JPH08504189A

JPH08504189A - 低／非たんでき性オピオイド鎮痛剤の確認及び使用方法

Info

Publication number: JPH08504189A
Application number: JP6508375A
Authority: JP
Inventors: キン、ボーイ; シェン、ケーフェイ; ゴン、キオン−ジ; クライン、スタンレイ・エム; マオ、ファン; ウォン、チャン・イ
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1992-09-21
Filing date: 1993-09-17
Publication date: 1996-05-07
Also published as: CA2145207A1; EP0668764A1; WO1994006426A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、「低又は非たんでき性」鎮痛剤としての使用のための高能力オピオイドをスクリーンし、確認するための後根神経節（ＤＲＧ）ニューロンの電気生理学的モデルと細胞培養システムよりなるバイオアッセイの使用方法に関する。本発明の他の局面は、低又は非たんてき性鎮痛剤としての使用のための、抑制オピオイドレセプター機能のみを活性化するが興奮機能は活性化しないユニークな能力についての本発明のバイオアッセイにより確認された特異的群のオピオイドアルカロイド及びその同族体に関する。本発明の他の局面は、低又は非たんでき性鎮痛剤として及びオピオイドたんできの処置のためのオピオイドアルカロイド族のエトロフィン又はジヒドロエトロフィンの特異的用途に関する。本発明は又、ジヒドロエトロフィン塩酸塩（７α−〔１−（Ｒ）−ヒドロキシ−１−メチルブチル〕−６，１４−エンド−エタノ−テトラヒドロオリパビン塩酸塩）及び製薬上許容されうる塩の形で活性成分としてその化合物を含む医薬組成物に関する。

Description

【発明の詳細な説明】低／非たんでき性オピオイド鎮痛剤の確認及び使用方法本発明は、低／非たんでき性鎮痛剤としての用途及びオピオイドたんできの処置のための特異群のオピオイドアゴニストに関する。より詳しくは、本発明はエトロフィン、ジヒドロエトロフィン、オーメフェンタニル及び他のオピオイド並びに低／非たんでき性鎮痛剤として及びオピオイドたんできの処理に有効であるその同族体に向けられる。さらに、本発明は選択的に活性な抑制能力を有するが、興奮性オピオイドレセプター伝達作用を有しない化合物をスクリーンし、検出するバイオアッセー法を提供する。本発明は、又、出発物質としてテバインを用いるエトロフィン、ジヒドロエトロフィン及びその同族体の製造に関する。より詳しくは、本発明はジヒドロエトロフィン塩酸塩（７α−〔１−（Ｒ）−ヒドロキシ−１−メチルブチル〕−６，１４−エンド−エタノーテトラヒドロオリパビン塩酸塩）及びその医薬組成物の製造に関する。痛み軽減剤としてモルヒネ［図１（Ｉ）］の臨床への導入以来、臨床医は薬者たんできの問題に悩まされて来た。１世紀以上もの間、化学者、薬理学者及び臨床医は高い効力でしかも低たんでき性の理想的な鎮痛剤の発見に努力して来た。メペリジン、メサドン［図１（II）］及びフェンタニルのような一連のオピオイドが次々と開発された。しかしながら、これらの薬剤はいずれもたんできを示すことなく患者に持続した鎮痛効果を示すことはない。西洋諸国では、メサドン置換が時々薬剤乱用の処置に適用されて来た。不幸にも、メサドンは強い精神的及び肉体的依存を誘発する。その結果、そのような処置を受けている患者は、モルヒネ、へロイン又は他のオピオイドの臨床使用由来の離脱症状の間、通常メサドン依存になる（ジャフェ，1990）。従って、薬剤乱用を処置するためのオピオイドたんできを引き起こす分子及び細胞メカニズムへの洞察力に基づくより良好な方法及び特に低又は非たんでき性鎮痛剤としての用途及びオピオイド禁断症状の抑制のための化合物を確認する手段を開発することが必要とされている。本発明はオピオイドをスクリーニングすることにより低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤を確認するためのインビトロスクリーニング方法に向けられ、約フェムトモル（ｆＭ）から約マイクロモル（μＭ）の濃度範囲に渡って投与量依存方法で知覚ニューロンのオピオイドレセプター伝達作用に対し、抑制効果を喚起するが興奮性効果を喚起しない化合物を確認する。特に、そのようなオピオイド化合物は、細胞培養スクリーニングアッセイで化合物により惹起された知覚ニューロン活動保有期間（ＡＰＤ）を記録すること及び化合物を約ｆＭないし約μＭの濃度範囲でアッセイするとＡＰＤを短縮するがコントロールＡＰＤに相対的にＡＰＤを延長しないオピオイド化合物を選択することにより確認される。これらの特徴を有する化合物は、本発明の低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤として確認される。好ましくは、細胞培養スクリーニングアッセイは、典型的には、入浴潅流により、候補化合物に後根神経節（ＤＲＧ）ニューロンをさらすこと、該ＤＲＧニューロンに主要細胞内分極流を適用すること及び標準的電気生理学技術を用いてＤＲＧニューロンのＡＰＤのオピオイド誘発変調を記録することを含む。従って、本発明の他の局面は、特に本発明の方法によって確認される通りの、用量依存方法で約ｆＭから約μＭの範囲の濃度で、オピオイドレセプター伝達作用の抑制作用を喚起するが興奮効果を喚起しない低又は非たんでき性鎮痛剤を提供する。好ましい実施態様では、これらのオピオイドは、エトロフィン、ジヒドロエトロフィン又はオーメフェンタニルを含む。標題の低又は非たんでき性オピオイド、或はその製薬上許容されうる塩も、製薬上許容されうる担体と共に提供される。さらに、標題の医薬組成物は、返還オピオイド又はオロキソンも含むことができる。本発明のさらに他の局面は、有効量の非たんでき性オピオイド鎮痛剤又はその同族体を、たんでき性オピオイドがたんでき者に用いられない時に起きる禁断症状を緩和し又は抑制するのに十分な時間、患者に投与することによるオピオイドたんできの処置方法を提供する。禁断症状の軽減を可能にする期間、非たんでき性オピオイド鎮痛剤の最初の投与のうち、非たんでき性オピオイド鎮痛剤の投与量は、厄介な副作用がなく該鎮痛剤から該患者を完全に引き離すに十分な時間にわたって、通常の投与量からゼロまで徐々に減じる。典型的には、非たんでき性オピオイド鎮痛剤の最初の投与は、約１ないし約５日間継続し、引き離し期間は約１ないし約７日続き、かくして患者は全体で約２ないし１２日の期間内にオピオイドたんできから回復できる。好ましい実施態様では、非たんでき性オピオイド鎮痛剤は、１日当り約１０μgないし約１０００μgの投与量で最初に投与されるエトロフィン又はジヒドロエトロフィンである。このような投与量は、患者の禁断症状の過酷さによって、通常、舌下、筋肉内又は静脈内に、好ましくは静脈内点滴により投与する。さらにより好ましくは、オピオイドたんできは、１日当り約４０ないし約５００μgのジヒドロエトロフィンを約１ないし約３日間患者に投与すること、続く約４ないし約７日間、減少量のジヒドロエトロフィンを投与し、これによりジヒドロエトロフィンがジヒドロエトロフィンの最初の投与後、約１０日まで、もはや必要でなくなることにより処置する。本発明の次の局面は、有効量の長時間作用（longer−acting）返還オピオイドを禁断症状の緩和又は抑制を維持するのに十分な時間、投与すること、次いで厄介な副作用なしに該オピオイド鎮痛剤から該患者を引き離すのに十分な時間、減少する投与量の非たんでき性オピオイド鎮痛剤を投与する、有効量の非たんでき性オピオイド鎮痛剤を該オピオイドたんできによる禁断症状の即時緩和又は抑制に十分な時間、患者に投与することによるオピオイドたんでき処置方法を提供する。典型的には、非たんでき性オピオイド鎮痛剤の最初の投与は約１ないし約３日間続け、返還オピオイドの投与は約１ないし３日間続け、そしてその随伴引き離し期間を伴う非たんでき性オピオイド鎮痛剤への復帰は約１ないし約８日続け、かくして患者は全部で３ないし１４日の期間内でオピオイドたんできから回復できる。別法として、非たんでき性オピオイド鎮痛剤の最初の投与と返還オピオイド投与を同時に行うことができる。従って、これら２つのオピオイドは、患者が緩和された又は禁断症状であるまで一緒に投与される（例えば症候群は有効に抑制される）。その後、返還オピオイドの投与は停止し、そして非たんでき性オピオイド鎮痛剤投与量は、患者がたんでき性オピオイド鎮痛剤から引き離されるまで段階的に又は徐々に減じる。これらのオピオイドを一緒に投与する期間は、約２ないし約６日間であり、引き離しの期間は約１ないし約８日であって、かくして患者は約３ないし約１４日の期間内にオピオイドたんできから回復できる。好ましい実施態様では、非たんでき性オピオイド鎮痛剤は、１日当り約１０μgないし約１０００μgの投与量で初めに投与されるエトロフィン又はジヒドロエトロフィンである。そのような投与量は、患者の禁断症状の過酷さにより、通常、舌下、筋肉内または筋肉内点滴により投与される。好ましくは、返還オピオイドは、約５−１００mg／日の投与量で経口投与されるメサドンである。本発明のさらに次の局面は、低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤による急性又は慢性疼痛の処置方法を提供する。詳しくは、ジヒドロエトロフィン塩酸塩（ＤＨＥ）を、患者に終結（resultant）たんできなしに痛みを緩和又は抑制するのに有効な時間及び量、投与する。急性疼痛の処置は典型的には、約３０−６０ μgのＤＨＥを舌下に、疼痛の間、１日当り約１８０μgまで、そして典型的には１週間以内投与することにより達成される。慢性疼痛の処置は、典型的には約２０−１００μgのＤＨＥを、１日当り４００μgまで舌下に投与することにより達成され、そのような投与は数カ月続けることができる。まれに、慢性疼痛の処置で緩和なたんできとなることがある。別法として、慢性又は急性疼痛は、低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤と返還オピオイドを、終結たんできなしに疼痛を緩和又は抑制するのに有効な時間及び量、一緒に投与することにより処置できる。低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤、例えばＤＨＥ及びエトロフィンにより発揮される有効な抑制効果は、モルヒネ及びメサドンのような返還オピオイドにより発揮される興奮効果をブロックする。典型的には、非たんでき性オピオイド鎮痛剤の量は、１日当り約１０ないし約１０００μgであり、又、低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤のみによる疼痛の処置のための上記したこれら投与量である。返還オピオイドの量は、１日当り約５ないし約１００mgである。鎮痛剤の投与量は、体重基準の約０．０５％ないし約５％としても決定できる。返還オピオイドと相対的に少量の低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤の組合せを用いることによりたんできなしに又は低偶発のたんできを伴う疼痛の処置が可能となる。好ましくは、鎮痛剤はＤＨＥ、エトロフィン、オーメフェンタニル又はその製薬上許容されうる塩であり、返還オピオイドはモルヒネ、メサドン又はフェンタニルである。本発明は、又、出発物質としてテバインを用いるエトロフィン、ＤＨＥ及びその同族体の製造の改良方法に関する。例えば本発明は、ジヒドロエトロフィン塩酸塩（７α−〔１−（Ｒ）−ヒドロキシ−１−メチルブチル〕−６，１４−エンド−エタノ−テトラヒドロオリパビン塩酸塩）及びＤＨＥの他の塩の製造方法を提供する。特に、ジヒドロエトロフィン及びその同族体［図１３、１４及び１５］の製造方法は、（１）テバインを過剰のメチルビニルケトンと、第一生成物を生成するのに十分な時間と条件下に反応させること、そしてこの第一生成物を回収すること；第一生成物を接触水素化に付して第二生成物を生成させること及びこの第二生成物を回収すること；第二生成物を式ＲＭｇＸ（式中、Ｒは低級アルキル基であり、Ｘはハロゲンである）のグリニヤール試薬と、第三生成物を生成するための時間及び条件下に反応させること及びこの第三生成物を回収すること；第三生成物を無水溶液中、強塩基と、ジヒドロエトロフィン又はその対応する同族体を生成するのに十分な時間及び条件で反応させることを含む。Ｒ基は好ましくはｎ −プロピル又はｉ−アミルである。本発明によるエトロフィン及びその同族体の製造方法は、接触水素化が除かれる以外、ＤＨＥの製造方法と同じである。エトロフィン又はエトロフィン関連成分を製造する場合、Ｒは好ましくはｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−アミル、ｉ−アミル又はシクロヘキシルである。図１は、オピオイドの構造を描く。（Ｉ）モルヒネ、（II）メサドン、（III ）エトロフィン（ａ）とその同族体（ｂ、ｃ、ｄ、ｅ）、（IV）ジヒドロエトロフィン（ａ）とその同族体（ｂ）及び（ｖ）ナロキソン。図２は、慢性オピオイド露出の間、オピオイド興奮過敏症とオピオイド抑制脱感作となりうる後根神経節（ＤＲＧ）ニューロンでの正及び負フィードバック附リン酸反応メカニズムを示す。興奮Ｇｓ−結合オピオイドレセプターの持続活性化はアデニル酸シクラーゼ活性とＰＫＡを増加し、その結果（ａ）ＰＫＡ経由のＧＭ１ガングリオシッドのｃＡＭＰ依存上昇並びに（ｂ）（もし同種のＡＰＤ変調が前シナップス性ＤＲＧ末端で生じると）活動電位持続（ＡＰＤ）延長に導き、伝達物質放出を促進した、電圧感覚性Ｋ⁺及びＣａ²⁺チャンネルの活性化となる。逆にＧＭ１上昇は、興奮Ｇｓ結合オピオイドレセプター作用、即ち（依存となる）異種感作、の効力を増強する。上方ら調節された（upregulated）ＡＣ／ｃＡＭＰ／ＰＫＡシステムは、リガンド結合抑制オピオイドレセプターを付随的にリン酸化し、それによりＧｉ／Ｇｏへの結合、即ち（オピオイド抑制効果に対する不応答性となる）異種脱感作、を減じうる。略語：Ａｃ、アデニル酸シクラーゼ；ＰＫＡ、ｃＡＭＰ依存蛋白キナーゼ；ｇ_k、膜Ｋ⁺コンダクタンス；ｇ_ca；膜Ｃａ²⁺コンダクタンス。図３は、ナイーブなＤＲＧニューロンに対するエトロフィンのｐＭ−μＭ濃度の急性適用がＡＰＤの抑制短縮を惹起することを示す。１：５ｍＭＣａ²⁺と５ｍＭＢａ²⁺を含有するハングの均衡塩溶液（ＢＳＳ）中のＤＲＧニューロンにより生じた活動電位（ＡＰ）。本記録の（及び以下の全ての記録の）ＡＰ応答が短い（２msec）細胞内電流パルスにより喚起した。２−５：ＡＰＤは、それぞれ１ｆＭ、１ｐＭ、１ｎＭ及び１μＭエトロフィンの浴潅流により徐々に短くなる。６：エトロフィンの浸蝕後、ＡＰＤが修復する。図４は、ＤＲＧニューロンのＡＰＤに対するエトロフィン、ＤＨＥ及びダイノルフィン（１−１３）（Ｄyn１−１３）の用量反応関係を示す。エトロフィンとＤＨＥはＡＰＤの用量依存短縮を惹起した（それぞれｎ＝１１及び１３）。対照的に、Ｄyn（１−１３）はｆＭ−ｎＭ濃度でＡＰＤの用量依存延長を惹起し、ＡＰＤを短くするために（ｎ＝３５）より高濃度（約μＭ）を必要とした。図５は、二頂作用オピオイド（ＤＡＤＬＥ）へのＤＲＧニューロンの慢性暴露がＤＲＧニューロンをダイノルフィンの抑制効果に超過敏とし（１−１３）（Ｄ yn）、これに対し、エトロフィンの潅流は同じＤＲＧニューロンのＡＰＤを有効に短縮した（抑制反応）ことを示す。１：１μＭＤＡＤＬＥを含む培地で３週間処理し、次いで１μＭＤＡＤＬＥを含む、ＢＳＳ中で試験したＤＲＧニューロンにより生ずる活性保持。２：ＡＰＤは１μＭＤＡＤＬＥを含む１ｆＭＤ ynの浴潅流により延長する（５分試験）。３，４：ＡＰＤはＤyn濃度を１ｎＭ及び１μＭに続けて上げることによりさらに延びる（５分試験）。５：１μＭＤＡＤＬＥを含有するＢＳＳによるＤynの浸漬５分後のコントロール応答。６：１ｆＭエトロフィン（Ｅtorp)は、１μＭＤＡＤＬＥの存在で同じＤＲＧニューロンのＡＰＤを短縮する。７−９：エトロフィンの濃度を１ｐＭから１μＭにさらに増すことはＡＰＤを徐々に短縮する。１０：ＡＰＤはエトロフィンの除去後、コントロール値にもどる。図６は、二頂作用オピオイド（ＤＡＤＬＥ）への慢性暴露、続く低濃度のエトロフィンへの急性適用は、本超過敏ＤＲＧニューロンにおいてナロキソン（ＮＬＸ）により促進した興奮ＡＰＤ延長効果をブロックできることを示す。１：１μ ＭＤＡＤＬＥを含む培地で２週間処理し、次いで１μＭＤＡＤＬＥを含むＢＳＳで試験したＤＲＧニューロンにより生ずる活性保持。２：１ｎＭＮＬＸは、本ＤＲＧニューロンのＡＰＤを延長する（５分試験）。対照的にｎＭナロキソンはナイーブＤＲＧニューロンに影響を及ぼさない（クレイン及びシェン、1992 ａ、ｂ）。３：１ｐＭエトロフィンの急性添加はナロキソン誘発ＡＰＤ延長を減じる（５分試験）。４：エトロフィンの濃度をさらに１ｎＭに増加するとナロキソン誘発ＡＰＤ延長をほぼ完全にブロックする。図７は、モルヒネ依存ラットでのモルヒネ、ＤＨＥ及びメサドン注射によるナロキソン促進、持続体重損失の回復を示す。１日投与量：モルヒネ１００mg／kg 、２小分け用量に分割；ＤＨＥ１２μg／kg、４小分け用量に分割；メサドン２４mg ／kg、４小分け用量に分割。黒ぬり円：モルヒネ群；中空円：ＤＨＥ群；黒ぬり三角：メサドン；×印：食塩水コントロール群。Ｘ±ＳＤ、★★★ｐ＜０．０１、食塩水コントロール群と比較して。図８は、モルヒネ依存ラットでのナロキソン促進体重損失に対するＤＨＥ及びメサドン置換の効果を描く。最初のナロキソン促進由来の体重損失はカラムＡで与える。第二ナロキソン促進試験はモルヒネ（１００mg／kg／日、２小分け用量に分割）で１群のラットを、第２群をＤＨＥ（１２μg／日、４小分け用量に分割）で、そして第三群をメサドン（２４mg／kg／日、４小分け用量に分割）で維持後４日に実施。第二ナロキソン促進試験後の体重の損失は、カラムＢで与える。最初と第二のナロキソン促進試験間の統計的Ｐ値は「★★」，ｐ＜０．０５及び「★★★」，ｐ＜０．０１である。メサドン群に対応するＤＨＥ群のｐ値はｐ＜０．０５である。図９は、モルヒネ依存ラットでのＤＨＥ及びメサドン置換に対するナロキソン促進後の禁断症状記録を描く。ラットは、図８で記載したように処理した。カラムＡ：禁断症は最初のナロキソン促進試験から記録する。カラムＢ：禁断症は第二ナロキソン促進試験から記録する。最初と第二のナロキソン促進試験間の統計的ｐ値は「★★」，ｐ＜０．０５及び「★★★」，ｐ＜０．０１である。メサドン群に対応するＤＨＥ群に対するｐ値はｐ＜０．０１である。図１０は、モルヒネ停止後、モルヒネ依存サルの禁断症状の発達を示す。図１１は、モルヒネ依存サルのＤＨＥによる禁断症状の回復を示す。矢印は、ＤＨＥ注射（３μg／kg）の時間を示す。中空円：コントロール群；黒ぬり円：ＤＨＥ群。図１２は、モルヒネ依存サルの禁断症状に対するＤＨＥ及びメサドンの治療効果を示す。矢印はナロキソン（ＮＬＸ）促進（１mg／kg）の時間を示す。中空円：コントロール群；黒ぬり円：ＤＨＥ群；黒ぬり三角；メサドン群。図１３は、テバインからエトロフィン及びその同族体の合成に関する反応式を示す。図１４は、テバインからジヒドロエトロフィン及びその同族体の合成に関する反応式を示す。図１５はテバインからジヒドロエトロフィン塩酸塩の合成を示す。用いた略字の簡単な説明ＤＡＤＬＥ〔Ｄ−A1a²，Ｄ−Leu⁵〕エンケファリンＤＡＧＯ〔Ｄ−A1a²，MePhe⁴，GLy−オル〕エンケファリンＤＰＤＰＥ Tyr−Ｄ−Pen−Gly−Phe−Ｄ−Pen（Pen＝ペニシラミン）Ｕ−５０，４８８Ｈ３，４−ジクロロ−Ｎ−メチル−Ｎ−（２−［１− ピロリジニル］−シクロヘキシル）ベンゼン−アセトアミドダイノルフィン１−１３ダイノルフィンＡ，断片１−１３（Tyr−Gly−Gly−Phe−Leu−Arg−Arg− Ile−Arg−Pro−Lys−Leu−Lys）ダイノルフィン１−１７ダイノルフィンＡ，断片１−１７（Tyr−Gly−Gly−Phe−Leu−Arg−Arg− Ile−Arg−Pro−Lys−Leu−Lys−Trp−A SP−Asn−Gln）Ｅtor エトロフィンＤＨＥジヒドロエトロフィン発明の詳細な説明本発明によれぱ、器官型培養での知覚ニューロンの作用可能性持続に対するオピオイドの効果の電気生理学的アッセイは、抑制オピオイドレセプター伝達作用を活性化するが興奮は活性化しない能力を有するアゴニストをスクリーンし、又、特徴付ける極端に感受性のインビトロバイオアッセイを提供する。本アッセイは、低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤及び薬剤たんできの処置に有用な試薬の同定を可能にする。本明細書で用いられる「非たんでき性」及び「低たんでき性」は、本発明のオピオイドたんでき可能性を記載するために交換可能に用いられる。本発明のオピオイドたんでき処置において、主題のオピオイドは、数週間まで使用した場合、処方投与量で実質的に非たんでき性である。例えば１４日までの期間にわたり徐々に減少される、１日当り約１０μgないし約１０００μgの範囲での薬物たんでき者へのＤＨＥ投与は、ＤＨＥに対するたんできとはならない。対照的に、メサドン置換による薬物たんでき者のよくコントロールされた処置でさえ、メサドンたんできに移行してしまう。従って本発明は、他のオピオイドに対し付随するたんできなしに、麻酔薬乱用を処置する本方法を大いに改良する。同様に、本発明の主題のオピオイドによる数日間の急性疼痛処置は、たんできをもたらさない。主題のオピオイドによる長期間の慢性疼痛処置がたんできとならないのに、緩和なたんできが例外ケースとなりうる。従って、本発明の主題のオピオイドの使用は大多数の慢性疼痛患者にとって非たんでき性である。従って、ＤＨＥで示したように、慢性疼痛患者にとって、主題のオピオイドのたんでき持続は低く、典型的には３カ月以上処置された患者の１００人中１人以下である。例えば、ＤＨＥで３カ月までの間、患者を処置した場合でもたんできは観察されなかった。さらに、たんできのまれなケースで、そのようなたんできは、ＤＨＥの幾つかの製造で用いられる、薬物合成の出発物質である二頂作用テベインに存在する小量の混入物によりうる。本明細書で用いられる「オピオイド」とは、麻酔薬レセプターに特に結合する全ての物質をいう（ケイシイ及びパーフィット、1986；パスターマック1988）。本明細書において「返還オピオイド」とは、オピオイドレセプターに対し抑制及び興奮効果を有する二頂作用オピオイドである。そのようなオピオイドは、一般にそれが使用のために混合される非たんできオピオイド鎮痛剤よりも長持続作用を有する。返還オピオイドと非たんでき性オピオイド鎮痛剤の組合せ治療は後者化合物に返還オピオイドの興奮効果をブロック又はマスクする。オピオイドレセプターの活性化は、逆にインビボでオピオイド鎮痛剤に内在する一次細胞メカニズムを提供するニユーロン活性に対する抑制効果を生ずることが判って来た（例えばノース，1986）。しかしながら、最近の電気生理学的研究は、特異的なミュー、デルター及びカッパー・オピオイドレセプターアゴニストが濃度依存方法で培養で分離された知覚ＤＲＧニユーロンの活性持続の興奮及び抑制変調を生ずることを示した（シェン及びクライン、1989；クライン及びシェン、1990）。これらのオピオイドアゴニストは、それぞれ活動持続期間（ＡＰＤ）のカルシウム依存成分の延長又は短縮により測定されるように低（＜ｎＭ）濃度で興奮効果を、高（μＭ）濃度で抑制効果をそれぞれ生ずることが判った（図２、表１）。初期の実験は、オピオイドの興奮効果がコレラトキシン感受性Ｇｓ様調整蛋白を経てアデニルシクラーゼ及び（例えばベータアドレナリンレセプターに類似する）サイクリックＡＭＰ依存電位感受性イオンコンダクタンスに正に結合するオピオイドレセプターにより伝達され（図２；シェン及びクライン，1989，1990a ；クライン及びシェン，1990，1992）、一方抑制効果は、（アルファアドルナリンレセプターに類似する）百日咳トキシン感受性Ｇｉ／Ｇｏ蛋白に結合したオピオイドレセプターにより伝達される（図２、シェン及びクライン，1989；グロス等、1990）ことを示した。オピオイドのこれら二頂性質、即ちオピオイドレセプターの二つの明らかに異なる群により伝達される興奮及び抑制活性間を識別する能力が本発明、特に低及び非たんでき性オピオイド鎮痛剤を確認する方法に導いた。従って、本発明は、抑制オピオイド反応を選択的に活性化できるが興奮オピオイド反応を活性化できない化合物を確認するインビトロバイオアッセイを提供する。興奮オピオイドレセプター作用の持続活性化がインビトロで慢性のオピオイド処置ニューロンのトレランスと依存の発展で重要な役割を演じるので（クライン及びシェン，1992；シェン及びクライン，1992）、そのような性質を有する、即ち、抑制反応を活性化するが興奮反応を活性化しない化合物はインビボで非たんでき性鎮痛剤として有用である。特に、インビトロバイオアッセイは、ＤＲＧニューロンの細胞培養系を使用し、ＤＲＧニューロンを候補化合物に暴露すること、及び標準的電気生理学的記録方法を用いてＡＰＤに対するその効果を観察することにより候補化合物をスクリーンする。ニューロンを生育し、候補化合物により処理し、そしてＡＰＤを記録するための方法論は、実施例１に与えられる。本発明によりスクリーンされた、約ｆＭ−ｐＭ範囲ないしμＭ範囲で抑制効果（例えばＤＲＧニューロンのＡＰＤを短縮する）を示すが興奮効果（例えばＤＲＧのＡＰＤを延長する）を示さない全てのオピオイド化合物はインビボで低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤である。一般にこれらの化合物は、濃度依存方法でＡＰＤに影響を及ぼし、反応は特異的オピオイドレセプターにより伝達される。従って、本発明の方法は、低又は非オピオイド鎮痛剤を確認するための強力な器具を提供する。モルヒネ、エンケファリン、ダイノルフィン、エンドルフィン及び合成オピオイドペプチドを含む本バイオアッセイにより試験したほとんど全てのオピオイドは、知覚ＤＲＧニューロンの活性持続に対し、用量関連二相性変調効果（即ち、抑制及び興奮）を有する。そのような化合物は全てたんでき性であることがよく知られている。しかしながら本発明によれば、たんでき性であるとしてこれまで信じられそして分類された化合物（ＷＨＯ、Ｒep 1966）、エトロフィン及びヒドロエトロフィン（テバイン誘導体）（ベントレイ及びハーディ，1963、ベントレイ及びハーディ，1967）は、オピオイドレセプター伝達作用を抑制し、そのような作用を興奮しないという選択的特性を有する（表１）。エトロフィン及びジヒドロエトロフィンは共に、幾つかのＤＲＧニューロンで約ｐＭレベルから始まりそして、ほとんどのＤＲＧニューロンでμＭレベルで最高の効果に達する、ＡＰＤの用量依存（抑制）短縮を惹起する（実施例１）。さらに、ＡＰＤの興奮延長は、二頂作用オピオイドにより低濃度で惹起する特徴的興奮効果と対照的にこれら２つの化合物によっては、＜ｐＭ濃度で全く起きない。ＤＲＧ脊髄体外移殖組織の二頂作用オピオイド（例えばモルヒネ又はＤＡＤＬＥ）への暴露が知覚ＤＲＧニューロンをオピオイドアゴニストの抑制効果に脱感作とし、その結果トレランスとなり（クライン等，1988）又、インビボでの禁欲、依存及び禁断症状の有意な特徴に類似する、オピオイドアゴニスト及びアンタゴニストの興奮効果に超過敏となることはよく知られている（クライン及びシェン，1992a，b；シェン及びクライン，1992）。オピオイドアゴニストによる慢性処置後の興奮オピオイドレセプターの持続活性化は正フィードバックメカニズムを誘発し、その結果、オピオイドアンタゴニスト及びアゴニストの興奮効果に対する慢性オピオイド処置ニューロンの顕著な超過敏を説明しうるＧｓ／アデニル酸シクラーゼ／サイクリックＡＭＰ／プロテインキナーゼＡ／ＧＭ１グリコシルートランスフェラーゼ系の調節となる（図２、クライン及びシェン，1992a，b；シェン及びクライン，1992）。ＤＲＧ索体外移殖組織を二頂作用デルタ／ミュアゴニスト、ＤＡＤＬＥ（１ μＭ）又はモルヒネ（１μg／ml）で３週間慢性的に処置すると、エトロフィンによる慢性処置まで、１ｆＭのような低濃度でもＤＲＧニューロンのＡＰＤの顕著な抑制用量依存短縮を惹起し（実施例２）、一方、二頂作用ミュ、デルタ及びカッパオピオイドアゴニストは、ｐＭからμＭにわたる濃度で高い程度のオピオイド興奮超過敏をしめす（実施例２）。さらに、インビボで麻酔薬たんでき者に細胞モデルのナロキソン誘発禁断症超過敏を与える（クライン及びシェン，1992b）、ｎＭナロキソン［図１（Ｖ）］（クライン及びシェン，1992a，b）の急性適用により促進する慢性オピオイド処置ＤＲＧニューロンの興奮ＡＰＤ延長は、エトロフィンの急性適用によりブロックできるが、モルヒネ又は他の二頂作用オピオイドアゴニストによってはできない（実施例２）。組織培養研究は、知覚ニューロンの興奮オピオイドレセプター作用が、抑制オピオイドレセプターにより伝達される鎮痛効果を減ずること、及びたんできの基礎にある細胞メカニズムを促進することにより、インビボで重要な役割を演じるという強い支持を提供する。スクリーンモデルで示されるように、インビトロで低濃度で抑制オピオイドルセプター作用を選択的に活性化するが興奮オピオイドレセプター作用を活性化しないオピオイド（例えばエトロフィン、ジヒドロエトロフィン）の使用により、インビボではるかに強力な無痛覚とモルヒネ及び他のほとんどの二頂作用麻酔薬による慢性処置の間に起きるよりも依存／たんできのより少ない徴候となる。本発明は、本バイオアッセイにより確認されるように、エトロフィン（及び同様の性質を有する化合物）（例えばジヒドロエトロフィン及びオーメフェンタニル）が、ほとんどの二頂作用オピオイドが一般に興奮ＡＰＤ延長効果を惹起する低（ｐＭ−ｎＭ）濃度でも、ナイーブ且つ慢性オピオイド処置「たんでき」知覚ＤＲＧニューロンに対し強い用量依存抑制ＡＰＤ短縮効果を惹起することを示す。エトロフィン及び本発明の同様の化合物は、細胞が慢性処置後、二頂作用オピオイドの興奮効果に超過敏である場合でもＤＲＧニューロンに対する興奮オピオイド反応よりもむしろ抑制を選択的に活性化する。エトロフィンはずっと、動物（ブレイン等，1967）及びヒト（ブレイン及びロビー，1970；ジャキンスキ等，1975）で、鎮痛剤としてモルヒネよりも１，０００倍以上強力であることが知られて来た。本発明は、エトロフィンの高抑制能力が、一部、その効果が高親和性興奮オピオイドレセプターの付随活性化によって減少されない抑制オピオイドレセプターの選択的能力によりうることを示す。本発明の臨床実施結果は、低用量の特異的抑制オピオイドレセプターアゴニスト、ジヒドロエトロフィンが、手術後の疼痛及び末期癌患者の慢性疼痛を緩和するのに極めて有効であり、トレランス及びたんできがモルヒネ及び他の慣用二頂作用麻酔薬で観察されるものよりもはるかに少ししか明らかでないことを示す（実施例５）。幾千人もの患者が＞９０％有効率で処置されて来たが有意な逆の副作用は観察されなかった。さらに本発明の低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤により発揮される強力な抑制効果は、二頂作用麻酔薬、即ち本明細書において定義される置換オピオイドの興奮効果をブロック又は抑制でき、二頂作用オピオイド（例えばモルヒネ又はメサドン）の単独使用により通常観察されるトレランス及びたんできを軽減する。さらに、数百人のヘロインたんでき者が２年の期間にわたって首尾よく処置されて来た。本グループでは、禁断症状は速やかにブロックされ、これよりジヒドロエトロフィン置換は最終オピオイド禁断症状後、最小の反動（rebound）で約１週間維持した（実施例６）。同様の結果がモルヒネ依存のサル及びラットに対する試験で得られた（実施例３及び４）。ヘロイン及びモルヒネたんできを処置するのにジヒドロエトロフィンで得られた成功結果は、メサドン及び他の二頂作用又は混合アゴニスト−アンタゴニストオピオイドによる比較臨床研究で得られた不確かな結果と明らかに対照的である。従って、本発明の他の局面は、オピオイド又はその同族体をオピオイドたんできの禁断症状を緩和するのに有効な量及び十分な時間投与すること、及び該オピオイド又はその同族体の投与を徐々に減少することによるオピオイドたんできの処置方法を提供する。本発明の他の局面は、ＤＨＥ、エトロフィン及びこれらの他の化合物の同族体の製造のための改良合成方法を提供する。さらに、前記化合物の塩、特に製薬上許容されうる塩の製造方法をも提供する。エトロフィン［図１（III）］及び関連同族体を製造するための反応式を図１３に示す。描かれるように、テバイン（１）を過剰のメチルビニルケトンと還流下、約１時間反応させる。次いで残留するケトンを好ましくは加圧下、全て留去する。粘稠な油を温メタノールに溶解し、冷却して結晶化させて結晶を回収する。便宜的には、結晶は氷冷メタノールで数回洗浄し、そして乾燥して７”−アセチル−６，１４−エンド−エテノーテトラヒドロテバイン（２）を得る。次いで本化合物（２）は、式ＲＭｇＸのグリニヤール試薬と反応させて、図１３の化合物（３）により示される通りのテバインの７”位にグリニヤール試薬のＲ基を伴う第三アルコールを形成させる。グリニヤール試薬のＲ基は、低級アルキルであり、Ｘはハロゲンである。従って、エトロフィンの同族体は、Ｒ基を変えることにより製造される。本明細書で用いられてアルキルは１ないし６炭素原子を含むアルキル基をいう。これらの基は直鎖状、分枝状又は環状鎖であり得、そしてメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、sec−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル（アミル）、イソペンチル（ｉ−アミル）、ネオペンチル（ｎ−アミル）、ヘキシル、シクロペンチル、シクメヘキシル等のような基を含みうる。Ｒがプロピルの場合、最終生成物（４）はエトロフィンである。エトロフィン及びその同族体にとって好ましいＲ基は、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−アミル、ｉ−アミル又はシクロヘキシルである。かくして、化合物（３）は（２）の無水溶液を所望のグリニヤール試薬と、第三アルコールの形成のための時間及び条件下に反応させることにより製造される。例えば（２）はベンゼンに溶解して、グリニヤール試薬と数時間、又は必要とされるように反応が完了するまで還流させることができる。完了すると、無水溶液を混合しない水性溶液（例えば飽和塩化アンモニウム）に加えることができ、生成物をこの水性溶液に抽出し、次いで有機層と水性層を分離する。水性層を回収し、エーテル又は他の適当な溶媒で数回抽出して化合物（３）を含有する中性溶液を得る。化合物（３）は再結晶によりさらに精製できる。強塩基性条件下での化合物（３）の反応により７”−〔１−ヒドロキシ−１− メチルＲ〕−６，１４−エンド−エテノ−テトラヒドロオリパビン化合物（４）を得る。このような化合物（４）は抽出、濾過、再結晶などにより回収できる。Ｒがｎ−プロピルの場合、（４）はエトロフィンである。エトロフィン又はその同族体（４）の種々の塩はいずれも、遊離塩基と所望の遊離酸とを反応させること、及び得られる塩を結晶化、濾過などにより回収することによって製造できる。好ましい実施態様では、（４）をアルコール性のエーテル溶液に溶解し、所望の酸を含有するエーテル溶液を、反応混合物が約２のｐＨに達するまでこれに添加する。付加的エーテルを結晶性固体（５）が形成するまでこれに加える。固体を収集し、エーテルで洗浄し、そして乾燥する。所望により固体は再結晶してもよい。（４）の塩を製造するのに用いることができる種々の酸の例を実施例９に提示する。ＤＨＥ、その同族体及び塩の製造のための反応式を図１４に示す。エトロフィンと同様、出発物質がテバインであり、メチルビニルケトンとの最初の反応はテバインの６，１４−エンド−エテノ誘導体（２）を形成するのと一致する。しかしながら（２）はまず、接触水素化と回収に付してテバインの６，１４−エンド −エテノ誘導体（３）を得、次いでグリニヤール試薬と反応させて（４）を生成させる。残っている合成段階をエトロフィンの合成について上記したように進める。即ち、ＤＨＥ及び関連化合物について、（２）を水素化して（３）を生成する；（３）をグリニヤール試薬と反応させて（４）を生成する；そして（４）を強塩基と反応させて（５）、遊離塩基ＤＨＥ又は関連同族体を生成する。最後に（５）を上記したような酸と反応させて（６）を生成する。ＤＨＥ及び関連化合物について、グリニヤール試薬のＲ基は明細書中、先に定義した通りの低級アルキルである。Ｒがｎ−プロピルの場合、図１４のの（５）はＤＨＥである。ＤＨＥ及びその同族体についての好ましいＲ基は、それそれｎ −プロピル及びｉ−アミルである。本発明の他の局面は、ジヒドロエトロフィン及びその同族体、エトロフィン及びその同族体、オーメフェンタニル並びに全ての前記化合物の製薬上許容されうる塩を含む本発明のオピオイド化合物の試薬組成物に向けられる。投与に適した投与量形（組成物）は、単位当り約１０μgから約１０００μgの活性成分を含んでもよい。これらの医薬組成物では、活性成分は、通常、組成物の全重量を基にして約０．５−９５重量％の量で存在するであろう。活性成分は、固体投与量形、例えばカプセル、錠剤、及び粉末で舌下に投与するか、又は無菌の液体投与量形で非経口的に投与できる。ゼラチンカプセルは、活性成分と粉末担体、例えばラクトース、シュークロース、マンニトール、澱粉、セルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などを含む。同様の希釈剤が圧縮錠を造るのに用いることができる。錠剤及びカプセルは共に、持効性生成物として製造し、数時間にわたって薬物の連続的放出を与えることができる。圧縮錠は、糖衣又はフィルム被覆して不快な風味をマスクし、又、大気から錠剤を保護することができる。一般に、水、適当な油、食塩水、水性デキストロース（グルコース）及び関連糖溶液並びにグリコール、例えばプロピレングリコール又はポリエチレングリコールが非経口溶液の適切な担体である。経口投与のための溶液は、好ましくは活性成分の水溶性塩、適切な安定剤、そして必要ならば緩衝性物質を含む。抗酸化剤、例えば重硫酸ナトリウム、硫酸ナトリウム又はアスコルビン酸は、単独又は組合せて、適切な安定剤である。クエン酸及びその塩並びにＥＤＴＡナトリウムも用いられる。さらに非経口溶液は、防腐剤、例えばベンザルコニウムクロリド、メチル−又はプロピル−パラベン及びクロロブタノールを含むことができる。適切な製薬上の担体は、本分野での標準的引用テキスト、レミントンズ・ファーマシューティカル・サイエンシズＡ．Ｏrolに記載される。本発明のさらに他の局面は、低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤又はその製薬上許容されうる塩を、オピオイドアンタゴニストであるナロキソンと共に混合物で含む医薬組成物を提供する。低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤は本明細書で与えられた量の、本明細書で与えられた化合物、例えばエトロフィン、ＤＨＥ、オーメフェンタニルなどである。主題の組成物は、固体形の例えば解毒又は激痛緩和以外に用いられる経口で又は舌下で投与される低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤の家庭で手持ちの（ta ke−home）製剤の流用又は乱用を避けるのに有用である。ナロキソンは低経口又は舌下生体内利用性を有するので、ナロキソンの量は、経口で舌下で取られた場合は効果がないが製剤を水に溶解し、注射した場合には、低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤、例えばＤＨＥの効果を拮抗する製剤に導入できる。本発明のさらに次の局面は、低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤或はその製薬上許容されうる塩を、「返還オピオイド」との混合物で含む医薬組成物を提供する。これらの組成物は慢性又は急性疼痛並びにオピオイドたんできを処置するのに有効である。各使用に適当な投与量は、当業者により容易に決定できる。低又は非たんできオピオイド鎮痛剤は、本明細書で与えられた化合物、例えばエトロフィン、ＤＨＥ、オーメフェンタニルなどを本明細書で与えられた量、含有する。これらの医薬組成物は上記のような処方で提供される。「返還オピオイド」は、オピオイドレセプターに抑制及び興奮効果を有する二頂作用オピオイドである。返還オピオイドは、オピオイドたんできの禁断症状を（部分的に又は完全に）緩和又は抑制するのに有効な量、或は疼痛を軽減するのに有効な量で組成物中に処方される。これらの組成物中の低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤の量は、返還オピオイドと共に用いる場合、禁断症状の緩和又は抑制を与えるのに又は疼痛を軽減するのに必要な量と同様である。当業者は鎮痛剤及び返還オピオイドの適切な割合及び投与量を容易に決定できる。例えば、投与のための適切な投与量形は、約１０ないし約１，０００μgの鎮痛剤を含んでもよい。鎮痛剤がＤＨＥの場合、舌下投与量の好ましい処方は、錠剤当り約２０μgないし約４０μgのＤＨＥ、又は対応する当量のその塩を含む。注射可能な投与量形の好ましい処方は、約２０μgないし約１００μgのＤＨＥ又は対応する当量のその塩を含む。同様に、返還オピオイドの投与のための適切な投与量形は、患者に１日当り約５mgないし約１００mgを与える量を含むことができる。好ましい返還オピオイドは、モルヒネ、メサドン、フェンタニル及びブプレモルヒネを含む。好ましい実施態様では、これらの医薬組成物は、ＤＨＥ又はその製薬上許容されうる塩、例えばＤＨＥ塩酸塩及びメサドン又はモルヒネのいずれかを含む。メサドンは薬物たんできを処置をするのに好ましく、一方、モルヒネは疼痛を処置するのに好ましい。実施例は、本発明を示すのに役立つのであって、本発明の範囲を限定するために用いられるべきでない。引用文献ベントレー，Ｋ．Ｗ．＆ハーディー、Ｄ．Ｇ．：ニュー・ポテント・アナルゲシクス・イン・ザ・モルヒネ・シリーズ。プロシーディングス・オブ・ケミカル・ソサイエティー、２２０頁、１９６３。ベントレー，Ｋ．Ｗ．＆ハーディー，Ｄ．Ｇ．：ノベル・アナルゲシクス・アンド・モレキュラー・リアレンジメンツ・イン・ザ・モルヒネ−テバイン・グループ。III．アルコールズ・オブ・ザ・６，１４−エンド−エテノテトラヒドロ 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“ディペンデント”・ウィザウト・トレランス。ブレイン・リサーチ（投稿中）、１９９２。ワイ，Ｅ．、ロー，Ｈ．Ｈ．＆ウェイ，Ｅ．Ｌ．：クアンティテーティブ・アスペクツ・オブ・プレシピテーティット・アブスティネンス・イン・モルヒネ− ディペンデント・ラッツ。ジャーナル・オブ・ファーマコロジカル・エクスペリメンタル・セラピー、１８４：３９８−４０３、１９７３。Ｗ．Ｈ．Ｏ．エクスパート・コイミッティー・オン・ディペンデンスープロデューシング・ドラッグス、ＷＨＯテクニカル・レポート・シリーズ、Ｖｏｌ．３４３、５頁、１９６６。ウィンガー，Ｇ．、スクヨルデージャー，Ｐ．＆ウッズ，Ｊ．Ｈ．：エフェクツ・オブ・ブプレノルフィン・アンド・アザー・オピオイド・アゴニスツ・アンド・アンタゴニスツ・オン・アルファンタニルーアンド・コカイン−レインフォースド・レスポンディング・イン・リーザス・モンキー、ジャーナル・オブ・ファーマコロジカル・エクスペリメンタル・セラピー、２６１：３１１−３１７、１９９２。実施例１培養における知覚後根神経節ニューロンの活性保有期間に対するエトロフィンおよびジヒドロエトロフィンの選択的阻害であるが、興奮性でない作用組織培養：実験は、培養物の成熟の３〜５週間後に付着ＤＲＧを有する脊髄（１３日齢胎児マウス由来）の体外移植組織の後根神経節（ＤＲＧ）ニューロンで行った。ＤＲＧ−索体外移植組織は、マキシモー抑制スライド室内のコラーゲン被覆カバースリップ上で成育させた。培養培地は、イーグル最小完全培地６５％、ウシ胎児血清２５％、トリ肺抽出物１０％、グルタミン２mMおよびグルコース０．６％からなった。インビトロで最初の週の間、培地に神経成育因子（ＮＧＦ −７ｓ）を、約０．５μg／mlの濃度で添加し、胎児マウスＤＲＧニューロンの生存及び成育を促進させた。電気物理学的記録：培養物カバースリップを、５mMＣａ²⁺および５mMＢａ²⁺（ＢＳＳ）を添加した約１mlのハンクス平衡塩溶液を含む記録室に移し、薬理学的試験の突出基底反応を得た。細胞内記録は、マイクロピペットプローブにより神経節内の無作為に選択されたＤＲＧペリカーヤから得た。マイクロピペットは、３ＭＫＣｌ（約６０−１００メグオーム耐性）で満たし、電流クランプ記録のために塩素化銀ワイアーにより、中和インプット能力予備増幅装置（Axoclamp 2A）に接続した。ＤＲＧニューロンの固定後、短い（２msec）脱分極電流パルスを、記録電極を経由して適用し、活動ポテンシャルを誘発した（０．１hzの頻度で）。活動ポテンシャルの記録は、ｐ−クランププログラム（Axon Instruments）を使用して、マイクロコンピューター（ＩＢＭＡＴ−互換性）でフロッピーディスクに保存した。薬物試験：薬物は、手で操作する押引シリンジ系を使用して、２−３ml／分の速度で浴還流して適用した。試験剤の還流は、活動ポテンシャルおよびニューロンの残ったポテンシャルが対照ＢＳＳにおいて＞４分の予備試験期間中に安定状態に到達した後に開始した。ＡＰＤ内のオピオイド−伝達変化は、ＡＰＤ変化が、同様の細胞に対して対照値の＞１０％であり、試験期間中（約５分）ずっと維持されれば、有意と見なした。ＡＰＤは、ＡＰＤのピークと再分極相の屈曲点の間の時間として測定した。オピオイド反応：ＤＲＧニューロンのオピオイド反応は、ＤＲＧペリカーヤ中のＡＰＤのオピオイド誘発変化の測定により分析した。ＤＲＧ−索外移植組織中のＤＲＧニューロンは、エトロフィンまたはジヒドロエトロフィンのfMからμＭの濃度の急性適用に対する感受性を試験した。細胞（ｎ＝１２）は、１fMエトロフィンでＡＰＤ短縮または延長を示さなかった。しかしながら、ナロキソン−可逆性ＡＰＤ短縮がpMおよびnM濃度のエトロフィン適用後に２５％の細胞（ｎ＝８）で、μM濃度のエトロフィン適用後に１００％（ｎ＝７）の細胞で観察された（図３および４）。種々の濃度のエトロフィンで試験したＤＲＧニューロン（ｎ＝１３）は全てＡＰＤ延長を示さなかった。これらの結果は、他のミュー、デルタまたはカッパーオピオイド（例えばモルヒネ、メサドン、ＤＡＧＯ、ＤＰＤＰＥ、ＤＡＤＬＥ、ジノルフィン（アミノ酸１−１３）または（アミノ酸１−１７）およびＵ−５０、４８８Ｈ）と明らかに対照的であり、そのいずれも、多くのＤＲＧニューロンに対する低濃度（＜nM）興奮性ＡＰＤ−延長効果と高濃度（^-μM）抑制性ＡＰＤ短縮効果の二頂作用を示す（図４；表１）。図４について、データはエトロフィン試験の１１ニューロンから得られ、その半分は全ての４つの濃度のエトロフィンで試験した（fMからμMまで）。エトロフィンの様に、ＤＲＧニューロン（ｎ＝１５）に対するジヒドロエトロフィンによる電気物理的試験（fM−μM範囲にわたる）は、濃度依存性阻害的ＡＰＤ短縮効果を、fM−pMの閾値で示し、明白な興奮性ＡＰＤ延長効果は示さなかった（図４）。実施例２二頂作用オピオイドアゴニストの興奮性効果およびナロキソンに超過敏となった慢性オピオイド処理した、耽溺知覚ニューロンに対するエトロフィンの抑制促進効果薬物試験：実施例１に記載のように＞３週間成育させたマウスＤＲＧ−索体外移植組織を、二頂作用（興奮／抑制）デルタ／ミューオピオイドアゴニスト、ＤＡＤＬＥ（３μM）またはモルヒネ（１μM）に１週間またはそれ以上慢性的にさらした。電気物理的記録を、実施例１のように行った。結果：このような慢性的暴露の後、ＤＲＧニューロンはオピオイドの興奮効果に超過敏である（クライン＆シェン１９９２ａ；クライン＆シェン、１９９２）。一方、pM−nM Ｄｙｎ（アミノ酸１−１３）は、ナイーブなＤＲＧニューロンの延長を一般的に必要とし（図４）、fM濃度およびそれ以下は、慢性オピオイド処理の後のＡＰＤの延長に有効である（図５、線１−４）。対照的に、慢性ＤＡＤＬＥ−処置ニューロンへのエトロフィンの急性適用は、低濃度の二頂作用オピオイドに対して超過敏興奮反応を示す同じＤＲＧニューロンのＡＰＤを有効に短縮する（図５、線６−９）。更に、ＤＲＧニューロンにおけるエトロフィンの阻害的ＡＰＤ短縮効果は、有意に促進されるようである。pMエトロフィンがナイーブな外移植中で試験したＤＲＧニューロンの２５％のＡＰＤの短縮に有効であるが（図３および４）、この低オピオイド濃度は１μMＤＬＥの存在下で試験した全ての慢性ＤＡＤＬＥ−処置ＤＲＧニューロンで有効であった（ｎ＝４；図５、線５および６）。この同様の低濃度（pM）のエトロフィンは、１μg／mlモルヒネの存在下、慢性モルヒネ−処理（１μg／ml）ＤＲＧニューロンの７１％に有効であった（ｎ＝７）。慢性ＤＡＤＬＥ−処理ＤＲＧニューロンの用量依存試験は、実際、ＡＰＤの大きさが、急性エトロフィン濃度が連続的に１fMから１μM に増加した場合、徐々に短縮されることを示す（図５、線６−９）。オピオイドアゴニスト、ナロキソン（nM−μM）はナイーブなＤＲＧニューロンのＡＰＤを変えない（クライン＆シェン１９９２ａ、ｂ）。対照的に、慢性の、ＤＡＤＬＥのようなオピオイドの処置の後、低濃度のナロキロンの急性投与は知覚ニューロンのＡＰＤを延長する（クラインら、１９９２ｂ；シェン＆クライン、１９９２）。慢性オピオイド処置ＤＲＧニューロンにおけるナロキソン誘発興奮ＡＰＤ−延長効果は図６、線１および２に示す。低濃度のエトロフィン（pM− nM）の急性投与は、ＤＲＧニューロンのナロキソン誘発ＡＰＤ延長を有効にブロックするが（ｎ＝３；図６、線３および４）、二頂作用オピオイドは有効でない。エトロフィンおよびジヒドロエトロフィンは、ナイーブな知覚ニューロンを、極端に低濃度（pM）で投与した場合でさえ有効な阻害効果を惹起し、これらの細胞のオピオイド受容体を同時に興奮的に活性化する徴候を示さないので、これらのインビトロ電気物理的分析は、エトロフィンおよびジヒドロエトロフィンのインビボでの無痛覚を得るのに必要な相対的に低い濃度（モルヒネより＜１，０００倍低い）での投与は、慢性疼痛の処置のための継続投与の後でさえ、耽溺性でないことを予期する。実施例３モルヒネ依存ラットにおけるＤＨＥによる禁断症状の抑制モルヒネ依存ラットモデル：両方の性、１２０−１５０ｇ体重のウィスターラットに、皮下的（s.c.）に１日２回（午前８：００、午後４：００）に、２０mg ／kg／日の量から開始して、５日の連続した日で２０mg／kg／日づつ、最終用量１００mg／kg／日になるように増加しながら投与した。禁断症状の採点のためのナロキソン（ＮＬＸ）促進：最終用量のモルヒネ（または他の試験薬）を投与した３−４時間後に、モルヒネ依存ラットの禁断症状は、ナロキソン（４mg／kg）の腹腔内（i．p.）注射により促進された。ナロキソン誘発禁断症状は、その後１時間追跡し、ワイら、１９７３の方法に従って採点した。動物群：モルヒネ耽溺５日後、動物を表２に従って７群に分けた。各々の群は５−６匹のラットを含む。１、２および３群は２０mg／kgモルヒネ（無痛覚のＥＤ₅₀の４倍）、９mg／kg メサドン（無痛覚のＥＤ₅₀の９倍）または６μg／kgＤＨＥ（無痛覚のＥＤ₅₀の１２倍）を、それぞれi.p.注射により投与した。これらのオピオイドアゴニストは、ナロキソン促進が開始される１５−３０分前に注射した。ナロキソン禁断症状試験が完了した後、１、２および３群は、更に４日間モルヒネ１００mg／kg（ s.c.）投与を継続した。第２のナロキソン促進試験を４日目に行ったが、ナロキソンの前に食塩水のみを投与（i.p.）した。最初のナロキソン促進試験は、４、５および６群で、ナロキソン試験の１５− ３０分前のオピオイドアゴニスト投与以外、１−３群と同様の方法で行った。第２のナロキソン試験において、４、５および６群は、それぞれモルヒネ１００mg ／kg（s.c.）を１日２回、ＤＨＥ３μg／kg１日４回、またメサドン６mg／kgを１日４回、モルヒネ１００mg／kgの変わりに４日間投与された。第２のナロキソン試験は、上記のように４日目に行った。最初のナロキソン促進試験の後、７群の動物に食塩水（s.c.）を対照として、第２のナロキソン試験の４日前に投与した。動物の体重は、全期間中追跡した。結果：ナロキソンの腹腔内注射から２分後、モルヒネ依存ラットは、１５分内にピーク反応を示すナロキソン誘発禁断症状を示し始めた。１時間後、動物の体重は非常に減少した。ナロキソン投与前のモルヒネ（２０mg／kg）、ＤＨＥ（６ μg／kg）またはメサドン（９mg／kg）の腹腔内注射は、ラットのナロキソン誘発禁断症状を抑制した。これらの３つのオピオイド物質間で抑制の効果の有意な差は検出されなかった。モルヒネ、ＤＨＥおよびメサドンについて、体重減少の防止はそれそれ４３．５％、４９．８％および４８．１５％であり、他の禁断症状の抑制は、それぞれ４５．５％、６３．７％および４９．４％と採点された。ナロキソン促進の後、依存ラットの体重は、減少し続けた。体重の損失は、ナロキソン促進２４時間後に最大に到達した。段階的な体重の回復は、９０時間で達成された。モルヒネ、ＤＨＥまたはメサドンの皮下注射は、最初のナロキソン促進試験の数日後に行った。モルヒネ依存ラットの体重減少は、オピオイドアゴニストで試験した３群全てで減少することが分かった。モルヒネの皮下投与（ナロキソン促進１時間後）は、体重減少を３時間で回復させ、あるラットでは時々体重増加もあった。完全な体重減少の回復は、４８時間後に見られた。ＤＨＥまたはメサドンの皮下注射の体重減少に対する効果はモルヒネほど劇的ではなかった。しかしながら、両方のオピオイドは、更なる体重減少を防止した。未処置対照群（食塩水注射）と比較した場合、ＤＨＥまたはメサドンの体重減少に対する作用は非常に著しかった（図７）。最初のナロキソン促進試験の後、数匹の動物はモルヒネ（s.c.）の継続を続けた。４日後、２のナロキソン試験を行った。第２のナロキソン試験は、最初の試験と比較して更に深刻な禁断症状をもたらした。比較して、モルヒネの代わりにＤＨＥ（s.c.、４日）処理した動物において、第２のナロキソン試験は、体重の僅かな損失以外、全ての禁断症状を促進することに失敗した。メサドンを維持した（s.c.）動物において、第２のナロキソン注射はモルヒネ群と比較してひどくなく禁断症状を促進をしたが、ＤＨＥ群と比較した場合、よりひどかった（図８および９）。実施例４モルヒネ依存サルのＤＨＥ処理の抗耽溺効果モルヒネ依存サルモデル：７匹の雄アカゲザル（マカカ・ムラッタ、３．４− ５kg）に、モルヒネ（s.c.）を１日２回（午前８：００、午後４：００）、１０ mg／kg／日で開始し、２４日目に５０mg／kg／日に到達するまで、３日毎に５mg ／kg／日づつ増加させ、注射した。この用量は、薬物試験を行う前に１０日間続けた。１段階薬物試験：サルを無作為に２群に分けた。モルヒネの禁断２４時間後、Ａ群（４匹の動物）にＤＨＥ３μg／kg（s.c.）を３時間毎に投与した。ＤＨＥ投与間の間隔を、３日目にＤＨＥを１日２回のみ投与するように増加させ、次いで観察の２日目に停止した。Ｂ群（３匹の動物）は、本群がＤＨＥの代わりに食塩水を投与される以外、Ａ群と同様に処理した。これらの試験の完了の後、全ての動物を、モルヒネ５０mg／kg／日（s.c.）１日２回投与することにより連続１２日間モルヒネで処理した。本試験は、Ａ群が対照食塩水を投与され、Ｂ群がＤＨＥ処理を受ける以外繰り返した。動物の禁断症状をデニュー＆シーバーズ（１９６４）に従って、実験期間中観察し、採点した。モルヒネの禁断１６時間後、モルヒネ依存サルで禁断症状が現れ始めた。症状は最初穏やかで、あくび、唾液分泌、興奮および恐れを含んだ。これらの徴候は時間が経つに連れてひどくなった。モルヒネの禁断２０−６０時間内に、動物の禁断症状は、嘔吐、震え、鎖上での歯軋り、閉眼、横向きに寝ることおよび呼吸困難を含んだ。これらの全ての症状は、極端な興奮の指標である。６０時間後、これらの症状は段階的に減少した。モルヒネ禁断１２０時間後、幾つかの緩和な禁断症状はまだ検出された（図１０）。１週間後、全ての禁断症状は消滅した。明らかに対照的に、これらの全ての禁断症状は、ＤＨＥ（３μg／kg s.c.）によりその投与１分後に完全に抑制された。２時間半から３時間後、禁断症状が再発し、これは別のＤＨＥ投与により再び抑制された（図１１）。このＤＨＥのモルヒネ禁断症状に対する抑制効果は、それぞれのサルで観察された。ＤＨＥは、２．５−３時間間隔の繰り返し注射により、３−４日間、禁断症状の抑制を有効に継続した。モルヒネ禁断８０時間後のＤＨＥ注射の中止は、禁断症状を誘発せず、動物は、この置換処理の間にＤＨＥに依存になっていないことを示した。２段階薬物試験：１段階実験の後、全ての７匹のサルに、モルヒネ（s.c.）を５０mg／kg／日の用量で７日間投与した。モルヒネ耽溺サルを、次いで、無作為３群に分けた。１群は、モルヒネ２５mg／kgのs.c.注射を１日２回、９日続けた。２群は、ＤＨＥ３μg／kg（無痛覚量と同じ）の１日４回４日間、ＤＨＥ１．５μg／kg１日３回２日間、次いで１日２回３日間のｓ．ｃ．注射により、ＤＨＥに代えた。３群は、メサドン６mg／kg（無痛覚量と同じ）の１日３回４日間、３mg／kg１日３回２日間、次いで１日２回３日間のs.c.注射により、メサドンに代えた。オピオイドの最後の注射１６時間後に、各々動物をナロキソン（１mg／kg s. c.）で促進し、１日のナロキソン禁断症状のひどさを評価した。７日後、これらのサルにおいて、１日、別のナロキソン促進試験を行った。全試験の完了後、３匹のサルを無作為にモルヒネ耽溺用に選択した（２５mg／kg、s.c.、１日２回７日間）。ナロキソン促進試験は、この３匹のサルで２回行い、最初の試験はモルヒネの最後の注射後に行い、第２の試験はその７日後に行った。ＤＨＥおよびメサドンの活性期間は比較的短いので、幾つかの緩和な禁断症状が最初の３日間、６時間間隔の注射の間に現れた。この３日後、禁断症状は弱くなって行き、徐々に消えた。ナロキソン促進試験は、ＤＨＥまたはメサドンによる置換処理の９日後に行った。モルヒネを維持しているサルに関し、ナロキソン注射は一連の禁断症状を１５秒後に促進した。これらの症状はキーキー鳴くこと、せき、ころがること、震え、嘔吐、興奮、鎖上の歯軋り、呼吸困難および最後には地上に寝ころぶことを含んだ。動物は７日後までに回復した。メサドンで置換したサルは、あくび、腹部に手を置くこと、四肢の震え、鎖上での頻繁な歯軋りおよび興奮を含む緩和な禁断症状を示した。しかしながら、ＤＨＥで置換したこれらの動物は、ナロキソン促進前および後で行動に変化を示さなかった。表３は、異なる３群のサルのナロキソン禁断症状の得点を示す。一度モルヒネが完全に体から排出されれば（禁断７日後）、ナロキソンは禁断症状をもはや促進しなかった。ナロキソン促進試験は、これらの動物がモルヒネ依存か、代替オピオイドに依存となったか否かの評価のために使用した。図１２は、強制禁断と比較して、ＤＨＥまたはメサドン置換後のサルにおける禁断症状の得点の変化を示す。強制禁断群において（上の線）、禁断症状は最初の数日間で最大に達するが、突然のモルヒネ禁断から７日後にはゼロに戻った。９日目には、ナロキソンはもはや禁断症状を促進しなかった。メサドン置換群（真ん中の線）において、最初の数日間の禁断症状は部分的に抑制された。９日目に、ナロキソンは禁断症状を促進し、動物が既にメサドン依存に移行したことを示唆する。ＤＨＥ置換群（下の線）において、僅かな禁断症状のみが観察された。９日目のナロキソン促進試験は、いかなる禁断症状をも誘発しなかった。これらの結果は、ＤＨＥが、オピオイド禁断問題の処置のための理想的な低−または非耽溺代替薬であることを示唆する。実施例５急性および慢性疼痛患者においてＤＨＡは有効な低または無耽溺性無痛覚症を誘発する第１相臨床試験の結果は、２０名のボランティア全員が舌下経路で、６０μg の単一用量でＤＨＥ投与後に愉快な感じを持たなかった。高投用量（例えば１日当たり＞１mg）では、めまい、吐き気、嘔吐および昏睡が見られた。第２相臨床試験の結果は、ＤＨＥが手術後の疼痛および癌の末期の疼痛を有効に緩和することができることを証明した。完全な医学的記録を有する７３０例の有効率は９７．６％であった。これらの中で、手術、産科および婦人科学の領域の患者における急性疼痛の有効率は殆ど１００％に近付いた。慢性のひどい疼痛および癌末期疼痛を緩和する有効率は９０−９５％であった。臨床データは、ＤＨＥの無痛覚効果が、実際に僅かな副作用のみを伴うことを示す。ＤＨＥ処置は、モルヒネまたはペシジン（デメロール）処置に反応しないこれらの癌末期患者に有効であった。ＤＨＥに対する交差耐性はこれらの患者で見られなかった。ＤＨＥの長期使用は耐性をもたらす；しかしながら、耐性の割合はモルヒネまたはペシジンで見られるものより少ない。ＤＨＥの臨床処置は、中国で１００，０００名以上の患者で行われた。鎮痛剤として、ＤＨＥの主な欠点はその短い活性期間（約３−４時間）である。モルヒネと比較して、ＤＨＥは高い沈痛効果と低い耽溺性を有するが、一方モルヒネは相対的に長い沈痛効果と高い耽溺性を有する。ＤＨＥを鎮痛剤として使用する長年の試験の間に、薬物乱用は全く報告されなかった、この現象は、ＤＨＥ処置の厳格な制御に帰する。通常の痛みに対する薬物治療期間は典型的には１週間に限定されている；一方、末期癌疼痛の患者については、処置期間はもっと長い。数人の患者の数名が長期使用の後ＤＨＥ耐性となったが、僅かな患者が長期間使用後に本薬物に耽溺となり得るのは僅かな機会である（例えば＞６カ月）。実施例６ＤＨＥ置換処理は麻酔剤耽溺における禁断症状をＤＨＥ耽溺を伴うことなく抑制する一般的プロトコール：代替薬としてのＤＨＥ治療の制度は、禁断症状を完全に抑制するために、十分な量で１−３日目に開始した。４−７日目には、用量を減少し、８−１０日目までに、ＤＨＥ代替治療を終了した。このプロトコールは、（１）禁断症状がヘロインまたは他の耽溺性オピオイドの完全な禁断後の最初の３日間が最もひどい；（２）禁断症状は徐々に減少し、７−１０日後に消滅する；および（３）ＤＨＥの代替剤としての７−１０日の連続使用は、自己依存性を産生しないという理由に従う。ＤＨＥ投与：慢性ヘロイン使用者の３００以上のケースを、中国の１０の病院で７−１０日間ＤＨＥで処置した。ＤＨＥは錠剤形での舌下（４０μg）または筋肉内注射（２０μg）または静脈内点滴（２０μg）のいずれかで投与した。錠剤形を最も頻繁に使用した。禁断症状の始まりにおいて、ＤＨＥの１−２個の錠剤（２０−４０μg）の舌下投与は、有効に症状を抑制した。禁断症状の持続した抑制は、２−４時間毎のＤＨＥ反復投薬を必要とした。全投与量は、禁断症状のひどさによって調整した。典型的には、ＤＨＥ投薬治療４日後、禁断症状抑制に必要な用量は一般に減少した。ＤＨＥ置換の全コースは、一般に７日であった。（ＤＨＥの過投薬の例の場合、呼吸の副作用が発生した。）禁断症状が非常にひどく、暴力的であってそれを経験するのに舌下投与では十分でない耽溺者には、ＤＨＥの筋肉注射（２０μg）が代替救援として行われた。耽溺者は、一般的に静かに協調的になった。しかしながら、治療効果を維持するために、ＤＨＥの静脈内点滴投与（６−１０時間で５００mlグルコース食塩水中１００μg）を必要とした。輸注速度は症状のひどさに依存する：点滴速度は、患者が不安の徴候を示した場合増加し、患者が静かになり、無気力について不平を言う場合減少させた。ひどい場合、ＤＨＥの静脈内点滴を、投与量を次第に減少しながら３−４日持続した。４または５日目に、ＤＨＥの静脈内点滴を舌下ＤＨＥ投与に代え、７日目に終了した。時々、処置は８−９日まで延長したが、可能性のある依存の発生を防止するために、１０日以上になることはなかった。従って、この最適７−１０日処置期間使用することにより、ＤＨＥは有効に薬物耽溺治療の代替薬として使用される。ＤＨＥ置換処置の効果は、１０日目に、ナロキソン促進試験（０．４−０．８ mgナロキソン、筋肉内注射）およびオピオイドの残量の尿分析により評価した。処置コースは、両方の試験が陰性の場合、成功と見なした。ＤＨＥのメサドン代替治療以上の主要な利点の一つは、ＤＨＥ効果の早い発生である。禁断症状はＤＨＥの舌下投与の１０−２０分後または筋肉内注射の５分後に著しく緩和された。対照的に、メサドン代替においては、最初の用量は通常１０mgで開始し、治療効果が得られるまで、毎時間増加する。このような処置は、症状が緩和される前の１乃至数時間続けることができる。この期間はひどい禁断症状の患者にとって耐え難い。更に、メサドン代替治療は、禁断症状の反動をしばしばもたらし、メサドン依存を示唆する。対照的に、ＤＨＥ投与の中断は、一般に滑らかに進行した、メサドンによる場合のように、ＤＨＥの副作用は、薬物耽溺に対する代替処理の間無視し得た。ＤＨＥが短い活性（僅か２−４時間）であるため、頻繁な投与が必要であり得る。これを避けるため、ＤＨＥの静脈内点滴が推奨される。しかしながら、静脈内投与は病院において処方されうるのであって、通常の薬物リハビリテーションクリニックでは適用できない。メサドンは経口で有効であるため（１日１回または２回）、１つの別法は、ＤＨＥとメサドン処置の組み合わせである。例えば、ＤＨＥを最初に禁断症状の速い制御に使用し、次いで２−３日抑制効果を持続させるためにメサドンに切り替える。次いでこの処置を、ＤＨＥをもはや必要としなくなるまで、減少投与量レジメによりＤＨＥに戻す（通常更に５−１０日）。この複合治療は、安全で、実際的で、便利である。実施例７以下の合成経路（図１５）に従って、ジヒドロエトロフィン塩酸塩を、テバイン［化合物１］を出発物質として製造した。（ａ）７”−アセチル−６，１４−エンド−エテノ−ジヒドロテバイン［化合物２］の製造テバイン（４９．８ｇ、０．１mol、化合物１）およびメチルビニルケトン（１５０ml）の混合物を、２５０ml丸底フラスコ中で１時間還流した。過剰のケトンを減圧下留去した。温メタノール（６０ml）を添加し、濃厚油を溶解した。冷却下、結晶生成物が産生し、それを濾過し、氷冷メタノールで２−３回洗浄し、乾燥した。固体（５６．６ｇ、収率９３％）が得られた、ｍ．ｐ．１２０−１２２℃。（ｂ）７”−アセチル−６，１４−エンド−エタノ−テトラヒドロテバイン［化合物３］の製造化合物［２］（１９．１ｇ、０．０５mol）、１０％Ｐｄ／Ｃ（４ｇ）および無水アルコール（２００ml）の混合物を、水素圧４０−５０kg／cm²下、５５− ６０℃で、８−１２時間攪拌しながら、触媒的に水素化した。触媒を濾取し、濾液を濃縮した。冷却後、結晶生産物を回収し、無水アルコールで洗浄した。白色固体（１５．７ｇ、収率８２％）が得られた、ｍ．ｐ．１３５−１３７℃。（ｃ）７”−［１−（Ｒ）−ヒドロキシ−１−メチルブチル−６，１４−エンド −エタノ−テトラヒドロテバイン［化合物４］の製造グリニヤール試薬を、１１００ml無水エーテル中のブロモプロパン（１２７．９ｇ、１mol）およびマグネシウム（２４．３ｇ、１mol）の反応により製造した。１１００mlのベンゼン中の化合物［３］（９９．７ｇ、０．２６mol）を、激しく攪拌しながら還流下滴下した。反応混合物を更に２時間攪拌および還流した。飽和塩化アンモニウム溶液を混合物中に注ぎ、有期層を分離した。水性相をエーテルで数回抽出した。合わせたエーテル抽出液を洗浄液が中性になるまで水で洗った。抽出液を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を蒸発させた後、粗生産物を無水アルコールから再結晶した。白色固体（７５−７９ｇ、収率６７−７１％）が得られた、ｍ．ｐ．１８４−１８６℃。（ｄ）７”−［１−（Ｒ）−ヒドロキシ−１−メチルブチル］−６，１４−エンド−エタノ−テトラヒドロオリパビン［化合物５］の製造化合物［４］（８５．５ｇ、０．２mol）、ジエチレングリコール（１７００m l）および水酸化カリウム（６１６ｇ）の混合物を、四首フラスコに入れた。低沸点物質を窒素流中で留去した後、反応混合物を内部温度２００−２１０℃で加熱し、１４−１６時間攪拌した。得られた混合物を１０ｌの水に注ぎ、それを溶解した。固体が完全に分離するまで、好適な量の塩化アンモニウムを添加した。固体を濾過し、水で洗浄液が中性になるまで洗浄し、乾燥し、無水エーテルで抽出した。エーテルを留去した後、粗生産物をメタノールから再結晶した。純粋な化合物（５４−５８ｇ、収率６６−７０％）が得られた、ｍ．ｐ．２０４−２０６℃。化学およびスペクトル分析：Ｃ₂₅Ｈ₃₅ＮＯ₄ 計算値：％Ｃ７２．６３Ｈ８．５３Ｎ３．３８実測値：％Ｃ７２．４０Ｈ８．６５Ｎ３．２２Ｍ⁺：４１３（ｅ）ジヒドロエトロフィン塩酸塩［化合物６］の製造遊離塩基［５］（１４ｇ、０．０３４mol）を無水アルコール（４００ml）および無水エーテル（６４０ml）の混合溶媒に溶解した。乾燥塩化水素飽和エーテルを、溶液が酸性（ｐＨ＝２）になるまで、滴下した。無水エーテル２００mlを添加後、結晶固体が形成した。白色固体を回収し、無水エーテルで洗浄し、乾燥した。所望の最終生産物（１４−１４．５ｇ、収率９２−９４％）が得られた、ｍ．ｐ．２９７−２９８℃、［α］¹⁰−６５。化学およびスペクトル分析：Ｃ₂₅Ｈ₃₅ＮＯ₄・ＨＣｌ計算値：％Ｃ６６．７２Ｈ８．０６Ｎ３．１１実測値：％Ｃ６６．７０Ｈ８．１５Ｎ３．０９実施例８種々のジヒドロエトロフィン（ＤＨＥ）塩の製造およびそれらの鎮痛効果の持続期間および効力の分析合計２６種のジヒドロエトロフィン（ＤＨＥ）塩が、下記列記の種々の酸がＨＣｌで置換されている以外、実施例７の工程（ｅ）に従って製造された。Ｉ．ジヒドロエトロフィン塩誘導体を形成するのに使用された２６種の酸の構造先に記載された（ハングおよびキン、１９８２）ような“マウス・ホット・プレート”（５５℃±０．５℃）法を、無痛覚％を測定するのに使用し、動物に皮下的に注射されたそれぞれのＤＨＥ塩の有効性を測定した。ＥＤ₅₀（以下の式に従って計算された５０％無痛覚を起こす値）は、表４に示すＤＨＥ塩で測定した。ＥＤ₅₀の用量は、対応する鎮痛期間の測定に、各々の塩で使用した。“無痛覚％”は、投与後９０、１２０及び１５０分で測定した（表５）。要約において、０．５０から２．０の範囲のＥＤ₅₀（μg／kg）は、１２種の試験したＤＨＥ塩で観察され、これらの塩で同等なレベルの鎮痛覚効果が与えられることを示唆した（表４に示すデータ参照）。更に、アセチルＤＨＥ、ＤＨＥマレイン酸塩およびＤＨＥアミグダリン酸塩以外、全てのＤＨＥ塩は１２０−１５０分の期間で同等レベルの無痛覚を示した。実施例９ジヒドロエトルフィン塩酸塩の薬物製剤は、注射可能滅菌溶液および舌下錠剤を含む。（ａ）注射可能ジヒドロエトロフィン塩酸塩の製造この注射可能物は、滅菌水性溶液中の薬物製剤である。その外観は透明で無色である。各々のアンプルは１mlの溶液中２０μgの上記化合物を活性成分として含む。処方は以下の通りである：ジヒドロエトロフィン塩酸塩２０mg ０．０１Ｎ塩酸塩１０００mlまで（ｂ）ジヒドロエトロフィン塩酸塩舌下錠の製造舌下錠の外観は白色である。各々の錠剤は２０μgまたは４０μgの上記化合物を活性成分として含む。例えば、１錠当たり４０μgの１００００錠剤の処方は以下の通りである：ジヒドロエトロフィン塩酸塩４００mg ラクトース:澱粉:マンニトール:シュークロース（3:1:3:3）６００ｇカルボキシメチルセルロースナトリウム（１％水性溶液）１８ml エチルアルコール（５０％）２４ml ステアリン酸マグネシウム６ｇ上記の処方に従って、ジヒドロエトロフィン塩酸塩の指示された量を秤量し、５０％エチルアルコール中に溶解した。本溶液を、均一性を増加させるために機械的に攪拌しながら賦形剤へ滴下した。その間に、１％カルボキシメチルセルロースナトリウム溶液を滴下した。このようにして形成された柔らかい材料を２０メッシュふるいを通してふるい分けし、同様の操作を３回繰り返した。次いで、生産物を６０℃のオーブンで乾燥させた。ステアリン酸マグネシウムを錠剤に潤滑剤として添加した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (31)優先権主張番号０８８，５０３ (32)優先日 1993年７月７日 (33)優先権主張国米国（ＵＳ） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＣＡ，ＪＰ (71)出願人クライン、スタンレイ・エムアメリカ合衆国07605 ニュー・ジャージィ、レオニア、リンデン・テラス 10番 (71)出願人マオ、ファン中華人民共和国100850 ベイジン、タイピング・ロード 27番、アカデミィ・オブ・ミリタリィ・メディカル・サイエンシズ (71)出願人ウォン、チャン・イアメリカ合衆国11021 ニューヨーク、グレート・ネック、ヒルパーク・アベニュー 159番 (72)発明者キン、ボーイ中華人民共和国100850 ベイジン、タイピング・ロード 27番、アカデミィ・オブ・ミリタリィ・メディカル・サイエンシズ (72)発明者シェン、ケーフェイアメリカ合衆国11355 ニューヨーク、フラッシング、サンフォード・アベニュー 144―30番 (72)発明者ゴン、キオン−ジ中華人民共和国100850 ベイジン、タイピング・ロード 27番、アカデミィ・オブ・ミリタリィ・メディカル・サイエンシズ (72)発明者クライン、スタンレイ・エムアメリカ合衆国07605 ニュー・ジャージィ、レオニア、リンデン・テラス 10番 (72)発明者マオ、ファン中華人民共和国100850 ベイジン、タイピング・ロード 27番、アカデミィ・オブ・ミリタリィ・メディカル・サイエンシズ (72)発明者ウォン、チャン・イアメリカ合衆国11021 ニューヨーク、グレート・ネック、ヒルパーク・アベニュー 159番

Claims

【特許請求の範囲】１．その化合物が約フェムトモル（ｆＭ）から約マイクロモル（μＭ）まで及ぶ濃度で存在する場合、オピオイドレセプター伝達作用に対し抑制効果を喚起することができて該作用に対し、興奮効果を喚起することができない化合物を確認することを含む、低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤を確認するためのインビトロスクリーニング方法。２．該化合物が、細胞培養スクリーニングアッセイにおいて、コントロール条件に対応する該化合物により惹起される知覚ニューロンの活性保有期間（ＡＰＤ）を記録すること；該化合物を約ｆＭないし約μＭの濃度範囲でアッセイすると、該ＡＰＤを短縮し、そして該コントロール条件からＡＰＤに対応する該ＡＰＤを延長しない化合物を選択すること及びそれにより該低又は非たんでき性鎮痛剤を確認することにより確認される、請求項１の方法。３．該細胞培養スクリーニングアッセイが、後根神経節（ＤＲＧ）ニューロンを該化合物に爆露すること、細胞内脱分極流を該ＤＲＧニューロンに適用すること、及び該ＡＰＤを記録することを含む、請求項２の方法。４．該化合物が約フェムトモルｆＭから約μＭに及ぶ濃度で存在する場合、オピオイドレセプター伝達作用に対し、抑制効果を喚起することがてきて、該作用に対し興奮効果を喚起することができない非たんでき性オピオイド鎮痛剤。５．該鎮痛剤がエトロフィン、ジヒドロエトロフィン又はオーメフェンタニルである、請求項４の鎮痛剤。６．請求項１の方法により生成される非たんでき性オピオイド鎮痛剤。７．請求項４ないし６のいずれか一つの非たんでき性オピオイド鎮痛剤の有効量を、該オピオイドたんできの禁断症状を緩和又は抑制するのに十分な第一の時間、患者に投与すること、次いで減少する量の該鎮痛剤を該鎮痛剤から該患者を引き離すのに十分な第二の時間、投与することを含むオピオイドたんできを処置する方法。８．該鎮痛剤がエトロフィン、ジヒドロエトロフィン又はオーメフェンタニルである、請求項７の方法。９．該量が１日当り約１０μgから約１，０００μgまでである、請求項７又は８の方法。１０．該第一の時間が約１から約５日までであり、該第二の時間が約１から約７日までであり、そして該第一の時間と該第二の時間の合計が約２から１２日までである、請求項７、８又は９の方法。１１．約４０ないし約５００μgのジヒドロエトロフィンを患者に約１ないし約３日間投与すること、減少する量のジヒドロエトロフィンを続く約４ないし７日間投与すること、及び該ジヒドロエトロフィンの最初の投与後、約１０日までそれ以上ジヒドロエトロフィンを与えないことを含む、オピオイドたんできの処置方法。１２．有効量の非たんでき性オピオイド鎮痛剤を、該オピオイドたんできによる禁断症状の即時緩和又は抑制のために十分な第一の時間、患者に投与すること、有効量の返還オピオイドを該緩和又は該抑制を維持するのに十分な第二の時間投与すること、次いで減少する量の該非たんでき性オピオイド鎮痛剤を該鎮痛剤を該患者から引き離すのに十分な第三の時間投与することを含む、オピオイドたんできを処置する方法。１３．該非たんでき性オピオイド鎮痛剤の該第一投与と該置換オピオイドの該投与を同時に行う、請求項１２の方法。１４．該鎮痛剤がエトロフィン、ジヒドロエトロフィン又はオーメフェンタニルである、請求項１２又は１３の方法。１５．該鎮痛剤の該量が１日当り約１０μgないし約１，０００μgである、請求項１４の方法。１６．該返還オピオイドがメサドンである、請求項１２又は１３の方法。１７．該置換オピオイドの該量が約５から約１００mg／日までである、請求項１６の方法。１８．該第一の時間が約１から約３日までであり、該第二の時間が約１から約３日までであり、該第三の時間が約１から約８日までであり、そして該第一、第二及び第三の時間の合計が約３から約１４日までである、請求項１３の方法。１９．該第一と第二の時間が約２から約６日までの単一期間であり、そして該期間と第三の時間の合計が約３から約１４日までである、請求項１３の方法。２０．該非たんでき性オピオイド又は該返還オピオイドの該投与のいずれもが舌下、筋肉内又は非経口的である、請求項１２ないし１９のいずれか一つの方法。２１．有効量のジヒドロエトロフィンを、たんできないしに又は低たんできで疼痛を緩和又は抑制するのに十分な時間投与することを含む、急性又は慢性疼痛を処置する方法であって、該量は約１０μgないし約１，０００μgである。２２．急性疼痛のための該量が３ないし４時間毎に舌下投与される約２０ないし約６０μgである、請求項２１の方法。２３．慢性疼痛のための該量が３ないし４時間毎に舌下投与される約２０ないし約１００μgである、請求項２１の方法。２４．慢性疼痛のための該量が３ないし４時間毎に舌下投与される約１０ないし約３０μgである、請求項２１の方法。２５．慢性疼痛のための該量が３ないし４時間毎に舌下投与される約１０ないし約５０μgである、請求項２１の方法。２６．有効量の低又は非たんでき性オピオイド鎮痛剤と有効量の返還オピオイドを、たんできなしに又は低たんできで疼痛を緩和、抑制又は軽減するのに十分な時間、共同に投与することを含む、急性又は慢性疼痛を処置する方法。２７．該鎮痛剤がジヒドロエトロフィン、エトロフィン、オーメフェンタニル又はその製薬上許容されうる塩である、請求項２６の方法。２８．該鎮痛剤の該量が約１０μgないし約１，０００μgである、請求項２６の方法。２９．該鎮痛剤がジヒドロエトロフィンであり、そして急性疼痛のための該鎮痛剤の該量が舌下投与される約２０ないし約６０μgである、請求項２７の方法。３０．該鎮痛剤がジヒドロエトロフィンであり、そして急性疼痛のための該鎮痛剤の該量が舌下投与される約２０ないし約１００μgである、請求項２７の方法。３１．該鎮痛剤がジヒドロエトロフィンであり、そして急性疼痛のための該鎮痛剤の該量が筋肉内投与される約１０ないし約３０μgである、請求項２７の方法。３２．該鎮痛剤がジヒドロエトロフィンであり、そして急性疼痛のための該鎮痛剤の該量が筋肉内投与される約１０ないし約５０μgである、請求項２７の方法。３３．該返還オピオイドがモルヒネ、メサドン又はフェンタニルである、請求項２６の方法。３４．該返還オピオイドの該量が１日当り約５mgないし約１００mgである、請求項３３の方法。３５．該返還オピオイドがモルヒネであり、該鎮痛剤がジヒドロエトロフィン又はその製薬上許容されうる塩である、請求項２６の方法。３６．低又は非たんでき性オピオイド又はその製薬上許容されうる塩を製薬上許容されうる担体との混合物で含有する医薬組成物。３７．さらに返還オピオイドを含有する、請求項３６の医薬組成物。３８．さらにナロキソンを含有する、請求項３６の医薬組成物。３９．該非たんでき性オピオイドがジヒドロエトロフィン、エトロフィン、オーメフェンタニル又はその同族体である、請求項３６ないし３８のいずれか一つの組成物。４０．該非たんでき性オピオイドがジヒドロエトロフィン塩酸塩である、請求項３６ないし３９のいずれか一つの組成物。４１．該組成物が舌下錠用の投与量形で約２０μgないし約４０μgの該ジヒドロエトロフィン塩酸塩を含有する、請求項４０の医薬組成物。４２．該組成物が注射しうる投与量形で約２０μgないし約１００μgの該ジヒドロエトロフィン塩酸塩を該する、請求項４０の医薬組成物。４３．該鎮痛剤の該量が１日当り約１０μgから約１，０００μgまでである、請求項３７又は３８の医薬組成物。４４．該返還オピオイドがメサドン、モルヒネ、フェンタニル又はブプレモルヒネである、請求項３７の医薬組成物。４５．該返還オピオイドの該量が１日当り、約５mgから約１００mgである、請求項３７又は４４の医薬組成物。４６．該鎮痛剤がジヒドロエトロフィン又はその製薬上許容されうる塩であり、該返還オピオイドがメサドンである、請求項３７の医薬組成物。４７．該鎮痛剤がジヒドロエトロフィン又はその製薬上許容されうる塩であり、該返還オピオイドがモルヒネである、請求項３７の医薬組成物。４８．テバインと過剰のメチルビニルケトンを第一生成物を生成するのに十分な時間及び条件下に反応させて該第一生成物を回収すること；該第一生成物を接触水素化に付して第二生成物生成させ、該第二生成物を回収すること；該第二生成物を式ＲＭｇＸ（式中、Ｒは低級アルキル基であり、Ｘはハロゲンである）のグリニヤール試薬と第三生成物を生成する時間及び条件下に反応させて該第三生成物を回収すること；該第三生成物を強塩基と無水溶液中、ジヒドロエトロフィン又はその同族体を生成するのに十分な時間及び条件下に反応させることを含む、ジヒドロエトロフィン及びその同族体の製造方法。４９．Ｒがｎ−プロピルまたはiso−アミルである、請求項４８の方法。５０．該ジヒドロエトロフィン又は該同族体を酸と反応させて対応する塩を形成させること及び該塩を回収することを含む、請求項４８の方法。５１．過剰のメチルビニルケトンとテバインを、第一生成物を生成する時間及び条件下に反応させて該第一生成物を回収すること；該第一生成物を式ＲＭｇＸ（式中、Ｒは低級アルキルであり、Ｘはハロゲン基である）のグリニヤール試薬と第二生成物を生成する時間及び条件下に反応させて該第二生成物を回収すること；該第二生成物を強塩基と無水溶液中、エトロフィン又はその同族体を生成する時間及び条件下に反応させることを含む、エトロフィン又はその同族体の製造方法。５２．Ｒがｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−アミル、iso−アミル又はシクロヘキシルである、請求項５１の方法。５３．該エトロフィン又は該同族体を酸と反応させて対応する塩を形成させること及び強塩を回収することを含む、請求項５１の方法。