JPH07507302A - セレクチン結合のペプチド阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 セレクチン結合のペプチド阻害剤 発明の背景 本発明は、Ｐ−セレクチン、Ｅ−セレクチンおよびＬ−セレクチンなどのセレク チンの結合を阻害するペプチドに関する。

血管表面に対する血小板および白血球の付着は、炎症性応答の決定的な成分であ り且つ補体、凝固および免疫系の同時および相互に関係のある活性化に関係する 複雑な一連の反応の一部分である。

集合的に、補体タンパク質は、ミュラー・エバーハード（Ｍｕｌｌｅｒ−Ｅｖｅ ｒｈａｒｄ）、Ｈ，Ｇ、　、Ａｎｎ、Ｒｅｖ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、５７：３２１〜 ３４７　（１９８８）によって論評されたように、異物および免疫複合体の識別 および除去の両方において、免疫系の先行役を果たしている。補体系の中心はＣ ３およびＣ４タンパク質てあり、活性化された場合に、それらは付近の標的に共 有結合してそれらを排除する。このプロセスを制御するのに役立つように、顕著 な一連の可溶性で且つ膜に結合した調節タンパク質が引き出されて、それぞれか 活性Ｃ３および／またはＣ４誘導体と相互作用する。凝固および炎症性経路は、 組織損傷に応答して同調様式で調節される。例えば、白血球に対して付着性にな ることに加えて、活性内皮細胞は細胞表面上で組織因子を発現し且つそれらのト ロンホモシュリンの表面発現を減少させて、細胞表面上での凝固反応の正味の促 進をもたらす。若干の場合、単一受容体か炎症性および凝固プロセスの両方に関 係していることかある。

血管内皮に対する白血球付着は、微生物侵入に応答した組織への白血球の移動に おいて重要な最初の段階である。誘導白血球受容体の種類であるＣＤ１１〜ＣＤ １８分子は、内皮に対する付着においである役割を有すると考えられるが、白血 球付着について同等のまたはなお一層重要な機序は、内皮それ自体の誘導変化の ためであると考えられる。

更に、活性血小板は、インビトロにおいて好中球および単球の両方と相互作用す ることが分かっている。血小板と単球との相互作用は、一部分は、血小板および 単球に対するトロンポスポンジンの結合によって媒介されることがあるが、他の 機序も排除されてはいない。活性血小板に対する好中球の結合の機序は、二価の 陽イオンが必要であることが知られている以外、十分に理解されていない。血管 損傷に応答して、血小板は内皮下表面に付着し、活性化さ也そして凝固を支持す ることが知られている。血小板および他の細胞は、更に、微生物の侵入を抑える ように創傷中に白血球を供給することにおいて重要な役割を果たしうる。

トロンビンおよびヒスタミンなどの「急速」活性化因子に暴露された内皮は、２ 〜１０分間以内に好中球に対して付着性になるが、腫瘍壊死因子およびインター ロイキン−１などのサイトカインに暴露された内皮は、１〜６時間後に付着性に なる。急速な内皮依存性白血球付着は、細胞表面上での脂質媒介物質血小板活性 化因子（ＰＡＦ）の発現およびおそらくは、他の内皮表面受容体の出現と関係し ていた。白血球に対する遅いサイトカイン誘導内皮付着は、少なくとも一部分は 、サイトカインに暴露後の内皮細胞によって合成された後に細胞表面に輸送さね −そこにおいて好中球を結合するＥ−セレクチンによって媒介される。Ｅ−セレ クチンすなわちＥＬＡＭ−４の単離、特性決定およびクローニングは、ベビラク ア（Ｂｅｖｉｌａｃｑｕａ）らによって５ｃｉｅｎｃｅ　２４３．１１６０〜１ １６５　（１９８９）に論評されている。「ネズミＭｅｌ　１４抗原」、ｒＬｅ ｕ８Ｊ　ｒＬｅｕ８抗原」および「ＬＡＭ　ＩＪとも称する末梢リンパ節ホーミ ング（ｈｏｍｉｎｇ）受容体であるし一セレクチンは、好中球、単球およびリン パ球上のもう一つの構造であり、末梢リンパ節中の高内皮細静脈にリンパ球を結 合させる。タンパク質の特性決定およびクローニングは、ラスキー（Ｌａｓｋｙ ）ら、Ｃｅ１ｌ　５６，１０４５〜１０５５（１９８９）（マウス）およびテダ ー（Ｔｅｄｄｅｒ）　ら、Ｊ、Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、１７０．　１２３〜１３３　（ １９８９）によって論評されている。

ＧＭＰ−１４０（顆粒膜タンパク質１４０）としても知られるＰ−セレクチンす なわちＰＡＤＧＥＭは、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳 動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）によって算定される見掛けの分子量が１４０，０００の 、システィンに富む且つ激しくグリコジル化された内在性膜糖タンパク質である 。Ｐ−セレクチンは、マクエバー（ＭｃＥｖｅｒ）およびマーチン（Ｍａｒｔ　 ｉｎ）、Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、２５９：９７９９〜９８０４　（１９８４） によってヒト血小板から最初に精製された。タンパク質は、ステンバーグ（Ｓｔ ｅｎｂｅｒｇ）ら（１９８５）によって報告されたように、休止血小板のα顆粒 中に存在するが、血小板活性化後、原形質膜に速やかに再分布される。

内皮細胞中のＰ−セレクチンの存在およびこれらの細胞によるその生合成は、マ クエバーら、Ｂｌｏｏｄ　７０　（５）補遺］：３５５ａ、アブストラクト１２ ７４号（１９８７）によって報告された。内皮細胞中において、Ｐ−セレクチン は、ワイベルーパレード（Ｗｅ　ｉｂｅ　１−Ｐａ　１ａｄｅ）体として知られ る貯蔵類Ｃｈｅｍ、２６４　：　７７６８〜７７７１　（１９８９））　。Ｐ− セレクチン（ＧＭＰ−１４０またはＰＡＤＧＥＭと称する）は、更に、ラルゼン （Ｌａｒｓｅｎ）らによってＣｅ１ｌ　５９，３０５〜３１２　（１９８９年１ ０月）におよびハンバーガー（Ｈｕｍｂｕ　ｒｇｅ　ｒ）およびマクエバー、Ｂ ｌｏｏｄ　７５：５５０〜５５４　（１９９０）に、活性血小板と好中球および 単球との相互作用を媒介することか報告された。

ジョンストン（Ｊｏｈｎｓｔｏｎ）らによってＣｅ１ｌ　５６．１０３３〜１０ ４４　（１９８９年３月２４日）におよび１９８９年３月８日出願の米国特許出 願第０７／３２０，４０８号明細書に報告されたｃＤＮＡ由来アミノ酸配列は、 それが、独立して折りたためるらしい多数のモジュラ−ドメインを含むことを示 している。Ｎ末端で開始すると、これらには、「レクチン」ドメイン、ｒＥＧＦ 」ドメイン、補体結合タンパク質中のものと同様の９種類のタンデム共通反復体 、トランスメンブランドメイン（示差スプライシングによって生じると考えられ る可溶柱形以外）および細胞質テイルがある。

血小板または内皮細胞をトロンビンなとの媒介物質によって活性化した場合、貯 蔵顆粒の膜は原形質膜と融合し、顆粒の可溶性内容物が外部環境に放出さね−そ して膜に結合したＰ−セレクチンか何秒か以内に細胞表面上に現れる。活性化の 結果として血小板および内皮細胞の表面にＰ−セレクチンが急速に再分布するこ とは、この糖タンパク質が、炎症または血管破裂部位で重要な役割を果たしうる ことを示唆した。

この重要な役割は、Ｐ−セレクチンが、好中球（ジエン（Ｇ　ｅ　ｎ　ｇ）ら、 Ｎａｔｕｒｅ　３４３ニア５７〜７６０　（１９９０）；ハンバーガーおよびマ クエバー、Ｂｌｏｏｄ　７５：５５０〜５５４　（１９９０））　、単球（ラル ゼンら、Ｃｅ１ｌ　５９：３０５〜３１２　（１９８９）；ムーア（Ｍｏｏｒｅ ）ら、Ｊ、Ｃｅ１ｌ　Ｂｉｏｌ、１１２：４９１−４９９　（１９９１））およ びおそらくはリンパ球のサブセット（ムーアら、Ｊ、Ｃｅ１ｌ　Ｂｉｏｌ、１１ ２：４９１〜４９９　（１９９１））の受容体であるという知見によって確証さ れた。したかって、ＧＭＰ−１４０は、トロンビンなどのアゴニストによって刺 激された血小板および内皮細胞の表面に対する白血球の急速な動員後のその受容 体として役立つことかできる。白血球供給におけるこの役割は、生理学的および 病理学的状態の両方でのうっ血および炎症性プロセスにおいて重要でありうる。

Ｐ−セレクチン由来のペプチドは、ロジャー（Ｒｏｄｇｅ　ｒ）Ｐ、マクエバー により、１９９０年７月１７日出願の「機能的に活性なセレクチン由来ペプチド （Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ　Ａｃｔｉｖｅ　５ｅｌｅｃｔｉｎ−Ｄｅｒｉｖｅ ｄ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ）Ｊと称する米国特許出願第０７１５５４゜１９９号明細 書において、Ｐ−セレクチンの白血球認識を阻止しうる治療的有効量のペプチド か患者に対して投与されている該患者の診断薬並びにうっ血および炎症性応答の 調節において有用であると記載されている。１９９０年７月１７日出願の米国特 許出願第０７１５５４．１９９号明細書は、更に、他のタンパク質、特に、Ｅ− セレクチンおよびＬ−セレクチンのレクチンドメインと相同関係を有するＰ−セ レクチンのレクチンドメイン中のペプチド配列が、精製Ｐ−セレクチンに対する 好中球の付着を選択的に阻害し、したがって、これらの分子による変更された結 合を特徴とする患者および疾患の診断用検定において、この結合を変更する化合 物のスクリーニング検定において、並びに凝固および／または炎症性プロセスに 関係している白血球と血小板または内皮細胞との相互作用を阻害するまたは調節 する臨床的用途において用いることができることを開示している。

Ｅ−セレクチン、Ｌ−セレクチンおよびＰ−セレクチンは、それらの関連した構 造および機能に基いて「セレクチン」と呼ばれてきた。Ｅ−セレクチンは、刺激 されていない内皮中には存在しない。しかしながら、内皮か腫瘍壊死因子または インターロイキン−１などのサイトカインに暴露されると、Ｅ−セレクチンの遺 伝子か転写されてＲＮＡを生じ、それが順次にタンパク質に翻訳される。その結 果、Ｅ−セレクチンは、ベビラクアら、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ。

Ｓｃ　ｉ、ＵＳＡ　８４　：９２３８〜９２４２　（１９８７）ｔ：報告された ように（顆粒中に貯蔵され且つ活性化後何秒か以内に細胞表面上に現れるＰ−セ レクチンとは対照的に）、サイトカインに暴露後１〜４時間て内皮細胞表面上に 発現される。Ｅ−セレクチンは、サイトカインで処理された内皮に対する好中球 の付着を媒介することが分かつており、したがって、サイトカインで刺激された 内皮を通って白血球を組織中に移動させるのに重要であると考えられる。Ｅ−セ レクチンのｃＤＮＡ由来−次構造は、それが、「レクチン」ドメイン、ＥＧＦド メインおよび補体調節タンパク質のものと同様の６種類の（Ｐ−セレクチンの９ 種類の代わりの）反復体、トランスメンブランドメイン並びに短い細胞質テイル を含むことを示している。Ｐ−セレクチンとＥ−セレクチンとの間の広範囲にわ たる配列相同関係か両方のタンパク質中に存在するか、その類似性は、特に、レ クチンおよびＥＧＦ　ドメインにおいて顕著である。

ホーミング受容体は、高内皮細胞または高内皮細静脈（イエトノツク（Ｙｅｄｎ ｏｃｋ）およびローズ（Ｒｏｓｅ）、Ａｄｖａｎｃｅｓ　ｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏ ｇｙ、４４巻、Ｆ、１．ディクソン（Ｄｉｘｏｎ）監修、３１３〜３７８（アカ デミツク・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ）、ニューヨーク　１９８９ 年）によって論評された）と称するリンパ組織中の特殊内皮細胞に対してリンパ 球を結合させることが可能なリンパ球表面構造である。この結合は、リンパ球か 内皮を通ってリンパ組織中に移動することを可能にし、そこにおいてそれらは、 プロセスされた抗原に暴露される。次に、リンパ球はリンパ系を介して血液中に 再び入る。リンパ球ホーミング受容体であるＬ−セレクチンは、レクチンドメイ ン、ＥＧＦドメイン、２種類の補体結合反復体、トランスメンブランドメインお よび短い細胞質テイルを含む。更に、し−セレクチンは、特に、レクチンおよび ＥＧＦドメインにおいて、Ｐ−セレクチンとの広範囲にわたる配列相同関係を共 有している。

Ｐ−セレクチン、Ｅ−セレクチンおよびＬ−セレクチン間のレクチンドメインの 比較に基いて、炎症性プロセスの成分に対するＥ−セレクチン、Ｌ−セレクチン おび他の相同セレクチンの結合を阻害するかまたは逆に、Ｐ−セレクチンの結合 のみを阻害する、Ｐ−セレクチンに対する好中球の結合を阻害するペプチドを選 択することは可能でありうる。

血小板−白血球相互作用のインビボの意義は、注意深く研究されていなかった。

しかしながら、血管損傷に応答して、血小板は内皮下表面に付着し、活性化され 、そして凝固を支持することが知られている。更に、血小板および他の細胞は、 微生物の侵入を抑えるように創傷中に白血球を供給することにおいて重要な役割 を果たしうる。逆に、白血球は、イセクツ（Ｉｓｓｅｋｕｔｚ）ら、Ｌａｂ。

Ｉｎｖｅｓ　ｔ、４９　：　７１６　（１９８３）によって報告されたように、 炎症部位の組織中に血小板を供給することができる。

凝固および炎症性経路は、組織損傷に応答して同調様式で調節される。例えば、 白血球に対して付着性になることに加えて、活性内皮細胞は細胞表面上で組織因 子を発現し且つそれらのトロンボモジュリンの表面発現を減少させて、細胞表面 上での凝固反応の正味の促進をもたらす。若干の場合、単一受容体が炎症性およ び凝固プロセスの両方に関係することがある。

うっ血および炎症性経路に関係するタンパク質は、ヒト障害の診断目的および治 療用に興味深い。しかしながら、タンパク質の治療的使用には多数の問題がある 。タンパク質は、通常、患者に対する投与に十分な量で製造するには高価である 。更に、患者に対してタンパク質が２回以上投与された後に、それに対する反応 があることがある。したがって、合成するのに費用がかからない、再現性のある 、そして比較的無害な、タンパク質と同様のまたはそれより優れた活性を有する ペプチドを開発することが望ましい。

タンパク質自体に由来するペプチドと少なくとも同等のまたはそれより大きい活 性を有する、合成によって製造することができるペプチドを開発することは好ま しい。

したがって、本発明の目的は、Ｐ−セレクチン、Ｅ−セレクチンおよびＬ−セレ クチンを含むセレクチンによって認識された細胞と相互作用するペプチドを製造 することである。

本発明のもう一つの目的は、これらのペプチドを用いて、内皮または血小板に対 する白血球の付着を阻害する方法を提供することである。

本発明の更に別の目的は、これらのペプチドを用いて、免疫応答およびうっ血経 路を調節する方法を提供することである。

本発明の更にもう一つの目的は、Ｐ−セレクチン、Ｅ−セレクチンおよびＬ−セ レクチンに関する診断用検定において用いるためのペプチドを提供することであ る。

発明の概要 本発明は、式（１）および（Ｉ　Ｉ） Ｒ−Ｗ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｘ−Ｒ” および Ｒ−Ｙ−Ｅ−Ｆ−Ｇ−Ｈ−Ｚ−Ｒ” （Ｉ　Ｉ） （式中、ＷおよびＹは、０〜１０個のアミノ酸を有するＮ末端アミノ酸直鎖状配 列であり、そしてＲ１は、Ｗ若しくはＹの末端αアミノ基に対して、またはＷ若 しくはＹがそれぞれ０である場合はＡ若しくはＥのαアミノ基に対して結合した 残基であり； ＸおよびＺは、０〜１０個のアミノ酸を有するＣ末端アミノ酸直鎖状配列であす 、そしてＲは、Ｘ若しくはｚ　（ｃ　（０）Ｒ２）のカルボキシル炭素に対して 、またはＸ若しくはＺがそれぞれＯである場合はＤ若しくはＨのカルボキシル炭 素に対して結合した残基であり： Ａは、Ｄ−若しくはＬ−チロシン、Ｄ−若しくはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−若 しくはＬ−リジン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アルギニ ン、Ｄ−若しくはＬ−システィン、Ｄ−若しくはＬ−０−Ｒ３−チロシン、Ｄ− 若しくはＬ−Ｎａ−Ｒ３−チロシン、Ｄ−若しくはＬ−４−アミノフェニルアラ ニン、Ｄ−若しくはＬ−Ｒ４−フェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−ナフチルア ラニン、Ｄ−若しくはＬ−ピリジルアラニンまたはＤ−Ｌ−テトラヒドロイソＢ は、Ｄ−若しくはＬ−トレオニン、Ｄ−若しくはＬ−リシン、Ｄ−若しくはＬ− グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−システィンまたはグリシンから成る群より選択 されるアミノ酸であり： Ｃは、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−ヒスチジン、Ｄ−若 しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グ ルタミン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−フェニルアラニン、Ｄ −若しくはＬ−リシンまたはグリシンから成る群より選択されるアミノ酸であり ； Ｄは、Ｄ−若しくはＬ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しく はＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ−アレイソロイシン 、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸 、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミンまたはＤ−若し くはＬ−トレオニンから成る群より選択されるアミノ酸であり；但し、ＸはＪ− に−Ｌ−Ｚ’ではないという条件付きであり、そこにおいて、Ｊは、Ｌ−ロイシ ン、Ｄ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しくはＬ−アラ ニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ −若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギンおよびＤ−若し くはＬ−グルタミン；Ｄ−若しくはＬ−ルオニン；並びにＤ−若しくはＬ−アロ イソロイシンから成る群より選択されるアミノ酸であり；には、Ｄ−若しくはＬ −ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ− 若しくはＬ−バリン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくは Ｌ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタ ミン、Ｄ−若しくはＬ−トレオニンおよびＤ−若しくはＬ−アロイソロイシンで あり；Ｌは、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸およ びＤ−若しくはＬ−アスパラギンであり：そしてＺ′は、０〜７個のアミノ酸を 有する直鎖であり：Ｅは、Ｄ−若しくはＬ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロ イシン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ −アロイソロイシン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくは Ｌ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタ ミンまたはＤ−若しくはＬ−トレオニンから成る群より選択されるアミノ酸であ り。

Ｆは、Ｄ−若しくはＬ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しく はＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ−アロイソロイシン 、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸 、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミンまたはＤ−若し くはＬ−トレオニンから成る群より選択されるアミノ酸であり；Ｇは、Ｄ−若し くはＬ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン 、Ｄ−若しくはＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ−アロイソロイシン、グリシン、Ｄ −若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくは Ｌ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミンまたはＤ−若しくはＬ−トレオ ニンから成る群より選択されるアミノ酸であり；Ｈは、グルタミン、Ｄ−グルタ ミン、グルタミン酸、Ｄ−グルタミン酸、アスパラギ：７またはＤ−アスパラギ ンから成る群より選択されるアミノ酸であり：但し、ＹはＭ−Ｎ−Ｐ−Ｚ’では ないという条件付きであり、そこにおいて、Ｍは、Ｄ−若しくはＬ−チロシン、 Ｄ−若しくはＩ、−フェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−リジン、Ｄ−若しくは Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アルギニン、Ｄ−若しくはＬ−システィン 、Ｄ−若しくはＬ−４−アミノフェニルアラニ〉、Ｄ−若しくはＬ−ナフチルア ラニン、Ｄ−若しくはＬ−ピリジルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−テトラヒドロイ ソキニリン、Ｄ−若しくはＬ−０−Ｒ３−チロノン、Ｄ−若しくはＬ−Ｎ２−Ｒ ”−チロシン、Ｄ−若しくはＬ−Ｒ４−フエニＬ−リシン、Ｄ−若しくはＬ−グ ルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−システィンおよびグリシンから成る群より選択さ れるアミノ酸であり、Ｐは、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ −ヒスチジン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン 、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ− フェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−リシンおよびグリシンから成る群より選択 されるアミノ酸であり；そしてＺ′は、０〜７個のアミノ酸を有する直鎖状アミ ノ酸鎖である）から選択される新規のペプチドまたは薬学的に許容しつるその塩 に関する。

Ｒ１は、水素（遊離Ｎ末端基を意味する）、低級アルキル、アリール、ホルミル 、アルカノイル、アロイル、アルキルオキシカルボニルまたはアロイルオキシカ ルボニルであり。

Ｒ２は、ＯＨ（遊離Ｃ末端カルボン酸を意味する）、エステルを意味するＯＲ（ 式中、Ｒ３は低級アルキルまたはアリールである）であるかまたはＲは、ＮＲＲ （式中、Ｒ５およびＲ６はそれぞわへ水素、低級アルキル、アリ−ルまたは環状 アルキルから独立して選択される）である。

式ＩおよびＩＩを有するペプチドは、それらのコア部分としてそれぞわ、Ｐ−セ レクチンの２３〜２６および２７〜３０アミノ酸配列部分を、シグナルペプチド の開裂後に成熟タンパク質のＮ末端として定義される残基１と一緒に有する。

試験は、式■およびＩＩを有するペプチドが、約５０〜約１５００μＭの範囲の ペプチド濃度においてＰ−セレクチンに対する好中球の結合を阻害することを示 す。更に、試験は、コア配列中並びにＮ末端およびＣ末端フランキング部分の変 化が、生物学的活性を損なわせないことを示す。

本発明は、式ＩおよびＩＩを有する新規のペプチドのみならず、それらを含む薬 剤組成物、それらを用いる診断法および治療法並びにそれらを製造する方法に関 する。

図面の簡単な説明 図１は、精製ヒトＰ−セレクチンに対するヒト好中球の付着を阻害する式■のペ プチドを示す。

発明の詳細な説明 本発明の好ましいペプチドは、式ＩおよびＩＩ（式中、互いにまたは独立して、 Ｒは水素またはアセチル（Ａｃ）てあり；ＲはＯＨまたはＮＨ２であり；Ａは、 ＴｙｒＳＤ−ＴｙｒｌＡｒｇまたはＤ−Ａｒｇであり；Ｄは、ＡｓｐＳＤＡｓｐ 、ＨｉｓまたはＤ−Ｈｉｓである）を有するものである。

具体的に好ましいペプチドとしては下記がある。

＾ｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−＾５ｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−＾１ａ−１１ｅ−ＮＨ２（ 配列番号・１）＾ｓｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−＾５ｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−＾ １ａ−１１ｅ−ＮＨ２（配列番号＝２）Ａｓｎ−＾ｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓ ｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−＾１ａ−ＮＨ２（配列番号＝３）Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−＾５ｐ −Ｌｃｕ−Ｖａｌ−＾１ａ−１１ｅ−Ｎｌ２（配列番号：４）＾ｓｎ−＾ｒｇ− Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−＾５ｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｎｌ２（配列番号：５）＾５ｐ−Ｌ ｅｕ−Ｖａ　ｌ−＾１ａ−１１ｅ−Ｇｉｎ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ− Ｎｌ２（配列番号＝６）Ｔｈｒ−＾５ｐ−Ｌｃｕ−Ｖａ　ｌ−＾１ａ−１１ｅ− Ｇｉｎ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−＾５ｎ−Ｇｌｕ−Ｎｌ（２（配列番号・７）ＬｅｕＪ ａｌ−＾１ａ−Ｉ　１ｅ−Ｇｉｎ−＾５ｎ−Ｌｙｓ−＾５ｎ−Ｇｌｕ−ＮＨ２（ 配列番号：８）Ｔｈｒ−＾５ｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−＾１ａ−１１ｅ−Ｇｉｎ−Ｎ ［＋２（配列番号。９）本明細書中で用いられる「アルキル」という用語は、分 岐状、直鎖および環状飽和炭化水素を包含する。「低級アルキル」という用語は 、１〜６個の炭素原子を有するアルキル、例えば、メチル、エチル、プロピル、 イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネ オペンチル、シクロペンチルメチルおよびヘキシルを意味する。「アルカノイル 」という用語は、（式中、Ｒ７はアルキル基である） を意味する。「アロイル」という用語は、（式中、Ｒ８はアリール基である） を意味する。「アリール」という用語は、環縮合構造であってよいしまたはな（ でもよいし、そして場合により、ハロゲン、炭素または他のへテロ原子、例えば 、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、リン（Ｐ）およびホウ素（Ｂ）で置換されている１ 〜３個の環を有する芳香族またはヘロ芳香族構造を意味する。アルコキシカルボ ニルという用語は、 （式中、Ｒ９は低級アルキル基である）を意味する。アリールオキシカルボニル という用語は、（式中、Ｒ１０はアリール基およびアリールメチル基である）を 意味する。

ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。

「Ｘの末端αアミノ基」という用語は、ＸのＮ末端アミノ酸のαアミノ基を意味 する。

式■およびＩＩを有するペプチドは、遊離ペプチドまたは薬学的に許容しうる塩 の形で用いることかできる。アミン塩は、既知の方法にしたがってペプチドを酸 で処理することによって製造することかできる。適当な酸としては、無機酸、例 えば、塩酸、臭化水素酸、過塩素酸、硝酸、チオシアン酸、硫酸お１よびリン酸 並びに有機酸、例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピル ビン酸、ソユウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、アントラニル 酸、ケイ皮酸、ナフタレンスルホン酸およびスルファニル酸がある。

ペプチド中のカルボン酸基は、既知の方法にしたがってペプチドを塩基で処理す ることによって塩に変換することができる。適当な塩基としては、無機塩基、例 えば、水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウムおよび水酸化カリウム並びに有機 塩基、例えば、モノ−、ジーおよびトリーアルキルおよびアリールアミン（例え ば、トリエチルアミン、ンイソプロピルアミン、メチルアミンおよびジメチルア ミン並びに場合により置換されたモノ−、ジーおよびトリーエタノールアミンか ある。

本明細書中で論及されるペプチドのアミノ酸成分およびそれらの製造において用 いられる若干の材料を、便宜上、略語で識別する。これらの略語は以下の通りで ある。

ペプチドの製造法 概して、ペプチドは、例えば、内容力体明細書中に具体的に包含されている引用 文献に記載されたような既知の技法にしたがって製造することができる。好まし い方法において、ペプチドは、メリフィールド（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ）によっ てＪ、Ａｍｅｒ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、、８５．２１４９〜２１５４　（１９６３ ）に最初に記載された固相合成技術にしたがって製造される。他の技法は、例え ば、Ｍ、ボダンッキー（Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ）ら、Ｐｅｐｔ　ｉｄｅ旦ヱ旦工亘 見王工！、第２版、　（ジョン・ウィリー・アンド・サンズ（ＪｏｈｎＷｉ　ｌ ｅｙ　＆　５ｏｎｓ）、１９７６年）並びに当業者に知られている他の参考書で 見出しつる。

このような合成において使用できる適当な保護基およびそれらの略語は、上記ス （Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ）、ニューヨーク、１９７３年）において見出され る。本明細書中で用いられる常用保護基は、ｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯ Ｃ）、フルオレニルメトキシカルボニル（ＦＭＯＣ）　、ベンジル（Ｂｚｌ）、 トシル（Ｔｏｓ）、ｏ−ブロモ−フェニルメトキシカルボニル（ＢｒＣＢＺ）、 フェニルメトキシカルボニル（ＣＢＺ）、２−クロロ−フェニルメトキシカルボ ニル（２−ＣＩ−ＣＢＺ）　、４−メトキシ−２，３，６−ドリメチルベンゼン スルホニル（Ｍｔｒ）、トリチル（Ｔｒｔ）、ホルミル（ＣＨＯ）および第三ブ チル（ｔ−Ｂｕ）である。

固相方法論による式ＩおよびＩＩのペプチドの合成のための一般的な合成手順は 以下の通りである。

Ａ、Ｎ　−Ｂｏａ保護を用いる固相ペプチド合成の一般的な合成手順反復　時間 １、　ＣＨ２Ｃｌ２中２５％ＴＦＡ　１　３分間２、　ＣＨ２Ｃｌ２中５０％Ｔ ＦＡ　１　１６分間３、　ＣＨ２Ｃｌ２　５　３分間 ４、　ＮＭＰ中５％ＤＩＥＡ　２　４分間５、ＮＭＰ　６５分間 ６、　結合工程　１　５７分間 ａ、ＮＭＰ中の予め生成されたＢＯＣ−３７分間アミノ酸−Ｈ０ＢＴ活性エステ ル ｂ、ＤＭＳｏ　１６分間 ｃ、ＤＩＥＡ　、５分間 ７、ＮＭＰ中１０％Ａｃ　Ｏｘ　５％ＤＩＥＡ　１　９分間８、　ＣＨ２Ｃｌ２ 　５　３分間 Ｂ、Ｎ　−ＦＭＯＣ保護を用いる固相ペプチド合成の一般的な合成手順反復　時 間 １、　ＮＭＰ中２０％ピペリジン　１　３分間２、　ＮＭＰ中２０％ピペリジン 　１　１５分間３、ＮＭＰ　６９分間 ４、　結合　１　７１分間 ＮＭＰ中の予め生成されたＦＭＯＣ−３７分間アミノ酸−Ｈ０ＢＴ活性エステル またはＮＭＰ中のＦＭＯＣ−アミノ酸および ＨＯＢＴの後にＮＭＰ中ＤＩＣの添加。

５、ＮＭＰ　６７分間 ＢｏｃかまたはＦＭＯＣ計画を用いて合成されたペプチドの脱保護されたＮ“− アミノ基に対するＮ末端アセチル化は、ＮＭＰ中１０％Ａ　Ｃ２０および５％Ｄ ＩＥＡを用いて達成された後、ペプチド樹脂をＮＭＰおよび／またはＣＨ２Ｃｌ ２で洗浄する。

ペプチドは、更に、当業者に知られている標準的な遺伝子工学技術を用いて製造 することができる。例えば、ペプチドは、該ペプチドをコードしている核酸を発 現ベクター中に挿入し、ＤＮＡを発現させ、そして必要なアミノ酸の存在下にお いて該ＤＮＡをペプチドに翻訳することによって酵素的に製造することができる 。次に、ペプチドを、クロマトグラフィー若しくは電気泳動技術を用いて、また は担体タンパク質をコードしている核酸配列を、ペプチドコード配列を含む相中 の発現ベクター中に挿入することによってペプチドに融合させることができるし 、そして引き続きペプチドから開裂することができる該担体タンパク質によって 精製される。融合タンパク質−ペプチドは、クロマトグラフィー、電気泳動また は免疫学的技法（例えば、担体タンパク質に対する抗体による樹脂に対する結合 ）を用いて単離することができる。ペプチドは、化学的方法論を用いてまたは加 水分解酵素などによって酵素的に開裂させることができる。

式Ｉを有するペプチドは、更に、段階的かまたはフラグメント縮合によって溶液 法を用いて製造することができる。適当にαアミノが保護されたアミノ酸を、ン イミド、対称性若しくは非対称性無水物、ＢＯＰまたは、当業者に知られている 他の結合試薬若しくは技術を用いて、適当にαカルボキシルが保護されたアミノ 酸（このような保護は、選択された結合法に応じて必要とされないことがある） に結合させる。これらの技法は、かまたは酵素的であってよい。αアミノおよび ／またはαカルボキシル保護基を除去し、そして次に適当に保護されたアミノ酸 またはアミノ酸ブロックを結合させて成長ペプチドを伸長させる。保護基並びに 化学的および／または酵素的技法および組立て計画の種々の組合せをそれぞれの 合成において用いることができる。

薬剤組成物の製造法 本発明の薬剤組成物は、薬学的に許容しうる担体または希釈剤および有効量の１ 種類またはそれ以上の式Ｉ若しくはＩＩを有するペプチドまたはその酸塩若しく は塩基塩を含む。担体または希釈剤は、舌下、直腸、鼻腔、経口または非経口な どの投与に望ましい剤形に応じて広範囲の形をとることができる。

経口用剤形の組成物を製造する場合、通常の薬剤媒質、例えば、水、油、アルコ ール、着香剤、保存剤および着色剤のいずれかを用いて経口用液状製剤（例えば 、懸濁剤、エリキシル剤または水剤）を製造することができるしまたはデンプン 、糖、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤および崩壊剤などの担体と一緒に経口用 固形製剤（例えば、散剤、カプセル剤または錠剤）を製造することができる。

制御放出形態または生物学的利用能を増加させるエンハンサ−を用いてもよい。

投与におけるそれらの容易さゆえに、錠剤およびカプセル剤は最も好都合な経口 用単位剤形であり、その場合、固形薬剤担体が用いられる。所望ならば、標準的 な技法によって錠剤を糖衣してよいしまたは腸溶コーティングしてよい。

非経口製品用に、通常、担体は滅菌水であるが、溶解性を助けるためのまたは保 存剤としての他の成分を含んでいてよい。注射可能な懸濁剤も製造することがで き、その場合、適当な液状担体および沈殿防止剤を用いることができる。

ペプチドは、更に、水剤またはクリーム剤の局所適用によって創傷または炎症性 部位に局所投与することができる。

或いは、ペプチドは、リポソームまたはミクロスフェア（または微粒子）で投与 することができる。患者に対する投与用のリポソームおよびミクロスフェアの製 造法は、当業者に知られている。米国特許第４，７８９，７３４号明細書には、 生物学的材料をリポソーム中に封入する方法が記載されている。本質的には、材 料を水溶液中に溶解させ、適当なリン脂質および脂質を、必要ならば界面活性剤 と一緒に加え、そして必要に応じて材料を透析するかまたは音波処理する。既知 の方法の論評は、Ｇ、グレゴリアゾイス（Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ）、１４章、 　「リポソーム（Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ）Ｊ、Ｄｒｕ　Ｃａｒｒｉｅｒｓ　ｉｎＢ ｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、２８７〜３４１頁（アカデミツク・ プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ）、１９７９年）による。ポリマーまた はタンパク質から成形されたミクロスフェアは当業者に周知であり、そして胃腸 管を介して直接血流中に通過させるように要求通りに製造することができる。或 いは、ペプチドは、何日間〜何か月間の期間にわたって徐放するように配合され 且つミクロスフェアまたはミクロスフェアの複合材料に植え込むことができる。

例えば、米国特許第４，９０６，４７４号明細書、同第４．９２５．６７３号明 細書および同第３，６２５．２１４号明細書を参照されたい。

概して、ペプチドは、約１μｇ／ｋｇ（体重）の量で非経口投与された場合に活 性である。他の投与経路による有効な用量は、概して、約１μｇ／ｋｇを越える 静脈内投与量と同様の血中濃度をもたらす用量である。再潅流を伴う場合の器官 損傷を防止する処置のために、ペプチドは、約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ（体 重）の量で非経口投与することができる。概して、炎症を軽減させるべき他の疾 患または症状の治療において、同様の投薬量範囲を用いることができる。この投 薬量は、一部分は、１種類またはそれ以上のペプチドを投与するか否かに関係す る。相乗効果は、レクチンドメイン部分と異なるか若しくは重複するペプチドの 組合せによって、またはＰ−セレクチンのＥＧＦドメイン由来のペプチドとの組 合せにおいて見られることがある。

結合を実証する方法 生物学的に活性であるペプチドは、Ｐ−セレクチンに対する好中球、単球、リン パ球サブセットまたは他の細胞の結合を阻害するかまたは、ＥＬＡＭ−１および ／またはホーミング受容体によって媒介されている内皮に対する白血球の付着を 阻害するものである。

ペプチドの、細胞に対する付着、例えば、プラスチックウェル上に固定された精 製Ｐ−セレクチンに対する好中球付着を阻害する能力について、ジエン（Ｇ　ｅ 　ｎ　ｇ）ら、Ｎａｔｕｒｅ　３４３．７５７〜７６０　（１９９０）によって 記載された検定を用いてスクリーニングすることができる。

ヒト好中球は、ヘパリン処理された全血から、モノ・ポリ（Ｍｏｎｏ−Ｐｏｌｙ ）分離媒質、フロー・ラボラトリーズ（ＦｌｏｗＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）で の密度勾配遠心分離によって単離される。好中球懸濁液は９８％を越えて純粋で あり且つトリパンブルー排除により９５％を越えて生存しつる。付着検定のため に、好中球を、１．２６ｍＭ　Ｃａ２＋および０．８１ｍＭ　Ｍｇ２＋含有ハン クス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ、ギブ：＋（Ｇｉｂｃ。

）中においてヒト血清アルブミンｇ　ｍｇ／ｍＬと一緒に（Ｈ’Ｂ　Ｓ　Ｓ／Ｈ Ｓ　Ａ）細胞濃度２ｘ１０６個／ｍＬで懸濁させる。付着検定は、各種タンパク 質溶液５０マイクロリットルと一緒に４℃−晩生インキユベートされた９６ウ工 ル微量滴定プレート、コーニング（Ｃｏｒｎｉｎｇ）中において三重反復試験で 行なわれる。

Ｐ−セレクチンは、ヒト血小板溶解産物から、抗体５１２−セファロース（Ｓｅ ｐｈａｒｏｓｅ）（商標）でのイムノアフィニティークロマトグラフィーおよび モノ（Ｍｏｎｏ）−Ｑ　（商標）カラム（Ｆ　Ｌ　Ｐ　Ｃ，ファーマシア・ファ イン・ケミカルズ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ　Ｆｉｎｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）での イオン交換クロマトグラフィーによって以下のように単離される。

血液銀行から入手され且つ４℃で貯蔵された旧式のヒト血小板パック（１００単 位）をプールし、ｐＨ７，５で５ｍＭ　ＥＤＴＡに調整し、１リツトルびん中に おいて４．００Ｏｒｐｍで３０分間遠心分離した後、０．１Ｍ　ＮａＣ１，２０ ｍＭトリス　ｐＨ７，５（ＴＢＳ）　、５ｍＭ　ＥＤＴＡ、５ｍＭベンズアミジ ンの１リツトルで３回洗浄する。

次に、血小板を最小量の洗浄バッファー中に再懸濁させ且つＤＩＦＰ中に１ｍＭ とした後、５０　ｍ　Ｌスクリュートップ試験管中において一８０℃で凍結させ る。凍結した血小板を解凍し且っＴＢＳ　５０ｍＬ、５ｍＭベンズアミジン、５ ｍＭ　ＥＤＴＡ　ｐＨ７，５，１００Ｍロイペプチン中に再懸濁させる。懸濁液 をドライアイス−アセトン浴中において６００ｍＬ凍結乾燥用フラスコを用いて 二回凍結および解凍させた後、ガラス／テフロン乳鉢中および乳棒で均一化し、 そしてＤＩＦＰ中に１ｍＭとした。ＮａＣ１濃度を、４Ｍ　ＮａＣ１の原液で０ ゜５Ｍに調整する。懸濁液を４℃で撹拌後、それをポリカーボネート試験管中、 ４℃において３３．ＯＯＯｒｐｍで６０分間遠心分離する。上澄み（領　５ＭＮ ａＣ１洗液）を取出し且つ蓄える。この上澄みは可溶形のＰ−セレクチンを含む 。ペレットの上部を上澄みと一緒に取出さないように注意する。次に、ペレット を抽出用バッフｙ−（ＴＢＳ、５ｍＭベンズアミジン、５ｍＭ　ＥＤＴＡＳｐＨ ７，５，１００μＭｏイペプチン、２％トリトン（Ｔｒｉｔｏｎ）Ｘ−１００） 中で均一化する。４℃において１９．５０Ｏｒｐｍで２５分間の遠心分離後、上 澄みを取出す。抽出操作をペレットについて繰り返し、そしてその上澄みを最初 の上澄みと合わせる。合わせた抽出液は膜形のＰ−セレクチンを含んでおり、そ れを０．５Ｍ　ＮａＣ１に調整する。

可溶性部分（０，５Ｍ　ＮａＣ１洗液）および膜抽出液（０，５Ｍ　ＮａＣ１に 更に調整される）を、アフィゲル（Ａｆｆｉｇｅｌ）（バイオラド（Ｂｉｏｒａ ｄ））に対して４℃において５ｍｇ／ｍＬで２時間予め結合させた単クローン性 抗体５１２（Ｐ−セレクチンに向けられた）の別個のプールによって吸収させる 。樹脂を沈降させた後、上澄みを取出す。次に、結合したＧＭＰ−１４０を含む Ｓ１２アフイゲルをカラム中に充填し且つ０゜５ＭＮａＣ１，２０ｍＭトリス　 ｐＨ７，５，０，０１％ルブロール（Ｌｕｂｒｏｌ）ＰＸの４００ｍＬと一緒に ４℃で一晩生洗浄する。

結合したＰ−セレクチンを、Ｓ１２アフイゲルから、８０％エチレングリコール 、１ｍＭ　ＭＥＳ　ｐＨ６，０，０，０１％ルブロールＰＸの１００ｍして溶離 する。２８０ｎｍでの吸光度によるピーク部分をプールする。溶離液を０．０５ ％ルフロール含有ＴＢＳに対して透析した後、モノＱカラム（ファーマシアから のＦＰＬＣ）に入れる。濃縮タンパク質を、２Ｍ　ＮａＣ１，２０ｍＭトリスｐ Ｈ７，５（膜部分用には０．０５％ルブロールＰＸを加える）で段階溶離する。

ピーク部分をＴＢＳ　ｐＨ７，５（膜部分用には０．０５％ルブロールＰＸを加 える）中に透析する。

Ｐ−セレクチンを５マイクログラム／ｍＬで入ね、そして対照タンパク質、すな わち、ヒト血清アルブミン（Ａｌｂ）、血小板糖タンパク質１１ｂ／ＩＩＩａ（ Ｉｌｂ）、ツインヒルプラント因子（ｖＷＦ）、フィブリノーゲン（Ｆ　Ｉ　Ｂ ）、トロンボモジュリン（ＴＭ）　、ゼラチン（Ｇ　Ｅ　Ｌ）またはヒト血清（ Ｈ３）を５０マイクログラム／ｍＬで加える。全部のウェルを、Ｈ３Ａ　１０ｍ ｇ／ｍＬ含有ＨＢＳＳ　３００マイクロリツトルを用いて２２℃で２時間ブロッ クした後、０．１％トウイーン（Ｔｗｅｅｎ）−２０含有ＨＢＳＳで３回および ＨＢＳＳで１回洗浄する。細胞（２ｘ１０５個／ウェル）をウェルに加え且つ２ ２℃で２０分間インキュベートする。次に、ウェルをＨＢＳＳ／Ｈ３Ａで満たし 、アセテートテープ（ダイナチク（Ｄｙｎａ　ｔｅａｈ））で密封し、そして１ ５０ｇで５分間倒置遠心分離する。非付着細胞および上澄みを捨てた後、各ウェ ルの内容物を、５０ｍＭリン酸カリウム、Ｉ）Ｈ６，Ｏ中の０．　５％臭化ヘキ サデシルトリメチルアンモニウム、シグマ（Ｓ　ｉ　ｇｍａ）２００マイクロリ ツトルを用いて可溶化し且つミエロペルオキシダーゼ活性について検定する。リ ー（Ｌ　ｅ　ｙ）ら、Ｂｌｏｏｄ　７３，１３２４〜１３３０　（１９８９）。

結合した細胞の数は、ミエロペルオキシダーゼ活性対細胞数の標準曲線から得ら れる。全ての検定条件下において、細胞は、全ミエロペルオキシダーゼおよび乳 酸デヒドロゲナーゼの５％未満を放出する。５％の値は、特異的付着の９５％が 阻害されたことを意味することから、阻害は低百分率付着として読み取られる。

臨床的応用 セレクチンは、白血球付着、炎症および凝固に関係するいくつかの機能を有する ので、Ｐ−セレクチン、Ｅ−セレクチンまたはＬ−セレクチンの結合を妨げる化 合物を用いてこれらの応答を調節することができる。

例えば、ペプチドは、白血球表面上のＰ−セレクチン受容体に対して競合的に結 合することによって白血球付着を競合的に阻害するのに用いることができる。

この種類の療法は、白血球に媒介された炎症の、一時的ではあるが有効な阻害が 望まれる急性の場合に特に有用であろう。ペプチドの注入による長期療法も、若 干の状況において可能でありうる。

白血球は正常な組織を損傷しうる多数の毒性分子を放出するので、炎症性応答は 、抑制されない場合、宿主に対して損傷を引起こすことがある。これらの分子と しては、タンパク質分解酵素および遊離基がある。白血球が組織損傷を引起こし うる病理学的状況の例としては、虚血および再潅流による損傷、細菌性敗血症お よび汎発性血管向凝固症候群、成人呼吸窮迫症候群、腫瘍転移、慢性関節リウマ チ並びにアテローム硬化症がある。

再潅流損傷は、臨床心臓病学における主要な問題である。虚血性心筋層での白血 球付着を減少させる治療薬は、血栓崩壊性薬の治療的を動性を有意に増大させる ことができる。組織プラスミノーゲン活性化因子またはストレプトキナーゼなど の薬剤による血栓崩壊性療法は、回復不能な心筋細胞死の前の苛酷な心筋虚血を 有する多数の患者において冠状動脈障害を緩和することができる。しかしながら 、多数のこのような思考は、血流の回復にもかかわらず、なお心筋神経症に苦し んでいる。この「再潅流損傷」は、おそらく一部分は、白血球に対して血小板お よび内皮を付着性にさせるトロンビンおよびサイトカインによるそれらの活性化 のために、虚血性区域中の血管内皮に対する白血球の付着性と関係があることが 知られている（ロスメン（Ｒｏｓｍｅｎ）ら、Ｃ４ｒｃｕｌａｔｉｏｎ　６７： １０１６〜１０２３　（１９８３））。これらの付着性白血球は、内皮を介して 移動し且つ虚血性心筋層を、ちょうどそれが血流の回復によって救われる時に破 壊することがある。

虚血および再潅流が、血管表面に対する白血球の付着に媒介された器官損傷を引 起こしている他の一般的な臨床的障害は多数存在し、発作；腸間膜および末梢血 管疾患；器官移植；並びに循環性ショック（この場合、多数の器官が血流回復後 に損傷されるかもしれない）がある。

細菌性敗血症および汎発性血管向凝固症候群は、重病患者において同時に存在す ることが多い。それらは、トロンビン、サイトカインおよび他の炎症性媒介物質 の発生、血小板および内皮の活性化、並びに血管系中の白血球の付着および血小 板の凝集と関係がある。白血球依存性器官損傷は、これらの症状の重要な特徴で ある。

成人呼吸窮迫症候群は、敗血症のまたは外傷後の患者において引起こされる破壊 的肺傷害であり、肺循環中の白血球の広範囲にわたる付着および凝集と関係があ る。これは、肺中への多量の血漿浸出および肺組織の破壊をもたらし、両方とも 大部分は白血球産物によって媒介される。

しばしば致命的である二つの関連した肝障害は、同種異系骨髄移植を受けた免疫 抑制患者および、インターロイキン−２で処理されたＬＡＫ細胞（リンホカイン で活性化されたリンパ球）による治療に起因する全身性血管漏出による合併症に 苦しむ癌患者に存在する。ＬＡＫ細胞は、血管壁に付着し、そしておそらくは内 皮に対して毒性である産物を放出することが知られている。ＬＡＫ細胞が内皮に 付着する機序は現在知られていないが、このような細胞は、好中球中で機能しう るちのと同様の機序によって内皮を活性化した後に内皮に結合する分子を放出す ることか可能であろう。

多数の悪性疾患（癌、リンパ腫および肉腫を含む）からの腫瘍細胞は、血管系を 介して離れた部位に転移することがある。内皮に対する腫瘍細胞の付着およびそ れらの引き続きの移動についての機序は十分に理解されていないが、少なくとも 若干の場合において白血球の機序と同様でありうる。血小板と転移性腫瘍細胞　 ′との関係は十分に記載されており、若干の癌の拡大における血小板の役割が示 唆されている。最近、Ｐ−セレクチンは種々のヒト癌組織部分（結腸、肺および 胸部）の腫瘍細胞に対して結合すること、およびＰ−セレクチンは、黒色腫以外 の種々の癌に由来する多数の細胞系の細胞表面に対して結合することが報告され た。アルボ（Ａｒｕｇｇｏ）Ａ、ら、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ　１．Ａｃａｄ、Ｓｃｉ 、Ｕ旦Δ、８９．２２９２〜２２９６　（１９９２）。アルボらも、Ｅ−セレク チンが、インビトロでの活性内皮細胞に対する結腸癌細胞系（ＨＴ−２０）の付 着を媒介することによって腫瘍転移に関与しているらしいということを示唆する 初期の研究に参考文献を記載している。血小板−白血球相互作用は、アテローム 硬化症において重要であると考えられる。血小板は、アテローム硬化症斑中への 単球の供給においである役割を有すると考えら瓢単球の蓄積は、アテローム発生 の際の最初に検出しうる結果の−っであることが知られている。完全に発達した 斑の破裂は、血小板の沈着および活性化並びに血栓形成の促進のみならず、虚血 部分に対する初期の好中球供給をもたらすことがある。

もう一つの可能な応用分野は、慢性関節リウマチの治療にある。

治療のための本発明のこれらのペプチドを用いる治療様式およびこのための有効 量のペプチドに対する応答を評価するための判定基準は、具体的な症状によって 指示され、そして概して、標準的な医療に従う。例えば、心筋梗塞の拡張を防止 する有効量の判定基準は、心電図、生命徴候および臨床反応を監視することによ って血漿中の心筋壊死のマーカー酵素を検査することにより、当業者によって決 定されるであろう。急性呼吸窮迫症候群の治療のためには、動脈酸素の増進、肺 浸潤の消散並びに軽減された呼吸困難および頻呼吸によって測定される臨床的改 善について検査されるであろう。ショック（低血圧）の患者の治療のための有効 量は、血圧の回復後の肝臓および腎臓などの生体器官についての臨床反応および 機能の具体的な測定値に基くであろう。神経学的機能は、発作のある患者におい て監視されるであろう。具体的な検査を用いて、移植された器官の機能、例えば 、腎臓移植を受けた患者の血清クレアチニン、尿量および血清電解質を監視する 。

診断用試薬 ペプチドは、更に、セレクチンのリガンドに欠陥があるかもしれないヒト障害の 検出用に用いることができる。このような障害は、白血球が活性血小板または内 皮に対して結合できないかもしれない感染に対する感受性が増加した患者におい て見られる可能性がある。検査される細胞、通常、白血球を、標準的な医学的に 承認された技法によって集め且つスクリーニングする。検出システムとしては、 エリザ（ＥＬＩＳＡ）法、固定された活性細胞に対する放射性標識抗体の結合、 フローサイトメトリーまたは当業者に知られている他の方法がある。レクチンド メインペプチドの存在下および不存在下における結合の阻害を用いて、セレクチ ン結合における欠陥または変化を検出することができる。セレクチンについて、 このような障害は、Ｐセレクチンのための白血球リガンドに欠陥があるために、 白血球の血小板および内皮に対する結合に欠陥があると考えられる感染に対する 感受性か増加した患者において見られる可能性がある。

ペプチドは、放射能によって、蛍光標識によって、酵素によってまたは、電子鏡 検法のための金なとの電子稠密材料によって標識される。検査される細胞、通常 、白血球を標識ペプチドと一緒にインキュベートし、そしてＰ−セレクチンに対 する抗体を用いる前記の方法によって、または当業者に知られている他の方法に よって結合を評価する。Ｐ−セレクチンのためのリガンドが血漿中においても見 出される場合、それらは、更に、標準的なエリザまたは放射線免疫検定法によっ て、検出用試薬として抗体の代わりに標識Ｐ−セレクチン由来ペプチドを用いて 測定することかできる。

更に、ペプチドは、セレクチンリガンドを有する細胞の濃度をインビボで考える 場合に有用でありうる。癌細胞などの生体中の異常に高い局所濃度または存在か 障害の指標となる、セレクチンリガンドを発現する細胞については、標識ペプチ ドを用いて考えることができる。これらの標識は、特異的なセレクチンペプチド の構造に対して内因性であるかまたは外因性であってよいし、そして制限されな いが、Ｘ線対比を増大させる１１１１ｎまたは非放射性稠密原子などの高エネル ギーエミッターを挙げることができる。

以下の実施例は、本発明を制限するのではなく、例証するために示される。実施 例においておよび明細書中において、特に断らない限り、部は重量による。

実施例Ｉ　アスパラギニルーアルギニニルーチロシルートレオニルーアスバルチ ルーロイシルーバリルーアラニンーアミド（配列番号　３）ペプチドを、ＡＢＩ 　４３１Ａ型ペプチドシンセサイザーにおいて標準ＢＯＣソフトウェアのバージ ョン１．１２を用いて製造した。４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（６２５ ｍｇ）を合成において用いた。樹脂の最終重量は１．３３ｇであった。

ＨＦ　１３ｍＬおよびアニソール１．３ｍＬを０℃で６０分間用いて、ペプチド を樹脂（１，３３ｇ）から開裂させた。樹脂をエーテルで洗浄し、そしてペプチ ドをＤＣＭ中５０％ＴＦＡで抽出して粗ペプチド３７９ｍｇを生成した。

粗ペプチド（２９９ｍｇ）を、ヴイダク（Ｖｙｄａｃ）Ｃ−１８カラム（１５μ 、５ｘ２５ｃｍ）において０．　１％ＴＦＡ中８０％中上０ニトリルの１０〜５ ０％勾配を用いて１５ｍＬ／分の流速で１２０分間にわたって溶離して精製した 。両分を集め、高速液体クロマトグラフィーで分析し、そして純粋な部分をプー ルし且つ凍結乾燥させて１０４ｍｇを生成した。

アミノ酸分析：Ａｌａ　１．０１　（１）、Ａｒｇ　０１９８　（１）　、Ａｓ ｘ２．０３　（２）、Ｌｅｕ　１．０’４　（１）、Ｔｈｒ　Ｏ，８９（１）、 ＴｙｒＯ１９５（１）、Ｖａｌ　１．００　（１）。

ＦＡＢ／ＭＳ＋ＭＨ＋　９５０．６ 実施例ＩＩ・アスパラギニルーアルギニニルーチロシルートレオニルーアスバル チルーロイシルーバリルーアラニルーイソロイシンーアミド（配列番号：２）ペ プチドを、ＡＢＩ　４３１Ａ型ペプチドシンセサイザーにおいて標準ＢＯＣソフ トウェアのバージョン１．１２を用いて製造した。４−メチルベンズヒドリルア ミン樹脂（６２５ｍｇ）を合成において用いた。樹脂の最終重量は１．４２ｇで あった。

ＨＦ　１３ｍＬおよびアニソール１．３ｍＬを０℃で６０分間用いて、ペプチド を樹脂（１，３２ｇ）から開裂させた。樹脂を１・１のエーテル／塩化メチレン で洗浄し、そしてペプチドを塩化メチレン中５０％ＴＦＡで抽出して粗ペプチド ５１６ｍｇを生成した。

粗ペプチド（３００ｍｇ）を、ヴイダクＣ−１８カラム（１５μ、５ｘ２５ｃｍ ）において０．１％ＴＦＡ中８０％中上０ニトリルの２５〜５０％勾配を用いて １５ｍＬ／分の流速で１２０分間にわたって溶離して精製した。画分を集め、高 速液体クロマトグラフィーで分析し、そして純粋な部分をプールし且つ凍結乾燥 させて１２９ｍｇを生成した。

アミノ酸分析＋ＡＩａ　０．　９８　（１，０）、Ａｒｇ　１゜０４　（１，０ ）、Ａｓｘ　２．　００　（２，０）、Ｔｉｅ　Ｏ，９４（１，０）、Ｌｅｕ　 １．　００（１，０）、Ｔｈｒ　０．　９３　（１，０）、Ｔｙｒ　Ｏ，９５（ １，０）、Ｖａｌ　１．　０９　（１，０）。

ＦＡＢ／ＭＳ：ＭＨ１０６３ 実施例ＩＩＩ：チロシルートレオニルーアスバルチルーロイシルーバリルーアラ ニルーイソロイシルーアミド（配列番号：４）ペプチドを、ＡＢＩ　４３１Ａ型 ペプチドシンセサイザーにおいて標準ＢＯＣソフトウェアのバージョン１．１２ を用いて製造した。４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（０，６２５ｇ、０． ５ミリモル）を合成において用いた。樹脂の最終重量は１．０５ｇであった。

ＨＦ　ＩＱｍＬおよびアニソール１．５ｍＬを０℃で６０分間用いて、ペプチド を樹脂（１，０５）から開裂させた。樹脂をエーテルで洗浄し、そしてペプチド をＣＨ２Ｃｌ２中５０％ＴＦＡて抽出して、粗ペプチド３１７ｍｇを生成した粗 ペプチド（２ｘ１６０）を、ヴイダクＣ−１８カラム（１５μ、５ｘ２５ｃｍ） において０．１％ＴＦＡ中８０％中上０ニトリルの１０〜５０％勾配を用いて１ ５ｍＬ／分の流速で１２０分間にわたって溶離して精製した。両分を集め、高速 液体クロマトグラフィーで分析し、そして純粋な部分をプールし且つ凍結乾燥さ せて２５０ｍｇを生成した。

アミノ酸分析：ＡＩａ　１．０１　（１）、Ａｓｘ　１．０４　（１）、１ｉｅ １．００　（１）、Ｌｅｕ　１．０４　（１）、Ｔｈｒ　０．９０　（１，）、 ＴｙｒＯ，９８（１）、Ｖａｌ　１．０１　（１）。

ＦＡＢ／ＭＳ：ＭＨ７９３，４ 実施例■ｖ、アルギニルーチロシルートレオニルーアスバルチルーロイシルーバ リルーアラニルーイソロイシンーアミド（配列番号：１）ペプチドを、Ａ、ＢＴ 　４３１Ａ型ペプチドシンセサイザーにおいて標準ＢＯＣソフトウェアのバージ ョン１．１２を用いて製造した。４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（０，６ ４６ｇ、０．５ミリモル）を合成において用いた。樹脂の最終重量は１．４６４ ｇであった。

ＨＦ　１４ｍＬおよびアニソール１．４ｍＬを０℃で６０分間用いて、ペプチド を樹脂（１，３５８ｇ）から開裂さぜた。樹脂をエーテルで洗浄し、そしてペプ チドをＴＦＡ　：　ＤＣＭの１：１溶液で抽出して、粗ペプチド０．６５１ｇを 生成した。

粗ペプチド（４９３ｍｇ）を、ヴイダクＣ−１８カラム（１５μ、５ｘ２５ｃｍ ）において０．　１％ＴＦＡ中８０％中上０ニトリルの１０〜６５％勾配を用い て１５ｍＬ／分の流速で１２０分間にわたって溶離して精製した。画分を集め、 高速液体クロマトグラフィーで分析し、そして純粋な部分をプールし且つ凍結乾 燥させて３３７ｍｇを生成した。

アミノ酸分析：Ａｌａ　１．０３　（１）、Ａｒｇ　０．９７　（１）、Ａｓｘ １、　０４　（１）、Ｉｌｅ　Ｏ，９７（１，）、Ｌｅｕ　１．０４　（１）、 ＴｈｒＯ，９４（１）、Ｔｙｒ　０．９９　（１）、Ｖａｌ　１．０３　（１） 。

ＦＡＢ／ＭＳ・ＭＨ９４９ 実施例Ｖニドレオニルーアスパルチル−ロイシル−バリル−アラニル−イソロイ シル−グルタミン−アミド（配列番号＝９）ペプチドを、ＡＢＩ　４３１Ａ型ペ プチドシンセサイザーにおいて標準ＢＯＣソフトウェアのバージョン１．１２を 用いて製造した。４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（０，６６８ｇ、０．５ ミリモル）を合成において用いた。樹脂の最終重量はｉ、１２ｇであった。

ＨＦ　ＩＱｍＬおよびアニソール１ｍＬを０℃で６０分間用いて、ペプチドを樹 脂（１，０６ｇ）から開裂させた。樹脂をエーテルで洗浄し、そしてペプチドを ＴＦＡ　：　ＤＣＭの１：１溶液で抽出して粗ペプチド０．６１５ｇを生成した 。

粗ペプチド（４００ｍｇ）を、ヴイダクＣ−１８カラム（１５μ、５．　０ｘ２ ５ｃｍ）において０．　１％ＴＦＡ中８０％中上０ニトリルの０〜６５％勾配を 用いて１５ｍＬ／分の流速で１２０分間にわたって溶離する２００ｍｇの注入を ２回用いることによって精製した。画分を集め、高速液体クロマトグラフィーで 分析し、そして純粋な部分をプールし且つ凍結乾燥させて１１９ｍｇを生成した 。

アミノ酸分析＋Ａｌａ　０．９９　（１，００）、Ａｓｘ　１．０１　（１，０ ０）、Ｇｌｘ　１．　０１　（１，００）、Ｉｌｅ　０．　９６　（１，００） 、Ｌｅｕｌ、０１　（１，００）、Ｔｈｒ　Ｏ，９０（１，００）、Ｖａｌ　１ ．０３（１，，００）。

ＦＡＢ／’ＭＳ：ＩｖｌＨ７５８ 実施例ｖ１．ニフルミルートレオニルーアスバルチルーロイシルーバリルーアラ ニルーイソロイシルーグルタミンーアミド（配列番号、１０）ペプチドを、ＡＢ Ｉ　４３１Ａ型ペプチドシンセサイザーにおいて標準ＢＯＣソフトウェアのバー ジョン１．１２を用いて製造した。４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（０， ６２５ｍｇ、０．５ミリモル）を合成において用いた。樹脂の最終重量は１．０ ２６ｇであった。

ＨＦ　ＩＱｍＬおよびアニソール１．０ｍＬを０℃で６０分間用いて、ペプチド を樹脂（０，９４１ｇ）から開裂させた。樹脂をエーテルで洗浄し、そしてペプ チドをＴＦＡ：ＤＣＮ・１の１；１溶液て抽出して粗ペプチド３８１ｍｇを生成 した。

粗ペプチド（３８１ｍｇ）を、ヴイダクＣ−１８カラム（１５μ、５ｘ２５ｃｍ ）において０１％ＴＦＡ中８０％中上０ニトリルの２５〜７５％勾配を用いて１ ５ｍＬ／′分の流速で１２０分間にわたって溶離して精製した。両分を集め、高 速液体クロマトグラフィーで分析し、そして純粋な部分をプールし且つ凍結乾燥 させて４３ｍｇを生成した。

アミノ酸分析：、Ａｌａ　１．　０　（１）、Ａｓｘ　１．　ＣＢＩ）、Ｇｌｘ 　１．　０（１）、ｌｉｅ　Ｏ，９７（１）、Ｌｅｕ　１．’Ｊ、、０１　（１ ）、Ｔｈｒ　Ｏ，６５（１）、Ｖａｌ　１．０（１）。

ＦＡＢ／’ＭＳ：ＭＨ１０２３ 実施例Ｖ１１　チオベンンルンクロへキシルアセチル−グリシル−アスパルチル −ロイシル−バリル−アラニル−イソロイシル−グルタミン−アミド（配列番号 ：１１） ペプチドを、ＡＢＩ　４３１Ａ型ペプチドシンセサイザーにおいて標準ＢＯＣソ フトウェアのバージョン１．１２を用いて製造した。４−メチルベンズヒドリル アミン樹脂（０，６２５ｇ、０．５ミリモル）を合成において用いた。樹脂の最 終重量は１．０４ｇであった。

ＨＦ　１０ｍＬＸＤＬ−ＤＴＴ　Ｌ　Ｏｇおよびアニソール１ｍＬを０℃で６０ 分間用いて、ペプチドを樹脂（１，ＯＯｇ）から開裂させた。樹脂をエーテルで 洗浄し、そしてペプチドをＴＦＡ／ＤＣＭ　（１：　１、ｖ／ｖ）（３ｘ１５ｍ Ｌ）で抽出して粗ペプチド５１０ｍｇを生成した。

粗ペプチド（５００ｍｇ）を、ヴイダクＣ−１８カラム（１５μ、５ｘ２５ｃｍ ）において０．１％ＴＦＡ中Ｂ（８０％アセトニトリル）の３０〜８５％勾配を 用いて１．５ｍＬ／分の光速で１２０分間にわたって溶離して精製した。両分を 集め、高速液体クロマトグラフィーで分析し、そして純粋な部分をプールし且つ 凍結乾燥させて白色固体１２２ｍｇを生成した。

アミノ酸分析：Ａｌａ　１．００　（１）、Ａｓｘ　１．０１（１）、Ｇｌｘｌ 、０１　（１）、Ｇｌｙ　１．０１　（１）、ｌｉｅ　Ｏ，９７（１）、Ｌｅｕ ｌ、、００　（１）　、Ｖａ　ｌ　１．　００　（１）。

ＦＡＢ／ＭＳ　：ＭＨ９６０（Ｍ、Ｗ、９６０．２１）実施例ＶＩＩＩ：トレオ ニルーアスバルチルーロイシルーノくリルーアラニルーイソロイシルーグルタミ ニルーアスパラギニルーリンルーアスノ々ラギニルーグルタミン酸−アミド（配 列番号ニア） ペプチドを、ＡＢＩ　４３１Ａ型ペプチドンンセサイザーにおいて標準ＢＯＣソ フトウェアのバージョン１．１２を用いて製造した。４−メチルベンズヒト１ノ ルアミン樹脂（０，６２５ｇ、０．５ミリモル）を合成において用いた。樹脂の 最終重量は１．５９０ｇであった。

ＩＦ　１５ｍＬおよびアニソール１．５ｍＬを０℃で６０分間用いて、ペプチド を樹脂（１，５３７ｇ）から開裂させた。樹脂をエーテルで洗浄し、そしてペプ チドをＴＦＡ：ＤＣＭの１：１溶液で抽出して粗ペプチド１１７１ｍｇを生成し た。

粗ペプチド（９３５ｍｇ）を、ヴイダクＣ−１８カラム（１５μ、５ｘ２５ｃｍ ）において０，１％ＴＦＡ中８０％中上０ニトリルの１０〜５０％勾配を用いて １５ｍＬ／分の流速で１２０分間にわたって溶離して精製した。画分を集め、高 速液体クロマトグラフィーで分析し、そして純粋な部分をプールし且つ凍結乾燥 させて３１４ｍｇを生成した。

アミノ酸分析＋Ａ１ａ　１．０　（１）、Ａｓｘ　３．０６　（３）、Ｇｌｘｌ 、９９　（２）、ｌｉｅ　０．９７　（１）、Ｌｅｕ　１．０１　（１）、１ｙ ｓ１．０１　（］、）、Ｔｈｒ　０．９１　（１）、Ｖａｌ　０．９９　（１） 。

ＦＡＢ／ＭＳ：ＭＨ１２４３，６ 実施例■Ｘ：アスパルチルーロインルーバリルーアラニルーイソロイシルーグル タミルーアスパラギニルーリシルーアスパラギニルーグルタミン酸−アミド（配 列番号・６） ペプチドを、ＡＢＩ　４３ＬＡ型ペプチドシンセサイザーにおいて標準ＢＯＣソ フトウェアのバージョン１，１２を用いて製造した。４−メチルベンズヒドリル アミン樹脂（０，６２５ｇ、０．５ミリモル）を合成において用いた。樹脂の最 終重量は１．４１０ｇであった。

ＨＦ　１４ｍＬおよびアニソール１．４ｍＬを０℃で６０分間用いて、ペプチド を樹脂（］、、３３７５ｇから開裂させた。樹脂をエーテルで洗浄し、そしてペ プチドをＴＦＡ　：　ＤＣＭの１．１溶液で抽出して粗ペプチド７８９ｍｇを生 成した。

粗ペプチド（７８９ｍｇ）を、ヴイダクＣ−１８カラム（１５μ、２．　２ｘ２ ５ｃｍ）において０．１％ＴＦＡ中８０％中上０ニトリルの１０〜４５％勾配を 用いて１０ｍＬ／分の流速で６０分間にわたって溶離して精製した。画分を集め 、高速液体クロマトグラフィーで分析し、そして純粋な部分をプールし且つ凍結 乾燥させて２９４ｍｇを生成した。

アミノ酸分析：Ａｌａ　１．０１　（１）、Ａｓｘ　２．９９　（３）、Ｇｌｘ ２．０２（２）、ｌｌｅ　０．９７（１）、Ｌｅｕ　１．０１（１）、Ｌｙｓｌ 、０１　（１）、Ｖａｌ　１．０１　（１）。

ＦＡＢ／ＭＳ：ＭＨ１１４２，４ 実施例Ｉｘ：ロイシルーバリルーアラニルーイソロイシルーグルタミル−アスノ でラギニルーリシルーアスパラギニルーグルタミン酸−アミド（配列番号＝８） ペプチドを、ＡＢＩ　４３１Ａ型ペプチドシンセサイザー１こおｔ）で標準ＢＯ Ｃソフトウェアのバージョン１．１２を用いて製造した。４−メチルベンズヒト １ノルアミン樹脂（０，６２５ｇ、０．５ミリモルおよびＢｏｃ−Ｇｌｕ　（ｃ ＨｅＸ））を合成において用いた。樹脂の最終重量は１．２５ｇであった。

ＨＦ　１２ｍＬおよびアニソール１．２ｍＬを０℃で６０分間用（１で、ペプチ ドを樹脂（１２ｇ）から開裂させた。樹脂をエーテルで洗浄し、そしてペプチド をＴＦＡ／ＤＣＭ（１，１、ｖ／ｖ）（３ｘ１５ｍＬ）で抽出して粗ペプチド４ ５０ｍｇを生成した。

粗ペプチド（４５０ｍｇ）を、ヴイダクＣ−１８カラム（１５μ、１０ｘ３０（ ｍ）において０．１％ＴＦＡ中８０％中上０ニトリルの０〜４５％勾配を用（Ａ で１２０ｍＬ／分の流速で６０分間にわたって溶離して精製した。画分を集め、 高速液体クロマトグラフ忙で分析し、そして純粋な部分をプールし且つ凍結乾燥 させて白色固体３５０ｍｇを生成した。

アミノ酸分析：Ａｌａ　１．００　（１）、Ａｓｘ　２．０１　（２）、Ｇｌｘ ２．０３（２）、ｌｌｅ　Ｏ，９８（１）、Ｌｅｕ　１．０２（１）、ＬｙｓＯ ，９９（１）　、Ｖａ　ｌ　０．　９９　（１）。

ＦＡＢ／ＭＳ：ＭＨ１０２７，４ 配列表 （１）一般情報・ （１）出願人　ヒーヴナー・ジョーシ（Ｈｅａｖｎｅｒ、Ｇｅｏｒｇｅ）Δ。

ニブ７、−レオ：／　（Ｅｌ）Ｉ）Ｓ、Ｌｅｏｎ）タルスツインスキ・マリアン （Ｋｒｕｓｚｙｎｓｋｉ。

Ｍａｒｊａｎ） （１、発明の名称、セレクチン結合のペプチド阻害剤（ｉ　ｉ　ｉ）配列の数　 １１ （１の宛先 （Ａ）住所　ウッドコック・ウオシュノく−ン・カーラ・マキーヴイク゛ソ・ア ンド・ノリス（Ｗｏｏｄｃｏｃｋ　Ｗａｓｈｂｕｒｎ　ＫｕｒｔｚＭａｃｋｉｅ ｗｉｃｚ　＆　Ｎｏｒｒｉｓ）（Ｂ）地区、ワン・リバティー・ブレイス（Ｏｎ ｅ　ＬｉｂｅｒｔｙＰｌａｃｅ）　−４６階 （Ｃ）車名　フィラデルフィア ＣＤ）州名・ペンシルバニア （Ｅ）国名　米国 （Ｆ）郵便番号：１９１０３ （ｖ）コンピューター読取り形式 （Ａ）中型・フロッピーディスク （Ｂ）コンピューター・ＩＢｌｖｉＰＣ適合性（Ｃ）操作システム　ＰＣ−ＤＯ Ｓ／ＭＳ−ＤＯ８（Ｄ）ソフトウェア・パテントインリリース（Ｐａｔｅｎｔｌ ｎＲｅｌｅａｓｅ）　＃１．０、バージョン（Ｖｅｒｓｉｏｎ）＃１．２５（ｖ ｌ）現行出願資料・ （Ａ）出願番号　ＵＳ　８８９．６５０（Ｂ）出願日　１９９２年５月２８日 （Ｃ）分類。

（ｖｉｉｉ）弁理士／代理人情報： （Ａ）氏名、エルダーキン令ディアンヌ（Ｅｌｄｅｒｋｉｎ、Ｄｉａｎｎｅ）Ｂ 。

（Ｂ）登録番号：２３，５９８ （Ｃ）照会／事件整理番号　ＣＣＯＲ−００２２（ｉｘ）通信情報。

（Ａ）電話　２１５−５６８−３１００（Ｂ）ファクシミリ・２１５−５６８− ３４３９（Ｃ）テレックス：７１０−６７０−４３３４（２）配列番号　１の情 報。

（１）配列の特徴・ （Ａ）長さ・８アミノ酸 （Ｂ）種類二アミノ酸 （Ｃ）鎖：１本 （Ｄ）トポロジー、直鎖状 （ｉ　ｉ）分子種類　ペプチド （ｉ　ｉ　ｉ）仮説　なし くｉｘ）特色 （Ａ）名称／キー　修飾部位 （Ｂ）位置　８ （Ｄ）その他の情報：／標識＝１１ｅ−ＮＨ２／注記＝「カルボキン末端アミノ 酸ｌｉｅは、アミノ化されて０る。」 （ｘｉ）配列種類、配列番号、１゜ Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　ｖａｌ　Ａｌａ　Ｘａａ（２）配列 番号　２の情報・ （ｉ）配列の特徴・ （Ａ）長さ・９アミノ酸 （Ｂ）種類　アミノ酸 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ　ｉ）分子種類：ペプチド （４ｊ４）仮説：なし くＩＸ）特色・ （Ａ）名称／キー：修飾部位 （Ｂ）位置　９ （Ｄ）その他の情報：／欅識−１ｉｅ−ＮＨ２／注記＝「カルボキシ末端アミノ 酸１１ｅは、アミノ化されているの」 （ｘｉ）配列種類・配列番号、２・ Ａｓｎ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｘａａ（ ２）配列番号・３の情報 （１）配列の特徴・ （Ａ）長さ二８アミノ酸 （Ｂ）種類・アミノ酸 （Ｄ）トポロジー　直鎖状 （ｉ　ｉ）分子種類：ペプチド （ｉ　ｉ　ｉ）仮説、なし くＩＸ）特色 （Δ）名称／キー・修飾部位 （Ｂ）位置・８ （Ｄ）その他の情報、／標識−１１ｅ−ＮＨ２／庄記リヵルポキシ末端アミノ酸 ｌｉｅは、アミン化されている。Ｊ （ｘｉ）配列種類、配列番号：３゜ Ａｓｎ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ｘａａ（２）配列 番号、４の情報。

（ｉ）配列の特徴： （Ａ）長さニアアミノ酸 （Ｂ）種類二アミノ酸 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ　Ｄ分子種類：ペプチド （ｉｉｉ）仮説、なし く１ｘ）特色： （Ａ）名称／キー　修飾部位 （Ｂ）位置、７ （Ｄ）その他の情報：／標識＝Ｉ１．ｅ−ＮＨ２／注記＝「カルボキシ末端残基 ｌｉｅは、アミノ化されている。」（ｘｉ）配列種類：配列番号：４： Ｔｙｒ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｘａａ（２）配列番号：５ の情報。

（ｊ）配列の特徴： （Ａ）長さ、７アミノ酸 （Ｂ＞種類、アミノ酸 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ　ｉ）分子種類：ペプチド （ｉ　ｉ　ｉ）仮説、なし く１ｘ）特色： （Ａ）名称／キー・修飾部位 （Ｂ）位置ニア （Ｄ）その他の情報二／標識＝Ｖａ　１−ＮＨ２／注記＝「カルボキシ末端残基 Ｖａｌは、アミノ化されている。」（ｘ　ｉ）配列種類：配列番号：５： Ａｓｎ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｘａａ（２）配列番号二６ の情報・ （１）配列の特徴： （Ａ）長さ：１０アミノ酸 （Ｂ）種類　アミノ酸 （Ｄ）トポロジー・直鎖状 （白）分子種類・ペプチド （１肖）仮説：なし く１ｘ）特色二 （Ａ）名称／キー　修飾部位 （Ｂ）位置　１０ （Ｄ）その他の情報、／標識−Ｇｌｕ−ＮＨ２／′注記＝「カルボキシ末端残基 Ｇｌｕは、アミノ化されている。」（ｘｉ）配列種類　配列番号　６ Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ＾ｌａ　Ｉｌｅ　Ｇｌｎ　Ａｓｎ　Ｌｙｓ　Ａｓｎ　Ｘ ａａ（２）配列番号・７の情報。

（１）配列の特徴 （Ａ）長さ　１１アミノ酸 （Ｂ）種類　アミノ酸 （Ｄ）トポロジー　直鎖状 （１１）分子種類　ペプチド （ｉ　ｉ　ｉ）仮説　なし く１ｘ）特色 （Ａ）名称／′主キー修飾部位 （Ｂ）位置　１１ （Ｄ）その他の情報　／′標識−Ｇｌｕ−ＮＨ２／注記＝「カルボキシ末端残基 Ｇｌｕは、アミノ化されている。」（Ｘｌ）配列種類　配列番号　７ 計＾ｓｐ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｉｌｅ　Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ｌｙｓ　Ａｓｎ 　Ｘａａ１５１゜ （２）配列番号　８の情報： （１）配列の特徴： （Ａ）長さ、９アミノ酸 （Ｂ）種類・アミノ酸 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （１１）分子種類・ペプチド ＋ｊ　ｉ　ｉ）仮説・なし くｉｘ）特色・ （Ａ）名称／キー：修飾部位 （Ｂ）位置：９ （Ｄ）その他の情報：／標識−Ｇｌｕ−ＮＨ２／注記；「カルボキシ末端残基Ｇ ｌｕは、アミノ化されている。」（ｘｉ）配列種類、配列番号：８゜ Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　ｉｌｅ　Ｇｌｎ　Ａｓｎ　Ｌｙｓ　Ａｓｎ　Ｘａａ（ ２）配列番号：９の情報： （１）配列の特徴・ （Ａ）長さ、７アミノ酸 （Ｂ）種類二アミノ酸 （Ｄ）トポロン−直鎖状 （白）分子種類：ペプチド （ｉ　ｉ　ｉ）仮説、なし くｉｘ）特色。

（Ａ）名称／キー、修飾部位 （Ｂ）位置＝７ （Ｄ）その他の情報・／標識＝Ｇｌｎ−ＮＨ２／注記−［カルボキシ末端アミノ 酸Ｇｌｎは、アミン化されている（ｘｉ）配列種類：配列番号：９、 Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｉｌｅ　Ｘａａ（２）配列番号・１ ０の情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）長さニアアミノ酸 （Ｂ）種類・アミノ酸 （Ｄ）トポロジー　直鎖状 （１１）分子種類、ペプチド （ｉ　ｉ　Ｄ仮説、なし くｉｘ）特色： （Ａ）名称／キー：修飾部位 （Ｂ）位置＝１ （Ｄ）その他の情報−／標識−二フルミルーＴｈｒ／注記＝「ニフルミル基は、 アミノ末端残基Ｔｈｒに対して結合しくＡ）名称／キー　修飾部位 （Ｂ）位置・７ （Ｄ）その他の情報、／標識＝Ｇｌｎ−ＮＨ２／注記＝「カルボキシ末端残基Ｇ ｉｎは、アミノ化されている。」（ｘｉ）配列種類　配列番号、１０゜ Ｘａａ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｉｌｅ　Ｘａａ（２）配列番号、１ １の情報： （１）配列の特徴。

（Ａ）長さニアアミノ酸 （Ｂ）種類　アミノ酸 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ　ｉ）分子種類：ペプチド （ｉ　ｉ　ｉ）仮説：なし くｉｘ）特色： （Ａ）名称／キー：修飾部位 （Ｂ）位置：１ （Ｄ）その他の情報：／標識＝修飾Ｇｌｙ／注記＝「チオベンジルシクロへキシ ルアセチル基は、アミノ末端残基Ｇｌｙに対して結合している。」 （ｉｘ）特色： （Ａ）名称／キー：修飾部位 （Ｂ）位置ニア （Ｄ）その他の情報：／標識−Ｇｉｎ−ＮＨ２／注記＝「カルボキシ末端残基Ｇ ｉｎは、アミノ化されている。」（ｘｉ）配列種類：配列番号：１１： Ｘａａ　Ａｓｎ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｉｌｅ　Ｘａａ阻害％ フロントページの続き （７２）発明者　クルツインスキー、マリアンアメリカ合衆国ペンシルバニア州 １９３８２゜ウェスト・チェスター、ウェスト・チェスター・パイク　１１００ ．アパートメント・イ

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. １．式 Ｒ１−Ｗ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｘ−Ｒ２ （Ｉ） および Ｒ１−Ｙ−Ｅ−Ｆ−Ｇ−Ｈ−Ｚ−Ｒ２ （ＩＩ） （式中、ＷおよびＹは、０〜１０個のアミノ酸を有するＮ末端アミノ酸直鎖状配 列であり、そしてＲ１は、Ｗ若しくはＹの末端αアミノ基に対して、またはＷ若 しくはＹがそれぞれ０である場合はＡ若しくはＥのαアミノ基に対して結合した 残基であり； ＸおよびＺは、０〜１０個のアミノ酸を有するＣ末端アミノ酸直鎖状配列であり 、そしてＲ２は、Ｘ若しくはＺのカルボキシル炭素に対して、またはＸ若しくは Ｚがそれぞれ０である場合はＤ若しくはＨのカルボキシル炭素に対して結合した 残差であり； Ａは、Ｄ−若しくはし−チロシン、Ｄ−若しくはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−若 しくはＬ−リシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アルギニ ン、Ｄ−若しくはＬ−システイン、Ｄ−若しくはＬ−Ｏ−Ｒ３−チロシン、Ｄ− 若しくはＬ−Ｎα−Ｒ３−チロシン、Ｄ−若しくはＬ−４−アミノフェニルアラ ニン、Ｄ−若しくはＬ−Ｒ４−フェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−ナフチルア ラニン、Ｄ−若しくはＬ−ピリジルアラニンまたはＤ−Ｌ−テトラヒドロイソキ ニリンカルボン酸から成る群より選択されるアミノ酸であり、そこにおいて、Ｒ ３は低級アルキルまたはアリールであり、そしてＲ４はハロゲンであり；Ｂは、 Ｄ−若しくはＬ−トレオニン、Ｄ−若しくはＬ−リシン、Ｄ−若しくはＬ−グル タミン酸、Ｄ−若しくはＬ−システインまたはグリシンから成る群より選択され るアミノ酸であり； Ｃは、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−ヒスチジン、Ｄ−若 しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グ ルタミン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−フェニルアラニン、Ｄ −若しくはＬ−リシンまたはグリシンから成る群より選択されるアミノ酸であり ； Ｄは、Ｄ−若しくはＬ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しく はＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ−アレイソロイシン 、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸 、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミンまたはＤ−若し くはＬ−トレオニンから成る群より選択されるアミノ酸であり；但し、ＸはＪ− Ｋ−Ｌ−Ｚ′ではないという条件付きであり、そこにおいて、Ｊは、Ｌ−ロイシ ン、Ｄ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−しくはＬ−アラニ ン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ− 若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギンおよびＤ−若しく はＬ−グルタミン；Ｄ−若しくはＬ−トレオニン；並びにＤ−若しくはＬ−アロ イソロイシンから成る群より選択されるアミノ酸であり；Ｋは、Ｄ−若しくはＬ −ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しくはＬ−アラエン、Ｄ− 若しくはＬ−バリン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくは Ｌ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−しくはＬ−グルタミ ン、Ｄ−若しくはＬ−トレオニンおよびＤ−若しくはＬ−アロインロイシンであ り；Ｌは、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸および Ｄ−若しくはＬ−アスパラギンであり；そしてＺ′は、０〜７個のアミノ酸を有 する直鎖であり；Ｅは、Ｄ−若しくはＬ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイ シン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ− アロインロイシン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ −アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミ ンまたはＤ−若しくはＬ−トレオニンから成る群より選択されるアミノ酸であり ；Ｆは、Ｄ−若しくはＬ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若し くはＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ−アロインロイシ ン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン 酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミンまたはＤ−若 しくはＬ−トレオニンから成る群より選択されるアミノ酸であり；Ｇは、Ｄ−若 しくはＬ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しくはＬ−アラニ ン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ−アロインロイシン、グリシン、 Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しく はＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミンまたはＤ−若しくはＬ−トレ オニンから成る群より選択されるアミノ酸であり；Ｈは、グルタミン、Ｄ−グル タミン、グルタミン酸、Ｄ−グルタミン酸、アスパラギンまたはＤ−アスパラギ ンから成る群より選択されるアミノ酸であり；但し、ＹはＭ−Ｎ−Ｐ−Ｚ′′で はないという条件付きであり、そこにおいて、Ｍは、Ｄ−若しくはＬ−チロシン 、Ｄ−若しくはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−リシン、Ｄ−若しくは Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アルギニン、Ｄ−若しくはＬ−システイン 、Ｄ−若しくはＬ−４−アミノフェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−ナフチルア ラニン、Ｄ−若しくはＬ−ピリジルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−テトラヒドロイ ソキニリン、Ｄ−若しくはＬ−Ｏ−Ｒ３−チロシン、Ｄ−若しくはＬ−Ｎ２−Ｒ ３−チロシン、Ｄ−若しくはＬ−Ｒ４−フエニルアラニンであり、そこにおいて Ｒ３は低級アルキルまたはアリールであり、そしてＲ４はハロゲンであり；Ｎは 、Ｄ−若しくはＬ−トレオニン、Ｄ−若しくはＬ−リシン、Ｄ−若しくはＬ−グ ルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−システインおよびグリシンから成る群より選択さ れるアミノ酸であり；Ｐは、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ −ヒスチジン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン 、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ− フェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−リシンおよびグリシンから成る群より選択 されるアミノ酸であり；そしてＺ′′は、０〜７個のアミノ酸を有する直鎖状ア ミノ酸鎖である）を有するペプチドまたは薬学的に許容しうるその塩。
2. ２．式 Ｒ１−Ｗ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｘ−Ｒ２ （Ｉ） （式中、Ｗは、０〜１０個のアミノ酸を有するＮ末端アミノ酸直鎖状配列であり 、そしてＲ１は、Ｗの末端αアミノ基に対して結合した残基であり；Ｘは、０〜 １０個のアミノ酸を有するＣ末端アミノ酸直鎖状配列であり、そしてＲ２は、Ｘ のカルボキシル炭素に対して結合した残基であり；Ａは、Ｄ−若しくはＬ−チロ シン、Ｄ−若しくはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−リシン、Ｄ−若し くはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アルギニン、Ｄ−若しくはＬ−システ イン、Ｄ−若しくはＬ−Ｏ−Ｒ３−チロシン、Ｄ−若しくはＬ−Ｎα−Ｒ３−チ ロシン、Ｄ−若しくはＬ−４−アミノフェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−Ｒ４ −フェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−ナフチルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−ピ リジルァラニンまたはＤ−Ｌ−テトラヒドロイソキニリンカルボン酸から成る群 より選択されるアミノ酸であり、そこにおいて、Ｒ３は低級アルキルまたはアリ ートルであり、そしてＲ４はハロゲンであり；Ｂは、Ｄ−若しくはＬ−トレオニ ン、Ｄ−若しくはＬ−リシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ −システインまたはグリシンから成る群より選択されるアミノ酸であり； Ｃは、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−ヒスチジン、Ｄ−し くはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グル タミン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−フェニルアラニン、Ｄ− 若しくはＬ−リシンまたはグリシンから成る群より選択されるアミノ酸であり； Ｄは、Ｄ−若しくはＬ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しく はＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ−アレイソロイシン 、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸 、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミンまたはＤ−若し くはＬ−トレオニンから成る群より選択されるアミノ酸であり；但し、ＸはＪ− Ｋ−Ｌ−Ｚ′ではないという条件付きであり、そこにおいて、Ｊは、Ｌ−ロイシ ン、Ｄ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しくはＬ−アラ ニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ −若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギンおよびＤ−若し くはＬ−グルタミン；Ｄ−若しくはＬ−トレオニン；並びにＤ−若しくはＬ−ア ロインロイシンから成る群より選択されるアミノ酸であり；Ｋは、Ｄ−若しくは Ｌ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ −若しくはＬ−バリン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しく はＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グル タミン、Ｄ−若しくはＬ−トレオニンおよびＤ−若しくはＬ−アロインロイシン であり；Ｌは、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸お よびＤ−若しくはＬ−アスパラギンであり；そしてＺ′は、０〜７個のアミノ酸 を有する直鎖である）を有する請求項１に記載のペプチドまたはその薬学的に許 容しうる塩。
3. ３．式 Ｒ１−Ｙ−Ｅ−Ｆ−Ｇ−Ｈ−Ｚ−Ｒ２ （ＩＩ） （式中、Ｙは、０〜１０個のアミノ酸を有するＮ末端アミノ酸直鎖状配列であり 、そしてＲ１は、Ｙの末端αアミノ基に対して結合した残基であり；Ｚは、０〜 １０個のアミノ酸を有するＣ末端アミノ酸直鎖状配列であり、そしてＲ２は、Ｚ のカルボキシル炭素に対して結合した残基であり；Ｅは、Ｄ−若しくはＬ−ロイ シン、Ｄ−若しくはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ−若しく はＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ−アロインロイシン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ −グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラ ギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミンまたはＤ−若しくはＬ−トレオニンから成る 群より選択されるアミノ酸であり；Ｆは、Ｄ−若しくはＬ−ロイシン、Ｄ−若し くはＬ−イソロイシン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、 Ｄ−若しくはＬ−アロインロイシン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸 、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若し くはＬ−グルタミンまたはＤ−若しくはＬ−トレオニンから成る群より選択され るアミノ酸であり；Ｇは、Ｄ−若しくはＬ−ロイシン、Ｄ−若しくはＬ−イソロ イシン、Ｄ−若しくはＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−バリン、Ｄ−若しくはＬ −アロインロイシン、グリシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくは Ｌ−アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタ ミンまたはＤ−若しくはＬ−トレオニンから成る群より選択されるアミノ酸であ り；Ｈは、グルタミン、Ｄ−グルタミン、グルタミン酸、Ｄ−グルタミン酸、ア スパラギンまたはＤ−アスパラギンから成る群より選択されるアミノ酸であり； 但し、ＹはＭ−Ｎ−Ｐ−Ｚ′′ではないという条件付きであり、そこにおいて、 Ｍは、Ｄ−若しくはＬ−チロシン、Ｄ−若しくはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−若 しくはＬ−リシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−アルギニ ン、Ｄ−若しくはＬ−システイン、Ｄ−若しくはＬ−４−アミノフェニルアラニ ン、Ｄ−若しくはＬ−ナフチルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−ピリジルアラニン、 Ｄ−若しくはＬ−テトラヒドロイソキニリン、Ｄ−若しくはＬ−Ｏ−Ｒ３−チロ シン、Ｄ−若しくはＬ−Ｎ２−Ｒ３−チロシン、Ｄ−若しくはＬ−Ｒ４−フェニ ルアラニンであり、そこにおいてＲ３は低級アルキルまたはアリールであり、そ してＲ４はハロゲンであり）；Ｎは、Ｄ−若しくはＬ−トレオニン、Ｄ−若しく はＬ−リシン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン酸、Ｄ−若しくはＬ−システインお よびグリシンから成る群より選択されるアミノ酸であり；Ｐは、Ｄ−若しくはＬ −アスパラギン酸、Ｄ−若しくはＬ−ヒスチジン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン 酸、Ｄ−若しくはＬ−アスパラギン、Ｄ−若しくはＬ−グルタミン、Ｄ−若しく はＬ−アラニン、Ｄ−若しくはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−若しくはＬ−リシン およびグリシンから成る群より選択されるアミノ酸であり；そしてＺ′′は、０ 〜７個のアミノ酸を有する直鎖状アミノ酸鎖である）を有する請求項１に記載の ペプチドまたは薬学的に許容しうるその塩。
4. ４．Ｗが、ＡｒｇまたはＡｓｎ−Ａｒｇから成る群より選択される請求項１に記 載のペプチド。
5. ５．Ｒ１が、ニフルミル（α，α，α−トリフルオロ−ｍ−トルイジノ）−ニコ チニル）である請求項１に記載のペプチド。
6. ６．Ｙが、Ａｓｐ−ＬｅｕまたはＴｈｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕから成る群より選択さ れる請求項１に記載のペプチド。
7. ７．Ｚが、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｌｙｓ、Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ、Ａｓｎ−