JPH08217675A

JPH08217675A - インフルエンザ治療剤

Info

Publication number: JPH08217675A
Application number: JP2378495A
Authority: JP
Inventors: Yoshio Ueno; 芳夫上野; Satoshi Nagata; 諭志永田; Mutsuyuki Kochi; 睦之東風
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1995-02-13
Filing date: 1995-02-13
Publication date: 1996-08-27

Abstract

(57)【要約】【目的】インフルエンザ治療薬として有用であり且つ
低毒性である抗インフルエンザウイルス剤を開発する。【構成】既知の化合物である 5,6−Ｏ−ベンジリデン
−Ｌ−アスコルビン酸又はこれのアルカリ金属塩あるい
はアルカリ土類金属塩を有効成分とするインフルエンザ
治療剤が提供される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は 5,6−Ｏ−ベンジリデン
−Ｌ−アスコルビン酸又はこれの製薬学的に許容できる
塩を有効成分とするインフルエンザ治療剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】インフルエンザはインフルエンザウイル
スの感染に原因する病気である。これまでインフルエン
ザ治療剤として有効であるとされる種々の化合物が提案
され、また多数の化合物がインフルエンザ治療剤として
実用されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】インフルエンザ治療剤
として優れた薬剤または化合物が長年、要望されている
が、未だ満足できるものがない。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記の事情
を考慮して鋭意検討を重ねた結果、 5,6−Ｏ−ベンジリ
デン−Ｌ−アスコルビン酸（以下では、単にベンジリデ
ン−アスコルビン酸と記載することもある）又はこれの
製薬学的に許容できる金属塩は低い毒性を有するがイン
フルエンザの治療に有効であることを見出し、本発明を
完成した。

【０００５】特に、ベンジリデン−アスコルビン酸ナト
リウム塩のインフルエンザ治療効果を検討するため、実
験動物としてマウスを用いてマウスにインフルエンザウ
イルスを感染させて本化合物を投与した場合にインフル
エンザによるマウスの死亡率を著るしく低下させること
を見いだした。

【０００６】従って、本発明によると、 5,6−Ｏ−ベン
ジリデン−Ｌ−アスコルビン酸又はこれの製薬学的に許
容できるアルカリ金属塩あるいはアルカリ土類金属塩を
有効成分として含有することを特徴とするインフルエン
ザ治療剤が提供される。

【０００７】本発明において有効成分として用いられる
ベンジリデン−アスコルビン酸またはその塩は公知の化
合物である。 5,6−Ｏ−ベンジリデン−Ｌ−アスコルビ
ン酸の製造法は「Steroids」12巻， 309頁(1968)等に記
載され、また別の製造法は、特公平３− 33127号公報及
び米国特許第 5,036,103号明細書に示される。更に、5,
6−Ｏ−ベンジリデン−Ｌ−アスコルビン酸又はこれの
ナトリウム塩、カリウム塩及びカルシウム塩が有する抗
癌活性と、これらの塩を製造する方法とは特公平３− 3
3127号公報及び米国特許第 5,036,103号明細書に記載さ
れる。

【０００８】本発明で有効成分として有用であるベンジ
リデン−アスコルビン酸の塩の具体例には、一ナトリウ
ム塩、二ナトリウム塩、一カリウム塩、二カリウム塩及
びカルシウム塩がある。特に、 5,6−Ｏ−ベンジリデン
−Ｌ−アスコルビン酸一ナトリウム塩（以下、ＳＢＡと
略記することがある）が好ましい。

【０００９】ＳＢＡは次式（Ｉ）で示される化合物であり、アスコルビン酸にベンズアル
デヒドを反応させ、得られたベンジリデン−アスコルビ
ン酸を水酸化ナトリウムと反応させることから成る通常
の方法で合成されたＳＢＡは２つの立体異性体、すなわ
ち (S)−ＳＢＡと(R)−ＳＢＡとからなるラセミ体であ
り、液体高速クロマトグラフィーによる分析で (S)−体
と (R)−体との混合比が２：１である。

【００１０】本発明によるインフルエンザ治療剤の作用
機構として、インフルエンザウイルスの増殖に伴う活性
酸素生成〔参考文献：前田浩及び赤池孝章「ウイルス感
染・炎症とオキシラジカル実験医学」９、 No.９，33−
38頁(1991)参照〕による肺組織の損傷が、本薬剤の有す
る活性酸素消去作用により軽減され、結果としてインフ
ルエンザ患者の死亡率の低下をもたらすと推定される。
本発明のインフルエンザ治療剤は、製薬学的に許容され
る添加剤、例えば、担体、賦活剤、希釈剤等の如き製薬
上必要な添加剤成分と適宜に混合し、粉末、顆粒、錠
剤、カプセル剤、シロップ剤、注射剤等の形の組成物と
して製剤でき、そして、経口的または非経口的に投与す
ることができる。

【００１１】上記製剤中には、本発明で用いる有効成分
化合物がその有効量で配合される。有効成分化合物の投
与量は、投与経路、症状、患者の体重、性別、年齢等に
よって異なるが、例えば、成人患者では１日当たり 100
〜3000 mg 程度が例示される。しかし、その投与量は動
物試験の結果など種々の情況を勘案して薬剤投与による
薬剤血中濃度が一定量を越えない範囲で、連続的または
間けつ的に投与できる。一定の条件下における適当な投
与量と投与回数は、上記の指針を基にして専門医の決定
によらなければならない。

【００１２】また、本発明のインフルエンザ治療剤の製
剤された組成物中における有効成分化合物の含量は製剤
型により種々異なるが、通常は 0.1−99重量％、好まし
くは１−90重量％である。例えば注射液の場合には、通
常 0.1−５重量％の有効成分化合物を含むようにするの
がよい。経口投与の場合には、本発明による有効成分化
合物は前記の固体担体もしくは液状担体と共に錠剤、カ
プセル剤、粉剤、顆粒剤、ドライシロップ剤、液剤、シ
ロップ剤等の形態で用いられる。カプセル、錠剤、顆
粒、粉剤の場合、一般に有効成分化合物の含量は３−99
重量％、好ましくは５−90重量％であり、残部は担体で
よい。

【００１３】かかる製剤中での賦形剤または担体は製薬
学上許容されるものが選ばれ、その種類および組成は投
与経路や投与方法によって決まる。例えば、液状担体と
して水、アルコールもしくは大豆油、ゴマ油、ミネラル
油などの動植物油、または合成油などが用いられる。固
体担体としてマルトース、シュークロースなどの糖類、
リジンなどのアミノ酸類、ヒドロキシプロピルセルロー
スなどのセルロース誘導体、シクロデキストリンなどの
多糖類、ステアリン酸マグネシウムなどの有機酸塩など
が使用される。

【００１４】注射剤として製剤する場合には、一般に液
状担体は生理食塩水、各種緩衝液、グルコース、イノシ
トール、マンニトールなどの糖類溶液、エチレングリコ
ール、ポリエチレングリコール等のグリコール類である
のが望ましい。また、イノシトール、マンニトール、グ
ルコース、マンノース、マルトース、シュークロースな
どの糖類、フェニルアラニンなどのアミノ酸類などの賦
形剤と共に有効成分化合物を凍結乾燥製剤として製剤
し、それを投与時に注射用の適当な溶剤、例えば滅菌
水、生理食塩水、ブドウ糖液、電解質溶液、アミノ酸な
どの静脈投与用液体に溶解して用いることもできる。

【００１５】本発明をより詳細に説明するために製剤例
及び試験例を挙げるが、本発明はこれらに何ら限定され
るものではない。

【００１６】製剤例１（錠剤）（１）ＳＢＡ(5,6−Ｏ−ベンジリデン−Ｌ−アスコルビン酸一ナトリウム塩） 50ｇ（２）メタケイ酸アルミン酸マグネシウム 14ｇ（３）トウモロコシデンプン 21ｇ（４）乳糖 35ｇ（５）結晶セルロース 60ｇ（６）ＣＭＣカルシウム 18ｇ上記の各成分を均一に混合した後にステアリン酸マグネ
シウムの２ｇを添加してさらに混合し、その混合粉末を
打錠して、１錠 200mgの錠剤とした。

【００１７】製剤例２（カプセル剤）（１）ＳＢＡ 1000ｇ（２）乳糖 960ｇ（３）ステアリン酸マグネシウム 40ｇ上記の各成分を均一に混合し、その混合粉末をハードゼ
ラチンカプセルに 200mgずつ充填した。

【００１８】製剤例３（注射剤）（１）ＳＢＡ 100mg （２）ブドウ糖 100mg （３）生理食塩水全量で10ml ＳＢＡとブドウ糖を生理食塩水に溶解した液をメンブラ
ンフィルターで濾過後に再び除菌濾過を行い、その濾過
液を無菌的にバイアルに分注し、窒素ガスを充填した
後、密封して静脈内注射剤とした。

【００１９】試験例１（毒性の評価）生理食塩水にとかしたＳＢＡ溶液(100μg/ml) としてＳ
ＢＡを 1000mg/kgの投与量でＩＣＲ系マウス（５週令，
雄，各群５匹）に静脈内投与したが、死亡例は認められ
なかった。これにより、 5,6−Ｏ−ベンジリデン−Ｌ−
アスコルビン酸が極めて低い毒性を示すことが認められ
る。

【００２０】次に、本発明によるインフルエンザ治療剤
に用いる有効成分化合物の一例としてのＳＢＡをインフ
ルエンザウイルスに感染したマウスに投与した場合に未
投与の場合と比べてマウスの死亡率を低下させてインフ
ルエンザ治療効果を有することを試験例２及び３で例証
する。

【００２１】試験例２第１群のマウス（７週齢、雌性、Balb／ｃ系）（１群、
５匹、平均体重20ｇ）に、生理食塩水に溶解したＳＢＡ
の溶液を、ＳＢＡの投与量が60mg/kg になるように１日
２回腹腔内投与した（第１回の投与後１時間目に第２回
の投与をし、各回に1.2mg のＳＢＡを投与した）が、イ
ンフルエンザウイルスを感染させないで置いてＳＢＡ投
与、ウイルス未感染の対照群（Ｃ−１群）とした。ま
た、Ｃ−１群のマウスへのＳＢＡ投与と同じ日に、第２
群のマウスに対して、インフルエンザＡ／山形（ＨＩＮ
Ｉ）ウイルスを４０ＬＤ₅₀の濃度で含むウイルス懸濁液
の20μｌ（ウイルス接種されたマウスは、その死亡率が
最終的に90％に達する条件であるウイルス接種量）をマ
ウス鼻孔に注入してウイルスを経鼻感染させたが、ＳＢ
Ａを投与しないで置いてウイルス感染、ＳＢＡ未処理の
対照群（Ｃ−２群）とした。

【００２２】さらに第３群のマウスには、上記のＣ−２
群のマウスと同じ条件および同じ要領でインフルエンザ
Ａ／山形（ＨＩＮＩ）ウイルスを経鼻感染させたが、そ
のウイルス感染７日前から、ＳＢＡを60mg/kg の投与量
で上記のＣ−１群と同様に腹腔内投与してウイルス感
染、ＳＢＡ前処理群（Ｔ−１群）とした。また、第４群
のマウスには、上記のＣ−１群のマウスと同様にＳＢＡ
を60mg/kg の投与量で腹腔内投与し且つこれと同時にイ
ンフルエンザＡ／山形（ＨＩＮＩ）ウイルスを上記のＣ
−２群のマウスと同じ条件および同じ要領で経鼻感染さ
せてウイルス感染、ＳＢＡ同時処理群（Ｔ−２群）とし
た。

【００２３】感染後、第１群〜第４群のマウスを夫々に
同じ飼育条件下で自由に食餌、飲水させた状態で９日間
飼育し、その間に死亡したマウス数を計数し、そして累
積死亡率（％）を算定した。その試験結果を次の表１に
要約して示す。

【００２４】〔表１〕

【００２５】上記の表１の結果から明らかなように、ウ
イルス感染、未処理対照群（Ｃ−２群）では、試験開始
日より５日経過以降にはインフルエンザ羅病マウスの死
亡率が70〜90％に達したが、これに比べて、ウイルス感
染、ＳＢＡ前処理群（Ｔ−１群）およびウイルス感染、
ＳＢＡ同時処理群（Ｔ−２群）では死亡率が40〜60％に
低下しているのが認められる。

【００２６】ＳＢＡをウイルス感染と同時に投与したＴ
−２群と、ウイルス感染１週間前にＳＢＡを投与したＴ
−１群との間では、マウスの生存数の差が１匹しかな
く、有意差が見られなかった。これらのことから、ＳＢ
Ａはインフルエンザウイルスの感染と同時投与すること
により、ウイルス感染に対するマウスの抵抗力を増強す
る作用を有すると考えられる。また、ウイルス感染１週
間後のＳＢＡ投与のＴ−１群でも有効であることから、
ウイルスの増殖による肺炎の発症を抑制し、死亡率を低
下させると考えられる。

【００２７】試験例３第１群のマウス（７週齢、雌性、Balb／ｃ系）（１群、
５匹、平均体重20ｇ）に、生理食塩水に溶解したＳＢＡ
の溶液を、ＳＢＡの投与量が60mg/kg になるように連日
５日間にわたり１日２回腹腔内投与した（第１回の投与
後１時間目に第２回の投与をし、各回に1.2mg のＳＢＡ
を投与した）が、インフルエンザウイルスを感染させな
いで置いてＳＢＡ投与、ウイルス未感染の対照群（Ｃ−
３群）とした。また、Ｃ−３群のマウスへのＳＢＡ投与
と同じ日に、第２群のマウスに対して、インフルエンザ
Ａ／山形（ＨＩＮＩ）ウイルスを４０ＬＤ₅₀の濃度で含
むウイルス懸濁液の20μｌ（ウイルス接種されたマウス
は、その死亡率が最終的に90％に達する条件であるウイ
ルス接種量）をマウス鼻孔に注入してウイルスを経鼻感
染させたが、ＳＢＡを投与しないで置いてウイルス感
染、ＳＢＡ未処理の対象群（Ｃ−４群）とした。

【００２８】さらに第３群のマウスには、上記のＣ−３
群のマウスと同じ条件および同じ要領でインフルエンザ
Ａ／山形（ＨＩＮＩ）ウイルスを経鼻感染させたが、そ
のウイルス感染日から１日目より、連日５日間にわたり
毎日20mg/kg の投与量でＳＢＡを上記のＣ−３群と同様
に腹腔内投与してウイルス感染、20mg/kg ＳＢＡ後処理
群（Ｔ−３群）とした。

【００２９】また、第４群のマウスには、上記のＣ−３
群のマウスと同様にインフルエンザＡ／山形（ＨＩＮ
Ｉ）ウイルスを経鼻感染させ且つそのウイルス感染日か
ら１日目より、連日５日間にわたり毎日60mg/kg の投与
量でＳＢＡを腹腔内投与してウイルス感染、60mg/kg Ｓ
ＢＡ後処理群（Ｔ−４群）とした。

【００３０】上記の第１群〜第４群のマウスは、夫々に
同じ飼育条件下で自由に食餌、飲水させた状態でウイル
ス感染日より11日間飼育し、その間に死亡したマウス数
を計数し、そして累積死亡率（％）を算定した。その試
験結果を次の表２に要約して示す。

【００３１】〔表２〕

【００３２】上記の表２の結果から明らかなように、ウ
イルス感染、未処理対照群（Ｃ−４群）では、試験開始
日より６日経過以降にはインフルエンザ羅病マウスの死
亡率が90〜 100％に達したが、これに比べて、ウイルス
感染、20mg/kg ＳＢＡ後処理群（Ｔ−４群）では死亡率
が50％に低下しているのが認められる。

【００３３】ウイルス感染、ＳＢＡ未処理対照群（Ｃ−
４群）では、90％の死亡率がウイルス感染日より６日目
に発生した。上記のＴ−４群の実験条件下でＳＢＡを投
与すると20mg/kg のＳＢＡが死亡率を50％と低下せし
め、ウイルス感染より９日目後も死亡例の発生を認めな
かった。他方、上記のＴ−３群におけるように、ＳＢＡ
投与量を60mg/kg に増加すると、死亡例を低下せしめた
が、ウイルス感染より９日目では前例が死亡した。即ち
ＳＢＡの５日間連日投与では、ＳＢＡの20mg/kg/日の投
与でインフルエンザウイルスの感染による死亡発生を著
名に低下せしめた。

【００３４】これら試験例２および３の結果から、ＳＢ
Ａは明らかにインフルエンザを抑制することが証明され
た。インフルエンザウイルスを経鼻感染されたマウスに
おいては、感染後のインフルエンザウイルスが粘膜上皮
細胞で急速に増殖し、その際の上皮細胞の破壊によって
気管支、細気管支炎がおこり、結果としてマウスを死亡
せしめる。

【００３５】ＳＢＡは、インフルエンザウイルスの増殖
に原因する肺炎を軽減化すると推論される。しかも、Ｓ
ＢＡは諸種の活性酸素種を補足・消去する作用を有する
ことは、本発明者らによりすでに発見されている〔特願
平６−235434号明細書、ならびに参考文献として「Anti
cancer」（1994年，in press）のKojima, S., Iizuka,
H., Yamaguchi, H., Tanuma, S. 及びUeno Y. の論文
「Antioxidative activity of benzylidine ascorbate
and its effect on adriamycin-induced cardiotoxicit
y 」参照〕。

【００３６】従ってインフルエンザウイルスの肺内増殖
に伴う活性酸素生成に原因する肺組織の損傷、出血など
がＳＢＡの有する活性酸素消去作用により軽減すると推
論される。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】 5,6−Ｏ−ベンジリデン−Ｌ−アスコル
ビン酸又はこれの製薬学的に許容できるアルカリ金属塩
あるいはアルカリ土類金属塩を有効成分として含有する
ことを特徴とするインフルエンザ治療剤。