JPH07278080A

JPH07278080A - アラニルアラニノール誘導体

Info

Publication number: JPH07278080A
Application number: JP7338894A
Authority: JP
Inventors: Daisuke Kamimura; 大輔上村; Akihiro Yamada; 昭浩山田; Kaoru Yamada; 薫山田
Original assignee: Sagami Chemical Research Institute
Current assignee: Sagami Chemical Research Institute
Priority date: 1994-04-12
Filing date: 1994-04-12
Publication date: 1995-10-24

Abstract

(57)【要約】【目的】抗腫瘍剤としての利用が期待される新規物
質、アラニルアラニノール誘導体を提供する。【構成】一般式（１）【化１】（式中、Ｒ¹ 、Ｒ²は独立に置換基を有していてもよい
芳香族基を表し、Ｒ³、Ｒ ⁴は独立に、水素原子、ベンジ
ルオキシカルボニル基、ｔ−ブチルオキシカルボニル
基、または置換基を有していてもよい脂肪族もしくは芳
香族アシル基を表す。ただし、Ｒ¹ 、Ｒ² の一方が無置
換フェニル基である場合には、他方は無置換フェニル基
以外の基である。）で表されるアラニルアラニノール誘
導体。【効果】上記アラニルアラニノール誘導体は、マウス
リンパ性白血病細胞（Ｐ３８８）に対する増殖阻害活性
を有し、抗腫瘍剤としての用途を有する。本物質は容易
に合成し得るので必要に応じ、大量に供給できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は下記一般式（１）

【０００２】

【化２】

【０００３】（式中、Ｒ¹ 、Ｒ²は独立に置換基を有し
ていてもよい芳香族基を表し、Ｒ³、Ｒ ⁴は独立に、水素
原子、ベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブチルオキシ
カルボニル基、または置換基を有していてもよい脂肪族
もしくは芳香族アシル基を表す。ただし、Ｒ¹ 、Ｒ² の
一方が無置換フェニル基である場合には、他方は無置換
フェニル基以外の基である。）で表されるアラニルアラ
ニノール誘導体に関するものである。本化合物は、癌細
胞であるマウスリンパ性白血病細胞（Ｐ３８８）に対し
てインビトロでの増殖阻害活性を持ち、抗腫瘍剤として
の用途を有する。

【０００４】

【従来の技術】天然物質由来の抗腫瘍剤はアドリアマイ
シン、マイトマイシン、ビンカアルカロイド等、数多く
知られているが、必ずしも満足の行かない治療成績や重
篤な副作用等の点で問題が残っている。また、著しい効
果がみられる物質、例えばタキソールやハリコンドリン
Ｂが見出されても供給量が不十分で、試験も含め、実際
に活用できない例が多いのが実状である。一方、医療の
場では常により有効で、より副作用の少ない薬剤が求め
られている。

【０００５】なお、下記式（２）

【０００６】

【化３】

【０００７】の構造を持つフェニルアラニルフェニルア
ラニノールは、トウダイグサ（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｆ
ｉｓｃｈｅｒｉａｎａＳｔｅｕｄｅｌ）の成分として
知られている（D. Uemura et al., Chem. Lett., 537,
1975. ）が、抗腫瘍活性を有することは知られていな
い。また、フェニル基に置換基を有するものは知られて
いない。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】そこで本発明は、新規
な基本構造を有する抗腫瘍性物質を提供することを目的
とする。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者等は種々の化合
物を探索した結果、特定の新規アラニルアラニノール誘
導体が、Ｐ３８８に対してインビトロの増殖阻害活性を
有することを見出し、本研究を完成した。

【００１０】即ち、本発明は一般式（１）

【００１１】

【化４】

【００１２】（式中、Ｒ¹ 、Ｒ²は独立に置換基を有し
ていてもよい芳香族基を表し、Ｒ³、Ｒ ⁴は独立に、水素
原子、ベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブチルオキシ
カルボニル基、または置換基を有していてもよい脂肪族
もしくは芳香族アシル基を表す。ただし、Ｒ¹ 、Ｒ² の
一方が無置換フェニル基である場合には、他方は無置換
フェニル基以外の基である。）で表されるアラニルアラ
ニノール誘導体を提供するものである。

【００１３】前記一般式（１）中、Ｒ¹ 、Ｒ²で示され
る芳香族基としては、フェニル基、ナフチル基、フリル
基等が例示できる。Ｒ¹ 、Ｒ²の少なくとも一方は置換
基を有し、その置換基としてはメチル基、エチル基等の
低級アルキル基、フッ素原子、塩素原子、臭素原子等の
ハロゲン原子、メトキシ基、エトキシ基等の低級アルコ
キシ基、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、水酸基、カル
ボキシル基、ホルミル基等が挙げられる。

【００１４】前記一般式（１）中、Ｒ³、Ｒ⁴で示される
脂肪族アシル基としては炭素数２から１０の直鎖状もし
くは分枝状の脂肪族アシル基が好ましく、具体的にはア
セチル基、プロパノイル基、イソプロパノイル基、グリ
シル基、アラニル基等が挙げられる。芳香族アシル基と
しては、置換基を有していてもよいベンゾイル基、ナフ
トイル基、フロイル基、テノイル基、ニコチノイル基等
が例示できる。置換基としてはメチル基、エチル基等の
低級アルキル基、フッ素原子、塩素原子、臭素原子等の
ハロゲン原子、メトキシ基、エトキシ基等の低級アルコ
キシ基、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、水酸基、カル
ボキシル基、ホルミル基等が挙げられる。

【００１５】本発明の前記一般式（１）で表される新規
アラニルアラニノール誘導体は一般に以下のようにして
得られる。

【００１６】

【化５】

【００１７】Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル（以下、ＢＯ
Ｃと略す）−アラニン誘導体（３）とアラニノール誘導
体（４）を例えばジシクロヘキシルカルボジイミド（Ｄ
ＣＣ）等の縮合剤をヒドロキシベンツトリアゾール（Ｈ
ＯＢＴ）などの縮合補助剤の存在下作用させＢＯＣ−ア
ラニルアラニノール誘導体（５）を得る。なおＢＯＣ−
アラニン誘導体は対応するアラニン誘導体に２−（ｔ−
ブトキシカルボニルオキシイミノ）−２−フェニルアセ
トニトリル（ＢＯＣＯＮ）を塩基存在下作用させて、ま
たアラニノール誘導体は対応するアラニン誘導体を還元
して得る。

【００１８】ＢＯＣ−アラニルアラニノール誘導体
（５）の水酸基を、例えば酸無水物または酸クロライド
をピリジンなどの塩基存在下で作用させてアシル化し、
ＢＯＣ−アラニルアシルアラニノール誘導体（６）を得
る。この化合物（６）をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）で
処理してＢＯＣ基をはずし、生成したアミノ基に対し前
述の方法でアシル化を行い、アラニルアラニノール誘導
体（１）を得る。

【００１９】本発明における前記一般式（１）に含まれ
る化合物としては具体的には、

【００２０】

【化６】

【００２１】などを例示することができる。以下、実施
例及び試験例により更に詳細に説明するが、本発明はそ
れらに限定されるものではない。

【００２２】

【実施例】

実施例１（７）の合成

【００２３】

【化７】

【００２４】水１００ｍｌ、１，４−ジオキサン１００
ｍｌ、Ｌ−フェニルアラニン２５ｇ、２−（ｔ−ブトキ
シカルボニルオキシイミノ）−２−フェニルアセトニト
リル（ＢＯＣＯＮ）９３．３ｇ、トリエチルアミン３
１．５ｍｌを３時間室温で攪はんした後、水２００ｍｌ
を加えて酢酸エチル４００ｍｌで３回洗浄した。１５％
クエン酸水溶液で水層をｐＨ３に調製後、酢酸エチル４
００ｍｌで２回抽出し、抽出液を水４００ｍｌで３回洗
浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後濃縮して（１
３）の粗製物を３９．５ｇを得た。

【００２５】（１３）の粗製物１．５ｇ、パラクロロフ
ェニルアラニノール１．１ｇ、ジシクロヘキシルカルボ
ジイミド（ＤＣＣ）１．５ｇ、ヒドロキシベンツトリア
ゾール−水（ＨＯＢＴ−H₂O ）１．８ｇ、ジメチルホル
ムアミド（ＤＭＦ）３０ｍｌを３．５時間攪はんした。
ＤＭＦ留去後酢酸エチル２００ｍｌに溶かし、飽和炭酸
水素ナトリウム水溶液２００ｍｌ、２Ｍクエン酸水溶液
２００ｍｌ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液２００ｍ
ｌ、水２００ｍｌで洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾
燥した後濃縮して（１４）の粗製物をジアステレオマー
混合物として２．７ｇ得た。

【００２６】（１４）の粗製物９６２・２ｍｇ、無水酢
酸７ｍｌ、ピリジン１４ｍｌを室温で１６時間攪はんし
た。濃縮して（１５）を１．０８ｇ得た。（１５）１．
０４ｇにＴＦＡ１０ｍｌを加え、室温で１５分攪はん
し、薄層クロマトグラフィ（ＴＬ）Ｃで反応が完結した
ことを確認してから濃縮した。シリカゲルカラムクロマ
トグラフィーで精製し、一組のジアステレオマー（１
６、高極性生成物：４０２・８ｍｇ、低極性生成物：３
２１・６ｍｇ、混合物：１２７・７ｍｇ）を得た。

【００２７】（１６）のジアステレオマー混合物８３ｍ
ｇにベンゾイルクロライド５０μｌ、炭酸水素ナトリウ
ム４３・５ｍｇ、ジクロロメタン１０ｍｌを加え室温で
６０分、５０℃で３０分攪はんし濃縮後、水２０ｍｌ加
え、クロロホルム３０ｍｌで２回抽出した。シリカゲル
カラムクロマトグラフィー、ＴＬＣで精製し一組のジア
ステレオマー（７、高極性生成物３１．１ｍｇ、低極性
生成物１６．３ｍｇ）を得た。

【００２８】高極性生成物¹ H-NMR(CDCl₃) :δ7.72(2H,dd,J=7.9,2.0Hz), 7.20-7.5
3(10H,m), 7.02(2H,d,J=8.5Hz), 6.74(1H,br.d,J=7.9H
z), 6.14(1H,br.d,J=9.1Hz), 4.80(1H,dt,J=7.3,6.1H
z), 4.29(1H,m), 3.95(2H,m), 3.11(1H,dd,J=6.7,15.0H
z), 3.08(1H,dd,J=7.8,15.0Hz), 2.66(1H,dd,J=6.7,14.
0Hz), 2.56(1H,dd,J=7.3,14.0Hz), 1.98(3H,s).

【００２９】低極性生成物¹ H-NMR(CDCl₃) :δ6.97-7.72(14H,m), 6.65(1H,br.d,J=
7.9Hz), 5.97(1H,br.d,J=8.5Hz), 4.75(1H,dt,J=7.9,6.
1Hz), 4.32(1H,m), 3.94(1H,dd,J=5.5,12.0Hz),3.80(1
H,dd,J=4.8Hz), 3.11(1H,dd,J=6.0,13.0Hz), 3.05(1H,d
d,J=9.1,13.0Hz),2.71(2H,d,J=6.7Hz), 2.02(3H,s).

【００３０】実施例２（８）の合成

【００３１】

【化８】

【００３２】実施例１で得られた（１６）のうち、高極
性の化合物１４１．１ｍｇに無水酢酸４ｍｌ、ピリジン
８ｍｌを加え、室温で２時間攪はんした後、濃縮して
（８）の片方のジアステレオマーを１３０．０ｍｇ得
た。

【００３３】¹H-NMR(CDCl₃) :δ7.14(7H,m), 6.98(2H,
d,J=8.5Hz), 6.04(1H,br.d,J=7.3Hz),5.95(1H,br.d,J=
7.3Hz), 4.56(1H,dt,J=9.1,6.1Hz), 4.25(1H,m), 3.93
(2H,m),3.00(2H,m), 2.69(1H,dd,J=6.7,15.0Hz), 2.52
(1H,dd,J=7.9,15.0Hz), 2.03(3H,s), 1.97(3H,s).

【００３４】実施例１で得られた（１６）のうち、低極
性の化合物１４５．９ｍｇを同様に処理して（８）の他
方のジアステレオマーを１３７．３ｍｇ得た。

【００３５】¹H-NMR(CDCl₃) :δ7.16-7.33(7H,m), 7.04
(2H,d,J=8.5Hz), 5.98(1H,br.d,J=7.3Hz), 5.81(1H,br.
d,J=11.5Hz), 4.50(1H,m), 4.27(1H,m), 3.90(1H,dd,J=
5.5,12.0Hz), 3.73(1H,dd,J=4.2,12.0Hz), 2.98(2H,m),
2.70(2H,d,J=7.3Hz), 2.01(3H,s), 1.95(3H,s).

【００３６】実施例３（９）の合成

【００３７】

【化９】

【００３８】実施例１で得られた（１４）のジアステレ
オマー混合物１．６４４ｇ、ベンゾイルクロライド０．
６６ｍｌ、ピリジン１０ｍｌを室温で１６時間、７５℃
で１時間攪はんし、濃縮後酢酸エチル８０ｍｌに溶解し
水１００ｍｌで洗浄し、酢酸エチル層を濃縮した。シリ
カゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、（１７）を
１．４２６ｇ得た。この１．３９６ｇにＴＦＡ１０ｍｌ
を加え、室温で１５分攪はんし、ＴＬＣで反応が完結し
たことを確認してから濃縮した。シリカゲルカラムクロ
マトグラフィーで精製し、（１８）のジアステレオマー
混合物を１．０８８ｇ得た。

【００３９】（１８）のジアステレオマー混合物５３
４．５ｍｇ、ベンゾイルクロライド２１３μｌ、ピリジ
ン２０ｍｌを３時間攪はんした。濃縮後水１００ｍｌ、
酢酸エチル１００ｍｌで抽出し酢酸エチル層を濃縮し
た。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、
（９）のジアステレオマー混合物を１７３・４ｍｇ得
た。

【００４０】¹H-NMR(CDCl₃) :δ7.89-7.99(2H,m), 7.66
-7.00(13H,m), 5.59-5.78(1H,m), 4.33-4.60(2H,m), 3.
92-4.28(2H,m), 2.86-3.23(2H,m), 2.50-2.83(2H,m).

【００４１】実施例４（１０）の合成

【００４２】

【化１０】

【００４３】ＤＬ−オルトフルオロフェニルアラニン２
０７．１ｍｇ、リチウムアルミニウムハイドライド１２
８．２ｍｇをジエチルエーテル２０ｍｌで２０時間還流
した。室温に冷却後水５ｍｌ、１５％水酸化ナトリウム
水溶液１０ｍｌ加えた後、酢酸エチル５０ｍｌで３回抽
出し濃縮してＤＬ−オルトフルオロフェニルアラニノー
ルの粗製物（１９）を１７０・３ｍｇ得た。実施例１で
得られた（１３）の粗製物３９４．５ｍｇ、（１９）を
１５９．６ｍｇ、ＤＣＣ４４０．５ｍｇ、ＨＯＢＴ−H₂
O ２８２．５ｍｇ、ＤＭＦ２０ｍｌを７時間攪はんし,
ＤＭＦ留去後酢酸エチル２０ｍｌに溶かし、飽和炭酸水
素ナトリウム水溶液２０ｍｌ、２Ｍクエン酸水溶液２０
ｍｌ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液２０ｍｌ、水２０
ｍｌで順次洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥した後
濃縮して（２０）の粗製物をジアステレオマー混合物と
して得た。

【００４４】この（２０）に無水酢酸７ｍｌ、ピリジン
１４ｍｌを加え、室温で４時間攪はんして、濃縮した後
シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、（２
１）のジアステレオマー混合物を３７５．３ｍｇ得た。
これにＴＦＡ８ｍｌを加え、室温で３０分攪はんし、Ｔ
ＬＣで反応が完結したことを確認してから濃縮した。ベ
ンゾイルクロライド１５０μｌ、ピリジン５ｍｌ、ジク
ロロメタン２０ｍｌを加え室温で９０分攪はんし濃縮し
た後、水５０ｍｌ加え、酢酸エチル５０ｍｌで２回抽出
し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離し一組
のジアステレオマー（１０、高極性生成物：４８・５ｍ
ｇ、低極性生成物：３６・５ｍｇ、混合物：４９・９ｍ
ｇ）を得た。

【００４５】高極性生成物¹ H-NMR(CDCl₃) :δ7.00-7.33(15H,m), 6.23(1H,br.d,J=
7.7Hz), 4.15(1H,dt,J=7.9,7.9Hz), 4.38(1H,m), 4.02
(2H,d,J=5.5Hz), 2.98(2H,m), 2.74(1H,m), 2.04(3H,
s), 1.98(3H,s,).

【００４６】低極性生成物¹ H-NMR(CDCl₃) :δ6.94-7.36(15H,m), 5.78(1H,br.d,J=
9.1Hz), 4.57(1H,dt,J=7.3,5.5=Hz), 4.36(1H,m,), 3.9
4(1H,dd,J=4.8,12.0Hz), 3.79(1H,dd,J=4.2,12.0Hz),
3.15(1H,dd,J=6.1,14.0Hz), 3.00(1H,dd,J=4.8,14.0H
z), 2.79(2H,m), 2.03(3H,s).

【００４７】実施例５（１１）の合成

【００４８】

【化１１】

【００４９】ＤＬ−パラニトロフェニルアラニン５１
３．０ｍｇ、ボラン−ＴＨＦコンプレックス（１Ｍ）
６．０ｍｌ、ＴＨＦ５ｍｌを攪はんし、９０分後ボラン
−ＴＨＦコンプレックス（１Ｍ）１０ｍｌを追加し、６
２時間攪はんを続けた。水２５ｍｌ、水酸化ナトリウム
１ｇ加えた後酢酸エチル５０ｍｌで３回抽出し濃縮して
ＤＬ−パラニトロフェニルアラニノール（２２）の粗製
物を得た。ＢＯＣ−フェニルアラニノール（１３）６０
４．０ｍｇ、先の反応で得られた（２２）の粗製物を全
量、ＤＣＣ５９１．０ｍｇ、ＨＯＢＴ−H₂O ６９４．９
ｍｇ、ＤＭＦ２０ｍｌを８時間攪はんし,ＤＭＦ留去後
酢酸エチル５０ｍｌに溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム
水溶液５０ｍｌ、２Ｍクエン酸水溶液５０ｍｌ、飽和炭
酸水素ナトリウム水溶液５０ｍｌ、水５０ｍｌで順次洗
浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥した後濃縮して（２
３）の粗製物をジアステレオマー混合物として得た。こ
れに無水酢酸８ｍｌ、ピリジン１６ｍｌを加え、室温で
２時間攪はんして濃縮した後シリカゲルカラムクロマト
グラフィーで精製し、（２４）のジアステレオマー混合
物を２５７・０ｍｇ得た。

【００５０】（２４）のジアステレオマー混合物２７
５．０ｍｇにＴＦＡ５ｍｌを加え、室温で２０分攪はん
し、ＴＬＣで反応が完結したことを確認してから濃縮
し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離し一組
のジアステレオマー（２５、高極性生成物：９．１ｍ
ｇ、低極性生成物：１４．９ｍｇ、混合物：１３１．７
ｍｇ）を得た。

【００５１】この内のジアステレオマー混合物１３１．
７ｍｇにベンゾイルクロライド５０μｌ、ピリジン５０
μｌ、ジクロロメタン１０ｍｌを加え室温で１６０分攪
はんし濃縮した。濃縮物をベンゼンに溶かし残ったもの
をピリジンから再結晶（９．５ｍｇ）し、更にＰＴＬＣ
で精製して（１１）のジアステレオマー混合物を３．１
ｍｇ得た。

【００５２】¹H-NMR(CDCl₃) :δ7.97(2H,d,J=8.5Hz),
7.24-7.71(7H,m), 6.53(1H,br.d,J=6.7Hz), 6.21(1H,b
r.d,J=8.5Hz), 4.73(1H,dt,J=8.5,7.3Hz), 4.41(1H,m),
4.00(1H,dd,J=5.5,12.0Hz), 3.86(1H,dd,J=4.2,12.0H
z), 3.15(2H,m), 2.98(2H,m), 2.06(3H,s).

【００５３】実施例６（１２）の合成

【００５４】

【化１２】

【００５５】実施例５で得られた（２５）のうち、高極
性化合物４．６ｍｇに無水酢酸３．５ｍｌ、ピリジン７
ｍｌを加え、室温で１．５時間攪はんした後、濃縮して
（１２）の極性の高い方のジアステレオマーを２．９ｍ
ｇ得た。

【００５６】¹H-NMR(CDCl₃) :δ8.12(2H,dd,J=6.8,2.0H
z), 7.13-7.33(7H,m), 6.18(1H,br.d,J=7.7Hz), 5.99(1
H,br.d,J=7.4Hz), 4.56(1H,dt,J=8.0,8.0,6.7Hz), 4.32
(1H,m), 4.04(1H,dd,J=4.0,12.0Hz), 3.92(1H,dd,J=4.
9,12.0Hz), 3.01(2H,m), 2.86(1H,dd,J=6.8,14.0Hz),
2.70(1H,dd,J=7.0,12.0Hz), 2.05(3H,s), 1.98(3H,s).

【００５７】実施例５で得られた（２５）のうち、低極
性化合物７．５ｍｇを同様に処理して（１２）の他方の
ジアステレオマーを８．２ｍｇ得た。

【００５８】¹H-NMR(CDCl₃) :δ8.12(2H,d,J=9.1Hz),
7.15-7.43(7H,m), 6.08(1H,br.d,J=10Hz), 5.99(1H,br.
d,J=7.9Hz), 4.52(1H,dt,J=7.9,6.1Hz), 4.37(1H,m),
3.95(1H,dd,J=5.5,12.0Hz), 3.76(1H,dd,J=4.8,12.0H
z), 3.02(2H,m), 2.85(2H,d,J=6.7Hz), 2.04(3H,s), 1.
95(3H,s).

【００５９】試験例１マウスリンパ性白血病細胞（Ｐ３８８）を２−ヒドロキ
シエチルジスルフィド５μＭ、硫酸カナマイシン１００
μｇ／ｍｌを添加した１０％牛胎児血清含有のＲＰＭＩ
−１６４０培地に加え、培養細胞を１ｘ１０⁴ 個／ｍｌ
に調製し、前記アラニルアラニノール誘導体を所定の濃
度になるように添加し、ＣＯ₂ 培養器（ＣＯ₂ ５％、
湿度１００％、３７℃）で４日間培養した。ＭＴＴ比色
法により生存細胞数を計測して、対照群に対する増殖阻
害率から５０％細胞増殖阻害濃度（ＩＣ₅₀）を求めた。
結果を表１に示す。

【００６０】

【表１】

【００６１】

【発明の効果】本発明物質は癌細胞Ｐ３８８に対してイ
ンビトロで増殖阻害活性を示し、抗腫瘍剤としての利用
が期待される。また、容易に合成し得るので必要に応
じ、大量に供給できる。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記一般式（１）【化１】（式中、Ｒ¹ 、Ｒ²は独立に置換基を有していてもよい
芳香族基を表し、Ｒ³、Ｒ ⁴は独立に、水素原子、ベンジ
ルオキシカルボニル基、ｔ−ブチルオキシカルボニル
基、または置換基を有していてもよい脂肪族もしくは芳
香族アシル基を表す。ただし、Ｒ¹ 、Ｒ² の一方が無置
換フェニル基である場合には、他方は無置換フェニル基
以外の基である。）で表されるアラニルアラニノール誘
導体。