JPH0899884A

JPH0899884A - グラム陰性菌増殖抑制剤

Info

Publication number: JPH0899884A
Application number: JP6261412A
Authority: JP
Inventors: Tsutomu Okubo; 勉大久保; Yukiko Nagato; 有希子長戸; Shigemitsu Akachi; 重光赤地
Original assignee: Taiyo Kagaku Co Ltd
Current assignee: Taiyo Kagaku Co Ltd
Priority date: 1994-09-29
Filing date: 1994-09-29
Publication date: 1996-04-16
Anticipated expiration: 2023-07-30
Also published as: JP4127864B2

Abstract

(57)【要約】【目的】哺乳動物や鳥類などからグラム陰性菌を除
く、または増殖を抑制する組成物を提供することを目的
とする。【構成】多糖類の分解物を含有することを特徴とする
グラム陰性菌増殖抑制剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、哺乳動物及び鳥類およ
びそれらから得られる畜産物のグラム陰性菌増殖抑制剤
に関する。

【０００２】

【従来の技術】細菌は菌の表層構造の差異によるグラム
染色性によりグラム陽性菌とグラム陰性菌に分別され
る。グラム陰性菌には、赤痢菌、チフス菌、パラチフス
菌、サルモネラ菌、大腸菌、クレブシエラ、セラチア、
プロテウス、ペスト菌、エルシニア、コレラ菌、腸炎ビ
ブリオ、緑濃菌、インフルエンザ菌、ブルセラ、レジオ
ネラ、カンピロバクター等があり、病原性の細菌が多
い。なかでも大腸菌やサルモネラ菌は代表的な食中毒菌
であり、人畜共通の感染症でもある。サルモネラ感染症
の場合、動物では牛、馬、めん羊、山羊、豚、犬、猫等
の哺乳動物や鶏、あひる、うずら等の鳥類に見られ、牛
では下痢や関節炎、豚では敗血症や腸炎、鶏の場合はブ
ロイラーのひな白痢や１０日齢以内の幼ひなの下痢・敗
血症を起こし、重度の場合は死に至る。サルモネラ感染
症は発生率が高く、損害も大きいと同時に肉用牛や鶏で
は、人への感染源ともなりうるため公衆衛生上重要な問
題である。過去にサルモネラ・エンテリティディスによ
るサルモネラ食中毒の発生が世界的に増加し、その原因
が鶏卵の汚染であることが明らかにされて大きな社会問
題となっている。また、大腸菌の場合は体内や食品中で
繁殖し、毒素を生成して下痢症の原因となっている。

【０００３】このようなグラム陰性菌が動物・ヒトの体
内へ侵入、増殖したりすることは衛生上また健康上好ま
しくない。これらグラム陰性菌に対する対策としては消
毒剤、抗菌剤、洗浄剤、ワクチン等が知られている。例
えば、家畜や鶏のサルモネラ感染症の予防・治療方法と
しては、畜舎や養鶏場の清掃・消毒の励行はもちろんの
こと、抗生物質や他の合成抗菌剤を飼料とともに投与す
る方法が行われている（特開昭６２−２９４６２３
号）。しかし、このような薬剤による方法は薬剤耐性菌
の出現や畜産物への薬剤の残留等の問題があり、人の健
康上好ましい方法ではない。また特公昭６４−７０４９
号には、盲腸内容物の嫌気培養したものを経口投与する
ことにより、腸管内のサルモネラ菌を排除しようとする
試みが開示されているが、効果が明確ではなく嫌気培養
等に特殊な設備が必要であり、実用的でない。さらに欧
米ではワクチンによる感染防除の方法が実施されている
が、ワクチン接種にかなりの手間がかかり、また鶏の場
合断餌等のストレスにより以後の発育、産卵に影響を及
ぼす等の問題があり有効な方法ではない。

【０００４】最近、鶏のサルモネラ感染症の場合、フラ
クトオリゴ糖やガラクトオリゴ糖を用いてサルモネラ菌
の増殖を阻害する方法が開示されている（特開平３−５
０１９７１号、特開平５−２０８９１２号）。しかしな
がら、これらのオリゴ糖は飼料化するときの加熱、酸に
対して不安定であったり、菌に対する増殖阻害効果が試
験管レベルでの結果にとどまっており効果が弱い等の欠
点を有する。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】従って、このような状
況下、哺乳動物や鳥類およびそれらから得られる畜産物
などからグラム陰性菌を除く、または増殖を抑制する安
全な物質が強く求められていた。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記課題を
解決すべく鋭意研究した結果、多糖類の分解物を哺乳動
物や鳥類などが経口的に摂取することによる、体内のグ
ラム陰性菌の増殖抑制効果を見出した。また、これら哺
乳動物や鳥類などから得られる畜産物についても抑制効
果の有ることを見出した。さらに、これら多糖類の分解
物とタンニン類を組み合わせたもの、多糖類の分解物と
グリセリン脂肪酸エステルまたはポリグリセリン脂肪酸
エステルを組み合わせたもの、多糖類の分解物とサポニ
ン類を組み合わせたものが多糖類の分解物単独で用いる
より優れた増殖抑制効果のあることを見出し本発明を完
成させるに至った。

【０００７】本発明における多糖類の分解物とは、グア
ーガム、ローカストビーンガム、タマリンドガム、ペク
チン、キサンタンガム、プルランなどの多糖類を酵素ま
たは酸によって分解したものを指す。具体的には、グア
ーガム、ローカストビーンガムについてはアスペルギル
ス属菌やリゾープス属菌等に由来する酵素ガラクトマン
ナナーゼによる分解が好ましく、ペクチンについてはア
スペルギルス属菌の生産する酵素ペクチナーゼによる分
解が好ましい。タマリンドガム及びキサンタンガムにつ
いては微生物由来のセルラーゼやキシラナーゼによる分
解が好ましく、プルランについてはプルラナーゼによる
分解が好ましい。また本発明の多糖類の分解物は加水分
解することによって得られた低分子化したものであり、
酵素の反応時間又は酸分解の反応時間を変えることによ
り分子量を変化させることができる。例えば、グアーガ
ムの加水分解物ではマンノース直鎖の鎖長が３０〜２０
０単位、または５〜２９単位の範囲内に８０％以上分布
していることがよい。

【０００８】グアーガムの加水分解物の鎖長とは、本分
解物の主鎖はマンノースであり、その結合している数を
指す。また、その他の多糖類の加水分解も同様で鎖長が
３０〜２００単位、好ましくは５〜２９単位の範囲内に
８０％以上分布していることがよい。それらの測定法は
特に限定するものではないが、例えば分解されたグアー
ガムを水に溶解し、８０３Ｄ型（東ソー（株）製）の高
速液体クロマトグラフィーを用い、水を移動相にしてＧ
３０００ＰＷ（東ソー（株）製）のカラムにてゲル濾過
を行い、示差屈折計にて検出することにより測定でき
る。

【０００９】本発明に用いられるタンニン類は、緑茶、
ウーロン茶又は紅茶の水もしくはアルコール抽出物の限
外濾過および逆浸透膜処理、又は酢酸可溶画分より得る
ことができるが、柿しぶやりんごなど他の原料起源のも
のまたは化学合成品でもよい。タンニン類としては、
（＋）−カテキン，（＋）−ガロカテキン，（−）−ガ
ロカテキンガレート，（−）−エピカテキン，（−）−
エピカテキンガレート，（−）−エピガロカテキン，
（−）−エピガロカテキンガレート，遊離型テアフラビ
ン，テアフラビンモノガレートＡ，テアフラビンモノガ
レートＢおよびテアフラビンジガレートが挙げられる。
得られたこれらのタンニン類を本発明に用いる場合は単
独で、もしくは二種以上の混合物として、さらにはタン
ニン類を含む粗抽出物でも使用できる。

【００１０】本発明で使用するグリセリン脂肪酸エステ
ルはグリセリンと脂肪酸のエステルであり、脂肪酸とし
ては、炭素数８〜１４の直鎖脂肪酸が好ましく、カプリ
ル酸、カプリン酸、ラウリン酸が挙げられる。グリセリ
ン脂肪酸エステルにはモノ、ジ、トリエステルがあり、
モノエステルを使用するのが好ましく、一例を挙げると
グリセリンモノカプリル酸エステル、グリセリンモノカ
プリン酸エステル、グリセリンモノラウリン酸エステル
である。本発明で使用するグリセリン脂肪酸エステル
は、単独もしくは二種以上の混合物でもかまわない。本
発明で使用するポリグリセリン脂肪酸エステルの脂肪酸
は、炭素数８〜１４の直鎖脂肪酸が好ましく、カプリル
酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸が挙げられ
る。本発明で使用するポリグリセリン脂肪酸エステルの
ポリグリセリンはグリセリンの重合したものであり、一
般にジ、トリ、ペンタ、ヘキサ、オクタ、デカグリセリ
ンがあげられる。本発明で使用するポリグリセリン脂肪
酸エステルは、単独または二種以上の混合物でもかまわ
ない。

【００１１】本発明に使用するサポニン類は、キラヤサ
ポニン、ユッカサポニン、ビートサポニン、大豆サポニ
ン、茶サポニン、杜仲茶サポニンであり、単独または二
種以上の混合物でもかまわない。本発明の多糖類の分解
物の有効量は、哺乳動物、鳥類に対して１日当たり０．
０１〜１０ｇ／体重ｋｇ、好ましくは０．０５〜５ｇ／
体重ｋｇ、また多糖類の分解物と合わせて用いることの
できるタンニン類は１日当たり０．０００１ｇ〜１．０
ｇ／体重ｋｇ、好ましくは０．００１〜０．５ｇ／体重
ｋｇ、多糖類の分解物とタンニン類の混合比は、６：１
〜１０００：１、好ましくは１０：１〜５０：１であ
る。多糖類の分解物と合わせて用いることのできるグリ
セリン脂肪酸エステル及び／又はポリグリセリン脂肪酸
エステルは０．００１〜５ｇ／体重ｋｇ、好ましくは
０．００５〜０．５ｇ／体重ｋｇであり、多糖類の分解
物とグリセリン脂肪酸エステルおよびポリグリセリン脂
肪酸エステルの混合比は、８：１〜４００：１、好まし
くは１５：１〜６０：１である。多糖類の分解物と合わ
せて用いることのできるサポニン類の有効量は０．００
０１〜１．０ｇ／体重ｋｇ、好ましくは０．００１〜
０．５ｇ／体重ｋｇであり、多糖類の分解物とサポニン
類との混合比は６：１〜７００：１、好ましくは１５：
１〜７０：１である。

【００１２】本発明のグラム陰性菌増殖抑制剤は、通常
の哺乳動物及び鳥類の飼料製造工程中のいずれかにおい
て、飼料原料中に液状、粉末状、もしくは顆粒状の多糖
類の分解物、タンニン類、グリセリン脂肪酸エステルま
たはポリグリセリン脂肪酸エステル、サポニン類を添
加、混合して、粉末状、スラリー状、もしくはペレット
状等、適宜の形態の製品に加工するか、または飼料製品
に直接添加、混合することによって製造できる。本発明
品の有効成分である多糖類の分解物、タンニン類、グリ
セリン脂肪酸エステルまたはポリグリセリン脂肪酸エス
テル、サポニン類の飼料への添加量は、動物に投与する
際、上述の有効量となるように適宜添加すればよい。本
発明の動物とは、牛、馬、羊、山羊、豚、犬、猫等の哺
乳動物および鶏、あひる、うずら等の鳥類である。また
本発明の畜産物とは、それら動物から得られる生産物で
あり、乳、畜肉、内臓や鶏等から得られる卵、肉、内臓
等を指す。以下、本発明を実施例により詳細に説明する
が、これにより特に限定されるものではない。

【００１３】

【実施例】

実施例１水９００部にクエン酸を加えてｐＨを３に調整した。こ
れにアスペルギルス由来のガラクトマンナナーゼ０．２
部とグアーガム粉末１００部を添加混合して４０〜４５
℃で２４時間酵素反応を行った。反応後９０℃、１５分
間加熱して酵素を失活させた。濾過により不純物を除去
し得られた透明な溶液を減圧濃縮した後、噴霧乾燥し本
発明品のグアーガム分解物６５部が得られた。高速液体
クロマトグラフィーで測定した結果、該ガラクトマンナ
ンの糖鎖の８０％以上はマンノースの鎖長が５０〜１５
０単位の範囲内に包含されていた。

【００１４】実施例２同様の方法で、反応時間のみを４８時間と変えることに
より、マンノース直鎖の短い本発明品のグアーガム分解
物（マンノースの鎖長の８０％以上が５〜２５単位の範
囲内に包含される）６８部が得られた。実施例３水９００部にクエン酸を加えてｐＨを３に調整した。こ
れにアスペルギルス由来のガラクトマンナナーゼ０．２
部とローカストビーンガム粉末１００部を添加混合して
４０〜４５℃で６時間酵素を作用させた。反応後、９５
℃、１５分間加熱して酵素を失活させた。そして濾過分
離して不純物を除き、得られた溶液を凍結乾燥し、ロー
カストビーンガム分解物６４部を得た。

【００１５】実施例４水９００部にクエン酸を加えてｐＨを３に調整した。こ
れにアスペルギルス由来のペクチナーゼ０．１部とペク
チン粉末（エステル化度７０％）１００部を添加混合し
て３０〜３５℃で８時間酵素を作用させた。反応後、９
５℃、１５分間加熱して酵素を失活させた。そして濾過
分離して不純物を除き、得られた溶液を凍結乾燥し、ペ
クチン分解物６４部を得た。実施例５実施例１で得られたグアーガム分解物と、タンニン類と
して緑茶の熱水抽出物の限外濾過膜処理画分を凍結乾燥
した粉末を用いて、重量比で１９：１となるように混合
し本発明品を得た。

【００１６】実施例６実施例２で得られたグアーガム分解物と、タンニン類と
して緑茶の熱水抽出物の酢酸エチル可溶画分を凍結乾燥
した粉末を用いて、重量比で１９：１となるように混合
し本発明品を得た。実施例７実施例２で得られたグアーガム分解物と、タンニン類と
して緑茶のエタノール抽出物の酢酸エチル可溶画分から
さらにカラムクロマトグラフィーを用いて精製した
（−）−エピガロカテキンガレートを用いて、重量比で
１９：１となるように混合し本発明品を得た。

【００１７】実施例８実施例２で得られたグアーガム分解物と、タンニン類と
して市販のインスタント紅茶の熱水抽出液のクロロホル
ム可溶画分より得た粗テアフラビンを用いて、重量比で
１９：１となるように混合し本発明品を得た。実施例９実施例１で得られたグアーガム分解物と、グリセリンモ
ノカプリル酸エステルを用いて、重量比で１９：１とな
るように混合し本発明品を得た。

【００１８】実施例１０実施例２で得られたグアーガム分解物と、グリセリンモ
ノラウリン酸エステルを用いて、重量比で１９：１とな
るように混合し本発明品を得た。実施例１１実施例２で得られたグアーガム分解物とキラヤサポニン
（商品名：キラヤニンＣ−１００、部分加水分解サポニ
ンとして約１０％、丸善製薬（株）製）を用いて、重量
比で１９：１となるように混合し本発明品を得た。

【００１９】実施例１２実施例２で得られたグアーガム分解物とユッカサポニン
（部分加水分解サポニンとして約２０％）を用いて、重
量比で１９：１となるように混合し本発明品を得た。実施例１３実施例２で得られたグアーガム分解物とビートサポニン
（部分加水分解サポニンとして約６０％）を用いて、重
量比で１９：１となるように混合し本発明品を得た。

【００２０】実施例１４実施例２で得られたグアーガム分解物と大豆サポニン
（部分加水分解サポニンとして約６０％）を用いて、重
量比で１９：１となるように混合し本発明品を得た。実施例１５実施例２で得られたグアーガム分解物と茶の実から得た
茶サポニン（部分加水分解サポニンとして約５０％）を
用いて、重量比で１９：１となるように混合し本発明品
を得た。実施例１６実施例２で得られたグアーガム分解物と杜仲茶サポニン
（部分加水分解サポニンとして約５０％）を用いて、重
量比で１９：１となるように混合し本発明品を得た。実施例１７実施例３で得られたローカストビーンガム分解物と、タ
ンニン類として緑茶の熱水抽出物の酢酸エチル可溶画分
を凍結乾燥した粉末を用いて、重量比で１９：１となる
ように混合し本発明品を得た。

【００２１】実施例１８実施例４で得られたペクチン分解物とキラヤサポニン
（商品名：キラヤニンＣ−１００、部分加水分解サポニ
ンとして約１０％、丸善製薬（株）製）を用いて、重量
比で１９：１となるように混合し本発明品を得た。実施例１９水溶性食物繊維のプルランをプルラナーゼで処理したプ
ルラン分解物とキラヤサポニン（商品名：キラヤニンＣ
−１００、部分加水分解サポニンとして約１０％、丸善
製薬（株）製）を用いて、重量比で１９：１となるよう
に混合し本発明品を得た。

【００２２】実施例２０実施例２で得られたグアーガム分解物と、緑茶の熱水抽
出物の酢酸エチル可溶画分を凍結乾燥した粉末およびグ
リセリンモノカプリル酸エステルを用いて、重量比で１
８：１：１となるように混合し本発明品を得た。実施例２１実施例２で得られたグアーガム分解物と、緑茶の熱水抽
出物の酢酸エチル可溶画分を凍結乾燥した粉末およびキ
ラヤサポニン（商品名：キラヤニンＣ−１００、部分加
水分解サポニンとして約１０％、丸善製薬（株）製）を
用いて、重量比で１８：１：１となるように混合し本発
明品を得た。

【００２３】試験例１サルモネラ・エンテリティディスＩＦＯ−３３１３と
サルモネラ・チフィムリウムＩＦＯ−１２５２９、サ
ルモネラ・ダブリンＮＩＡＨ−１２０１、ビブリオ・
パラファエモリティカス、シュードモナス・マレイ、ブ
ルセラ・スイスを本発明品含有培地にて次のように培養
した。肉汁培地に、炭素源として実施例１〜４で得られ
た本発明品を０．５％となるように加え、対照として、
肉汁培地にグルコースを０．５％加えたものを用いた。
３７℃で４８時間培養を行い、培養液のｐＨ低下により
菌の生育を確認した。結果を表１に示す。表中の菌の増
殖の程度は、次のように表示した。−（増殖なし：ｐＨ
６．０以上）、＋−（弱い増殖：ｐＨ５．５１−６．０
０）、＋（増殖：ｐＨ５．０１−５．５０）、＋＋（よ
く増殖：ｐＨ５．００以下）

【００２４】

【表１】

【００２５】表１の結果より、本発明品を添加すると試
験菌の増殖はほとんどないことがわかる。試験例２サルモネラ・エンテリティディスＩＦＯ−３３１３と
サルモネラ・チフィムリウムＩＦＯ−１２５２９およ
びサルモネラ・ダブリンＮＩＡＨ−１２０１、ビブリ
オ・パラファエモリティカス、シュードモナス・マレ
イ、ブルセラ・スイスを本発明品含有培地にて次のよう
に培養した。肉汁培地に、炭素源としてグルコース０．
５％と実施例５〜２１で得られた本発明品を０．５％と
なるように加えて、３７℃で４８時間培養を行い、培養
液のｐＨ低下により菌の生育を確認した。対照として、
グルコース０．５％を含む肉汁培地を用い、比較とし
て、緑茶の熱水抽出物の限外濾過膜処理画分を凍結乾燥
した粉末（Ａ）、緑茶の熱水抽出物の酢酸エチル可溶画
分を凍結乾燥した粉末（Ｂ）、（−）−エピガロカテキ
ンガレート（Ｃ）、粗テアフラビン（Ｄ）、グリセリン
モノカプリル酸エステル（Ｅ）、グリセリンモノラウリ
ン酸エステル（Ｆ）、キラヤサポニン（Ｇ）、ユッカサ
ポニン（Ｈ）、ビートサポニン（Ｉ）、大豆サポニン
（Ｊ）、茶サポニン（Ｋ）、杜仲茶サポニン（Ｌ）、Ｂ
とＥを同重量比で混合したもの（Ｍ）、ＢとＧを同重量
比で混合したもの（Ｎ）をそれぞれ０．０２５％となる
ように加えて同様に培養した。結果を表２および表３に
示す。表中の菌の増殖の程度は、次のように表示した。
−（増殖なし：ｐＨ６．０１以上）、＋−（弱い増殖：
ｐＨ５．５１−６．００）、＋（増殖：ｐＨ５．０１−
５．５０）、＋＋（よく増殖：ｐＨ５．００以下）

【００２６】

【表２】

【００２７】

【表３】

【００２８】表２および表３の結果より、多糖類の分解
物にタンニン類、グリセリン脂肪酸エステルまたはポリ
グリセリン脂肪酸エステル、サポニン類を併用すると、
試験菌の増殖はないのはもちろんのこと、増殖阻害効果
のあることがわかる。試験例３１５頭の分娩直後の成牛を３頭ずつ５群に分け、基本飼
料のみを与えた群をＡ群、基本飼料１ｋｇに実施例１、
７、１０、１２で調製した本発明品１０ｇを添加した群
をそれぞれＢ、Ｃ、Ｄ、Ｅ群とし５週間飼育した。牛由
来のサルモネラ・タブリンをＢＨＩ培地で培養し集菌
後、生理食塩水で１×１０⁵個／ｍｌとなるように調製
した菌液を１頭当たり１００ｍｌ哺乳壜にて、各飼料で
飼育後１週間目に経口感染させた。感染後２および４週
間目の糞便を採取し、サルモネラ選択培地（栄研化学
（株）製）にてサルモネラ菌の菌数を測定した。結果を
表４に示す。

【００２９】

【表４】

【００３０】表４より、本発明品を添加した群でサルモ
ネラ菌は検出されなかった。また、グアーガム分解物と
タンニン類、グリセリン脂肪酸エステルまたはポリグリ
セリン脂肪酸エステル、サポニン類を併用すると、増殖
抑制効果は顕著であった。試験例４１５頭の搾乳牛を３頭ずつ５群に分け、基本飼料のみを
与えた群をＡ群、基本飼料１ｋｇに実施例１、７、１
０、１２で調製した本発明品１０ｇを添加した群をそれ
ぞれＢ、Ｃ、Ｄ、Ｅ群とし５週間飼育した。牛由来のサ
ルモネラ・タブリンをＢＨＩ培地で培養し集菌後、生理
食塩水で１×１０⁵個／ｍｌとなるように調製した菌液
を１頭当たり１００ｍｌ哺乳壜にて、各飼料で飼育後１
週間目に経口感染させた。感染後２および４週間目の牛
乳を採取し、牛乳１ｍｌをサルモネラ増菌培地で増菌を
行った後、サルモネラ選択培地（栄研化学（株）製）に
塗抹してサルモネラ菌の有無を判定した。サルモネラ菌
が多数検出された場合＋＋、わずかの場合＋、全く検出
されなかった場合−と表示した。結果を表５に示す。

【００３１】

【表５】

【００３２】表５より、本発明品を添加した群の牛乳中
にはサルモネラ菌は検出されなかった。また、グアーガ
ム分解物とタンニン類、グリセリン脂肪酸エステルまた
はポリグリセリン脂肪酸エステル、サポニン類を併用す
ると、増殖抑制効果は顕著であった。試験例５２０日令の子豚１５頭を３頭ずつ５群に分け、基本飼料
として哺乳期子豚育成用飼料（昭和産業（株）製）のみ
を与えた群をＡ群、基本飼料１ｋｇ実施例２、６、１
１、１３で調製した本発明品１０ｇを添加した飼料を与
えた群をそれぞれＢ、Ｃ、Ｄ、Ｅ群とし、５週間飼育し
た。豚由来のサルモネラ・チフィムリウムをＢＨＩ培地
で培養し集菌後、生理食塩水で１×１０⁵個／ｍｌとな
るように菌液を調製した。１頭当たり１００ｍｌ哺乳壜
にて、各飼料で飼育後１週間目に経口感染させた。感染
後２および４週間目の糞便を採取し、サルモネラ選択培
地（栄研化学（株）製）にてサルモネラ菌の菌数を測定
した。また同時にデスオキシコレート培地（栄研化学
（株）製）にて糞便中の大腸菌の菌数も測定した。結果
を表６に示す。

【００３３】

【表６】

【００３４】表６より、本発明品を添加した群でサルモ
ネラ菌は検出されず、大腸菌は減少した。また、グアー
ガム分解物とタンニン類、グリセリン脂肪酸エステルま
たはポリグリセリン脂肪酸エステル、サポニン類を併用
することにより増殖抑制効果は顕著であった。試験例６豚１５頭を３頭ずつ５群に分け、基本飼料として豚育成
用飼料（昭和産業（株）製）のみを与えた群をＡ群、基
本飼料１ｋｇ実施例２、６、１１、１３で調製した本発
明品１０ｇを添加した飼料を与えた群をそれぞれＢ、
Ｃ、Ｄ、Ｅ群とし、５週間飼育した。豚由来のサルモネ
ラ・チフィムリウムをＢＨＩ培地で培養し集菌後、生理
食塩水で１×１０⁵個／ｍｌとなるように菌液を調製し
た。１頭当たり１００ｍｌ哺乳壜にて、各飼料で飼育後
１週間目に経口感染させた。感染後５日目に屠殺し、大
腿筋、胃、十二指腸、盲腸、直腸、肝臓、脾臓を採取
し、各検体１ｇをサルモネラ増菌培地で増菌を行った
後、サルモネラ選択培地（栄研化学（株）製）に塗抹し
てサルモネラ菌の有無を判定した。サルモネラ菌が多数
検出された場合＋＋、わずかの場合＋、全く検出されな
かった場合−と表示した。結果を表７に示す。

【００３５】

【表７】

【００３６】表７より、本発明品を添加した群から得ら
れた大腿筋、肝臓、脾臓にサルモネラ菌は検出されず、
また、胃、十二指腸、盲腸、直腸の消化管ではサルモネ
ラ菌の増殖抑制効果が見られた。さらに、グアーガム分
解物とタンニン類、グリセリン脂肪酸エステルまたはポ
リグリセリン脂肪酸エステル、サポニン類を併用するこ
とにより増殖抑制効果は顕著であった。試験例７孵化直後の幼雛６０羽を５羽ずつ１２群に分け、基本飼
料にて１週間飼育した。その後、２週間基本飼料のみを
与えた群をＡ群、基本飼料１ｋｇ実施例１〜２１で調製
した本発明の組成物５ｇをそれぞれ添加した飼料を与え
た群をそれぞれＢ〜ｖ群とした。各飼料で１週間飼育
後、サルモネラ菌の感染を行った。鶏由来のサルモネラ
・エンテリティディスをＢＨＩ培地で培養し集菌後、生
理食塩水で１×１０⁵個／ｍｌとなるように調製した菌
液を１羽当たり１ｍｌ注射器にて経口感染させた。感染
前日、感染後１、２、４、６および８日目の糞便を採取
し、サルモネラ選択培地（栄研化学（株）製）にてサル
モネラ菌の菌数を測定した。結果を表８〜表１０に示
す。

【００３７】

【表８】

【００３８】

【表９】

【００３９】

【表１０】

【００４０】表８〜表１０より、本発明品を添加した群
でサルモネラ菌は検出されなかった。また、多糖類の分
解物とタンニン類、グリセリン脂肪酸エステルまたはポ
リグリセリン脂肪酸エステル、サポニン類を併用するこ
とによりサルモネラ菌の増殖抑制効果は顕著であった。

【００４１】試験例８ブロイラー６０羽を５羽ずつ１２群に分け、基本飼料に
て１週間飼育した。その後、２週間基本飼料のみを与え
た群をＡ群、基本飼料１ｋｇと実施例１〜２０で調製し
た本発明の組成物５ｇをそれぞれ添加した飼料を与えた
群をそれぞれＢ〜Ｕ群とした。各飼料で１週間飼育後、
サルモネラ菌の感染を行った。鶏由来のサルモネラ・エ
ンテリティディスをＢＨＩ培地で培養し集菌後、生理食
塩水で１×１０⁵個／ｍｌとなるように調製した菌液を
１羽当たり１ｍｌ注射器にて経口感染させた。感染後５
日目に屠殺し、大腿筋、十二指腸、盲腸、直腸、肝臓、
脾臓を採取し、各検体１ｇをサルモネラ増菌培地で増菌
を行った後、サルモネラ選択培地（栄研化学（株）製）
に塗抹してサルモネラ菌の有無を判定した。サルモネラ
菌が多数検出された場合＋＋、わずかの場合＋、全く検
出されなかった場合−と表示した。結果を表１１〜表１
３に示す。

【００４２】

【表１１】

【００４３】

【表１２】

【００４４】

【表１３】

【００４５】表１１〜表１３より、本発明品を添加した
群から得られた大腿筋、肝臓、脾臓にサルモネラ菌は検
出されず、十二指腸、盲腸、直腸の消化管ではサルモネ
ラ菌の増殖抑制効果が見られた。また、多糖類の分解物
とタンニン類、グリセリン脂肪酸エステルまたはポリグ
リセリン脂肪酸エステル、サポニン類を併用することに
よりサルモネラ菌の増殖抑制効果は顕著であった。試験例９産卵鶏６０羽を５羽ずつ１２群に分け、基本飼料にて１
週間飼育した。その後、２週間基本飼料のみを与えた群
をＡ群、基本飼料１ｋｇと実施例１〜２１で調製した本
発明の組成物５ｇをそれぞれ添加した飼料を与えた群を
それぞれＢ〜ｖ群とした。各飼料で１週間飼育後、サル
モネラ菌の感染を行った。鶏由来のサルモネラ・エンテ
リティディスをＢＨＩ培地で培養し集菌後、生理食塩水
で１×１０⁴個／ｍｌとなるように調製した菌液を１羽
当たり１ｍｌ注射器にて経口感染させた。感染後１０日
目の卵を採取し、卵殻表面と卵黄中のサルモネラ菌を測
定した。卵殻表面の場合、卵１個につき１０ｍｌの生理
食塩水で卵殻表面を洗い出しその液について、また卵黄
の場合１０倍希釈液について、それぞれサルモネラ増菌
培地で増菌を行った後、サルモネラ選択培地（栄研化学
（株）製）に塗抹してサルモネラ菌の有無を判定した。
サルモネラ菌が多数検出された場合＋＋、わずかの場合
＋、全く検出されなかった場合−と表示した。結果を表
１４〜表１６に示す。

【００４６】

【表１４】

【００４７】

【表１５】

【００４８】

【表１６】

【００４９】表１４〜表１６より、本発明品を添加した
すべての群から得られた鶏卵の卵殻表面、卵黄中にサル
モネラ菌は検出されなかった。従って、本発明品による
サルモネラ菌の鶏卵内部および外部の汚染は予防可能と
なった。本発明の実施態様ならびに目的生成物を挙げれ
ば以下の通りである。（１）多糖類の分解物を含有するグラム陰性菌増殖抑制
剤。（２）多糖類がグアーガムである前記（１）記載のグラ
ム陰性菌増殖抑制剤。（３）多糖類がローカストビーンガムである前記（１）
記載のグラム陰性菌増殖抑制剤。（４）多糖類がキサンタンガムである前記（１）記載の
グラム陰性菌増殖抑制剤。（５）多糖類がペクチンである前記（１）記載のグラム
陰性菌増殖抑制剤。（６）多糖類がプルランである前記（１）記載のグラム
陰性菌増殖抑制剤。（７）分解物が酵素による分解物である前記（１）〜
（６）記載のグラム陰性菌増殖抑制剤。（８）分解物が酸による分解物である前記（１）〜
（６）記載のグラム陰性菌増殖抑制剤。（９）多糖類の分解物とタンニン類と併用することを特
徴とするグラム陰性菌増殖抑制剤。（１０）タンニン類が緑茶の熱水抽出物である前記
（９）記載のグラム陰性菌増殖抑制剤。（１１）タンニン類が緑茶の酢酸エチル可溶画分である
前記（９）記載のグラム陰性菌増殖抑制剤。（１２）タンニン類が（＋）−カテキン，（＋）−ガロ
カテキン，（−）−ガロカテキンガレート，（−）−エ
ピカテキン，（−）−エピカテキンガレート，（−）−
エピガロカテキン，（−）−エピガロカテキンガレー
ト，遊離型テアフラビン，テアフラビンモノガレート
Ａ，テアフラビンモノガレートＢおよびテアフラビンジ
ガレートの化合物群より選ばれる一種または二種以上の
化合物である前記（９）記載のグラム陰性菌増殖抑制
剤。（１３）タンニン類が（−）−エピガロカテキンガレー
ドである前記（９）記載のグラム陰性菌増殖抑制剤。（１４）多糖類の分解物とグリセリン脂肪酸エステルま
たはポリグリセリン脂肪酸エステルとを併用することを
特徴とするグラム陰性菌増殖抑制剤。（１５）グリセリン脂肪酸エステルがモノ、ジ、トリエ
ステルである前記（１４）記載のグラム陰性菌増殖抑制
剤。（１６）ポリグリセリン脂肪酸エステルの脂肪酸が、炭
素数８〜１４のカプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、
ミリスチン酸の直鎖脂肪酸である前記（１４）記載のグ
ラム陰性菌増殖抑制剤。（１７）多糖類の分解物とサポニン類とを併用すること
を特徴とするグラム陰性菌増殖抑制剤。（１８）サポニン類がキラヤサポニン、ユッカサポニ
ン、ビートサポニン、大豆サポニン、茶サポニン、杜仲
茶サポニンより選ばれる一種または二種以上のサポニン
である前記（１７）記載のグラム陰性菌増殖抑制剤。（１９）多糖類の分解物とタンニン類とグリセリン脂肪
酸エステルまたはポリグリセリン脂肪酸エステルとを併
用することを特徴とするグラム陰性菌増殖抑制剤。（２０）多糖類の分解物とタンニン類とサポニン類とを
併用することを特徴とするグラム陰性菌増殖抑制剤。（２１）畜産物からグラム陰性菌の増殖を抑制すること
を特徴とする前記（１）〜（２０）記載のグラム陰性菌
増殖抑制剤。（２２）畜産物が哺乳動物及び鳥類から得られる生産物
である前記（２１）記載のグラム陰性菌抑制剤。（２３）畜産物が牛乳である前記（２１）記載のグラム
陰性菌抑制剤。（２４）畜産物が鶏卵である前記（２１）記載のグラム
陰性菌抑制剤。（２５）畜産物が動物の内臓である前記（２１）記載の
グラム陰性菌抑制剤。（２６）畜産物が動物の消化管である前記（２１）記載
のグラム陰性菌抑制剤。（２７）畜産物が動物の筋肉である前記（２１）記載の
グラム陰性菌抑制剤。（２８）グラム陰性菌がサルモネラ菌である前期（１）
〜（２７）記載のグラム陰性菌抑制剤。

【００５０】

【発明の効果】本発明のグラム陰性菌増殖抑制剤は哺乳
動物および鳥類のグラム陰性菌の増殖を抑制する。ま
た、それから得られる畜産物についても増殖を抑制す
る。しかも本発明品の有効成分が食品工業で多用されて
いる多糖類の分解物であることからその安全性は極めて
高い。また、タンニン類、グリセリン脂肪酸エステルま
たはポリグリセリン脂肪酸エステル、サポニン類を多糖
類の分解物と併用することによりその増殖抑制効果は極
めて高くなり産業上有用である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】多糖類の分解物を含有することを特徴と
するグラム陰性菌増殖抑制剤。
【請求項２】多糖類の分解物と（＋）−カテキン，
（＋）−ガロカテキン，（−）−ガロカテキンガレー
ト，（−）−エピカテキン，（−）−エピカテキンガレ
ート，（−）−エピガロカテキン，（−）−エピガロカ
テキンガレート，遊離型テアフラビン，テアフラビンモ
ノガレートＡ，テアフラビンモノガレートＢおよびテア
フラビンジガレートの化合物群より選ばれる一種または
二種以上の化合物を併用することを特徴とするグラム陰
性菌増殖抑制剤。
【請求項３】多糖類の分解物とサポニン類を併用する
ことを特徴とするグラム陰性菌増殖抑制剤。
【請求項４】グラム陰性菌の増殖抑制が畜産物のグラ
ム陰性菌の抑制である請求項１〜３記載のグラム陰性菌
増殖抑制剤。
【請求項５】畜産物が鶏卵である請求項４記載のグラ
ム陰性菌抑制剤。