JPH07501689A - １４α−ヒドロキシ−４−アンドロステン−３，１７−ジオンの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 １４α−ヒドロキシ−４−アンドロステン−３，１７−ジオンの製造方法 本発明は、カルプラリアルナータ（（：ｕｒｖｕｌａｒｉａ　１ｕｎａｔａ　） の培養菌を用いて４−アンドロステン−３，１７−ジオンを発酵させることによ り１４α−ヒドロキシ−４−アンドロステン−３，１７−ジオンを製造する方法 において、４−アンドロステン−３，１７−ジオンを水中に懸濁させ、得られた ＠／Ｒ液を発酵させることを特徴とする、１４α−ヒドロキシ−４−アンドロス テン−３，１７−ジオンの製造方法に関する。

ソ連特許第８０１５１７号明細書（Ｃ，Ａ、１１０゜１３３６９７ｕ参照）には 、カルブラリアルナータの培養菌を用いて４−アンドロステン−３，１７−ジオ ンを発酵させることによる、１４α−ヒドロキシ−４−アンドロステン−３，１ ７−ジオンの製造方法が記載されている。しかしながら該特許明細書には、該微 生物がどの公開菌株寄託機関からのものであるか、及びどの番号下にあるのかと いう指示が含まれていないので、記載された方法を追試することができない。該 明細書の技術的手段によれば４−アンドロステン−３゜１７−ジオンをメタノー ル又はジメチルフォルムアミド中に溶解させ、基質０．５〜１．５ｇ／ｌを４０ 〜６６時間発酵させて、明らかに著しく強度に不純化された１４α−ヒドロキシ −４−アンドロステン−３，１７−ジオン粗製生成物３５〜７０％が得られる。

（そのことは、後処理方法から明白である、すなわち発酵バッチをクロロホルム で抽出し、クロロホルム相を濃縮し、残留物をヘキサンとともに煮沸する。

従って、このようにして得られた生成物はすべて抽出可能であり、ヘキサン中に 不溶な物質を含有しなければならない。該生成物は、発酵パッチ中に含有される すべてのステロイドだけでなく、相応するカルブラリア含有物質及び媒体成分で もある）。

これとは異なり、本発明の方法により１リットル当り５ｇより多い４−アンドロ ステン−３，１７−ジオンを約１２時間以内で再現可能で１４α−ヒドロキシ− ４−アンドロステン−３，１７−ジオンに転化することができる。該処理生成物 の収率は、純粋生成物約６０％である。

本発明による方法は、カルブラリアルナータ培養菌を用いた公知の微生物学的な 基質の転化にも使用される発酵条件下で行われる。

該微生物のために通常使用される培養条件下で、適した培地中で、通気下で液体 培養菌を増殖させる。次いで、培養菌に４−アンドロステン−３，１７−ジオン の水性！１５液を加え、基質転化が最大に達するまで発酵させる。４−アンドロ ステン−３，１７−ジオンの水性懸濁液は容易な方法で製造することができる、 例えば該基質を、２〜５倍の量の水とともに非イオン性界面活性剤を添加しなが らボールミル内で、該基質が約１〜５μｍの粒度を有するまで粉砕する。適当な 界面活性剤は、例えばポリグリコールの酸化エチレン付加物又は脂肪酸エステル である。適当な界面活性剤としては、例えば市販の湿潤剤、例えばＴｅｇｉｎ（ Ｒ）、Ｔｗｅｅｎ（Ｒ）又は５ｐａｎ　（Ｒ）が挙げられる。

発酵を実施した後、培養菌を常法で後処理する１例えば難水溶性アルコール、ケ トン又はエステルで抽出し、該抽出液を濃縮し、次いで得られた残留物をクロマ トグラフィー及び／又は晶出により精製する。

得られた１４α−ヒドロキシ−４−アンドロステン−３，１７〜ジオンの薬理学 的に作用するステロイドへの次の処理は公知であるか、又は自体公知の方法で行 う（Ｊ、　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅｗ、　Ｓａｃ、、　９１，１９６９．１２２８以 降：ヨーロッパ特許出願公開第０３０００６２号明細書、その他）。

次に、本発明を以下の実施例につき詳細に説明する例。

ａ）コーンステイーブリーカー　１％ 大豆パウダー　１，２５％ ｐＨ値６．２に調整 を含有する無菌培地１リツトルを有する２リツトルの工−レンマイヤーに、カル ブラリアルナータＮＲＲＬ２３８０培養薗の！！！濁液濁液５奢ｌ種し、３０℃ で６０時間、１分間に１８０回転で振盪させた。

ｂ）ａ）に記載と同様の無菌培養液４０リツトルを有する５０リツトルの発酵槽 に、カルブラリアルナータ増殖培１１リットルを接種し、３０’Ｃで１８時間、 １時間に２ｍ３の通気及び１分間に２２０回転の撹拌下で温室した。

Ｃ）コーンステイーブリーカー　１％ 大豆パウダー　１．２５％ β−シクロデクストリン　０．３％ ｐＨ値６，２に調整 を含有する無菌培養液４０リツトルを有する５０リツトルの発酵槽に、カルブラ リアルナータ前培養菌４リットルを接種し、１時間に２．４ｍ’の通気及び１分 間に１５０回転の撹拌下で３０℃で７時間湿地した。

次いで、該培養菌４−アンドロステン−３，１７−ジオン２５０ｇを粉砕物とし てＴｗｅｅｎ（Ｒ）８０２５　ｇを有する水１０１００Ｏ中に加え、更に１２時 間、１分間に２２０回転の撹拌及び１時間に２．４ｍ’の通気下で発酵させた。

ｄ）発酵を実施した後に、該培養菌の液体をそれぞれメチルイソブチルケトン２ ０リツトルで３回抽出し、該抽出液を回転蒸発器中、最大５０℃で真空下で濃縮 した。引続き、ヘキサン−アセトン傾斜を用いたシリカゲル上でのクロマトグラ フィーによる精製を行った融点２５７〜２５９℃の１４α−ヒドロキシ−アンド ロスタ−４−エン−３，１７−ジオン１５０ｇが得られた。

国際調査報告　。、７１．。。５／ｎ１７゜７ＰＣＴ／ＥＰ　９２１０１７９７

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. １．カルブラリアルナータの培養菌を用いて４−アンドロステン−３，１７−ジ オンを発酵させることによリ１４α−ヒドロキシ−４−アンドロステン−３，１ ７−ジオンを製造する方法において、４−アンドロステン−３，１７−ジオンを 水中に懸濁させ、得られた懸濁液を発酵させることを特徴とする、１４α−ヒド ロキシ−４−アンドロステン−３，１７−ジオンの製造方法。
2. ２．発酵させるために、カルブラリアルナータＮＲＲＬ２３８０の培養菌を使用 する、請求項１記載の１４α−ヒドロキシ−４−アンドロステン−３，１７−ジ オンの製造方法。