JPH074273B2 - 歯周疾患状態の型および程度の決定法 - Google Patents
歯周疾患状態の型および程度の決定法Info
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- JPH074273B2 JPH074273B2 JP1511789A JP51178989A JPH074273B2 JP H074273 B2 JPH074273 B2 JP H074273B2 JP 1511789 A JP1511789 A JP 1511789A JP 51178989 A JP51178989 A JP 51178989A JP H074273 B2 JPH074273 B2 JP H074273B2
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Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、一般に哺乳動物の活性歯周疾患の存在を決定
する方法、具体的には歯肉溝液を分析して高レベルのア
スパラギン酸アミノ基転移酵素の存在を調べることを含
む歯周疾患の存在を決定する方法に関する。さらに具体
的には、本発明は、歯周疾患の型および程度を決定する
このような方法の改良に関する。
する方法、具体的には歯肉溝液を分析して高レベルのア
スパラギン酸アミノ基転移酵素の存在を調べることを含
む歯周疾患の存在を決定する方法に関する。さらに具体
的には、本発明は、歯周疾患の型および程度を決定する
このような方法の改良に関する。
歯周疾患は、微生物が病因となる炎症性の疾患であり、
歯の支持組織に影響を及ぼすものである。『歯周疾患』
という用語は、歯肉炎と歯周炎という２つの主要なかつ
明確に分類される疾患を含んでいる。歯肉炎の特徴は、
骨の喪失あるいは結合組織付着の喪失を伴わない歯肉の
炎症という点にある。歯肉炎は、必ずしも歯周炎に至る
とは言えないが、その前兆であり、歯周炎の特徴は結合
組織付着の喪失および骨の喪失が原因となって歯肉組織
と歯の間に進行性の歯周ポケットが形成されることであ
り、最終的に歯を喪失することになる。現在使用可能な
歯周疾患測定法としては、歯肉炎についてはH.Loeおよ
びP.Silness,Acta Odont.Scand.21:533（1963）に記載
された方法、歯周炎についてはS.Ramfjord,J.Periodont
al.30:602（1967）に記載された方法のような主観的観
察指標がある。歯周炎に関するこれら指標は、軽い探針
擦過による出血、ポケットの深さ、付着喪失、およびラ
ジオグラフが示す骨喪失の証拠などの判定基準に基づ
く。あいにくこれらの臨床指数は、探針擦過による出血
を除いて、一般に過去の疾患や以前に受けた損傷を反映
するものとして認識されている。これらの指標のうち、
探針擦過による出血（硬い器具、例えば、探針や鋭匙を
用いて歯肉筋あるいはポケットを擦過することによる歯
肉組織の出血）だけが、活性歯周疾患と相関があるとさ
れている。しかしながら、出血そのものは疾患の主観的
指標であり、探針擦過による出血の診断価値について
は、このような出血が歯周疾患の偽似陽性の徴候と高い
割合で関連するとして、問題とされている。A.D.Haffaj
ee,S.S.SocranskyおよびJ.M.Goodson,J.Clin.Perio.10:
257-265（1983）参照。
歯の支持組織に影響を及ぼすものである。『歯周疾患』
という用語は、歯肉炎と歯周炎という２つの主要なかつ
明確に分類される疾患を含んでいる。歯肉炎の特徴は、
骨の喪失あるいは結合組織付着の喪失を伴わない歯肉の
炎症という点にある。歯肉炎は、必ずしも歯周炎に至る
とは言えないが、その前兆であり、歯周炎の特徴は結合
組織付着の喪失および骨の喪失が原因となって歯肉組織
と歯の間に進行性の歯周ポケットが形成されることであ
り、最終的に歯を喪失することになる。現在使用可能な
歯周疾患測定法としては、歯肉炎についてはH.Loeおよ
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された方法、歯周炎についてはS.Ramfjord,J.Periodont
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察指標がある。歯周炎に関するこれら指標は、軽い探針
擦過による出血、ポケットの深さ、付着喪失、およびラ
ジオグラフが示す骨喪失の証拠などの判定基準に基づ
く。あいにくこれらの臨床指数は、探針擦過による出血
を除いて、一般に過去の疾患や以前に受けた損傷を反映
するものとして認識されている。これらの指標のうち、
探針擦過による出血（硬い器具、例えば、探針や鋭匙を
用いて歯肉筋あるいはポケットを擦過することによる歯
肉組織の出血）だけが、活性歯周疾患と相関があるとさ
れている。しかしながら、出血そのものは疾患の主観的
指標であり、探針擦過による出血の診断価値について
は、このような出血が歯周疾患の偽似陽性の徴候と高い
割合で関連するとして、問題とされている。A.D.Haffaj
ee,S.S.SocranskyおよびJ.M.Goodson,J.Clin.Perio.10:
257-265（1983）参照。
別の方法が歯周疾患の診断用に提案されている。歯肉炎
と歯周炎はいずれも、歯肉溝液（血清の濾出液）が歯肉
溝やポケットに蓄積したり流出することを特徴とするた
め、ある部位に存在する歯肉溝液の容量測定が、歯周疾
患の診断用として提案されている。Periotron（Harco E
lectronics Ltd.;ウィニペグ、カナダ）の名で知られて
いる器具は、この原理を利用し、歯と歯肉の隙間に挿入
したPeriopaper（Harco;タスティン、カリフォルニア
州）の名で知られている多孔性材料の小片に吸収された
歯肉溝液の容量を電流測定法によって測定する。
と歯周炎はいずれも、歯肉溝液（血清の濾出液）が歯肉
溝やポケットに蓄積したり流出することを特徴とするた
め、ある部位に存在する歯肉溝液の容量測定が、歯周疾
患の診断用として提案されている。Periotron（Harco E
lectronics Ltd.;ウィニペグ、カナダ）の名で知られて
いる器具は、この原理を利用し、歯と歯肉の隙間に挿入
したPeriopaper（Harco;タスティン、カリフォルニア
州）の名で知られている多孔性材料の小片に吸収された
歯肉溝液の容量を電流測定法によって測定する。
さらに別の方法は、歯周疾患を診断するための歯肉溝液
の成分分析に関する。Kornamn,J.Period.Res.,22,（198
7）は、歯肉溝液中に存在するコラゲナーゼと歯周疾患
の程度とを相関させる方法を開示している。ある器具
（Periocheck,Advanced Clinical Technologies,Inc.,
ウェストウッド、マサチューセッツ州）は、中性プロテ
アーゼを検定して歯周疾患の存在を決定するのに用いる
ことができる。コラゲナーゼと中性プロテアーゼ双方の
発生源は、隙間に移行した多形核球（PMN）であるとさ
れている。歯肉溝液のその他の成分、例えば、その存在
が骨の破壊を示唆するものと考えられるコンドロイチン
‐4-硫酸は、歯肉炎に関連する歯肉溝液中と、歯周炎に
関連する歯肉溝液中とでは異なることが明らかとなって
いる。さらに、炎症の媒介物質であるプロスタグランジ
ンE2は、歯肉炎よりも歯周炎とより密接な関連があるこ
とも示唆されている。
の成分分析に関する。Kornamn,J.Period.Res.,22,（198
7）は、歯肉溝液中に存在するコラゲナーゼと歯周疾患
の程度とを相関させる方法を開示している。ある器具
（Periocheck,Advanced Clinical Technologies,Inc.,
ウェストウッド、マサチューセッツ州）は、中性プロテ
アーゼを検定して歯周疾患の存在を決定するのに用いる
ことができる。コラゲナーゼと中性プロテアーゼ双方の
発生源は、隙間に移行した多形核球（PMN）であるとさ
れている。歯肉溝液のその他の成分、例えば、その存在
が骨の破壊を示唆するものと考えられるコンドロイチン
‐4-硫酸は、歯肉炎に関連する歯肉溝液中と、歯周炎に
関連する歯肉溝液中とでは異なることが明らかとなって
いる。さらに、炎症の媒介物質であるプロスタグランジ
ンE2は、歯肉炎よりも歯周炎とより密接な関連があるこ
とも示唆されている。
本発明との関連で特に注目すべき点は、歯肉溝液中に高
レベルのアスパラギン酸アミノ基転移酵素（AST）の存
在が活性歯周疾患の存在と高い相関を示すという開示で
ある。この相関は、最初にAmerican Association for D
ental Research Meetings,シンシナティ、オハイオ、19
83年３月17〜20日において発表された２つの要約（J.M.
Crawford,S.Mukherjee D.A.ChambersならびにR.Cohen,A
bstract No.241およびS. Mukherjee,J.Crawford,D.A.Ch
ambersならびにR.Cohen,Abstract No.242,双方とも1983
年２月１日以降に発行された。）、ならびに論文、D.A.
Chambers,J.M.Crawford,S.MukherjeeおよびR.Cohen,J.P
eriodon.,55 No.9,526-530（1984年９月）において言及
されている。Crawfordらの要約は、歯肉炎と歯周炎を実
験的に誘発させたイヌを用いた研究について開示してい
る。具体的には、まず５匹のビーグル犬の歯肉が健康で
あることを確認し、軟らかい食餌を与え、且つ歯磨きを
止めることによって、４週間にわたって歯肉炎が進行す
るようにした。
レベルのアスパラギン酸アミノ基転移酵素（AST）の存
在が活性歯周疾患の存在と高い相関を示すという開示で
ある。この相関は、最初にAmerican Association for D
ental Research Meetings,シンシナティ、オハイオ、19
83年３月17〜20日において発表された２つの要約（J.M.
Crawford,S.Mukherjee D.A.ChambersならびにR.Cohen,A
bstract No.241およびS. Mukherjee,J.Crawford,D.A.Ch
ambersならびにR.Cohen,Abstract No.242,双方とも1983
年２月１日以降に発行された。）、ならびに論文、D.A.
Chambers,J.M.Crawford,S.MukherjeeおよびR.Cohen,J.P
eriodon.,55 No.9,526-530（1984年９月）において言及
されている。Crawfordらの要約は、歯肉炎と歯周炎を実
験的に誘発させたイヌを用いた研究について開示してい
る。具体的には、まず５匹のビーグル犬の歯肉が健康で
あることを確認し、軟らかい食餌を与え、且つ歯磨きを
止めることによって、４週間にわたって歯肉炎が進行す
るようにした。
次に、イヌの歯を結紮することによって歯周炎が誘発さ
れた。すなわち、被実験物（イヌ）の口腔内にて個々の
歯を結紮することで互いの歯を分離し（離間させ）、吸
収性物質にて口腔中の唾液を吸収ならびに除去し、そし
て、互いに分離した歯の風乾を経て歯肉溝液を採取する
ものである。具体的には、前述した歯の分離と乾燥を、
一週間毎に行って、歯肉溝液の試料を、容量測定用毛管
に採取した。この要約は、実験的歯周炎の発生時に得た
歯肉溝液は、アスパラギン酸アミノ基転移酵素（AST）
の濃度が、結紮前（468±164シグマ・フランケル単位/m
l（SFU/ml））よりも、そのピーク時において約10倍高
い（3209±1435SFU/ml）こと、さらに実験的歯肉炎の発
生時に得た歯肉溝液は、アスパラギン酸アミノ基転移酵
素濃度が血清中（41±4SFU/ml）よりも約10倍高いこと
を示した。
れた。すなわち、被実験物（イヌ）の口腔内にて個々の
歯を結紮することで互いの歯を分離し（離間させ）、吸
収性物質にて口腔中の唾液を吸収ならびに除去し、そし
て、互いに分離した歯の風乾を経て歯肉溝液を採取する
ものである。具体的には、前述した歯の分離と乾燥を、
一週間毎に行って、歯肉溝液の試料を、容量測定用毛管
に採取した。この要約は、実験的歯周炎の発生時に得た
歯肉溝液は、アスパラギン酸アミノ基転移酵素（AST）
の濃度が、結紮前（468±164シグマ・フランケル単位/m
l（SFU/ml））よりも、そのピーク時において約10倍高
い（3209±1435SFU/ml）こと、さらに実験的歯肉炎の発
生時に得た歯肉溝液は、アスパラギン酸アミノ基転移酵
素濃度が血清中（41±4SFU/ml）よりも約10倍高いこと
を示した。
Chambers et al.,J.Periodontalの論文は、イヌを用い
たさらに詳細な研究について記述しており、歯肉溝液の
平均ASTレベルは、付着レベルの臨床推定値あるいは歯
肉の炎症とは相関しないと述べている。しかし、この論
文は、歯の結紮から２週間後に起きたASTのピークは、
ビーグル犬について報告された高レベルの柔組織破壊と
破骨細胞活性の時期、ならびにサルに見られた結紮誘発
歯周炎の活性骨吸収の時期と同時期であったとしてい
る。さらにこの論文は、歯肉溝液中のASTレベルは歯垢
中の酵素レベルとは相関せず、酵素が細胞起源でないこ
とを開示している。
たさらに詳細な研究について記述しており、歯肉溝液の
平均ASTレベルは、付着レベルの臨床推定値あるいは歯
肉の炎症とは相関しないと述べている。しかし、この論
文は、歯の結紮から２週間後に起きたASTのピークは、
ビーグル犬について報告された高レベルの柔組織破壊と
破骨細胞活性の時期、ならびにサルに見られた結紮誘発
歯周炎の活性骨吸収の時期と同時期であったとしてい
る。さらにこの論文は、歯肉溝液中のASTレベルは歯垢
中の酵素レベルとは相関せず、酵素が細胞起源でないこ
とを開示している。
Mukherjeeの要約は、Ramfjordの歯周疾患指数（PDI）に
従って歯肉炎あるいは歯周炎と診断された部位から容量
測定用毛管に採取さたヒトの歯肉溝液中のASTレベルの
測定について述べている。さらに、探針で擦過した際に
出血が見られるか、あるいは見られなかったかによって
示される疾患の活性についても言及している。探針によ
る擦過で出血を見なかった部位から採取された歯肉溝液
のAST濃度は0SFU/ml（試料採取部位の数〔Ｎ〕＝４）、
最小限出血の場合は464±113SFU/ml（Ｎ＝４）、さらに
一定の出血の場合は595±192SFU/ml（Ｎ＝６）であっ
た。歯肉炎および歯周炎に従って分類されたデータを分
析したところ、それぞれ363±182SFU/ml（Ｎ＝４）と42
4±119SFU/ml（Ｎ＝３）を示した。この要約は、歯肉溝
液中のASTのレベルは、探針で擦過した時の出血によっ
て決定される疾患の活性と相関するであろうと記してい
る。
従って歯肉炎あるいは歯周炎と診断された部位から容量
測定用毛管に採取さたヒトの歯肉溝液中のASTレベルの
測定について述べている。さらに、探針で擦過した際に
出血が見られるか、あるいは見られなかったかによって
示される疾患の活性についても言及している。探針によ
る擦過で出血を見なかった部位から採取された歯肉溝液
のAST濃度は0SFU/ml（試料採取部位の数〔Ｎ〕＝４）、
最小限出血の場合は464±113SFU/ml（Ｎ＝４）、さらに
一定の出血の場合は595±192SFU/ml（Ｎ＝６）であっ
た。歯肉炎および歯周炎に従って分類されたデータを分
析したところ、それぞれ363±182SFU/ml（Ｎ＝４）と42
4±119SFU/ml（Ｎ＝３）を示した。この要約は、歯肉溝
液中のASTのレベルは、探針で擦過した時の出血によっ
て決定される疾患の活性と相関するであろうと記してい
る。
該文献は、歯肉溝液中の高いAST活性と、付着喪失ある
いは歯肉炎症のいずれかとの間の特異的な正の関連を実
証していないが、これら文献は、歯肉溝液中の高いAST
レベルと探針による擦過の出血で決定された歯周疾患活
性との間には、一般的な関係があることを確かに示して
いる。内容を引用することによって本出願に取り込む、
1984年１月31日に出願された米国特許出願第575,552号
に基づく1985年８月14日に公開されたChambersの欧州特
許出願第151,536号は、前述の論文および要約に具体化
された研究および前述の高いASTレベルと歯周疾患活性
との一般的関係の認識に関する。当該出願は、歯肉溝液
中のASTレベルが高いことは、高い確率で非進行性では
ない、進行性の歯周疾患やそれに対応する組織損傷の兆
しであるという認識に基づいた診断法を請求の範囲とし
ている。
いは歯肉炎症のいずれかとの間の特異的な正の関連を実
証していないが、これら文献は、歯肉溝液中の高いAST
レベルと探針による擦過の出血で決定された歯周疾患活
性との間には、一般的な関係があることを確かに示して
いる。内容を引用することによって本出願に取り込む、
1984年１月31日に出願された米国特許出願第575,552号
に基づく1985年８月14日に公開されたChambersの欧州特
許出願第151,536号は、前述の論文および要約に具体化
された研究および前述の高いASTレベルと歯周疾患活性
との一般的関係の認識に関する。当該出願は、歯肉溝液
中のASTレベルが高いことは、高い確率で非進行性では
ない、進行性の歯周疾患やそれに対応する組織損傷の兆
しであるという認識に基づいた診断法を請求の範囲とし
ている。
Chambersの特許出願の方法によると、歯肉溝液はマイク
ロシリンジ、毛管、あるいは吸収材細片等の手段を用い
て歯肉溝から採取される。物質の容量を測定し、さらに
採取された歯肉溝液サンプル中のAST濃度を、比色検定
法あるいは免疫検定法のいずれかによって定量する。こ
の特許出願は、歯肉溝液を検定して高レベルのアスパラ
ギン酸アミノ基転移酵素の存在を調べることを含む哺乳
動物の活性歯周疾患を決定する方法を請求の範囲として
いる。当該出願は、高レベルのAST量を、試験した種の
健康な成体の血流中に通常に見られるASTのレベル、す
なわち、用いた緻密な試験計画によって異なるが、約４
〜約32ミリ国際単位/ml（mIU/ml）の範囲を大幅に上回
るものと定義している。
ロシリンジ、毛管、あるいは吸収材細片等の手段を用い
て歯肉溝から採取される。物質の容量を測定し、さらに
採取された歯肉溝液サンプル中のAST濃度を、比色検定
法あるいは免疫検定法のいずれかによって定量する。こ
の特許出願は、歯肉溝液を検定して高レベルのアスパラ
ギン酸アミノ基転移酵素の存在を調べることを含む哺乳
動物の活性歯周疾患を決定する方法を請求の範囲として
いる。当該出願は、高レベルのAST量を、試験した種の
健康な成体の血流中に通常に見られるASTのレベル、す
なわち、用いた緻密な試験計画によって異なるが、約４
〜約32ミリ国際単位/ml（mIU/ml）の範囲を大幅に上回
るものと定義している。
Chamber等のグループが行ったASTに関する研究の最初の
報告書以来、その他の組織、細菌酵素、そして歯周疾患
との関係が研究されている。Lamster等、J.Periodonta
l.,56,139-147（1985）は、実験的歯肉炎発生時の歯肉
溝液の容量と歯肉溝液中の乳酸デヒドロゲナーゼ（LD
H）、β‐グルクロニダーゼ（BG）、およびアリールス
ルファターゼ（AS）の酵素活性を評定する研究を開示し
ている。
報告書以来、その他の組織、細菌酵素、そして歯周疾患
との関係が研究されている。Lamster等、J.Periodonta
l.,56,139-147（1985）は、実験的歯肉炎発生時の歯肉
溝液の容量と歯肉溝液中の乳酸デヒドロゲナーゼ（LD
H）、β‐グルクロニダーゼ（BG）、およびアリールス
ルファターゼ（AS）の酵素活性を評定する研究を開示し
ている。
LDHは、主に歯肉溝上皮の細胞から誘導されると言われ
ているが、歯肉溝に溶解している繊維芽細胞や多形核球
（PMN）もLDHプールの一因である。BGは、主にPMNのリ
ソソーム夥粒の分解によって誘導されると言われてお
り、マクロファージがBGプールの一因である。AS活性の
パターンは、LDHとBGのパターンの間に位置することを
特徴とし、この酵素の発生源としてはPMN、肥満細胞、
および繊維芽細胞がある。
ているが、歯肉溝に溶解している繊維芽細胞や多形核球
（PMN）もLDHプールの一因である。BGは、主にPMNのリ
ソソーム夥粒の分解によって誘導されると言われてお
り、マクロファージがBGプールの一因である。AS活性の
パターンは、LDHとBGのパターンの間に位置することを
特徴とし、この酵素の発生源としてはPMN、肥満細胞、
および繊維芽細胞がある。
歯肉溝液の『静止』容量は、濾紙細片を弱い抵抗を感じ
るまで歯肉溝に挿入し、さらに細片をその場に30秒間放
置し、吸収された液量を定量して決定した。細片を取り
出した後に30秒間待ち、さらに第２の濾紙細片をその部
位に３秒間挿入して『流動』容量を決定した。実験的歯
肉炎を生じさせた実験動物から集めたデータを解析した
ところ、４週間の研究の間に臨床的炎症は進行したが、
BGとASの濃度ならびに全活性（総量：濃度×試料容量）
は、歯肉炎の発生時には上昇したが、研究開始から２〜
３週間後にピークに達するか、または横ばい状態となる
ことが分った。このデータは、対応するBGあるいはASの
活性の増加を伴わずに液量の増加が試験の後半に起きた
ことを示した。実験中のLDH濃度と全活性の増加は劇的
なものではなく、歯肉溝液中のLDH濃度は歯肉が軽く、
炎症した実験動物よりも歯肉が健康な実験動物において
高いとした以前の研究結果と一致するものであった。La
mster等は、濃度だけに関する歯肉溝液成分データの報
告は不十分であり、試料の濃度と全活性の双方に関する
酵素データの報告が望ましいであることも示唆した。
るまで歯肉溝に挿入し、さらに細片をその場に30秒間放
置し、吸収された液量を定量して決定した。細片を取り
出した後に30秒間待ち、さらに第２の濾紙細片をその部
位に３秒間挿入して『流動』容量を決定した。実験的歯
肉炎を生じさせた実験動物から集めたデータを解析した
ところ、４週間の研究の間に臨床的炎症は進行したが、
BGとASの濃度ならびに全活性（総量：濃度×試料容量）
は、歯肉炎の発生時には上昇したが、研究開始から２〜
３週間後にピークに達するか、または横ばい状態となる
ことが分った。このデータは、対応するBGあるいはASの
活性の増加を伴わずに液量の増加が試験の後半に起きた
ことを示した。実験中のLDH濃度と全活性の増加は劇的
なものではなく、歯肉溝液中のLDH濃度は歯肉が軽く、
炎症した実験動物よりも歯肉が健康な実験動物において
高いとした以前の研究結果と一致するものであった。La
mster等は、濃度だけに関する歯肉溝液成分データの報
告は不十分であり、試料の濃度と全活性の双方に関する
酵素データの報告が望ましいであることも示唆した。
Lamster等、J.Clin.Periodontol.,13,799-804（1986）
は、歯周炎患者グループと対象グループの30秒間試料
の、LDH,BGおよびasの濃度および全活性を検定したデー
タを示している。酵素濃度、歯肉指数（GI）および探針
擦過の深さについて、負のあるいは低い正の相関係数が
得られた。
は、歯周炎患者グループと対象グループの30秒間試料
の、LDH,BGおよびasの濃度および全活性を検定したデー
タを示している。酵素濃度、歯肉指数（GI）および探針
擦過の深さについて、負のあるいは低い正の相関係数が
得られた。
一方、30秒間試料の病状の程度の増大と全酵素活性との
間に『中度の、しかし絶対的ではない』相関がデータに
よって示唆された。したがって、Lamster等は、標準化
された試料の全活性は歯肉溝液成分データを報告するた
めのより適切な手段となることを示唆した。
間に『中度の、しかし絶対的ではない』相関がデータに
よって示唆された。したがって、Lamster等は、標準化
された試料の全活性は歯肉溝液成分データを報告するた
めのより適切な手段となることを示唆した。
当該技術において様々な進歩があったにもかかわらず、
当該技術では未だ歯周疾患の型および程度を酵素による
決定をするだけの単純且つ信頼性のある手段を見出して
いない。このような方法は、かような疾患の診断、ある
いは歯周疾患状態の治療効果の決定に用いることができ
るであろう。現在のところ、歯周疾患の治療効果を決定
する完全に適切な手段は存在しない。薬剤投与、根元表
面処理、あるいは外科的処置を伴う歯周炎の連続的、あ
るいは反復的な処置が容易でないため、このような治療
経過の観察は重要事項である。
当該技術では未だ歯周疾患の型および程度を酵素による
決定をするだけの単純且つ信頼性のある手段を見出して
いない。このような方法は、かような疾患の診断、ある
いは歯周疾患状態の治療効果の決定に用いることができ
るであろう。現在のところ、歯周疾患の治療効果を決定
する完全に適切な手段は存在しない。薬剤投与、根元表
面処理、あるいは外科的処置を伴う歯周炎の連続的、あ
るいは反復的な処置が容易でないため、このような治療
経過の観察は重要事項である。
現行の方法は、歯肉の出血、探針擦過の深さ、および骨
のラジオグラフィ判定等の臨床的パラメータの観察を含
む。探針擦過の深さおよび骨レベルの観察は、治療効果
の評価の遅延をもたらすだけであるため、改善された方
法が必要なことは明らかである。
のラジオグラフィ判定等の臨床的パラメータの観察を含
む。探針擦過の深さおよび骨レベルの観察は、治療効果
の評価の遅延をもたらすだけであるため、改善された方
法が必要なことは明らかである。
本発明は歯肉溝液を検定して高レベルのアスパラギン酸
アミノ基転移酵素（AST）の存在を調べることによっ
て、歯周疾患状態の程度と型を決定する方法を提供す
る。具体的には、本発明は歯周疾患の型および程度と、
選択された時間の間に採取された歯肉溝液試料中のAST
の全活性との間に相関関係があるという知見に基づくも
のである。選択された時間の間に採取された歯肉溝液試
料中のASTの全活性は、歯肉溝液のAST濃度の検定より
も、歯周疾患活性との間に優れた相関関係を有すること
が明らかとなっている。この手法に従って採取された歯
肉溝液試料中のASTの全活性は、疾患状態の程度を示す
だけではなく、当該技術の教示に反して、歯肉炎と歯周
炎の疾患状態を区別し、存在する歯周疾患の型を同定す
るのにも用いられることが明らかとなっている。
アミノ基転移酵素（AST）の存在を調べることによっ
て、歯周疾患状態の程度と型を決定する方法を提供す
る。具体的には、本発明は歯周疾患の型および程度と、
選択された時間の間に採取された歯肉溝液試料中のAST
の全活性との間に相関関係があるという知見に基づくも
のである。選択された時間の間に採取された歯肉溝液試
料中のASTの全活性は、歯肉溝液のAST濃度の検定より
も、歯周疾患活性との間に優れた相関関係を有すること
が明らかとなっている。この手法に従って採取された歯
肉溝液試料中のASTの全活性は、疾患状態の程度を示す
だけではなく、当該技術の教示に反して、歯肉炎と歯周
炎の疾患状態を区別し、存在する歯周疾患の型を同定す
るのにも用いられることが明らかとなっている。
具体的には、本発明は歯周疾患の程度および型を決定す
る方法を提供するものであり、該方法は（１）選択され
た時間の間に歯肉溝液の試料を採取し、（２）採取した
歯肉溝液の試料に含有される全AST量を調べ、さらに
（３）歯肉溝液試料中の全AST量と、歯周疾患の存在と
程度を示す選択された試料採取時間の標準との相関関係
を調べる工程を含む。さらに、本発明は歯周疾患状態の
治療効果を決定する方法をも提供する。
る方法を提供するものであり、該方法は（１）選択され
た時間の間に歯肉溝液の試料を採取し、（２）採取した
歯肉溝液の試料に含有される全AST量を調べ、さらに
（３）歯肉溝液試料中の全AST量と、歯周疾患の存在と
程度を示す選択された試料採取時間の標準との相関関係
を調べる工程を含む。さらに、本発明は歯周疾患状態の
治療効果を決定する方法をも提供する。
本発明の方法は、定められた部位の歯肉溝液を、望まし
くは約１秒〜約３分の間、最も望ましくは約５秒〜30秒
の選択された時間にわたって試料を採取する特定の手順
に従った歯肉溝液の採取を含む。得られた歯肉溝液試料
は、試料採取部位に特有の状態によって容量が異なる。
採取した歯肉溝液は、容量の如何によらず、濃度ではな
く、存在するASTの全活性の検定を行う。検定した試料
中のASTの活性は、次に特定の試料採取時間について確
立された歯周疾患の程度と型（すなわち、歯肉炎あるい
は歯周炎）についての標準との相関関係を調べる。本発
明の改善された方法は、歯周疾患の診断に有効であるだ
けではなく、治療を施した歯肉部位の歯周疾患状態の程
度を決定することにより、歯周疾患状態に対する治療効
果を決定するのにも有効である。
くは約１秒〜約３分の間、最も望ましくは約５秒〜30秒
の選択された時間にわたって試料を採取する特定の手順
に従った歯肉溝液の採取を含む。得られた歯肉溝液試料
は、試料採取部位に特有の状態によって容量が異なる。
採取した歯肉溝液は、容量の如何によらず、濃度ではな
く、存在するASTの全活性の検定を行う。検定した試料
中のASTの活性は、次に特定の試料採取時間について確
立された歯周疾患の程度と型（すなわち、歯肉炎あるい
は歯周炎）についての標準との相関関係を調べる。本発
明の改善された方法は、歯周疾患の診断に有効であるだ
けではなく、治療を施した歯肉部位の歯周疾患状態の程
度を決定することにより、歯周疾患状態に対する治療効
果を決定するのにも有効である。
本発明の実施態様によると、歯肉溝液は、選択された短
時間において、歯と歯肉組織の間の内部空間から採取さ
れる。その時間内に採取された全容量の液を、当該技術
において周知の方法により、存在するASTの全活性を測
定する。測定したASTの量と、選択された試料採取時間
に対する歯周疾患の程度および型を示す標準との相関を
調べる。
時間において、歯と歯肉組織の間の内部空間から採取さ
れる。その時間内に採取された全容量の液を、当該技術
において周知の方法により、存在するASTの全活性を測
定する。測定したASTの量と、選択された試料採取時間
に対する歯周疾患の程度および型を示す標準との相関を
調べる。
歯肉溝液は、細い（望ましくは先の鈍い）針を持つマイ
クロシリンジ、あるいは較正の必要がない毛管等の、本
発明による種々の手段を用いて歯肉溝から採集すること
ができる。
クロシリンジ、あるいは較正の必要がない毛管等の、本
発明による種々の手段を用いて歯肉溝から採集すること
ができる。
さらに、試料は、ガーゼ、綿棒、あるいはデンタル・フ
ロス等のフィラメント状材料を用いて採取することもで
きる。前述の液は、望ましくは、Periopaper（Harco;タ
スティン、カリフォルニア州）のような紙の吸収性細片
を用いて採取する。試料は、採取器具を歯肉溝の濾出液
に直接接触させて採取する。試料採取手段は、選択され
た採取時間において採取された歯肉溝液量を十分に受け
入れるだけの容量を有するようにする。この液量は約１
μｌ以下であることが一般に望ましいが、流量が極めて
高くなれば、試料の量がずっと多くなる（すなわち、１
〜10μｌ）。しかしながら、流量１μｌ以上の試料のAS
Tレベルは一般に、選択された試料採取時間に対して、
重度の歯周炎を示唆するのに十分なASTを含んでいるの
で、試料の量が１μｌを上回ることは一般に必要ない。
採取された液は、採取手段の全容量を下回ることもあ
る。歯肉溝部位に酵素または濾出液が存在しないこと
は、一般に健康であることを示しており、また健康であ
ると判断してもよい。吸収された液量を吸収手段で測定
する必要はないが、一般に吸収手段は定められた時間内
で歯肉溝の全ての液を吸収することが望まれる。
ロス等のフィラメント状材料を用いて採取することもで
きる。前述の液は、望ましくは、Periopaper（Harco;タ
スティン、カリフォルニア州）のような紙の吸収性細片
を用いて採取する。試料は、採取器具を歯肉溝の濾出液
に直接接触させて採取する。試料採取手段は、選択され
た採取時間において採取された歯肉溝液量を十分に受け
入れるだけの容量を有するようにする。この液量は約１
μｌ以下であることが一般に望ましいが、流量が極めて
高くなれば、試料の量がずっと多くなる（すなわち、１
〜10μｌ）。しかしながら、流量１μｌ以上の試料のAS
Tレベルは一般に、選択された試料採取時間に対して、
重度の歯周炎を示唆するのに十分なASTを含んでいるの
で、試料の量が１μｌを上回ることは一般に必要ない。
採取された液は、採取手段の全容量を下回ることもあ
る。歯肉溝部位に酵素または濾出液が存在しないこと
は、一般に健康であることを示しており、また健康であ
ると判断してもよい。吸収された液量を吸収手段で測定
する必要はないが、一般に吸収手段は定められた時間内
で歯肉溝の全ての液を吸収することが望まれる。
本発明の方法は、定められた部位の歯肉溝液を、望まし
くは約５秒〜約３分間、また最も望ましくは約５秒〜30
秒間の選択された時間において試料を採取するという技
術による歯肉溝液の採取を含む。次に、何らかの手段に
より採取された口腔液試料の検定を行い、存在するAST
の量を決定する。当該技術において周知の化学的あるい
は免疫学的方法を、前述の分析に用いることができる。
前述の方法は、基質のAST触媒反応を用いて、検出可能
な反応生成物を生成するものであり、その詳細は、Cham
bersの欧州特許出願第151,536号とそれに対応する米国
出願に開示されており、その開示を参考までに本明細書
の一部に取り入れる。さらに、Chambersの欧州特許出願
は、AST濃度を決定するための免疫学的分析法をも開示
している。特に望ましい酵素法は、1986年３月18日に出
願された米国特許出願第840,890号に基づく特許協力条
約出願第PCT/US87/00541号に開示されたものであり、そ
の開示内容は参考までに本出願に取り入れた。PCT/US87
/00541による方法は、AST濃度が或値以下あるいは以上
である値の存在を確認するものであり、また本発明に従
って被験査料の評価を行う際、さらには歯周炎を示唆す
る試料、歯肉炎を示唆する試料、ならびに活性疾患の欠
如すなわち歯周炎の欠如と歯肉炎の欠如を示唆する試料
を区別するのに特に有効であると考えられる。
くは約５秒〜約３分間、また最も望ましくは約５秒〜30
秒間の選択された時間において試料を採取するという技
術による歯肉溝液の採取を含む。次に、何らかの手段に
より採取された口腔液試料の検定を行い、存在するAST
の量を決定する。当該技術において周知の化学的あるい
は免疫学的方法を、前述の分析に用いることができる。
前述の方法は、基質のAST触媒反応を用いて、検出可能
な反応生成物を生成するものであり、その詳細は、Cham
bersの欧州特許出願第151,536号とそれに対応する米国
出願に開示されており、その開示を参考までに本明細書
の一部に取り入れる。さらに、Chambersの欧州特許出願
は、AST濃度を決定するための免疫学的分析法をも開示
している。特に望ましい酵素法は、1986年３月18日に出
願された米国特許出願第840,890号に基づく特許協力条
約出願第PCT/US87/00541号に開示されたものであり、そ
の開示内容は参考までに本出願に取り入れた。PCT/US87
/00541による方法は、AST濃度が或値以下あるいは以上
である値の存在を確認するものであり、また本発明に従
って被験査料の評価を行う際、さらには歯周炎を示唆す
る試料、歯肉炎を示唆する試料、ならびに活性疾患の欠
如すなわち歯周炎の欠如と歯肉炎の欠如を示唆する試料
を区別するのに特に有効であると考えられる。
実施例１ 本実施例では、上記Crawford等およびMukherjee等の要
約、Chambers等のJ.Periodontol.（1984）の文献および
Chambersの欧州特許出願第151,536号に記載された方法
に従って、ビーグル犬を用いた実験的歯肉炎と歯周炎の
研究が実施された。
約、Chambers等のJ.Periodontol.（1984）の文献および
Chambersの欧州特許出願第151,536号に記載された方法
に従って、ビーグル犬を用いた実験的歯肉炎と歯周炎の
研究が実施された。
６匹のビーグル犬には、歯肉を健康な状態にするため
に、１カ月間、固い食餌を与え、さらに口腔清掃を毎日
行った。１カ月間の口腔清掃と固い食餌の前後に、各イ
ヌの12本の前臼歯の周囲の頬側面部位から採取した歯肉
溝液（GCF）試料中のAST活性を測定した。さらに、歯周
状態の臨床的測定も行った。１カ月間の口腔清掃後、歯
肉炎を誘発させるために、イヌの食餌は柔らかいものに
切換え、また毎日の口腔清掃を中止した。軟らかい食餌
を与え、毎日の口腔清掃を中止してから６週間後、各イ
ヌの６本の前臼歯の結紮を行い、残り６本の前臼歯を対
照とした。従って、個々のイヌには、付着喪失が誘発さ
れるようにした６本の結紮した歯と、付着喪失が起きな
かった６本の対照歯があった。
に、１カ月間、固い食餌を与え、さらに口腔清掃を毎日
行った。１カ月間の口腔清掃と固い食餌の前後に、各イ
ヌの12本の前臼歯の周囲の頬側面部位から採取した歯肉
溝液（GCF）試料中のAST活性を測定した。さらに、歯周
状態の臨床的測定も行った。１カ月間の口腔清掃後、歯
肉炎を誘発させるために、イヌの食餌は柔らかいものに
切換え、また毎日の口腔清掃を中止した。軟らかい食餌
を与え、毎日の口腔清掃を中止してから６週間後、各イ
ヌの６本の前臼歯の結紮を行い、残り６本の前臼歯を対
照とした。従って、個々のイヌには、付着喪失が誘発さ
れるようにした６本の結紮した歯と、付着喪失が起きな
かった６本の対照歯があった。
この研究では、GCF試料は、Periopaper細片（Harco、タ
スティン、カリフォルニア州）を歯肉と歯の間の歯肉溝
空間に挿入して採取され、Periopaper細片は、0.2μｌ
〜1.0μｌの容量範囲の試料を採取するのに必要な時間
の間、所定位置に保持された。この研究では、採取時間
は１秒〜10分間の範囲であった。各GCF試料の液量を、P
eriotronディジタル液量計（Harco Electronic Devices
社、イルビン、カリフォルニア州）を用いて測定した。
次に、各部位の歯肉溝液流量を、採取した試料の容量と
採取時間から計算した。AST活性は、AST活性を定量的動
力学的に決定する標準分光光度法によって測定した。様
々な容量および様々な採取時間において採取された試料
のAST活性を比較するために、各GCF試料のAST活性を
（１）GCF試料のAST活性と試料容量に基づく単位容量当
たりのAST活性濃度として、また、（２）GCF試料のAST
活性と流量に基づく30秒間当たりの全AST活性とする２
つの異なる方法によって計算した。疾患の活性と容量当
たりのAST活性の濃度として計算したAST活性との間より
も、疾患の活性と30秒間の全AST活性として計算したAST
活性との間の方に、より高い相関があることが実証でき
ることが分かった。
スティン、カリフォルニア州）を歯肉と歯の間の歯肉溝
空間に挿入して採取され、Periopaper細片は、0.2μｌ
〜1.0μｌの容量範囲の試料を採取するのに必要な時間
の間、所定位置に保持された。この研究では、採取時間
は１秒〜10分間の範囲であった。各GCF試料の液量を、P
eriotronディジタル液量計（Harco Electronic Devices
社、イルビン、カリフォルニア州）を用いて測定した。
次に、各部位の歯肉溝液流量を、採取した試料の容量と
採取時間から計算した。AST活性は、AST活性を定量的動
力学的に決定する標準分光光度法によって測定した。様
々な容量および様々な採取時間において採取された試料
のAST活性を比較するために、各GCF試料のAST活性を
（１）GCF試料のAST活性と試料容量に基づく単位容量当
たりのAST活性濃度として、また、（２）GCF試料のAST
活性と流量に基づく30秒間当たりの全AST活性とする２
つの異なる方法によって計算した。疾患の活性と容量当
たりのAST活性の濃度として計算したAST活性との間より
も、疾患の活性と30秒間の全AST活性として計算したAST
活性との間の方に、より高い相関があることが実証でき
ることが分かった。
結紮誘発歯周炎の研究は、結紮部位における付着喪失と
高いAST活性の間に正の相関があることを実証した。結
紮部位の68/92（73.9％）において、2mm以上の付着喪失
（ALOSS）が起きた。ALOSS間隔（この間隔内では、付着
レベルに大きな変化が起きた）が、これら結紮部位の各
々について測定された。結紮部位のALOSS間隔と同じ場
所で１つ以上の高いAST測定値を示すALOSS部位の数を、
第１表にまとめた。さらに、AST測定値の高い結紮して
いない対照部位（結紮した各ALOSS部位に対応するも
の）の数を比較のために表にまとめた。表の各列は、明
示した各分離レベルを上回るAST測定値を示した部位の
累積数を示している。分離レベルは、高いASTを定義す
るものであり、またALOSS部位と対照部位を区別するの
にASTレベルがどの程度敏感であるかを決定する。ASTレ
ベルは、歯肉溝液の単位容量当たりのAST活性濃度とし
て、また、30秒当たりの全AST活性とする（上記参照）
２つの異なる方法によって決定された。第１表は、AST
活性を濃度として計測する場合には、ALOSS部位と対照
部位とでは、全ての分離レベルにおいてほとんど差異が
ないことを示している。AST濃度が分離レベルを上回るA
LOSS部位の累積数は、各分離レベルにおける対照部位の
累積数と大きな違いはない。わずか５つのALOSS部位に
おいてAST濃度が3000μIU/μｌを上回ったが、これに対
して、２つの対照部位でAST濃度が3000μIU/μｌを上回
った。合計10個のALOSS部位でのみAST濃度が2000μIU/
μｌを上回ったのに対し、８つの対照部位で2000μIU/
μｌを上回った。
高いAST活性の間に正の相関があることを実証した。結
紮部位の68/92（73.9％）において、2mm以上の付着喪失
（ALOSS）が起きた。ALOSS間隔（この間隔内では、付着
レベルに大きな変化が起きた）が、これら結紮部位の各
々について測定された。結紮部位のALOSS間隔と同じ場
所で１つ以上の高いAST測定値を示すALOSS部位の数を、
第１表にまとめた。さらに、AST測定値の高い結紮して
いない対照部位（結紮した各ALOSS部位に対応するも
の）の数を比較のために表にまとめた。表の各列は、明
示した各分離レベルを上回るAST測定値を示した部位の
累積数を示している。分離レベルは、高いASTを定義す
るものであり、またALOSS部位と対照部位を区別するの
にASTレベルがどの程度敏感であるかを決定する。ASTレ
ベルは、歯肉溝液の単位容量当たりのAST活性濃度とし
て、また、30秒当たりの全AST活性とする（上記参照）
２つの異なる方法によって決定された。第１表は、AST
活性を濃度として計測する場合には、ALOSS部位と対照
部位とでは、全ての分離レベルにおいてほとんど差異が
ないことを示している。AST濃度が分離レベルを上回るA
LOSS部位の累積数は、各分離レベルにおける対照部位の
累積数と大きな違いはない。わずか５つのALOSS部位に
おいてAST濃度が3000μIU/μｌを上回ったが、これに対
して、２つの対照部位でAST濃度が3000μIU/μｌを上回
った。合計10個のALOSS部位でのみAST濃度が2000μIU/
μｌを上回ったのに対し、８つの対照部位で2000μIU/
μｌを上回った。
AST活性を30秒間に得られる全活性として計算したとこ
ろ、全ての分離レベルにおいて、ALOSS部位と対照部位
との間に明らかな相違が見られた。その上、ほぼ全ての
ALOSS部位において、AST活性のピーク・レベル（全AST/
30秒）は付着レベル喪失と時間的に相関を示した。
ろ、全ての分離レベルにおいて、ALOSS部位と対照部位
との間に明らかな相違が見られた。その上、ほぼ全ての
ALOSS部位において、AST活性のピーク・レベル（全AST/
30秒）は付着レベル喪失と時間的に相関を示した。
高いAST活性と付着喪失の相関を示す証拠を提示するこ
とに加え、研究はさらに、歯肉の炎症と結紮部位の歯肉
溝液中の高いAST活性との間に正の相関があることを実
証した。92の結紮部位の内、24の部位では重大な付着喪
失は起きなかったが、これら全ての部位において明らか
な歯肉炎症が発生したことは、歯周疾患活性を示唆する
ものであった。加えて、重大な付着喪失を示した68の結
紮部位のほとんどにおいて、付着喪失後と付着喪失時に
歯肉炎症が高い発生率で起こった。68の付着喪失部位の
うち59の部位の付着喪失期間は、結紮開始後１週間半の
間であったが、結紮の最後の２週間の間に発生した歯肉
炎症は、付着喪失間隔の後にさらに疾患活性が存在した
ことを示唆するものであった。（結紮の最後の２週間中
に起こった付着喪失は、68の付着喪失部位の内、９つの
部位だけで発生した。）結紮部位の66％において、付着
喪失を伴わない炎症が付着喪失部位とは異なる部位で明
らかに認められ（歯肉指数≧２によって示されたも
の）、結紮を行わなかった対照部位の８％だけが、同じ
期間内にこのレベルの炎症を起こした。したがって、結
紮した部位においてより頻繁に炎症が発生したという結
果は、炎症が破壊性疾患過程と相関することを示した。
第２表は、高レベルAST活性がこの炎症にどの程度相関
するかを示したものである。
とに加え、研究はさらに、歯肉の炎症と結紮部位の歯肉
溝液中の高いAST活性との間に正の相関があることを実
証した。92の結紮部位の内、24の部位では重大な付着喪
失は起きなかったが、これら全ての部位において明らか
な歯肉炎症が発生したことは、歯周疾患活性を示唆する
ものであった。加えて、重大な付着喪失を示した68の結
紮部位のほとんどにおいて、付着喪失後と付着喪失時に
歯肉炎症が高い発生率で起こった。68の付着喪失部位の
うち59の部位の付着喪失期間は、結紮開始後１週間半の
間であったが、結紮の最後の２週間の間に発生した歯肉
炎症は、付着喪失間隔の後にさらに疾患活性が存在した
ことを示唆するものであった。（結紮の最後の２週間中
に起こった付着喪失は、68の付着喪失部位の内、９つの
部位だけで発生した。）結紮部位の66％において、付着
喪失を伴わない炎症が付着喪失部位とは異なる部位で明
らかに認められ（歯肉指数≧２によって示されたも
の）、結紮を行わなかった対照部位の８％だけが、同じ
期間内にこのレベルの炎症を起こした。したがって、結
紮した部位においてより頻繁に炎症が発生したという結
果は、炎症が破壊性疾患過程と相関することを示した。
第２表は、高レベルAST活性がこの炎症にどの程度相関
するかを示したものである。
AST活性を30秒間試料当たりの全活性として計算したと
ころ、ほとんどの炎症部位も高レベルであった。しか
し、AST活性を単位容量当たりの濃度として計算した場
合、結紮していない対照部位よりもASTレベルが高い結
紮部位はほとんどないので、この相関は先の場合ほど明
白ではなかった。これらの結果は、30秒当たりの全活性
として表された高いAST活性と、疾患活性を伴う歯肉炎
症との間には、正の相関があることを実証した。
ころ、ほとんどの炎症部位も高レベルであった。しか
し、AST活性を単位容量当たりの濃度として計算した場
合、結紮していない対照部位よりもASTレベルが高い結
紮部位はほとんどないので、この相関は先の場合ほど明
白ではなかった。これらの結果は、30秒当たりの全活性
として表された高いAST活性と、疾患活性を伴う歯肉炎
症との間には、正の相関があることを実証した。
容量当たりの酵素活性濃度に対して、30秒試料の全活性
としてASTレベルを測定すると、ASTと歯周疾患状態の程
度ならびに型との関係は、さらに容易に明らかとなる
（第３表参照）。結紮した歯と結紮していない歯とで
は、AST濃度に差異が認められるが、ベースライン、健
康な状態、および歯肉炎症状態を比較した場合、AST濃
度にはほとんど明白な相違は見られない。これとは対照
的に、計算された30秒試料中のAST量を比較すると、結
紮した（実験的歯周炎の）歯と、健康、ベースライン、
および歯肉炎状態の歯とでは、明白な相違が見られる。
としてASTレベルを測定すると、ASTと歯周疾患状態の程
度ならびに型との関係は、さらに容易に明らかとなる
（第３表参照）。結紮した歯と結紮していない歯とで
は、AST濃度に差異が認められるが、ベースライン、健
康な状態、および歯肉炎症状態を比較した場合、AST濃
度にはほとんど明白な相違は見られない。これとは対照
的に、計算された30秒試料中のAST量を比較すると、結
紮した（実験的歯周炎の）歯と、健康、ベースライン、
および歯肉炎状態の歯とでは、明白な相違が見られる。
この実施例は、時間設定した歯肉溝液試料中の高いAST
総量が付着喪失の発生と密接な相関があることを実証し
ている。さらに、この実施例は、結紮誘発疾患活性期間
中、高いAST活性は歯肉炎症の高い発生頻度と相関があ
ることを実証している。
総量が付着喪失の発生と密接な相関があることを実証し
ている。さらに、この実施例は、結紮誘発疾患活性期間
中、高いAST活性は歯肉炎症の高い発生頻度と相関があ
ることを実証している。
実施例２ 本実施例では、歯周炎の危険性が中程度であるが治療を
受けていない34人のヒト被検者に対して、歯周炎の長期
的研究を実施した。一被検者当たり最高52カ所の部位を
臨床的に評価し、さらに３〜７四半期にわたって四半期
毎にASTの存在を検定した。そして実施例１の方法に従
い、Periopaper（Harco;タスティン、カリフォルニア
州）細片を歯肉溝空間に挿入し、さらに各試料について
記録された種々の時間にわたって歯肉溝液を採取し、各
患者の各部位のAST活性を検定した。次に、得られた歯
肉溝液試料のAST濃度を、従来の検定法によって決定し
た。ある限られた量の歯肉溝液を採取したが、試料を採
取するのに必要な時間に基づいて歯肉溝液の流量を計算
することができた。次に、30秒間にわたって試料を採取
した場合に存在するASTの量を決定できた。
受けていない34人のヒト被検者に対して、歯周炎の長期
的研究を実施した。一被検者当たり最高52カ所の部位を
臨床的に評価し、さらに３〜７四半期にわたって四半期
毎にASTの存在を検定した。そして実施例１の方法に従
い、Periopaper（Harco;タスティン、カリフォルニア
州）細片を歯肉溝空間に挿入し、さらに各試料について
記録された種々の時間にわたって歯肉溝液を採取し、各
患者の各部位のAST活性を検定した。次に、得られた歯
肉溝液試料のAST濃度を、従来の検定法によって決定し
た。ある限られた量の歯肉溝液を採取したが、試料を採
取するのに必要な時間に基づいて歯肉溝液の流量を計算
することができた。次に、30秒間にわたって試料を採取
した場合に存在するASTの量を決定できた。
歯肉溝液の試料は、６〜18カ月にわたって３カ月毎に一
被験者当たり最高52の部位から採取した。ポケット深
さ、付着レベル、歯肉指数、および探針擦過による出血
を含む歯周状態の臨床的測定も四半期毎に実施した。こ
れらの臨床測定値を用いて、各歯肉部位で発生している
疾患活性の程度を決定した。AST活性と疾患程度の相関
を調べるために、全ての研究部位を疾患活性の４つの異
なるカテゴリーに分類した（第４表）。各部位の平均AS
T活性を計算し、次に各カテゴリー内の全ての部位の平
均ASTを求めた。30秒間試料当たりのASTを用いて疾患活
性の４つのカテゴリーの平均AST活性レベルを計算した
ところ、AST活性の大きさと疾患程度の間には明白な相
関があった（第1a図）。最も高い平均ASTレベルは、最
も重度の疾患活性、すなわち付着喪失と関連した。さら
にAST活性レベルは、歯肉炎の程度と出血に相関した。
すなわち、より高い平均ASTレベルは、モード歯肉指数
＝２および／または探針擦過による頻繁な出血と関連
し、より低いレベルは、モード歯肉指数＝１の軽度の歯
肉炎と関連し、さらに最低レベルは、モード歯肉指数＝
０の歯肉の健康と関連した（第1a図）。これとは対照的
に、AST濃度を用いた場合、疾患程度の異なるカテゴリ
ーの間には、有意な差異は認められなかった（第1b
図）。これらの結果は、30秒間当たりの全活性として計
算されたAST活性が、AST活性の濃度よりも疾患活性との
間で高い相関を示した実施例１の結果と一致するもので
あった。さらに、高いASTは、歯肉炎および歯周炎の程
度との相関を示した。
被験者当たり最高52の部位から採取した。ポケット深
さ、付着レベル、歯肉指数、および探針擦過による出血
を含む歯周状態の臨床的測定も四半期毎に実施した。こ
れらの臨床測定値を用いて、各歯肉部位で発生している
疾患活性の程度を決定した。AST活性と疾患程度の相関
を調べるために、全ての研究部位を疾患活性の４つの異
なるカテゴリーに分類した（第４表）。各部位の平均AS
T活性を計算し、次に各カテゴリー内の全ての部位の平
均ASTを求めた。30秒間試料当たりのASTを用いて疾患活
性の４つのカテゴリーの平均AST活性レベルを計算した
ところ、AST活性の大きさと疾患程度の間には明白な相
関があった（第1a図）。最も高い平均ASTレベルは、最
も重度の疾患活性、すなわち付着喪失と関連した。さら
にAST活性レベルは、歯肉炎の程度と出血に相関した。
すなわち、より高い平均ASTレベルは、モード歯肉指数
＝２および／または探針擦過による頻繁な出血と関連
し、より低いレベルは、モード歯肉指数＝１の軽度の歯
肉炎と関連し、さらに最低レベルは、モード歯肉指数＝
０の歯肉の健康と関連した（第1a図）。これとは対照的
に、AST濃度を用いた場合、疾患程度の異なるカテゴリ
ーの間には、有意な差異は認められなかった（第1b
図）。これらの結果は、30秒間当たりの全活性として計
算されたAST活性が、AST活性の濃度よりも疾患活性との
間で高い相関を示した実施例１の結果と一致するもので
あった。さらに、高いASTは、歯肉炎および歯周炎の程
度との相関を示した。
得られたデータを解析したところ、付着喪失（ALOSS）
として表される最も重度の疾患活性と、AST活性を30秒
間試料の全AST活性として計算した時の最も軽度の疾患
活性（GO）との間に明白な相違が見られた。しかし、AS
T活性を濃度として計算した時には、疾患部位と健康部
位との間にはほとんど相違はなかった（第５表参照）。
として表される最も重度の疾患活性と、AST活性を30秒
間試料の全AST活性として計算した時の最も軽度の疾患
活性（GO）との間に明白な相違が見られた。しかし、AS
T活性を濃度として計算した時には、疾患部位と健康部
位との間にはほとんど相違はなかった（第５表参照）。
疾患の存在（ALOSS）と疾患が存在しないことの相違
も、個々の被験者の疾患部位と健康部位を比較した順位
確率化論によっても実証された。
も、個々の被験者の疾患部位と健康部位を比較した順位
確率化論によっても実証された。
計算された30秒間AST試料のデータを、この順位確率化
論によって解析したところ、ASTは付着喪失の発生と極
めて有意な相関があることが分かった（第２図参照）。
高いASTレベルと付着喪失の間に相関がなければ、その
患者の要約的指数は0.5以下となるが、高いASTと付着喪
失の間に正の相関があれば、要約的指数は0.5を上回
る。１つあるいはそれ以上の付着喪失部位を有する23人
の患者の内（全部で58部位）、20人の患者において指数
が0.5を上回り、有意性の高い結果を示した（ｐ＝0.000
244）。対照としては、健康と判断された23人の被験者
の合計597部位を用いた。したがって、この研究は、高
いASTレベルと歯周疾患との相関だけではなく、ASTと歯
周炎との間に高い相関（ならびに時間的な関係）がある
ことを示した。
論によって解析したところ、ASTは付着喪失の発生と極
めて有意な相関があることが分かった（第２図参照）。
高いASTレベルと付着喪失の間に相関がなければ、その
患者の要約的指数は0.5以下となるが、高いASTと付着喪
失の間に正の相関があれば、要約的指数は0.5を上回
る。１つあるいはそれ以上の付着喪失部位を有する23人
の患者の内（全部で58部位）、20人の患者において指数
が0.5を上回り、有意性の高い結果を示した（ｐ＝0.000
244）。対照としては、健康と判断された23人の被験者
の合計597部位を用いた。したがって、この研究は、高
いASTレベルと歯周疾患との相関だけではなく、ASTと歯
周炎との間に高い相関（ならびに時間的な関係）がある
ことを示した。
実施例３ 実施例２の研究と類似した第２の研究として、歯周炎の
病歴をもつ25人の被験者各人の８カ所の歯肉部位から、
30秒間にわたってperiopaper細片を用いて歯肉溝液を採
取することにより、全ての歯肉溝液試料を採取した。AS
T検定および臨床評価を、３〜７四半期にわたり四半期
毎に行った。
病歴をもつ25人の被験者各人の８カ所の歯肉部位から、
30秒間にわたってperiopaper細片を用いて歯肉溝液を採
取することにより、全ての歯肉溝液試料を採取した。AS
T検定および臨床評価を、３〜７四半期にわたり四半期
毎に行った。
この研究において、各歯肉溝液試料は30秒間に設定され
た試料採取時間にわたって採取され、AST活性は試料当
たりの全活性としてのみ計算した。ポケット深さ、付着
レベル、および歯肉指数等の歯周状態の臨床測定も四半
期毎に行った。実施例２の研究と同様に、臨床測定は、
各歯肉部位で発生している疾患活性の程度を判断するの
に用いた。それら測定部位は、各疾患程度カテゴリーに
分類され、さらに部位当たりの平均ASTレベルを第３図
に示した。このグラフは、AST活性の大きさと歯周疾患
の程度との相関を示しており、第１図と類似するもので
ある。
た試料採取時間にわたって採取され、AST活性は試料当
たりの全活性としてのみ計算した。ポケット深さ、付着
レベル、および歯肉指数等の歯周状態の臨床測定も四半
期毎に行った。実施例２の研究と同様に、臨床測定は、
各歯肉部位で発生している疾患活性の程度を判断するの
に用いた。それら測定部位は、各疾患程度カテゴリーに
分類され、さらに部位当たりの平均ASTレベルを第３図
に示した。このグラフは、AST活性の大きさと歯周疾患
の程度との相関を示しており、第１図と類似するもので
ある。
このように、ヒトに自然に発生した歯周疾患の２つの各
研究結果から、歯肉溝液中の最高AST活性レベルは、重
度の付着喪失（歯周炎）と相関することが確認された。
さらに双方の研究は、高いASTレベルが中程度の歯肉炎
とも相関し、低ASTレベルが軽度の歯肉炎と相関し、ま
た最低ASTレベルは歯肉炎が無いことと相関することを
実証した。
研究結果から、歯肉溝液中の最高AST活性レベルは、重
度の付着喪失（歯周炎）と相関することが確認された。
さらに双方の研究は、高いASTレベルが中程度の歯肉炎
とも相関し、低ASTレベルが軽度の歯肉炎と相関し、ま
た最低ASTレベルは歯肉炎が無いことと相関することを
実証した。
この実施例のヒトの研究は、四半期毎に根元表面処理お
よび歯石除去を行うメインテナンス・プログラムに登録
された者に対して行われた。この定期的な治療にもかか
わらず、ある部位ではかなりの付着喪失が見られたが、
別の部位では治療が成功したことを示唆する、かなりの
付着増加が見られた。15人の被験者の合計31の研究部位
において、2mm以上の付着増加として分類される顕著な
付着増加が見られた。これら部位のうち23部位（74％）
について、付着レベルの増加は、AST活性レベルの低下
と相関しているが、これら部位のうちわずか９つの部位
（26％）において、付着レベルの増加がAST活性の増加
と相関した。さらに、付着増加に相関するASTの平均減
少（平均減少＝492μIU）は、ASTの平均増加（平均増加
＝210μIU）の２倍を上回った。それ故、メインテナン
ス治療の効果があった患者の72％において、付着増加と
同時にASTの低下が起きた。ウィルコクソンの符号付順
位検定によってデータを解析したところ、付着増加に相
関するASTレベルの低下は有意性が高く、ｐ＝0.002であ
ることがわかった。これらの結果は、AST活性の低下
は、しばしば疾患活性度の低下を伴うことを示した。そ
れ故、歯肉溝液（GCF）中のAST活性の測定は、疾患の発
生を検出する診断器具としてだけではなく、治療に対す
る反応を観察するのにも有効である。
よび歯石除去を行うメインテナンス・プログラムに登録
された者に対して行われた。この定期的な治療にもかか
わらず、ある部位ではかなりの付着喪失が見られたが、
別の部位では治療が成功したことを示唆する、かなりの
付着増加が見られた。15人の被験者の合計31の研究部位
において、2mm以上の付着増加として分類される顕著な
付着増加が見られた。これら部位のうち23部位（74％）
について、付着レベルの増加は、AST活性レベルの低下
と相関しているが、これら部位のうちわずか９つの部位
（26％）において、付着レベルの増加がAST活性の増加
と相関した。さらに、付着増加に相関するASTの平均減
少（平均減少＝492μIU）は、ASTの平均増加（平均増加
＝210μIU）の２倍を上回った。それ故、メインテナン
ス治療の効果があった患者の72％において、付着増加と
同時にASTの低下が起きた。ウィルコクソンの符号付順
位検定によってデータを解析したところ、付着増加に相
関するASTレベルの低下は有意性が高く、ｐ＝0.002であ
ることがわかった。これらの結果は、AST活性の低下
は、しばしば疾患活性度の低下を伴うことを示した。そ
れ故、歯肉溝液（GCF）中のAST活性の測定は、疾患の発
生を検出する診断器具としてだけではなく、治療に対す
る反応を観察するのにも有効である。
上記発明の種々の修正および変更が、当業者によってな
されることが予測される。特に、歯周疾患状態のいかな
る潜在的存在と程度を示す比色検定用具の改良に関する
検定方法の修正が行われることが予測される。したがっ
て、添付の請求の範囲に示された限定のみがなされるべ
きである。
されることが予測される。特に、歯周疾患状態のいかな
る潜在的存在と程度を示す比色検定用具の改良に関する
検定方法の修正が行われることが予測される。したがっ
て、添付の請求の範囲に示された限定のみがなされるべ
きである。
図面の簡単な説明 第1a図は、時間を計測して採取した試料の全AST酵素レ
ベルと歯周疾患の程度および型との関係を示すグラフで
ある。
ベルと歯周疾患の程度および型との関係を示すグラフで
ある。
第1b図は、AST酵素濃度と歯周疾患の程度および型との
関係を示すグラフである。
関係を示すグラフである。
第２図は、高いAST酵素レベルと付着喪失との統計的関
係を示すグラフである。
係を示すグラフである。
第３図は、時間を計測して採取した試料の全AST酵素レ
ベルと歯周疾患の程度および型との関係を示すグラフで
ある。
ベルと歯周疾患の程度および型との関係を示すグラフで
ある。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 米国特許4801535（ＵＳ，Ａ) 欧州特許出願公開151536 Ｊ Ｃｌｉｍ Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏ ｌ，13（８），Ｐ．799−804，1986
Claims (7)
- 【請求項１】哺乳動物の歯周疾患の程度および型を決定
する方法であって、下記工程、すなわち： 選択された時間内にて歯肉溝液を採取し、 採取した前記歯肉溝液中に存在するアスパラギン酸
アミノ基転移酵素の総量を決定するために、採取した前
記歯肉溝液試料の分析を行い、および 前記歯肉溝液試料中に存在するアスパラギン酸アミ
ノ基転移酵素の総量と、選択された時間における歯周疾
患の程度と型を示す標準とを相関させる、 工程を含むことを特徴とする、哺乳動物の歯周疾患の程
度および型を決定する方法。 - 【請求項２】歯周疾患状態の治療効果を決定する方法で
あって、下記工程、すなわち： 選択された時間内にて歯肉溝液を採取し、 採取した前記歯肉溝液中に存在するアスパラギン酸
アミノ基転移酵素の総量を決定するために、採取した前
記歯肉溝液試料の分析を行い、および 前記歯肉溝液試料中に存在するアスパラギン酸アミ
ノ基転移酵素の総量と、歯周疾患の程度を示す標準とを
相関させる、 工程を含むことを特徴とする、歯周疾患状態の治療効果
を決定する方法。 - 【請求項３】前記歯肉溝液が、１秒から３分間の選択さ
れた時間内で採取された歯肉溝液である請求項１もしく
は２に記載の方法。 - 【請求項４】前記歯肉溝液が、５秒から30秒間の選択さ
れた時間内で採取された歯肉溝液である請求項３に記載
の方法。 - 【請求項５】前記歯肉溝液が、吸収材細片で採取された
歯肉溝液である請求項１もしくは２に記載の方法。 - 【請求項６】前記分析工程が、比色分析法にて行われ
る請求項１もしくは２に記載の方法。 - 【請求項７】前記比色分析法が、アスパラギン酸アミノ
基転移酵素の選択された上限値量の存在を示す半定量分
析である請求項６に記載の方法。
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|---|---|---|---|
| US07/262,995 US5047328A (en) | 1988-10-26 | 1988-10-26 | Method for determination of the type and severity of periodontal disease states |
| US262,995 | 1988-10-26 | ||
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|---|---|---|---|
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| AU (1) | AU626346B2 (ja) |
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| DE (1) | DE68915437T2 (ja) |
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- 1988-10-26 US US07/262,995 patent/US5047328A/en not_active Expired - Lifetime
-
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- 1989-10-25 JP JP1511789A patent/JPH074273B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1989-10-25 EP EP89912553A patent/EP0404887B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-10-25 CA CA002001434A patent/CA2001434C/en not_active Expired - Fee Related
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