の
ほかに、乳癌、大腸癌、肺癌等に対する制癌作用、コレ
ステロール、中性脂肪等の血中脂質低下作用、網膜反射
能向上作用（視力低下抑制作用）、血圧降下作用、抗血
栓作用（血小板凝集抑制作用）、抗アレルギー作用、抗
炎症作用、抗糖尿病作用（血糖値低下）等の生理活性効
果が期待できる。

【０００４】このようにＤＨＡには多くの生理活性効果
が期待できる一方、従来、多くの肝機能障害予防及び改
善剤が提案されているにもかかわらず、魚類眼組織から
のＤＨＡを含む脂質を用いる肝機能障害予防及び改善剤
の報告はなされていない。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、天然
物由来の安全性の高い魚類眼組織を原料として、人体に
危険な化学薬品を用いることなく、脱色、脱臭された高
品質のＤＨＡを多量に含む脂質を用いて、優れた肝機能
障害予防及び改善剤を提供することにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明は、前記の課題を
解決するために鋭意研究した結果、ＤＨＡを多量に含む
脂質が肝機能障害予防や改善に有効であることを見い出
し本発明を完成するに至った。

【０００７】以下、本発明につき更に詳細に説明する。
本発明における、ＤＨＡを多量に含む脂質を用いて、肝
機能障害予防及び改善効果をみることが出来るが、その
場合には第１１８回日本農芸化学会東北支部例会（開催
日時；平成５年７月９日、会場；東北大学農学部）、講
演演題「マグロ眼脂肪生抽出ドコサヘキサエン酸の急性
四塩化炭素肝障害ラットにおよぼす影響」の方法に準拠
し、例えば以下のようにして行うことが出来る。

【０００８】本発明に用いるＤＨＡを多く含む脂質は、
マグロ及び／又はカツオの水産加工副産物から分離精製
することが出来るが、本発明に用いる加工副産物の例と
しては、魚体頭部の眼組織として眼球（水晶体、角膜、
強膜）及びその周辺に存在する脂肪層を含めた部分を挙
げることが出来る。新鮮なマグロ、カツオの頭部眼組織
に加水後、機械的撹拌（以下、ホモジネイトと称す）し
た懸濁液を減圧下で眼脂肪層を分離することが望まし
く、例えば−１０℃〜１０℃にて１０〜６０分程度、減
圧（１０〜１０^−４Ｔｏｒｒ）処理することが望まし
い。ホモジネイト処理する際の加水は行わなくてもよい
が、通常はマグロ、カツオの眼組織１部に対して水１〜
１０部加えてホモジナイズすることが望ましい。処理す
るマグロ、カツオの眼組織はチョパーなどでカットして
も良いが、そのまま処理しても差し支えない。得られる
脂質の酸化安定性を向上させるために、添加する水には
予め抗酸化剤、例えばトコフェノール、卵黄レシチン、
大豆レシチン、茶カテキン、ペプチド等を添加しておく
ことが望ましい。このようにして得られた眼脂肪層は、
冷却後又は冷却しながら遠心分離するが、例えば０℃〜
１０℃にて５〜６０分程度、遠心分離（４０００〜１５
０００ｒｐｍ）すればよい。

【０００９】かくして得られた脂質は、マグロ、カツオ
の眼組織１００部に対して３０〜５０部得ることが出
来、酸価１以下、過酸化物価３以下、色調ロビボンドカ
ラー１０Ｒ＋Ｙ＝３０以下であり、ほぼ無味無臭、無色
透明の脂質を得た。上記の方法で得られた脂質の主要脂
肪酸組成は、Ｃ_１４４〜６％、Ｃ_１６６〜９％、Ｃ
_１６：１６〜９％、Ｃ_１８２〜５％、Ｃ_１８：１１１〜
１３％、Ｃ_１８：２１〜４％、Ｃ_２０：１３〜６％、Ｃ
_{２０：４＋２２：１}６〜９％、Ｃ_２０：５７〜１０％、
Ｃ_２２：６２６〜３３％とＤＨＡが多量に含有されてい
るため、使用目的によっては直接そのまま用いても良
く、あるいはアセトン、ヘキサンを用いる溶媒抽出、あ
るいは硝酸銀を担持したカラム分別、あるいは高速液体
クロマトグラフィー（以下、ＨＰＬＣと称す）による逆
相ＨＰＬＣカラム及び溶離液９０％アセトニトリル水を
用いる分離精製法等によってＤＨＡ濃度を容易に高めう
る。

【００１０】本発明における魚類眼組織からのＤＨＡを
含む脂質を有効成分とする肝機能障害予防及び改善剤
は、前記のＤＨＡを含む脂質の軟・硬カプセル剤又は錠
剤、顆粒剤、細粒剤、水溶性懸濁液、油性製剤（リポソ
ーム製剤、リピッドマイクロスフェアー製剤）などの形
態にて経口的に投与される。これらの剤の製造は、ＤＨ
Ａを含む脂質に界面活性剤、賦形剤、滑沢剤、矯味剤、
矯臭剤、佐剤（懸濁剤、潤滑剤）及び必要に応じて腸溶
製剤とするために皮膜形成物質、コーティング剤などを
用い適宜行なうことができる。投与量は、成人に対しＤ
ＨＡを含む脂質の場合、０．１〜１０ｇを１日数回に分
けて投与する。このＤＨＡを含む脂質は常食されている
魚介類の成分であるので毒性はなく、従って上記投与量
を超えて役与しても何等支障はない。

【００１１】一方、肝障害になると、血液中のグルタミ
ン酸−オキザロ酢酸トランスアミナーゼ（以下、ＧＯＴ
と称す）、グルタミン酸−ピルビン酸トランスアミナー
ゼ（以下、ＧＰＴと称す）などの肝臓の酵素の増加、血
清のビリルビンの上昇、肝細胞の壊死など生化学的及び
組織学的に特徴ある変化が現れる。肝障害の研究のため
に、実験的な肝炎のモデルが開発されている。その中
で、ラットを用いる四塩化炭素（以下、ＣＣｌ_４と称
す）による肝障害は、ＣＣｌ_４がチトクロームＰ−４５
０によりフリーラジカル（・ＣＣｌ_２）に変換し、この
フリーラジカルが肝細胞膜蛋白に結合し、細胞活性を抑
制するため、及び膜脂質の過酸化反応を促進し、膜構造
を変化させることにより引き起こると考えられている。
又、肝病理組織像としては、ＣＣｌ_４投与により脂肪変
性と思われる肝細胞の空砲化と萎縮が認められる。

【００１２】

【発明の効果】本発明の魚類眼組織からのＤＨＡを含む
脂質を有効成分とする肝機能障害予防及び改善剤の投与
によって、肝障害による血清トランスアミナーゼ（ＧＯ
Ｔ，ＧＰＴ）露出を抑制し、又、総蛋白量、アルブミン
量の減少を抑制することにより、肝臓蛋白合成能の障害
を抑制、又は、回復させる効果が認められ、更に、病理
組織学的にも肝機能障害に対して予防及び改善効果が認
められるものである。

【００１３】

【実施例】以下に、本発明を実施例として具体的に説明
するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものでは
ない。

【００１４】被験試料の調製新鮮なミナミマグロの頭部８Ｋｇの両眼部を中心に切断
した後、眼組織５００ｇを採取した。これに水２．５_ｌ
を加え、０℃で冷却しながらホモジネイト処理した。更
に、ホモジネイトした眼組織懸濁液を、０℃で冷却しな
がら２０分間、１０^−１Ｔｏｒｒの真空度で減圧処理し
た。減圧処理により上層へ分離してきた眼脂肋層４５０
ｇを、０℃で冷却しながら２０分間、１２０００ｒｐｍ
の回転数で遠心分離した。これら一連の減圧下冷却遠心
分離操作を行うことにより脂質１６０ｇ、対マグロ頭部
２％を得た。脂質中のＤＨＡ量は下記定量法により図１
に示すように２７．８％であり、酸価０．２、過酸化物
価１．１，色調ロビボンドカラー１０Ｒ＋Ｙ＝１５であ
った。

【００１５】（定量法）脂質１００ｍｇを正確にとり，
１０％可性ソーダを含むメタノール溶液を加え１ｍｌと
する。これを加熱しつつ激しく振り混ぜ完全に溶解した
液についてガスクロマトグラフィーにより各脂肪酸をそ
のメチルエステルとして定量する。定量条件ガスクロマト装置；島津ＧＣ−１４Ａ型カラム；１０％ＤＥＧＳ３ｍＸ３ｍｍＩＤ検出器；ＦＩＤキャリアーガス；Ｎ_２ガス、４０ｍｌ／ｍｉｎカラム温度；２１０℃ 注入口、検出器温度；２３０℃ Ｒａｎｇｅ；０．０２Ｖ，Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔ
ｙ；１０^３ＭΩ

【００１６】上記２７．８％ＤＨＡを含む脂質を被験試
料とし、それぞれラット体重ｋｇ当り２０ｍｌを、ゾン
デを用いて経口投与した。

【００１７】試験方法体重２００ｇのウイスター系雄性ラットを用い、又、肝
臓障害の起炎薬物としてＣＣｌ_４を５０％となるように
オリーブ油で希釈して、２ｍｌ／ｋｇを１６時間絶食さ
せたラットに腹腔内投与した。このＣＣｌ_４の腹腔内投
与から８時間後に頚静脈より、血液約２．５ｍｌを採血
し、更に、ＣＣｌ_４投与２４時間後に放血致死させた。
これら血清を、血清ＧＯＴ及びＧＰＴ活性、総ビリルビ
ン、ロイシンアミノペプチダーゼ、アルカリフォスファ
ターゼ、総蛋白、アルブミン量等の血清生化学検査に供
した。

【００１８】試験群の構成Ｉ_８群；比較としてＣＣｌ_４投与に代えオリーブ油のみ
を２ｍｌ／ｋｇ腹腔内投与、８時間後に採血。Ｉ_２４群；比較としてＣＣｌ_４投与に代えオリーブ油の
みを２ｍｌ／ｋｇ腹腔内投与、２４時間後に採血。ＩＩ_８群；比較としてＣＣｌ_４投与のみ、８時間後に採
血。ＩＩ_２４群；比較としてＣＣｌ_４投与のみ、２４時間後
に採血。ＩＩＩ_８群；ＣＣｌ_４投与２４及び１時間前に被試験料
を投与、８時間後に採血。ＩＩＩ_２４郡：ＣＣｌ_４投与２４及び１時間前に被試験
料を投与、２４時間後に採血。

【００１９】試験結果上記の血清生化学検査の結果を第１表に記載した。

【表１】この結果、ＣＣｌ_４を単回投与するとＧＯＴ、ＧＰＴ
は、８時間後には２７１７、１３１３Ｕ／ｌ、２４時間
後には６５８０，２２５１Ｕ／ｌに達した。総ビリルビ
ン、ロイシンアミノペプチダーゼ、アルカリフォスファ
タターゼ活性は変化しなかった。総蛋白とアルブミンは
ＣＣｌ_４投与の８時間後には変化なく、２４時間後には
各々３２％、２９％低下した。ＤＨＡを含む脂質（２０
ｍｌ／ｋｇ）をＣＣＬ_４の２４時間前及び１時間前に投
与すると、ＣＣｌ_４投与２４時間後でＧＯＴ、ＧＰＴの
上昇を各々４８％、５７％抑制し、血清トランスアミナ
ーゼ露出を抑制した。又、ＤＨＡを含む脂質の投与によ
りＣＣｌ_４投与２４時間後の総蛋白、アルブミン量の減
少を抑制し、肝蛋白合成能の障害を抑制、又は回復させ
た。一方、採血後、直ちに摘出した肝臓は、電顕的検索
による病理組織学的検査に供し、その結果を図２に示し
た。ＣＣｌ_４投与により脂肪変性と思われる肝細胞の空
砲化と萎縮が認められ、ＤＨＡを含む脂質投与によっ
て、細胞膜透過性機能維持、細胞膜安定効果が起こり、
肝細胞を保護した。

【００２０】

【図面の簡単な説明】

【図１】ガスクロマトグラフィーによる多価不飽和脂肪
酸（ＰＵＦＡ）の分折。

【図２】ａ）ＣＣｌ_４投与後２４時間後のラット肝臓の
電子顕微鏡写真。ｂ）ＣＣｌ_４投与後１２及び１時間前にＤＨＡを含む脂
質を投与、２４時間後のラット肝臓の電子顕微鏡写真。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】魚類眼組織からのドコサヘキサエン酸を
含む脂質を有効成分とする肝機能障害予防及び改善剤。