JPH08332094A - アルカリゲネス属の微生物を利用してヘテロ芳香族カルボン酸を製造する微生物学的方法 - Google Patents
アルカリゲネス属の微生物を利用してヘテロ芳香族カルボン酸を製造する微生物学的方法Info
- Publication number
- JPH08332094A JPH08332094A JP8142719A JP14271996A JPH08332094A JP H08332094 A JPH08332094 A JP H08332094A JP 8142719 A JP8142719 A JP 8142719A JP 14271996 A JP14271996 A JP 14271996A JP H08332094 A JPH08332094 A JP H08332094A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acid
- cyanopyridine
- carboxylic acid
- microorganism
- heteroaromatic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
- C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 一般式ＩまたはIIのヘテロ芳香族カルボン酸
またはその生理的に許容できる塩を製造する微生物学的
方法を提供する。 【解決手段】 一般式III またはIVのヘテロ芳香族ニト
リルを基質として使用し、アルカリゲネス・フェーカリ
ス属の２−シアノピリジンを利用する微生物を使用し
て、対応するカルボン酸に転化する。 微生物学的転換
に先立って、菌をジカルボン酸、トリカルボン酸または
炭水化物の存在下に培養しておく。 （式Ｉ〜IVを通じて、Ｒ1 およびＲ2 は水素またはハロ
ゲンを、Ｘは窒素または−ＣＨ−を表わす。）
またはその生理的に許容できる塩を製造する微生物学的
方法を提供する。 【解決手段】 一般式III またはIVのヘテロ芳香族ニト
リルを基質として使用し、アルカリゲネス・フェーカリ
ス属の２−シアノピリジンを利用する微生物を使用し
て、対応するカルボン酸に転化する。 微生物学的転換
に先立って、菌をジカルボン酸、トリカルボン酸または
炭水化物の存在下に培養しておく。 （式Ｉ〜IVを通じて、Ｒ1 およびＲ2 は水素またはハロ
ゲンを、Ｘは窒素または−ＣＨ−を表わす。）
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、下記の一般式で表
わされる
わされる
【０００２】
【化５】
【０００３】
【化６】
【０００４】〔式中、Ｒ1 およびＲ2 は、同一または異
なるものであって、水素またはハロゲンの原子を表わ
し、Ｘは窒素原子または−ＣＨ−を表わす。〕 ヘテロ芳香族カルボン酸またはその生理的に許容される
塩の、新規な微生物学的製造方法に関する。
なるものであって、水素またはハロゲンの原子を表わ
し、Ｘは窒素原子または−ＣＨ−を表わす。〕 ヘテロ芳香族カルボン酸またはその生理的に許容される
塩の、新規な微生物学的製造方法に関する。
【０００５】たとえば６−ヒドロキシピコリン酸のよう
なヘテロ芳香族カルボン酸は、医薬品製造の中間体、た
とえば２−オキシピリミジン（ベリヒテ・デア・ドイッ
チェン・ヒェミッシェン・ゲゼルシャフト １９１２，
４５，ｐ．2456〜2467）または除草剤製造の中間体とし
て重要である。
なヘテロ芳香族カルボン酸は、医薬品製造の中間体、た
とえば２−オキシピリミジン（ベリヒテ・デア・ドイッ
チェン・ヒェミッシェン・ゲゼルシャフト １９１２，
４５，ｐ．2456〜2467）または除草剤製造の中間体とし
て重要である。
【０００６】一般に、ニトリルヒドラターゼおよびアミ
ダーゼまたはニトリラーゼを含有する微生物は、ニトリ
ルを対応する酸に転換することが知られている。 たと
えばＥＰ−Ａ０１８７６８０には、コリネバクテリウム
属、ノカルディア属、バチルス属、バクテリジウム属、
ミクロコッカス属およびブレビバクテリウム属の微生物
を利用してニチコン酸を製造する、微生物学的方法が記
載されている。 この反応は、光のエネルギーの存在下
に実施することを要する。 ＥＰ−Ａ０４４４６４０に
は、たとえばロドコッカス属の微生物を利用してニコチ
ン酸を製造する微生物学的方法が開示されている。 こ
の反応は、ラクタムの存在下に実施することが必要であ
る。
ダーゼまたはニトリラーゼを含有する微生物は、ニトリ
ルを対応する酸に転換することが知られている。 たと
えばＥＰ−Ａ０１８７６８０には、コリネバクテリウム
属、ノカルディア属、バチルス属、バクテリジウム属、
ミクロコッカス属およびブレビバクテリウム属の微生物
を利用してニチコン酸を製造する、微生物学的方法が記
載されている。 この反応は、光のエネルギーの存在下
に実施することを要する。 ＥＰ−Ａ０４４４６４０に
は、たとえばロドコッカス属の微生物を利用してニコチ
ン酸を製造する微生物学的方法が開示されている。 こ
の反応は、ラクタムの存在下に実施することが必要であ
る。
【０００７】さらに、ロドコッカス・ロドクラス（Ｒｈ
ｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｈｏｄｏｃｈｒｏｕｓ）Ｊ１種
は、たとえば２−シアノピラジンをピラジンカルボン酸
に転換することが知られている。（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ
ｅｔ ａｌ． Ｊ． ｏｆＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，
４３，No.１０，１９９０，p. 1316〜1320） しかしな
がら、この微生物は２−シアノピリジンをピコリン酸に
転換する能力はない（Ｍａｔｈｅｗ ｅｔ ａｌ． Ａ
ｐｐｌ． Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂ
ｉｏｌｏｇｙ, ５４，No．４，１９８８，p. 1030〜103
2）。
ｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｈｏｄｏｃｈｒｏｕｓ）Ｊ１種
は、たとえば２−シアノピラジンをピラジンカルボン酸
に転換することが知られている。（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ
ｅｔ ａｌ． Ｊ． ｏｆＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，
４３，No.１０，１９９０，p. 1316〜1320） しかしな
がら、この微生物は２−シアノピリジンをピコリン酸に
転換する能力はない（Ｍａｔｈｅｗ ｅｔ ａｌ． Ａ
ｐｐｌ． Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂ
ｉｏｌｏｇｙ, ５４，No．４，１９８８，p. 1030〜103
2）。
【０００８】２−シアノピリジンを利用するアルカリゲ
ネス属の微生物は２−シアノピリジンを６−ヒドロキシ
ピコリン酸に変換することも、知られている（ＥＰ−Ａ
０５０４８１８）。 この方法の不利益な点は、６−ヒ
ドロキシピコリン酸が中程度の収率でしか生成しないこ
とである。
ネス属の微生物は２−シアノピリジンを６−ヒドロキシ
ピコリン酸に変換することも、知られている（ＥＰ−Ａ
０５０４８１８）。 この方法の不利益な点は、６−ヒ
ドロキシピコリン酸が中程度の収率でしか生成しないこ
とである。
【０００９】本発明の目的は、ヘテロ芳香族カルボン酸
またはその生理的に許容し得る塩、たとえばピラジンカ
ルボン酸、ピコリン酸またはピコリン酸クロムを、アル
カリゲネス属の微生物を利用して、より経済的な微生物
学的製造方法であって、生成するカルボン酸またはその
生理的に許容し得る塩が高収率で得られるような製造方
法を提供することにある。
またはその生理的に許容し得る塩、たとえばピラジンカ
ルボン酸、ピコリン酸またはピコリン酸クロムを、アル
カリゲネス属の微生物を利用して、より経済的な微生物
学的製造方法であって、生成するカルボン酸またはその
生理的に許容し得る塩が高収率で得られるような製造方
法を提供することにある。
【００１０】この目的は、請求項１に記載の方法により
達成される。
達成される。
【００１１】本発明の製造方法は、下記の一般式で表わ
されるヘテロ芳香族ニトリル
されるヘテロ芳香族ニトリル
【００１２】
【化７】
【００１３】
【化８】
【００１４】〔式中、Ｘ，Ｒ1 およびＲ2 は前記した意
味を有する。〕を基質とし、これを２−シアノピリジン
を利用するアルカリゲネス属の微生物であって、生物学
的転換に先立ってジカルボン酸、トリカルボン酸または
炭水化物の存在下に培養したものを利用して、一般式Ｉ
またはIIのヘテロ芳香族カルボン酸に転換するような手
法で実施される。 ヘテロ芳香族カルボン酸は、つい
で、所望によりその生理的に許容できる塩に転化され
る。 これらカルボン酸の「生理的に許容できる塩」と
は、以下、たとえばクロム、カルシムまたはアンモニウ
ムの塩である。
味を有する。〕を基質とし、これを２−シアノピリジン
を利用するアルカリゲネス属の微生物であって、生物学
的転換に先立ってジカルボン酸、トリカルボン酸または
炭水化物の存在下に培養したものを利用して、一般式Ｉ
またはIIのヘテロ芳香族カルボン酸に転換するような手
法で実施される。 ヘテロ芳香族カルボン酸は、つい
で、所望によりその生理的に許容できる塩に転化され
る。 これらカルボン酸の「生理的に許容できる塩」と
は、以下、たとえばクロム、カルシムまたはアンモニウ
ムの塩である。
【００１５】実際の生物学的転換に先立って、本発明の
方法に使用するアルカリゲネス属の微生物は、通常の培
養をして、その有効な酵素を２−シアノピリジンで好都
合に誘起させる。 ２−シアノピリジンは、この培養お
よび誘起のために、０．０１〜２０重量％の濃度で、好
ましくは０．１〜１重量％の濃度で使用する。
方法に使用するアルカリゲネス属の微生物は、通常の培
養をして、その有効な酵素を２−シアノピリジンで好都
合に誘起させる。 ２−シアノピリジンは、この培養お
よび誘起のために、０．０１〜２０重量％の濃度で、好
ましくは０．１〜１重量％の濃度で使用する。
【００１６】「ジカルボン酸」の語は、以下、フマール
酸、コハク酸、マレイン酸、グルタル酸、マロン酸また
はそれらの塩および誘導体たとえばエステルを意味す
る。
酸、コハク酸、マレイン酸、グルタル酸、マロン酸また
はそれらの塩および誘導体たとえばエステルを意味す
る。
【００１７】「トリカルボン酸」の語は、以下、クエン
酸、イソクエン酸またはそれらの塩および誘導体たとえ
ばエステルを意味する。 これらジカルボン酸およびト
リカルボン酸の塩および誘導体であって使用に適するも
のは、フマレート、マレート、マロネート、オキサルア
セテート、サイトレート、アコニテート、イソサイトレ
ート、２−オキソグルタレート、サクシネートまたはサ
クシニル−ＣｏＡである。 フマレート、マレートまた
はサクシネートが好ましく使用される。
酸、イソクエン酸またはそれらの塩および誘導体たとえ
ばエステルを意味する。 これらジカルボン酸およびト
リカルボン酸の塩および誘導体であって使用に適するも
のは、フマレート、マレート、マロネート、オキサルア
セテート、サイトレート、アコニテート、イソサイトレ
ート、２−オキソグルタレート、サクシネートまたはサ
クシニル−ＣｏＡである。 フマレート、マレートまた
はサクシネートが好ましく使用される。
【００１８】「炭水化物」の語は、以下、グルコースの
ようなモノサッカライド、シュクロース、トレハロース
またはマルトースのようなジサッカライド、ラフィノー
スのようなトリサッカライド、さらにはグリセロールの
ようなシュガーアルコールを意味する。 グリセロール
が、炭水化物としては好ましく使用される。
ようなモノサッカライド、シュクロース、トレハロース
またはマルトースのようなジサッカライド、ラフィノー
スのようなトリサッカライド、さらにはグリセロールの
ようなシュガーアルコールを意味する。 グリセロール
が、炭水化物としては好ましく使用される。
【００１９】ジカルボン酸、トリカルボン酸または炭水
化物は、０．１〜２０重量％の濃度、好ましくは０．５
〜５重量％の濃度で好都合に使用される。
化物は、０．１〜２０重量％の濃度、好ましくは０．５
〜５重量％の濃度で好都合に使用される。
【００２０】培地としては、当業者の間に常用されてい
るもの、たとえばＫｕｌｌａ ｅｔａｌ．のミネラル塩
培地（Ａｒｃｈ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， １３５，
１−７，１９８３）の低モル度リン酸緩衝液、または下
記の表１に示されたものを使用することができる。 好
ましくは表１に記載のものを使用する。
るもの、たとえばＫｕｌｌａ ｅｔａｌ．のミネラル塩
培地（Ａｒｃｈ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， １３５，
１−７，１９８３）の低モル度リン酸緩衝液、または下
記の表１に示されたものを使用することができる。 好
ましくは表１に記載のものを使用する。
【００２１】培養期の後であって基質の添加の前に、微
生物を常用の分離手段によって収穫してもよいし、ある
いはまた、基質を直接微生物に対して加えてもよい。
生物を常用の分離手段によって収穫してもよいし、ある
いはまた、基質を直接微生物に対して加えてもよい。
【００２２】生物学的転換に使用する基質である一般式
III およびIVのヘテロ芳香族ニトリルたとえば２−シア
ノピリジンは、市場で入手できる化合物である。
III およびIVのヘテロ芳香族ニトリルたとえば２−シア
ノピリジンは、市場で入手できる化合物である。
【００２３】一般式Ｉ〜IVにおけるＸは、窒素原子また
は−ＣＨ−を表わし、好ましくは−ＣＨ−である。 基
Ｒ1 およびＲ2 は同一または異なるものであって、水素
または、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素のようなハ
ロゲンを表わす。 あり得る基質は、従って、２−シア
ノピリジン、６−クロロ−２−シアノピリジン、５，６
−ジクロロ−２−シアノピリジン、２−シアノピラジ
ン、６−クロロ−２−シアノピラジン、５−ブロモ−６
−クロロ−２−シアノピラジンである。 ２−シアノピ
リジン、２−シアノピラジンまたは６−クロロ−２−シ
アノピリジンが、基質として好都合に使用される。
は−ＣＨ−を表わし、好ましくは−ＣＨ−である。 基
Ｒ1 およびＲ2 は同一または異なるものであって、水素
または、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素のようなハ
ロゲンを表わす。 あり得る基質は、従って、２−シア
ノピリジン、６−クロロ−２−シアノピリジン、５，６
−ジクロロ−２−シアノピリジン、２−シアノピラジ
ン、６−クロロ−２−シアノピラジン、５−ブロモ−６
−クロロ−２−シアノピラジンである。 ２−シアノピ
リジン、２−シアノピラジンまたは６−クロロ−２−シ
アノピリジンが、基質として好都合に使用される。
【００２４】基質は、生物学的転換のためには、一時的
に加えてもよいし、連続的に加えてもよい。 基質は、
培地中の基質濃度が２０重量％を超えないようなやり方
で、好ましくは基質濃度が１０重量％を超えないような
やり方で加えるのがよい。
に加えてもよいし、連続的に加えてもよい。 基質は、
培地中の基質濃度が２０重量％を超えないようなやり方
で、好ましくは基質濃度が１０重量％を超えないような
やり方で加えるのがよい。
【００２５】生物学的転換は、通常は静止した細胞で行
なわれ、２−シアノピリジンを利用するアルカリゲネス
・フェーカリス種の微生物（この微生物はＥＰ−Ａ０５
０４８１８に記載され、ＤＳＭ６３３５の番号を与えら
れている）およびその機能的に同等な変異種および突然
変異種を使用して実施する。 上記の微生物は１９９１
年１月３日に、ドイツ国ブラウンシュヴァィク・Ｄ−３
８１２４，マシェローダ・ヴェク１ｂのドイッチェ・ザ
ムルング・フオン・ミクロオーガニスメン・ウント・ツ
ェルクルトゥーレン・ＧｍｂＨに、ブタペスト条約の規
定に従って寄託された。
なわれ、２−シアノピリジンを利用するアルカリゲネス
・フェーカリス種の微生物（この微生物はＥＰ−Ａ０５
０４８１８に記載され、ＤＳＭ６３３５の番号を与えら
れている）およびその機能的に同等な変異種および突然
変異種を使用して実施する。 上記の微生物は１９９１
年１月３日に、ドイツ国ブラウンシュヴァィク・Ｄ−３
８１２４，マシェローダ・ヴェク１ｂのドイッチェ・ザ
ムルング・フオン・ミクロオーガニスメン・ウント・ツ
ェルクルトゥーレン・ＧｍｂＨに、ブタペスト条約の規
定に従って寄託された。
【００２６】「機能的に同等な変異種および突然変異
種」とは、もとの微生物と本質的に同じ性質と機能を有
する微生物を意味する。 このような変異種および突然
変異種は、たとえば紫外線照射のような冒険的な方法に
よって得られる。
種」とは、もとの微生物と本質的に同じ性質と機能を有
する微生物を意味する。 このような変異種および突然
変異種は、たとえば紫外線照射のような冒険的な方法に
よって得られる。
【００２７】生物学的転換には、微生物の培養に用いた
ものと同じ培地を使用することができる。 生物学的転
換はまた、上述したジカルボン酸、トリカルボン酸また
は炭水化物の存在下でも、不存在下でも起り得る。
ものと同じ培地を使用することができる。 生物学的転
換はまた、上述したジカルボン酸、トリカルボン酸また
は炭水化物の存在下でも、不存在下でも起り得る。
【００２８】ｐＨは好ましくは４〜１０の範囲、より好
ましくは５〜９の範囲である。 生物学的転換は、温度
１０〜５０℃において実施することができる。 好まし
い温度は、２０〜４０℃である。
ましくは５〜９の範囲である。 生物学的転換は、温度
１０〜５０℃において実施することができる。 好まし
い温度は、２０〜４０℃である。
【００２９】通常の転換時間である６〜１００時間を経
過した後、式ＩまたはIIに従う適切なカルボン酸が、常
用の処理操作たとえば酸性化によって得られる。 カル
ボン酸はまた、たとえばアンモニウム塩やクロム塩のよ
うな塩の形でも単離することができる。
過した後、式ＩまたはIIに従う適切なカルボン酸が、常
用の処理操作たとえば酸性化によって得られる。 カル
ボン酸はまた、たとえばアンモニウム塩やクロム塩のよ
うな塩の形でも単離することができる。
【００３０】製造されたヘテロ芳香族カルボン酸が６−
位においてヒドロキシル化されているもの（一般式II）
である場合、生物学的転換は好気的条件下に実施するの
が有利である。 しかしながら、ヒドロキシル化されて
いないヘテロ芳香族カルボン酸たとえばピコリン酸を製
造しようとする場合、生物学的転換は嫌気的条件下に実
施するのが有利である。
位においてヒドロキシル化されているもの（一般式II）
である場合、生物学的転換は好気的条件下に実施するの
が有利である。 しかしながら、ヒドロキシル化されて
いないヘテロ芳香族カルボン酸たとえばピコリン酸を製
造しようとする場合、生物学的転換は嫌気的条件下に実
施するのが有利である。
【００３１】
〔実施例１〕 ６−ヒドロキシピコリン酸の製造 アルカリゲネス・フェーカリスＤＳＭ６３３５株を使用
する６−ヒドロキシピコリン酸製造の条件は、下記のと
おりである。 操作容積が５リットルある７．５リット
ル発酵容器を使用した。 アルカリゲネス・フェーカリ
スＤＳＭ６３３５を、フマール酸ナトリウムを唯一の炭
素源およびエネルギー源とするミネラル塩培地(表１)
で、２−シアノピリジンをインデューサとして用い、３
０℃で、撹拌速度６００rpm 、ｐＨ７．０で培養した。
その間、エアレーションの速度は約３リットル／分と
した。 フマール酸ナトリウムの追加を、ｐＯ2 をコン
トロールしてｐＯ2 ＞３０％であるときに行なった。
濃度２０％のフマール酸ナトリウムのストック溶液に、
０．５％の２−シアノピリジンを加えたものを使用し
た。 ６５０nm（ＯＤ650 ）で測定した光学密度が１６
に至るまで、２３時間にわたって、生物学的転換がスタ
ートするのに先立って細胞を培養した。 成長相におい
て、約１６０ｇのフマール酸ナトリウムを、濃度２０％
の溶液（約８００ml)として使用した。
する６−ヒドロキシピコリン酸製造の条件は、下記のと
おりである。 操作容積が５リットルある７．５リット
ル発酵容器を使用した。 アルカリゲネス・フェーカリ
スＤＳＭ６３３５を、フマール酸ナトリウムを唯一の炭
素源およびエネルギー源とするミネラル塩培地(表１)
で、２−シアノピリジンをインデューサとして用い、３
０℃で、撹拌速度６００rpm 、ｐＨ７．０で培養した。
その間、エアレーションの速度は約３リットル／分と
した。 フマール酸ナトリウムの追加を、ｐＯ2 をコン
トロールしてｐＯ2 ＞３０％であるときに行なった。
濃度２０％のフマール酸ナトリウムのストック溶液に、
０．５％の２−シアノピリジンを加えたものを使用し
た。 ６５０nm（ＯＤ650 ）で測定した光学密度が１６
に至るまで、２３時間にわたって、生物学的転換がスタ
ートするのに先立って細胞を培養した。 成長相におい
て、約１６０ｇのフマール酸ナトリウムを、濃度２０％
の溶液（約８００ml)として使用した。
【００３２】２−シアノピリジンの好気的な生物学的転
換により６−ヒドロキシピコリン酸にする間、炭素およ
びエネルギーの源を別に与えなかった。 生物学的転換
は、静止した細胞で行なわれた。
換により６−ヒドロキシピコリン酸にする間、炭素およ
びエネルギーの源を別に与えなかった。 生物学的転換
は、静止した細胞で行なわれた。
【００３３】２−シアノピリジンの追加を、定量ポンプ
を使用して行なった。 ポンプ速度は、ＨＰＬＣにより
「オンライン」でモニターした。 中間体であるピコリ
ン酸の生成速度は、ピコリン酸を６−ヒドロキシピコリ
ン酸に転換する速度に対して約２．５倍大きく（４ｇ／
ｌ・ｈに対して１０ｇ／ｌ・ｈ）、ピコリン酸の濃度は
２ｇ／ｌ未満に制限した。 そうしないと、ピコリン酸
の６−ヒドロキシピコリン酸への転化が妨げられるから
である。
を使用して行なった。 ポンプ速度は、ＨＰＬＣにより
「オンライン」でモニターした。 中間体であるピコリ
ン酸の生成速度は、ピコリン酸を６−ヒドロキシピコリ
ン酸に転換する速度に対して約２．５倍大きく（４ｇ／
ｌ・ｈに対して１０ｇ／ｌ・ｈ）、ピコリン酸の濃度は
２ｇ／ｌ未満に制限した。 そうしないと、ピコリン酸
の６−ヒドロキシピコリン酸への転化が妨げられるから
である。
【００３４】２−シアノピリジンは室温で固体であるた
め、２−シアノピリジンを入れた貯蔵容器を５０℃に加
熱して、２−シアノピリジンを液体の形で加えられるよ
うにした。 このプロセスによって、７５ｇ／ｌの６−
ヒドロキシピコリン酸を３１時間のうちに製造すること
ができた。 中間体であるピコリン酸は、生物学的転換
の末期においては、もはや検出されなかった。
め、２−シアノピリジンを入れた貯蔵容器を５０℃に加
熱して、２−シアノピリジンを液体の形で加えられるよ
うにした。 このプロセスによって、７５ｇ／ｌの６−
ヒドロキシピコリン酸を３１時間のうちに製造すること
ができた。 中間体であるピコリン酸は、生物学的転換
の末期においては、もはや検出されなかった。
【００３５】この６−ヒドロキシピコリン酸を単離する
ため、細胞を濾過により分離した。細胞を除いた溶液を
次に６０℃に加熱し、濃硫酸で酸性にしてｐＨを２〜
２．５とした。 このｐＨにおいて、６−ヒドロキシピ
コリン酸が溶液から析出した。
ため、細胞を濾過により分離した。細胞を除いた溶液を
次に６０℃に加熱し、濃硫酸で酸性にしてｐＨを２〜
２．５とした。 このｐＨにおいて、６−ヒドロキシピ
コリン酸が溶液から析出した。
【００３６】撹拌下にゆっくり冷却して２４℃にし、濾
過してその残渣を脱ミネラル水で洗浄して乾燥した（１
００mbar，５５℃）。 約２ｇ／ｌの６−ヒドロキシピ
コリン酸が母液中に残っていた。 収率は、使用した２
−シアノピリジン基準で８７％であった。
過してその残渣を脱ミネラル水で洗浄して乾燥した（１
００mbar，５５℃）。 約２ｇ／ｌの６−ヒドロキシピ
コリン酸が母液中に残っていた。 収率は、使用した２
−シアノピリジン基準で８７％であった。
【００３７】 表１ 組 成 濃度（ｇ／ｌ） フマール酸ジナトリウム 10 酵母エキス 1 ＭｇＣｌ2 ・６Ｈ2 Ｏ 0.8 Ｎａ2 ＳＯ4 0.25 （ＮＨ4 ）2 ＳＯ4 1.0 ＮＨ4 Ｃｌ 2.33 ＮａＣｌ 0.2 ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏ 0.16 ＭｎＳＯ4 1.8×10-2 Ｈ3 ＢＯ3 3×10-2 ＮｉＣｌ2 2×10-3 ＮａＭｏＯ4 3×10-3 ＦｅＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ 0.3 Ｎａ2 ＥＤＴＡ・２Ｈ2 Ｏ 0.75 ２−シアノピリジン 1 ＫＨ2 ＰＯ4 0.4 Ｎａ2 ＨＰＯ4 ０．９６ 〔実施例２〕 ピコリン酸の製造 バイオマスを、実施例１と同様にして培養した。 ピコ
リン酸の生成は、厳密に嫌気的な条件下で起った。 ゴ
ム栓をそなえた５００ｍｌのガラス瓶を使用し、ＯＤ
650 ＝２０のバイオマス４００ｍｌを入れた。 保温培
養を３０℃で行なった。 生物学的転換の開始に先立っ
て、混合物は純窒素で嫌気条件下に置いた。この目的の
ために、窒素ガス（ゲージ圧５０mbar）を、撹拌されて
いる混合物中に、針を通して約３０分間注入し、酸素を
定量的に追い出した。 生物学的転換の間または２−シ
アノピリジンの添加の際に酸素が侵入するのを防ぐため
に、窒素ガスの導入を生物学的転換の操作の間、続けて
行なった（ゲージ圧約１０mbarで）。 ２−シアノピリ
ジンを１２回に分けて、各回１時間が経過するごとに１
０ｇ／ｌずつ添加した。 しかし、添加は連続的に行な
うこともできる。 ＨＰＬＣを使用して、２−シアノピ
リジンが完全にピコリン酸に転化したかどうかをチェッ
クした上で、次の添加を行なった。 生物学的転換の
間、検知されるほどのピコリン酸アミドの生成はなかっ
た。 この方法によって、約１５０ｇ／ｌのピコリン酸
を２６時間の間に製造することができた。 その間、６
−ヒドロキシピコリン酸は生成しなかった。
リン酸の生成は、厳密に嫌気的な条件下で起った。 ゴ
ム栓をそなえた５００ｍｌのガラス瓶を使用し、ＯＤ
650 ＝２０のバイオマス４００ｍｌを入れた。 保温培
養を３０℃で行なった。 生物学的転換の開始に先立っ
て、混合物は純窒素で嫌気条件下に置いた。この目的の
ために、窒素ガス（ゲージ圧５０mbar）を、撹拌されて
いる混合物中に、針を通して約３０分間注入し、酸素を
定量的に追い出した。 生物学的転換の間または２−シ
アノピリジンの添加の際に酸素が侵入するのを防ぐため
に、窒素ガスの導入を生物学的転換の操作の間、続けて
行なった（ゲージ圧約１０mbarで）。 ２−シアノピリ
ジンを１２回に分けて、各回１時間が経過するごとに１
０ｇ／ｌずつ添加した。 しかし、添加は連続的に行な
うこともできる。 ＨＰＬＣを使用して、２−シアノピ
リジンが完全にピコリン酸に転化したかどうかをチェッ
クした上で、次の添加を行なった。 生物学的転換の
間、検知されるほどのピコリン酸アミドの生成はなかっ
た。 この方法によって、約１５０ｇ／ｌのピコリン酸
を２６時間の間に製造することができた。 その間、６
−ヒドロキシピコリン酸は生成しなかった。
【００３８】単離のため、細胞を除いたピコリン酸溶液
にＣａＣｌ2 ／Ｈ2 ＳＯ4 を加えて沈でんを生じさせ
た。 この目的のため、実施例２の細胞を除いたピコリ
ン酸溶液を３倍に稀釈し、この細胞除去発酵溶液を９０
℃に加熱したのち、撹拌しながら、ピコリン酸の当量あ
たり０．５当量のＣａＣｌ2 を添加した。 その結果、
カルシウム／ピコリン酸錯体が直ちに生成し析出した。
析出した錯体を撹拌下に４℃に冷却し、ガラスフリッ
ト(ポロシティ３)上で濾過し、脱ミネラル水で洗浄し
た。 フィルターケークを脱ミネラル水に分散し、濃硫
酸で酸性化してｐＨを２．５にした。 この間、ピコリ
ン酸は錯体から溶け出し、それと同時に不溶性の硫酸カ
ルシウムが生成した。 遊離のピコリン酸は水によく溶
けるので、硫酸カルシウムを濾過により除去することが
できた。 ピコリン酸溶液を蒸発して乾固し、分析し
た。 粗生成物は収率７０％、滴定により定めた純度８
６％であった。 カール・フィッシャー法で測定した水
分含有量は０．７％であった。
にＣａＣｌ2 ／Ｈ2 ＳＯ4 を加えて沈でんを生じさせ
た。 この目的のため、実施例２の細胞を除いたピコリ
ン酸溶液を３倍に稀釈し、この細胞除去発酵溶液を９０
℃に加熱したのち、撹拌しながら、ピコリン酸の当量あ
たり０．５当量のＣａＣｌ2 を添加した。 その結果、
カルシウム／ピコリン酸錯体が直ちに生成し析出した。
析出した錯体を撹拌下に４℃に冷却し、ガラスフリッ
ト(ポロシティ３)上で濾過し、脱ミネラル水で洗浄し
た。 フィルターケークを脱ミネラル水に分散し、濃硫
酸で酸性化してｐＨを２．５にした。 この間、ピコリ
ン酸は錯体から溶け出し、それと同時に不溶性の硫酸カ
ルシウムが生成した。 遊離のピコリン酸は水によく溶
けるので、硫酸カルシウムを濾過により除去することが
できた。 ピコリン酸溶液を蒸発して乾固し、分析し
た。 粗生成物は収率７０％、滴定により定めた純度８
６％であった。 カール・フィッシャー法で測定した水
分含有量は０．７％であった。
【００３９】〔実施例３〕 ピコリン酸クロム（III)の製造 ５００mlフラスコ中で、三塩化クロム六水塩の水溶液
（２３．９５ｇ，水６３ml中にＣｒが０．０９モル）
を、３．５時間かけて、ｐＨ７．１のピコリン酸アンモ
ニウム溶液（２７１．４ｇ，０．３２５モル、１６．８
％）に、７３℃で滴状にして加えた。 その結果生じた
紫色の溶液をさらに１時間撹拌し、それからゆっくりと
３℃に冷却した。 生成した赤色の固体が落ち着いたと
ころで、上澄みの青色の液をデカントして除去した。
固体を１００mlの水中に３０分間懸濁させ、デカンテー
ションを繰り返した。 ５０mlの水中で２回目の懸濁の
後、固体を吸引濾過し、５０℃で減圧下に乾燥した。
３３．６４ｇの暗赤色結晶が得られた（収率９０％）。
（２３．９５ｇ，水６３ml中にＣｒが０．０９モル）
を、３．５時間かけて、ｐＨ７．１のピコリン酸アンモ
ニウム溶液（２７１．４ｇ，０．３２５モル、１６．８
％）に、７３℃で滴状にして加えた。 その結果生じた
紫色の溶液をさらに１時間撹拌し、それからゆっくりと
３℃に冷却した。 生成した赤色の固体が落ち着いたと
ころで、上澄みの青色の液をデカントして除去した。
固体を１００mlの水中に３０分間懸濁させ、デカンテー
ションを繰り返した。 ５０mlの水中で２回目の懸濁の
後、固体を吸引濾過し、５０℃で減圧下に乾燥した。
３３．６４ｇの暗赤色結晶が得られた（収率９０％）。
【００４０】〔実施例４〕 アルカリゲネス・フェーカリスＤＳＭ６３３５の種々の
炭素源を使用しての培養 Ａ＋Ｎ培地（表１、ただしフマール酸ジナトリウムを含
まない）１００mlを入れた３００ml三角フラスコを使用
して、アルカリゲネス・フェーカリス（ＤＳＭ６３３
５）を培養した。 ２ｇ／ｌの２−シアノピリジンと１
０ｇ／ｌの下記の炭素源のうちのひとつとを、培地に加
えた。
炭素源を使用しての培養 Ａ＋Ｎ培地（表１、ただしフマール酸ジナトリウムを含
まない）１００mlを入れた３００ml三角フラスコを使用
して、アルカリゲネス・フェーカリス（ＤＳＭ６３３
５）を培養した。 ２ｇ／ｌの２−シアノピリジンと１
０ｇ／ｌの下記の炭素源のうちのひとつとを、培地に加
えた。
【００４１】フマール酸ジナトリウム グリセロール マロン酸ジナトリウム コハク酸ジナトリウム 保温培養はシェーカー中、３０℃で行なった。 １６時
間の成長の後、細胞を取り出し、新しいＡ＋Ｎ培地（炭
素源を含まない）の１０ｇ／ｌの２−シアノピリジンを
含有するものに再懸濁した。 細胞懸濁液６５０nm（Ｏ
Ｄ650 ）で測定した光学密度は、１０であった。 細胞
懸濁液（全容積は１０〜２０ml）を、再度３０℃で保温
培養した。 ６−ヒドロキシピコリン酸の生成を、分光
分析により、細胞を除いた液の３０８nm光の吸収を測定
して追跡した。 ６−ヒドロキシピコリン酸に関して、
下記の平均生産性が得られた： 炭素源 生産性（ｇ／ｌ・hr） フマール酸ジナトリウム 2.4 グリセロール 2.0 マロン酸ジナトリウム 4.2 コハク酸ジナトリウム 0.14 〔実施例５〕 ６−ヒドロキシピラジンカルボン酸の製造 アルカリゲネス・フェーカリス（ＤＳＭ６３３５）を、
炭素源としてフマール酸を使用して、実施例４と同様に
培養した。 洗浄した細胞を、１０ｇ／ｌの２−シアノ
ピリジンを含有するＡ＋Ｎ培地に再懸濁し（ＯＤ650 ＝
１０）、３０℃で初期培養した。 ６−ヒドロキシピラ
ジンカルボン酸の生成を、分光分析により、細胞を除い
た溶液の３２０nm光の吸収を測定して追跡した。 ２−
シアノピラジン（基質）濃度の減少を、２７０nm光の吸
収を測定することにより決定することができた。 使用
した２−シアノピラジンの全量が、７時間後に、６−ヒ
ドロキシピラジンカルボン酸に転化していた。
間の成長の後、細胞を取り出し、新しいＡ＋Ｎ培地（炭
素源を含まない）の１０ｇ／ｌの２−シアノピリジンを
含有するものに再懸濁した。 細胞懸濁液６５０nm（Ｏ
Ｄ650 ）で測定した光学密度は、１０であった。 細胞
懸濁液（全容積は１０〜２０ml）を、再度３０℃で保温
培養した。 ６−ヒドロキシピコリン酸の生成を、分光
分析により、細胞を除いた液の３０８nm光の吸収を測定
して追跡した。 ６−ヒドロキシピコリン酸に関して、
下記の平均生産性が得られた： 炭素源 生産性（ｇ／ｌ・hr） フマール酸ジナトリウム 2.4 グリセロール 2.0 マロン酸ジナトリウム 4.2 コハク酸ジナトリウム 0.14 〔実施例５〕 ６−ヒドロキシピラジンカルボン酸の製造 アルカリゲネス・フェーカリス（ＤＳＭ６３３５）を、
炭素源としてフマール酸を使用して、実施例４と同様に
培養した。 洗浄した細胞を、１０ｇ／ｌの２−シアノ
ピリジンを含有するＡ＋Ｎ培地に再懸濁し（ＯＤ650 ＝
１０）、３０℃で初期培養した。 ６−ヒドロキシピラ
ジンカルボン酸の生成を、分光分析により、細胞を除い
た溶液の３２０nm光の吸収を測定して追跡した。 ２−
シアノピラジン（基質）濃度の減少を、２７０nm光の吸
収を測定することにより決定することができた。 使用
した２−シアノピラジンの全量が、７時間後に、６−ヒ
ドロキシピラジンカルボン酸に転化していた。
【００４２】〔実施例６〕 ６−クロロピコリン酸およびピラジンカルボン酸の製造 アルカリゲネス・フェーカリス（ＤＳＭ６３３５）を、
フマール酸を炭素源として、実施例４と同様に培養し
た。 洗浄した細胞を、ゴム栓のできるガラス容器中の
Ａ＋Ｎ培地に再懸濁し（ＯＤ650 ＝１０）、窒素ガスを
針を通して注入して、溶存している酸素を追い出した。
続いて、２−シアノピリジンまたは６−クロロ−２−
シアノピリジンを、細胞懸濁液に基質として加え、最終
的な濃度を１０ｇ／ｌとして、３０℃で初期培養した。
３時間後、出発原料である基質は、対応する酸に定量
的に転化していた。 〔薄層クロマトグラフィーによる
検出：シリカゲル６０、蛍光指示薬使用、移動相：クロ
ロフォルム３０／エタノール５５／ＮＨ4 ＯＨ（２５
％）１０／Ｈ2 Ｏ ５〕
フマール酸を炭素源として、実施例４と同様に培養し
た。 洗浄した細胞を、ゴム栓のできるガラス容器中の
Ａ＋Ｎ培地に再懸濁し（ＯＤ650 ＝１０）、窒素ガスを
針を通して注入して、溶存している酸素を追い出した。
続いて、２−シアノピリジンまたは６−クロロ−２−
シアノピリジンを、細胞懸濁液に基質として加え、最終
的な濃度を１０ｇ／ｌとして、３０℃で初期培養した。
３時間後、出発原料である基質は、対応する酸に定量
的に転化していた。 〔薄層クロマトグラフィーによる
検出：シリカゲル６０、蛍光指示薬使用、移動相：クロ
ロフォルム３０／エタノール５５／ＮＨ4 ＯＨ（２５
％）１０／Ｈ2 Ｏ ５〕
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ライナー グレックラー スイス国 カントン・ヴァリス ヴィスパ ーターミネンオブリ ビフィガ（番地な し)
Claims (4)
- 【請求項１】 下記の一般式で表わされるヘテロ芳香族
カルボン酸またはその生理的に許容される塩を製造する
微生物学的方法において、 【化１】 【化２】 〔式中、Ｒ1 およびＲ2 は同一または異なるものであっ
て、水素またはハロゲンの原子を表わし、Ｘは窒素原子
または−ＣＨ−を表わす。〕 下記の一般式のヘテロ芳香族ニトリルを基質とし、 【化３】 【化４】 〔式中、Ｒ1 ，Ｒ2 およびＸは、上記した意味を有す
る。〕 これを、２−シアノピリジンを利用するアルカリゲネス
属の微生物であって、生物学的転換に先立ってジカルボ
ン酸、トリカルボン酸または炭水化物の存在下に培養さ
れたものを使用して対応するカルボン酸に転化し、適切
であればこれをさらに生理的に許容し得る塩に転化する
ことを特徴とする方法。 - 【請求項２】 生物学的転換を、アルカリゲネス・フェ
ーカリス種に属する寄託番号ＤＳＭ６３３５の微生物ま
たはその機能的に同等な変異種および突然変異種を用い
て実施することを特徴とする請求項１の方法。 - 【請求項３】 生物学的転換を、ｐＨ４〜１０および温
度１０〜５０℃において実施することを特徴とする請求
項１または２の方法。 - 【請求項４】 ピコリン酸またはその生理的に許容し得
る塩を製造する方法であって、基質としての２−シアノ
ピリジンを、２−シアノピリジンを利用するアルカリゲ
ネス属の微生物であって、生物学的転換に先立ってジカ
ルボン酸、トリカルボン酸または炭水化物の存在下に培
養されたものを使用して対応するカルボン酸に転化し、
適切であればこれをさらに生理的に許容し得る塩に転化
することを特徴とする方法。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH166495 | 1995-06-07 | ||
| CH1733/95-2 | 1995-06-13 | ||
| CH173395 | 1995-06-13 | ||
| CH1664/95-9 | 1995-06-13 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08332094A true JPH08332094A (ja) | 1996-12-17 |
| JP3810860B2 JP3810860B2 (ja) | 2006-08-16 |
Family
ID=25688320
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14271996A Expired - Fee Related JP3810860B2 (ja) | 1995-06-07 | 1996-06-05 | アルカリゲネス属の微生物を利用してヘテロ芳香族カルボン酸を製造する微生物学的方法 |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5702930A (ja) |
| EP (1) | EP0747486B1 (ja) |
| JP (1) | JP3810860B2 (ja) |
| KR (1) | KR100471703B1 (ja) |
| CN (1) | CN1127573C (ja) |
| AT (1) | ATE186328T1 (ja) |
| CA (1) | CA2177651C (ja) |
| CZ (1) | CZ288989B6 (ja) |
| DE (1) | DE59603534D1 (ja) |
| DK (1) | DK0747486T3 (ja) |
| ES (1) | ES2140757T3 (ja) |
| HU (1) | HU219855B (ja) |
| NO (1) | NO319146B1 (ja) |
| PT (1) | PT747486E (ja) |
| SK (1) | SK281873B6 (ja) |
| TW (1) | TW528803B (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010125829A1 (ja) * | 2009-04-30 | 2010-11-04 | 三井化学株式会社 | ３-メルカプトプロピオン酸またはその塩を製造する方法 |
| CN109251169B (zh) * | 2018-10-08 | 2022-08-16 | 盐城工学院 | 一种利用2-op精馏残渣制备吡啶-2-甲酸铬的方法 |
| CN111072558B (zh) * | 2019-11-05 | 2022-05-24 | 南京红太阳生物化学有限责任公司 | 一种2,3-二氯-6-氰基吡啶的制备方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61162191A (ja) * | 1985-01-11 | 1986-07-22 | Nitto Chem Ind Co Ltd | 微生物による有機酸類の製造法 |
| JP3009421B2 (ja) * | 1990-02-28 | 2000-02-14 | 秀明 山田 | 有機酸の生物学的製造法 |
| GB9005965D0 (en) * | 1990-03-16 | 1990-05-09 | Shell Int Research | Herbicidal carboxamide derivatives |
| US5264361A (en) * | 1991-03-18 | 1993-11-23 | Lonza Ltd. | Microbiological process for the production of 6-hydroxypicolinic acid |
| US5270203A (en) * | 1992-03-13 | 1993-12-14 | Lonza Ltd. | Biologically pure culture of Alcaligenes faecalis DSM 6335 |
-
1996
- 1996-05-29 CA CA002177651A patent/CA2177651C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-04 SK SK716-96A patent/SK281873B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1996-06-05 ES ES96109088T patent/ES2140757T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-05 JP JP14271996A patent/JP3810860B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-05 EP EP96109088A patent/EP0747486B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-05 DK DK96109088T patent/DK0747486T3/da active
- 1996-06-05 DE DE59603534T patent/DE59603534D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-05 PT PT96109088T patent/PT747486E/pt unknown
- 1996-06-05 CZ CZ19961636A patent/CZ288989B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-06-05 AT AT96109088T patent/ATE186328T1/de active
- 1996-06-06 NO NO19962389A patent/NO319146B1/no not_active IP Right Cessation
- 1996-06-06 US US08/659,362 patent/US5702930A/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-07 HU HU9601582A patent/HU219855B/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-06-07 KR KR1019960020328A patent/KR100471703B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-07 CN CN96110476A patent/CN1127573C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-12 TW TW085107071A patent/TW528803B/zh not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1145956A (zh) | 1997-03-26 |
| ATE186328T1 (de) | 1999-11-15 |
| SK71696A3 (en) | 1997-01-08 |
| HU219855B (hu) | 2001-08-28 |
| NO962389D0 (no) | 1996-06-06 |
| HUP9601582A3 (en) | 2000-04-28 |
| CN1127573C (zh) | 2003-11-12 |
| EP0747486A1 (de) | 1996-12-11 |
| CZ288989B6 (cs) | 2001-10-17 |
| KR100471703B1 (ko) | 2005-06-20 |
| JP3810860B2 (ja) | 2006-08-16 |
| HU9601582D0 (en) | 1996-07-29 |
| HUP9601582A2 (en) | 1997-03-28 |
| CA2177651A1 (en) | 1996-12-08 |
| NO319146B1 (no) | 2005-06-27 |
| DK0747486T3 (da) | 2000-01-31 |
| CZ163696A3 (en) | 1997-01-15 |
| US5702930A (en) | 1997-12-30 |
| DE59603534D1 (de) | 1999-12-09 |
| TW528803B (en) | 2003-04-21 |
| SK281873B6 (sk) | 2001-08-06 |
| EP0747486B1 (de) | 1999-11-03 |
| KR970001546A (ko) | 1997-01-24 |
| ES2140757T3 (es) | 2000-03-01 |
| NO962389L (no) | 1996-12-09 |
| PT747486E (pt) | 2000-04-28 |
| CA2177651C (en) | 2008-01-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2053300C1 (ru) | Штамм бактерий rhodococcus rhodochrous - продуцент нитрилгидратазы | |
| EP0046284B1 (en) | Method for preparing 2,5-diketo-d-gluconic acid and microorganisms for carrying out the method | |
| US5360731A (en) | Bacteria capable of stereospecifically hydrolyzing R-(-)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxamide | |
| SK278496B6 (en) | Microbiological producing method of 6-hydroxypicolinic acid | |
| JP3810860B2 (ja) | アルカリゲネス属の微生物を利用してヘテロ芳香族カルボン酸を製造する微生物学的方法 | |
| US5516661A (en) | Microbiological process for the production of aromatic hydroxy-heterocyclic carboxylic acids | |
| US5270203A (en) | Biologically pure culture of Alcaligenes faecalis DSM 6335 | |
| US5338667A (en) | Microbiological process for the production of malonyl-7-amino-cephalosporanic acid derivatives using Sphingomonas sp. DSM 7007 | |
| US5264361A (en) | Microbiological process for the production of 6-hydroxypicolinic acid | |
| JP2507406B2 (ja) | Ｄ−（−）−酒石酸の製造法 | |
| JPH01104194A (ja) | Ｄ−（−）−酒石酸の製造法 | |
| US5234819A (en) | Method for preparing 2,5-diketo-D-gluconic acid | |
| CA2062667C (en) | Microbiological process for the production of 6-hydroxynicotinic acid | |
| JP2002281993A (ja) | シキミ酸の製造方法 | |
| PL184111B1 (pl) | Mikrobiologiczny sposób wytwarzania heteroaromatycznych kwasów karboksylowych | |
| JPS6019992B2 (ja) | ラクタ−ゼの製造法 | |
| JPS63207391A (ja) | 芳香族化合物の微生物酸化方法 | |
| JPH08154692A (ja) | Ｄ−２−アミノ酪酸の製造方法 | |
| JPH0378102B2 (ja) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050823 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20051124 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20051201 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060322 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20060404 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20060425 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20060525 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100602 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110602 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120602 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130602 Year of fee payment: 7 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |