JPH08500820A - 細胞接着インヒビターとしての置換されたラクトース誘導体 - Google Patents
細胞接着インヒビターとしての置換されたラクトース誘導体Info
- Publication number
- JPH08500820A JPH08500820A JP6502607A JP50260794A JPH08500820A JP H08500820 A JPH08500820 A JP H08500820A JP 6502607 A JP6502607 A JP 6502607A JP 50260794 A JP50260794 A JP 50260794A JP H08500820 A JPH08500820 A JP H08500820A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- compound
- benzoyl
- benzyl
- selectin
- formula
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 150000002597 lactoses Chemical class 0.000 title claims description 8
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 title description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 86
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 22
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 18
- UZFMOKQJFYMBGY-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-TEMPO Chemical group CC1(C)CC(O)CC(C)(C)N1[O] UZFMOKQJFYMBGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 125000000625 hexosyl group Chemical group 0.000 claims abstract 4
- KPPVNWGJXFMGAM-UUILKARUSA-N (e)-2-methyl-1-(6-methyl-3,4-dihydro-2h-quinolin-1-yl)but-2-en-1-one Chemical compound CC1=CC=C2N(C(=O)C(/C)=C/C)CCCC2=C1 KPPVNWGJXFMGAM-UUILKARUSA-N 0.000 claims abstract 2
- -1 2,3,4-trihydroxybenzoyl Chemical group 0.000 claims description 41
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 20
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 12
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- 239000012039 electrophile Substances 0.000 claims description 4
- 125000002446 fucosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O1)C)* 0.000 claims description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 2
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 abstract description 35
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 abstract description 35
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 16
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 16
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000017455 cell-cell adhesion Effects 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 53
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 48
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 42
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 description 33
- 102100023471 E-selectin Human genes 0.000 description 27
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 22
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 22
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 22
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 20
- 239000000047 product Substances 0.000 description 20
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 108010035766 P-Selectin Proteins 0.000 description 18
- 102100023472 P-selectin Human genes 0.000 description 18
- AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N prometryn Chemical compound CSC1=NC(NC(C)C)=NC(NC(C)C)=N1 AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 17
- 102100033467 L-selectin Human genes 0.000 description 15
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- 108010092694 L-Selectin Proteins 0.000 description 14
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 12
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- LAQPKDLYOBZWBT-NYLDSJSYSA-N (2s,4s,5r,6r)-5-acetamido-2-{[(2s,3r,4s,5s,6r)-2-{[(2r,3r,4r,5r)-5-acetamido-1,2-dihydroxy-6-oxo-4-{[(2s,3s,4r,5s,6s)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy}hexan-3-yl]oxy}-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy}-4-hydroxy-6-[(1r,2r)-1,2,3-trihydrox Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]([C@@H](NC(C)=O)C=O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@]2(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C2)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 LAQPKDLYOBZWBT-NYLDSJSYSA-N 0.000 description 10
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- QTMDXZNDVAMKGV-UHFFFAOYSA-L copper(ii) bromide Chemical compound [Cu+2].[Br-].[Br-] QTMDXZNDVAMKGV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N toluene Substances CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 9
- OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;toluene Chemical compound CCOC(C)=O.CC1=CC=CC=C1 OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 8
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 6
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 6
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 6
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 6
- 229910021590 Copper(II) bromide Inorganic materials 0.000 description 5
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 5
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 5
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 5
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- CYQYBRMAYUBANC-UHFFFAOYSA-N 1,1-dichloroethane;n,n-dimethylformamide Chemical compound CC(Cl)Cl.CN(C)C=O CYQYBRMAYUBANC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 4
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 4
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 4
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 4
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 4
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 4
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 4
- 108010045397 lysyl-tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 4
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 4
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 4
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 4
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 4
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WCDLCPLAAKUJNY-UHFFFAOYSA-N 4-[4-[3-(1h-pyrazol-4-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-6-yl]phenyl]morpholine Chemical compound C1COCCN1C1=CC=C(C2=CN3N=CC(=C3N=C2)C2=CNN=C2)C=C1 WCDLCPLAAKUJNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 3
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- NIGUVXFURDGQKZ-UQTBNESHSA-N alpha-Neup5Ac-(2->3)-beta-D-Galp-(1->4)-[alpha-L-Fucp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@]3(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C3)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O NIGUVXFURDGQKZ-UQTBNESHSA-N 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 125000002519 galactosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium bromide Chemical compound [Br-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- PRDNHOYZCYSDIV-QKKXKWKRSA-N (2S,3R,4S,5R,6R)-2-[(2R,3S,4R,5R)-6-bromo-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)CO)[C@H](O1)CO)Br PRDNHOYZCYSDIV-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- ABUFEAKDTQPJQZ-UHFFFAOYSA-N 2,2-diethylbutane-1,1,1-triol Chemical compound CCC(CC)(CC)C(O)(O)O ABUFEAKDTQPJQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MITGKKFYIJJQGL-UHFFFAOYSA-N 9-(4-chlorobenzoyl)-6-methylsulfonyl-2,3-dihydro-1H-carbazol-4-one Chemical compound ClC1=CC=C(C(=O)N2C3=CC=C(C=C3C=3C(CCCC2=3)=O)S(=O)(=O)C)C=C1 MITGKKFYIJJQGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-DCSYEGIMSA-N Beta-Lactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-DCSYEGIMSA-N 0.000 description 2
- QUMCIHKVKQYNPA-RUZDIDTESA-N C1(CCCCC1)CN1[C@@H](C=2N(C=3C=NC(=NC1=3)NC1=C(C=C(C(=O)NC3CCN(CC3)C)C=C1)OC)C(=NN=2)C)CC Chemical compound C1(CCCCC1)CN1[C@@H](C=2N(C=3C=NC(=NC1=3)NC1=C(C=C(C(=O)NC3CCN(CC3)C)C=C1)OC)C(=NN=2)C)CC QUMCIHKVKQYNPA-RUZDIDTESA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 2
- XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-N Phosphine Chemical compound P XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 2
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- HXUAVKFUQQQZRL-UHFFFAOYSA-N chloroform formaldehyde Chemical compound C(Cl)(Cl)Cl.C=O HXUAVKFUQQQZRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 2
- 150000002402 hexoses Chemical group 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 2
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Chemical class 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 2
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- FRACPXUHUTXLCX-BELIEFIBSA-N tert-butyl N-{1-[(1S)-1-{[(1R,2S)-1-(benzylcarbamoyl)-1-hydroxy-3-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2-yl]carbamoyl}-2-cyclopropylethyl]-2-oxopyridin-3-yl}carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NC1=CC=CN(C1=O)[C@@H](CC2CC2)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]3CCNC3=O)[C@H](C(=O)NCC4=CC=CC=C4)O FRACPXUHUTXLCX-BELIEFIBSA-N 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 2
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 2
- JQSHBVHOMNKWFT-DTORHVGOSA-N varenicline Chemical compound C12=CC3=NC=CN=C3C=C2[C@H]2C[C@@H]1CNC2 JQSHBVHOMNKWFT-DTORHVGOSA-N 0.000 description 2
- FTLYMKDSHNWQKD-UHFFFAOYSA-N (2,4,5-trichlorophenyl)boronic acid Chemical compound OB(O)C1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl FTLYMKDSHNWQKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WGJUFIXHTBAMBX-BYPYZUCNSA-N (2s)-2,6,6-triaminohexanoic acid Chemical group NC(N)CCC[C@H](N)C(O)=O WGJUFIXHTBAMBX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- DMXYNFDSPMSNLS-BCKJCLKYSA-N (2s,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6r)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-(2-trimethylsilylethoxy)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OCC[Si](C)(C)C)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 DMXYNFDSPMSNLS-BCKJCLKYSA-N 0.000 description 1
- UXBCHMIKTYBYTN-LQPTXBPRSA-N (3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-3-[12-(3-iodophenyl)dodecoxy]-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthrene Chemical compound O([C@@H]1CC2=CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)CCCCCCCCCCCCC1=CC=CC(I)=C1 UXBCHMIKTYBYTN-LQPTXBPRSA-N 0.000 description 1
- VUDZSIYXZUYWSC-DBRKOABJSA-N (4r)-1-[(2r,4r,5r)-3,3-difluoro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-4-hydroxy-1,3-diazinan-2-one Chemical compound FC1(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)N[C@H](O)CC1 VUDZSIYXZUYWSC-DBRKOABJSA-N 0.000 description 1
- WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N (S)-chloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(N[C@@H](C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- DPRJPRMZJGWLHY-HNGSOEQISA-N (e,3r,5s)-7-[5-(4-fluorophenyl)-3-propan-2-yl-1-pyrazin-2-ylpyrazol-4-yl]-3,5-dihydroxyhept-6-enoic acid Chemical compound OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)/C=C/C=1C(C(C)C)=NN(C=2N=CC=NC=2)C=1C1=CC=C(F)C=C1 DPRJPRMZJGWLHY-HNGSOEQISA-N 0.000 description 1
- HEWZVZIVELJPQZ-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethoxypropane Chemical compound COC(C)(C)OC HEWZVZIVELJPQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZWGTXHSYZGXKF-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methylphenyl)acetic acid Chemical compound CC1=CC=CC=C1CC(O)=O RZWGTXHSYZGXKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TZKBVRDEOITLRB-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-n-[4-[(4-methylpiperazin-1-yl)methyl]-3-(trifluoromethyl)phenyl]-3-[2-(1h-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl)ethynyl]benzamide Chemical compound C1CN(C)CCN1CC(C(=C1)C(F)(F)F)=CC=C1NC(=O)C1=CC=C(C)C(C#CC=2C=C3C=NNC3=NC=2)=C1 TZKBVRDEOITLRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KUZSBKJSGSKPJH-VXGBXAGGSA-N 5-[(9R)-6-[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]-11-oxa-1,3,5-triazatricyclo[7.4.0.02,7]trideca-2,4,6-trien-4-yl]pyrazin-2-amine Chemical compound C[C@@H]1COCCN1c1nc(nc2N3CCOC[C@H]3Cc12)-c1cnc(N)cn1 KUZSBKJSGSKPJH-VXGBXAGGSA-N 0.000 description 1
- LDIOUQIXNSSOGU-UHFFFAOYSA-N 8-(3-pentylamino)-2-methyl-3-(2-chloro-4-methoxyphenyl)-6,7-dihydro-5h-cyclopenta[d]pyrazolo[1,5-a]pyrimidine Chemical compound CC1=NN2C(NC(CC)CC)=C3CCCC3=NC2=C1C1=CC=C(OC)C=C1Cl LDIOUQIXNSSOGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 238000000035 BCA protein assay Methods 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920000832 Cutin Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- IECPWNUMDGFDKC-UHFFFAOYSA-N Fusicsaeure Natural products C12C(O)CC3C(=C(CCC=C(C)C)C(O)=O)C(OC(C)=O)CC3(C)C1(C)CCC1C2(C)CCC(O)C1C IECPWNUMDGFDKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100040510 Galectin-3-binding protein Human genes 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 101001018097 Homo sapiens L-selectin Proteins 0.000 description 1
- 101000614095 Homo sapiens Proton-activated chloride channel Proteins 0.000 description 1
- WINFHLHJTRGLCV-BZSNNMDCSA-N Lys-Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WINFHLHJTRGLCV-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 101100342814 Medicago truncatula LEC11 gene Proteins 0.000 description 1
- KFEUJDWYNGMDBV-LODBTCKLSA-N N-acetyllactosamine Chemical group O[C@@H]1[C@@H](NC(=O)C)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 KFEUJDWYNGMDBV-LODBTCKLSA-N 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010035148 Plague Diseases 0.000 description 1
- 102100040631 Proton-activated chloride channel Human genes 0.000 description 1
- CVBNMWXECPZOLM-UHFFFAOYSA-N Rhamnetin Natural products COc1cc(O)c2C(=O)C(=C(Oc2c1)c3ccc(O)c(O)c3O)O CVBNMWXECPZOLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700031314 Rotavirus VP6 Proteins 0.000 description 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical group 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- HBBOZFUQJDYASD-LPHOMBEVSA-N alpha-L-Fucp-(1->3)-[beta-D-Galp-(1->4)]-beta-D-GlcpNAc Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O HBBOZFUQJDYASD-LPHOMBEVSA-N 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- SWLVFNYSXGMGBS-UHFFFAOYSA-N ammonium bromide Chemical compound [NH4+].[Br-] SWLVFNYSXGMGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 229940127217 antithrombotic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000002820 assay format Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- VJBCNMFKFZIXHC-UHFFFAOYSA-N azanium;2-(4-methyl-5-oxo-4-propan-2-yl-1h-imidazol-2-yl)quinoline-3-carboxylate Chemical compound N.N1C(=O)C(C(C)C)(C)N=C1C1=NC2=CC=CC=C2C=C1C(O)=O VJBCNMFKFZIXHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 230000008614 cellular interaction Effects 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- MVPPADPHJFYWMZ-UHFFFAOYSA-N chlorobenzene Chemical compound ClC1=CC=CC=C1 MVPPADPHJFYWMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.ClC(Cl)Cl SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003677 chloroquine Drugs 0.000 description 1
- WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N chloroquine Natural products ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010549 co-Evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 1
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000020176 deacylation Effects 0.000 description 1
- 238000005947 deacylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- LBVWYGNGGJURHQ-UHFFFAOYSA-N dicarbon Chemical compound [C-]#[C+] LBVWYGNGGJURHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- ZKQFHRVKCYFVCN-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;hexane Chemical compound CCOCC.CCCCCC ZKQFHRVKCYFVCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 description 1
- 150000008131 glucosides Chemical group 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 108010008385 glycolipid receptor Proteins 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000004678 hydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 125000000654 isopropylidene group Chemical group C(C)(C)=* 0.000 description 1
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N methane;palladium Chemical compound C.[Pd] UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000010807 negative regulation of binding Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 125000001736 nosyl group Chemical group S(=O)(=O)(C1=CC=C([N+](=O)[O-])C=C1)* 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 1
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000006179 pH buffering agent Substances 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003961 penetration enhancing agent Substances 0.000 description 1
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910000073 phosphorus hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000007639 printing Methods 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005493 quinolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 108010038196 saccharide-binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 229940085605 saccharin sodium Drugs 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 208000037974 severe injury Diseases 0.000 description 1
- 230000009528 severe injury Effects 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 230000009450 sialylation Effects 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 125000005353 silylalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M sodium bicarbonate Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- MNWBNISUBARLIT-UHFFFAOYSA-N sodium cyanide Chemical compound [Na+].N#[C-] MNWBNISUBARLIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HJHVQCXHVMGZNC-JCJNLNMISA-M sodium;(2z)-2-[(3r,4s,5s,8s,9s,10s,11r,13r,14s,16s)-16-acetyloxy-3,11-dihydroxy-4,8,10,14-tetramethyl-2,3,4,5,6,7,9,11,12,13,15,16-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-ylidene]-6-methylhept-5-enoate Chemical compound [Na+].O[C@@H]([C@@H]12)C[C@H]3\C(=C(/CCC=C(C)C)C([O-])=O)[C@@H](OC(C)=O)C[C@]3(C)[C@@]2(C)CC[C@@H]2[C@]1(C)CC[C@@H](O)[C@H]2C HJHVQCXHVMGZNC-JCJNLNMISA-M 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical group 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000000264 venule Anatomy 0.000 description 1
- 235000008979 vitamin B4 Nutrition 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/18—Acyclic radicals, substituted by carbocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H11/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by inorganic acids; Metal salts thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H23/00—Compounds containing boron, silicon or a metal, e.g. chelates or vitamin B12
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/04—Disaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
セレクチンレセプターに結合し、細胞−細胞接着事像を調節することにより、炎症、癌、および関連した疾患の進行を調節する、式（Ｉ）を有する化合物、およびそれらの製造方法を記載する。式（Ｉ）において、R1は、それぞれ独立して、Hまたは低級アルキル（1-4C）であり；R2は、H、OH、低級アルキル（1-4C）、アルキルアリール、あるいは１つまたはそれ以上の他の糖残基であり；R3は、SO4 --、PO4 --を含む、負に荷電した部分であり；Yは、Hまたは低級アルキル（1-4C）であり；そしてXは、-CHR4（CHOR1）2CHR5OR1であり、ここで、R4およびR5は、それぞれ独立して、H、低級アルキル（1-4C）、あるいは、一緒になって、O、S、およびNR1からなる群から選択されるヘテロ原子を随意に含む、５員環または６員環を形成し；該５員環または６員環は、R1、CH2OR1、OR1、OOCR1、NR1 2、NHCOR1、およびSR1からなる群より選択される１種の置換基で随意に置換され、Xが、ヘキソース置換基を表すときは、R３およびR4は一緒になっても、ヘキソース置換基にはなり得ない。
Description
【発明の詳細な説明】細胞接着インヒビターとしての置換されたラクトース誘導体 技術分野
本発明は、炎症、アレルギー反応、自己免疫疾患、および関連した状態の治療
に有用な化合物に関する。より詳細には、本発明は、セレクチンレセプターに結
合する置換されたラクトース、およびそれらを含む薬学的組成物に関する。本発
明はまた、これらの類似物および他のラクトース誘導体を得るのに有用な合成方
法に関する。背景技術
細胞の相互作用が、少なくとも一部はレセプター／リガンド相互作用により仲
介されていることは、現在十分に確立されている。レセプターの１つのクラスは
、ペプチド部分配列「RGD」を認識することが知られており、他のレセプターは
、炭水化物リガンドを認識することが知られている。
炭水化物ベースのリガンドを認識するレセプターの１つのクラスは、刺激され
た血管内皮への、循環好中球の付着を仲介する。これは炎症性応答の最初の事象
であり、そしてこれはアレルギーおよび自己免疫応答にも包含されているようで
ある。数種のレセプターが、この相互作用に関与しており、１群の推定レクチン
を包含する。このレクチン群には、gp90
MEL
(Leu8)、ELAM-1、およびGMP-140(PADGEM)、ならびに(Gong，J.-G.ら、Nature
(1990)343:757；Johnston,G.I.ら、Cell(1989)56:1033；Geoffrey,J.S.およびRo
sen,S.D.、J.Cell Biol.(1989)109:2463；Lasky,L.A.ら、Cell(1989)56:1045)が
包含される。これらのレクチンは、L-セレクチン、E-セレクチン、およびP-セレ
クチンと呼ばれている。
E-セレクチンは、おそらく、これら３種のセレクチンのうち、最も特徴付けら
れている。これは、IL-1またはTNFに応答する内皮細胞での一過性発現である(Be
vilacqua,M.P.ら、Science(1989)243:1160)ため、特に興味深い。この誘導され
た発現期間（２〜８時間）により、感染および外傷に応答する初期の好中性溢出
におけるこのレセプターの役割が示唆される。さらに、Bevilacquaら(Bevilacqu
a,M.P.ら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1987)84:9238)は、ヒト好中球またはHL-60
細胞が、E-セレクチンレセプターについてコードするcDNAを含むプラスミドを用
いてトランスフェクトされたCOS細胞に接着することを示した。内皮細胞−白血
球接着分子についてコードするDNA配列に関する情報は、1990年11月15日に公開
された、公開PCT出願WO90/13300のなかで開示されている。
最近、いくつかの異なるグループが、E-セレクチンに対するリガンドに関する
論文を発表した。Loweら、Cell(1990)、63:475-484では、シアリルルイスx(sLex
)オリゴ多糖、NeuNac α2-3Ga1-β1-4(Fuc α1-3)-G1cNAcを用いて、HL-60細胞
変異物のE-セレクチン依存性接着と、トランスフェクトされ
た細胞株(line)との間の正の相関が報告された。α(1,3/1,4)フコシルトランス
フェラーゼを含むプラスミドで細胞をトランスフェクトすることにより、非骨髄
性COSまたはCHO系を、E-セレクチンに依存して結合するsLex陽性細胞に変換し得
た。抗sLex抗体を用いてE-セレクチン依存性接着をブロックする試みは、該抗体
による試験細胞の凝集反応のために解釈不可能であった。シアリル化フコシル化
ラクトサミノグリカンからなるオリゴ多糖群のうちの１種またはそれ以上が、E-
セレクチンのレクチンドメインに対するリガンドであると結論された。Phillips
ら（(1990)Science,250:1130-1132）は、sLexに対して報告された特異性を有す
る抗体を用いて、HL-60またはLEC11 CHO細胞の、活性化内皮細胞へのE-セレクチ
ン依存性接着を阻害した。末端sLex構造を有するジフコシル化糖脂質を含むリポ
ソームは、接着を阻害したが、非シアリル化Lex構造を有するリポソームは、部
分的に阻害性であった。WalZら（(1990)Science,250:1132-1135）は、sLexに対
するモノクローナル抗体を用いて、またはsLex構造を有する糖タンパク質によっ
て、HL-60細胞へのE-セレクチン-1gGキメラの結合を阻害し得たが、CD65またはC
D15抗体を用いた阻害は例示され得なかった。これら両グループは、sLex構造がE
-セレクチンに対するリガンドであると結論した。現譲渡人に譲渡され、そして
本明細書中で参考として援用される、特許出願番号WO92/02527は、上記の最小の
四糖類構造を開示し、そして特許請求の範囲とし、そしてELAM-1レセプターと相
互作用性
であると推定される基を同定している。
E-セレクチンとは対照的に、L-セレクチンおよびP-セレクチンに結合するリガ
ンドの特性は、よく解明されていない。L-セレクチンは、L-セレクチン認識を阻
害する、末梢リンパ節の高内皮性小静脈(high endothelial venule)のノイラミ
ニダーゼ処理に基づき、シアル酸を持つリガンドに結合するようである。Trueら
、1990,J.Cell Biol.111,2757-2764。さらに、直接的結合／阻害アッセイで可溶
性L-セレクチンを用いる、他の研究により、一定の炭水化物部分が、マンノース
およびフコースを含む重要なリガンド構成要素であり得る（特に硫酸化またはリ
ン酸化されるとき）ことを示唆している。Imalら、1990,J.Cell Blol.111,1225-
1232。より最近の研究では、L-セレクチンは、シアリルルイスｘに結合すること
が示唆されている。Foxall,C.ら、(1992)Cell、印刷中。
P-セレクチンに対するリガンドは、シアリルルイスｘに関連したエピトープを
有すると考えられる。この結論は、活性化された血小板またはP-セレクチンを発
現するCOS細胞への、HL-60細胞のP-セレクチン仲介接着をブロックするという特
異性を有する抗体を用いる研究に基づいている。Larsenら、(1990)Cell 63,467-
474。他の実験では、P-セレクチンでトランスフェクトされた細胞へのHL-60細胞
の接着は、ルイスｘエピトープを有する、乳から単離された五糖類によりブロッ
クされることが示された。最近、P-セレクチンは、スルファチドに結合すること
が示された。Aruffo,A.ら、(1991)Cell,67:3
5-44。
疾病（特に、ある一定の細胞タイプにおいて、セレクチン−リガンド結合を介
して起こる、所望されない細胞−細胞接着を含む疾病）でのセレクチンの役割の
ために、そのようなセレクチン−リガンド結合の制御を可能にする、新規なリガ
ンドの同定および単離が非常に必要とされている。発明の目的
本発明は、セレクチンレセプターに結合するアゴニストおよびアンタゴニスト
を提供する。従って、細胞−細胞接着事象を調節することにより、炎症、癌、お
よび関連した応答の経過を調節する。この局面において、本発明は以下の式の化
合物に関する：
ここで、R1は、それぞれ独立して、Hまたは低級アルキル(1-4C)であり；
R2は、H、低級アルキル(1-4C)、アルキルアリール、あるいは１つまたはそれ
以上の他の糖残基であり；
R3は、SO4 --、PO4 --、または関連する基を含む、負に荷電した部分であり；
Yは、H、OH1または低級アルキル(1-4C)であり；そして
Xは、-CHR4(CHOR1)2CHR5OR1であり、ここで、R4およびR5は、それぞれ独立し
て、H、低級アルキル(1-4C)、あるいは一緒になって、O、S、およびNR1から成る
群から選択されるヘテロ原子を随意に含む５員環または６員環を形成し；
該５員環または６員環は、R1、CH2OR1、OR1、OOCR1、NR1 2、NHCOR1、およびSR1
からなる群から選択される１種の置換基で随意に置換され、Xがヘキソース置換
基を表すときには、R4およびR5は一緒になっても、ヘキソース置換基になり得な
い。
他の局面においては、本発明はラクトース誘導体を合成する方法に関する。そ
の方法は、下式の中間体を接触させる工程を包含し、
ここで、R6は、それぞれ独立して、H、低級アルキル(1-4C)、または保護基で
あり；そして
ここで、Y1は、H、OH6、OOCR6、またはSR6であり；
ここで、少なくとも１つのR6は、置換されるべき位置にあり、そして、多くて
も１つの近接したR6がHであり、その他の全てのR6が保護基であり；そして
R7は保護基であり、生成物を得るための求電子試薬供給部分
を有し、ここで、求電子試薬は、置換されるべき位置で、OHのHに対して置換さ
れている。
他の局面において、本発明は、式１の化合物を含む薬剤組成物に関し、そして
これらの化合物を用いる炎症の治療方法に関する。他の局面において、本発明は
、式２の化合物、および、セレクチン結合リガンドまたは他の有用なラクトシル
残基含有部分の合成における、付加的な中間体に関する。発明を実施する形態
本明細書中で引用する全ての文献全体を、参考として援用することが意図され
ている。
本発明は、セレクチンレセプターに対して結合する能力によって、炎症を治療
するのに有用な化合物を提供する。例えば、図１は、炎症を介在するときにセレ
クチンレセプターの１種，ELAM-1によって行われると考えられている役割の概略
図である。血管には、ELAM-1表面レセプターを生成し得る内皮細胞が並んでいる
。血管内を循環しているリンパ球は、その表面にELAM-1レセプターと結合し得る
炭水化物リガンドを含む。これにより、血管壁を通って周囲の組織中にリンパ球
が移動する。これはいくつかの状況において有用な効力を有し得るが、周囲の組
織が感染している場合には、血管壁を通り組織中へのリンパ球の過度の移動は、
過度であり得、望ましくない炎症を引き起こす。いかなる特別な理論によっても
制限されることは望まないが、ELAM-1レセプターに結合する本
発明の化合物は、循環しているリンパ球の表面リガンドの反応を拮抗し、従って
、周囲の組織内で炎症を引き起こす、リンパ球の血管壁を通る移動を予防すると
考えられている。リガンドを同定するアッセイ
セレクチンリガンドとして作用するラクトース誘導体を同定するためのアッセ
イは、最も一般的な形態では、適切なセレクチン、L-セレクチン、E-セレクチン
、またはP-セレクチンを推定リガンドと接触させ、そしてその結合特性を測定す
ることを包含する。
いくつかのアッセイを利用して、L-セレクチン、E-セレクチン、またはP-セレ
クチンに結合する化合物の能力を測定することが可能であり、そしてこのような
アッセイは、当該分野で周知である。例えば、セレクチンおよび推定リガンドの
両方を、充分な時間、溶液中において、セレクチンおよびリガンドからなる複合
体を生成させ、次いで複合体を形成していないセレクチンおよびリガンドからこ
の複合体を分離し、そして生成した複合体の量を測定し得る。あるいは、複合体
を形成していないセレクチンまたは化合物の量を測定し得る。
第２の、そして好ましいアッセイ形式は、セレクチンまたは推定リガンドのい
ずれかを固体表面上に固定すること、および、固定化した反応物を固定化してい
ない反応物と接触させることにより、固体表面上にセレクチン−リガンド複合体
を生成することからなる。このセレクチン−リガンド複合体
を、複合体を形成していない反応物から分離し、そして複合体中に存在する固定
化していない反応物の量を測定することにより、生成した複合体の量を測定し得
る。例えば、推定リガンドは、マイクロタイターウェルに固相化され得、次いで
所望のセレクチンをウェルに添加し、そしてリガンドに結合したセレクチンの量
を測定し得る。
上記アッセイの変法は、遺伝子工学的に細胞を操作して、細胞表面に高レベル
のL-セレクチン、E-セレクチン、またはP-セレクチンを発現させ、そしてその細
胞を精製したセレクチンのかわりに用いることである。放射標識したCOS細胞が
、このタイプのアッセイに用いられており、そしてL-セレクチン、E-セレクチン
、またはP-セレクチンをコードするcDNAを用いて、トランスフェクトされ得る。
この細胞を、充分な時間、リガンドをコートしたマイクロタイターウェルに接着
させた後、非接着細胞を除去し、そして接着細胞の数を測定する。接着細胞の数
は、セレクチンに結合するリガンドの能力を反映する。
このタイプのアッセイの代表的用途は、E-セレクチンリガンドの同定である。
例えば、ELAM-1レセプターの完全なcDNAは、IL-1刺激したヒト臍静脈内皮から単
離した全RNAを用いて開始したPCRによって得られた。得られたcDNAを、CDM8プラ
スミド(Aruffo,A．およびSeed,B.、Proc. Natl. Acad. Sci. USA(1987)84:8573
を参照）中に挿入し、そして大腸菌内で増幅した。個別のコロニーから得たプラ
スミドDNAを単離し、そ
してこれを用いてCOS細胞をトランスフェクトした。ポジティブなプラスミドを
、それらがHL-60細胞接着を支持するCOS細胞を生成する能力により、選択した。
DNA塩基配列決定により、これらのクローンの１つがELAM-1をコードするものと
して、ポジティブに同定された（Bevilacqua,M.P.ら、Science、(1989)243:1160
; Polte,T.ら、Nucleic Acids Res.(1990)18:1083; Hession, C.ら、Proc. Natl . Acad.Sci. USA
(1990)87:1673)。これらの出版物を、ELAM-1およびそれをコー
ドする遺伝物質の開示に関し、本明細書中で参考として援用する。ELAM-1 cDNA
の完全なヌクレオチド配列およびELAM-1タンパク質の予測アミノ酸配列は、上記
引用したBevilacquaらの論文中に掲載されている。これらのDNAおよびアミノ酸
配列を、本明細書中で参考として援用する（本明細書中で参考として援用する、
1990年11月15日に公開された、公開PCT特許出願W090/13300も参照）。
ELAM-1をコードする完全長cDNAは、非翻訳の隣接配列に対して相補的なプライ
マーを用いて、IL-1刺激したヒト臍静脈内皮細胞から抽出した全RNA１μｇを用
いた、35サイクルのポリメラーゼ連鎖反応によって得られた。上記配列は以下の
通り：
生成した２Kbインサートをゲル精製し、ポリリンカーへのSalI部位の挿入により
改変された噛乳動物発現ベクターCDM8に
複製方向にクローンし、大腸菌(MC1061/p3)中で増殖した。プラスミドを個別の
コロニーから単離し、そしてこれを用いてCOS細胞をトランスフェクトした。推
定E-セレクチンをコードするプラスミドを、これらのトランスフェクトされたCO
S細胞が、トランスフェクト後72時間におけるHL-60細胞接着を支持する能力に基
づいて選択した。
E-セレクチンの発表された配列（ここでは２つの核酸置換を有する）のポジテ
ィブcDNAを、全ての実験で用いた。COS細胞を、3.5〜5.0×105個の細胞当たり、
このプラスミドDNA１μｇ、DEAE−デキストラン400μｇ/mlおよびクロロキン100
μＭを用いて、４時間トランスフェクトし、次いで、PBS中の１0％DMSOに短時間
曝した。細胞を、代謝的に、キャリアを含まない32PO4で一晩放射標識し、そし
てトランスフェクションから72時間後、細胞接着の研究で使用するために0.02％
のアジドおよび2mMのEDTAを追加したPBS中に回収した。
上記手法により産生された、E-セレクチンでトランスフェクトされたCOS細胞
を用いて、グルクロニル糖脂質リガンドについてアッセイし得る。同様に、COS
細胞は、L-セレクチンおよび／またはP-セレクチンをコードするcDNAを用いてト
ランスフェクトされ得る。L-セレクチン−IgGキメラ構造体の産生および特徴付
けは、以前にWatson,S.R.ら、(1990)J.Cell Biol.110:2221-2229に記載された。
このキメラは、天然での発現と同様、２個の補体結合ドメインを含む。Watson,
S.R.ら、(1991)J.Cell Biol.115:235-243を参照。P-セレクチン
キメラを、Walz,G.,ら、(1990)Science 250,1132-1135およびAruffo,A.ら、(199
1)Cell,67,35-44にそれぞれ記載の方法と同様の方法で構築した。これらのキメ
ラは、適切な宿主細胞、例えば、293細胞中で発現され、そして精製され得る。
プロテインＡアフィニティークロマトグラフィーが、好ましい精製方法である。
E-セレクチンおよびP-セレクチンは、キメラのサイズを標準化し、そしてこれら
の分泌を促進する短縮形補体結合ドメインを用いて構築され得る。上記アッセイ
の１つの変法は、細胞を遺伝子工学的に操作して、高レベルのL-セレクチン、E-
セレクチン、またはP-セレクチンを細胞表面に発現させ、そして精製したセレク
チンの代わりにこれらの細胞を用いることである。放射性標識したCOS細胞が、
このタイプのアッセイで用いられており、そしてL-セレクチン、E-セレクチン、
またはP-セレクチンをコードするcDNAを用いてトランスフェクトされ得る。これ
らの細胞を充分な時間、リガンドをコートしたマイクロタイターウェルに接着さ
せた後、非接着細胞を除去し、そして接着細胞の数を測定する。接着細胞の数は
、リガンドがセレクチンに結合する能力を反映する。
従って、式１のいかなる候補化合物も、上述のアッセイにおける陽性の結果に
より、ELAM-1レセプターと結合すると証明し得る。これらのアッセイにより、式
１の化合物からなる群の種々のメンバーの相対的な効果を決定するための簡単な
スクリーニングが提供される。式１の化合物の非治療的使用
以下にさらに記載するように、式１の化合物は、炎症の治療または予防におけ
る使用の他に、インビトロ、およびインビボの両方で、診断および予備の手法に
有用である。
式１の化合物は、固体基質に結合され得、そして生物学的試料からのセレクチ
ンレセプタータンパク質の精製に使用され得る。これは、アフィニティークロマ
トグラフィーカラムとして結合した基質を配置して、セレクチンレセプタータン
パク質が吸着しているが、不純物質は無いという条件下で、セレクチンレセプタ
ータンパク質を含有していると推定される試料を、アフィニティーカラムにかけ
ることによって、最も好都合に行われる。次いで、セレクチンレセプタータンパ
ク質は、例えば、式１の化合物の競合量を含むように、溶離液を調整することに
よって、あるいは、pHまたは塩のパラメーターを調整することによって、続いて
溶出される。アフィニティー精製のための技法はよく理解され、そして型にはま
った、最適化された実験により、この手法を行うために適した条件が作り出され
る。
式１の化合物はまた、セレクチンまたは関連の炭水化物結合レセプターリガン
ドの有無を決定するための検出試薬としても、有用である。こうした診断アッセ
イでの使用に対して、セレクチンレセプタータンパク質、またはそれに非常に関
連のあるレセプタータンパク質を含有すると予想される生物学
的試料は、レセプタータンパク質および式１の化合物間で複合体形成が起こる条
件下で、式１の化合物で処理されて、複合体の形成が検出される。広範な種々の
プロトコールは、免疫アッセイに用いられるプロトコールと類似の手順で有用で
あり得る。従って、形成された複合体の量が直接測定される直接アッセイは、有
用であり得；あるいは、標識したセレクチンレセプタータンパク質が、生物学的
試料と共に供給され、そして生物学的試料と競合する、競合アッセイが使用され
得る。いくつかの形態の上記アッセイは、標識した形での式１の化合物を供給す
るのに便利であるので、複合体は直接検出される；それに代わる手順では、複合
体は、サイズ分離、２次標識試薬、またはそれに代わる他の手段によって検出さ
れ得る。適切な標識は、当業者に既知であり、そして標識には、放射標識、蛍光
標識、酵素標識、色素生成標識またはこれらのアプローチを複合したものを包含
する。
式１の化合物はまた、競合的診断試薬としても、使用され得、生物学的液体中
の表面リガンドのようなセレクチンレセプター結合成分の量を検出する。このよ
うなアッセイを行うには、式１の化合物を上記のように標識し、生物学的試料と
混合し、そして適切なレセプタータンパク質と接触させる；生物学的試料中に存
在するセレクチンレセプターに対する、標識した式１の化合物の結合が減少する
ことが、次いで測定される。
式１の化合物はまた、インサイチュてのセレクチンレセプ
ターの場所を決定するためのインビボでのイメージ研究で使用され得る。このよ
うなアッセイで使用するために、式１の化合物は、インジウム111、テクネチウ
ム99、ヨウ素131などを包含するシンチグラフィー標識のような、インビボでの
イメージ技法によって検出され得る標識物と共に供給される。
式１の化合物などの化合物を標識、クロマトグラフィーの支持体、または関連
する手法において化合物を使用するのに有用な他の部分に結合するための技法は
、当該分野において周知である。
抗体もまた、適切な担体に対して上記化合物を結合させて、適当な含有物であ
るアジュバントを用いる標準免疫プロトコールで、哺乳類または他の脊椎動物患
者に、結合した物質を投与することよって、式１の化合物に対して調製され得る
。適切な免疫遺伝学的担体には、例えば、キーホールリンペットヘモシアニン(K
LH)、破傷風トキソイド、ウシ血清アルブミン(BSA)などの種々の血清アルブミン
、および、ロタウイルスのVP6プロテインなどの特定のウイルスタンパク質が挙
げられる。次いで、これらの結合した物質を、ウサギ、ラット、またはマウスな
どの患者に繰り返し注射して投与し、そして、抗体力価を標準免疫アッセイ技法
によってモニターした。得られた抗血清は、それ自体が使用され得、または、免
疫によって生成された抗体分泌細胞は、標準技法を用いることによって不滅化さ
れ、式１の化合物との免疫反応性を有するモノクローナル調製物源として使用さ
れ得る。得られた抗体は、
関連する式１の化合物の存在および／または量を決定するためのアッセイ系にお
いて有用である。このようなアッセイは、以下に記載のような治療方法において
、式１の化合物の循環レベルをモニターするのに有用である。抗炎症のプロトコールでの投与
本発明の化合物は、それが炎症を予防のために防ぐとき、または、炎症が起こ
った後にそれを緩和するのに必要である時、患者に投与される。本明細書中で使
用している「治療」は、炎症および／または炎症に伴う症候を予防または改善す
ることを意味する。上記化合物は、好ましくは、薬学的に受容可能な担体ととも
に投与され、その担体の性質は、例えば、通常は固体担体を用いる経口投与、お
よび、液体の塩溶液担体を用いる静脈内投与など、投与の態様で異なる。典型的
には、注射し得る組成物は、液体溶液または懸濁液として調製される；注射前に
液体媒体に溶解するのに、または懸濁するのに適した固体形態もまた調製し得る
。上記化合物はまた乳化され得、または活性成分をリポソーム媒体中にカプセル
化した。
適切な媒体は、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エ
タノールなど、およびそれらの組み合わせである。さらに、もし所望であれば、
上記媒体は、湿潤剤または乳化剤、あるいはpH緩衝剤などの補助物質を少量含み
得る。このような調剤形状の実際的な調製方法は、当業者には
既知、または明白である。例えば、Reminton's Pharmaceutical Sciences, Mack
Publishing Company, Easton, PA, 17版、1985年を参照のこと。処方物は、例
えば、薬剤級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウ
ム、サッカリンセルロースナトリウム、炭酸マグネシウムなどを含有する種々の
賦形剤を使用し得る。経口用組成物は、溶液、懸濁液、錠剤、丸剤、カプセル剤
、徐放性処方物、または、散剤の形をとり得る。DMSOのような浸透増強剤を含む
経皮用処方物として本願リガンド分子を、患者に直接投与することは、特に有用
である。他の局所用処方物は、皮膚の炎症を治療するために投与され得る。さら
に、経粘膜投与は、任意に他の洗浄剤分子と組合せて、胆汁酸塩またはフシジン
酸誘導体などの浸透剤を使用することで効果的にし得る。これらの処方物は、例
えば、坐剤、または鼻用噴霧剤の調製に有用である。坐剤として、媒体組成物は
、従来の結合剤および担体（ポリアルキレングリコールまたはトリグリセリドな
ど）を包含する。このような坐剤は、約0.5％から約10％（w/w）、好ましくは約
１％から約２％の範囲の活性成分を含有する混合物から形成され得る。
通常、鼻腔内用の処方物は、鼻の粘膜に対する刺激を引き起こさず、または繊
毛の機能をほとんど妨害しない媒体を含有する。水、生理食塩水溶液、または他
の既知の物質など希釈剤は、本願発明に用いられ得る。鼻用の処方物もまた、ク
ロロブタノールおよび塩化ベンザルコニウムのような保存剤
を含有するが、これらに限定されるものではない。界面活性剤は、鼻の粘膜によ
って対象のタンパク質の吸収を高めるために存在し得る。
典型的には、本発明の組成物は、１％未満から約95％までの、好ましくは約10
％から約50％までの活性成分を含む。好ましくは、約10mgと50mgとの間で子供に
対して投与され、そして約50mgと1000mgとの間で成人に対して投与される。投与
の回数は、患者の応答性に基づいて与えられる管理によって決定される。他の効
果的な用量は、通常の試験で確立する用量反応曲線から、当業者によって容易に
決定され得る。
投与すべき用量を決定する上で、特定のタイプの全てのセレクチンレセプター
を完全に遮断することは望ましいものであり得ないことに注意すべきである。普
通の治癒プロセスを進めるために、少なくともいくつかの白血球または好中球が
、あらゆる創傷、感染、または病状が生じている患部組織へ運び込まれなければ
ならない。遮断剤として投与されるセレクチンリガンド量は、治療されている疾
患の型のような種々の要素を考慮しながら、患者個々の必要性に基づいて、注意
深く調節されなければならない。
本発明の化合物は、広い範囲の疾患、例えば、慢性関節リウマチおよび多発性
硬化症などの自己免疫疾患の治療に有用である。本発明の組成物は、組織の損傷
、腫脹、炎症、および／または疼痛を引き起こす程度にまで組織内に白血球蓄積
を引き起こした身体に対して免疫系が向けられている、いか
なる病状にも適応し得る。
本発明の処方物はまた、心臓発作に起因する組織の損傷の望ましくない後遺症
を、予防するためにも投与され得る。心臓発作が起こり、抗凝血薬または血栓崩
壊薬の（例えば、tPA)の適用によってなど、患者が回復した時、凝血塊が形成さ
れた内皮内層は、損傷を受けることがしばしばある。抗血栓薬が凝血塊を除去し
たとき、凝血塊の下で損傷を受けた組織および内皮内層中の酸素が欠如していた
他の損傷を受けた組織は、活性化される。次いで、活性化された内皮細胞は、細
胞が損傷を受けてから数時間以内にセレクチンレセプター、例えば、ELAM-1レセ
プターを合成する。このレセプターは血管中にまで達し、白血球表面の糖脂質リ
ガンド分子に付着する。大量の白血球が素早く捕獲され、そして活性化された内
皮細胞の周囲組織中へもたらされて、炎症、腫脹、および壊死が起こり、これに
よって患者の回復の見込みが減少する。
心臓発作が原因で傷害を受けた患者を治療することに加えて、身体のある部分
が重傷を負った後に、通常生じる炎症および腫脹の量を軽減するために、現実に
物理的な外傷を受けた患者を、本発明の処方物を用いて治療し得た。本発明の処
方物を用いて治療し得るその他の条件は、種々の型の関節炎、および成人呼吸障
害症候群を包含する。本開示を読んだ後、当業者は、本発明の処方物を投与する
ことによって、治療および／または緩和され得る他の疾患の状態および／または
症状を理解する。式２の化合物の適用
式２の化合物は、ラクトシル単位を含む化合物を調製する際の中間体である。
顕著に、式２の化合物は、本明細書中で使用が上述されている式１の化合物の調
製に有用である。式１の化合物に加えて、ラクトース残基を含む他の化合物もま
た調製され得、それは、例えば
4-O-(3-O-カルボニメチル-β-D-ガラクトピラノシル）-3-O-[2R,S)-グリセリ
ル]-D-グルコピラノース；
4-O-(3-O-カルボニメチル-β-D-ガラクトピラノシル）-3-O-[2R,S)-2,3-ジデ
オキシ-2,3-ジフルオロプロピル]-D-グルコピラノース；
4-O-[3-O-{(1R,S)-1-（カルボキシ）エチル}-β-D-ガラクトピラノシル]-3-O-[
(2R,S)-グリコシル]-D-グルコピラノース；
4-O-[3-O-{(1R,S)-1-（カルボキシ）エチル}-β-D-ガラクトピラノシル]-3-O-
（α-L-フコピラノシル）-D-グルコピラノース；
4-O-[3-O-（α-Neu5Ac)-β-D-ガラクトピラノシル]-3-O-［(2R,S)-グリセリル
］-D-グルコピラノース；
4-O-［3-O-（α-Neu5Ac）-β-D-ガラクトピラノシル］-3-O-［(2R,S)-2,3-ジ
デオキシ-2,3-ジフルオロープロピル］-D-グルコピラノースである。レセプター結合リガンドの多価性形態
レセプターに対する本発明のリガンドの親和性は、好ましくは、担体部分によ
って提供される土台を用いて、リガンドの非常に近い多数のコピーを提供するこ
とにより強化され得る。この部分間の最適な間隔を有するこのような多価性を与
えることにより、レセプターに対する結合が劇的に改善することが示された。例
えば、Lee,R.ら、Biochem(1984) 23:4255には、ラクトースが多価性物として供
給されるとき、ラクトースの多価性形態を与えることにより、標識したASORが哺
乳類の肝細胞になおさら効果的に結合するのを阻害することを示した；IC50は、
１価のラクトースについての500μMから、２価のラクトシル化合物については９
まで、３価のラクトシル化合物については４まで、理想ではまたは３つのラクト
ース部分間の最適な間隔では0.007μMまで減少した。
多価性および間隔は、適切な担体部分を選択することによって制御し得る。こ
のような部分は、本発明のリガンドと会合した官能基と反応し得る官能基の多価
性を有する、分子支持体を包含する。特に好ましいアプローチは、本発明のラク
トース誘導リガンドが、還元的アミノ化によって担体のアミノ基にカップリング
することを包含する。還元的アミノ化は、最初にシッフ塩基を形成し、次いで、
水素化物還元剤のような還元試薬で複合体を処理することにより、遊離アミノ基
にアルデヒド部分を結合させる、特に好適な方法である。典型的には、担体を有
するアミノ基は、約pH9で炭水化物部分と
混合し、そしてシッフ塩基を形成し得る；溶媒は典型的には蒸発させ、そして高
いpHで、還元試薬を添加して、反応を完了させる。
本発明のリガンドの多価性形態を得るための特に好適な担体部分は、タンパク
質およびペプチドを包含し、特に、ε-アミノ基を有するリジン残基を含む担体
部分は、結合に利用できる。また少なくとも１つのチロシン残基を有するペプチ
ドまたはタンパク質は有用である。なぜなら、これは、例えば放射性ヨウ素で標
識するのに好適な部位を提供するからである。３価結合を得るための特に好適な
担体は、ペプチドLys-Tyr-Lysである。このペプチド上での本発明のリガンドと
遊離アミノ基との完全な反応は、３価部分をもたらす。従って、次式で示される
本発明の化合物は、X、Y、ならびに、R1およびR3が、上記で定義したように、本
発明の多価性化合物を例示する。
確かに、BSAまたはHSAなどのタンパク質、例えばペンタペプチド、デカペプチド
、ペンタデカペプチドなどを包含する、ペプチドの多価性を包含する、種々の担
体が用いられ得る。好ましくは、ペプチドまたはタンパク質は、それらの側鎖に
遊離アミノ基を有するアミノ酸残基の所望の数を含む；しかし、スルフヒドリル
基またはヒドロキシル基のような他の官能基もまた、安定な結合を得るために用
いられ得る。例えば、本発明の炭水化物リガンドは、アミドを形成する遊離アミ
ノ
基またはエステルを形成するヒドロキシル基のどちらかで誘導体化され得る還元
末端で、カルボキシ基を含有するように酸化され得る。式１の化合物の調製
式１の本発明の化合物は、式２の中間体を用いて合成され得る。１つの実施態
様では、式２の中間体は、標準的な手順を用いてD-ラクトースから直接調製され
得る。この変換では、D-ラクトースは、Hudson,C.，およびKuns,A.,J Am Chem S oc
(1925)47:2052に記載の方法で、95％を上回る収率で、結晶性形でオクタアセ
テートに変換される。オクタアセテートは、順次、Hudson,C.の方法（上記）、
または、Fischer, E.およびFischer, H.,Ber(1910)43:2521の方法によって、90
％より多い収率で、対応する臭化ラクトシルに変換され、これもまた結晶性化合
物である。保護化された臭化ラクトシルは、Jansson, K.,ら,J Org Chem(1988)5 3
:5629の方法によって、60％を上回る収率で対応するアシル化トリメチルシリル
エチルラクトースに変換され、これは定量的収率で脱アシル化によって脱保護化
され得、2-（トリメチルシリル）エチルラクトシド、すなわち、2-（トリメチル
シリル）エチルβ-D-ガラクトピラノシル-β-D-グルコピラノシドを得る。二糖
の１位の他の保護基もまた、使用され得る。
式２の化合物のこの前駆体は、以下の式であり：
ここでR7は保護基、好ましくはSEまたはBnであって、ここで、SEは-CH2CH2SiM
e3を表し、そしてBnはベンジルを表す。
反応スキーム１は、この中間体からの式２の化合物の一つの実施態様の形成を
概略し、ここでBzはベンゾイルを表す。
反応スキームの工程１において、保護化されたラクトース、例えばトリメチル
シリルエチル誘導体は、過剰の2,2-ジメトキシプロパンで処理し、そして乾燥カ
ンファースルホン酸を反応混合液に添加し、それを約室温で２〜３日間撹拌する
。トリエチルアミンのような適切な塩基を添加し、そして10〜20分間撹拌し続け
る；次いで、混合物を、乾燥するまで濃縮し、そして塩基を除去する。ベンジル
ラクトシドの場合は、用いる方法は、D.Beith-Halahmiら、Carbohydr.Res., (19
67)5:25の方法であり、この方法では、ベンジルラクトシドを、4-トルエンスル
ホン酸を含有する大過剰の乾燥アセトン中で３〜４時間煮る。この反応混合物を
標準的な手法を用いて処理し、生成物６を回収する。この中間体は、次いで適切
な条件下で、例えば、塩化ベンゾイルを用いて、ベンゾイル化し、反応スキーム
に７として示す中間体化合物を得る。
中間体７は、次いでグルコシド残基の３位の遊離ヒドロキシル基でさらに誘導
体化され得るか、またはこの位置が保護化され得、そして化合物はガラクトシル
残基の３位および４位で脱保護化され、そして３位でさらに誘導体化される。ガ
ラクトシル残基の４位は相対的に非反応性である。この鍵となる中間体７の利用
に対する典型的なスキームを、反応スキーム2Aに示す。（このスキームにおいて
、Bzはベンゾイル（PhCO-）であり、そしてBnはベンジル（PhCH2-）である）。
反応スキーム2Aに示すように、中間体７は、適切な条件下で保護化されたメチ
ル１-チオ-L-フコシドで処理することにより、２つの工程で中間体10に変換され
る。この反応は、臭化第二銅、臭化テトラブチルアンモニウム、およびモレキュ
ラーシーブの存在下で、非水溶非プロトン性溶媒中で行う。（S.Satoら、Carboh ydr. Res.
,(1986)155:C6）。次いで、10として示される、得られた化合物を、文
献の手順に従って、中間体を単離することなく、3,4-オルトエステルを経ること
によって、D-ガラクトピラノシル残基の４位を選択的にアセチル化し（R.U.Lemi
euxおよびH.Drigwez、 J.Amer.Chem.Soc.，(1975)97:4069）、中間体11を与え
る。中間体11の硫酸化により、中間体12を生成し、これを脱アセチル化し、そし
て水素添加して、最終生成物13、セレクチンリガンドを生成する。
反応スキーム2Bに示した、本発明の他の実施態様では、中間体11をリン酸化し
て中間体14を生成し得、これは、脱アセチル化および水素添加により最終生成物15
を生成する。この化合物は、セレクチンリガンドとして作用すると期待される
。
本発明の化合物および好ましい実施態様
本明細書中に使用しているように、アルキル（1-6C）は、1-6Cを含む飽和直鎖
または飽和分枝鎖炭化水素残基、あるいは飽和環状炭化水素残基を示し；低級ア
ルキルは、同様に定義されるが1-4Cしか含まない。
本明細書中に使用しているように、アルキルアリールは式(CH2)m-Arであり、
ここでｍは1-10、そしてArは単環状または双環状芳香族残基あり、１種またはそ
れ以上のヘテロ原子を任意に含む。Arの典型的な実施態様は、フェニル、ナフチ
ル、キノリル、ピリジル、ピリミジル、ベンゾチアゾイル、ベンズイミダゾイル
などを包含する。
R7は、糖残基に適切な保護基である。典型的な保護基は、ベンジル、ベンゾイ
ル、トリメチルシリルエチル（SE）のような種々のシリルアルキル基などを包含
する。
本発明の式１の化合物の代表例は、R3がS04-2、P04-2、または他の同様の荷電
した部分である化合物である。
本発明の式１の化合物の他の代表例は、Xが以下のものを包含する：
6-メチル-3,4,5-トリヒドロキシピラン-2-イル、
6-アセチル-3,4,5-トリヒドロキシピラン-2-イル、
6-プロピルアミド-3,4,5-トリヒドロキシピラン-2-イル、
6-プロピルアミド-2,3,4-トリメトキシピラン-2-イル、
6-エチル-2,3-ジヒドロキシ-4-メトキシピラン-2-イル、
6-N-エチルアミノ-2-ヒドロキシ-3,4-エトキシピラン-2-イ
ル、
3,4,5-トリ-n-プロピロキシピラン-2-イル、
3,4,5-トリヒドロキシピラン-2-イル、
2,3,4-トリメトキシフラン-2-イル、
2,3-ジヒドロキシ-4-メトキシフラン-2-イル、
2-ヒドロキシ-3,4-エトキシフラン-2-イル、
3,4,5-トリ-n-プロピロキシフラン-2-イル、および
3,4,5-トリヒドロキシフラン-2-イル；
または、ここでR5およびR6の両方がHであり、そしてX中の全てのR1がHまたは
メチルであり；
または、ここで、Xが2,3,4-トリヒドロキシベンゾイルである。
従って、特に式１の好ましい化合物は、全てのR1がHまたはメチルであり、Yが
H、OH、OCH3、またはOAcであり；および／または、Xが-CH2(CHOH)3H、 3,4,5-ト
リヒドロキシピラン-2-イル、3,4,5-トリヒドロキシ-6-メチルピラン-2-イル、3
,4,5-トリメトキシピラン-2-イル、3,4,5-トリメトキシ-6-メチルピラン-2-イル
、3,4,5-トリヒドロキシフラン-2-イル、3,4,5,-トリメトキシフラン-2-イル、2
,3,4-トリヒドロキシベンゾイル、または2,3,4-トリヒドロキシナフトイルであ
り；そして、R3がSO4-2、PO4-2、または他の同様の荷電した部分である。
式１の最も好ましい化合物は、全てのR1がHであり、R2がHであり、YがH、OR1
または低級アルキルである。
中間体を表す式２の化合物については、好ましい形態は、R6によって表される
保護基が、ベンジルまたはベンゾイルであり、R7によって表される保護基が、ト
リメチルシリルエチルまたはベンジルであり、そしてここでY1が、H、OR6であり
、ここでR6が上述のようにベンジルまたはベンゾイルであり、そして、ここでの
遊離ヒドロキシ基が、グルコシル部分の３位、またはガラクトシル部分の３位お
よび４位にある。ガラクトシル部分の３位および４位に対する他の好ましい保護
基は、イソプロピリデンである。
次の実施例は、本発明の例示を意図しており、本発明を限定することを意図し
ていない。実施例１ 2-（トリメチルシリル）エチル2,6-ジ-O-ベンゾイル-4-O-(2,6-ジ-O-ベンゾイル -3,4-O-イソプロピリデン−β-D-ガラトピラノシル）-β-グルコピラノシド(7a) の調製
2-（トリメチルシリル）エチル4-O-(3,4-O-イソプロピリデン-β-D-ガラクト
ピラノシル）-β-D-グルコピラノシド（K.Janssonら、J.Org.Chem.(1988)53:562
9-5647;6.6g、13.75mmol）を乾燥ピリジン(120mL)に溶解した。この混合物を-45
℃まで冷却し、そして塩化ベンゾイル（9.07mL、77.4mMo1.）を滴下しながら撹
拌し、そして-45℃で４時間撹拌し続けた。
T.I.c（8.5:1.5トルエン−酢酸エチル）により、出発アセタールよりも移動が
速い主生成物の存在が明らかになった。少
量の、さらに移動が速い生成物（ペンタベンゾエート）も、t.I.c.により明らか
になった。この混合物を、氷水に注ぎ、そしてジクロロメタンを用いて抽出した
。このジクロロメタン溶液を、引き続いて、水、NaHCO3水溶液、および水で洗浄
し、乾燥（Na2SO4）し、そして濃縮した。濃縮物を、9:1トルエン−酢酸エチル
を溶出液とするシリカゲルカラムにかけて、そして固体を得、これをメタノール
から結晶化して7a（5.2g、42.3％）を得、［α］D＋17.5（c,1.1、クロロホルム
）であ
実施例２ ベンジル2,6-ジ-O-ベンゾイル-4-O-（2,6-ジ-O-ベンゾイル-3,4-O-イソプロピリ デン-β-D-ガラクトピラノシル）-β-D
-グルコピラノシド（7b）の調製
撹拌しそして冷却（-45℃）した、ベンジル4-O-(3,4-O-イ ソプロピリデン-
β-D-ガラクトピラノシル）-β-D-グルコピラノシド（5g、10.6mmol;D.Beith-Ha
lahmiら、Carbohydr.Res.(1967)5:25）の乾燥ピリジン(120mL)溶液を、塩化ベン
ゾイル（6mL、51.8mmol）を滴下して処理し、そして-45℃で４時間撹拌し続けた
。T.l.c(8.5:1.5トルエン−酢酸エチル）により、出発アセタールよりも移動の
速い主生成物の存在が明らかに
なった。少量の、さらに移動の速い生成物（ペンタベンゾエート）も、t.l.c.に
より明らかになった。この混合物を、氷水に注ぎ、そしてジクロロメタンを用い
て抽出した。このジクロロメタン溶液を、引き続いて、水、NaHCO3水溶液、およ
び水で洗浄し、乾燥（Na2SO4）し、そして濃縮した。次いで、濃縮物を、シリカ
ゲルカラムにかけ、9:1トルエン−酢酸エチルを用いて溶出した。濃縮で、主生
成物に対応する画分は、固体残渣を与え、これを熱メタノールから結晶化して7b
(5.53g、59％）を得た； m.p.159〜161℃；［α］D-4.2°（c,1.3、クロロホル
ム）。
実施例３ ベンジル2,6-ジ-O-ベンゾイル-3-O-（2,3,4-トリ-O-ベンジル-α-L-フコピラノ シル）-4-O-(2,6-ジ-O-ベンゾイル-3,4-
O-イソプロピリデン-β-D-ガラクトピラ ノシル）-β-D-グルコピラノシド（9b）の調製
湿気から保護した5:1ジクロロエタン-N,N-ジメチルホルムアミド（120mL）中
の、化合物7b（4g、4.5mmoI）、メチル2,3,4-トリ-O-ベンジル-1-チオ-α-L-フコ
ピラノシド8(3.6g、7.75mmol）、および粉末状4Aモレキュラーシーブ（10g）の混
合物を室温で２時間撹拌した。臭化第二銅（2g、9mmo1）および臭化テトラブチル
アンモニウム（0.29g、0.9mmol）を添加し、そして、室温で35時間撹拌し続けた
。さらにドナー８（1.2g、2.6mmol、5:1ジクロロエタン-N,N-ジメチルホルムアミ
ド14.4mL中）、臭化第二銅（0.67g、0.3mmol）、およびモレキュラーシーブ4A(2
g)を添加し、そして室温で16時間撹拌し続けた。次いで、T.l.c(9:1 トルエン
−酢酸エチル）により、7bよりも移動の速い主生成物の存在が示された；痕跡量
の未変化の7bも、t.l.c.により明らかになった。この混合物を濾過し（Celite床
）、そして固体をクロロホルムで徹底的に洗浄した。濾液および洗浄液を合わせ
、そしてNaHCO3水溶液および水を用いて洗浄し、乾燥し、そして濃縮した。残渣
をシリカゲルカラムにかけ、そして9.5:0.5 トルエン−酢酸エチルを用いて溶
出した。主生成物に対応する画分の濃縮により固体が得られ、これをエーテルか
ら結晶化して9b(3.68g、76％）を得た。これは、反応した7bに基づいていた。化
合物9bは、m.p.180〜181℃；［α］ D -８゜（c,1.1、クロロホルム）を有して
いた。
実施例４ 2-（トリメチルシリル）エチル2,6-ジ-O-ベンゾイル-3-O-（2,3,4-トリ-O-ベン ジル-α-L-フコピラノシル）-4-O-(2,6-ジ-O-ベンゾイル-3,4-O-イソプロピリデ ン-β-D-ガラクトピラノシル）-β-D-グルコピラノシド（9a）の調製
湿気から保護された5:1ジクロロエタン-N,N-ジメチルホルムアミド（135mL）
中の、化合物7a(5.2g、5.78mmol）、化合物８(4.68g、10.17mmol）、および粉末
状4Aモレキュラーシーブ(6g)の混合物を室温で２時間撹拌した。臭化第二銅(2.6
g、11.7mmol）および臭化テトラブチルアンモニウム（3.77g、11.7mmol）を添加
し、そして室温で合計48時間撹拌し続け、24時間後に追加量の８（2.34g、5.09m
mo1、5:1ジクロロエタン−N,N-ジメチルホルムアミド60mL中）、臭化第二銅（1.
3g、5.85mmol）、臭化テトラブチルアンモニウム（1.9g、5.85mmol）、および4A
モレキュラーシーブ（3g）を添加した。T.l.c（9:1 トルエン−酢酸エチル）に
より、7aよりも移動の速い主生成物の存在が
明らかになり、いくらかの未反応の7aもt.1.c.により明らかになった。7b（9bを
与えた）について記載したように処理した後、カラムクロマトグラフィーにかけ
、非結晶性固体として化合物9a（6.7g、88％）を得た；陽イオンLSIMS：1442.6
（M+Na）+、1340.8（M-NaS03）+、陰イオンLSIMS：1396.2（M-Na）-。実施例５ ベンジル2,6-ジ-0-ベンゾイル-3-0-（2,3,4-トリ-0-ベンジル-α-L-フコピラノ シル）-4-0-（2,6-ジ-0-ベンゾイル-β-D-ガラクトピラノシル）-β-D-グルコピ ラノシド（10b）の調製
70％酢酸水溶液（600mL）中の化合物９ｂ（1.0g）を、85〜90℃で撹拌し、t.l
.c.（4:1トルエン−酢酸エチル）により反応の進行をモニターした。2.5時間後
、出発アセタール9bのほとんどは、移動のより遅い生成物に変換された。T.l.c.
により、α-L-フコシル結合の幾分かの開裂も示された。これは、２種の副生成
物の存在によって証拠づけられ、これらのうち一方は、生成物（トリベンジルフ
コース）よりも移動が速く、そして他方は、硝酸化がより遅い（二糖生成物）。
酢酸を減圧下で（〜40℃）蒸発させ、最終痕跡量を、幾分か添加したトルエンと
の共蒸発により除去した。このようにして得た残渣を、溶離液として9:1トルエ
ン−酢酸エチルを用いて、シリカゲルカラムで精製し、非結晶性固体として10b
（0.6g、61.8％）を得た。
実施例６ 2-（トリメチルシリル）エチル2,6-ジ-0-ベンゾイル-3-0-（2,3,4-トリ-0-ベン ジル-α-L-フコピラノシル）-4-0-（2,6-ジ-0-ベンゾイル-β-D-ガラクトピラノ シル）-β-D-グルコピラノシド（10a）の調製
化合物9a（3g、2.3mmo1）を70％酢酸水溶液（300mL）中に取り、そして混合物
を85〜90（バス）で撹拌しながら２時間加熱した。T.l.c.（4:1トルエン−酢酸
エチル）により、10bに相当するクロマトグラフィー移動度を有する主生成物の
存在が示された。9b（10bを与えた）について記載したように処理し、次いでカ
ラムクロマトグラフィーにかけることにより、非結晶性固体として三糖ジオール
10a（2.3g、79％）を得た；［α］D-20.6
実施例７ ベンジル2,6-ジ-0-ベンゾイル-4-0-（4-0-アセチル-2,6-ジ-0-ベンゾイル-β-D- ガラクトピラノシル）-3-0-（2,3,4-トリ-0-ベンジル-α-L-フコピラノシル）- β-D-ルコピラノシド（llb）の調製
化合物10b（0.56g）を、4-トルエンスルホン酸（0.15g）を含有する、ベンゼ
ン（30mL）とトリエチルオルト酢酸（30mL）との混合物に溶解し、そしてこの混
合物を室温で１時間撹拌した。酸を少量のトリエチルアミンで中和し、そしてこ
の混合物を蒸発乾固した。次いで、これを80％酢酸水溶液（50mL）に取り、そし
て室温で40分間撹拌した。T.l.c.（4:1トルエン−酢酸エチル）により、ジオー
ル10bよりも移動の速い主生成物の存在が示された。酢酸を減圧下で除去し、そ
して少量のトルエンを添加し、そして残渣から蒸発して、非結晶性固体としてll
b（0.56g、96.6％）を得、［α］D-14.3°（c,1.1、クロロホルム）であった。
実施例８ 2-（トリメチルシリル）エチル2,6-ジ-0-ベンゾイル-4-0-（4-0-アセチル-2,6- ジ-0-ベンゾイル-β-D-ガラクトピラノシル）-3-0-（2,3,4-トリ-0-ベンジル-α -L-フコピラノシル）--D-ガラクトピラノシド（lla）の調製
化合物10a（1.87g）の、4-トルエンスルホン酸（0.25g）を含有するベンゼン
（50mL）とトリエチルオルト酢酸（50mL）との混合物溶液を、室温で１時間撹拌
した。次いで、酸を数滴のトリエチルアミンで中和し、そしてこの混合物を蒸発
乾固した。残渣を80％酢酸水溶液（100mL）と混合し、そしてこの混合物を室温
で40分間撹拌した。10b（llbを与えた）について記載したように処理して、標記
の化合物lla（1.86g、89％）を得た；白色の非結晶性固体；［α］D-2.7゜（c,l
.l、クロロホルム）。
実施例９ ベンジル2,6-ジ-0-ベンゾイル-3-0-（2,3,4-トリ-0-ベンジル-α-L-フコピラノ シル）-4-0-（ソジウム4-0-アセチル-2,6-ジ-0-ベンゾイル-β-D-ガラクトピラ ノシル3-スルフェート） -β-D-グルコピラノシド（12b）の調製
乾燥ピリジン（50mL）中の、化合物llb（0.6g、0.46mmo1）および三酸化イオ
ウ−ピリジン複合体（0.6g、6.3mmol）の混合物を、55〜60℃（バス）で２時間
撹拌し、次いで室温で16時間撹拌した。T.l.c.（6:1クロロホルム−メタノール
）は、llbの消失および移動のより遅い単一の生成物の存在を示した。メタノー
ル（５mL）を添加し、そしてこの混合物を15分間撹拌し（過剰の試薬を分解し）
た。次いで、これを濃縮し、そして10:1、次いで6:1のクロロホルム−メタノー
ルを用いた溶離により、シリカゲルカラムで精製した。濃縮で、生成物に対応す
る画分は、固休残渣を与え、これを1:1クロロホルム−メタノール（30mL）に溶
解し、そしてAmberlite IR 120（Na+）カチオン交換樹脂を用いて処理し、そし
て混合物を室温で１時間撹拌した。次いでこれを濾過し、そして蒸発乾固して、
非結晶性固体として12b（0.58G、89％）を与えた：［α］D-5.1°（c,1.8、1:1
クロロホルム−メタノール）：陽イオンLSIMS：1433（M+Na）+、1411.1（M+H）+
、陰イオンLSIMS：1563.9（M+mNBA）-、1386.7（M-Na）-。実施例１０ 2-（トリメチルシリル）エチル2,6-ジ-0-ベンゾイル-3-0-（2,3,4-トリ-0-ベン ジル-α-L-フコピラノシル）-4-0-（ソジウム4-0-アセチル-2,6-ジ-0-ベンゾイ ル-β-D-ガラクトピラノシル 3-スルフェート）-β-D-グルコピラノシド（12a） の調製
乾燥ピリジン（25mL）中の、化合物lla（0.45g、0.39mmol）および三酸化イオ
ウ−ピリジン複合体（0.45g、4.7mmol）の混合物を、55〜60℃で２時間撹拌し、
次いで、室温で１晩撹拌した。上記と同様の方法で処理および精製した後、非結
晶性固体として化合物12a（0.46g、95.8％）を得た；［α］D+2.2°（c,1.5、1:
1クロロホルム−メタノール）；陽イオンLSIMS：１442.6（M+Na）+、1341.1（M+
NaS03）-、陰イオンLSIMS：1395.5（M-Na）-。実施例11 0-α-L-フコピラノシル-（1→3）-0-［ソジウム β-D-ガラクトピラノシル3-ス ルフェート-（1→4）］-D-グルコピラノース（13b）の調製
触媒量のナトリウムメトキシドを含有するメタノール（50mL）中の化合物12b
（0.58g）を、45〜50で１晩撹拌した。T.l.c.（13:6:1クロロホルム−メタノー
ル−水）は、移動のより遅い単一の生成物の存在を示した。室温まで冷却した後
、この混合物が中性になるまで（pH試験紙）、Amberlite IR 120（H+）カチオン
交換樹脂を添加した。次いで、この混合物を、Amberlite IR 120（Na+）カチオ
ン交換樹脂を含むフラスコ中に直接濾過し、そして混合物を45分間撹拌した。次
いで、これを濃縮し、そしてヘキサン−エーテル混合物で繰り返し抽出して安息
香酸メチルを除去した。そのようにして得られた、部分的に保護された中間体（
0.38g）は、充分に純粋てあり、次工程
で直接用いた；陰イオンLSIMS：928.1（M-Na）-。一部分（0.35g）を、さらに精
製せずに、パラジウム炭素10％（0.35g）を含有する、80％メタノール水溶液（3
0mL）に加えた。この混合物を、室温で１晩、H2のわずかな過圧下で撹拌した。
このときt.1.c.（5:4:1または13:6:1クロロホルム−メタノール−水）は、移動
のより遅い生成物の存在を、痕跡量の、移動のより速い数種の夾雑物（恐らく、
不完全な加水分解による）と共に示した。この混合物を、直接、Amberlite IR 1
20（Na+）カチオン交換樹脂上に濾過し（Celite床）、そして固体をメタノール
水溶液で徹底的に洗浄した。樹脂と共に１時間撹拌した後、混合物を濾過し、そ
して濃縮して小容量にし、これをシリカゲルカラムにかけ、そして5:4:1クロロ
ホルム−メタノール−水を用いて溶出した。生成物に対応する画分をプールし、
濃縮して小容量にし、そしてAmberlite IR 120（Na+）カチオン交換樹脂を用い
て処理した。樹脂を濾去し、そして水で洗浄し、そして濾液および洗浄液を合わ
せて、再濾過し（0.2μM酢酸セルロースシリンジフィルター）、そして凍結乾燥
して13bを得た（183mg、84.3％；［α］D-20.5°（c,0.6、水）。
実施例１２ 2-（トリメチルシリル）エチル0-α-L-フコピラノシルー（1→3）-0-［ソジウム β-D-ガラクトピラノシル3-スルフェート-（1→4）］-β-D-グルコピラノシド （13a）の調製
化合物12a（0.45g）を、正確に10について記載した通りにして、メタノール性
ナトリウムメトキシド（50ml）中て0-脱アセチル化し、対応する、部分的にベン
ジル化された中間体（0.29g）を得た。この中間体は、陽イオンLSIMS：983.9（M
+Na）+、882.1（M-NaS03）、陰イオンLSIMS：938.0（M-Na）-を示した。この化
合物（0.24g）を、さらに精製せずに、80％メタノール水溶液（30mL）中、パラ
ジウム炭素10％（0.24g）の存在下で、触媒的加水分解に供し、次いで上記と類
似の方法で処理して、白色の綿毛状物質として化合物13a（125mg、 72.7％）を
与えた；
実施例１３ 多価リガンド、N,6N,6N'トリス（20）Lys-Tyr-Lysの調製
実施例12で調製した化合物13aまたは13bを、ペプチドLys-Tyr-Lysに誘導体化
して、ペプチドの２つのε-アミノリジン基およびα-アミノＮ末端において誘導
体化された、３価の複合体を得る。この３価の化合物を得るために、100mMの炭
酸ナトリウム（pH9）中の2mMのペプチドLys-Tyr-Lys 50μｌ（100
nmol）を、200mMの20 5μｌ（1mmol）を含む小さいエッペンドルフチューブに
入れ、そして試料を約30分間スピードバック（SpeedVac）中て蒸発乾固する。
蒸発乾固後、100mMの炭酸ナトリウム（pH9）中の800mMのNaCN・BH3 50μｌ（再
結晶化、40μmol）を添加し、そして混合物を55℃で48時間インキュベートする
。インキュベートして得られた混合物を、GPCペプチドHPLCサイジングカラムに
かけて、画分を収集し、そしてBCAタンパク質アッセイによってタンパク質含量
をアッセイする。タンパク質含有画分をプールし、凍結乾燥し、そして質量分析
を行う。
結果は、化合物13aまたは13bを１、２、または３個含む、誘導体化されたペプ
チドの生成を示す。
この３価誘導体は、Lee,R.ら、Biochem（1984） 23:4255に記載のように行っ
たアッセイにおいて、肝細胞に対するラクトースの結合を阻害することに、特に
効果的である。実施例14 ラクトース誘導体のセレクチンリガンド特性
化合物13aまたは13bを、ＥおよびＬセレクチンに結合する能力について試験し
た。用いたELISAアッセイは、ウェル当たり25ピコモルの2,3 sLex糖脂質を、マ
イクロタイターウェル上にエバポレートし、次いで過剰分を水で洗浄することか
らなる。ウェルを、５％のＢＳＡを用いて室温で１時間ブロックし、次いで１mM
のCaを含有するPBSで洗浄する。プレートがブロッ
クされている間に、１％BSA-PBS（１mM Ca）て1:1500に希釈した、ビオチン標識
ヤギＦ（ab'）2IgG（Fc特異性）およびストレプトアビジン−アルカリ性ホスフ
ァターゼを、200ng/mLでE-またはL-セレクチン-IgGキメラ（L9I-10）と結合させ
、37℃で15分間インキュベートして複合体を形成させる。これにより、可溶性「
多価」レセプターが与えられる。化合物13aおよび13bを、1.5〜5.0mMの範囲の最
終濃度で可溶性レセプターに添加し、そして37℃で45分間反応させた。次いで、
この溶液を、ブロックした後洗浄しておいたマイクロタイターウェルに入れ、そ
してプレートを37℃で45分間インキュベートして、可溶性レセプターを既知の天
然リガンド、2,3 sLex糖脂質に結合させた。陽性コントロールは、マイクロタイ
ターウェルにエバポレートされたリガンドのみと反応した、可溶性「多価性」レ
セプターにより生成されたシグナルであった。これを「100％結合」とみなした
。それ以前にインヒビターと反応したレセプターによって生成されたシグナルは
、陽性コントロールにより生成されたシグナルで割り、100を掛けてインヒビタ
ー存在下で結合したレセプター％を計算した。この反数が、阻害率％である。
化合物13aおよび13bが両方とも、Ｅセレクチンの2,3 sLex糖脂質への結合を阻
害することは、表１から明らかである。試験した３つの濃度にわたって、13bは
より良好なインヒビターであり、最大の差異は明らかに濃度５mMであった。13a
の48％に比較して、この濃度では、13bは、82.5％の阻害率を示
した。
化合物13aおよび13bが両方とも、Ｌセレクチンの2,3 sLex糖脂質への結合を阻
害することは、表２から明らかである。しかし、この場合の差異は、Ｅセレクチ
ンへの結合の阻害率％における差異よりもかなり大きかった。例えば、1.25mMで
、13bは、驚くべきことに90％の阻害率を示した。２mMおよび５mMで100％の阻害
率が観測された。顕著に対照的に、13bは、1.25mMでたった13％の阻害率および5
mMで47％の最大阻害率を示した。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(72)発明者 エイサ，ダーウィン
アメリカ合衆国 ミシガン 49053，ゲー
ルスバーグ，サウス 35ティーエイチ ス
トリート 3608
(72)発明者 ムッサー，ジョン エイチ.
アメリカ合衆国 カリフォルニア 94804,
サン カルロス，マイケル コート 23
(72)発明者 ナッシュド，ミナ
アメリカ合衆国 カリフォルニア 94501,
アラメダ，ナンバー３，セントラル アベ
ニュー 600
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １．下式の化合物： ここで、R1は、それぞれ独立して、Hまたは低級アルキル(1-4C)であり； R2は、H、低級アルキル(1-4C)、アルキルアリール、あるいは１つまたはそれ 以上の他の糖残基であり； R3は、SO4 --、PO4 --を含む、負に荷電した部分であり； Yは、H、OH、または低級アルキル(1-4C)であり；そして Xは、-CHR4(CHOR1)2CHR5OR1である：ここで、R4およびR5は、それぞれ独立し て、H、低級アルキル(1-4C)、あるいは、一緒になって、O、S、およびNR1からな る群から選択されるヘテロ原子を随意に含む、５員環または６員環を形成し； 該５員環または６員環は、R1、CH2OR1、OR1、OOCR1、NR1 2、NHCOR1、およびSR1 からなる群より選択される１種の置換基で随意に置換され、Xが、ヘキソース置 換基を表すときは、R4およびR5は一緒になっても、ヘキソース置換基になり得な い、化合物。 ２．すべてのR1がHである、請求項１に記載の化合物。 ３．R2がHである、請求項１に記載の化合物。 ４．YがHまたはOHである、請求項１に記載の化合物。 ５．Xが、-CH2(CHOH)3H、2,3,4-トリヒドロキシベンゾイルであるか、あるい は、Xが、3,4,5-トリヒドロキシピラン-2-イル、3,4,5-トリメトキシピラン-2- イル、3,4,5-トリヒドロキシフラン-2-イル、または3,4,5-トリメトキシフラン- 2-イルである、請求項１に記載の化合物。 ６．R4およびR5のうち一方がHであり、そして他方がH、低級アルキル(1-4C)ま たはフェニルである、請求項１に記載の化合物。 ７．前記アルキルがメチルである、請求項６に記載の化合物。 ８．R4およびR5が共にHである、請求項６に記載の化合物。 ９．R4およびR5が一緒になった場合、3,4,5-トリヒドロキシピラン-2-イル、3 ,4,5-トリメトキシピラン-2-イル、3,4,5-トリヒドロキシフラン-2-イル、また は3,4,5-トリメトキシフラン-2-イルである、請求項１に記載の化合物。 10．すべてのR1がHであり、R2がHであり、R3がSO4--を含み、そしてXがフコシ ル残基である、請求項１に記載の化合物。 11．ラクトース誘導体を合成する方法であって、下式の化合物を接触させるこ とを包含する、方法： ここで、R6は、それぞれ独立して、H、低級アルキル(1-4C)、または保護基で あり； ここで、Y1は、H、OH、OR7OOCR7、またはSR7であり； ここで、少なくとも１つのR6は、置換されるべき位置にあり、そして、多くて も１つの近接したR6はHであり、そしてその他の全てのR6は保護基であり； R7は保護基であり； 生成物を得るための求電子試薬供与部分を有し、ここで該求電子試薬は、置換さ れるべき位置で、OHのHに対して置換される。 12．前記式の化合物が、以下の群より選択される化合物である、請求項11に記 載の方法： ベンジル6-0-ベンゾイル-3-0-(2,3,4-トリ-0-ベンジル-α-L-フコピラノシル) -4-0-(6-0-ベンゾイル-β-D-ガラクトピラノシル)-β-D-グルコピラノシド； ベンジル6-0-ベンゾイル-3-0-(2,3,4-トリ-0-ベンジル-α-L-フコピラノシル) -4-0-(6-0-ベンゾイル-3,4-0-イソプロピリデンβ-D-ガラクトピラノシル)-β-D -グルコピラノシド； ベンジル3-0-(2,3,-トリ-0-ベンジル-α-L-フコピラノシル)-4-0-(3,4-0-イソ プロピリデン-β-D-ガラクトピラノシル)-β-D-グルコピラノシド； ベンジル2,6-ジ-0-ベンゾイル-3-0-(2,3,4-トリ-0-ベンジル-α-L-フコピラノ シル)-4-0-(2,6-ジ-0-ベンゾイル-3,4-0-イソプロピリデン-β-D-ガラクトピラ ノシル)-β-D-グルコピラノシド； ベンジル2,6-ジ-0-ベンゾイル-4-0-(2,6-ジ-0-ベンゾイル-3,4-0-イソプロピ リデン-β-D-ガラクトピラノシル)-β-D-グルコピラノシド； 2-(トリメチルシリル)エチル3-0-(2,3,4-トリ-0-ベンジル-L-フコピラノシル) -4-0-(2,6-ジ-0-ベンゾイル-β-D-ガラクトピラノシル)-2,6-ジ-0-ベンゾイル- β-D-グルコピラノシド；および ベンジル0-(2,3,4-トリ-0-ベンジル-α-L-フコピラノシル)-(1-3-[0-(2,6-ジ- 0-ベンゾイル-3,4-0-イソプロピリデン-β-D-ガラクトピラノシル)-(1-4)]-2,6- ジ-0-ベンゾイル-β-D-グルコピラノシド。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US91070992A | 1992-06-29 | 1992-06-29 | |
| US07/910,709 | 1992-06-29 | ||
| PCT/US1993/006110 WO1994000477A1 (en) | 1992-06-29 | 1993-06-25 | Substituted lactose derivatives as cell adhesion inhibitors |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08500820A true JPH08500820A (ja) | 1996-01-30 |
Family
ID=25429220
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6502607A Pending JPH08500820A (ja) | 1992-06-29 | 1993-06-25 | 細胞接着インヒビターとしての置換されたラクトース誘導体 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0648223A4 (ja) |
| JP (1) | JPH08500820A (ja) |
| AU (1) | AU678373B2 (ja) |
| CA (1) | CA2138645A1 (ja) |
| WO (1) | WO1994000477A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009249383A (ja) * | 2008-04-02 | 2009-10-29 | Lvmh Recherche | 抗老化特性を有するアルキルグリコシドの又はアルキルグリコシドの混合物の化粧品組成物における活性剤としての使用、及び前記組成物を用いる化粧用ケアの方法 |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5591835A (en) * | 1992-06-29 | 1997-01-07 | Glycomed Incorporated | Substituted lactose derivatives |
| US5620864A (en) * | 1992-06-29 | 1997-04-15 | Health Research, Inc. | Acceptor for fucosyl transferase |
| US5783693A (en) * | 1993-11-19 | 1998-07-21 | The Regents Of The University Of California | Methods for synthesizing sulfated disaccharide inhibitors of selectins |
| US5444050A (en) * | 1994-04-29 | 1995-08-22 | Texas Biotechnology Corporation | Binding of E-selectin or P-selectin to sialyl Lewisx or sialyl-Lewisa |
| JPH0899989A (ja) * | 1994-09-30 | 1996-04-16 | Akira Hasegawa | 新規糖脂質誘導体およびその製造用中間体 |
| DE4436164A1 (de) * | 1994-10-10 | 1996-04-11 | Hoechst Ag | Neue Kohlenhydratkonjugate als Inhibitoren der Zelladhäsion |
| US5962424A (en) * | 1995-02-21 | 1999-10-05 | Arch Development Corporation | Methods and compositions for targeting selectins |
| WO1997000881A1 (fr) * | 1995-06-22 | 1997-01-09 | Nippon Shinyaku Co., Ltd. | Derives de la moranoline |
| CA2227013A1 (en) | 1995-07-14 | 1997-02-06 | Glycotech Corp. | Compounds and methods for treatment of egf receptor associated cancers and purification of the egf receptor |
| JPH0952902A (ja) * | 1995-08-09 | 1997-02-25 | Daikin Ind Ltd | フッ素含有シアリルルイスｘ誘導体及びその合成中間体 |
| JP2003508499A (ja) * | 1999-09-08 | 2003-03-04 | インスティテュート・フュア・ディアグノスティクフォルシュンク・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング・アン・デア・フライエン・ウニヴエアズィテート・ベルリン | Ｌ−セレクチン造影剤 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5326752A (en) * | 1991-11-27 | 1994-07-05 | Glycomed Incorporated | Substituted lactose and lactosamine derivatives as cell adhesion inhibitors |
| CA2100412A1 (en) * | 1992-07-15 | 1994-01-16 | Yutaka Yamada | Glycolipid derivatives |
-
1993
- 1993-06-25 AU AU46526/93A patent/AU678373B2/en not_active Ceased
- 1993-06-25 EP EP93916790A patent/EP0648223A4/en not_active Withdrawn
- 1993-06-25 CA CA002138645A patent/CA2138645A1/en not_active Abandoned
- 1993-06-25 WO PCT/US1993/006110 patent/WO1994000477A1/en not_active Ceased
- 1993-06-25 JP JP6502607A patent/JPH08500820A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009249383A (ja) * | 2008-04-02 | 2009-10-29 | Lvmh Recherche | 抗老化特性を有するアルキルグリコシドの又はアルキルグリコシドの混合物の化粧品組成物における活性剤としての使用、及び前記組成物を用いる化粧用ケアの方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU4652693A (en) | 1994-01-24 |
| EP0648223A1 (en) | 1995-04-19 |
| WO1994000477A1 (en) | 1994-01-06 |
| AU678373B2 (en) | 1997-05-29 |
| CA2138645A1 (en) | 1994-01-06 |
| EP0648223A4 (en) | 1996-07-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5728685A (en) | Methods of treating inflammation using cell adhesion inhibitors | |
| US5567683A (en) | Substituted lactose and lactosamine derivatives as cell adhesion inhibitors | |
| US5470842A (en) | Carbohydrate-based anti-inflammatory agents | |
| US5648344A (en) | Methods of treating inflammation using selection binding compounds | |
| US5143712A (en) | Method of determining a site of inflammation utilizing elam-1 ligands | |
| US5412123A (en) | Anthraquinone and anthracene derivatives as inhibitors of the cell-adhesion molecules of the immune system | |
| US5658880A (en) | Sialic acid/fucose based medicaments | |
| DE69329735T2 (de) | Peptid-kohlenwasserstoff konjugate, welche t-zell immunität bewirken | |
| JPH08510729A (ja) | 細胞接着のインヒビターとしてのシアリルＬｅ▲上ｘ▼類似体 | |
| WO1996005209A9 (en) | Sialic acid/fucose based medicaments | |
| JPWO2000017216A1 (ja) | カルボキシメチルガラクトース誘導体 | |
| JPH08500820A (ja) | 細胞接着インヒビターとしての置換されたラクトース誘導体 | |
| JP2001506604A (ja) | 細胞接着を促進または阻害し、ガン細胞転移を阻害し、そしてアポトーシスを誘導する合成グリコアミン | |
| WO1993023031A1 (en) | Multivalent mimetics and peptide mimetics for blocking carbohydrate-dependent cellular interaction and for eliciting anticarbohydrate t-cell response | |
| JPH10500948A (ja) | シアル酸／フコース含有薬剤 |