JPH0763383B2 - 新規な微生物およびそれを用いるグルタミン酸の製造法 - Google Patents
新規な微生物およびそれを用いるグルタミン酸の製造法Info
- Publication number
- JPH0763383B2 JPH0763383B2 JP62075727A JP7572787A JPH0763383B2 JP H0763383 B2 JPH0763383 B2 JP H0763383B2 JP 62075727 A JP62075727 A JP 62075727A JP 7572787 A JP7572787 A JP 7572787A JP H0763383 B2 JPH0763383 B2 JP H0763383B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glutamic acid
- culture
- strains
- producing
- bacterium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
- C12P13/14—Glutamic acid; Glutamine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/15—Corynebacterium
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は発酵法によるグルタミン酸を著量に蓄積する新
規な微生物、およびその微生物を培養して目的物を製造
する方法に関する。
規な微生物、およびその微生物を培養して目的物を製造
する方法に関する。
微生物を用いてグルタミン酸を著量蓄積せしめ、これを
採取する方法、すなわちグルタミン酸発酵の工業生産で
は、グルタミン酸を培地中に著量に蓄積する能力を有す
る微生物、いわゆるグルタミン酸生産菌を発酵タンク中
で適当な培地を用いpH,温度，溶存酸素量などの培養条
件を適正な条件下にコントロールして行れている。従来
知られているグルタミン酸生産菌の分類については数多
くの報告があり、例えば以下のものを挙げることが出来
る。
採取する方法、すなわちグルタミン酸発酵の工業生産で
は、グルタミン酸を培地中に著量に蓄積する能力を有す
る微生物、いわゆるグルタミン酸生産菌を発酵タンク中
で適当な培地を用いpH,温度，溶存酸素量などの培養条
件を適正な条件下にコントロールして行れている。従来
知られているグルタミン酸生産菌の分類については数多
くの報告があり、例えば以下のものを挙げることが出来
る。
1.木下らAminoAcids ２ 42（1960），（以下文献） 2.奥村ら農化誌36 141（1962），（以下文献） 3.高山ら農化誌39 328（1965），（以下文献） 4.高山ら農化誌39 335（1965），（以下文献） 5.高山ら農化誌39 342（1965），（以下文献） 6.駒形らJ.Gen.Appl.Microbiol.,15 243（1969），（以
下文献） 7.山田らJ.Gen.Appl.Microbiol.,16 103（1970），（以
下文献） 8.山田らJ.Gen.Appl.Microbiol.,16 215（1970），（以
下文献） 9.山田らJ.Gen.Appl.Microbiol.,18 399（1972），（以
下文献） 10.山田らJ.Gen.Appl.Microbiol.,18 417（1972），
（以下文献） これらの報告でグルタミン酸生産菌とはグルタミン酸を
培地中に著量に蓄積する菌であるが厳密な定義がなされ
ている訳ではない。しかしその量的目安としては、文献
に述べられているように培地中に30g/以上、かつ対
グルコース収率が30％以上のグルタミン酸を蓄積する工
業的に利用可能な微生物をさすものと解釈出来る。
下文献） 7.山田らJ.Gen.Appl.Microbiol.,16 103（1970），（以
下文献） 8.山田らJ.Gen.Appl.Microbiol.,16 215（1970），（以
下文献） 9.山田らJ.Gen.Appl.Microbiol.,18 399（1972），（以
下文献） 10.山田らJ.Gen.Appl.Microbiol.,18 417（1972），
（以下文献） これらの報告でグルタミン酸生産菌とはグルタミン酸を
培地中に著量に蓄積する菌であるが厳密な定義がなされ
ている訳ではない。しかしその量的目安としては、文献
に述べられているように培地中に30g/以上、かつ対
グルコース収率が30％以上のグルタミン酸を蓄積する工
業的に利用可能な微生物をさすものと解釈出来る。
これらの既知のグルタミン酸生産菌はすべて好気性，グ
ラム陽性，胞子を形成しない桿菌でありコリネフォルム
細菌とよばれている菌群に含まれるが、さらにグルタミ
ン酸を培地中に著量に蓄積する能力を有する、ビオチン
要求性である、細胞壁中にメゾジアミノピメリン酸を含
有する、DNAのGC含量が55％付近にある、形態的特徴お
よび生理・生化学的性状が相互に類似しているなどの事
実が知られており、これらのことからグルタミン酸生産
菌と呼ばれている既知の微生物は分類学的には相互に近
縁のものであることは広く認められているところであ
る。このように相互に近縁な微生物であると考えられて
いるにも拘らず、既知のグルタミン酸生産菌はブレビバ
クテリウム属（Brevibacterium属），コリネバクテリウ
ム属（Corynebacterium属）或はミクロバクテリウム属
（Microbacterium属）など異なった属に同定されてい
る。これは同定を行った時代の違い、なかんづく世界で
もっとも権威ある細菌の同定書であるバーヂースマニュ
アルデタミネイティブバクテリオロジーの同定時に於け
る最新版の分類体系や分類基準の考え方の相違や、同定
者の分類基準のウエイトの置き方の相違などがこのよう
な現象をもたらした要因と考えられる。また木下ら（文
献）は約20株のグルタミン酸生産菌について分類学的
な研究を行ないこれらの菌のもつ共通的性質を分類基準
としてグルタミン酸生産菌属の設定を主張しているが、
現在までこの主張は広く採用されるには至っていない。
ラム陽性，胞子を形成しない桿菌でありコリネフォルム
細菌とよばれている菌群に含まれるが、さらにグルタミ
ン酸を培地中に著量に蓄積する能力を有する、ビオチン
要求性である、細胞壁中にメゾジアミノピメリン酸を含
有する、DNAのGC含量が55％付近にある、形態的特徴お
よび生理・生化学的性状が相互に類似しているなどの事
実が知られており、これらのことからグルタミン酸生産
菌と呼ばれている既知の微生物は分類学的には相互に近
縁のものであることは広く認められているところであ
る。このように相互に近縁な微生物であると考えられて
いるにも拘らず、既知のグルタミン酸生産菌はブレビバ
クテリウム属（Brevibacterium属），コリネバクテリウ
ム属（Corynebacterium属）或はミクロバクテリウム属
（Microbacterium属）など異なった属に同定されてい
る。これは同定を行った時代の違い、なかんづく世界で
もっとも権威ある細菌の同定書であるバーヂースマニュ
アルデタミネイティブバクテリオロジーの同定時に於け
る最新版の分類体系や分類基準の考え方の相違や、同定
者の分類基準のウエイトの置き方の相違などがこのよう
な現象をもたらした要因と考えられる。また木下ら（文
献）は約20株のグルタミン酸生産菌について分類学的
な研究を行ないこれらの菌のもつ共通的性質を分類基準
としてグルタミン酸生産菌属の設定を主張しているが、
現在までこの主張は広く採用されるには至っていない。
一方、グルタミン酸発酵の工業凄惨では上述したグルタ
ミン酸生産菌をブドー糖、蔗糖や酢酸などの成分を含む
培地で窒素源としてアンモニア，尿素或は硫安などを用
いて好気条件下で培養し培地中にグルタミン酸を著量蓄
積せしめる。グルタミン酸の蓄積量は培地の組成、培養
pH、培養温度溶存酸素量および菌体内に生成したグルタ
ミン酸を培地中に排出せしめる手段などにより異なって
くるが、これらの因子を至適に設定することにより容易
に対ブドー糖収率30％以上かつ溶培液中のグルタミン酸
の蓄積濃度30g/以上でグルタミン酸を蓄積させること
が可能である。
ミン酸生産菌をブドー糖、蔗糖や酢酸などの成分を含む
培地で窒素源としてアンモニア，尿素或は硫安などを用
いて好気条件下で培養し培地中にグルタミン酸を著量蓄
積せしめる。グルタミン酸の蓄積量は培地の組成、培養
pH、培養温度溶存酸素量および菌体内に生成したグルタ
ミン酸を培地中に排出せしめる手段などにより異なって
くるが、これらの因子を至適に設定することにより容易
に対ブドー糖収率30％以上かつ溶培液中のグルタミン酸
の蓄積濃度30g/以上でグルタミン酸を蓄積させること
が可能である。
〔発明が解決しようとする問題点〕 グルタミン酸は上述せる発酵法により我が国はもとより
世界の多くの国々で工業生産されている。工業生産を実
施するに当り最も重要な因子の一つに経済性がある。本
発明は発酵法によるグルタミン酸の工業生産の経済性を
高める技術を提供するものである。
世界の多くの国々で工業生産されている。工業生産を実
施するに当り最も重要な因子の一つに経済性がある。本
発明は発酵法によるグルタミン酸の工業生産の経済性を
高める技術を提供するものである。
グルタミン酸発酵の工業生産において経済性を高める技
術的な要因はいくつかある。例えば対糖収率の向上、グ
ルタミン酸の蓄積濃度の向上、培養時間の短縮化等々で
ある。其の他に要因として重要なものに培養温度の高温
化がある。培養温度はグルタミン酸発酵至適温度で行れ
るが従来のグルタミン酸生産菌を使用する場合、この温
度は通常31〜32゜である。培養が開始されると発酵熱が
発生するためにそのまま放置すれば培養液の温度は上昇
しグルタミン酸の生成は著じるしく低下する。培養液の
温度を至適に維持するためには、発酵槽内に熱交換機を
設置し、これに冷水を循環させることが必要となる。冷
水を得るためには冷凍機を使用しなければならないが発
生する発酵熱が莫大であるため冷凍機で消費する電気エ
ネルギーも大きなものとなっている。従ってグルタミン
酸発酵の培養温度を従来より上昇させることが出来れば
冷却負担が減少し、もって本工業生産の経済性を高める
ものである。
術的な要因はいくつかある。例えば対糖収率の向上、グ
ルタミン酸の蓄積濃度の向上、培養時間の短縮化等々で
ある。其の他に要因として重要なものに培養温度の高温
化がある。培養温度はグルタミン酸発酵至適温度で行れ
るが従来のグルタミン酸生産菌を使用する場合、この温
度は通常31〜32゜である。培養が開始されると発酵熱が
発生するためにそのまま放置すれば培養液の温度は上昇
しグルタミン酸の生成は著じるしく低下する。培養液の
温度を至適に維持するためには、発酵槽内に熱交換機を
設置し、これに冷水を循環させることが必要となる。冷
水を得るためには冷凍機を使用しなければならないが発
生する発酵熱が莫大であるため冷凍機で消費する電気エ
ネルギーも大きなものとなっている。従ってグルタミン
酸発酵の培養温度を従来より上昇させることが出来れば
冷却負担が減少し、もって本工業生産の経済性を高める
ものである。
本発明者らは叙上の問題点を解決するため種々の研究を
行った結果、従来のグルタミン酸生産菌では生育し得な
い45゜で生育出来る微生物の中に、従来のグルタミン酸
生産菌と同等のグルタミン酸生産能（対糖収率30％以
上，グルタミン酸蓄積量30g/以上）を有し、かつ従来
のグルタミン酸生産菌では生育せずグルタミン酸発酵の
実施不能な高温領域（例えば43℃）で著量のグルタミン
酸を蓄積する能力を有する新規な微生物を見出し、その
微生物を用いてグルタミン酸発酵を行ない培地中に著量
のグルタミン酸を蓄積せしめる条件を見出すことにより
本発明を完成するに至った。
行った結果、従来のグルタミン酸生産菌では生育し得な
い45゜で生育出来る微生物の中に、従来のグルタミン酸
生産菌と同等のグルタミン酸生産能（対糖収率30％以
上，グルタミン酸蓄積量30g/以上）を有し、かつ従来
のグルタミン酸生産菌では生育せずグルタミン酸発酵の
実施不能な高温領域（例えば43℃）で著量のグルタミン
酸を蓄積する能力を有する新規な微生物を見出し、その
微生物を用いてグルタミン酸発酵を行ない培地中に著量
のグルタミン酸を蓄積せしめる条件を見出すことにより
本発明を完成するに至った。
以下に本発明の詳細について述べる。
従来のグルタミン酸生産菌の生育温度に関しては、上述
の引用した報告の中で触れられている限り、いずれの報
告でもグルタミン酸生産菌の共通の性質であるとして、
文献では28゜−37゜で良好な生育をする。文献では
30゜−37゜で良好な生育を示し42゜では極めて悪く生育
しないものが多い、文献では至適生育温度25゜−37
゜,42゜では微かな生育、文献では42゜で生育するも
のはない、と報告されている。それぞれの報告では実施
方法の違い、生育の判定基準の違いがあるとしても、従
来のグルタミン酸生産菌の最高生育温度はせいぜい42゜
程度であると、類推される。そこで発明者らは、従来の
グルタミン酸生産菌として取扱われている菌株中より入
手し得るものの殆どを網羅した表−１に示した20株を用
い、ニュートリエントブロスを培地として振盪式液体恒
温槽による方法、及びニュートリエントアガーを培地と
した平板培養を高精度気体恒温槽による方法の２法を用
いて最高生育温度を検定した。その結果供試菌株はすべ
て42゜では液体培養及び平板培養の何れでも、生育は認
められなかった。すなわち従来のグルタミン酸生産菌の
最高生育温度は42゜以下と判定した。
の引用した報告の中で触れられている限り、いずれの報
告でもグルタミン酸生産菌の共通の性質であるとして、
文献では28゜−37゜で良好な生育をする。文献では
30゜−37゜で良好な生育を示し42゜では極めて悪く生育
しないものが多い、文献では至適生育温度25゜−37
゜,42゜では微かな生育、文献では42゜で生育するも
のはない、と報告されている。それぞれの報告では実施
方法の違い、生育の判定基準の違いがあるとしても、従
来のグルタミン酸生産菌の最高生育温度はせいぜい42゜
程度であると、類推される。そこで発明者らは、従来の
グルタミン酸生産菌として取扱われている菌株中より入
手し得るものの殆どを網羅した表−１に示した20株を用
い、ニュートリエントブロスを培地として振盪式液体恒
温槽による方法、及びニュートリエントアガーを培地と
した平板培養を高精度気体恒温槽による方法の２法を用
いて最高生育温度を検定した。その結果供試菌株はすべ
て42゜では液体培養及び平板培養の何れでも、生育は認
められなかった。すなわち従来のグルタミン酸生産菌の
最高生育温度は42゜以下と判定した。
本発明者らは従来の培養温度よりも高温領域でグルタミ
ン酸発酵を行うためには少くとも従来のグルタミン酸生
産菌より最高生育温度が高い微生物であることが要件と
なるであろうとの仮説のもとに自然界の各種のサンプル
を微生物分離源として43℃で生育する微生物を分離し、
その中から著量のグルタミン酸を培地中に蓄積する能力
のある菌株を探索し、異なった微生物分離源より14株を
取得した。これらの菌株の菌学的性質を検定し同定を行
った結果、分離株は相互に類似しており同一種に含まれ
るものと判定した。以下に代表的な４株（菌株番号、AJ
12308,AJ12309,AJ12310,AJ12340）について菌学的性質
を記載する。
ン酸発酵を行うためには少くとも従来のグルタミン酸生
産菌より最高生育温度が高い微生物であることが要件と
なるであろうとの仮説のもとに自然界の各種のサンプル
を微生物分離源として43℃で生育する微生物を分離し、
その中から著量のグルタミン酸を培地中に蓄積する能力
のある菌株を探索し、異なった微生物分離源より14株を
取得した。これらの菌株の菌学的性質を検定し同定を行
った結果、分離株は相互に類似しており同一種に含まれ
るものと判定した。以下に代表的な４株（菌株番号、AJ
12308,AJ12309,AJ12310,AJ12340）について菌学的性質
を記載する。
ここに示したようにこれらの菌株（以下本発明菌とい
う）はいずれも好気的に生育するグラム陽性の無胞子桿
菌であるところからコリネフォルム細菌群に属する。さ
らに、細胞分裂の様式がスナッピングタイプである、細
胞壁に含まれる２塩基アミノ酸がメゾジアミノピメリン
酸である、５％食塩含有培地で生育出来る耐滲透圧性菌
である、生育にビオチンを必要とする、後述する実施例
で示すように糖から高収率で著量のグルタミン酸を生成
し培地中に蓄積する、などの特徴的性質を有するが、こ
れらの性質は従来知られているグルタミン酸生産菌と同
一である。また其の他の形態的性質、生理生化学的性質
においても多くの性状が既知のグルタミン酸生産菌と共
通である。以上のことから、本発明菌は既知のグルタミ
ン酸生産菌と属のレベルでは同一の属に属せしめるのが
妥当であろうと考えられる。既知のグルタミン酸生産菌
をどの属に分類するかは前述の通り見解のわかれるとこ
ろであるが、文献〜などを参考にした上で編さんさ
れたコリネフォルム細菌群にかかわる最新のバージース
マニュアル第８版では既知のグルタミン酸生産菌はコリ
ネバクテリウム属とブレビバクテリウム属とにわけられ
て記載されている。しかし本マニュアルではブレビバク
テリウム属そのものを分類学的に不確定な属（Genus in
certae sidis）として扱い、コリネバクテリウム属は正
規な属として扱っていることを考慮すれば本発明菌をコ
リネバクテリウム属に属せしめるのが現時点ではもっと
も妥当であると考えられる。次に本発明菌の種レベルで
の分類学的考察を行う。本発明菌と既知のグルタミン酸
生産菌との菌学的性質面で共通して異なるものは以下の
３性質である。第１は明瞭な生育を示す最高温度が43゜
以上であるという点である。前述したように既知のグル
タミン酸生産菌の最高生育温度は文献的にも、また発明
者らは実施した試験結果からも42゜程度ないし42゜以下
であり43゜以上で生育するものは存在しない。第二は温
度抵抗性である。温度抵抗性は試験管など大容量で試験
する場合には熱の伝導時間などのばらつきから正しい結
果が得られにくく、スキムミルク中に菌を懸濁しこれを
ガラスキャピラリーに封入してテストする方法が最良と
されている（文献）本発明菌はすべての菌株がスキム
ミルク中、キャピラリーチューブ検定法で55゜−10分の
処理で生残する。これに対し既知グルタミン酸菌は本法
で行えば55゜−10分処理で大部分の菌株は死滅するが、
微かな生残をする菌株もあるとの報告（文献）があ
る。
う）はいずれも好気的に生育するグラム陽性の無胞子桿
菌であるところからコリネフォルム細菌群に属する。さ
らに、細胞分裂の様式がスナッピングタイプである、細
胞壁に含まれる２塩基アミノ酸がメゾジアミノピメリン
酸である、５％食塩含有培地で生育出来る耐滲透圧性菌
である、生育にビオチンを必要とする、後述する実施例
で示すように糖から高収率で著量のグルタミン酸を生成
し培地中に蓄積する、などの特徴的性質を有するが、こ
れらの性質は従来知られているグルタミン酸生産菌と同
一である。また其の他の形態的性質、生理生化学的性質
においても多くの性状が既知のグルタミン酸生産菌と共
通である。以上のことから、本発明菌は既知のグルタミ
ン酸生産菌と属のレベルでは同一の属に属せしめるのが
妥当であろうと考えられる。既知のグルタミン酸生産菌
をどの属に分類するかは前述の通り見解のわかれるとこ
ろであるが、文献〜などを参考にした上で編さんさ
れたコリネフォルム細菌群にかかわる最新のバージース
マニュアル第８版では既知のグルタミン酸生産菌はコリ
ネバクテリウム属とブレビバクテリウム属とにわけられ
て記載されている。しかし本マニュアルではブレビバク
テリウム属そのものを分類学的に不確定な属（Genus in
certae sidis）として扱い、コリネバクテリウム属は正
規な属として扱っていることを考慮すれば本発明菌をコ
リネバクテリウム属に属せしめるのが現時点ではもっと
も妥当であると考えられる。次に本発明菌の種レベルで
の分類学的考察を行う。本発明菌と既知のグルタミン酸
生産菌との菌学的性質面で共通して異なるものは以下の
３性質である。第１は明瞭な生育を示す最高温度が43゜
以上であるという点である。前述したように既知のグル
タミン酸生産菌の最高生育温度は文献的にも、また発明
者らは実施した試験結果からも42゜程度ないし42゜以下
であり43゜以上で生育するものは存在しない。第二は温
度抵抗性である。温度抵抗性は試験管など大容量で試験
する場合には熱の伝導時間などのばらつきから正しい結
果が得られにくく、スキムミルク中に菌を懸濁しこれを
ガラスキャピラリーに封入してテストする方法が最良と
されている（文献）本発明菌はすべての菌株がスキム
ミルク中、キャピラリーチューブ検定法で55゜−10分の
処理で生残する。これに対し既知グルタミン酸菌は本法
で行えば55゜−10分処理で大部分の菌株は死滅するが、
微かな生残をする菌株もあるとの報告（文献）があ
る。
発明者らはこの点についても追試を行なった。表−１に
示した既知のグルタミン酸生産菌のすべてについて本発
明菌と同じ条件下で温度抵抗性試験を行った結果、既知
のグルタミン酸生産菌はすべて55゜−10分の処理で死滅
した。これに対し本発明菌は55゜−10分の処理で分離株
14株のすべてが生残し、さらにこのうち11株は60゜−10
分の処理でも生残した。
示した既知のグルタミン酸生産菌のすべてについて本発
明菌と同じ条件下で温度抵抗性試験を行った結果、既知
のグルタミン酸生産菌はすべて55゜−10分の処理で死滅
した。これに対し本発明菌は55゜−10分の処理で分離株
14株のすべてが生残し、さらにこのうち11株は60゜−10
分の処理でも生残した。
第三の特徴的性質は、本発明菌は43゜においても著量の
グルタミン酸を蓄積することである。本試験の条件及び
グルタミン酸の蓄積量は実施例に示した通りである。同
条件で表−１に示した既知グルタミン酸生産菌株のグル
タミン酸の蓄積性を検定したがすべての菌株が生育せ
ず、蓄積したグルタミン酸も実質的に無であった。以上
述べた本発明菌の性質は既知のグルタミン酸生産菌にみ
られない性質で、特に最高生育温度や温度抵抗性の性質
は微生物変異操作によって上昇させることは不可能な安
定した性質と考えられているので本発明菌は既知のグル
タミン酸生産菌の何れとも別種であるとするに充分な根
拠を有するものと解釈できる。また、本発明菌分離株14
株の菌株相互間では生育状態やコロニーの色調などの形
態的性質の僅かな差異、例えばショ糖，麦芽糖，トレハ
ロース，マンニット，イノシットなどからの酸生成,MR,
VP,硝酸塩還元及びウレアーゼ、などで生理生化学的性
質の差異がみられたが、これらの差異は菌株レベルの差
異であり、種をわける程の差異とすることは不適当と考
え、本発明菌はすべて同一種に属するものと認定した。
グルタミン酸を蓄積することである。本試験の条件及び
グルタミン酸の蓄積量は実施例に示した通りである。同
条件で表−１に示した既知グルタミン酸生産菌株のグル
タミン酸の蓄積性を検定したがすべての菌株が生育せ
ず、蓄積したグルタミン酸も実質的に無であった。以上
述べた本発明菌の性質は既知のグルタミン酸生産菌にみ
られない性質で、特に最高生育温度や温度抵抗性の性質
は微生物変異操作によって上昇させることは不可能な安
定した性質と考えられているので本発明菌は既知のグル
タミン酸生産菌の何れとも別種であるとするに充分な根
拠を有するものと解釈できる。また、本発明菌分離株14
株の菌株相互間では生育状態やコロニーの色調などの形
態的性質の僅かな差異、例えばショ糖，麦芽糖，トレハ
ロース，マンニット，イノシットなどからの酸生成,MR,
VP,硝酸塩還元及びウレアーゼ、などで生理生化学的性
質の差異がみられたが、これらの差異は菌株レベルの差
異であり、種をわける程の差異とすることは不適当と考
え、本発明菌はすべて同一種に属するものと認定した。
なお、本発明菌をグルタミン酸生産菌以外のコリネフォ
ルム細菌群に属する菌種と対比して検索を行ったが、該
当する菌種は存在しなかった。以上の考察より本発明菌
は何れの菌株もコリネバクテリウム属に属する新菌種と
認め、コリネバクテリウム・サーモアミノゲネス（Cory
nebacterium thermoaminogenes nov.sp）と命名した。
本菌種に属する代表的菌株はAJ12308,AJ12309,AJ12310,
AJ12340であり、これらの菌株はそれぞれFERMBP−1540,
1541,1542,1539として寄託されている。
ルム細菌群に属する菌種と対比して検索を行ったが、該
当する菌種は存在しなかった。以上の考察より本発明菌
は何れの菌株もコリネバクテリウム属に属する新菌種と
認め、コリネバクテリウム・サーモアミノゲネス（Cory
nebacterium thermoaminogenes nov.sp）と命名した。
本菌種に属する代表的菌株はAJ12308,AJ12309,AJ12310,
AJ12340であり、これらの菌株はそれぞれFERMBP−1540,
1541,1542,1539として寄託されている。
実施例−１ コリネバクテリウム・サーモアミノゲネスAJ12308を用
い、＜表−２＞に示した培地組成を有する培養液を容量
１の小型発酵槽に300ml張り込み、培養液のpHが7.5〜
8.0に保たれるようにアンモニアガスを適宜加えつつ43,
で培養した。培養開始５時間後、比濁が0.6に達したと
きにペニシリンを3U/mlの濃度になるように添加しさら
に培養を継続した。培養16時間後の培養液を高速液体ク
ロマトグラフで分析した結果、39.1g/の濃度でグルタ
ミン酸が蓄積していた。なおこのとき併行して同条件で
ブレビバクテリウム・フラブムATCC 13826を用いて行っ
た場合のグルタミン酸の蓄積量は0.1g/以下であっ
た。
い、＜表−２＞に示した培地組成を有する培養液を容量
１の小型発酵槽に300ml張り込み、培養液のpHが7.5〜
8.0に保たれるようにアンモニアガスを適宜加えつつ43,
で培養した。培養開始５時間後、比濁が0.6に達したと
きにペニシリンを3U/mlの濃度になるように添加しさら
に培養を継続した。培養16時間後の培養液を高速液体ク
ロマトグラフで分析した結果、39.1g/の濃度でグルタ
ミン酸が蓄積していた。なおこのとき併行して同条件で
ブレビバクテリウム・フラブムATCC 13826を用いて行っ
た場合のグルタミン酸の蓄積量は0.1g/以下であっ
た。
実施例２ コリネバクテリウム・サーモアミノゲネスAJ12309を用
い実施例１と同様な方法でグルタミン酸発酵を行った結
果、培養19時間後の培養液中に40.0g/の濃度でグルタ
ミン酸が蓄積した。
い実施例１と同様な方法でグルタミン酸発酵を行った結
果、培養19時間後の培養液中に40.0g/の濃度でグルタ
ミン酸が蓄積した。
実施例３ コリネバクテリウム・サーモアミノゲネスAJ12310を用
い実施例１と同様な方法でグルタミン酸発酵を行った結
果、培養17時間後の培養液中に35.2g/の濃度でグルタ
ミン酸が蓄積した。
い実施例１と同様な方法でグルタミン酸発酵を行った結
果、培養17時間後の培養液中に35.2g/の濃度でグルタ
ミン酸が蓄積した。
実施例４ コリネバクテリウム・サーモアミノゲネスAJ12340を用
い実施例−１と同様な方法でグルタミン酸発酵を行った
結果、培養18時間後の培養液中に38.1g/の濃度でグル
タミン酸が蓄積した。
い実施例−１と同様な方法でグルタミン酸発酵を行った
結果、培養18時間後の培養液中に38.1g/の濃度でグル
タミン酸が蓄積した。
実施例−５ コリネバクテリウム・サーモアミノゲネスAJ12308を用
い、＜表−２＞に示した培地組成よりグルコースと硫酸
アンモニウムを除き酢酸アンモニウムを20gを添加した
培地組成を有する培養液を容量１の小型発酵槽に300m
l張り込み、培養液のpHが7.5〜8.0に保たれるように酢
酸或はアンモニアガスを適宜加えつつ40゜で培養した。
培養開始８時間後、比濁が0.6に達したときにペニシリ
ンを3U/mlの濃度になるように添加しさらに培養を継続
した。培養24時間後の培養液を高速液体クロマトグラフ
で分析した結果32g/の濃度で蓄積していたが、これは
対酢酸収率31.5％であった。
い、＜表−２＞に示した培地組成よりグルコースと硫酸
アンモニウムを除き酢酸アンモニウムを20gを添加した
培地組成を有する培養液を容量１の小型発酵槽に300m
l張り込み、培養液のpHが7.5〜8.0に保たれるように酢
酸或はアンモニアガスを適宜加えつつ40゜で培養した。
培養開始８時間後、比濁が0.6に達したときにペニシリ
ンを3U/mlの濃度になるように添加しさらに培養を継続
した。培養24時間後の培養液を高速液体クロマトグラフ
で分析した結果32g/の濃度で蓄積していたが、これは
対酢酸収率31.5％であった。
Claims (1)
- 【請求項１】最高生育温度が43℃以上、温度抵抗性が55
℃−10分以上かつ著量のグルタミン酸を蓄積する能力を
有する新規な微生物、コリネバクテリウム・サーモアミ
ノゲネスを用いてグルタミン酸発酵を行ない培養液中よ
りグルタミン酸を採取することを特徴とするグルタミン
酸の製造法。
Priority Applications (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62075727A JPH0763383B2 (ja) | 1987-03-27 | 1987-03-27 | 新規な微生物およびそれを用いるグルタミン酸の製造法 |
| AU11614/88A AU616168C (en) | 1987-03-27 | 1988-02-10 | Novel microorganisms and a method for production of glutamic acid using the same |
| MYPI88000138A MY102317A (en) | 1987-03-27 | 1988-02-10 | Novel microorganisms and a method for production of glutamic acid using the same. |
| BR8801289A BR8801289A (pt) | 1987-03-27 | 1988-03-22 | Microorganismo e processo para a producao de acido glutamico |
| PH36679A PH25252A (en) | 1987-03-27 | 1988-03-23 | Novel microorganism and method for production of glutamic acid using the same |
| FR888803884A FR2612937B1 (fr) | 1987-03-27 | 1988-03-24 | Nouveaux micro-organismes et procede pour la production d'acide glutamique utilisant ces micro-organismes |
| KR1019880003283A KR960006580B1 (ko) | 1987-03-27 | 1988-03-26 | 신규한 미생물 및 이를 사용하여 글루탐산을 제조하는 방법 |
| US07/702,111 US5250434A (en) | 1987-03-27 | 1991-05-16 | Microorganisms for production of glutamic acid |
| BR1100229-8A BR1100229A (pt) | 1987-03-27 | 1997-04-07 | Microrganismo e processo para a produção de ácido glutâmico. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62075727A JPH0763383B2 (ja) | 1987-03-27 | 1987-03-27 | 新規な微生物およびそれを用いるグルタミン酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63240779A JPS63240779A (ja) | 1988-10-06 |
| JPH0763383B2 true JPH0763383B2 (ja) | 1995-07-12 |
Family
ID=13584588
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62075727A Expired - Lifetime JPH0763383B2 (ja) | 1987-03-27 | 1987-03-27 | 新規な微生物およびそれを用いるグルタミン酸の製造法 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0763383B2 (ja) |
| KR (1) | KR960006580B1 (ja) |
| BR (1) | BR8801289A (ja) |
| FR (1) | FR2612937B1 (ja) |
| MY (1) | MY102317A (ja) |
| PH (1) | PH25252A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2990735B2 (ja) * | 1990-04-20 | 1999-12-13 | 味の素株式会社 | Ｌ―リジンの発酵的製造法 |
| PL341895A1 (en) | 1999-08-12 | 2001-02-26 | Ajinomoto Kk | Plasmide autonomously replicable in corynebacter bacteria |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3355359A (en) * | 1964-07-18 | 1967-11-28 | Asahi Chemical Ind | Process for producing l-glutamic acid by using corynebacterium melassecola |
| US3338793A (en) * | 1964-09-18 | 1967-08-29 | Asahi Chemical Ind | Method for production of l-glutamic acid by microbacteria |
| JPS6248393A (ja) * | 1985-08-24 | 1987-03-03 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−グルタミン酸の製造法 |
-
1987
- 1987-03-27 JP JP62075727A patent/JPH0763383B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1988
- 1988-02-10 MY MYPI88000138A patent/MY102317A/en unknown
- 1988-03-22 BR BR8801289A patent/BR8801289A/pt not_active Application Discontinuation
- 1988-03-23 PH PH36679A patent/PH25252A/en unknown
- 1988-03-24 FR FR888803884A patent/FR2612937B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-26 KR KR1019880003283A patent/KR960006580B1/ko not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR880011324A (ko) | 1988-10-27 |
| FR2612937A1 (fr) | 1988-09-30 |
| JPS63240779A (ja) | 1988-10-06 |
| BR8801289A (pt) | 1988-10-25 |
| FR2612937B1 (fr) | 1990-01-12 |
| PH25252A (en) | 1991-03-27 |
| AU1161488A (en) | 1988-09-29 |
| MY102317A (en) | 1992-05-28 |
| KR960006580B1 (ko) | 1996-05-20 |
| AU616168B2 (en) | 1991-10-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1188236A (en) | Plasmids | |
| Abe et al. | Taxonomical studies on glutamic acid-producing bacteria | |
| JP3966583B2 (ja) | 発酵法によるｌ−アミノ酸の製造法 | |
| US5250434A (en) | Microorganisms for production of glutamic acid | |
| US5250423A (en) | Method for the production of L-lysine employing thermophilic corynebacterium thermoaminogenes | |
| US3979261A (en) | Production of glucose isomerase by bacillus coagulans | |
| JPS60224488A (ja) | 微生物学的手段によるｌ−カルニチンの製造 | |
| Jenni et al. | Taxonomy of non H2-lithotrophic, oxalate-oxidizing bacteria related to Alcaligenes eutrophus | |
| CN110791462B (zh) | 一株枯草芽孢杆菌及其在发酵生产腺苷中的应用 | |
| EP0666321B1 (en) | Process for production of amide compounds using microorganism | |
| JPH10248588A (ja) | 発酵法によるｌ−セリンの製造法 | |
| JPH0763383B2 (ja) | 新規な微生物およびそれを用いるグルタミン酸の製造法 | |
| CN116656547B (zh) | 一株能预防雏鹅痛风的解木聚糖拟杆菌及医用用途 | |
| JPS59227294A (ja) | シユ−ドモナス属微生物及びその使用方法 | |
| EP0032987A1 (en) | Thermophilic aspartase, processes for producing, culture used, and L-aspartic acid preparation process using the same | |
| Sen et al. | Extracellular lysine production from hydrocarbons by Arthrobacter globiformis | |
| US4237228A (en) | Method of producing L-isoleucine using Brevibacterium flavum | |
| JPH119296A (ja) | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 | |
| EP0054311A2 (en) | Process for producing L-glutamic acid | |
| JP2001517429A (ja) | 繊毛虫（原生動物）の連続大量培養を用いた生物由来の貴重物質を生産する発酵法 | |
| KR930008972B1 (ko) | 신균주 슈도모나스속 y-132 및 이로부터 생산되는 글루타릴-7-아미노세팔로스포린산 아실라아제 | |
| Ishizaki et al. | General character and taxonomic study of Lactococcus lactis IO-l, JCM 7638 | |
| JP3976355B2 (ja) | α−ヒドロキシ−４−メチルチオ酪酸の製造方法 | |
| Tracy | Comparative metabolism of the R and S variants of Lactobacillus plantarum (Orla-Jensen) | |
| SU1738853A1 (ru) | Способ получени биомассы MIcRococcUS LUтеNS ВКПМ В-2836 продуцента рестриктазы MLU 1 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20070712 Year of fee payment: 12 |