JPH08507534A

JPH08507534A - ４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類、及びその興奮性アミノ酸及びグリシン受容体アンタゴニストとしての使用

Info

Publication number: JPH08507534A
Application number: JP6520346A
Authority: JP
Inventors: ツァイ，スイ・シオン; ウェバー，エッカード; キーナ，ジョン・エフ・ダブリュ
Original assignee: University of California, San Diego
Current assignee: University of California
Priority date: 1993-03-12
Filing date: 1994-03-11
Publication date: 1996-08-13
Also published as: WO1994020470A1; US5622965A; EP0688319A4; EP0688319A1; AU6406394A; CA2156389A1

Abstract

(57)【要約】発作、虚血、ＣＮＳ損傷、低血糖症及び手術に伴うニューロン損失の治療又は予防、同様にアルツハイマー病、筋萎縮側索硬化症、ハンチンチトン病及びダウン症候群を含む神経変性疾患の治療、興奮性アミノ酸の過剰刺激の有害な影響の治療又は予防、同じく不安、慢性疼痛、痙攣の治療及び麻酔の誘引などの治療を必要とする動物に、グリシン受容体との強い結合を有する、置換された又は置換されていない４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン又はその薬学的に許容し得る塩を投与することによって治療又は予防する方法を開示する。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類、及びその興奮性アミノ酸及びグリシン受容体アンタゴニストとしての使用本発明は米国政府の援助によりなされたものである。従って、米国政府は一定の権利を有する。関連出願のクロス・リファレンス本出願は、参考のためにその内容の全てを本明細書中に引用する、１９９３年３月１２日に出願された米国特許出願第０８／０３０，６０８の号の一部継続出願である。発明の分野本発明は、薬化学の分野に属する。特に、本発明は置換された、もしくは置換されていない４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類とその薬学的に許容し得る塩、及び虚血に関連するニューロンの変性、ニューロンの変性に関連する病態生理学的状態、痙攣、不安、慢性疼痛の治療又は予防のため、及び麻酔の誘引のための該化合物の使用に関する。発明の背景グルタミン酸塩は、脳における主要な神経伝達物質であると考えられている。ＣＮＳにおけるグルタミン酸受容体には３つの大きいサブタイプがある。これらは一般にカイニン酸塩、ＡＭＰＡ及びＮ−メチル−Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）受容体（Watkins及びOlverman，Trends in Neurosci．７巻：２６５〜２７２頁（１９８７年））と呼ばれている。ＮＭＤＡ受容体は脳における事実上全てのニューロンの膜に存在する。ＮＭＤＡ受容体は、グルタミン酸塩又はアスパルテート（非選択的、内生アゴニスト）又はＮＭＤＡ（選択的、合成アゴニスト）によって活性化されたときにＮａ⁺、Ｋ⁺、及びＣａ⁺⁺の浸透を許容するリガンド −ゲートカチオンチャンネル（ligand-gated cation channels）である（Wong及びKemp，Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol．３１巻：４０１〜４２５頁（１９９１年））。グルタミン酸塩は単独ではＮＭＤＡ受容体を活性化できない。グルタミン酸塩によって活性化させるためにＮＭＤＡ受容体チャンネルは、まず最初に、受容体タンパク上の、グルタミン酸塩／ＮＭＤＡ結合部位と分離している特異的、高親和性グリシン結合部位にてグリシンと結合しなければならない（Johnson及びAsc her，Nature ３２５巻：３２９〜３３１頁（１９８７年））。従ってグリシンはＮＭＤＡ受容体／チャンネル複合体におけるコアゴニストである（Kemp，J.A. ら，Proc.Natl.Acad.Sci．USA ８５巻：６５４７〜６５５０頁（１９８８年））。グルタミン酸塩／ＮＭＤＡ及びグリシンの結合部位に加え、ＮＭＤＡは多くの他の機能的に重要な結合部位を有している。これらにはＭｇ⁺⁺,Ｚｎ⁺⁺,ポリアミン類、アラキドン酸及びフェンサイクリジン（ＰＣＰ）の結合部位が含まれる（ Reynolds及びMiller，Adv.in Pharmacol．２１巻：１０１〜１２６頁（１９９０年）;Miller,B.ら，Nature ３５５巻：７２２〜７２５頁（１９９２年））。ＰＣＰ結合部位（現在では一般にＰＣＰ受容体と呼ばれている）はＮＭＤＡ受容体／チャンネル複合体のイオノフォア（ionophore）の孔の内側に位置している（Wrong,E.H.F.ら，Proc.Natl.Acad.Sci．ＵＳＡ８３巻：７１０４〜７１０８頁（１９８６年）；Huettner及びBean，Proc.Natl.Acad.Sci．ＵＳＡ８５巻：１３０７〜１３１１頁（１９８８年）；MacDonald,J.F.ら，Neurophysiol．５８巻：２５１〜２６６頁（１９８７年））。ＰＣＰをＰＣＰ受容体に接近させるために、最初にグルタミン酸塩及びグリシンによってチャンネルを開かねばならない。グルタミン酸塩及びグリシンが存在しなければ、ＰＣＰはＰＣＰ受容体と結合することができないけれども、グルタミン酸塩及びグリシンが存在していなくても少量のＰＣＰの結合は起こり得るということを幾つかの研究は示唆している（Si rcar及びZukin，Brain Res．５５６巻：２８０〜２８４頁（１９９１年））。ＰＣＰがＰＣＰ受容体と結合すると、ＰＣＰは開放チャンネルを通るイオンの流動をブロックする。従って、ＰＣＰは開放チャンネルブロッカーであり、ＮＭＤＡ受容体／チャンネル複合体での非拮抗的グルタミン酸アンタゴニストである。ＰＣＰ受容体と結合する最も効力のある特異的な薬物のひとつは鎮痙性の薬物であるＭＫ−８０１である。この薬物はＰＣＰ受容体に対し約３ｎＭのＫ_dを有する（Wrong,E.H.F.ら，Proc.Natl.Acad.Sci．ＵＳＡ８３巻：７１０４〜７１０８頁（１９８６年））。ＰＣＰ及びＭＫ−８０１は両者、並びに他のＰＣＰ受容体リガンド［例えば、デキストロメトルファン、ケタミン及びＮ,Ｎ,Ｎ'-３置換グアニジン］はインビトロとインビボの両方で神経保護効力を有する（Gill,R.ら，J.Neurosci．７巻：３３４３〜３３４９頁（１９８７年）；Keana,J.F.W.ら，Proc.Natl.Acad.Sci .ＵＳＡ８６巻：５６３１〜５６３５頁（１９８９年）；Steinberg,G.K.ら，Neu roscience Lett．８９巻：１９３〜１９７頁（１９８８年）；Church,J.ら，Sig ma and Phencyclidine-Like Compounds as Molecular Probes in Biology，Domi no and Kamenka,eds.，Ann Arbor：NPP Books，７４７〜７５６頁（１９８８年））。これら薬物のよく特徴づけられた神経保護効力は、脳虚血の状態（例えば、発作、心停止虚血など）において、過剰のグルタミン酸塩の放出によって活性化されすぎるＮＭＤＡ受容体チャンネルを通じてニーロンヘ過剰のＣａ⁺⁺が流入するのをブロックするこれら薬物の能力によるところが大きい（Collins,R.C.,M etabol.Br.Dis．１巻：２３１〜２４０頁（１９８６年）；Collins,R.C.ら，Ann als Int．Med．１１０巻：９９２〜１０００頁（１９８９年））。しかし、発作における虚血救済薬としてのこれらＰＣＰ受容体薬物の治療の潜在能力が、ＰＣＰ受容体とこれら薬物との相互作用によるものと思われる強いＰＣＰ様行動副作用（精神異常発現性行動の効果）をこれら薬物が有するという事実によって、発作における虚血救済剤としての、これらＰＣＰ受容体薬物の治療の能力が非常に妨げられる（Tricklebank,M.D.ら，Eur.J.Pharmacol．１６７巻：１２７〜１３５頁（１９８９年）；Koek,W.ら，J.Pharmacol.Exp.Ther．２４５巻：９６９頁（１９８９年）；Willets及びBalster，Neuropharmacology ２７巻：１２４９頁（１９８８年））。これらＰＣＰ様行動副作用は虚血救済剤としての臨床的開発からのＭＫ８０１の撤退を引き起こしたものとみられる。さらにこれらＰＣＰ受容体リガンドはＰＣＰ自身の弊害の傾向が示されているように相当の弊害の可能性を有するようである。ＰＣＰ受容体リガンドのＰＣＰ様行動効果は動物モデルにおいて実証し得る：ＰＣＰ及び関連するＰＣＰ受容体は齧歯類における挙動興奮（過剰移動）（Tric klebank,M.D.ら，Eur.J.Pharmacol．１６７巻：１２７〜１３５頁（１９８９年））や、ハトにおける特徴的なカタレプシー（katalepsy）（Koek,W.ら，J.Phar macol.Exp.Ther．２４５巻：９６９頁（１９８９年）；Willets及びBalster，Ne uropharmacology ２７巻：１２４９頁（１９８８年））を引き起こし、薬物識別のパラダイムにおいてこれら薬物のＰＣＰ受容体親和性と薬物のＰＣＰ−至適応答挙動を引き起こすそれらの能力との間に強い相関関係がある（Zukin,S.R．ら，Brain Res．２９４巻：１７４頁（１９８４年）；Brady,K.T．ら，Science ，２１５巻：１７８頁（１９８２年）；Tricklebank,M.D．ら，Eur.J.Pharmacol ．１４１巻：４９７頁（１９８７年））。ＣＧＳ１９７５５及びＬＹ２７４６１４のようなＮＭＤＡ受容体のグルタミン酸塩結合部位における拮抗アンタゴニストとして作用する薬剤もまた、これら薬物（ＰＣＰ受容体リガンドのような）は虚血においてＮＭＤＡ受容体／チャンネルを通る過剰のＣａ⁺⁺の流入を防止し得るので神経保護能力を有している（Bo ast,C.A．ら，BrainRes．４４２巻：３４５〜３４８頁（１９８８年）；Schoepp ,D.D．ら，J.Neural.Trans．８５巻：１３１〜１４３頁（１９９１年））。しかし、拮抗的ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストはまた、ＭＫ−８０１及びＰＣＰ程の強力ではないけれども動物モデルにおいてＰＣＰ様行動副作用を有する（行動の興奮、ＰＣＰ薬剤識別試験における活性）（Tricklebank,M.D．ら，Eur.J.Pharm acol．１６７巻：１２７〜１３５頁（１９８９年））。ＮＭＤＡ受容体チャンネルの活性化をを阻害するほかの方法はＮＭＤＡ受容体のグリシン結合部位でのアンタゴニストを使用することによるものである。グルタミン酸塩にチャンネル開放させるためにグリシンはグリシン結合部位に結合しなければならない（Johnson及びAscher，Nature ３２５巻：３２９〜３３１頁（１９８７年）；Kemp,J.A.ら，Proc.Natl.Acad.Sci．ＵＳＡ８５巻：６５４７〜６５５０頁（１９８８年））ので、グリシンアンタゴニストは（大量のグルタミン酸塩の存在下でさえも）ＮＭＤＡ受容体チャンネルを通るイオンの流入を完全に防ぎ得る。最近のインビボ微量透析の研究は、ラット局部的虚血モデルにおいて、グリシン放出の著しい増加なしに、虚血脳領域においてグルタミン酸塩放出の大きな増加があることを実証した（Globus,M.Y.T.ら，J.Neurochem．５７巻：４７０〜４７８頁（１９９１年））。従って、理論的には、グリシンアンタゴニストは非常に強力な神経保護剤であろう。何故なら、それらは非拮抗的にグルタミン酸塩によってＮＭＤＡチャンネルの開放を防止し、その結果、（拮抗ＮＭＤＡアンタゴニストと異なり）虚血脳領域において放出される高濃度の内生グルタミン酸塩に打ち勝つ必要はないからである。さらに、グリシンアンタゴニストはグルタミン酸塩／ＮＭＤＡとＰＣＰ結合部位のいずれにおいても作用せず、ＮＭＤＡチャンネル開放を防止するので、これらの薬物はＰＣＰ受容体リガンド及び拮抗的ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストの両方においてみられるＰＣＰ様行動副作用を引き起こさないであろう（Trickleban k,M.D．ら，Eur.J.Pharmacol．１６７巻：１２７〜１３５頁（１９８９年）；Ko ek,W．ら，J.Pharmacol.Exp.Ther．２４５巻：９６９頁（１９８９年）；Willet s及びBalster，Neuropharmacology ２７巻：１２４９頁（１９８８年）；Trick lebank,M.D．ら，Eur.J.Pharmacol．１６７巻：１２７〜１３５頁（１９８９年）；Zukin,S.R．ら，Brain Res．２９４巻：１７４頁（１９８４年）；Brady,K. T.ら，Science，２１５巻：１７８頁（１９８２年）；Tricklebank,M.D．ら，Eu r.J.Pharmacol．１４１巻：４９７頁（１９８７年））。グリシンアンタゴニストがＰＣＰ様挙動副作用を有していないだろうということは、ＰＣＰ様挙動を引き起こすことなく、齧歯類の脳に直接グリシンアンタゴニストを注射することが可能になった最近の研究によって示唆されている（Tricklebank,M.D．ら，Eur.J .Pharmacol．１６７巻：１２７〜１３５頁（１９８９年））。しかし、臨床的に有用な神経保護剤としてのグリシンアンタゴニストの開発を妨げている２つの大きな問題がある。Ａ．７−Ｃｌ−キヌレン酸（Kemp,J.A.ら，Proc.Natl.Acad.Sci．ＵＳＡ８５巻：６５４７〜６５５０頁（１９８８年））、５，７−シクロロキヌレン酸（ McNamara,D．ら，Neuroscience Lett．１２０巻：１７〜２０頁（１９９０年））及びインドール−２−カルボン酸（Gray,N．M．ら，J．Med．Chem．３４巻：１２８３〜１２９２頁（１９９１年））などの、インビトロで比較的高い受容体結合親和性を有する最も入手可能なグリシンアンタゴニストは、血液／脳関門を通過できないので治療薬としての有用性がない。Ｂ．血液／脳関門を充分に通過する、唯一広く利用され得るグリシンアンタゴニスト−ＨＡ−９６６薬（Fletcher及びLodge，Eur．J．Pharmacol．１５１巻：１６１〜１６２頁（１９８８年））−はグリシン結合部位に対してマイクロモル親和性を有する部分的なアゴニストである。インビボでの生物学的利用能が不足しているために、ＨＡ−９６６についての神経保護効力は実証されておらず、他の用いられ得るグリシンアンタゴニストについても実証されていない。血液／脳関門を通過し得、そして、・ＭＫ８０１のようなＰＣＰ様ＮＭＤＡチャンネルブロッカーあるいはＣＧＳ１９７５５のような拮抗的ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストに一般的なＰＣＰ様行動副作用がなく；・ＮＭＤＡ受容体でのこれらのグルタミン酸塩アンタゴリズムの非拮抗の性質のために強力な抗虚血効力があることを示し；・ＰＣＰ様ＮＭＤＡチャンネルブロッカー又は拮抗的ＮＭＤＡアンタゴニストよりも副作用の少ない新規の抗痙薬として有用であって；・インビボでのＮＭＤＡ受容体のグリシン結合部位の機能的意義を明らかにするのを助ける強力で選択的なグリシン／ＮＭＤＡの必要性が存在し続ける。４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類の製造に関する文献において多くの報告がなされてきた。１９７６年１０月２７日に公開された英国特許第１，４５３，８６３号は、式：［式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、及びＲ₄は水素、アルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アリール、アラルキル、複素環、ヒドロキシ、ニトロ、又はハロゲン基である］を有する化合物の製造を開示している。この英国特許に開示されている特定の化合物には、３−ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、３，６−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、４−ヒドロキシ−３，６，８−トリニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６，７−ジメチル−４−ヒドロキシ−３−ニトロキノリン−２−オン、６，７−ジエチル−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２− オン、７，８−ジメチル−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、４−ヒドロキシ−８−メチル−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６−エチル−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６−クロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２− ジヒドロキノリン−２−オン、４−ヒドロキシ−６−メチル−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６−エチル−４−ヒドロキシ−３−ニトロ− １，２−ジヒドロキノリン−２−オン、４−ヒドロキシ−５−メチル−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、４−ヒドロキシ−７−メチル−３− ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、４−ヒドロキシ−８−メチル− ３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６−ブロモ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，８−ジメチル−４ −ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジメチル−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６，８−ジメチルー４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン− ２−オン、７，８−ジメチル−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、８−ブロモ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、８−クロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オン、７−クロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン −２−オン、４−ヒドロキシ−７−メトキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、４−ヒドロキシ−７−メトキシ−６−メチル−３−ニトロ− １，２−ジヒドロキノリン−２−オン、８−エトキシ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−６−ｎ−プロピル−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、４−ヒドロキシ−７−メチル−８−ｎ−プロポキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン −２−オン、４−ヒドロキシ−３−ニトロ−７−フェノキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、７−ベンジルオキシ−４−ヒドロキシ−６−メチル−３− ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、７−エチル−４−ヒドロキシ− ３−ニトロ−６−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、８−ベンジル−４−ヒドロキシ−６−メチル−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オン、４−ヒドロキシ−６−メチル−３−ニトロ−７−（３’−ピリジル）− １，２−ジヒドロキノリン−２−オン、４−ヒドロキシ−３−ニトロ−８−（３ ’−ピリジル）−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、４，７−ジヒドロキシ −３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、４−ヒドロキシ−３−ニトロ−７−ｎ−プロポキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、及び７−クロロ−４−ヒドロキシ−６−メトキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン −２−オンが含まれる。英国特許第１，４５３，８６３号によれば、４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類は、あるタイプの抗原−抗体反応の効果の阻害に有用であって、例えば、喘息、枯草熱及び鼻炎などのアレルギー又は免疫反応に関連する疾患の予防及び治療に有用である。１９７４年１２月１３日に公開された、フランス特許第２，２２９，４１４号及び１９７４年１２月５日に公開された、ドイツ特許第２，４２４，０７６号もまた参照されたい。１９８０年３月１１日に発行された、米国特許第４，１９２，８７６号は、式：［式中、Ｒ⁰は水素、炭素原子１〜６のアルキル、炭素原子３〜６のアルケニル、炭素原子３〜６のアルキニル、炭素原子３〜６のシクロアルキル、シクロアルキルが炭素原子３〜６であり、アルキル部分が炭素原子１〜２であるシクロアルキルアルキル、又はであり、Ｍは水素又はプロトン引き抜き剤から誘導されたカチオンであり、ｎは０又は１であって、Ｙ及びＹ’は独立して、ハロゲン、原子量１８〜８０のハロ、即ちフルオロ、クロロ、又はブロモ、炭素原子１〜３のアルキル、炭素原子１〜３のアルコキシ、又はトリフルオロメチルであり、Ｒ及びＲ’は独立して、ハロゲン、原子量１８〜８０のハロ、即ちフルオロ、クロロ、又はブロモ、炭素原子１〜４のアルキル、炭素原子１〜４のアルコキシ、ニトロ又はトリフルオロメチルであるか、又はＲ及びＲ’はともに６，７−メチレンジオキシを形成する。但し、Ｒ及びＲ’の一方のみがニトロ及びトリフルオロメチルからなる群から由来するものであり、さらにアルケニル又はアルキニルのいずれかにおいては、α炭素原子上以外で不飽和である］の化合物を開示している。この特許において開示されている特定の化合物には、６−トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン及び８−メチル−４−ヒドロキシ−３−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンが含まれる。この特許によれば、開示された化合物は、例えばアレルギー性喘息のようなアレルギー状態の治療に有用である。１９９１年１月２９日に発行された、米国特許第４，９８８，８１５号は、式：［Ｒは、低級アルコキシ、ハロゲン及び低級アルキルであり、ｎは０〜２の整数である］を有する化合物を開示している。これらの化合物は、報告によると、１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン類の製造のための中間体として有用である。欧州特許出願公開第０，３８５，６３０号は、１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン類の製造のための中間体として４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン化合物類の使用を開示している。 Buckle,D．R．ら，J．Med．Chem．１８巻：７２６〜７３２頁（１９７５年）は、式：を有する置換された４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン− ２−オン類を開示している。報告によると、これらの化合物はアレルギー反応の阻害剤として有用である。１９９１年７月２日発行の米国特許第５，０２８，７０７号は式：［式中、Ａはアジド、アミド又はイソシアナートであり、Ｂはクロロ又は水素であり、Ｃはメトキシ又は水素であり、Ｄはクロロ、ブロモ、ヨード又はフルオロである］の化合物を開示している。これらの化合物は、報告によるとニューロンにおけるＮＭＤＡ受容体複合体のためのフォトアフィニティープローブとして有用である。 McQuaid,L．A．ら，J．Med．Chem．３５巻：３４２３〜３４２５頁（１９９２年）は、ＮＭＤＡ受容体複合体上のストリキニーネ−非感受性グリシン部位での選択的アンタゴニストであると報告されている式：を有する３−フェニル−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類を開示している。欧州特許公開第４８９，４５８号は、式：［式中、Ｒ¹は式（ｉ）（ｉｉ）又は（ｉｉｉ）：（式中、Ｅは０、１、２又は３以上の窒素原子を含む５員の複素芳香環の残基を表す）の基を表す］の化合物を開示している。これらの化合物は、報告によると、ＮＭＤＡ受容体の選択的非拮抗的アンタゴニストの投与を必要とする状態、特に神経変性疾患の治療及び／又は予防において有用である。１９７７年６月２８日発行の米国特許第４，０３２，５２８号は、式：［式中、Ｒは炭素原子４〜６のアルキルである］の化合物を開示している。これらの化合物は、報告によると、トランキライザー及び鎮痙薬として有用である。１９９１年１２月１２日公開の欧州特許公開第４５９，５６１号は、式：［式中、Ｒ¹は部分式（ｉ）又は（ｉｉ）：の基である］の２，４−ジオキソ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン誘導体を開示している。これらの化合物は、ＮＭＤＡ受容体の選択的非拮抗的アンタゴニストであると報告されており、神経変性疾患、痙攣及び精神分裂症の治療に有用である。発明の概要本発明は、発作、虚血、ＣＮＳ損傷、低血糖症及び手術に伴うニューロンの損失（neuronal loss）の治療又は予防方法、また、アルツハイマー病、筋萎縮側索硬化症、ハンチンチトン病及びダウン症候群を含む神経変性疾患の治療、興奮性アミノ酸の過剰剌激の有害な影響の治療又は予防方法、同じく不安、痙攣、慢性疼痛の治療の方法及び麻酔の誘引方法に関するものであり、式（Ｉ）：［式中、Ｒ₁−Ｒ₄は水素、ニトロ、アミノ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アジド、アシルアミノ、スルホニル、アリール又はアルコキシであってよい］の化合物又はその薬学的に許容し得る塩をこのような治療を必要とする動物に投与することからなる。本発明は、４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンがグリシン受容体に強い結合を示すという初期の発見に基づくものである。４ −ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンはグリシン受容体に対して高い選択性を有しているので、本発明の化合物がＭＫ−８０１及びＣＧＳ１９７５５のような他のＮＭＤＡアンタゴニストなどのＰＣＰ様ＮＭＤＡチャンネルブロッカーに一般的な、ＰＣＰ様行動副作用を示さないということが期待される。従って、本発明の化合物は、深刻な副作用や毒性を有することなく病態生理学的状態を治療するのに有用である。好ましい態様の記載本発明は、選択性の高い、ＮＭＤＡ受容体及び興奮性アミノ酸のグリシン結合部位の選択性の高い、拮抗的アンタゴニストである、置換された及び置換されていない４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類に関する。本発明の実施に用いられ得る、４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２− ジヒドロキノリン−２−オン類は次式（Ｉ）：［式中、Ｒ₁−Ｒ₄は水素、ニトロ、アミノ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アジド、アシルアミノ、スルホニル、アリール又はアルコキシであってよい］を有し、又はその薬学的に許容し得る塩である。式Ｉの範囲内にある好ましい化合物は、式中、Ｒ₁がニトロ、アミノ、クロロ又はブロモであり；Ｒ₂は水素、クロロ、ブロモ又はトリフルオロメチルであり、；Ｒ₃はニトロ、クロロ、ブロモ又はトリフルオロメチルであり；Ｒ₄は水素、ニトロ、クロロ、ブロモ又はアミノであるものである。代表的なＣ_6-14アリール基は、フェニル、ナフチル、フェナントリル、アントラシル、インデニル、アズレニル、ビフェニル、ビフェニレニル及びフルオレニル基を含む。代表的なアミノ基は、ＮＨ₂、ＮＨＲ₅及びＮＲ₅Ｒ₆であって、Ｒ₅及びＲ₆がＣ_1-4 アルキル基である基を含む。代表的なハロ基は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を含む。代表的なＣ_1-4アルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、sec−ブチル及びtert−ブチル基を含む。代表的なＣ_2-4アルケニル基は、ビニル、アリル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル及びイソブテニル基を含む。代表的なＣ_2-4アルキニル基は、プロパルジル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル及び３−ブチニル基を含む。代表的なハロアルキル基は、１又はそれ以上のフッ素、塩素、臭素又はヨウ素原子で置換されたＣ_1-4アルキル基、例えばフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、１，１−ジフルオロエチル及びトリクロロメチル基を含む。代表的なアルコキシ基は、上述のＣ_1-4アルキル基のうちの１つによって置換された酸素を含む。本発明の特に好ましい化合物は、４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３，６−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジクロロ−４− ヒドロキシ−３，８−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５−クロロ−７ −トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ−３，６−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５−クロロ−７−トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ− ３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５−ブロモ−７−トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，６，７−トリクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３，５−ジニトロ− １，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３，８−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６，７−ジブロモ−４ −ヒドロキシ−３，５−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６，７−ジブロモ−４−ヒドロキシ−３，８−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン −２−オン、６，７−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−３，５−ジニトロ−１，２ −ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ビス（トリフルオロメチル）−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５−（トリフルオロメチル）−６−クロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２− ジヒドロキノリン−２−オン、５−（トリフルオロメチル）−６−ブロモ−４− ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５−（トリフルオロメチル）−６−フルオロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６−クロロ−７−（トリフルオロメチル）−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６−ブロモ−７−（トリフルオロメチル）−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６−フルオロ−７−（トリフルオロメチル）−４−ヒドロキシ− ３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６−クロロ−７−（トリフルオロメチル）−４−ヒドロキシ−３，５−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６−ブロモ−７−（トリフルオロメチル）−４−ヒドロキシ−３，５−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６−フルオロ−７−（トリフルオロメチル）−４−ヒドロキシ−３，５−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジブロモ−４−ヒドロキシ−３，６−ジニトロ− １，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジフルオロ−４−ヒドロキシ− ３，６−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ビス（トリフルオロメチル）−４−ヒドロキシ−３，６−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２− オン、５，７−ビス（トリフルオロメチル）−６−クロロ−４−ヒドロキシ−３ −ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ビス（トリフルオロメチル）−６−ブロモ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ビス（トリフルオロメチル）−６−フルオロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ビス（トリフルオロメチル）−６−アジド−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ビス（トリフルオロメチル）−６−アセトアミド−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６，７，８−トリクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジメチル−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，６，７，８−テトラフルオロ−４−ヒドロキシ− ３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、６，７，８−トリフルオロ −４−ヒドロキシ−３，５−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、７−クロロ−６，８−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−３，５−ジニトロ−１，２ −ジヒドロキノリン−２−オン、６，７−ジクロロ−８−フルオロ−４−ヒドロキシ−３，５−ジニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジクロロ−６−ブロモ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン− ２−オン、５，７−ジクロロ−６−フルオロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジクロロ−６−アジド−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジクロロ −６−アセトアミド−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン −２−オン、５，７−ジブロモ−６−クロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、５，７−ジブロモ−６−フルオロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン、及び５，７−ジブロモ−６−アジド−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン −２−オンを含むがこれに限らない。本発明の化合物の内、あるものは動物モデルにおいて強力な鎮痙薬であると期待されており、腹腔内投与後はジャービル（gerbil）の完全虚血モデルにおいて虚血によって誘発された神経細胞の死滅を妨げるであろう。本発明の化合物はニューロンの死滅、神経変性疾患、慢性的な疼痛の治療又は予防に有効であって、鎮痙薬として及び麻酔の誘引に有効である。本発明の化合物のあるものは他の受容体、特にＮＭＤＡ受容体に関連するＰＣＰ及びグルタミン酸塩受容体との非選択的な結合による都合の悪い副作用が少ない又は無いと期待される。さらに、化合物のうち、あるものは、カイニン酸塩、ＡＭＰＡ及びキスカル酸塩受容体をブロックし、したがって、広スペクトル興奮性アミノ酸受容体アンタゴニストとして有用である。さらに、本発明の化合物は、グリシン受容体をブロックし、虚血の間に起こるリガンド−ゲートカチオンチャンネルが開かれＣａ⁺⁺がニューロン内へ過剰に流入するのを阻止することにより、例えばＮＭＤＡ受容体系に関与する興奮性アミノ酸の過剰活性の有害な影響の治療又は予防において効果がある。本発明の化合物で治療し得る神経変性疾患は、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン舞踏病及びダウン症候群を含む。本発明の化合物は、痴呆を引き起こす多発性の発作に関連するニューロンの死滅の治療及び予防において特別の有用性を有する。患者が発作苦しんでいると診断されたら、本発明の化合物を投与して、即時の虚血を改善し、発作の再発から起こり得る、さらなるニューロンの損傷を予防する。さらに、本発明の化合物は中枢神経系を含む状態の治療又は予防にそれらを特に有用なものにする、血液／脳関門を通ることができる。本発明の化合物は、ニューロンの手術による有害な影響の治療又は予防において、特別の有用性を有する。例えば、冠状動脈バイパス手術は人工心肺の使用を必要とするが、これは循環系内に気泡が入りがちであり、その気泡は脳に留まり得る。このような気泡の存在はニューロン組織の酸素を奪い、酸素欠乏症及び虚血をもたらす。本発明の４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類の術前又は術後投与は、虚血が起こるのを治療又は予防し得る。好ましい態様では、本発明の化合物は、心肺バイパス手術又は頚動脈内膜切除手術を受けている患者に投与される。本発明の化合物はまた、慢性疼痛の治療又は予防において有用性がある。このような慢性疼痛は、手術、外傷、頭痛、関節炎、又は他の変性疾患に起因し得るものである。本発明の化合物はまた、四肢の切断から生じる幻想疼痛の治療において有用である。疼痛の治療に加えて、本発明の化合物はまた、例えば手術中の、全身又は局所麻酔の誘引において有用であると期待される。グリシン及び興奮性アミノ酸アンタゴニストはマウスにおいて多くの鎮痙剤を用いて腹腔内投与の後のインビボの鎮痙活性を試験し得る（ＤＢＡ−２マウスにおける聴原性発作モデル、マウスにおけるペンチレンテトラゾール−誘発発作、ＮＭＤＡ誘発死）。本化合物はまた、ＰＣＰと食塩水を識別するように訓練されたラットにおける薬物識別試験においても試験し得る。本発明の化合物の大部分は、いかなる用量でもＰＣＰに一般化できないであろうと期待されている。さらに、本発明の化合物のいずれも、マウスの移動活性試験において行動の興奮をもたらさないであろうことも予期される。このような結果は、本発明のグリシン、ＡＭＰＡ、カイニン酸塩及びキスカル酸塩アンタゴニストが、ＭＫ−８０１及びＰＣＰなどのＮＭＤＡチャンネルブロッカーあるいはＣＧＳ１９７５５のような拮抗的ＮＭＤＡアンタゴニストに一般的なＰＣＰ様行動副作用を示さないことを示唆することが予期されるだろう。グリシン及び興奮性アミノ酸アンタゴニストはまた、これら化合物が血液／脳関門を透過し得ることを示唆している腹腔内投与後のインビボでの強い活性を示すであろう。本発明の化合物はラット又はモルモットの脳膜ホモジネートにおいて、１μＭグリシン−刺激［³Ｈ］−ＭＫ−８０１の結合の阻害を観察することにより、潜在的なグリシンアンタゴニスト活性を試験し得る。強力なグリシンアンタゴニストほど、結合し得る［³Ｈ］−ＭＫ８０１は少ない。何故なら［³Ｈ］−ＭＫ８０１結合部位（ＰＣＰ受容体）はグルタミン酸塩及びグリシンによってチャンネルが開かれたときのみ近付くことができるからである（Fletcher，E.L．ら，in Gl ycine Neurotransmission，Otterson，P．ら（eds.），John Wiley and Sons（１９９０年）；Johnson,J.W．ら，Nature３２５巻：５２９頁（１９８７年））。本発明の化合物は、英国特許第１，４５３，８６３号に教示されている通常の方法によって製造し得る。特に、式Ｉの化合物は、対応する４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンを、以下のいずれか１つでニトロ化することにより製造される：（ｉ）濃硝酸及び酸化ヒ素から発生させた発煙硝酸；（ｉｉ）濃硝酸に酢酸を加えたもの；（ｉｉｉ）クロロホルム中の発煙硝酸；又は（ｉｖ）濃硝酸。出発物質の４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類を文献において既知の標準的な方法によって製造する。例えば、Patel及びMehta（J．Sci ．Ind．Res．１９Ｂ：４３６〜８頁（１９６０年））の方法を使用してもよく、この方法は適切に置換されたアニリンをマロン酸ジエチルで縮合させ、次いでモノアニリンを加水分解し、ポリリン酸で環化する。対称的に置換されたアニリン又は１つのオルト位置換アニリンの場合、環化により１種類のみの生成物を生じる。両方のオルト位が自由な非対称のアニリンでは、様々な割合の５−及び７− 置換のヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類を生じる。従って、３，４−ジメチルアニリンでは２種の可能性のある異性体の１：１の混合物を生じる。より大きな置換基では、割合は、最も大きな置換基から最も遠いＣ−Ｃ結合を新たに形成するように影響する。従って３，４−ジエチルアニリンは、主として６，７−ジエチル−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン及び、ごく少量の５，６−異性体を生じる。参考のために本明細書に全て引用する英国特許第１，４５３，８６３号を参照されたい。３−ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン１６ａ（Buckle，D.R．ら，J．Med．Chem．１８巻：７２６〜７３２頁（１９７５年））は２，４−ジヒドロキシキノリン１５ａ（反応式Ｉ，式６）のニトロ化によって製造した。化合物１６ａは１．４％の５，７−ジクロロキヌレン酸（ＤＣＫ）の力価で１８μＭのＫ_i値を有することがわかった。さらなる１６ａのニトロ化はモノ−ニトロ置換化合物１６ｂを生成し、１６ａとだいたい同じぐらい活性であることがわかった。５，７−ジクロロ−２，４−ジヒドロキシキノリン１５ｃは３，５−ジクロロアニリンとマロン酸ジエチルとを反応させ、次いで塩基で加水分解し、ポリリン酸（ＰＰＡ）中で環化（式７）することにより製造した。Pate l,G.H．ら，J．Sci．Industr．Res．１９Ｂ：４３６〜４３８頁（１９６０年）。１５ｃのニトロ化は、５，７−ジクロロ−３−ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン１６ｃを生成し、これは１９％のＤＣＫの力価で１．４μＭのＫ_i値を有することがわかった。これらニトロ化合物のグリシン／ＮＭＤＡ受容体に対する結合能力は、キノキサリンジオン（ＱＸ）化合物と非常に類似している（ＱＸ２％のＤＣＫ、５，７−ジクロロ−ＱＸ、２０％のＱＸ）。従って、一連の３−ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン −２−オン類は、グリシン／ＮＭＤＡ受容体と結合する有望なアンタゴニストを提供する。さらに、ジクロロ及びジクロロニトロ−置換３−ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン類もまた製造した。５，７−ジクロロ−３− ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン１６ｃのニトロ化は、ニトロの位置が未定の１６ｄ及び１６ｃの混合物を生成した（反応式Ｉ）。６，７−ジクロロ−２，４−ジヒドロキシキノリン１５ｆ及び５，６−ジクロロ−２，４−ジヒドロキシキノリン１５ｇの約１：１の混合物は、３，４− ジクロロアニリンとマロン酸ジエチルを１５ｃの条件と同じ条件下での反応により得た（反応式ＩＩ、式８）。ＨＣｌ水溶液の添加による、１５ｆ及び１５ｇの塩基性溶液の分別沈殿による１５ｆと１５ｇの分離の試みは失敗し、これら２つの化合物はＴＬＣではよく分離しなかった。驚くべきことに、１５ｆ及び1５ｇの混合物のニトロ化は反応混合物から沈殿を生じ、これは他の異性体の混入の無い、５，６−ジクロロ−３−ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン１６ｆ（Ｋ_i＝０．８μＭ）であるとわかった。１６ｆのさらなるニトロ化により、１６ｈ又は１６ｉのいずれかである単一のジニトロ生成物が生成した。従って、本発明はグリシン受容体と強い結合を有し、カイニン酸塩及びＡＭＰＡ部位に弱い結合を有する化合物に関するものである。本発明の特定の化合物は、グリシン受容体に加えて、カイニン酸塩、ＡＭＰＡ及びキスカル酸塩受容体に強いアンタゴニスト効力を有し得る。本発明に従えば、グリシン受容体に対して強い結合を有するこれら化合物は、グリシン結合分析において約１００μＭあるいはそれ未満のグリシン結合親和性（Ｋ_i）を示す。最も好ましくは、本発明の化合物は１μＭあるいはそれ未満のＫ_iを示す。カイニン酸塩又はＡＭＰＡ結合分析において、約１０μＭあるいはそれ未満、特に１μＭあるいはそれ未満のＫ iを示せば、その化合物はカイニン酸塩及びＡＭＰＡ部位に対して強い結合を示す。インビボのグリシンアンタゴニストの力価は１μＭのグリシン剌激性［³Ｈ］ −ＭＫ８０１結合分析を用いて測定し得る。この分析はＮＭＤＡチャンネルの孔の内側のＰＣＰ受容体への［³Ｈ］−ＭＫ８０１の結合が、グルタミン酸塩及びグリシンの両方の存在に依存しているという事実を利用する。グリシンが存在していなくて、グルタミン酸塩が存在しているとき、ＮＭＤＡチャンネルは閉じたままであり、閉じたチャンネルの孔の内部のＰＣＰ受容体への［³Ｈ］−ＭＫ８０１の接近がひどく制限されるので、［³Ｈ］−ＭＫ８０１はＰＣＰ受容体に効果的に結合することができない。ＮＭＤＡ受容体に富むラット脳膜ホモジネートを用いて分析を行う。膜は、次の様に調製する。凍結したラット脳（Pel-Freez，Rogers，Arkansasより得る）を１５倍量（重量／容量）の０．３２Ｍ氷冷スクロース中でホモジナイズする。このホモジネートを１，０００×ｇで１０分間回転させる。上清を集め、２０分間４４，０００×ｇで回転させる。ペレットを１５倍量（元の脳重量について）の水に懸濁する。ホモジネートを再び、４４，０００×ｇで２０分間回転させる。ペレットを５倍量の水に再懸濁し、この懸濁液を２回凍結−解凍する。最後の解凍の過程の後、懸濁液を水で１５倍量にし４４，０００×ｇで２０分間回転させる。ペレットを５倍量の１０ｍＭ氷冷ＨＥＰＥＳに再懸濁し、０．０４％トリトンＸ−１００を含むＫＯＨでｐＨ７．４になるまで滴定する。膜をトリトン／ＨＥＰＥＳ緩衝液と共に３７℃にて１５分間インキュベートする。ｐＨ７．４の１０ｍＭ氷冷ＨＥＰＥＳで１５倍量にし、洗浄の間は４４，０００×ｇで回転させて回転／洗浄を３回行う。最終のペレットを３倍量のｐＨ７．４の５０ｍＭＨＥＰＥＳに懸濁し、タンパク濃度を標準的な色素−結合タンパク分析（Bio-Rad ，Richmond，CA）で測定する。この懸濁液を使用するまで−８０℃で保存する。すべての緩衝液及び懸濁液／洗浄にＨＰＬＣグレードの水のみを使用する。できるだけ大量の内生グリシンを膜の調製から除去するために広範囲の洗浄が必要である。分析の日に、あらかじめ調製した膜を解凍し、最終のタンパク濃度が０．１５６ｍｇ／ｍｌになるようにｐＨ７．４の５ｍＭトリス／ＨＣｌ緩衝液を加える。結合分析のために、０．８ｍｌの膜に次いで、１５．１μＭ５，７−ジクロロキヌレン酸（ＤＣＫ）０．０３３ｍｌ、緩衝液中の３０．３μＭグリシン（又は緩衝液のみ）０．０３３ｍｌ、緩衝液中の３０３μＭグルタミン酸塩（又は対照のために、ＤＣＫ／グリシン／グルタミン酸塩の代わりとして、１ｍＭＰＣＰ０．１ｍＭ）０．０３３ｍｌ、緩衝液中のグリシンアンタゴニスト（又は緩衝液のみ）０．０３３ｍｌ及び２００，０００ｃｐｍ［³Ｈ］−ＭＫ８０１を含む緩衝液０．１ｍｌをポリプロピレン管にピペットで入れる。非特異的結合をＰＣＰ（最終濃度：１００μＭ）の非存在下又は存在下で起こる結合の差異として定義する。［³Ｈ］−ＭＫ８０１の結合における１μＭグリシンの影響を測定するために、１０μＭグルタミン酸塩のみの存在下（最終濃度）での結合放射能を１０μＭグルタミン酸塩及び１μＭグリシン（最終濃度）の両者の存在下の結合放射能から差し引く。５００ｎＭ濃度（最終）の５，７−ジクロロキヌレン酸（ＤＣＫ）を全ての分析チューブに加える。グリシンアンタゴニストＤＣＫのこの濃度は、膜調製の手順の間に行った広範囲な洗浄によって除去されなかった、残存する内生グリシンの大部分を「緩衝化する」。５００ｎＭのＤＣＫは、１μＭの外性グリシンの添加によって行われる［³Ｈ］−ＭＫ８０１結合の刺激を妨げない。分析物は、室温で１２０分間インキュベートした後、０．３％ポリエチレンイミンで前処理したWhatmanグラスファイバーフィルターでの吸引濾過によって、膜−結合放射能を遊離放射能から分離する。濾過は、Brandel ４８ウェル細胞採集器を用いて行う。濾過された膜は、氷冷緩衝液各３ｍｌで、３回洗浄する。フィルターをシンチレーションびんに移し、５ｍｌのシンチレーションカクテルを加える。びんを一晩振盪し、放射能をリキッドシンチレーション分光法によって計測する。分析は３回行い、全ての実験は少なくとも３回実施する。５ｎＭから３３０μＭまで増加する濃度のグリシンアンタゴニストを用いて、阻害用量応答曲線を作成する。１μＭグリシン−刺激性［³Ｈ］−ＭＫ８０１結合の阻害において活性な化合物のＩＣ₅₀値をコンピューターで補佐する阻害曲線のプロット及び補間によって測定する。化合物が、グリシン−刺激性［³Ｈ］− ＭＫ８０１結合を阻害するとわかったら、グリシン−刺激性［³Ｈ］−ＭＫ８０１結合の阻害が本当にＮＭＤＡ受容体のグリシン結合部位で媒介されているかどうかを測定するために実験する。これらの実験において、１μＭグリシン−刺激性［³Ｈ］−ＭＫ８０１結合の９５％より高い阻害をもたらすに充分な、固定濃度のアンタゴニストを、グリシンの添加（１μＭ以上）なし、及び増加する濃度の更なるグリシン（２μＭから１μＭ）の存在下で、膜とインキュベートする。１μＭグリシンの存在下の薬物による［³Ｈ］−ＭＫ８０１結合の阻害が、増加する濃度のグリシンを添加することにより完全に逆になれば、［³Ｈ］−ＭＫ８０１結合の阻害はＮＭＤＡ受容体のグリシン結合部位でアンタゴニストとして作用する薬物によって媒介されている。阻害用量応答曲線を作成し、グリシン可逆性を測定した後、グリシンアンタゴニストに対するＫ_i値を実験的に決定したＩＣ₅₀値、分析におけるグリシンの既知の濃度（１μＭ）、及びＮＭＤＡ受容体のグリシン結合部位に対するグリシンの既知の親和性（１００ｎＭ）を使い、ChengとPrusoffの式を用いて計算する。１μＭグリシン−刺激性［³Ｈ］−ＭＫ８０１結合分析に使用した、同じラットの脳の膜のホモジネートを［³Ｈ］−ＡＭＰＡ放射リガンド結合分析に用いた。分析の当日に（上記のように調製した）凍結膜を解凍し、２．５ｍＭＣａＣｌ₂及び１００ｍＭＫＳＣＮを含む、ｐＨ７．４の３０ｍＭトリス／ＨＣｌ緩衝液で希釈して１．２５ｍｇ／ｍｌ膜タンパクの最終膜濃度にする。結合分析のために、０．８ｍｌの膜ホモジネートをポリプロピレンチューブに加え、次いで薬物０．０３３ｍｌ及び緩衝液０．０６７ｍｌ（又は対照として、０．１ｍｌの緩衝液のみ）及び２００，０００ｃｐｍの［³Ｈ］−ＡＭＰＡを含む０．１ｍｌの緩衝液を加える。分析は、氷上で３０分間インキュベートする。Brandel ４８ウェル細胞採集器を使用して、（０．３％ポリエチレンイミンで前処理した）Whatmanグラスファイバーフィルター上の濾過により遊離の放射能から結合放射能を分離する。濾過した膜を氷冷緩衝液各３ｍｌで３回洗浄する。フィルターをシンチレーションびんに移し、シンチレーションカクテル５ｍｌを加える。びんを一晩振盪し、リキッドシンチレーション分光法により放射能を計測する。非特異的結合は、１０ｍＭのグルタミン酸塩の存在下で、膜に結合したままの放射能によって決定する。１０ｎＭから１００μＭまで増加する濃度の薬物を加えることによって、阻害用量応答曲線を作成する。［³Ｈ］−ＡＭＰＡ結合分析に使用したのと同じ膜調製品を［3Ｈ］−カイニン酸塩放射リガンド結合分析に使用し得る。分析の当日に、凍結ラット脳膜を解凍し、ｐＨ７．４の５ｍＭトリス／ＨＣｌ緩衝液を加え、０．５ｍｇ／ｍｌ膜タンパクの最終濃度にする。結合分析のために膜ホモジネート０．８ｍｌをポリエチレンチューブに加え、次いで薬物０．０３３ｍｌ及び緩衝液０．０６７ｍｌ（又は対照として、０．１ｍｌの緩衝液のみ）、及び２００，０００ｃｐｍの［³ Ｈ］−カイニン酸塩を含む緩衝液０．１ｍｌを加える。分析は氷上で２時間インキュベートする。Brandel ４８ウェル細胞採集器を使用して、（０．３％ポリエチレンイミンで前処理した）Whatmanグラスファイバーフィルター上の濾過により遊離の放射能から結合放射能を分離する。濾過した膜を氷冷緩衝液各３ｍｌで３回洗浄する。フィルターをシンチレーションびんに移し、シンチレーションカクテル５ｍｌを加える。びんを一晩振盪し、リキッドシンチレーション分光法により放射能を計測する。非特異的結合は、１０ｍＭのグルタミン酸塩の存在下で、膜に結合したままの放射能によって測定する。２５０ｎＭから３３０μＭまで増加する濃度の薬物を加えることによって、阻害用量応答曲線を作成する。本発明のいくつかの特定の化合物の不安解消活性は、不安について確認された動物モデルを用いることにより測定し得る。好ましいモデルは、Jones,B.J.ら， Br.J.Pharmacol．９３巻：９８５〜９９３頁（１９８８年）に記載されている。このモデルは不安の高い基底レベルを有するマウスへの、問題の化合物の投与を伴う。試験はこのようなマウスが、暗試験室内の暗室環境から取り出され、白く塗られ、明るく照らされた領域に置かれたとき、嫌悪を感じるという発見に基づく。試験箱は、２つの室を有し、１つは白く、明るい照明であり、もう１つは、黒く、照明がない。マウスは、２つの室の間の衝立にある床の高さの穴を通って両方の室に通じる通路を有する。マウスを明るい照明の領域の中央に置く。暗領域への穴の場所をみつけた後、マウスは２つの室の間を前後自由に通ることができる。対照のマウスは、暗室にいる時間の割合がより長くなる傾向がある。不安解消剤を与えると、マウスは、新たなより明るい照明の室を探索する時間が長くなり、暗室へ移動するための潜伏を遅らせる兆候をしめす。さらに、立ち上がった状態での探索、及び進路の交差によって測定されるように、不安解消剤で治療されたマウスは白い室において、多くの挙動を示す。マウスはこの試験状況に慣れ得るので、試験には常に未被験のマウスを用いるべきである。５つのパラメーターを試験し得る：暗室に入る潜伏時間、各領域で費やす時間、室の間の移動回数、各室における進路の交差回数、各室における立ち上がりの回数。本発明の化合物の投与は、マウスが試験チェンバーのより大きな、明るい照明の領域により長い時間を費やす結果をもたらす。明／暗探索モデルにおいて、推測の薬剤の不安解消活性は、対照のマウスに比べて、暗室における進路の交差及び立ち上がりの回数を犠牲にした明室における進路の交差及び立ち上がりの回数の増加によって同定し得る。第二の好ましい動物モデルは、Jones,B.J.ら（前掲）により記載されている、２匹のマウスが社会的相互作用に費やす時間を測定する、ラット社会的相互作用試験である。推測の薬剤の不安解消活性は、雄性ラットのペアが活発な社会的相互作用（自然界において挙動の９０％は探索である）に費やす時間の増加によって同定し得る。試験場の精通度及び光のレベルの両方を操作し得る。試験場をよく知っているものにし、弱い光を照らしたとき、薬物投与されていないラットは高いレベルの社会的相互作用を示した。試験場をラットにとって未知にするか、又は明るい光を照らした場合は、社会的相互作用は減退する。不安解消剤は、この減退を防止する。運動活性の全体のレベルを測定して、社会行動に特異的な薬物効果を検出してもよい。ラット脳皮質神経細胞培養系におけるグルタミン酸塩神経毒性を阻害するグリシン及び興奮性アミノ酸アンタゴニストの効力は、次のように測定し得る。Choi （Choi,D.W.，J.Neuroscience ７巻：３５７頁（１９８７年））の開発の後、改良された興奮毒性（excitotoxicity）モデルは、グリシン及び興奮性アミノ酸アンタゴニストの抗−興奮毒性効力試験に使用し得る。胚形成１９日のラットからの胎児を交尾期（time-mated）の妊娠したラットから摘出する。胎児から脳を摘出し大脳皮質を解剖する。解剖した皮質の細胞を、Landon及びRobbins（Metho ds in Enzymology １４２巻：４１２頁（１９８６年））の方法に従って、機械的掻き交ぜと酵素的な消化の組み合わせによって解離させる。解離した細胞を８０ミクロンのナイテックス（nitex）スクリーンに通し、細胞の成育能力をトリパンブルーにより評価する。細胞をポリ−Ｄ−リジンをコートしたプレートに置き、９１％Ｏ₂、９％ＣＯ₂の雰囲気下、３７℃でインキュベートする。６日後、非神経細胞の増殖を抑えるために、フルオロ−ｄ−ウラシルを２日間加える。培養１２日目、主要な神経培養細胞をグリシン及び興奮性アミノ酸アンタゴニスト又は他の薬物の増加する用量ともに、もしくは無しに１００μＭグルタミン酸塩に５分間さらす。５分後、培養細胞を洗浄し、３７℃で２４時間インキュベートする。神経細胞の損傷を培地中に放出された乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）活性を測定することによって定量する。ＬＤＨ活性はDeckerら（Deckerら，J.Immunol.Me thos１５巻：１６頁（１９８８年））の方法に従って測定する。グリシン及び興奮性アミノ酸アンタゴニストの鎮痙活性は、次のようにＤＢＡ −２マウスにおけるオーディオジェニック（audiogenic）発作モデルにおいて評価し得る。ＤＢＡ−２マウスは、Jackson Laboratories，Bar Harbor，Maineより入手し得る。１１０ｄＢで１４ｋＨｚの音（正弦波）にさらすと生後２７日未満のこれらのマウスは、５〜１０秒以内に緊張性の発作を起こして死亡する（Lo nsdale，D.，Dev.Pharmacol.Ther.４巻：２８頁（１９８２年））。発作保護は、音にさらす３０分前に薬物注射した動物が、音に１分間さらしている間に発作を起こさす死亡しない場合であると定義する。全ての実験に生後２１日のＤＢＡ− ２マウスを使用する。食塩水、ＤＭＳＯ、又はポリエチレングリコール−４００中の化合物を腹腔内投与する。各実験において、適当な溶媒対照を含ませる。１ｍｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇに増加する用量の薬物を投与することによって、用量応答曲線を作成する。各用量群（又は溶媒対照）は少なくとも６匹の動物で構成する。グリシン受容体アンタゴニストの鎮痙効力は、次のようにペンチレンテトラゾール（ＰＴＺ）誘発発作試験において試験し得る。Ｓｗｉｓｓ／Ｗｅｂｓｔｅｒマウスは５０ｍｇ／ｋｇ（腹腔内）注射したとき、薬物注射から５〜１５分以内に約５秒の最小の間代性発作を起こす。グリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニスト（又は他の）薬物の鎮痙効力は、ＰＴＺの使用の３０分前に薬物を投与したときに発作が起こらず、ＰＴＺ投与後４５分までの間発作が起こらないことと定義される。グリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニスト又は他の薬物は、食塩水、ＤＭＳＯ又はポリエチレングリコール−４００中で腹腔内投与される。各実験において、適当な溶媒対照を含ませる。１ｍｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇに増加する用量の薬物を投与することによって、用量応答曲線を作成する。各用量群（又は溶媒対照）は少なくとも６匹の動物で構成する。マウスをＮＭＤＡ誘発死から保護するグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストの効力は次のように評価し得る。マウスにＮ−メチル−Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）２００ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与したとき、マウスは発作を起こし、５〜１０分以内に死亡するであろう。グリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストをＮＭＤＡ使用の３０分前に腹腔内投与することにより、ＮＭＤＡ−誘発死を防止するその薬物の能力を試験する。グリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニスト又は他の薬物は、食塩水、ＤＭＳＯ又はポリエチレングリコール−４００中で腹腔内投与される。各実験において、適当な溶媒対照を含ませる。１ｍｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇに増加する用量の薬物を投与することによって、用量応答曲線を作成する。各用量群（又は溶媒対照）は少なくとも６匹のマウスで構成する。正常なジャービル及び５分間の両側の頚動脈閉鎖にさらしたジャービルにおける化合物の生物学的活性を測定するために、本発明のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストの用量について種々の評価をおこなうことができる。スキームＩＩＩを参照されたい。これら一連の評価を意識のあるジャービルにおいて行い、ジャービルには他の薬剤の投与は行わない。虚血の前にジャービルを４８時間プレインストルメンテーションし、使用するペントバルビタール麻酔薬を完全に除去させる。薬物を試験する場合、ジャービルはグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニスト又は担体を腹腔内注射で投与する。多数回の注射の場合、２時間おきに腹腔内注射し、最後の注射を虚血の時期の３０分前に行うか、あるいは後治療の場合、３０分、２時間、４時間及び６時間の虚血後の再潅流で注射する。直接のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストの薬理活性又は潜在的な活性を評価するために、未被験のジャービルに生理食塩水又は種々の用量のアンタゴニストのいずれかを注射する。挙動の変化を光線検出の付いた直径２フィートの範囲の光線運動活性チェンバーを用いて評価する。ジャービルは、直径２フィートのチェンバーに独立して置いた。チェンバーは密閉したキャビネットの中に入れ、背景ホワイトノイズ発生器及びファンの両方を用いてノイズを減衰する。初期の薬理評価の場合には、これらのチェンバーにジャービルを６時間入れ、コンピュター制御システムを用いて、各継続する時間の間の総活性を累積する。生理食塩水は大きい初期活性をもたらし、対照動物は、始めの１時間は約１６００カウントの活性レベルであった。対照のこの活性レベルは、これらの実験の条件下にあるジャービルについては典型的なものである。実験が進むにつれて、ジャービルの探索活性が減少し、終末期間では、探索活性は１時間当たり２５０カウントに減少する。本発明のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストが初期の探索速度又は探索の終末速度のいずれかにおいて有意に影響しないことが期待される。グリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストの評価の次の段階では、ジャービルを種々の用量のアンタゴニストであらかじめ処置し、次いで５分間の両側の頚動脈閉鎖に付す。再潅流の開始に次いで、ジャービルを循環運動活性試験装置に入れ、再潅流後の最初の１時間目の始めの活性をその後４時間監視する。虚血に付さずに運動活性チェンバーに入れる前に生理食塩水の注射をした対照動物は、最初の１時間の運動活性においては実質的に他のすべての時間中よりも高く、４時間で非常に低い値にまで次第に減衰するという特徴的な活性のパターンを示す。４時間の試験期間中の活性の斬新的な減衰と対照的に、５分間の皮質虚血に付した対照動物は、完全に異なる運動活性パターンを示す。１時間の間は、活性の有意の減衰があり、その後に次第に増加し、その増加は４時間目の活性が頚動脈虚血に付していないジャービルによって示される活性よりも１０倍高い。これらの結果は、ジャービルにおける５分間の両側の頚動脈閉鎖に起因する変化の典型的で信頼すべき結果である。別のジャービルの群を頚動脈閉鎖の開始の３０分前に本発明のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストで前処置し、次いで再潅流の１時間の後に運動活性試験装置に入れる。本発明のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストによるジャービルの前処置は、活性の虚血後の減少と増加の両方を防止することが期待される。活性の虚血後の減少は再潅流後の最初の１時間の間に０に近いことが期待される。本発明のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストによる前処置は、行動のこの早期抑制を減少させ又は防止することが期待される。さらに、本発明のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストは、行動の虚血後の興奮を防止することが期待される。単一用量の前処理評価の完了の次に、ジャービルを本発明のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストの多数の注射でも評価する。５分間の虚血の開始前６時間、４時間、２時間及び３０分に腹腔内で用量を投与する。２４時間目、すべてのジャービルを８枝放射状迷路を用いて巡回挙動における差異について評価する。この方法において、ジャービルを迷路の中央出発チェンバーに置き、該チェンバーは障壁が除かれ、ジャービルが迷路の８枝すべての探索を完了する前におかした間違いの時間と回数を記録する。間違いは、ジャービルの尾を除く体の全体が入ることによる枝の再訪問によって定義される。ジャービルが５分より長く枝に固執、又は枝から出そこなった場合、１回の実験は終了する。ジャービルの対照群では、未経験（未被験）での間違いの数及び迷路の探索は、およそ６の間違いである。これは、２８匹のジャービルのＮについての平均値である。５分間の両側の頚動脈の閉鎖に続き、２４時間目に試験すると、ジャービルのおかす間違いの平均の数は２１である。本発明のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストでジャービルを前処置する場合、発生する間違いの数を有意に減少することが期待される。また、放射状枝迷路の動作において誘導される行動の変化を有意に抑えることも期待される。また、処置後に本発明のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストが虚血／再潅流後２４時間の短期間の記憶の減退を緩和することも期待される。背面の海馬の神経細胞死に対する５分間の両側の頚動脈閉鎖の効果は、虚血再潅流損傷後７日のジャービルについて試験する。以前の試験は、ニューロン変性が大脳虚血後の３日辺りに起こり始めることを示した。冒されたこれらのニューロンは７日間まで細胞崩壊を受け、変性を完全にし、又は濃い色の核として見え、及び核凝縮を有するエオシン親和性の細胞質によって置換される。５分間の虚血による損傷は、海馬内部では背面の海馬のＣＡＩ領域に本質的に限られる。角の中間側方領域は、冒されておらず、歯状回及び／又はＣＡ３においては病理を示さない。ジャービルは、虚血から７日目に６０ｍｇ／ｋｇのペントバルビタールで麻酔する。脳は氷冷生理食塩水で、次いで緩衝化したパラホルムアルデヒド（１０％）で心臓を通って潅流する。脳を切除し、包埋し、切片を作成する。切片をヘマトキシリン−エオシンで染色し、切片及び神経細胞の合計を１００マイクロメーター当たりの神経核の数に換算して測定する。正常な対照ジャービル（虚血再潅流損傷に付していない）はこの領域内の正常な核の密度における有意の変化を何ら示さないであろう。５分間の両側の頚動脈閉鎖にさらした結果は、ＣＡ１領域に存在する核の数の有意の減少となる。一般的に、この病変は、１０分間の虚血を行う場合にみられる融合性の壊死ではなく、むらのある壊死という結果となる。本発明のグリシン受容体アンタゴニストは海馬神経変性の有意の保護をもたらすことが期待される。ＮＭＤＡ受容体は神経及び組織の損傷後の持続的疼痛の発生に重大に関わっているということが知られている。少量のホルマリンを被験動物の後足に皮下注射することによって起こるような組織の損傷は、脊髄のグルタミン酸塩とアスパルテートの速やかな増加をもたらすことが示されている（Skilling,S.R.等，J.Neu rosci.１０巻：１３０９〜１３１８頁（１９９０年））。ＮＭＤＡ受容体ブッロカー（blocker）の投与は、ホルマリン注射後の脊髄の背角ニューロンの応答を減退させる（Dickenson及びAydar，Neuroscience Lett.１２１巻：２６３〜２６６頁（１９９１年）；Haley,J.E.等，Brain Res.５１８巻：２１８〜２２６頁（１９９０年））。これらの背角ニューロンは、脊髄から脳への疼痛のシグナルの伝達に重要なものであり、これらニューロンの応答減少は、ホルマリン皮下注射によって加えられる、被験動物が感知する疼痛の減少を示す。ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストがホルマリン皮下注射によって誘導される背角神ニューロン応答を遮断し得るという観察から、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストは、手術又は切断（幻肢痛）又は他の創傷の苦痛（創傷痛）によって起こる疼痛などの慢性の疼痛の治療に可能性を有する。しかし、ＭＫ８０１又はＣＧＳ１９７５５のような従来のＮＭＤＡアンタゴニストの使用は、慢性疼痛の防止及び治療においては、これらの薬物によって起こる、好ましくないＰＣＰ−様行動の副作用によって厳しく制限される。本発明の主題であるグリシン受容体アンタゴニストがマウスの後足内にホルマリン皮下注射することによって誘発したマウスの慢性疼痛の防止において高い効果を有することが期待される。本発明のグリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストはＰＣＰ−様副作用が存在しないと期待されるのでこれらの薬物はＰＣＰ様の好ましくない行動副作用の起こらない、慢性疼痛の防止及び治療に非常に有用である。慢性疼痛における本発明のグリシン受容体アンタゴニストの効果は、次のように評価する。体重２５〜３５ｇの雄性Ｓｗｉｓｓ／Ｗｅｂｓｔｅｒマウスを１つのかごに５匹ずつ入れ、水と食物を自由に飲食させて１２時間の光サイクルに維持する（照明８００時間）。グリシン受容体アンタゴニストをＤＭＳＯ中に１〜４０及び５〜４０ｍｇ／ｍｌの濃度にそれそれ溶解する。ＤＭＳＯは賦形剤対照として用いる。すべての薬物を腹腔内投与する（１μ／ｇ）。ホルマリン試験は、記載（Dubuisson及びDennis，Pain ４巻：Ｈ１６１〜１７４頁（１９７７年））されている通りに行う。マウスは直径２５ｃｍ高さ３０ｃｍのプレキシガラスの筒の中で観察する。１つの後足の足底表面に、２０μｌの５％ホルマリンを皮下注射する。疼痛の程度を次の時間間隔：０〜５秒（初期）；５〜１０秒、１０〜１５秒及び１５〜５０秒（後期）の間にホルマリン注射された足を嘗めるのにその動物が費やす時間の合計を測定することによって決定する。グリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストが被験動物の慢性疼痛を防止するかどうかを試験するために、賦形剤（ＤＭＳＯ）、又は賦形剤中に１ｍｇ／ｋｇから４０ｍｇ／ｋｇの用量で溶解した薬物を、ホルマリン注射の３０分前に注射する。薬物又は賦形剤対照の各用量を少なくとも６匹の動物に用いる。賦形剤対照と比較して、後足へのホルマリン注射の３０分前のグリシン受容体アンタゴニストの腹腔内注射は、グリシン／興奮性アミノ酸アンタゴニストの増加する用量に起因する、後足にホルマリン注射されたマウスによる嘗めるのに費やされた時間の減少によって測定する用量−依存法においてホルマリン−誘発の慢性疼痛を有意に阻害することが期待される。本発明の範囲内にある組成物には、本発明の化合物が意図した目的を達成するに効果的である量で含まれている、すべての組成物が含まれる。個々の必要量は多様であるが、各成分の有効量の至適範囲は当業者によって決定される。典型的には、本化合物は哺乳動物、例えばヒトに０．００２５〜５０ｍｇ／ｋｇの用量又は当量のそれらの薬学的に許容し得る塩で経口的に投与でき、これは不安疾患、例えば一般的な不安疾患、恐怖疾患、強迫疾患、パニック疾患、及び外傷後のストレス疾患を治療している哺乳類の体重の１日当たりの用量である。好ましくは、このような疾患を治療又は予防するために約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇが経口的に投与される。筋肉注射については用量は通常は経口での用量の約２分の１である。例えば、不安の治療又は予防のための適切な筋肉内投与量は約０．００２５〜約１５ｍｇ／ｋｇ、もっとも好ましくは約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇになろう。虚血、脳及び脊椎の外傷、低酸素症、低血糖症、及び手術によるニューロン損失の治療又は予防の方法において、同様にアルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン舞踏病及びダウン症候群の治療のために、疾患の病態生理学が興奮性アミノ酸又は神経毒性に関連するＮＭＤＡ受容体−イオンチャンネルの過剰活性にかかわる疾病を治療する方法においては、本発明の医薬組成物は、一日当たり１〜４回の服用で、本発明化合物を体重１ｋｇ当たり単位投与量レベル約０．０１〜約５０ｍｇで含有してなるか、又は当量の薬学的に許容し得るそれらの塩を含有してなる。慢性疼痛の治療又は麻酔の誘引に使用する場合は、本発明化合物は、１日当たり１〜４回の服用で、体重１ｋｇ当たり約０．０１〜約５０ｍｇの単位投与量レベルで投与し得るか、又は当量の薬学的に許容し得るそれらの塩を投与し得る。勿論、厳密な治療レベルは治療される動物、例えばヒトの病歴に依存であろうということは理解される。正確な治療レベルは当業者によって不当な試験なしに決定し得る。経口での単位投与量は約０．０１〜約５０ｍｇ、好ましくは約０．１〜１０ｍｇを含有し得る。この用量は、各々約０．１〜１０、便利には約０．２５〜５０ｍｇの化合物又はその溶媒和物を含有する１個又はそれ以上の錠剤として１日に１回又はそれ以上投与し得る。未製剤の化学物質としての化合物の投与に加えて、本発明の化合物は、薬学的に使用できる、化合物の製剤への加工を容易にする賦形剤及び添加剤を含む適当な薬学的に許容し得る担体を含有する医薬製剤の一部として投与し得る。好ましくは、製剤、特に経口投与でき、また、錠剤、糖衣丸剤、及びカプセルなどの好ましい投与形態で使用し得る製剤及びまた坐剤のような直腸に投与し得る製剤、同様に注射又は経口による投与のための適当な溶液は、約０．０１〜９９パーセント、好ましくは約０．２５〜７５パーセントの活性化合物を賦形剤とともに含有する。また本発明の範囲には、本発明化合物の非毒性の薬学的に許容し得る塩も含まれる。基本の塩は、本発明の特定の４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンの溶液を、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化コリン、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、トリスなどの薬学的に許容し得る非毒性の塩基の溶液と混合することによって形成される。本発明の医薬組成物は本発明化合物の有益な効果を経験し得る動物に投与し得る。このような動物のうち主要な動物はヒトであるが、本発明はそのような限定を意図するものではない。本発明の医薬組成物はその目的を達成するあらゆる方法によって投与し得る。例えば、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、経皮、口腔内又は眼の経路から投与し得る。若しくは、又はそれと同時に、経口によっても投与し得る。投与量は年齢、健康状態、患者の体重、同時に行う治療の種類、もしあれば、治療の頻度、及び所望の効果の性質に依存するであろう。本発明の組成物を眼（ocularly）に投与する場合、局所的又は全身的投与のどちらか一方を達成し得る。例えば、本発明の組成物は実質的に涙液と等張である点眼剤の形で投与し、全身的投与を達成し得る。好ましくは、このような組成物はまた、本発明の化合物の全身的な吸収を助ける透過−増強剤も含んでなる。米国特許第５，１８２，２５８号を参照されたい。若しくは、視神経変性を治療又は防止するために本発明の組成物を眼に投与し得る。この態様では、本発明の化合物は、前記のように点眼剤の形で投与されるか、又は視神経の付近に注射し得る。別の態様では、本発明の化合物をゆっくりと放出する細かい移植片を使用し得る。薬理活性を有する化合物の投与に加えて、新規の医薬製剤は、適当な薬学的に許容し得る担体を含有してもよく、これは活性化合物の薬学的に使用できる製剤への加工を容易にする賦形剤及び添加剤を含んでなる。好ましくは、この製剤、特に経口投与でき、錠剤、糖衣丸剤、及びカプセルなどの好ましい投与形態で使用し得る製剤、及びまた坐剤のような直腸に投与し得る製剤、同様に注射又は経口による投与のための適当な溶液は、約０．０１〜９９パーセントの活性化合物を賦形剤とともに含有する。本発明の医薬製剤は、既知の方法で製造され、例えば、慣用的な混合、造粒、糖衣、溶解、又は凍結乾燥工程により製造される。したがって、経口で使用される医薬製剤は活性化合物と固体の賦形剤とを混合することにより得られ、場合により、所望又は必要であれば、適当な添加剤を加えた後、得られた混合物を粉砕し顆粒の混合物を加工し、錠剤又は糖衣丸剤の核を得る。適当な賦形剤は、特に糖、例えばラクトース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース調製品及び／又はリン酸カルシウム、例えばリン酸三カルシウム又はリン酸水素カルシウムなどの賦形剤、同様に例えばトウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース及び／又はポリビニルピロリドンを使用するデンプンペーストなどの結合剤である。所望なら、前記のデンプン及びまたカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、又はアルギン酸又はアルギン酸ナトリウムなどのアルギン酸の塩などの崩壊剤を加えてもよい。添加剤は特に流動調節剤及び滑沢剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸又はステアリン酸マグネシウム又はステアリン酸カルシウムなどのステアリン酸の塩、及び／又はポリエチレングリコールである。所望なら、糖衣丸剤の核に胃液に対して抵抗力のある適当なコーティングがされる。この目的のために、濃厚な糖の溶液が使用でき、この溶液には場合によりアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール及び／又は二酸化チタン、ラッカー溶液及び適当な有機溶媒又は溶媒混合物を含んでいてもよい。胃液に対して抵抗力のあるコーティングを形成するためにアセチルセルロースフタレート又はヒドロキシプロピルメチルーセルロースフタレートなどの適当なセルロース調製品の溶液が使用される。識別又は活性化合物の服用量を特徴づけるために染料又は色素を錠剤又は糖衣丸剤に加えてもよい。経口で使用できる他の医薬製剤には、ゼラチン製のプッシュ−フィット（push -fit）カプセル及びゼラチン及びグリセリン又はソルビトールなどの可塑剤で製造された軟質のシールされたカプセルが含まれる。プッシュ−フィットカプセルは顆粒状の活性化合物を含み得、この顆粒にはラクトースのような賦形剤、デンプンのような結合剤。及び／又はタルク又はステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤、場合により安定化剤が混合されていてもよい。軟質カプセル中では、活性成分は脂肪油、又は流動パラフィンなどの適当な液体中で好ましく溶解又は懸濁されている。さらに安定化剤を加えてもよい。直腸に使用可能な医薬製剤には、例えば１つ又はそれ以上の活性化合物と坐剤基剤の組み合わせからなる坐剤が含まれる。適当な坐剤基剤は、例えば天然又は合成のトリグリセリド、又はパラフィン炭化水素である。さらに、活性化合物と基剤との組み合わせからなるゼラチン直腸溶カプセルもまた使用することができる。可能な基剤材料には、例えば液体トリグリセリド、ポリエチレングリコール、又はパラフィン炭化水素が含まれる。非経口投与に適当な製剤には、水溶液の形の活性化合物の水溶液、例えば、塩の水溶液及びアルカリ溶液が含まれる。さらに、適当な油性注射懸濁液として活性化合物の懸濁液を投与し得る。適当な親油性溶媒又はビヒクルには、例えばゴマ油のような脂肪油、又は例えばオレイン酸エチル又はトリグリセリド又はポリエチレングリコール−４００（この化合物はＰＥＧ−４００に溶解する）のような合成脂肪酸エステルが含まれる。水性注射懸濁剤は、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトール及び／又はデキストランを含む懸濁液の粘度を増加させる物質を含む。場合により、懸濁剤は安定化剤を含んでいてもよい。インビボでのグリシン結合部位のキャラクタライゼーションは選択的な薬物リガンドがなかったために困難であった。したがって、本発明のグリシンリガンドはグリシン結合部位のキャラクタライゼーションに使用し得る。この目的に使用し得る、特に好ましく置換された又は置換されていない４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリンはアイソトピカルであり、例えば放射性標識誘導体、例えば１つ又はそれ以上の原子が³Ｈ、¹¹Ｃ、¹⁴Ｃ、¹⁵Ｎ、又は⁸Ｆで置換されている誘導体である。次の実施例は、本発明の方法及び組成物を説明するものであるが限定ではない。臨床治療において普通に行われており、当業者には自明である様々な条件及びパラメーターの他の適切な改変及び適合は本発明の精神及び範囲の内にある。実施例実施例１：３−ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンの合成氷冷酢酸１０ｍｌ中の２，４−ジヒドロキノリン（Aldrich）１．４５ｇ（９．００ｍｍｏｌ）の混合物にＨＮＯ₃（６９〜７１％）２．５ｍｌを加えた。この混合物を９０℃で５分間加熱して赤色の溶液にすると、溶液中に沈殿が観察された。混合物を室温に冷却し、次いで水４０ｍｌを加えて混合物を２０分間攪拌した。混合物は濾過して水で洗浄し、乾燥して黄色の固体として標題の化合物１．５４ｇ（８３％）を得た。融点２１６℃（分解、文献：Buckle,D.R.，ら，J.Med .Chem．１８巻：７２６〜７３２頁（１９７５年），２１６℃）であった。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃＋ＤＭＳＯ−ｄ₆），７．０１３（ｔ，１，Ｊ＝７．５），７．１０５（ｄ，１，Ｊ＝７．５），７．３９６（ｔ，１，Ｊ＝７．２），７．８７７（ｄ，１，７．８），１１．７２（ｍｂ１）。実施例２：３，６−ジニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オンの合成９６％Ｈ₂ＳＯ₄ ４ｍｌ中の３−ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン７２４ｍｇ（３．５１ｍｍｏｌ）及びＫＮＯ₃ ４０１ｍｇ（３．９７ｍｍｏｌ）の溶液を氷浴中で３０分間攪拌し、次いで２５℃で２０時間攪拌した。この溶液を氷水２５ｍｌ中に加え、黄色の沈殿を得、この混合物を１時間攪拌して濾過、水で洗浄、及び乾燥して標題の化合物６０２ｍｇ（６８％）を黄色の固体として得た。融点１９７〜１９８℃（分解、文献（Buckleら，前掲）１９９〜２００℃）。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃＋ＤＭＳＯ−ｄ₆），７．１１４（ｄ，１，Ｊ＝９．１２），７．９８０（dd，１，Ｊ＝２．２７，９．１３），８．６２８（ｄ，１，Ｊ＝２．２８），１２．１３（ｍｂ，１）。実施例３：５，７−ジクロロ−２，４−ジヒドロキノリンの合成３，５−ジクロロアニリン３．２ｇ（２０ｍｍｏｌ）及びジエチルマロネート６．４ｇ（４０ｍｍｏｌ）の溶液を１８０℃で１時間加熱した。この溶液を室温に冷却しメタノール５ｍｌで希釈して混合物を濾過した。濾液をＮａ₂ＣＯ₃ ３．０ｇ及び水１０ｍｌと混合し、１時間還流した。混合物を濾過して濾液を氷浴中２ＮＨＣｌ水溶液でｐＨ＝１に酸性化した。混合物は、濾過し、水で洗浄し、乾燥して白色の固体を得た。この固体をポリリン酸２０ｍｌと混合し、１４０ ℃に３時間加熱した。溶液を室温に冷却し、１ＮＨＣｌ水溶液２５ｍｌで希釈した。混合物を４時間攪拌し、次いで２０％ＮａＯＨ水溶液でｐＨ＝４まで中和した。これを濾過し、水で洗浄し、乾燥して白色の固体１．１ｇを得た。この固体を酢酸４０ｍｌで煮沸し、濾過し、乾燥して標題の化合物７６２ｍｇ（１６％）を白色の固体として得た。融点３６０〜３６１℃（分解）¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ＋ＤＭＳＯ−ｄ₆），５．４４７（ｓ，１），６．６２０（ｄ，１，Ｊ＝１．８４），６．８０４（ｄ，１，Ｊ＝１．８６），１０．９１５（ｓｂ，１）。ＭＳ，２２９（100，Ｍ⁺），１８７（８０），１６０（３０），１２４（２０）。高分解能ＭＳ，Ｃ₉Ｈ₅ ³⁵Ｃｌ₂ＮＯ₂の計算値２２８．９６９４，実測値２２８．９７０９。実施例４：５，７−ジクロロ−３−ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンの合成氷冷酢酸３ｍｌ中の５，７−ジクロロ−２，４−ジ−４−ヒドロキシ−１，２ −ジヒドロキノリン−２−オン５３４ｍｇ（２．３２ｍｍｏｌ）の混合物にＨＮＯ₃（６９〜７１％）０．７ｍｌを加え、この混合物を９０℃で３０分間加熱した。混合物を室温に冷却し、濾過して水で洗浄し、乾燥して標題の化合物５６２ｍｇ（８８％）を黄色の固体として得た。融点１７０〜１７１℃（分解）。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃＋ＤＭＳＯ−ｄ₆），６．９０９（ｄ，１，Ｊ＝１．８６），６．９９７（ｄ，１，Ｊ＝１．８４），１１．９９３（ｓｂ，１）。ＭＳ，２７４（３５，Ｍ⁺），２５８（２０），２４１（２０），２１４（１００），１６０（５０）。高分解能ＭＳ、Ｃ₉Ｈ₄ ³⁵Ｃｌ₂Ｎ₂Ｏ₄の計算値２７３．９５４４，実測値２７３．９５５１。実施例５：５，７−ジクロロ−３，６−ジニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン及び５，７−ジクロロ−３，８−ジニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンの合成９６％Ｈ₂ＳＯ₄ １ｍｌ中の５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ −１，２−ジヒドロキノリン−２−オン１３６ｍｇ（０．４９４ｍｍｏｌ）及びＫＮＯ₃６２ｍｇ（０．６０ｍｍｏｌ）を氷浴中で３０分間攪拌し、次いで２５ ℃で一晩攪拌した。この溶液に氷水２ｍｌを加え、沈殿を濾過して水で洗浄し、乾燥して標題の化合物の混合物である黄色の固体１４２ｍｇ（８９％）を得た。融点２１２〜２１４℃。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃＋ＤＭＳＯ−ｄ₆），７．２１８（ｓ，０．８），７．３１９（ｓ，０．２），１２．５（ｍｂ，１）。ＭＳ，３１９（１００，Ｍ⁺），３０３（４０），２６１（５０），２４３（４０），２３２（５０），２１５（７０），１８５（５０）。高分解能ＭＳ、Ｃ₉Ｈ₃ ³⁵Ｃｌ₂Ｎ₃Ｏ₆の計算値３１８．９３９４，実測値３１８．９４００。実施例６：５，６−ジクロロ−２，４−ジヒドロキノリン及び６，７−ジクロロ −２，４−ジヒドロキノリンの合成３，４−ジクロロアニリン９．７５ｇ（６０．２ｍｍｏｌ）及びジエチルマロネート２１．１ｇ（１３２ｍｍｏｌ）の溶液をＮ₂下、１８０℃で３０時間加熱した。これを室温に冷却し、濾過してメタノール１０ｍｌで洗浄した。濾液をＮａ₂ＣＯ₃ １５ｇ、水３０ｍｌ及びメタノール１０ｍｌと混合し、１時間還流した。混合物を氷浴中、６ＮＨＣｌ水溶液でｐＨ＝１に酸性化した。沈殿を濾過し、水で洗浄し、乾燥して白色の固体（９．４ｇ）を得た。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃＋ＤＭＳＯ−ｄ₆），３．０９９（ｓ，２），７．０２８（ｄ，１，Ｊ＝８．７５），７．１２８（dd，１，Ｊ＝２．２６，８．７０），７．６１９（ｄ，１，Ｊ＝２．２３），９．８００（ｓ，１）。この固体をポリリン酸１００ｍｌと混合し、１４０℃に３時間加熱した。溶液を室温に冷却し、氷浴中で１ＮＨＣｌ水溶液１００ｍｌ及び水３００ｍｌで希釈した。次いで氷浴中、２０％ＮａＯＨ水溶液でｐＨ＝４まで中和した。この混合物を濾過し、水で洗浄し、乾燥して薄い黄色の固体８．２ｇ（９５％）を標題の化合物の混合物として得た。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃＋ＤＭＳＯ−ｄ₆），５，６−ジクロロ−誘導体：５．５１３（ｓ，１），７．０５０（ｓ，１），７．５１０（ｓ，１），１０．８６（sb ，１）；５，７−ジクロロ−誘導体：５．５９７（ｓ，１），６．８４６（ｄ，１，Ｊ＝９．０），７．０６６（ｄ，１，Ｊ＝９．０），１０．９０（sb，１）；比＝１：１。この混合物の一部（８００ｍｇ）を１ＮＮａＯＨ水溶液１５ｍｌ中に溶解し、濾過した。濾液を２ＮＨＣｌ水溶液でｐＨ＝８．２に酸性化し固形の沈殿を得た。これを濾過し、水で洗浄して乾燥して白色の沈殿を得た。¹ＨＭＮＲは再び１：１の比を示す。さらに沈殿を得るために、この水溶液をｐＨ＝８．０に酸性化した。濾過し、水で洗浄し、乾燥して白色の固体を得た。¹ＨＭＮＲは再び１：１の比を示す。さらに沈殿を得るために、この水溶液をｐＨ＝４．０に酸性化した。濾過し、水で洗浄し、乾燥して白色の固体を得た。５，６−ジクロロ−誘導体の６，７−ジクロロ−誘導体に対する比は１：０．７を示す。実施例７：６，７−ジクロロ−３−ニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンの合成氷冷酢酸８ｍｌ中の５，６−ジクロロ−２，４−ジヒドロキシキノリン及び６，７−ジクロロ−２，４−ジヒドロキシキノリン１．２５ｇ（５．４３ｍｍｏｌ）の混合物にＨＮＯ₃（６９〜７１％）１．５ｍｌを加え、この混合物を９０℃ で２時間加熱した。混合物を室温に冷却し、濾過して水で洗浄し、乾燥して標題の化合物２８０ｍｇ（１９％）を黄色の固体として得た。融点２３５〜２３６℃ （分解）。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃＋ＤＭＳＯ−ｄ₆），７．３６２（ｓ，１），８．０３９（ｓ，１），１１．３６９（ｓ，１）。ＭＳ，２７４（５０，Ｍ⁺ ），２１４（１００），１８７（１８），１６０（２０）。高分解能ＭＳ、Ｃ₉ Ｈ₄ ³⁵Ｃｌ₂Ｎ₂Ｏ₄の計算値２７３．９５４４，実測値２７３．９５４８。実施例８：６，７−ジクロロ−３，５−ジニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン又は６，７−ジクロロ−３，８−ジニトロ−４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンの合成９６％Ｈ₂ＳＯ₄ １ｍｌ中の６，７−ジクロロ−３−ニトロ−４−ヒドロキシ −１，２−ジヒドロキノリン−２−オン１４３ｍｇ（０．５２０ｍｍｏｌ）及びＫＮＯ₃ ２１０ｍｇ（２．０７ｍｍｏｌ）の溶液を氷浴中で１時間攪拌し、次いで２５℃で４８時間攪拌した。この溶液に氷水４ｍｌを加え、沈殿を濾過して水で洗浄し、乾燥して２種の標題の化合物のうちの１つである黄色の固体１３８ｍｇ（８４％）を得た。融点１９５〜１９６℃。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃＋ＤＭＳＯ −ｄ₆），８．１２０（ｓ，１）。ＭＳ，３１９（１００，Ｍ⁺），３０３（４５），２５９（３０），２４３（３５），２３２（４０），２１５（６０），１９９（７０）。高分解能ＭＳ、Ｃ₉Ｈ₃ ³⁵Ｃｌ₂Ｎ₃Ｏ₆の計算値３１８．９３９４，実測値３１８．９３９０。ここに本発明をすべて記載したが、それと同じことが、本発明の範囲又は本発明のいずれかの態様に影響することなく、条件、形式及び他のパラメーターの広くそして同意義の範囲内で行い得るものであるということは、当業者には理解されるであろう。本明細書に引用されたすべての特許及び出版物は、その全内容が参考として本明細書に完全に組み込まれる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ツァイ，スイ・シオンアメリカ合衆国カリフォルニア92715、アーヴィン、パークビュー・レーン3900番、ナンバー６ビー (72)発明者ウェバー，エッカードアメリカ合衆国カリフォルニア92651、ラグーナ・ビーチ、デル・マール・アベニュー 1560番 (72)発明者キーナ，ジョン・エフ・ダブリュアメリカ合衆国オレゴン97405、ユージーン、オニックス・ストリート3854番

Claims

【特許請求の範囲】１．発作、虚血、ＣＮＳ損傷、低血糖症及び手術に伴うニューロン損失の治療又は予防の方法であって、このような治療を必要とする動物に有効量の式［式中、Ｒ₁−Ｒ₄は水素、ニトロ、アミノ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アジド、アシルアミノ、スルホニル、アリール又はアルコキシであってよい］の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を投与することを含んでなる方法。２．該化合物が４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オンである請求の範囲１に記載の方法。３．該化合物が５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンである請求の範囲１に記載の方法。４．該ニューロン損失が手術中又は手術直後に脳内に入り込んだ気泡の結果として起こる、請求の範囲１に記載の方法。５．該ニューロン損失が心肺バイパス手術の結果として起こる請求の範囲１に記載の方法。６．該ニューロン損失が頚動脈内膜切除手術の結果として起こる請求の範囲１に記載の方法。７．該ニューロン損失が痴呆をもたらす多発性発作の結果として起こる請求の範囲１に記載の方法。８．アルツハイマー病、筋萎縮側索硬化症、ハンチンチトン病及びダウン症候群から選択される神経変性疾患の治療又は予防の方法であって、このような治療を必要とする動物に有効量の式［式中、Ｒ₁−Ｒ₄は水素、ニトロ、アミノ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アジド、アシルアミノ、スルホニル、アリール又はアルコキシであってよい］の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を投与することを含んでなる方法。９．該化合物が４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オンである請求の範囲８に記載の方法。１０．該化合物が５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンである請求の範囲８に記載の方法。１１．興奮性アミノ酸の過剰活性の有害な結果の治療又は予防の方法であって、このような治療を必要とする動物に有効量の式［式中、Ｒ₁−Ｒ₄は水素、ニトロ、アミノ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アジド、アシルアミノ、スルホニル、アリール又はアルコキシであってよい］の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を投与することを含んでなる方法。１２．該化合物が４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オンである請求の範囲１１に記載の方法。１３．該化合物が５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンである請求の範囲１１に記載の方法。１４．慢性疼痛の治療又は予防の方法であって、このような治療を必要とする動物に有効量の式［式中、Ｒ₁−Ｒ₄は水素、ニトロ、アミノ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アジド、アシルアミノ、スルホニル、アリール又はアルコキシであってよい］の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を投与することを含んでなる方法。１５．該化合物が４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オンである請求の範囲１４に記載の方法。１６．該化合物が５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンである請求の範囲１４に記載の方法。１７．不安の治療又は予防の方法であって、このような治療を必要とする動物に有効量の式［式中、Ｒ₁−Ｒ₄は水素、ニトロ、アミノ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アジド、アシルアミノ、スルホニル、アリール又はアルコキシであってよい］の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を投与することを含んでなる方法。１８．該化合物が４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オンである請求の範囲１７に記載の方法。１９．該化合物が５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンである請求の範囲１７に記載の方法。２０．痙攣の治療又は予防の方法であって、このような治療を必要とする動物に有効量の式［式中、Ｒ₁−Ｒ₄は水素、ニトロ、アミノ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アジド、アシルアミノ、スルホニル、アリール又はアルコキシであってよい］の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を投与することを含んでなる方法。２１．該化合物が４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オンである請求の範囲２０に記載の方法。２２．該化合物が５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンである請求の範囲２０に記載の方法。２３．麻酔誘引の方法であって、このような処置を必要とする動物に有効量の式［式中、Ｒ₁−Ｒ₄は水素、ニトロ、アミノ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アジド、アシルアミノ、スルホニル、アリール又はアルコキシであってよい］の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を投与することを含んでなる方法。２４．該化合物が４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オンである請求の範囲２３に記載の方法。２５．該化合物が５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンである請求の範囲２３に記載の方法。２６．該化合物が薬学的に許容し得る担体を含有する医薬組成物の一部として投与される請求の範囲１、８、１１、１４、１７、２０及び２３のいずれかに記載の方法。２７．式を有する化合物又はその薬学的に許容し得る塩。２８．請求の範囲２７に記載の化合物及び薬学的に許容し得る担体を含んでなる医薬組成物。２９．式［式中、Ｒ₁−Ｒ₄は水素、ニトロ、アミノ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アジド、アシルアミノ、スルホニル、アリール又はアルコキシであってよい］を有する同位体で標識された化合物又はその薬学的に許容し得る塩。３０．同位体が³Ｈ、¹¹Ｃ、¹⁴Ｃ、¹⁵Ｎ又は¹⁸Ｆである請求の範囲２９に記載の同位体で標識された化合物。３１．該化合物が４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２ −オンである請求の範囲２９に記載の同位体で標識された化合物。３２．該化合物が５，７−ジクロロ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オンである請求の範囲２９に記載の同位体で標識された化合物。