JPH07500566A - ネルボン酸及び長鎖脂肪酸の脱髄疾患の治療のための使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ネルボン酸及び長鎖脂肪酸の脱髄疾患の治療のための使用 本発明は多発性硬化症のような脱髄疾患の治療に対する、ネルボン酸或いはその 誘導体のような長鎖脂肪酸を含有する医薬組成物に関する。

多発性硬化症（ＭＳ）は成熟した中枢神経系（ＣＮＳ）を冒す疾患である。この 疾患は連続するＣＮＳ脱髄明及びそれに続く寛解期によって特徴づけられる。Ｍ Ｓの病因学は完全には理解されていないが、遺伝的素因、ウィルス感染、及び、 ＣＮＳ、特に脳、視神経及びを髄の脱髄を生じさせるいくつかの抗原に対する自 己免疫応答を包含する多くの因子が重要であると思われる。

ＭＳの原因いかんにかかわらず、脱髄及び髄鞘再成（寛解）のパターンはミニリ ン成分の損失及び再生的同化の両者を包含する。ミニリンはその乾燥重量の約６ ０％を脂質として含有しており、重要な脂質成分である脂肪酸、特に長鎖脂肪酸 は、多くの重要な複合脂質において最も豊富な脂肪酸なので、数年にわたってか なり注目を受けてきた。本発明の文脈における長鎖脂肪酸は、Ｃ２２より長い炭 素鎖を有するモノカルボン酸として定義づけられる。本発明の文脈における複合 脂質は、ガングリオシド（特にガングリオシドＧ　或いは６Ｍ４）、セレブロシ ド、スルファチド、及びスフィンゴミエリン、を包含する。これらの脂質は、そ の構造中に有意な墓の長鎖脂肪酸（特にネルボン酸−シスー１５−テトラコセン 酸）を含有する。正常ミニリンの典型的な組成を下記の表にまとめる。

１１１孝　ガングリオシド事拳　セレブロシドロ　スルフ１チドネネ　スフィン ゴミエリン　本本本Ｇ７（６Ｍ４） Ｃ２４＋１　２４．１　４５．７　４８．０　３５．０Ｃ２４：０　１１．１　 １５．８　１４ｊ　−Ｃ２５：ｌ　５．０　７．８　１０．２２゜３Ｃ２５：０ 　１．８　２ｊ　３．４　−Ｃ２６：ｌ　４．１　４．５　９．１　１．０Ｃ２ ６：０　０．８　０ｊ　１．１　−重炭素原子の総数二二重結合の数。

傘本ヒト精製ミニリン由来（Ｌｒｄｅｅｎ、　Ｒ，Ｗ、　、　ａ　１．　Ｎｅｕ ｒｏｃｈ！ｍ、　、　２１８２９−８３９．１９７３参り　。

零本本ヒト脳白質由来（Ｇｅｒｓ目、Ｂ５．他１．　Ｎｅｕｒａｌ、　、　２０ ２１０４−１２０．１９７２参照）。

活性型ＭＳにおけるミニリンの崩壊はこれらミニリン成分の有意の損失を生じさ せる。更に、これらの復元には、これらの特定成分の脂肪酸を利用することが必 要である。これは、いわゆるインビボ合成（最重要ルート）及び食事からの外因 的なものの２つの異なるルートによって生じる。長鎖脂肪酸は現代食において微 少量成分であり、またインビボ合成は効率的ではなく、ＭＳにおいては阻害され ることがある。数人の研究者はＭＳの組織（脳、を髄）において総脂質の有意の 減少が存在することを示した。更に重要なことは、多分、ＭＳの脳白質における 特定のガングリオシド（ガングリオシドＧ　或いは６Ｍ４）の欠損及び脱髄斑で ある。（Ｙｕ、　Ｒ，Ｋ、順Ｊ、　ＮｔｕｒＢｈｅｍ、、２３　１６９−１７４ ．１９７４参りミニリン崩壊はＣＮＳ組織の必須脂質を減少させるのみならずミ ニリン塩基性蛋白質（ＭＢＰ）を遊離する。ＭＢＰはミニリンの抗原として知ら れており、また実験動物に注入したときに実験アレルギー脳を髄炎（ＥＡＥ）を 誘発する。ＥＡＥはＭＳと同様のいくつかの神経病理学的な特徴を有しており、 疾患に対する動物モデルとして広く用いられている。

しかしながら、注入前にＭＢＰをガングリオシドＧ７　（６Ｍ４）と共にインキ ュベートするとこれはモルモットにおけるＭＢＰの脳形成の潜在性を減少させる 。（Ｍｕｆｆｉｎ、Ｂ、Ｒ，ｆｉ、　Ｂｒ＋＋ｉｎ　Ｒｅｓ＊ａｒｃｈ、２９６ 　１７４−１７６．１９８４参照）我々は、ＭＳ患者における長鎖脂肪酸の薬理 学的に許容できる供給源の提供は、ミニリン鞘の再構築のためのミニリン成分の 構築に対して極めて重要な材料のプールを提供することであると理解している。

更に、これらの長鎖脂肪酸が容易に入手できるということは、重要なガングリオ シド、特に、Ｍ　Ｂ　Ｐのミニリン形成傾向を阻害することが知られているガン グリオシドＧ７　（６Ｍ４）の生合成を可能にする。従って本発明によれば１以 上の長鎖脂肪酸を生理学的に許容できる形態で、及びそのための担体または希釈 剤を含有する医薬組成物を提供する。好ましくは、本組成物はネルボン酸を長鎖 脂肪酸として或いはその１つとして、例えばそのエステルの形で含有する。

ネルボン酸（シス−１５−テトラコセン酸）のような長鎖脂肪酸は通常の食事に はほとんど存在しないが、これらは少数の植物及び微生物に存在する。これらは 、カルダミン・グラセア（Ｃａｒｄａｍｉｎｅ　ｇｒａｃｅａ）、ヘリフィラ・ ロンギフォラ（Ｈｅｌｉｐｈｉｌａ　ｌｏｎｇｉｆｏｌａ）、トラスピ舎ベルフ ォリアッム（Ｔｈｌａｓｐｉ　ｐｅｒｆｏｌｉａｔｕｍ）、ｈロバエオルム争ス ペシオスム（Ｔ　ｒ　。

ｐａｅｏｌｕｍ　ｓｐｅｃｉｏｓｕｍ）、ルナリア・ビニニス（Ｌｕｎａｒｉａ 　ｂｉｅｎｎｉｓ）、ルナリア・アヌア（Ｌｕｎａｒｉａ　ａｎｎｕａ）及びマ ラニアーオレイフエラ（Ｍａｌａｎｉａ　ｏｌｅｉｆｅｒａ）の種油、黴である ネオカリスマステックス・フロンタリス（Ｎｅｏｃａｌｌｉｓｍａｓｔｉｘ　ｆ ｒｏｎｔａｌｉｓ）、エリシフエｅグラミニス（Ｅｒｙｓｉｐｈｅ　ｇｒａｍｉ ｎｉｓ）及びスファエロテカψフムリ（Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ　ｈｕｍｕｌ ｉ）、バクテリアであるプソイドモナスΦアトランチイカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎ ａｓ　ａｔｌａｎｔｉｃａ）、酵母であるサツカロミセスΦセレビシアエ（Ｓａ ｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）及び海洋ケイ藻類であるニラ チア・シリンドルス（Ｎｉｔｚｓｃｈｉａ　ｃｙｌｉｎｄｒｕｓ）を包含する。

好ましい供給源は、トリグリセリド脂質に有意量、すなわち１０％以上のネルボ ン酸を含有することが知られている植物の種油である。１０％未満を含有する他 の供給源は、活性成分を濃縮するために付加的な工程をとらなければならないの で明らかに有用性が低い。特に有用なのはルナリア・ビニニス（Ｌｕｎａｒｉａ 　ｂｉｅｎｎｉｓ）或いはルナｙノアーアヌア（Ｌｕｎａ　ｒ　ｉ　ａ　ａｎｎ ｕａ）の種油であり、これらはトリグリセリドに２０％以上のネルボン酸を含有 する。

このオイルの典型的な組成の詳細を表２に示す。

表２ Ｌ、ｂｉｅｎｎｉｓ種油の脂肪酸分布ネＣ１６：ｌ　オレオバルミチン酸　０． 　２　０．　１Ｃ１８；０　ステアリン酸　０．２　０．２Ｃ１８；ｌ　オレイ ン酸　２３．４　２３．３Ｃ２０：０　エイフサン酸　微少ｆｉｅ本＊　−本本 ＊＊零ネガスクロマトグラフィーによって分析された。

＃ネトリグリセリドエステルは対応するメチルエステルに変換された。

ＵＳ微量、通常０．１％未満である。

車傘車車異なったサンプルでの２回目の測定。

本傘本本車検出できなかった。

上記にその例を挙げた種々の自然原料に加えて、合成手段によってネルボン酸を 提供することもできる。この合成の開始点は、例えば、容易に入手できるエルカ 酸（シス−１３−トコセン酸）である。典型的な合成は、これは決して唯一の可 能性ではないが、Ｃａｒｔｏｌ、　Ｋ、　Ｋ、　Ｃａｎａｄｉａｎ　Ｊ、　Ｃｈ ｅｍ、　、　３５７５７−７６０、１９５７に記載されている。この合成はエル カ酸のメタノールを用いたエステル化によるそのメチルエステルへの変換、水素 化アルミニウムリチウムを用いたエルキルアルコールへの還元、該アルコールの 三臭化リンとの反応によるその臭化アルキルへの変換、臭化エルキルのマロン酸 ジエチルとの反応、及びネルボン酸を生成させるための脱炭酸反応を包含する。

この合成はいくつかの利点を有しており、特に放射性同位元素でラベルしたネル ボン酸の調製においては利点があるが、手順の長いこと及び費用の点で不利であ る。

オイルを含有する種から種油を抽出する多種の方法が当業者によく知られている （ＢａｉｌＢｓ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　Ｏｉｌ　ａｎｄ　Ｆａｔ　Ｐｒｏｄｕ ｃｊｓ、　ｓｄ、　Ｄ、　Ｓｗｏｒｎ、　Ｖｏｌ、　２．　ｐａｇ！ｓ　１７５ 　ｅｔ　ｓｅｑ、　４ｔｈ　ｅｄｉｔｉｏｎ、　Ｐｕｂ、　１９８２．　Ｊｏｈ ｎ　ＷｉｌＢ　＆　５ｏｎｓ　ＩｎｃＪ照）。これらの方法は、いり取り　（ｃ ｌｒｙ　ｒｅｎｄｅｒｉｎｇ）、煮取り　（ｗｅｔｒｅｎｄｅｒｉｎｇ）、バッ チ式圧搾、連続圧搾、溶媒抽出、及び二酸化炭素のような超臨界ガスを用いた抽 出を包含する。

実施にあたって最も効率的な方法は、連続圧搾、或いは種油ケークの二次溶媒抽 出を伴う、又はこれを伴わない超臨界抽出を包含する。

溶媒から遊離された抽出オイルはまた薬用としてのオイルの価値を落とすような 望ましくない不純物を含有していることがある。望ましくない不純物或いは汚染 物は、種々の精製方法によって除去することができる。精製とは、遊離脂肪酸、 ホスファチド、ガム或いは他の主な不純物を除去するために設計された精製処理 として定義される。

オイルは更に漂白及び脱臭によって改良されてもよい。漂白は、オイルの色を減 らすために設計された方法として定義される。多種の方法が用いられ、これらは 当業者によく知られている。脱臭は香気及び臭気を生じさせる微少量の汚染物を 除去するために設計された方法として定義される。

漂白及び脱臭の詳細は、Ｂｘｉｌｅ７ｓ　１ｎｄｕｓｔｔｉａｌ　Ｏｉｌ　＆　 Ｆａｔ　Ｐｒｏｄｕｃｆｓ、ｅｄ、Ｄ、ｓｗｅｒｎ、Ｖｏｌ、２，４ｔｈ　＋ｄ ｉｆｉｏｎ、ｐａｇｃｓ　２５３　ｅｊ　ｕｑ。

Ｐｕｂ、１９Ｂ２．　Ｊｏｂｎ　１ｆｉｌｃｙ　＆　５ｏｎｓ　Ｉｎｃに記載さ れている。

精製、漂白及び脱臭を１つの工程で行うという利点を有する特に価値のある精製 方法は吸着クロマトグラフィーによるものである。

表２から分かるように、天然オイルは長鎖脂肪酸に加えて多数の構成成分脂肪酸 を含有する。所望により、長鎖脂肪酸は、他の成分を選択的に除去することによ って濃縮することができる。好適な方法は、トリグリセリドの遊離脂肪酸或いは 低級アル午ルエステル、特にそのメチル或いはエチルエステルへの変換を包含す る。濃縮は、その後、分別蒸留、結晶化、溶媒抽出、尿素包接化、或いはクロマ トグラフィーによって効果的に遂行されてネルボン酸に富んだ留分を得ることが できる。場合によっては、これらの技術の組み合わせを用いることが望ましいこ とがある。

本発明の組成物はネルボン酸を唯一の治療上活性な物質として含有してもよい。

或いは、１以上の他の活性な物質が存在してもよい。

本発明のさらなる態様は、長鎖脂肪酸の官能性誘導体、特にネルボン酸の官能性 誘導体の使用を包含する。ここで用いた官能性誘導体という用語は、ここにおい て定義した長鎖脂肪酸、特にネルボン酸の誘導体であって、ネルボニルアシル基 をそのまま含有するものと定義される。これらの官能性誘導体の例は、エステル 、特にグリセリドエステル、エチルエステル等、ナトリウム塩、カリウム塩、カ ルシウム塩、アミノ酸塩のような塩を包含する。酸及びこれらの官能性、活性誘 導体はこれまでに記載した方法によって合成調製できる。

しかしながら、これらの方法は、多くの工程及び高い費用を包含する。従って、 これら物質を天然に存在する種油或いは微生物から得ることが特に好ましい。特 に好ましくはこれまでに記載した種油、特にルナリア科（Ｌｕｎａｒｉａ）の種 油である。さらに、長鎖脂肪酸、特にネルボン酸或いはその官能性誘導体を適切 な薬理学的に許容できる形態で投与することが好ましい。このような形態は多く 知られており、これはオイル自体、遊離脂肪酸或いはその官能性誘導体の経口投 与を包含する。更に、オイル、遊離脂肪酸或いは官能性誘導体は、カプセル、錠 剤或いは水中乳剤として投与してもよい。

更に、本医薬組成物は適切なら例えば注射、静脈内挿管、或いは鼻胃挿管によっ て投与されてもよい。投与量は、必要な薬理学的効果を達成するために必要な治 療上活性な物質の量として定義されることが理解される。一般に、ネルボン酸を 含有するオイル、その官能性誘導体、或いは純ネルボン酸又はその官能性誘導体 の、成人に対して必要な投与量は０．０１ｇ〜５０ｇ７日、特に０．１ｇ〜１０ ｇ及び好ましくは０゜５ｇ〜５ｇ／日の範囲である。

よく知られているように、ＭＳは、急性散在性脳を髄炎、ウェスタンハルスト（ Ｗｅｓｔｅｒｎ　Ｈｕｒｓｔ）病、進行性多病巣性白質脳障害、原発性多発性神 経炎、ジフテリア性神経障害、副腎白質萎縮症（ＡＬＤ）、及び副腎を髄神経障 害を包含する脱髄疾患の群の１つである。これらの疾患の１以上は上記のネルボ ン酸含有製剤を用いた治療から恩恵を得ることができる。天然オイルを、特にル ナリア植物からのものをもとにした本発明の好ましい化合物はすべてネルボン酸 に加えて多量のエルカ酸を含有している。エルカ酸及びその誘導体はＡＬＤに特 有の蓄積された毒代謝産物の濃度を減少する効果的な方法である。従って、本発 明のこれらの好ましい組成物はまたＡＬＤの治療に対しても用いることができる 。しかし、この目的に使用するときはオイルはいかなる有意量のテトラコサン酸 又はヘキサコサン酸をも含有するべきではない。これらの成分の除去は当業者に よく知られた方法によって達成でき、尿素包接化によるすべての飽和脂肪酸の除 去を包含する。更にＡＬＤの治療に当たっては、望ましくない脂肪酸、特にテト ラコサン酸及びヘキサコサン酸のすべての食事源を排除するために患者の食事を 制限することがしばしば好ましい。場合によっては、厳しい食事制限は、成長、 代謝、及び健康に必要な脂肪酸をもまた排除してしまうことがある。この場合、 ネルボン酸を含有するオイルを、適切な墓のこれら脂肪酸で補っても良い。これ らはガンマーリルン酸、エイコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸を包含 する。

例１ 以下、例示のみであるが、濃縮されたエチルネルボネートを得るためのギンセン ツウオイルの処理、及び、そこからの有用なネルボン酸の生理学的に許容できる 誘導体である、精製されたグリセリルトリネルボネートの調製を記述する。

原料油の典型的な組成は以下の通りである。

Ｃ１６；１　０．２ Ｃ１８：０　０．２ Ｃ１８：１　２３．４ Ｃ１８：２　４．８ Ｃ１８：３　１．０ Ｃ２０：　０　微少量 Ｃ２０：１　１．６ Ｃ２２：０　０．２ Ｃ２２：１　４５．３ Ｃ２２：２　０．１ Ｃ２４：ＯＯ，２ Ｃ２４：１　２１．８ （Ａ）エチルエステルの調製 ギンセンツウオイル（１モル）を、ナトリウムエトキシド（０，０１モル）の存 在下に、８０℃で３時間過剰の無水アルコールと反応させることによって、その エチルニスエルに変換する。ついで、反応混合物を３０℃まで冷却し、下層のグ リセロール層を分離する。生成物を８０℃の水によって３回洗浄し、その後１１ ０℃までの温度で真空下で乾燥する。

Ｃ１６：０　１．２ Ｃ１６：１　０．２ Ｃ１８：ＯＯ，２ Ｃ１８：１　２３．２ Ｃ１８：２　４．９ Ｃ１８：３　１．　Ｉ Ｃ２０：　０　微少量 Ｃ２０：１　１．６ Ｃ２２：ＯＯ，２ Ｃ２２：１　４５．１ Ｃ２２：２　ｏ、１ Ｃ２４：０　０．２ Ｃ２４：１　２２．０ （Ｂ）エチルエステルの精製−飽和脂肪酸の除去飽和脂肪酸エチルエステルを、 無水アルコールに溶解した・過剰の尿素と共に２時間環流させることにより、ギ ンセンツウエチルエステルから除去する。１４時間かけて攪拌しながら周囲温度 まで冷却することにより飽和エチルエステルが、尿素−脂肪酸包接化合物として 晶出する。

固体包接化合物及び過剰の尿素を、濾過により除去し、不７飽和エチルエステル のアルコール溶液を残す。これを真空蒸留によって濃縮して溶媒を除去する。

上記の粗製の「飽和物を除去した」エチルエステルを８５〜９０℃において、稀 釈水酸化カリウム水溶液で１回洗浄し、再び２回分の熱水で洗浄して粗製生成物 に存在する微少量の石鹸及び尿素を除去する。その後この生成物を真空下１００ ℃１において乾燥する。

Ｃ１６：　０　微少量 Ｃ１６：１　０．４ Ｃ１８：Ｏ微少量 Ｃ１８：１　２３．５ Ｃ１８：２　５．０ Ｃ１８：３　１．２ Ｃ２０：　Ｏ微少量 Ｃ２０：１　１．７ Ｃ２２：　Ｏ微少量 Ｃ２４：０　微少量 Ｃ２４：１　２２．０ 「飽和物を除去した」エチルエステルを分別蒸留１こよってＣ２４：１を濃縮し 、５０〜９０％のＣ２４：１を含有する残渣を得る。ついで、粗製エチルネルボ ネートを更１こ真空下で蒸留する。

Ｃ１８：１　微少量 Ｃ１８：２　微少量 Ｃ１８：３　微少量 ナトリウムメトキシド（０，，０３モル）を触媒として用（１て、化学量論量の 濃縮エチルネルボネート（９０％）をり゛ＩＪセリル（Ｂ　Ｐ）と反応させるこ とによってＧＴＮを調製する。

反応は、（ａ）８５％のグリセロールを添加し、２２０℃、真空下で１０時間反 応させ、（ｂ）更に７％を添加し、２２０℃で３時間反応させ、（ｃ）更に４％ を添加し、２２０℃で３時間反応させ、（ｄ）最後の４％を添加し、２２０℃で ５時間反応させるという段階的な方法によっておこなう。総反応時間は２１時間 である。

このグリセロールの段階的な添加は、エチルエステルのトリグリセリドへの変換 を最大にするため、また、モノ及びジグリセリドの生成を最小にするために必要 である。反応期間が経過した後、粗製トリグリセリドを４０℃まで冷却する。

（Ｅ）ＧＴＮのクロマトクラフィー精製粗製ＧＴＮを純ヘキサンに溶解し、活性 化二酸化ケイ素を吸収剤として用いたカラムクロマトグラフィーに供する。

合わせたカラム溶出液を単離し、蒸留してヘキサンを除去する。残渣をその後１ １０℃真空下で水蒸気蒸留する。ＧＴＮを７０℃真空下で濾過して、淡黄色の液 体を得る。これは、周囲温度においては放置すると固化する。

Ｃ１８：１　微少量 Ｃ１８：２　微少量 Ｃ１８：３　微少量 Ｃ２０：１　０．３ Ｃ２２：１　８．４ Ｃ２２：２　１．　Ｉ Ｃ２４：１　９０．２ 例２ 本発明の１つの好ましい組成物は活性成分としてグリセリルトリネルボネートオ イル（例１において記載された）を含有する。このオイルは、そのままで或いは カプセルの形態で患者に経口投与することができる。好適なカプセルは約１ｇの オイルを含有するゼラチンカプセルである。投薬量は患者の病状に依存するが、 通常、成人１人１日当たり５〜１０ｇであると信じられる。カプセルのゼラチン はもちろん患者の炭化水素及び蛋白源を構成する。

本オイルは、所望により、経口投与用の乳剤として調製することもできる。

国際調査報告 一一＠榛−＾−−−−信崗　ＰＣＴ／ＧＢ　９０１０１１１７０国際調査報告 フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，’　識別記号　庁内整理番号Ｃ１１Ｂ　１１０６　 ２１１５−４Ｈ １／１０　２１１５−４Ｈ ３／１０　２１１５−４Ｈ （８１）指定回　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、　ＥＳ、　ＦＲ，ＧＢ、　ＧＲ，ＩＴ、　ＬＵ、　ＮＬ、　ＳＥ）、　Ｃ Ａ、　ＧＢ、ＪＰ、　Ｎｏ、　ＵＳＩ （７２）発明者　ラングレイ、ナイジェル・アランイギリス国、レイオー４・５ エルダブリユ、ヨーク、ウイルバーソス、セント・ジョンズ・クロース　１

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. １．生理学的に許容できる形態のネルボン酸（シス−１５−テトラコセン酸）を 含有することを特徴とする、多発性硬化症のような脱髓疾患の治療に使用するた めの組成物。
2. ２．生理学的に許容できる形態の少なくとも１つの付加的な長鎖脂肪酸（Ｃ１６ 〜Ｃ２６）をさらに含有する請求項１に記載の組成物。
3. ３．酸或いは各酸がエステルの形態で存在する請求項１ないし２のいずれか１項 に記載の組成物。
4. ４．各エステルがトリグリセリドエステルである請求項３に記載の組成物。
5. ５．生理学的に許容できる形態のネルボン酸が組成物の治療上活性な成分の少な くとも２０重量％を構成する請求項１ないし４のいずれか１項に記載の組成物。
6. ６．実質的に精製された形態のルナリア・ビエニス（Ｌｕｎａｒｉａ　ｂｉｅｎ ｎｉｓ）の種油を含有する請求項１ないし５のいずれか１項に記載の組成物。
7. ７．多発性硬化症のような脱髄疾患の治療のための薬を製造するための請求項１ ないし６のいずれか１項に記載の組成物の使用。
8. ８．多発性硬化症のような脱髄疾患の治療のための薬を製造するためのネルボン 酸の使用。
9. ９．ルナリア・ビエニス（Ｌｕｎａｒｉａ　ｂｉｅｎｎｉｓ）の種を提供し、そ こから圧搾或いは超臨界ガス抽出によってオイルを抽出し、該オイルを吸着クロ マトグラフィーで精製し、及び場合により、長鎖脂肪酸或いはそのエステルまた は塩以外の成分を選択的に除去する工程を包含する請求項１ないし６のいずれか １項に記載の組成物を製造する方法。
10. １０．ネルボン酸を生理学的に許容できる形態で包含する組成物の薬理学的に有 効な量を投与することを含有する多発性硬化症を包含する脱髄疾患の治療法。