JPH0761945B2 - 癌細胞転移抑制剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、ノジリマイシン，ノジリマイシン亜硫酸付加
物，ノジリマイシンB,ノジリマイシンＢ亜硫酸付加物の
癌細胞抗転移作用による癌細胞転移抑制剤に関する。

〔従来の技術〕

従来の制癌剤は悪性細胞を活性物質の有する殺細胞性或
いは人の免疫系を介して死滅させる活性物質を成分とす
る薬剤が主体であった。この種の薬剤は現在多く研究さ
れ、臨床に用いられているものも有る。しかし癌の治療
に対して未だ充分なものとは言えない。また、固型癌に
関しては外科手術或いは放射線による治療も数多く行わ
れている。これらの現行の種々の療法の有効性は癌細胞
の転移を抑制することで、更に高められる事が期待され
ているが、抗転移を作用の主体とする物質は数少なく、
臨床で本格的に用いられているものは皆無である。

〔発明が解決しようとする課題〕

本発明は癌の治療を有効、適切に行うに使用する癌細胞
の転移を顕著に抑制する物質を見出し、これを有効成分
とする癌細胞転移抑制剤を提供することを目的とするも
のである。

〔課題を解決するための手段〕

癌の転移は（イ）癌細胞の原発巣からの遊離、（ロ）脈
管内への播種、（ハ）毛細血管での停滞，栓塞等を経て
標的組織内へ到達し増殖を開始するプロセスである。

本発明者らは、この癌の転移の抑制作用を評価する実験
評価系を組み、この実験評価系により下記一般式（Ｉ）
で示されるノジリマイシン，ノジリマイシン亜硫酸付加
物，ノジリマイシンB,ノジリマイシンＢ亜硫酸付加物が
極めて優れた癌細胞転移抑制作用を有することを見出し
本発明を完成した。

本発明は一般式 〔式中Ｚは−OH又は−SO₃H基を表し、R₁,R₂はいずれか
一方が水酸基で他方が水素原子を表す〕で示されるノジ
リマイシン（５−アミノ−５−デオキシ−Ｄ−グルコピ
ラノース），ノジリマイシン亜硫酸付加物，ノジリマイ
シンＢ（５−アミノ−５−デオキシ−Ｄ−マンノピラノ
ース），ノジリマイシンＢ亜硫酸付加物を有効成分とす
る癌細胞転移抑制剤である。

本発明の有効成分である一般式（Ｉ）で表される当該化
合物は公知である。

ノジリマイシンは、本発明者らにより見出された放線菌
〔ストレプトミセス ラベンジュレ（Streptomyces lav
endulae SF−425）の生産する発酵代謝産物である（特
公昭43−760号公報,J.Antibiotics20巻 66〜71頁,1967
年参照）。その化学構造は５−アミノ−５−デオキシ−
Ｄ−グルコピラノースであり（Tetrahedron23巻,2125〜
2144頁,1968年参照）、いわゆるヘテロ糖（hetero suga
r）として天然界より初めて単離された化合物である。
その亜硫酸付加物は安定な結晶形で存在するため、発酵
液よりの採取，保存，その他の用途にあたって有利な形
態である（明治製菓株式会社 研究年報13巻,80〜84頁,
1973年、J.Antibiotics38巻,116〜117頁,1985年参
照）。

ノジリマイシンＢはノジリマイシン亜硫酸付加物の結晶
母液よりその溶解度の差を利用して採取された化合物で
あり、その構造式は５−アミノ−５−デオキシ−Ｄ−マ
ンノピラノースである（特公昭58−9676号公報、J.Anti
biotics37巻,1579〜1586頁,1984年参照）。

また、１−デオキシノジリマイシンは本発明者らによっ
て放線菌の代謝産物である上記ノジリマイシン（特公昭
43−760号公報参照）の還元反応により得られる公知の
ものである（Tertahedron,24巻,2125〜2144頁,1968年参
照）。

これらは何れもα，β−グルコシダーゼ，α−マンノシ
ダーゼ阻害活性が知られている（Agric.Biol.Chem.34
巻,966頁,1970年、J.Antibiotics,37巻,1579〜1586頁,1
984年参照）。

しかし、これらの物質が癌細胞転移抑制作用を有するこ
とは知られていない。

本発明の癌細胞転移抑制剤は上記のノジリマイシン，ノ
ジリマイシン亜硫酸付加物，ノジリマイシンB,ノジリマ
イシンＢ亜硫酸付加物を含有する経口、非経口製剤とし
て臨床的に静脈，動脈，皮膚，皮下，皮内，直腸及び筋
肉内を経由、又は経口にて投与される。また腫瘍に直接
投与することにより、より強い効果が期待できる。投与
量は投与形態、剤型或いは患者の年令、体重、病態によ
り異なるが、概ね１日100〜3000mgを１回又は数回投与
する。

非経口製剤としては無菌の水性又は非水性溶液剤，或い
は乳濁剤があげられる。非水性の溶液剤又は乳濁剤の基
剤としてはプロピレングリコール、ポリエチレングリコ
ール、グリセリン、オリーブ油、とうもろこし油、オレ
イン酸エチル等があげられる。また、経口製剤としては
カプセル剤、錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤等があげられ
る。これらの製剤には、賦形剤として澱粉、乳糖、マン
ニット、エチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチ
ルセルロース等が配合され、滑沢剤としてステアリン酸
マグネシウム又はステアリン酸カルシウムを添加する。
結合剤としはゼラチン、アラビアゴム、セルロースエス
テル、ポリビニルピロリドン等が用いられる。

なお、本発明の有効成分に関しノジリマイシン亜硫酸付
加物及びノジリマイシンＢ亜硫酸付加物をマウス（５
匹）にそれぞれ経口投与した結果、急性毒性のLD₅₀値は
いずれも6g/kg以上であった。

次に本発明の製剤例並びに効果について説明する。

〔実施例１〕 ノジリマイシン 50mg 乳糖 130mg ジャガイモデンプン 70mg ポリビニルピロリドン 10mg ステアリン酸マグネシウム 2.5mg ノジリマイシン，乳糖及びジャガイモデンプンを混合
し、これにポリビニルピロリドンの20％エタノール溶液
を加え均一に湿潤させ、1mmの網目を篩を通し、45℃に
て乾燥させ、再度1mmの網目の篩を通した。こうして得
た顆粒をステアリン酸マグネシウムと混和し錠剤に成型
した。

〔実施例２〕 ノジリマイシンＢ亜硫酸付加物を約10μの粒子になるま
でピンミルで粉砕した後、その500mgを注射用バイアル
に充填する。別にTween80 5mg及び日局精製ゼラチン10
mgを注射用蒸留水5mlに溶かし、溶解液とする。用時、
先のバイアルに充填されたノジリマイシンＢ亜硫酸付加
物に、この溶解液5mlを加えてよく振りまぜ懸濁液と
し、適当量を筋肉内投与する。

効果試験 試験法 マウスの腫瘍細胞であるメラノーマB16株よりフィドラ
ー（Fidler）の方法（Method in Cancer Research,15
巻,399〜439頁,1978年）を基にB16高転移株を選択し、
使用した。

転移抑制作用の評価はキジマースダ（Kijima−Suda）ら
の方法（Cancer Research,46巻,858〜862頁,1986年）を
基にして行った。

先ずB16高転移株を牛胎児血清を加えたダルベコME培地
（DME培地）に植え、一般式（Ｉ）で表されるノジリマ
イシン，ノジリマイシン亜硫酸付加物，ノジリマイシン
Ｂ又はノジリマイシンＢ亜硫酸付加物を加え、２〜４日
間,5％CO₂の存在下37℃で培養し、増殖した細胞をトリ
プシン−EDTA溶液で培養容器より剥がした。この細胞を
Ca⁺⁺とMg⁺⁺を含まないダルベコの平衡塩類溶液で生細胞
として1ml当たり１×10⁶細胞になるように懸濁した。

この懸濁液の0.1mlをマウス尾静脈中に注入し細胞を移
植し14日間飼育した後、開腹して肺を摘出し、肺表面及
び内部に形成されたB16高転移株の転移結節数を数え、
薬剤処理をしなかった対照と比較した。

試験例１ ノジリマイシンＢ亜硫酸付加物の細胞障害性 B16高転移株を10％牛胎児血清を加えたDME培地で５％CO
₂の存在下37℃で培養した後、トリプシン−EDTA溶液で
細胞を培養容器より剥がし、1ml当たりB16高転移株を１
×10⁴細胞になるように上記の培地に懸濁した。この懸
濁液の150μをノジリマイシンＢ亜硫酸付加物或いは
アドリアマイシン（対照）溶液50μにそれぞれ加え混
合した。この後４日間培養し、倒立顕微鏡下で生死を観
察し、細胞障害性を判定した。その結果は表１の通りで
あった。

以上の試験結果より明らかな通り、本発明の有効成分で
あるノジリマイシンＢ亜硫酸付加物はB16高転移株に対
して10μg/mlという濃度でも顕著な細胞障害性を示さな
かった。

試験例２ ノジリマイシンＢ亜硫酸付加物の抗転移作用 B16高転移株を10％牛胎児血清を加えたDME培地に植え、
ノジリマイシンＢ亜硫酸付加物を1ml当たりそれぞれ10
又は30μｇ加え、５％CO₂の存在下37℃で３日間培養し
た。試験例１と同様の方法で細胞を培養容器より剥が
し、1ml当たり生細胞が１×10⁶細胞になるようCa⁺⁺とMg
⁺⁺を含まない平衡塩類溶液に懸濁し、その0.1mlをBDF₁
マウス（８週令、雄）の尾静脈に注入し、細胞を移植し
た。14日間飼育観察後、開腹して肺を摘出し、肺表面及
び内部に形成されたB16高転移株の転移結節数を数え
た。その結果を表２に示した。

以上の試験結果より明らかな通り、本発明の有効成分で
あるノジリマイシンＢ亜硫酸付加物の処理で肺に形成さ
れる転移結節数は大きく減少した。

〔発明の効果〕

本発明の癌細胞転移抑制剤は癌細胞の転移を極めて顕著
に抑制し、かつ細胞障害性が非常に少ない薬剤である。
従って、本剤は既存の制癌剤と同時に投与して、また、
外科手術療法或いは放射線療法時に使用することで制癌
効果を著しく高め得る極めて有用な薬剤である。

フロントページの続き (72)発明者 中林 暁 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明 治製菓株式会社中央研究所内 (72)発明者 鶴岡 崇士 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明 治製菓株式会社中央研究所内 (72)発明者 井上 重治 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明 治製菓株式会社中央研究所内 (72)発明者 近藤 信一 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明 治製菓株式会社中央研究所内

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 〔式中Ｚは−OH又は−SO₃Hを表し、R₁,R₂はいずれか一
   方が水酸基で他方が水素原子を表す〕で示されるノジリ
   マイシン（５−アミノ−５−デオキシ−Ｄ−グルコピラ
   ノース）、ノジリマイシン亜硫酸付加物、ノジリマイシ
   ンＢ（５−アミノ−５−デオキシ−Ｄ−マンノピラノー
   ス）又はノジリマイシンＢ亜硫酸付加物を有効成分とす
   る癌細胞転移抑制剤。