JPH08332076A

JPH08332076A - 培養装置

Info

Publication number: JPH08332076A
Application number: JP7161597A
Authority: JP
Inventors: Kayoko Miyake; 佳代子三宅
Original assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Current assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Priority date: 1995-06-06
Filing date: 1995-06-06
Publication date: 1996-12-17

Abstract

(57)【要約】【目的】菌数検査などに用いる微生物の培養装置にお
いて、その保存性、使用時の簡便性及び培養性能に優れ
ると共に釣菌も可能な利用範囲の広い培養装置を提供す
る。【構成】防水性の基材シート１と、これに被せられる
水分不透過性で透明なカバーフィルム６とを備え、その
いずれか一方の内面、または両方の内面に吸水性樹脂層
３を積層し、更に、前記基材シート１側の内面に微生物
の培地成分を含浸、固着させた所定寸法の繊維質シート
５を設けて培養装置を構成する。吸水性樹脂層３と基材
シート１またはカバーフィルム６との間の接着性が不足
する場合には両者の間に接着層２a 、２b を設けてもよ
い。また、吸水性樹脂層にはポリエチレンオキシドを用
いることが特に好ましい。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、菌数検査などに用いら
れる微生物の培養装置に関し、更に詳しくは、長期保存
が可能で、且つ、使用時の操作が簡便な培養装置に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】食品などの微生物の数を測定する方法と
して、従来から行われているものに寒天平板混釈法があ
る。この方法は、予め滅菌したシャーレに、高圧蒸気滅
菌した後温度を約４５℃とした寒天培地と、別に準備し
た試料液とをそれぞれ所定量分注し、十分に混釈して放
置後、培地が凝固したことを確認して、これを孵卵器な
どに入れて培養し、所定時間後にシャーレの中に発育し
たコロニー数を計数するものである。しかし、この方法
の場合、寒天培地を高圧蒸気滅菌するためのオートクレ
ーブや、一連の微生物検査を無菌的に行うことのできる
検査室が必要であり、また、微生物のサンプリングから
試料液の調整、分注、培地との混釈、培養、計数に至る
微生物検査の操作には熟練を要し、初心者が正確に行う
ことは難しいものであった。

【０００３】そこで、簡便に、且つ、高度の熟練を必要
とすることなく、微生物検査を行える方法が研究された
結果、培養装置の一つとして乾燥培地なるものが開発さ
れ、使用されている。このような培養装置としては、例
えばペトリフィルムプレート〔スリーエム社商品名〕や
ＢＡＣｃＴ〔島久薬品（株）商品名〕などがある。

【０００４】前者のペトリフィルムプレートは、防水性
の平板とこれに重なるカバーフィルムとからなり、相対
するそれぞれの内面には、接着剤を塗布し、更にその上
に冷水可溶物質（ゲル化剤）の粉末と培地成分、或い
は、冷水可溶物質（ゲル化剤）の粉末を散布し、その
後、余分な粉末を払い落とすことにより、乾燥培地を形
成したものであり、これを更に滅菌して製品としたもの
である。そして、その使用方法の概略は、先ず前記平板
に重ねられたカバーフィルムフィルムを持ち上げ、平板
上に接着剤層を介して形成された培地成分と冷水可溶物
質とからなる乾燥培地上に被検液を所定量接種し、その
後、カバーフィルムを降ろし、その上からプラスチック
製のスプレッダーで押さえて被検液を円形且つ均等に広
げて吸収させる。約１分ほどで冷水可溶物質であるゲル
化剤が凝固するので、凝固したらそのままの状態で孵卵
器に収納し、所定の温度および時間で培養し、発生した
コロニー数を計数するものである。

【０００５】また、後者のＢＡＣｃＴは、防水性の平板
とこれを覆う透明カバーフィルムとを有し、その防水性
平板のカバーフィルムと相対する側の面には、固着剤の
溶液中に冷水可溶性ゲル化剤と微生物培養基の混合物を
添加して泥状に混練した塗布液を塗布、乾燥して被覆を
形成し、その上の少なくとも一部に繊維質吸水性シート
を積層し、また、カバーフィルムの防水性平板に相対す
る側の面には、固着剤の溶液中に、冷水可溶性ゲル化剤
と微生物培養基の混合物、または、冷水可溶性ゲル化剤
を添加して混練した塗布液を塗布、乾燥して被覆を形成
した後、これらを滅菌して製品としたものである。この
ＢＡＣｃＴの使用法は、防水性の平板を覆うカバーフィ
ルムを持ち上げ、防水性平板上の冷水可溶性ゲル化剤と
微生物培養基の混合物の被覆層上に積層された繊維質吸
水性シート上に被検液を所定量接種する。その後、カバ
ーフィルムを降ろす。これにより被検液は繊維質吸水性
シートの繊維の重なりによる毛細管現象により、吸水性
シート全体に拡散し、微生物の培養基が溶解し、冷水可
溶性ゲル化剤が吸水してゲル化する。この時繊維質吸水
性シートの繊維はゲルの中に包み込まれ、或いはゲルに
粘着する。その後、孵卵器に入れ、所定の温度と時間で
培養し、発生したコロニー数を計数するものである。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】上記のような培養装置
は、微生物の培養を行う際に、その都度ペトリ皿や培地
を用意する必要がない点で、使用上の便利性を有してい
る。しかし、前者のペトリフィルムプレートの場合、そ
の使用方法は、カバーフィルムを持ち上げ、平板上に接
着剤層を介して形成された培地成分と冷水可溶物質とか
らなる乾燥培地上に被検液を所定量接種し、カバーフィ
ルムを降ろした後、その上からプラスチック製のスプレ
ッダーで押さえて被検液を均一に広げ、スプレッダーを
約１分間乗せたままにして冷水可溶物質に水分を吸収さ
せ、ゲルを形成すると同時に培地成分を溶解させるもの
である。このためスプレッダー１個では、１分間に一つ
の試料しか処理できず、また、スプレッダーがずれると
被検液が乾燥培地上に更に広がってしまうという不都合
が生じる。

【０００７】また、ＢＡＣｃＴの場合は、前記したよう
に防水性平板側の繊維質吸水性シート上に被検液を滴下
することにより、繊維間の毛細管現象でシート全体に被
検液が広がり、その下の冷水可溶性ゲル化剤のゲル化と
培養基の溶解が行われる。この時、繊維質吸水性シート
の繊維はゲルの中に包み込まれ、或いはゲルに粘着され
ている。従って、被検液の広がり領域は略一定にできる
が、菌体は、繊維質吸水性シートの繊維の中に入り込ん
でおり、シート内で増殖が進行する。この時ゲル化剤に
吸収されない固着剤により、発生したコロニーが滲んだ
状態に見え、不鮮明となる傾向がある。このため特に、
菌体が接近して増殖した場合には、計数が難しくなると
いう問題がある。また、繊維質吸水性シートがゲル中に
包み込まれ、或いはゲルに粘着しているため、培養後、
釣菌の必要がある場合でもカバーフィルムを持ち上げる
と繊維質吸水性シートが破壊され釣菌ができないという
問題もある。

【０００８】本発明は、上記のような問題点に鑑みてな
されたものであり、その目的とするところは、培養装置
として保存性があり、培養の操作も簡便で、特に、被検
液の接種に際して、特別な器具を使用することなく、容
易に一定の面積に均一に広げることができ、且つ、発生
したコロニーが明瞭に判別でき、培養の精度に優れると
同時に、必要な場合には釣菌も容易にできるという利用
範囲の広い微生物の培養装置を提供することにある。

【０００９】

【課題を解決するための手段】上記の課題は下記の本発
明により解決される。即ち、本請求項１の発明は、防水
性の基材シートと該基材シート上に被せられる水分不透
過性で透明なカバーフィルムとを備え、該基材シートと
カバーフィルムのいずれか一方の内面、または両方の内
面に吸水性樹脂層を積層し、更に、該基材シート側の内
面に微生物の培地成分を含浸し、固着させた所定寸法の
繊維質シートを設けたことを特徴とする微生物の培養装
置からなる。

【００１０】また、本請求項２の発明は、前記吸水性樹
脂層がポリエチレンオキシドからなることを特徴とする
請求項１記載の微生物の培養装置である。

【００１１】

【作用】以上のように本発明の微生物の培養装置は、防
水性の基材シートと該基材シート上に被せられる水分不
透過性で透明なカバーフィルムとを備え、該基材シート
とカバーフィルムのいずれか一方の内面、または両方の
内面に吸水性樹脂層を積層し、更に、該基材シート側の
内面に微生物の培地成分を含浸、固着させた所定寸法の
繊維質シートを設けた構成である。従って、微生物の培
養に際して、培養装置のカバーフィルムを持ち上げて基
材シート側の内面に設けられた微生物の培地成分が含
浸、固着されている繊維質シート上に、ピペットなどを
用いて一定量の被検液を滴下し、カバーフィルムを降ろ
すことにより、被検液が繊維質シートの全域に繊維間の
毛細管現象により拡散し、繊維質シートに含浸、固着さ
れている培地成分を溶解すると同時に、基材シート及び
／又はカバーフィルムの内面に積層された吸水性樹脂層
を膨潤、ゲル化させ、微生物に栄養分と水分とを供給で
きるようになる。

【００１２】この時、被検液中の微生物は、繊維質シー
ト全体に均一に分散して捕捉されるので、そのまま孵卵
器に入れて培養することができ、培養により容易に計数
のできるシャープなコロニーを形成できる。また、微生
物に対する水分の供給源として吸水性樹脂を用いてお
り、例えばポリエチレンオキシドなどを使用した場合、
そのゲルは、繊維質シートと強く粘着することもなく、
培養後も自由にカバーフィルムを、基材シート側から剥
がすことができるので、釣菌が必要な場合には、容易に
これを実施することができる。尚、カバーフィルムは、
培養操作中の落下菌などによる汚染を防止すると共に、
ゲルなどから水分が蒸発するのを防止する働きをする。

【００１３】

【実施例】次に、図面および実施例により、本発明を詳
細に説明する。図１、図２、図３は、それぞれ本発明の
培養装置の一実施例の構成を示す模式断面図である。
尚、本発明はこれらに限定するものではない。図１の培
養装置は、基材シート１上にコロニーの計数を容易にす
るための枡目柄（図示せず）を印刷し、その上に接着層
２a 、吸水性樹脂層３を順に積層して本体シート４を作
成し、更にその上に培地付き繊維質シート５を設けて本
体部分を構成し、その上にカバーフィルム６の一方の面
に接着層２b 、吸水性樹脂層３を順に積層したカバーシ
ート７を、その吸水性樹脂層３が本体シート４上の培地
付き繊維質シート５に接するように重ね合わせて、該カ
バーシート７が開閉できるように一端で本体シート４と
カバーシート７とを熱接着或いは接着剤などを用いて接
合した構成である。上記の構成において、接着層２a 、
２b は必要のない場合には除くこともできる。また、カ
バーシート７は、本体シート４と接合せずに別体として
用いることもできる。只、培養中に位置ずれなどを生じ
た場合には落下菌による汚染やゲルの水分蒸発などの問
題がでるため接合しておくことが好ましい。

【００１４】図２の培養装置は、本体部分については前
記図１の培養装置と同じ構成、即ち、基材シート１上に
枡目柄（図示せず）を印刷し、その上に接着層２a 、吸
水性樹脂層３を順に積層して本体シート４を作成し、更
にその上に培地付き繊維質シート５を設けて本体部分を
構成し、その上にカバーフィルム６単体を重ね合わせ
て、該カバーフィルム６が開閉できるように一端で接合
した構成である。この場合も接着層２a は、必要のない
場合には除いてもよい。

【００１５】図３の培養装置は、本体側には吸水性樹脂
層を設けず、基材シート１上に枡目柄（図示せず）を印
刷し、その上に培地付き繊維質シート５を設けて本体部
分とし、その上にカバーフィルム６の一方の面に接着層
２b 、吸水性樹脂層３を順に積層したカバーシート７
を、その吸水性樹脂層３が、基材シート１上に設けた培
地付き繊維質シート５に接するように重ね合わせて、カ
バーシート７が開閉できるように一端で基材シート１と
接合した構成である。この構成においても接着層２b
は、必要のない場合には除いてもよい。

【００１６】以下に本発明の培養装置の構成材料等につ
いて説明する。基材シート基材シート１は、防水性を有することが必要であり、例
えば、ポリエステル、ポリプロピレン、ポリエチレン、
ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリ塩化ビニルなど
のプラスチックシート、或いは、これらの積層体が使用
できる。これらのプラスチックシートは、無着色の透明
でもよいが、白色に着色したものが生育させたコロニー
を観察し易く、計数し易い点で好ましい。プラスチック
シート以外では、耐水加工を施した紙も使用可能であ
り、例えば、紙に合成樹脂を塗布または押し出しコート
したもの、或いは、プラスチックフィルムをラミネート
したものなどが使用できる。

【００１７】基材シート１は、カールなどがなく平坦で
あることが好ましく、その厚さは、特に限定はされない
が、通常、５０〜５００μｍ程度の範囲であり、８０〜
３００μｍ程度がより好ましい。基材シート１には、予
め水に不溶性で微生物の生育に影響を与えないインキで
枡目柄を印刷しておくことが、コロニーの計数を容易に
する点で好ましい。印刷の版式は、特に限定されず何で
もよいが、着色剤、樹脂、溶剤などの選択範囲が広い
点、および、後加工で吸水性樹脂層などを積層する際、
ロール状で連続的に加工する方が生産性がよく、これら
を考慮して巻取り印刷の可能な輪転グラビア印刷などが
好ましい。枡目の大きさは、通常１ｃｍ角程度が適当で
ある。

【００１８】カバーフィルムカバーフィルム６は、防水性、水蒸気不透過性を有する
と同時に、微生物の培養後、カバーフィルム６を通して
コロニーを計数するのが一般的であるため透明であるこ
とが好ましく、例えば、前記基材シート１で挙げたよう
なポリプロピレン、ポリエチレン、ポリエステル、ポリ
スチレン、ポリカーボネート、ポリ塩化ビニルなどのプ
ラスチックフィルムを使用することができる。また、培
養試験の際、カバーフィルム６は、基材シート１から持
ち上げて被検液を滴下するため、適度の柔軟性を有する
材質および厚さのものが好ましい。従って、カバーフィ
ルム６の厚さは、１０〜２００μｍ程度が好ましく、２
０〜１００μｍ程度が更に好ましい。

【００１９】尚、上記基材シート１またはカバーフィル
ム６に吸水性樹脂層３などを積層する場合、これらが適
度に接着する必要があり、接着性が不足する場合には、
基材シート１またはカバーフィルム６の積層面にコロナ
放電処理やアンカーコートなどの前処理をすることがで
きる。このほか、基材シート１およびカバーフィルム６
は、培養する微生物の種類により、適した気体透過性、
主に酸素透過性を有することが好ましく、前記水蒸気不
透過性と併せて判断すると、少なくとも基材シート１と
カバーフィルム６のいずれか一方には、ポリエチレン、
ポリプロピレンなどのポリオレフィンを用いることが好
ましい。

【００２０】吸水性樹脂層本発明において、基材シート１とカバーフィルム６のい
ずれか一方の内面、または両方の内面に積層する吸水性
樹脂層３は、培養に際して被検液の水分を吸収して微生
物の培養に適したゲルを形成し、微生物を捕捉すると共
に吸収した水分を微生物に供給する機能を果たすもので
ある。また、積層する基材シート１やカバーフィルム６
に対して適度の接着性を有することも必要である。この
ような吸水性樹脂として、具体的にはポリエチレンオキ
シド、電子線架橋型ポリアクリルアミド、カルボキシメ
チルセルロースなどが使用できる。これらの中でポリエ
チレンオキシドは、良好なゲルを形成できると同時に強
い粘着性もなく培養後もカバーフィルム６を容易に基材
シート１側から剥がせるため釣菌も容易である上、製造
時には溶液として塗布できるほか、インフレーション成
形機やＴダイ押し出し機により単体でフィルム化した
り、他の樹脂とブレンドしてフィルム化可能のものもあ
り、加工性においても優れている点で特に好ましい。従
って、吸水性樹脂層３を積層する方法は、吸水性樹脂の
溶液を塗布、乾燥して積層する方法のほか、吸水性樹脂
を押し出しコーティングして積層する方法、更には、吸
水性樹脂をフィルム化し、これを接着剤を使用してドラ
イラミネーションにより積層する方法など、いずれの方
法も利用できる。

【００２１】このような吸水性樹脂層３の厚さは、樹脂
の種類によっても異なるが通常、２５〜１００μｍ程度
の範囲が好ましく、４０〜８０μｍの範囲がより好まし
い。只、吸水性樹脂層３を基材シート１とカバーフィル
ム６の両方の内面に設ける場合は、両者の総厚がこの範
囲であればよい。吸水性樹脂層３の厚さが２５μｍ未満
の場合は、水分吸収能力が不足し水分吸収に時間もかか
り好ましくない、また、厚さが１００μｍ以上は、その
必要性がなく、材料の無駄でもあり好ましくない。尚、
吸水性樹脂層３と基材シート１またはカバーフィルム６
との接着性が弱い場合には、両者の間に接着性を向上さ
せるための中間層として接着層２a 、２bを設けてもよ
い。

【００２２】繊維質シート本発明の培養装置において、本体部分の最上層に一定の
大きさで設ける繊維質シートは、微生物用の培地成分を
その必要とするに足る量、通常４ｇ／ｍ²程度を含浸、
固着し、被検液が接種された際には、これを繊維間の毛
細管現象によりその全面積に均一に拡散、浸透させ、固
着された培地成分を溶解し、また、これと接する吸水性
樹脂層３に水分を供給し、ゲルを形成させる機能を果た
すものであり、通常、水分の吸収性を有する不織布や漉
き紙などが使用できる。不織布では、レーヨンのほかポ
リオレフィン系繊維を使用した不織布も使用できるが、
レーヨン系の不織布が親水性に優れており、被検液の拡
散も迅速に行われる点で好ましい。漉き紙では、水分の
吸収性のよいものが適しており、表面コートのある紙や
サイズ効果の強い紙は好ましくなく、フィルターペーパ
ーのようなタイプの紙が適している。繊維質シートの厚
さは、培地成分の保持能力、生育したコロニーの見やす
さなどを考慮して決めればよく、不織布の場合の目付
量、紙の場合の坪量で１０〜３０ｇ／ｍ²程度の範囲の
比較的薄いものが適している。

【００２３】培地その他このような繊維質シートに微生物の栄養成分（培地成
分）を含浸、固着させることによって培地付き繊維質シ
ート５が得られる。そして、微生物の栄養成分として
は、例えば、酵母エキス、ペプトン、リン酸水素二カリ
ウム、ぶどう糖、乳糖、塩化ナトリウムなどが使用で
き、これらの中から発育させようとする微生物に応じて
適宜選択し、所定の割合で混合して使用することができ
る。これらを繊維質シートに含浸、固着させる方法は、
特に限定はされず、例えば、水或いは水−エチルアルコ
ールの混合系などの液に、上記の栄養成分を所定の割合
で溶解若しくは懸濁させて含浸液を作成し、これを繊維
質シートに公知の方法でコーティングしてもよく、ま
た、繊維質シートを含浸液に浸漬して含浸させた後、引
き上げて表面の余分の液をバーなどで軽く掻き落として
乾燥させてもよい。

【００２４】このような培地付き繊維質シート５の大き
さは、通常、その上に接種する被検液の量を１mlとした
場合、直径５ｃｍ程度の円形にすることが、被検液を培
地付き繊維質シート５の全面に均一に拡散、浸透させ培
養に適した培地を形成できる点で好ましい。また、培地
付き繊維質シート５は、培養装置の本体部分の最上層に
設けるが、吸水性樹脂などの溶液を接着剤の代わりに用
いて、スポット状に本体側に塗布して貼り合わせてもよ
く、また、単に本体シート４または基材シート１とカバ
ーシート７の間に挟んでおいて使用することもできる。

【００２５】また、微生物の栄養成分のほかに、微生物
に代謝され得る染料を添加することも有効である。この
ような染料は、培養過程において発育する微生物に代謝
され、コロニーが着色されるために、コロニー数の計数
を極めて容易にする効果がある。このような染料として
具体的には、トリフェニルテトラゾリウムクロライド
（以下ＴＴＣと表示）、ｐ−トリルテトラゾリウムレッ
ド、テトラゾリウムバイオレット、ペテトリルテトラゾ
リウムブルーなどが挙げられる。

【００２６】そして、上記染料を本発明の培養装置に適
用する方法としては、例えば、微生物の栄養成分を繊維
質シートに含浸、固着する際、予め栄養成分の含浸液に
染料を添加しておいて、栄養成分と共に繊維質シートに
含浸させ、乾燥して固着させてもよく、また、吸水性樹
脂層３を、吸水性樹脂の溶液を用いてこれを塗布、乾燥
して積層する場合には、吸水性樹脂の溶液中に予め染料
を添加しておいて、これを塗布、乾燥することにより吸
水性樹脂層３中に含有させてもよい。更に別の方法とし
ては、吸水性樹脂層３を基材シート１またはカバーフィ
ルム６のいずれか一方の内面にのみ積層する構成の場
合、吸水性樹脂を固着剤とする染料単独の塗布液を別に
作成し、これを例えば吸水性樹脂層３が積層されていな
い側のカバーフィルム６または基材シート１の内面に塗
布、乾燥して染料層を設けてもよい。

【００２７】本発明の培養装置において、本体シート４
とカバーシート７とは、重ね合わせた位置がずれないよ
うに一端で接合されていることが好ましいが、その接合
方法は、特に限定されず接合部分、即ち、本体シート４
または基材シート１の内面とカバーシート７の内面の材
質により適する方法を自由に選択して接合することがで
きる。例えば、両方の内面に吸水性樹脂層としてポリエ
チレンオキシドの層が積層されている場合は、ポリエチ
レンオキシド自体が熱接着性を有するためヒートシール
により接合することができる。また、本体側の内面とカ
バーシート側の内面の材質が異なる場合は、テープ状粘
着剤、両面粘着テープ、或いは粘着剤の塗布により接合
でき、更に、所謂パートコート剤などヒートシール剤の
塗布によるヒートシール或いは両面感圧接着剤などによ
っても接合可能である。

【００２８】以下に、本発明の培養装置の具体的な実施
例を挙げ、実際に培養試験を行い、その性能を標準寒天
培地を用いた混釈法と比較して説明する。〔実施例１〕（本体シートの作成）坪量１６０ｇ／ｍ²のコップ原紙
の表面に、ピッチが各１ｃｍの枡目柄をグラビア印刷方
式で印刷した後、その両面に低密度ポリエチレン（以下
ＬＤＰＥと表示する）（ミラソン１６ＳＰ三井石油化
学工業製）を厚さ２０μｍに押し出しコートした積層紙
を基材シートとし、その枡目印刷を施した側のＬＤＰＥ
層上に、接着層として、ＬＤＰＥ（ミラソン１６ＳＰ）
とポリエチレンオキシド（アクアコーク住友精化製）
を重量比６：４でブレンドした樹脂を厚さ２０μｍで押
し出しコートし、更に、その上に吸水性樹脂層としてポ
リエチレンオキシド（アクアコーク）単独を厚さ４０μ
ｍで押し出しコートして積層し、本体シートを作成し
た。

【００２９】（カバーシートの作成）カバーシートの基
材となるカバーフィルムとして、厚さ２５μｍの２軸延
伸ポリプロピレンフィルム（ＯＰＵ−１トーセロ
製）（片面コロナ放電処理）を用い、そのコロナ放電処
理面に接着層としてポリプロピレン（以下ＰＰと表示す
る）（ハイポールＬ−８４０三井石油化学工業製）と
ポリエチレンオキシド（アクアコーク）の重量比１０：
４のブレンド樹脂をインフレーション法により厚さ２０
μｍに製膜したフィルムをウレタン系接着剤を用いてド
ライラミネーション方式で積層し、更にその上に、下記
の組成の吸水性樹脂層用塗布液をコンマコーターにより
乾燥前の溶剤込みの塗布量が２０ｇ／ｍ²となるように
塗布し、乾燥温度８０℃で乾燥して吸水性樹脂層（ＴＴ
Ｃを含む）を設けてカバーシートを作成した。吸水性樹脂層用塗布液の組成ポリエチレンオキシド（アクアコーク住友精化製）の１０重量％エタノール溶液１０００重量部染料ＴＴＣ０．２重量部

【００３０】（培地付き繊維質シートの作成）繊維質シ
ートの基材として、レーヨン系不織布（クラフレックス
ＮＡ２２０−ＪＰ０３５９目付量１７ｇ／ｍ²）を用
い、これを下記の組成の標準液体培地に浸漬し含浸させ
た後、両面をバーで軽くスクィーズして余分の液を除
き、６０℃で乾燥して培地固形分４ｇ／ｍ²を固着させ
た繊維質シートを作成した。標準液体培地の組成ペプトン１０重量部酵母エキス５重量部ブドウ糖２重量部純水１９５重量部

【００３１】以上のように作成した本体シート、カバー
シート、培地付き繊維質シートをそれぞれ、本体シート
は縦７cm×横８cmの長方形に、カバーシートは縦７cm×
横８．５cmの長方形にカットし、また、培地付き繊維質
シートは直径５cmの円形にカットして培養装置の部材と
した。次に、この本体シートとカバーシートの部材を、
その吸水性樹脂層面同士が内側に重なり合うように重ね
て、カバーシートの一端が０．５cmだけ本体シートから
突出するように、もう一方の端で突き揃えて重ね合わ
せ、突き揃えた側の端の内面同士を６mm幅の両面テープ
で貼り合わせた。尚、本体シートから０．５cm突出した
カバーシートの突出部は、培養などに際してカバーシー
トを持ち上げるための把手とするものである。そして、
上記のように貼り合わせた本体シートとカバーシートの
間に培地付き繊維質シート部材を挿入した後、γ線照射
による滅菌を行って実施例１の培養装置を作成した。

【００３２】〔実施例２〕（本体シートの作成）基材シートとして、坪量１６０ｇ
／ｍ²のコップ原紙の表面にピッチが各１ｃｍの枡目柄
をグラビア印刷方式で印刷した後、その両面にＬＤＰＥ
（ミラソン１６ＳＰ三井石油化学工業製）を厚さ２０
μｍに押し出しコートした積層紙を作成した。また、接
着層としてＬＤＰＥ（ミラソン１６ＳＰ）とポリエチレ
ンオキシド（アクアコーク住友精化製）を重量比６：
４でブレンドした樹脂をインフレーション法で厚さ２０
μｍに製膜したフィルムを作成し、吸水性樹脂層として
ポリエチレンオキシド（アクアコーク）単独をインフレ
ーション法で厚さ６０μｍに製膜したフィルムを作成し
た。上記の基材シートを縦７cm×横８cmの長方形にカッ
トし、また、接着層および吸水性樹脂層のフィルムをそ
れぞれ直径６cmの円形にカットした後、基材シートの枡
目印刷側を上にして、その長辺（８cm）側の一端をカバ
ーフィルムとの接着部分として１cm幅だけ残し、残りの
７cm四方の略中央部に上記円形にカットした接着層フィ
ルム（厚さ２０μｍ）および吸水性樹脂層フィルム（厚
さ６０μｍ）を重ねて置き、上から熱板で加熱圧着して
熱接着させ、基材シート、接着層、吸水性樹脂層の順に
積層した本体シートを作成した。

【００３３】（カバーシートの作成）厚さ５０μｍで片
面コロナ放電処理した２軸延伸ポリプロピレンフィルム
（ＯＰＵ−１トーセロ製）をカバーフィルムとし、
そのコロナ放電処理面に下記の組成のＴＴＣ塗布液をリ
バースロールコーターにより乾燥前溶剤込みの塗布量が
１０ｇ／ｍ²となるように塗布し、１００℃で熱風乾燥
し、電子線を照射してカバーシートを作成した。ＴＴＣ塗布液の組成ポリアクリルアミド１０重量％水溶液１０００重量部染料ＴＴＣ０．４重量部（培地付き繊維質シート）実施例１で作成した培地付き
繊維質シートと同じものをそのまま使用した。上記のカ
バーシートを縦７cm×横８．５cmの長方形にカットし、
上記本体シートの直径６cmの円形の吸水性樹脂層（厚さ
６０μｍ）の上に、カバーシートのＴＴＣ塗布面が重な
り合うように重ねて、カバーシートの一端が０．５だけ
本体シートの基材シートから突出するように、もう一方
の端で突き揃えて重ね合わせ、突き揃えた側の端の内面
同士を６mm幅の両面テープで貼り合わせた後、本体シー
トの直径６cmの円形の吸水性樹脂層上の中央部に直径５
cmの円形にカットした培地付き繊維質シートを挿入し、
これにγ線を照射して滅菌を行い実施例２の培養装置と
した。

【００３４】〔実施例３〕（本体シートの作成）基材シートとして厚さ１２０μｍ
のポリプロピレンシート（片面コロナ放電処理）を使用
し、そのコロナ放電処理面にグラビア印刷によりピッチ
が各１cmの枡目柄を印刷し、その上に下記の組成のＴＴ
Ｃ塗布液を乾燥前の溶剤込みの塗布量が１０ｇ／ｍ²と
なるようにリバースロールコーターで塗布し、１００℃
で熱風乾燥し、電子線を照射して本体シートを作成し
た。ＴＴＣ塗布液の組成ポリアクリルアミド１０重量％水溶液１０００重量部染料ＴＴＣ０．４重量部

【００３５】（カバーシートの作成）基材となるカバー
フィルムとして、厚さ２５μｍの２軸延伸ポリプロピレ
ンフィルム（ＯＰＵ−１トーセロ製）（片面コロナ
放電処理）を使用し、そのコロナ放電処理面に、接着層
としてＰＰ（ハイポールＬ−８４０三井石油化学工業
製）とポリエチレンオキシド（アクアコーク住友精化
製）の重量比１０：４のブレンド樹脂をインフレーショ
ン法により厚さ２０μｍに製膜したフィルムをウレタン
系接着剤を用いてドライラミネーション方式で貼り合わ
せた後、この積層シートを縦７cm×横８．５cmの長方形
にカットした。この積層シートの接着層面に吸水性樹脂
層を積層するために、ポリエチレンオキシド（アクアコ
ーク）の厚さ６０μｍのフィルムをインフレーション法
により製膜し、直径６cmの円形にカットして吸水性樹脂
層用フィルムとした。次に、前記積層シートの接着層面
の長辺（８．５cm）側の一端に本体シートとの接着部と
して１cm幅を取り、また、もう一方の端にはカバーシー
トの把手部として０．５cm幅を取り、残りの縦７cm×横
７cmの領域の中央部に、前記円形にカットした吸水性樹
脂（ポリエチレンオキシド）のフィルムを置き、熱板で
加熱圧着して熱接着し、カバーシートを作成した。

【００３６】（培地付き繊維質シート）実施例１で作成
した培地付き繊維質シートと同じものをそのまま使用し
た。以上のように作成した本体シートのＴＴＣ塗布面
と、カバーシートの吸水性樹脂層面とが重なるように重
ね合わせて、カバーシートの長辺側の一端で本体シート
との接着部分（１cm幅）を設けた側の端部で本体シート
とカバーシートとを突き揃えて、その突き揃えた側の端
の内面同士を６mm幅の両面テープで貼り合わせた後、本
体シートのＴＴＣ塗布面上に、直径５cmの円形にカット
した培地付き繊維質シートを、カバーシートの内面に積
層した円形の吸水性樹脂層で覆われる位置に挿入し、こ
れをγ線照射により滅菌して実施例３の培養装置とし
た。

【００３７】〔培養試験およびその結果〕以上のように
作成した実施例１、２、３の培養装置各５個を使用し
て、下記の方法で作成した菌液を滅菌済みピペットで各
１ml宛、それぞれの培地付き繊維質シート上に接種し、
カバーシートを被せた後、３７℃に調節した孵卵器に入
れて４８時間培養を行った。また、実施例とは別に、比
較用として実施例と同じ下記の方法で作成した菌液を用
いて、各１mlを従来の混釈法により、５個のペトリ皿に
準備した標準寒天培地各２０mlに混釈して比較試料を作
成し、実施例と同じ条件で培養を行った。

【００３８】菌液の作成菌株として大腸菌を使用し、液体培地（NUTRIENT BROT
H）にて３７℃で２４時間、振盪培養を行い、その菌液
を滅菌生理食塩水で菌数が１０²／mlとなるように希釈
して、培養試験に用いる菌液とした。上記の実施例１、
２、３および比較試料の培養試験により発生したコロニ
ーの数をそれぞれ計数し、各々のデータと平均値を表１
に示した。

【００３９】

【表１】菌数測定結果（大腸菌）〔単位：個〕

【００４０】表１に示した培養試験結果から明らかなよ
うに、本発明の実施例１、２、３の培養装置を用いた培
養試験の結果は、従来の混釈法による標準寒天培地を用
いた比較試料の培養試験の結果と略一致しており、培養
性能が良好で、操作も容易で簡便な培養装置として十分
実用性のあることを示している。また、発生したコロニ
ーも繊維質シートが比較的薄いため鮮明に観察でき、計
数も容易に実施できた。そして、実施例１〜３の各試料
は、培養後、そのカバーフィルムを基材シート側から容
易に剥がすことができ、釣菌することも容易であった。

【００４１】

【発明の効果】以上詳しく説明したように本発明の培養
装置は、防水性の基材シートと、これに被せられる水分
不透過性で透明なカバーフィルムとを備え、該基材シー
トとカバーフィルムのいずれか一方の内面、または両方
の内面に吸水性樹脂層を積層し、更に、該基材シート側
の内面に微生物の培地を含浸、固着した繊維質シートを
設けた構成である。このような構成を採ることにより、
微生物の培養に際して、培養装置のカバーシートを持ち
上げて、培地が含浸、固着されている繊維質シート上に
ピペットなどにより一定量の被検液を接種し、カバーシ
ートを降ろすだけで、被検液が所定面積の繊維質シート
の全域に繊維間の毛細管現象により均一に拡散し、培地
成分を溶解すると同時に基材シートとカバーフィルムの
いずれか一方の内面、または両方の内面に積層されてい
る吸水性樹脂層を膨潤、ゲル化させ、微生物に栄養分と
水分とを供給できるようになり培養が可能となる。従っ
て、培地調整のための加温溶解や高圧滅菌などの操作が
不要であり、熟練した技術者でなくても容易に微生物検
査など培養試験を行うことができる。そして、使用前
は、滅菌された乾燥状態であり長期保存も可能で、何時
でも迅速に試験することができる。

【００４２】また、繊維質シートは比較的薄く、ゲルを
形成する材料がポリエチレンオキシドなどの吸水性樹脂
であり、ゲル化した場合も繊維質シートと強く粘着する
ことがないため、均一に分散したコロニーを鮮明な状態
に形成でき、計数も容易であり、また、培養後、カバー
フィルムを基材シート側から容易に剥がすことができる
ので自由に釣菌することもできる。また、使用後の廃棄
性においても、容易に焼却することもでき、使用適性と
性能に優れた培養装置を容易に提供できる効果を奏す
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の培養装置の一実施例の構成を示す模式
断面図である。

【図２】本発明の培養装置の別の一実施例の構成を示す
模式断面図である。

【図３】本発明の培養装置の更に別の一実施例の構成を
示す模式断面図である。

【符号の説明】

１基材シート２a 、２b 接着層３吸水性樹脂層４本体シート５培地付き繊維質シート６カバーフィルム７カバーシート８接合部

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】防水性の基材シートと該基材シート上に
被せられる水分不透過性で透明なカバーフィルムとを備
え、該基材シートとカバーフィルムのいずれか一方の内
面、または両方の内面に吸水性樹脂層を積層し、更に、
該基材シート側の内面に微生物の培地成分を含浸し、固
着させた繊維質シートを設けたことを特徴とする微生物
の培養装置。
【請求項２】前記吸水性樹脂層がポリエチレンオキシ
ドからなることを特徴とする請求項１記載の微生物の培
養装置。