JPH07309773A

JPH07309773A - アセチルコリン放出促進剤

Info

Publication number: JPH07309773A
Application number: JP6124701A
Authority: JP
Inventors: Kazuyoshi Yazawa; 一良矢澤; Yasuji Muneda; 靖二宗田
Original assignee: Sagami Chemical Research Institute; Nippon Shoji Co Ltd
Current assignee: Sagami Chemical Research Institute; Nippon Shoji Co Ltd
Priority date: 1994-05-16
Filing date: 1994-05-16
Publication date: 1995-11-28

Abstract

(57)【要約】【目的】老人性痴呆症治療薬等の中枢神経機能の改
善薬として期待される新規なアセチルコリン放出促進剤
の提供。【構成】下記一般式【化１】（式中、Ｒ¹は炭素数１２〜２６の不飽和脂肪酸のアシ
ル残基を表わし、Ｒ²はドコサヘキサエン酸のアシル残
基を表わす。Ｙは−Ｐ(Ｏ)(Ｏ^-)ＯＣＨ₂ＣＨ₂Ｎ⁺(Ｃ
Ｈ₃)₃または−Ｐ(Ｏ)(ＯＨ)ＯＣＨ₂ＣＨ(ＮＨ₂)ＣＯＯ
Ｈで示される基を表わす。）で表わされるジアシル型グ
リセロリン脂質又はその薬学上許容しうる塩を有効成分
とするアセチルコリン放出促進剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、老人性痴呆症治療薬等
の中枢神経機能の改善薬として期待される、特定の脂肪
酸よりなるジアシル型グリセロリン脂質を有効成分とす
るアセチルコリン放出促進剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、平均寿命の延長と共に、高齢者が
急激に増加し、高齢化社会としての様々な問題が生じて
いる。なかでも、老人性痴呆症の増加は大きな問題であ
る。老人性痴呆症は大別して、脳血管性痴呆とアルツハ
イマー型痴呆（ＳＤＡＴ）とに分けられる。アルツハイ
マー型痴呆は従来は、欧米諸国に比べて我が国での頻度
は低いとされていた。しかしながら、近年の成人病の疾
病構造の変化と共に、今後我が国でも急激な増加が予想
されており、その発症、進展の機構について精力的な研
究が進められている。ＳＤＡＴにおける１つの仮説は、
アセチルコリン作動系が異常をきたし、コリンアセチル
転移酵素活性が低下して脳内アセチルコリンが減少し、
記憶や知能に影響を及ぼしているというものである（中
村重信、医学のあゆみ，145, p. 291 (1988)）。

【０００３】また、ごく最近、老化による中枢神経機能
の低下との関連で、加齢に伴って、アセチルコリンの放
出能が低下することが見い出されている（安藤進、神
経精神薬理、１６巻、１０３頁（１９９４））。

【０００４】このように、神経機能の障害にアセチルコ
リンの減少が関与していると考えられることから、アセ
チルコリンの放出促進剤がＳＤＡＴを含めた痴呆症等の
中枢神経機能の低下の改善薬として期待される。従来、
アセチルコリン放出促進剤としては、４−アミノピリジ
ン等が知られているが、副作用、とくにけいれん発作を
起こす点で問題があった（Arzneim. -Forsch./Drug Re
s. 39(II), Nr. 7, 762(1989)、 European Journal of
Pharmacology, 178, 275 (1990)）。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、副作用の問
題がなく、優れた放出促進作用を示す、新規なアセチル
コリン放出促進剤を提供することを目的とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者等は、アセチル
コリン放出能の活性化について種々検討したところ、特
定の脂肪酸を構成成分とするジアシル型グリセロリン脂
質が特に強いアセチルコリン放出活性化能を有すること
を見いだし、本発明を完成するに至った。

【０００７】すなわち本発明は、下記一般式（１）

【化２】（式中、Ｒ¹は炭素数１２〜２６の不飽和脂肪酸のアシ
ル残基を表わし、Ｒ²はドコサヘキサエン酸のアシル残
基を表わす。Ｙは−Ｐ(Ｏ)(Ｏ^-)ＯＣＨ₂ＣＨ₂Ｎ⁺(Ｃ
Ｈ₃)₃または−Ｐ(Ｏ)(ＯＨ)ＯＣＨ₂ＣＨ(ＮＨ₂)ＣＯＯ
Ｈで示される基を表わす。）で表わされるリン脂質又は
その薬学上許容しうる塩を有効成分とするジアシル型グ
リセロアセチルコリン放出促進剤に関する。

【０００８】炭素数１２〜２６の不飽和脂肪酸のアシル
基としては、オレオイル基、エルカノイル基、リノロイ
ル基、リノレノイル基、アラキドノイル基、イコサペン
タエノイル基、ドコサヘキサエノイル基等を例示するこ
とができる。

【０００９】薬学上許容しうる塩としては、ナトリウム
塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、アン
モニウム塩、リン酸塩、塩酸塩、硫酸塩、酢酸塩等を例
示することができるが、とくにナトリウム塩及びカリウ
ム塩が好ましい。

【００１０】本発明においては、Ｒ¹が炭素数１２〜２
６の不飽和脂肪酸のアシル残基であることが高い放出活
性発現のために必須であるが、炭素数１２〜２６の不飽
和脂肪酸のアシル残基の中でも、オレオイル基または高
度不飽和脂肪酸のアシル残基、例えばドコサヘキサエノ
イル基が特に好適である。

【００１１】また、上記一般式（１）で表わされるジア
シル型グリセロリン脂質のうち、Ｙが−Ｐ(Ｏ)(ＯＨ)Ｏ
ＣＨ₂ＣＨ(ＮＨ₂)ＣＯＯＨで示される基であるもの、す
なわちホスファチジルセリンが、一般に活性が高い点で
好適である。

【００１２】上記一般式で表わされるジアシル型グリセ
ロリン脂質としては、例えば、１-オレオイル-２-ドコサヘキサエノイルホスファチジ
ルコリン１-オレオイル-２-ドコサヘキサエノイルホスファチジ
ルセリン１-エルカノイル-２-ドコサヘキサエノイルホスファチ
ジルコリン１-エルカノイル-２-ドコサヘキサエノイルホスファチ
ジルセリン１-リノロイル-２-ドコサヘキサエノイルホスファチジ
ルコリン１-リノロイル-２-ドコサヘキサエノイルホスファチジ
ルセリン１-リノレノイル-２-ドコサヘキサエノイルホスファチ
ジルコリン１-リノレノイル-２-ドコサヘキサエノイルホスファチ
ジルセリン１-アラキドノイル-２-ドコサヘキサエノイルホスファ
チジルコリン１-アラキドノイル-２-ドコサヘキサエノイルホスファ
チジルセリン１-イコサペンタエノイル-２-ドコサヘキサエノイルホ
スファチジルコリン１-イコサペンタエノイル-２-ドコサヘキサエノイルホ
スファチジルセリン１,２-ジドコサヘキサエノイルホスファチジルコリン１,２-ジドコサヘキサエノイルホスファチジルセリンなどを具体例として挙げることができる。

【００１３】なお、本発明のジアシル型グリセロリン脂
質は、大別して、ホスファチジルコリンとホスファチジ
ルセリンに分けられる。これらをそれぞれ一般式で表す
と、以下のようにも表すことができる。

【００１４】

【化３】

【化４】

【００１５】これらの化合物のうち、ホスファチジルコ
リンは特願昭５２−８９６２２号公報に記載された方法
により、またホスファチジルセリンは対応するホスファ
チジルコリンを、特願昭６１−２３８７９３号公報に記
載の方法により塩基交換することにより製造される。

【００１６】すなわち、グリセロホスホリルコリンを出
発原料として、化学合成により目的の脂肪酸を有する単
酸型１，２−ジアシル-ホスファチジルコリンを得、次
いでホスホリパーゼＡ₂の酵素反応により、目的の脂肪
酸を有する１−アシルグリセロホスホリルコリンを得
る。さらに、１−アシルグリセロホスホリルコリンのエ
ステル化によりドコサヘキサエノイル基を２位に導入す
ることにより、本発明の１−アシル−２−ドコサヘキサ
エノイルホスファチジルコリンが得られる。次いでホス
ホリパーゼＤの酵素反応により、１−アシル−２−ドコ
サヘキサエノイルホスファチジルセリンを得ることがで
きる。

【００１７】本発明の活性化剤は、治療のために経口的
あるいは非経口的に投与することができる。経口投与剤
としては散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤などの固形製
剤あるいはシロップ剤、エリキシル剤などの液状製剤と
することができる。また、非経口投与剤として注射剤、
直腸投与剤、皮膚外用剤、吸入剤とすることができる。
これらの製剤は活性成分に薬学的に認容である製造助剤
を加えることにより常法に従って製造される。更に公知
の技術により持続性製剤とすることも可能である。

【００１８】経口投与用の固形製剤を製造するには、活
性成分と、賦形剤、例えば乳糖、デンプン、結晶セルロ
ース、乳糖カルシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシ
ウム、無水ケイ酸などとを混合して散剤とするか、さら
に必要に応じて白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、
ポリビニルピロリドンなどの結合剤、カルボキシメチル
セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウムな
どの崩壊剤などを加えて湿式又は乾式造粒して顆粒剤と
する。錠剤を製造するにはこれらの散剤及び顆粒剤をそ
のままあるいはステアリン酸マグネシウム、タルクなど
の滑沢剤加えて打錠すればよい。これらの顆粒又は錠剤
はヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メ
タアクリル酸、メタアクリル酸メチルコポリマーなどの
腸溶性基剤で被覆して腸溶性製剤、あるいはエチルセル
ロース、カルナウバロウ、硬化油などで被覆して持続性
製剤とすることもできる。また、カプセル剤を製造する
には散剤又は顆粒剤を硬カプセルに充填するか、活性成
分をグリセリン、ポリエチレングリコール、ゴマ油、オ
リーブ油などに溶解したのちゼラチン膜で被覆し軟カプ
セル剤とすることができる。

【００１９】経口投与用の液状製剤を製造するには活性
成分と白糖、ソルビトール、グリセリンなどの甘味剤と
を水に溶解して透明なシロップ剤、更に精油、エタノー
ルなどを加えてエリキシル剤とするか、アラビアゴム、
トラガント、ポリソルベート８０、カルボキシメチルセ
ルロースナトリウムなどを加えて乳剤又は懸濁剤として
もよい。これらの液状製剤には所望により矯味剤、着色
剤、保存剤などを加えてもよい。

【００２０】注射剤を製造するには活性成分を必要に応
じ塩酸、水酸化ナトリウム、乳剤、乳酸ナトリウム、リ
ン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウムなどの
ｐＨ調整剤、塩化ナトリウム、ブドウ糖などの等張化剤
とともに注射用蒸留水に溶解し、無菌濾過してアンプル
に充填するか、更にマンニトール、デキストリン、シク
ロデキストリン、ゼラチンなどを加えて真空下凍結乾燥
し、用時溶解型の注射剤としてもよいし、活性成分にレ
シチン、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化
ヒマシ油などを加えて水中で乳化せしめ注射用乳剤とす
ることもできる。

【００２１】直腸投与剤を製造するには活性成分及びカ
カオ脂、脂肪酸のトリ、ジ及びモノグリセリド、ポリエ
チレングリコールなどの坐剤用基剤とを加湿して溶融し
型に流しこんで冷却するか、活性成分をポリエチレング
リコール、大豆油などに溶解したのちゼラチン膜で被覆
すればよい。

【００２２】皮膚外用剤を製造するには活性成分を白色
ワセリン、ミツロウ、流動パラフィン、ポリエチレング
リコールなどに加えて必要ならば加湿して練合し軟膏剤
とするか、ロジン、アクリル酸アルキルエステル重合体
などの粘着剤と練合したのちポリエチレンなどの不織布
に展延してテープ剤とする。

【００２３】吸入剤を製造するには活性成分をフロンガ
スなどの噴射剤に溶解又は分散して耐圧容器に充填しエ
アゾール剤とする。

【００２４】上記構成を有する本発明のアセチルコリン
放出促進剤は、公知の製造法、例えば日本薬局方第１０
版製剤総則記載の方法ないし適当な改良を加えた方法に
よって製造することができる。

【００２５】本発明の活性化剤の投与量は、ホスファチ
ジルセリンまたはその薬学上許容しうる塩の重量とし
て、患者の年齢、体重及び病態によって異なるが、通常
１日約１ｍｇ〜１０００mgであり、１乃至数回に分けて
投与することが望ましい。

【００２６】本発明のアセチルコリン放出促進剤は、と
くに老人、痴呆症患者などに投与することにより、中枢
神経機能の改善のために有用である。

【００２７】

【実施例】以下、本発明を実施例及び試験例により詳細
に説明する。ただし、本発明はこれらの実施例、試験例
に限定されるものではない。

【００２８】製造例１．１-ステアロイル-２-ドコサ
ヘキサエノイルホスファチジルコリン（比較化合物）の
合成ドコサヘキサエン酸（９５％）２．９７ｇ（９ｍｍｏ
ｌ）とＮ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール１．７５ｇ
（１０．８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフランに溶解
し、窒素気流下室温で約１時間反応させた。ついで、こ
の反応液に１−ステアロイル−Ｌ−３−グリセロホスホ
リルコリン１．６３ｇ（３ｍｍｏｌ）を加え、さらに触
媒として、水素化ナトリウム（４０％）４００ｍｇとイ
ミダゾール１ｇとを乾燥ジメチルスルホキシド（以下、
ＤＭＳＯと略す）１０ｍｌ中で約１時間反応させて調製
したイミダゾールナトリウム−ＤＭＳＯ溶液（２．７ｍ
ｌ）及び無水ピリジン１．５ｍｌを加えた後、室温にて
３時間反応させた。終了後、反応液を１Ｎ塩酸−メタノ
ールで中和し、クロロホルム−メタノール（２：１）３
００ｍｌ、水６０ｍｌを加えて分液ロートで分液し、下
層を分取して減圧濃縮した。濃縮液は、クロロホルム−
メタノール−水（６５：２５：４）１００ｍｌ，エタノ
ール１００ｍｌ，アンバーライトＭＢ−３型樹脂４０ｍ
ｌを加えて処理後、樹脂をろ別し、得られたろ液を減圧
濃縮した。この濃縮物を少量のクロロホルムに溶解し、
あらかじめクロロホルムで活性化したシリカゲル（１０
０ｇ）カラムにかけ、クロロホルム−メタノール（９：
１）６００ｍｌ，クロロホルム−メタノール−水（６
５：２５：４）１０００ｍｌで順次溶出させた。得られ
た溶出分画からＴＬＣ分析を指標として目的画分を集
め、目的物１．７１ｇ（６７％）を得た。

【００２９】本物質は、ＴＬＣ分析（シリカゲルプレー
ト、展開溶媒：クロロホルム−メタノール−水（６５：
２５：４））を行ったところ、沃素及びリンモリブデン
酸による検出で単一のスポットを与え、そのＲｆ値は市
販のジステアロイル−Ｌ−α−グリセロホスホリルコリ
ン（シグマ製）とほぼ一致した。¹ H-NMR（CDCl₃）：δ(ppm) 0.86 (3H), 0.99 (3H), 1.2
7 (30H), 2.07 (2H), 2.20 (2H), 2.36 (4H), 2.84 (10
H), 3.37 (9H), 3.81 (2H), 3.97 (2H), 4.13 (1H), 4.
33 (2H), 4.40 (1H), 5.20 (1H), 5.38 (12H).

【００３０】その他の脂肪酸のアシル残基を有するホス
ファチジルコリンも上記と同様にして合成できる。

【００３１】１-オレオイル-２-ドコサヘキサエノイル
ホスファチジルコリン¹ H-NMR（CDCl₃）：δ(ppm) 0.87 (3H), 0.99 (3H), 1.2
7 (20H), 1.60 (2H), 2.00 (4H), 2.07 (2H), 2.27 (2
H), 2.36 (4H), 2.84 (10H), 3.37 (9H), 3.81 (2H),
3.97 (2H), 4.13 (1H), 4.33 (2H), 4.40 (1H), 5.20
(1H), 5.37 (14H).

【００３２】製造例２．１，２-ジドコサヘキサエノ
イルホスファチジルコリンの合成グリセロホスホリルコリン１．２７ｇ（４．６ｍｍｏ
ｌ）に乾燥ＤＭＳＯ６ｍｌを加え、５０〜６０℃で攪拌
して懸濁させたのち室温に戻す。一方、ドコサヘキサエ
ン酸（９５％）４．５０ｇ（１３．７ｍｍｏｌ）とＮ，
Ｎ’−カルボニルジイミダゾール２．７０ｇ（１６．６
ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン１６ｍｌに溶解
し、窒素気流下室温で約１時間反応させた。ついで、こ
の反応液に触媒として、水素化ナトリウム（４０％）４
００ｍｇとイミダゾール１ｇとを乾燥ＤＭＳＯ１０ｍｌ
中で約１時間反応させて調製したイミダゾールナトリウ
ム−ＤＭＳＯ溶液（４．６ｍｌ）及び無水ピリジン２ｍ
ｌを加えた後、室温にて２０時間反応させた。終了後、
反応液を１Ｎ塩酸−メタノールで中和し、クロロホルム
−メタノール（２：１）３００ｍｌ、水６０ｍｌを加え
て分液ロートで分液し、下層を分取して減圧濃縮した。
濃縮液は、クロロホルム−メタノール−水（６５：２
５：４）５０ｍｌ，エタノール５０ｍｌ，アンバーライ
トＭＢ−３型樹脂２０ｍｌを加えて処理後、樹脂をろ別
し、得られたろ液を減圧濃縮した。この濃縮物を少量の
クロロホルムに溶解し、あらかじめクロロホルムで活性
化したシリカゲル（９０ｇ）カラムにかけ、クロロホル
ム−メタノール（９：１）９００ｍｌ，クロロホルム−
メタノール−水（６５：２５：４）１０００ｍｌで順次
溶出させた。得られた溶出分画からＴＬＣ分析を指標と
して目的画分を集め、目的物２．７ｇ（６６％）を得
た。

【００３３】本物質は、ＴＬＣ分析（シリカゲルプレー
ト、展開溶媒：クロロホルム−メタノール−水（６５：
２５：４））を行ったところ、沃素及びリンモリブデン
酸による検出で単一のスポットを与え、そのＲｆ値は市
販のジオレオイル−Ｌ−α−グリセロホスホリルコリン
（フナコシ製）とほぼ一致した。（スペクトルデー
タ）

【００３４】製造例３．１−ステアロイル−２−ドコ
サヘキサエノイルホスファチジルセリン（比較化合物）
の合成Ｌ−セリン８．４ｇ（８０ｍｍｏｌ）を０．１ＭＣａＣ
ｌ₂を含む０．１Ｍ酢酸緩衝液２０ｍｌ（ｐＨ５．６）
に溶解後、ホスホリパーゼＤ（１８６単位／ｍｇ，東洋
醸造製）１０ｍｇを加えた。ついで、製造例１で得られ
た１−ステアロイル−２−ドコサヘキサエノイルホスフ
ァチジルコリン１．７７ｇ（２ｍｍｏｌ）をクロロホル
ム５０ｍｌに溶解したものを加え、３０℃にて約４時間
反応させた。終了後、反応液に、２Ｎ塩酸２０ｍｌ，ク
ロロホルム１９０ｍｌ，メタノール１２０ｍｌ、水２０
ｍｌを加え、分液ロートで分液し、下層を分取して減圧
濃縮した。得られた濃縮液にクロロホルム−メタノール
−０．１Ｎ塩酸（２：１：０．２）２５０ｍｌを加えて
分液し、下層を分取して減圧濃縮した。この濃縮物を少
量のクロロホルム−メタノール−酢酸（８０：２０：
３．５）に溶解し、あらかじめ同じ溶媒系で活性化した
シリカゲル（１７０ｇ）カラムにかけ、同じ溶媒系で溶
出させた。得られた溶出分画からＴＬＣ分析を指標とし
て目的画分を集め、目的物１．２７ｇ（６８％）を得
た。ついで、このものをクロロホルム−メタノール
（２：１）５０ｍｌに溶解し、０．１Ｍ炭酸水素カリウ
ム溶液２８ｍｌを加えて室温で３０分間攪拌した。終了
後、クロロホルムーメタノール（２：１）１３０ｍｌを
加えて分液し、下層を集め、乾固するまで減圧濃縮し
た。乾固物をクロロホルムに溶解し、アセトンから再結
晶して白色結晶１．１４ｇ（６３％）を得た。

【００３５】本物質は、ＴＬＣ分析（シリカゲルプレー
ト、展開溶媒：クロロホルム−メタノール−酢酸（８
０：２０：３．５））を行ったところ、沃素及びリンモ
リブデン酸、ニンヒドリン試薬による検出で単一のスポ
ットを与え、そのＲｆ値は市販の牛脳ホスファチジルセ
リン（フナコシ製）とほぼ一致した。¹ H-NMR（CDCl₃）（脂肪酸プロトンのみ）：δ(ppm) 0.8
6 (3H), 0.98 (3H), 1.26 (30H), 2.07 (2H), 2.20 (2
H), 2.35 (4H), 2.82 (10H), 5.35 (12H).

【００３６】その他の脂肪酸のアシル残基を有するホス
ファチジルセリンも上記と同様にして合成できる。

【００３７】１−オレオイル−２−ドコサヘキサエノイ
ルホスファチジルセリン¹ H-NMR（CDCl₃）（脂肪酸プロトンのみ）：δ(ppm) 0.8
7 (3H), 0.98 (3H), 1.26 (20H), 1.60 (2H), 1.99 (4
H), 2.06 (2H), 2.35 (6H), 2.82 (10H), 5.35 (14H).

【００３８】製造例４．１，２−ジドコサヘキサエノ
イルホスファチジルセリンの合成Ｌ−セリン３．１５ｇ（３０ｍｍｏｌ）を０．１ＭＣａ
Ｃｌ₂を含む０．１Ｍ酢酸緩衝液７．５ｍｌ（ｐＨ５．
６）に溶解後、ホスホリパーゼＤ（１０８単位／ｍｇ，
旭化成製）４ｍｇを加えた。ついで、製造例２で得られ
た１，２−ドコサヘキサエノイルホスファチジルコリン
０．７８２ｇ（８７ｍｍｏｌ）をクロロホルム２０ｍｌ
に溶解したものを加え、室温にて約３．５時間反応させ
た。終了後、反応液に、２Ｎ塩酸７．５ｍｌ，クロロホ
ルム６０ｍｌ，メタノール３０ｍｌ、水１５ｍｌを加
え、分液ロートで分液し、下層を分取して減圧濃縮し
た。さらに、得られた濃縮液にクロロホルム−メタノー
ル−０．１Ｎ塩酸（２：１：０．２）１００ｍｌを加え
て分液し、下層を分取して減圧濃縮した。この濃縮物を
少量のクロロホルム−メタノール−酢酸（８０：２０：
３．５）に溶解し、あらかじめ同じ溶媒系で活性化した
シリカゲル（９０ｇ）カラムにかけ、同じ溶媒系で溶出
させた。得られた溶出分画からＴＬＣ分析を指標として
目的画分を集め、目的物４６０ｍｇ（５４％）を得た。
ついで、このものをクロロホルム−メタノール（２：
１）２０ｍｌに溶解し、０．１Ｍ炭酸水素カリウム溶液
１１ｍｌを加えて室温で３０分間攪拌した。終了後、ク
ロロホルムーメタノール（２：１）４０ｍｌを加えて分
液し、下層を集め、乾固するまで減圧濃縮した。乾固物
をクロロホルムに溶解し、エタノールで沈殿させ、無色
粘稠物４３９ｍｇ（５３％）を得た。

【００３９】本物質は、ＴＬＣ分析（シリカゲルプレー
ト、展開溶媒：クロロホルム−メタノール−酢酸（８
０：２０：３．５））を行ったところ、沃素及びリンモ
リブデン酸、ニンヒドリン試薬による検出で単一のスポ
ットを与え、そのＲｆ値は市販の牛脳ホスファチジルセ
リン（フナコシ製）とほぼ一致した。¹ H-NMR（CDCl₃）（脂肪酸プロトンのみ）：δ(ppm) 0.9
6 (6H), 2.06 (4H), 2.35 (8H), 2.82 (20H), 5.35 (24
H).

【００４０】試験例１〔シナプトソームの調製〕雌性Ｃ５７ＢＬ／６マウスの
大脳皮質部より、Ｆｉｃｏｌｌ密度勾配遠心法（Ｂｏｏ
ｔｈ, Ｒ. Ｆ. Ｇ. とＣｌａｒｋ, Ｊ. Ｂ., Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ. Ｊ. １７６, ３６５（１９７８））によりシ
ナプトソームを調製した。〔シナプトソームへのジアシル型グリセロリン脂質の取
り込み〕ホスファチジルコリンあるいはホスファチジル
セリンを懸濁したＫｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ液にシナプ
トソームを加え、３７℃でインキュベートした。３０分
ないし６０分後に５倍量の氷冷したＫｒｅｂｓ−Ｒｉｎ
ｇｅｒ液を加え反応を停止した。遠心後、シナプトソー
ムを再びＫｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ液に懸濁し試料とし
た。〔アセチルコリン放出量の測定〕シナプトソーム懸濁液
（１００μＬ）に１３７ｍＭ塩化カリウムを含むＫｒ
ｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ液を５０μＬ加え、反応液のカリ
ウム濃度を５０ｍＭに調整した。３７℃で５分間インキ
ュベートした後、直ちに氷冷し反応を停止した。内部標
準物質のエチルホモコリンを既知量加えた後に遠心し、
その上清を高速液体クロマトグラフに導入した。放出さ
れたアセチルコリン量の高感度定量は固定化酵素カラム
を接続した電気化学検出器付の高速液体クロマトグラフ
ィー（ＨＰＬＣ−ＥＣＤシステム、ＢＡＳ社製）で行っ
た。結果を表１及び表２に示す。なお、ホスファチジル
コリン又はホスファチジルセリンを添加しない場合をコ
ントロールとした。

【００４１】

【表１】表１．本発明のホスファチジルコリンによる放出促進結果 ───────────────────────────── １位置換基（Ｒ¹）ステアロイルオレオイルト゛コサヘキサエノイル ───────────────────────────── アセチルコリン放出の増加（％）¹⁾ -1.0 15.5 4.8 ─────────────────────────────¹⁾ コントロールにおける放出量に対する増加を百分率で
表わす。

【００４２】

【表２】表２．本発明のホスファチジルセリンによる放出促進結果 ───────────────────────────── １位置換基（Ｒ¹）ステアロイルオレオイルト゛コサヘキサエノイル ───────────────────────────── アセチルコリン放出の増加（％）¹⁾ 10.5 15.6 18.2 ─────────────────────────────¹⁾ コントロールにおける放出量に対する増加を百分率で
表わす。

【００４３】

【発明の効果】本発明のアセチルコリン放出促進剤は、
強いアセチルコリン放出促進活性を有する。したがっ
て、本発明のアセチルコリン放出促進剤は、老人性痴呆
症、記憶障害等等の中枢神経機能低下の治療薬および改
善薬として期待される。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記一般式（１）【化１】（式中、Ｒ¹は炭素数１２〜２６の不飽和脂肪酸のアシ
ル残基を表わし、Ｒ²はドコサヘキサエン酸のアシル残
基を表わす。Ｙは−Ｐ(Ｏ)(Ｏ^-)ＯＣＨ₂ＣＨ₂Ｎ⁺(Ｃ
Ｈ₃)₃または−Ｐ(Ｏ)(ＯＨ)ＯＣＨ₂ＣＨ(ＮＨ₂)ＣＯＯ
Ｈで示される基を表わす。）で表わされるジアシル型グ
リセロリン脂質又はその薬学上許容しうる塩を有効成分
とするアセチルコリン放出促進剤。
【請求項２】Ｙが−Ｐ(Ｏ)(ＯＨ)ＯＣＨ₂ＣＨ(ＮＨ₂)
ＣＯＯＨで示される基である請求項１または請求項２記
載のアセチルコリン放出促進剤。