JPH07505408A - 治療及び診断用組成物及びその製造方法，ならびにその用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 治療及び診断用組成物及びその製造方法、ならびにその用途 発明の分野 本発明は、輸送体（ｃａｒｒｉｅｔ）　（以下、屡々キャリヤーと称す）とリゾ ソーム向性剤（ｌｉｓｏｓｏｍｏｌｒｏｐｉｃ　ａｇｅｎｔ）とよりなる治療及 び診断用組成物に関し、特に、（ａ）リポタンパク類［特に、再構成ＬＤＤ　（ 低密度リポタンパク）コ、他のマイクロエマルジョン微粒子類、リポソーム類及 びミセル類から選ばれるキャリヤーであって、治療的または診断的に活性な親油 性又は両親媒性の活性薬剤の有効量を含有し、且つ細胞リセプターに特異的（相 補的）であって該リセプターによって認識され得る適当なリガンドと会合してな るキャリヤー、ならびに（ｂ）リゾソーム向性剤からなる組成物に関する。該組 成物は、例えばガン組織のような目的部位に活性薬剤を標的化し、該目的部位で の活性薬剤の薬効を最大限に活用するのに有効である。

発明の背景 細胞表面上のリガンド特異的なリセプターは、環境情報及び栄養素情報の両者を 細胞へ伝達する。認識されるそのようなリガンドは、広い範囲の分子構造体を包 含し、その例としては、成長因子類（例えば、血小板由来の成長因子、内皮細胞 成長因子、腫瘍成長因子、神経成長因子）、ホルモン類（例えば、インスリン、 バソプレッシンなど）、細胞外マトリックスタンパク（例えば、コラーゲン）、 及びリポタンパク（例えば、低密度リポタンパク）などが含まれる。多くの場合 、リガンドが細胞表面リセプターへ結合すると、リガンドーリセブター複合体の 集合（ｃｌｏｓｔｅｔｉｎｇ）　、次いで被覆されたビット（ｃｏｓｌｅｄ　ｐ ｉｔｓ）を経由しての内部への吸収が起きる。この経路は、例えばウィルスの細 胞内への侵入の際の場合と同じである。

ガン患者の血清中のコレステロール濃度が正常人のそれより低いことは、よく知 られている。コレステロールは、脂質−タンパク複合体、主として低密度リポタ ンパク（ＬＤＬ）の形で血液中を循環している。ＬＤＬは、約１８０人の直径を 有する球状巨大分子である。ＬＤＬは、リン脂質、コレステロールとスフィンゴ ミエリン、そして更にタンパク、即ち、アポリポタンパクＢ（アポＢ）とからな る表面膜により囲繞されている。ＬＤＬの内部は、エステル化された形のコレス テロール（脂肪酸とコレステロールとの化合物）、トリアジルグリセロール、レ チノール、及び他の炭化水素可溶性化合物により形成されている。

細胞はその表面に、ＬＤＬ特異的なりセブターを有しており、該リセプターは、 ＬＤＬ表面のタンパク成分、即ちアポリポタンパクＢを特異的に認識してＬＤＬ 粒子に結合する。

ガン細胞上のＬＤＬリセブターの密度は、正常細胞上のそれより非常に高（、ガ ン細胞はＬＤＬにより効果的に結合する。

ガン患者の血清中のコレステロール濃度が低いのは、ＬＤＬのガン細胞への取込 みが高まるのが理由であることは明らかである。このことは、腫瘍細胞の成長に は、コレステロールのような成分の要求が高いことで説明される。

ＬＤＬの粒子コア中の天然非極性脂質と置換する細胞障害性化合物を含有する再 構成ＬＤＬを用いることは公知である。

まず、デン粉の存在下でリポタンパクを凍結乾燥することによってＬＤＬのコア から脂質を除去をする［Ａ、グスタフソン（Ａ、　Ｇｕｓｌａｌｓｏｎ）　（１ ９６５）　、　Ｊ、　ｔｉｐｉｄＲｅｓ、　２０，２５４−２６４）　］。又、 この方法を僅かに改変した技術が、クリーガーによって発表されている［Ｍ、ク リーガー（Ｍ、　Ｋｒｉｅｇｓｔ）　（１９８６）、Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅｎｔ７ ｍｏ１．１２８．６０８−６１３コ。ジャガ薯のデン粉の存在下でリポタンパク を凍結乾燥し、そして中性脂質をへブタンのような有機溶剤で抽出することによ って、ＬＤＬを再構成する。導入すべき薬剤を有機溶剤に溶解し、そして抽出処 理されたＬＤＬと共にインキュベートする。その後、有機溶剤を蒸発して除き、 再構成ＬＤＬを水性バッファー溶液に溶解する。

上記の方法の改善方法がＷＯ３６１０７５４０公報に記載されている。その方法 によれば、デン粉の代りにサツカライド又は糖アルコールを用い、天然ＬＤＬと 類似の物性を有する再構成ＬＤＬが、ｉｎ　ｖｉｌｒｏ及びｉｎ　ｖｉｖｏで得 られている。

しかしながら、例えば再構成ＬＤＬを、例えば薬剤のキャリヤーとして、注射可 能な水溶液の形で用いると、逆エンドサイトーシス（ｔｅｔｔｏ−ｅｎｄｏｃｙ ｌｏｓｉｓ）が観察される。かくして、血液中の薬剤濃度の最初の濃度低下（即 ち、細胞によるＬＤＬの取込みを示す）の後、薬剤濃度の上昇が観察され、これ は細胞からの薬剤の脱離・排出を示す。即ち、標的組織中への薬剤の有意の蓄積 を果たすことは困難であり、結局、活性薬剤の作用を十分に利用することができ ない。

又、薬剤の輸送のために、リポソームを用いることも知られている。即ち、この リポソームを用いる公知の方法においては、（ａ）Ｉｌ！質物質［典型的な例は リン脂質（これは、一般には、例えばコレステロール及びスフィンゴミエリンと 共に用いる）コの２重層によって囲繞されたコア中に活性薬剤を組込むか、或い は（ｂ）もし用いる治療薬剤化合物が両親媒性（例えば、抗ガン性リン脂質）の 場合には、薬剤は２重層そのものに組込む。又、この目的のために、例えば、ホ スファチジルコリンの単層によって囲繞された親油性薬剤のような活性物質のエ マルジョンに代表されるマイクロエマルジョン類が用いられる。

発明の概要 本発明は、標的部位における活性薬剤の濃度を高める改良法に関する。この改良 法は、（ａ）　リポタンパク類、他のマイクロエマルジョン微粒子類、リポソー ム類及びミセル類から選ばれるキャリヤーであって、治療的または診断的に活性 な親油性又は両親媒性の活性薬剤の有効量を含有し、且つ生体細胞内の特異的リ セプターに相補的であって該リセブターによって認識され得るリガンドと会合し てなるキャリヤー、ならびに（ｂ）リゾソーム向性剤からなる組成物を用いるこ とにより達成される。

即ち、本発明は、上記の組成物に関し、又、該組成物の製造方法に関する。特に 、本発明は、キャリヤーとして再構成ＬＤＬを用いる上記組成物及び方法に関し 、更に、ヒト及び動物へのそれらの適用に関するものである。

発明の詳細な説明 本発明による組成物は少なくとも２つの成分を含有する。

その１つは、リポタンパク類、他のマイクロエマルジョン微粒子類、リポソーム 類及びミセル類から選ばれ、且つ適当なりガントと会合してなるキャリヤーであ り、他の１つはリゾソーム向性剤である。上記のキャリヤーとなる物質は、それ 自身よく知られたものであり、又、その製法も知られている。

これらのキャリヤーに共通していることは、これらが治療的又は診断的に活性な 薬剤を含有することができることである。

キャリヤーは、特異的な細胞リセブターに相補的であって該リセプターに認識さ れ得ることを特徴とするリガンドと会合されている。“会合”という言葉は、上 記リガンドを組込んでいる場合も包含する。その例は、ＬＤＬの場合であり、Ｌ ＤＬでは、リガンドはＬＤＬの表面膜に含まれているアポＢ部分であることがで きる。リガンドの典型的な例は、上記したタンパクのような物質であり、タンパ クの例としては、成長因子、ホルモン、アポリポタンパク、ウィルス性タンパク 、合成タンパクなどである。既に述べたように、キャリヤーが再構成ＬＤＬであ る時には、リガンドはアポＢ部分または、対応リセプターによって認識され得る 、表面に存在している合成タンパクである。リガンドは、また、キャリヤー粒子 の脂質表面に組込ませるために親油性又は両親媒性とした合成リガンドであるこ とができる。勿論その場合には、細胞リセブターによって認識され得る要素を持 っていることが必要である。上記のような合成リガンド当該分野においてよく知 られている。

本発明の組成物における第２の主要な成分はリゾソーム向性剤であり、それはリ ゾソーム向性と同時に両親媒性であって、リポソーム中性と界面活性を有するこ とが特徴である。

リゾソーム向性剤はリゾソーム阻止活性を発揮するものであって、よく知られて いる。リゾソーム向性剤は、又、Ｔ＋１ｌｏｎＷＲ−１３３９［米国、アメリカ ン　ローランド　コーポレーション（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｒｏｌａｎｄ　Ｃｏｒ ｐｏｒａ口ｏｎ）製″Ｔｙｌｏｘａｐｏｌ″］。

長鎖のアルキル又はアシル鎖を含むイミダゾール類或いはモルフイン類（例えば 、Ｎ−ドデシル　イミダゾール）のような弱アミン類（例えば、ｐＫ５〜９）、 又はクロロキンなどの両親媒性物質でもよい。これらの物質については、例えば 、ミラー等（Ｍｉｌｌｅｔ　ｅｌ　ａｌ）、　Ｊ、　Ｃａ１ｌ　Ｒｉａｌ、　９ ７　（＋９８３）　＋８４１−１８５１；　ウィルソン等（Ｗｉｌｓｏｎ　ｅｌ 　！１．）、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　４９゜（１９８９）、　５０ ７−５１０　；及びドドゥブ等（ｄｅＤｕｖｅ　ｅｔ　！１．）ｌ　Ｂｉｏ−ｃ ｂｅｒｎ、　Ｐｂａｒｍａｃｏｌ、　２３　（１９７４）　２４９５を参照する ことができる。

両親媒性物質をキャリヤー及び会合したリガンドと共に用いると、該両親媒性物 質は、その疎水性故に、キャリヤー微粒子表面に収容される。リソソーム向性ア ミン類は、それ自身が細胞障害性を有することがある。

本発明によれば、リポソーム中性両親媒性物質の存在はりセプターによるリガン ドの認識とは干渉せず、活性薬剤を含むキャリヤーは、細胞内のりセプターの量 及びエンドサイト−シス路の活性に依存して、細胞外空間から細胞内へ取込まれ る。しかし、一度、リゾソーム向性剤を含有するキャリヤー粒子がリソソームに 入ると、キャリヤー粒子の動きは阻止される。換言すれば、活性薬剤含有キャリ ヤーの細胞表面への戻りサイクリング（逆エンドサイトーシス）は起きず、そし て活性薬剤の標的部位への蓄積が果たされる。

本発明の組成物は、治療的又は診断的に活性な薬剤を含有するキャリヤー微粒子 とリゾソーム向性剤とを共に包含し、例えば注射用（静脈注射用）のような非経 口的投与のための水性溶液の形態であるのが好ましい。キャリヤー微粒子のリゾ ソーム向性剤に対する重量比は、各キャリヤー粒子において、その表面に存在す る活性薬剤の約２〜４０モル％がリソンーム向性剤によって占められるようにす るのが好ましい。

本発明の組成物は、製薬的に適当なビヒクル及び任意成分としての製薬的に許容 されるアジュバント中において、活性薬剤を含有するキャリヤーをリゾソーム向 性剤と調合することにより製造される。ビヒクルは通常は殺菌水である。アジュ バントについては、この目的によく知られたものであり、その選択は当業者に容 易である。

投与量は、用いる治療的又は診断的に活性な薬剤の種類及び治療及び診断される 対象の状態に依存し、適当な投与量は当業者によって容易に決めることができる 。

上記したように、本発明の好ましい態様によれば、キャリヤーは再構成ＬＤＬよ りなる。この再構成ＬＤＬは、次の工程よりなる方法により製造される。即ち、 該方法は、保護物質の存在下でＬＤＬを凍結乾燥する工程；凍結乾燥されたしＤ Ｌを有機溶剤による抽出処理に付す工程；治療的又は診断的に有効な親油性又は 両親媒性薬剤を有機溶媒中で該抽出処理されたＬＤＬと共にインキュベートする 工程；溶媒を蒸発除去し、そして生成物としての再構成ＬＤＬを水性緩衝水溶液 に溶解させて組込まれなかった薬剤を除去する工程−及びＬＤＬを例えば超遠心 分離によって分離する工程とからなる。

再構成されるＬＤＬは、示差超遠心分離浮上法〔用いる密度（ｄ）範囲：　１． ０１９＜ｄ＜１．０６３ｇ／ｍＱコによってヒト血清から得ることができる。又 、別の方法としては、例えば、ゾーン超遠心分離法を挙げることができる。

保護物質は、この分野で知られている物質であり、例えばデン粉、特にジャガ薯 デン粉を用いることができ、又、ｗ。

公報８６１０７５４０に開示されている糖誘導体を用いることもできる。

凍結乾燥したＬＤＬから中性脂質を抽出するために用いる溶剤は、非極性溶剤で あることが好ましく、例えば、ヘプタン、ヘキサン、ペンタン、石油エーテル、 オクタン、又はそれらの任意の混合物を用いることができる。

活性薬剤を溶解するため溶剤、又それにより得られる溶液を凍結乾燥及び抽出処 理したＬＤＬと共にインキュベートするために用いる溶剤も、非極性溶剤である ことが好ましく、その例は上記した通りである。

本発明の別の態様によれば、キャリヤー微粉子としてリポソームが用いられる。

リポソームの製造法或いはそれに医薬のような活性薬剤を組込ませる方法はよく 知られている。

この実施態様においても、リガンドは、特異的な細胞表面リセブターによって認 識され得る適当な物質であることができ、その例は前記した通りであって、それ は、製造の過程でリポソーム中に組込まれる。

本発明によれば、又、マイクロエマルジョンもキャリヤーとして用いることがで き、その製造方法は９例えば、ＩＪ、Ｔ。

ウオルシュ等（Ｍ、Ｔ、　Ｗａｌｓｈ　ｅｌ　ａｌ、）　、　Ｍｅｔｈｏｄｓ　 ｉｎ　Ｅｎｘｙｍｏｌ。

ｇＹ、　ｖｏｌ、　１２８．５８２　（１９８６ンなどにより知られている。そ して、リガンドとしては、上記したものを用いることができる。

活性薬剤は、診断的又は治療的な目的のものである。親油性と両親媒性との間の 境界は余り明確ではないが、そのどちらでもよい。診断用薬剤の例としては、ヘ マトポルフィリンのような感光剤；ホウ素化脂肪酸エステルのような放射線感受 性剤；又はＸ線造影剤を挙げることができる。治療剤の例としては１．好ましく は抗ガン剤を挙げることができ、その例は、デオキシルビシン、ダウノマイシン 、１−ヘキサデシル−２−メチル−３−ホスフォコリンなどである。

次に実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに制限されるも のではない。

実施例 ＬＤＬを、１．１０１９＜ｄ＜１．０６３ｇ／ｍＱの密度（ｄン範囲の示差超遠 心分離浮上法により単離した。次いで、密度調整のために用いたＫＢｒを、ｐＨ ７，０，４℃の条件下で、０．３ｍＭのＥＤＴＡにより透析にかけて除去した。

その後、リポタンパクをアミコン（Ａｍｉｃｏｎ）　ＸＭ　−３００膜を用いて 限外濾過に付して濃縮し、コレステロール濃度を測定した。純粋なジャガ薯デン 粉［シグマ（Ｓｉｇｍａ）社製６０ｍｇ）］を１６μｍｏ１２のコレステロール を含む全容１．５ｍＱのＬＤＬ溶液に溶解した。得られた溶ｌαを液体窒素中で 凍結し、それから凍結乾燥した。凍結乾燥したコア脂質を４Ｘ　１０　ｍ　Ｑの 氷冷したヘプタンで抽出処理にかけた。コア脂質を、細胞障害性化合物、即ちク ロランプシルのコレステリルエステル（１５ｍｇを１．５ｍＱのへブタンに溶解 したもの）で置換した。このクロランプシルのコレステリルエステルは、その組 織中の分布を定量するためのマーカーとして１Ｈ−コレステリル部分を含有して いるものである。該溶液をまず一１０℃で９０分間インキュベートし、その後、 氷水浴に保持しながら、ゆるやかな窒素ガス流下で溶剤を除去した。乾燥残留物 を１）Ｈ８，４の条件下で１　、３　ｍ　Ｑの１０ｍＭトリシン（Ｔ＋１ｃｉｎ ｅ）に溶解し、４℃で４８時間インキュベートした。コレステリルクロランプシ ルを組込んだＬＤＬを分離するために、溶液を２００Ｏｒｐｍで遠心分離にかけ 、上溝を採取した。細胞障害性上溝に、５０ｐＱのＴ山。

ｎＷＲ−１３３９を加え、得られた混合物を一晩＋４℃でインキュベートした。

このようにして、注射用製剤を得た。これは、そのま−使ってもよいし、また、 必要に応じて、微粒子状への分散を促進するために、浴型の音波処理にかけても よい。

■ 上記の実施例で得られた注射液製剤をそのま−用い、腹膜に移植されたルー肉腫 （Ｒｏｕｓ　ｓａｔｃｏｍａ）担持ラット群の静脈に注射した。発育した腫瘍の 平均重量は０．９ｇであった。

注射から０．５．１．０及び３時間後に、ラット群を殺し、異なった組織中の放 射能強度を測定した。Ａ−Ｅと命名した各試験ラットを、肉腫を移植していない 対照ラット（注射後１時間で殺したもの）と比較した。その結果を次の表に示す 。

血ｉｅ　＋３１　３５０　１５２　１４０　２０　３２心臓　１９　８３　９６ 　８８　５４　６９腎臓　２２　４４　５６　７２　５６　８５膵臓　４４　２ ３　１０９　１６１　８８　９４牌臓　４７　３３　１２０　１５３　２１３　 １５１肝臓　８５　７９　１８９　１９５　２９９　１８７腫瘍　−２３４５９ ５３０２９６４７１（単位：　ｃｐｍ／ｇ） 上記の結果から、ＬＤＬ−クロランプシルエステルが腫瘍部に蓄積されること、 及びその脱離度は低いが、血液中の濃度は急速に低下することが分かる。

図面の簡単な説明 図１は、上記したのと同様に、注射液製剤を作り［但し、リゾソーム向性剤（Ｔ ｔ目ｏｎ　ＷＲ−１３３９）は添加しなかったコ、ラット群に静脈注射した時の 、ＬＤＬ−クロランプシルエステルの血液中及び腫瘍中の濃度の時間による変更 を示す。

図１において、横軸には時間を、縦軸には血液中及び腫瘍中のそれぞれにおける 薬剤−ＬＤＬ濃度を示す。

図２は、同じ薬剤−ＬＤＬ及びリゾソーム向性剤を含有する注射液をラット群に 注射した時の、血液中及び腫瘍中の薬剤−ＬＤＬ濃度の時間に対する変化を示す 。

図１及び図２より分かるように、リゾソーム向性剤が存在しない場合には、血液 中の薬剤濃度は、最初の過度的な減少の後、急速に増加するが、腫瘍の場合には 逆の傾向が観察される。

しかし、本発明によって、リゾソーム向性剤が存在する場合には、血液中の再構 成ＬＤＬの濃度は減少し、腫瘍中の濃度は増加する。このことは、本発明によっ てリゾソーム向性剤を共存させた場合には、逆エンドサイトーシスが防止される ことを示している。

フロントページの続き （８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＥ、ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＰＴ、ＳＥ） 、０Ａ（ＢＦ、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ゛、　Ｃ１，ＣＭ、　ＧＡ、　ＧＮ、　ＭＬ、 　ＭＲ，ＮＥ、ＳＮ。

ＴＤ、　ＴＧ）、　ＡＴ、　ＡＵ、　ＢＢ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ。

ＣＨ，ＣＺ、　ＤＥ、　ＤＫ、　ＥＳ、　ＦＩ、　ＧＢ、　ＨＵ、ＪＰ、　ＫＰ 、　ＫＲ，ＬＫ、　ＬＵ、　ＭＧ、　ＭＮ、　ＭＷ、　ＮＬ、Ｎｏ、ＮＺ、ＰＬ 、ＰＴ、Ｒ○、　ＲＵ、　ＳＤ、　ＳＥ。

ＳＫ、ＵＡ、ＵＳ、ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．（ａ）リボタンパク類、他のマイクロエマルジョン微粒子類、リポソーム類 及びミセル類から選ばれるキャリヤーであって、治療的または診断的に活性な親 油性又は両親媒性の活性薬剤の有効量を含有し、且つ特異的細胞リセプターに相 補的であって該リセプターによって認識され得るリガンドと会合してなるキャリ ヤー、ならびに（ｂ）リソソーム向性剤からなることを特徴とする治療又は診断 用組成物。 ２．キャリヤーが再構成低密度リボタンパク（ＬＤＬ）であり、リガンドがＬＤ Ｌの表面上に存在するアポリボタンパクＢ部分であることを特徴とする請求項１ に記載の組成物。 ３．リソソーム向性剤がトライトン（Ｔｒｎｏｎ）ＷＲ−１３３９であることを 特徴とする請求項１又は２に記載の組成物。 ４．治療的又は診断的に活性な薬剤が、感光剤、放射性感受性剤、Ｘ線造影剤及 び抗ガン剤から選ばれることを特徴とする請求項１又は２に記載の組成物。 ５．抗ガン剤がクロランブシル　コレステリル　エステルである請求項４に記載 の組成物。 ６．クロランブシル　コレステリル　エステルを含有する再構成低密度リボタン パク（ＬＤＬ）と、トライトン（Ｔｒｉｔｏｎ）ＷＲ−１３３９とを含有してな る治療用組成物。 ７．治療用又は診断用組成物の製造方法にして、リボタンパク類、他のマイクロ エマルジョン微粒子類、リポソーム類及びミセル類から選ばれるキャリヤーであ って、治療的または診断的に活性な親油性又は両親媒性の活性薬剤の有効量を含 有し、且つ特異的細胞リセプターに相補的であって該リセプターによって認識さ れ得るリガンドと会合してなるキャリヤーと、リソソーム向性剤及び製薬的に許 容されるビヒクル、ならびに任意成分としての他のアジュバントとを組み合わせ ることを特徴とする製造方法。 ８．請求項２に記載の組成物の製造方法にして、保護物質の存在下でＬＤＬを凍 結乾燥する工程；凍結乾燥されたＬＤＬを有機溶剤による抽出処理に付す工程； 治療的又は診断的に活性な親油性又は両親媒性薬剤を有機溶媒中で該抽出処理さ れたＬＤＬと共にインキュベートする工程；溶媒を除去する工程、得られる再構 成ＬＤＬを回収する工程、及び該再構成ＬＤＬの治療的又は診断的有効量をリソ ソーム向性剤及び製薬的に許容されるビヒクルと、場合によっては更にアジュバ ントと組み合わせる工程からなることを包含することを特徴とする製造方法。 ９．リソソーム向性剤がトライトン（Ｔｒｉｔｏｎ）ＷＲ−１３３９であること を特徴とする請求項８に記載の方法。１０．治療的又は診断的に活性な薬剤が、 感光剤、放射性感受性剤、Ｘ線造影剤及び抗ガン剤から選ばれることを特徴とす る請求項８又は９に記載の方法。 １１．抗ガン剤がクロランブシルコレステリルエステルである請求項１０に記載 の方法。 １２．治療的に活性な薬剤がクロランブシルコレステリルエステルであり、リソ ソーム向性剤がトライトン（Ｔｒｉｔｏｎ）ＷＲ−１３３９であることを特徴と する請求項８に記載の方法。 １３．保該物質がデン粉である請求項９に記載の方法。 １４．ＬＤＬの抽出処理に用いる溶剤がヘプタンである請求項９に記載の方法。 １５．請求項１に記載の組成物又は請求項７の方法によって製造される組成物よ りなる、ヒト又は動物の治療又は診断剤。