JPH0728605B2 - モルケラ属菌種の培養法 - Google Patents

モルケラ属菌種の培養法

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JPH0728605B2
JPH0728605B2 JP61502641A JP50264186A JPH0728605B2 JP H0728605 B2 JPH0728605 B2 JP H0728605B2 JP 61502641 A JP61502641 A JP 61502641A JP 50264186 A JP50264186 A JP 50264186A JP H0728605 B2 JPH0728605 B2 JP H0728605B2
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Description

【発明の詳細な説明】 本発明はモルケラ（Morchella）属の菌種であるアミガ
サダケ（それらの成熟した食用子嚢果を含む）の培養に
関する。
発明の背景 モルケラ属にはアルガサダケまたはスポンジマッシュル
ームとして知られるキノコが含まれる。それらは子嚢菌
類に属する。真のアミガサダケは食べることができ、し
かも美味である。実際に、ある人達はそれらが全ての菌
類のうちで最もおいしいと考えている。これらのキノコ
の味は早春に森を探索する人々によって知られ愛されて
いるが、今までアミガサタケは一年を通じて商業生産に
役立つ培養法が限られていたので、一般の人々には手に
入らないものであった。
キノコの鑑識家には、アミガサダケはそれらの子嚢果ま
たは子実体（目に見えるキノコ）によって知られてい
る。もしもこれらのキノコが野生または自然の状態で培
養することなく自由に生育するならば、培養法はそれら
の生産高を最大限に増加するように展開されたであろ
う。しかしながら、これはその場合でなかった。アミガ
サダケを戸外で生育させる報告はあるが、一年を通じて
環境制御室で一般のハラタケ科（Agaricus）の菌種やそ
の他の食用キノコのようにアミガサダケを培養すること
はだれも成功しなかった。
子嚢果または子実体の生産はアミガサダケの有性生殖サ
イクルの成熟した具体化である。子嚢胞子や生殖胞子
（germ spore）を含む成熟した子嚢果は、２つの半数核
（一倍体）の内部接合によって倍数核（二倍体；これは
減数分裂を受けて新しい一倍体の子嚢胞子を形成する）
を形成することにより特徴づけられるこの菌のライフサ
イクルにおける全盛期を表わす。減数分裂に先立つ自家
生殖および異形接合は両方ともモルケラ属について報告
されている。もう１つのライフサイクルは無性生殖過程
であり、この過程で分生子（無性胞子）が作られ、それ
から半数核を含む新しい菌糸体が生長する。
また、ある種の条件下で菌種を保護する手段として、栄
養菌糸体は菌核（不利な条件の期間中休眠しうる）とし
て知られる硬い塊状物に集合する。従って、アミガサダ
ケの子実体の形成は選ばれた条件（すなわち、アミガサ
ダケ収集に対して、“凶年”を経験したキノコ狩りの人
々によって認識された状況）の間に起こる。
本発明の一般的な目的は、制御された条件下で一年を通
じて子嚢果の商業生産に適した方法によりアミガサダケ
を培養する方法を提供することである。
定義 明確にするために、本明細書において使用する用語は一
般にアレクソポーラス（C.J.Alexopoulos）およびミム
ズ（C.W.Mims）,Introductory Mycology,第３版，ジョ
ン・ウイリー＆サンズ，ニューヨーク（1979）によって
次のように定義されている： 子嚢果（ascocarp）−子嚢を含む子実体。
子嚢胞子（ascospore）−子嚢の中に生ずる減数胞子（m
eiospore）。
子嚢（ascus）−通常核融合および減数分裂の後の遊離
細胞形成によって形成された一定数（一般には８個）の
子嚢胞子を含む嚢状の細胞であり、子嚢菌亜門に特徴的
である。
分生子柄（conidiophore）−体細胞菌糸から生ずる単一
または分岐した菌糸であって、その先端または側面に１
つ以上の分生子細胞をもつ。
分生子（conidium）−分生胞子とも呼ばれ、通常細胞の
先端または側面に形成される非運動性の無性胞子；いく
つかの場合には予め存在する菌糸細胞が分生子に変形し
うる。
菌糸（hypha）−大部分の菌類の栄養構造単位；無性核
を含む円筒形の糸状細胞。
菌糸体（mycelium）−菌類の本体（葉状体）を構成する
菌糸の集合体。
原基（primordium）−あらゆる構造の初期段階。
菌核（sclerotium）−本明細書中において、菌核は貯蔵
栄養分を含み、集合することができ、埋め込まれた量の
基層を含み、また硬い構造（本明細書では硬い菌核と称
す）を形成しうる菌糸と定義される。
基層（substratum）−本明細書中において、基層は菌類
が生長して子実体を生ずる生息地として役立つ土のよう
な物質と定義される。
発明の要約 本発明はモルケラ属の菌種を培養して成熟した子嚢果ま
たは子実体を生産することに関する。栄養菌糸体は栄養
分を与えられて菌核（ある種の培養下では硬い菌核の形
をとり得る）を生ずる。栄養分に富む菌核は、菌核から
子実体を生ずるための完全な栄養必要条件を実質的に満
たすのに十分な貯蔵栄養素を含有する。栄養供給の後
に、菌糸体および付随する菌核の環境が有性生殖サイク
ル（この過程で子嚢果、すなわち目で見えるキノコが生
ずる）を促進するように実質的に変えられる。利用可能
な外因性栄養素を除去することは、この過程にとって有
用である。また、菌糸体および付随する菌核を高レベル
の水にさらすこともこの過程にとって有用である。有性
生殖サイクルはまず初めに原基（原始細胞）の出現によ
って証明され、この原基は最高度に発達して成熟子実体
となる。原基の出現から子実体の成熟時期ごろまでの生
長期間は特に重要な発生時期であり、発育しつつある子
実体の発育中断を最小限に抑えるように諸条件が注意深
く制御される。発育しつつある子実体の発育中断を最小
限にする１つの重要な要因は、菌糸体および付随する菌
核中に十分な栄養分（特に中性脂質）を確実に貯えさせ
て、子実体の成熟を助けることである。他の重要な要因
は子実体発生中の正確な空気の湿度および基層水分の維
持、ならびに子実体発生中の適当な換気である。その他
の要因には生息地に関する最適空気速度、および生息地
からの日々の水分損失の保持が含まれる。
好適な実施態様の詳細な説明 本発明はアミガサダケを培養することによる子嚢果また
は子実体の生産に関する。アミガサダケ培養のために使
用される種菌は、不利な条件に対してやや耐性の休眠体
および栄養貯蔵体である栄養分に富む菌糸体と付随する
菌核（硬い菌核を含む）である。栄養分に富む菌糸体お
よび付随する菌核は、環境条件に応じて、追加の栄養菌
糸体を維持するか、あるいは有性生殖サイクルを生じさ
せて子嚢果を成熟させるように誘発される。栄養分（特
にトリグリセリドの形の中性脂質）は菌糸体および付随
する菌核の中に蓄えられ、そして有性生殖サイクルの間
中、子実体発育のための実質的にすべての栄養分がこれ
らおよび他の貯蔵栄養分から引き出される。
従って、本発明は子嚢果へのその後の発育のために、菌
糸体と付随する菌核中に十分な栄養分を貯えさせるよう
にそれらに栄養素を与えることからなる。菌糸体と付随
する菌核の生産または培養を提供する。その後条件を適
切に調整して、菌糸体と付随する菌核を有性生殖サイク
ルへ誘導する。原基の出現から子嚢果の成熟までの発育
期間中には十分な注意を払って、発育しつつある子嚢果
が発育を中断しないように諸条件を維持する。特に、土
壌の水分、湿度および空気交換の条件を調整して、子嚢
果の発育を促進させ且つ病気を最小限に抑える。
アミガサダケ生産の第一段階は種菌としての菌核の発生
である。菌核を種菌として使用することは、アミガサダ
ケの効率のよい生産という点に関して本発明の好適な面
を表わしている。アミガサダケの培養は各サイクルを胞
子から出発して行うことができるが、生産が非常に遅い
ので、各サイクルを胞子から始めることは商業培養法に
とって実用的でない。さらに、基層に接種する種菌とし
て慣用的な粒状種菌を使用することは、一般に粒状種菌
の接種が他の菌類やバクテリアによって高度に汚染され
た培養物をもたらしやすいので適当でない。
種菌用の硬い菌核を培養する１つの方法は、容器に小麦
または他の栄養物質を、その容器体積の約40〜約80％の
ところまで充填することである。次いで小麦を、一般的
にはプラスチックフィルムまたは金属箔（その他の材料
も使用できる）のような有孔被覆材料で被覆し、その後
その被覆材料の上に容器体積の残りの20〜60％に湿った
土を充填する。この容器の容量は約50mlから数リットル
までの範囲であり得るが、一般には約500mlである。小
麦粒または他の栄養物質は、その後の子嚢果の発育に必
要とされる栄養分の貯蔵を促進させるのに役立つ有機お
よび無機の窒素源、他の鉱物、ビタミン類並びに炭水化
物からなる追加の栄養素で補足されてもよい。この容器
にふたをかぶせて、混入の可能性がある汚染微生物を殺
すためにオートクレープ滅菌する。滅菌容器の土壌層に
子嚢胞子、栄養菌糸または菌核の小片を接種し、そして
この容器を再び密閉する。容器は約10℃〜約30℃、好ま
しくは約18℃〜約22℃の温度に維持する。
接種物からの菌糸は土壌層から生育して粒状の集落を形
成する。約１週間後、土壌層に菌糸のゆるい集合体が現
われる。顕微鏡で観察すると、菌糸細胞は高度に分岐し
ており、隔膜で分かれており、そして樽の形状にふくら
んでいる。その後、これは隣接細胞が固着することによ
って、肉眼で見ることのできる塊状物を形成する。これ
は集落化粒子から得られた栄養物質を蓄えている菌核の
菌糸細胞である。この方法で培養された菌核は成熟した
段階で硬い構造体となり、これは非常に大きくなり得、
実際に全土壌層は硬い菌核でからまれてしまう。
この時点で、種菌として使用するために硬い菌核を収穫
する。発育した硬い菌核の若干量は追加の菌核をつくる
ために、あるいは他の用途のために“植継用種菌”とし
て取っておく。
菌核を種菌として使用することがアミガサダケの効率の
よい生産のためにいくつかの利点をもたらす。接種物の
安定した源として使用するのにふさわしい速度で生育す
ることのほかに、菌核は長期間保存することができる。
実際に菌核は、諸条件が生育の開始にとって都合がよく
なるまで、長期間（例えば冬の間中）休眠状態のままで
いることが可能である。約５℃での貯蔵が長期保存にと
って満足のゆくものであるとわかった。
成熟した菌核は基層に接種するための種菌として使用さ
れる。本発明方法に対して２つの変法が存在しうる。第
一の変法では、成熟菌核を小片に分割し、これらの小片
を基層に接種する。これらの菌核片は菌糸を生じ、栄養
素を添加することにより菌糸は有性生殖サイクルへ誘導
される前に基層内で菌糸体と付随する菌核を生ずる。第
二の変法では、容器中で生育した菌核（すなわち硬い菌
核）が直接基層に接種され、そして菌核から生じた追加
の菌糸が栄養素の添加なしに有性生殖サイクルへ誘導さ
れる。
本発明の重要な面は、子嚢果を生ずる有性生殖サイクル
へ菌類を誘導または誘起させることである。１つの重要
な貢献する誘導要因は、菌類による栄養素の同化および
貯蔵をやめさせるか、あるいは著しく遅くするように、
菌類に対して外因性の利用可能な栄養素を取り除くこと
である。従って、菌類の環境は栄養分に富む環境から栄
養分の乏しい環境へと変化する。本発明において、“栄
養分の乏しい”環境とは発育しつつある子嚢果に与える
ための容易に利用し得る栄養素を欠く環境のことであ
り、それによってこのような発育しつつある子嚢果の栄
養素は誘導以前に菌糸体と付随する菌核の中に蓄えられ
た栄養素である。
誘導に貢献すると思われる他の重要な要因は、菌類が生
育している基層において菌類を多量の水にさらすことで
ある。一般に、基層は栄養分に富む菌糸体と付随する菌
核の有性生殖サイクルへの誘導を促進するために水で実
質的に飽和される。“実質的に飽和される”とは基層の
水和容量の少なくとも約90％を意味するが、好ましくは
100％容量に近づける。好適には、多量の水にさらして
いる間中、水を連続的に交換する。例えば、これは菌類
が生育している基層に水を浸透（パーコレーション）さ
せることにより達成される。本発明者は高レベルの水が
なぜ誘導を促進するのかについていかなる理論にも束縛
されないが、水はその系に誘導性“ショック”（例えば
浸透圧の変化）を与えるかも知れない。
第一の変法において、菌核は約0.5〜約4cm3の大きさの
小片に分割され、そして一般に深さが約１〜約4cmの基
層に接種される。基層面1m2当たり約６〜約30ccの分割
菌核が存在する場合に良好な結果が生じる。硬い菌核を
使用する場合、接種物からの菌糸体の成長は菌核片を基
層に接種する直前にそれらを水の中に浸すことによって
高められる。
好ましい支持基層は栄養分の乏しいものであって、基層
への外的栄養源の適用およびその後の除去により栄養素
の利用可能性を制御できるものである。適当な基層には
標準樹皮、土またはおがくず堆肥、もしくは当業者に知
られた添加鉱物を含むか又は含まない陶土などが挙げら
れる。例えば、スーパーソイル（商標名:supersoil;R.M
cL.Co.,サンフランシスコ）は市販の袋から直接に、あ
るいは等量（容量／容量）の水で２回濾すことにより首
尾よく使用できた。基層は十分な排水を考慮すべきであ
り、緩衝能を与えるべきであり、良好な保水能をもつべ
きであり、そして適当なガス交換を行わせるために十分
な通気（エアレーション）を与えるべきである。現在使
用されている基層は約25％の砂と約75％の有機物質であ
る。少量の石灰も加えられる。土壌の有機部分は主に粉
砕したモミの樹皮（85％）であり、さらに10％のミズゴ
ケと５％のセカイヤメスギの樹皮を含む。この土壌混合
物は55％の利用可能な水含量と25％の空気容量をもつ。
しかしながら、より好適な基層を開発することが期待さ
れる。
基層は水蒸気殺菌、熱水殺菌またはオートクレープ滅菌
により処理する。その後、殺菌された基層は処理しうる
スラリーを作るために一般に水と混合される。スラリー
をトレーの所定の深さにまで加えた後、土壌が重力作用
によって水を失うまで、すなわち圃場容水量（field ca
pacity）以下となって最大空隙をもたらすまで排水させ
ておく。これは少なくとも２つの点で有利である。第一
に、菌糸体および付随する菌核の生産増加をもたらし、
より詳細には菌糸体と付随する菌核とが基層全体にわた
って形成される。第二に、静止した水の除去はあとの微
生物による汚染問題を最小限に抑えるのに役立つ。ま
た、トレー調製の別法として、まず第一にトレーに上記
のごとく基層を装填し、その後で殺菌することもでき
る。
注入した基層に菌核の小片を接種した後、トレーの周囲
の温度を約10℃〜約22℃に維持し、相対湿度を約75〜約
95％に維持し、そして基層の水含量を約50〜約75％に維
持する。接種後すぐに菌核から菌糸が生育し、約１週間
でトレー全体に集落が形成される。菌糸体と付随する菌
核が生育するときにはもはや水を加えず、それによって
基層を乾燥させ、好ましくは水分含量が約75％以下の基
層へ乾燥させる。栄養供給に先立つ基層の乾燥は、発育
しつつあるアミガサダケを害するか又はそれと競合しう
るバクテリアや他の菌類の生育を阻止する上で重大な要
素であると考えられる。
菌類であるアミガサダケは光合成を行う植物のようにそ
れら自身の栄養物を作ることはせず、それらの全栄養供
給を外部源から得ている。栄養分の乏しい基層を意図的
に与えているので、アミガサダケの組織に必要な栄養素
をある時点で供給しなければならない。この第一の変法
では接種物から生育する菌糸体に栄養素が与えられる。
栄養素の添加後の栄養成長によりさらに発生する菌糸体
および菌核形成菌糸体は、効果的な子実体の発育のため
に要する実質的にすべての栄養素を貯蔵形態で含有しな
ければならない。
栄養素は、基層を再び栄養分の乏しい状態にするため
に、あとで栄養素を除去することができるような方法で
菌糸体に与えられる。栄養素を除去すると、有性生殖サ
イクルへの分化が促進され、また汚染の発生率が低下す
る。
除去可能な栄養源を与える便利な方法として、栄養分に
富む培地を基層の上におくことにより、その源で菌糸が
生育し、そしてその源から菌糸が菌糸体の集落全体にわ
たって栄養素を分配することができる。このような栄養
源を与える一手段として、硬い菌核を培養するために使
用したものと同じような容器を作る。一般には容器を有
機物質でほとんど満たし、耐熱性の有孔被覆材料（通常
は金属箔）を有機物質の上にかぶせ、そして容器の頂部
まで土を加えて前記の被覆材料を覆う。この容器は有孔
箔の別の層で再び覆い、さらに金属箔のシートで密封し
た後滅菌する。
容器を満たす栄養源は有機物質を供給する。この有機物
質は代謝されて、最後には炭水化物や脂質として菌糸体
と付随する菌核の中に蓄えられる。蓄えられた物質は終
局的に子嚢果の形成のために利用される。この培養法の
開発において最も一般的に使用される栄養源は小麦粒で
ある。しかし、混合堆肥を含めたその他の栄養物質も適
している。小麦粒を栄養源とする場合、それらは基層1m
2当たり約1000g〜約8000g（乾燥重量）の割合で供給さ
れるべきである。しかしながら、この割合はかなり変え
ることができ、単に一般概数としてみなされる。
基層中の菌糸体および付随する菌核の量と、基層の単位
面積あたりに発生する子嚢果の総量との間には直接の関
係があると思われるので、この段階の間にできるだけ多
くの栄養分に富む菌糸体と付随する菌核が生ずることが
望ましい。基層中での菌糸体と付随する菌核の生育は、
容器中での硬い菌核の生育と一致しており、容器中での
生育を高める同じ栄養素が基層中での生育を高める。従
って、有機物質はビタミン類、鉱物、追加のタンパク質
および他の物質で補足されてもよい。
この第一の変法では、冷却した滅菌容器から箔の上層を
取り除き、容器を基層の表面上にひっくり返す。箔の第
二層の穴を通して上方へ生育する菌糸は栄養素を蓄え
て、それを菌糸体の集落に分配する。栄養供給の間、土
壌水分は約45％〜約70％のレベルに維持し、相対湿度は
約85％〜約95％に維持し、そして温度は約10℃〜約22℃
に維持する。栄養供給は約７〜約40日間、一般には約16
日間続ける。栄養供給期間の終わりに、分生子と菌核の
両方が基層の表面上に相当数で観察される。
菌糸体の集落と新たに形成された付随する菌核がその後
の子嚢果形成のために要する実質的に全ての栄養素を供
給されたならば、栄養源を取り除く。菌糸体に対して外
的な栄養素が過剰に存在すると、有性生殖サイクルが認
めうる程度に進行しないので、栄養素の除去は培養にと
って必要な工程である。栄養物質を含むさかさまにした
容器または類似物の使用は、栄養分の乏しい基層中に菌
糸体を残したままで、大部分の利用可能な栄養素を直ち
に除去させる。
栄養源の除去に続いて、少量の追加水分が例えば基層面
1m2あたり約１リットルの量で基層に添加され、栄養生
長を約10日間続行させる。この期間中、基層の水分含量
は約45％〜約70％に維持し、相対湿度は約85％〜約95％
に維持し、そして温度は約10℃〜約22℃に維持する。こ
の期間の後に菌核は成熟する。
貯蔵栄養分に富むが外因性栄養分を奪われた成熟した菌
糸体と付随する菌核は、今や有性生殖サイクルへの誘導
に寄与する多量の水にさらされる。好ましくは、基層お
よびアミガサダケの菌糸体は約12〜約36時間の間水を基
層の中にゆっくり浸透させることにより水和される。水
は基層の表面積1m2あたり約250〜約1000ml/時間の流量
で基層に添加される。基層および浸透用水は約10℃〜約
22℃の温度に維持する。
第二の変法では、容器内に生じた成熟した菌核（例えば
硬い菌核）は湿った栄養分の乏しい基層に、例えば基層
面1m2当たり約1500〜4000ccの非常に高い割合で接種さ
れる。これらの菌核は菌糸増殖およびその後の子実体発
育に必要な貯蔵栄養素を含む。菌核はそのままでまたは
分割された状態で基層中に接種される。また、それらは
容器から直接に接種しても、あるいは初めに水で湿らせ
てから（一般には18〜24時間の浸漬）接種してもよい。
栄養分の乏しい基層への接種は外因性（菌核に対して）
栄養素の除去を意味し、これは有性生殖サイクルへの誘
導に寄与することが判明した諸要因の１つである。
誘導に対して大きく貢献することが判明したその他の要
因（すなわち多量の水にさらすこと）は基層への接種と
同時に、あるいはその後比較的短時間のうちに開始され
る。基層は誘導を促す多量の水を与えるために、接種時
のころに十分湿らせることができる。しかしながら、菌
核を栄養分の乏しい基層中に保持するがその基層に水を
浸透させる前に、第一の変法におけるこの期間の条件と
同様の条件下で約７日間菌核を基層に保持してそれらの
菌糸体を基層全体に集落化させる場合に、より良い結果
が得られる。次に、第一の変法と同様の方法で水を基層
中に浸透させ、それにより菌糸体から原基（原始細胞）
を発生させる。
第一の変法に対して第二の変法はいくつかの利点を有す
る。第二の変法のより顕著な利点の１つは基層の許容さ
れる深さである。この方法では基層がかなり深くてもよ
く、一般には約６〜約16cmであり得る。より厚い基層で
の培養はより多くの菌核を含むことができ、最終的に薄
い基層よりも基層面の単位面積あたりに多くの子嚢果を
もたらす。
しかしながら、第一の変法は他のタイプの菌類を培養す
るために使用される方法とよく類似しており、それ故に
現存する設備や利用可能な装置での培養へ比較的適合し
やすいので好適であるかも知れない。
第一または第二の変法における水和の後に基層は排水さ
れ、さらに水を除くために培養物を吸引してもよい。相
対湿度は約85〜約95％に維持し、温度は約10℃〜約22℃
に維持する。基層の水分含量はこの期間中約55％〜約65
％に維持する。
この期間の終わりに、すなわち水和の約１〜３日後に、
アミガサダケの原基が形成し始める。原基は直径が約1m
mの球形の菌糸集合体である。2,3日のうちに原基は子嚢
果の基本組織形成の最初のサインである隆起部を形成す
る。
原基の初期出現から、アミガサダケの子嚢果が約30mmの
高さに達するまでの生育期間は子嚢果の発育にとって大
切な期間である。この期間中、温度は約10℃〜約22℃、
好ましくは約18℃に維持し、相対湿度は約85〜約95％に
維持し、そして基層の水分含量は約50〜約60％に維持す
る。もし非常に有利な生育条件が維持されないならば、
未熟な子嚢果が平伏して発育を中止するであろう。
子嚢果の最大収量は、基層付近の空気の流れを約20〜約
40cm/分の実質的に一定の速度に維持するときに得られ
ることが判明した。
アミガサダケの子嚢果が30mmの高さに達した後、諸条件
を連続した発育および成熟化に都合のいいように維持す
る。成熟期間中の温度は約10℃〜約27℃の範囲であり、
相対湿度は約80％〜約95％であり、そして土壌水分は約
30％〜約55％である。子嚢果が発育しつづけるにつれ
て、それらは暗灰色になり、そして成熟期に到達すると
子嚢果の色は灰色から金茶色に変わり、この時点でアミ
ガサダケは成熟する。子嚢果の第一の収穫物を得た後
に、培養物はその次の収穫物を得るために再誘導するこ
とができる。
モルケラ・エスクレンタ（Morchella esculenta）に対
して上記方法を使用することにより、1m2あたり25〜500
個の子嚢果が得られた。
本発明方法の開発の大部分はモルケラ・エスクレンタの
単離物に関するものであったが、本方法は一般にモルケ
ラ属に含まれる他の菌種に対しても応用することができ
る。例えば、モルケラ・クラシペス（Morchella crassi
pes）およびモルケラ・コステータ（Morchella costat
a）のような試験的に培養した菌種に対しても成功をお
さめた。
本発明を特に好適な実施態様について記載してきたが、
当分野で通常の知識を有する者にとっては明らかな修飾
が本発明の範囲を逸脱することなくなし得るであろう。
例えば、アミガサダケのそれぞれの生育段階においてそ
れらの生育を促進するのに特に有利な条件（例えば基層
水分、温度、湿度、空気の流れなどを含めた諸要因）が
先に記載されている。生育は上記の好適な条件から外れ
た条件においてあまり有利な速度ではないにしてもよく
進行するかも知れず、また好適な条件から短期間外れて
もアミガサダケの生育速度に重大な影響を及ぼさないか
も知れないことを理解すべきである。従って、例えば、
有利な温度範囲の低い方の温度が子嚢果のそれぞれの生
育段階に関して記載されているが、水の凝固点に近い温
度へ短期間外れても、子嚢果の連続した生存に何ら変化
がない。
本発明の種々の特徴は次の請求の範囲おいて説明され
る。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 マラチョウスキー，ジェームズ・アンソニ ー アメリカ合衆国ミシガン州48823，ハスレ ット，ブリス・ストリート 1678

Claims (31)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】モルケラ属に属する菌種の子嚢果を培養す
    る方法であって、該菌種の菌糸体および付随する菌核
    を、有機および無機栄養素を供給する栄養源の存在下
    で、上記菌糸体および付随する菌核がその後の子嚢果の
    発育のために要する栄養供給物を蓄えるのに十分な期間
    培養し；上記の栄養分に富む菌糸体および付随する菌核
    の成熟化を促進してそれらを該菌種の有性生殖サイクル
    へ誘導し；そして該菌種の子嚢果の発育および成熟に適
    した条件を維持することからなる培養法において、前記
    菌糸体および付随する菌核の有性生殖サイクルへの誘導
    を、当該菌糸体および付随する菌核から外因性栄養素を
    取り除くこと若しくは当該菌糸体および付随する菌核を
    多量の水にさらすことによって促進するか、または当該
    菌糸体および付随する菌核から外因性栄養素を取り除き
    且つそれらを多量の水にさらすことによって促進する、
    前記培養法。
  2. 【請求項２】モルケラ属に属する菌種の子嚢果を培養す
    る方法であって、該菌種の菌糸体を培養して菌核をつく
    り；栄養分の乏しい基層を用意して該基層に上記菌核の
    小片を接種し；該基層において上記の菌核接種物から菌
    糸体を生育させ；該菌糸体に有機および無機栄養素を供
    給する栄養源を予め決められた期間にわたって与え；次
    いで栄養源を取り除いて該菌糸体と新たに形成された付
    随菌核から外因性栄養素を取り去り；上記の菌糸体と付
    随菌核の成熟化をその環境を適切に調整することによっ
    て促進し；成熟した菌糸体と付随菌核を含む該基層を水
    和して、該菌糸体と付随菌核を多量の水にさらし；上記
    の栄養素の除去および多量の水への暴露は、該菌糸体と
    付随菌核を該菌種の有性生殖サイクルへ誘導するのに役
    立ち；そして子嚢果の発育と成熟に適した条件を維持す
    る；ことから成る培養法。
  3. 【請求項３】上記の菌糸体は湿った植物栄養源を用意
    し、それを滅菌し、該湿った栄養源に菌核、子嚢胞子、
    栄養菌糸および分生子から成る群より選ばれた小片を接
    種することにより培養する、請求の範囲第２項記載の方
    法。
  4. 【請求項４】基層面1m2あたり６〜30cm3の菌核を接種す
    る、請求の範囲第２項記載の方法。
  5. 【請求項５】上記の接種基層における菌糸体の生育は基
    層の水分含量を50％〜75％に維持し、相対湿度を75％〜
    95％に維持し、そして温度を10℃〜22℃に維持すること
    により栄養供給に先立って促進される、請求の範囲第２
    項記載の方法。
  6. 【請求項６】上記の栄養源は植物を含む請求の範囲第２
    項記載の方法。
  7. 【請求項７】上記の栄養源は上記菌核中への中性脂質の
    貯蔵を促す有機補足物、無機補足物およびそれらの混合
    物から成る群より選ばれた物質をさらに含む、請求の範
    囲第６項記載の方法。
  8. 【請求項８】上記の栄養源は基層表面積1m2あたり1000
    〜8000gの乾燥重量で供給された小麦粒である、請求の
    範囲第７項記載の方法。
  9. 【請求項９】栄養供給の間中、上記基層の水分含量は45
    ％〜70％であり、相対湿度は85％〜95％に維持し、そし
    て温度は10℃〜22℃に維持する、請求の範囲第２項記載
    の方法
  10. 【請求項１０】栄養源を取り除いた後の菌糸体と付随菌
    核の成熟化は、基層の水分含量を45％〜70％に維持し、
    相対湿度を85％〜95％に維持し、そして温度を10℃〜22
    ℃に維持することによって促進される、請求の範囲第２
    項記載の方法。
  11. 【請求項１１】上記基層は該基層に水を浸透させること
    により水和する、請求の範囲第２項記載の方法。
  12. 【請求項１２】基層面1m2あたり250〜1000ml/時間の流
    量で基層に水を浸透させる、請求の範囲第11項記載の方
    法。
  13. 【請求項１３】12〜36時間にわたって水を浸透させる、
    請求の範囲第11項記載の方法。
  14. 【請求項１４】浸透用の水は10℃〜22℃の温度に保つ、
    請求の範囲第11項記載の方法。
  15. 【請求項１５】基層の水和の後に、原基が出現するまで
    基層の水含量を55％〜65％に調整し、相対湿度を85％〜
    95％に維持し、温度を10℃〜22℃に維持する、請求の範
    囲第２項記載の方法。
  16. 【請求項１６】原基の出現から子嚢果が30mmの高さに発
    育するまでの間、基層の水含量を50％〜60％に維持し、
    相対湿度を85％〜95％に維持し、そして温度を10℃〜22
    ℃に維持する、請求の範囲第15項記載の方法。
  17. 【請求項１７】原基の出現から子嚢果が30mmの高さに発
    育するまでの上記期間中、基層付近の空気の流れを20〜
    40cm/分に維持する、請求の範囲第16項記載の方法。
  18. 【請求項１８】子嚢果が30mmの高さに発育する時期から
    子嚢果の成熟期まで、基層の水含量を30％〜55％に維持
    し、相対湿度を80％〜95％に維持し、そして温度を10℃
    〜27℃に維持する、請求の範囲第16項記載の方法。
  19. 【請求項１９】モルケラ属に属する菌種の子嚢果を培養
    する方法であって、子嚢果の発育のための十分な貯蔵栄
    養素を含む成熟した菌核を形成させ；栄養分の乏しい基
    層を用意して該基層に上記菌核を接種し；該菌核接種物
    から菌糸体をさらに生育させ；該菌核とさらに生育した
    菌糸体を該菌種の有性生殖サイクルへ誘導し；そして該
    菌種の子嚢果の発育に適した条件を維持する；ことから
    成る培養法。
  20. 【請求項２０】接種物として使用する菌核は硬い菌核で
    あり、接種直前に18〜24時間の間水に浸漬して湿らせ
    る、請求の範囲第19項記載の方法。
  21. 【請求項２１】上記の菌核とさらに生育した菌糸体を外
    因性栄養素を取り去り且つ多量の水にさらすことによっ
    て有性生殖サイクルへ誘導する、請求の範囲第19項記載
    の方法。
  22. 【請求項２２】上記菌核が接種される栄養分の乏しい基
    層は接種時のころに湿らせ、それによって外因性栄養素
    の除去と多量の水への暴露が同時期に行われる、請求の
    範囲第21項記載の方法。
  23. 【請求項２３】接種後のある期間中、上記菌核を基層の
    水分含量45％〜70％、相対湿度85％〜95％および温度10
    ℃〜22℃で上記の栄養分の乏しい基層中に保持し、続い
    て該基層を水和して該菌核とさらに生育した菌糸体とを
    多量の水にさらす、請求の範囲第21項記載の方法。
  24. 【請求項２４】上記基層は基層面1m2あたり250〜1000ml
    /時間の流量で基層に水を浸透させることにより水和す
    る、請求の範囲第23項記載の方法。
  25. 【請求項２５】12〜36時間にわたって水を浸透させる、
    請求の範囲第24項記載の方法。
  26. 【請求項２６】浸透用の水は10℃〜22℃の温度に保つ、
    請求の範囲第24項記載の方法。
  27. 【請求項２７】基層面1m2あたり1500〜4000ccの成熟菌
    核を接種する、請求の範囲第19項記載の方法。
  28. 【請求項２８】誘導の後に、原基が出現するまで基層の
    水含量を55％〜65％に調整し、相対湿度を85％〜95％に
    維持し、そして温度を10℃〜22℃に維持する、請求の範
    囲第19項記載の方法。
  29. 【請求項２９】原基の出現から子嚢果が30mmの高さに発
    育するまでの間、基層の水含量を50％〜60％に維持し、
    相対湿度を85％〜95％に維持し、そして温度を10℃〜22
    ℃に維持する、請求の範囲第19項記載の方法。
  30. 【請求項３０】原基の出現から子嚢果が30mmの高さに発
    育するまでの上記期間中、基層付近の空気の流れを20〜
    40cm/分に維持する、請求の範囲第19項記載の方法。
  31. 【請求項３１】子嚢果が30mmの高さに発育する時期から
    子嚢果の成熟期まで、基層の水含量を30％〜55％に維持
    し、相対湿度を80％〜95％に維持し、そして温度を10℃
    〜27℃に維持する、請求の繊維第19項記載の方法。
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