【発明の詳細な説明】
密度測定のために凹部において液レベルを上昇させる装置
本発明は、本質的に、凹部、ウエルまたはその類似物において液レベルを上昇
させる装置を主題とするものである。
また、本発明は、この装置を備え、かつ細胞培養、マイクロタイトレーション
またはその他の使用のための複数のウエルを有するプレートにも関する。
生物学、特に細胞生物学においては、分析されるべき１種類または複数の物質
を含有することを意図された複数の凹部またはウエルを備えるプレートが頻繁に
使用される。
しかし、液中に溶解しかつウエル内に含まれる物質の光学密度を、例えばバー
メイスター（F.BURMEISTER）らの方法（Preprints of theXIVth IFSCC Congress
，Barcelona，1986，Vol．Ｉ参照）に従って測定したいときには、液の高さが充
分に高いこと、即ち充分に正確であり従って信頼できる光学密度測定を可能にす
る高さであることが必要である。
実際、一般的な単色光のビームを用いて透明または半透明の試料を照射するこ
とにより測定される光学密度は、照射ビームの通過光路の長さ、測定される溶液
中の物質の濃度および物質に特異的な光の吸収係数の関数であり、次式：
Ｄｏ＝ε・Ｃ・ｌｏ
（式中、Ｄｏは光学密度であり；εはモル吸光度の係数であり、その値は使用さ
れる光の波長および溶解している物質の性質に依存し；Ｃは溶液中の物質濃度で
あり、そして；ｌｏは溶液試料中の通過光路の長さである）
により表される。
ところで、よくあることだが、試料が極めて少量であり、ウエルにおける試料
の高さ即ちその通過光路が極めて短いと、それは光学濃度測定の著しい不正確さ
の一因となる。分析試料のモル吸光度の係数値が小さい場合には、この不正確さ
はより大きくなり、よりやっかいなものとなる。さらに、付加液の供給によるウ
エル内の試料の高さの増加は測定の正確さを改善するという課題の解決とはなら
ないが、それはこの供給が、実行された希釈により物質濃度を減少させるという
効果を有するからである。
本発明は上記課題を解決する目的でなされたものである。
上記目的のため、本発明は、本質的に、凹部、ウエルまたはその類似物におい
て液のレベルを上昇させる装置であって、改変可能な厚みを有しかつその２つの
端部に開口を有し、かつ前記凹部またはウエル内に挿入され得るスリーブにより
特徴付けられる装置を主題とする。
この装置の他の特徴によれば、前記スリーブは、そのようなスリーブを複数含
む部材に固定させられる。
この部材は、棒部材またはプレート部材であることができる。
スリーブの一部だけを使用することを可能にするために、該部材はスリーブと
スリーブの間を通る切取線を有することができる。
さらに、本発明は、例えば細胞培養または試料のマイクロタイトレーションを
可能にする複数の凹部またはウエルを有するプレートであって、前記特徴に合致
する装置を備えることを特徴とするプレートに関する。
このプレートは、ウエルプレート上のウエルと同数のスリーブをその一面上に
含むプレート部材により覆われることができる。
また、本発明は、液中に溶解した物質の光学密度の測定のための、上記装置ま
たはプレートの使用に関する。
本発明は、細胞培養培地中に含有される物質の量を測定するための本装置の使
用に特に関するが、これらの物質は、例えば培養内に存在する細胞により生産さ
れる物質であるか、または細胞を溶解させた後に培地内に放出される物質である
が、後者は免疫学的マーカーを有していることもある。
本発明のさらなる特徴および利点は、例示のためだけの添付図面を引用する下
記の詳細な記述によって、より明瞭となろう。添付図面は次の通りである：
図１はウエル内に挿入されたスリーブの透視図であり；
図２はそのようなスリーブを備えた棒の透視図であり；
図３は図２と同様の透視図であるが、前記棒から個々のスリーブが分離可能で
あることを示しており；
図４は図２の棒のスリーブの軸を通る線分に沿った断面図であり、ウエルの列
上に取り付けられた状態を説明しており；そして
図５は本発明のスリーブを含むプレート部材をその一面上に容易に受け入れ得
る、複数のウエルを備えたプレートの部分的な透視図である。
図１に特に則して述べれば、本発明の装置は、要素３内に形成されており且つ
何らかの物質が溶解されている液を含み得る凹部またはウエル２に挿入可能なス
リーブ１により、一般的な方法で構成されている。
スリーブ１はその両端部で開口しているので光ビームの通過を許し、そしてそ
の壁部４は改変可能な厚みを有するのでスリーブ１の口径を定めることができる
。
従って、ウエル２内に挿入されたスリーブ１は、その壁部４の厚みに応じてウ
エルの容積を減少させるので、これにより使用した厚み寸法に応じて所望の高さ
までウエル２内の液の上昇を可能にすることは容易に理解されるであろう。
スリーブ１および要素３は如何なる材料からなっていてもよく、例えば、１回
使用用の、またはある測定をして洗浄した後に別の測定に使用可能な、透明なプ
ラスチック材料等からなることができる。
従って、好ましくは通常は実質的に円筒状であるウエルの軸に実質的に平行な
方向に、ウエルおよびそれが含有する液を通過する光ビームは、所望の感度、正
確性および効率で測定するに充分な高さをウエル内で有する液内に溶解した物質
の光学密度の測定を可能にする。
図２および図３に見られる如く、スリーブ１は、支持体５の一側面から突出し
たそのようなスリーブを複数含む支持体５に固定させられることができる。
図２に見られる如く、支持体５はスリーブ１を複数備えた棒により構成される
ことができるが、そのスリーブの間隔は、要素３内に形成され一列に並んだウエ
ル２同士の間隔に応じた間隔である。
棒形状の支持体５は、スリーブ１同士の間に切取線６を含むことができるので
、それらを互いに分離させて要素３内に形成されたいずれかのウエル内に挿入す
ることを容易にする。
図２に示したと同様に１つの棒５上に設けられ、一列に並んだ１組のスリーブ
１が図４に示されているが、その一列に並んだスリーブは、対応する間隔で要素
３内に形成されているウエル２内に挿入されている。
また、スリーブ１は、プレートまたはプレート部材の形状の支持体７に固定さ
せられることができ、図５において、前記スリーブ１がプレート部材７の同一面
から突出している様子が明瞭に見て取れる。
連結したスリーブを備えたこのプレート部材７は、例えば細胞培養、試料のマ
イクロタイトレーション、量的測定の操作またはその他の使用のための複数のウ
エルを備えたプレートＰ内に用意された凹部またはウエル２と同数のスリーブ１
を含むことができる。
例えば図２または３に示した如き、分離不可能であるか、または切取線の付け
られた棒５を利用して、プレートＰの幾つかのウエル２だけにスリーブ１を使用
し得ることは明らかである。
上記に記述および説明した実施態様は例示のためだけに与えられたものであり
、当然ながら、本発明はこれにより些かも制限されない。
従って、スリーブ１の材料および壁部の厚みは、如何なる材料および壁部の厚
みであってもよく、プレート部材、棒またはその他の支持体上における、スリー
ブの幾何学的位置も同様である。
このことは、本発明が上述の手段の全ての技術的等価物、および本発明の精神
に従い実施される前記等価物の組合せを包含することを意味する。Detailed Description of the Invention
Device for raising liquid level in recesses for density measurement
The present invention essentially raises liquid levels in recesses, wells or the like.
The subject is the device.
In addition, the present invention is equipped with this device, and also performs cell culture and microtitration
Or for plates with multiple wells for other uses.
In biology, in particular cell biology, one or more substances to be analyzed
Plates with multiple recesses or wells intended to contain
used.
However, the optical density of the substance dissolved in the liquid and contained in the well is
Method (Preprints of the XIVth IFSCC Congress) by Meister (F.BURMEISTER)
, Barcelona, 1986, Vol. If you want to measure according to
Reasonably high, i.e., sufficiently accurate and thus enabling reliable optical density measurements
Must be high enough.
In fact, it is possible to illuminate a transparent or semitransparent sample with a common monochromatic beam of light.
The optical density measured by and is the length of the optical path through which the irradiation beam passes, the solution to be measured.
It is a function of the concentration of the substance in the substance and the absorption coefficient of light specific to the substance,
Do = ε ・ C ・ lo
(Wherein Do is the optical density; ε is the coefficient of molar absorbance, and its value is
Depends on the wavelength of the light being emitted and the nature of the substance being dissolved; C is the concentration of the substance in solution
Yes, and; lo is the length of the optical path through the solution sample)
Represented by
By the way, as is often the case, the sample is very small and
If the height of the optical path, i.e. its path through it, is very short, it will cause a significant inaccuracy in the optical density measurement.
Contribute to. This inaccuracy is obtained when the coefficient of molar absorbance of the analytical sample is small.
Will be bigger and more troublesome. In addition, the additional liquid supply
Increasing the height of the sample in the ell does not solve the problem of improving measurement accuracy.
No, but it says that this supply reduces the substance concentration due to the dilution performed.
This is because it has an effect.
The present invention has been made for the purpose of solving the above problems.
To this end, the present invention essentially comprises a recess, a well or the like.
Device for increasing the level of liquid by means of a variable thickness and
By a sleeve having an opening at the end and which can be inserted into said recess or well
The subject is the device being characterized.
According to another characteristic of this device, the sleeve comprises a plurality of such sleeves.
Fixed to the member.
This member can be a bar member or a plate member.
In order to be able to use only part of the sleeve, the member is
There may be a tear line running between the sleeves.
In addition, the present invention provides for microtitration of cell cultures or samples, for example.
A plate with multiple recesses or wells to enable it to meet the above characteristics
The invention relates to a plate comprising a device for
This plate has as many sleeves on one side as there are wells on the well plate.
It can be covered by a containing plate member.
The present invention also relates to the above device for measuring the optical density of a substance dissolved in a liquid.
Or regarding the use of plates.
The present invention uses the device for measuring the amount of a substance contained in a cell culture medium.
Of particular interest, these substances are produced, for example, by cells present in culture.
Substance that is released or released into the medium after lysing the cells
However, the latter may have immunological markers.
Additional features and advantages of the present invention will be described below with reference to the accompanying drawings, which are for illustration only.
A more detailed description will make it clearer. The accompanying drawings are as follows:
FIG. 1 is a perspective view of the sleeve inserted into the well;
FIG. 2 is a perspective view of a rod with such a sleeve;
FIG. 3 is a perspective view similar to FIG. 2, except that the individual sleeves can be separated from the rod.
Indicates that there is;
FIG. 4 is a cross-sectional view taken along a line segment passing through the axis of the sleeve of the rod of FIG.
Described mounted above; and
FIG. 5 readily accommodates a plate member including the sleeve of the present invention on one side thereof.
FIG. 6 is a partial perspective view of a plate with multiple wells.
With particular reference to FIG. 1, the device of the invention is formed in the element 3 and
A space that can be inserted into a recess or well 2 that may contain a liquid in which some substance is dissolved.
Reeve 1 is constructed in a general manner.
The sleeve 1 is open at both ends to allow passage of the light beam, and
The wall 4 of the sleeve has a modifiable thickness so that the diameter of the sleeve 1 can be determined.
.
Therefore, the sleeve 1 inserted into the well 2 has a wall depending on the thickness of the wall portion 4.
It reduces the volume of the ell, which allows the desired height depending on the thickness dimension used.
It will be readily understood that allowing the liquid in well 2 to rise.
The sleeve 1 and the element 3 may be made of any material, for example once
A clear plate that can be used or used for another measurement after one measurement has been washed.
It can consist of a plastic material or the like.
Therefore, it is preferably substantially parallel to the axis of the well, which is usually substantially cylindrical.
In the direction, the light beam passing through the well and the liquid it contains will have the desired sensitivity, positive
A substance dissolved in a liquid that has sufficient height in the well to measure with accuracy and efficiency
It enables the measurement of the optical density of.
As seen in FIGS. 2 and 3, the sleeve 1 projects from one side of the support 5.
It can be fixed to a support 5 including a plurality of such sleeves.
As can be seen in FIG. 2, the support 5 is composed of a rod with a plurality of sleeves 1.
However, the sleeve spacing is such that the wafers formed in the element 3 are aligned.
This is an interval corresponding to the interval between the two rules.
Since the rod-shaped support 5 can include a tear line 6 between the sleeves 1,
, Separate them from each other and insert into any well formed in element 3.
Make it easy.
As shown in FIG. 2, a set of sleeves arranged in a line on one rod 5
1 is shown in FIG. 4, the in-line sleeves of which are arranged at corresponding intervals.
It is inserted in the well 2 formed in 3.
Also, the sleeve 1 is fixed to a support 7 in the form of a plate or plate member.
5, the sleeve 1 has the same surface of the plate member 7 in FIG.
You can clearly see how it is protruding from.
This plate member 7 with connected sleeves is used, for example, for cell culture, sample
Multiple windows for icrotitration, quantitative measurement operations or other uses.
The same number of sleeves 1 as the recesses or wells 2 prepared in the plate P provided with the ell
Can be included.
Inseparable or perforated lines, for example as shown in FIG. 2 or 3.
Using sleeves 1 for only some of the wells 2 of plate P using
It is clear that this is possible.
The embodiments described and described above are provided for illustration only.
Of course, the invention is in no way limited thereby.
Therefore, the material of the sleeve 1 and the thickness of the wall portion are different from those of the material and the wall portion.
Three, on a plate member, rod or other support
The same applies to the geometrical position of the bu.
This means that the invention is all technical equivalents of the above-mentioned means, and the spirit of the invention.
It is meant to include combinations of the equivalents carried out according to.
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フロントページの続き
(51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ
Ｇ０１Ｎ 33/543 ５８７ 8310−2Ｊ Ｇ０１Ｎ 33/543 ５８７
(72)発明者 マイベック、アラン
フランス国、92400 クールブヴォワ、リ
ュー・デ・ブゾン 20テール─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (51) Int.Cl. 6 Identification number Internal reference number FI G01N 33/543 587 8310-2J G01N 33/543 587 (72) Inventor Meibeck, Alain France, 92400 Courbevoie, Li Éu de Bezons 20 tails