JPH0889280A - バクテリア菌体からのカロチノイド化合物の抽出方法 - Google Patents
バクテリア菌体からのカロチノイド化合物の抽出方法Info
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- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 安全な製品が得られ、且つ効率のよいカロチ
ノイド化合物の抽出方法の提供。 【構成】 カロチノイド化合物を含有するバクテリア菌
体を超臨界流体と接触させることを特徴とするカロチノ
イド化合物の抽出方法。
ノイド化合物の抽出方法の提供。 【構成】 カロチノイド化合物を含有するバクテリア菌
体を超臨界流体と接触させることを特徴とするカロチノ
イド化合物の抽出方法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はカロチノイド化合物を含
有するバクテリア菌体からカロチノイド化合物を抽出す
る方法に関する。
有するバクテリア菌体からカロチノイド化合物を抽出す
る方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】カロチノイド化合物は微生物の菌体、藻
類の藻体あるいは植物および動物の組織および器官など
天然界に広く分布する赤−黄色色素である。カロチノイ
ド化合物は食品、飲料の着色剤としての食品添加物の分
野およびサケあるいはマスなどの魚類の肉あるいは体
表、鶏などの家禽類の卵への色付けなどを目的とした飼
料添加物などとして近年その用途が拡大している。また
カロチノイド化合物は抗酸化作用を持つことが知られて
おり抗酸化剤としての用途も期待される。近年ある種の
カロチノイド化合物に発癌阻止効果が見いだされており
今後は医薬品としての用途も期待されている。
類の藻体あるいは植物および動物の組織および器官など
天然界に広く分布する赤−黄色色素である。カロチノイ
ド化合物は食品、飲料の着色剤としての食品添加物の分
野およびサケあるいはマスなどの魚類の肉あるいは体
表、鶏などの家禽類の卵への色付けなどを目的とした飼
料添加物などとして近年その用途が拡大している。また
カロチノイド化合物は抗酸化作用を持つことが知られて
おり抗酸化剤としての用途も期待される。近年ある種の
カロチノイド化合物に発癌阻止効果が見いだされており
今後は医薬品としての用途も期待されている。
【０００３】カロチノイド化合物は分子中に酸素原子を
含むものおよび含まないものに大別され、前者をキサン
トフィル化合物と称することがある。キサントフィル化
合物の中では、アスタキサンチン、カンタキサンチン、
ゼアキサンチンなどが合成法により工業的に生産されて
おり（Pure and Applied Chemistry, 63 (1), 35-44(19
91)) 、色付けを目的とした飼料添加物として用いられ
ている。しかしながら近年安全性の問題から合成品を食
品および飼料添加物として用いることはできなくなりつ
つあり、近年の天然物指向ともあいまってこれらの合成
品を代替するために天然のカロチノイド化合物を製造す
る技術の開発が強く望まれている。
含むものおよび含まないものに大別され、前者をキサン
トフィル化合物と称することがある。キサントフィル化
合物の中では、アスタキサンチン、カンタキサンチン、
ゼアキサンチンなどが合成法により工業的に生産されて
おり（Pure and Applied Chemistry, 63 (1), 35-44(19
91)) 、色付けを目的とした飼料添加物として用いられ
ている。しかしながら近年安全性の問題から合成品を食
品および飼料添加物として用いることはできなくなりつ
つあり、近年の天然物指向ともあいまってこれらの合成
品を代替するために天然のカロチノイド化合物を製造す
る技術の開発が強く望まれている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】天然のカロチノイド化
合物を工業的に生産することを考えた場合、安定した供
給、生育の早さ、生産性の高さなどを考慮するとバクテ
リアを培養して菌体にカロチノイド化合物を蓄積させた
後菌体を回収し抽出することによる方法が最も有利であ
ると考えられる。
合物を工業的に生産することを考えた場合、安定した供
給、生育の早さ、生産性の高さなどを考慮するとバクテ
リアを培養して菌体にカロチノイド化合物を蓄積させた
後菌体を回収し抽出することによる方法が最も有利であ
ると考えられる。
【０００５】バクテリア菌体からカロチノイド化合物を
抽出する方法として、特開平２−１３８９９６、特開平
６−１６５６８３、特開平６−１６５６８４などが報告
されているが、これらはすべて有機溶媒により抽出を行
う方法である。しかしながら抽出されたカロチノイド化
合物は食品添加物あるいは試料添加物として使用される
ために、有機溶媒を用いた抽出においては使用する溶媒
の残留の問題が生じる。そのため安全性を考慮すれば使
用できる溶媒は限定される。また、カロチノイド化合物
の中の一群であるキサントフィル化合物は特に安全と考
えられる溶媒の中に溶解度の高い溶媒がなく溶媒残留の
問題が深刻である。
抽出する方法として、特開平２−１３８９９６、特開平
６−１６５６８３、特開平６−１６５６８４などが報告
されているが、これらはすべて有機溶媒により抽出を行
う方法である。しかしながら抽出されたカロチノイド化
合物は食品添加物あるいは試料添加物として使用される
ために、有機溶媒を用いた抽出においては使用する溶媒
の残留の問題が生じる。そのため安全性を考慮すれば使
用できる溶媒は限定される。また、カロチノイド化合物
の中の一群であるキサントフィル化合物は特に安全と考
えられる溶媒の中に溶解度の高い溶媒がなく溶媒残留の
問題が深刻である。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本願発明者らは、バクテ
リア菌体に蓄積されるカロチノイド化合物を抽出する方
法を研究するうちに、超臨界流体を溶媒として用いるこ
とにより安全性に問題のある有機溶媒を用いること無し
にカロチノイド化合物を効率よく抽出できることを見い
だし本発明を完成させた。
リア菌体に蓄積されるカロチノイド化合物を抽出する方
法を研究するうちに、超臨界流体を溶媒として用いるこ
とにより安全性に問題のある有機溶媒を用いること無し
にカロチノイド化合物を効率よく抽出できることを見い
だし本発明を完成させた。
【０００７】従って本発明は、カロチノイド化合物を含
有するバクテリア菌体を超臨界流体と接触せしめること
を特徴とするカロチノイド化合物の抽出方法を提供す
る。本発明における超臨界流体としては、各種の超臨界
流体を用いることができる。超臨界流体は拡散係数は気
体の性質をもちながらその比重は液体に近く液体なみの
溶解力を持つ流体として作用する。
有するバクテリア菌体を超臨界流体と接触せしめること
を特徴とするカロチノイド化合物の抽出方法を提供す
る。本発明における超臨界流体としては、各種の超臨界
流体を用いることができる。超臨界流体は拡散係数は気
体の性質をもちながらその比重は液体に近く液体なみの
溶解力を持つ流体として作用する。
【０００８】本願発明において用いる超臨界流体として
は、特に超臨界二酸化炭素が好ましい。超臨界二酸化炭
素とは、臨界温度（３１．１℃）および臨界圧力（７
５．２kgf／cm2 ）以上の二酸化炭素のことである。本
願発明における抽出方法は特に限定されるものではない
が、通常耐圧容器中で超臨界流体単独あるいは超臨界流
体にエントレーナーとして他の溶媒を併用したものを被
抽出物に接触させることにより行われる。
は、特に超臨界二酸化炭素が好ましい。超臨界二酸化炭
素とは、臨界温度（３１．１℃）および臨界圧力（７
５．２kgf／cm2 ）以上の二酸化炭素のことである。本
願発明における抽出方法は特に限定されるものではない
が、通常耐圧容器中で超臨界流体単独あるいは超臨界流
体にエントレーナーとして他の溶媒を併用したものを被
抽出物に接触させることにより行われる。
【０００９】エントレーナーを併用する場合の使用割合
は特に限定されるものではないが、超臨界流体に対し通
常、１００重量％以下である。エントレーナーとして用
いる溶媒としては特に制限はないが、通常溶媒が残留し
た場合の安全性を考慮して水、メタノール、エタノー
ル、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、アセトン、酢
酸エチル、ヘキサンなどが好ましく用いられる。
は特に限定されるものではないが、超臨界流体に対し通
常、１００重量％以下である。エントレーナーとして用
いる溶媒としては特に制限はないが、通常溶媒が残留し
た場合の安全性を考慮して水、メタノール、エタノー
ル、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、アセトン、酢
酸エチル、ヘキサンなどが好ましく用いられる。
【００１０】抽出温度は臨界温度以上であれば特に限定
されるものではない。超臨界二酸化炭素を用いた場合
は、二酸化炭素の臨界温度である３１．１℃以上であ
り、通常１００℃以下、好ましくは６０℃以下、さらに
好ましくは４５℃以下である。抽出圧力は臨界圧力以上
であれば特に限定されるものではない。超臨界二酸化炭
素を用いた場合は、二酸化炭素の臨界圧力である７５．
２ kgf／cm2 以上であり、通常５００ kgf／cm2 以下、
好ましくは２５０ kgf／cm2 以下である。
されるものではない。超臨界二酸化炭素を用いた場合
は、二酸化炭素の臨界温度である３１．１℃以上であ
り、通常１００℃以下、好ましくは６０℃以下、さらに
好ましくは４５℃以下である。抽出圧力は臨界圧力以上
であれば特に限定されるものではない。超臨界二酸化炭
素を用いた場合は、二酸化炭素の臨界圧力である７５．
２ kgf／cm2 以上であり、通常５００ kgf／cm2 以下、
好ましくは２５０ kgf／cm2 以下である。
【００１１】抽出時間は特に限定されるものではないが
好ましくは１秒以上、好ましくは１分以上、特に好まし
くは１０分以上であり、１００時間以下、好ましくは１
０時間以下である。抽出に用いられる超臨界流体の使用
量は特に限定されるものではなく、通常バクテリア菌体
１mgに対し、１mg以上、好ましくは１０mg以上であり、
１０ｇ以下、好ましくは５ｇ以下である。
好ましくは１秒以上、好ましくは１分以上、特に好まし
くは１０分以上であり、１００時間以下、好ましくは１
０時間以下である。抽出に用いられる超臨界流体の使用
量は特に限定されるものではなく、通常バクテリア菌体
１mgに対し、１mg以上、好ましくは１０mg以上であり、
１０ｇ以下、好ましくは５ｇ以下である。
【００１２】本願発明の被抽出物は、カロチノイド化合
物を含んだバクテリア菌体であれば特に限定されるもの
ではない。このようなバクテリア菌体の具体例として
は、Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）などの
アスタキサンチン、アドニキサンチン、β−カロチン、
エキネノン、カンタキサンチン及びゼアキサンチンから
成るカロチノイド化合物のうち少なくとも１種を生産す
る能力を有するバクテリアを、生育に必要な炭素源、窒
素源、無機塩および必要であれば特殊な要求物質（例え
ば、ビタミン、アミノ酸、核酸塩基等）を含む培地で培
養した後に遠心分離、濾過等により分離して得た菌体、
あるいはカンタキサンチン生産能を有するコリネバクテ
リウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）ＳＱＨ３４
８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８４）などのコリネバクテ
リウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属する
バクテリアを、生育に必要な炭素源、窒素源、無機塩お
よび必要であれば特殊な要求物質（例えば、ビタミン、
アミノ酸、核酸塩基等）を含む培地で培養した後に遠心
分離、濾過等により分離して得た菌体が挙げられる。当
然のことながら本発明はこれらの具体例により限定され
るものではない。
物を含んだバクテリア菌体であれば特に限定されるもの
ではない。このようなバクテリア菌体の具体例として
は、Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）などの
アスタキサンチン、アドニキサンチン、β−カロチン、
エキネノン、カンタキサンチン及びゼアキサンチンから
成るカロチノイド化合物のうち少なくとも１種を生産す
る能力を有するバクテリアを、生育に必要な炭素源、窒
素源、無機塩および必要であれば特殊な要求物質（例え
ば、ビタミン、アミノ酸、核酸塩基等）を含む培地で培
養した後に遠心分離、濾過等により分離して得た菌体、
あるいはカンタキサンチン生産能を有するコリネバクテ
リウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）ＳＱＨ３４
８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８４）などのコリネバクテ
リウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属する
バクテリアを、生育に必要な炭素源、窒素源、無機塩お
よび必要であれば特殊な要求物質（例えば、ビタミン、
アミノ酸、核酸塩基等）を含む培地で培養した後に遠心
分離、濾過等により分離して得た菌体が挙げられる。当
然のことながら本発明はこれらの具体例により限定され
るものではない。
【００１３】抽出される菌体はいかなる状態で用いても
差し支えない。好ましくは、湿潤状態、乾燥状態あるい
は菌体を何らかの溶媒にけんだくした状態で用いる。抽
出されるカロチノイド化合物は特に限定されるものでは
ない。特に本発明の方法によれば、通常の方法では抽出
されにくいキサントフィル化合物に対しても非常に有効
である。
差し支えない。好ましくは、湿潤状態、乾燥状態あるい
は菌体を何らかの溶媒にけんだくした状態で用いる。抽
出されるカロチノイド化合物は特に限定されるものでは
ない。特に本発明の方法によれば、通常の方法では抽出
されにくいキサントフィル化合物に対しても非常に有効
である。
【００１４】本発明の方法により抽出されるカロチノイ
ド化合物としては、アスタキサンチン、カンタキサンチ
ン、ゼアキサンチン、アドニキサンチン、エキネノン、
クリプトキサンチン、アドニルビン、アステロイデノ
ン、ロドキサンチン、３−ヒドロキシエキネノン、アス
タキサンチンエステル、β−カロチン、α−カロチン、
γ−カロチン、リコペン、カプサンチン、β−ゼアカロ
テン、トルレン、フラボキサンチン、α−ドラカロテ
ン、フコキサンチン、フォニコキサンチンなどが挙げら
れる。
ド化合物としては、アスタキサンチン、カンタキサンチ
ン、ゼアキサンチン、アドニキサンチン、エキネノン、
クリプトキサンチン、アドニルビン、アステロイデノ
ン、ロドキサンチン、３−ヒドロキシエキネノン、アス
タキサンチンエステル、β−カロチン、α−カロチン、
γ−カロチン、リコペン、カプサンチン、β−ゼアカロ
テン、トルレン、フラボキサンチン、α−ドラカロテ
ン、フコキサンチン、フォニコキサンチンなどが挙げら
れる。
【００１５】本発明においては、これらのカロチノイド
化合物の少なくとも１種を含むバクテリア菌体が用いら
れる。特にアスタキサンチン、カンタキサンチン、ゼア
キサンチン、アドニキサンチン、エキネノン、クリプト
キサンチン、アドニルビンおよびアステロイデノンから
選ばれる少なくとも１種のカロチノイド化合物を含有す
るものが好ましく用いられる。
化合物の少なくとも１種を含むバクテリア菌体が用いら
れる。特にアスタキサンチン、カンタキサンチン、ゼア
キサンチン、アドニキサンチン、エキネノン、クリプト
キサンチン、アドニルビンおよびアステロイデノンから
選ばれる少なくとも１種のカロチノイド化合物を含有す
るものが好ましく用いられる。
【００１６】
【実施例】以下に実施例により本発明をより詳しく説明
するが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるもの
ではない。調製例１． アスタキサンチンおよびアドニキサンチンの
生産バクテリアであるＥ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−
４２８３）を酵母エキス２０ｇ／Ｌ、蔗糖３０ｇ／Ｌ、
リン酸１カリウム１．５ｇ／Ｌ、リン酸２ナトリウム
１．５ｇ／Ｌ、硫酸マグネシウム７水物０．５ｇ／Ｌ、
硫酸鉄（II）７水物０．０１ｇ／Ｌ、塩化カルシウム
０．０１ｇ／Ｌを含み、炭酸ナトリウムを用いてpH７．
０に調製した３０Ｌの培地で５日間培養した後遠心分離
により９００ｇの湿菌体を得た。この湿菌体のカロチノ
イド化合物濃度は１．０mg／ｇであった。得られた菌体
３００ｇを凍結乾燥することにより凍結乾燥菌体５７ｇ
を得た。
するが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるもの
ではない。調製例１． アスタキサンチンおよびアドニキサンチンの
生産バクテリアであるＥ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−
４２８３）を酵母エキス２０ｇ／Ｌ、蔗糖３０ｇ／Ｌ、
リン酸１カリウム１．５ｇ／Ｌ、リン酸２ナトリウム
１．５ｇ／Ｌ、硫酸マグネシウム７水物０．５ｇ／Ｌ、
硫酸鉄（II）７水物０．０１ｇ／Ｌ、塩化カルシウム
０．０１ｇ／Ｌを含み、炭酸ナトリウムを用いてpH７．
０に調製した３０Ｌの培地で５日間培養した後遠心分離
により９００ｇの湿菌体を得た。この湿菌体のカロチノ
イド化合物濃度は１．０mg／ｇであった。得られた菌体
３００ｇを凍結乾燥することにより凍結乾燥菌体５７ｇ
を得た。
【００１７】実施例１〜２０．Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ
ＢＰ−４２８３）乾燥菌体５０mgを２．５mL容のＨＰ
ＬＣ用空カラムに充填し、超臨界クロマトグラフィー装
置（日本電子（株）製）に接続した。ここに超臨界状態
の二酸化炭素を９２mg／min の速度で通じることにより
抽出を行った。エントレーナーとして別の溶媒を同時に
流す場合は超臨界状態の二酸化炭素の流速を９２mg／mi
n 、エントレーナーの流速を２０μＬ／min に設定して
抽出を行った。
ＢＰ−４２８３）乾燥菌体５０mgを２．５mL容のＨＰ
ＬＣ用空カラムに充填し、超臨界クロマトグラフィー装
置（日本電子（株）製）に接続した。ここに超臨界状態
の二酸化炭素を９２mg／min の速度で通じることにより
抽出を行った。エントレーナーとして別の溶媒を同時に
流す場合は超臨界状態の二酸化炭素の流速を９２mg／mi
n 、エントレーナーの流速を２０μＬ／min に設定して
抽出を行った。
【００１８】抽出温度、抽出圧力、エントレーナー条件
を変えて抽出を行った結果を表１に示した。抽出効率
は、抽出されたカロテノイド量と菌体に含まれているカ
ロテノイド量の比として表した。
を変えて抽出を行った結果を表１に示した。抽出効率
は、抽出されたカロテノイド量と菌体に含まれているカ
ロテノイド量の比として表した。
【００１９】実施例２１〜４０．Ｅ−３９６株（ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−４２８３）湿菌体１００mgを短冊状に切断し
たメッシュに擦り付け２．５mL容のＨＰＬＣ空カラムに
充填し、超臨界クロマトグラフィー装置に接続した。抽
出は乾燥菌体の場合と同一の条件で行った。抽出温度、
抽出圧力、エントレーナー条件を変えて抽出を行った結
果を表２に示した。抽出効率は、抽出されたカロテノイ
ド量と菌体に含まれているカロテノイド量の比として表
した。
Ｍ ＢＰ−４２８３）湿菌体１００mgを短冊状に切断し
たメッシュに擦り付け２．５mL容のＨＰＬＣ空カラムに
充填し、超臨界クロマトグラフィー装置に接続した。抽
出は乾燥菌体の場合と同一の条件で行った。抽出温度、
抽出圧力、エントレーナー条件を変えて抽出を行った結
果を表２に示した。抽出効率は、抽出されたカロテノイ
ド量と菌体に含まれているカロテノイド量の比として表
した。
【００２０】
【表１】
【００２１】
【表２】
【００２２】実施例４１．Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ Ｂ
Ｐ−４２８３）乾燥菌体１０ｇを１００mL容の高圧容器
に収容し、該容器に温度３５℃、圧力１５０ kgf／cm2
の超臨界二酸化炭素を１０ｇ／min の速度で２時間流す
ことによりカロチノイド化合物の抽出を行った。その結
果、カロチノイド化合物の抽出効率は７５％であった。
Ｐ−４２８３）乾燥菌体１０ｇを１００mL容の高圧容器
に収容し、該容器に温度３５℃、圧力１５０ kgf／cm2
の超臨界二酸化炭素を１０ｇ／min の速度で２時間流す
ことによりカロチノイド化合物の抽出を行った。その結
果、カロチノイド化合物の抽出効率は７５％であった。
【００２３】実施例４２．Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ Ｂ
Ｐ−４２８３）乾燥菌体１０ｇを２０mLのイソプロピル
アルコールと混合して１００mL容の高圧容器に収容し、
該容器に温度３５℃、圧力１５０ kgf／cm2 の超臨界二
酸化炭素を１０ｇ／min の速度で２時間流すことにより
カロチノイド化合物の抽出を行った。その結果、カロチ
ノイド化合物の抽出効率は９７％であった。
Ｐ−４２８３）乾燥菌体１０ｇを２０mLのイソプロピル
アルコールと混合して１００mL容の高圧容器に収容し、
該容器に温度３５℃、圧力１５０ kgf／cm2 の超臨界二
酸化炭素を１０ｇ／min の速度で２時間流すことにより
カロチノイド化合物の抽出を行った。その結果、カロチ
ノイド化合物の抽出効率は９７％であった。
【００２４】実施例４３．Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ Ｂ
Ｐ−４２８３）湿菌体２０ｇを１００mL容の高圧容器に
収容し、該容器に温度３５℃、圧力１５０ kgf／cm2 の
超臨界二酸化炭素を１０ｇ／min の速度で２時間流すこ
とによりカロチノイド化合物の抽出を行った。その結
果、カロチノイド化合物の抽出効率は６４％であった。
Ｐ−４２８３）湿菌体２０ｇを１００mL容の高圧容器に
収容し、該容器に温度３５℃、圧力１５０ kgf／cm2 の
超臨界二酸化炭素を１０ｇ／min の速度で２時間流すこ
とによりカロチノイド化合物の抽出を行った。その結
果、カロチノイド化合物の抽出効率は６４％であった。
【００２５】実施例４４．Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ Ｂ
Ｐ−４２８３）湿菌体２０ｇを２０mLのイソプロピルア
ルコールと混合して１００mL容の高圧容器に収容し、該
容器に温度３５℃、圧力１５０ kgf／cm2 の超臨界二酸
化炭素を１０ｇ／min の速度で２時間流すことによりカ
ロチノイド化合物の抽出を行った。その結果、カロチノ
イド化合物の抽出効率は９５％であった。
Ｐ−４２８３）湿菌体２０ｇを２０mLのイソプロピルア
ルコールと混合して１００mL容の高圧容器に収容し、該
容器に温度３５℃、圧力１５０ kgf／cm2 の超臨界二酸
化炭素を１０ｇ／min の速度で２時間流すことによりカ
ロチノイド化合物の抽出を行った。その結果、カロチノ
イド化合物の抽出効率は９５％であった。
【００２６】調製例２．カンタキサンチン生産菌体であ
るコリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ）ｓｐ．ＳＱＨ３４８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８
４）を酵母エキス３０ｇ／Ｌ、グルコース１０ｇ／Ｌ、
大豆油５mL／Ｌ、硝酸アンモニウム２．５ｇ／Ｌ、リン
酸１カリウム１．５ｇ／Ｌ、リン酸２ナトリウム１．５
ｇ／Ｌ、硫酸マグネシウム７水物０．５ｇ／Ｌ、硫酸鉄
（II）７水物０．０１ｇ／Ｌ、塩化カルシウム０．０１
ｇ／Ｌを含み、炭酸カルシウムでpH８．０に調製した３
Ｌの培地で７日間培養を行い、遠心分離により湿菌体７
５ｇを得た。湿菌体のカロチノイド化合物含量は０．６
１mg／ｇであった。湿菌体４０ｇを凍結乾燥することに
より凍結乾燥菌体８．６ｇを得た。
るコリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ）ｓｐ．ＳＱＨ３４８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８
４）を酵母エキス３０ｇ／Ｌ、グルコース１０ｇ／Ｌ、
大豆油５mL／Ｌ、硝酸アンモニウム２．５ｇ／Ｌ、リン
酸１カリウム１．５ｇ／Ｌ、リン酸２ナトリウム１．５
ｇ／Ｌ、硫酸マグネシウム７水物０．５ｇ／Ｌ、硫酸鉄
（II）７水物０．０１ｇ／Ｌ、塩化カルシウム０．０１
ｇ／Ｌを含み、炭酸カルシウムでpH８．０に調製した３
Ｌの培地で７日間培養を行い、遠心分離により湿菌体７
５ｇを得た。湿菌体のカロチノイド化合物含量は０．６
１mg／ｇであった。湿菌体４０ｇを凍結乾燥することに
より凍結乾燥菌体８．６ｇを得た。
【００２７】実施例４５〜４９．Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｓｐ．ＳＱＨ３４８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−
４２８４）乾燥菌体５０mgを２．５mL容のＨＰＬＣ用空
カラムに充填し、超臨界クロマトグラフィー装置（日本
電子（株）製）に接続した。ここに超臨界状態の二酸化
炭素を９２mg／min の速度で通じることにより抽出を行
った。エントレーナーとして別の溶媒を同時に流す場合
は超臨界状態の二酸化炭素の流速を９２mg／min 、エン
トレーナーの流速を２０μＬ／min に設定して抽出を行
った。その結果を表３に示した。
ｅｒｉｕｍ ｓｐ．ＳＱＨ３４８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−
４２８４）乾燥菌体５０mgを２．５mL容のＨＰＬＣ用空
カラムに充填し、超臨界クロマトグラフィー装置（日本
電子（株）製）に接続した。ここに超臨界状態の二酸化
炭素を９２mg／min の速度で通じることにより抽出を行
った。エントレーナーとして別の溶媒を同時に流す場合
は超臨界状態の二酸化炭素の流速を９２mg／min 、エン
トレーナーの流速を２０μＬ／min に設定して抽出を行
った。その結果を表３に示した。
【００２８】実施例５０〜５４．Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｓｐ．ＳＱＨ３４８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−
４２８４）湿菌体１００mgを短冊状に切断したメッシュ
に擦り付け２．５mL容のＨＰＬＣ空カラムに充填し、超
臨界クロマトグラフィー装置に接続した。抽出は乾燥菌
体の場合と同一の条件で行った。その結果を表３に併記
した。
ｅｒｉｕｍ ｓｐ．ＳＱＨ３４８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−
４２８４）湿菌体１００mgを短冊状に切断したメッシュ
に擦り付け２．５mL容のＨＰＬＣ空カラムに充填し、超
臨界クロマトグラフィー装置に接続した。抽出は乾燥菌
体の場合と同一の条件で行った。その結果を表３に併記
した。
【００２９】
【表３】
【００３０】
【発明の効果】本発明によれば超臨界流体を用いること
によりバクテリア菌体から効率よくカロチノイド化合
物、特にキサントフィル化合物を抽出することができ
る。また本発明の方法により製造されるカロチノイド化
合物は飼料添加物あるいは食品添加物として安全に使用
することができる。
によりバクテリア菌体から効率よくカロチノイド化合
物、特にキサントフィル化合物を抽出することができ
る。また本発明の方法により製造されるカロチノイド化
合物は飼料添加物あるいは食品添加物として安全に使用
することができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:15）
Claims (1)
- 【請求項１】 カロチノイド化合物を含有するバクテリ
ア菌体を超臨界流体と接触させることを特徴とするカロ
チノイド化合物の抽出方法。
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|---|---|---|---|
| JP23126694A JP3727077B2 (ja) | 1994-09-27 | 1994-09-27 | バクテリア菌体からのカロチノイド化合物の抽出方法 |
| US08/533,390 US5591343A (en) | 1994-09-27 | 1995-09-25 | Process for extraction of carotenoids from bacterial cells |
| DE69524369T DE69524369T2 (de) | 1994-09-27 | 1995-09-26 | Verfahren zur Extraktion von Karotenoiden aus Bakterienzellen |
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| EP95306770A EP0719866B1 (en) | 1994-09-27 | 1995-09-26 | Process for extraction of carotenoids from bacterial cells |
| NO953813A NO309859B1 (no) | 1994-09-27 | 1995-09-26 | FremgangsmÕte ved ekstraksjon av karotenoider fra bakterieceller |
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| WO2007114461A1 (ja) | 2006-03-28 | 2007-10-11 | Asahi Kasei Pharma Corporation | カロテノイドの製造方法 |
| WO2009028643A1 (ja) | 2007-08-29 | 2009-03-05 | Nippon Oil Corporation | カロテノイドの製造方法 |
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| WO2014054669A1 (ja) | 2012-10-02 | 2014-04-10 | 株式会社ダイセル | カロテノイド含有組成物の製造方法及びカロテノイド含有組成物 |
| JP2019506133A (ja) * | 2015-08-28 | 2019-03-07 | アルガヘルス （エーエイチ） リミテッド | 微細藻類からフコキサンチンおよび／またはポリサッカライドを生産するための改善されたプロセス |
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| JP2023074934A (ja) * | 2021-11-18 | 2023-05-30 | Ｅｎｅｏｓ株式会社 | トランス型キサントフィルの異性化方法 |
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| US9113653B2 (en) | 2011-08-19 | 2015-08-25 | Steven J Maranz | Methods of administering probiotic organisms that synthesize carotenoid compounds in situ to enhance human health and nutrition |
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1994
- 1994-09-27 JP JP23126694A patent/JP3727077B2/ja not_active Expired - Lifetime
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1995
- 1995-09-25 US US08/533,390 patent/US5591343A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-09-26 NO NO953813A patent/NO309859B1/no unknown
- 1995-09-26 EP EP95306770A patent/EP0719866B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-09-26 CA CA002159176A patent/CA2159176A1/en not_active Abandoned
- 1995-09-26 DE DE69524369T patent/DE69524369T2/de not_active Expired - Fee Related
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