JPH0769907A - 日和見感染症防御用組成物 - Google Patents
日和見感染症防御用組成物Info
- Publication number
- JPH0769907A JPH0769907A JP5235580A JP23558093A JPH0769907A JP H0769907 A JPH0769907 A JP H0769907A JP 5235580 A JP5235580 A JP 5235580A JP 23558093 A JP23558093 A JP 23558093A JP H0769907 A JPH0769907 A JP H0769907A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- bifidobacterium
- culture
- cmf
- bacteria
- composition
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- Pending
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- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 副作用が全く認められない安全な日和見感染
症防御用組成物の提供。 【構成】 ビフィドバクテリウム属の菌株の培養液の濃
縮物または乾燥物であって、１ｇあたり該菌を1010個以
上含有するものを有効成分とする日和見感染症防御用組
成物。
症防御用組成物の提供。 【構成】 ビフィドバクテリウム属の菌株の培養液の濃
縮物または乾燥物であって、１ｇあたり該菌を1010個以
上含有するものを有効成分とする日和見感染症防御用組
成物。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は日和見感染症防御用組成
物に関する。
物に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年では、種々の社会的、経済的、医原
的要因よって、感染防御機構に異常をきたした宿主が多
くみられるようになり、正常では免疫応答刺激にはなり
こそすれ、決して病原とはなり得ない、いわゆる平素無
害菌による感染症（日和見感染症）が多発するようにな
っていることが知られている（細菌学はここまですすん
だ、蜂須賀養悦監修、菜根出版p305(1986)）。すなわ
ち、日和見感染症とは、健康な宿主では無害と考えられ
ている菌が、感染に対する抵抗力が低下した宿主で引き
起こす感染症のことであり、このような抵抗力が低下し
た宿主には、例えば、放射線の照射、免疫組織の切除を
受けた患者、糖尿病患者、臓器移植の際に免疫抑制剤の
投与を受け免疫能の低下した患者、ならびに火傷などの
重篤な外傷を負った患者などがある。また、日和見感染
症の潜在的な感染源の一つに腸内菌（特にグラム陰性桿
菌）が考えられている。このため、前述したような患者
では、常在する腸内菌の一部が腸管外の組織に移行（ト
ランスロケーション）し、定着、増殖することが知られ
ている。
的要因よって、感染防御機構に異常をきたした宿主が多
くみられるようになり、正常では免疫応答刺激にはなり
こそすれ、決して病原とはなり得ない、いわゆる平素無
害菌による感染症（日和見感染症）が多発するようにな
っていることが知られている（細菌学はここまですすん
だ、蜂須賀養悦監修、菜根出版p305(1986)）。すなわ
ち、日和見感染症とは、健康な宿主では無害と考えられ
ている菌が、感染に対する抵抗力が低下した宿主で引き
起こす感染症のことであり、このような抵抗力が低下し
た宿主には、例えば、放射線の照射、免疫組織の切除を
受けた患者、糖尿病患者、臓器移植の際に免疫抑制剤の
投与を受け免疫能の低下した患者、ならびに火傷などの
重篤な外傷を負った患者などがある。また、日和見感染
症の潜在的な感染源の一つに腸内菌（特にグラム陰性桿
菌）が考えられている。このため、前述したような患者
では、常在する腸内菌の一部が腸管外の組織に移行（ト
ランスロケーション）し、定着、増殖することが知られ
ている。
【０００３】バクテリアルトランスロケーションは、腸
内常在細菌が腸管から腸上皮のmucosal barrier を通過
して、腸間膜リンパ節、肝臓等の各種臓器や血中に移行
する現象と定義されている(Infection and Immunity, 2
3, 403(1979)）。また、バクテリアルトランスロケーシ
ョンは、一般の腸管感染症とは異なり、細胞侵入性を有
しない細菌により引き起こされるものであり、前述した
いわゆる日和見感染症の原因となりうるものである。こ
のようなバクテリアルトランスロケーションの原因には
例えば、腸内細菌の恒常性が崩壊することによるある種
の菌の異常発育、免疫機構の損傷、ならびにmucosal ba
rrier の物理的な崩壊等が考えられている（無菌生物、
20, 38(1990)）。
内常在細菌が腸管から腸上皮のmucosal barrier を通過
して、腸間膜リンパ節、肝臓等の各種臓器や血中に移行
する現象と定義されている(Infection and Immunity, 2
3, 403(1979)）。また、バクテリアルトランスロケーシ
ョンは、一般の腸管感染症とは異なり、細胞侵入性を有
しない細菌により引き起こされるものであり、前述した
いわゆる日和見感染症の原因となりうるものである。こ
のようなバクテリアルトランスロケーションの原因には
例えば、腸内細菌の恒常性が崩壊することによるある種
の菌の異常発育、免疫機構の損傷、ならびにmucosal ba
rrier の物理的な崩壊等が考えられている（無菌生物、
20, 38(1990)）。
【０００４】日和見感染症の防御法として、抗生物質の
投与や抗体、インターフェロン等を静脈投与することに
より原因菌を排除するという治療が行われている。ま
た、細菌性抗原菌で免疫した雌牛が産出する、分泌乳中
の抗体を経口的に投与することで日和見感染症を予防・
治療する方法（特開平4-211613）も考案されている。
投与や抗体、インターフェロン等を静脈投与することに
より原因菌を排除するという治療が行われている。ま
た、細菌性抗原菌で免疫した雌牛が産出する、分泌乳中
の抗体を経口的に投与することで日和見感染症を予防・
治療する方法（特開平4-211613）も考案されている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】従来技術で示した日和
見感染症防御法のなかで、抗生物質を投与する方法は、
有効な薬剤を選択しなければならないことに加えて、耐
性菌が出現すること、さらに副作用の認められることが
あるという問題がある。また、抗体等を経静脈または経
口的に投与する場合は、当該菌に有効な抗体を選択また
は作出するために要する時間や手間が膨大であるという
問題があった。これらの従来技術は、いずれも発病後に
原因菌を特定したうえで特異的な抗菌活性を持つ物質を
投与するという点で本質的に同じであり、日和見感染症
に対する対症療法的な側面を有するものである。本願発
明は、ビフィドバクテリウム属菌株を培養し、これを濃
縮、もしくは乾燥するという簡単な工程で得られ、この
小量を食餌に添加し日常的に食しても副作用が全く認め
られない、安全な日和見感染症防御用組成物を提供する
ことを目的とする。
見感染症防御法のなかで、抗生物質を投与する方法は、
有効な薬剤を選択しなければならないことに加えて、耐
性菌が出現すること、さらに副作用の認められることが
あるという問題がある。また、抗体等を経静脈または経
口的に投与する場合は、当該菌に有効な抗体を選択また
は作出するために要する時間や手間が膨大であるという
問題があった。これらの従来技術は、いずれも発病後に
原因菌を特定したうえで特異的な抗菌活性を持つ物質を
投与するという点で本質的に同じであり、日和見感染症
に対する対症療法的な側面を有するものである。本願発
明は、ビフィドバクテリウム属菌株を培養し、これを濃
縮、もしくは乾燥するという簡単な工程で得られ、この
小量を食餌に添加し日常的に食しても副作用が全く認め
られない、安全な日和見感染症防御用組成物を提供する
ことを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、日和見感
染症発症の第一歩としての、腸内常在菌のバクテリアル
トランスロケーションの阻止につき動物実験モデルを用
いて鋭意研究を重ねた結果、ビフィドバクテリウム属菌
株の培養物（濃縮物または乾燥物）を餌と共に投与する
ことにより、腹腔、腸間膜リンパ節等へのトランスロケ
ーションが抑制されることを見い出し、この知見の下に
本発明を完成した。すなわち本発明はビフィドバクテリ
ウム属の菌株の培養液の濃縮物または乾燥物であって、
１ｇあたり該菌を1010個以上含有するものを有効成分と
する日和見感染症防御用組成物に関する。
染症発症の第一歩としての、腸内常在菌のバクテリアル
トランスロケーションの阻止につき動物実験モデルを用
いて鋭意研究を重ねた結果、ビフィドバクテリウム属菌
株の培養物（濃縮物または乾燥物）を餌と共に投与する
ことにより、腹腔、腸間膜リンパ節等へのトランスロケ
ーションが抑制されることを見い出し、この知見の下に
本発明を完成した。すなわち本発明はビフィドバクテリ
ウム属の菌株の培養液の濃縮物または乾燥物であって、
１ｇあたり該菌を1010個以上含有するものを有効成分と
する日和見感染症防御用組成物に関する。
【０００７】本発明においてはまずビフィドバクテリウ
ム属の菌株を栄養培地で培養する。本発明で使用する微
生物としてはビフィドバクテリウム属に属する微生物で
あればいずれの微生物でもよく、例えばビフィドバクテ
リウム・ロングム（Bifidobacterium longum）、ビフィ
ドバクテリウム・インフアンテイス(B.infantis)、ビフ
ィドバクテリウム・ブレベ（B.breve)、ビフィドバクテ
リウム・アドレセンテイス(B.adolescentis)、ビフィド
バクテリウム・ビフィダム(B.bifidum) 等に属する菌
株、具体的には例えばビフィドバクテリウム・ロングム
No.7が挙げられる。
ム属の菌株を栄養培地で培養する。本発明で使用する微
生物としてはビフィドバクテリウム属に属する微生物で
あればいずれの微生物でもよく、例えばビフィドバクテ
リウム・ロングム（Bifidobacterium longum）、ビフィ
ドバクテリウム・インフアンテイス(B.infantis)、ビフ
ィドバクテリウム・ブレベ（B.breve)、ビフィドバクテ
リウム・アドレセンテイス(B.adolescentis)、ビフィド
バクテリウム・ビフィダム(B.bifidum) 等に属する菌
株、具体的には例えばビフィドバクテリウム・ロングム
No.7が挙げられる。
【０００８】No.7株は次の菌学的性質を有している。 Ａ．形態的性状 （１）細胞の形：桿菌または分岐状の多形 （２）運動性：なし （３）胞子の有無：なし （４）グラム染色性：陽性 Ｂ．培地上の生育状態 ＢＬ寒天培地（栄研）平板上で本菌を塗布し、スチール
ウール法にて37℃48時間培養すると、不透明な円形半球
状の光沢を有するコロニーを形成する。 Ｃ．生理学的性質 （１）硝酸塩の還元：陰性 （２）インドールの生成：陰性 （３）ゼラチンの液化：陰性 （４）カタラーゼ：陰性 （５）酸素に対する態度：偏性嫌気性菌
ウール法にて37℃48時間培養すると、不透明な円形半球
状の光沢を有するコロニーを形成する。 Ｃ．生理学的性質 （１）硝酸塩の還元：陰性 （２）インドールの生成：陰性 （３）ゼラチンの液化：陰性 （４）カタラーゼ：陰性 （５）酸素に対する態度：偏性嫌気性菌
【０００９】（６）各種炭水化物の分解性 １.L−アラビノース：＋ ２.D−キシロース：＋ ３.D−リボース：＋ ４.D−グルコース：＋ ５.D−フラクトース：＋ ６.D−ガラクトース：＋ ７. シュークロース：＋ ８. マルトース：＋ ９. ラクトース：＋ 10. メリビオース：＋ 11. ラフィノース：＋ 12. メレチトース：＋ 13.D−マンノース：− 14. セロビオース：− 15. トレハロース：− 16. グリコーゲン：− 17. マンニトール：− 18. ソルビトール：− 19. イノシトール：− 20. エスクリン：− 21. サリシン：− 22. アミグダリン：−
【００１０】以上の菌学的性質をもとに Bergey's Manu
al of Systematic Bacteriology(Vol.2)(1986 ）により
同定を行うと、本菌株はビフィドバクテリウム・ロング
ムの菌学的性質と一致したため、ビフィドバクテリウム
・ロングムNo.7と命名した。本菌株は工業技術院生命工
学技術研究所にFERMP-13610 として寄託されている。
al of Systematic Bacteriology(Vol.2)(1986 ）により
同定を行うと、本菌株はビフィドバクテリウム・ロング
ムの菌学的性質と一致したため、ビフィドバクテリウム
・ロングムNo.7と命名した。本菌株は工業技術院生命工
学技術研究所にFERMP-13610 として寄託されている。
【００１１】上記菌株を培養するための培地としては乳
酸菌の培養に通常用いられる培地が使用される。すなわ
ち主炭素源のほか窒素源、無機物その他の栄養素を程よ
く含有する培地ならばいずれの培地も使用可能である。
炭素源としてはラクトース、グルコース、スクロース、
フラクトース、澱粉加水分解物、廃糖蜜などが使用菌の
資化性に応じて使用できる。窒素源としてはカゼイン加
水分解物、大豆蛋白質加水分解物、ホエー蛋白質加水分
解物等の有機窒素含有物が使用できる。ほかに増殖促進
剤として肉エキス、魚肉エキス、酵母エキス等が用いら
れる。
酸菌の培養に通常用いられる培地が使用される。すなわ
ち主炭素源のほか窒素源、無機物その他の栄養素を程よ
く含有する培地ならばいずれの培地も使用可能である。
炭素源としてはラクトース、グルコース、スクロース、
フラクトース、澱粉加水分解物、廃糖蜜などが使用菌の
資化性に応じて使用できる。窒素源としてはカゼイン加
水分解物、大豆蛋白質加水分解物、ホエー蛋白質加水分
解物等の有機窒素含有物が使用できる。ほかに増殖促進
剤として肉エキス、魚肉エキス、酵母エキス等が用いら
れる。
【００１２】培養は嫌気的条件下で行う。このため、炭
素ガスを通気しながら培養する方法等の公知の手法を適
用することができる。培養温度は一般には35〜40℃が好
ましいが、菌が生育する温度であれば他の温度条件でも
よい。培養中の培地のpHは 6.0〜7.0 に維持することが
好ましい。培養時間は通常10〜20時間が適当である。培
養終了後の培養液は濃縮またはさらに乾燥して菌体濃度
を濃縮物もしくは乾燥物1gあたり1010個以上とする。こ
こで最高菌数は特に限定されていないが、通常、濃縮液
で約４×1010cells/g 、乾燥物で約５×1011cells/g 程
度である。濃縮は通常の手法、例えば減圧濃縮によって
行うことができる。乾燥も通常の手段、例えば真空乾
燥、噴霧乾燥、凍結乾燥等により行うことができる。
素ガスを通気しながら培養する方法等の公知の手法を適
用することができる。培養温度は一般には35〜40℃が好
ましいが、菌が生育する温度であれば他の温度条件でも
よい。培養中の培地のpHは 6.0〜7.0 に維持することが
好ましい。培養時間は通常10〜20時間が適当である。培
養終了後の培養液は濃縮またはさらに乾燥して菌体濃度
を濃縮物もしくは乾燥物1gあたり1010個以上とする。こ
こで最高菌数は特に限定されていないが、通常、濃縮液
で約４×1010cells/g 、乾燥物で約５×1011cells/g 程
度である。濃縮は通常の手法、例えば減圧濃縮によって
行うことができる。乾燥も通常の手段、例えば真空乾
燥、噴霧乾燥、凍結乾燥等により行うことができる。
【００１３】本濃縮物または乾燥物は、そのまま、又は
加熱あるいは放射線殺菌後、経口投与した場合、腸内常
在菌、例えば日和見感染症を起すことが知られている大
腸菌、緑膿菌、クレブシェラ、エンテロバクター等の腸
管外の組織、例えば腹腔、腸間膜リンパ節、肝臓等への
移行（バクテリアルトランスロケーション）を防止する
ことができ、従ってヒトをはじめとする哺乳動物の日和
見感染症の予防、治療に有用であると期待される。上記
から明らかなごとく、本濃縮物または乾燥物はその中の
菌体が生菌体のみならず死菌体であっても有用である。
加熱あるいは放射線殺菌後、経口投与した場合、腸内常
在菌、例えば日和見感染症を起すことが知られている大
腸菌、緑膿菌、クレブシェラ、エンテロバクター等の腸
管外の組織、例えば腹腔、腸間膜リンパ節、肝臓等への
移行（バクテリアルトランスロケーション）を防止する
ことができ、従ってヒトをはじめとする哺乳動物の日和
見感染症の予防、治療に有用であると期待される。上記
から明らかなごとく、本濃縮物または乾燥物はその中の
菌体が生菌体のみならず死菌体であっても有用である。
【００１４】本濃縮物または乾燥物はそのまま、または
少なくとも１つの製薬補助剤と製薬組成物にして使用す
る。本濃縮物または乾燥物は通常経口的に投与し、それ
に適した形態に製剤化することができる。錠剤、カプセ
ル剤、顆粒剤、細粒剤、粉末剤は常用の製薬補助剤、例
えば結合剤（シロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソル
ビット、トラガカント、ポリビニルピロリドン、ヒドロ
キシプロピルセルロース等）、賦形剤（ラクトース、ス
クロース、コーンスターチ、リン酸カルシウム、ソルビ
ット、グリシン等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウ
ム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ等）、崩
壊剤（ポテトスターチ、カルボキシメチルセルロース
等）、湿潤剤（ラウリル硫酸ナトリウム等）を包含する
ことができる。錠剤は常法によりコーティングすること
ができる。経口液剤は水溶液等にしたり、ドライプロダ
クトにすることができる。そのような経口液剤は常用の
添加剤例えば保存剤（p-ヒドロキシ安息香酸メチルもし
くはプロピル、ソルビン酸等）を包含していてもよい。
少なくとも１つの製薬補助剤と製薬組成物にして使用す
る。本濃縮物または乾燥物は通常経口的に投与し、それ
に適した形態に製剤化することができる。錠剤、カプセ
ル剤、顆粒剤、細粒剤、粉末剤は常用の製薬補助剤、例
えば結合剤（シロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソル
ビット、トラガカント、ポリビニルピロリドン、ヒドロ
キシプロピルセルロース等）、賦形剤（ラクトース、ス
クロース、コーンスターチ、リン酸カルシウム、ソルビ
ット、グリシン等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウ
ム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ等）、崩
壊剤（ポテトスターチ、カルボキシメチルセルロース
等）、湿潤剤（ラウリル硫酸ナトリウム等）を包含する
ことができる。錠剤は常法によりコーティングすること
ができる。経口液剤は水溶液等にしたり、ドライプロダ
クトにすることができる。そのような経口液剤は常用の
添加剤例えば保存剤（p-ヒドロキシ安息香酸メチルもし
くはプロピル、ソルビン酸等）を包含していてもよい。
【００１５】本日和見感染症防御用組成物中の当該濃縮
物もしくは乾燥物の量は種々変えることができるが、通
常５〜100 ％(w/w) 、特に10〜100 ％(w/w) が適当であ
る。本日和見感染症防御用組成物の投与量は有効成分と
して１〜1,000mg/kg/dayが適当である。また、本濃縮物
または乾燥物は多量に摂取しても生体に悪影響を与えな
い利点を有することから、そのまま、または種々の栄養
分等を加えて、もしくは飲食品中に含有せしめて日和見
感染症防御の機能をもたせた機能性食品、健康食品とし
て食してもよい。すなわち、例えば各種ビタミン類、ミ
ネラル類等の栄養分を加えて、例えば栄養ドリンク、豆
乳、スープ等の液状の食品や各種形状の固形食品、さら
には粉末状としてそのままあるいは食餌もしくは各種食
品へ添加して用いることもできる。かかる機能性食品、
健康食品としての本日和見感染症防御用組成物中の有効
成分の含有量、摂取量はそれぞれ上記製薬における含有
量、投与量と同様でよい。
物もしくは乾燥物の量は種々変えることができるが、通
常５〜100 ％(w/w) 、特に10〜100 ％(w/w) が適当であ
る。本日和見感染症防御用組成物の投与量は有効成分と
して１〜1,000mg/kg/dayが適当である。また、本濃縮物
または乾燥物は多量に摂取しても生体に悪影響を与えな
い利点を有することから、そのまま、または種々の栄養
分等を加えて、もしくは飲食品中に含有せしめて日和見
感染症防御の機能をもたせた機能性食品、健康食品とし
て食してもよい。すなわち、例えば各種ビタミン類、ミ
ネラル類等の栄養分を加えて、例えば栄養ドリンク、豆
乳、スープ等の液状の食品や各種形状の固形食品、さら
には粉末状としてそのままあるいは食餌もしくは各種食
品へ添加して用いることもできる。かかる機能性食品、
健康食品としての本日和見感染症防御用組成物中の有効
成分の含有量、摂取量はそれぞれ上記製薬における含有
量、投与量と同様でよい。
【００１６】
【実施例】次に本発明を実施例により説明する。実施例
１ （培養液濃縮物） ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7、FERM P-13610を
カゼイン加水分解物 3.0％(w/v) 、ラクトース 4.0％(w
/v) 、酵母エキス 0.5％(w/v) を含む培地で炭酸ガスを
通気しながら37℃、pH 6.0で15時間嫌気培養し、培養物
を減圧濃縮して10倍濃縮物（菌体濃度２×1010cells/g)
を得た。本濃縮物の組成は、蛋白質19.2％(w/v) 、ラク
トース10.9％(w/v) 、酢酸 6.4％(w/v) 、乳酸 6.5％(w
/v）、灰分12.8％(w/v) 、ガラクトース 6.5％(w/v) 、
水分31.7％(w/v) 、その他 6.0％(w/v) であった。
１ （培養液濃縮物） ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7、FERM P-13610を
カゼイン加水分解物 3.0％(w/v) 、ラクトース 4.0％(w
/v) 、酵母エキス 0.5％(w/v) を含む培地で炭酸ガスを
通気しながら37℃、pH 6.0で15時間嫌気培養し、培養物
を減圧濃縮して10倍濃縮物（菌体濃度２×1010cells/g)
を得た。本濃縮物の組成は、蛋白質19.2％(w/v) 、ラク
トース10.9％(w/v) 、酢酸 6.4％(w/v) 、乳酸 6.5％(w
/v）、灰分12.8％(w/v) 、ガラクトース 6.5％(w/v) 、
水分31.7％(w/v) 、その他 6.0％(w/v) であった。
【００１７】実施例２ （バクテリアルトランスロケー
ションの抑制） ４週齢のSlc;ICR マウスの雄（日本ＳＬＣ）80匹を用
い、実施例１の濃縮物を基礎飼料（CMF:オリエンタル酵
母工業（株) 製）に１％(w/v) 添加したものを与える群
（MB群）、および対照として基礎飼料のみを与える群
（CMF 群）に分けた。実験に用いた飼料は、いずれもγ
線滅菌（50 kGy）したものを用いた。なお、各群とも餌
と水は実験終了時まで４週間自由摂取させた。実験開始
３週後に、両群マウスの腸内を無菌化するため、ストレ
プトマイシン2g/Lとペニシリン1g/Lを添加した飲水を３
日間与えた。次に、ブレインハートインフュジョン（BH
I)液体培地（Difco 社製）で一晩培養したエシェリヒア
・コリC25(E.coli C25、ストレプトマイシン耐性）株を
0.5mLずつ経口投与し、飲水はストレプトマイシン1g/L
入りとし、実験終了時まで与えた。実験開始４週後に、
両群のマウスにザイモサン（Zymosan 、以下Zy。酵母の
細胞壁粗画分の灰白色粉末。キサンチンオキシダーゼを
活性化させてスーパーオキシドアニオン（O2 - ）を多量
生成し、腸管壁に炎症を起こす。）を生理食塩水に溶か
し、0.1mg/g-bodyになるように腹腔内に投与した。対照
は生理食塩水を１mL腹腔内投与したものとした。
ションの抑制） ４週齢のSlc;ICR マウスの雄（日本ＳＬＣ）80匹を用
い、実施例１の濃縮物を基礎飼料（CMF:オリエンタル酵
母工業（株) 製）に１％(w/v) 添加したものを与える群
（MB群）、および対照として基礎飼料のみを与える群
（CMF 群）に分けた。実験に用いた飼料は、いずれもγ
線滅菌（50 kGy）したものを用いた。なお、各群とも餌
と水は実験終了時まで４週間自由摂取させた。実験開始
３週後に、両群マウスの腸内を無菌化するため、ストレ
プトマイシン2g/Lとペニシリン1g/Lを添加した飲水を３
日間与えた。次に、ブレインハートインフュジョン（BH
I)液体培地（Difco 社製）で一晩培養したエシェリヒア
・コリC25(E.coli C25、ストレプトマイシン耐性）株を
0.5mLずつ経口投与し、飲水はストレプトマイシン1g/L
入りとし、実験終了時まで与えた。実験開始４週後に、
両群のマウスにザイモサン（Zymosan 、以下Zy。酵母の
細胞壁粗画分の灰白色粉末。キサンチンオキシダーゼを
活性化させてスーパーオキシドアニオン（O2 - ）を多量
生成し、腸管壁に炎症を起こす。）を生理食塩水に溶か
し、0.1mg/g-bodyになるように腹腔内に投与した。対照
は生理食塩水を１mL腹腔内投与したものとした。
【００１８】これらのマウスはZy処理の24時間後に、頸
椎脱臼により殺し、無菌的に解剖した。腹部を80％アル
コールで消毒した後、滅菌したはさみで開腹した。腹腔
を滅菌した綿棒で拭い、それを BHI液体培地に移し、37
℃で24時間好気的に培養して腹腔へのバクテリアルトラ
ンスロケーションの有無を調べた。続いて、腸間膜リン
パ節(MLN) を無菌的に取り出し、 BHI液体培地（１mL）
を含むガラスホモジナイザーに移し均質化した。このホ
モジネートの一部をストレプトマイシン１g/L入り DHL
寒天培地に接種した。さらに盲腸も無菌的に切除し、同
様に BHI液体培地（９mL）を含むガラスホモジナイザー
に移し均質化した。そのホモジネートは滅菌リン酸緩衝
液で希釈し、希釈液の一部をストレプトマイシン１g/L
加 DHL寒天培地に接種した。これらの寒天培地は37℃で
24時間好気的に培養し、出現したコロニー数より、 MLN
ヘバクテリアルトランスロケーションした菌数と盲腸内
菌数を算出した（表１）。
椎脱臼により殺し、無菌的に解剖した。腹部を80％アル
コールで消毒した後、滅菌したはさみで開腹した。腹腔
を滅菌した綿棒で拭い、それを BHI液体培地に移し、37
℃で24時間好気的に培養して腹腔へのバクテリアルトラ
ンスロケーションの有無を調べた。続いて、腸間膜リン
パ節(MLN) を無菌的に取り出し、 BHI液体培地（１mL）
を含むガラスホモジナイザーに移し均質化した。このホ
モジネートの一部をストレプトマイシン１g/L入り DHL
寒天培地に接種した。さらに盲腸も無菌的に切除し、同
様に BHI液体培地（９mL）を含むガラスホモジナイザー
に移し均質化した。そのホモジネートは滅菌リン酸緩衝
液で希釈し、希釈液の一部をストレプトマイシン１g/L
加 DHL寒天培地に接種した。これらの寒天培地は37℃で
24時間好気的に培養し、出現したコロニー数より、 MLN
ヘバクテリアルトランスロケーションした菌数と盲腸内
菌数を算出した（表１）。
【００１９】無処理マウスで MLNにバクテリアルトラン
スロケーションしたE.coli C25の菌数をみると、MB群の
コントロールマウスでは、 CMF群のコントロールマウス
に比べて、有意にその菌数が低下していることが分かっ
た。一方、Zy投与をした際にE.coli C25が腹腔中へバク
テリアルトランスロケーションした発生率を表２に示
す。Zy投与により CMF群とMB群で有意にバクテリアルト
ランスロケーションの発生率が上昇した。これに対し、
MB群は CMF群と比べてコントロールマウス、Zy投与マウ
スのいずれとも、腹腔中へのバクテリアルトランスロケ
ーションが有意に抑制されることを認めた。また、 MLN
ヘバクテリアルトランスローションしたE.coli C25の菌
数（表３）も、コントロールとZy投与のいずれとも、MB
群の方が CMF群よりも有意に抑制された。さらに MLNへ
バクテリアルトランスロケーションした菌数を、各群の
コントロールマウスとZy投与マウスとで比較すると、Zy
によって誘発されたバクテリアルトランスロケーション
の程度でもMB群の方が CMF群より低かった。
スロケーションしたE.coli C25の菌数をみると、MB群の
コントロールマウスでは、 CMF群のコントロールマウス
に比べて、有意にその菌数が低下していることが分かっ
た。一方、Zy投与をした際にE.coli C25が腹腔中へバク
テリアルトランスロケーションした発生率を表２に示
す。Zy投与により CMF群とMB群で有意にバクテリアルト
ランスロケーションの発生率が上昇した。これに対し、
MB群は CMF群と比べてコントロールマウス、Zy投与マウ
スのいずれとも、腹腔中へのバクテリアルトランスロケ
ーションが有意に抑制されることを認めた。また、 MLN
ヘバクテリアルトランスローションしたE.coli C25の菌
数（表３）も、コントロールとZy投与のいずれとも、MB
群の方が CMF群よりも有意に抑制された。さらに MLNへ
バクテリアルトランスロケーションした菌数を、各群の
コントロールマウスとZy投与マウスとで比較すると、Zy
によって誘発されたバクテリアルトランスロケーション
の程度でもMB群の方が CMF群より低かった。
【００２０】
【表１】 表１ マウス腸間膜リンパ節へのバクテリアルトランスロケーション に及ぼすビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物の効果 ──────────────────────────────────── 実験 ＣＭＦa) 回数 ─────────────────────────── 腸間膜リンパ節 盲腸 ──────────────────────────────────── １ 214.7±88.33 c)（n=18） 9.6±0.15d)（n=17） ２ 146.1±75.47 （n=19） 9.7±0.21 （n=20） ３ 179.0±146.8 （n=15） 10.1±0.10 （n=16） ──────────────────────────────────── 実験 ＭＢb) 回数 ─────────────────────────── 腸間膜リンパ節 盲腸 ──────────────────────────────────── １ 169.5±124.8 （n=19） 9.4±0.30 （n=19） ２ 86.32±39.80 （n=19）** 9.5±0.27 （n=20） ３ 82.11±44.08 （n=19）* 10.1±0.22 （n=18） ──────────────────────────────────── * CMFに対して５％有意 ** CMFに対して１％有意a) ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物を含ま
ない飼料b) ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物を含む
飼料c) cfu/腸間膜リンパ節d) log(cfu/g-盲腸）； cfu : colony forming unit
ない飼料b) ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物を含む
飼料c) cfu/腸間膜リンパ節d) log(cfu/g-盲腸）； cfu : colony forming unit
【００２１】
【表２】 表２ マウス腹腔中へのバクテリアルトランスロケーションに及ぼす ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物の効果 ──────────────────────────────────── ＣＭＦa) ＭＢb) ──────────────────────────────────── コントロール ４／２０c) １／２１** Zymosan 投与 １１／２０ ７／２２* ──────────────────────────────────── * CMFに対して５％有意 ** CMFに対して１％有意a) ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物を含ま
ない飼料b) ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物を含む
飼料c) バクテリアルトランスロケーションを起こしたマウ
ス／実験に供試した マウス
ない飼料b) ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物を含む
飼料c) バクテリアルトランスロケーションを起こしたマウ
ス／実験に供試した マウス
【００２２】
【表３】 表３ ザイモサン処理したマウスのバクテリアルトランスロケーショ ンに及ぼすビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物の効果 ──────────────────────────────────── ＣＭＦa) 処理 ─────────────────────────── 腸間膜リンパ節 盲腸 ──────────────────────────────────── コントロール 180.0±72.4c)（n=17） 9.9±0.23d)（n=17） Zymosan 投与 269.0±225.0 （n=19） 9.7±0.20 （n=20） ──────────────────────────────────── ＭＢb) 処理 ─────────────────────────── 腸間膜リンパ節 盲腸 ──────────────────────────────────── コントロール 99.5±66.7 （n=20）** 9.9±0.21 （n=21） Zymosan 投与 127.5±133.1 （n=20）* 9.7±0.17 （n=22） ──────────────────────────────────── * CMFに対して５％有意 ** CMFに対して１％有意a) ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物を含ま
ない飼料b) ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物を含む
飼料c) cfu/腸間膜リンパ節d) log(cfu/g-盲腸）
ない飼料b) ビフィドバクテリウム・ロングムNo.7培養物を含む
飼料c) cfu/腸間膜リンパ節d) log(cfu/g-盲腸）
【００２３】 実施例３（カプセル剤） 実施例１の濃縮物の凍結乾燥物 200g コーンスターチ 150g タルク 80g ステアリン酸マグネシウム 30g 上記成分を十分混和し、60メッシュの金網を通過させて
粒度を調整した後、1,000 個のゼラチンカプセルに充填
する。
粒度を調整した後、1,000 個のゼラチンカプセルに充填
する。
【００２４】
【発明の効果】本発明によって副作用が全く認められな
い安全な日和見感染症防御用組成物が提供される。
い安全な日和見感染症防御用組成物が提供される。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 伊藤 喜久治 埼玉県志木市館２−１−７−207
Claims (1)
- 【請求項１】 ビフィドバクテリウム属の菌株の培養液
の濃縮物または乾燥物であって、１ｇあたり該菌を1010
個以上含有するものを有効成分とする日和見感染症防御
用組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5235580A JPH0769907A (ja) | 1993-08-27 | 1993-08-27 | 日和見感染症防御用組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5235580A JPH0769907A (ja) | 1993-08-27 | 1993-08-27 | 日和見感染症防御用組成物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0769907A true JPH0769907A (ja) | 1995-03-14 |
Family
ID=16988105
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5235580A Pending JPH0769907A (ja) | 1993-08-27 | 1993-08-27 | 日和見感染症防御用組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0769907A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7943124B2 (en) | 2005-02-02 | 2011-05-17 | Meiji Dairies Corporation | Composition for immunostimulation |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61257930A (ja) * | 1985-05-09 | 1986-11-15 | Morinaga Milk Ind Co Ltd | 感染防御剤 |
| JPH04335885A (ja) * | 1991-05-10 | 1992-11-24 | Terutake Yabiki | 抗ヘルペスウイルスならびに抗病性製剤及び食品添加剤 |
| JPH0551321A (ja) * | 1991-08-23 | 1993-03-02 | Yotsuba Nyugyo Kk | 免疫賦活剤 |
-
1993
- 1993-08-27 JP JP5235580A patent/JPH0769907A/ja active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61257930A (ja) * | 1985-05-09 | 1986-11-15 | Morinaga Milk Ind Co Ltd | 感染防御剤 |
| JPH04335885A (ja) * | 1991-05-10 | 1992-11-24 | Terutake Yabiki | 抗ヘルペスウイルスならびに抗病性製剤及び食品添加剤 |
| JPH0551321A (ja) * | 1991-08-23 | 1993-03-02 | Yotsuba Nyugyo Kk | 免疫賦活剤 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7943124B2 (en) | 2005-02-02 | 2011-05-17 | Meiji Dairies Corporation | Composition for immunostimulation |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20040622 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20040818 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20041026 |