JPH0770199A - ヒトγ−インターフェロン特異的受容体蛋白質に対する抗体 - Google Patents
ヒトγ−インターフェロン特異的受容体蛋白質に対する抗体Info
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 ヒトγ−インターフェロン特異的受容体蛋白
質に対する抗体の提供。 【構成】 各種ヒト細胞中の受容体に交差結合したイン
ターフェロンγを電気泳動により解析した結果、各種の
ヒトγ−インターフェロン特異的受容体蛋白質が得られ
た。これらの蛋白質を動物に免疫感作することによりこ
れらの蛋白質に対する抗体が得られた。これらの抗体
は、医薬としてのインターフェロンγの作用に選択性を
付与することができる。
質に対する抗体の提供。 【構成】 各種ヒト細胞中の受容体に交差結合したイン
ターフェロンγを電気泳動により解析した結果、各種の
ヒトγ−インターフェロン特異的受容体蛋白質が得られ
た。これらの蛋白質を動物に免疫感作することによりこ
れらの蛋白質に対する抗体が得られた。これらの抗体
は、医薬としてのインターフェロンγの作用に選択性を
付与することができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】各種ヒト細胞上の受容体に交差結
合した〔 125Ｉ〕インターフェロンγをＳＤＳ−ＰＡＧ
Ｅで解析した結果、ヒトインターフェロンγ受容体には
少なくとも３種の異なるタイプがあることが明らかにな
った。ＷＩＳＨ、ＨｅＬａ、ＦＳ１１および他の組織細
胞にＭｒ９０，０００〜１０５，０００の受容体が見出
された。単球およびミエロイド細胞系ＫＧ−１には、Ｍ
ｒ１４０，０００の受容体が見出され、一方、Ｄａｕｄ
ｉリンホブラストイド細胞にはＭｒ９５，０００〜１１
５，０００の受容体が見出された。
合した〔 125Ｉ〕インターフェロンγをＳＤＳ−ＰＡＧ
Ｅで解析した結果、ヒトインターフェロンγ受容体には
少なくとも３種の異なるタイプがあることが明らかにな
った。ＷＩＳＨ、ＨｅＬａ、ＦＳ１１および他の組織細
胞にＭｒ９０，０００〜１０５，０００の受容体が見出
された。単球およびミエロイド細胞系ＫＧ−１には、Ｍ
ｒ１４０，０００の受容体が見出され、一方、Ｄａｕｄ
ｉリンホブラストイド細胞にはＭｒ９５，０００〜１１
５，０００の受容体が見出された。
【０００２】これらの細胞から、抽出ついで固定化イン
ターフェロンγ上でのアフィニティークロマトグラフィ
ーにより、様々の受容体が単離された。得られた精製プ
レパレーションは、インターフェロンγに対する元来の
親和性を保持していて、マウスの免疫感作に使用すると
高度に特異的な抗体を産生した。
ターフェロンγ上でのアフィニティークロマトグラフィ
ーにより、様々の受容体が単離された。得られた精製プ
レパレーションは、インターフェロンγに対する元来の
親和性を保持していて、マウスの免疫感作に使用すると
高度に特異的な抗体を産生した。
【０００３】
【従来の技術】本発明は、ヒト細胞上のインターフェロ
ンγの各種受容体に対する抗体に関する。このような抗
体は、ある細胞へのインターフェロンγの作用を遮断す
ることができ、また他の細胞には影響しない。したがっ
て、医薬としてのインターフェロンγの作用に選択性を
付与することができるし、また内因性インターフェロン
γのある細胞への作用を他の細胞に対する作用には影響
を与えないで防止することが可能になる。
ンγの各種受容体に対する抗体に関する。このような抗
体は、ある細胞へのインターフェロンγの作用を遮断す
ることができ、また他の細胞には影響しない。したがっ
て、医薬としてのインターフェロンγの作用に選択性を
付与することができるし、また内因性インターフェロン
γのある細胞への作用を他の細胞に対する作用には影響
を与えないで防止することが可能になる。
【０００４】インターフェロンγは、活性化Ｔ−リンパ
球によって産生されるリンホカインの１種で、多くの免
疫調節活性を有する。ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて細胞殺
滅の方向に単球およびマクロファージを活性化する能力
から、一般的には免疫刺激物質として知られている（Ｌ
ｅほか：Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３１：２８２１〜２
８２３，１９８３）。さらに、インターフェロンγは、
免疫細胞および非免疫細胞の両者において、主要組織適
合遺伝子複合体（ＭＨＣ）抗原クラスＩおよびIIの直接
インデューサーである（Ｓｔｅｅｇほか：Ｊ．Ｅｘｐ．
Ｍｅｄ．，１５６：１７８０，１９８２；Ｗａｌｌａｃ
ｈほか：Ｎａｔｕｒｅ，２９９：８３３〜８３６，１９
８２）。これまでのところ、インターフェロンγは確認
されている唯一のクラスIIＭＨＣ抗原の直接インデュー
サーであり、きわめて低濃度（１〜１０ｐＭ）でもその
効果を発揮する。
球によって産生されるリンホカインの１種で、多くの免
疫調節活性を有する。ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて細胞殺
滅の方向に単球およびマクロファージを活性化する能力
から、一般的には免疫刺激物質として知られている（Ｌ
ｅほか：Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３１：２８２１〜２
８２３，１９８３）。さらに、インターフェロンγは、
免疫細胞および非免疫細胞の両者において、主要組織適
合遺伝子複合体（ＭＨＣ）抗原クラスＩおよびIIの直接
インデューサーである（Ｓｔｅｅｇほか：Ｊ．Ｅｘｐ．
Ｍｅｄ．，１５６：１７８０，１９８２；Ｗａｌｌａｃ
ｈほか：Ｎａｔｕｒｅ，２９９：８３３〜８３６，１９
８２）。これまでのところ、インターフェロンγは確認
されている唯一のクラスIIＭＨＣ抗原の直接インデュー
サーであり、きわめて低濃度（１〜１０ｐＭ）でもその
効果を発揮する。
【０００５】クラスII主要組織適合抗原（ヒトではＨＬ
Ａ−ＤＲ）は免疫系において主要な役割を果たしてい
る。これらのトランスメンブラン蛋白質は主に、単球、
マクロファージ、Ｂリンパ球、ランゲルハンス細胞およ
び胸腺上皮細胞上に発現する。これらは大部分の組織特
異的細胞や休止Ｔ細胞には存在しない。これらの蛋白質
の遺伝子は著しい多形現象を示し、多数の異なる血清型
を生じる。一般にＴ−リンパ球は、抗原が“抗原提供細
胞”たとえば単球の表面に提供され、クラスII主要組織
適合抗原たとえばヒトではＨＬＡ−ＤＲ、マウスではＩ
ａに結合したときにのみ、その抗原に応答する。そうす
ると、Ｔヘルパー細胞の抗原特異的クローンの増殖を生
じる。これらのＴ細胞は一方では、細胞障害性／サプレ
ッサーＴ細胞を誘発し、Ｂ細胞が成熟し抗体産生形質細
胞になるのを助けることになる。ＨＬＡ−ＤＲのもうひ
とつの重要な機能は、Ｂ細胞の増殖および成熟に必須な
Ｔ細胞とＢ細胞の相互作用におけるものである。ＨＬＡ
−ＤＲの役割のさらに詳細については免疫学の参考書に
みられるとおりである（たとえば、Ｔｈｅ Ｉｍｍｕｎ
ｅ Ｓｙｓｔｅｍ，Ｉ．ＭｃＣｏｎｎｅｌ，Ａ．Ｍｕｎ
ｒｏ＆ Ｍ．Ｗａｌｄｍａｎ著、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ
Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｏ
ｘｆｏｒｄ，１９８１）。すなわち、インターフェロン
γは、抗原提供細胞上の表面ＨＬＡ−ＤＲのレベルを修
飾することによって免疫応答の開始に中心的な役割を果
たし、細胞性細胞毒性の増大に重要な役割を果たしてい
る。
Ａ−ＤＲ）は免疫系において主要な役割を果たしてい
る。これらのトランスメンブラン蛋白質は主に、単球、
マクロファージ、Ｂリンパ球、ランゲルハンス細胞およ
び胸腺上皮細胞上に発現する。これらは大部分の組織特
異的細胞や休止Ｔ細胞には存在しない。これらの蛋白質
の遺伝子は著しい多形現象を示し、多数の異なる血清型
を生じる。一般にＴ−リンパ球は、抗原が“抗原提供細
胞”たとえば単球の表面に提供され、クラスII主要組織
適合抗原たとえばヒトではＨＬＡ−ＤＲ、マウスではＩ
ａに結合したときにのみ、その抗原に応答する。そうす
ると、Ｔヘルパー細胞の抗原特異的クローンの増殖を生
じる。これらのＴ細胞は一方では、細胞障害性／サプレ
ッサーＴ細胞を誘発し、Ｂ細胞が成熟し抗体産生形質細
胞になるのを助けることになる。ＨＬＡ−ＤＲのもうひ
とつの重要な機能は、Ｂ細胞の増殖および成熟に必須な
Ｔ細胞とＢ細胞の相互作用におけるものである。ＨＬＡ
−ＤＲの役割のさらに詳細については免疫学の参考書に
みられるとおりである（たとえば、Ｔｈｅ Ｉｍｍｕｎ
ｅ Ｓｙｓｔｅｍ，Ｉ．ＭｃＣｏｎｎｅｌ，Ａ．Ｍｕｎ
ｒｏ＆ Ｍ．Ｗａｌｄｍａｎ著、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ
Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｏ
ｘｆｏｒｄ，１９８１）。すなわち、インターフェロン
γは、抗原提供細胞上の表面ＨＬＡ−ＤＲのレベルを修
飾することによって免疫応答の開始に中心的な役割を果
たし、細胞性細胞毒性の増大に重要な役割を果たしてい
る。
【０００６】その後の研究により、インターフェロンγ
によるＨＬＡ−ＤＲの誘発は造血系細胞に限定されない
ことが明らかにされている。実際、繊維芽細胞、内皮細
胞、表皮ケラチン細胞、星状膠細胞および甲状腺濾胞細
胞を含めた多くのタイプの細胞が、ｉｎ ｖｉｔｒｏに
おいて、低用量のインターフェロンγに曝されたのちに
ＨＬＡ−ＤＲを発現する。非造血系細胞におけるＨＬＡ
−ＤＲの役割に関しては多くの研究者で論争がある。た
とえば、ＭａｓｏｎとＢａｒｃｌａｙ（Ｉｍｍｕｎｏｌ
ｏｇｙ，１６８：１６７〜１７１，１９８４）は、Ｉａ
陽性細胞（ＩａはヒトＨＬＡ−ＤＲに相当するマウスの
抗原である）がインターロイキン−１も産生し、したが
って抗原提供細胞として適性をもちうることを指摘して
いる。この種の細胞としてはとくに、血管内皮細胞（Ｈ
ｉｒｓｈｂｅｒｇほか：Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１５
２：２４９５，１９８０）、表皮ケラチン細胞（Ｌｕｇ
ｅｒほか：Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２８：２１４７，
１９８２）、および星状膠細胞（Ｆｏｎｔａｎａほか：
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２９：２１４３，１９８２）
が挙げられている。これらの場合すべてで、免疫刺激の
尺度とされたＴ細胞の増殖がこれらのＩａ陽性、非造血
細胞によって誘発された。
によるＨＬＡ−ＤＲの誘発は造血系細胞に限定されない
ことが明らかにされている。実際、繊維芽細胞、内皮細
胞、表皮ケラチン細胞、星状膠細胞および甲状腺濾胞細
胞を含めた多くのタイプの細胞が、ｉｎ ｖｉｔｒｏに
おいて、低用量のインターフェロンγに曝されたのちに
ＨＬＡ−ＤＲを発現する。非造血系細胞におけるＨＬＡ
−ＤＲの役割に関しては多くの研究者で論争がある。た
とえば、ＭａｓｏｎとＢａｒｃｌａｙ（Ｉｍｍｕｎｏｌ
ｏｇｙ，１６８：１６７〜１７１，１９８４）は、Ｉａ
陽性細胞（ＩａはヒトＨＬＡ−ＤＲに相当するマウスの
抗原である）がインターロイキン−１も産生し、したが
って抗原提供細胞として適性をもちうることを指摘して
いる。この種の細胞としてはとくに、血管内皮細胞（Ｈ
ｉｒｓｈｂｅｒｇほか：Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１５
２：２４９５，１９８０）、表皮ケラチン細胞（Ｌｕｇ
ｅｒほか：Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２８：２１４７，
１９８２）、および星状膠細胞（Ｆｏｎｔａｎａほか：
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２９：２１４３，１９８２）
が挙げられている。これらの場合すべてで、免疫刺激の
尺度とされたＴ細胞の増殖がこれらのＩａ陽性、非造血
細胞によって誘発された。
【０００７】さらに最近になって、Ｂｏｔｔａｚｚｏら
（Ｌａｎｃｅｔ，II，１１１５，１９８３；Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．Ｔｏｄａｙ，５：２３，１９８４）は、甲状腺濾
胞細胞上でのＨＬＲ−ＤＲの発現が甲状腺の自己免疫疾
患の発症および維持に関与している可能性を提示した。
その後（Ｌｏｎｄｅｉほか：Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２８：
８５，１９８５）、彼らは自己免疫甲状腺に由来し、同
原のＨＬＡ−ＤＲ陽性甲状腺細胞を認識するＴ細孔クロ
ーンを同定した。これらの著者らは、自己免疫甲状腺細
胞がそれら自身の表面自己抗原を提供する抗原提供細胞
として作用することを示唆している。
（Ｌａｎｃｅｔ，II，１１１５，１９８３；Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．Ｔｏｄａｙ，５：２３，１９８４）は、甲状腺濾
胞細胞上でのＨＬＲ−ＤＲの発現が甲状腺の自己免疫疾
患の発症および維持に関与している可能性を提示した。
その後（Ｌｏｎｄｅｉほか：Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２８：
８５，１９８５）、彼らは自己免疫甲状腺に由来し、同
原のＨＬＡ−ＤＲ陽性甲状腺細胞を認識するＴ細孔クロ
ーンを同定した。これらの著者らは、自己免疫甲状腺細
胞がそれら自身の表面自己抗原を提供する抗原提供細胞
として作用することを示唆している。
【０００８】他の研究では、Ｆｉｅｒｚほか（Ｊ．Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ．，１３４：３７８５〜３７９３，１９８
５）が、インターフェロンγ処置星状膠細胞はＩａ陽性
で、このような処置は上記星状膠細胞との接触によりＴ
細胞増殖の誘発を４倍にまで増強することを明らかにし
た。これらの著者は、ある刺激による星状膠細胞上での
Ｉａ抗原の異常な誘発が中枢神経系における自己免疫疾
患の発症の基盤と考えられると述べている。上述の研究
はｉｎ ｖｉｔｒｏで行われたものであるが、最近、ｉ
ｎ ｖｉｖｏでの研究がＧｒｏｅｎｅｗｅｇｅｎらによ
って実施された（Ｎａｔｕｒｅ，３１６：３６１〜３６
３，１９８５）。公知のインターフェロンγ産生阻害剤
であるシクロスポリンＡを用い、彼らは、イヌ内皮細胞
によるクラスII抗原の発現は構成的なものではなくむし
ろインターフェロン依存性であることを示している。こ
れらの著者は、非造血細胞のクラスIIＭＨＣ生成物（た
とえば、ヒトにおけるＨＬＡ−ＤＲおよびマウス細胞に
おけるＩａ）が免疫応答に関与しているこも示唆してい
る。
ｍｕｎｏｌ．，１３４：３７８５〜３７９３，１９８
５）が、インターフェロンγ処置星状膠細胞はＩａ陽性
で、このような処置は上記星状膠細胞との接触によりＴ
細胞増殖の誘発を４倍にまで増強することを明らかにし
た。これらの著者は、ある刺激による星状膠細胞上での
Ｉａ抗原の異常な誘発が中枢神経系における自己免疫疾
患の発症の基盤と考えられると述べている。上述の研究
はｉｎ ｖｉｔｒｏで行われたものであるが、最近、ｉ
ｎ ｖｉｖｏでの研究がＧｒｏｅｎｅｗｅｇｅｎらによ
って実施された（Ｎａｔｕｒｅ，３１６：３６１〜３６
３，１９８５）。公知のインターフェロンγ産生阻害剤
であるシクロスポリンＡを用い、彼らは、イヌ内皮細胞
によるクラスII抗原の発現は構成的なものではなくむし
ろインターフェロン依存性であることを示している。こ
れらの著者は、非造血細胞のクラスIIＭＨＣ生成物（た
とえば、ヒトにおけるＨＬＡ−ＤＲおよびマウス細胞に
おけるＩａ）が免疫応答に関与しているこも示唆してい
る。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】上述の研究は結論は主
として情況的であり、細胞対細胞相互作用およびＴ細胞
増殖にのみ基づいていた。しかしながら、これまでの報
告には、ＨＬＡ−ＤＲ保持組織細胞に対する直接的細胞
毒性または特異的自己抗体の誘発について触れたものは
なかった。このような考え方は最近、Ｍｏｗａｔ（Ｌａ
ｎｃｅｔ，１９８５年８月３日号、２８３頁）によって
示されたもので、彼は、自己免疫疾患におけるクラスII
ＭＨＣ抗原の発現の増大は単に組織病変へのエフェクタ
ーＴリンパ球の関与するものであることを示唆した。そ
して、自己崩壊過程の憎悪におけるＨＬＡ−ＤＲの役割
を排除はしていないが、注意深い実験的考察を示唆して
いる。
として情況的であり、細胞対細胞相互作用およびＴ細胞
増殖にのみ基づいていた。しかしながら、これまでの報
告には、ＨＬＡ−ＤＲ保持組織細胞に対する直接的細胞
毒性または特異的自己抗体の誘発について触れたものは
なかった。このような考え方は最近、Ｍｏｗａｔ（Ｌａ
ｎｃｅｔ，１９８５年８月３日号、２８３頁）によって
示されたもので、彼は、自己免疫疾患におけるクラスII
ＭＨＣ抗原の発現の増大は単に組織病変へのエフェクタ
ーＴリンパ球の関与するものであることを示唆した。そ
して、自己崩壊過程の憎悪におけるＨＬＡ−ＤＲの役割
を排除はしていないが、注意深い実験的考察を示唆して
いる。
【００１０】無関係な３系列の研究により、実際に、事
情はそれまで期待されていたのと全く逆であるかもしれ
ないこと、すなわち、インターフェロンγが現実に非造
血細胞上にＨＬＡ−ＤＲを誘発することによって免疫を
阻害する可能性のあることが、間接的な方法で示されて
いる。Ｔａｒａｍｅｌｌｉら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅ
ｒ，３４：７９７〜８０６，１９８４）は、転位ヒト黒
色腫細胞に対し、同原リンパ球仲介細胞毒性およびリン
パ球増殖の抑制という形でのＨＬＡ−ＤＲの役割を研究
した。ヒト腫瘍細胞は、その６０〜７０％の場合、同原
リンパ球の増殖およびその腫瘍特異的細胞障害Ｔ細胞へ
の分化を刺激できる。これはＩＬ−２の産生を介して行
われる。Ｔａｒａｍｅｌｌｉらは、転移黒色腫細胞（リ
ンパ小節からの）が同原リンパ球のＩＬ−２依存性刺激
を阻害できることを発見した。この阻害はＨＬＡ−ＤＲ
陽性黒色腫細胞にのみ認められた。
情はそれまで期待されていたのと全く逆であるかもしれ
ないこと、すなわち、インターフェロンγが現実に非造
血細胞上にＨＬＡ−ＤＲを誘発することによって免疫を
阻害する可能性のあることが、間接的な方法で示されて
いる。Ｔａｒａｍｅｌｌｉら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅ
ｒ，３４：７９７〜８０６，１９８４）は、転位ヒト黒
色腫細胞に対し、同原リンパ球仲介細胞毒性およびリン
パ球増殖の抑制という形でのＨＬＡ−ＤＲの役割を研究
した。ヒト腫瘍細胞は、その６０〜７０％の場合、同原
リンパ球の増殖およびその腫瘍特異的細胞障害Ｔ細胞へ
の分化を刺激できる。これはＩＬ−２の産生を介して行
われる。Ｔａｒａｍｅｌｌｉらは、転移黒色腫細胞（リ
ンパ小節からの）が同原リンパ球のＩＬ−２依存性刺激
を阻害できることを発見した。この阻害はＨＬＡ−ＤＲ
陽性黒色腫細胞にのみ認められた。
【００１１】しかも、ＨＬＡ−ＤＲ陰性細胞をインター
フェロンγで処理するとＨＬＡ−ＤＲ陽性に変化し、抑
制活性を獲得した。すなわち、インターフェロンγによ
る黒色腫細胞上へのＨＬＡ−ＤＲの誘導は、情況的に、
同原リンパ球仲介細胞毒性の阻害に連結していたのであ
る。もしこの現象が腫瘍細胞に限定されず、すべての細
胞に起こるものであれば、自己免疫疾患に伴う組織細胞
上のＨＬＡ−ＤＲの出現は、単球、キラー細胞および細
胞毒性Ｔリンパ球による組織障害を阻害する恒常性反応
の一部と考えることもできる。実際、Ｂｉｏｇｅｎ Ｉ
ｎｃ．により、慢性関節リウマチに罹患している癌患者
に抗新生物効果を期待してインターフェロンγが投与さ
れたところ、関節炎の改善の徴候を示したことが最近報
告されている。予備的な研究では、患者の７０％が疼痛
および腫張の緩解を経験している。これらの観察はｉｎ
ｖｉｔｒｏにおいて認められたような滑液細胞へのＨ
ＬＡ−ＤＲの発現増大に関係しているのかもしれない。
フェロンγで処理するとＨＬＡ−ＤＲ陽性に変化し、抑
制活性を獲得した。すなわち、インターフェロンγによ
る黒色腫細胞上へのＨＬＡ−ＤＲの誘導は、情況的に、
同原リンパ球仲介細胞毒性の阻害に連結していたのであ
る。もしこの現象が腫瘍細胞に限定されず、すべての細
胞に起こるものであれば、自己免疫疾患に伴う組織細胞
上のＨＬＡ−ＤＲの出現は、単球、キラー細胞および細
胞毒性Ｔリンパ球による組織障害を阻害する恒常性反応
の一部と考えることもできる。実際、Ｂｉｏｇｅｎ Ｉ
ｎｃ．により、慢性関節リウマチに罹患している癌患者
に抗新生物効果を期待してインターフェロンγが投与さ
れたところ、関節炎の改善の徴候を示したことが最近報
告されている。予備的な研究では、患者の７０％が疼痛
および腫張の緩解を経験している。これらの観察はｉｎ
ｖｉｔｒｏにおいて認められたような滑液細胞へのＨ
ＬＡ−ＤＲの発現増大に関係しているのかもしれない。
【００１２】細胞仲介細胞毒性のサプレッサーとして最
もよく検討されているインターフェロンγの役割は、天
然キラー（ＮＫ）活性の分野においてである。インター
フェロンは、標的細胞の障害の方向にＮＫ細胞を活性化
する一方、これらの標的細胞をＮＫに対してより抵抗性
にすることを示すいくつかの研究がある（たとえば、Ｔ
ｒｉｎｃｉｅｒｉ ＆ Ｓａｎｔｏｌｉ；Ｊ．Ｅｘｐ，
Ｍｅｄ．，１４７：１３１４，１９７８；Ｈａｎｎｓｏ
ｎほか：Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２５：２２２５，１
９８０；Ｗｅｌｓｈ：Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．，
１：５，１９８１；Ｗａｌｌａｃｈ：Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆ
ｅｒｏｎ Ｒｅｓ．，２：３２９，１９８２；Ｗａｌｌ
ａｃｈ：Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｌｉ．，７５：
３９０，１９８３）。
もよく検討されているインターフェロンγの役割は、天
然キラー（ＮＫ）活性の分野においてである。インター
フェロンは、標的細胞の障害の方向にＮＫ細胞を活性化
する一方、これらの標的細胞をＮＫに対してより抵抗性
にすることを示すいくつかの研究がある（たとえば、Ｔ
ｒｉｎｃｉｅｒｉ ＆ Ｓａｎｔｏｌｉ；Ｊ．Ｅｘｐ，
Ｍｅｄ．，１４７：１３１４，１９７８；Ｈａｎｎｓｏ
ｎほか：Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２５：２２２５，１
９８０；Ｗｅｌｓｈ：Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．，
１：５，１９８１；Ｗａｌｌａｃｈ：Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆ
ｅｒｏｎ Ｒｅｓ．，２：３２９，１９８２；Ｗａｌｌ
ａｃｈ：Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｌｉ．，７５：
３９０，１９８３）。
【００１３】すなわち、インターフェロンγは、細胞に
よって逆の作用をもつように思われる。単球およびＮＫ
細胞はインターフェロンγによって活性化され、細胞毒
性細胞としての機能が効率化されるが、一方、分解の標
的となる様々の非造血細胞はＮＫ抵抗性を付与される可
能性がある。しかも、ある種の腫瘍細胞は（転移黒色
腫、Ｔａｒａｍｅｌｌｉほか：Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅ
ｒ，３４：７９７，１９８４；マウス白血病、Ｒａｍｉ
ｌａ＆ｅｔ ａｌ．，：Ｎａｔｕｒｅ，３０４：４４
２，１９８３；神経膠腫、Ｇａｔｅｌｙほか：Ａｃｔａ
Ｎｅｕｒｏｃｈｉｒｕｒｇ．，６４：１７５，１９８
２；リンパ肉腫、Ｒｏｔｈほか：Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏ
ｌ．，１３０：３０３，１９８３）は、その表面上にお
けるＨＬＡ−ＤＲの発現と関連すると思われる免疫抑制
活性を有する。
よって逆の作用をもつように思われる。単球およびＮＫ
細胞はインターフェロンγによって活性化され、細胞毒
性細胞としての機能が効率化されるが、一方、分解の標
的となる様々の非造血細胞はＮＫ抵抗性を付与される可
能性がある。しかも、ある種の腫瘍細胞は（転移黒色
腫、Ｔａｒａｍｅｌｌｉほか：Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅ
ｒ，３４：７９７，１９８４；マウス白血病、Ｒａｍｉ
ｌａ＆ｅｔ ａｌ．，：Ｎａｔｕｒｅ，３０４：４４
２，１９８３；神経膠腫、Ｇａｔｅｌｙほか：Ａｃｔａ
Ｎｅｕｒｏｃｈｉｒｕｒｇ．，６４：１７５，１９８
２；リンパ肉腫、Ｒｏｔｈほか：Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏ
ｌ．，１３０：３０３，１９８３）は、その表面上にお
けるＨＬＡ−ＤＲの発現と関連すると思われる免疫抑制
活性を有する。
【００１４】
【課題を解決するための手段】本発明は、様々なタイプ
のインターフェロンγ受容体に対する抗体に関するもの
である。本発明の抗体は、選択的に、インターフェロン
γのある細胞への結合は遮断するが、他の細胞への結合
は遮断しない。本発明は、ヒト細胞がその組織によって
インターフェロンγに対する異なる受容体を有するとの
観察に基づくものである。インターフェロンγは細胞に
よって逆の作用を発揮するので、その受容体を選択的に
遮断することにより、たとえば免疫細胞の受容体の遮断
によりインターフェロンγの免疫刺激作用を低下させ、
一方、その非免疫細胞との相互作用は保持させて、自己
免疫疾患において生じる障害に対して非免疫細胞を抵抗
性にすることができる。
のインターフェロンγ受容体に対する抗体に関するもの
である。本発明の抗体は、選択的に、インターフェロン
γのある細胞への結合は遮断するが、他の細胞への結合
は遮断しない。本発明は、ヒト細胞がその組織によって
インターフェロンγに対する異なる受容体を有するとの
観察に基づくものである。インターフェロンγは細胞に
よって逆の作用を発揮するので、その受容体を選択的に
遮断することにより、たとえば免疫細胞の受容体の遮断
によりインターフェロンγの免疫刺激作用を低下させ、
一方、その非免疫細胞との相互作用は保持させて、自己
免疫疾患において生じる障害に対して非免疫細胞を抵抗
性にすることができる。
【００１５】本発明はまた、精製された活性型の上記受
容体およびそれに対する抗体の製造方法に関する。本発
明はまた、上述の抗体を含有する医薬組成物、ならびに
各種自己免疫疾患に対して免疫調節剤として投与するた
めの上記組成物の使用に関する。ヒトの各種細胞におけ
るインターフェロンγの受容体を、放射標識インターフ
ェロンγを用いた架橋結合実験によって同定した。要約
すれば、純粋なインターフェロンγを公知の方法に従っ
て〔 125Ｉ〕で標識した。得られたプレパレーションは
正常な生物学的活性を示した。このような標識インター
フェロンをヒトの各種細胞と４℃で反応させ、生成した
インターフェロン受容体複合体を共有結合により架橋結
合させた。ついで、架橋結合複合体を、ドデシル硫酸ナ
トリウム（ＳＤＳ）の存在下にポリアクリルアミドゲル
電気泳動（ＰＡＧＥ）によって分析したのち、オートラ
ジオグラフィーに付した。実施例に示すように、組織源
の異なるヒト細胞は、分子量の異なるインターフェロン
γ受容体を示し、これはそれらが構造的に異なることを
示唆した。
容体およびそれに対する抗体の製造方法に関する。本発
明はまた、上述の抗体を含有する医薬組成物、ならびに
各種自己免疫疾患に対して免疫調節剤として投与するた
めの上記組成物の使用に関する。ヒトの各種細胞におけ
るインターフェロンγの受容体を、放射標識インターフ
ェロンγを用いた架橋結合実験によって同定した。要約
すれば、純粋なインターフェロンγを公知の方法に従っ
て〔 125Ｉ〕で標識した。得られたプレパレーションは
正常な生物学的活性を示した。このような標識インター
フェロンをヒトの各種細胞と４℃で反応させ、生成した
インターフェロン受容体複合体を共有結合により架橋結
合させた。ついで、架橋結合複合体を、ドデシル硫酸ナ
トリウム（ＳＤＳ）の存在下にポリアクリルアミドゲル
電気泳動（ＰＡＧＥ）によって分析したのち、オートラ
ジオグラフィーに付した。実施例に示すように、組織源
の異なるヒト細胞は、分子量の異なるインターフェロン
γ受容体を示し、これはそれらが構造的に異なることを
示唆した。
【００１６】次に、各種細胞系からの受容体を、固定化
インターフェロンγカラム上アフィニティークロマトグ
ラフィーに付し、そのインターフェロンγへの結合能を
失なわせないで精製した。これらの精製プレパレーショ
ンを、ある細胞へのインターフェロンγの結合を選択的
に遮断し、他の細胞への結合は遮断しない抗体の開発に
使用した。
インターフェロンγカラム上アフィニティークロマトグ
ラフィーに付し、そのインターフェロンγへの結合能を
失なわせないで精製した。これらの精製プレパレーショ
ンを、ある細胞へのインターフェロンγの結合を選択的
に遮断し、他の細胞への結合は遮断しない抗体の開発に
使用した。
【００１７】本発明をさらに、以下の実施例により例示
する。例１〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γのその無傷細胞受容体への
架橋結合 細胞（その細胞種により１〜２×１０8 個）を過剰の非
標識ＩＦＮ−γの存在下または非存在下に、Ｃａ++およ
びＭｇ++含有ＰＢＳ中、〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γと４℃
で１．５時間インキュベートした。非分解性架橋結合試
薬〔ジスクシニミジルスベレート（ＤＳＳ）〕を最終濃
度０．５〜１ｍＭになるように、４℃、２０分間で添加
した。ついで細胞を、１．５％Ｔｒｉｔｏｎ ×−１０
０含有５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、０．１Ｍ ＮａＣ
ｌ、ｐＨ７．５中、穏やかに撹拌しながら４℃で１時
間、洗浄、再懸濁した。このプレパレーションを、２
７，０００×ｇで２０分間遠心分離した。上澄液をウサ
ギ−ＩＦＮ−γ血清（ウサギを同種ＩＦＮ−γで免疫感
作して調製）で免疫沈殿させ、１：５０に希釈した。室
温に２時間放置したのち、プロテイン−Ａ Ｓｅｐｈａ
ｒｏｓｅの懸濁液を加え、１時間室温に放置した。Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅビーズを次に洗浄し、結合した物質をＳ
ＤＳ−ＰＡＧＥサンプル緩衝液の添加により解離させ
た。サンプルの解析はＳＤＳ−ＰＡＧＥ（７．５％）に
よって行った。
する。例１〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γのその無傷細胞受容体への
架橋結合 細胞（その細胞種により１〜２×１０8 個）を過剰の非
標識ＩＦＮ−γの存在下または非存在下に、Ｃａ++およ
びＭｇ++含有ＰＢＳ中、〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γと４℃
で１．５時間インキュベートした。非分解性架橋結合試
薬〔ジスクシニミジルスベレート（ＤＳＳ）〕を最終濃
度０．５〜１ｍＭになるように、４℃、２０分間で添加
した。ついで細胞を、１．５％Ｔｒｉｔｏｎ ×−１０
０含有５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、０．１Ｍ ＮａＣ
ｌ、ｐＨ７．５中、穏やかに撹拌しながら４℃で１時
間、洗浄、再懸濁した。このプレパレーションを、２
７，０００×ｇで２０分間遠心分離した。上澄液をウサ
ギ−ＩＦＮ−γ血清（ウサギを同種ＩＦＮ−γで免疫感
作して調製）で免疫沈殿させ、１：５０に希釈した。室
温に２時間放置したのち、プロテイン−Ａ Ｓｅｐｈａ
ｒｏｓｅの懸濁液を加え、１時間室温に放置した。Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅビーズを次に洗浄し、結合した物質をＳ
ＤＳ−ＰＡＧＥサンプル緩衝液の添加により解離させ
た。サンプルの解析はＳＤＳ−ＰＡＧＥ（７．５％）に
よって行った。
【００１８】第１図には、ＷＩＳＨおよびＫＧ−１細胞
上の受容体に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの見
かけの分子量を示す。ＷＩＳＨ細胞の場合（第１図のレ
ーン２）、分子量１０５，０００〜１３０，０００の広
いバンドがみられた。受容体が１分子のＩＦＮ−γ（２
５ｋＤ）と結合したと仮定すると、受容体の分子量の計
算値は９０，０００〜１０５，０００となる。ＫＧ−１
ミエロイド細胞の場合（第１図レーン５）は分子量１６
５，０００の鋭いバンドを示し、分子量１４０，０００
〜１５０，０００の受容体を与えた。１００倍過剰の非
標識ＩＦＮ−γの添加によりこれらの架橋結合複合体の
生成は妨害され（第１図；レーン３、ＷＩＳＨ；レーン
６、ＫＧ−１）、結合の特異性を示している。９２，０
００以下の分子量のバンドは、第１図レーン１に示すよ
うにそれ自体と架橋結合したＩＦＮ−γに相当する。第
２図は類似のパターンを示す。ＷＩＳＨ細胞の受容体に
架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γは分子量１０５，
０００〜１３０，０００をもつようにみえた。
上の受容体に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの見
かけの分子量を示す。ＷＩＳＨ細胞の場合（第１図のレ
ーン２）、分子量１０５，０００〜１３０，０００の広
いバンドがみられた。受容体が１分子のＩＦＮ−γ（２
５ｋＤ）と結合したと仮定すると、受容体の分子量の計
算値は９０，０００〜１０５，０００となる。ＫＧ−１
ミエロイド細胞の場合（第１図レーン５）は分子量１６
５，０００の鋭いバンドを示し、分子量１４０，０００
〜１５０，０００の受容体を与えた。１００倍過剰の非
標識ＩＦＮ−γの添加によりこれらの架橋結合複合体の
生成は妨害され（第１図；レーン３、ＷＩＳＨ；レーン
６、ＫＧ−１）、結合の特異性を示している。９２，０
００以下の分子量のバンドは、第１図レーン１に示すよ
うにそれ自体と架橋結合したＩＦＮ−γに相当する。第
２図は類似のパターンを示す。ＷＩＳＨ細胞の受容体に
架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γは分子量１０５，
０００〜１３０，０００をもつようにみえた。
【００１９】〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γが正常末梢血液単
球の受容体に架橋結合した場合、分子量１６５，０００
のバンドが得られた。このバンドはＫＧ−１細胞（ミエ
ロイド細胞系）にみられたもののひとつと同一であっ
た。正常末梢血液Ｔリンパ球では、ＩＦＮ−γ受容体複
合体と関連づけられるバンドは全く検知されず、分子量
９２，０００以下の出現したバンドはそれ自体と架橋結
合したＩＦＮ−γに相当する。第３図には、先に示した
ＷＩＳＨ細胞上の受容体と同じ分子量がみられる。Ｈｅ
Ｌａ Ｈ−２２９細胞（繊維芽細胞系）は複合体の１０
５，０００〜１３０，０００の広いバンドを示す。Ｄａ
ｕｄｉ細胞（Ｂ−リンホブラストイド）も１２０，００
０〜１４０，０００の広いバンドを示す。ＭＯＬＴ−４
（Ｔ細胞系）では複合体は検知されなかった。
球の受容体に架橋結合した場合、分子量１６５，０００
のバンドが得られた。このバンドはＫＧ−１細胞（ミエ
ロイド細胞系）にみられたもののひとつと同一であっ
た。正常末梢血液Ｔリンパ球では、ＩＦＮ−γ受容体複
合体と関連づけられるバンドは全く検知されず、分子量
９２，０００以下の出現したバンドはそれ自体と架橋結
合したＩＦＮ−γに相当する。第３図には、先に示した
ＷＩＳＨ細胞上の受容体と同じ分子量がみられる。Ｈｅ
Ｌａ Ｈ−２２９細胞（繊維芽細胞系）は複合体の１０
５，０００〜１３０，０００の広いバンドを示す。Ｄａ
ｕｄｉ細胞（Ｂ−リンホブラストイド）も１２０，００
０〜１４０，０００の広いバンドを示す。ＭＯＬＴ−４
（Ｔ細胞系）では複合体は検知されなかった。
【００２０】例２ ヒトＷＩＳＨ細胞からのＩＦＮ−γ
受容の体の単離 ヒトＷＩＳＨ細胞を、１０％ウシ胎仔血清とグルタミン
２ｍＭを補充した最小必須培地中で生育させた。細胞を
リン酸緩衝食塩溶液（ＰＢＳ）で洗浄した。１〜１０×
１０10個の細胞を可溶化緩衝液（最終濃度：１０ｍＭ
Ｈｅｐｅｓ，ｐＨ７．４、１〜２％Ｔｒｉｔｏｎ×−１
００、１ｍＭ ＰＭＳＦおよび２０単位／ｍｌアプロチ
ニン）中で可溶化した。懸濁液を最初１０，０００×ｇ
で１５分間、ついで１００，０００×ｇで６０分間遠心
分離した。上澄液を固定化ＩＦＮ−γカラム（Ａｆｆｉ
ｇｅｌ−１０ １ｍｌあたり７ｍｇ）に適用した。負荷
は流速０．２〜０．５ｍｌ／分とした。ついでカラムを
ＰＢＳ（５０ｍｌ）で洗浄し、結合した物質を５０ｍＭ
Ｎａ2 ＣＯ3 および０．５Ｍ ＮａＣｌの溶液、ｐＨ
１１で溶出した。１ｍｌの分画を集め、３Ｍ酢酸で直ち
に中和した。各分画について〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γへ
の結合能および蛋白質量を試験した。第４図には、ＷＩ
ＳＨ細胞についてのアフィニティーカラムの溶出像を示
す。蛋白質はフロレスカミンで定量した。比活性による
精製係数少なくとも２６００が１工程で得られた。
受容の体の単離 ヒトＷＩＳＨ細胞を、１０％ウシ胎仔血清とグルタミン
２ｍＭを補充した最小必須培地中で生育させた。細胞を
リン酸緩衝食塩溶液（ＰＢＳ）で洗浄した。１〜１０×
１０10個の細胞を可溶化緩衝液（最終濃度：１０ｍＭ
Ｈｅｐｅｓ，ｐＨ７．４、１〜２％Ｔｒｉｔｏｎ×−１
００、１ｍＭ ＰＭＳＦおよび２０単位／ｍｌアプロチ
ニン）中で可溶化した。懸濁液を最初１０，０００×ｇ
で１５分間、ついで１００，０００×ｇで６０分間遠心
分離した。上澄液を固定化ＩＦＮ−γカラム（Ａｆｆｉ
ｇｅｌ−１０ １ｍｌあたり７ｍｇ）に適用した。負荷
は流速０．２〜０．５ｍｌ／分とした。ついでカラムを
ＰＢＳ（５０ｍｌ）で洗浄し、結合した物質を５０ｍＭ
Ｎａ2 ＣＯ3 および０．５Ｍ ＮａＣｌの溶液、ｐＨ
１１で溶出した。１ｍｌの分画を集め、３Ｍ酢酸で直ち
に中和した。各分画について〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γへ
の結合能および蛋白質量を試験した。第４図には、ＷＩ
ＳＨ細胞についてのアフィニティーカラムの溶出像を示
す。蛋白質はフロレスカミンで定量した。比活性による
精製係数少なくとも２６００が１工程で得られた。
【００２１】例３ ヒト（ＫＧ−１）細胞のＩＦＮ−γ
受容体の単離 ヒトＫＧ−１細胞を１０％ウシ胎仔血清とグルタミン２
ｍＭを補充した（α−改変）最小必須培地中で生育させ
た。細胞リン酸緩衝食塩溶液（ＰＢＳ）で洗浄した。１
〜１０×１０10個の細胞を可溶化緩衝液（最終濃度：１
０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１〜２％Ｔｒｉｔｏ
ｎ×−１００、１ｍＭ ＰＭＳＦおよび２０単位／ｍｌ
アプロチニン）中で可溶化した。懸濁液を最初１０，０
００×ｇで１５分間ついで１００，０００×ｇで６０分
間遠心分離した。上澄液を固定化ＩＦＮ−γカラム（Ａ
ｆｆｉｇｅｌ−１０ １ｍｌあたり７ｍｇ）に適用し
た。負荷は流速０．２〜０．５ｍｌ／分とした。ついで
カラムをＰＢＳ（５０ｍｌ）で洗浄し、結合した物質を
適当な緩衝液で溶出した。１ｍｌの分画を集め、直ちに
中和した。各分画について〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ結合
能および蛋白含量を試験した。比活性に基づく精製係数
少なくとも１５００が１工程で得られた。
受容体の単離 ヒトＫＧ−１細胞を１０％ウシ胎仔血清とグルタミン２
ｍＭを補充した（α−改変）最小必須培地中で生育させ
た。細胞リン酸緩衝食塩溶液（ＰＢＳ）で洗浄した。１
〜１０×１０10個の細胞を可溶化緩衝液（最終濃度：１
０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１〜２％Ｔｒｉｔｏ
ｎ×−１００、１ｍＭ ＰＭＳＦおよび２０単位／ｍｌ
アプロチニン）中で可溶化した。懸濁液を最初１０，０
００×ｇで１５分間ついで１００，０００×ｇで６０分
間遠心分離した。上澄液を固定化ＩＦＮ−γカラム（Ａ
ｆｆｉｇｅｌ−１０ １ｍｌあたり７ｍｇ）に適用し
た。負荷は流速０．２〜０．５ｍｌ／分とした。ついで
カラムをＰＢＳ（５０ｍｌ）で洗浄し、結合した物質を
適当な緩衝液で溶出した。１ｍｌの分画を集め、直ちに
中和した。各分画について〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ結合
能および蛋白含量を試験した。比活性に基づく精製係数
少なくとも１５００が１工程で得られた。
【００２２】例４ ヒトＤａｕｄｉ細胞からのＩＦＮ−
γ受容体の単離 ヒトＤａｕｄｉ細胞を、１０％ウシ胎仔血清とグルタミ
ン２ｍＭを補充したＲＰＭＩ−１６４０培地中で生育さ
せた。細胞をリン酸緩衝食塩溶液（ＰＢＳ）で洗浄し
た。１〜１０×１０10個の細胞を可溶化緩衝液（最終濃
度：１０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１〜２％Ｔｒ
ｉｔｏｎ×−１００、１ｍＭ ＰＭＳＦおよび２０単位
／ｍｌのアプロチニン）中で可溶化した。懸濁液を最初
１０，０００×ｇで１５分間ついで１００，０００×ｇ
で６０分間遠心分離した。上澄液を固定化ＩＦＮ−γカ
ラム（Ａｆｆｉｇｅｌ−１０ １ｍｌあたり７ｍｇ）に
適用した。負荷は流速０．２〜０．５ｍｌ／分で行っ
た。ついでカラムをＰＢＳ（５０ｍｌ）で洗浄し、結合
した物質を適当な緩衝液で溶出した。１ｍｌの分画を集
め直ちに中和した。各分画について〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ
−γ結合能および蛋白含量を試験した。蛋白はフロレス
カミンで定量した。比活性に基づく精製係数少なくとも
１０００が１工程で得られた。
γ受容体の単離 ヒトＤａｕｄｉ細胞を、１０％ウシ胎仔血清とグルタミ
ン２ｍＭを補充したＲＰＭＩ−１６４０培地中で生育さ
せた。細胞をリン酸緩衝食塩溶液（ＰＢＳ）で洗浄し
た。１〜１０×１０10個の細胞を可溶化緩衝液（最終濃
度：１０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１〜２％Ｔｒ
ｉｔｏｎ×−１００、１ｍＭ ＰＭＳＦおよび２０単位
／ｍｌのアプロチニン）中で可溶化した。懸濁液を最初
１０，０００×ｇで１５分間ついで１００，０００×ｇ
で６０分間遠心分離した。上澄液を固定化ＩＦＮ−γカ
ラム（Ａｆｆｉｇｅｌ−１０ １ｍｌあたり７ｍｇ）に
適用した。負荷は流速０．２〜０．５ｍｌ／分で行っ
た。ついでカラムをＰＢＳ（５０ｍｌ）で洗浄し、結合
した物質を適当な緩衝液で溶出した。１ｍｌの分画を集
め直ちに中和した。各分画について〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ
−γ結合能および蛋白含量を試験した。蛋白はフロレス
カミンで定量した。比活性に基づく精製係数少なくとも
１０００が１工程で得られた。
【００２３】例５ 〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの結合およ
び非標識リガンドとの競合 ＷＩＳＨ細胞のアフィニティーカラムからの各種フラク
ションの一部（蛋白含量２００ｎｇ）をとり、非標識Ｉ
ＦＮ−γ（１３０，０００単位）を加えまたは加えない
で、〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ（１３０単位）と混合し
た。４℃で２時間インキュベートしたのち、担体として
γ−グロブリンを加え、プロピレングリコール（ＰＥ
Ｇ）（分子量８０００）で蛋白質を沈殿させた。混合物
をミリポア（ＨＡＷＰ、０．４５μ）上で濾過し、膜に
結合した放射能を測定した。可溶性受容体を含まないほ
かは同じ反応混合物でバックグランドのカウントを測定
した。第１表は、溶出分画中の蛋白質への〔 125Ｉ〕−
ＩＦＮ−γの結合は非標識リガンドによって完全に置換
されたことを示し、これは結合の特異性を示唆してい
る。バックグランドは溶出分画中の総結合の２０％未満
であり、これはすべての読みから差し引いた。
び非標識リガンドとの競合 ＷＩＳＨ細胞のアフィニティーカラムからの各種フラク
ションの一部（蛋白含量２００ｎｇ）をとり、非標識Ｉ
ＦＮ−γ（１３０，０００単位）を加えまたは加えない
で、〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ（１３０単位）と混合し
た。４℃で２時間インキュベートしたのち、担体として
γ−グロブリンを加え、プロピレングリコール（ＰＥ
Ｇ）（分子量８０００）で蛋白質を沈殿させた。混合物
をミリポア（ＨＡＷＰ、０．４５μ）上で濾過し、膜に
結合した放射能を測定した。可溶性受容体を含まないほ
かは同じ反応混合物でバックグランドのカウントを測定
した。第１表は、溶出分画中の蛋白質への〔 125Ｉ〕−
ＩＦＮ−γの結合は非標識リガンドによって完全に置換
されたことを示し、これは結合の特異性を示唆してい
る。バックグランドは溶出分画中の総結合の２０％未満
であり、これはすべての読みから差し引いた。
【００２４】例６ 飽和結合部位 例２からの溶出分画Ｎｏ．６の一部（蛋白含量２００ｎ
ｇ）をとり、〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γを濃度を増加させ
ていって（５〜６０００単位／ｍｌ）混合した。蛋白を
沈殿させ、前述したと同様にして濾過した。第５図は、
〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γが４℃でも３７℃でも飽和様式
で受容体に結合することを示している。飽和曲線のＳｃ
ａｔｃｈａｒｄ解析ではいずれの温度でも直線性のプロ
ットを示す。Ｋｄは４℃で４．８×１０-10 Ｍ、３７℃
で２．９５×１０10Ｍであった。これらの値は、正常細
胞について報告されている値と同じオーダーである。
ｇ）をとり、〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γを濃度を増加させ
ていって（５〜６０００単位／ｍｌ）混合した。蛋白を
沈殿させ、前述したと同様にして濾過した。第５図は、
〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γが４℃でも３７℃でも飽和様式
で受容体に結合することを示している。飽和曲線のＳｃ
ａｔｃｈａｒｄ解析ではいずれの温度でも直線性のプロ
ットを示す。Ｋｄは４℃で４．８×１０-10 Ｍ、３７℃
で２．９５×１０10Ｍであった。これらの値は、正常細
胞について報告されている値と同じオーダーである。
【００２５】例７ ＷＩＳＨからの精製受容体の架橋結
合および免疫沈殿による解析 例２のアフィニティーカラムの各種分画の一部を〔 125
Ｉ〕−ＩＦＮ−γと混合し、最終容量を６０μｌとし
た。ジ−Ｎ−ヒドロキシスクシニミジルスベレート（Ｄ
ＳＳ）を加え、インキュベートしたのち、ウサギ抗−Ｉ
ＦＮ−γ血清を加えた。複合体をプロテイン−Ａ Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅで沈殿させた。サンプルの分析はＳＤＳ
−ＰＡＧＥ（７．５％）、ついでオートラジオグラフィ
ーによって行った。第６図は、溶出分画中に得られた高
分子量バントと同時に、分子量１１５，０００の複合体
を示す。免疫沈殿の特異性をさらに確認するために、Ｉ
ＦＮ−γ（０、１０または１０００倍モル過剰）または
ＩＦＮ−α（１０００倍モル過剰）との競合実験を実施
した。免疫沈殿の特異的阻害はＩＦＮ−γによってのみ
認められた（第６図）。
合および免疫沈殿による解析 例２のアフィニティーカラムの各種分画の一部を〔 125
Ｉ〕−ＩＦＮ−γと混合し、最終容量を６０μｌとし
た。ジ−Ｎ−ヒドロキシスクシニミジルスベレート（Ｄ
ＳＳ）を加え、インキュベートしたのち、ウサギ抗−Ｉ
ＦＮ−γ血清を加えた。複合体をプロテイン−Ａ Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅで沈殿させた。サンプルの分析はＳＤＳ
−ＰＡＧＥ（７．５％）、ついでオートラジオグラフィ
ーによって行った。第６図は、溶出分画中に得られた高
分子量バントと同時に、分子量１１５，０００の複合体
を示す。免疫沈殿の特異性をさらに確認するために、Ｉ
ＦＮ−γ（０、１０または１０００倍モル過剰）または
ＩＦＮ−α（１０００倍モル過剰）との競合実験を実施
した。免疫沈殿の特異的阻害はＩＦＮ−γによってのみ
認められた（第６図）。
【００２６】例８ マウスの免疫感作 各種細胞系からのインターフェロンγ受容体の部分精製
プレパレーションを抗原として使用し、雌性ＢＡＬＢ／
ｃマウスを免疫感作した。受容体プレパレーション５μ
ｇを完全フロインドアジュバンド中に乳化し、マウスに
最初に皮下注射した。この注射を１週間隔でさらに３回
くり返した。抗体の発生レベルは、マウス血清のヒトＷ
ＩＳＨ細胞中でのＩＦＮ−γの抗ウイルス活性阻害能に
より、また〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γのＫＧ−１およびＤ
ａｕｄｉ細胞への結合の阻害能により追跡した。他の実
験では、９５，０００バンド蛋白質（２μｇ）を含有す
るポリアクリルアミドゲルを細切し、完全フロインドア
ジュバント中に乳化して、マウスに皮下注射した。３０
日後に、９５，０００バンド蛋白質（２μｇ）含有ポリ
アクリルアミドゲルを細切してマウスに皮下注射した。
感作をさらに３回１週間隔でくり返し、抗体の発生レベ
ルはマウス血清のヒトＷＩＳＨ細胞中でのＩＦＮ−γの
抗ウイルス活性阻害能により追跡した。
プレパレーションを抗原として使用し、雌性ＢＡＬＢ／
ｃマウスを免疫感作した。受容体プレパレーション５μ
ｇを完全フロインドアジュバンド中に乳化し、マウスに
最初に皮下注射した。この注射を１週間隔でさらに３回
くり返した。抗体の発生レベルは、マウス血清のヒトＷ
ＩＳＨ細胞中でのＩＦＮ−γの抗ウイルス活性阻害能に
より、また〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γのＫＧ−１およびＤ
ａｕｄｉ細胞への結合の阻害能により追跡した。他の実
験では、９５，０００バンド蛋白質（２μｇ）を含有す
るポリアクリルアミドゲルを細切し、完全フロインドア
ジュバント中に乳化して、マウスに皮下注射した。３０
日後に、９５，０００バンド蛋白質（２μｇ）含有ポリ
アクリルアミドゲルを細切してマウスに皮下注射した。
感作をさらに３回１週間隔でくり返し、抗体の発生レベ
ルはマウス血清のヒトＷＩＳＨ細胞中でのＩＦＮ−γの
抗ウイルス活性阻害能により追跡した。
【００２７】例９ 医薬組成物 本発明の化合物は、医薬用組成物の製造の場合の公知方
法に従って処方することができる。すなわち、本発明の
精製受容体もしくは抗体生成物またはその抗体もしくは
インターフェロンγのＦ（ａｂ）フラグメントのいずれ
かを、医薬用に許容される担体ビークルと混合して配合
する。適当なビークルおよび処方はＥ．Ｗ．Ｍａｒｔｉ
ｎ編、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ
ｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓに記載されている。このよう
な組成物は、本発明の活性物質の有効量を適当量のビー
クルとともに含有し、宿主への効果的な投与に適した医
薬用として許容される組成物を提供するものである。
法に従って処方することができる。すなわち、本発明の
精製受容体もしくは抗体生成物またはその抗体もしくは
インターフェロンγのＦ（ａｂ）フラグメントのいずれ
かを、医薬用に許容される担体ビークルと混合して配合
する。適当なビークルおよび処方はＥ．Ｗ．Ｍａｒｔｉ
ｎ編、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ
ｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓに記載されている。このよう
な組成物は、本発明の活性物質の有効量を適当量のビー
クルとともに含有し、宿主への効果的な投与に適した医
薬用として許容される組成物を提供するものである。
【００２８】例１０ 非経口投与 免疫抑制または免疫調節処置を必要とする対象に、本発
明の抗体もしくは精製受容体、その両者またはインター
フェロンγとの混合物を非経口的に投与することができ
る。投与量および投与回数は、他の抗体の臨床的検討に
現在使用されている方法と同様に選択される。たとえば
約０．１〜１００ｍｇ、またさらに大きな効果を期待す
るときはさらに大量を使用することができる。本発明に
おいて非経口的に適用できるほぼ均一な抗体の適当な投
与剤型の例を示せば、抗体６ｇを米局ヒト血清アルブミ
ン２５０ｍｌに溶解し、この溶液を滅菌フィルターに通
し、濾液を無菌的に１００個のバイアルに分割充填す
る。非経口投与に適した純粋な抗体６０ｍｇをそれぞれ
含有するバイアルが得られる。このバイアルは凍結乾燥
することが好ましく、使用前に滅菌水を用いて再生す
る。
明の抗体もしくは精製受容体、その両者またはインター
フェロンγとの混合物を非経口的に投与することができ
る。投与量および投与回数は、他の抗体の臨床的検討に
現在使用されている方法と同様に選択される。たとえば
約０．１〜１００ｍｇ、またさらに大きな効果を期待す
るときはさらに大量を使用することができる。本発明に
おいて非経口的に適用できるほぼ均一な抗体の適当な投
与剤型の例を示せば、抗体６ｇを米局ヒト血清アルブミ
ン２５０ｍｌに溶解し、この溶液を滅菌フィルターに通
し、濾液を無菌的に１００個のバイアルに分割充填す
る。非経口投与に適した純粋な抗体６０ｍｇをそれぞれ
含有するバイアルが得られる。このバイアルは凍結乾燥
することが好ましく、使用前に滅菌水を用いて再生す
る。
【００２９】
【表１】 第１表 〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの結合と非標識リガンドとの競合 ──────────────────────────────────── 総結合 特異的結合b) サンプル ｃｐｍ／２００ｎｇ （％） ──────────────────────────────────── 負荷 ０ ０ 廃液 ０ ０ 洗液２ ０ ０ 溶出液１ ４７，２００ １００ 〃 ２ ４８，０００ １００ 〃 ３ ４７，０００ １００ 〃 ４ ４９，０００ １００ ──────────────────────────────────── ａ）バックグランド（１０，２００ｃｐｍ）を差し引い
た。 適用：２６８，０００ｃｐｍ（１３０単位） ｂ）１０００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下におけ
る 125Ｉ−ＩＦＮ−γの結合
た。 適用：２６８，０００ｃｐｍ（１３０単位） ｂ）１０００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下におけ
る 125Ｉ−ＩＦＮ−γの結合
【図１】図１は、電気泳動の結果を示す写真であり、〔
125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの、ＷＩＳＨ細胞およびＫＧ−１
細胞への結合および架橋結合、ならびに非標識ＩＦＮ−
γとの競合を示す。 レーン１：それ自体と架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ
−γ レーン２：ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−Ｉ
ＦＮ−γ レーン３：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン４：分子量マーカー（上から下へ：ミオシン、２
００，０００；ホスホリラーゼＢ、９２，０００；ウシ
血清アルブミン、６９，０００；オバルブミン、４６，
０００） レーン５：ＫＧ−１細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−Ｉ
ＦＮ−γ レーン６：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
ＫＧ−１細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ
125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの、ＷＩＳＨ細胞およびＫＧ−１
細胞への結合および架橋結合、ならびに非標識ＩＦＮ−
γとの競合を示す。 レーン１：それ自体と架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ
−γ レーン２：ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−Ｉ
ＦＮ−γ レーン３：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン４：分子量マーカー（上から下へ：ミオシン、２
００，０００；ホスホリラーゼＢ、９２，０００；ウシ
血清アルブミン、６９，０００；オバルブミン、４６，
０００） レーン５：ＫＧ−１細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−Ｉ
ＦＮ−γ レーン６：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
ＫＧ−１細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ
【図２】図２は、電気泳動の結果を示す写真であり、受
容体に対する〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの結合および架橋
結合、ならびに非標識ＩＦＮ−γとの競合を示す。 レーン１：分子量マーカー（上から下へ：ミオシン、２
００，０００；ホスホリラーゼＢ、９２，０００；ウシ
血清アルブミン、６９，０００；オバルブミン、４６，
０００） レーン２：ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−Ｉ
ＦＮ−γ レーン３：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン４：正常末梢血単球に架橋結合した〔 125Ｉ〕−
ＩＦＮ−γ レーン５：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
正常末梢血単球に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン６：正常末梢血Ｔリンパ球に架橋結合した〔 125
Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン７：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
正常末梢血Ｔリンパ球に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦ
Ｎ−γ
容体に対する〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの結合および架橋
結合、ならびに非標識ＩＦＮ−γとの競合を示す。 レーン１：分子量マーカー（上から下へ：ミオシン、２
００，０００；ホスホリラーゼＢ、９２，０００；ウシ
血清アルブミン、６９，０００；オバルブミン、４６，
０００） レーン２：ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−Ｉ
ＦＮ−γ レーン３：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン４：正常末梢血単球に架橋結合した〔 125Ｉ〕−
ＩＦＮ−γ レーン５：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
正常末梢血単球に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン６：正常末梢血Ｔリンパ球に架橋結合した〔 125
Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン７：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
正常末梢血Ｔリンパ球に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦ
Ｎ−γ
【図３】図３は、電気泳動の結果を示す写真であり、受
容体に対する〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの結合および架橋
結合ならびに非標識ＩＦＮ−γとの競合を示す。 レーン１および６：分子量マーカー（上から下へ：ミオ
シン、２００，０００；ホスホリラーゼＢ、９２，００
０；ウシ血清アルブミン、６９，０００） レーン２：ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−Ｉ
ＦＮ−γ レーン３：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン４：Ｈ−２２９細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−
ＩＦＮ−γ レーン５：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下Ｈ
−２２９細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン７：ＭＯＬＴ−４細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕
−ＩＦＮ−γ レーン８：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
ＭＯＬＴ−４細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−
γ レーン９：Ｄａｕｄｉ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−
ＩＦＮ−γ レーン１０：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下
にＤａｕｄｉ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−
γ
容体に対する〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの結合および架橋
結合ならびに非標識ＩＦＮ−γとの競合を示す。 レーン１および６：分子量マーカー（上から下へ：ミオ
シン、２００，０００；ホスホリラーゼＢ、９２，００
０；ウシ血清アルブミン、６９，０００） レーン２：ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−Ｉ
ＦＮ−γ レーン３：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
ＷＩＳＨ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン４：Ｈ−２２９細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−
ＩＦＮ−γ レーン５：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下Ｈ
−２２９細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γ レーン７：ＭＯＬＴ−４細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕
−ＩＦＮ−γ レーン８：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下に
ＭＯＬＴ−４細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−
γ レーン９：Ｄａｕｄｉ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−
ＩＦＮ−γ レーン１０：１００倍過剰の非標識ＩＦＮ−γの存在下
にＤａｕｄｉ細胞に架橋結合した〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−
γ
【図４】図４は、アフィニティーカラムからのＩＦＮ−
γ受容体の溶出パターンを示す。各分画について〔 125
Ｉ〕−ＩＦＮ−γに対する結合能（−▲−）および蛋白
含量（−●−）を試験した。Ｌ：負荷、Ｗ：洗液、Ｅ、
溶出分画。蛋白はフロレスカミンで定量した。
γ受容体の溶出パターンを示す。各分画について〔 125
Ｉ〕−ＩＦＮ−γに対する結合能（−▲−）および蛋白
含量（−●−）を試験した。Ｌ：負荷、Ｗ：洗液、Ｅ、
溶出分画。蛋白はフロレスカミンで定量した。
【図５】図５は、溶出分画Ｎｏ．６（第４図）に対する
〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの結合を示す。蛋白（２００ｎ
ｇ）を〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの濃度を増大させていっ
て、４℃（−●−）および３７℃（−▲−）でインキュ
ベートした。遊離放射能は前述のようにして蛋白結合放
射能から分離した。挿入図は結合データのＳｃａｔｃｈ
ａｒｄプロットである。
〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの結合を示す。蛋白（２００ｎ
ｇ）を〔 125Ｉ〕−ＩＦＮ−γの濃度を増大させていっ
て、４℃（−●−）および３７℃（−▲−）でインキュ
ベートした。遊離放射能は前述のようにして蛋白結合放
射能から分離した。挿入図は結合データのＳｃａｔｃｈ
ａｒｄプロットである。
【図６】図６は、電気泳動の結果を示す写真であり、〔
125Ｉ〕−ＩＦＮ−γとその受容体の免疫沈殿架橋複合
体のＳＤＳ−ＰＡＧＥ（７．５％）およびオートラジオ
グラフィーによる解析結果である。レーンａ：負荷分
画、レーンｂ：廃出液、レーンｃおよびｄ：洗液分画、
レーンｅ：分子量マーカー（上から下へ、ミオシン、２
００，０００；ホスホリラーゼＢ、９２，０００；ウシ
血清アルブミン、６９，０００；オバルブミン、４６，
０００）、レーンｆ、ｇおよびｈ：溶出分画、レーン
ｉ：対照血清で免疫沈殿させた溶出分画Ｎｏ．６
125Ｉ〕−ＩＦＮ−γとその受容体の免疫沈殿架橋複合
体のＳＤＳ−ＰＡＧＥ（７．５％）およびオートラジオ
グラフィーによる解析結果である。レーンａ：負荷分
画、レーンｂ：廃出液、レーンｃおよびｄ：洗液分画、
レーンｅ：分子量マーカー（上から下へ、ミオシン、２
００，０００；ホスホリラーゼＢ、９２，０００；ウシ
血清アルブミン、６９，０００；オバルブミン、４６，
０００）、レーンｆ、ｇおよびｈ：溶出分画、レーン
ｉ：対照血清で免疫沈殿させた溶出分画Ｎｏ．６
フロントページの続き (72)発明者 ディナ フィッシャー イスラエル国 レホボット，ハナシ ハリ ション ストリート，37 (72)発明者 メナケム ルビンステイン イスラエル国 ギバット シュムエル，ハ トマー ストリート 16
Claims (11)
- 【請求項１】 水性溶媒に溶解し、比活性による精製係
数が少なくとも１，０００であるヒトγ−インターフェ
ロン特異的受容体蛋白質に対する抗体。 - 【請求項２】 該受容体蛋白質が、分子量約９０，００
０〜１０５，０００ダルトンの、ＷＩＳＨ、ＨｅＬａあ
るいはＦＳ−１１細胞の受容体蛋白質である請求項第１
項に記載の抗体。 - 【請求項３】 該受容体蛋白質が分子量約１４０，００
０ダルトンの、単球あるいはＫＧ−１細胞の受容体蛋白
質である請求項第１項に記載の抗体。 - 【請求項４】 該受容体蛋白質が分子量約９５，０００
〜１１５，０００ダルトンの、Ｄａｕｄｉリンホブラス
トイド細胞の受容体蛋白質である請求項第１項に記載の
抗体。 - 【請求項５】 水性溶媒に溶解し、比活性による精製係
数が少なくとも１，０００であるヒトγ−インターフェ
ロン特異的受容体蛋白質に対する抗体の取得方法であっ
て、 水性溶媒に溶解し、比活性による精製係数が少なくとも
１，０００であるヒトγ−インターフェロン特異的受容
体蛋白質で動物を免疫感作することを特徴とする、上記
抗体の取得方法。 - 【請求項６】 水性溶媒に溶解し、比活性による精製係
数が少なくとも１，０００であるヒトγ−インターフェ
ロン特異的受容体蛋白質に対する抗体、及びインターフ
ェロンγを含む組成物。 - 【請求項７】 少なくとも１種のヒトインターフェロン
γ受容体に対する抗体からなるが、少なくとも１種の他
のヒトインターフェロンγに対する抗体を欠く請求項第
６項に記載の組成物。 - 【請求項８】 水性溶媒に溶解し、比活性による精製係
数が少なくとも１，０００であり、分子量約９０，００
０〜１０５，０００ダルトンのＷＩＳＨ、ＨｅＬａある
いはＦＳ−１１細胞のヒトγ−インターフェロン特異的
受容体蛋白質に対する抗体を欠く、請求項第７項に記載
の組成物。 - 【請求項９】 水性溶媒に溶解し、比活性による精製係
数が少なくとも１，０００であり、分子量約１４０，０
００ダルトンの単球あるいはＫＧ−１細胞のヒトγ−イ
ンターフェロン特異的受容体蛋白質に対する抗体を欠
く、請求項第７項に記載の組成物。 - 【請求項１０】 水性溶媒に溶解し、比活性による精製
係数が少なくとも１，０００であり、分子量約９５，０
００〜１１５，０００ダルトンのＤａｕｄｉリンホブラ
ストイド細胞のヒトγ−インターフェロン特異的受容体
蛋白質に対する抗体を欠く、請求項第７項に記載の組成
物。 - 【請求項１１】 ヒトインターフェロンγ受容体の少な
くとも１つに対する抗体からなるが、他のヒトインター
フェロンγ受容体の少なくとも１つに対する抗体を欠く
組成物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IL78444A IL78444A (en) | 1986-04-08 | 1986-04-08 | Human gamma interferon-specific receptor protein,antibody against said protein,and compositions containing said protein and antibody |
| IL78444 | 1986-04-08 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62086749A Division JPH0787795B2 (ja) | 1986-04-08 | 1987-04-08 | ヒトγ−インタ−フエロン特異的受容体蛋白質およびそれに対する抗体 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0770199A true JPH0770199A (ja) | 1995-03-14 |
| JP2577868B2 JP2577868B2 (ja) | 1997-02-05 |
Family
ID=11056685
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62086749A Expired - Lifetime JPH0787795B2 (ja) | 1986-04-08 | 1987-04-08 | ヒトγ−インタ−フエロン特異的受容体蛋白質およびそれに対する抗体 |
| JP6057873A Expired - Lifetime JP2577868B2 (ja) | 1986-04-08 | 1994-03-28 | ヒトγ−インターフェロン特異的受容体蛋白質に対する抗体 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62086749A Expired - Lifetime JPH0787795B2 (ja) | 1986-04-08 | 1987-04-08 | ヒトγ−インタ−フエロン特異的受容体蛋白質およびそれに対する抗体 |
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| Country | Link |
|---|---|
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| EP (1) | EP0240975B1 (ja) |
| JP (2) | JPH0787795B2 (ja) |
| AU (1) | AU614487B2 (ja) |
| CA (1) | CA1323728C (ja) |
| DE (2) | DE3750342T2 (ja) |
| ES (1) | ES2061448T3 (ja) |
| IL (1) | IL78444A (ja) |
| ZA (1) | ZA872523B (ja) |
Families Citing this family (33)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU561649B2 (en) * | 1981-02-27 | 1987-05-14 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies to proteins |
| CA1340698C (en) * | 1986-07-25 | 1999-08-10 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kaguku Kenkyujo | Preparation and uses of interferon-gamma |
| CA1335792C (en) * | 1987-08-18 | 1995-06-06 | Chaim O. Jacob | Method and dosage form using an antagonist to gamma interferon to control mhc-associated autoimmune disease |
| SE462364B (sv) * | 1988-09-30 | 1990-06-18 | Goeran Hansson | Anvaendning av gamma-interferon foer beredning av ett preparat foer behandling av vaskulaer stenos |
| IL88378A (en) * | 1988-11-14 | 2000-11-21 | Yeda Res & Dev | Human interferon-gamma binding proteins their manufacture and pharmaceutical compositions comprising them |
| AU625866B2 (en) * | 1989-04-19 | 1992-07-16 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Soluble interferon-gamma receptors and methods for their production |
| IL91562A0 (en) * | 1989-09-07 | 1990-04-29 | Yeda Res & Dev | Interferon-gamma receptor fragment and its production |
| JPH04505019A (ja) * | 1989-10-23 | 1992-09-03 | シェリング・コーポレーション | ガンマインターフェロンのポリペプチド性阻害剤 |
| DE69104356T2 (de) * | 1990-04-24 | 1995-03-02 | Schering Corp | Lösliche verkürzte interferon-gamma rezeptoren. |
| DK0695189T3 (da) * | 1992-12-29 | 1999-08-09 | Genentech Inc | Behandling af inflammatorisk tarmsygdom med IFN-gammainhibitorer |
| US20020025316A1 (en) * | 1995-08-18 | 2002-02-28 | Ferguson Mark Williams James | Pharmaceutical composition containing inhibitors of interferon-gamma |
| GB2304342A (en) * | 1995-08-18 | 1997-03-19 | Univ Manchester | Pharmaceutical comprising either an inhibitor or a stimulator of interferon gamma |
| US6589750B2 (en) | 1997-02-20 | 2003-07-08 | Institut Pasteur | Therapeutic use of the SMR1 protein, the SMR1 maturation products, specifically the QHNPR pentapeptide as well as its biologically active derivatives |
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