JPH07501263A - アルキルーまたはアルキルグリセローホスホリルコリン界面活性剤を含有するエマルジョンおよび使用方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 アルキル−またはアルキルグリセロ−ホスホリルコリン界面活性剤を含有するエ マルジョンおよび使用方法　、発明の技術分野 本発明は、油と水とのエマルジョンおよびこのようなエマルジョンの製造方法お よびこれらのエマルジョンの使用に関するものである。

さらに特に、本発明は、油（この用語は一般的意味で使用する）、水および一般 的にアルキルホスホリル　コリンまたはアルキルグリセロホスホリル　コリンと して同定することかできる新規な界面活性剤を含有する新規エマルジョンに関す るものである。このようなエマルジョンは一般に多くの工業的用途で有用性を存 し、特に酸素輸送剤、人工血液または赤血球代用物質として、およびまた生物学 的造影用の造影剤として有用である。

発明の背景 エマルジョンは、油（この用語は一般的意味で使用する）の広範囲の細分を可能 にし、引き続く大きい油−水界面の形成を可能にする。エマルジョンは、水中油 型または油中水型であることかでき、その他の相および界面を含有することもあ る。これらの分散液か水中油型である場合には、これらの分散液は通常、油エマ ルジョンもしくは可溶性油組成物と称される。これらの相が逆になっている油中 水型の場合には、これらの分散液は通常、逆相エマルジョンと称される。油と水 とのエマルジョンには多くの工業的用途があり、これらの用途には、塗料、接着 剤、潤滑剤、洗浄剤、石鹸、殺虫剤、化粧品、医薬品および治療剤か包含される 。この簡単なリストは、油と水とのエマルジョンの非常に多大な用途の初端に過 ぎない。

かなりの年月にわたって開発されてきたエマルジョンの１種には、酸素輸送剤ま たは人工血液として、フルオロカーボン　エマルジョンがある。Ｃ１ａｒｋによ り発行された米国特許Ｎｏ、３，９１１，１３８は、この種の特許の初期例であ り、この特許には、人工血液として、パーフルオロカーボン　エマルジョンが開 示されている。この特許に開示されているように、真正のフルオロカーボン液は 血液流中に注入することはできない。その理由は、真正フルオロカーボン液の疎 水性物性が、これらを血液中で不混和性にし、その結果として、これらの液体を 小さい血管に送ると、血管封鎖を生じさせ、死に至らしめることにある。

従って、血管的注入を必要とする医療用途の場合には、高度にフッ素化された存 機化合物またはフルオロケミカルは、上記Ｃ１ａｒｋの特許およびまた米国特許 Ｎｏ、４．　１１０．　４７４　；同Ｎｏ、４．１８７，２５２および同Ｎｏ。

４．４４３，４８０に開示されているように、生理学的に許容されるエマルジョ ンとして分散されていなければならない。

人工血液などのような、投与できるエマルジョンの総量が制限される医療用途で 要求される比較的大Ｉのフルオロケミカルを含有しており、かつまた安定である エマルジョンを製造しようとする種々の試みがなされている。このようなエマル ジョンの製造における目標は、臨床的に許容される時間内に身体から排泄するこ とができる許容されるフルオロカーボンを使用することにある。さらにまた、組 成物には、それらの安定性を破壊することなく殺菌することができることが要求 される。

ＦＤＡにより承認されているフルオロカーボン　エマルジョンには、ＦＬＵＯＳ ＯＬ　ＤＡがあり、これは２種の界面活性剤、すなわち卵黄ホスホリピドおよび プルロニック（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）Ｆ−６８の混合物中にパーフルオロデカリン およびパーフルオロトリプロピルアミンを含有するエマルジョンである。しかし ながら、この製品は、液体状態で安定ではなく、凍結して保存しなければならな い。さらにまた、安定性を助長するために、その存在が必須であるパーフルオロ トリプロピルアミンは、このエマルジョンの医療用途における有用性にとって欠 点となる。その理由は、このパーフルオロトリプロピルアミンの肝臓およびその 他の身体組織における半減期が、望ましい期間よりも長いからである（に、　Ｙ ｏｋｏｙａｍａ等による＋Ａ　Ｐｅｒｆｌｕｏｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅｍｕｌ ｓｉｏｎ　ａｓ　ａｎ　Ｏｘｙｇｅｎ　Ｃａｒｒ奄■秩■ Ａｒｔｉｆ、　Ｏｒｇａｎｓ（Ｃ１ｅｖｅ）、　８（１）、　３４−４０頁（１ ９８４）参照）。さらにまた、このエマルジョンは、約１２％のフルオロカーボ ンを含有するのみであり、この量は、その酸素含有能力が小さいことから、所望 の治療効果を得るにはあまりにも少ない。

人工血液用の酸素輸送剤としてのフルオロカーボンの有用で、安定なエマルジョ ンの製造実験において、種々の界面活性剤かまた研究された。例えば、水素添加 されたホスホリピド、非イオン性ポリマー界面活性剤およびＣ６−２２脂肪酸、 それらの塩およびモノグリセライド類から選ばれる界面活性剤を含有するフルオ ロカーボン　エマルジョンはまた、４°Ｃで保存しなければならない。例えば、 日本国特許出願５９−０６７．２２９；米国特許Ｎｏ、４．２５２，８２７およ びｌ・イツ国公開ＤＥ２６３０５０６参照。

Ｃ１ａｒｋおよびＳｈａｗのヨーロッパ特許出願８７３００４５４．３には、酸 素輸送剤および人工血液として使用するための、高フツ素化有機化合物の新規エ マルジョンが記載されている。このＣ１ａｒｋおよびＳｈａｗの出願には、約７ ５容量％まての高レベルでパーフルオロカーホンを含有していても、安定である エマルジョンが記載されている。これらのエマルジョンのフルオロカーボンは、 肝臓およびその他の身体組織からの許容されるほと迅速な排泄時間を示し、かつ また容易に殺菌することかできる。これらのエマルジョンは、フルオロケミカル 、界面活性剤および水を含有する組成物中に乳化助剤として油を含有するもので ある。

このＣ１ａｒｋおよびＳｈａｗの出願には、人工血液に有効な酸素輸送剤に係わ る長期間にわたる研究において、問題のかなりか相当に軽減された旨、記載され ているけれとも、さらなる開発の必要性は継続している。

簡単に言えば、油と水からなる型式のエマルジョンは、多くの工業用途において 非常に重要な役割を果たし、このようなエマルジョンに係わる多数の特許が認め られている。医療および非医療分野を包含する多くの工業用途においてより広い 有用性と高い安定性とを有するエマルジョンを提供する新規な乳化剤の開発に対 する努力を佳う研究が続けられている。

発明の要旨 本発明は油と水からなる型式のエマルジョンに関するものである。本発明によっ て、驚くほどの安定性を存する水中油型のエマルジョンを形成させる新規界面活 性剤か見出たされた。さらに特に、フルオロケミカル（以下で時には、単純にｒ ＰＦＣＪと記す）か製造され、このＰＦＣか有意に増加した循環血液残留時間お よび臨床上の臓器、例えは肝臓および牌臓における好ましいものに変えられてい る組織分布を有することか見出だされた。さらにまた、通常レシチンを基材とす るＰＦＣエマルジョンと組み合わせて静脈注入された後に、本発明の新規界面活 性剤は、ヘマトクリットあるいは赤血球細胞数の存置な減少を有意に改善するこ とか見出だされた。

本発明のエマルジョンは、アルキルホスホリル　コリンまたはアルキルグリセロ ホスホリル　コリン界面活性剤を含有する。これらの界面活性剤は、下記の一般 構造を有する： さらに詳細には、Ｒ，、Ｒ，またはＲ１は、アルキル、アルケニル、フルオロア ルキルおよびアルケニルである。これらの基はそれぞれ、約６個−約５４個の炭 素原子を有することができ、飽和または不飽和であることができ、そしてまた直 鎖状脂肪族基または分枝鎖状脂肪族基であることができる。−膜構造■において 、基部およびＲ９は、Ｃｌ２−Ｃ１１炭素原子を存すると好ましく、本発明の医 療用ＰＦＣエマルジョンの場合の界面活性剤として使用する場合には、Ｒ１はＣ ，−Ｃ，２炭素原子を存すると好ましい。最も好ましくは、Ｒ８およびＲ３は、 ＣＣｌ４−ＣＩ飽和または不飽和脂肪族基である。一般に、これらの基Ｒは、本 発明の方法により合成される場合に、脂肪族アルコールまたはハライド反応剤の 残基である。

上記構造式において、ＰＣは、ホスホリルコリン基である：０　Ｐ　Ｏ，ＣＨ２ ＣＨｘ　Ｎ＋　（Ｒ４）ｚこの式において、Ｒ４は、水素または低級アルキル、 例えばメチル、エチルおよびプロピルである。本発明の医療用ＰＦＣエマルジョ ンの場合には、水素またはメチル基か好ましい。

本発明はまた、これらの界面活性剤の製造方法、これらの界面活性剤を含有する エマルジョン、およびまたこれらのエマルジョンを酸素輸送剤、人工血液または 赤血球細胞代用物質として使用することを包含する。本発明のその他の目的およ び利点は、以下の詳細な説明から明白になるであろう。

詳細な説明 本発明のエマルジョンは、油、水および上記で同定されている種類の界面活性剤 からなる。一般に、この油は、水と油の総容積の約１−９０重量％の量で含有さ れている。さらに詳細に言えば、例えば静脈使用する医療用エマルジョンの場合 には、静脈使用では粘度か制限されることから、約６０容ｊｌ／容量％（１１５ 重Ｆ容量％）が実際上の限界である。その他の用途に対しては、さらに多い量も 使用することができる。界面活性剤は、エマルジョンの約０．５−約１０重量％ 、通常約１−２重量％の量で含有させることかできる。これらの成分に関して、 以下にさらに特定して説明する。

Ａ、油 本明細書において、［油」の用語は、鉱物、植物、動物、精油、合成または食用 由来に無関係に、多種の界面活性剤の同定に使用される一般的用語として使用す る。従って、本明細書において、「油」の用語は、化学的種類としては全く相違 する、広範囲の物質に適用されるものとする。油を種または機能で分類する場合 には、例えば鉱油は、石油から誘導されるものであり、脂肪族またはワックスベ ースの炭化水素類、芳香族または脂肪族ベースの炭化水素類、あるいは混合脂肪 族または芳香族ベースの炭化水素類を包含する。鉱油類にはまた、石油から誘導 される油、例えば精油パラフィン油等が包含される。植物種では、油は主として 、種子またはナツツ類に由来するものであり、乾性油、例えば亜麻仁油およびタ ング油（ｔｏｎｇｕｅ　ｏｉｌ）　；半乾性油、例えばひまわりおよび大豆種子 油；非乾性油、例えばひまし油、綿実油およびヤシ油：および非食用石鹸原料油 、例えばパーム曲およびヤシ油を包含する。動物種では、油は一般に獣脂、ラー ドおよびステアリン酸由来の脂肪から誘導されるものである。液状の動物種油に は、魚油、オレイン酸、鯨油等か包含され、これらは一般に、高い脂肪酸含有量 を有する。

精油種では、花、茎および葉、多くの場合に植物全体から誘導される複合揮発性 液体か包含される。これらの精油には、テルペン類、例えばピネン、ジペンテン 等か包含され、これらは主として、香料および芳香剤に使用されるものである。

食用種としては、或種の植物油、例えばオリーブ油、綿実油、トウモロコシ油お よび落花生油、およびまた或種の特殊な魚油、例えばタラ肝油、ハリバ（肝油） 、サメ肝油、およびまたそれらの高ビタミン含有量によって医療用として広く使 用されているものか包含される。本発明の目的に係わり、油として分類されうる 、この広範囲の物質には、周知の化学的方法または電気化学的方法により合成す ることができる、多数のフッ素を含有する有機化合物またはパーフルオロ化合物 等の親油性の合成有機化合物が包含される。

本明細書において、「フルオロケミカル」またはｒＰＦｃＪの用語は、パーフル オロカーボンの中の多くのフッ素を含有するを機化合物またはフッ素含有化学物 質のどちらかを表すために使用されている。さらに、［パーフルオロカーボンＪ の用語には、炭素か「環状」である化合物または「非環状」である化合物が包含 される。それらの構造内に他の元素、例えば酸素、窒素および臭素等を存する、 その置換誘導体も包含される。「パーフルオロカーボン」の用語はまた、その炭 素原子鎖または炭素原子環およびまた炭素側鎖基に結合している水素原子の全部 がフッ素により置換されているものが包含されることに留意されるべきである。

しかしながら、　「フルオロカーボンＪの用語は、部分的に、または実質的にフ ッ素化されているフッ素含有化学物質を包含する意味を有する。この置換は、本 発明の好適医療用フルオロカーボンの基本的に無毒性の特性に対して有害に作用 しない、全部の水素かフッ素により完全に置換されていない化合物の提供を可能 にする。使用できるパーフルオロカーボン化合物の中には、パーフルオロトリブ チルアミン（ＰＣ４７）　、パーフルオロデカリン（ＰＰ５）、パーフルオロメ チルデカリン（ＰＰ９）、パーフルオロオクチルブロマイド、パーフルオロテト ラヒドロフラン（ＰＣ８０）、パーフルオロエーテル（ＰＩＤ）［（ＣＦ＝　） ２　ＣＦＯＣＦｔ　（ＣＦｔ　）ｔ　ＣＦｇ　ＯＣＦ　（ＣＦｓ　）ｔ　］　、 パーフルオロエーテル（ＰＩ　ＩＤ）［（ＣＦ２　’）２　ＣＦＯＣＦ２　（Ｃ Ｆ２　）ｌ　ＣＦ、ＯＣＦ　（ＣＦ□）２コ、パーフルオロポリマー（Ｒ３）Ｃ Ｆ。

■ ［ＣＦ、ＣＨＦ　（ＯＣＦ、ＣＦ）、ＯＣＦ、ＣＦ、ＣＦ２］、パーフルオロエ ーテルポリマーしホムブリン（Ｆｏｍｂｌｉｎ　）　Ｙ／　ＯＩ　］　、パーフ ルオロドデカン、パーフルオロビシクロ［４，３，０］ノナン、バーノルオロト リメチルシクロベキサン、パーフルオロトリプロピルアミン、パーフルオロイソ プロピルシクロヘキサン、パーフルオロエンドテトラヒドロジシクロペンタジェ ン、パーフルオロアダマンタン、パーフルオロエキソ−テトラヒドロジシクロペ ンタジェン、パーフルオロビンクロ［５，３，０］デカン、パーフルオロテトラ メチルシクロヘキサン、パーフルオロ−１−メチル−４−イソプロピルシクロヘ キサン、パーフルオロ−ｎ−ブチルシクロヘキサン、パーフルオロジメチルビシ クロ［３，３，１］ノナン、パーフルオロ−１−メチル−アダマンタン、パーフ ルオロ−１−メチル−４−ｔ−ブチルシクロヘキサン、パーフルオロデカヒドロ アセナフテン、パーフルオロトリメチルビシクロ［３，３，１］ノナン、パーフ ルオロ−ｎ−ウンデカン、パーフルオロテトラデカヒドロフェナントレン、パー フルオロ−１，３，５，７−チトラメチルアダマンタン、パーフルオロドデカヒ ト冶フルオレン、パーフルオロ−１，３−ジメチルアダマンタン、パーフルオロ −ｎ−オクチルンクロヘキサン、パーフルオロ−７−メチルビシクロ［４，３， ０］ノナン、パーフルオロ−ｐ−ジイソプロピルシクロへ牛サン、およびパーフ ルオロ−ｍ−ジイソプロピルシクロヘキサンがある。米国特許Ｎｏ、４６８６０ ２４に記載のクロロアダマンタンおよびクロロメチルアダマンタン等の塩素化パ ーフルオロカーボン化合物を使用することもできる。このような化合物は例えば 、米国特許Ｎｏ、３９６２４３９；同３４９３５８１．同４１１０４７４．同４ ！８６２５３、同４１８７２５２．同４２５２８２７．同４４２３０７７、同４ ４４３４８０　；同４５３４９７８および同４５４２１４７．ヨーロツパ特許出 願Ｎｏ。

８０７１０および同＋５８９９６、英国特許明細書Ｎｏ、１５４９０３８および ドイツ国公開２６５０５８６に記載されている。これらの多数のフッ素を含有す る有機化合物のいづれの混合物もまた本発明のエマルジョンおよび方法に使用で きることを理解すべきことは勿論のことである。

本発明に従い、丸くはどの安定性を有する水中油型エマルジョンを生成させる新 規界面活性剤か見出だされた。さらに特に、安定なＰＦＣエマルジョンが製造さ れ、このＰＦＣエマルジョンは、存意に増加した循環血液残留時間および臨床上 の臓器、例えば肝臓および牌臓における好ましいものに変えられている組織分布 を存することか見出だされた。さらにまた、本発明の界面活性剤は、大部分のレ シチンを基材とするＰＦＣエマルジョンと通常組み合わせて静脈注入された後に 、ヘマトクリット、あるいは赤血球細胞数の有害な減少を有意に改善することか 見出だされた。

本発明のエマルジョンは、アルキルホスホリル　コリンまたはアルキルグリセロ ホスホリル　コリン界面活性剤を含有する。これらの界面活性剤は、下記の一般 構造を有する： さらに詳細には、Ｒ，、Ｒ，またはＲ１は、アルキル、アルケニル、フルオロア ルキルおよびアルケニルである。これらの基はそれぞれ、約６個−約５４個の炭 素原子を有することができ、そしてまた直鎖状脂肪族基または分枝鎖状脂肪族基 であることができる。−膜構造■において、基Ｒ１およびＲ１は、Ｃ１ｇ、Ｃ＋ ＊炭素原子を存すると好ましく、本発明の医療用ＰＦＣエマルジョンの場合の界 面活性剤として使用する場合には、Ｒ１はＣ＝　Ｃｓｔ炭素原子を有すると好ま しい。

最も好ましくは、Ｒ，およびＲ７は、Ｃｌ４Ｃ１１飽和または不飽和脂肪族基で ある。一般に、これらの基Ｒは、本発明の方法により合成される場合に、脂肪族 アルコールまたはハライド反応剤の残基である。

上記構造式において、ＰＣは、ホスホリルコリン基である：〇 この式において、Ｒ４は、水素または低級アルキル、例えばメチル、エチルおよ びプロピルである。本発明の医療用ＰＦＣエマルジョンの場合には、水素または メチル基が好ましい。

上記構造式においてＲ，、Ｒ，またはＲ１を構成する脂肪族アルコールまたはハ ライド反応剤の例には、テトラデシルブロマイド、オレイルアルコール、ヘキサ デソルブロマイド、オクタデシルアルコール、ＩＨ，ＩＨ，７Ｈ−ドデカフルオ ロ−１−ヘプタツール、２−ヨウドー　１．　１．　１−　トリフルオロエタン 、ＩＨ。

ＩＨ，１ｌＨ−エイコサフルオロウンデカン−１−オール、１−ヨウドーＩＨ。

ＩＨ−パーフルオロブタン、ｌ−ヨウドーＩＨ，ＩＨ，２Ｈ，２Ｈ−パーフルオ ロデカン、■−ヨウト　ＩＨ，ＩＨ，２Ｈ，２Ｈ−パーフルオロドデカン、ｌ− ヨウド−ＩＨ，ＩＨ，２Ｈ，２Ｈ−パーフルオロオクタン、４−ヨウドー、２− トリフルオロメチル−１，Ｉ、Ｉ、２−テトラフルオロブタン、２．　２．　３ ．　３゜４、　４．　５．　５−オクタフルオロヘキサジ−１，６−ジオール、 ｌ−ヨウドーｌＨ，ｌＨ−ペンタデカフルオロオクタノ−ルー　１．　３．　３ ．　４．　４．　４−ペンタフルオロブタノール−２、（ＩＨ，ＩＨ−ペンタフ ルオロプロパノ−ルー　１）、および（パーフルオロ−ｔｅｒｔ−ブタノール） かある。さらにまた、Ａｔｏｃｈｅｍ、Ｄｕｐｏｎｔ、３ＭおよびＨｏｅｃｈｓ ｔは、式Ｒ，−ＣＨ，−ＣＨ２−Ｘ　（Ｘ＝ＯＨ，Ｉ）で表される、適当な混合 物を市販している。この式において、Ｒ２はＣｍ　Ｆ２１１＋１パーフルオロア ルキル直鎖または分岐鎖の種々の鎖か混在している基からなる。

代表的には、これらの混合物において、ｒｎＪの数はＩ−３，４−８または６− １２である。これらと同一の会社はまた、Ｒ１−Ｃ０ＯＨを販売しており、これ らの化合物中のカルボキシレートを減少させると、Ｒ，−ＣＨ，ＯＨか生成され る。また、多くのタイプのパーフルオロアルケン化合物（これらの化合物はＲＯ Ｈを付加するための物質として容易に作用することができる）およびオキシラン 化合物（これらのすキシラン環は水素を含有し、この分子の残りの部分は本質的 にパーフルオロケミカルである）も市販されている。このオキシラン環はまた、 ＲＯＨにより核的に容易に開環する。

上記−膜構造式に包含される界面活性剤の特定の例には、１．　２−ジオクチル グリセロ−３−ホスホリルコリン、１．　２−ジテトラデシルグリセロー３−ホ スホリルコリン、１，２−ジムキサデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、■ 。

２−ジオクタデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、ｌ−ヘキサデ’、７に− ２−テトラデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、■−オクタデシルー２−テ トラデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、ｌ−テトラデシル−２−才クタデ シルグリセロ−３−ホスホリルコリン、ｌ−ヘキサデシル−２−オクタデシルグ リセ、ロー３−ホスホリルコリン、Ｉ、２−ジオクタデシルグリセロ−３−ホス ホリルコリン、■−オクタデシルー２−ヘキサデシルグリセロ−３−ホスホリル コリン、Ｉ−テトラデシル−２−ヘキサデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン 、２，２−ジテトラデシルー１−ホスホリルコリンエタンおよびｌ−ヘキサデシ ル−２−テトラデシルグリセロ−３−ホスホリルコリンがあり、また以下に示す ように、これらの新規界面活性剤とその他の公知の界面活性剤との混合物を使用 すること本発明のエマルジョンは、上記定義のとおりの界面活性剤の存在の下に 、水中に油を分散させることによって製造される。界面活性剤は、液相の分散性 および安定性を増加させる。本明細書において、分散液は一般にエマルジョンの 用語で表されているが、これらは溶液、ミセル状溶液、ミクロエマルジョン、小 のう懸濁液、あるいはこれらの物理的状態の全部の混合形態であると考えられる ものと理解されるべきである。従って、本明細書で使用されているものとして、 「エマルジョン」の用語は、これらの状態の全部を包含し、本発明に係わる界面 活性剤もしくは可溶化剤は、油相と水相とからなるこれらの物理的状態の混合物 の安定性を増強させるために使用される。−例として、フルオロケミカル油を水 中で乳化させる場合には、前記のＣ１ａｒｋおよびＳｈａｗによりヨーロッパ特 許出願８７３００４５４．３に記載されているように、もう一種の油を乳化助剤 として使用することかできる。本発明においては、この乳化助剤の使用か任意で あることを強調したい。このような助剤を使用しなくても、満足なエマルジョン を製造することかできる。このような助剤を使用する場合に、好適な助剤は、モ ノ−、ジーまたはトリーグリセライｌ”またはその混合物なとの液状脂肪油であ る。以下で示すように、このような油と親油性ＰＦＣとの組み合わせを水中で乳 化させる場合には、複合相および中間面か形成されつる。

好ましくは、人工血液の場合に、本発明のエマルジョンは、ＰＦＣまたはＰＦＣ 混合物を含有し、最も好ましくは、パーフルオロデカリン、パーフルオロメチル デカリン、パーフルオロジメチルアダマンタン、パーフルオロオクチルブロマイ ド、パーフルオロ−４−メチルーオクタヒドロキノリジジン、パーフルオロ−Ｎ −メチル−デカヒドロキシリン、Ｆ−メチル−１−オキサ−デカリン、パーフル オローヒシクロ（５，３，０）デカン、パーフルオロオクタヒトロキノリジジン 、パーフルオロ−５，６−シヒドロー５−デセン、およびパーフルオロ−４゜５ −ジヒドロ−４−オクテンからなる群から選ばれるフルオロカーボンを含有する 。生物学的造影用の造影剤として使用する場合には、パーフルオロオクチルブロ マイドか、本発明に係わる好適ＰＦＣの一種である。

ＰＦＣまたはＰＦＣ混合物は、エマルジョンの１０−約７５容量％まで、あるい はそれ以上の割合を構成することかできるが、好ましくはＰＦＣまたはＰＦＣ混 合物は、エマルジョンの少なくとも４０容量％を構成する。エマルジョンを「人 工血液」または赤血球代用物質として使用する場合には、ＰＦＣをできるだけ多 い容量濃度で存在させる。例えばその濃度が全血の大体の酸素含有量に適応する ことから、４０容量％の濃度かしばしば好適である。

前記したように、広い観点においては、エマルジョン中の油の量は約０．５−約 ９０容量％、あるいはそれ以上の濃度範囲で変えることかできる。この油の量は 、エマルジョンの池の成分の濃度および性質ならびにその用途により変わる。

−例として、人工血液として使用する場合には、ＰＦＣ油は、その他の油乳化助 剤とともに、許容される量で存在させる。いづれか一定の成分の許容されるエマ ルジョンを生成させるための実際の油の濃度は、種々の油濃度のエマルジョンを 製造し、これらのエマルションの安定性を試験することによって、決定すること かできる。例えは、ＰＦＣ人工血液の場合に、油動剤０−３０重量％およびＰＦ Ｃ曲１０−７０容量％を使用することかできる。

本発明のエマルションに使用される特定の界面活性剤の量は、前記したような当 該エマルション中のその他の成分の量および種類に依存する。一般に、約０．５ −１０重量％、好ましくは約１−２重量％の界面活性剤を使用する。前記したよ うに、本発明の界面活性剤は、別種の界面活性剤とともに使用することができる 。本発明のエマルジョンに有用な別種の界面活性剤としては、公知のアニオン性 、カチオン性、非イオン性および両性イオン性界面活性剤がある。これらの例と しては、アルキルまたはアリールスルフェート、スルホネート、カルボキンレー トまたはホスフェートのようなアニオン性界面活性剤、モノ−、ノー、トリーお よびテトラ−アルキルまたはアリールアンモニウム塩のようなカチオン性界面活 性剤、その親水性部分かポリオキシエチレン鎖、糖分子、ポリアルコール誘導体 またはその他の親水性基からなるアルキルまたはアリール化合物のような非イオ ン性界面活性剤、および上記アニオン性基またはカチオン性基を組み合わせて含 有することができ、その疎水性部分がいづれかその他のポリマー、例えばポリイ ソブチレンまたはポリプロピレン　オキサイドからなる、両性イオン性界面活性 剤かある。

本発明のエマルジョンを人工血液または赤血球代用物質として使用しようとする 場合には、これらのエマルジョンの界面活性剤またはその組み合わせは、生理学 的に許容されるものでなければならない。例えば、人工血液の場合には、そのア ルキル基か約Ｃｌ２−Ｃ１１である、アルキルホスホリルコリンまたはジアルキ ルグリセロホスホリルコリン、例えばｌ−才クタデシル−２−ヘキサデシルグリ セロ−３−ホスホリルコリンを使用する。

本発明に係わるエマルジョンは、油、界面活性剤および水からなる主成分をいづ れかの順序で混合することによって製造することかできる。しかしながら、最適 のＰＦＣエマルジョンを製造するためには、ＰＦＣを先ず、界面活性剤の一部ま たは全部と水の一部との組合せの存在の下に、補助油と混合する。次いで、この 第一のエマルジョンを、残りの水および残りの界面活性剤中で、乳化させること によって製造する。この方法は、上記Ｃ１ａｒｋおよびＳｈａｗによるヨーロッ パ出願８７３００４５４．３に記載されており、この記載を引用してここに組み 入れる。

成分の混合および乳化は、慣用のミキサーおよび乳化装置のどれかを使用して行 うことかできる。例えば、フィッシャー（Ｆｉａｈｅｒ）ブランド　タッチ　ミ キサー、マイクロッロイダイザ−（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）　、ガラリ ン（Ｇａｕｌ　ｉｎ）およびラニー（Ｒａｎｎｉｅ）ホモジナイザーを使用する ことかできる。

下記の非限定例は、本発明の種々の態様を説明するものである。

詳細な具体例 本発明の界面活性剤は、相当するシアルギルグリセロール化合物から合成した。

この合成経路を次の反応経路もしくは方法により示す。

反応経路　■：対称ジアルキルエーテルグリセロール化合物の製造（ａｌ　ｘｓ 　ＫＯＨｔ　）ルエン、ＲＢｒまたはＲＣＩｌｂ）　５％Ｐｄ／Ｃ，Ｎ２／Ｅ１ ０Ａｃ−ＨＯＡｃまたはＬｌ／８８３／ＥＩ２０反応経路　１１．非対称シアル ギルエーテルグリセロール化合物の製造（ｍｌ　ｘｓ　ＫＯ）ｌ／）ルｚン、Ｒ Ｂｒ＊たはＦＩＣＩ　（ｂ）　Ｎ２ＳＱ４ｔＨ２ｏｔ馴ｅＯＨ（ｃ）　ｏ３ｃｃ Ｉ　（ｄｉ　ｓ　、！−同一　（＠Ｉ　ＭＣＩ（無水１１石油エーテル方法　Ａ ・ジアルキルグリセロホスホリル　コリンの製造方法　Ｂ：ジアルキルグリセロ ホスホリル　コリンの製造上記反応経路および方法に関連して、［対称」の用語 は、アルキル基が両方ともに同一であるジアルキル化合物を意味するために、そ して「非対称Ｊの用語は、これらのアルキル基が相違しているジアルキル化合物 を意味するために使用されている。これらの反応経路および方法を使用して、本 発明のジアルキルグリセロホスホリル　コリン界面活性剤の前駆物質として、ジ アルキルエーテルグリセロールを製造する特定例を示す。

３−ベンジル−１，２−ジヘキサデシルグリセロール（反応経路　１ａ）トルエ ン（５００ｍｌ）中の、電気式粉砕装置で新たに粉末にした、ＫＯＨ（４０ｇ、 ０．７６モル）およびベンジルグリセロール（５０ｇ、０．２７モル）の還流し ている混合物に、！−ブロモヘキサデカン（２５２ｇ、９．７６モル）を１時間 にわたって添加した。この混合物をディーンースターク（Ｄｅａｎ−３ｔａｒｋ 　）装置により反応水を除去しながら、−夜にわたり還流させた。このスラリー からトルエンを回転蒸発器て留去し、次いでこの残留物をＣＨＣｌ５中でスラリ ー形成し、次いて水により洗浄した。この存機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、次 いて蒸留した。未反応の出発物質をクーゲルガ−（Ｋｕｇｅｌｒｏｈｒ）蒸留（ １５０°、１ｍｍＨｇ）により分離した。このポット残留物は、引き続く工程で 使用するのに充分の純度を有する、黄色固形物であった。

２．２−ジヘキサデシルグリセロール（反応経路　１ｂ）クーゲルガー蒸留器か らの残留物をパール（Ｐａｒｒ）水素添加装置に移し、ＥｔＯＡｃ　（２００ｍ ｌ）およびＨＯＡｃ　（２００ｍｌ）中に溶解した。窒素雰囲気の下に、５％Ｐ ｄ／Ｃ（８ｇ）を添加した。５０°Ｃおよび５０ｐｓｉｇにおいて、水素吸収が 止むまで、脱ベンジル化を行った。この反応混合物を熱いうちに濾過し、この濾 過ケーキをクロロホルムで洗浄した。揮発性成分を、回転蒸発器で蒸発させた後 に、この残留物を酢酸エチルから再結晶させて、白色結晶（２００ｇ、６９％） を得た：融点：　５６−７°Ｃ０反応経路　Ｉにより製造されるその他の化合物 ：１、　２−ジオクタデシルグリセロール＊１、　２−ジオクタデシルグリセロ ール１、　２−ジオクチルグリセロール １．２−ジデシルグリセロール ＊この化合物はまた、２，３−ビス（オクタデシルオキシ）−１−プロパツール の別名を有し、この命名法は、他の化合物にも使用することかできる。

物に、２０°Ｃて撹拌しながら、ブロモエタノール６２ｇを滴下して添加した。

この混合物を、−夜にわたり放置し、次いで２時間加熱還流させて、塩化水素を 除去した。四塩化炭素を留去した後に、この残留物を減圧の下に分留した。生成 物ニア０−７７ｇ、沸点：１１０−１＋５°Ｃ／１２ｍｍＨｇ。

１．２−ジオクタデシルグリセロールリン酸の２−ブロモエチルエステル（方法 Ａｃ） ２−ブロモエチルホスホリルジクロライド（１４，５ｇ、０．０７４ｍ１）を、 無水エーテル（３００ｍｌ）およびトリエチルアミン（７，５ｇ、０．０７４モ ル）中に溶解した。この溶液に、室温において、ジヘキサデシルグリセロール（ ２０ｇ、０．０３７モル）を一度に添加した。この反応混合物を一夜にわたり撹 拌した。この中間体の加水分解をＮ２０　（３００ｍｌ）およびＭｅＯＨ（１０ ０ｍ１）とともに５時間、激しく撹拌することにより行った。層を分離させ、こ のエーテル相をＭｇ５ＯＪ上で乾燥させた。回転蒸発器でエーテルを除去した後 ・　に、白色ワックス状固形物２６．３ｇを得た。

１．２−ジヘキサデシルグリセロホスホリル　コリン（方法　Ａ）上記方法Ａの ２−ブロモエチルエステル（８２ｇ、０．１８モル）のメチルエチルケトン（４ ００ｍｌ）中の溶液に、密封容器中で、トリメチルアミン（３５ｇ、０．６モル ）を添加し、次いで５５°Ｃに１８時間加熱した。このスラリーを次いで、室温 まで冷却し、濾過し、次いてこのケーキをアセトンで洗浄した。このケーキを熱 い９０％エタノール（１４００ｍｌ）中に溶解し、ドーペックス（Ｄｏｗｅｘ　 ）　ＳＢＲ（２００ｇ）イオン交換樹脂を添加し、このスラリーを１５分間撹拌 した。この樹脂を濾別し、次いて回転蒸発器でエタノール−水を除去した。

この残留物をＰｚＯｓ上で乾燥させ、次いてカラムクロマトグラフィにより精製 して、純粋な生成物３５．５ｇ（収率：４２．２％）を得た。

Ｉｔ　２−ジオレイルグリセロホスホリル　コリン（方法　Ｂ）コンデンサー、 攪拌機および温度計を備え、充分に乾燥させた５００ｍ１丸底フラスコに、ジオ レイルグリセロール（下記の反応経路１　ｂ）　（４０ｇ、６７ミリモノりおよ び無水ジエチルエーテル（３８０ｍｌ）を添加した。この固形物を、温和に温め ることによって溶解し、次いでこの溶液を室温まで冷却させた。ジエチルエーテ ル（５０ｍｌ）中の２−クロロ−２−才キソー１．　３．　２−ジオキサホスホ ラン（９，８ｇ、６９ミリモル）を、１５分間の間に、滴下して添加した。

この時点て、トリエチルアミン（ＴＥＡ）（７，２ｇ、７１ミリモル）を加える と、はとんと直ぐに、白色沈殿か生成された。この混合物を１時間撹拌し、次い て乾燥窒素流の下に、濾過した。この濾液を回転蒸発させ、白色固形物を得た。

この固形物を、５００ｍ１血清ボトル内のアセトニトリル（４００ｍｌ）に溶解 し、次いでトリメチルアミン（ＴＭΔ’）（２８，０ｇ、２３７ミリモル）を加 えた。このボトルを密封し、６５°Ｃに１８時間保持した。室温まで冷却させた 後に、その内容物をＣＨＣ］ｊに溶解し、次いでその溶媒を蒸発させて、白色固 形物を得た。この固形物をシリカゲルにおけるクロマトグラフィに付しく溶出剤 ＝７５％ＣＨＣｌ、、２２％Ｈ，Ｏ１３％Ｈ２０）、所望の生成物を得た（２１ ．２ｇ。

原料ジオレイルグリセロールから４１．５％）。

（注、方法Ｂは、ホスホリル先頭基を付加するために選ばれる方法である。）１ ．２−ジオレイルグリセロール（反応経路　ＩＢ）ドライアイス　コンデンサー およびドライアイス−アセトン浴を備えた２５０ｍ１フラスコを、無水ＮＨ，（ １４０ｍ１）により浄化した。Ｎ２の下に−６５、°Ｃに冷却させた後に、Ｌｉ ワイヤー（１，３５ｇ）を少しづつ添加した。ＴＨＦ（６０ｍｌ）およびＥｔＯ Ｈ（１２ｇ）中のジオレイルペンジルグリセ口−ル（１０ｇ、０．０１４６モル ）を、３０分間にわたって加え、次いで一６５°Ｃで１５分間撹拌した。ドライ アイス浴を取り除き、次いでこの反応混合物を、ＮＨ８の蒸発の下に、室温まで 温めた。水（１００ｍｌ）およびヘプタン（１５０ｍ１）を添加した。この有機 相を水で洗浄し、乾燥させ（Ｍｇ　Ｓ　０４　）次いで溶媒を留去して、淡黄色 油状物を得た（７．　８ｇ、９０％）。

１−ヘキサデシル−２−テトラデシルグリセロール（反応経路　１１ｃ、ｄ、ｅ ）ｌ−ヘキサデシルグリセロール（１０５ｇ、０．３３モル）およびトリチルク ロライＦ９３ｇ　（０，３３モル）を、ピリジン３００ｍ１中に溶解した。この 混合物を１００’Ｃて１６時間加熱した。室温まで冷却させた後に、エチルエー テル１５００ｍｌを添加し、このスラリーを冷いｏ、５Ｎ　Ｈ２ＳＯ４により３ 回、５％重炭酸ナトリウムおよび水で２回、洗浄した。この有機相をＭｇ５Ｏ４ 上で乾燥させ、エーテルを回転蒸発器で除去し、次いでこの残留物をエタノール から再結晶させて、中間体１−ヘキサデシル−３−トリチルグリセロール（１２ ９ｇ。

７０％）を得た。Ｉ、２−ジヘキサデシルグリセロールの製造に係わり、ベンジ ルグリセロールのジアルキル化に関して前記した方法と同一の方法により（＋− ルエン中で粉末状のＫＯＨを使用する）、この中間体２部を、テトラデシルブロ マイドによりアルキル化した。生成する■−ヘキサデシルー２−テトラデシル− ３−トリチルグリセロール（１２８ｇ）を石油エーテル３００ｍ１中に溶解した 。

室温において、無水塩化水素３０ｇを添加した。短時間内に、沈殿か生成された 。

このスラリーを室温で４時間撹拌し、次いで濾過した。この固形物をアセトンか ら再結晶させて、生成物４５．６ｇを得た：融点：４２−３°ｃ０界面活性剤の 溶血スクリーニング 上記−膜構造式Ｉに従う界面活性剤例１ａ−１ｋ、および上記構造式＋１の界面 活性剤例２ａを、上記方法に従って製造した。これらの界面活性剤の溶血スクリ ーニングの結果を以下の表Ｉに示す。

０９％塩類溶液中の界面活性剤の５％溶液／分散液を調製し、ラットの全血とｌ 　Ｉて混合することによって、先ず界面活性剤を選別した。２４０Ｏｒｐｍで遠 心分離すると（６分冊）、詰め込まれた細胞と上澄液とが得られた。この遠心分 離からの上澄液か、対照ラット血液に比較して、目で見て相違する赤色を示した 場合には、その一定の濃度で溶血したものと判断した。この上澄液の脱色は、比 色によっては定量されない。この初期試験において、低分子量界面活性剤１ａお よび１ｂは、完全赤血球と混合すると溶血が生じさせることが見出だされたので 、引き続く毒性試験には付さなかった。これは表■において、ｒＮ／ＡＪで表さ れている。非溶血性であることか見出だされた化合物は次いで、当該化合物の０ ．９％塩類溶液中の５％音波処理した分散液４０ｃｃ／ｋｇを、２匹のスブラギ ュー　ダウレイ（Ｓｐｒａｇｕｅ　Ｄａｗｌｅｙ）ラットに注入することによる 、初期急性毒性試験で試験した。動物か１４日間生存した場合には、このエマル ジョンは、毒性試験に合格したものとした。これらの結果を表１に示す。これら の試験は、低分子量の化合物は溶血性であり、従って毒性であることを示す傾向 があるのに対して、さらに大きいＣｌ４−Ｃ１１の基は非溶血性であったので、 致死性の合理的相違に係わる試験を必要とすることかある。

パーフルオロカーボン　エマルジョンおよびそれらの性質表Ｉの界面活性剤を使 用して、４０容量％（Ｖ／Ｖ）パーフルオロケミカル含有エマルジョンを調製し た。前記ヨーロッパ特許出願８７３００４５４．３には、ある種の油類、すなわ ち脂肪酸のトリグリセライドが補助添加剤として、レシチン含有エマルジョンの 安定性を改善するものと教示されている。従って、本発明のパーフルオロケミカ ル含有エマルジョンとの比較用の対照として、これらのパーフルオロケミカル含 有エマルジョンを使用した。この対照エマルジョンは、上記ヨーロッパ特許出願 の技術に従い調製された４０ｖ／ｖ％パーフルオロオクチルブロマイド含存エマ ルジョンであり、界面活性剤として１．７５ｗ／ｖ％卵黄レンチンを含存し、そ してまた２ｗ／ｖ％サフラワー油を含有していた。レシチンの代わりに、本発明 の界面活性剤を使用して、そのエマルジョンの性質の結果を表Ｈに示す。この表 １１にはまた、エマルジョン組成、レーザー光散乱により測定した平均粒子サイ ズ、およびラクテート化リンゲル溶液中の血清アルブミンの５％溶液中で、３７ °Ｃで４日間保存した後の安定性を示す。データはいずれも、大量非経口投与用 工業基準に従い、回転バスケット　オートクレーブ中で１２１℃において、１５ 分間殺菌したエマルジョンに関するものである。

表Ｉ＋ Ｉｃ　４．０　０．０　２＋２　−−−１．５　２．０　２７０　２６７ Ｉｅ　１．５　２．０　３４７　３８５Ｉｆ　２．０　２．０　３５９　３５７ １ｇ　２．０　２．０　３９２　４３８Ｉｈ　２．０　２．０　’２３５’　９ １ｉ　１．８　２．０　３０４　２５８表ＩＩのデータを比較するために、対照 および本発明の界面活性剤に係わり、一定の２ｗ／ｖ％界面活性剤濃度、および ２ｗ／ｖ％サフラワー油助剤を含有するエマルジョンを使用して、この試験を繰 り返した。

表ＩＴＩ 化合物　平均粒子サイズ（ｎＭ）　４日目の血清（ｎＭ）ｌ　ｃ　４２１　３１ ８ １ｅ　、２５６　２５６ １　ｆ　３３３　３２０ １　ｇ　２０７　Ｎ／Ａ １　ｈ　３５４　４６０ １　ｉ　３２３　３０１ １　ｊ　２２９　Ｎ／Ａ １　ｋ　２２７　Ｎ／Ａ 対照　２２６　２３２ 表Ｉおよび表ＩＩのデータに関して、これらのエマルジョンは、製造時点および 血液および血漿に偽だ、ラクテート化リンゲル溶液とヒト血清アルブミンとの混 合物（「血１ａＪＩＩ）中で３７°Ｃで４日間保存した後の両方において、レー ザー光散乱により測定して、非常に良好な粒子サイズ分布特徴を示した。これら のデータはいずれも、本発明の界面活性剤を卵黄レシチンの代わりに使用すると 、驚くほど安定なエマルジョンか得られることを示している。

パーフルオロケミカルの循環血液中滞留時間に対する組成の影響各エマルジョン 当たりで、無作為選別した１０匹の動物を使用して、表ＩおよびＩＩＩのエマル ジョンを試験した。試験は、各動物にエマルジョン２０　ｃ　ｃ／ｋｇを注入し 、４８時間の時点て動物を犠牲にして、循環パーフルオロケミカルまたはパーフ ルオロカーボン含有量（「フルオロクリット）および略字ｒＦＣｔＪて表す）を 測定することによって行った。Ｆｃｔは、血液中のパーフルオロカーボンのパー センテージをＶ／Ｖ％で示すものである。

一群１０匹の動物の２群のそれぞれを、対照エマルジョンおよび本発明の界面活 性剤から調製したエマルジョンにより、無作為投与計画に従い処置した。４８時 間の後に、動物を麻酔し、その胸腔を開き、まだ心臓か鼓動しているうちに血液 試料を採取した（１−２ｍｌ）。予め計量した、ｌＯ％ＫＯＨ／ＥｔＯＨ（１， ０ｍ１）を含有する、３本の４ｍｌバイアルのそれぞれに、試料３−４滴を添加 した。バイアルの重量を測定して、血液添加量を決定し、次いでＣＦＣＩ　、中 の１％オクタンの内部標準混合物（１，５−２，０ｍ１）の添加後に、重量を再 度測定した。バイアルを満たす量て、バイアルに水を加え、次いでこれらのバイ アルを２４Ｏｒｐｍの回転振動器に２０分間入れた。下方の層を採取し、シリカ ゲルを含有する（０．３−０．４ｇ）、ガラスウールプラグ付きのパスツールピ ペットに通した。この溶出液をヒユーレット　パラカート　オーｉ・サンプラー （Ｈｅｗｌｅｔｔ　Ｐａｃｋａｒｄ　ａｕｔｏｓａｍｐｌａｒ　）バイアル中に 集め、３０メーター、０．０５４インチＩＤ　メガホール（Ｍｅｇａｂｏｒｅ） 、０．３被覆ＤＢ−１カラムを有する５８９０ＡクロマＩ−グラフに付した。プ ログラム　パラメーターは、４０°Ｃて４分間の保有時間に特定し、次いで１４ ０°Ｃまて１０°Ｃ／分温度上昇速度を達成した。

このフルオロケミカルの循環血液中滞留時間に対する、組成の影響を表ＩＶに示 す。

表ＴＶ フッ素含有化学物質の循環血液中滞留時間対照　６．４６ ＊　９９％の信頼限界において、対照に比較して有意の差異を表す（Ｆｉｓｈｅ ｒＰｒｏｔｅｃｔｅｄ　Ｌｅａｓｔ　５１ｇｎ１ｆｉｃａｎｔ　Ｄｉｆｆｅｒｅ ｎｃｅ）表ＩＶに関して、本発明の界面活性剤、特に化合物Ｉｆおよび１ｊを使 用して調製されたエマルジョンは、４８時間の時点で残存するパーフルオロケミ カルの量により測定して、循環血液系中において増加した安定性を示すことは明 白である。従って、本発明の界面活性剤を使用することによって、安定なＰＦＣ エマルジョンか形成されるのに加えて、これらの界面活性剤はＲＦＣの循環血液 中滞留時間を有意に増加させる。

パーフルオロケミカルの臓器分布に対する組成の影響注入後の１４４日目試験動 物を犠牲にすることによって、ＰＦＣの臓器分布に対する表ＩＶのエマルジョン の影響を試験した。この臓器分析試験の結果を表Ｖに示す。

ｌ　ｅ　７．９７　１．５５”　０．５７°　１．０６　３５．８　９／＋０Ｉ ｇ　７．５２°　１．４９°　０．５５″″　０．９４　３９．０”　６／＋０ １ｉ　７．４７″’　２．５６　０．６４＠０．９６　３４．７　８／＋０Ｉ　 ３　６．６４”　１．６６’″”　０．５７”　０．８９　４４．４°”　９／ １０１ｋ　７．７６６　２．０９°　０．６４”　１．２２　３６．５　９／１ ０対照　９．＋３　２．８９　０．８７　１．０２　３＋、７　９／１０＊　Ｆ ｉｓｈｅｒ　Ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ　Ｌｅａｓｔ　５１ｇｎ１ｆｉｃａｎｔ　Ｄｉ ｆｆｅｒｅｎｃｅにより、９９％の信頼限界において、対照に比較して存意の差 異を表す＊　＊Ｆｉｓｈｅｒ　Ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ　Ｌｅａｓｔ　５１ｇｎ１ｆ ｉｃａｎｔ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅおよび５ｃｈｅｆｆ　Ｆ−テス１−により、 ９９％の信頼限界において、対照に比較して有意の差異を表す表Ｖから、本発明 の界面活性剤化合物は、肝艮牌臓および肺臓の肥大に係わる毒性応答に対するパ ーフルオロケミカルの作用を格別に軽減することは明白である。さらにまた、注 入後にヘマトクリットはほとんと低下しなかった（赤血球のＶ／Ｖ％で表す、ｒ ＨｃｔＪ）。この結果は、化合物１ｋに関して非常に劇的である。この結果は、 表ＶｌおよびＶｌｌに示されているように、２回の追加の別々の試験により追跡 した。

表ＶＩ Ｉ−オクタデシル−２−ヘキサデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン界面活性 剤 Ｉｊ　７．４４　１．７０”　０．９Ｂ　０．９７　３６．１　１０／１０対照 　７．９９　２．５１．　０．９２　０．９３　３２．１”　８／１０＊　５ｔ ｕｄｅｎｔ”ｓにより、９７．４％の確率において、対照に比較して存意の差異 を表す ＊　＊　５ｔｕｄｅｎｔ　＋　Ｓにより、９９．３％の確率において、対照に比 較して有意の差異を表す 表Ｖｌｌ トオクタデシルー２−ヘキサデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン界面活性剤 Ｉｊ　７．３９　１．４６”　０．８２８　０．９０１　３７．７”　１０／１ ０対照　７．８２　２．７８　０．８３８　０．９４３　３４．１　１０／１０ ＊　５ｔｕｄｅｎｔ″Ｓにより、９９％の確率において、対照に比較して有意の 差異を表す 表ＶＩおよびＶＩ［は、牌臓分布は減少され、ヘマトクリットにより測定して、 循環赤血球数は高いままであることを証明している。表Ｖｌにおいては、肝臓お よび肺臓に対する作用は、表Ｖにおけるようには際立っていなかった。しかしな がら、表ＶＩ＋　ｉ：Ｊ胃して、肝臓および肺臓で得られた小さい数値もまた、 真実であるものと考えられる。ｔ−テストは、９９％レベルで各試験において、 存意の差異の存在を示さないが、肝臓重量は対照よりも少ないままであり、そし て差異の５ｔｕｄｅｎｔ　を確率は８６％であった。従って、３種の別々の試験 で得られた結果のオツズは非常に低い。さらにまた、血液学的検査を、公認の部 外研究所により行った。この結果を表Ｖｌｌｌに示す。

化合物　ＲＢＣヘモグロビン　血小板　網状赤血球ｌｊ　５．４２°　１１．０ ４°　１０２４２２２　３１３２８１”対照　４，８０　９．７９　９２０３０ ０　４８１８５８＊　５ｔｕｄｅｎｔ−ｓ　ｔにより、９９％の確率において、 対照に比較して有意の差異を表す ＊＊　５ｔｕｄｅｎｔ’ｓ　ｔにより、９８％の確率において、対照に比較して 有意の差異を表す 表Ｖｌｌ＋に関して、これらの結果は、循環する赤血球数の増加は真実であると 結論できることを証明している。上記の詳細な説明および試験結果からみて、本 発明の利点は明白である。要約すると、広い観点で、油と水とのエマルジョンを 安定にする、新規な一群の界面活性剤か見出だされた。この安定性は、乳化粒子 として脂肪酸のトリグリセライド類の油と乳化粒子として親油性パーフルオロケ ミカルとを含有するエマルジョンの場合に、特に立証された。この驚くほどの安 定性を有するＰＦＣエマルジョンに加えて、本発明の界面活性剤は動物血液中に おけるＰＦＣの循環滞留時間を有意に増加させ、臨床臓器におけるＰＦＣの組織 分布を好ましい様相に変え、そしてまた赤血球数の有害な低下を有意に軽減する 。

本発明の界面活性剤はまた、卵黄レシチン乳化剤が通常付随する酸化および分解 に対して耐性である。従って、本発明の新規界面活性剤を含有するエマルジョン は、これらの酸素耐性界面活性剤によって、殺菌処理中に、およびまた分解する ことなく延長された時間にわたる保存中に、酸素処理することかできる。

前記詳細な説明に基づいて、本発明の他の変更および態様は当業者にとって理解 されるものであり、このような変更および態様は本発明の範囲および精神の範囲 内にあるものとする。

Claims (22)

【特許請求の範囲】
1. １．油、水および界面活性剤を含むエマルジョンであって、この界面活性剤が、 ａ）▲数式、化学式、表等があります▼および ｂ）Ｒ３−ＰＣ ［各式中、Ｒ１、Ｒ２またはＲ３は、アルキル、アルケニル、フルオロアルキル およびフルオロアルケニルであり、そしてＰＣは、構造式：▲数式、化学式、表 等があります▼ （式中、Ｒ４は、水素またはメチル、エチルおよびプロピルからなる群からの低 級アルキルである） で示されるホスホリルコリン基またはその塩である］からなる群から選ばれる一 般構造を有するものであるエマルジョン。
2. ２．Ｒ１、Ｒ２またはＲ３が、約６個−約５４個の炭素原子を有する、請求項１ に記載のエマルジョン。
3. ３．Ｒ１およびＲ２が、Ｃ１４−Ｃ１８の飽和または不飽和脂肪族基であり、あ るいはＲ４がメチルである、請求項１に記載のエマルジョン。
4. ４．界面活性剤が、１，２−ジオクチルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１， ２−ジテトラデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１，２−ジヘキサデシル グリセロ−３−ホスホリルコリン、１，２−ジオクタデシルグリセロ−３−ホス ホリルコリン、１−ヘキサデシル−２−テトラデシルグリセロ−３−ホスホリル コリン、１−オクタデシル−２−テトラデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン 、１−テトラデシル−２−オクタデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１− ヘキサデシル−２−オクタデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１，２−ジ オクタデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１−オクタデシル−２−ヘキサ デシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１−テトラデシル−２−ヘキサデシル グリセロ−３−ホスホリルコリン、１−ヘキサデシル−２−テトラデシルグリセ ロ−３−ホスホリルコリンおよび２，２−ジテトラデシルグリセロ−１−ホスホ リルコリンエタンからなる群から選ばれる、請求項１に記載のエマルジョン。
5. ５．フルオロケミカルを含有する、請求項１に記載のエマルジョン。
6. ６．パーフルオロケミカルが、パーフルオロデカリン、パーフルオロメチルデカ リン、パーフルオロジメチルデカリン、パーフルオロジメチルアダマンタン、パ ーフルオロオクチルブロマイド、パーフルオロ−４−メチル−オクタヒドロキノ リジジン、バーフルオロ−Ｎ−メチルーデカヒドロキノリン、Ｆ−メチル−１− オキサーデカリン、パーフルオロービシクロ（５．３．０）デカン、パーフルオ ロオクタヒドロキノリジジン、パーフルオロ−５，６−ジヒドロ−５−デセン、 およびパーフルオロ−４，５−ジヒドロ−４−オクテン、塩素化パーフルオロカ ーボン、ならびにその混合物からなる群から選ばれる、請求項５に記載のエマル ジョン。
7. ７．殺菌温度において充分の時間にわたり加熱された後に、安定である、請求項 ６に記載のエマルジョン。
8. ８．乳化助剤として液状脂肪油がエマルジョンの約０．５−約３０重量％の量で 存在する、請求項５に記載のエマルジョン。
9. ９．上記油が、生理学的に許容される油である、請求項１に記載のエマルジョン 。
10. １０．上記油が、モノ−、ジ−およびトリ−グリセライド類およびその混合物か らなる群から選ばれる、請求項９に記載のエマルジョン。
11. １１．界面活性剤が、エマルジョンの約０．５−約１０重量％の量で存在する、 請求項１に記載のエマルジョン。
12. １２．フルオロケミカルが、エマルジョンの約１０−約７５容量％の量で存在す る、請求項５に記載のエマルジョン。
13. １３．請求項５に記載のエマルジョンを、動物における酸素担持および輸送に係 わり治療有効量で含有する、赤血球代用物質。
14. １４．請求項５に記載のエマルジョンを、核磁気共鳴、Ｘ−線および超音波から なる群から選ばれる方式による造影に関して臨床的に有効な量で含有する、生物 学的造影用の造影剤。
15. １５．油、水および界面活性剤からなる生理学的に許容されるエマルジョンであ って、この界面活性剤が、 ａ）▲数式、化学式、表等があります▼および ｂ）Ｒ３−ＰＣ ［各式中、Ｒ１、Ｒ２またはＲ３は、約１２個−約１８個の炭素原子を有するア ルキル、アルケニル、フルオロアルキルおよびフルオロアルケニルであり、そし てＰＣは、構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ４は、水素またはメチルである）で示されるホスホリルコリン基また はその塩である］からなる群から選ばれる一般構造を有するものである生理学的 に許容されるエマルジョン。
16. １６．界面活性剤が、１，２−ジテトラデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン 、１，２−ジヘキサデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１，２−ジオクタ デシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１−ヘキサデシル−２−テトラデシル グリセロ−３−ホスホリルコリン、１−オクタデシル−２−テトラデシルグリセ ロ−３−ホスホリルコリン、１−テトラデシル−２−オクタデシルグリセロ−３ −ホスホリルコリン、１−ヘキサデシル−２−オクタデシルグリセロ−３−ホス ホリルコリン、１，２−ジオクタデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１− オクタデシル−２−ヘキサデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１−テトラ デシル−２−ヘキサデシルグリセロ−３−ホスホリルコリン、１−ヘキサデシル −２−テトラデシルグリセロ−３−ホスホリルコリンおよび２，２−ジテトラデ シルグリセロ−１−ホスホリルコリンエタンからなる群から選ばれる、請求項１ ５に記載のエマルジョン。
17. １７．フルオロケミカルを、エマルジョンの約１０−約６０容量％の量で含有す る、請求項１５に記載のエマルジョン。
18. １８．界面活性剤が、１−オクタデシル−２−ヘキサデシルグリセロ−３−ホス ホリルコリンである、請求項１５に記載のエマルジョン。
19. １９．請求項５に記載のエマルジョンを投与することによって、動物において酸 素担持および輸送に係わる循環血液中のフルオロケミカルの含有量を増加させる 方法。
20. ２０．エマルジョンの静脈灌流により行う、請求項１９に記載の方法。
21. ２１．動物の血液中のヘマトクリットを減少させることなく行われる、請求項１ ９に記載の方法。
22. ２２．動物の臓器内の上記フルオロケミカルの残留分布を減少させるために行わ れる、請求項１９に記載の方法。