JPH0784472B2

JPH0784472B2 - 抗生物質ａ８０１９０

Info

Publication number: JPH0784472B2
Application number: JP60225924A
Authority: JP
Inventors: ロバート・エル・ハミル; レイモンド・チー‐フオン・ヤオ; ラベルヌ・ドウエイン・ボエツク
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1984-10-09
Filing date: 1985-10-08
Publication date: 1995-09-13
Anticipated expiration: 2010-09-13
Also published as: EP0184291B1; CY1666A; JPS6191190A; BG44030A3; EP0184291A3; SU1531861A3; AU585264B2; IE852467L; EP0184291A2; IE58637B1; AU4837885A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、新規なポリエーテル抗生物質A80190、ある種
のこの誘導体、および新規な微生物菌株を培養すること
による、この化合物の製造方法に関する。

ウエストレイ〔ジヨン・W.ウエストレイ（John・W.West
ley），「ポリエーテル抗生物質：天然に存在する酸イ
オン透過担体，第２巻，化学（Polyether Antibiotics:
Naturally Occurring Acid Ionophores,Vol.2,Chemistr
y）」マーセル・デツカー（Marcel Dekkcr）：ニユーヨ
ーク,1983〕は、現存するポリエーテル類をクラスおよ
びタイプによつて分類した。ウエヌトレイの系によれ
ば、A80190は１個のスピロケタール系を有するため、ク
ラス1b、タイプ（１）ポリエーテルの群の新規な構成員
である。この群に含まれるその他の物質には、Ａ−2869
5AおよびＢ（米国特許第3,839,558）、A204IおよびII
（米国特許第3,705,238）ならびにＡ−32887（米国特許
第4,133,876）がある。

A80190は以下の構造を有する： A80910の特性抗生物質A80190は、Ｘ線結晶解析に基づき、構造１を有
するとされた。A80190（遊離酸の形）は以下の特有を有
する：形状：白色結晶（アセトン−水より） Mp:98〜100℃または120〜122℃（より頻繁に）；溶媒和
の程度によつて変わると思われる。

pKa:6.2（66％水性ジメチルホルムアミド） ▲〔α〕²⁵ _D▼：−26°（C1、CHCl₃）分子量:828（フイールドデソープシヨン質量分析）実験式：C₄₄H₇₆O₁₄ UV:吸収なし IR:（CHCl₃）第１図；以下の波数（cm^-1）において吸収
を示す:3019、2970、2936、2827、1721、1457、1402、1
376、1314、1163、1105、1092、1083、1056、1022、100
6、989、980、945、934、917、892および859。

元素分析：実測値理論値炭素 63.35 63.77 水素 9.17 9.18 酸素 27.10 27.05 溶解性：水に不溶、メタノールのような低級アルコール
類、アセトンのようなケトン類、酢酸エチルのようなエ
ステル類、クロロホルムのようなハロゲン化炭化水素
類、ならびにジエチルエーテル、ベンゼン、トルエンお
よび温ヘキサンのような炭化水素類に可溶。

A80190は、塩およびエステル誘導体を形成できる酸官能
基を有し、かつ、エステル化することのできる、または
エーテル誘導体もしくはウレタン誘導体を形成すること
のできる、少なくとも１個のヒドロキシ基を有する。A8
0190のアシルおよびアルキルエステルならびにアルキル
エーテル誘導体、ウレタン誘導体、ならびにA80190およ
びこれらの誘導体の製薬上許容し得る塩もまた、抗生物
質、抗コクシジウム剤、および飼料利用効率を増加させ
る薬物として有用である。

本発明の１つの目的は式（Ｉ）：〔式中、Ｒは水素または-CONHR¹であり、R¹はアルキ
ル、アリール、アルキル−アリール、アリールアルキ
ル、ハロアリール、ニトロアリール、ハロアリール−ア
ルキル、アルコキシアリール、アリールオキシアリー
ル、アリールシクロアルキル、アシルアリールおよびシ
クロアルキルである〕で示される化合物およびアシル、アルキルエステルもし
くはアルキルエーテル誘導体、またはその塩を提供する
ことにある。

A80190およびその誘導体は、抗菌および抗コクシジウム
剤として有用である。これらは反芻動物において飼料利
用効率を改善し、単胃動物においては成長促進剤として
の効果がある。さらに、これらの化合物は、殺虫、除草
および抗ウイルス活性を有する。また、これらはイオン
透過担体として有用である。本発明はこれらの用途に関
連する方法および組成物を提供するものである。

本発明は、さらに、A80190、そのアシルおよびアルキル
エステル、アルキルエーテルおよびウレタン誘導体また
はこれらの製薬上許容し得る塩（以下「A80190化合物」
という）とニカルバジン、4,4′−ジニトロカルバニリ
ド、メチクロルピンドールおよびある種のナフタレンア
ミンまたはベンゼンアミアン化合物から選ばれる化合物
からなる共働組成物（相剰効果を有する組成物）に関す
る。これらの組成物は、動物のコクシジウム症の治療に
有用である。

「アシル」という語は、C₁〜C₇、好ましくはC₁〜C₄アル
カン酸基、即ち式：〔式中、R^1aはC₁〜C₆−アルキルまたは水素である〕で示される基、例えばホルミン、アセチル、プロピオニ
ル、ブチリル等を意味する。

「シクロアルキル」という語は、３〜７個の炭素原子を
含む環状炭化水素基、即ちシクロプロピル、シクロブチ
ル、シクロヘキシル等を意味し、シクロヘキシルが好ま
しい。このシクロアルキル基は、本明細書中で定義する
アリール基により置換されてアリールシクロアルキル
基、例えば２−（フエニル）シクロプロピルを形成して
いてもよい。

「アルコキシ」という語は、C₁〜C₇低級アルキル基で置
換された酸素官能基を有するC₁〜C₇低級アルキル基、例
えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ等を意味する。

「アリール」という語は、芳香族炭化水素から１個の水
素原子を除くことにより誘導される芳香族基を示し、こ
れには例えばフエニル、ピリジルまたはフリルなどがあ
り、とりわけフエニルが好ましい。この「アリール」基
は種々の基によつて置換されていてもよい。フエニル核
上の置換基は、好ましくは４位にある。例としては、４
−メチルフエニル（４−トリル）のごとき４−アルキル
アリール、４−クロロフエニルのごとき４−ハロフエニ
ル、４−ニトロフエニル、４−フエノキシフエニルのご
とき４−アリールオキシ−アリール、４−メトキシフエ
ニルのごとき４−アルコキシフエニル、および４−（メ
チルカルボニル）フエニルのごとき４−（アルキル−カ
ルボニル）フエニルまたは４−（フエニルカルボニル）
フエニルがある。

「アルキル」という語は、C₁〜C₇の直鎖または分枝鎖状
の炭化水素、好ましくはC₁〜C₄炭化水素、例えばメチ
ル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル等を
意味する。このアルキル基は、上に定義したアリール基
により置換されてアリールアルキル基、例えばフエニル
エチルもしくは２−フエニルエチルを形成し、またはハ
ロアリール基により置換されてハロアリールアルキル
基、例えば４−ブロモフエネチルを形成していてもよ
い。

A80190およびその誘導体の塩は、この抗生物質の分離お
よび精製に有用である。製薬上許容し得る塩は特に有用
である。このような塩は、混血動物に対する毒性を全く
または殆んど持つていないものである。塩類の例として
は、A80190およびその誘導体のアルカリ金属、アルカリ
土類金属およびアミン塩がある。

A80190の代表的かつ好適なアルカリ金属およびアルカリ
土類金属塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、セ
シウム、ルビシウム、バリウム、カルシウムおよびマグ
ネシウム塩が含まれる。A80190の好適なアミン塩には、
アンモニウムならびに第一級、第二級および第三級C₁〜
C₄−アルキルアンモニウムならびにヒドロキシ−C₂〜C₄
−アルキルアンモニウム塩が含まれる。代表的なアミン
塩には、水酸化アンモニウム、メチルアミン、sec−ブ
チルアミン、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、ジ
−イソプロピルアミン、エタノールアミン、トリエチル
アミン、３−アミノ−１−プロパノール等とA80190との
反応により生成する塩が含まれる。

抗生物質で動物を治療する場合には、その抗生物質の形
は通常大きな重要性を有しないということが、動物薬の
分野ではよく知られている。殆んどの場合、動物内部の
状態が、その薬物を、投与時とは異なる形に変化させて
しまう。したがつて、投与の際の塩の形は、そして重要
ではない。しかしながら経済性、簡便さ、および毒性の
軽減という理由から、塩の形を選択してもよい。

抗生物質A80190は、アクチノマデユラ・ポリゴスポラ
（Actinomadura oligospora）のA80190産生菌株を、適
当な培地で、実質的な抗菌活性が得られるまで液中好気
的条件下に培養することによつて生産できる。この抗生
物質は、当分野で理解されている種々の単離および精製
方法を用いて回収する。

抗生物質A80190を産生する、本発明に係る新規アクチノ
マデユラ・オリゴスポラ（Actinomadura oligospora）
菌は、インドの土壌試料から分離した。次いで、より大
量のA80190を産生する。実質上改善された変種が、ラベ
ルヌ・D.ボエツク（Laverne D.Boeck）により分離され
た。

これら２つのA80190産生菌の培養物は、ノーザン・リー
ジヨナル・リサーチ・センター（Northern Regional Re
serch Center）、アグリカルチユラル・リサーチ（Agri
cultural Research）、ノース・セントラル・リージヨ
ン（North Central Region）（1815ノース・ユニバーシ
テイ・ストリート、ペオリア、イリノイズ、61604）に
寄託され、ストツク・カルチヤー・コレクシヨンの一部
となつており、ここから受理番号NRRL15877（親菌株）
およびNRRL15878（変異菌株）の下で誰でも入手可能で
ある。

この変異株の分類学的研究は、リリー（Lilly）研究所
のフレデリツク・Ｐ・メルツ（Frederick P.Mertz）に
よつて行なわれた。この研究に基づけば、２種の新しい
微生物はアクチノマデユラ（Actinomadura）属の新しい
種の一員として分類され、アクチノマデユラ・オリゴス
ポラ（Actinomadura oligospora）sp.nov.という名称が
提示されている。この分類は、類似の種との直接的な研
究所内での比較、および以下の刊行物の記載の調査に基
づいている：〔M.グツドフエロー（M.Goodfellow）およ
びG.アルダーソン（G.Alderson），「アクチノマデユラ
および関連アクチノマイセテスの数値分類学（Numerica
l Taxonomy of Actinomadura and Related Actinomycet
es）」,J.ジエン・ミクロバイオル（J.Gen.Microbio
l.）112:95〜111（1970）;M.グツドフエローおよびK.P.
シヤール（K.P.Schaal），「ノカルデイア、アクチノマ
デユラおよびロドコツカスの同定方法（Identification
Methods for Nocardia,Actinomadura and Rhodococcu
s）」,F.A.スキナー（F.A.Skinner）およびD.W.ラブロ
ツク（D.W.Lovelock）編，「微生物学者のための同定方
法（Identification Methods for Microbiologist
s）」，第２版，ザ・ソサエテイ・フオア・アプライド
・ミクロバイオロジー・テクニカル・シリーズ（The So
ciety for Applied Microbiology Technical Series）N
o.14（アカデミツク・プレス，ニユーヨーク,1979）の2
61〜276頁;L.H.フアング（L.H.Huang），「アクチノマ
デユラ・マクラsp.nov.、抗生物質CP-47,433およびCP-4
7,434の産生菌（Actinomadura macra sp.nov.,the Prod
ucer of Antibiotics CP-47433 and CP-47434）」，イ
ント・J.シスト・バクテリオル（Int.J.Syst.J.Bacteli
ol.）30:565〜568（1980）；ならびにH.A.レチエバリア
ー（H.A.Lechevalier）およびM.P.レチエバリアー（M.
P.Lechevalier），「好気的アクチノマイセテスの属の
臨界的評価（A Critical Evaluation of the Genera of
Aerobic Actinomycetes）」,H.プラウサー（H.Prause
r）編，「アクチノマイセターレス（The Actinomycetal
es）」，（グスタフ・フイツシヤー・フエアローク，イ
エナ）の393〜405頁〕。

使用した方法国際ストレプトマイセス（Streptomyces）プロジエクト
（ISP）がストレプトマイセス（Streptomyces）種の特
性決定のために推奨する方法〔E.B.シヤーリング（E.B.
Shirling）およびD.ゴツトリープ（D.Gottlieb），「ス
トレプトマイセス種の特性決定方法（Methods of Chara
cterization of Streptomyces Species）」，イント・
Ｊ・シスト・バクテリオル（Int.J.Syst.Bacteriol.）1
6:313〜340（1966）〕に従い、ある種の追補試験〔D.J.
ブラツエビク（D.J.Blazevic）およびG.M.エデラー（G.
M.Ederer），「診断微生物学における生化学試験の原理
（Principles of Biochemical Testsin Diagnostic Mic
robiology）」，ジヨン・ウイレー・アンド・サンズ，
インク，ニユーヨーク,1975〕を追加して行なつた。

炭素利用性は、過滅菌した炭素源を最終濃度1.0％に
等しくなるまで塩化したISP No.9基本培地により調べ
た。プレートを30℃でインキユベートし、14日後に読み
取りを行なつた。

メラノイド色素産生（色素生産性）は、ISP No.1（トリ
プトン−酵母エキスブロス）、ISP No.6（ペプトン−酵
母エキス鉄寒天）、ISP No.7（チロシン寒天）およびチ
ロシンを除いた改変ISP No.7で調べた。

澱粉加水分解性は、ISP No.4（無機塩−澱粉寒天）プレ
ート上の澱粉の存在をヨウ素で試験することにより調べ
た（ブラツエビクおよびエデラー（前記）参照）。

光学顕微鏡を用いて形態学的検討を行なつた。胞子表面
の装飾状態の調査には走査電子顕微鏡（SEM）を使用し
た。

NaCl耐性は、ISP No.2寒天に所望濃度と等しくなるまで
NaClを加えることにより測定した。

色の名称の割り当てには、ICSS-NBSセントロイド・カラ
ー・チヤート（Centroid Color Charts）、標準試料No.
2106（国立標準局,1958,米国商業省，ワシントンD.C.）
およびカラー・ハーモニー・マニユアル（Color Harmon
y Manual）（第４版，コンテナー・コーポレーシヨン・
オブ・アメリカ（Container Corporation of Americ
a），シカゴ，イリノイズ,1958）を使用した。

全細胞の加水分解物中の炭水化物およびジアミノピメリ
ン酸（DAP）の異性体を、ベツカー等〔B.ベツカー（B.B
ecker）,M.P.レチエバリアー,R.E.ゴードン（R.E.Gordo
n）およびH.A.レチエバリアー，「全細胞の加水分解物
のペーパークロマトグラフイーによるノカルデイアおよ
びストレプトマイセスの迅速な識別（Rapid Differenti
ation between Nocardia and Streptomyces by Paper C
hromatography of Whole-cell Hydrolysates）」，アプ
ル・ミクロバイオル（Appl.Microbiol.）12:421〜423
（1964）〕およびレチエバリアー〔M.P.レチエバリア
ー，「臨床的に重要な好気性アクチノマイセテスの同定
（Identification of Aerobic Actinomycetes of Clini
cal Importance）」,J.ラブ・クリン・メド（J.Lab.Cli
n.Med.）71:934〜944（1968）〕のクロマトグラフイー
方法によつて確認した。

リゾチームに対する抵抗性は、ゴードンにより推奨され
る方法〔R.E.ゴードン（R.E.Gordon）およびD.A.バーネ
ツト（D.A.Bernett），「分類学的手段としてのミコバ
クテリウムおよびノカルデイアの幾つかの種の菌株につ
いてのリフアンピンおよびリゾチームに対する抵抗性
（Resistance）to Rifampin and Lysozme of Strains o
f Some Species of Mycobacterium and Nocardia as a
Taxonomic Tool）」，イント・J.シスト・バクテリオル
（Int.J.Syst.Bacteriol.）27,176〜178（1977）〕によ
つて測定した。

抗生物質に対する抵抗性は、接種したISP No.2寒天プレ
ート表面上に抗生物質感受性デイスクを当てることによ
り測定した。

ホスフアターゼおよびウレアーゼは、前記のブラツエビ
クに記載の方法により測定した。

ミコール酸は、ミニキンにより記載された技術〔D.E.ミ
ニキン（D.E.Minikin）,L.アルシヤマオニー（L.Alsham
aony）およびM.グツドフエロー，「全菌体メタノール分
解物の薄層クロマトグラフイー分析による、ミコバクテ
リウム、ノカルデイア，および関連菌の識別（Differen
tiation of Mycobacterium,Nocardia,and Related Taxa
by Thin-Layer Chromatographic Analysis of Whole-o
rganism Methanolysates）」,J.ジエン・ミクロバイオ
ル（J.Gen.Microbiol.）88:200〜204（1975）〕に基づ
く方法によつて測定した。

リン脂肪分析は、レチエバリアーにより記載されている
方法〔M.P.レチエバリアー,G.ドウ・ビーブル（C.De Bi
evre）およびH.レチエバリアー，「好気的アクチノマイ
セテスの化学分類（Chemotaxonomy of Aerobic Actinom
ycetes）：リン脂質組成物（Phospholipid Compositio
n）」，バイオケミカル・システマテイクス・アンド・
エコロジー（Biochemical Systematics and Ecology）
5,249〜260（1977）〕により実施した。

培養上の特性本微生物の増殖は、一般に、合成培地では悪く、複雑な
有機培地ではより良好である。ISP No.4および酪酸ナト
リウム寒天上では、気菌糸はごく微量しか存在しない。
胞子が存在する場合、その色は、トレスナーおよびバツ
カスの系〔H.D.トレスナー（H.D.Tresner）およびE.J.
バツカス（E.J.Backus），「ストレプトマイセート分類
学のための色環系（System of Color Wheels for Strep
tomycete Taxonomy）」，アプル・ミクロバイオル（App
l.Microbiol.）11:335〜338（1956）〕の中の、やや灰
色がかつた白色（オイスター・ホワイト）であつた。裏
面の色は黄味がかつた灰色ないし茶色であつた。ISP N
o.2中で、ごく淡い茶色の可溶性色素を、そして酵母−
エキストロース寒天中で暗茶色の可溶性色素を産生する
他は、可溶性色素の産生はなかつた。表Ｉに、これらの
培養特性を示す。

形態学的特性胞子鎖は、ISP No.4および酪酸ナトリウム寒天上でまば
らに生成した。担胞子体は鎖当たりおよそ10個の胞子を
含んでおり、一般に直角に曲がる（レクタス−フレキシ
ビリス（RF））形となるような屈曲性を有した。しかし
ながら鉤状の担胞子体もまた観察された。気菌系は、ひ
と固まりになる傾向があつた。胞子の形状は楕円で、0.
5〜0.7μｍ×0.9〜1.3μｍの範囲の大きさであつた。平
均の胞子の大きさは1.1×0.6μｍと計測された。胞子表
面の装飾は滑らかであつた。

生理学的特性表IIに、A.マクラ（A.macra）と比較した本菌株の炭水
化物利用パターンを列挙する。基本培地としてISP培地N
o.9を使用した。ビタミンB₁の添加およびレドマン培地
〔G.M.レドマン（G.M.Luedemann）およびB.ブロドスキ
ー（B.Brodsky），「ミクロモノセポラ・カルボナセアs
p.m.、エベリノミシン産生菌（Micromonospora carbona
cea sp.n.,an Everinomicin-Producing Organism）」，
アンチミクロブ・エイジエンツ・ケモセル（Antimicro
b.Agents Chemother.）1964,47〜52〕の使用はわずかに
より良好な増殖を示したが、炭素利用性に変化はなかつ
た。アドニトール、セロビオース、グルコース、および
リボースが利用された。フルクトースおよびキシロース
については疑わしい利用性を示した。アラビノース、セ
ルロース、デキストラン、ガラクトース、ｉ−イノシト
ール、イヌリン、ラクトース、マンニトール、マンノー
ス、メリジドース、メリビオース、ラフイノース、ラム
ノース、サリシン、シユクロース、トレハロース、およ
びキシリトールは、増殖に利用されなかつた。

表IIIは、表示の濃度における種々の抗生物質に対する
本菌株の抵抗性を示し、A.マクラ（A.macra）と比較す
るものである。

NRRL15878は15〜42℃の温度で発育し、２％までのNaCl
に耐性を示した。この菌株は、カタラーゼ、ホスフアタ
ーゼおよびウレアーゼを産生した。

NRRL15878は、カゼイン、DNA、エスクリン、およびゼラ
チンを分解したが、アデニン、リンゴ酸カルシウム、キ
チン、エラスチン、グアニン、馬尿酸塩、ヒポキサンチ
ン、ケラチン、澱粉、テストステロン、チロシンまたは
キサンチンを分解しなかつた。

細胞壁の分析加水分解した全細胞は、ジアミノピメリン酸のメソ異性
体を含有していた。全細胞加水分解物中に存在する糖類
は以下の通りであつた：グルコース、マンノース、マド
ウロース、およびリボース。ベツカー（前記）による細
胞壁の型は、タイプIIIであり、糖の型はタイプＢ（レ
チエバリアー,1968）であつた。ミコール酸について
の、全細胞メタノール分解物の定性分析は、不可能な結
果となつた。この培養物がミコール酸を含有することは
疑わしい。タイプPIのリン脂質パターンが見出された。
タイプPIは窒素を含有するリン脂質を含まず、アクチノ
マデユラ（Actinomadura）属に特徴的である（レチエバ
リアー,1977）。

菌株の同定 NRRL15878は、タイプIIIの細胞壁、タイプＢの全細胞糖
パターン、そしてタイプPIのリン脂質パターンを有す
る。この化学分類学的情報に一般的培養特性を加える
と、この菌株をアクチノマデユラ・レチエバリアー・ア
ンド・レチエバリアー（Actinomadura Lechevalier and
Lechevalier）（レチエバリアー,1970）属に帰属させ
るのが妥当である。

この特性を、アクチノマデユラ（Actinomadura）の既知
の種について刊行物に記載されている特性と比較する
と、この培養物はA.ペレテイエリ（A.Pelletieri）（ラ
ベラン（Laveran 1906））レチエバリアー・アンド・レ
チエバリアー（Lechevalier and Lechevalier）,1970お
よびA.マクラ（A.macra）（フアング,1970）に類似して
いることがわかる。

この培養物は、主として、気菌糸がないかまたは少なく
ともごく稀にしかないという点でアクチノマデユラ・ペ
レテイエリ（Actinomadura pelletieri）に似ている。
産生された場合の担胞子体の形態は、文献（グツドフエ
ロー,1979）に記載されたものと類似している。この２
つの培養物は、さらに数多くの生理学的特性を共通に有
している。しかしながら、培養上の、および生理学的相
違は、これらを別個の種として分離するに充分である。

レチエバリアー（1970）によると、A.ペレテイエリ（A.
pelletieri）は、もつぱら一連の臨床単離体によつて代
表される。ゴードンによるA.ペレテイエリ（A.pelletie
ri）の原記載〔R.E.ゴードン，「ノカルデイア・マデユ
ラエ（ビンセント）ブランチヤードの識別のための諸基
準〔Some Criteria for the Recognition of Nocardia
madurae （Vincent）Blanchared〕」.J.ジエン．ミクロ
バイオル（J.Gen.Microbiol.）45:355〜364（1966）〕
には、この菌が鮮やかな赤色培養物であると記載してあ
る。NRRL15878は、この色素を産生しない。A.ペレテイ
エリ（A.pelletieri）はエラスチン、ヒポキサンチン、
ケラチン、チロシンを分解し、トレハロースを利用し、
硝酸塩を還元し、45℃で発育する。しかしNRRL15878
は、これらの特性を持つていない。NRRL15878はアドニ
トールおよびセロビオースを利用し、エスクリンおよび
DNAを分解し、リゾチームに対し抵抗性であるが、A.ペ
レテイエリ（A.pelletieri）は、これらの特性を持たな
い。したがつて、この新たな培養物はA.ペレテイエリ
（A.pelletieri）とは異なる種であると考えられる。

この培養物はA.マクラ（A.macra）に類似しているた
め、同時的実験室比較を行なつた。NRRL15878およびA.
マクラ（A.macra）は多くの性質を共有している。両者
共にアデニン、リンゴ酸カルシウム、キチン、エラスチ
ン、グアニン、ケラチン、澱粉、テストステロン、チロ
シン、およびキサンチンを分解できない。共にH₂Sまた
はメラノイド色素を産生しない。両培養物共にカゼイ
ン、DNAおよびゼラチンを分解し、カタラーゼおよびホ
スフアターゼを産生し、そしてポリエーテル抗生物質を
合成する。両者はNaClに対し同じ抵抗性があり、酪酸ナ
トリウム上で増殖し、同一の細胞壁型を有する。A.マク
ラ（A.macra）およびNRRL15878は、炭素利用パターン、
エスクリンおよびヒポキサンチン分解、抗生物質に対す
る抵抗性、温度範囲、ウレアーゼ産生、および硝酸塩の
還元の点で相違する。

A.マクラ（A.macra）およびNRRL15878は、多くの培養特
性、特に気菌糸の欠如という特性を共有する。しかし、
顕著な相違がある。NRRL15878の裏面は灰色ないし黄味
がかつた茶色であり、A.マクラ（A.macra）は多くの培
地で赤色を産生する。この差はグルコース・アスパラギ
ン寒天上で最も明瞭に観察される。この培地上では、A.
マクラ（A.macra）は桃色の気中増殖物を産生し、一方N
RRL15878は何も産生しない。これらの培養上の比較を表
Ｉに示す。

NRRL15878の形態はA.マクラ（A.macra）に類似してい
る。両者はプリダム〔T.G.プリダム（T.G.Pridham）,C.
W.ヘツセルテイン（C.W.Hesseltine），およびR.C.ベネ
デイクト（R.C.Benedict），「抜粋した群によるストレ
プトマイセテスの分類指針（A Guide for the Classifi
cation of Streptomycetes According to Selected Gro
ups）」，アプル・ミクロバイオル（Appl.Microbiol.）
6;52〜79（1957）〕の、レクタス−フレキシビリス（R
F）部に属する気菌糸を貧弱に発育させる。胞子表面の
装飾は滑らかである。

NRRL15878およびA.マクラ（A.macra）の相違点および類
似点を表IVに要約する。

表Ｖにこれらの類似点および相違点をより詳細に示す。

これらの比較の結果、NRRL15877およびNRRL15878培養物
はアクチノマデユラ（Actinomadura）の他の種とは著し
く相違し、その名称としてアクチノマデユラ・オリゴス
ポラ（Actinomadura oligospora）sp.nov.を与えて新種
の菌株とするにふさわしい。この種名（O.logo.spor.u
s:L.副詞oligo＝少ない、L.名詞sporus＝胞子、origosp
ora＝少ない胞子の）は、該微生物に担胞子体が相対的
に欠如していることを表わしている。菌株NRRL15878
は、A.オリゴスポラ（A.oligospora）の標準株である。

他の微生物の場合と同様、本発明に係るA80190産生培養
物アクチノマデユラ・オリゴスポラ（Actinomadura oli
gospora）NRRL15877の特性は変化を受け易い。本菌株の
組換え体、突然変異株または変種は、当技術分野の方法
により得ることができる。例えば、突然変異株は、紫外
線、Ｘ線、ガンマ線、およびＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ
−Ｎ−ニトロソグアニジンのごとき化学薬品のような種
々の既知の物理的および化学的変異源を用いた処理によ
つて得ることができる。A80190産生の特性を保持してい
るアクチノマデユラ・オリゴスポラ（Actinomadura oli
gospora）NRRL15877の天然および誘導変種、突然変異株
ならびに組換え体は、本発明の一部とみなす。

アクチノマデユラ・オリゴスポラ（Actinomadura oligo
spora）培養物の増殖に使用する培地は、多くの培地の
うちの任意の１つとすることができる。しかし、生産の
経済性、最適の収量、および生成物の単離の容易さのた
めには、ある種の培地が好ましい。即ち、例えば大規模
発酵に好ましい炭水化物源はグルコースであるが、リボ
ース、キシロース、フルクトース、ガラクトース、マン
ノース、マンニトール、バレイシヨデキストリン等も使
用できる。グリセロールおよび脂質を主要な炭素源とし
て使用した場合、増殖および抗生物質の産生を全くまた
は殆んど維持しない。グルコースと組み合わせた場合、
これらは生物量を増加させるが、抗生物質の生産は抑制
する。

好ましい窒素源はコラーゲン加水分解物であるが、酵素
−加水分解カゼイン、肉ペプトン、魚粉、肝臓粉等もま
た使用できる。栄養無機塩類で培地中に添加できるもの
は、亜鉛、ナトリウム、マグネシウム、カルシウム、ア
ンモニウム、塩化物、炭酸、硫酸、硝酸イオンなどを生
成できる普通の可溶性塩類である。

この微生物の増殖と発育に必要な必須微量元素もまた、
培地に含有されねばならない。このような微量元素は、
通常、培地の他の置換成分中の不純物として、微生物の
発育必要量を満たすに充分な量が存在する。発泡は普通
問題とはならないが、必要ならばポリプロピレングリコ
ールのような消泡剤の少量（即ち0.2ml/L）を、大規模
発酵培地に添加してよい。

抗生物質A80190の大量生産のために、タンク内での液中
好気的発酵が好ましい。少量のA80190は、振とうフラス
コ培養によつて得ることができる。大容量タンクに胞子
形態の微生物を接種する場合に通常付随して起こる抗生
物質産生の時間的遅れがあるため、生長接種物を使用す
るのが好ましい。生長接種物は、少容量の培地に、その
菌の胞子形態または菌糸断片を接種することによつて調
製し、その結果、当該微生物の新鮮な活発に発育してい
る培養物を得るものである。次いでこの生長接種物の培
地は大発酵用に使用するものと同一とすることができる
が、他の培地もまた適当である。

約25°および約37°の間の温度で発育させた場合、A801
90産生微生物によつてA80190が生産される。A80190の生
産に最適な温度は、約30〜32℃であると思われる。

液中好気的培養の場合には通常のことであるが、滅菌空
気を底から容器に吹き込み、また、培地は常套のタービ
ン回転翼にて攪拌する。これまでに使用した条件下で
は、発酵の最大酸素取り込み量は、約0.2mM/L/分を超え
なかつた。およそ115lのブロスを入れた十分に攪拌され
た165l発酵槽の場合、通気速度0.125v/v/m、攪拌速度20
0rpmならば、溶存酸素レベルを飽和の30％またはそれ以
上に維持するに充分である。

抗生物質A80190に対し感受性であることがわかつている
微生物を用いてブロスからの試料を抗菌活性について試
験することにより、抗生物質A80190の生産を、発酵の間
追跡することができる。A80190の試験に有用な１つのア
ツセイ用微生物は、バチルス・サブテイリス（Bacillus
subtilis）ATCC6633である。この生物検定は、常法に
従い寒天−ウエル・プレート試験によつて実施する。

液中好気的発酵条件下で産生させた後、A80190を発酵技
術分野で用いられる方法により、発酵培地から回収でき
る。A80190産生菌の発酵中に生産される抗菌活性は、
過ブロスおよび菌糸塊の両者に存在する。したがつて、
最大量のA80190の回収は、まず培地を過してブロスを
菌糸塊から分離することにより達成できる。過したブ
ロスおよび菌糸塊を、次いで別々に精製して、それぞれ
が含有しているA80190を取得することができる。この精
製には種々の技術を使用できる。過ブロスの精製に好
ましい方法は、これを約pH9に調節し、例えば酢酸エチ
ルのような適当な溶媒で抽出する工程を含む。次に抽出
溶媒を減圧留去して、ブロス含有分のA80190を得る。菌
糸塊を精製する好ましい方法は、分離した菌糸過ケー
キを、例えばメタノールまたはアセトンのような適当な
溶媒で抽出することである。次いで抽出溶媒を減圧留去
して、濃縮水溶液を得る。この水溶液を次に約pH9に調
節し、例えば酢酸エチルのごとき適当な溶媒で抽出す
る。次に抽出溶媒を減圧濃縮して、菌糸体含有分のA801
90を得る。ブロスおよび菌糸体部分のA80190複合体を、
さらに類似の方法により精製する。好ましい方法はシリ
カゲルクロマトグラフイーである。

あるいは、培地構成成分および菌糸体を含む培養固型物
を、抽出または分離することなく、好ましくは水分を除
去した後、A80190源として使用することができる。例え
ば、A80190の生産後、全発酵ブロスを、凍結乾燥、ドラ
ム乾燥、または共沸蒸留および乾燥によつて乾燥するこ
とができる。次いで乾燥したブロスを飼料プレミツクス
中に直接混合する。

A80190のアルカリ金属およびアルカリ土類金属陽イオン
塩は、陽イオン塩の製造に通常使用される方法に従つて
製造する。例えば、A80190の遊離酸をアセトンのような
適当な溶媒に溶解し、1/3溶量の水を加え、この溶液
を、所望の陽イオン塩の塩基（例えばNaOH、KOH）にそ
つて約pH9〜10に調節する。こうして生成した塩は、
過または溶媒の蒸発といつた常法によつて単離できる。

塩を形成させる好ましい方法は、A80190（酸の形）を酢
酸エチルのような水と混和しない溶媒に溶解し、等容量
の水を加え、対応する陽イオン塩基（例えばNaOH、KOH
等）によつてこの混合物をpH10に調節することである。
分離した有機相を水洗し、蒸発乾固する。残留物をジオ
キサンから凍結乾燥する。この塩は、ペンタンのような
適当な溶媒から結晶化できる。

有機アミンによつて形成される塩も同様に製造できる。
例えば、気体または液体のアミンを、アセトンのような
適当な溶媒中のA80190溶液に添加し、溶媒および過剰の
アミンを蒸発によつて除去することができる。

A80190アシルエステル誘導体は、対応する酸無水物また
は酸クロライドでA80190を処理することによつて製造す
る。エステル化はA80190のヒドロキシ基のうち１箇所で
起こる。このようなエステルは、典型的にはA80190を、
例えば対応する酸無水物と共に室温で反応させることに
より製造する。

A80190アルキルエステル誘導体は、標準的方法でカルボ
キシ基をエステル化することにより製造する。A80190ア
ルキルエステル誘導体は、典型的にはインビトロで試験
した場合、より活性が低い。しかし、動物に投与した場
合、このようなエステルは、インビボでA80190に変換す
るプロドラツグとして挙動することができる。

A80190のアルキルエーテル誘導体は、１またはそれ以上
のヒドロキシ基がYR基によつて置き換えられた化合物で
ある〔ここで、ＹはＯまたはＳを表わし、ＲはC₁〜C₆−
アルキル、C₁〜C₄−アルコキシ−C₂〜C₅−アルキル、C₁
〜C₄−アルコキシカルボニル−C₂〜C₅−アルキル、アミ
ノ−C₂〜C₅−アルキル、メルカプト−C₂〜C₅−アルキ
ル、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、または
（Ｒ′）_m−フエニル（(CH₂)_n−〔式中、Ｒ′はC₁〜C₄
−アルキル、C₁〜C₄−アルコキシまたはヒドロキシを表
わし、ｍは０〜２を表わし、ｎは０〜３を表わす〕を表
わす〕。アルキルおよびアルコキシという語は前に述べ
た意義を有するが、たゞし明記した炭素原子数の制限を
受ける。

「ヒドロキシアルキル」という語は、モノヒドロキシ−
C₂〜C₅−アルキル基、またはＹがＯの場合2,3−ジヒド
ロキシプロプ−１−イル基のいずれかを意味する。

「ハロアルキル」という語は、臭素、塩素および弗素よ
り成る群から選ばれる１〜３個のハロゲン置換基を有す
るC₂〜C₅−アルキル基を意味する。このアルキル基がジ
ハロ−またはトリハロ−置換されている時は、このハロ
−置換基は同一のハロゲン基でなければならない。

好ましいA80190エーテル誘導体は、ＹがＯであり、Ｒが
C₁〜C₆アルキルである化合物である。エーテル誘導体
は、A80190またはその塩を、対応する第一級アルコール
またはチオールと反応させることにより製造する。

幾つかの出発アルコールまたはチオールについては、反
応体に酸触媒を加える必要がある場合がある。好適な触
媒は、塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホ
ン酸、トルエンスルホン酸、二酸化セレニウム、および
三弗化硼素を含む。

反応を促進するために、例えば水、アセトン、ベンゼ
ン、エーテル、テトラヒドロフラン、またはジオキサン
のような溶媒を添加することができる。反応は、一般に
室温で起こるが、例えば100℃までの高温を採用しても
よい。

通常の反応後処理方法で充分な場合もあるが、本発明化
合物を得るために、さらには精製の必要がある場合もあ
る。このような精製は、例えばカラムクロマトグラフイ
ー、薄層クロマトグラフイー、分別結晶等のような周知
の方法によつて達成することができる。

式Ｉで示されるA80190のウレタン誘導体は、A80190また
はA80190塩を式３：Ｒ−NCO ３〔式中、Ｒは前記と同意義〕で示されるイソシアナートで処理することにより製造で
きる。

好ましくはA80190の塩、とりわけナトリウム塩を用い
る。モノ誘導体の最適の量を生成させるために、式３の
イソシアナートは小過剰、例えば約10％過剰量を加える
べきである。反応は、好ましくは、例えば四塩化炭素、
塩化メチレンまたはクロロホルムのごとき塩素化炭化水
素、エーテル、酢棧エチルのような不活性溶媒、または
ベンゼンもしくはトルエンのような芳香族炭化水素溶媒
中で実施する。反応温度は重要でないが、０℃以上かつ
反応混合物の沸点までとすることができ、好ましくは、
ほゞ室温である。

A80190化合物は、動物および植物の生命に対し病原性の
バクテリアおよび真菌の発育を阻害する。A80190の阻害
活性を表VIに示す。活性は、常套のデイスク拡散法（6m
mの円板を、溶液1mlに付き化合物1mgを含有する溶液に
浸し、試験菌を蒔いた寒天板にこれを置く）により測定
した。

A80190化合物の抗菌活性のある重要な一面は、嫌気性菌
に対するその活性に関係している。標準寒天希釈アツセ
イにより測定した、A80190が種々の嫌気性菌を阻止する
最小阻止濃度（MIC）を、表VIIに要約する。終点は24時
間のインキユベーシヨンの後に読み取つた。

抗コクシジウム活性はA80190化合物の重要な性質であ
る。表VIIIに、A80190化合物のエイメリア・テネラ（Ei
meria tenella）に対するインビトロの組織培養スクリ
ーニングの結果を要約する。

家禽のコクシジウム症を治療するために、非毒性抗コク
シジウム量のA80190化合物を、感染した、または感染し
易い鳥に、好ましくは経口的に毎日投与する。A80190化
合物は多くの経路で供給できるが、製薬上許容し得る担
体、好ましくは鳥が摂取する飼料と共に供給するのが最
も簡便である。A80190化合物の最適な濃度を決定するに
あたり、さまざまな因子を考慮せねばならないが、投与
割合は一般に、飼料中約２〜約100ppm、好ましくは飼料
の約15〜約50ppmの範囲である。別の態様においては、
本発明は、コクシジウム症の治療のためのA80190化合物
の有効量を、適当な補薬と共に含有する、コクシジウム
症治療のための組成物に関する。

本発明に係る家禽のコクシジウム症を制御するための組
成物は、１）式（Ｉ）の化合物を、２）ａ）ニカルバジン、ｂ） 4,4′−ジニトロカルバニリド、ｃ）式４で示されるナフタレンアミン化合物：〔式中、R²はC₁〜C₄アルキルであり、R³はハロゲン、C₁
〜C₄フルオロアルキル、C₁〜C₄フルオロアルコキシまた
はC₁〜C₄フルオロアルキルチオであり、R⁴はハロゲンで
あり、R⁵は水素またはハロゲンであり、ｍは０、１また
は２であり、ｎは０または１である。ただし、R⁴置換基
が存在する時、これは２位以外にある。〕、ｄ） 2,4−ジニトロ−Ｎ−〔４−（トリフルオロメト
キシ）フエニル〕−６−（トリフルオロメチル）ベンゼ
ンアミン、2,4−ジニトロ−Ｎ−〔４−（1,1,2,2−テト
ラフルオロエトキシ）フエニル〕−６−（トリフルオロ
メチル）ベンゼンアミンまたは2,4−ジニトロ−Ｎ−
〔４−（ペンタフルオロエトキシ）フエニル〕−６−
（トリフルオロメチル）ベンゼンアミンから選ばれるベ
ンゼンアミン、ｅ）メチクロルピンドール、およびｆ）（ａ）〜（ｅ）の化合物の製薬上許容し得る塩、から成る群から選ばれる化合物、と組み合わせて含有する。

式４において、C₁〜C₄アルキルは、メチル、エチル、ｎ
−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、sec−ブチ
ル、イソブチル、ｔ−ブチル等を包含する。

「ハロゲン」という語は、弗素、塩素、臭素およびヨウ
素を表わす。

C₁〜C₄フルオロアルキルは、１またはそれ以上の弗素原
子を有するC₁〜C₄アルキル基である。このようなフルオ
ロアルキル基には、トリフルオロメチル、1,1,2,2−テ
トラフルオロエチル、ペンタフルオロエチル、1,2,3,3
−テトラフルオロプロピル、ノナフルオロブチル等が含
まれる。

C₁〜C₄フルオロアルコキシは、１またはそれ以上の弗素
原子を有するC₁〜C₄アルコキシ基である。このようなフ
ルオロアルコキシ基には、ジフルオロメトキシ、トリフ
ルオロメトキシ、１−フルオロエトキシ、1,1,2,2−テ
トラフルオロエトキシ、ペンタフルオロエトキシ、1,2,
2,3,3−ペンタフルオロプロポキシ、ヘプタフルオロプ
ロポキシ、4,4,4−トリフルオロブトキシ等が含まれ
る。

C₁〜C₄フルオロアルキルチオは、１またはそれ以上の弗
素原子を有するC₁〜C₄アルキルチオ基である。このよう
なフルオロアルキルチオ基には、トリフルオロメチルチ
オ、1,1,2,2−テトラフルオロエチルチオ、ペンタフル
オロエチルチオ、4,4,4−トリフルオロブチルチオ等が
含まれる。

好ましい式４の化合物は、ｍおよびｎがＯであり、R⁵が
水素である化合物である。

典型的な式４の化合物は、４−フルオロ−Ｎ−〔2,4−ジニトロ−６−（トリフル
オロメチル）フエニル〕−１−ナフタレンアミン、４−ヨード−Ｎ−〔2,4−ジニトロ−６−（トリフルオ
ロメチル）フエニル〕−１−ナフタレンアミン、４−トリフルオロメチル−Ｎ−〔2,4−ジニトロ−６−
（トリフルオロメチル）フエニル〕−１−ナフタレンア
ミン、４−ペンタフルオロエチル−Ｎ−〔2,4−ジニトロ−６
−（トリフルオロメチル）フエニル−１−ナフタレンア
ミン、 6,7−ジメチル−４−（1,1,2,2−テトラフルオロエトキ
シ）−Ｎ−〔2,4−ジニトロ−６−（トリフルオロメチ
ル）フエニル〕−１−ナフタレンアミン、２−イソプロピル−４−クロロ−Ｎ−〔３−クロロ−2,
4−ジニトロ−６−（トリフルオロメチル）フエニル〕
−１−ナフタレンアミン、８−ｎ−ブチル−４−（4,4,4−トリフルオロブトキ
シ）−Ｎ−〔３−ブロモ−2,4−ジニトロ−６−（トリ
フルオロメチル）フエニル〕−１−ナフタレンアミン、３−メチル−６−プロピル−４−ヘプタフルオロプロピ
ル−Ｎ−〔2,4−ジニトロ−６−（トリフルオロメチ
ル）フエニル〕−１−ナフタレンアミン、 3,4−ジクロロ−Ｎ−〔2,4−ジニトロ−６−（トリフル
オロメチル）フエニル〕−１−ナフタレンアミン、４−（1,1−ジフルオロエトキシ）−Ｎ−〔2,4−ジニト
ロ−６−（トリフルオロメチル）フエニル〕−１−ナフ
タレンアミン、４−（1,1,2,2−テトラフルオロエトキシ）−Ｎ−〔2,4
−ジニトロ−６−（トリフルオロメチル）フエニル〕−
１−ナフタレンアミン、および４−（1,1,2,2−テトラフルオロエチルチオ）−Ｎ−
〔2,4−ジニトロ−６−（トリフルオロメチル）フエニ
ル〕−１−ナフタレンアミンである。

ニカルバジンおよび4,4′−ジニトロカルバニリドは、
米国特許2,731,382に記載がある。ニカルバジンは4,4′
−ジニトロカルバニリドおよび２−ヒドロキシ−4,6−
ジメチルピリミジンの複合体であるが、4,4′−ジニト
ロカルバニリドにみが抗コクシジウム活性を示す。サイ
エンス（Science）122,244（1955）を参照されたい。

A80190化合物と化合物２（ａ）〜（ｅ）の組み合わせの
構成成分は、組み合わせた場合に少なくとも１種のコク
シジウム症誘発生物に関して共働的（相剰作用発現）と
なるような量で使用する。一般に、合剤に使用する最大
量は、個々の成分についての抗コクシジウム処置のため
の最大量と同一である。下限は、一般に、個々の成分に
ついての治療に必要な量より少ない。したがつて、本発
明は通常、１）約２〜約100ppmのA80190化合物および
２）ａ）約５〜125ppmのニカルバジン、ｂ）約25〜約15
0ppmの4,4′−ジニトロカルバニリド、ｃ）約１〜約100
0ppmの特定したナフタレンアミン、ｄ）約５〜約125ppm
の特定したベンゼンアミン、またはｅ）約20〜約70ppm
のメチクロルピンドールを含有する組成物をもつて実施
する。A80190化合物は、ニカルバジンと共に投与する
時、特に効果的である。好ましい合剤は、約２〜約20pp
mのA80190化合物と約５〜約50ppmのニカルバジンを含有
する。

もう１つの重要なA80190化合物の特性は、動物の飼料利
用効率を改善する能力である。例えばA80190化合物は、
発達したルーメン機能を持つ反芻動物の飼料利用効率を
改善する。

飼料利用の効率は、米国特許3,794,732（特に実施例５
を参照されたい）にアーサー・P.ローン（Arthur P.Rau
n）が記載している方法を用いて、ルーメン中のプロピ
オナート化合物の生成および濃度を観察することによつ
てモニターできる。表IXに、この試験における、対照フ
ラスコ中の濃度に対するA80190−処置フラスコ中の揮発
性脂肪酸（VFA）濃度の割合を示す。

A80190化合物は、典型的にはプロピオナートを増加させ
るのに有効であり、故に、反芻動物に約0.02mg/kg/日〜
約1.5mg/kg/日の割合で経口投与した場合、飼料利用効
率を高めるのに有効である。好ましい投与割合は約0.05
mg/kg/日〜約0.5mg/kg/日である。

好ましい投与方法は、本化合物を動物の飼料と混合する
ことである。しかし、他の方法、例えば錠剤、水薬、丸
剤またはカプセルで投与することもできる。これら種々
の剤型の調製は、動物薬分野でよく知られる方法により
達成できる。１個１個の投薬単位は、処置される動物に
とつて適切な日用量に直接つながある量の本発明化合物
を含有させるべきである。

さらに本発明は、飼料とA80190化合物2.5〜25g/tを含
む、飼料利用性を増大させるに適した飼料組成物に関す
る。

上に記載したように、A80190化合物は嫌気性菌、特にク
ロストリジウム・ペルフリンゲンス（Clostridium perf
ringens）に対し活性である。したがつてA80190は、ひ
な鳥、豚、牛および羊の腸炎の予防または治療に有益で
ある。A80190は反芻動物の腸性中毒症の治療にも有用で
ある。

A80190は、駆虫薬でもある。例えば、A80190は、20ppm
という低レベルにおいてカエノルハブデイテイス・エレ
ガンス（Caenorhabditiselegans）に対し活性である。

更に、A80190化合物は豚の赤痢の治療に有用である。A8
0190は、0.39mcg/mlという低レベルで、豚の赤痢の誘発
菌であるトレポネマ・ヒオデイセンテリアエ（Treponem
a hyodysenteriae）の発育を阻害する。好ましい豚への
投与方法は、適当量のA80190化合物を飼料または飲料水
に添加することである。適当量とは、その処置が感染を
予防するためなのか治療するためなのかに関係する。通
常、感染を予防するためには、既に罹患した動物の感染
を除くのに必要な濃度より低い活性化合物の濃度でよ
い。一般に、感染を予防するためには、飼料1t当りA801
90化合物約20〜約100gの範囲の量が効果的である。赤痢
に罹患した豚の治療には、飼料1t当りA80190化合物約10
0〜約500gの範囲の量が推奨される。これらの量は、約
１〜約5mg/kg体重／日（予防的措置）または約５〜約25
mg/kg体重／日（感染動物の治療）を供給する。飲料水
に添加する場合は、水１ガロン当りA80190化合物約0.04
〜約0.2g（予防）または約0.2〜約1g（治療）の量が推
奨される。

さらに本発明は、豚の飼料および豚の赤痢の治療のため
に有効な量のA80190化合物を含む、豚の赤痢を治療する
ための飼料組成物に関する。論じたように、有効量とは
典型的には、飼料1t当りA80190化合物約20〜約500gの範
囲である。

A80190化合物は、動物に経口または非経口的に投与する
ことができる。さらにこれらは噴霧、即ち、動物または
家禽を収容した密閉空間または部屋の中に、薬物を加え
た粉末の形の本抗生物質を吹き込むことによつても投与
できる。動物または家禽は、空気中に存在する薬用粉剤
を呼吸し、この薬用粉剤はまた、眼を経由して体内に取
り込まれる（眼内注入と称する方法）。

A80190化合物を投与する最も実用的な方法は、供給する
飼料中に配合することである。普通の乾燥飼料、液体飼
料およびペレツト飼料を含む種々の飼料が使用できる。
好ましい投与方法は、動物の飼料にこれを混合すること
であるが、例えば錠剤、水薬、丸薬またはカプセル等、
他の方法で投与することもできる。個々の投薬単位は、
処理される動物にとつて適切な日用量に直接つながる量
のA80190化合物を含有させるべきである。

動物飼料に薬物を配合する方法は、よく知られている。
好ましい方法は、濃縮薬物プレミツクスを作り、次にこ
れを薬物添加飼料の調製に使用することである。典型的
なプレミツクスは、プレミツクス１ポンド当り約１〜約
200gの薬物を含有させることができる。プレミツクスは
液体または固体製剤のいずれかとしてよい。

動物または家禽用飼料の最終的な調製は、投与すべき薬
物の量に依存する。通常の配合方法である、ペレツト飼
料への混合を、A80190化合物を含有する飼料の調製に使
用することができる。

A80190化合物は、動物薬分野で認識されている方法によ
つて、非経口投与用に製剤化できる。A80190化合物を含
有する有効な注射用組成物は、懸濁液または溶液のいず
れかの形であつてよい。溶液の形の場合、A80190化合物
を生理的に許容し得る担体に溶解する。このような担体
は、適当な溶媒、必要ならばベンジルアルコールのごと
き保存剤、そして緩衝剤を含む。有用な溶媒には、例え
ばアルコール類、グリコール類、または植物油もしくは
高精製鉱物油のごとき不活性油が含まれる。

注射用懸濁組成物は、当該化合物に対する非溶媒を、担
体としてのアジユバントと共に使用して調製する。非溶
媒は、例えば水またはポリエチレングリコールのごとき
グリコールとすることができる。

当該化合物を懸濁組成物中に懸濁させておくために、適
当な生理学的に許容し得るアジユバントが必要である。
アジユバントは、カルボキシメチルセルロース、ポリビ
ニルピロリドン、ゼラチン、およびアルギナートのよう
な賦形剤から選択してよい。多くの界面活性剤もまた、
化合物を懸濁させるのに有用である。レシチン、アルキ
ルフエノールポリエチレンオキシド付加物、ナフタレン
スルホナート類、アルキルベンゼンスルホナート類、お
よびポリオキシエチレンソルビタンエステル類が、液体
非溶媒中の懸濁化剤として有用なものである。

液体非溶媒の親水性、密度、および表面張力に影響を及
ぼす多くの物質が、個々の場合に注射用懸濁液を作る助
けとなり得る。例えば、シリコン消泡剤、グリコール
類、ソルビトールおよび糖類は、有用な懸濁化剤となり
得る。

噴霧により投与するための微粉または粉末の調製の際に
は、典型的には本化合物をタルク、珪藻土、またはその
他のアジユバントとしての不活性物質と混合する。

A80190化合物は、殺虫剤およびダニ駆除剤としても有用
である。例えば、A80190は、以下の昆虫に対し、括弧内
に示した低レベルで活性である：蚊の幼虫（＜50pp
m）、クロバエの幼虫（35ppm）、イエバエの成虫（35pp
m）、ならびにメキシコマメ甲虫およびナンポウヨトウ
ムシ（＜100ppm）。さらにA80190は、25ppmという低濃
度で適用する場合、フタツボシクモダニのごときダニ類
に対しても活性である。

更に、A80190化合物は除草活性を有する。例えば、A801
90は、発芽前または発芽後のいずれかにおいて2lb/エー
カー（200gpa）でメヒシバ、カラシナおよびヒユに対し
て活性である。

A80190化合物はポリオウイルスに対して活性である。例
えば組織培養試験によると、A80190は2000μg/mlのレベ
ルでポリオIIIウイルスに対し活性であることが示され
ている。

抗生物質A80190はイオン輸送特性を示し、したがつてイ
オン透過担体（イオン担持体）〔B.C.プレスマン（B.C.
Presman），イオン透過担体、アルカリ金属キレート類
（Alkali metal chelators the ionophores），「無機
生化学（Inorganic Biochemistry）」,1巻,G.L.エイク
ホーン（G.L.Eichhorn），エルセヴイール,1973を参照
されたい〕である。A80190は0.5μg/mlの濃度でイオン
透過担体の活性を示した。Na⁺，K⁺およびRb⁺についての
この活性は、Cs⁺またはLi⁺についての活性より良好であ
つた。しかし、より低濃度（0.2μg/ml）では、A80190
は、陽イオンとしてのNa⁺よりむしろCs⁺について大きな
イオン透過効果を示した。

したがつて、A80190は、特定の陽イオンの選択的除去が
望まれる時に使用することができる。このような用途の
例には、写真用溶液からの銀イオンの除去および回収、
工業廃水が環境に投棄される前の、かかる廃水からの有
毒陽イオンの除去、そして海水の脱塩が含まれる。A801
90は、イオン特異的電極の１成分として使用できる〔O.
ケデム（O.Kedem）等，米国特許3,753,887（1973年８月
21日）を参照されたい〕。

A80190は、天然および人工の両方の膜の陽イオン透過性
を変える。よつてA80190は、濃度勾配に逆行する陽イオ
ンの選択的輸送のために用いられる膜の１成分として使
用できる。この性質の１つの可能な適用は、商業ベース
での重貴金属類の回収にである〔E.L.カスラー（E.L.Cu
ssler）,D.F.エバンズ（D.F.Evans），およびシスター
M.A.メイトシツク（Sister M.A.Matesick），サイエン
ス（Science）172,377（1971）を参照されたい〕。

更に、A80190化合物は酵素ATPaseの阻害剤として活性で
ある。細胞膜に見出されるアルカリ金属感受性酵素であ
るATPaseは、能動輸送に必要なエネルギーに関係してい
る。「能動輸送」とは、細胞内および細胞外液がその組
成物を維持するための一連のエネルギーを要する働きを
さす。ATPaseの阻害剤は、能動輸送に必要なエネルギー
を減少させる。インビトロ試験では、A80190は0.5μg/m
lの半有効濃度（IC₅₀）でミトコンドリアのATPaseを阻
害する。

A80190化合物は、さらに強心剤としての可能性もある。

本発明の操作をより完全に説明するために以下の実施例
を挙げる。

実施例１ A80190の製造 A.A80190の振とうフラスコ発酵凍結乾燥ペレツトまたは液体窒素中に維持した懸濁液の
いずれかの形の培養物アクチノマデユラ・オリゴスポラ
（Actinomadura oligospora）NRRL15878を、以下の組成
を有する種菌培地（seed medium）への接種に使用す
る。

種菌培地成分量（％）グルコース 1.0 可溶性澱粉 2.0 酵母エキス 0.5 カゼインの酵素加水分解物^* 0.5 CaCO₃ 0.1 脱イオン水で１とする滅菌前にNaOHを加え、培地のpHを約7.2まで上げる。^* NZアミンＡ、シエフイールド・ケミカル・Co.,（Sheff
ield Chemical Co.,）、ノーウイツチ、N.Y. 種菌培地に2.5％の寒天を加えることにより、斜面培地
（スラント）または平面培地（プレート）を作る。接種
したスラントを30℃で約10〜約14日間インキユベートす
る。成熟したスラント培養物を滅菌した器具でこすつて
胞子を遊離させ、菌糸体の平板をはずし、ほぐす。こう
して得た遊離胞子および培養増殖物の約1/4を、第１期
種菌培地50mlへの接種に使用する。

接種した第１期培地を250mlエルレンマイヤーフラスコ
中で、250rpm、２インチ（5.08cm）の円を描いて回転す
る振とう機上で、約48時間30℃でインキユベートする。

このインキユベートした第１期培地（0.4ml）を、以下
の組成を有する生産培地50mlへの接種に使用する。成分量（％）グルコース 3.0 Ｎ−ＺアミンＡ 0.4 コラーゲン加水分解物^* 0.5 MgSO₄・7H₂O 0.05 CaCO₃ 0.2 冷水道水で１とする（滅菌前pHを7.0に調節する）^* IPC3,インランド・インダストリアル・モラセス・Co.,
（Inland Industrial Malasses Co.,），デユブーク，
アイオワ接種した生産培地を250mlの広口エルレンマイヤーフラ
スコに入れ、250rpm、２インチの円を描いて回転する振
とう機上で、８〜10日間30〜32℃でインキユベートす
る。

B.A80190のタンク発酵より大容量の接種物を得るために、Ａ項に記載のごとく
調製した接種済の第１期培地10mlを、第１期培地と同一
の組成を有する第２期増殖培地400mlへの接種に使用す
る。この第２期生長培地を2lの広口エルレンマイヤーフ
ラスコに入れ、250rpmで２インチの円を描いて回転する
振とう機上で、約48時間30℃でインキユベートする。

このように調製した、接種済の第２期生長培地（800m
l）を、Ａ項に記載のごとく調製した滅菌生産培地100l
への接種に使用する。接種した生産培地を165lの攪拌発
酵タンク中で30〜32℃の温度で８〜10日間発酵させる。
攪拌容器中の通気を低く（0.12〜0.25v/v/m）、かつrpm
を低く（150〜200）すると、溶存酸素レベルは空気飽和
の30％以上を維持できる。

実施例２ A80190の単離 100Lタンク２基から得た全発酵ブロスを合し（207L）、
ハイフロ・スーパーセル（Hyflo Supercel）を用いて圧
搾過機で過する。菌糸体の過ケーキを、循環する
メタノール（40L）によつて圧搾過機を通して抽出す
る。抽出溶媒としてアセトンを使用することも可能であ
る。減圧で約15Lの容量に濃縮したメタノール抽出液
を、ブロス液（182L）と合する。これを1N水酸化ナト
リウムでpH9に調節し、得られた容液を同容量の酢酸エ
チルで抽出する。酢酸エチル抽出液を約700mlの容量ま
で濃縮する。水（1L）を濃縮した抽出液に加え、水酸化
ナトリウムでpH9.0に調節し、混合物をpH9.0に維持しな
がらトルエン（1L）で２回抽出する。トルエン抽出液を
合し、減圧濃縮すると、A80190を含有する油状残留物が
得られる。

この残留物をトルエン（100ml）に溶解し、トルエン中
のシリカゲル（ウエルム（Woelm）、70〜150メツシユ）
2Lを充填したカラムに適用する。このカラムを、まずト
ルエン（10L）で、次いで（49:1、10L）および（48:2、
10L）のトルエン：エタノール混合液で溶出し、1Lの分
画を集めた。溶出は生物検定およびTLCによりモニター
した。A80190を含有する分画を合し、濃縮する。この残
留物をジオキサンに溶解し、凍結乾燥して、粗製のA801
90を13.6g得た。

実施例３ A80190の精製実施例１および２に記載のごとく、100Lタンク４基から
得た、粗製のA80190（20.4g）を、アセトニトリル（200
ml）に溶解する。この溶液を、アセトニトリル中のシリ
カゲル（ウエルム、70〜150メツシユ）2Lを充填したカ
ラムに適用する。カラムをアセトニトリル（10L）で洗
浄し、（95:5、2L）、（9:1、10L）、（4:1、10L）およ
び（7:3、10L）のアセトニトリル：アセトン混合物にて
順次溶出し、1Lの分画を集める。溶出は、バチルス・サ
ブテイリス（Bacillus subtilis）を用いた生物検定に
よつてモニターする。A80190を含有する分画を合し、濃
縮する。この残留物をジオキサンに溶解し、凍結乾燥し
て、精製されたA80190を15.8g得た。

実施例４ A80190の結晶化精製したA80190（28.2g）をアセトン（500ml）に溶解す
る。水（500ml）を加え、希塩酸でpHを5.0に調節する。
得られた溶液を、結晶化が起こるよう室温で20時間放置
する。結晶を別し、水洗し、真空窯炉中で乾燥して、
A80190（酸の形態）の結晶25.9gを得た。第１図に、ク
ロロホルム中のA80190の赤外吸収スペクトルを示す。

実施例５ A80190ナトリウム塩の製造 A80190（酸の形態、300mg）をアセトン（30ml）に溶解
し、水（10ml）を加え、NaOHでpHを10に調節する。この
溶液を濃縮して油状残留物を得、これをジオキサンに溶
解し、凍結乾燥すると白色粉末（m.p.145〜150℃）が生
成する。フイールド・デソープシヨン質量分析（FDMS）
によるこの生成物の分子量は850であつた。第２図に示
したCHCl₃中のIRは、以下の波数（cm^-1）において吸収
極大を示す： 2962、2934、2885、2825、1719、1569、1455、1397、13
77、1358、1314、1285、1243、1162、1104、1074、105
7、1025、987、979、936、922、985および847。

実施例６ A80190ナトリウム塩の別途製造 A80190（酸の形態、5g）を酢酸エチル（500mg）に溶解
し、水（500ml）を加える。この混合物を5NNaOHでpH10
に調節し、15分間攪拌してこのpHを維持する。酢酸エチ
ル相を分離し、水（500ml）で洗浄し、減圧で濃縮乾固
する。残留物をジオキサン（100ml）に溶解してA80190
のナトリウム塩4.1gを得る。

水洗液を一夜室温で放置し、生成した結晶を過し、乾
燥する。この結晶は、酸の形態のA80190（mp 115〜120
℃）であつた。

実施例７ A80190ナトリウム塩の結晶化 A80190ナトリウム塩（1g）をペンタン（10ml）に溶解
し、３日間室温で放置する（溶媒は蒸発して約5mlとな
る）。生成した結晶を過し、減圧下に乾燥して、A801
90ナトリウム塩の結晶593mgを得た。mp225〜230℃。

実施例８アセチルA80190の製造 A80190（酸の形態、200mg）をピリジン（4ml）に溶解
し、無水酢酸（4ml）を加え、混合物を室温で72時間放
置する。水（10ml）を加え、この水性溶液をクロロホル
ム（50ml）で抽出する。クロロホルム抽出液を、各50ml
の0.1NHCl、NaHCO₃１％を含有する水、および水で順次
洗浄する。次にこのクロロホルム抽出液を減圧濃縮して
残留物を得、この残留物をアセトン（100ml）に溶解す
る。アセトン溶液を減圧濃縮して、残余のピリジンおよ
び酢酸を除く。この工程を３回反復し、得られた残留物
をアセトン（50ml）に溶解する。水（50ml）を加え、得
られた溶液を室温に放置して結晶化させる。結晶を別
し、水洗し、50℃の真空窯炉で乾燥すると、アセチルA8
0190の結晶（m.p.87〜89℃）192mgが生成する。高速原
子衝撃質量分析（FABMS）による分子量＝870。第３図に
示したCHCl₃中のIRは、以下の波数（cm^-1）において吸
収極大を示す:3021,3018、2935、2825、1726、1454、13
73、1311、1244、1162、1104、1078、1058、1024、98
7、976、934および925。

実施例９プロピオニルA80190の製造 A80190（酸の形態、200mg）をピリジン（4ml）に溶解
し、無水プロピオン酸（4ml）を加え、混合物を室温で7
2時間放置する。水（10ml）を加え、溶液をクロロホル
ム（50ml）で抽出する。クロロホルム抽出液を、各50ml
の0.1NHCl、１％のNaHCO₃を含有する水、および水で順
次洗浄する。クロロホルム抽出液を減圧濃縮して残留物
を得、これをアセトン（100ml）に溶解する。このアセ
トン溶液を減圧濃縮して、残留するピリジンおよび酢酸
を除く。この工程を３回反復する。残留物をアセトン
（50ml）に溶解し、水（50ml）を加え、この混合物を室
温で16〜20時間放置して結晶化させる。結晶を別し、
水洗し、50℃の真空窯炉で乾燥して、プロピオニルA801
90の結晶（m.p.83〜85℃）170mgを得た。FDMSおよびFAB
MSによる分子量＝884。第４図に示したCHCl₃中のIRは、
以下の波数（cm^-1）において吸収極大を示す:3018、297
6、2935、2827、1725、1460、1376、1313、1160、110
5、1082、1058、1024、987、979、945、935および893。

実施例10〜12 実施例８〜９の方法を用いて以下のA80190エステル誘導
体が製造できる：ｎ−ヘプタノイルA80190、バレリルA80190、ｔ−ブチリルA80190。

実施例13 A80190の４−ブロモフエニルウレタン誘導体
の製造 A80190（酸の形態、7g）をベンゼン（100ml）に溶解
し、ベンゼン（100ml）に入れた４−ブロモフエニルイ
ソシアナート（3g）を攪拌しつつ加える。混合物を室温
で168時間攪拌する。展開溶媒としてアセトニトリル：
アセトン（1:1）を用い、バニリン−H₂SO₄噴霧試薬にて
検出するシリカゲルTLCにより、反応を毎日モニターす
る。反応は168時間で完結したように思われた。生成し
た沈殿を別し、この誘導体および若干の未反応のA801
90を含有する液を濃縮し、凍結乾燥すると、7.5gの生
成物が得られる。

この生成物をアセトニトリル（50ml）に溶解し、アセト
ニトリル中のシリカゲル（ウエルム、70〜150メツシ
ユ）800mlを充填した３×140cmのカラムに適用する。カ
ラムをアセトニトリルで展開し、まず容量500mlの分画
を、引き続き各々100mlずつの５分画を、そして次に各
々500mlずつの６分画を集める。溶出はシリカゲルTLCで
モニターする。第４の分画を室温で一夜放置後、結晶が
析出する。この結晶を別し、減圧乾燥してA80190の４
−ブロモフエニルウレタン誘導体689mgを得た。

液を乾燥する。残留物をジオキサン（50ml）に溶解
し、凍結乾燥して、さらに477mgの生成物を得る。第５
〜第10の分画を合し、濃縮乾固する。残留物をアセトニ
トリル（50ml）に溶解し、凍結乾燥して、アモルフアス
のA80190 ４−ブロモフエニルウレタン誘導体をさらに
2.3g得る。この化合物は以下の特性を有していた： mp:142〜145℃ ▲〔α〕²⁵ _D▼：＋４°（c10、CHCl₃）分子量:1025（高速原子衝撃質量分析）実施例14〜15 実施例13の方法を用いて以下のA80190ウレタン誘導体を
製造した:A80190 ４−クロロフエニルウレタン誘導体
およびA80190 ４−ニトロフエニルウレタン誘導体。

実施例16〜23 実施例13の方法を用いて以下のウレタン誘導体が製造で
きる： A80190フエニルウレタン、 A80190 ４−メチルフエニルウレタン、 A80190 ４−ヨードフエニルウレタン、 A80190 ４−フルオロフエニルウレタン、 A80190シクロヘキシルウレタン、 A80190 ２−フエネチルウレタン、 A80190 ２−（フエニル）シクロプロピルウレタン、 A80190 ４−フエノキシフエニルウレタン。

実施例24 A80190メチルエーテル誘導体の製造酸の形態のA80190をメタノールに溶解し、水（1/2容
量）を加える。この溶液を、エーテル誘導体が生成する
まで放置する。溶液を減圧下に蒸発させる。生成物を、
例えばシリカゲルを用いたクロマトグラフイーに付し
て、A80190メチルエーテル誘導体を得る。

実施例25〜27 実施例24に類似する方法および適当なアルコールまたは
チオールを用いて、以下のA80190エーテル誘導体が製造
できる： A80190n−プロピルエーテル誘導体、 A80190メチルチオエーテル誘導体、 A80190n−ブチルエーテル誘導体。

実施例28 A80190のクロマトグラフイーによる同定 I.シリカゲルTLC 系：アセトニトリル：アセトン（1:1） Rf＝0.59 検出：バチルス・サブテイリス（Bacillus subtilis）バニリン−H₂SO₄噴霧 II.HPLC 吸着剤：μボンダパツク（Bondapak）C18 （４×300mmカラム）溶媒系：H₃PO₄１％を含有するアセトニトリル：テトラ
ヒドロフラン：H₂O（6:1:3）、NH₄OHでpH3.0に調節検出：屈折計流速:3.0ml/分保持時間:9.7分実施例29 アクチノマデユラ・オリゴポラス（Actinomadura oligo
sporus）NRRL15877培養体を使用する他は実施例１の方
法によつてA80190を製造する。

実施例30 コクシジウム症制御のためのA80190修飾ひな
鳥用飼料迅速な体重増加のためのひな鳥飼育に適した、均衡のと
れた高エネルギー飼料を、以下の処方によつて製造す
る：これらの物質を、標準的な飼料混合技術に従つて混合す
る。このような飼料で飼育し、水を自由に摂取させたひ
な鳥は、コクシジウム症に対する暴露から保護され、体
重増加は、同様の薬物無添加飼料で飼育したコクシジウ
ム症のないひな鳥に匹敵する。

実施例31 A80190で改良した肉牛飼料均衡のとれた高穀物肉牛用飼料を以下のように製造す
る：混合した飼料を圧縮してペレツトとする。毎日の平均摂
取割合が飼料15ポンド／動物である場合、この飼料はお
よそ300mg/動物／日のA80190（Na塩）を供給する。

実施例32 A80190で改良した豚の飼料均衡のとれた豚の分娩用飼料を以下のように調製する：プレミツクス1kgは以下の成分を含有する：ビタミンD₂7
7,161USP単位、ビタミンE2,205I.U.、リボフラビン441m
g、パントテン酸1620mg、ナイアシン2,205mg、ビタミン
B₁₂4.4mg、ビタミンK441mg、コリン19,180mg、葉酸110m
g、ピリドキシン165mg、チアミン110mg、ビオチン22m
g。² プレミツクス1kgは以下の成分を含有する：硫酸マンガ
ンとしてのマンガンの50g、炭酸亜鉛としての亜鉛100
g、硫酸鉄（II）としての鉄50g、酸化銅としての銅5g、
ヨウ化カリウムとしてのヨウ素1.5g、および炭酸カルシ
ウムとしてのカルシウム最大150g、最少130g。³ プレミツクス1kgはビタミンA6,6138,00USP単位を含有
する。

この飼料200ポイドに対し、少量の溶媒抽出大豆飼料にA
80190（10g）を加え、乳鉢および乳棒ですりつぶし、す
りつぶした混合物に溶媒抽出大豆飼料を追加して１ポン
ドに希釈することによつてプレミツクスを調製する。次
にこのプレミツクスを上記の豚用飼料200lbに添加し、
標準的な技術により混合する。この薬物添加飼料は、基
礎の飼料1t当り100gのレベルのA80190を提供する。薬物
添加飼料を、分娩前に少なくとも１日、好ましくは７〜
10日間、そして分娩後は所望の期間、雌豚に給餌する。

プレミツクス中のA80190の量および／または基礎の飼料
の量を変えることにより、種々のレベルのA80190を含
む、より大量または少量の薬物添加飼料が製造できる。

雌豚には、飼料100ポンド当りA80190を1.0〜10gの割合
で給餌する。薬物添加飼料は水と共に自由に摂取させ
る。通常、雌豚は、１日当り約６〜8lbの飼料を食う。

実施例33 子豚用A80190製剤 A80190を少量のエタノールに溶解する。このエタノール
溶液をポリエチレングリコール200に懸濁する。懸濁液
を濃縮して、各単位投与量が約0.5〜2mlの容量となるよ
うにする。このような懸濁液を、0.5〜50mg/lbの割合で
１日に３回、胃管栄養法によつて若い豚に与える。

実施例34 豚の赤痢の制御のための改良飼料以下の成分を用いて標準的方法によりプレミツクスを調
製する：成分 g/kg 活性成分 150.0 珪酸カルシウム 20.0 炭酸カルシウム（カキ穀粉） 830.0 総重量 1000g このプレミツクスを、標準的飼料混合技術を用いて市販
の豚用飼料に混合し、活性化合物の最終レベルを100g/t
とする。

A80190と組み合わせた際のニカルバジンの共働効果の立
証を以下のごとく行なつた:1週齡のブロイラーひな鳥を
５羽用かごに配し、コクシジウム症誘発生物の接合子に
より感染させるに先立ち、薬物添加または対照飼料を、
典型的には１日間給餌する。ひな鳥には一定期間、典型
的には７日間、それぞれの飼料を与え続ける。１処置当
り４回の反復を行なつた。

試験１ひな鳥に、エイメリア・アセルブリナ（Eimeria acervu
lina）（リリー（Lilly）菌株59）の接合子を200,000、
エイメリア・マクシマ（Eimeria maxima）（FS-177株）
の接合子を60,000、そしてエイメリア・テネラ（Eimeri
a tenella）（FS-155株）の接合子を40,000接種する。

【図面の簡単な説明】

第１図はA80190の赤外吸収スペクトル（クロロホルム
中）を示すグラフ、第２図はA80190のナトリウム塩の赤
外吸収スペクトル（クロロホルム中）を示すグラフ、第
３図はアセチルA80190の赤外吸収スペクトル（クロロホ
ルム中）を示すグラフ、第４図はプロピオニルA80190の
赤外吸収スペクトル（クロロホルム中）を示すグラフで
ある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ１２Ｒ 1:03） (72)発明者ラベルヌ・ドウエイン・ボエツクアメリカ合衆国インデイアナ46224、インデイアナポリス、チヤペル・ヒル・ウエスト・ドライブ741番

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（Ｉ）：［式中、Ｒは水素または-CONHR¹であり、R¹はアルキ
ル、アリール、アルキル−アリール、アリールアルキ
ル、ハロアリール、ニトロアリール、ハロアリールアル
キル、アルコキシアリール、アリールオキシアリール、
アリールシクロアルキル、アシルアリールおよびシクロ
アルキルである］で示される化合物もしくはそのアシル、アルキルエステ
ルもしくはアルキルエーテル誘導体、またはその塩。
【請求項２】Ｒが水素であり、抗生物質A80190と命名さ
れた第１項に記載の化合物またはその製薬上許容し得る
塩。
【請求項３】アクチノマジュラ・オリゴスポラのA80190
産生菌株を、同化可能な炭素、窒素および無機塩類供給
源を含有する培地中で、液中好気的発酵条件下に、抗生
物質A80190が生産されるまで培養し、次いで培地からA8
0190を分離することからなる第１項または第２項に記載
の化合物を生産する方法。
【請求項４】アクチノマジュラ・オリゴスポラNRRL1587
7もしくはNRRL15878、またはそのA80190産生変種、突然
変異株もしくは組換え体を使用する、第３項記載の方
法。
【請求項５】第１項または第２項記載の化合物のプロピ
オナートを増加させる有効量を反芻動物に経口投与する
ことからなる、反芻動物の飼料利用効率を増加させる方
法。
【請求項６】第１項または第２項記載の化合物の有効量
を家禽に投与することからなる、家禽のコクシジウム症
を制御する方法。
【請求項７】第１項または第２項記載の化合物の有効量
を単胃動物に投与することからなる、単胃動物の生長を
促進する方法。
【請求項８】活性成分として第１項または第２項記載の
化合物を含有する動物の飼料プレミックス。
【請求項９】第１項または第２項記載の化合物である第
１の成分、および、ａ）ニカルバジン、ｂ）4,4′−ジ
ニトロカルバニリド、ｃ）式：［式中、R²はC₁〜C₄アルキルであり、R³はハロゲン、C₁
〜C₄フルオロアルキル、C₁〜C₄フルオロアルコキシまた
はC₁〜C₄フルオロアルキルチオであり、R⁴はハロゲンで
あり、R⁵は水素またはハロゲンであり、ｍは０、１また
は２であり、ｎは０または１である。ただし、R⁴置換基
が存在する時、これは２位以外にある。］で示されるナフタレンアミン、ｄ）2,4−ジニトロ−Ｎ
−［４−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−６−
（トリフルオロメチル）ベンゼンアミン、2,4−ジニト
ロ−Ｎ−［４−（1,1,2,2−テトラフルオロエトキシ）
フェニル］−６−（トリフルオロメチル）ベンゼンアミ
ンまたは2,4−ジニトロ−Ｎ−［４−（ペンタフルオロ
エトキシ）フェニル］−６−（トリフルオロメチル）ベ
ンゼンアミンから選ばれるベンゼンアミン、ｅ）メチク
ロルピンドール、またはｆ）（ａ）〜（ｅ）の化合物の
製薬上許容し得る塩、より成る群から選ばれる第２の成
分を含有している飼料組成物であって、これらの成分
が、組み合わせた場合に少なくとも１種のコクシジウム
症誘発エイメリア菌株に対して相乗作用を発揮する量で
飼料中に存在していることを特徴とする家禽の飼料組成
物。
【請求項１０】第２の成分がニカルバジンである第９項
記載の組成物。