JPH07508973A - 血中酸素親和性の抑制のためのヘモグロビンのアロステリック修飾剤の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 血中酸素親和性の抑制のためのヘモグロビンのアロステリック修飾剤の使用 関連出願参照 この特許出願は、１９９１年５月２０日出願で同時出願中の米国特許出願第０７ ／７０２，９４７号「保存血液の酸素親和性の抑制および酸素保持力の維持に有 効なアロステリックなヘモグロビン修飾剤」の一部継続出願である。

その出願も、１９９０年２月１２日出願の米国特許第５゜０４９．６９５号の一 部継続出願であった。この出願の主題は、また、１９９１年６月２６日の出願日 をもって出願中であって、１９９０年１２月７日出願の米国特許出願第０７／６ ２３，３４６号の一部継続出願である米国特許出願第０７／７２２．３８２号「 アロステリックなヘモグロビン修飾剤化合物」の一部継続である。上記三件の特 許出願および米国特許のすべての明細書本文をこの参照により本明細書に組み入 れる。

発明の背景 発明の技術分野 この発明は、概括的には、ヘモグロビンのアロステリック平衡を低酸素親和性状 態に調節するだめの一部の化合物の使用に関する。また、この発明は、酸素欠乏 を伴う疾病の治療、外傷の治療、および保存血液の酸素親和性の回復に使える一 部の化合物の使用を意図する。

ヘモグロビンはアロステリック機構を通じて酸素を放出する四量体タンパク質で ある。ヘモグロビン分子の四つのヘムに酸素が結合している。各ヘムはポルフィ リンおよび第二鉄状態の鉄を含む。第二鉄・酸素結合は高度に可逆的である。第 １の酸素分子のヘムへの結合は第２の酸素分子のそれに比べてずっと多量のエネ ルギーを必要とし、第３の酸素分子の結合はより少量のエネルギーで十分であり 、第４の酸素分子の結合には最も少量の酸素で十分である。

ヘモグロビンは２次対称配置の２つのαサブユニットおよび２つのβサブユニッ トを備える。α二量体およびβ二量体は酸素放出の期間中に回転し、中央部に大 きい水空洞を形成する。アルファ・ベータ二量体の運動を伴うアロステリック遷 移は、上記第３および第４の酸素分子の結合の間で生ずる。α１β１界面の結合 はα１α、界面またはα。

Ｒ２界面よりも強固である。

血液中において、ヘモグロビンは２つのアロステリック構造の間の平衡状態にあ る。「Ｔ」　（緊張）状態ではヘモグロビンはデオキシ型になる。「Ｒ」　（弛 緩）状態ではヘモグロビンはオキシ型になる。アミンコ　ヘモスキャン（ＡＭＩ ＮＣＯＴＭ　ＨＥＭ−０−３ＣＡＮ）など周知の装置を用いて酸素平衡状態曲線 を走査し、ヘモグロビンの酸素親和性および協同作用（アロステリック作用）の 度合を実測できる。この走査において、Ｙ軸にはヘモグロビンのオキシ型化の百 分比が表示され、Ｙ軸には酸素分圧がミリメートル水銀柱（ｍｍＨｇ）で表示さ れる。５０％酸素飽和点から走査曲線まで水平方向の直線を描き、これら水平直 線と曲線との交点から分圧表示のＹ軸まで垂直方向の直線を描くと、通常Ｐ、。

とじて知られる値が定まる（すなわち、走査にかけられたヘモグロビンの酸素飽 和度５０％のときのｍｍ）Ｉｇ表示の分圧である）。生理的条件（すなわち、３ ７”Ｃ，ｐＨ＝７．４、炭酸ガス分圧４０価Ｈｇ）の下では、正常な成人のヘモ グロビン（ＨｂＡ）のＰ、。値はおよそ２６．５ｍｍＨｇである。試験対象のヘ モグロビンについて正常値よりも低いＰ、。値が得られた場合は、走査曲線は「 左シフト」と考えられ、親和性の高いヘモグロビンの存在が示される。

逆に、試験対象のヘモグロビンについて正常値よりも高いＲ５゜値が得られた場 合は、走査曲線は「右シフト」と考えられ、親和性の低いヘモグロビンの存在が 示される。

ヘモグロビンのアロステリック平衡に影響を与えることは、疾病治療のための見 込みある手法として提案されてきた。ヘモグロビンの高親和性状態への変換は、 デオキシヘモグロビン−３（鐘状赤血球貧血症）に伴う問題の解決に有益である と一般にみなされている。ヘモグロビンの低親和性状態への変換は、局所貧血や 腫瘍の放射線治療など組織が低酸素緊張に陥る種々の疾病状態の治療に有用であ ると信じられている。ヘモグロビンおよびその他のタンパク質のアロステリック 作用の調整に有用ないくつかの合成化合物がすでにつきとめられている。例えば 、ヘモグロビンのアロステリック調整を伴う鐘状赤血球貧血治療用の新しい化合 物および新しい方法がエイプラムほか名義の米国特許第４．６９９，９２６号、 同第４，７３１，３８１号、同第４，７３１，４７３号、同第４，７５１．２４ ４号および同第４，８８７，９９５号に提案されている。また、フォータリー・ レビュー・オブ・バイオフィジックス（Ｑｕａｒ−ｔｅｒｌｙ　Ｒｅｖｉｅｗ　 ｏｆ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ）基環２２巻第２号（１９８９年）第１６３〜１６ ４頁所載のペルッッ（Ｐｅｒｕｔｚ）著の論文「タンパク質における協同作用お よびアロステリック調整の仕組（Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　Ｃｏｏｐｅｒａ ｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　Ａ１１ｏｓｔｅ−ｒｉｃ　Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ 　Ｐｒｏｔｅｉｎｓ）　Ｊおよびプロシーディンゲス・才プ・ナショナル・アカ デミ−・オブ・サイエンシズ・ニーニスエイ（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａ ｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ）第８５巻（１９８８年）第６１１７〜６１２１頁所載 のラレザリ（Ｌａｌｅｚａｒｉ）ほか著の論文「ヘモグロビンの酸素親和性、血 中コレステロールおよび低密度リポタンパク質に影響を及ぼす化合物ＬＲｌ　６ 　（ＬＰ０１　、　ａ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｗｉｔｈ　ｐｏｔｅｎｔｅｆｆｅｃ ｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｏｘｙｇｅｎ　ａｆｆｉｎｉｔｙ　ｏｆ　ｈｅｍｏｇｌｏ ｂｉｎ、ｏｎ　ｂｌｏｏｄｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ、　ａｎｄ　ｏｎ　ｌｏｗ　 ｄｅｎｓｉｔｙ　１ｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　）　Ｊの両方において、アロステリ ックなヘモグロビン修飾剤として効果のある化合物が検討されている。さらに、 ペルッッらは、周知のりボタンバク質過多血症治療薬ベザフィプレート（ｂｅｚ ａｆ　１ｂｒａｔｅ）がヘモグロビンの酸素親和性を低下させる効果をもつこと を示した（ランセット（Ｌａｎｃｅｔ）誌」９８３年第８８１頁所載の論文［（ ベザフィプレートがヘモグロビンの酸素親和性を低下させる（Ｂｅｚａｆｉｂｒ ａｔｅ　ｌｏｗｅｒｓ特表千７−５０８９７３　（６） ｏｙ；ｙｇｅｎａｆｆｉｎｉｔｙ　ｕｆ　ｌ＋ｅｍｏｇｌｏｂｉｎ）　Ｊ参照） 。

ＷｉｔＬｃ　ホか名義ノ独ＬｉＪ４’ｒ：ｌ’ｌ’出願第２，１４０，０７０号 および同第２，４３２．　５ＧＯ号には、この発明が明らかにする−１１の化ａ 物のい（っかと構造の類似した化合物が記載されている。しかし、１ｖｉｔＬｅ らのこれら特許出願はそれら化合物を漿液脂質レベルの抑制のために使うことを 意図している。ＷｉＬｌｅらの出願には、・それら「化合物がアロステリックな ヘモグロビン修飾剤として有用である可能性があることについては何ら示してい ない。

発明の要約 したがって、この発明の目的は酸素親和性の低い状態で血液中に存在するように ヘモグロビンをアロステリックに修飾する一部の化合物を使う方法を提Ｏ１：す ることである。

この発明のもう一つの目的は、特定の化合物ＩＴの中の化合物を血液に添加する ことによってその血液の保存期間を延長する方法をＩｊＭ（Ｊ（することである 。

この発明によると、アロステリックヘモグロビン（１飾化合物１１Ｔは次の横遣 式゛Ｃ定義される。すなわち、ここで、Ｒ１はフェニル、ナフチル、インダニル などの置換ずみもしくは未置換の芳香族、複素理工（芳香族、シクロヘギシル、 アダマンティルなとの置換ずみもしくは未置換のアリギル環化合物、または未置 換もしくは置換ずみのフタルイミド化合物であり、Ｘはカルボキシル基、Ｙは窺 素てあり、Ｒ２はＸおよびＹの両方に結合されてフタルイミド化合物を完結し、 また、ＸＳＹおよびＺはそれぞれＣＨ，、ＮＨ，Ｃｏ、０またはＮであってＸ、 ＹおよびＺ各部は互いに異なっており、また、Ｒ１は構造式を備え、ここて、Ｒ １はフェニル環のどの位置にも結合でき、Ｒ２およびＲ４は水素、ハロゲン、メ チルもしくはエチル基であってそれら基部分が同一でも互いに異なってもＲ２お よびＲ４を結合する脂肪族環の一部を成すアルキル基部分てもよく、Ｒ，は水素 、またはメチル、エチル、プロピルなどの低アルキル、またはすトリウム、カリ ウム、アンモニウムなどの塩陽イ′オンである。

この種の化合物は数多く合成され、ヘモグロビンのＰ、。

値に対するそれら化合物の影響が測定されてきた。試験対象となったそれら化α 物の各々がヘモグロビンの１〕、。値を増加させることが見出された。すなわち 、それら化合物はヘモグロビンのアロステリック平衡を低酸素親和性状態を助長 する秋懇の方へ変ｆヒさせることができるのである。また、これら化合物が、Ｉ Ｔｚ（Ｙ血液中のヘモグロビンの酸素解離の度合を長期間にわたり安定させるこ とも見出された。

さらに、これら化合物はマウスの腹膜内投与においてよく受容されることが見出 された。この発明が明らかにした化合物群の中の化合物はヘモグロビンのアロス テリック平衡を低親和性の「Ｔ」状態にシフトさせることができるので、これら 化合物はヘモグロビンに働らきかけて組織により多くの酸素を放出させる能力を 有する。したがって、この発明の化合物は、局所貧血防止剤、癌治療におけるＸ 線照射への増感剤または負傷治療剤として、また、アルツハイマー病、営病、精 神分裂病など脳内酸素供給不足関連の疾患の治療、血液代替物の製造および血液 の保存において有用になろう。

図面の簡単な説明 上述のおよびそれら以外の目的、側面および利点は、図面を参照して次に述べる この発明の好適な実施例の説明からよりよく理解されるであろう。

第１ａ図はこの発明において使われる化合物群の中のとくに好ましいグループを 定義する化学構造式を示し、第１ｂ図および第１ｃ図は第１ａ図で定義された群 の２つのサブセットを定義する化学構造式を示し、第２Ａ図および第２Ｂ図は、 上記化合物群の第１のグループの中の化合物を合成するための中間体として有用 な化合物の生成の反応式の形で配列した前駆化合物の化学構造式を示し、 第２Ｃ図は好ましい化合物群の第１のグループを生成する反応式の形で配列した 第２Ａ図および第２Ｂ図図示のとおり生成された中間体を含む化合物の化学構造 式を示し、第３図は好ましい化合物群の第２のグループを生成する反応式の形で 配列した化学構造式を示し、第４図は好ましい化合物群の第３のグループを生成 する反応式の形で配列した化学構造式を示し、第５Ａ図および第５Ｂ図は好まし い化合物群の第４のグループの中の化合物を合成するための中間体として有用な 化合物の生成の反応式の形で配列した前駆組成物の化学構造式を示し、 第５Ｃ図は上記化合物の第４のグループを生成する反応式の形で配列した第５Ａ 図および第５Ｂ図図示のとおり生成された中間体を含む化合物の化学構造式を示 し、第６Ａ図は好ましい化合物群の第３のグループの中の化合物を生成するため の反応式であって、第４図図示のものの代替の反応式の形で配列した化学構造式 を示し、第６Ｂ図は製造される化合物が一つのフェニル環にパラエニル環の置換 基の部分にメチル基でなくエチル基が存在するように前駆物質を選ぶこと以外は 第６Ａ図図示のものと同様の反応式の形に配置した化学構造式を示し、第７Ａ図 および第７Ｂ図は好ましい化合物群の第５のグループの中の化合物を生成する反 応式の形で配列した化学構造式を示し、 第８図は溶液中のヘモグロビンについてのＰ、。値の測定特表千７−５０８９７ ３　（７） 値を示す表であって、上記好ましい化合物群の中の化合物の各々の添加がヘモグ ロビンを低酸素親和性状態の方ヘアロステリツクに修飾した様子を示し、 第９図は、この発明が定義する化合物群の中の化合物のいくつかに曝された人間 の赤血球そのもの（ヘモグロビン溶液でなく）についてのｐｓｏ値の測定値が示 しであること以外は、第８図と同様の表であり、 第１Ｏ図はヘペス（ＨＥＰＥＳ）をバッファとして用いヘモスキャン酸素解離分 析器によりｐＨ７，４、上記化合物のある場合とない場合とで正常のヘモグロビ ンの５．４ミリモル溶液を試験して得られた酸素解離曲線を示すグラフであり、 第１１図は選ばれた化合物のある場合およびない場合における人間の血液そのも のについての酸素解離曲線を示す第１０図と同様のグラフであり、 第１２図は、ヘペス（ＨＥＰＥＳ）をバッファとして用いヘモスキャン酸素解離 分析器によりｐＨ７，４で天然のアロステリックなヘモグロビン修飾剤２．３− 二リン酸グリセリン酸塩を含む特定の化合物のある場合とない場合とで正常ヘモ グロビンの５．４ミリモル溶液を試験して得られた第１Ｏ図と同様の酸素解離曲 線を示すグラフであり、第１３図はアトゾル状で保存された人間の赤血球に対す る２−（４−（（（（３，５−ジメチルフェニル）アミノ）カルボニル）メチル ）フェノキシゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃ２゜Ｈ，、Ｎｏ、）の影響を示す 表であり、第１４図は包装された赤血球、新しい保存血液、および２−　（４− （（（（３，５−ジメチルフェニル）アミン）カルボニル）メチル）フェノキシ ゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃ２゜Ｈ，２Ｎｏ、）添加後の血液がそれぞれ放 出する酸素の百分比を示す棒グラフを示し、 第１５図は古くなった包装赤血球のＰ、。値が２−［４−（（（（３，５−ジメ チルフェニル）アミノ）カルボニル）メチル）フェノキシゴー２−メチルプロピ オン酸（Ｒ２Ｈ−１３と呼ばれる）で処理することにより変化することを示す表 であり、 第１６図はこの発明の範囲内の化合物のフタルイミド形式で生成するために用い る反応式における化学構造式であって、Ｒ５゜値の測定値によりこれら化合物が ヘモグロビンを低酸素親和性状態の方ヘアロステリツクに修飾したことが示され た反応式における化学構造式を示す。

好適な実施例の詳細な説明 図面、とくに第１ａ図〜第１ｃ図を参照すると、この発明において使用を意図し ているとくに好適な化合物の一般的構造式、ならびにこの構造式の第１および第 ２のサブセットがそれぞれ示しである。第１ａ図の一般構造式においてＸ部、２ 部１；ＩＣＨｔ　、Ｃｏ、ＮＨまたはｏて構成噛れ、７部はＣｏまたはＮＨて構 成される。ただし、Ｘ、ＹおよびＺ各部は互いに異なる構成を備える。また、Ｒ ７−Ｒ６は、水素、ハロゲン、置換ずみもしくは未置換の０１−、アルキル基（ 炭素３個までの長さ）、またはＣ１−、エステルもしくはエーテルで構成でき、 これら各部は同一でも互いに異なってもよく、互いに隣接するＲ１−Ｒ６部を含 む脂肪族環もしくは芳香族環のアルキル基部でもよい。Ｒ１−Ｒ１部は水素、ハ ロゲン、メチル、またはエチル基であり、各部は同一でも互いに異なってもよ（ 、Ｒ１およびＲ１を結合する脂肪族（すなわちシクロブチル）環の一部はアルキ ル基であってもよい。Ｒ，部は水素、またはハロゲン、またはメチルやエチルや プロピルなどのＣ＋−Ｓ低アルキル、またはナトリウム、カリウム、アンモニウ ムなどの塩陽イオンである。

Ｆｉｂ図で定義されている化合物の第」のサブセットにおいて、ＸおよびＺの各 々はＣＨ，、ＮＨまたは０で構成できる。ただし、ＸがＣＨ，のときＺはＮＨま たはＯであり、ＸがＮＨのとき２はＣＨ２または０であり、ＸがＯのときＺはＮ ＨまたはＣＨ２である。これら化合物の第１のサブセットは次の４つのグループ に便宜的に分類する。

グループＩ：第２Ｃ図に示した一般構造式をもつ２−〔４−（（アリル）アセト アミド）フェノキシ〕−２−メチルプロピオン酸化合物 グループ■、第３図に示した一般構造式をもつ２−（４−（（（アリル）オキシ ）カルボニル）アミノ）フェノキシ〕−２−メチルプロピオン酸化合物グループ ■・第４図および第６Ａ図に示した一般構造式をもつ２−（４−（（（アリル） アミノ）カルボニル）メチル）フェノキシ〕−２−メチルプロピオン酸化合グル ープ■：第５Ｃ図に示した一般構造式をもっ２−〔４−（（（アリル）アミノ） カルボニル）オキシ）フェノキシ〕−２−メチルプロピオン酸化合物第１ｃ図で 定義されている化合物の第２のサブセットにおいて、ＸおよびＺの各々はＣＯま たはＣＨｔで構成できる。ただし、ＸがＣＯのときＺはＣＨｔであり、ＸがＣＨ 。

のときＺはＣＯである。これら化合物の第２のサブセットは次の２つのグループ に便宜的に分類する。

グループ■：第７Ｂ図に示した一般構造式をもっ２−〔４−（（（アリルオイル ）アミノ）メチル）フェノキシュー２−メチルプロピオン酸化合物 グループ■：エイブラムほか名義の１９９０年１２月７日出願の出願中の米国特 許出願第０７／６２３，３４６号の主題である２−（４−（（（アリル）メチル ）アミノ）カルボニル）フェノキシュー２−メチルプロピオン酸化合物 第１Ａ図〜第１Ｃ図におけるＲ３〜Ｒ０置換基は第１Ａ図を参照して明らかにし たものと同じである。初めの５つの化合物グループの中の特定の化合物の合成は 第２図乃至第７図を参照した下記の例に示しである。グループ■の化合物の中の 特定の化合物の合成は、この参照により本明細書に組み入れたエイプラムほか名 義の同時出願中の米国特許出願第０７／６２３．３４６号に詳述しである。生成 された化合物はすへて薄層クロマトグラフィ（ＴＣＬ）にか特表千７−５０８９ ７３　（８） けて純度を点検し、構造解析はＮＭＲ，ＩＲ分光法、および元素分析によって行 った。

例１ 第２Ａ図は上記グループエの物質の生成における前駆物質として有用な化合物２ −（４−アミノフェノキシ）−２−メチルプロピオン酸を製造するための反応式 を示す。第２Ａ図の反応式に従って、微粉砕水酸化ナトリウム８グラム（ｇ）（ ０，２モル）を、アセトン２３ｇ（０，４モル）にｐ−アセトアミノフェノール ５．２８ｇ（０，０３５モル）を加えた懸濁液に添加した。この反応混合物を室 温で１／２時間にわたり撹拌した。次に、クロロホルム３．５８ｇ　（０，０３ モル）を３０分にわたり滴状添加した。この反応混合物を室温で一晩撹拌し、真 空中でアセトンを除去した。残留物を水（１０ｍ＃）に溶解させ、３７％塩酸（ ＭＣＩ）により酸化させ、２−（４−アセトアミノフェノキシ）−２−メチルプ ロピオン酸（５ｇ、収率６０％）の薄黄色の沈澱物ｍｐ６９〜７１°Ｃをメタノ ールからの結晶として生成した。

上記２−（４−アセトアミノフェノキシ）−２−メチルプロピオン酸１．１８ｇ （０，００５ミリモル）を１０％ＫＯ）（（６０ｒｎ１）溶液で１／２時間煮沸 した。次にこの溶液を冷却し、酢酸で酸化させ、２−（４−アミノフェノキシ） −２−メチルプロピオン酸０．６ｇ（収率６２％）を黄色がかった白色粉末ｍｐ ２１４−１６°Ｃを生成した。

’ＨＮＭＲ：　（ＤＭＳＯｄ、　＋Ｔｈ１Ｓ）δ６．６（ｍ、４Ｈ）　Ａｒ）Ｉ 、１．３５例２ 第２Ｂ図は２−（４−アミノフェノキシ）−２−メチルプロピオン酸生成のため のもう一つの反応式を示す。第２Ｂ図の反応式に従って、水酸化カリウム８ｇを 水３２ｍｊに溶解させ、その結果得られるＫＯＨ溶液を３％過酸化水素２８ｍ１ と混合する。このＫ　ＯＨ／　Ｈｔ　Ｏを溶液に２−（４−シアノフェノキシ） −２−メチルプロピオン酸１１．３ｇ（０，０５８モル）を徐々に添加し、反応 混合物を発熱とガス発生が止まるまで約１時間撹拌する。次に、この混合物を冷 却し濃塩酸で酸化する。上述の２−　（４−（カルボキシアミド）フェノキシフ −２−メチルプロピオン酸生成物が白色固体として得られる（９．８ｇ、収率７ ９％）。この生成物をエタノールから結晶させ純粋な白色結晶ｍｐ２０２−４° Ｃを生成する。

上記２−　（４−（カルボキシアミド）フェノキシフ−２−メチルプロピオン酸 ５．５７ｇ　（０，０２５モル）を、臭素４．４ｇ（０，０２５モル）および水 酸化ナトリウムＩ１ｇ（０，２５モル）を含む水冷却水溶液１００ｒｎｌに撹拌 しながら徐々に添加する。このようにして得られた溶液を７５°Ｃ（二２時間に わたり維持する。冷却ののちこの溶液を酢酸で酸化させると、所望の２＝（４− アミノフェノキシ）−２−メチルプロピオン酸生成物が４．０ｇ（収率８１％） の白色の沈澱物ｍｐ２１４−１６°Ｃとして得られる。この化合物は例１で生成 した生成物と同一である。

例３ 第２Ｃ図は上記グループＩの２−　（４−（アリルアセトアミド）フェノキシフ −２−メチルプロピオン酸を生成する一般反応式を示す。図示の反応式に従って 、２−（４−アミノフェノキシ）−２−メチルプロピオン酸Ｌ　ｇ（０，００５ モル）をＮａＯＨＯ，４１ｇ　（０，１モル）含有の水１０ｒｎｌに撹拌しなが ら溶解させる。この溶液にテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）５−中の塩化フェニル アセチル０．７９　ｇ（０，００５モル）を約１５分にわたり徐々に添加する。

この添加の完了時には、反応混合物のｐＨ値はアルカリ性を示すであろう（アル カリ性でなければ、アルカリ性確保のために２ＮＮａＯＨ数滴を添加する）。反 応混合物はひきつづき１時間にわたり撹拌しつづける。次にＴＨＦを真空中で蒸 発させ、さらに水５ｍｌで希釈化したのち濃塩酸により酸化させる。生成物はエ チルエーテル（２Ｘ２０１ｎｌ）で抽出し、水（３ｘ２０ｍｌ）で洗浄し、無水 Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４で乾燥させる。エーテル溶液に石油エーテルを加えると、上記 ２−〔４−（フェニルアセトアミド）フェノキシフ−２−メチルプロピオン酸生 成物０．９ｇ（収率５６％）が薄茶色の固体ｍｐ１７３−１７５°Ｃとして沈澱 する。

Ａｎａｌ　：Ｃ＋ｇＨ＋５ＮＯａ 計算値Ｃ６９，００Ｈ６，０７Ｎ　４．４７実測値Ｃ６８，８６Ｈ６，１４Ｎ　 ４．４２例４ 上述の例３の手順に従い、同例の塩化フェニルアセチルの代わりに塩化４−クロ ロフェニルアセチルＯ，ＯＳモルを用いた点が異なるだけである。この例では、 生成物（収率５７％）は２−　（４−（ｐ−クロロフェニルアセトアミド）フェ ノキシュー２−メチルプロピオン酸ｍｐ１６８−７１”ＣＡｒ！り、３．６（Ｓ 、２Ｈ，ｑ２）、１．４（Ｓ、６Ｈ，２Ｃｊｉ＊）Ａｎａｌ　：　Ｃｌ　ＩＨＩ 　ｌＮＯ４Ｃ１計算値Ｃ６２，１５Ｈ５，１７Ｎ　４．０２　Ｃ１１０，１２実 測値Ｃ６２，＋６　１（５，２５Ｎ　３．９８　Ｃ１１０，２５上述の合成のた めの塩化４−クロロフェニルアセチルは、塩化チオニル１．０７ｇ　（０，００ ９モル）に酢酸４−クロロフェニルＩｇ（０，００６モル）を加えた懸濁液を１ 時間にわたり撹拌しながら還流まで加熱することによって生成する。冷却後、過 剰の塩化チオニルを真空中で蒸発させ、塩化４−クロロフェニルアセチルが黄色 の油状生成物（Ｉｇ、収率８３％）として得られる。

例５ 第３図はグループ■の２−（４−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）フ ェノキシュー２−メチルプロピオン酸の生成のための一般反応式を示す。図示の 反応式に従って、ＴＨＦ３ｍｌにフェニルクロロフォルメート０．１５ｇ特表千 ７−５０８９７３　（９） （０，００１モル）を含有する溶液を、水１０ｍ１に２−（４−アミノフェノキ シ）−２−メチルプロピオン酸０．３　ｇ（０，００１モ／Ｉ、）および重炭酸 ナトリウム０．１７ｇ　（０，００２モル）を含有する水冷却溶液に徐々に添加 する。反応液を０°Ｃで１／２時間にわたり撹拌したのち室温で１時間にわたり 撹拌する。次にＴＨＦを真空中で除去し、水１０ｍ１を加える。次に反応液を濃 塩酸で酸化させ、エチルエーテル（２Ｘ２０ｍｊ）で抽出する。エーテル溶液は 水（３Ｘ２０ｉ）で洗浄し、無水Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４で乾燥させる。所望の生成物 、すなわち２−（４−（（（（フェニル）オキシ）カルボニル）アミノ）フェノ キシュー２−メチルプロピオン酸が石油エーテル添加のエーテル溶液から白色の 固体０．１５ｇ（収率３１％）ｍｐ１８３−５°Ｃとして沈澱する。

Ａｎａｌ　：　Ｃｌ７８１７０５Ｎ 計算値Ｃ６４，７６８５，３９Ｎ　４．４４実測値Ｃ６４，６５Ｈ５，４５Ｎ　 ４．４３例６ 上述の例５の手順に従い、同例のフェニルクロロフォルメートの代わりに４−ク ロロフェニルクロロフォルメート０．００１モルを用いた点が異なるだけである 。この例では、２−（４−（（（（１）−クロロフェニル）オキシ）カルボニル ）アミノ）フェノキシ〕−２−メチルプロピオン酸生成物が白色の沈澱物０．１ ５ｇ（収率２８％）ｍｐ１７９−８２°Ｃとして得られる。

Ａｎａｌ　：　Ｃ＋ｔＨ＋５ＯｓＮＣ１計算値Ｃ５８，３６Ｈ４，５７ＣＩ　１ ０．１５実測値Ｃ５８，１６Ｈ４，６８Ｃ１１０，３５例７ 第４図にグループ■の化合物の生成のための一般反応式を示す。図示の反応式に 従って、４−ヒドロキシフェニル酢酸（ＨＰＡＡ）５．２ｇ　（３４モル）を塩 化チオニル（ＳＯＣＩりの過剰分と還流まで１／２時間にわたり加熱する。次に 、反応液を冷却し、過剰５ＯＣ１２を真空中で除去する。残留物を還流キシレン ５０ｍ１中のアニリン６．３ｇ（６８ミリモル）と２時間にわたり反応させる。

次に、反応液を冷却し、稀釈ＨＣＩ、水および臭素で洗浄し、２Ｎ　ＮａＯＨ水 溶液により抽出する。化合物アルカリ層をエーテルで洗浄し、冷却し、酸化させ て、Ｎ−フェニル−４−ヒドロキシヘンシルアミド（ＣＩ４８Ｉ２ＮＯ！　’） ７ｇを中間生成物（収率９０％）ｍｐ１３８°Ｃとして生成する。

この中間生成物をアセトンおよび石油エーテルのｌ：２混合物から再結晶させ、 その一部１．１３ｇ（５ミリ？し）を、アセトン２０ｍｌ、　Ｎａ　ＯＨ２，７ ５ｇ、およびＣＨＣｌ。

１．２５ｍｊ’とした例１の手順を用いて１２時間にわたり〇−アルキル化する 。最終生成物は２−（４−（（（（フェニル）アミン）カルボニル）メチル）フ ェノキシュー２−メチルプロピオン酸（Ｃ，、Ｈ，、ＮＯ４）１．２ｇ　（収率 ７６％）ｍｐ１９８°Ｃである。

例８ アニリンの代わりに４−クロロアニリン８−６ｇ（６８ミリモル）を用いて例７ の手順を繰り返す。この例においては、中間生成物はＮ−（４−クロロフェニル ）−４−ヒドロキシベンジルアミド（Ｃ＋４Ｈ＋ｔＣＩＮＯｔ　）７．５ｇ　（ 収率８４％）ｍｐ１６３°Ｃである。この中間生成物１．３　ｇを０−アルキル 化して２−（４−（（（（４−クロロフェニル）アミノ）カルボニル）メチル） フェノキシュー２−メチルプロピオン酸（Ｃ１＠ＨＩＩＣ］　ＮＯ４）　０．８ ６　ｇ　（収率５０％）ｍｐ１９６°Ｃを生成する。

例９ ＨＰＡＡ２．６ｇ　（１７ミリモル）を用い、アニリンの代わりに３，４−ジク ロロアニリン５．６７ｇ（３５ミリモル）を用いて例７の手順を繰り返す。この 例では、中間生成物はＮ−（３，４−ジクロロフェニル−４−ヒドロキシベンジ ルアミド（ＣＩ４Ｈ３ＩＣＩ２　Ｎｏｚ　）である。この中間体１．４８ｇ（５ ミリモル）を０−アルキル化し、２−　（４−（（（３，４−ジクロロフェニル ）アミノ）カルボニル）メチル）フェノキシュー２−メチルプロピオン酸（Ｃ， 。

Ｈ，７Ｃ］ｔＮ○４）０．７６ｇ（収率４ｏ％）ｍｐ１７４°Ｃを生成する。

例ｌ０ ＨＰＡＡ２．６ｇ　（１７ミリモル）を用い、アニリンの代わりに３．５−ジク ロロアニリン５．７ｇ（３５ミリモル）を用いて例７の手順を繰り返す。この例 では、中間生成物はＮ−（３，５−ジクロロフェニル−４−ヒドロキシベンジル アミド（Ｃ，、Ｈ，、ＣＩｔ　Ｎｏ、）である。この中間生成物１．４８ｇ（５ ミリモル）を０−アルキル化して２−（４−（（（（３，５−ジクロロフェニル ）アミノ）カルボニル）メチル）フェノキシゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃ＋ ｓＨ＋ｉＣ１＊　ＮＯ４）　ｏ、　８　ｇ　（収率４２％）ｍｐ１３８°Ｃを生 成する。

例１１ ＨＰＡＡｏ、９５ｇ　（６ミリモル）、アニリンの代わりの３、　４．　５−ト リクロロアニリン２．６ｇ　（１２ミリモル）および還流キシレン２５ｍｔ’を 用いて例７の手順を繰り返す。

この例では中間生成物はＮ−（３，４，５−）ジクロロフェニル）−４−ヒドロ キシベンジルアミドである。アセトンｌ　ＯｍＮ、ＮａＯＨＯ，８２ｇおよびＣ ＨＣｌ、ｏ、ａ　７ｄを用いて上記中間生成物をＯ−アルキル化し、２−　（４ −（（（（３，４，５−トリクロロフェニル）アミノ）カルボニル）メチル）フ ェノキシゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃ＋＊Ｈ＋ａＣ１２ＮＯａ　）０．２７ ｇ　（収率４３％）ｍｐ１６０°Ｃを生成する。

例１２ ＨＰＡＡ５．０４　ｇ　（３２ミリモル）、アニリンの代わりの４−フルオロア ニリン６ｍｔ’（６４ミリモル）および還流キシレン２５ｍ１を用いて例７の手 順を繰り返す。この例で特表千７−５０８９７３　（１０） は中間生成物はＮ−（４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシベンジルアミド である。この中間生成物１．２２　ｇ（５ミリモル）を０−アルキル化して、２ −　（４−（（（（４−フルオロフェニル）アミノ）カルボニル）メチル）フェ ノキシゴー２−メチルプロピオン酸（ＣＩ−Ｈ＋　−ＦＮＯ，）０．７４　ｇ　 （収率４５％）ｍｐ１９８℃を生成する。

例１３ ＨＰ’ＡＡ５．０４　ｇ　（３２ミリモル）、アニリンの代わりの４−トリフル オロメチルアニリン８．０５ｍ１（６４ミリモル）および還流キシレン２５ｍ１ ’を用いて例７の手順を繰り返す。この例では中間生成物はＮ−（４−１−リフ ルオロメチルフェニル）−４−ヒドロキシベンジルアミドである。

この中間生成物１．５ｇ（５ミリモル）を用いて２−　（４−（（（（４−トリ フルオロメチルフェニル）アミノ）カルボニル）メチル）フェノキシゴー２−メ チルプロピオン酸（Ｃ＋ｓＨ＋ｓＦｔ　ＮＯ４）ｏ、ｓ５ｇ　（収率４４％）ｍ ｐ９７°Ｃを生成する。

例１４ ＨＰＡＡ５．０４　ｇ　（３２ミリモル）、アニリンの代わりの４−メチルアニ リン８ｇ（６５ミリモル）および還流キシレン２５ｍ１を用いて例７の手順を繰 り返す。この例では中間生成物はＮ−（４−メチルフェニル）−４−ヒドロキシ ベンジルアミドである。この中間生成物１．２ｇ（５ミリモル）を用いて２．− 　（４−（（（（４−メチルフェニル）アミノ）カルボニル）メチル）フェノキ シゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃ＋ｓＨ２＋ＮＯａ　）　０．９８　ｇ　（収 率６５％）ｍｐ　１６４°Ｃを生成する。

例１５ ＨＰＡＡ３．２６　ｇ　（２１ミリモル）、アニリンの代わりの３．５−ジメチ ルアニリン５．３ｍ１（４２ミリモル）および還流キシレン２５ｍ１を用いて例 ７の手順を繰り返す。この例では中間生成物はＮ−（３，５−ジメチルフェニル ）−４−ヒドロキシベンジルアミドである。この中間生成物１．２７ｇ（５ミリ モル）を用い、２−　（４−（（（（３，５−ジメチルフェニル）アミン）カル ボニル）メチル）フェノキシゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃ２゜Ｈ２，ＮＯ， ）１．１５ｇ（収率６８％）、ｍｐ８５°Ｃを生成する。あるいは参照により本 明細書に組み入れた独国特許出願第２．４３２．５６０号記載の手順をこの例１ ５の化合物の生成に用いることもできる。

例１６ ＨＰＡＡ５．０４　ｇ　（３２ミリモル）、アニリンの代わりの４−イソプロピ ルアニリン１　ＯｍＮ　（６４ミリモル）および還流キシレン２５ｍ１を用いて 例７の手順を繰り返す。この例では中間生成物はＮ−（４−イソプロピルフェニ ル）−４−ヒドロキシベンジルアミドである。半固体の高濃度・高粘性の液状の この中間生成物を用いて２−Ｃ４−（（（（４−イソプロピルフェニル）アミノ ）カルボニル）メチル）フェノキシゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃ２゜Ｈ２Ｓ Ｎ０．　）　１．　ｌ　ｇ　（収率６１％）ｍｐ＋４１°Ｃを生成する。

例１７ 第５Ａ図、５Ｂ、５Ｃ図を参照すると上記グループ■の化合物の生成のための反 応式が図示しである。第５Ａ図によると、アニリンまたはアニリン誘導体をホス ゲンと反応させ塩化カルバモイルを得ることができる。第５Ｂ図に従って、ヒド ロキノンを無水酢酸を用いてモノアセチル化する。次に、この生成物をアセトン 、ｃＨｃｔ＊およびＫＯＨを用いて０−アルキル化し、塩基を用いて加水分解す る。

第５Ａ、５Ｂ図の反応の生成物を第５Ｃ図の反応式に従って反応させ、グループ ■の２−（４−（（（アリルアミノ）カルボニル）オキシ）フェノキシ）〕−〕 ２−メチルプロピオンを生成する。

例１８ 例７において述へ第４図に示した反応式による代わりに、グループ■化合物は第 ６Ａ図図示の反応式によって生成することもできる。ＨＰＡＡ５．２ｇ　（３２ ミリモル）、アニリン６−３ｇ（６８ミリモル）およびメシチレン２５ｍ１を還 流状に加熱する。この還流混合物に五塩化リン０．７４　ｇ（８ミリモル）を添 加し、この還流状態をさらに２時間にわたり維持する。この反応混合物を次に冷 却し、希釈塩酸、水および臭素で洗浄し、２Ｎ水酸化ナトリウムＮａＯＨ水溶液 で抽出する。結合アルカリ層をエーテルで洗浄し、冷却し、酸化して固体のＮ− フェニル−４−ヒドロキシベンジルアミド（（、＋＊Ｈ＋２ＮＯｘ　）７ｇ　（ 収率９０％）ｍｐ１３８°Ｃを中間生成物として得る。この中間生成物をアセト ン・石油エーテルの１：２混合物から再結晶させ、その一部１．１３ｇ（５ミリ モル）を０−アルキル化する。Ｎ−フェニル−４−ヒドロキシベンザミド１．１ ３ｇ（５ミリモル）をアセトン２０ｍ１に加えた溶液に微粉砕した水酸化ナトリ ウム１．６ｇ（３０ミリモル）を添加する。この反応混合物を室温でひと晩撹拌 し、アセトンを真空中で除去する。残留物を水＊０ｒｎｌに溶解し、２Ｎ’ＨＣ １で酸化させ、薄黄色の固体を生成する。この固体を分離し、メタノールに溶解 し、木炭状にし、溶剤を蒸発させて、２−　（４−（（（（フェニル）アミノ） カルボニル）メチル）フェノキシ〕−２−メチルプロＬ：’ｔ”、を酸（Ｃ，＠ Ｈ，，ＮＯ，）１．２ｇ（収率７６％）ｍｐ１９８°Ｃを生成する。第６Ａ図図 示の手順の最終工程は、この酸を重炭酸ナトリウムと反応させてナトリウム塩に 変換する工程である。カリウムやアンモニウムなど他の塩陽イオンとの同様の反 応、またはエステルを形成する反応も利用できる。

例１９ 第６Ｂ図は第６Ａ図と同様の反応式を示し、４−ヒドロキシフェニル酢酸（ＨＰ ＡＡ）の代わりに３−ＨＰＡＡを前駆物質として用い最終化合物がバラ置換でな くメタ置換をもつ点だけ異なる。また、フェニル環の一つにおける基置換におい て、メチル位付与のためのアセトン（ジメチルケトン）との反応の代わりにエチ ル位付与のためのジエチルケトンとの反応を用いている。例示すると、３−ＨＰ Ａ特表千７−５０８９７３　（１１） Ａ　１．５ｇ（１０ミリモル）および４−クロロアニリン２．６ｇ（２０ミリモ ル）をメシチレン２０ｍｔ’に加えたものを還流状に加熱した。この還流状溶液 にｐｃＩｓ溶液０．３３ｇ（２，５５ミリモル）を徐々に添加して還流状を２時 間にわたり維持した。次にこの反応混合物を冷却し、上述の通りの手順にかけて ３−（（（４−クロロアニリノ）カルボニル）メチル〕フェノール２．２ｇ　（ 収率９ｏ％）を生成した。上述のとおり、３−（（（４−クロロアニリノ）カル ボニル）メチル〕フェノール１．２３　ｇおよび水酸化ナトリウム１．６ｇをア セトン１５ｍ１に加えて撹拌した水冷却混合物にクロロホルム（０，８ｍｊ）を 添加した。反応混合物を室温に戻れる状態にして撹拌をさらに１０時間継続した 。通常の手順により、２−　（３−（（（４−クロロアニリノ）カルボニル）メ チル）フェノキシフ−２−メチルプロピオン酸が低融点高粘着性の固体として生 成された（Ｃ，Ｈ。

ＣＩ、Ｎ分析により（Ｃ，、Ｈ，、ＣｌＮ０．　）と特定、ＮＭＲトンでな（ジ メチルケトンを上述の工程と同様に用いて、第６Ｂ図図示の構造式の酪酸（プロ ピオン酸でなく）を生成することもできる。

例２０ 第７Ａ図を参照すると、２−　（４−（アミノメチル）フェノキシフ−２−メチ ルプロピオン酸、すなわちグループ■化合物の生成の前駆物質として有用な化合 物の生成のための一般反応式が示しである。図示の反応式に従って、例２記載の とおり生成された２−〔４−シアノフェノキシュー２−メチルプロピオン酸２ｇ （９ミリモル）とエタノール２０ｍ１とを２５０　ｍｌ　Ｐａｒｒ水素化水素大 瓶た。この溶液を濃塩酸（３ｒｎｌ）で酸化させ、活性炭に含ませた１０％パラ ジウム（０，２ｇ、１０重量％）をこの混合物に添加した。

反応混合物をＰａｒｒ水素化装置に入れ、水素圧４５ｐｓｉで２時間にわたり振 りまぜた。次にこの混合物を濾過して触媒を除去し、濾液を真空中で濃縮した。

エーテルを加えることによって、所望の生成物の塩酸塩が光沢ある白色の結晶（ ２，１ｇ＋収率８７％）として沈澱した。

例２１ 第７Ｂ図はこの発明で用いるグループ■化合物の生成のための一般反応式を示す 。図の反応式に従って、ＴＨＦ（３ｍｅ）に塩化ベンゾイル０．１４ｇ（１ミリ モル）を加えた溶液を、水１０ｍ１に２−　（４−（、アミノメチル）フェノキ ンツー２−メチルプロピオシ酸０．２４ｇ（１ミリモル）およびＮａＯＨＯ，０ ８ｇ（２ミリモル）を加えた撹拌溶液に１５分間かけて添加した。塩化ベンゾイ ルの添加の完了後、この反応混合物を室温で１時間にわたり撹拌した。

次にＴＨＦを真空中て蒸発させた。残留物を酸化させると所望の化合物が油とし て得られ、これをエーテルにより抽出した。有機質層を水、臭素で洗浄し、無水 Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４で乾燥させた。これに石油エーテルを加えることによって、２ −（４−（（ベンゾイルアミノ）メチル）フェノキシフ−２−メチルプロピオン 酸（Ｃ，、Ｈ，、ＮＯ，）が白色の塩０．１５ｇ（収率４８％）ｍｐｌ’７６− １７９°Ｃとして沈澱した。

塩化ベンゾイルの代わりに塩化２−クロロベンゾイル（１ミリモル）を用いて例 ２１の手順を繰り返す。この例では、生成物（収率５８％）は２−　（４−（（ （２−クロロベンゾイル）アミノ）メチル）フェノキシフ−２−メチルプロピオ ン酸（ＣＩｓＨ＋５ＣＩＮＯ４）ｍｐ　１ａｓ−塩化ベンゾイルの代わりに塩化 ３−クロロベンゾイル１ミリモルを用いて例２１の手順を繰り返す。この例では 、生成物（収率５３％）は２−　（４−（（（３−クロロベンゾイル）アミノ） メチル）フェノキシフ−２−メチルプロピオン酸（Ｃ１ｓＨ＋ｓＣｌＮＯ４）　 ｍｐ　１４５−１４６°Ｃである。

例２５ 塩化ベンゾイルの代わりに塩化３．４−ジクロロベンゾイル１ミリモルを用いて 例２１の手順を繰り返す。この例では、生成物（収率５７％）は２−　［４−（ （（３，４−ジクロロベンゾイル）アミン）メチル）フェノキシ〕−２−メチル プロピオン酸（Ｃ＋５Ｈ２ｔｃ１＊　ＮＯ４）　ｍｐ１８６−１８９℃である。

例２６ 塩化ベンゾイルの代わりに塩化３．５−ジクロロベンゾイル１ミリモルを用いて 例２０の手順を繰り返す。この例では、生成物（収率４３％）は２−　（４−（ （（３，５−ジクロロベンゾイル）アミノ）メチル）フェノキシフ−２−メチル プロピオン酸（Ｃ＋ｗＨ＋１ＣＩ２ＮＯｎ　）ｍｐｌｌｏ−１１３℃である。

例２７ 塩化ベンゾイルの代わりに塩化３．　４．　５−）ジクロロベンゾイル１ミ９ この例では、生成物は２−　（４−　（　（　（３，４．５−トリクロロベンゾ イル）アミノ）メチル）フェノキシフ−２−メチルプロピオン酸（ＣＩＩＨｌｌ Ｃ　１　２　ＮＯ４　）ｍｐ　１　５　１−１５２℃である。

例１乃至２７は第１ａ図の一般的構造式で定義される化合物群の中のいくつかの 化合物の生成のための合成手順の概要を示している。より詳述に述べると、例１ 〜１９は第１ｂ図の構造式で定義されるサブセット内のグループＩ〜■化合物の 合成手順を開示し、例２０〜２７は第１ｃ図の構造式で定義されるサブセット内 のグループ■化合物の合成手順を開示する。エイプラムほか名義で同時出願中の １９９０年１２月７日出願の米国特許出願第０　７／６　２　３。

特表千７−５０８９７３　（１２） ３４６号は、第１ｃ図のＪｉ’ｉ造式で定義されたザブセット内のグループ■化 合物の合成手順を記載している。この発明で用いる化合物Ｉｆｆの中のこれら以 外の化合物も出発物質の変更により容易に合成できるものと理解されて然るべき である。上記化合物１１゛「の中の化合物はすべて同様の結合の形を備え、した がって、ヘモグロビンのアロステリック平衡を低親和性の「ＴＪ状悪を優位とす る方にシフトさせる効果をもつであろう。

この発明において沈用を意図している化合物の広い群は次の構造式で定義される 化合物を含む、すなわちここで、Ｒ２はフェニル、ナフチル、インダニルなどの 置換ずみもしくは未置換の芳香族、複素環式芳香族、シクロヘキシル、アダマン ティルなどの直換ずみもしくは未置換のアルギル環化合物、または未置換らしく は置換ずみのフタルイミド化合物であり、Ｘはカルボキシル基、Ｙは窒素であり 、Ｒ２はＸおよびＹの両方に結合されてフタルイミド化合物を完結し、またＸ， ＹおよびＺはそれぞれＣ　Ｈ　！、ＮＨ，Ｃｏ、０またはＮてあってＸ，Ｙおよ びＺ各部は互いに異なっており、また、Ｒ１は構造式を備え、ここでＲ１はフェ ニル環のどの位置にも結合でき、Ｒ３およびＲ４は水素、ハロゲン、メチルもし くはエチル基であってそれら基部分が同一でも互いに異なってもＲ３およびＲ４ を結合する脂肪族環の一部を成すアルギル基部分でもよく、Ｒ５は水素、または メチル、エチル、プロピルなとの低アル＝１’−ル、またはすトリウム、カリウ ム、アンモニウムなどのｊｕ　ｌ！Ａイオンである。この目的のため（こ、これ ら化合物は第１ａ図図示のものと同様の直換ずみのフェニルの代わりにＲ１にナ フチル基、アダマンティル基またはインダニル基を有し、上述の合成手順とほぼ 同一の合成手順を用いて生成されたものである。また、これら化合物に加えて第 １６Δ−１１３Ｉ３１３に示し、次の例２８に述べるようにフタルイミドと類似 の化合物を合成した。

例２８ 第１［ｉＡおよびＩＧＩ３図は２−（４−（（フタルアミド）Ｎ−メチル）フェ ノ；１゛・ソ〕ー２ーメチルプロピオン酸の生成のための代習合成手順を示す。

無水フタル酸０．　７　５　ｇ（５ミリモル）および２−（４−（（アミノ）メ チル）フェノキシ〕ー２ーメヂルブロピオン酸（第２Ｂ図参照）を、トリエチル アミン１ｔｎｎの介在により！・ルエン２５ｍ１に還流させた。水を共沸により 除去した。還流状態に４時間保ったのち、反応混合物を冷却し、トルエンを分離 し、上記手順にかけ、結晶状の白色残留物（収率９０％，ｍｐ１４９この発明の 化合物の生理学的効果を試験するために人間の血液をバージニア州すッチモノド 中央血液銀行から入手した。分離ヘモグロビンの抽出、クロマトグラフィ分析、 特性抽出のために発明者らが用いた方法は、「ジャーナル・才ブ・クロマトグラ フィ（Ｊ．ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）」基環３２巻（１９６８年） 第７２３頁所載のＤｏｚｙおよびｌｌｕｉｓｍａｎの論文の記載およびニューヨ ーク州マルセル　デツカ−（Ｍａｒｃｅｌ　Ｄｅｋｋｅｒ）社刊［ヘモグロビン のクロマトグラフィ」のＨ．　Ｊ．　５ｃｈｒｏｅｄｅｒおよびり．　Ｈ．　Ｊ ．　Ｈｕｉｓｍａｎの論文の記載のものと同一であり、これら文献をここで参照 して本明細書に組み入れる。正常ヘモグロビン（ＨｂＡ）の純度を、ジェルマン （Ｇｅｌｍａｎ）小量電気泳動室を用いてゲル電気泳動法により測定した。ヘモ グロビンの濃度は［クリニカル・ケミカル・アクタ（ＣＩｉｎ．　Ｃｈｅｍ．　 Ａｃｔａ．）Ｊ基環５巻第７１９−７２６頁（１９６０年）所載のＺｉｊｌｓｔ ｒａの論文および「ジャーナル・才ブ・クリニカル・ケミストリー・アンドクリ ニカル・バイオケミストリー（Ｊ．　Ｃｌ１ｎ．　Ｃｈｅｍ．　ＣＩ　ｉｎ．　 Ｂｉｏ−ｃｈｅｍ、）　Ｊ基環１９巻第５２１頁（１９８１年）所載のＺｉ　ｊ ｌｓｔｒａおよびＶａｎ　Ｋａｍｐｅｒの論文に記載のシアンメトヘモグロビン 法により測定した。これら論文はここに参照して本明細書に組み入れる。純化し たヘモグロビン溶液はすべて液体窒素中に保有した。試薬および緩衝剤は次の供 給元、すなわちフィッシャー　サイエンティフィック）（ＦｉｓｃｈｅｒＳｃｉ ｅｎｔｉｆｉｃ）　、シグマ　ケミカル　カンパ＝　（ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃ ａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ）　、およびファーマシア　アンド　リサーチ　ケミカル ズ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ　ａｎｄ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ。

Ｉｎｃ、　）から購入した。

酸素平衡曲線はトラベノル　ラボラトリーズ（ＴｒａｖｅｎｏｌＬａｂｏｒａｔ ｏｒｉｅｓ）から入手可能なアミンコ　ヘモスキャン（ＡＭＩＮＣＯ”　ＴＥＭ −０−３ＣＡＮ）酸素解離分析器により測定した。ＨｂＡは次のとおり生成した 。すなわち、非喫煙献血者からの全血２０ｍ１（バージニア州すッチモノド血液 銀行）をヘパリン処理した真空容器に導入した。

血液は直ちに氷詰めにしくメトヘモグロビン形成防止のため）だのち、遠心分離 機にかけ（２５００ｒｐｍで１０分間）、赤血球から血清ともみ皮様の外被を分 離した。遠心分離機処理の終了後に血清と外被とを吸引により除去し、血球を１ リツトルにつきエチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）４０ｍｇを含む０．９ ％ＮａＣ１液で３回洗浄し、さらに１リツトルあたりＥＤＴＡ　４０ｍｇを含む １．０％ＮａＣ１液で１回洗浄した。これら血球を、１リツトルあたりＥＤＴＡ ４０■を含む脱イオン水１乃至２分量を加えて溶解させる。

特表平７−５０８９７３　（１３） この混合物をときどき撹拌しながら３０分にわたりそのまま維持し、然るのち４ ℃で１０．００　Ｏｒｐｍで２時間にわたり遠心分離機にかけ残留ストローマを 除去した。上澄み液をセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）　Ｇ　−２５による ゲル濾過またはｐＨ８，６）リス緩衝剤（１リツトルあたりＥＤＴＡ４０■を含 む５０ミリモル）に対する透析によりさらに純化した。塩化ナトリウムを除去さ れたヘモグロビン溶液をトリス緩衝剤（ｐＨ８，６，５０ミリモル、１リツトル あたりＥＤＴＡ４０■含有）で予め平衡化したＤＥＡＥ−セファセル（Ｓｅｐｈ ａｃｅｌ）イオン交換樹脂（Ｓｉｇｍａ）によりクロマトグラフ分析にかけ、次 に、ＨｂＡ部分をｐＨ８，４トリス緩衝剤により溶出した。純粋なＨｂＡ部分く 電気泳動法により特定）を、交換緩衝剤としてヘペス（ＨＥＰＥＳ）緩衝剤（１ ５０ミリモル、ｐＨ７，４）を用いたシュライヒャー・ジュール（Ｓｃｈｅｉｃ ｈｅｒ　ａｎｄ　５ｃｈｕｅｌｌ）コロジオンバック装置により濃縮した。次に ヘモグロビン濃度を上記シアノメトヘモグロビン法により測定した。この段階に おけるヘモグロビン濃度は通常およそ３５ｇ％または５．５ミリモルであること が見出された。メトヘモグロビンの濃度は４℃で数日経過したのちでも５％以下 であることがわかった。

上記化合物はすべて重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ，）１当量を混合しくこの処 理によりカルボキシル酸部がナトリウム塩に変換される、第６Ａ図参照）、ヘペ ス（ＨＥＰＣ３）緩衝剤に溶解させて２０ミリモル溶液とした。酸素平衡曲線測 定にかける直前に、ヘモグロビンと上記化合物とをｌ：ｌの割合で混合（ヘモグ ロビン５０μｌに化合物５０μｌを加える）し、化合物濃度ｌＯミリモルのヘモ グロビン２．７５ミリモルとした。ヘモグロビン５０μｌをヘベス（ＨＥＰＥＳ ）緩衝剤５０μｌに加えて対照体を生成した。

第８図はＰ、。値の測定値と、Ｐ、。値の対照値と、合成化合物のいくつかで処 理した正常ヘモグロビンについての上記測定値対対照値比（ＰＩ。／ｐｇ。Ｃ） を示す。Ｐ、。対照値は生理的条件下の正常ヘモグロビンについての値よりも小 さいこと（例えば２６．５）、これはＰ、。値が溶液中のヘモグロビン（赤血球 の外）についてのものであることに起因することが注目される。この発明が定義 する化合物群の中に含まれる化合物の一つで処理したヘモグロビン試料はいずれ も、Ｐ、。対照値よりも高い化合物処理後Ｐ、。測定値を示した。この測定値変 化は、ヘモグロビンについてのアロステリック平衡が、これら化合物の介在によ って、低酸素親和性の「Ｔ」状態を優位とする方向ヘシフトしたことを示してい る。第８図の最下部に、「右シフト」アロステリックヘモグロビン修飾剤として 知られるベサフィプレート（ＢＺＦ）について１つの行（３４）が示しである。

新しく見出された［右シフト」アロステリックヘモグロビン修飾剤の場合と同様 に、ＢＺＦて処理したヘモグロビンはＲ５゜対照値よりも高いＰ、。測定値を示 した。第８図は測定対象のフェニル基置換化合物についての種々のＲｔ　Ｒ＝部 を示し、置換フェニル基をもたない化合物の場合はその化合物の名称をＲ，−Ｒ ，全部にわたって記入しである（例えば、ナフチル、アダマンチル、インダニル ）。Ｒ７−Ｒ，部は測定対象の各化合物についてメチル基であり、Ｒ，部はナト リウム陽イオン（測定前のＮａＨＣＯ＝処理に起因する）であった。上記化合物 群の中のこれら以外の化合物も同様の結合形態を備えるので（例えば、異なるＲ ２−Ｒ，部を有するもの）、それら化合物がＰ、。値に及ぼす影響も同じである と推測できる。第１６Ａ−１６Ｂ図および例２８で明らかにしたフタルイミド構 造は平均のＰ、。値（すなわち、化合物処理後ｐｓｏ測定値／ｐｓ。参照値）　 １．０８を示した。これは、ヘモグロビンについてのアロステリック平衡が、フ タルイミド化合物によって、ヘモグロビンの低酸素親和性「Ｔ」状態を優位とす る方向にシフトしたことを示している。

第９図はこれら化合物のいくつかが人間の赤血球（ＲＢＣ）そのものの中の正常 ヘモグロビンの酸素解離に及ぼす影響を示す。最初の行は人間のＲＢＣだけの対 照体について得られたＰ、。値を示す。その次の２行は、ＲＢＣを、２−　（４ −（（（（３，５−ジクロロフェニル）アミノ）カルボニル）メチル）フェノキ シフ−２−メチルプロピオン酸（Ｃ，、Ｈ，、Ｃ１，Ｎｏ４）（例１０に記載） または２−［４−（（（（３，５−ジメチルフェニル）アミノ）カルボニル）メ チル）フェノキシフ−２−メチルプロピオン酸（Ｃ，。Ｒ２，ＮＯ，）（例１５ に記載）とそれぞれ混合したときのＲ５゜値を示す。生理的条件の下で、これら 化合物で処理したＲＢＣそのものにおけるヘモグロビンのＰ、。値が処理を何ら 加えないヘモグロビンのＰｓ、値よりもずっと大きいことに注目されたい（例え ば例２７の対照体参照）。

また、２−　（４−（（（（３，５−ジメチルフェニル）アミノ）カルボニル） メチル）フェノキシフ−２−メチルプロピオン酸１ミリモルを介在させるとＰ、 。値が２７から３１に増加し、２−　（４−（（（（３，５−ジメチルフェニル ）アミノ）カルボニル）メチル）フェノキシ〕−２−メチルプロピオン酸２ミリ モルを介在させると４２に増加することが見出された。これらのデータは、これ ら化合物が赤血球膜を透過できること、およびヘモグロビンの酸素解離曲線に対 するこれら化合物の効果は漿液アルブミンには何ら左右されないことを証拠づけ るものである。第９図の次の２行２３および２４は行２１および２２で用いたの と同じの２つの化合物ｌＯミリモルでそれぞれ処理したＲＣＢそのものについて のＰ、。値を示す。ただし、この場合はＲＣＢを０．９％食塩水の２４０倍液で 洗浄しである。食塩水による洗浄後にみられるＰ、。値の比較的微小な減少は、 アロステリック効果が十分に維持されていることを示し、本発明において用いら れる化合物がヘモグロビンに対して高い結合親和性をもつことを示している。

第１Ｏ図は正常なヘモグロビンの５．４ミリモル溶液をｐＨ７，４てへペス（Ｈ ＥＰＥＳ）を緩衝剤として用い、ヘモスキャン（Ｈｅｍ−０−３ｃａｎ）酸素解 離分析器で分析した場合の酸素解離曲線を示すグラフである。上述のとおり、第 ８図に特表千７−５０８９７３　（１４） 表示したＰ、。値は第１０図に示したものと同様の曲線から決定したものである 。第１０図をとくに参照すると、酸素飽和百分比（縦軸にＳＯ７を示す）の酸素 分圧（横軸にＰＯ，を示す）に対する変化が描いである。曲線１はアロステリッ ク修飾剤のない場合の酸素解離曲線（ＯＤＣ）を示す。曲線２は、ベザフィプレ ート（既知の右シフト剤）１０ミリモルを等モルのＮａＨＣＯ＝で溶解したもの をヘモグロビンに添加したとき、ＯＤＣが右にシフトしたことを示す。曲線が右 向きに低酸素親和性状態にシフトすると、Ｐ、。値が増大することに注目された い。曲線３は、ヘモグロビンに２−（４−（（（（４−クロロフェニル）アミノ ）カルボニル）メチル）フェノキシゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃ，、Ｈ，、 ＣｌＮ０．）（例８に記載）の１０ミリモル濃縮を添加することによって生じた 右シフトを示す。曲線４は、ヘモグロビンに２−　（４−（（（（３，５−ジメ チルフェニル）アミノ）カルボニル）メチル）フェノキシゴー２−メチルプロピ オン酸（Ｃ，＠Ｈｔ２ＮＯ，’）（例１５に記載）の１０ミリモル濃縮を添加す ることによって生じた右シフトを示す。最後に、曲線５は、ヘモグロビンに２− （４−（（（（３，５−ジクロロフェニル）アミノ）カルボニル）メチノいフェ ノキシゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃ，ＩＨ，？ＣＩｔ　ＮＯ４）（例１０に 記載）のｌθミリモル濃縮を添加することによって生じた右シフトを示す。第１ Ｏ図に示した右シフト効果は、これらの化合物がヘモグロビンの酸素親和性を低 下させるのに使えることを示している。

第１１図は人間の全血のＯＤＣに対して特定の化合物の及ぼす効果を示す。第１ ０図と同様に酸素飽和百分比が酸素分圧に対してプロットしである。上述のとお り、第９図に表示したＰ、。値は第１１図に示したものと同様の曲線から決定し たものである。これら曲線については、人間の全合物溶液５０μｌとｐ　Ｈ７， ４で混合した。曲線１は処理を加えない全血の中のヘモグロビンのＯＤＣを示す 。曲線２および３は、２−　（４−（（（（３，５−ジメチルフェニル〉アミノ ）カルボニル）メチル）フェノキシゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃｔ。Ｈ，、 ＮＯ，）Ｃ例１５に記載）の１０ミリモル濃縮または２−　（４−（（（（３， ５−ジクロロフェニル）アミノ）カルボニル）メチル）フェノキシゴー２−メチ ルプロピオン酸（ＣＩｊＨＩ７ＣＩ２　Ｎｏ、）（例１Ｏに記載）の塩の全血中 ヘモグロビンに及ぼす右シフト効果をそれぞれ示す。

第１２図は第１Ｏ図について述べたのと同じやり方で作成したｐＨ７，４ヘペス （ＨＥＰＥＳ）緩衝剤中の人間のヘモグロビン（５，４ミリモル）のＯＤＣ曲線 を示す。第１０図および第１１図と同様に酸素飽和百分比を酸素分圧に対してプ ロットしである。曲線ｌはアロステリック修飾剤が全く介在しない場合の人間の ヘモグロビンのＯＤＣを示す。

曲線２および３は２−　（４−（（（（３，５−ジメチルフェニル）アミノ）カ ルボニル）メチル）フェノキシゴー２−メチルプロピオン酸（Ｃ，。Ｈ，、Ｎ０ ４）（例１５に記載）の１ミリモル濃縮および１０ミリモル濃縮が人間のヘモグ ロビンに及ぼす右シフト効果を示す。このように、この化合物はヘモグロビンを 低酸素親和性状態に変換する。曲線４は天然のアロステリックヘモグロビンエフ ェクターである２、３−ジフォスフォグリセレー）　（２，３−ＤＰＧ）Ｚ５ミ リモルの右シフト効果を示す。曲線５は２つのエフェクター、すなわち２−　（ ４−（（（（３，５−ジメチルフェニル）アミノ）カルボニル）メチル）フェノ キシラー２−メチルプロピオン酸ｌミリモルおよび２．３−ＤＰＧ２．５ミリモ ルの組合せ効果がいずれか一方のエフェクター単独の効果よりも大きいことを示 す。この相乗効果は、血液への化合物添加量を少量にするというように利用でき る。

第１３図は２−（４−（（（（３，５−ジメチルフェニル）アミノ）カルボニル ）メチル）フェノキシゴー２−メチルプロピオン酸（ＲＳＲ−１３と呼ばれる） が保存血液中のヘモグロビンの酸素親和性の保持に有用であることを示す。ＲＳ Ｒ−１３１ミリモルおよび２ミリモルを、標準のアドソル製剤で４０〜７０日間 ４°Ｃで保存されていた人間のＲＢＣ試料（包装血球）に添加した。第１３図に 見られるとおり、処理を加えないＯＤＣは時間の経過とともに左シフトしくＰ５ ゜値の減少により示される）、高酸素親和性状態へ変化する。保存血液の酸素親 和性の増加は２゜３−ＤＰＧ１１度の減少に起因する。４０日口の非処理試料の Ｐ、。値は３２に左シフトした。しかし、ＲＳＲ−１３１ミリモルで処理した試 料は比較的不変（Ｐｓ。＝９０）に留まり、ＲＳＲ−１３２ミリモルで処理した 試料は右シフトした（Ｐ％６＝４５）　。第１３図は、５０日自重６０日口のよ び７０日口の包装血球のＯＤＣに対するＲＳＲ−１３の濃度依存の同様の効果を 示す。解糖代謝のために、処理を加えない赤血球のｐＨ値は時間の経過とともに 、４０日口の試料の６．８５から７０日口の試料の６６というように低下する。

この現象が、処理なしで７θ日を経過した試料がボーア（Ｂｏｈｒ）効果下で４ ０日を経過した資料に比べてわずかに右シフトを示すことをおそらく説明するで あろう。

ＲＳＲ−１３で処理した赤血球のｐＨは処理なしの試料よりも一貫して小さかっ たが、このことはＲＳＲ−１３が解糖代謝の速度を有利な方向へ減少させている ことを示している。ＲＳＲ−１３はＲＢＣ安定度に対して悪影響をもたらさない 。このことは処理ずみの試料および未処理の試料の両方についてＲＢＣ数が一致 していることによって証拠づけられるとおりである。同様に、溶血の量も包装血 球の処理ずみ試料および未処理試料の両方について一致している。

第１４図は包装血球の放出する酸素の百分比ΔＹを示す。

酸素飽和値の変化ΔＹをヒルの方程式（Ｈｉｌｌ’　ｓ　ｅｑｕａｔｉｏｎ）に より（ストライア−（Ｓｔｒｙｅｒ）著「バイオケミストリー（Ｂｉｏｃｈｅｍ ｉｓｔｒｙ）　Ｊサンフランシスコ市フリーマンアノドカンバー＝−−（Ｆｒｅ ｅｍａｎ　ａｎｄ　Ｃｏ、　）　１９７５年刊、第４章第７１特表平７−５０８ ９７３　（１５） −９４頁に記載。なおこの記載をここに参照して本明細書に組み入れる）１００ から３０　ｔｏｒｒ、について計算した。

棒グラフｌは未処理包装赤血球に対応するΔＹ　（５９）を示す。棒グラフ２は 可能な最良のアドソル製剤状で４℃で４０日間保存した包装赤血球のΔＹ　（５ ０）を示す。棒グラフ３はＲＳＲ−１３（１ミリモル）で処理した４０日口の包 装赤血球のΔＹ（５８）を示す。包装赤血球の酸素放出量の減少（約１０％）が ＲＳＲ−１３ｔミリモルの添加によって補正されていることに注目されたい。

第１５図は、２−　（４−（（（（３，５−ジメチルフェニル）アミノ）カルボ ニル）メチル）フェノキシフ−２−メチルプロビオン酸（ＲＳＲ−１３）による 処理に伴って、古い包装赤血球のＰ、。値に生じる変化を示す。４０日口の５０ 日自重よび６０日口の赤血球５０μｌをＲＳＲ−１３５０μｍと混合して１ミリ モルおよび２ミリモルのＲＳＲ−１３濃縮を生成した。包装赤血球と緩衝剤とを １：１で混合して対照試料を生成した。図１５にみられるとおり、未処理試料の Ｐ５゜値はＲＳＲ−１３で処理した試料のそれよりも一貫して小さい。また、新 しい赤血球についての測定結果を４０日口の５０日自重よび６０日口の赤血球１ こついてのそれと比較すると、Ｐ、。値が日数の増加とともに急激に低下するこ とが示される。１ミリモルＲ３Ｒ−１３で処理した４０日口の５０日自重よび６ ０日口の赤血球試料のＰ５゜値は新しい赤血球についてのＰ、。値３８に匹敵す る。

これらの測定結果は、保存赤血球へのＲＳＲ−１３の添加により血球酸素親和性 が回復したことを示している。

この発明が考慮する化合物は、低酸素親和性ｒＴＪ状態を優位とする（第８およ び第９図のＰ、。値棒グラフの示すように平衡曲線を右シフトさせる）ようにヘ モグロビンをアロステリックに修飾できるので、これら化合物は癌や局所貧血な ど組織が低酸素緊張状態に陥る人間ほか哺乳動物の種々の疾患状態の治療に有用 であろう。バーストはか（Ｈｉｒｓｔ　ｅｔ　ａｌ）が［レディニージョン・リ サーチ（Ｒａｄｉａｔ。

Ｒｅｓ、）Ｊ基環１１２巻（１９８７年）第１６４頁に指摘しているとおり、循 環血液中のヘモグロビンの酸素親和性の低下が、腫瘍の放射線治療に有益である が示された。ヘモグロビンの酸素親和性の異常に高い患者にこれら化合物は投与 され得る。特定の条件として、胎児ヘモグロビンレベルが高いことにより態化し た新生児のヘモグロビン異常症および呼吸困難症候群やヘモグロビン／酸素の組 織への供給の減少（例えば、末梢血管疾患、冠状動脈閉塞、脳血管事故、組織移 植などの局所貧血状態における）などが挙げられる。これら化合物は血小板凝集 の抑制や血栓防止や外傷治療にも使用され得る。外傷治療には局所塗布が用いら れよう。また、これら化合物は、アルツハイマー病、億病、精神分裂病など脳の 酸素供給不足関連の疾患の治療に使用され得る。処理ずみの全血または赤血球の 輸血の前または同時にこれら化合物を患者に投与するのが望ましい。これは、血 液の投与の際に生ずる希釈化に起因するヘモグロビンの酸素親和性の大幅な変動 を避けるためである。

これら化合物は、全血または包装赤血球に、望ましくは保存の際にまたは輸血の 際に添加できる。これは、ヘモグロビンからの酸素の解離を容易にし、血液の酸 素配送能力を改善するためである。化合物の添加量は、血液１本（４７３ｍｌ） また包装赤血球１袋（２３５ｒｎｌ）あたり約５０■乃至Ｉｇとするのが好まし い。血液を保存すると、血液中のヘモグロビンが、２，３−ニリン酸グリセリド を失うことにより酸素親和性を高める傾向がある。上述のとおり、この発明の化 合物は、全血または包装赤血球の保存の際にみられるヘモグロビンの機能異常を 除去および／または防止する能力がある。全血または包装赤血球の分量への上記 化合物の添加は、保存前に化合物を配置しておいた溜め器具を用いた閉鎖系内で 行うこともでき、血液収集袋内の凝血防止剤に含めて行うこともできる。

投薬は経口により、または静脈注射もしくは腹膜内注射、または坐薬により肛門 経由で行うことができるが、分量および投薬方法は患者個人の感受性および治療 対象の疾患の状態によって変わる。マウスを用いた実験では、２−〔４−（（（ （３，５−ジメチルフェニル）アミノ）カルボニル）メチル）フェノキシ〕−２ −メチルプロピオン酸（Ｃ２゜Ｈ２２ＮＯ４）（例１５に記載）を１■／ｋｇ／ 日分量ずつ腹膜内注射で投与して良好に受容された。外傷の治療に用いる場合は 、患部に直接に局所的に塗布するのが有利である。また、輸血の前または進行中 同時に患者の体外でこれら化合物を血液と混合できる。これら化合物の投与は、 純粋な形または医薬品として受け入れられる製剤の形、すなわち適当な飲み薬、 接合剤などとして、または医薬品として受け入れられる基剤もしくはそれ以外の 誘導体として行うことができる。医薬品として受け入れられる製剤および基剤に は、注射可能な投薬形態および錠剤、カプセルなどの固体の投薬形態を生成する のに通常用いられる液体もしくは固体の材料も含まれるものと理解されたい。慣 用の緩衝剤や化合物等張化剤を含む注射用化合物の調製には水が用いられよう。

固体希釈剤および付形剤にはラクトース澱粉、慣用の壊変剤、コーティングなど が含まれる。

好適な実施例についてこの発明を説明してきたが、この発明が添付請求の範囲記 載の真意および範囲内の変形で実施できることは当業者に認められるであろう。

ＦＩＧ、　１ａ ＦＩＧ、　１ｂ ＦＩＧ、　１ｃ ＦＩＧ、　２Ａ ＦＩＧ、　６ｂ ＩＴＩＣＱ ｎＧ、　１１ ＰＯ２川ｍ１（９ ］二ＩＧ、　１３ ６０　３’ｌ　旬　４７ 新鮮　３８ フロントページの続き （８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＳＥ）、ＣＡ、ＪＰ （７２）発明者　マハラン、モナ アメリカ合衆国、ヴアージニア州　２１２１５、アレグザンドリア、ユニバーシ ティ　オブアレグザンドリア　スクール　オブ　ファーマシ−メディシナル　ケ ミストリーデパートメント （７２）発明者　メハンナ、アバメト アメリカ合衆国、マサチューセッツ州 ０１８９０、ウィンチェスタ−、ベッドフォードロード　１７ （７２）発明者　ランダート、ラムナラヤンアメリカ合衆国、ヴアージニア州　 ２３２２５、リッチモノド　エクスマウス　ドライブ

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. １．一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ２は置換ずみもしくは未置換の芳香族化合物、置換ずみもしくは未置換 のアルキル環化合物、または置換ずみもしくは未置換のフタルイミド化合物であ り、Ｘはカルボキシル、Ｙは窒素であり、Ｒ２はＸおよびＹの両方に結合されて フタルイミド化合物を完結させ、Ｘ、ＹおよびＺはＣＨ２、ＮＨ、ＣＯ、Ｏおよ びＮであって、Ｘ、ＹおよびＺ部分は互いに異なっており、Ｒ１は構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ１はフェニル環のどの位置にも結合でき、Ｒ２およびＲ４は水素、ハロ ゲン、メチル、またはエチル基であって、これら基部分は互いに同一でも、互い に異なっていても、Ｒ２およびＲ４を結合する脂肪族環の一部としてのアルキル 基部分でもよく、 Ｒ６は水素、ハロゲン、Ｃ１−２低アルキル、または塩陽イオンである 化合物にヘモグロビンを曝す工程を含みヘモグロビンをアロステリックに修飾す る方法。
2. ２．一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＸ、ＹおよびＺはＣＨ２、ＣＯ、ＮＨまたはＯであって、Ｘ、ＹおよびＺ 部分は互いに異なっており、Ｒ２−Ｒ６は水素もしくはハロゲン、置換ずみもし くは未置換のＣ１−３アルキル基、またはＣ１−２エーテルもしくはエステルで あり、これら基部分は互いに同一でも、互いに異なっていても、Ｒ２−Ｒ６結合 位置のうちの２つを組み入れる芳香族環または脂肪族環のアルキル基部分でもよ く、 Ｒ７−Ｒ８は水素、メチル、またはエチル基であって、これら部分は互いに同一 でも、互いに異なっていても、Ｒ７およびＲ８を結合する脂肪族環の一部として のアルキル基部分でもよく、 Ｒ９は水素もしくはハロゲン、置換ずみもしくは未置換のＣ１−３低アルキル、 または塩陽イオンである化合物にヘモグロビンを曝す工程を含みヘモグロビンを アロステリックに修飾する方法。
3. ３．一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ３−Ｒ６は水素、ハロゲン、置換ずみもしくは未置換のＣ１−３アルキ ル基、またはＣ１−３エーテルもしくはエステルであり、これら基部分は互いに 同一でも、互いに異なっていても、Ｒ３−Ｒ４結合位置のうちの２つをとり込む 芳香族環または脂肪族環のアルキル基部分でもよく、Ｒ１は構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ１はフェニル環のどの位置にも結合でき、Ｒ７およびＲ８は水系、ハロ ゲン、メチルまたはエチル基であり、これら基部分は互いに同一でも、互いに異 なっていても、Ｒ７およびＲ８を結合する脂肪族環の一部としてのアルキル基部 分でもよく、 Ｒ９は水素、ハロゲン、Ｃ１−３低アルキル、または塩陽イオンである 化合物にヘモグロビンを曝す工程を含みヘモグロビンをアロステリックに修飾す る方法。
4. ４．血液をその血液中のヘモグロビンが低酸素親和性状態に向かってアロステリ ックに修飾されるように処理する方法であって、一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ２は置換ずみもしくは末置換の芳香族化合物、置換ずみもしくは未置換 のアルキル環化合物、または置換ずみもしくは未置換のフタルイミド化合物であ り、Ｘはカルボキシル、Ｙは窒素、Ｒ２はＸおよびＹの両方に結合されてフタル イミド化合物を完結させるものであり、Ｘ、ＹおよびＺはＣＨ２、ＮＨ、ＣＯ、 ＯまたはＮであってこれらＸ、ＹおよびＺ部分は互いに異なっており、Ｒ１は構 造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ１はフェニル環のどの位置にも結合可能であり、Ｒ３およびＲ４は水素 、ハロゲン、メチルまたはエチル基であって、これら基部分は互いに同一でも、 互いに異なっていても、Ｒ２およびＲ４を結合する脂肪族環の一部としてのアル キル基部分でもよく、 Ｒ５は水素、ハロゲン、Ｃ１−３低アルキル、または塩陽イオンである 化合物に前記血液を曝す工程を含む血液処理方法。
5. ５．血液をその血液中のヘモグロビンが低酸素親和性状態に向かってアロステリ ックに修飾されるように処理する方法であって、一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＸ、ＹおよびＺはＣＨ２、ＣＯ、ＮＨまたはＯであって、Ｘ、ＹおよびＺ 部分は互いに異なっており、Ｒ、−Ｒ４は水素もしくはハロゲン、置換ずみもし くは未置換のＣ１−３アルキル基、またはＣ１−３エーテルもしくはエステルで あって、これら部分は互いに同一でも、互いに異なっていても、Ｒ２−Ｒ４結合 位置の二つを組み入れる芳香族環もしくは脂肪族環のアルキル基部分でもよく、 Ｒ７−Ｒ８は水素、メチルまたはエチル基であって、これら基部分は互いに同一 でも、互いに異なっていても、Ｒ７およびＲ８を結合する脂肪族環の一部として のアルキル基部分でもよく、 Ｒ９は水素、ハロゲン、置換ずみもしくは未置換のＣ１−３低アルキル、または 塩陽イオンである 化合物に前記血液を曝す工程を含む血液処理方法。
6. ６．血液をその血液中のヘモグロビンが低酸素親和性状態に向かってアロステリ ックに修飾されるように処理する方法であって、一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ２−Ｒ６は水素もしくはハロゲン、置換ずみもしくは未置換のＣ１−２ アルキル基、または１−３エーテルもしくはエステルであって、これら基部分は 互いに同一でも、互いに異なっていても、結合位置Ｒ３−Ｒ４の２つを組み入れ る芳香族環もしくは脂肪族環のアルキル基部分であってもよく、 Ｒ１は構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ１はフェニル環のどの位置にも結合可能であり、Ｒ７およびＲ８は水素 、ハロゲン、メチル、またはエチル基であって、これら基部分は互いに同一でも 、互いに異なっていても、Ｒ７およびＲ８を結合する脂肪族環の一部としてのア ルキル基部分でもよく、 Ｒ■は水素、ハロゲン、Ｃ１−２低アルキル、または塩陽イオンである 化合物に前記血液を曝す工程を含む血液処理方法。
7. ７．一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ２は置換ずみもしくは未置換の芳香族化合物、置換ずみもしくは末置換 のアルキル環化合物、または置換ずみもしくは未置換のフタルイミド化合物であ り、Ｘはカルボキシル、Ｙは窒素であり、Ｒ２はＸおよびＹの両方に結合されて フタルイミド化合物を完結させ、Ｘ、ＹおよびＺはＣＨ２、ＮＨ、ＣＯ、Ｏまた はＮであって、Ｘ、ＹおよびＺ部分は互いに異なっており、Ｒ１は構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ１はフェニル環のどの位置にも結合でき、Ｒ３およびＲ４は水素、ハロ ゲン、メチル、またはエチル基であって、これら基部分は互いに同一でも、互い に異なっていても、Ｒ３およびＲ４を結合する脂肪族環の一部としてのアルキル 基部分でもよく、 Ｒ５は水素、ハロゲン、Ｃ１−３低アルキル、または塩陽イオンである 化合物に保存すべき血液を曝す工程を含む血液保存方法。
8. ８．一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＸ、ＹおよびＺはＣＨ２、ＣＯ、ＮＨまたはＯであって、Ｘ、ＹおよびＺ 部分は互いに異なっており、Ｒ２−Ｒ６は水素もしくはハロゲン、置換ずみもし くは未置換のＣ１−３アルキル基、またはＣ１−３コエーテルもしくはエステル であって、これら基部分は互いに同一でも、互いに異なっていても、Ｒ２−Ｒ６ 結合位置のうちの２つを組み入れる芳香族環または脂肪族環のアルキル基部分で もよく、 Ｒ７−Ｒ８は水素、メチルまたはエチル基であって、これら部分は互いに同一で も、互いに異なっていても、Ｒ７およびＲ８を結合する脂肪族環の一部としての アルキル基部分でもよく、 Ｒ９は水素もしくはハロゲン、置換ずみもしくは未置換のＣ１−３低アルキル、 または塩陽イオンである化合物に保存すべき血液を曝す工程を含む血液保存方法 。
9. ９．一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ２−Ｒ４は水素、ハロゲン、置換ずみもしくは未置換のＣ１−２アルキ ル基、またはＣ１−３エーテルもしくはエステルであり、これら基部分は互いに 同一でも、互いに異なっていても、Ｒ３−Ｒ４結合位置のうちの２つを組み入れ る芳香族環または脂肪族環のアルキル基部分でもよく、 Ｒ１は構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ１はフェニル環のどの位置にも結合でき、Ｒ７およびＲ■は水素、ハロ ゲン、メチル、またはエチル基であって、これら基部分は互いに同一でも、互い に異なっていても、Ｒ７およびＲ■を結合する脂肪族環の一部としてのアルキル 基部分でもよく、 Ｒ９は水素、ハロゲン、Ｃ１−３低アルキル、または塩陽イオンである、 化合物に保存すべき血液を曝す工程を含む血液保存方法。
10. １０．赤血球の酸素親和性を回復させる方法であって、赤血球をある期間にわた り保存する工程と、前記赤血球を、一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ２は置換ずみらしくは未置換の芳香族化合物、置換ずみもしくは未置換 のアルキル環化合物、または置換ずみもしくは未置換のフタルイミド化合物であ り、Ｘはカルボキシル、Ｙは窒素であり、Ｒ２はＸおよびＹの両方に結合されて フタルイミド化合物を完結させ、Ｘ、ＹおよびＺはＣＨ２、ＮＨ、ＣＯ、Ｏまた はＮであって、Ｘ、ＹおよびＺ部分は互いに異なっており、Ｒ１は構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ１はフェニル環のどの位置にも結合でき、Ｒ３およびＲ４は水素、ハロ ゲン、メチル、またはエチル基であって、これら基部分は互いに同一でも、互い に異なっていても、Ｒ３およびＲ４を結合する脂肪族環の一部としてのアルキル 基部分でもよく、 Ｒ５は水素、ハロゲン、Ｃ１−３低アルキル、または塩陽イオンである 化合物に曝す工程と を含む方法。
11. １１．赤血球の酸素親和性を回復させる方法であって、赤血球をある期間にわた り保存する工程と、併記赤血球を、一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＸ、ＹおよびＺはＣＨ２、ＣＯ、ＮＨまたはＯであって、Ｘ、ＹおよびＺ 部分は互いに異なっており、Ｒ２−Ｒ６は水素もしくはハロゲン、置換ずみもし くは未置換のＣ１−３アルキル基、または１−２エーテルもしくはエステルであ り、これら基部分は互いに同一でも、互いに異なっていても、Ｒ２−Ｒ６結合位 置のうちの２つを組み入れる芳香族環または脂肪族環のアルキル基部分でもよく 、 Ｒ７−Ｒ８は水素、メチル、またはエチル基であって、これら部分は互いに同一 でも、互いに異なっていても、Ｒ７およびＲ８を結合する脂肪族環の一部として のアルキル基部分でもよく、 Ｒ９は水素もしくはハロゲン、置換ずみもしくは未置換のＣ１−３低アルキル、 または塩陽イオンである化合物に曝す工程と を含む方法。
12. １２．赤血球の酸素親和性を回復させる方法であって、赤血球をある期間にわた り保存する工程と、前記赤血球を、一般構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ３−Ｒ６は水素、ハロゲン、置換ずみもしくは未置換のＣ１−３アルキ ル基、またはＣ１−２エーテルもしくはエステルであり、これら基部分は互いに 同一でも、互いに異なっていても、Ｒ３−Ｒ４結合位置のうらの２つを組み入れ る芳香族環または脂肪族環のアルキル基部分でもよく、 Ｒ１は構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を備え、 ここでＲ１はフェニル環のどの位置にも結合でき、Ｒ７およびＲ８は水素、ハロ ゲン、メチルまたはエチル基であり、これら基部分は互いに同一でも、互いに異 なっていても、Ｒ７およびＲ■を結合する脂肪族環の一部としてのアルキル基部 分でもよく、 Ｒ９は水素、ハロゲン、Ｃ１−２低アルキル、または塩陽イオンである 化合物に曝す工程と を含む方法。