JPH08508935A - 揺動濾過装置によって溶質を濃縮するための方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 透析において溶質分子の逆濾過を減少させそして膜バイオリアクターにおいては栄養供給と産生物回収とを改善する一方向又は整流膜として有用な二重皮の膜（８８）を用意するための方法。該膜は、好ましくは中空繊維の形態の、二重皮のポリマー材料である。該膜は、相対する側に、溶質に対する透過性と篩特性とを異にするポリマーの皮（１２、１４）を有する。各側の該皮は、10,000倍拡大においても見えないポアを有する。これらの皮の間の微孔性構造（１６）は、内側（１４）及び外側（１２）皮の間に約5000乃至200,000の分子量範囲内の溶質を高められた濃度に保持することのできるポアを含む。透析装置は、整流特性を有する透析部材として該中空繊維膜の束を用いることによって形成される。該膜（８８）を横切って前方及び後方に溶液を反復的に循環させることにより、溶質を膜（８８）の片側に分離及び濃縮することができる。

Description

【発明の詳細な説明】 揺動濾過装置によって溶質を濃縮するための方法 発明の背景 本発明は、一般的には、血液透析装置及びバイオリアクターのような液体濾過 装置、並びにそのような装置のために使用される膜に関する。より具体的には、 本発明は、そのような透析その他の濾過操作を実施するための、整流濾過特性の 、二重皮の膜を有する改良された透析装置に関する。 透析膜及び装置は、人工腎臓その他のタイプの濾過装置において使用される とき、重要な生命維持機能を果たす。高流速透析器のよく認識されている問題点 の一つは、透析液から血液への、望ましくない分子の逆濾過である。無菌の、パ イロージェン不含の透析液を使用することの高いコストのために、β2-ミクログ ロブリンのような比較的大きな溶質を除去することができる一方、近似のサイズ の分子が透析液から血液へと通過するのを阻止する透析膜を利用できれば非常に 望ましいであろう。 しかしながら、血液から透析液への溶質の高速の拡散を提供するそのような膜 はまた、透析液から血液へ戻る溶質の高速の逆拡散という問題をも伴っている。 同様に、高速の対流を提供する現行の膜はまた、高速の逆濾過という問題をも伴 っている。従って、血液からの尿毒症の毒素の十分な除去を提供する一方、血液 への望ましくない物質の逆輸送を阻止する透析膜への需要が存在している。同様 に、他の液体濾過方法も、そのような整流特性を有する膜の利用可 能性から利益を得る。 伝統的な合成化学技術によっては経済的に製造することができない産生物を産 生させるために使用される、生きた細胞へ栄養を供給すると同時にそれから産生 物及び老廃副産物を運び出すための手段を整流膜が提供するものである、バイオ リアクターのような装置の需要もまた存在する。 発明の要約 本発明により、透析装置のような濾過装置内の膜を用いる方法が提供される。 該膜を含んだ該濾過装置は、整流特性、すなわち非対称的な篩係数を有する。非 対称的な篩係数は、与えられた溶質について、ある方向に膜を通過する溶質の画 分が、その反対方向に膜を通過する溶質の画分に比して実質的に異なっていると いう状況において存在する。 この目的に向けて、一具体例においては、欲しない材料を溶液から除去するた めの方法が提供される。該方法は、囲い内に全体として平行な向きに固定された 複数の二重皮の中空膜であってその各々が該欲しない材料を含んだ溶液の通過に 関して非対称の篩係数を提供する微孔性構造を中に有するものである中空膜を有 する装置を用意するステップと、該溶液を該装置に複数回通すステップと、そし て該溶液が該装置を通して移される際に該望ましくない材料を除去するステップ と、を含む。 一具体例においては、該篩係数は、0.1乃至0.9である。 一具体例においては、該溶液は透析液を含む。 一具体例においては、該方法は更に、該膜の片側に第１の貯蔵器を用意するス テップと、そして該膜の第２の側に第２の貯蔵器を用 意するステップとを含み、ここに該溶液は、該第１の貯蔵器と該第２の貯蔵器と の間において該装置を通して流される。 一具体例においては、該方法は更に、該膜の内部と液体連通した流入手段を用 意するステップを含む。 一具体例においては、該方法は更に、該溶液の流出のために該膜の末端と液体 連通した流出手段を用意するステップを含む。 一具体例においては、該方法は更に、該囲いの内部と液体連通した第２の液体 流路を含み、ここに該溶液は、該膜の外表面と接触して流されることができる。 一具体例においては、該望ましくない材料は、規定された分子量範囲内にある 。 本発明の別の一具体例においては、望ましくない材料を体液から除去するため の方法が提供される。該方法は、囲い内に全体として平行な向きに固定された複 数の二重皮のポリマー膜であってその各々がシェル側と管腔側を有し且つ各々が 両端において全体として平行な向きで囲い内に固定されているものであるポリマ ー膜を有する透析装置を用意するステップと、透析を受ける液体のための流入手 段であって該膜の該管腔側と液体連通しているものである流入手段を用意するス テップと、濾過後の体液の流出のために該膜の末端と液体連通した流出手段を用 意するステップと、そして体液を該装置を通して複数回流すステップとを含み、 ここに該望ましくない材料は該膜内に又は該膜の該シェル側に集積する。 一具体例においては、該複数の膜は、微孔性構造を有する。 一具体例においては、該微孔性構造は、非対称の篩係数を提供する。 本発明の別の一具体例においては、複数の非対称の篩係数を有する微孔性構造 を備えた二重皮の中空膜であって全体として平行な向きで内部を有する囲い内に 固定され、ここに該膜の外部及び該囲いの内部がバイオリアクター容器を規定す るものである、中空膜を有するバイオリアクター容器内に生きた細胞を閉じ込め ることにより生物学的産生物を産生するための方法が提供される。該方法は、該 膜を通して細胞への栄養の輸送を許容するために、該細胞のための栄養を含有す る液体を該中空膜を通し循環させて反復的に流すステップと、老廃物が膜を通し て該液体へと輸送される際に該細胞から老廃物を除去するステップと、そして該 容器から生物学的産生物を除去するステップと、を含む。 従って、望みの溶質を分離及び濃縮するための装置を提供することは本発明の 一利点である。 本発明の更なる一利点は、膜を前方及び後方に横切って溶液を繰り返し循環さ せることによりの望みの溶質を分離及び濃縮するための方法を提供することであ る。 本発明の尚も更なる一利点は、膜の片側に溶質を分離及び濃縮するための方法 を提供することである。 尚も更には、本発明の一利点は、膜の管腔側に溶質を濃縮するための方法を提 供することである。 そして、本発明の別の一利点は、整流膜を用いて、サイクル数が増加するとき 溶質の濃度を連続的に増大させることである。 本発明の尚も更なる一利点は、操作条件から独立して、整流膜を用いて溶質の 濃度を増大させることである。 本発明の更なる特徴及び利点は、現在好ましい具体例についての 詳細な記述中に記述されており、およびこれと図面とから明らかであろう。 図面の簡単な記述 図１は、中空繊維の形に本発明の膜を形成するための方法を図解する概要図で ある。 図２は、本発明の実施に際して使用される環状の押し出しダイの断面図である 。 図３は、本発明の濾過装置の、一部を断面で示した側面立面図である。 図４は、本発明の濾過装置の使用に際して起こる濾過のメカニズムを（仮説的 に）図解する、大きく拡大した縮尺の略図であり、 図５及び６は、電子顕微鏡でとられた、異なる拡大の本発明の中空繊維膜の断 面図である。 図７は、本発明によるバイオリアクター装置の側面立面図である。 図８〜１４は、ここに記述した特定の実施例の試験から得られた結果のグラフ 表示である。 図１５は、濾過装置の揺動により得られた結果及び得られた溶質濃度のグラフ による表現である。 図１６〜２０は、ある範囲の篩係数を有する濾過装置の揺動により得られた結 果及び得られた溶質濃度のグラフによる表現である。 現在好ましい具体例の詳細な記述 より具体的に図面を参照して、図１は、中空繊維紡糸システム６０を概念的に 示す。有機溶媒中のポリマーの溶液６２は、容器６４ 内に収容されており、そこから流量調節ポンプ６６によって環状の押し出しダイ ６８へとポンプ移送される。同様に、ポリマーにとって非溶媒である凝固剤溶液 ７２は、第２の容器７０内に収容されており、別のポンプ７４によってダイ６８ へと移送される。 溶液がダイを出るときに相互に接触して形成される境界面６３における非溶媒 ７２とポリマー溶液６２との相互作用が、内側膜の最終的な構造及び性質を決定 する。 形成された押し出し成形物は、次いで、エアギャップ７６を通って落ち、第２ の非溶媒凝固剤溶液８０を収容した浴７８に入る。押し出し成形物と第２の溶液 ８０との相互作用が、外側膜の構造及び性質を決定する。繊維は、中空繊維から 溶媒を完全に抽出するために、ドライバーローラー８２によって浴７８を通して 及び必要に応じて１又はより多くの追加の浴８４を通して引かれる。抽出された 繊維は、最後に、多区分ワインダー８６上に巻き取られ、そして乾燥させられる 。乾燥された繊維８８は、長さを切り揃えられてハウジング９０内に入れられる 。繊維８８は、熱硬化性樹脂９２によって、ハウジング９０内にシールされる。 該アセンブリーには、末端キャップ９４及び９６が嵌められる。濾液のための入 口９７及び出口９８もハウジング９０上に備えられる。 図５及び６は、内部の微孔性構造８３、内側の皮８５、及び該内側の皮８５と は異なった多孔度を有する外側の皮８７を示す拡大した断面図で、本発明の典型 的な繊維８８を図解する。本発明の膜は、好ましくは、約200μｍの内径を有し 、一般的には内径約100乃至1000μｍの範囲に及ぶ。 全体としての篩係数とは、溶質のうち濾過されつつある液体と共 に膜を通って流入してくるものの割合である。それは、膜の下流側の溶質の濃度 を膜の上流側のその濃度で除すことによって計算される。 単一皮の膜については、全体としての篩係数は、該皮の篩係数に等しく、それ は溶質のうち、その皮を通過するものの割合である。該皮自体の篩係数は、ポア と溶質分子との相対的サイズにのみ依存する。皮が緻密である程（すなわちポア が小さい程）、与えられた分子のうちそれを通過する割合は小さい。 しかしながら、二重皮の膜については、第２の皮に到達する溶質の濃度は、第 １の皮の特性並びに流れ条件に依存しており、従って全体としての篩係数は、流 れ及び膜特性の双方よりなる特性である。一の方向の篩係数が他の方向の篩係数 と異なるものである整流膜への鍵は、一方向の流れが膜の２つの皮の内部に溶質 を蓄積させることである。 図４は、外側の皮１２が内側の皮14よりも緻密であり、負荷された圧力勾配の 結果として液体が内側から外側へと通過するものである、二重皮の整流膜８８の 概要である。この場合において、膜８８の中心領域1６に入る分子のいくらかは 、ゆるい皮１４を通って入ってきたのと同じ速度では、より緻密な外側の皮１２ を通って該中心領域１６を去ることができない。この正の流入れの結果として、 膜８８の内部の濃度は、分子の正味の流入がゼロである新たな定常状態の値に達 するまで増大する。繊維内のこれらの変化に付随して、繊維外の液体中の濃度も 同様に増大する。繊維の管腔内の濃度は変化していないから、全体としての篩係 数は、緻密な皮１２のみの場合に得られるよりも高い定常状態の値に達するまで 、時間と共に増 大する。 もしも同じ膜８８が外部から内部への流れを伴う反対方向からの圧力勾配に曝 されても、溶質は最初に緻密な皮１２に出会う。この緻密な膜１２を通過する溶 質の小部分は、ゆるい皮１４を容易に通過することができ、それは膜８８内に蓄 積が起こらないことを意味する。この場合、膜８８内の濃度も内部１８の濃度も 共に低い。全体としての篩係数は、他の方向の場合に得られたよりも小さい。 中空繊維を形成するためには、本発明の方法において種々のポリマーを使用す ることができる。それらのポリマーは、少なくとも一の有機溶媒に可溶性であり 、且つ、該溶媒と混和性である別の一の液体に不溶性でなければならない。適し たポリマーの例としては、ポリスルホン、ポリエーテルイミド、ポリアクリロニ トリル、ポリアミド、ポリ二フッ化ビニリデン、ポリプロピレン、及びポリエー テルスルホンがある。そのようなポリマーのための溶媒の説明的な例としては、 Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチ ルアセタミド及びγ−ブチロラクトンが含まれる。皮の形成のための凝固剤又は ゲル化剤として使用することのできる好ましい非溶媒は、水である。他の好まし い液体としては、メタノール、水中の95又は99.5体積％のエタノールのようなエ タノール−水混液、又はイソプロピルアルコールが含まれる。多孔度を異にする 皮を形成するために、種々の材料を該非溶媒に加えることができる。例としては 、ポリビニルアルコール、テトラエチレングリコール、ポリエチレングリコール 、過塩素酸塩、及びポリビニルピロリドンが含まれる。 本発明の重要な利点の一つは、液体から濾去されるべき分子に対 し、濾液の流れの方向に依存して異なる篩係数を有する繊維を提供する能力であ る。更なる一利点は、狭く規定された分子量範囲を有する分子を液体から濾去す るための、異なった篩係数を有する繊維を提供する能力である。例えば、5000乃 至10000の範囲の分子を膜の一方側からと他の側からとで異なって濾過する能力 を有する繊維を提供することができる。多孔度の適当な修正によって、篩係数の 差は、10000乃至100000の範囲又は更に200000の範囲の分子量を有する分子のた めに最適化することもできる。最適化は、凝固剤溶液の組成及び加えられる添加 物の量及びタイプを調整することにより、並びに、流速、ライン速度及びギャッ プ距離のような紡糸条件を変化させることによって達成できる。 実施例 以下の実施例は、本発明に従って膜を製造し及び使用するための好ましい方法 を説明する。別に示さない限り、全ての「部」は重量で与えられている。 実施例１ 表Ｉに示した処方及び工程条件に従い、図１及び２に記述した紡糸システム及 び方法を用いて中空繊維を製造した。 試験手順 試験モジュールは、約22ｃｍの長さ及び約0.6ｃｍの内径を有する、小型透析 装置ケース中に100本の繊維を植え込むことによって組み立てられた。ポリウレ タン埋め込み用樹脂は、各ヘッダーから約１ｃｍ延び、約20ｃｍの活性長さを残 していた。透析液ポートは、各末端において該埋め込み材料から約１ｃｍの位置 に配置した。 次の組成を有する標準的透析液を、血液透析機調合システムを使用して濃縮物 から調製した。 ナトリウム 134ｍＥｑ／ｌ カリウム 2.6ｍＥｑ／ｌ カルシウム 2.5ｍＥｑ／ｌ マグネシウム 1.5ｍＥｑ／ｌ 塩素イオン 104ｍＥｑ／ｌ 酢酸イオン 36.6ｍＥｑ／ｌ ブドウ糖 2500ｍＥｑ／ｌ ミオグロビン溶液は、透析液１ｌ当たり330ｍｇのミオグロビンを添加するこ とにより調製した。ミオグロビン（分子量＝17000）は、分光光度法により測定 できることから、β-2 ミクログロブリン（分子量＝12000）のような中程度の 分子のためのマーカーとして使用される。 管腔及び濾液コンパートメントは、シリンジを用いてアルコール（イソプロパ ノール又はエタノール）でプライミングした。試験モジュールを、次いで、濾液 ポートを閉じた状態で管腔を通して250ｍｌを、次いで一方の濾液ポートを開い た状態で更に200ｍｌをポンプ移送して、過剰の透析液で濯いだ。入口流速を測 定するために、透析液ポートを閉じ、注入ポンプを所望の速度（10.5ｍｌ／分） に設定し、流出を、時間を定めた回収によって測定した。 篩係数の測定のためには、繊維をテーブルの上面に対し垂直にした状態で試験 モジュールを垂直配置に固定した。注入ポンプを入口貯蔵器に連結し、該注入ポ ンプからのチューブを底部ヘッダーに連結した。廃液のチューブは、上部ヘッダ ーに連結した。透析液ポー トを閉じ、ポンプを始動させ、そして試験溶液が装置に到達した時を時間ゼロと した。 時間ゼロにおいて、両方の透析液ストップコックを開くことによって透析液側 のプライミング溶液の液抜きを行った。次いで下側透析液ポートを閉じ、濾液コ ンパートメントが満たされると直ちに時間ゼロの濾液サンプルを上側ポートから 採取した。同時に、出口管腔サンプルを別のビーカーに回収した。入口管腔サン プルは、入口貯蔵器から直接に採取した。その後の濾液サンプルは、サンプル間 における濾液の損失なしに、３分間隔で回収した。全てのサンプルについて、Gi lford分光光度計を用いてミオグロビン含量を測定した。篩係数Ｓは、次の方程 式を用いて計算した。 サンプリングは、計算された篩係数が、３つの連続するサンプルについて一定 となるまで続けた。繊維をテストモジュール内に組み込み、上述の手順に従って 篩係数を測定した。この実施例における、ミオグロビンについて得られた繊維の 篩係数は、濾液流が半径方向外方に向けられたときには0.35であり、濾液流が内 方であるときは0.80であることが見出された。 実施例２ コア液組成が10/90 ２−プロパノール／水であり析出浴組成が5/95 ２−プ ロパノール／水であることを除いて、実施例１と同様にして中空繊維を製造した 。図５及び６は、得られた繊維の、それぞれ2000倍及び400倍拡大で取った断面 の走査型電子顕微鏡写真であり、各境界から延びて中央の壁で出合っている指様 の構造を示している。ミオグロビンについての篩係数は、外方濾液については0. 45、そして内方流れについては0.90であることが見出された。 実施例３ コア液組成が70％イソプロピルアルコール及び30％水であることを除いて、実 施例１と同様にして中空繊維を製造した。紡糸溶液濃度は、10％のアセトンを含 むＮ−メチルピロリドン中のポリスルホン20重量％であった。析出浴は水であっ た。篩係数は、次の手順を用いて、デキストランについて測定した。 １） デキストラン篩係数 次の組成のデキストラン溶液を、リン酸緩衝食塩水（0.9％）中に調製した。 デキストランＦＰ１（Serva） 0.2ｇ／ｌ デキストラン４（Serva） 1.0ｇ／ｌ デキストランＴ40（Pharmacia） 1.0ｇ／ｌ デキストランＴ10（Pharmacia） 0.3ｇ／ｌ シェル側から濾液を収集しつつ、デキストラン溶液を該管腔に貫流させた。デ キストラン溶液はまた、管腔から濾液を収集しつつ、シェル側にも貫流させた。 試験の順序は変化させた。溶液の流速は５ｍｌ／分であり、膜横断圧は150乃至2 00ｍｍＨｇであった。入口サンプルは、デキストラン溶液貯蔵器から直接に採取 した。濾液サンプルは、５分間隔で採取した。濾液濃度値は、15分後に安定化し た。40又は60分における濾液の濃度値を、篩係数を計算するために使用した。溶 液全体の濃度はその入口値に等しく且つ透析装置の全長にわたって一定であると 仮定した。サンプルは、屈折率検出器を用いて高速液体クロマトグラフィー（Ｈ ＰＬＣ）によって分析した。 結果は図８に示されている。 アルコールデヒドロゲナーゼ（ＭＷ約150000）及びβ−アミラーゼ（ＭＷ約20 0000）についての篩係数は、上記の手順により測定し、サンプルは商業的に入手 可能なアッセイキット（Sigma ChemicalCo.）により分析した。アルコールデヒ ドロゲナーゼについての篩係数は、外向き流については0.05であり、内向き流に ついては0.76であった。β−アミラーゼについての篩係数は、外向き流について は0.01であり、内向き流については0.17であった。 実施例４ コア液組成が50％イソプロピルアルコール＋50％水であることを 除き、実施例１におけると同様にして、中空繊維を製造した。紡糸溶液は、20重 量％のポリスルホン及び、10％アセトン含有Ｎ−メチルピロリドンを含有した。 析出浴は水であった。デキストランについての篩係数を、管腔からシェル、及び シェルから管腔について測定した。結果は図９に示されている。 実施例５ コア液組成がイソプロピルアルコールであることを除き、実施例１におけると 同様にして、中空繊維を製造した。紡糸溶液は、Ｎ−メチルピロリドン中15重量 ％濃度のポリスルホン＋15重量％のポリビニルピロリドンであった。コア液組成 はイソプロピルアルコールであり、析出浴は水であった。デキストランについて の篩係数を、実施例３におけると同様にして測定した。結果は図10に示されてい る。 実施例６ 5000キロダルトン（ｋＤ）の公称分子量（ＭＷ）カットオフを有する外側皮と 、より大きな、しかし未知のＭＷカットオフを有する内側繊維表面上の皮を有す る、ポリスルホン中空繊維膜を製造した。これらの繊維について、種々の分子量 のデキストランの篩係数は、濾液流が外向きであるときに比して、濾液流が内向 きであるとき一層大きいことが見出された。 タンパク質篩係数 次のタンパク質をリン酸緩衝食塩水（0.9％）に溶解した。 溶液１ 牛血清アルブミン 2.0ｇ／ｌ 溶液２ 卵白アルブミン（鶏卵アルブミン） 1.0ｇ／ｌ 溶液３ ミオグロビン 0.08ｇ／ｌ 溶液４ チトクロームＣ 0.12ｇ／ｌ シェル側から濾液を収集しながら、タンパク質溶液を、管腔に貫流させた。管 腔から濾液を収集しながら、タンパク質溶液をシェル側からも貫流させた。試験 の順序は変化させた。入口溶液は、タンパク質溶液貯蔵器から直接に採取した。 濾液サンプルは、５分間隔で採取した。濾液濃度は、15分後に安定化した。40又 は60分における濾液濃度を、篩係数を計算するために用いた。溶液全体の濃度は 、その入口の値に等しく且つ透析装置の全長に渡って一定であると仮定した。サ ンプルは、分光光度計を用いて、特徴的波長における吸収について分析した。牛 血清アルブミン及び卵白アルブミンは、280ｎｍにて分析した。ミオグロビン及 びチトクロームＣは、410ｎｍにて分析した。 上記手順に従って試験したデキストラン及びタンパク質双方の篩係数の結果は、 図11に示されている。 実施例７ 次の材料を用いて、実施例１の手順に従って、中空繊維を製造した。 ポリマー： ポリエーテルイミド 溶媒 ： Ｎ−メチルピロリドン 紡糸溶液濃度： 20重量％ コア液組成： 水 析出浴： 水 試験したときのデキストランについての篩係数データは図12に示されている通 りである。 実施例８ 次の材料を用いて、実施例１の手順に従って、中空繊維を製造した。 ポリマー： ポリエーテルイミド 溶媒： Ｎ−メチルピロリドン 紡糸溶液濃度： 25重量％ コア液組成： 50／50の水／Ｎ−メチルピロリドン 析出浴： 水 デキストランについての篩係数が、図13に示されている。 実施例９ 整流膜の挙動に関する現在の理論によれば、溶質の内部濃度分極が、上記の３ ５の実施例における非対称の篩係数特性の理由である。膜の２枚の皮の間への溶 質の蓄積は、起こるのに有限量の時間を要するであろう。その結果、一方向への 篩係数は、平衡に達するまで時間と共に増大するであろう。大半の通常の膜につ いては、篩係数は一般に早期の測定値において最も大きく、保持された溶質によ って孔が詰まることから、時間と共に低下する。図14には、シェルから管腔への 方向の篩係数が、実施例３の膜について時間の関数として示されている。この実 験のために、濾過の最初の10分間は、１分間隔で濾液を収集した。篩係数は、特 に50000乃至100000の範囲においては、時間と共に有意に上昇した。 バイオリアクターが図７に示されており、それは図３に示された 透析装置に幾分類似の装置よりなる。この場合は、しかしながら、繊維を取り囲 みそしてハウジング90の内部及び熱硬化性樹脂92に囲い込まれている空間８９は 、生きた細胞の増殖のための反応容器を形成する。ポート97及び98は、省略する か又は示したように弁99及び100によって閉じることができる。そのサイズに依 存して、産生物は、膜88を通過して戻りそして廃液の流れから精製され、又は反 応容器を構成するシェル空間中に集積して、そこからそれは半連続的又はバッチ ベースで取り出される。 膜を横切る栄養素、老廃物及び所望の生物学的産生物の輸送は、拡散及び／又 は対流によるものである。中空繊維内において起こる軸方向の圧力降下は、装置 の入口においてチューブ側からシェル側への対流及び装置の出口においてシェル 側からチューブ側への対流を伴う、スターリングの流れをもたらす。 あるタイプの細胞は、10％牛胎仔血清を含有する高価な生育培地を要求する。 整流膜の使用は、血清成分が細胞に向かって膜を通過し次いでシェル空間内に濃 縮されることを許容し、それによって要求される培地の液量を減らす。これはま た、精製流の液量が一層小さいため、膜を通過する産生物を精製するコストをも 低下させる。 整流膜はまた、産生物を直接に濃縮するためにも使用することができる。もし も所望の生成物が、代謝老廃物並びに栄養素よりも大きい分子より形成されてい るならば、整流膜装置は、中空繊維膜の内部を通過する液流によって栄養素が細 胞に到達すること及び老廃物が洗い去られることを許容しつつ、産生物をシェル 空間内に濃縮するために使用することができる。 本発明の膜は、こうして、中空膜の内側又は外側上に一層緻密な皮を備えた状 態で形成することができる。どちらの場合にも、重要なことは、膜の各側の皮が 10000倍の拡大でも見えない孔を含んでいることである。このことは膜の各側に 、当該皮の間において膜の微孔性の内部に溶質の蓄積を引き起こすに十分に緻密 な皮の存在を保証する。溶質のそのような蓄積は、該膜を通る異なった方向への 流れについて異なった篩係数が得られる膜を構成するのに重要であると信じられ ている。 該膜の更なる適用においては、濾液中において溶質の濃縮を実行することがで きる。図４を参照して先に記述したように、この二重皮の整流膜８８は、内側皮 １４よりも緻密である外側皮１２を有する。課された圧力勾配の結果、液は内側 から外側へと通過する。記述されている膜８８は、非対称の篩係数を有する。す なわち、膜８８についてのある方向における篩係数は、一般に他の方向における 篩係数と異なっている。従って、膜８８をある方向に通る溶質の画分は、該膜を 他の方向に通る溶質の画分とは異なっている。 膜８８を横切って前方及び後方に反復して溶液を循環させることにより、溶質 を、該膜の片側に分離及び濃縮することができる。シェルから管腔への方向に一 層大きい篩係数を有する膜８８のシェル側において濃縮された溶液から始めれば 、膜８８を横切って溶質を前方及び後方に循環させることにより、溶質を膜８８ の管腔側に濃縮することができる。 この概念は種々の適用のために用いることができる。そのような適用には、透 析及びバイオリアクターが含まれる。 実施例１０ 100ｍｌの0.2％牛血清アルブミン（ＢＳＡ）を整流膜のシェル側の貯蔵器内に 入れた。液体を膜のシェル側で300ｍｌ／分の速度で再循環させた。濾過速度は 約１ｍｌ／分であった。最初の通過において、60ｍｌが管腔側の貯蔵器内へと濾 過された。次いで、約40ｍｌをこれら２つの貯蔵器の間で前方及び後方に循環さ せた。５回のサイクルの後、管腔側の25ｍｌの溶液は、ＢＳＡを、シェル側にお ける元の値の2.8倍に等しい濃度に含んでいた。 図１５は、各サイクルの中間及び各サイクルの後における、装置の各側におけ るＢＳＡの濃度をｇ／ｌでグラフにより図解する。明らかなように、各サイクル の最初の半分においては、第１側における濃度（Ｃ１ＭＩＤ）は相対的に高く、 一方第２側における濃度（Ｃ２ＭＩＤ）は相対的に低い。該サイクルの第２の半 分においては、第２側から戻ってくる溶液によって希釈されるために第１側にお ける濃度（Ｃ１ＥＮＤ）は低下する。最終の下流側濃度（Ｃ２ＥＮＤ）が、各サ イクルの進行と共に実質的に増大していることが示されている。 図１６〜２０は、膜の種々の篩係数についての、各サイクルの中間及び終わり における変化する濃度の、単純な単一皮の膜のコンピュータシミュレーションを 図解する。図１６においては、篩係数は0.1に等しく、図１７においては、篩係 数は0.3に等しく、図１８においては篩係数は0.5に等しく、図１９においては篩 係数は0.7に等しく、そして図２０においては、篩係数は0.9に等しい。 図１６〜２０より明らかなように、二重皮の整流膜８８は、第２側において溶 質濃度の連続的な増大を示している。大半の単一皮の膜は、しかしながら、２、 ３回の循環で平衡してしまう。図１６か ら２０に示されているように、達成される最大の下流濃度は1.62であり、それは 0.3に等しい篩係数を有する単一皮の膜に対応する。 上記より、二重皮の整流膜８８が、５つの実験的サイクルの後当初濃度の2.8 倍という下流濃度をもたらすことが分かる。これは単一皮の膜の如何なるものよ りも70％高い。勿論、特定の溶質と膜との具体的相互作用及び装置の操作条件に 依存して、一層高い濃縮も可能である。 ここに記述した現在好ましい具体例に対する種々の変更及び修正が当業者に明 らかであろうことが、理解されなければならない。そのような変更及び修正は、 本発明の精神及び範囲から逸脱することなく且つ伴う利点を損なうことなく行う ことができる。従って、そのような変更及び修正は、添付の請求の範囲に包含さ れることが意図されている。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ｂ０１Ｄ 69/12 9538−4Ｄ Ｂ０１Ｄ 69/12 Ｃ１２Ｍ 1/12 7417−4Ｂ Ｃ１２Ｍ 1/12 3/06 7417−4Ｂ 3/06

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 欲しない材料を溶質から除去するための方法であって、 囲い内に全体として平行な向きに固定された複数の二重皮の中空膜であってそ の各々が該膜を通すことによって除去すべき溶質を含む溶液の通過に関し非対称 の篩係数を提供する微孔性構造を有するものである膜を有する装置を用意するス テップと、 該装置を通して該溶液を揺動させる仕方で複数回流すステップと、そして 該溶液が該装置を通して移される際に該膜の少なくとも第１の側に該溶質を 蓄積させることによって該溶質を除去するステップと、 を含む方法。 ２． 該篩係数が0.1乃至0.9である、請求項１の方法。 ３． 該溶質が透析液である、請求項１の方法。 ４． 該膜の片側に第１の貯蔵器を用意するステップと、そして 該膜の第２の側に第２の貯蔵器を用意するステップとを含み、該溶液が該第 １の貯蔵器と該第２の貯蔵器との間で該装置を通して流されるものである、請求 項１の方法。 ５． 該膜の内部と液体連通した流入手段を用意するステップを更に含む、請求 項１の方法。 ６． 該溶液の流出のために該膜の末端と液体連通した流出手段を用意するステ ップを更に含む、請求項１の方法。 ７． 該囲いの内部と液体連通した第２の液体流路を用意するステップを更に含 み、ここに該溶液が該膜の外部表面と接触して流され るものである、請求項１の方法。 ８． 該溶質が規定された範囲の分子量を有するものである、請求項１の方法。 ９． 体液から欲しない材料を除去する方法であって、 複数の二重皮のポリマー膜であって各々がシェル側と管腔側とを有し且つ各 々が両端において全体として平行な向きに囲い内に固定されているものである膜 を有する透折装置を用意するステップと、 透析を受ける液のための流入手段であって該膜の管腔側と液体連通した流入 手段を用意するステップと、 濾過後の体液の流出のために該膜の末端と液体連通した流出手段を用意する ステップと、そして 該装置を通して体液を複数回流すステップとを含み、該欲しない材料の少な くとも幾らかが該膜のシェル側に集積するものである、方法。 １０． 該複数の膜が微孔性構造を有するものである請求項９の方法。 １１． 該複数の膜が、非対称の篩係数を提供する微孔性構造を有するものであ る、請求項９の方法。 １２． 該微孔性構造が、外部から内部へよりも内部から外部への流れについて 一層大きいものである非対称の篩特性を提供するものである、請求項１１の方法 。 １３． 該欲しない材料が規定された範囲の分子量のものである、請求項９の方 法。 １４． 該体液がヒトの血液である、請求項９の方法。 １５． 該体液から除去される欲しない材料がβ−２−ミクログロブリン又は他 の中程度の分子である、請求項９の方法。 １６． 非対称の篩係数を有する微孔性構造を備えた複数の二重皮の中空膜であ って全体として平行な向きで内部を有する囲い内に固定され該膜の外部及び該囲 いの内部がバイオリアクター容器を規定するものである、中空膜を有するバイオ リアクター容器内に生きた細胞を閉じ込めることにより、生物学的産生物を産生 するための方法であって、 該細胞のための栄養を含有する液体を該中空膜を通して反復的に循環させて 流して該膜を通した該細胞への該栄養の輸送を許容するステップと、そして 該膜を通して該液体へと老廃物が輸送される際に該細胞から老廃物を除去す るステップと、 を含む方法。 １７． 生物学的産生物を該容器から除去するステップを更に含む、請求項１６ の方法。