JPH08507501A

JPH08507501A - プロテアーゼ阻害活性を有するペプチドボロン酸誘導体

Info

Publication number: JPH08507501A
Application number: JP6519548A
Authority: JP
Inventors: クック、ニジェル・スコット; メッテルニヒ、ライナー; タッパレルリ、カルロ; ビーナンド、アネッテ
Original assignee: サンド・リミテッド
Priority date: 1993-03-03
Filing date: 1994-03-01
Publication date: 1996-08-13
Also published as: MY131622A; NZ262415A; TW329428B; KR960701085A; CA2153656A1; DE69403459D1; GR3023577T3; EP0688336A1; AU6208094A; AU677297B2; PL310940A1; WO1994020526A1; HUT72735A; SG52766A1; EP0688336B1; ATE153670T1; HU9501976D0; DE69403459T2; DK0688336T3; IL108797A0

Abstract

(57)【要約】式Ｉ〔式中、Ｗ、Ｙ、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｑ₁およびＱ₂は請求項１で定義の意味〕で示される疑似ペプチドは、有効なトロンビン阻害剤である。

Description

【発明の詳細な説明】プロテアーゼ阻害活性を有するペプチドボロン酸誘導体本発明は、トロンビン（第IIa因子）、第Ｘa因子、第VIIa因子、第XIIa因子、カリクライン、プラスミン、プロリルエンドペプチダーゼおよびIg AIプロテアーゼのような、血液凝固工程に含まれるセリンプロテアーゼ類の阻害剤に関する。凝血系の最後の酵素、トロンビンは、可溶性フィブリノーゲンをフィブリンに開裂し、次いで、それは架橋し血栓となるマトリックスを形成する不溶性ゲルを形成する。血管が傷害を受けた場合、上記の工程は止血に必要である。正常の環境下では、血漿中でトロンビンは測定可能量ではない。トロンビン濃度の増加は、現在の最も一般的で深刻な医学的問題の一つである血栓塞栓疾病を導く血餅の形成をもたらし得る。トロンビンは、数個の生理学的反応により、止血の制御を寄与する。その主要な機構、フィブリノーゲンのフィブリンへの転換に加えて、トロンビンは第XIII 因子を活性化し、それはフィブリンの架橋を担う。トロンビンは、プロトロンビンからトロンビンの形成に両方とも必要な第Ｖ因子および第VIII子の活性化を含む陽性フィードバック機構によりまた働く。トロンビンは他の本質的な役割を有する：その血小板への結合は、初期止血を担う血小板遊離および凝固を開始させる。トロンビンの反応は、血漿中の天然阻害剤により更に制御される。これらの中で最も重要なものはアンチトロンビンIIIおよびヘパリンである。これらの２つの化合物は単離され、プロトロンビン活性化の危険を伴う止血機構の不均衡の病気において、治療的および予防的に使用されている。経口的に活性な合成トロンビン阻害剤は、これらの天然阻害剤の非経口的投与の代替物として有用である。この領域の更なる研究が、インビトロでのトロンビンの良好な阻害剤の合成をもたらすであろうが、今までのところ経口臨床使用のために本当に優れた候補はまだ無い。トロンビンの重要な天然基質であるフィブリノーゲンのアミノ酸配列を模倣することにより、幾つかの優れたトロンビンの短いペプチド基質が合成されている。これらのペプチド基質は酵素の阻害剤を提供するためにまた派生する。従って、色素基質Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−pＮＡおよびＤ−Ｐhe−Ｐig−Ａrg−ＰＮＡは、トロンビン開裂部位に先立つ配列を模倣する。対応する可逆的および非可逆的阻害剤、Ｄ−Ｐhe−Ｐro−アルギナル（Ar ginal）およびＤ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−ＣＨ₂Ｃｌは、インビトロで１０^-8Ｍ範囲の阻害を示す。クロロメチルケトン類は、一般的に臨床的使用に理想的な特性は不十分であり、上記に例示のペプチドアルデニドは非常に低いＬＤ₅₀を有する。第Ｘa因子は、そのチモーゲン、プロトロンビンの限定蛋白分解によりトロンビンの産生に応答可能な凝血酵素である。重量／重量を基本にして、第Ｘa因子はインビボでトロンビンより少なくとも１０倍血栓源性である。これは、第Ｘa 因子が増殖縦つなぎ系においてトロンビンの１工程前であり、第Ｘa因子１部因予は、その前駆体から多くのトロンビン分子を産生できるという事実に起因する。その有効性は、体の相対的に遅い第Ｘa因子の排出にもまた起因し得る。第Ｘa 因子と異なり、トロンビンは血管壁の高親和性部位上へ循環血液から急速に無くなる。組織因子の第VII因子への結合は、組織傷害後の血液凝固の開始における重要な事象を示す。最初にそれは第IX因子および第Ｘ因子の活性化を触媒し、第２に痕跡量の第Ｘa因子および第IXa因子（および恐らく組織傷害後に細胞から遊離された他の酵素）は、チモーゲン第VII因子／組織因子複合体から、非常に活性な第VIIa因子／組織因子複合体に変換する。内および外経路の接合部の第Ｘa因子の中心位置ならびに内および外凝血経路の両方の開始における第VIIa因子の重要な役割により、第Ｘa因子および第VIIa 因子は止血経路を調整する好適な標的となる。カリクラインは第XII因子の働きにより、陰性に荷電した表面の存在下、プレカリクラインから形成される。カリクラインは、次に、第XII因子を、第XIIa因子に開裂でき、それにより両方向活性化系が形成される。第XIIa因子は凝血系の内部の最初の酵素である。接触系の重要性は、恐らく表面媒介防御機構としてであり、系の大規模な活性化は通常ショック状態または播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）で見られる。カリクラインのこの段階での役割は、高分子量キニノーゲンを、血管拡張物、ブラジキニンの遊離を伴って開裂することである。ブラジキニンは、また、増加した血管透過性、痛みおよび好中球の移動の原因となる。キニン形成阻害剤は、関節炎および膵炎を含むある種の炎症に有益であることが示され、喘息の処置にもまた有用であり得る。カリクレイン阻害剤として臨床的に重要になっている唯一の物質はアプロチニン（トラシロール）である。アプロチニンは分子量６５００のポリペプチドであり、プロテアーゼと安定な複合体を形成し、結合定数１０^-10−１０^-13Ｍを有する。線維溶解はフィブリノーゲンおよびフィブリン凝塊の酵素的溶解の工程である。血漿はタンパク質、種々の活性剤の影響を受けてプラスミンに変換するプラスミノーゲン、その活性がトリプシンに類似しているタンパク質分解酵素を含む。プラスミンはフィブリノーゲンおよびフィブリンをフィブリン／フィブリノーゲン分解産物に分解する。正常の条件下では、線維分解系は凝固系と平衡を保っている。血流中に形成された小血栓は、酵素的に溶解され、血管を経由する循環は体内での線維溶解系の活性化により回復する。線維分解活性が高すぎれば、出血をもたらしまたは延長し得る。活性は血中の天然阻害剤により阻害できる。プロリルエンドペプチダーゼは、ペプチド鎖内のプロリン残基のカルボキシル側のペプチド結合を開裂する。サブスタンスＰ、ニューロテンシン、甲状腺刺激ホルモン−遊離ホルモンおよび黄体形成ホルモン−遊離ホルモンを含む多くの神経ペプチドを容易に分解し、細胞のインターロイキン２（ＩＬ−２）を産生する能力に関係があるのはセリンプロテアーゼである。本酵素はベンジルオキシカルボニル−プロリル−プロリナルにより、１４nMのＫ_iで阻害される。プロリルエンドペプチダーゼの生理的役割についてほとんど知られていないが、種々の神経ペプチドの生理活性の制御において顕著な役割を担っている可能性がある。感染に対する防御の最初の系を構成する抗体の優勢な形であるＩgＡのＩgＡプロテイナーゼ触媒開裂は、分子の抗原結合Ｆab領域からＦcを分離する。このような開裂は、その抗微生物活性を妨げまたはなくすことが予期される。すべてのＩgＡプロテイナーゼは、従って、ヒトＩgＡの蝶番領域のプロリン残基の後を開裂すると確認された。ペプチドプロリル−ボロン酸は、これらの酵素をタンパク質分解酵素のセリンプロテアーゼ群に属する酵素として表すナイセリア・ゴノロエア（Neisseria gonorrhoea）およびヘモフィラス・インフルエンザエ（Hemoph ilus influenzae）由来のＩgＡｌプロテイナーゼを阻害する。癌、炎症および神経活性のような病理的疾病に関連する種々の生理学的工程においてトロンビンが果す多数の役割は、心臓血管系に全く関係しない数個の徴候において、トロンビン阻害剤として有効な使用が示唆される。多くの癌細胞がトロンビンの産生に関連する前凝固活性の誘導を示す。結果として、局所的フィブリン蓄積および凝固が発生し、それは癌の成育に重要であると考えられている。加えて、その内皮細胞上でのその作用のために、トロンビンは転移している癌細胞の滲出を促進し得る。これゆえ、トロンビン阻害剤はある種の癌の処置だけでなく。化学療法剤で治療している患者に頻繁に見られる凝固性亢進の減少にまた有益であることを証明し得る。トロンビンの内皮細胞活性化は、インターロイキン−１、プロスタグランジンおよび血小板活性化因子の合成および遊離のような多くの前炎症的変化を誘発する。加えて、トロンビンはＣＤ６２（あるいはＧＭＰ−１４０としても既知）およびＣＤ６３の暴露を誘発し、２種の粘着分子は内皮表面への白血球の粘着の原因となる。トロンビンはまた好中球を含むタンパク質の血管透過性を増加させ、呼吸性疾患、関節リューマチおよび大腸潰瘍に含まれると信じられているペプチドである、インターロイキン−８−前駆体タンパク質を開裂する。これら全ての前炎症工程へのトロンビンの拘わりあいにより、トロンビン阻害剤は炎症関連病理的疾病の治療的処置に使用するための有効な標的となる。神経成育の調節物および特異的天然トロンビンアンタゴニストであるプロテアーゼネキシン−１の活性は、アルツハイマー病の患者で顕著に特異的に減少する。アルツハイマー患者の脳でトロンビン様活性が増加したという観察と併せて、これはトロンビン阻害剤がトロンビン活性亢進または関連したセリンプロテアーゼに関する神経病理変化の限定または回復に有用であり得ることを示唆する。ボロン酸は、種々のセリンエステラーゼおよびプロテアーゼの阻害剤として研究されている。プロテアーゼ阻害剤として使用された最初のボロン酸含有アミノ酸同族体は、キモトリプシンおよびサブチリシンの阻害剤として使用されていたＮ−アセチル−Ｌ−フェニルアラニンのボロン酸同族体であった。ペプチドボロン酸は、キモトリプシン、サブチリシンおよびエラスターゼの阻害剤として使用されている。ボロン酸とプロテアーゼの生物系における相互作用は知られており、種々の簡単なボロン酸がヒトへの使用に対して充分無毒であることが示されている。エラスターゼのペプチドボロン酸阻害剤は、最近気腫に関連した動物試験で使用されている。ペプチドクロロメチルケトンと異なり、生理学的有効量レベルで毒性は報告されていない。欧州特許出願第２９３８８１号（デュポン）は、Ｃ末端にリジン、オルニチンおよびアルギニンのボロン酸誘導体を含むペプチドの製造およびそのトリプシン様セリンプロテアーゼ阻害剤としての使用を開示している。ペプチドの他のアミノ酸は、全て２０の天然由来アミノ酸のＤまたはＬ形である。疎水性側鎖を有する少なくとも１つの非天然α−アミノ酸を含む場合、トリプシン様セリンプロテアーゼ阻害剤として優れた特性を有する化合物が得られることが本発明により分かった。従って、本発明は式Ｉ〔式中、Ｗ＝ＨまたはＮ−保護基；Ｙはｎ＋１アミノ酸ペプチドＹ−ＬysまたはＹ−Ａrgがトリプシン様プロテアーゼの活性部位に親和性を有するように選択されたｎアミノ酸の配列（ここで、ｎは１から１０、好ましくは１から４の整数であり、少なくとも１つのアミノ酸が疎水性側鎖を有する非天然アミノ酸である）；Ｑ₁およびＱ₂は、同一または異なって−ＯＨ、−ＣＯＲ₁、−ＣＯＮＲ₁Ｒ₂、− ＮＲ₁Ｒ₂および−ＯＲ₃から選択され得、またはＱ₁およびＱ₂は一緒になってジオール残基を形成する；Ｒ₁、Ｒ₂およびＲ₃は、同一または異なってＣ_1-10アルキル、Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキルまたは、Ｃ_1-4アルキル、ハロゲンおよびＣ_1-4アルコキシから選ばれた基で３個まで置換されているフェニル；Ｒ₄は水素またはＣ_1-10アルキル；Ｒ₅は−Ａ−Ｘ基〔ここで、Ａは−（ＣＨ₂）_z−（ここでｚは２、３、４または５）；−ＣＨ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₂−；−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−；− （ＣＨ₂）₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−；−（ＣＨ₂）₂−Ｃ（ＣＨ₃）₂−；−ＣＨ（ＣＨ₃ ）−（ＣＨ₂）₃−；−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）_-（ＣＨ₂）₂−；−ＣＨ₂−ＣＨ₂− ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−；−（ＣＨ₂）₂Ｃ（ＣＨ₃）₂−ＣＨ₂−；−（ＣＨ₂ ⁾ ₃− ＣＨ（ＣＨ₃）−；−（ＣＨ₂）₃−Ｃ（ＣＨ₃）₂−；−（ＣＨ₂）₃ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂−；Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキルおよびＸはＯＨ、ＳＨ、ＮＲ₆Ｒ₇ またはフェニル、Ｒ₆はＨまたはＣ_1-10アルキルおよびＲ₇はＣ_1-10アルキル、− ＣＯ−Ｒ₈、−ＣＳ−Ｒ₈または−ＳＯ₂−Ｒ₈、Ｒ₈はハロゲン、ＯＨ、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｃ（ＮＨ）Ｒ₉、ＮＲ₁₀Ｒ₁₁およびＣ（Ｏ）ＯＲ₆（Ｒ₆は上記で定義の意味）から選ばれた基で３個まで置換されていてもよいＨまたはＣ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルコキシ、Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキル、Ｒ₉はＣ_1-3アルキルまたはＮ（ＣＨ₃）₂およびＲ₁₀およびＲ₁₁は（同一または異なって）ＨまたはＣ_1-10 アルキルである〕で示される化合物およびその塩を提供し、＊で印をした不斉炭素原子はＤ−またはＬ−形であり得、本化合物はこれらの任意の混合物を含み得る。非天然アミノ酸は、Ｄ−またはＬ−Ａla、Ａrg、Ａsp、Ｃys、Ｇln、Ｇlu、Ｇ ly、Ｈis、Ｉle、Ｌeu、Ｌys、Ｍet、Ｐhe、Ｐro、Ｓer、Ｔhr、Ｔrp、ＴyrまたはＶal以外を意味する。好ましくはＮ−保護基Ｗは、式Ｈ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_p−（式中、ｐ＝３−３０）；Ｒ₁₂ＣＯ−；Ｒ₁₃ＯＣＯ−またはＲ₁₄ＳＯ₂−（ここで、Ｒ₁₂はＣ_1-6アルキルまたはＨ（ＣＨ₂−Ｏ−ＣＨ₂）_p、ｐは上記で定義の意味；Ｒ₁₃はＣ_1-6アルキル、フェニル、ベンジルまたはナフチル；およびＲ₁₄はフェニル、ナフチルまたはＣ_1-4アルキルフェニルである）で示されるものであり、Ｒ₁₃ＯＣＯ−が特に好ましい。最も好ましい保護基は、Ｒ₁₃’ＯＣＯ−（式中、Ｒ₁₃’は第３級ブチル（Ｂｏｃと呼ぶ）およびＲ₁₃’がベンジル（Ｚと呼ぶ）である）で示されるものである。好ましくはＲ₅はＲ₅’〔ここで、Ｒ₅’は−（ＣＨ₂）_z’−Ｘ’（ここで、Ｘ ’は３個までのハロゲン原子で置換されていてもよいＯＨ、フェニル、ＮＨ−ＣＯ−Ｒ₈’、ＮＨ−ＣＳ−Ｒ₈’、ＮＨＳＯ₂Ｒ₈’またはＮＲ₁₀’Ｒ₁₁’、ここで、Ｒ₈’はＨまたはＣ_1-3アルキルまたはＣ_1-3アルコキシならびにＲ₁₀’およびＲ₁₁’は、同一または異なってＨまたはＣ_1-3アルキルである）およびｚ’は２、３または４である〕である。更に好ましくは、Ｒ₅はＲ₅”〔ここで、Ｒ₅”は−（ＣＨ₂）_z’−Ｘ”（式中、Ｘ”はＯＨ、Ｃ₆Ｈ₅、Ｃ₆Ｈ₄Ｃｌ、Ｃ₆Ｈ₄Ｎ（Ｍｅ）₂、ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ₃、ＮＨ−ＣＨＯ、ＮＨ−ＣＳ−ＮＨＣＨ₃、ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ（ＣＨ₃）₂、ＮＨ− ＣＯ−ＣＨ₂−ＣＨ₃、ＮＨ−ＣＨＳ、ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ₂Ｃｌ、ＮＨ−ＣＯ−ＯＣＨ₃およびｚ’は上記で定義の意味である）〕である。好ましい化合物は、式Ｉａ〔式中、Ｗ、Ｙ、Ｒ₄およびＲ₅は上記で定義の意味およびＲ₁₅およびＲ₁₆はジヒドロキシ化合物の残基を意味する〕で示されるものである。ジヒドロキシ化合物の有用な例は、２，３−ブタンジオール；カテコール；２，３−ジメチル；２’，３’−ブタンジオール；シクロヘキサンジオール；エチレングリコール；１，２−ヘキサンジオール；２，３−ヘキサンジオール；ジエタノールアミンまたは、炭素原子または他の炭素原子により置換されている炭素原子の憐りに置換されたヒドロキシ基を有する脂肪族または芳香族化合物である。特に好ましいものは、Ｑ₁およびＱ₂が一緒になって式ａ）または式ｂ）〔式中、ＬはＣ_1-4アルキル基、特にメチル、ｉ−Ｐi、ｎ−Ｐrまたはｎ−Ｂuである〕で示されるＯＰin基を意味するものである。Ｙを構成するアミノ酸はタンパク質中に天然に生じるＬ−アミノ酸および対応たはピペコール酸（Ｐip）のような化学的修飾α−アミノ酸からなる群から選択され得るα−アミノ酸であるが、ただし少なくとも１つのアミノ酸は、疎水性側鎖を有する非天然アミノ酸である。非天然アミノ酸は、Ｏ−アルキルまたはＳ−アルキル−システインのようなアルキル化天然アミノ酸であり得る。しかしながら、好ましい非天然アミノ酸は、式II 〔式中、Ｒ₁₇は疎水性基である〕で示される。好ましい疎水性基は、所望により極性基または少なくとも２環および非極性置換基を有する脂環式基で置換されていてもよい芳香族基または第３級ブチルまたはトリメチルシリル基に結合したメチレン基から成る。式IIで示される非天然アミノ酸は、Ｄ−またはＬ−形またはこれらの任意の混合物であり得るが、好ましくはＤ−形である。更に好ましい化合物は、式Ｉ〔式中、ＹはＮ−末端アミノ酸が非天然アミノ酸であり、他のアミノ酸が式であるＬ−プロリン（Ｐro）である２アミノ酸の配列〕で示されるトロンビン阻害剤である。これらのより好ましい化合物は、式Ｉ’ 〔式中、Ｗ、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₁₇、Ｑ₁およびＱ₂は上記で定義の意味〕を有する。特に好ましい化合物は、式Ｉ” 〔式中、Ｗ、Ｒ₄、Ｒ₅’およびＲ₁₇は上記で定義の意味〕で示されるものである。最も好ましい化合物は式III で示される化合物、式IV で示される化合物、式Ｖで示される化合物および式VI で示される化合物である。ペプチドは、ペプチド−ペプチダーゼ複合体の分解定数が、１０^-5Ｍまたはそれ以下の値を示せば、トリプシン様プロテアーゼの活性部位に親和性を有していると考えられる。式Ｉ（式中、ＸがＮＨＣＨＯまたはＮＨＣＯアルキル）で示される化合物は、式Ｉ（式中、Ｘは−ＮＨ₂）で示される化合物を、対応する酸の活性形と反応させることにより製造し得る。式Ｉ（式中、ＸがＮＨＣＯアルコキシ）で示される化合物は、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨ₂）で示される化合物を、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミドと反応させ、続いて対応するエステルの活性形を添加することにより製造し得る。式Ｉ（式中、ＸがＮＨＣ（Ｓ）ＮＨアルキル）で示される化合物は、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨ₂）で示される化合物を、有機溶媒中で対応するアルキルイソチオシアネートと反応させることにより製造し得る。式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨ₂）で示される化合物は、次に、式Ｉ（式中、Ｘが− Ｎ₃）で示される化合物の水素添加により製造し得る。水素添加は、例えばＰｄ／Ｃ触媒を使用した標準条件下で行い得る。式Ｉ（式中、Ｘが−Ｎ₃）で示される化合物は、式VI 〔式中、Ｗ、Ｙ、Ｑ₁およびＱ₂は上記で定義の意味およびＲ₁₈は−Ａ−Ｂｒ（ここで、Ａは上記で定義の意味）〕で示される化合物を、ジメチルスルフォキシドのような極性非プロトン性溶媒中で、ナトリウムアジドと反応させて製造し得る。式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨＣＨＳ）で示される化合物は、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨＣＨＯ）で示される化合物を、トルオールのような有機溶媒中でローエソン（ Laweson）試薬と反応させることにより製造し得る。式Ｉ（式中、Ｘは所望により置換されたフェニル）で示される化合物は、式VI I 〔式中、Ｑ₁およびＱ₂は上記で定義の意味およびＲ₁₉は−Ａ−フェニル（所望により置換）（ここで、Ａは上記で定義の意味）〕で示される化合物を、ＬiＮ［Ｓi（ＣＨ₃）₃］₂と反応させ、続いて過剰の酸と共に加水分解し、式VIII 〔式中、ＷおよびＹは上記で定義の意味〕で示される保護ペプチドと結合させることにより得られ得る。反応は好ましくは乾燥非プロトン性極性溶媒、例えばテトラヒドロフラン中で、−７８℃から室温の間の温度で行う。式VIIIで示される中間体は、マットソンら、オルガノメタリクス、３、１２８４−８（１９８４）の方法により得られ得る。式VIIIで示される保護ペプチドは、ペプチド化学で慣用的な方法により、所望の非天然アミノ酸で出発して製造し得る。このようなアミノ酸は、商業的に入手可能（例えば、Ｒ₁₆がｃ群であるアミノ酸）または文献、例えばアンゲヴェント・ケーミエ９３、７９３（１９８１）およびジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティー、１０９、６８８１（１９８７）に開示の方法と類似のものにより製造し得るかのいずれかである。式Ｉ（式中、ＸがＯＨ）で示される化合物は、式Ｉ（式中、Ｘが−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃）で示される化合物を、テトラブチルアンモニウム−フロリドのような脱シリル化剤と反応させて得られ得る。式Ｉで示される化合物は、トリプシン様プロテアーゼ阻害剤として有用であり、これらの酵素のイン・ビトロでの診断および機構研究に使用し得る。更に、その阻害作用のために、それらは、制御系における酵素の過剰による疾病の予防または処置、例えば凝固および線維溶解の制御への使用が示唆される。本発明の化合物は、以下の試験法で示唆されるように、トリプシン様セリンプロテアーゼ阻害特性を有する：ａ）酵素阻害動態試験物質をクレモフォア／エタノール（１：１）またはＤＭＳＯに溶解し、蒸留水で希釈し、１mMの貯蔵溶液を産生する。更に、測定用緩衝液（１００mMリン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ７.４、１００mM ＮａＣｌおよび０.１％ウシ血清アルブミン含有）で希釈する。動態測定は、９６マイクロウェルプレートを使用して行う；各々のウェルは５０μl基質、１００μl試験化合物および１００μl酵素を緩衝液中に含む。基質および酵素の最終濃度は下記の通りである：１６０pM α−トロンビンおよび１００μlペファクロム（Pefachrom）ＴＨ（Ｋ_m＝６.９μ M）、８００pMヒトプラスミンおよび２００μMペファクロムＰＬ（Ｋ_m＝６６.４ μM）、および２６０pMウシ膵臓トリプシンおよび５００μMペファクロムＴＲＹ（Ｋ_m＝１６７.７μM）。測定は、試験すべき物質および基質を含む溶液に酵素を加えることにより開始する。基質の加水分解によるｐ−ニトロアニリンの遊離はサーモマックス・マイクロウェル・カイネティック・リーダー（Thermomax mi crowell kinetic reader）（モレキュラー・デバイシーズ、メンロ・パーク、カリフォルニア州、ＵＳ）で、４０５nmの光学密度の増加を測定することにより３０分追跡する。阻害定常速度に急速に到達した場合、阻害定数（Ｋ_i）は、ディクソン方程式（マイオケミカル・ジャーナル、１９５３、５５：１７０−１７１）へ重量直線退行をあてはめることにより、決定する。遅い、きちんと結合する阻害剤に対しては、阻害の機構は下記のスキームにより説明し得る：〔ここで、Ｅ、Ｓ、ＰおよびＩは、それぞれ、酵素、基質、生産物（ｐ−ニトロアニリン）および試験すべき阻害物質であり、ｋ_onおよびｋ_offは阻害についての結合および分離定数である（タッパレリら、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー２６８（１９９３）、４７３４−４７４１）〕。異なった濃度の阻害剤存在下でのｐ−ニトロアニリンの形成の進行曲線は、スキームにより示される機構の方程式へ非直線退行によりあてはめられる（モリソンおよびワルシュ、Adv．Enzymol．Relat．Areas Mol．Biol．１９８８、６１：２０１−３０１）。これらの分析によりｋ_on、ｋ_offおよびＫ_iの見掛けの値の推定がされ、モリソンおよびワルシュが開示したように、基質の存在に対して補正して、真の値を得る。記載した実験条件下では、実施例１の化合物においてＫ_i１３nMが観察される。ｂ）イン・ビトロ凝固測定イン・ビトロ凝固測定は、クエン酸化ヒト血漿で行う。試験すべき物質または溶媒を、血漿と共に、測定前に１０分、３７℃でインキュベーションする。トロンビン時間（ＴＴ）決定は、最終トロンビン濃度５Ｕ／mlで行う。活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）は、０.１ml血漿±試験すべき物質と、０.１ mlエラギン酸中の精製大豆リン脂質（Actin-FS）を、４時間、３７℃でインキュベーションし、続いて０.１ml ＣaＣl₂（５０mM）を加えることにより、測定する。本試験法において、本発明の化合物は０.１μMから０.５μMの濃度で著しくＴＴおよびＡＰＴＴを増加させる。実施例１の化合物では、約３００秒のＴＴの延長が、１.８μMで達成され、対照値の２×のＡＰＴＴの高さが４.４μMで達成される。ｃ）イン・ビトロ血小板凝固測定洗浄ヒト血小板をアードリー（ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・ファーマコロジー、１９７０、１９：７−１７）の方法の変法により製造する。洗浄血小板懸濁液（０.４６ml）を３７℃に保ち、１１００rpmで撹拌する。試験すべき物質または溶媒の添加後、凝固を１nMヒトトロンビンで誘発する前に血小板を２分間維持する。血小板凝固の程度を、最大凝固振幅および阻害剤無しで観察された凝固率の阻害により定量する。本試験法において、本発明の化合物は低nM範囲で血小板凝固を著しく阻害する。実施例１の化合物は、ＩＣ₅₀値が３.８nMを有する。トロンビンまたは第Ｘa因子阻害剤であるこれらの本発明の化合物は、抗トロンボゲン特性を有し、抗トロンボゲン剤が必要である場合、使用し得る。一般に、これらの化合物は経口的または非経口的にホストに投与され、抗トロンボゲン効果を得る。ヒトのような大型哺乳類の場合、本化合物は単独または薬理学的担体または希釈剤と共に、０.０２−１５mg/体重Kg、好ましくは１−１０mg／体重 Kgの用量で投与し得、抗トロンボゲン効果を得、一回投与または複数回投与として、または持続性遊離形として投与し得る。体外血液輪が患者で確立されている場合、０.１−１mg／kgを、静脈から投与し得る。全血と使用する場合、リットル当たり１−１０mgを、凝固予防のために与え得る。薬理学的希釈剤は既知であり、糖、澱粉および水を含み、それらは錠剤、カプセル、注射可能溶液等の製造に使用し得る。本発明の化合物は、採血または血液分配容器、管または血液と接触する移植可能装置中での血液の凝固の予防の目的で、血液に加え得る。バトラーら（ブロッド・コアギュレーション・アンド・フィブリノリシス、第３巻（１９９２）１５５頁）記載のラットでの動脈−静脈吻合部血栓症モデルにおいて、本発明の化合物は用量依存的に血栓形成を阻害する。実施例１の化合物を使用して、０.３mg／kg i.v.で血栓形成は２１％阻害され、３mg／kg i.v. の用量で阻止される。また、そのトリプシン様セリンプロテアーゼ阻害活性の観点から、式Ｉで示される化合物は、静脈または動脈手術または他の形の血管傷害に続く血管再造形（増殖、移動）の阻害への使用が示唆される。経皮経管冠動脈形成術（PTCA）は、アテローム硬化症斑閉塞環状動脈の処置の一般的な手術方法になっている。血管形成は、例え少ない程度でも、大腿および腎臓動脈の様な末梢血管でまた行われる。バルーンカテーテル血管形成中のアテローム硬化症斑を裂く／圧縮および動脈壁を伸ばすことは、更に内皮細胞を傷付け（または除去）る結果となり、また下にある血管平滑筋細胞を傷付ける可能性がある。ＰＴＣＡが担う主な合併症は、急性再閉塞（暴露されたトロンボゲン血管表面の閉塞血小板血栓の形成）および慢性再狭窄（主に平滑筋の増殖および移動のため）である。ＰＣＴＡ２４時間後に〜５％の患者に発生する急性再閉塞は、生命を脅かし、すぐに外科的に処置しなければならない。手術後３−６カ月後で約３０％の患者で診断された慢性狭窄は、胸部の痛みを誘発するが、その閉塞が１００％においてのみ生命を脅かす（斑が破裂したら、心筋の閉塞形成を起こす）。傷害に反応した血管におけるトロンビンの考えられる拘わりあいは、最近精密に調べられている。その血小板への作用により、トロンビンは、傷害部位の初期血小板漸増および活性化に含まれ、その平滑筋へのマイトジェン作用の効能により、トロンビンはまた血管内膜を厚くする。トロンビン濃縮は、正常内皮層の欠損における凝固経路の連続活性化のため、また血栓溶解工程中の血餅結合トロンビンの遊離のため、血管傷害部位で上昇するようである。加えて、トロンビンは細胞外マトリックスに結合するようになり、そこで、活性であり続け、循環抗トロンビンの阻害効果から長期間保護される。血小板と重傷の血管壁との相互作用は、局所トロンビン産生に一部分依存しているように見える。トロンビン阻害の蓄積された証拠は、もしかすると、バルーン血管形成に続く再狭窄を限定するための興味深い法則となるが、全ての入手可能な試薬は、充分な局所濃度を得るため、または他の副作用を軽減し得るために、非経口的（または局所的）に投与しなければならない。本発明の化合物は、抗トロンボゲン剤として使用されるのと同様の濃度で、血管再造形の阻害に使用し得る。有利には、本発明の化合物は経口で活性であり、低毒性で急速な活性の発生がある。加えて、これらの化合物はヘパリンのような化合物に過敏である固体の処置にも特に実用的であり得る。以下の実施例において、記号は以下の意味を有する：Ｚ＝ベンジルオキシカルボニルＢoc ＝ｔ−ブチルオキシカルボニルＡc ＝アセチルＭeＯＨ＝メチルアルコールＥtＯＡc ＝酢酸エチルＤＭＦ＝ジメチルホルムアミドＤＣＣ＝ジシクロヘキシルカルボジイミドＨＯＮＳu ＝Ｎ−ヒドロキシ−サクシンイミドＯＰin ＝ピナンジオールＴＨＦ＝テトラヒドロフランｎ−Ｂu ＝ｎ−ブチルＮp ＝ｐ−ニトロフェニルＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィーＢzl ＝ベンジルＴＭＳal ＝トリメチルシリルアラニンＢoroＰro−ＯＰin ＝ −ＣＯＯＨ基がＢ−ＯＰinで置き換わっている、プロリンの同族体ＢoroＬys ＝ −ＮＨ−ＣＨ−（ＣＨ₂-ＣＨ₂-ＣＨ₂-ＣＨ₂-ＮＨ₂）Ｂ − 実施例１Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＯＨ］Ｂ−ＯＰin Ａ．Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−ＯＨアンゲヴァンテ・キーミエ（Angew．Chem．）９３、７９３（１９８１）に記載の方法で製造したＤ−ＴＭＳa1エチルエステル２１.５ｇ（１１３.７mmol）を、ＣＨ₂Ｃｌ₂に溶解し過剰のＣＨ₂Ｃｌ₂中のＢoc₂Ｏの溶液を加える。室温で１５時間の後、氷冷０.２５Ｎ塩酸５００mlを加える。有機層を５％ＮａＨＣＯ₃および食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空濃縮する。粗物質（無色油状物）を直接ケン化工程に使用する。メタノールに溶解し、０ ℃ に冷却し、１ＮＮａＯＨ５１０mlと合わせ、０℃で３時間撹拌する。１ＮＨＣｌでｐＨ１まで酸性化した後、混合物を数回エーテルで抽出する。有機層を合わせ、食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空で濃縮する。生産物（２９ .７ｇ油状物）を更に精製することなく、次工程に使用する。Ｂ．Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＯＮＳu Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−ＯＨ２９.７ｇ（１１３.７mmol）およびｐ−ニトロフェノール１９.０ｇ（１３６.３mmol）をＥｔＯＡｃに溶解する。０℃に冷却した後、ＤＣＣ２３.４ｇ（１１３.６mmol）を加え、混合物を１時間０℃で、続いて１５時間室温で撹拌する。沈殿を濾取し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、濾液を真空で濃縮する。得られる油状物をフラッシュクロマトグラフィー（９：１、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製し、所望のＢoc−Ｄ−ＴＭＳal−ＯＮpを白色結晶として得る。Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−ＯＮp５１.６ｇ（１１３.７mmol）をＴＨＦに溶解し、等モル量のプロリンおよびＥｔ₃Ｎの水性溶液を加える。室温で２０時間後、ＴＨＦを真空で除去し、水性残渣を水で希釈し、数回ＥｔＯＡｃで抽出する。１０％クエン酸を加えることにより水性層のｐＨを３に調節する。得られる油状生産物を数回ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機相を食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄ で乾燥し、真空で濃縮する。無色油状物が、エーテル／ヘキサンから再結晶し、ジペプチドＢoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＯＨが、白色結晶化合物、mp：１７６℃ で得られる。得られたジペプチド２６.０ｇ（７２.５mmol）をＥｔＯＡｃに溶解する。０℃ まで冷却した後、ＨＯＮＳｕ９.８ｇ（８５.５mmol）およびＤＣＣｌ４.９ｇ（７２.３mmol）を加える。混合物を３時間０℃で、更に１５時間室温で撹拌する。混合物を０℃に再冷却し、ジシクロヘキシルウレアを濾取し、数回ＥｔＯＡｃで洗浄する。濾液を水性０.１ＭＮa₂ＣＯ₃で、次いで２％ＫＨＳＯ₄で洗浄する。Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮した後Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＯＮＳu が白色泡状物として得られる。Ｃ．（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−ペンタン−１−ボロン酸３−ブテン−１−オール１０.５ml（１２０mmol）、ｔ−ブチルジメチルシリルクロリド２２.３ｇ（１４４mmo1）およびイミダゾール２０.４ｇ（３００mmol ）をＤＭＦ６０mlに溶解し、一晩３５℃で撹拌する。２層を分離し、生産物層を２Ｎ酒石酸、水および食塩水で洗浄する。Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥および真空で濃縮後、１−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３−ブテンが無色油状物として得られる。本生産物７.４５ｇ（４０mmol）をカテコールボロン酸５.１ｇ（４０mmol）と、１２５℃で２４時間撹拌し、黄茶色油状物を産生する。本油状物をＴＨＦ３０ ml中の（＋）−ピナンジオール６.９ｇ（４０mmol）溶液に加え、一晩撹拌する。フラッシュクロマトグラフィー（９５：９、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）の後、（＋）−ピナンジオール−４−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−ブタン−１−ボロン酸が得られる。２０分間にわたって、ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ）１７ml（２７.０mmol ）を、前冷却（−１００℃）したＣＨ₂Ｃｌ₂ ２.８mlおよびＴＨＦ４９mlの溶液に加える。１５分間１００℃で撹拌した後、ＴＨＦ２４ml中の上記で得られたピナンジオールボロン酸生産物９.０ｇ（２４.５mmol）を２０分間にわたって加える。反応混合物を再び１５分間−１００℃で撹拌し、その後ＺｎＣｌ₂（固体）１.２４ｇ（１２.３mmol）を加える。反応混合物を一晩室温で暖める。真空で濃縮後、残渣をエーテル／Ｈ₂Ｏに溶解する。有機相をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。（＋−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−ブタン−１−ボロン酸が、黄橙色油状物として得られる。Ｄ．Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＯＳi（ｔ−Ｂu）Ｍe₂ ］Ｂ−ＯＰin ブチルリチウム（ヘキサン中１.６Ｍ）１２.８ml（２０.４mmol）を、前冷却（−７８℃）した、ＴＨＦ３０ml中のヘキサメチルジシラザン４.３ml（２０.４ mmol）の溶液に加える。反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで−７８℃に再び冷却する。ＴＨＦ中（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ｔ− ブチルジメチルシリルオキシ−ブタン−１−ボロン酸８.５ｇ（２０.４mmol）を加える。１時間−７８℃で撹拌した後、一晩室温に暖める。−７８℃へ再冷却した後、３モル当量のジオキサン中のＨＣｌを加える。混合物を−７８℃で１時間、次いで室温で２時間撹拌する。−２０℃へ冷却した後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中の実施例１、工程Ｂの活性エステル９.２８ｇ（４０.８mmol）の溶液を加え、続いてトリエチルアミン５ .６７ml（４０.８mmo1）を加える。混合物を１時間−２０℃でおよび２時間室温で撹拌し、次いで濾過する。真空で濃縮後、残渣をエーテル／Ｈ₂Ｏに溶解する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー（６：４、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）の後、所望の生産物が得られる：［α］_D ² ⁰ ＝−４５.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝７３６。Ｅ．Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＯＨ］Ｂ−ＯＰin 実施例１の工程Ｄで得たシロキシ化合物６００mg（０.８１６mmol）をＴＨＦに溶解し、テトラブチルアンモニウムフロリド５１４mg（１.６２mmol）を加える。一晩環境温度で撹拌した後、混合物を真空で濃縮し、エーテル／Ｈ₂Ｏに溶解する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。副生産物をシリカゲル上でＥｔＯＡｃで除去し、次いで、生産物をＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ（９：１）で抽出し、標題生産物を白色泡状物として産生する；［α］_D ²⁰＝−７２.４゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６２２。実施例２−４Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰin Ａ）（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ブロモ−ペンタン−１ −ボロン酸４−ブロモ−１−ブテン２０.８ml（２０３.３mmol）を、カテコールボラン酸９２４.４ｇ（２０３.３mmol）と１００℃で１６時間反応させる。粗生産物を真空で蒸留し、４−ブロモ−ブタン−１−ボロン酸を、白色結晶生産物として得る。（＋）−ピナンジオール２７.７ｇ（１６３mmol）をＴＨＦに溶解し、上記のように合成した４−ブロモ−ブタン−１−ボロン酸４１.６ｇ（１６３mmol）を加える。室温で１時間の後、ＴＨＦを真空で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（９：１、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製し、（＋）−ピナンジオール−４−ブロモ−ブタン−１−ボロン酸を無色油状物として得る。所望の（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ブロモ−ペンタン −１−ボロン酸を、オルガノメタリクス３、１２８４（１９８４）に記載の方法により製造する。ＴＨＦ中のＣＨ₂Ｃｌ₂９.８mlを−１００℃に冷却し、ｎ−ブチルリチルム（ヘキサン中１.６Ｍ）７１.６ml（１１４.５mmol）を２０分にわたって加える。−１００℃で１５分の後、ＴＨＦ中の（＋）−ピナンジオール− ５−ブロモ−ペンタン−１−ボロン酸３２.８ｇ（１０４．１mmol）の冷（−７８℃）溶液を加える。更に−１００℃で１時間後、ＴＨＦ中の無水ＺｎＣｌ₂７. １ｇ（５２.０mmol）を加える。更に−１００℃で１５分後、反応混合物を室温に暖める。溶媒を真空で除去し、残渣をヘキサン／水で希釈し、ヘキサンで数回抽出する。Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、溶媒を真空で除去した後、（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ブロモ−ペンタン−１−ボロン酸が、黄色油状物として得られ、それを更に精製することなく直接次工程に使用する。Ｂ）Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｂr］Ｂ−ＯＰin ＴＨＦ中のLiN（SiMe₃）₂（ＴＨＦ中に１Ｍ）６５.２ml（６６.２mmol）の溶液を−７８℃に冷却する。ＴＨＦ中の実施例２、工程Ａのα−クロロ−ボロン酸２３.７ｇ（６５.２mmol）を加える。１時間−７８℃で撹拌した後、本混合物を室温で１５時間撹拌する。この期間が終了した後、反応混合物を−７８℃に再冷却する。ジオキサン中のＨＣｌ２９.８ml（６.５６Ｎ溶液、１９６mmol）を加え、溶液を４５分間−７８℃で、次いで２時間室温で撹拌する。混合物を−１５℃に冷却し、ＣＨＣｌ₂ _{中の実施例１、工程ＢのＢoc−ＴＭＳal−Ｐro-ＯＮＳu２９.７ｇ（６５.２mmol} _{）、続いてトリメチルアミン１８.１ml（１３０.４mmol）を加え、結合反応を開} _{始する。−１５℃で１時間撹拌した後、混合物を室温で２時間撹拌する。混合物} _{を、次いで、ヒフロ（Hyflo）で濾過し、真空で濃縮する。残渣をエーテル／水} _{で希釈し、エーテルで数回抽出する。Ｎａ} ₂ ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮した後、所望のＢoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｂr］Ｂ−ＯＰinが、エーテル／ヘキサンから、白色結晶として得られる、ｍｐ：７４℃。Ｃ）Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｎ₃］Ｂ−ＯＰin 実施例２、工程Ｂの生産物３３.３ｇ（４８.６mmol）をＤＭＳＯに溶解し、ナトリウムアジド６.３ｇ（９７.２mmol）を加える。混合物を６時間室温で撹拌する。エーテル／氷水を加え、得られる油状物を結晶化し、Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal− Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｎ₃］Ｂ−ＯＰinを白色結晶化合物として得る、m p：６９−７０℃；［α］_D ²⁰＝−５６.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝１.０）；ＭＨ⁺＝６４７。Ｄ）Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＢoroＬys−ＯＰin 実施例２、工程Ｃのアジド２２.０ｇ（３４.０mmol）をＥｔＯＡｃに溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ４.０ｇの存在下水素添加する。９時間後、触媒を除去し、溶液を真空で濃縮する。得られる泡状物をＥtＯＡcに溶解し、結晶化して、所望のＢ oc−ＴＭＳal−Ｐro−ＢoroＬys−ＯＰinを白色結晶として得る、mp：１２８− １２９℃；［α］_D ²⁰＝−４０.８゜（ＣＨ₂Ｃｌ₂中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６２１。Ｅ）Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰ in ギ酸０.２２４ml（５.９５mmol）および無水酢酸０.５３０ｇ（５.２mmol）を２時間６０℃で撹拌する。混合物を０℃に冷却し、ＴＨＦに溶解した実施例２、工程Ｄで得られたボロリジン１.８６ｇ（３.００mmol）を加える。１０分間０℃ で撹拌した後、反応混合物を一晩室温で撹拌する。氷水８０mlを加え、溶液を数回エーテルで抽出し、食塩水で洗浄する。Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮した後、所望の生産物が白色泡状物として得られ、それはエーテル／ヘキサンから結晶化できる；mp：９３−９９℃；［α］_D ²⁰＝−７７.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０．５）；ＭＨ⁺＝６４９。Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₅ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰin （［α］_D ²⁰＝−４７.２゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６６３）およびＢ oc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₃ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰin（［ α］_D ²⁰＝−６８.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６３５）の生産物が、同様にして得られる。実施例５−１４Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ₃］Ｂ− ＯＰin ＣＨ₂Ｃｌ₂中のピリジン２０μl（０.２５mmol）および酢酸クロリド１８μl （０.２５mmol）を０℃に冷却し、実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１５５. ２mg（０ .２５mmol）を加え、溶液を１時間撹拌する。水を加え、生産物を数回エーテルで抽出し、食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。所望の生産物が油状物として得られる；［α］_D ²⁰＝−６２.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６６３。以下の（Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ］Ｂ−ＯＰin）〔式中、Ｒは下記の表で定義〕生産物が、対応するアシルクロリドまたはブロミドから同様にして製造される：実施例１５−１６Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ₂Ｃl］Ｂ −ＯＰin ＴＨＦ中の実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１２４.２mg（０.２mmol）を０℃に冷却し、モノクロロ酢酸無水物３５.２mg（０.２mmol）を添加する。３時間室温で撹拌後、溶媒を真空で除去し、生産物を白色泡状物として得る；［α］_D ²⁰ ＝−５７.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６９７。Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＣＣｌ₃］Ｂ−ＯＰin生産物を同様にして製造する；［α］_D ²⁰＝−５４.０°（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝７６５。実施例１７Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ₃］Ｂ −ＯＰin ＣＨ₂Ｃｌ₂中のＮ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド５８.７μl（０.２４mmol）をＣＨ₂Ｃｌ₂中の実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１２４.２ mg（０.２０mmol）に加え、室温で１時間撹拌する。０℃に冷却後、ＣＨ₂Ｃｌ₂ 中のメチルクロロフォルメート１９.５μl（０.２４mmol）を加え、混合物を０ ℃で５時間撹拌する。ＣＨ₂Ｃｌ₂を除去し、ｐＨ７緩衝液を０℃で加える。生産物をエーテルで数回抽出し、食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮し、白色泡状物を得る；［α］_D ²⁰＝−５９.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６７９。実施例１８−２２Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｓ）ＮＨＣＨ₃］Ｂ−ＯＰin ＣＨ₂Ｃｌ₂中の実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１２４.２mg（０.２mmol ）を０℃に冷却し、メチルイソチオシアネート１５mg（０.２mmol）を加える。７時間、室温で撹拌後、溶媒を真空で除去し、生産物を白色泡状物として得、それをエーテル／ヘキサンから結晶化できる；mp：１０９−１１３℃；［α］_D ²⁰ ^{＝−６６.８°（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ} ⁺ =６９４。同様にして、Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｓ）ＮＨＥt］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−６６.４゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺ ＝７０８）、Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−６２.２゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６７８）、Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）−ＮＨＥt］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−６５.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６９２）およびＢoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₃ ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＥt］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−７１.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６７８）が、対応するイソ（チオ）シアネートから得られる。実施例２３Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＳ］Ｂ−ＯＰin トルエン中の実施例２、工程Ｅのホルムアミド生産物２１７mg（０.３５mmol ）を、ローエソン試薬７０.８mg（０.１７５mmol）で処理する。１.５時間室温で撹拌後、トルエンを真空で除去する。所望の生産物が、エーテルから結晶化する；mp：１２３−１２５℃；［α］_D ²⁰＝−７４.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６６５。実施例２４Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｓ）ＣＨ₃］Ｂ− ＯＰin 実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１２４mg（０.２mmol）をＭｅＯＨに溶解し、ＭｅＯＨ中のエチルジチオ酢酸２３μl（０.２mmol）を室温で加える。２ .５時間６０℃で撹拌後、溶媒を真空で除去する。残渣をＲＰ−クロマトグラフィー（７：３、ＥｔＯＨ／Ｈ₂Ｏ）で精製し、所望の生産物を白色泡状物として得る；［α］_D ²⁰＝−６５.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６７９。実施例２５−２６Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ₂］Ｂ−ＯＰin Ｈ₂Ｏ中の実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物２４８.３mg（０.４mmol）および１ＮＨＣ１０.４mlを５０℃に暖める。５分後、シアン酸カリウム３３.２ mg（０.４mmol）を少しずつ加える。６時間後、５０℃で水を加え、生産物をＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー（１：９、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）の後、所望の生産物が得られる；［α］_D ² ⁰ ＝−７１.７°（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６６４。Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₃ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ₂］Ｂ −ＯＰinを同様にして製造する；［α］_D ²⁰＝−５４.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０. ５）；ＭＨ⁺＝７６５。実施例２７Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ₂ＯＨ］Ｂ−ＯＰin ＴＨＦ中のピリジン４８μl（０.６mmol）およびベンジルオキシアセチルクロリド９９.６μl（０.６mmol）を０℃に冷却し、実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物３７２.４mg（０.６mmol）を加える。３時間、０℃の後、生産物を数回エーテルで抽出し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。得られる白色泡状物（３７０mg、０.４８mmol）をＥｔＯＨに溶解し、４０psi で１０％Ｐｄ／Ｃ０.５ｇ存在下水素添加する。１２時間後、触媒を除去し、溶液を真空で濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー（９：１、ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ）の後、所望の生産物を得る；［α］_D ²⁰＝−６７.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６７９。実施例２８Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＳＯ₂ＣＨ₃］Ｂ−ＯＰ in ＴＨＦ中の塩化メタンスルホン酸１９.８μl（０.２５mmol）を０℃でピリジン２０μl（０.２５mmol）に加える。ＴＨＦ中の実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１５５.２mg（０.２５mmol）を本混合物に加える。２.５時間０℃で撹拌後、水を加え、生産物をエーテルで抽出し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮し、生産物を白色泡状物として産生する：［α］_D ²⁰＝−６１.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６９９。実施例２９−３１Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₂Ｃ₆Ｈ₅］Ｂ−ＯＰin Ａ．（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−３−フェニル−プロパン− １− ボロン酸スチレン３.４７ｇ（３０.０mmol）およびカテコールボロン酸３.６ｇ（３０. ０mmol）を２０時間１００℃で撹拌し、黄茶色油状物を得る。本油状物をＴＨＦ中の（＋）−ピナンジオール５.０ｇ（３０.０mmol）に加え、一晩撹拌する。フラッシュクロマトグラフィー（８：２、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）の後、（＋）− ピナンジオール−２−フェニル−エタン−１−ボロン酸を得る。ＢｕＬｉ（ヘキサン中１.６Ｍ）１５ml（２４.０mmol）を、ＣＨ₂Ｃｌ₂２.１m lおよびＴＨＦ３７mlの前冷却（−１００℃）溶液に２０分にわたって加える。３０分、−１００℃で撹拌後、上記ＴＨＦ中に得られたピナンジオールボロン酸生産物６.２ｇ（２１.８mmol）を２０分にわたって加える。反応混合物を再び− １００℃で１時間撹拌し、その後ＴＨＦ中のＺｎＣｌ₂１.５１ｇ（１０.９mmol ）を加える。反応混合物を一晩で室温まで暖める。真空で濃縮後、残渣をエーテル／Ｈ₂Ｏに溶解する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。（＋） −ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−３−フェニル−プロパン−１−ボロン酸が、黄橙色油状物として得られる。Ｂ．Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₂Ｃ₆Ｈ₅］Ｂ−ＯＰin ブチルリチウム５.１ml（８.０９mmol）を、ＴＨＦ中のヘキサメチルジシラザン１.７ml（８.０９mmol）の前冷却（−７８℃）溶液に加える。反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで再び−７８℃に冷却する。ＴＨＦに溶解した（＋）− ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−３−フェニル−プロパン−１−ボロン酸２.６８ｇ（８.０９mmol）を加える。１時間−７８℃で撹拌後、溶液を一晩室温に暖める。再び−７８℃に冷却した後、３モル当量のジオキサン中のＨＣｌを加える、混合物を１時間−７８℃で、次いで室温で２時間撹拌する。−２０℃に冷却後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中の実施例１、工程Ｂの活性エステル３.７ｇ（８.０９mmol）の溶液を加え、次いでトリエチルアミン２.３ml（１８.２mmol）を加える。混合物を−２０℃で１時間、室温で２時間撹拌し、次いで濾過する。真空で濃縮後、残渣をエーテル／Ｈ₂Ｏに溶解する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー（６：４、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）の後、所望の生産物が得られる；［α］_D ²⁰＝−８８.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６５４。Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₂（p−Ｃｌ−Ｃ₆Ｈ₄）］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−８３.２゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６８８）およびＢoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro-ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₂（p−ＮＭe₂−Ｃ₆ Ｈ₄）］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−８４.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０．５４）；ＭＨ⁺＝６９７）生産物が、同様にして得られる。実施例３２ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰin Ａ．ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｎ₃］Ｂ−ＯＰin 実施例２、工程Ｃのアジド生産物５.１５ｇ（８.００mmol）を酢酸／濃ＨＣｌ（９：１）４０.０mlに加え、７５分撹拌する。真空で濃縮後、ＨＣｌ・Ｈ−Ｄ −ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｎ₃］Ｂ−ＯＰinをエーテルから結晶化する；mp：８７℃。ＴＨＦ中の塩化ピバロイル０.２９ml（２.４０mmol）を、ＴＨＦ中の上記で得られた生産物１.１７ｇ（２.００mmol）およびトリエチルアミン０.３４ml（２. ４０mmol）に０℃で加え、１時間その温度で撹拌する。本溶液に、ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ）₂］₃ _ＯＣＨ ₂ ＣＯ₂Ｈ５３３mg（２.４０mmol）、続いて飽和水性ＮａＨＳＯ₄溶液４. ０mlを加える。１時間室温で撹拌した後、飽和水性ＮａＨＳＯ₄を加え、生産物を数回ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を２ＮＨ₂ＳＯ₄および食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。粗生産物をＭｅＯＨ／水（６：４）に溶解し、ヘキサンで洗浄する。ＭｅＯＨ／水層を濃縮した後、ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂ ］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｎ₃］Ｂ− ＯＰinが油状物として得られる；［α］_D ²⁰＝−７４.５゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０. ８３）；ＭＨ⁺＝７５１。Ｂ．ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨ₂］Ｂ−ＯＰin 実施例３２、工程Ａの生産物１.０５ｇ（１.４０mmol）をＥｔＯＨ１４mlに溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃｌ４０mgおよび２ＮＨＣｌ０.８４ml（１.３８mmol）の存在下、水素添加する。２.５時間後、触媒を除去し、水を加える。水層をエーテルで洗浄し、真空で濃縮し、ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨ₂］Ｂ−ＯＰinを油状物として得る；［α］_D ²⁰＝−７４.２゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.６１）；ＭＨ⁺＝７２５。Ｃ．ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰin ギ酸３１μl（０.８０mmol）および酢酸無水物７１μl（０.７０mmol）を２時間、５０℃で撹拌する。０℃に冷却後、ＴＨＦ中の実施例３２、工程Ｂのボロリジン生産物３２５mg（０.４３mmol）およびトリエチルアミン０.１２ml（０.８３mmol）を加える。１７時間室温で撹拌後、ＥｔＯＡｃを加え、溶液を２ＮＨ₂ ＳＯ₄および食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。ＲＰ−クロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／水、勾配５０％Ｈ₂Ｏ→２５％Ｈ₂Ｏ）の後、所望の生産物を油状物として得る；［α］_D ²⁰＝−８０.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０．２７）；ＭＨ⁺＝７５３。実施例３３ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＥt］Ｂ−ＯＰin ＴＨＦ中の実施例３２、工程Ｂのボロリジン生産物３２５mg（０.４３mmol）を０℃に冷却し、イソシアン酸エチル４０μl（０.４３mmol）およびＮ−メチルモルホリン４８μl（０.４３mmol）を加える。４時間室温で撹拌後、ＥｔＯＡｃを加え、溶液を１ＮＮａＨＳＯ₄、飽和水性ＮａＨＣＯ₃および食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。ＲＰ−クロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／水、勾配５０％Ｈ₂Ｏ→２５％Ｈ₂Ｏ）の後、所望の生産物を油状物として得る；［α］_D ²⁰＝−７６.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５５）；ＭＨ⁺＝７９６。実施例３４Ｈ−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＯ］Ｂ（ＯＨ）₂ 実施例２、工程Ｅのホルムアミド生産物１５０mg（０.２３１mmol）を酢酸／濃ＨＣｌ（１：９）２.５mlに溶解し、４時間室温で撹拌する。真空で濃縮後、残渣をトルエンで３回溶解し、再び真空で濃縮する。所望の生産物が黄色泡状物として得られる；［α］_D ²⁰＝−６３.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５５）；ＭＨ⁺＝４１５。実施例３５Ｈ−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＥt］Ｂ（ＯＨ）₂ 実施例２１の生産物Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＥt］Ｂ−ＯＰin１５０mg（０.２１７mmol）を酢酸／濃ＨＣｌ（１：９）２.５mlに溶解し、室温で４時間撹拌する。真空で濃縮後、残渣を３回トルエンに溶解し、再び真空で濃縮する。所望の生産物が橙色泡状物として得られる；［α］_D ²⁰＝−７４.１゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５６）；ＭＨ⁺＝４５８。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年３月３１日【補正内容】明細書プロテアーゼ阻害活性を有するペプチドボロン酸誘導体本発明は、トロンビン（第IIa因子）、第Ｘa因子、第VIIa因子、第XIIa因子、カリクライン、プラスミン、プロリルエンドペプチダーゼおよびIg AIプロテアーゼのような、血液凝固工程に含まれるセリンプロテアーゼ類の阻害剤に関する。凝血系の最後の酵素、トロンビンは、可溶性フィブリノーゲンをフィブリンに開裂し、次いで、それは架橋し血栓となるマトリックスを形成する不溶性ゲルを形成する。血管が傷害を受けた場合、上記の工程は止血に必要である。正常の環境下では、血漿中でトロンビンは測定可能量ではない。トロンビン濃度の増加は、現在の最も一般的で深刻な医学的問題の一つである血栓塞栓疾病を導く血餅の形成をもたらし得る。トロンビンは、数個の生理学的反応により、止血の制御を寄与する。その主要な機構、フィブリノーゲンのフィブリンへの転換に加えて、トロンビンは第XIII 因子を活性化し、それはフィブリンの架橋を担う。トロンビンは、プロトロンビンからトロンビンの形成に両方とも必要な第Ｖ因子および第VIII因子の活性化を含む陽性フィードバック機構によりまた働く。トロンビンは他の本質的な役割を有する：その血小板への結合は、初期止血を担う血小板遊離および凝固を開始させる。トロンビンの反応は、血漿中の天然阻害剤により更に制御される。これらの中で最も重要なものはアンチトロンビンIIIおよびヘパリンである。これらの２つの化合物は単離され、プロトロンビン活性化の危険を伴う止血機構の不均衡の病気において、治療的および予防的に使用されている。経口的に活性な合成トロンビン阻害剤は、これらの天然阻害剤の非経口的投与の代替物として有用である。この領域の更なる研究が、インビトロでのトロンビンの良好な阻害剤の合成をもたらすであろうが、今までのところ経口臨床使用のために本当に優れた候補はまだ無い。トロンビンの重要な天然基質であるフィブリノーゲンのアミノ酸配列を模倣することにより、幾つかの優れたトロンビンの短いペプチド基質が合成されている。これらのペプチド基質は酵素の阻害剤を提供するためにまた派生する。従って、色素基質Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−pＮＡおよびＤ−Ｐhe−Ｐig−Ａrg−ＰＮＡは、トロンビン開裂部位に先立つ配列を模倣する。対応する可逆的および非可逆的阻害剤、Ｄ−Ｐhe−Ｐro−アルギナル（Ar ginal）およびＤ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−ＣＨ₂Ｃｌは、インビトロで１０^-8Ｍ範囲の阻害を示す。クロロメチルケトン類は、一般的に臨床的使用に理想的な特性は不十分であり、上記に例示のペプチドアルデニドは非常に低いＬＤ₅₀を有する。第Ｘa因子は、そのチモーゲン、プロトロンビンの限定蛋白分解によりトロンビンの産生に応答可能な凝血酵素である。重量／重量を基本にして、第Ｘa因子はインビボでトロンビンより少なくとも１０倍血栓源性である。これは、第Ｘa 因子が増殖縦つなぎ系においてトロンビンの１工程前であり、第Ｘa因子１部因子は、その前駆体から多くのトロンビン分子を産生できるという事実に起因する。その有効性は、体の相対的に遅い第Ｘa因子の排出にもまた起因し得る。第Ｘa 因子と異なり、トロンビンは血管壁の高親和性部位上へ循環血液から急速に無くなる。組織因子の第VII因子への結合は、組織傷害後の血液凝固の開始における重要な事象を示す。最初にそれは第IX因子および第Ｘ因子の活性化を触媒し、第２に痕跡量の第Ｘa因子および第IXa因子（および恐らく組織傷害後に細胞から遊離された他の酵素）は、チモーゲン第VII因子／組織因子複合体から、非常に活性な第VIIa因子／組織因子複合体に変換する。内および外経路の接合部の第Ｘa因子の中心位置ならびに内および外凝血経路の両方の開始における第VIIa因子の重要な役割により、第Ｘa因子および第VIIa 因子は止血経路を調整する好適な標的となる。カリクラインは第XII因子の働きにより、陰性に荷電した表面の存在下、プレカリクラインから形成される。カリクラインは、次に、第XII因子を、第XIIa因子に開裂でき、それにより両方向活性化系が形成される。第XIIa因子は凝血系の内部の最初の酵素である。接触系の重要性は、恐らく表面媒介防御機構としてであり、系の大規模な活性化は通常ショック状態または播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）で見られる。カリクラインのこの段階での役割は、高分子量キニノーゲンを、血管拡張物、ブラジキニンの遊離を伴って開裂することである。ブラジキニンは、また、増加した血管透過性、痛みおよび好中球の移動の原因となる。キニン形成阻害剤は、関節炎および膵炎を含むある種の炎症に有益であることが示され、喘息の処置にもまた有用であり得る。カリクレイン阻害剤として臨床的に重要になっている唯一の物質はアプロチニン（トラシロール）である。アプロチニンは分子量６５００のポリペプチドであり、プロテアーゼと安定な複合体を形成し、結合定数１０^-10−１０^-13Ｍを有する。線維溶解はフィブリノーゲンおよびフィブリン凝塊の酵素的溶解の工程である。血漿はタンパク質、種々の活性剤の影響を受けてプラスミンに変換するプラスミノーゲン、その活性がトリプシンに類似しているタンパク質分解酵素を含む。プラスミンはフィブリノーゲンおよびフィブリンをフィブリン／フィブリノーゲン分解産物に分解する。正常の条件下では、線維分解系は凝固系と平衡を保っている。血流中に形成された小血栓は、酵素的に溶解され、血管を経由する循環は体内での線維溶解系の活性化により回復する。線維分解活性が高すぎれば、出血をもたらしまたは延長し得る。活性は血中の天然阻害剤により阻害できる。プロリルエンドペプチダーゼは、ペプチド鎖内のプロリン残基のカルボキシル側のペプチド結合を開裂する。サブスタンスＰ、ニューロテンシン、甲状腺刺激ホルモン−遊離ホルモンおよび黄体形成ホルモン−遊離ホルモンを含む多くの神経ペプチドを容易に分解し、細胞のインターロイキン２（ＩＬ−２）を産生する能力に関係があるのはセリンプロテアーゼである。本酵素はベンジルオキシカルボニル−プロリル−プロリナルにより、１４nMのＫ_iで阻害される。プロリルエンドペプチダーゼの生理的役割についてほとんど知られていないが、種々の神経ペプチドの生理活性の制御において顕著な役割を担っている可能性がある。感染に対する防御の最初の系を構成する抗体の優勢な形であるＩgＡのＩgＡプロテイナーゼ触媒開裂は、分子の抗原結合Ｆab領域からＦcを分離する。このような開裂は、その抗微生物活性を妨げまたはなくすことが予期される。すべてのＩgＡプロテイナーゼは、従って、ヒトＩgＡの蝶番領域のプロリン残基の後を開裂すると確認された。ペプチドプロリル−ボロン酸は、これらの酵素をタンパク質分解酵素のセリンプロテアーゼ群に属する酵素として表すナイセリア・ゴノロエア（Neisseria gonorrhoea）およびヘモフィラス．インフルエンザエ（Hemoph ilus influenzae）由来のＩgＡｌプロテイナーゼを阻害する。癌、炎症および神経活性のような病理的疾病に関連する種々の生理学的工程においてトロンビンが果す多数の役割は、心臓血管系に全く関係しない数個の徴候において、トロンビン阻害剤として有効な使用が示唆される。多くの癌細胞がトロンビンの産生に関連する前凝固活性の誘導を示す。結果として、局所的フィブリン蓄積および凝固が発生し、それは癌の成育に重要であると考えられている。加えて、その内皮細胞上でのその作用のために、トロンビンは転移している癌細胞の滲出を促進し得る。これゆえ、トロンビン阻害剤はある種の癌の処置だけでなく。化学療法剤で治療している患者に頻繁に見られる凝固性亢進の減少にまた有益であることを証明し得る。トロンビンの内皮細胞活性化は、インターロイキン−１、プロスタグランジンおよび血小板活性化因子の合成および遊離のような多くの前炎症的変化を誘発する。加えて、トロンビンはＣＤ６２（あるいはＧＭＰ−１４０としても既知）およびＣＤ６３の暴露を誘発し、２種の粘着分子は内皮表面への白血球の粘着の原因となる。トロンビンはまた好中球を含むタンパク質の血管透過性を増加させ、呼吸性疾患、関節リューマチおよび大腸潰瘍に含まれると信じられているペプチドである、インターロイキン−８−前駆体タンパク質を開裂する。これら全ての前炎症工程へのトロンビンの拘わりあいにより、トロンビン阻害剤は炎症関連病理的疾病の治療的処置に使用するための有効な標的となる。神経成育の調節物および特異的天然トロンビンアンタゴニストであるプロテアーゼネキシン−１の活性は、アルツハイマー病の患者で顕著に特異的に減少する。アルツハイマー患者の脳でトロンビン様活性が増加したという観察と併せて、これはトロンビン阻害剤がトロンビン活性亢進または関連したセリンプロテアーゼに関する神経病理変化の限定または回復に有用であり得ることを示唆する。ボロン酸は、種々のセリンエステラーゼおよびプロテアーゼの阻害剤として研究されている。プロテアーゼ阻害剤として使用された最初のボロン酸含有アミノ酸同族体は、キモトリプシンおよびサブチリシンの阻害剤として使用されていたＮ−アセチル−Ｌ−フェニルアラニンのボロン酸同族体であった。ペプチドボロン酸は、キモトリプシン、サブチリシンおよびエラスターゼの阻害剤として使用されている。ボロン酸とプロテアーゼの生物系における相互作用は知られており、種々の簡単なボロン酸がヒトへの使用に対して充分無毒であることが示されている。エラスターゼのペプチドボロン酸阻害剤は、最近気腫に関連した動物試験で使用されている。ペプチドクロロメチルケトンと異なり、生理学的有効量レベルで毒性は報告されていない。欧州特許出願第２９３８８１号（デュポン）は、Ｃ末端にリジン、オルニチンおよびアルギニンのボロン酸誘導体を含むペプチドの製造およびそのトリプシン様セリンプロテアーゼ阻害剤としての使用を開示している。ペプチドの他のアミノ酸は、全て２０の天然由来アミノ酸のＤまたはＬ形である。疎水性側鎖を有する少なくとも１つの非天然α−アミノ酸を含む場合、トリプシン様セリンプロテアーゼ阻害剤として優れた特性を有する化合物が得られることが本発明により分かった。この後者の型の化合物は式Ｉ〔式中、Ｗ＝ＨまたはＮ−保護基；Ｙはｎ＋１アミノ酸ペプチドＹ−ＬysまたはＹ−Ａrgがトリプシン様プロテアーゼの活性部位に親和性を有するように選択されたｎアミノ酸の配列（ここで、ｎは１から１０の整数であり、少なくとも１つのアミノ酸が疎水性側鎖を有する非天然アミノ酸である）；Ｑ₁およびＱ₂は、同一または異なって−ＯＨ、−ＣＯＲ₁、−ＣＯＮＲ₁Ｒ₂、− ＮＲ₁Ｒ₂および−ＯＲ₃から選択され得、またはＱ₁およびＱ₂は一緒になってジオール残基を形成する；Ｒ₁、Ｒ₂およびＲ₃は、同一または異なってＣ_1-10アルキル、Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキルまたは、Ｃ_1-4アルキル、ハロゲンおよびＣ_1-4アルコキシから選ばれた基で３個まで置換されているフェニル；Ｒ₄は水素またはＣ_1-10アルキル；Ｒ₅は−Ａ−Ｘ基〔ここで、Ａは−（ＣＨ₂）_z−（ここでｚは２、３、４または５）；−ＣＨ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₂−；−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−；− （ＣＨ₂）₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−；−（ＣＨ₂）₂−Ｃ（ＣＨ₃）₂−；−ＣＨ（ＣＨ₃ ）−（ＣＨ₂）₃−；−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₂−；−ＣＨ₂−ＣＨ₂− ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−；−（ＣＨ₂）₃−ＣＨ（ＣＨ₃）−；−（ＣＨ₂）₃−Ｃ（ＣＨ₃）₂−；Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキル）およびＸは−ＮＨ₂、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ₂、−Ｓ−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ₂、−Ｎ₃、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｃ_1-4アルキルチオまたは−Ｓｉ（ＣＨ₃）₃もしくはＲ₄およびＲ₅が一緒になってトリメチレン基を形成し、＊で印をした不斉炭素原子はＤ−またはＬ−形を有し得、またはこれらの任意の混合物を意味する〕で示される化合物であり、我々の同時存在特許、公開済特許出願欧州特許第０４７１６５１号に記載されている。非天然アミノ酸は、Ｄ−またはＬ−Ａla、Ａrg、Ａsp、Ｃys、Ｇln、Ｇlu、Ｇ ly、Ｈis、Ｉle、Ｌeu、Ｌys、Ｍet、Ｐhe、Ｐro、Ｓer、Ｔhr、Ｔrp、ＴyrまたはＶal以外の任意のアミノ酸として定義される。本発明により、Ｒ₅の好適な選択により後者の化合物が更に改善され得ることが分かった。従って、本発明は式Ｉで示される化合物およびその塩を提供し、式中、Ｗ、Ｒ₄ 、Ｑ₁およびＱ₂は欧州特許第０４７１６５１号に記載の意味であり、ＹはＮ末端アミノ酸が疎水性側鎖を有する非天然アミノ酸であり、他方のアミノ酸がＬ− プロリンであり、非天然アミノ酸はアミノ酸ペプチドＹ−ＬysまたはＹ−Ａrgがトリプソン様プロテアーゼの活性部位に親和性を有するように選択され、Ｒ₅は −Ａ−Ｘ基〔式中、Ａは−（ＣＨ₂）_z−（ここで、ｚは２、３、４または５）； −ＣＨ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₂−；−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−；−（ＣＨ₂ ）₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−；−（ＣＨ₂）₂−Ｃ（ＣＨ₃）₂−；−ＣＨ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₃−；−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₂−；−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂；−（ＣＨ₂）₂Ｃ（ＣＨ₃）₂−ＣＨ₂−；−（ＣＨ₂）₃−ＣＨ（ＣＨ₃）−；−（ＣＨ₂）₃ −Ｃ（ＣＨ₃）₂；−（ＣＨ₂）₃ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂−；Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10 アラルキルであり、ＸはＯＨ、ＳＨ、ＮＲ₆Ｒ₇またはフェニル、Ｒ₆はＨまたはＣ_1-10アルキルおよびＲ₇はＣ_1-10アルキル、−ＣＯ−Ｒ₈、−ＣＳ−Ｒ₈または −ＳＯ₂−Ｒ₈、Ｒ₈はハロゲン、ＯＨ、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｃ（ＮＨ）Ｒ₉、ＮＲ₁ ₀ Ｒ₁₁およびＣ（Ｏ）ＯＲ₆（Ｒ₆は上記で定義の意味）から選ばれた基で３個まで置換されていてもよいＨまたはＣ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルコキシ、Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキル、Ｒ₉はＣ_1-3アルキルまたはＮ（ＣＨ₃）₂およびＲ₁₀ およびＲ₁₁は（同一または異なって）ＨまたはＣ_1-10アルキル）であり、＊で印をした炭素原子はＤ−またはＬ−形であり得、本化合物はこれらの任意の混合物を含む。非天然アミノ酸は欧州特許第０４７１６５１号と同様の意味を有する。好ましくはＮ−保護基Ｗは、式Ｈ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_p−（式中、ｐ＝３−３０）；Ｒ₁₂ＣＯ−；Ｒ₁₃ＯＣＯ−またはＲ₁₄ＳＯ₂−（ここで、Ｒ₁₂はＣ_1-6アルキルまたはＨ（ＣＨ₂−Ｏ−ＣＨ₂）_p、ｐは上記で定義の意味；Ｒ₁₃はＣ_1-6アルキル、フェニル、ベンジルまたはナフチル；およびＲ₁₄はフェニル、ナフチルまたはＣ_1-4アルキルフェニルである）で示されるものであり、Ｒ₁₃ＯＣＯ−が特に好ましい。最も好ましい保護基は、Ｒ₁₃’ＯＣＯ−（式中、Ｒ₁₃’は第３級ブチル（Ｂｏｃと呼ぶ）およびＲ₁₃’がベンジル（Ｚと呼ぶ）である）で示されるものである。好ましくはＲ₅はＲ₅’〔ここで、Ｒ₅’は−（ＣＨ₂）_z’−Ｘ’（ここで、Ｘ ’は３個までのハロゲン原子で置換されていてもよいＯＨ、フェニル、ＮＨ−ＣＯ−Ｒ₈’、ＮＨ−ＣＳ−Ｒ₈’、ＮＨＳＯ₂Ｒ₈’またはＮＲ₁₀’Ｒ₁₁’、ここで、Ｒ₈’はＨまたはＣ_1-3アルキルまたはＣ_1-3アルコキシならびにＲ₁₀’およびＲ₁₁’は、同一または異なってＨまたはＣ_1-3アルキルである）およびｚ’は２、３または４である〕である。更に好ましくは、Ｒ₅はＲ₅”〔ここで、Ｒ₅”は−（ＣＨ₂）_z’−Ｘ”（式中、Ｘ”はＯＨ、Ｃ₆Ｈ₅、Ｃ₆Ｈ₄Ｃｌ、Ｃ₆Ｈ₄Ｎ（Ｍｅ）₂、ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ₃、ＮＨ−ＣＨＯ、ＮＨ−ＣＳ−ＮＨＣＨ₃、ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ（ＣＨ₃）₂、ＮＨ− ＣＯ−ＣＨ₂− ＣＨ₃、ＮＨ−ＣＨＳ、ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ₂Ｃｌ、ＮＨ−ＣＯ−ＯＣＨ₃およびｚ ’は上記で定義の意味である）〕である。好ましい化合物は、式Ｉａ〔式中、Ｗ、Ｙ、Ｒ₄およびＲ₅は上記で定義の意味およびＲ₁₅およびＲ₁₆はジヒドロキシ化合物の残基を意味する〕で示されるものである。ジヒドロキシ化合物の有用な例は、２，３−ブタンジオール；カテコール；２，３−ジメチル；２’，３’−ブタンジオール；シクロヘキサンジオール；エチレングリコール；１，２−ヘキサンジオール；２，３−ヘキサンジオール；ジエタノールアミンまたは、炭素原子または他の炭素原子により置換されている炭素原子の隣りに置換されたヒドロキシ基を有する脂肪族または芳香族化合物である。特に好ましいものは、Ｑ₁およびＱ₂が一緒になって式ａ）または式ｂ）〔式中、ＬはＣ_1-4アルキル基、特にメチル、ｉ−Ｐi、ｎ−Ｐrまたはｎ−Ｂuである〕で示されるＯＰin基を意味するものである。非天然アミノ酸は、Ｏ−アルキルまたはＳ−アルキル−システインのようなアルキル化天然アミノ酸であり得る。しかしながら、好ましい非天然アミノ酸は、アミノ酸に直接またはメチレン基を経由して結合した少なくとも２環および非極性置換基を有する脂環式基；または所望により極性基で置換されていてもよい芳香族基、または第３級ブチルまたはトリメチルシリル基に結合したメチレン基から成る式II 〔式中、Ｒ₁₇は疎水性基である〕で示される。好ましいＲ₁₇はＲ₁₇’でありここでＲ₁₇’は式ｃ）、ｄ）、ｅ）、ｆ）ｇ）、ｈ）またはｉ）で示される。これらのより好ましい化合物は、式Ｉ’ 〔式中、Ｗ、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₁₇、Ｑ₁およびＱ₂は上記で定義の意味〕を有する。特に好ましい化合物は、式Ｉ” 〔式中、Ｗ、Ｒ₄、Ｒ₅’およびＲ₁₇は上記で定義の意味〕で示されるものである。最も好ましい化合物は式III で示される化合物、式IV で示される化合物、式Ｖで示される化合物および式VI で示される化合物である。ペプチドは、ペプチド−ペプチダーゼ複合体の分解定数が、１０^-5Ｍまたはそれ以下の値を示せば、トリプシン様プロテアーゼの活性部位に親和性を有していると考えられる。式Ｉ（式中、ＸがＮＨＣＨＯまたはＮＨＣＯアルキル）で示される化合物は、式Ｉ（式中、Ｘは−ＮＨ₂）で示される化合物を、対応する酸の活性形と反応させることにより製造し得る。式Ｉ（式中、ＸがＮＨＣＯアルコキシ）で示される化合物は、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨ₂）で示される化合物を、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミドと反応させ、続いて対応するエステルの活性形を添加することにより製造し得る。式Ｉ（式中、ＸがＮＨＣ（Ｓ）ＮＨアルキル）で示される化合物は、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨ₂）で示される化合物を、有機溶媒中で対応するアルキルイソチオシアネートと反応させることにより製造し得る。式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨ₂）で示される化合物は、次に、式Ｉ（式中、Ｘが− Ｎ₃）で示される化合物の水素添加により製造し得る。水素添加は、例えばＰｄ／Ｃ触媒を使用した標準条件下で行い得る。式Ｉ（式中、Ｘが−Ｎ₃）で示される化合物は、式VI 〔式中、Ｗ、Ｙ、Ｑ₁およびＱ₂は上記で定義の意味およびＲ₁₈は−Ａ−Ｂｒ（ここで、Ａは上記で定義の意味）〕で示される化合物を、ジメチルスルフォキシドのような極性非プロトン性溶媒中で、ナトリウムアジドと反応させて製造し得る。式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨＣＨＳ）で示される化合物は、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨＣＨＯ）で示される化合物を、トルオールのような有機溶媒中でローエソン（ Laweson）試薬と反応させることにより製造し得る。式Ｉ（式中、Ｘは所望により置換されたフェニル）で示される化合物は、式VI I 〔式中、Ｑ₁およびＱ₂は上記で定義の意味およびＲ₁₉は−Ａ−フェニル（所望により置換）（ここで、Ａは上記で定義の意味）〕で示される化合物を、ＬiＮ［Ｓi（ＣＨ₃）₃］₂と反応させ、続いて過剰の酸と共に加水分解し、式VIII 〔式中、ＷおよびＹは上記で定義の意味〕で示される保護ペプチドと結合させることにより得られ得る。反応は好ましくは乾燥非プロトン性極性溶媒、例えばテトラヒドロフラン中で、−７８℃から室温の間の温度で行う。式VIIIで示される中間体は、マットソンら、オルガノメタリクス、３、１２８４−８（１９８４）の方法により得られ得る。式VIIIで示される保護ペプチドは、ペプチド化学で慣用的な方法により、所望の非天然アミノ酸で出発して製造し得る。このようなアミノ酸は、商業的に入手可能（例えば、Ｒ₁₆がｃ群であるアミノ酸）または文献、例えばアンゲヴェント・ケーミエ９３、７９３（１９８１）およびジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティー、１０９、６８８１（１９８７）に開示の方法と類似のものにより製造し得るかのいずれかである。式Ｉ（式中、ＸがＯＨ）で示される化合物は、式Ｉ（式中、Ｘが−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃）で示される化合物を、テトラブチルアンモニウム−フロリドのような脱シリル化剤と反応させて得られ得る。式Ｉで示される化合物は、トリプシン様プロテアーゼ阻害剤として有用であり、これらの酵素のイン・ビトロでの診断および機構研究に使用し得る。更に、その阻害作用のために、それらは、制御系における酵素の過剰による疾病の予防または処置、例えば凝固および線維溶解の制御への使用が示唆される。本発明の化合物は、以下の試験法で示唆されるように、トリプシン様セリンプロテアーゼ阻害特性を有する：ａ）酵素阻害動態試験物質をクレモフォア／エタノール（１：１）またはＤＭＳＯに溶解し、蒸留水で希釈し、１mMの貯蔵溶液を産生する。更に、測定用緩衝液（１００mMリン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ７.４、１００mM ＮａＣｌおよび０.１％ウシ血清アルブミン含有）で希釈する。動態測定は、９６マイクロウェルプレートを使用して行う；各々のウェルは５０μl基質、１００μl試験化合物および１００μl酵素を緩衝液中に含む。基質および酵素の最終濃度は下記の通りである：１６０pM α−トロンビンおよび１００μlペファクロム（Pefachrom）ＴＨ（Ｋ_m＝６.９μ M）、８００pMヒトプラスミンおよび２００μMペファクロムＰＬ（Ｋ_m＝６６.４ μM）、および２６０pMウシ膵臓トリプシンおよび５００μMペファクロムＴＲＹ（Ｋ_m＝１６７.７μM）。測定は、試験すべき物質および基質を含む溶液に酵素を加えることにより開始する。基質の加水分解によるｐ−ニトロアニリンの遊離はサーモマックス・マイクロウェル・カイネティック・リーダー（Thermomax mi crowell kinetic reader）（モレキュラー・デバイシーズ、メンロ・パーク、カリフォルニア州、ＵＳ）で、４０５nmの光学密度の増加を測定することにより３０分追跡する。阻害定常速度に急速に到達した場合、阻害定数（Ｋ_i）は、ディクソン方程式（マイオケミカル・ジャーナル、１９５３、５５：１７０−１７１）へ重量直線退行をあてはめることにより、決定する。遅い、きちんと結合する阻害剤に対しては、阻害の機構は下記のスキームにより説明し得る：〔ここで、Ｅ、Ｓ、ＰおよびＩは、それぞれ、酵素、基質、生産物（ｐ−ニトロアニリン）および試験すべき阻害物質であり、ｋ_onおよびｋ_offは阻害についての結合および分離定数である（タッパレリら、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー２６８（１９９３）、４７３４−４７４１）〕。異なった濃度の阻害剤存在下でのｐ−ニトロアニリンの形成の進行曲線は、スキームにより示される機構の方程式へ非直線退行によりあてはめられる（モリソンおよびワルシュ、Adv．Enzymol．Relat．Areas Mol．Biol．１９８８、６１：２０１−３０１）。これらの分析によりｋ_on、ｋ_offおよびＫ_iの見掛けの値の推定がされ、モリソンおよびワルシュが開示したように、基質の存在に対して補正して、真の値を得る。記載した実験条件下では、実施例１の化合物においてＫ_i１３nMが観察される。ｂ）イン・ビトロ凝固測定イン・ビトロ凝固測定は、クエン酸化ヒト血漿で行う。試験すべき物質または溶媒を、血漿と共に、測定前に１０分、３７℃でインキュベーションする。トロンビン時間（ＴＴ）決定は、最終トロンビン濃度５Ｕ／mlで行う。活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）は、０.１ml血漿±試験すべき物質と、０.１ mlエラギン酸中の精製大豆リン脂質（Actin-FS）を、４時間、３７℃でインキュベーションし、続いて０.１ml ＣａＣｌ₂（５０mM）を加えることにより、測定する。本試験法において、本発明の化合物は０.１μMから０.５μMの濃度で著しくＴＴおよびＡＰＴＴを増加させる。実施例１の化合物では、約３００秒のＴＴの延長が、１.８μMで達成され、対照値の２×のＡＰＴＴの高さが４.４μMで達成される。ｃ）イン・ビトロ血小板凝固測定洗浄ヒト血小板をアードリー（ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・ファーマコロジー、１９７０、１９：７−１７）の方法の変法により製造する。洗浄血小板懸濁液（０.４６ml）を３７℃に保ち、１１００rpmで撹拌する。試験すべき物質または溶媒の添加後、凝固を１nMヒトトロンビンで誘発する前に血小板を２分間維持する。血小板凝固の程度を、最大凝固振幅および阻害剤無しで観察された凝固率の阻害により定量する。本試験法において、本発明の化合物は低nM範囲で血小板凝固を著しく阻害する。実施例１の化合物は、ＩＣ₅₀値が３.８nMを有する。トロンビンまたは第Ｘa因子阻害剤であるこれらの本発明の化合物は、抗トロンボゲン特性を有し、抗トロンボゲン剤が必要である場合、使用し得る。一般に、これらの化合物は経口的または非経口的にホストに投与され、抗トロンボゲン効果を得る。ヒトのような大型哺乳類の場合、本化合物は単独または薬理学的担体または希釈剤と共に、０.０２−１５mg/体重Kg、好ましくは１−１０mg／体重 Kgの用量で投与し得、抗トロンボゲン効果を得、一回投与または複数回投与として、または持続性遊離形として投与し得る。体外血液輪が患者で確立されている場合、０.１−１mg／kgを、静脈から投与し得る。全血と使用する場合、リットル当たり１−１０mgを、凝固予防のために与え得る。薬理学的希釈剤は既知であり、糖、澱粉および水を含み、それらは錠剤、カプセル、注射可能溶液等の製造に使用し得る。本発明の化合物は、採血または血液分配容器、管または血液と接触する移植可能装置中での血液の凝固の予防の目的で、血液に加え得る。バトラーら（ブロッド・コアギュレーション・アンド・フィブリノリシス、第３巻（１９９２）１５５頁）記載のラットでの動脈−静脈吻合部血栓症モデルにおいて、本発明の化合物は用量依存的に血栓形成を阻害する。実施例１の化合物を使用して、０.３mg／kg i.v.で血栓形成は２１％阻害され、３mg／kg i.v. の用量で阻止される。また、そのトリプシン様セリンプロテアーゼ阻害活性の観点から、式Ｉで示される化合物は、静脈または動脈手術または他の形の血管傷害に続く血管再造形（増殖、移動）の阻害への使用が示唆される。経皮経管冠動脈形成術（PTCA）は、アテローム硬化症斑閉塞環状動脈の処置の一般的な手術方法になっている。血管形成は、例え少ない程度でも、大腿および腎臓動脈の様な末梢血管でまた行われる。バルーンカテーテル血管形成中のアテローム硬化症斑を裂く／圧縮および動脈壁を伸ばすことは、更に内皮細胞を傷付け（または除去）る結果となり、また下にある血管平滑筋細胞を傷付ける可能性がある。ＰＴＣＡが担う主な合併症は、急性再閉塞（暴露されたトロンボゲン血管表面の閉塞血小板血栓の形成）および慢性再狭窄（主に平滑筋の増殖および移動のため）である。ＰＣＴＡ２４時間後に〜５％の患者に発生する急性再閉塞は、生命を脅かし、すぐに外科的に処置しなければならない。手術後３−６カ月後で約３０％の患者で診断された慢性狭窄は、胸部の痛みを誘発するが、その閉塞が１００％においてのみ生命を脅かす（斑が破裂したら、心筋の閉塞形成を起こす）。傷害に反応した血管におけるトロンビンの考えられる拘わりあいは、最近精密に調べられている。その血小板への作用により、トロンビンは、傷害部位の初期血小板漸増および活性化に含まれ、その平滑筋へのマイトジェン作用の効能により、トロンビンはまた血管内膜を厚くする。トロンビン濃縮は、正常内皮層の欠損における凝固経路の連続活性化のため、また血栓溶解工程中の血餅結合トロンビンの遊離のため、血管傷害部位で上昇するようである。加えて、トロンビンは細胞外マトリックスに結合するようになり、そこで、活性であり続け、循環抗トロンビンの阻害効果から長期間保護される。血小板と重傷の血管壁との相互作用は、局所トロンビン産生に一部分依存しているように見える。トロンビン阻害の蓄積された証拠は、もしかすると、バルーン血管形成に続く再狭窄を限定するための興味深い法則となるが、全ての入手可能な試薬は、充分な局所濃度を得るため、または他の副作用を軽減し得るために、非経口的（または局所的）に投与しなければならない。本発明の化合物は、抗トロンボゲン剤として使用されるのと同様の濃度で、血管再造形の阻害に使用し得る。有利には、本発明の化合物は経口で活性であり、低毒性で急速な活性の発生がある。加えて、これらの化合物はヘパリンのような化合物に過敏である固体の処置にも特に実用的であり得る。以下の実施例において、記号は以下の意味を有する：Ｚ＝ベンジルオキシカルボニルＢoc ＝ｔ−ブチルオキシカルボニルＡc ＝アセチルＭeＯＨ＝メチルアルコールＥtＯＡc ＝酢酸エチルＤＭＦ＝ジメチルホルムアミドＤＣＣ＝ジシクロヘキシルカルボジイミドＨＯＮＳu ＝Ｎ−ヒドロキシ−サクシンイミドＯＰin ＝ピナンジオールＴＨＦ＝テトラヒドロフランｎ−Ｂu ＝ｎ−ブチルＮp ＝ｐ−ニトロフェニルＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィーＢzl ＝ベンジルＴＭＳal ＝トリメチルシリルアラニンＢoroＰro-ＯＰin ＝ −ＣＯＯＨ基がＢ−ＯＰinで置き換わっている、プロリンの同族体ＢoroＬys ＝ −ＮＨ−ＣＨ−（ＣＨ₂-ＣＨ₂-ＣＨ₂-ＣＨ₂-ＮＨ₂）Ｂ − 実施例１Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＯＨ］Ｂ−ＯＰin Ａ．Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−ＯＨアンゲヴァンテ・キーミエ（Angew．Chem．）９３、７９３（１９８１）に記載の方法で製造したＤ−ＴＭＳalエチルエステル２１.５ｇ（１１３.７mmol）を、ＣＨ₂Ｃｌ₂に溶解し過剰のＣＨ₂Ｃｌ₂中のＢoc₂Ｏの溶液を加える。室温で１５時間の後、氷冷０.２５Ｎ塩酸５００mlを加える。有機層を５％ＮａＨＣＯ₃および食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空濃縮する。粗物質（無色油状物）を直接ケン化工程に使用する。メタノールに溶解し、０ ℃に冷却し、１ＮＮaＯＨ５１０mlと合わせ、０℃で３時間撹拌する。１ＮＨＣｌでｐＨ１まで酸性化した後、混合物を数回エーテルで抽出する。有機層を合わせ、食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空で濃縮する。生産物（２９.７ｇ油状物）を更に精製することなく、次工程に使用する。Ｂ．Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＯＮＳu Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−ＯＨ２９.７ｇ（１１３.７mmol）およびｐ−ニトロフェノール１９.０ｇ（１３６.３mmol）をＥｔＯＡｃに溶解する。０℃に冷却した後、ＤＣＣ２３.４ｇ（１１３.６mmol）を加え、混合物を１時間０℃で、統いて１５時間室温で撹拌する。沈殿を濾取し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、濾液を真空で濃縮する。得られる油状物をフラッシュクロマトグラフィー（９：１、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製し、所望のＢoc−Ｄ−ＴＭＳal−ＯＮpを白色結晶として得る。Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−ＯＮp５１.６ｇ（１１３.７mmol）をＴＨＦに溶解し、等モル量のプロリンおよびＥｔ₃Ｎの水性溶液を加える。室温で２０時間後、ＴＨＦを真空で除去し、水性残渣を水で希釈し、数回ＥｔＯＡｃで抽出する。１０％クエン酸を加えることにより水性層のｐＨを３に調節する。得られる油状生産物を数回ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機相を食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄ で乾燥し、真空で濃縮する。無色油状物が、エーテル／ヘキサンから再結晶し、ジペプチドＢoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＯＨが、白色結晶化合物、mp：１７６℃ で得られる。得られたジペプチド２６.０ｇ（７２.５mmol）をＥｔＯＡｃに溶解する。０℃ まで冷却した後、ＨＯＮＳｕ９.８ｇ（８５.５mmol）およびＤＣＣ１４.９ｇ（７２.３mmol）を加える。混合物を３時間０℃で、更に１５時間室温で撹拌する。混合物を０℃に再冷却し、ジシクロヘキシルウレアを濾取し、数回ＥｔＯＡｃで洗浄する。濾液を水性０.１ＭＮa₂ＣＯ₃で、次いで２％ＫＨＳＯ₄で洗浄する。Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮した後Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＯＮＳu が白色泡状物として得られる。Ｃ．（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−ペンタン−１−ボロン酸３−ブテン−１−オール１０.５ml（１２０mmol）、ｔ−ブチルジメチルシリルクロリド２２.３ｇ（１４４mmol）およびイミダゾール２０.４ｇ（３００mmol ）をＤＭＦ６０mlに溶解し、一晩３５℃で撹拌する。２層を分離し、生産物層を２Ｎ酒石酸、水および食塩水で洗浄する。Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥および真空で濃縮後、１−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３−ブテンが無色油状物として得られる。本生産物７.４５ｇ（４０mmol）をカテコールボロン酸５.１ｇ（４０mmol）と、１２５℃で２４時間撹拌し、黄茶色油状物を産生する。本油状物をＴＨＦ３０ ml中の（＋）−ピナンジオール６.９ｇ（４０mmol）溶液に加え、一晩撹拌する。フラッシュクロマトグラフィー（９５：９、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）の後、（＋）−ピナンジオール−４−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−ブタン−１−ボロン酸が得られる。２０分間にわたって、ＢｕＬｉ（ヘキサン中１.６Ｍ）１７ml（２７.０mmol）を、前冷却（−１００℃）したＣＨ₂Ｃｌ₂ ２.８mlおよびＴＨＦ４９mlの溶液に加える。１５分間１００℃で撹拌した後、ＴＨＦ２４ml中の上記で得られたピナンジオールボロン酸生産物９.０ｇ（２４.５mmol）を２０分間にわたって加える。反応混合物を再び１５分間−１００℃で撹拌し、その後ＺｎＣｌ₂（固体）１.２４ｇ（１２.３mmol）を加える。反応混合物を一晩室温で暖める。真空で濃縮後、残渣をエーテル／Ｈ₂Ｏに溶解する。有機相をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−ブタン−１−ボロン酸が、黄橙色油状物として得られる。Ｄ．Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＯＳi（ｔ−Ｂu）Ｍe₂ ］Ｂ−ＯＰin ブチルリチウム（ヘキサン中１.６Ｍ）１２.８ml（２０.４mmol）を、前冷却（−７８℃）した、ＴＨＦ３０ml中のヘキサメチルジシラザン４.３ml（２０.４ mmol）の溶液に加える。反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで−７８℃に再び冷却する。ＴＨＦ中（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−ブタン−１−ボロン酸８.５ｇ（２０.４mmol）を加える。１時間−７８℃で撹拌した後、一晩室温に暖める。−７８℃へ再冷却した後、３モル当量のジオキサン中のＨＣｌを加える。混合物を−７８℃で１時間、次いで室温で２時間撹拌する。−２０℃へ冷却した後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中の実施例１、工程Ｂの活性エステル９.２８ｇ（４０.８mmol）の溶液を加え、続いてトリエチルアミン５.６７ml（４０.８mmol）を加える。混合物を１時間−２０℃でおよび２時間室温で撹拌し、次いで濾過する。真空で濃縮後、残渣をエーテル／Ｈ₂Ｏに溶解する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー（６：４、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）の後、所望の生産物が得られる：［ α］_D ²⁰＝−４５.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）：ＭＨ⁺＝７３６。Ｅ．Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＯＨ］Ｂ−ＯＰin 実施例１の工程Ｄで得たシロキシ化合物６００mg（０.８１６mmol）をＴＨＦに溶解し、テトラブチルアンモニウムフロリド５１４mg（１.６２mmol）を加える。一晩環境温度で撹拌した後、混合物を真空で濃縮し、エーテル／Ｈ₂Ｏに溶解する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。副生産物をシリカゲル上でＥｔＯＡｃで除去し、次いで、生産物をＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ（９：１）で抽出し、標題生産物を白色泡状物として産生する：［α］_D ²⁰＝−７２.４゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６２２。実施例２−４Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰin Ａ）（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ブロモ−ペンタン−１ −ボロン酸４−ブロモ−１−ブテン２０.８ml（２０３.３mmol）を、カテコールボラン酸９２４.４ｇ（２０３.３mmol）と１００℃で１６時間反応させる。粗生産物を真空で蒸留し、４−ブロモ−ブタン−１−ボロン酸を、白色結晶生産物として得る。（＋）−ピナンジオール２７.７ｇ（１６３mmol）をＴＨＦに溶解し、上記のように合成した４−ブロモ−ブタン−１−ボロン酸４１.６ｇ（１６３mmol）を加える。室温で１時間の後、ＴＨＦを真空で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（９：１）ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製し、（＋）−ピナンジオール− ４−ブロモ−ブタン−１−ボロン酸を無色油状物として得る。所望の（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ブロモ−ペンタン −１−ボロン酸を、オルガノメタリクス３、１２８４（１９８４）に記載の方法により製造する。ＴＨＦ中のＣＨ₂Ｃｌ₂９.８mlを−１００℃に冷却し、ｎ−ブチルリチルム（ヘキサン中１.６Ｍ）７１.６ml（１１４.５mmol）を２０分にわたって加える。−１００℃で１５分の後、ＴＨＦ中の（＋）−ピナンジオール− ５−ブロモ−ペンタン−１−ボロン酸３２.８ｇ（１０４.１mmol）の冷（−７８ ℃）溶液を加える。更に−１００℃で１時間後、ＴＨＦ中の無水ＺｎＣｌ₂７.１ｇ（５２.０mmol）を加える。更に−１００℃で１５分後、反応混合物を室温に暖める。溶媒を真空で除去し、残渣をヘキサン／水で希釈し、ヘキサンで数回抽出する。Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、溶媒を真空で除去した後、（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−５−ブロモ−ペンタン−１−ボロン酸が、黄色油状物として得られ、それを更に精製することなく直接次工程に使用する。Ｂ）Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｂr］Ｂ−ＯＰin ＴＨＦ中のLiN（SiMe₃）₂（ＴＨＦ中に１Ｍ）６５.２ml（６６.２mmol）の溶液を−７８℃に冷却する。ＴＨＦ中の実施例２、工程Ａのα−クロロ−ボロン酸２３.７ｇ（６５.２mmol）を加える。１時間−７８℃で撹拌した後、本混合物を室温で１５時間撹拌する。この期間が終了した後、反応混合物を−７８℃に再冷却する。ジオキサン中のＨＣｌ２９.８ml（６.５６Ｎ溶液、１９６mmol）を加え、溶液を４５分間−７８℃で、次いで２時間室温で撹拌する。混合物を−１５℃に冷却し、ＣＨＣｌ₂ 中の実施例１、工程ＢのＢoc−ＴＭＳal−Ｐro−ＯＮＳu２９.７ｇ（６５.２mmo l）、続いてトリメチルアミン１８.１ml（１３０.４mmol）を加え、結合反応を開始する。−１５℃で１時間撹拌した後、混合物を室温で２時間撹拌する。混合物を、次いで、ヒフロ（Hyflo）で濾過し、真空で濃縮する。残渣をエーテル／水で希釈し、エーテルで数回抽出する。Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮した後、所望のＢ oc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｂr］Ｂ−ＯＰinが、エーテル／ヘキサンから、白色結晶として得られる、ｍｐ：７４℃。Ｃ）Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｎ₃］Ｂ−ＯＰin 実施例２、工程Ｂの生産物３３.３ｇ（４８.６mmol）をＤＭＳＯに溶解し、ナトリウムアジド６.３ｇ（９７.２mmol）を加える。混合物を６時間室温で撹拌する。エーテル／氷水を加え、得られる油状物を結晶化し、Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal− Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｎ₃］Ｂ−ＯＰinを白色結晶化合物として得る、m p：６９−７０℃；［α］_D ²⁰＝−５６.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝１.０）；ＭＨ⁺＝６４７。Ｄ）Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＢoroＬys−ＯＰin 実施例２、工程Ｃのアジド２２.０ｇ（３４.０mmol）をＥｔＯＡｃに溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ４.０ｇの存在下水素添加する。９時間後、触媒を除去し、溶液を真空で濃縮する。得られる泡状物をＥｔＯＡｃに溶解し、結晶化して、所望のＢoc−ＴＭＳal−Ｐro−ＢoroＬys−ＯＰinを白色結晶として得る、mp：１２８ −１２９℃；［α］_D ²⁰＝−４０.８゜（ＣＨ₂Ｃｌ₂中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６２１。Ｅ）Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰ in ギ酸０.２２４ml（５.９５mmol）および無水酢酸０.５３０ｇ（５.２mmol）を２時間６０℃で撹拌する。混合物を０℃に冷却し、ＴＨＦに溶解した実施例２、工程Ｄで得られたボロリジン１.８６ｇ（３.００mmol）を加える。１０分間０℃ で撹拌した後、反応混合物を一晩室温で撹拌する。氷水８０mlを加え、溶液を数回エーテルで抽出し、食塩水で洗浄する。Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮した後、所望の生産物が白色泡状物として得られ、それはエーテル／ヘキサンから結晶化できる；mp：９３−９９℃；［α］_D ²⁰＝−７７.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０. ５）；ＭＨ⁺＝６４９。Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₅ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰin （［α］_D ²⁰＝−４７.２゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６６３）およびＢ oc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₃ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝ −６８.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６３５）の生産物が、同様にして得られる。実施例５−１４Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ₃］Ｂ− ＯＰin ＣＨ₂Ｃｌ₂中のピリジン２０μl（０.２５mmol）および酢酸クロリド１８μl （０.２５mmol）を０℃に冷却し、実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１５５. ２mg（０.２５mmol）を加え、溶液を１時間撹拌する。水を加え、生産物を数回エーテルで抽出し、食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。所望の生産物が油状物として得られる；［α］_D ²⁰＝−６２.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６６３。以下の（Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ］Ｂ−ＯＰin）〔式中、Ｒは下記の表で定義〕生産物が、対応するアシルクロリドまたはブロミドから同様にして製造される：実施例１５−１６Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ₂Ｃl］Ｂ −ＯＰin ＴＨＦ中の実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１２４.２mg（０.２mmol）を０℃に冷却し、モノクロロ酢酸無水物３５.２mg（０.２mmol）を添加する。３時間室温で撹拌後、溶媒を真空で除去し、生産物を白色泡状物として得る；［α］_D ²⁰ ＝−５７.８°（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６９７。Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＣＣｌ₃］Ｂ−ＯＰin生産物を同様にして製造する；［α］_D ²⁰＝−５４.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝７６５。実施例１７Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ₃］Ｂ −ＯＰin ＣＨ₂Ｃｌ₂中のＮ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド５８.７μl（０.２４mmol）をＣＨ₂Ｃｌ₂中の実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１２４.２ mg（０.２０mmol）に加え、室温で１時間撹拌する。０℃に冷却後、ＣＨ₂Ｃｌ₂ 中のメチルクロロフォルメート１９.５μl（０.２４mmol）を加え、混合物を０ ℃で５時間撹拌する。ＣＨ₂Ｃｌ₂を除去し、ｐＨ７緩衝液を０℃で加える。生産物をエーテルで数回抽出し、食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮し、白色泡状物を得る；［α］_D ²⁰＝−５９.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６７９。実施例１８−２２Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｓ）ＮＨＣＨ₃］Ｂ−ＯＰiｎＣＨ₂Ｃｌ₂中の実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１２４.２mg（０.２mmol ）を０℃に冷却し、メチルイソチオシアネート１５mg（０.２mmol）を加える。７時間、室温で撹拌後、溶媒を真空で除去し、生産物を白色泡状物として得、それをエーテル／ヘキサンから結晶化できる；mp：１０９−１１３℃；［α］_D ²⁰ ＝−６６.８°（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６９４。同様にして、Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｓ）ＮＨＥt］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−６６.４゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝７０８）、Ｂoc-Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−６２.２゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６７８）、Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）−ＮＨＥt］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−６５.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６９２）およびＢoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₃ ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＥt］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−７１.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６７８）が、対応するイソ（チオ）シアネートから得られる。実施例２３Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＳ］Ｂ−ＯＰin トルエン中の実施例２、工程Ｅのホルムアミド生産物２１７mg（０.３５mmol ）を、ローエソン試薬７０.８mg（０.１７５mmol）で処理する。１.５時間室温で撹拌後、トルエンを真空で除去する。所望の生産物が、エーテルから結晶化する；mp：１２３−１２５℃；［α］_D ²⁰＝−７４.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６６５。実施例２４Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｓ）ＣＨ₃］Ｂ− ＯＰin 実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１２４mg（０.２mmol）をＭｅＯＨに溶解し、ＭｅＯＨ中のエチルジチオ酢酸２３μl（０.２mmol）を室温で加える。２ .５時間６０℃で撹拌後、溶媒を真空で除去する。残渣をＲＰ−クロマトグラフィー（７：３、ＥｔＯＨ／Ｈ₂Ｏ）で精製し、所望の生産物を白色泡状物として得る；［α］_D ²⁰＝−６５.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６７９。実施例２５−２６Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ₂］Ｂ− ＯＰin Ｈ₂Ｏ中の実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物２４８.３mg（０.４mmol）および１ＮＨＣｌ０.４mlを５０℃に暖める。５分後、シアン酸カリウム３３.２ mg （０.４mmol）を少しずつ加える。６時間後、５０℃で水を加え、生産物をＥtＯＡcで抽出し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー（１：９、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）の後、所望の生産物が得られる；［α ］_D ²⁰＝−７１.７゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６６４。Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₃ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ₂］Ｂ −ＯＰinを同様にして製造する；［α］_D ²⁰＝−５４.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０. ５）；ＭＨ⁺＝７６５。実施例２７Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ₂ＯＨ］Ｂ−ＯＰin ＴＨＦ中のピリジン４８μl（０.６mmol）およびベンジルオキシアセチルクロリド９９.６μl（０.６mmol）を０℃に冷却し、実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物３７２.４mg（０.６mmol）を加える。３時間、０℃の後、生産物を数回エーテルで抽出し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。得られる白色泡状物（３７０mg、０.４８mmol）をＥｔＯＨに溶解し、４０psi で１０％Ｐｄ／Ｃ０.５ｇ存在下水素添加する。１２時間後、触媒を除去し、溶液を真空で濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー（９：１、ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ）の後、所望の生産物を得る；［α］_D ²⁰＝−６７.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６７９。実施例２８Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＳＯ₂ＣＨ₃］Ｂ−ＯＰ in ＴＨＦ中の塩化メタンスルホン酸１９.８μl（０.２５mmol）を０℃でピリジン２０μl（０.２５mmol）に加える。ＴＨＦ中の実施例２、工程Ｄのボロリジン生産物１５５.２mg（０.２５mmol）を本混合物に加える。２.５時間０℃で撹拌後、水を加え、生産物をエーテルで抽出し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮し、生産物を白色泡状物として産生する：［α］_D ²⁰＝−６１.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６９９。実施例２９−３１Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₂Ｃ₆Ｈ₅］Ｂ−ＯＰin Ａ．（＋）−ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−３−フェニル−プロパン− １−ボロン酸スチレン３.４７ｇ（３０.０mmol）およびカテコールボロン酸３.６ｇ（３０. ０mmol）を２０時間１００℃で撹拌し、黄茶色油状物を得る。本油状物をＴＨＦ中の（＋）−ピナンジオール５.０ｇ（３０.０mmol）に加え、一晩撹拌する。フラッシュクロマトグラフィー（８：２、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）の後、（＋）− ピナンジオール−２−フェニル−エタン−１−ボロン酸を得る。ＢｕＬｉ（ヘキサン中１.６Ｍ）１５ml（２４.０mmol）を、ＣＨ₂Ｃｌ₂２.１m lおよびＴＨＦ３７mlの前冷却（−１００℃）溶液に２０分にわたって加える。３０分、−１００℃で撹拌後、上記ＴＨＦ中に得られたピナンジオールボロン酸生産物６.２ｇ（２１.８mmol）を２０分にわたって加える。反応混合物を再び− １００℃で１時間撹拌し、その後ＴＨＦ中のＺｎＣｌ₂１.５１ｇ（１０.９mmol ）を加える。反応混合物を一晩で室温まで暖める。真空で濃縮後、残渣をエーテル／Ｈ₂Ｏに溶解する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。（＋） −ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−３−フェニル−プロパン−１−ボロン酸が、黄橙色油状物として得られる。Ｂ．Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₂Ｃ₆Ｈ₅］Ｂ−ＯＰin ブチルリチウム５.１ml（８.０９mmol）を、ＴＨＦ中のヘキサメチルジシラザン１.７ml（８.０９mmol）の前冷却（−７８℃）溶液に加える。反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで再び−７８℃に冷却する。ＴＨＦに溶解した（＋）− ピナンジオール−（Ｓ）−１−クロロ−３−フェニル−プロパン−１−ボロン酸２.６８ｇ（８.０９mmol）を加える。１時間−７８℃で撹拌後、溶液を一晩室温に暖める。再び−７８℃に冷却した後、３モル当量のジオキサン中のＨＣｌを加える、混合物を１時間−７８℃で、次いで室温で２時間撹拌する。−２０℃に冷却後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中の実施例１、工程Ｂの活性エステル３.７ｇ（８.０９mmol）の溶液を加え、次いでトリエチルアミン２.３ml（１８.２mmol）を加える。混合物を−２０℃で１時間、室温で２時間撹拌し、次いで濾過する。真空で濃縮後、残渣をエーテル／Ｈ₂Ｏに溶解する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー（６：４、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）の後、所望の生産物が得られる；［α］_D ²⁰＝−８８.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６５４。Ｂoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro-ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₂（p−Ｃｌ−Ｃ₆Ｈ₄）］Ｂ −ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−８３.２゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５）；ＭＨ⁺＝６８８）およびＢoc−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro-ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₂（p−ＮＭｅ₂−Ｃ₆Ｈ₄ ）］Ｂ−ＯＰin（［α］_D ²⁰＝−８４.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５４）；ＭＨ⁺ ＝６９７）生産物が、同様にして得られる。実施例３２ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰin Ａ．ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｎ₃］Ｂ−ＯＰin 実施例２、工程Ｃのアジド生産物５.１５ｇ（８.００mmol）を酢酸／濃ＨＣｌ（９：１）４０.０mlに加え、７５分撹拌する。真空で濃縮後、ＨＣｌ・Ｈ−Ｄ −ＴＭＳal−Ｐro-ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｎ₃］Ｂ−ＯＰinをエーテルから結晶化する；mp：８７℃。ＴＨＦ中の塩化ピバロイル０.２９ml（２.４０mmol）を、ＴＨＦ中の上記で得られた生産物１.１７ｇ（２.００mmol）およびトリエチルアミン０.３４ml（２. ４０mmol）に０℃で加え、１時間その温度で撹拌する。本溶液に、ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ）₂］₃ＯＣＨ₂ＣＯ₂Ｈ５３３mg（２.４０mmol）、続いて飽和水性ＮａＨＳＯ₄溶液４.０mlを加える。１時間室温で撹拌した後、飽和水性ＮａＨＳＯ₄を加え、生産物を数回ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を２ＮＨ₂ＳＯ₄および食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。粗生産物をＭｅＯＨ／水（６：４）に溶解し、ヘキサンで洗浄する。ＭｅＯＨ／水層を濃縮した後、ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂ Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄Ｎ₃］Ｂ−ＯＰinが油状物として得られる；［α］_D ²⁰＝−７４.５゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.８３）；ＭＨ⁺＝７５１。Ｂ．ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨ₂］Ｂ−ＯＰin 実施例３２、工程Ａの生産物１.０５ｇ（１.４０mmol）をＥｔＯＨ１４mlに溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃｌ４０mgおよび２ＮＨＣｌ０.８４ml（１.３８mmol）の存在下、水素添加する。２.５時間後、触媒を除去し、水を加える。水層をエーテルで洗浄し、真空で濃縮し、ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ− ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨ₂］Ｂ−ＯＰinを油状物として得る；［α］_D ²⁰＝−７４.２゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.６１）；ＭＨ⁺＝７２５。Ｃ．ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＯ］Ｂ−ＯＰin ギ酸３１μl（０.８０mmol）および酢酸無水物７１μl（０.７０mmol）を２時間、５０℃で撹拌する。０℃に冷却後、ＴＨＦ中の実施例３２、工程Ｂのボロリジン生産物３２５mg（０.４３mmol）およびトリエチルアミン０.１２ml（０.８３mmol）を加える。１７時間室温で撹拌後、ＥｔＯＡｃを加え、溶液を２ＮＨ₂ ＳＯ₄および食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。ＲＰ−クロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／水、勾配５０％Ｈ₂Ｏ→２５％Ｈ₂Ｏ）の後、所望の生産物を油状物として得る；［α］_D ²⁰＝−８０.８゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.２７）；ＭＨ⁺＝７５３。実施例３３ＣＨ₃［Ｏ（ＣＨ₂）₂］₃ＯＣＨ₂Ｃ（Ｏ）−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＥt］Ｂ−ＯＰin ＴＨＦ中の実施例３２、工程Ｂのボロリジン生産物３２５mg（０.４３mmol）を０℃に冷却し、イソシアン酸エチル４０μl（０.４３mmol）およびＮ−メチルモルホリン４８μl（０.４３mmol）を加える。４時間室温で撹拌後、ＥｔＯＡｃを加え、溶液を１ＮＮａＨＳＯ₄、飽和水性ＮａＨＣＯ₃および食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ ＳＯ₄で乾燥し、真空で濃縮する。ＲＰ−クロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／水、勾配５０％Ｈ₂Ｏ→２５％Ｈ₂Ｏ）の後、所望の生産物を油状物として得る；［α ］_D ²⁰＝−７６.０゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５５）；ＭＨ⁺＝７９６。実施例３４Ｈ−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣＨＯ］Ｂ（ＯＨ）₂ 実施例２、工程Ｅのホルムアミド生産物１５０mg（０.２３１mmol）を酢酸／濃ＨＣｌ（１：９）２.５mlに溶解し、４時間室温で撹拌する。真空で濃縮後、残渣をトルエンで３回溶解し、再び真空で濃縮する。所望の生産物が黄色泡状物として得られる；［α］_D ²⁰＝−６３.６゜（ＭｅＯＨ中ｃ＝０.５５）；ＭＨ⁺＝４１５。実施例３５Ｈ−Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＥt］Ｂ（ＯＨ）₂ 実施例２１の生産物Ｂoc-Ｄ−ＴＭＳal−Ｐro−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ₂）₄ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＥt］Ｂ−ＯＰin１５０mg（０.２１７mmol）を酢酸／濃ＨＣｌ（１：９）２.５mlに溶解し、室温で４時間撹拌する。真空で濃縮後、残渣を３回トルエンに溶解し、再び真空で濃縮する。所望の生産物が橙色泡状物として得られる；［α］_D ²⁰＝−７４.１゜（ＭｅＯＨ中＝０.５６）；ＭＨ⁺＝４５８。請求の範囲１．式Ｉ〔式中、Ｗは水素またはＮ−保護基；Ｙは２個のアミノ酸配列であって、そのＮ末端アミノ酸は疎水性側鎖を有する非天然アミノ酸であり、他方のアミノ酸はＬ−プロリンであり、前記非天然アミノ酸はアミノ酸ペプチドＹ−ＬysまたはＹ−Ａrgがトリプシン様プロテアーゼの活性部位に親和性を有するように選択されたものである；Ｑ₁およびＱ₂は、同一または異なって−ＯＨ、−ＣＯＲ₁、−ＣＯＮＲ₁Ｒ₂、− ＮＲ₁Ｒ₂および−ＯＲ₃から選択され得、またはＱ₁およびＱ₂は一緒になってジオール残基を形成する；Ｒ₁、Ｒ₂およびＲ3は、同一または異なってＣ_1-10アルキル、Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキルまたはＣ_1-4アルキル、ハロゲンおよびＣ_1-4アルコキシから選ばれた基で３個まで置換されているフェニル；Ｒ₄は水素またはＣ_1ー10アルキル；Ｒ₅は−Ａ−Ｘ基〔ここで、Ａは−（ＣＨ₂）_z−（ここでｚは２、３、４または５）；−ＣＨ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₂−；−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−；− （ＣＨ₂）₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−；−（ＣＨ₂）₂−Ｃ（ＣＨ₃）₂−；−ＣＨ（ＣＨ₃ ）−（ＣＨ₂）₃−；−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₂−；−ＣＨ₂−ＣＨ₂− ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−；−（ＣＨ₂）₂Ｃ（ＣＨ₃）₂−ＣＨ₂−；−（ＣＨ₂）₃ −ＣＨ（ＣＨ₃）−；−（ＣＨ₂）₃−Ｃ（ＣＨ₃）₂−；−（ＣＨ₂）₃ＣＨ（ＣＨ₃ ）ＣＨ₂−；Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキルおよびＸはＯＨ、ＳＨ、ＮＲ₆Ｒ₇ またはフェニル、Ｒ₆はＨまたはＣ_1-10アルキルおよびＲ₇はＣ_1-10アルキル、 −ＣＯ−Ｒ₈、−ＣＳ−Ｒ₈または−ＳＯ₂−Ｒ₈、Ｒ₈はハロゲン、ＯＨ、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｃ（ＮＨ）Ｒ₉、ＮＲ₁₀Ｒ₁₁およびＣ（Ｏ）ＯＲ₆（Ｒ₆は上記で定義の意味）から選ばれた基で３個まで置換されていてもよいＨまたはＣ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルコキシ、Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキル，Ｒ₉はＣ_1-3アルキルまたはＮ（ＣＨ₃）₂ならびにＲ₁₀およびＲ₁₁は（同一または異なって）ＨまたはＣ_1-10アルキルである〕で示される化合物であり、＊で印をした不斉炭素原子はＤ−またはＬ−形であり得、これらの任意の混合物を含み得る化合物。２．ＷがＨ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_p−、Ｒ₁₂ＣＯ−、Ｒ₁₃ＯＣＯ−またはＲ₁₄ＳＯ₂ −〔式中、Ｒ₁₂＝Ｃ_1-6アルキルまたはＨ（ＣＨ₂−Ｏ−ＣＨ₂）_p、Ｒ₁₃＝Ｃ_1-6 アルキル、フェニル、ベンジルまたはナフチル；およびＲ₁₄＝フェニル、ナフチルまたはＣ_1-4アルキルフェニルである（ここで、ｐ＝３−３０）〕である、請求項１記載の化合物。３．式Ｉａ〔式中、Ｗ、Ｙ、Ｒ₄およびＲ₅は請求項１または２で定義の意味およびＲ₁₅およびＲ₁₆はジヒドロキシ化合物の残基を意味する〕で示される化合物である、請求項１または２記載の化合物。４．Ｑ₁およびＱ₂が一緒になって式ａ）または式ｂ）〔式中、ＬはＣ_1-4アルキル基である〕を意味するものである、請求項１または２記載の化合物。５．非天然アミノ酸が、式II 〔式中、Ｒ₁₇は疎水性基である〕で示されるものである、請求項１から４のいずれかに記載の化合物。６．Ｒ₁₇がＲ₁₇’であり、式（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）または（ｉ）のいずれかである、請求項５記載の化合物。７．式III、 IV、ＶおよびVI から選択される化合物である、請求項１記載の化合物。８．ｉ）ＸがＮＨＣＨＯまたはＮＨＣＯアルキルである場合、式Ｉ（式中、Ｘは−ＮＨ₂）で示される化合物を、対応する酸の活性形と反応させる； ii）ＸがＮＨＣＯアルコキシである場合、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨ₂）で示される化合物を、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミドと反応させ、続いて対応するエステルの活性形を添加する； iii）ＸがＮＨＣ（Ｓ）ＮＨアルキルである場合、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨ₂）で示される化合物を、アルキルイソチオシアネートと反応させる； iv）ＸがＮＨＣＨＳである場合、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨＣＨＯ）で示される化合物を、ローエソン（Laweson）試薬と反応させる；ｖ）Ｘが所望により置換されたフェニルである場合、式VII 〔式中、Ｑ₁およびＱ₂は請求項１で定義の意味およびＲ₁₉は−Ａ−フェニル（所望により置換）（ここで、Ａは請求項１で定義の意味）〕で示される化合物を、ＬiＮ［Ｓi（ＣＨ₃）₃］₂と反応させ、続いて過剰の酸で加水分解し、式VIII 〔式中、ＷおよびＹは請求項１で定義の意味〕で示される保護ペプチドと結合させる； vi）ＸがＯＨである場合、式Ｉ（式中、Ｘが−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃ ）で示される化合物を脱シリル化剤と反応させる：ことを含む、請求項１で定義の式Ｉで示される化合物の製造法。９．トリプシン様プロテアーゼ阻害剤としての、請求項１から７のいずれかに記載の化合物の使用。１０．薬理学的に許容可能な添加剤および／または希釈剤と共に、請求項１から７のいずれかに記載の化合物を含む、治療用組成物。１１．トリプシン様セリンプロテアーゼ阻害のための、請求項１０記載の治療用組成物の使用。１２．トリプシン様セリンプロテアーゼがトロンビン、Ｘ_a因子、カリクレイン、血漿、プロリルエンドペプチダーゼおよびＩｇＡＩプロテアーゼであることを特徴とする、請求項６および１１記載の使用。１３．薬理学的に許容可能な添加剤および／または希釈剤と共に、請求項１から８のいずれかに記載の化合物を含む、抗凝固または抗トロンボゲン活性を有する治療用組成物。１４．トロンビン阻害剤としての、請求項１から７のいずれかに記載の化合物の使用。１５．静脈または動脈手術または他の形の血管傷害の後の血管再造形阻害剤としての、請求項１から７のいずれかに記載の化合物の使用。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＦＩ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ，ＶＮ (72)発明者ビーナンド、アネッテドイツ連邦共和国デー―79423ハイテルシェイム、マルテーゼールシュトラーセ15番

Claims

【特許請求の範囲】１．式Ｉ〔式中、Ｗは水素またはＮ−保護基；Ｙはｎ＋１アミノ酸ペプチドＹ−ＬysまたはＹ−Ａrgがトリプシン様プロテアーゼの活性部位に親和性を有するように選択されたｎアミノ酸の配列（ここで、ｎは１から１０の整数であり、少なくとも１つのアミノ酸が疎水性側鎖を有する非天然アミノ酸である）；Ｑ₁およびＱ₂は、同一または異なって−ＯＨ、−ＣＯＲ₁、−ＣＯＮＲ₁Ｒ₂、− ＮＲ₁Ｒ₂および−ＯＲ₃から選択され得、またはＱ₁およびＱ₂は一緒になってジオール残基を形成する；Ｒ₁、Ｒ₂およびＲ₃は、同一または異なってＣ_1-10アルキル、Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキルまたはＣ_1-4アルキル、ハロゲンおよびＣ_1-4アルコキシから選ばれた基で３個まで置換されているフェニル；Ｒ₄は水素またはＣ_1-10アルキル；Ｒ₅は−Ａ−Ｘ基〔ここで、Ａは−（ＣＨ₂）_z−（ここでｚは２、３、４または５）；−ＣＨ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₂−；−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−；− （ＣＨ₂）₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−；−（ＣＨ₂）₂−Ｃ（ＣＨ₃）₂−；−ＣＨ（ＣＨ₃ ）−（ＣＨ₂）₃−；−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₂−；−ＣＨ₂−ＣＨ₂− ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ₂−；−（ＣＨ₂）₂Ｃ（ＣＨ₃）₂−ＣＨ₂−；−（ＣＨ₂）₃ −ＣＨ（ＣＨ₃）−；−（ＣＨ₂）₃−Ｃ（ＣＨ₃）₂−；−（ＣＨ₂）₃ＣＨ（ＣＨ₃ ）ＣＨ₂−；Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキルおよびＸはＯＨ、ＳＨ、ＮＲ₆Ｒ₇ またはフェニル、Ｒ₆はＨまたはＣ_1-10アルキルおよびＲ₇はＣ_1-10アルキル、 −ＣＯ−Ｒ₈、−ＣＳ−Ｒ₈または−ＳＯ₂−Ｒ₈、Ｒ₈はハロゲン、ＯＨ、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｃ（ＮＨ）Ｒ₉、ＮＲ₁₀Ｒ₁₁およびＣ（Ｏ）ＯＲ₆（Ｒ₆は上記で定義の意味）から選ばれた基で３個まで置換されていてもよいＨまたはＣ_1-10アルキル、Ｃ_1-10アルコキシ、Ｃ_6-10アリール、Ｃ_6-10アラルキル、Ｒ₉はＣ_1-3アルキルまたはＮ（ＣＨ₃）₂ならびにＲ₁₀およびＲ₁₁は（同一または異なって）ＨまたはＣ_1-10アルキルである〕で示される化合物であり、＊で印をした不斉炭素原子はＤ−またはＬ−形であり得、これらの任意の混合物を含み得る化合物。２．ＷがＨ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_p−、Ｒ₁₂ＣＯ−、Ｒ₁₃ＯＣＯ−またはＲ₁₄ＳＯ₂ −〔式中、Ｒ₁₂＝Ｃ_1-6アルキルまたはＨ（ＣＨ₂−Ｏ−ＣＨ₂）_p、Ｒ₁₃＝Ｃ_1-6 アルキル、フェニル、ベンジルまたはナフチル；およびＲ₁₄＝フェニル、ナフチルまたはＣ_1-4アルキルフェニルである（ここで、ｐ＝３−３０）〕である、請求項１記載の化合物。３．式Ｉａ〔式中、Ｗ、Ｙ、Ｒ₄およびＲ₅は請求項１または２で定義の意味およびＲ₁₅およびＲ₁₆はジヒドロキシ化合物の残基を意味する〕で示される化合物である、請求項１または２記載の化合物。４．Ｑ₁およびＱ₂が一緒になって式ａ）または式ｂ）〔式中、ＬはＣ_1-4アルキル基である〕を意味するものである、請求項１または２記載の化合物。５．非天然アミノ酸が、式II 〔式中、Ｒ₁₇は疎水性基である〕で示されるものである、請求項１から４のいずれかに記載の化合物。６．Ｒ₁₇がＲ₁₇’であり、式（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）または（ｉ）のいずれかである、請求項５記載の化合物。７．ＹがＮ−末端アミノ酸が非天然アミノ酸であり、他のアミノ酸がＬ−プロリンである２個のアミノ酸の配列である、請求項１記載の化合物。８．式III、IVおよびVI から選択される化合物である、請求項１記載の化合物。９．ｉ）ＸがＮＨＣＨＯまたはＮＨＣＯアルキルである場合、式Ｉ（式中、Ｘは−ＮＨ₂）で示される化合物を、対応する酸の活性形と反応させる； ii）ＸがＮＨＣＯアルコキシである場合、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨ₂）で示される化合物を、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミドと反応させ、続いて対応するエステルの活性形を添加する； iii）ＸがＮＨＣ（Ｓ）ＮＨアルキルである場合、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨ₂）で示される化合物を、アルキルイソチオシアネートと反応させる； iv）ＸがＮＨＣＨＳである場合、式Ｉ（式中、Ｘが−ＮＨＣＨＯ）で示される化合物を、ローエソン（Laweson）試薬と反応させる；ｖ）Ｘが所望により置換されたフェニルである場合、式VII 〔式中、Ｑ₁およびＱ₂は請求項１で定義の意味およびＲ₁₉は−Ａ−フェニル（所望により置換）（ここで、Ａは請求項１で定義の意味）〕で示される化合物を、ＬiＮ［Ｓi（ＣＨ₃）₃］₂と反応させ、続いて過剰の酸で加水分解し、式VIII 〔式中、ＷおよびＹは請求項１で定義の意味〕で示される保護ペプチドと結合させる； vi）ＸがＯＨである場合、式Ｉ（式中、Ｘが−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃ ）で示される化合物を脱シリル化剤と反応させる：ことを含む、請求項１で定義の式Ｉで示される化合物の製造法。１０．トリプシン様プロテアーゼ阻害剤としての、請求項１から８のいずれかに記載の化合物の使用。１１．薬理学的に許容可能な添加剤および／または希釈剤と共に、請求項１から８のいずれかに記載の化合物を含む、治療用組成物。１２．トリプシン様セリンプロテアーゼ阻害のための、請求項１１記載の治療用組成物の使用。１３．トリプシン様セリンプロテアーゼがトロンビン、Ｘ_a因子、カリクレイン、血漿、プロリルエンドペプチダーゼおよびＩｇＡＩプロテアーゼであることを特徴とする、請求項１０および１２記載の使用。１４．薬理学的に許容可能な添加剤および／または希釈剤と共に、請求項１から８のいずれかに記載の化合物を含む、抗凝固または抗トロンボゲン活性を有する治療用組成物。１５．トロンビン阻害剤としての、請求項１から８のいずれかに記載の化合物の使用。１６．静脈または動脈手術または他の形の血管傷害の後の血管再造形阻害剤としての、請求項１から８のいずれかに記載の化合物の使用。