JPH0748997B2 - 抗真菌性製品の生産法と真菌の生育阻害法 - Google Patents

抗真菌性製品の生産法と真菌の生育阻害法

Info

Publication number
JPH0748997B2
JPH0748997B2 JP1162490A JP16249089A JPH0748997B2 JP H0748997 B2 JPH0748997 B2 JP H0748997B2 JP 1162490 A JP1162490 A JP 1162490A JP 16249089 A JP16249089 A JP 16249089A JP H0748997 B2 JPH0748997 B2 JP H0748997B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
product
afp
species
penicillium
growth
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP1162490A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH02117389A (ja
Inventor
エイ バンデンバーグ ピーター
エス クンカ ブレア
Original Assignee
インドプコ・インコーポレイテツド
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by インドプコ・インコーポレイテツド filed Critical インドプコ・インコーポレイテツド
Publication of JPH02117389A publication Critical patent/JPH02117389A/ja
Publication of JPH0748997B2 publication Critical patent/JPH0748997B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K4/00—Peptides having up to 20 amino acids in an undefined or only partially defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K4/04—Peptides having up to 20 amino acids in an undefined or only partially defined sequence; Derivatives thereof from bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23B—PRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
    • A23B11/00—Preservation of milk or dairy products
    • A23B11/60—Preservation of cheese or cheese preparations
    • A23B11/65—Preservation of cheese or cheese preparations by addition of preservatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23B—PRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
    • A23B2/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general
    • A23B2/70—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals
    • A23B2/725—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
    • A23B2/729—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23B—PRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
    • A23B2/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general
    • A23B2/70—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals
    • A23B2/725—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
    • A23B2/729—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A23B2/742—Organic compounds containing oxygen
    • A23B2/754—Organic compounds containing oxygen containing carboxyl groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23B—PRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
    • A23B2/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general
    • A23B2/70—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals
    • A23B2/725—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
    • A23B2/729—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A23B2/783—Microorganisms; Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; PREPARATION THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/13—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using additives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
    • C12P1/04—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/41—Pediococcus
    • A23V2400/429—Urinaeequi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 〔微生物の寄託〕 この発明を実施するのに好適したペジオコツクス・アシ
デイラクテイシイはアメリカ合衆国、メリーランド州、
ベルツビレエのアメリカン・タイプ・カルチヤ・コレク
シヨン（American Type Culture Collection）にペジオ
コツクス・アシデイラクテイシイ（Pediococcus acidi
lactici）ATCC25742として、寄託されている。
〔産業上の利用分野〕
この発明は、ペジオコツクス（Pediococcus）種によつ
て生産される抗真菌性（「抗真菌用」と同義）の製品
（antifungalproduct−AFP）に関するものである。特に
この発明は酵母及びカビ阻害性の製品（AFP）の生産法
と同製品を食品及び他の組成物中で真菌類（酵母及びカ
ビ）の生育を阻止するために利用する方法に係る。
〔従来の技術〕
乳酸菌によつて生産される抗菌性化合物についての報告
が発表されて来ている（Abdel−Bar,N.,N.D.Harris,and
R.L.Rill:J.Food Sei.52,411−415（1987）、Angelo.
j.A.,Shahani,K.M.and A.D.Angelo:J.Dairy Sci.63.520
（1980）、及びBranen.A.L.,Go.H.C.,and R.P.Genske:
J.Food Sci.40,446−450（1975））。生産される化合物
は普通、バクテリオシン、過酸化水素及び乳酸である
（Raccach,M.:CRC Crit.Rev.Microbiol.14,291−309（1
987）、及びDahiya,R.S.,and M.L.Speck:J.Dairy Sci.5
1,1568−1571（1968））。ペジオコツクス属の細菌は乳
酸菌であるとみなされ、乳酸を生産する（Mundt.J.O.,
W.G.Beattie,and F.R.Wieland:J.Bacteriol.98,938−94
2（1969））。
ペジオコツクス属の細菌によつて酵母及びカビ阻害性の
製品が生産されるとの報告は、何ら存在しない。抗真菌
性の製品が土壌のアクチノミセス類によつて生産される
との報告（Yamaguchi.H.K.Uchida,T.,Hiratani,T.Hara,
H.Fukuyasu,Y.,Kazaro,S.,and S.Inouye:Antimicrob.Ag
ents.Chemother.30,705−712（1986））があり、またシ
ユードモナス菌がシデロフオル（siderophore）の生産
を介して間接的に真菌類の生育を阻止することが報告さ
れている（Vandenbergh,P.A.,C.F.Gonzalez,A.M.Wrigh
t,and B.S.Kunka:Appl.Environ.Microbiol.42,128−132
（1983））。これらの微生物はペジオコツクス属と無縁
のものである。
本願出願人の出願に係る特開平１−86883号公報には、
ラクトバチルス（Lactobacillus）種から得られた真菌
類阻害性製品（FIC）が開示されている。これらの製品
は化学的にみて、本発明に係る製品とは全く異なつた混
合物である。
〔発明課題〕
したがつてこの発明は本明細書で「AFP」（antifungal
product）と称するところの、ペジオコツクス（Pedioco
ccus）種から得られる抗真菌（酵母及びカビ）性の新規
な代謝産物を提供することを課題とする。またこの発明
は、かかる抗真菌性製品を生産する方法と食品及び他の
組成物中で同製品を利用する方法を提供することも、一
つの課題とする。この発明の他の目的と長所は以下に掲
げる記述により、極く明白に理解できる。
〔一般的な説明〕
第１図にはペジオコツクス・アシデイラクテイシイ（Pe
diococcus acidilactici）ATCC25742から得られた精製
々品（AFP）の逆相HPLCクロマトグラムが示され、第２
図には第１図の部分精製々品（AFP）のFAB質量スペクト
ルが示されている。
本発明は、抗真菌用製品の生産法であって、 （ａ）ペジオコックス（Pediococcus）種を増殖培地中
で、アミノ酸またはペプチド、タンパク質、タンパク質
の加水分解物またはタンパク質の酵素消化物の存在下で
培養し、 （ｂ）バリン及び乳酸を含む約400〜500ダルトンの分子
量の化合物を有する抗真菌用製品（AFP）であって、pH1
〜５で安定、最適pHが３であり、100℃での60分間の加
熱によって活性への影響を受けず、プロテアーゼによっ
て消化され、リパーゼ、リソチーム、DNアーゼ及びRNア
ーゼ並びに1053g/cm2（15ポンド／インチ2）の圧力下、
121℃での15分間のオートクレーブ処理で活性への影響
がなく、アスペルギルス・フラブス（Aspergillus fla
vus）、アスペルギルス・ニガー（A. niger）、アスペ
ルギルス・テリウス（A. terreus）、シヤエトミウム
・グロボスム（Chaetomium globosum）、クラドスポリ
ウム（Cladosporium）種、フサリウム・ソラニ（Fusari
um solani）、モニリニア・フルクチコーラ（Monilini
a fructicola）、ペニシリウム・オグザリクム（Penic
illium oxalicum）、ペニシリウム（Penicillium）種、
トリコダーマ（Trichoderma）種、及びサッカロミセス
・セレビツシエ（Saccharomyces cerevisiae）を阻害
する製品（AFP）を、上記増殖培地から単離する、生産
法である。
また、本発明は、抗真菌用製品の生産法であって、 （ａ）トウモロコシ浸出液、システイン、ニンニクエキ
ス、乳消化物、酵母エキス、乳或は卵或はダイズの酵素
消化物、または乳或は卵或はダイズの加水分解物中に存
在する、上記抗真菌用製品（AFP）の生成を誘導する発
育因子、タンパク資源及び炭素源を含む細胞用の増殖培
地中でペジオコックス（Pediococcus）種の生細胞を培
養して、該培地中に製品（AFP）を産生させ、（ｂ）培
養後に増殖培地を処理して生細胞を含んでもよい上記抗
真菌用製品（AFP）を得る生産法である。
また、本発明は、抗真菌用製品の生産法であって、 （ａ）トウモロコシ浸出液、システイン、ニンニクエキ
ス、乳消化物、酵母エキス、乳或は卵或はダイズの酵素
消化物、乳或は卵或はダイズの加水分解物、または糖乳
中に存在する、上記抗真菌用製品（AFP）の生成を誘導
する発育因子、タンパク資源及び炭素源を含む細胞用の
増殖培地中で、ペジオコックス・アシデイラクテイシイ
（Pediococcus acidilactici）ATCC25742の抗真菌特性
を有するペジオコックス種の生細胞を培養して、該培地
中に上記抗真菌用製品（AFP）を産生させ、 （ｂ）培養後に増殖培地を処理し、かくして、生細胞を
含んでもよい上記抗真菌用製品（AFP）を得る、生産法
である。
また、本発明は、抗真菌用製品の生産法であって、 （ａ）トウモロコシ浸出液、システイン、ニンニクエキ
ス、乳消化物、酵母エキス、乳或は卵或はダイズの酵素
消化物、または乳或は卵或はダイズの加水分解物中に存
在する、上記抗真菌用製品（AFP）の生成を誘導する発
育因子、及び炭素源を含む細胞用の増殖培地中で、検定
株としてのペニシリウム・オグザリクム（Penicillium
oxalicum）の生育を阻害するところのペジオコックス
・アシデイラクテイシイ（Pediococcus acidilactic
i）ATCC25742の抗真菌特性を有するペジオコックス種の
細胞を培養して、上記抗真菌用製品（AFP）を該栄養培
地中で産生させ、 （ｂ）培養後に増殖培地を、上記抗真菌用製品（AFP）
を透過させ増殖培地の他の成分を透過させない微細孔濾
過手段によって濾過処理する、生産法である。
更に、本発明は、真菌類の生育を阻害することが必要な
組成物中で真菌の生育を阻害する生育阻害法であって、 ペジオコックス（Pediococcus）種の生細胞を増殖培地
中で該培地中に単離可能な量の抗真菌用製品が生産され
るように培養して得た、上記抗真菌用製品（AFP）を、
上記組成物に添加する生育阻害法である。
好ましい抗真菌性製品（AFP）は、前述したペジオコツ
クス・アシデイラクテイシイ（Pediococcus acidilact
ici）ATCC25742によつて生産される。このペジオコツク
ス・アシデイラクテイシイATCC25742が最も有効である
天然の（遺伝子工学に依らない）菌源であると認められ
るけれども、抗真菌性製品の生産情報をエンコードする
（染色体内或はプラスミド内の）遺伝子をもつ天然の或
は遺伝子工学処理された他のペジオコツクス（Pediococ
cus）株を、製品（AFP）を生産するために使用すること
ができる。
ペジオコツクス（Pediococcus）用の種々の増殖培地を
使用できる。同培地は細胞の増殖と抗真菌性製品（AF
P）の生産を促進せねばならない。増殖を促すために培
地は、タンパク質及び炭素源を含まなければならない。
培地は製品（AFP）の生産を促進する発育因子を含む。
発育因子はトウモロコシ浸出液、システイン、ニンニク
エキス、乳消化物、酵母エキス、乳或は卵或はダイズの
酵素消化物、乳或は卵或はダイズの加水分解物に含まれ
る。
天然源からのタンパク質性或はアミノ酸性の組成物を、
増殖培地中で用いることができる。したがつて乳、ホエ
ー、酵母、酵母エキス或はタンパク質消化物のようなタ
ンパク質源を使用できる。炭素源としてはフルクトー
ス、シヨ糖、デキストロース或は糖蜜を用い得る。マン
ガン塩及びマグネシウム塩のような細胞の増殖を促すミ
ネラルはトウモロコシ浸出液中のものを利用できるし、
また純粋な塩として加えることもできる。アルカリ金属
リン酸塩のような緩衝剤も、pHを保持するのに有利に使
用できる。細胞を10℃と50℃との間の温度で増殖させる
のが望ましい。栄養培地と増殖条件についての数多くの
変形例は、当業者であれば容易に考え付くであろう。
細胞の増殖後に増殖培地を、大部分の細胞を消滅させる
ように処理した上で濃縮するか、或は増殖培地から抗真
菌性製品（AFP）を分離するのがよい。抗真菌性製品は
使用前に乾燥、凍結乾燥、凍結或は冷蔵できる。比較的
に濃縮しない形の製品を生産するための推賞できる方法
は、培地中で抗真菌性製品が産生された後で増殖培地を
噴霧乾燥する方法である。これらの方法の全ては当業者
によく知られている。
増殖培地から製品を限外過法により、また当業者に周
知である分子ふるいクロマトグラフイー、イオン交換ク
ロマトグラフイー及び高圧液体クロマトグラフイー（HP
LC）を含むクロマトグラフイー法により、分離すること
ができる。製品（AFP）から不純物を分子ふるい法、限
外過法、逆浸透法及び他の微細孔過法を用いて除去
することができる。また低級アルキルアルコール及びエ
ステルのような各種の有機溶剤を用いて増殖培地から製
品を抽出することもできる。ｎ−ブタノール、イソプロ
パノール、アセトン、酢酸エチル或はエタノールを水と
組合せて、利用できる。分離のために実質上どのような
化学的及び／または物理的方法も、利用可能である。
製品（AFP）は実質的に、分子量が約500ダルトンより小
さいペプチド、最適のpH値としてpH3を備え、100℃の温
度にさらして60分間、影響を受けない。製品をブタノー
ル抽出及びHPLC（高圧液体クロマトグラフイー）を利用
して精製した。逆相HPLCを用いC8カラムでクロマトグラ
フイーを実施した。アミノ酸分析により純粋な分画の形
でアミノ酸バリンが存在することが示された。質量スペ
クトル分析によりペプチドの分子量が、約500ダルトン
より小さく約400ダルトンより大きいことが示された。
特定の精製製品（AFP）中には実質的な量の乳酸が存在
しうる。
製品（AFP）は、pH1〜５で安定であり、プロテアーゼに
よって消化され、リパーゼ、リソチーム、DNアーゼ及び
RNアーゼ並びに1053g/cm2（15ポンド／インチ2）の圧力
下、121℃での15分間のオートクレーブ処理で活性への
影響がない（実施例５参照）。
製品（AFP）は次の代表的なカビ及び酵母を阻害した：
アスペルギルス・フラブス（Aspergillus flavus）、
アスペルギルス・ニガー（A. niger）、アスペルギル
ス・テリウス（A. terreus）、シヤエトミウム・グロ
ボスム（Chaetomium globosum）、クラドスポリウム
（Cladosporium）種、フサリウム・ソラニ（Fusarium
solani）、モニリニア・フルクチコーラ（Monilinia f
ructicola）、ペニシリウム・オグザリクム（Penicilli
um oxalicum）、ペニシリウム（Penicillium）種、ト
リコダーマ（Trichoderma）種、及びサツカロミセス・
セレビツシエ（Saccharomyces cerevisiae）。
製品（AFP）によつて処理される「組成物（materia
l）」とは、本製品によつて処理することが望ましい何
らかの表層を有するものを指す。かかる組成物は生きて
いる表層も生きていない表層も持ちうる。抗真菌性製品
（AFP）は食品中で、検定菌株としてのペニシリウム・
オグザリクム（Penicillium oxalicum）を少なくとも7
2時間阻害するだけ用いるのが望ましい。「阻害（inhib
ition）」とは、検定菌株が本製品（AFP）を用いない場
合ほど良くは生育できないことを指す。使用する製品
（AFP）の量は、処理すべき組成物中の真菌細胞の個数
に依存する。
本発明の方法によりどのような食品も、そして特にペツ
トフツド、炭酸飲料、コテージチーズ、ヨーグルト、マ
ーガリン、パン、穀物及び堅果（ナツツ）を、保存する
ことができる。製品（AFP）が広範囲のpHで有効である
ことから、同製品（AFP）は本発明の方法に従つてどの
ような食品を処理する上でも特に有用である。この抗真
菌性製品は、変敗しがちな発酵食品、加工食品及び保存
食品において特に有利に使用できる。他の食料分野での
用途としては、カビによるアフラトキシン汚染を阻止す
るための貯蔵牧草及びトウモロコシの処理、ピーナツの
処理がある。紙、織物及びプラスチツク材のような各種
の非食品組成物も、本製品（AFP）で処理することがで
きる。作物或は動物、特に哺乳類の生きた組織中で感染
防止のために製品（AFP）を使用することができる。哺
乳類に対し製品（AFP）を、体内或は体外で局所的に施
用するのがよい。石けん、シヤンプー、髪及び皮膚用の
薬剤（コンデイシヨナー）、及び化粧品に本製品（AF
P）を組合せることもできる。
〔明細な説明〕
実施例の要約 以下の実施例は、ペジオコツクス・アシデイラクテイシ
イ（Pediococcus acidilactici）ATCC25742からの製品
（AFP）の単離と試験に係る。ATCC25742由来の好ましい
製品（AFP）に類似した抗真菌特性を有する製品（AFP）
は、次の実施例１で示すようにペジオコツクス（Pedioc
occus）属の他の菌株からも得られる。
実施例１ ペジオコツクス（Pediococcus）種の各種の単離体を液
体窒素中に貯蔵培養物として保存し、MRS（登録商標）
培地（アメリカ合衆国、デトロイトのDifco社製）上で
繁殖させた。
ペジオコツクス種をMRS寒天を用い、寒天表面上で1.0cm
の円形区画内におき35℃で18時間培養した。それから各
培養平板を、105胞子/mlのペニシリウム・オグザリクム
（Penicillum oxalicum）を含むMRS軟寒天8mlで覆つ
た。無菌の蒸留水を用いてカビ胞子の懸濁液を作製し、
波長530nmで0.1の吸光度に調整した。48時間後に各1.0c
mの円形培養区画を取捲く阻害領域について調べた。結
果を第１表に示す。
この第１表に見られるように、ペジオコツクス・アシデ
イラクテイシイ（Pediococcus acidilactici）ATCC257
42が抗真菌性製品（AFP）の最も優れた生産者である。
ペジオコツクス・ペントサセウス（Pediococcus pento
saceus）も、良好な量の抗真菌性製品（AFP）を生産し
た。
実施例２ 本実施例は望ましい株菌ATCC25742の栄養上の要求を、
各種の培地について検討するものである。ペジオコツク
ス・アシデイラクテイシイ（Pediococcus acidilactic
i）ATCC25742を、種々の異なつた栄養添加物を補充した
100mlのMRSブロス中において35℃で18時間培養した。18
時間後に培養物を４℃において10,000×ｇで20分間遠心
分離にかけ、次に上澄液について抽出操作を行なつた。
上澄液をフラツシユ蒸発器で乾いた状態にまで濃縮し、
10mlの蒸留水中に再懸濁させた。これに100mlのｎ−ブ
タノールを混合した。水−ブタノール混合物を分液漏斗
に入れ、均一化するように25℃で60分間放置した。次に
ブタノール層を取得し、フラツシユ蒸発器を用いて乾い
た状態にまで濃縮した。次に残分を5mlの蒸留水中に再
懸濁させ、洗滌し濃縮した。洗滌後の残分を5mlの蒸留
水中に再懸濁させた。洗滌した再懸濁残渣（1ml）に8ml
のMRS軟寒天と105胞子/mlのペニシリウム・オグザリク
ム（Penicillium oxalicum）を混合し、MRS寒天の表面
上に重ね合せて25℃で72時間培養した。第２表と第３表
に結果を示す。
第２表に示したように、ラクトアルブミンの酵素消化物
が製品（AFP）の生産に最大の促進効果を附与した。第
３表に示したようにトウモロコシ浸出液、酵母エキス及
びデキストロースに種々の補給物を加えて培地を調製し
た。ラクトアルブミンの酵素消化物が製品（AFP）の生
産に最大の促進効果を与えた。
実施例３ 本実施例はペジオコツクス・アシデイラクテイシイ（Pe
diococcus acidilactici）ATCC25742から得た製品（AF
P）の種々の真菌類に対する阻害スペクトル試験に係
る。ペジオコツクス・アシデイラクテイシイATCC25742
を、前述のEdmin S（登録商標）１％を補給した１のM
RSブロス中において35℃で18時間培養した。培養物を４
℃において10000×ｇで20分間、遠心分離にかけた。次
に上澄液をフラツシユ蒸発器を用い、100mlに濃縮し
た。次にこれを900mlのｎ−ブタノールで抽出すること
とし、分液漏斗に入れて25℃で60分間放置して均一化さ
せた。次いでブタノール層をフラツシユ蒸発器で濃縮
し、10mlの蒸留水中に再懸濁させた。洗滌した再懸濁残
分（1ml）を、105胞子/mlの濃度の各種の真菌に対する
抗菌性検定に供した。無菌の蒸留水を用いて菌胞子の懸
濁液を作製し、波長530nmで0.1の吸光度に調整した。第
４表に結果を示す。
製品（AFP）はアスペルギルス・フラブス、アスペルギ
ルス・ニガー、アスペルギルス・テリウス、シヤエトミ
ウム・グロボスム、クラドスポリウム種、フサリウム・
ソラニ、モニリニア・フルクチコーラ、ペニシリウム・
オグザリクム、トリコダーマ種、ペニシリウム種、及び
サツカロミセス・セレビツシエを阻害しえた。
実施例４ 本実施例は製品（AFP）の精製法と特性試験に係る。ペ
ジオコツクス・アシデイラクテイシイ（Pediococcus a
cidilactici）ATCC25742を、前述のEdamin S（登録商
標）1.0％を補給した１のMRSブロス中に植菌した。培
養を35℃で18時間、行なつた。次に培養物を以下の手順
で処理した。
工程1:細胞と培地を４℃において10000×ｇで20分間、
遠心分離にかけた。細胞は排棄し、フラツシユ蒸発器を
用いて上澄液を100mlに濃縮した。
工程2:濃縮後の上澄液に900mlのｎ−ブタノールを混合
し、分液漏斗に入れて25℃で60分間、均一化させるよう
に放置した。
工程3:ブタノール層を取出し、フラツシユ蒸発器を用い
て乾いた状態にまで濃縮した。残分を10mlの蒸留水中に
再懸濁させ、洗滌し濃縮した上で、再び10mlの蒸留水中
に再懸濁させた。
工程4:洗滌後の再懸濁残分を一連のSep−Pak（登録商
標）Ｃ−18カートリツジ（アメリカ合衆国、マサチユー
セツツ州、ミルフオードのWatersAssociates製）を、残
分が淡黄色を呈するまで通過させた。
工程5:この調製物（500μｌ）を、EconosilC−８（登録
商標。250×10mm,10μｍ粒子。アメリカ合衆国、イリノ
イ州、デアフイールドのAlltech Associates製）カラム
に装填した。このカラムを移動相として水を用いて2.0m
l/分の割合で溶出処理した。カラム温度は80℃に保つ
た。溶出物を波長269nmで鑑視して1.0mlの画分（フラク
シヨン）を採取した。
画分について無菌の管を用い、50μｌの試料に50μｌの
ペニシリウム・オグザリクム（105胞子/mlの濃度。波長
530nmでの吸光度を0.1に調整）を混合し、MRS軟寒天の4
00μｌと組合せて検定した。
ブタノール抽出濃縮物の試料を1.0NのHClと1.0NのNaOH
を用いて、1.0から12.0までの範囲のpH値に調整した。
抗真菌活性を、４℃で24時間貯蔵した後で測定した。1m
lの試料を種々の温度25℃、37℃、60℃、100℃及び121
℃で異なつた時間々隔、培養した。その後に抗菌活性度
が低下するかどうかについて検定した。
抗真菌性製品（AFP）の精製は、ブタノール抽出とＣ−
８調製カラムを用いた精製とにより達成した。画分を採
取し、抗菌活性について検定した。
部分精製した製品（AFP）のHPLCクロマトグラムは、９
−9.5分の間に採取した画分で抗菌活性を呈した。HPLC
（高圧液体クロマトグラフイー）法による次いでの活性
画分の分析によつて、第１図に示すような単一のピーク
が示された。
精製画分についてのアミノ酸分布図を、PICO−TAG（登
録商標）system（アメリカ合衆国、マサチユーセツツ
州、ミルフオードのWaters Associates製）を修正した
方式を用いて得た。本方法は試料加水分解、次のフエニ
ルイソチオシアナートを用いての誘導体化、次いでのHP
LCによる分析を含む（Mundt,J.O.,W.G.Beattie,andF.R.
Wieland:J.Bacteriol.98,938−942（1969））。アミノ
酸は、活性画分加水分解物の保持時間を公知の標準の保
持時間と比較することにより同定した。
質量スペクトルを、VG Micromass 7070EQマグネチツク
・セクター質量分析計を用いて得た。イオン化は、中性
キセノン原子を8KVに加速するIon Tech（登録商標）高
速原子衝撃銃を用いて達成した。試料基質はジチオトレ
イトール：ジチオエリトール（3:1）であつた。
主要な質量ピークは第２図に示すように、分子イオン＋
１を表わすM/E＝442、ナトリウムの分子イオン＋23を表
わすM/E＝464、カリウムの分子イオン＋39を表わすM/E
＝480で観察された。製品（AFP）はバリンと乳酸を含ん
でいた。
実施例５ 実施例４の製品（AFP）の抗菌活性に対する酵素の効果
をアメリカ合衆国、ミズーリ州、セント・ルイスのSigm
a Chemical Co.から入手した種々の酵素を用いて検べ
た。使用した酵素にはプロテアーゼ、リソチーム、リパ
ーゼ、DNアーゼ及びRNアーゼが含まれる。適当した緩衝
液を用いて各酵素の貯蔵溶液（10mg/ml）を調製した。
部分精製した抗真菌性製品（AFP）を各貯蔵酵素と共
に、適当した温度で60分間培養した。その後に酵素を不
活化するように各試料を100℃で３分間、煮沸した。次
いで抗真菌性製品の活性を検定した。
製品（AFP）はプロテアーゼに対し感受性であつた。抗
菌活性はリパーゼ、リソチーム、DNアーゼ、RNアーゼ或
は100℃での60分間の加熱によつては影響されなかつ
た。15lbs/in2の圧力下で121℃での15分間のオートクレ
ーブ処理も、活性に対し影響を及ぼさなかつた。活性は
pH1〜５で最も安定であり、約５より高いpH値では低下
するのを観察した。種々のメンブレンを用いての透析実
験によつて、抗菌性製品（AFP）の分子寸法が1000ダル
トンより小さいことが示された。
実施例６ 本実施例は製品（AFP）についてのメンブレンを用いた
限外過を示すものである。ペジオコツクス・アシデイ
ラクテイシイ（Pediococcus acidilactici）ATCC25742
を、酵母エキス１％を補給した１のMRSブロス中で35
℃において18時間培養した。
細胞を４℃において10000×ｇで15分間、遠心分離し
た。上澄液を集め、0.22μｍのフイルターを用い過滅
菌した。
過滅菌した上澄液を次に、Amicon（登録商標）Model8
200限外過セル（アメリカ合衆国、マサチユーセツツ
州、ダンバースのW.R.Grace Co.製）に入れた。それか
ら２種のDiaflo（登録商標）限外過膜YM10とYC05を用
い、上澄液を過した。これらの過膜の分子量遮断値
はそれぞれ10000ダルトンと500ダルトンである。抗菌活
性の検定を、限外過によつて得た液について実施し
た。
何れのメンブレンYM10,YC05の透過物も、抗菌活性を示
した。出発容量は1000mlで、最終容量は950mlであつ
た。この結果、抗菌性製品（AFP）が500ダルトンより小
さい分子量をもつことが示された。
実施例７ 本実施例は限外過した製品（AFP）の濃度について示
すものである。製品（AFP）を、Amicon Model8200限外
過セルを用いて調製した。上澄液を、YM10 Diaflo限
外過膜及びYC05 Diaflo限外過膜を用いて過し
た。YC05幕を用いて得た液を、フラツシユ蒸発或は凍
結乾燥によつて10倍の濃度のものにした。
生産された製品（AFP）の活性を管検定法（AFP組成物50
μｌ、波長530nmでの吸光度が0.1である濃度のペニシリ
ウム・オグザリクム胞子50μｌ、MRS軟寒天400μｌ）に
より、検べた。試料を未希釈状態で、そして1:1及び1:2
に系列希釈して検定した。フラツシユ蒸発処理したYC05
液製品（AFP）は、未希釈のものと1:1の希釈物で抗菌
活性を示した。凍結乾燥処理したYC05液製品（AFP）
は、未希釈のもの、1:1希釈物及び1:2希釈物の何れでも
抗菌活性を示した。
この結果、製品AFPを凍結乾燥法或はフラツシユ蒸発法
で濃縮できるが、活性が若干低下することが示された。
実施例８ 製品（AFP）を市販のスパゲテイソース（pH4.3）に添加
して、ペニシリウム・オグザリクム（P. oxalicum）の
生育を阻害する能力について調べた。スパゲテイソース
は、次の成分を含むものであつた：粉砕トマト、ダイズ
油、塩、オリーブ油、ロマノチーズ（romano chees
e）、脱水ニンニクスパイス、天然の賦香料。スパゲテ
イソース（20g）を無菌のペトリ皿にのせ、ペニシリウ
ム・オグザリクムをスパゲテイソース1g当り2.5×103胞
子の最終濃度になまで加えた。実施例３におけるのと同
様にして作製したAFP（1ml）を、ペトリ皿上でソースに
植菌した。次にペトリ皿試料を、30℃で数日間培養し
た。対照（AFPを添加せず）中では48時間後にペニシリ
ウム・オグザリクムの生育が観察されたのに対し、AFP
を加えた試験物中では120時間後にさえ糸状菌の生育を
認めえなかつた。
実施例９ 製品（AFP）をヨーグルト（pH4.1）に添加して、ペニシ
リウム・オグザリクム（P. oxalicum）の生育を阻害す
る能力について調べた。ヨーグルトは次の成分を含むも
のであつた：培養後の脱脂乳、ゼラチン及び修飾食用デ
ンプンと生ヨーグルト培養物。ヨーグルト（20g）を無
菌のペトリ皿にのせ、ペニシリウム・オグザリクムをヨ
ーグルト1g当り2.5×103胞子の最終濃度になるまで加え
た。実施例３におけるのと同様にして作製したAFP（1m
l）を、試験皿上でヨーグルトに混合した。ペトリ皿試
料を、30℃で数日間培養した。対照（AFPを添加せず）
中で96時間後にペニシリウム・オグザリクムの生育が観
察されたのに対し、AFPを含む試験皿では144時間後にお
いてさえ糸状菌の生育を認めえなかつた。
実施例10 製品（AFP）をソフトマーガリン（pH5.0）に添加して、
ペニシリウム・オグザリクム（P. oxalicum）の生育を
阻害する能力について調べた。ソフトマーガリンは次の
成分を含むものであつた：液体ダイズ油、部分的に脱水
素したダイズ油、水、塩、乳漿、植物モノ及びジグリセ
ライド、ダイズ油レシチン、安息香酸ナトリウム、クエ
ン酸。ソフトマーガリン（20g）を無菌のペトリ皿上に
のせ、ペニシリウム・オグザリクムをマーガリン1g当り
2.5×103胞子の最終濃度になるまで加えた。実施例３に
おけるのと同様にして作製したAFP（1ml）を、試験皿上
でマーガリンに混合した。次にペトリ皿試料を、30℃で
数日間培養した。対照（AFPを添加せず）中で96時間後
にペニシリウム・オグザリクムの生育が観察されたのに
対し、AFPを含む試験皿では144時間後においてさえ糸状
菌の生育を認めえなかつた。
実施例11 製品（AFP）をスライスチーズに添加して、ペニシリウ
ム・オグザリクム（P. oxalicum）の生育を阻害する能
力について調べた。チーズは次の成分を含むものであつ
た：乳、チーズ培養物、塩、酵素、塩化カルシウム、
水、脱脂乳チーズ、乳漿、クリーム、クエン酸ナトリウ
ム、ソルビン酸。スライスチーズ（20g）を無菌のペト
リ皿上にのせ、ペニシリウム・オグザリクムをチーズ1g
当り2.5×103胞子の最終濃度になるまで加えた。実施例
３におけるのと同様にして作製したAFP（1ml）を、試験
皿上でスライスチーズに混ぜた。次にペトリ皿試料を、
30℃で数日間培養した。対照（AFPを添加せず）中で48
時間後にペニシリウム・オグザリクムの生育が観察され
たのに対し、AFPを含む試験皿では120時間後においてさ
え糸状菌の生育を認めえなかつた。
実施例12 製品（AFP）をコテージチーズ（pH5.1）に添加して、ペ
ニシリウム・オグザリクム（P. oxalicum）の生育を阻
害する能力について調べた。コテージチーズは次の成分
を含むものであつた：培養後の脱脂乳、乳クリーム、
塩、安定剤（ガーゴム、ハリエンジユ豆ガム、カロジー
ナン（carrogeenan））、乳酸、リン酸。コテージチー
ズ（20g）を無菌のペトリ皿上にのせ、ペニシリウム・
オグザリクムをコテージチーズ1g当り2.5×103胞子の最
終濃度になるまで加えた。実施例３におけるのと同様に
して作製したAFP（1ml）を、試験皿上のコテージチーズ
に混ぜた。ペトリ皿試料を、30℃で数日間培養した。対
照（AFPを添加せず）中で72時間後にペニシリウム・オ
グザリクムの生育が観察されたのに対し、AFPを含む試
験皿では120時間後においてさえ糸状菌の生育を認めえ
なかつた。
実施例13 製品（AFP）をペパローニ・スライスに添加して、ペニ
シリウム・オグザリクム（P. oxalicum）の生育を阻害
する能力について調べた。ペパローニは次の成分を含む
ものであつた：ブタ肉、牛肉、塩、水、デキストロー
ス、天然スパイス、乳酸、発酵スタータ、樹脂油剤、パ
プリカ、脱水ニンニク、亜硫酸ナトリウム、BHA、BHT、
クエン酸。ペパローニ・スライス（20g）を無菌のペト
リ皿上にのせ、ペニシリウム・オグザリクムをペパロー
ニ・スライス1g当り2.5×103胞子の最終濃度になるまで
加えた。実施例３におけるのと同様にして作製したAFP
（1ml）を、試験皿上のペパローニ・スライスに混ぜ
た。次にペトリ皿試料を、30℃で数日間培養した。対照
（AFPを添加せず）中で36時間後にペニシリウム・オグ
ザリクムの生育が観察されたのに対し、AFPを含む試験
皿では144時間後においてさえ糸状菌の生育を認めえな
かつた。
【図面の簡単な説明】
第１図は、ペジオコツクス・アシデイラクテイシイ（Pe
diococcus acidilactici）ATCC25742から得られた精製
々品の逆相高圧液体クロマトグラフイーによるクロマト
グラムを示す。 第２図は、第１図の部分精製々品の高速原子衝撃質量ス
ペクトルを示す。

Claims (26)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】抗真菌用製品の生産法であって、 （ａ）ペジオコックス（Pediococcus）種を増殖培地中
    で、アミノ酸またはペプチド、タンパク質、タンパク質
    の加水分解物またはタンパク質の酵素消化物の存在下で
    培養し、 （ｂ）バリン及び乳酸を含む約400〜500ダルトンの分子
    量の化合物を有する抗真菌用製品（AFP）であって、pH1
    〜５で安定、最適pHが３であり、100℃での60分間の加
    熱によって活性への影響を受けず、プロテアーゼによっ
    て消化され、リパーゼ、リソチーム、DNアーゼ及びRNア
    ーゼ並びに1053g/cm2（15ポンド／インチ2）の圧力下、
    121℃での15分間のオートクレーブ処理で活性への影響
    がなく、アスペルギルス・フラブス(Aspergillus flav
    us）、アスペルギルス・ニガー（A. niger）、アスペ
    ルギルス・テリウス（A. terreus）、シヤエトミウム
    ・グロボスム（Chaetomium globosum）、クラドスポリ
    ウム（Cladosporium）種、フサリウム・ソラニ（Fusari
    um solani）、モニリニア・フルクチコーラ（Monilini
    a fructicola）、ペニシリウム・オグザリクム（Penic
    illium oxalicum）、ペニシリウム（Penicillium）種、
    トリコダーマ（Trichoderma）種、及びサッカロミセス
    ・セレビツシエ（Saccharomyces cerevisiae）を阻害
    する製品（AFP）を、上記増殖培地から単離する、生産
    法。
  2. 【請求項２】前記したタンパク質の酵素消化物がラクト
    アルブミンの酵素消化物である、請求項１に記載の生産
    法。
  3. 【請求項３】前記したタンパク質の酵素消化物が卵アル
    ブミンの酵素消化物である、請求項１に記載の生産法。
  4. 【請求項４】前記したタンパク質の加水分解物が酵母エ
    キスである、請求項１に記載の生産法。
  5. 【請求項５】前記アミノ酸がシステインである、請求項
    １に記載の生産法。
  6. 【請求項６】前記したタンパク質の酵素消化物がカゼイ
    ンの酵素消化物である、請求項１に記載の生産法。
  7. 【請求項７】前記製品（AFP）を粉体として得る、請求
    項１に記載の生産法。
  8. 【請求項８】抗真菌用製品の生産法であって、 （ａ）トウモロコシ浸出液、システイン、ニンニクエキ
    ス、乳消化物、酵母エキス、乳或は卵或はダイズの酵素
    消化物、または乳或は卵或はダイズの加水分解物中に存
    在する、製品（AFP）の生成を誘導する発育因子、タン
    パク質源及び炭素源を含む細胞用の増殖培地中でペジオ
    コックス（Pediococcus）種の生細胞を培養して、該培
    地中に製品（AFP）を産生させ、 （ｂ）培養後に増殖培地を処理し、かくして、生細胞を
    含んでもよくバリン及び乳酸を含む約400〜500ダルトン
    の分子量の化合物を有する抗真菌用製品（AFP）であっ
    て、pH1〜５で安定、最適pHが３であり、100℃での60分
    間の加熱によって活性への影響を受けず、プロテアーゼ
    によって消化され、リパーゼ、リソチーム、DNアーゼ及
    びRNアーゼ並びに1053g/cm2（15ポンド／インチ2）の圧
    力下、121℃での15分間のオートクレーブ処理で活性へ
    の影響がなく、アスペルギルス・フラブス（Aspergillu
    s flavus）、アスペルギルス・ニガー（A. niger）、
    アスペルギルス・テリウス（A. terreus）、シヤエト
    ミウム・グロボスム（Chaetomium globosum）、クラド
    スポリウム（Cladosporium）種、フサリウム・ソラニ
    （Fusarium solani）、モニリニア・フルクチコーラ
    （Monilinia fructicola）、ペニシリウム・オグザリ
    クム（Penicillium oxalicum）、ペニシリウム（Penici
    llium）種、トリコダーマ（Trichoderma）種、及びサッ
    カロミセス・セレビツシエ（Saccharomyces cerevisia
    e）を阻害する製品（AFP）を得る、生産法。
  9. 【請求項９】前記増殖培地が発育因子として酵母エキス
    を、タンパク質源としてカゼインまたはダイズ消化物
    を、主ミネラル源及び発育因子としてトウモロコシ浸出
    液を、炭素源としてショ糖、デキストロース、フルクト
    ースまたは糖蜜を、それぞれ含むものである、請求項８
    に記載の生産法。
  10. 【請求項１０】培養後に増殖培地を生細胞と共に乾燥す
    る、請求項８に記載の生産法。
  11. 【請求項１１】前記増殖培地の少なくとも一部の成分を
    除去した製品（AFP）を得る、請求項８に記載の生産
    法。
  12. 【請求項１２】抗真菌用製品の生産法であって、 （ａ）トウモロコシ浸出液、システイン、ニンニクエキ
    ス、乳消化物、酵母エキス、乳或は卵或はダイズの酵素
    消化物、乳或は卵或はダイズの加水分解物、または糖乳
    中に存在する、製品（AFP）の生成を誘導する発育因
    子、タンパク質源及び炭素源を含む細胞用の増殖培地中
    で、ペジオコックス・アシデイラクテイシイ（Pediococ
    cus acidilactici）ATCC 25742の抗真菌特性を有する
    ペジオコックス種の生細胞を培養して、該培地中に製品
    （AFP）を産生させ、 （ｂ）培養後に増殖培地を処理し、かくして、生細胞を
    含んでもよくバリン及び乳酸を含む約400〜500ダルトン
    の分子量の化合物を有する抗真菌用製品（AFP）であっ
    て、pH1〜５で安定、最適pHが３であり、100℃での60分
    間の加熱によって活性への影響を受けず、プロテアーゼ
    によって消化され、リパーゼ、リソチーム、DNアーゼ及
    びRNアーゼ並びに1053g/cm2（15ポンド／インチ2）の圧
    力下、121℃での15分間のオートクレーブ処理で活性へ
    の影響がなく、アスペルギルス・フラブス（Aspergillu
    s flavus）、アスペルギルス・ニガー（A. niger）、
    アスペルギルス・テリウス（A. terreus）、シヤエト
    ミウム・グロボスム（Chaetomium globosum）、クラド
    スポリウム（Cladosporium）種、フサリウム・ソラニ
    （Fusarium solani）、モニリニア・フルクチコーラ
    （Monilinia fructicola）、ペニシリウム・オグザリ
    クム（Penicillium oxalicum）、ペニシリウム（Penici
    llium）種、トリコダーマ（Trichoderma）種、及びサッ
    カロミセス・セレビツシエ（Saccharomyces cerevisia
    e）を阻害する製品（AFP）を得る、生産法。
  13. 【請求項１３】培養後に増殖培地を前記ペジオコックス
    種の生細胞と共に乾燥して製品（AFP）を得る、請求項1
    2に記載の生産法。
  14. 【請求項１４】前記増殖培地の少なくとも一部の成分を
    除去して製品（AFP）を得る、請求項12に記載の生産
    法。
  15. 【請求項１５】前記ペジオコックス種の生細胞を増殖培
    地中で約10℃から50℃の間の温度で培養し、次に増殖培
    地を乾燥して製品（AFP）を得る、請求項12に記載の生
    産法。
  16. 【請求項１６】前記増殖培地が発育因子として酵母エキ
    スを、タンパク質源としてカゼインまたはダイズ消化物
    を、主ミネラル源及び発育因子としてトウモロコシ浸出
    液を、炭素源としてショ糖、デキストロース、フルクト
    ースまたは糖蜜を、それぞれ含むものである、請求項12
    に記載の生産法。
  17. 【請求項１７】抗真菌用製品の生産法であって、 （ａ）トウモロコシ浸出液、システイン、ニンニクエキ
    ス、乳消化物、酵母エキス、乳或は卵或はダイズの酵素
    消化物、または乳或は卵或はダイズの加水分解物中に存
    在する、製品（AFP）の生成を誘導する発育因子、及び
    炭素源を含む細胞用の増殖培地中で、検定株としてのペ
    ニシリウム・オグザリクム（Penicillium oxalicum）
    の生育を阻害するペジオコックス・アシデイラクテイシ
    イ（Pediococcus acidilactici）ATCC 25742の抗真菌
    特性を有するペジオコックス種の細胞を培養して、バリ
    ン及び乳酸を含む約400〜500ダルトンの分子量の化合物
    を有する抗真菌用製品（AFP）であって、pH1〜５で安
    定、最適pHが３であり、100℃での60分間の加熱によっ
    て活性への影響を受けず、プロテアーゼによって消化さ
    れ、リパーゼ、リソチーム、DNアーゼ及びRNアーゼ並び
    に1053g/cm2（15ポンド／インチ2）の圧力下、121℃で
    の15分間のオートクレーブ処理で活性への影響がなく、
    アスペルギルス・フラブス（Aspergillus flavus）、
    アスペルギルス・ニガー（A. niger）、アスペルギル
    ス・テリウス（A. terreus）、シヤエトミウム・グロ
    ボスム（Chaetomium globosum）、クラドスポリウム
    （Cladosporium）種、フサリウム・ソラニ（Fusarium
    solani）、モニリニア・フルクチコーラ（Monilinia f
    ructicola）、ペニシリウム・オグザリクム（Penicilli
    um oxalicum）、ペニシリウム（Penicillium）種、トリ
    コダーマ（Trichoderma）種、及びサッカロミセス・セ
    レビツシエ（Saccharomyces cerevisiae）を阻害する
    製品（AFP）を該栄養培地中で産生させ、 （ｂ）培養後に増殖培地を、製品（AFP）を透過させ増
    殖培地の他の成分を透過させない微細孔濾過手段によっ
    て濾過処理する、生産法。
  18. 【請求項１８】前記濾過手段による濾過処理後に製品
    （AFP）を乾燥する、請求項17に記載の生産法。
  19. 【請求項１９】前記濾過手段による濾過処理後に製品
    （AFP）をさらに、液体クロマトグラフィー法によって
    精製する、請求項17に記載の生産法。
  20. 【請求項２０】前記増殖培地を、前記細胞の植菌前に殺
    菌処理する、請求項17に記載の生産法。
  21. 【請求項２１】真菌類の生育を阻害することが必要な組
    成物中で真菌の生育を阻害する生育阻害法であって、 ペジオコックス（Pediococcus）種の生細胞を増殖培地
    中で該培地中に単離可能な量の抗真菌用製品が生産され
    るように培養して得た、バリン及び乳酸を含む約400〜5
    00ダルトンの分子量の化合物を有する抗真菌用製品（AF
    P）であって、pH1〜５で安定、最適pHが３であり、100
    ℃での60分間の加熱によって活性への影響を受けず、プ
    ロテアーゼによって消化され、リパーゼ、リソチーム、
    DNアーゼ及びRNアーゼ並びに1053g/cm2（15ポンド／イ
    ンチ2）の圧力下、121℃での15分間のオートクレーブ処
    理で活性への影響がなく、アスペルギルス・フラブス
    （Aspergillus flavus）、アスペルギルス・ニガー
    （A. niger）、アスペルギルス・テリウス（A. terre
    us）、シヤエトミウム・グロボスム（Chaetomium glob
    osum）、クラドスポリウム（Cladosporium）種、フサリ
    ウム・ソラニ（Fusarium solani）、モニリニア・フル
    クチコーラ（Monilinia fructicola）、ペニシリウム
    ・オグザリクム（Penicillium oxalicum）、ペニシリウ
    ム（Penicillium）種、トリコダーマ（Trichoderma）
    種、及びサッカロミセス・セレビツシエ（Saccharomyce
    s cerevisiae）を阻害する製品（AFP）を、上記組成物
    に添加する生育阻害法。
  22. 【請求項２２】前記組成物が食品である、請求項21に記
    載の生育阻害法。
  23. 【請求項２３】前記食品がペットフード、炭酸飲料、コ
    ッテージチーズ、ヨーグルト、マーガリン、スプレッド
    類、パン、穀物、及び堅果の何れかである、請求項22に
    記載の生育阻害法。
  24. 【請求項２４】前記組成物が生物の組織である、請求項
    21に記載の生育阻害法。
  25. 【請求項２５】バリン及び乳酸を含む約400〜500ダルト
    ンの分子量の化合物を有する抗真菌用製品（AFP）であ
    って、pH1〜５で安定、最適pHが３であり、100℃での60
    分間の加熱によって活性への影響を受けず、プロテアー
    ゼによって消化され、リパーゼ、リソチーム、DNアーゼ
    及びRNアーゼ並びに1053g/cm2（15ポンド／インチ2）の
    圧力下、121℃での15分間のオートクレーブ処理で活性
    への影響がなく、アスペルギルス・フラブス（Aspergil
    lus flavus）、アスペルギルス・ニガー（A. nige
    r）、アスペルギルス・テリウス（A. terreus）、シヤ
    エトミウム・グロボスム（Chaetomium globosum）、ク
    ラドスポリウム（Cladosporium）種、フサリウム・ソラ
    ニ（Fusarium solani）、モニリニア・フルクチコーラ
    （Monilinia fructicola）、ペニシリウム・オグザリ
    クム（Penicillium oxalicum）、ペニシリウム（Penici
    llium）種、トリコダーマ（Trichoderma）種、及びサッ
    カロミセス・セレビツシエ（Saccharomyces cerevisia
    e）を阻害する製品（AFP）。
  26. 【請求項２６】請求項１に記載の生産法によって生産さ
    れた抗真菌用製品。
JP1162490A 1988-09-23 1989-06-23 抗真菌性製品の生産法と真菌の生育阻害法 Expired - Lifetime JPH0748997B2 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US248,438 1988-09-23
US07/248,438 US4877615A (en) 1988-09-23 1988-09-23 Antifungal product

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH02117389A JPH02117389A (ja) 1990-05-01
JPH0748997B2 true JPH0748997B2 (ja) 1995-05-31

Family

ID=22939133

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP1162490A Expired - Lifetime JPH0748997B2 (ja) 1988-09-23 1989-06-23 抗真菌性製品の生産法と真菌の生育阻害法

Country Status (9)

Country Link
US (1) US4877615A (ja)
EP (1) EP0360290B1 (ja)
JP (1) JPH0748997B2 (ja)
AT (1) ATE106408T1 (ja)
AU (1) AU612479B2 (ja)
CA (1) CA1340809C (ja)
DE (2) DE360290T1 (ja)
ES (1) ES2016782T3 (ja)
NZ (1) NZ229398A (ja)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4929445A (en) * 1988-01-25 1990-05-29 Microlife Technics, Inc. Method for inhibiting Listeria monocytogenes using a bacteriocin
EP0574681A1 (en) * 1992-06-15 1993-12-22 Quest International B.V. Yogurt product containing bacteriocin from pediococcus adilactici
FI94875C (fi) * 1993-01-15 1995-11-03 Panimolaboratorio Bryggerilabo Menetelmä elintarvikekäyttöön tarkoitetun teollisesti idätettävän siemenmateriaalin käsittelemiseksi
US6635659B1 (en) 1995-03-20 2003-10-21 Arrie Kegler Topical formulation for arthritic symptoms treatment
EP0954978B1 (en) 1998-03-12 2011-11-30 VHsquared Limited New products comprising inactivated yeasts or moulds provided with active antibodies
ATE535154T1 (de) * 1998-03-12 2011-12-15 Vhsquared Ltd Produkten die inaktivierte hefen oder schimmel enthalten, die auf ihrer aussenoberfläche aktive antikörper haben
GB0307350D0 (en) 2003-03-29 2003-05-07 Smiths Group Plc Catheters
JP5049489B2 (ja) * 2005-12-16 2012-10-17 サントリーホールディングス株式会社 β−Ｎ−アセチルグルコサミニダーゼ阻害活性を有する化合物
JP5569710B2 (ja) * 2009-02-27 2014-08-13 国立大学法人広島大学 肥満予防又は改善剤
CN110250396A (zh) * 2019-07-24 2019-09-20 天津科技大学 乳酸片球菌cgmcc 1.4在抑制黄曲霉中的应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3592926A (en) * 1969-04-14 1971-07-13 American Cyanamid Co Antifungals bk217beta and bk217upsilon and process for producing same
KR800001462B1 (ko) * 1979-05-01 1980-12-10 강원명 탈지유로부터 화장품 원료를 제조하는 방법
JPS57105194A (en) * 1980-12-24 1982-06-30 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd Novel antibiotic xk-210 and its preparation
US4508738A (en) * 1982-03-17 1985-04-02 Microlife Technics, Inc. Non-sucrose fermenting Pedioccus pentosaceus
US4452895A (en) * 1982-03-17 1984-06-05 Microlife Genetics Non-lactose fermenting Pediococcus pentosaceus
JPS5993092A (ja) * 1982-11-16 1984-05-29 Snow Brand Milk Prod Co Ltd 蛋白多糖体
JPS59104326A (ja) * 1982-12-04 1984-06-16 Toyo Jozo Co Ltd マクロライド抗生物質の安定な経口用製剤および安定化法
JPS61115100A (ja) * 1984-11-09 1986-06-02 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd Ｄｃ−７９およびその製造法

Also Published As

Publication number Publication date
ATE106408T1 (de) 1994-06-15
ES2016782A4 (es) 1990-12-01
DE68915665D1 (de) 1994-07-07
JPH02117389A (ja) 1990-05-01
EP0360290B1 (en) 1994-06-01
DE68915665T2 (de) 1994-09-15
DE360290T1 (de) 1990-12-20
AU3337489A (en) 1990-03-29
NZ229398A (en) 1992-02-25
CA1340809C (en) 1999-11-02
US4877615A (en) 1989-10-31
EP0360290A2 (en) 1990-03-28
ES2016782T3 (es) 1994-08-16
AU612479B2 (en) 1991-07-11
EP0360290A3 (en) 1991-10-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4740593A (en) Derived nisin producing microorganisms, method of production and use and products obtained thereby
US7858137B2 (en) Stabilization of fresh mozzarella cheese using fermented whey
US4956177A (en) Method for inhibiting fungi
CN110577910B (zh) 一种侧孢短芽孢杆菌、抗菌脂肽及其在农业与食品上的应用
EP0302300B1 (en) Process for producing novel yeast and mold inhibiting products
KR100743828B1 (ko) 항균 활성이 있는 신규 화합물 및 그것을 함유하는 제품
Luchese et al. Growth of, and aflatoxin production by Aspergillus parasiticus when in the presence of either Lactococcus lactis or lactic acid and at different initial pH values
CA2281102A1 (en) Stabilization of cooked meat compositions using whey from nisin-producing cultures
US4877615A (en) Antifungal product
US6277374B1 (en) Process for producing by culturing Lactobacillus casei var. rhamnosus yeast and mold inhibiting products
KR100413335B1 (ko) 항균 펩타이드 물질을 생산하는 유산균 락토코커스 락티스bh5(케이씨씨엠 10275)
US4942032A (en) Process for producing a novel antifungal product
US4906611A (en) Process for using a novel antifungal product
KR20110125108A (ko) 신규한 화합물 및 이의 용도
KR100273742B1 (ko) 천연 항균물질을 생산하는 락토코커스 락티스 미생물(kfcc 11047)
KR100536522B1 (ko) 인간 피부 유래의 신규한 박테리오신 및 여드름치료제로서의 용도
KR101647032B1 (ko) 신규한 항균성 화합물
US20260033509A1 (en) Development of food-grade antimicrobial fungal fermentates using yeast extract, proteins, or amino acids as culture substrates
KR102191432B1 (ko) 유해세균에 대해 항균 활성을 갖는 락토바실러스 타이완엔시스 균주 및 이의 용도
Maïworé et al. Biotechnology of bacteriocins production by LAB
KR102733270B1 (ko) 모든 종류의 필수 아미노산을 포함하는 균사체를 생성하는 아스퍼질러스 오리제 균주
Mahalakshmi Synergistic Antibacterial Activity of the Probiotic Kefir with Conventional Antibiotics
Namashivayama et al. EVALUATION OF SOYA BEAN BASED MEDIA FOR BACTERIOCIN PRODUCTION BY LACTOBACILLUS ACIDOPHILLUS AND THE ANTI BACTERIAL EFFECT ON FOOD SPOILAGE BACTERIA