JPH09208431A

JPH09208431A - 毛乳頭細胞増殖促進作用を有する育毛剤

Info

Publication number: JPH09208431A
Application number: JP8020885A
Authority: JP
Inventors: Yutaka Miyauchi; ユタカ宮内; Shigeo Hasegawa; 重男長谷川
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1996-02-07
Filing date: 1996-02-07
Publication date: 1997-08-12

Abstract

(57)【要約】【課題】特定の薬草抽出液または該薬草に由来する毛
乳頭細胞増殖促進作用を有するペプチドを含有する育毛
剤を提供する。【解決手段】オウギエキスを出発原料とし、濃縮後の
水溶液を各種カラムクロマトグラフィー（活性炭、アン
バーライトＩＲ−１２０Ｂ〔Ｈ⁺〕、セルロース、セフ
ァデックスＧ−２５、ＨＰＬＣ）で精製し、白色の粉末
を単離した。本ペプチドは、水溶性の中性物質であり、
ニンヒドリン反応およびニトロプルシドナトリウム反応
は陽性、アニスアルデヒド反応、フェノール硫酸反応お
よびドラーゲンドルフ反応は陰性であった。本ペプチド
の構成アミノ酸はアスパラギン酸およびオキシリシンを
多く含む。本ペプチドは１．４μg/mlでウサギの毛乳頭
細胞の増殖を１５０％促進した。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】この発明は、特定の薬草抽出
液または薬草由来の毛乳頭細胞増殖促進作用を有するペ
プチドを含有し、発毛、育毛促進および脱毛防止効果の
ある育毛剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】脱毛の原因として、男性ホルモン関与に
よる毛包機能の低下、毛包・毛球部の新陳代謝機能の低
下、頭皮生理機能の低下、頭皮緊張による局所血流障
害、栄養不良、ストレス、薬物による副作用、遺伝等の
要因があげられるが、まだ脱毛の原因は完全には解明さ
れていない。このため、市販の育毛剤に含まれる有効成
分は、頭皮の血行促進、毛根の刺激や毛包賦活等の作用
により、二次的に毛関連細胞を活性化させるものであ
る。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】発毛や脱毛メカニズム
の基礎的な研究に基づいて直接毛関連細胞を活性化する
育毛剤が要望されている。この発明の目的は、上記の観
点から、発毛のメカニズムを担っている毛乳頭細胞に直
接作用して、該細胞の増殖を促進する薬草抽出液または
それから得られたペプチドを含有する育毛剤を提供する
ものである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】この発明者は、天然産物
中に毛乳頭細胞増殖促進作用を示す生理活性物質を広範
囲に探索した結果、特定の薬草抽出液またはそれから得
られた新規ペプチドが該活性を有することを見い出し
た。

【０００５】この発明は、オウギ（黄耆）、オウレン
（黄連）、カシュウ（何首鳥）、カンキョウ、カンゾウ
（甘草）、キジツ（枳実）、キョウカツ、クコシ（枸杞
子）、コウブシ（香附子）、サイコ（紫胡）、サンショ
ウ（山椒）、ジオウ（地黄）、シャカンゾウ（炙甘
草）、センキュウ、ソウハクヒ（桑白皮）、タイソウ、
チンピ（陳皮）、トウキ（当帰）、トウニン（桃仁）、
ニンジン（人参）、ゲンチアナ、ツヅラフジ、セネガ、
セロリおよびモクテンリョウ（木天蓼）から選ばれる薬
草のアルコール抽出液を含有する育毛剤である。また、
これら薬草由来の次の物理化学的性質を有するペプチド
を含有する育毛剤である。（１）分子量：２，０００〜４，０００（ゲルろ過法に
よる）（２）赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ法）：図１に示す
とおりであり、３，３５６、３，０８０、１，６７６、
１，６４７、１，６１４、１，５００、１，４２５、
１，４０２、１，３５８、１，３３６、１，２５０、
１，１５１、１，０７２、９８５cm^-1に吸収帯を有す
る。紫外線吸収スペクトル（水中）は特徴的な吸収極大
を示さない。（３）溶解性：水に可溶。エーテル、ベンゼン、クロロ
ホルムに難溶。（４）呈色反応：ニンヒドリン反応およびニトロプルシ
ドナトリウム反応は陽性、アニスアルデヒド反応、フェ
ノール硫酸反応およびドラーゲンドルフ反応は陰性。（５）塩基性、中性、酸性の区別：中性（６）性状：無色の結晶または白色の結晶性粉末であっ
て、わずかに特有の臭いを有する。（７）構成アミノ酸：ホスホセリン、アスパラギン酸、
セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、
シスチン、メチオニン、オキシリシン、オルニチン、リ
シンおよびヒスチジンを含み、そのモル比はリシンを１
とした場合、それぞれ約８：９，１７４：８４：４：
６：４：４：１７：２：１３，６０６：２：１：２であ
り、オキシリシンおよびアスパラギン酸を多く含む。他
にタウリン、ホスホエタノールアミン、尿素を含む。

【０００６】この発明の育毛剤の有効成分であるペプチ
ドは、次のようにして得ることができる。前記薬草をメ
タノール、エタノールのようなアルコールで抽出し、抽
出液をろ過して得たろ液からアルコールを留去し、乾燥
物を得る。この乾燥物を精製水に溶解して水溶液とす
る。

【０００７】得られた水溶液を更にイオン交換樹脂等に
吸着させ、希アンモニア水等の溶出溶媒で溶出し、得ら
れた溶出液を減圧濃縮することにより粗物質を得る。イ
オン交換樹脂の担体の具体例としては強酸性陽イオン交
換樹脂のアンバーライトＩＲ−１２０Ｂ〔Ｈ⁺〕等が挙
げられる。

【０００８】得られた粗物質は、更に水溶性物質の精製
において通常用いられている公知の方法、例えば活性
炭、セルロース、セファデックスＧ−２５、シリカゲ
ル、ゲルろ過等の担体を用いるカラムクロマトグラフィ
ーまたはイオン交換担体を用いる高速液体クロマトグラ
フィーにより精製することができる。このようにして得
られたペプチドを水または含水アルコールに溶解し、ま
たは前記薬草抽出液を、要すれば毛髪用化粧品に常用さ
れている各種成分を配合して、ヘヤトニック、シャンプ
ー、ヘヤクリーム等に製剤して用いられる。特にアロエ
エキスのような殺菌成分を配合したものは好ましい製剤
である。

【０００９】

【実施例】

実施例１；オウギの細片１００ｇに５０ v/v％エタノー
ル１，０００mlを加えてよく撹拌した後、この抽出エキ
スをろ過し、沈殿物を除いたろ液を減圧下でエタノール
を留去し、濃縮乾固して粗抽出物を得た。この粗抽出物
を精製水２L に溶解して水溶液とし、活性炭カラムに通
塔させ、通過液と水洗画分を一緒にして、強酸性陽イオ
ン交換樹脂アンバーライトＩＲ−１２０Ｂ〔Ｈ⁺〕のカ
ラムに吸着させ、０．５N のアンモニア水で活性画分を
溶出後、濃縮乾固し、粗粉末約５ｇを得た。この粗粉末
をセルロースカラムクロマトグラフィーにかけ、ブタノ
ール：酢酸：水＝２０：１：１、１０：１：１および
５：１：１の各２L でカラムを洗浄後、ブタノール：酢
酸：水＝３：１：１の溶出液２L で活性物質を溶出さ
せ、粗精製物１．５ｇを得た。この粗精製物をセファデ
ックスＧ−２５を担体とするゲルろ過（展開溶媒：水）
にかけ、粗精製物６００mgを得た。次いでセルロースカ
ラムクロマトグラフィーにかけ、エタノール：水＝７．
５：１および５：１の各０．５L で洗浄後、エタノー
ル：水＝３：１〜１：１の溶出液１L で活性物質を溶出
させ、粗精製物１００mgを得た。更に陽イオン交換系の
高速液体クロマトグラフィー（展開溶媒：水）により、
毛乳頭細胞増殖促進物質５mgを得た。

【００１０】実験例１ウサギ髭培養毛乳頭細胞に対す
る効果；日本白色系ウサギから分離した髭毛乳頭をコラーゲン
（タイプIV）コートしたシャーレ表面に接着し、勝岡ら
の方法（Katuoka, K., et al.: Arch. Dermatol.Res.,
279, 20-25 (1986)）を改変した２０％牛胎児血清（Ｆ
ＢＳ）および抗生物質添加Dulbecco変法Eagle 培地（Ｄ
ＭＥＭ）にて培養を行い、髭毛乳頭より遊走した初代培
養細胞を得た。この細胞を更に１０％ＦＢＳ−ＤＭＥＭ
にて継代培養し、培養毛乳頭細胞とした。アッセイ法は
培養毛乳頭細胞を１０％ＦＢＳ−ＤＭＥＭに浮遊させて
９６穴プレートに播き、実施例１で得たペプチドの所定
濃度水溶液を２回添加して、６日間培養した。培養毛乳
頭細胞の増殖の有無はＭＴＴ法で調べた。その結果を表
１に示した。

【００１１】

【表１】

【００１２】この結果から、本発明のペプチドが培養毛
乳頭細胞を１５０％増殖促進する濃度は、１．４μg/ml
と低濃度で有効であることがわかる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明のペプチドの赤外線吸収スペクトルを示
す。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】オウギ、オウレン、カシュウ、カンキョ
ウ、カンゾウ、キジツ、キョウカツ、クコシ、コウブ
シ、サイコ、サンショウ、ジオウ、シャカンゾウ、セン
キュウ、ソウハクヒ、タイソウ、チンピ、トウキ、トウ
ニン、ニンジン、ゲンチアナ、ツヅラフジ、セネガ、セ
ロリおよびモクテンリョウから選ばれる薬草のアルコー
ル抽出液を含有する育毛剤。
【請求項２】薬草由来の次の物理的化学的性質を有す
るペプチドを含有する育毛剤。（１）分子量２，０００〜４，０００（ゲルろ過法による）（２）赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ法）：図１に示す
とおり（３）溶解性水に可溶。エーテル、ベンゼン、クロロホルムに難溶（４）呈色反応ニンヒドリン反応およびニトロプルシドナトリウム反応
は陽性；アニスアルデヒド反応、フェノール硫酸反応お
よびドラーゲンドルフ反応は陰性（５）塩基性、中性、酸性の区別中性（６）性状無色の結晶または白色の結晶性粉末であって、わずかに
特有の臭いを有する（７）構成アミノ酸アスパラギン酸およびオキシリシンを含む
【請求項３】構成アミノ酸として、ホスホセリン、ア
スパラギン酸、セリン、グルタミン酸、グリシン、アラ
ニン、バリン、シスチン、メチオニン、オキシリシン、
オルニチン、リシンおよびヒスチジンを含む、請求項２
の育毛剤。
【請求項４】アロエエキスを配合した、請求項１〜３
のいずれか１項の育毛剤。