JPH085802B2 - 家禽大腸菌症ワクチン - Google Patents
家禽大腸菌症ワクチンInfo
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Description
【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は家禽大腸菌症ワクチンに関し、さらに詳しく
は、家禽由来の不活化した大腸菌の菌体を超音波処理し
たことを特徴とする家禽大腸菌症予防用の不活化ワクチ
ン、並びに該ワクチンを用いる家禽大腸菌症の予防法に
関するものである。
は、家禽由来の不活化した大腸菌の菌体を超音波処理し
たことを特徴とする家禽大腸菌症予防用の不活化ワクチ
ン、並びに該ワクチンを用いる家禽大腸菌症の予防法に
関するものである。
［発明の背景］ 家禽における大腸菌症には、大腸菌症敗血症を始め、
関節炎、出血性腸炎等の種々の疾患が含まれるが、中で
も敗血症のブロイラー鶏での集団発生は養鶏家にとって
極めて大きい経済的損失をもたらすことから、重大な問
題となっている。従来、各種の化学療法剤や抗生物質を
用いて予防および治療が行なわれていたが、耐性菌の増
加に伴ってその効果が低下しており、ワクチンの開発が
待たれていた。これまでに知られているのは、不活化し
た大腸菌の全細胞を用いた不活化ワクチンのみであり、
かかる全細胞不活化ワクチンでは毒性が高く、かつ予防
効果が充分でなかった。一方、毒性の低減及び薬剤耐性
菌の出現の抑制などを図るために、ワクチンの経肛門部
投与法が提案されている（特開昭58−131920号）。本発
明者らは、これらの方法を更に改良すべく種々研究を重
ねた結果、本発明を完成するに至った。
関節炎、出血性腸炎等の種々の疾患が含まれるが、中で
も敗血症のブロイラー鶏での集団発生は養鶏家にとって
極めて大きい経済的損失をもたらすことから、重大な問
題となっている。従来、各種の化学療法剤や抗生物質を
用いて予防および治療が行なわれていたが、耐性菌の増
加に伴ってその効果が低下しており、ワクチンの開発が
待たれていた。これまでに知られているのは、不活化し
た大腸菌の全細胞を用いた不活化ワクチンのみであり、
かかる全細胞不活化ワクチンでは毒性が高く、かつ予防
効果が充分でなかった。一方、毒性の低減及び薬剤耐性
菌の出現の抑制などを図るために、ワクチンの経肛門部
投与法が提案されている（特開昭58−131920号）。本発
明者らは、これらの方法を更に改良すべく種々研究を重
ねた結果、本発明を完成するに至った。
［問題点を解決するための手段］ 本発明者らは、予め不活化した大腸菌菌体を超音波処
理すると、大腸菌症に対する予防効果が増強されること
を見出し、本発明を完成するに至った。
理すると、大腸菌症に対する予防効果が増強されること
を見出し、本発明を完成するに至った。
即ち、本発明は、不活化した大腸菌菌体を超音波処理
したことを特徴とする家禽大腸菌症ワクチン、並びに該
ワクチンを使用する家禽大腸菌症の予防法を提供するも
のである。
したことを特徴とする家禽大腸菌症ワクチン、並びに該
ワクチンを使用する家禽大腸菌症の予防法を提供するも
のである。
本発明のワクチンを製造するには、まず、大腸菌症に
感染している家禽の臓器（例えば気のう部）または糞便
から単離した大腸菌を、ホルマリン、フェノール、アセ
トンまたはアルコール等の化学物質を用いる方法、ある
いは凍結乾燥や加熱処理等の他の方法で不活化する。次
いで、不活化した大腸菌を超音波処理に付して細胞を損
傷破壊することにより本発明のワクチンを得る。超音波
処理は、例えば、商品名、セル・ディスルーパー（Cell
Disruper）200［ブランソン（BRAMSON）製］を用い、PB
S（りん酸緩衝液）中の菌体に氷冷下、最大出力、発振
サイクル50％で５分間、３回処理することにより行うこ
とができる。その他、当業者既知の同等の装置を用いて
もよい。また、超音波処理の条件は、大腸菌の菌体を損
傷破壊させることを前提として適宜、設定することがで
き、前記の条件に限定されるものではない。
感染している家禽の臓器（例えば気のう部）または糞便
から単離した大腸菌を、ホルマリン、フェノール、アセ
トンまたはアルコール等の化学物質を用いる方法、ある
いは凍結乾燥や加熱処理等の他の方法で不活化する。次
いで、不活化した大腸菌を超音波処理に付して細胞を損
傷破壊することにより本発明のワクチンを得る。超音波
処理は、例えば、商品名、セル・ディスルーパー（Cell
Disruper）200［ブランソン（BRAMSON）製］を用い、PB
S（りん酸緩衝液）中の菌体に氷冷下、最大出力、発振
サイクル50％で５分間、３回処理することにより行うこ
とができる。その他、当業者既知の同等の装置を用いて
もよい。また、超音波処理の条件は、大腸菌の菌体を損
傷破壊させることを前提として適宜、設定することがで
き、前記の条件に限定されるものではない。
この様にして得られた本発明のワクチンは、そのまま
でも有効であるが、さらに、水酸化アルミニウムゲル、
フロインドの完全アジュバンド等のアジュバンドを加え
て免疫原性を高めることもできる。さらには、他の免疫
的抗原や非病原性の抗原を混合し、併用してもよい。
でも有効であるが、さらに、水酸化アルミニウムゲル、
フロインドの完全アジュバンド等のアジュバンドを加え
て免疫原性を高めることもできる。さらには、他の免疫
的抗原や非病原性の抗原を混合し、併用してもよい。
［発明の作用］ 本発明ワクチンは種々の経路から投与することができ
るが、細菌毒性に由来する副作用（体重減少等）が発現
するおそれのない、肛門部接種法（特開昭58−131920
号）によるのが最も好ましい。通常、本発明のワクチン
0.002〜0.2ml（約２×105〜２×1010CFU/ml）をニワト
リ、アヒル、七面鳥等の肛門部に接種すると大腸菌症を
有効に予防することができ、集団発生を阻止することが
できる。
るが、細菌毒性に由来する副作用（体重減少等）が発現
するおそれのない、肛門部接種法（特開昭58−131920
号）によるのが最も好ましい。通常、本発明のワクチン
0.002〜0.2ml（約２×105〜２×1010CFU/ml）をニワト
リ、アヒル、七面鳥等の肛門部に接種すると大腸菌症を
有効に予防することができ、集団発生を阻止することが
できる。
以下に実施例を挙げ、本発明をさらに詳細に説明す
る。
る。
［実施例］ 大腸菌症を呈する病鶏の気のう部から分離した大腸菌
（O2）をブイヨン培地中、37℃で24時間培養した後、ホ
ルマリン0.2％を加えて不活化した。1.5×109CFU/ml
（細胞/ml）以上の細胞密度を有するこの培養ブイヨン
培地の一部をとり、ブランソン（BRANSON）製、商品名
セル・ディスルーパー（Cell Disruper）200を使用し
て、最大出力、発振サイクル50％の条件で氷冷下５分間
を３回実施することにより超音波処理してワクチン
（Ｉ）を得た。
（O2）をブイヨン培地中、37℃で24時間培養した後、ホ
ルマリン0.2％を加えて不活化した。1.5×109CFU/ml
（細胞/ml）以上の細胞密度を有するこの培養ブイヨン
培地の一部をとり、ブランソン（BRANSON）製、商品名
セル・ディスルーパー（Cell Disruper）200を使用し
て、最大出力、発振サイクル50％の条件で氷冷下５分間
を３回実施することにより超音波処理してワクチン
（Ｉ）を得た。
他方、上記の不活化した培養ブイヨン培地の一部をと
り、遠心（14000XG、20分間、４℃）して菌体を集め、P
BSで２×1010CFU/ml濃度に調製した菌液を上記同様に超
音波処理し、ワクチン（II）を得た。PBS液は、NaH2PO4
・12H2O11.9g、Na2HPO4・2H2O3.6gおよびNaCl9.6gを蒸留
水で1000mlに調節した後、滅菌処理したものである。
り、遠心（14000XG、20分間、４℃）して菌体を集め、P
BSで２×1010CFU/ml濃度に調製した菌液を上記同様に超
音波処理し、ワクチン（II）を得た。PBS液は、NaH2PO4
・12H2O11.9g、Na2HPO4・2H2O3.6gおよびNaCl9.6gを蒸留
水で1000mlに調節した後、滅菌処理したものである。
［発明の効果］ 本発明のワクチンの接種方法並びに家禽大腸菌症に対
する免疫効果の判定方法およびその結果を実験例に示
す。
する免疫効果の判定方法およびその結果を実験例に示
す。
実験例 1.対照ワクチンの調製 実施例においてホルマリンにより不活化処理して得た
培養ブイヨン培地を、それぞれ対照ワクチン（Ｉ）およ
び（II）として用いた。
培養ブイヨン培地を、それぞれ対照ワクチン（Ｉ）およ
び（II）として用いた。
2.ワクチン接種および評価 孵化後30時間以内の雛（ブロイラー専用種、チャンキ
ー）各11羽に、本発明ワクチンまたは対照ワクチンを肛
門部から0.03ml点滴接種（特開昭58−131920参考）し
た。次いで、これらの雛が21日令に達した時点で、ワク
チンと同一菌株を１羽当り６×107CFU静脈内接種し、感
染させた。なお、対照（12羽）にはワクチンを接種せ
ず、感染処置のみを行った。効果の判定は、感染後７日
目の生存羽数（耐過率とそのχ２検定）によった。
ー）各11羽に、本発明ワクチンまたは対照ワクチンを肛
門部から0.03ml点滴接種（特開昭58−131920参考）し
た。次いで、これらの雛が21日令に達した時点で、ワク
チンと同一菌株を１羽当り６×107CFU静脈内接種し、感
染させた。なお、対照（12羽）にはワクチンを接種せ
ず、感染処置のみを行った。効果の判定は、感染後７日
目の生存羽数（耐過率とそのχ２検定）によった。
結果を表１に示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 柴田 健次 埼玉県川越市小堤894番地２ 川越ビレッ ジ３−103号 (56)参考文献 特開 昭58−131920（ＪＰ，Ａ) 特公 昭31−10549（ＪＰ，Ｂ１)
Claims (2)
- 【請求項１】予め不活化した大腸菌菌体を超音波処理に
より破壊したことを特徴とする家禽大腸菌症のための全
菌ワクチン。 - 【請求項２】予め不活化した大腸菌菌体を超音波処理に
より破壊した家禽大腸菌症のための全菌ワクチンを家禽
の総排泄腔に接種することを特徴とする家禽大腸菌症の
予防法。
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61191119A JPH085802B2 (ja) | 1986-08-13 | 1986-08-13 | 家禽大腸菌症ワクチン |
| US07/079,803 US4837018A (en) | 1986-08-13 | 1987-07-31 | Vaccines for fowl colibacillosis |
| EP87306987A EP0256792B1 (en) | 1986-08-13 | 1987-08-06 | Vaccines for fowl colibacillosis |
| AT87306987T ATE101044T1 (de) | 1986-08-13 | 1987-08-06 | Gefluegelcolibacillose-vakzin. |
| DE87306987T DE3788986D1 (de) | 1986-08-13 | 1987-08-06 | Geflügelcolibacillose-Vakzin. |
| CA000544351A CA1306193C (en) | 1986-08-13 | 1987-08-12 | Vaccines for fowl colibacillosis |
| KR1019870008864A KR960003606B1 (ko) | 1986-08-13 | 1987-08-12 | 가금류의 대장균증 백신 |
| AU76806/87A AU597709B2 (en) | 1986-08-13 | 1987-08-12 | Vaccines for fowl colibacillosis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61191119A JPH085802B2 (ja) | 1986-08-13 | 1986-08-13 | 家禽大腸菌症ワクチン |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6348224A JPS6348224A (ja) | 1988-02-29 |
| JPH085802B2 true JPH085802B2 (ja) | 1996-01-24 |
Family
ID=16269180
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61191119A Expired - Fee Related JPH085802B2 (ja) | 1986-08-13 | 1986-08-13 | 家禽大腸菌症ワクチン |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4837018A (ja) |
| EP (1) | EP0256792B1 (ja) |
| JP (1) | JPH085802B2 (ja) |
| KR (1) | KR960003606B1 (ja) |
| AT (1) | ATE101044T1 (ja) |
| AU (1) | AU597709B2 (ja) |
| CA (1) | CA1306193C (ja) |
| DE (1) | DE3788986D1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008231123A (ja) * | 2008-06-02 | 2008-10-02 | Biseibutsu Kagaku Kenkyusho:Kk | 家禽大腸菌症ワクチン |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU4114893A (en) * | 1992-04-27 | 1993-11-29 | Michigan State University | Method for producing a bacterial vaccine and novel vaccines produced thereby |
| US7357935B2 (en) * | 2003-05-14 | 2008-04-15 | Wyeth | Avian E. coli vaccine for protection against colibacillosis |
| US7943352B2 (en) | 2006-03-29 | 2011-05-17 | Bacoustics, Llc | Apparatus and methods for vaccine development using ultrasound technology |
| KR101321501B1 (ko) * | 2011-09-21 | 2013-10-29 | 주식회사 바이오포아 | 조류 대장균증 백신 조성물 및 이의 제조방법 |
| FR3145866B1 (fr) | 2023-02-16 | 2026-03-06 | Vaxinano | Composition vaccinale comprenant un systeme de delivrance d’une bacterie entiere inactivee via des nanoparticules cationiques |
| AU2024220779A1 (en) | 2023-02-16 | 2025-09-04 | Vaxinano | Vaccine composition comprising a system for delivering an inactivated whole bacterium via cationic polysaccharide nanoparticles without any adjuvant |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3445568A (en) * | 1965-02-02 | 1969-05-20 | Gen Electric | Electrohydraulic process for producing antigens |
| US3558066A (en) * | 1969-01-21 | 1971-01-26 | Howard Alliger | Ultrasonic extraction of viable antigens from gram positive bacteria |
| US4298597A (en) * | 1979-09-04 | 1981-11-03 | University Of Saskatchewan | Vaccine for diarrhea caused by E. coli |
| JPS58131920A (ja) * | 1982-01-29 | 1983-08-06 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 鶏の大腸菌症の予防法 |
-
1986
- 1986-08-13 JP JP61191119A patent/JPH085802B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1987
- 1987-07-31 US US07/079,803 patent/US4837018A/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-08-06 AT AT87306987T patent/ATE101044T1/de not_active IP Right Cessation
- 1987-08-06 EP EP87306987A patent/EP0256792B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-08-06 DE DE87306987T patent/DE3788986D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-08-12 AU AU76806/87A patent/AU597709B2/en not_active Ceased
- 1987-08-12 KR KR1019870008864A patent/KR960003606B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1987-08-12 CA CA000544351A patent/CA1306193C/en not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008231123A (ja) * | 2008-06-02 | 2008-10-02 | Biseibutsu Kagaku Kenkyusho:Kk | 家禽大腸菌症ワクチン |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0256792B1 (en) | 1994-02-02 |
| ATE101044T1 (de) | 1994-02-15 |
| CA1306193C (en) | 1992-08-11 |
| US4837018A (en) | 1989-06-06 |
| KR960003606B1 (ko) | 1996-03-20 |
| EP0256792A2 (en) | 1988-02-24 |
| JPS6348224A (ja) | 1988-02-29 |
| DE3788986D1 (de) | 1994-03-17 |
| AU597709B2 (en) | 1990-06-07 |
| AU7680687A (en) | 1988-02-18 |
| EP0256792A3 (en) | 1988-05-25 |
| KR880002998A (ko) | 1988-05-13 |
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