JPH09318588A - バイオセンサおよびその製造方法 - Google Patents
バイオセンサおよびその製造方法Info
- Publication number
- JPH09318588A JPH09318588A JP8136982A JP13698296A JPH09318588A JP H09318588 A JPH09318588 A JP H09318588A JP 8136982 A JP8136982 A JP 8136982A JP 13698296 A JP13698296 A JP 13698296A JP H09318588 A JPH09318588 A JP H09318588A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polymer
- cellulose
- biosensor
- electrode
- reaction layer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 試料液中の基質を、共存する他の成分による
影響を受けずに高精度に定量できるバイオセンサを提供
することを目的とする。 【解決手段】 電気絶縁性の基板上に作用極と対極から
なる電極系を形成し、電極系上に親水性高分子と酵素と
電子受容体を含む反応層、及び脂溶性高分子と両親媒性
高分子を混合物からなる高分子膜を形成したバイオセン
サ。
影響を受けずに高精度に定量できるバイオセンサを提供
することを目的とする。 【解決手段】 電気絶縁性の基板上に作用極と対極から
なる電極系を形成し、電極系上に親水性高分子と酵素と
電子受容体を含む反応層、及び脂溶性高分子と両親媒性
高分子を混合物からなる高分子膜を形成したバイオセン
サ。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、試料中の特定成分
について、迅速かつ高精度な定量を実施するためのバイ
オセンサおよびその製造方法に関する。
について、迅速かつ高精度な定量を実施するためのバイ
オセンサおよびその製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、試料中の特性成分について、試料
液の希釈や攪拌などを行うことなく簡易に定量しうる方
式として、次のようなバイオセンサが開示されている
（特開平３ー２０２７６４号公報）。従来のバイオセン
サは、電気絶縁性の基板上にスクリーン印刷などの方法
で作用極及び対極からなる電極系を形成し、さらに電気
絶縁層を形成した後に、上記電極上に親水性高分子と酸
化還元酵素と電子受容体からなる酵素反応層を形成した
ものである。基質を含む試料液を酵素反応層上へ接触さ
せると、酵素反応層が溶解し、基質と酵素が反応して基
質が酸化され、これに伴い電子受容体が還元される。酵
素反応終了後、この還元された電子受容体を電気化学的
に酸化し、このとき得られる酸化電流値から試料液中の
基質濃度を求めるものである。
液の希釈や攪拌などを行うことなく簡易に定量しうる方
式として、次のようなバイオセンサが開示されている
（特開平３ー２０２７６４号公報）。従来のバイオセン
サは、電気絶縁性の基板上にスクリーン印刷などの方法
で作用極及び対極からなる電極系を形成し、さらに電気
絶縁層を形成した後に、上記電極上に親水性高分子と酸
化還元酵素と電子受容体からなる酵素反応層を形成した
ものである。基質を含む試料液を酵素反応層上へ接触さ
せると、酵素反応層が溶解し、基質と酵素が反応して基
質が酸化され、これに伴い電子受容体が還元される。酵
素反応終了後、この還元された電子受容体を電気化学的
に酸化し、このとき得られる酸化電流値から試料液中の
基質濃度を求めるものである。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】上記のような従来構成
のバイオセンサにおいては、試料液の基質濃度が同じ場
合でも、試料液に含まれる基質以外の成分が異なること
によって、センサの応答特性に差が生じるという問題を
有していた。試料液の性状の差を緩和する方法として、
一定の希釈液を用いて希釈し、それぞれの性状の差を小
さくする方法も有効であるが、操作性を考慮すると必ず
しも得策ではない。本発明は、試料液中の基質を、共存
する他の成分の影響を受けずに、高精度に定量できるバ
イオセンサを提供することを目的とする。
のバイオセンサにおいては、試料液の基質濃度が同じ場
合でも、試料液に含まれる基質以外の成分が異なること
によって、センサの応答特性に差が生じるという問題を
有していた。試料液の性状の差を緩和する方法として、
一定の希釈液を用いて希釈し、それぞれの性状の差を小
さくする方法も有効であるが、操作性を考慮すると必ず
しも得策ではない。本発明は、試料液中の基質を、共存
する他の成分の影響を受けずに、高精度に定量できるバ
イオセンサを提供することを目的とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明のバイオセンサ
は、電気絶縁性の基板、前記基板上に形成された作用極
と対極を有する電極系、前記電極系上に配置された少な
くとも酵素を含有する反応層および脂溶性高分子と両親
媒性高分子の混合物からなる高分子膜を具備することを
特徴とする。また、本発明のバイオセンサの製造方法
は、電気絶縁性の基板上に設けた作用極と対極を有する
電極上に、少なくとも酵素を含有する反応層を形成する
工程、および脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合物か
らなる高分子膜を形成する工程を有する。ここで、前記
酵素としては、グルコースオキシダーゼ、グルコースデ
ヒドロゲナーゼ、乳酸オキシダーゼ、乳酸デヒドロゲナ
ーゼ、フルクトースデヒドロゲナーゼ、ガラクトースオ
キシダーゼ、コレステロールオキシダーゼ、コレステロ
ールデヒドロゲナーゼ、コレステロールエステラーゼ、
アルコールデヒドロゲナーゼ、アルコールオキシダー
ゼ、アスコルビン酸オキシダーゼ、ビリルビンオキシダ
ーゼなどから選ばれる少なくとも１種が用いられる。ま
た、前記脂溶性高分子としては、エチルセルロース、エ
チルヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、
ベンジルセルロース、酢酸セルロース、三酢酸セルロー
ス、硝酸セルロース、ポリスチレン、ポリカーボネー
ト、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリアクリル酸エ
チル、ポリアクリル酸メチルから選ばれる少なくとも１
種が用いられる。さらに、前記両親媒性高分子として
は、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロ
ース、カルボキシメチルエチルセルロース、カルボキシ
メチルセルロース、ポリメタクリルアミドから選ばれる
少なくとも１種が用いられる。前記高分子層に含まれる
脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合比が、重量比で１
０：１から１：１であることが好ましい。前記高分子膜
は、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液を反応層
の上に接触させ、乾燥させることで形成することができ
る。脂溶性高分子および両親媒性高分子を溶解または分
散させた混合溶液の溶媒としては、メタノール、エタノ
ール、プロパノール、ブタノール、アセトン、トルエ
ン、キシレン、クロロホルム、およびエチルエーテルか
ら選ばれる１種の溶媒、または２種以上の混合溶媒が用
いられる。また、反応層に電子受容体を含有させること
ができ、電子受容体としてはフェリシアン化カリウム、
ｐ−ベンゾキノン、フェナジンメトサルフェート、イン
ドフェノール及びその誘導体、β−ナフトキノン−４−
スルホン酸カリウム、メチレンブルー、フェロセン及び
その誘導体から選ばれる１種以上が用いられる。さら
に、反応層に親水性高分子を含有させることができ、親
水性高分子としてはカルボキシメチルセルロース、ヒド
ロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロー
ス、カルボキシエチルメチルセルロース、ポリビニルピ
ロリドン、ポリビニルアルコール、ゼラチン及びその誘
導体、アクリル酸及びその塩やメタクリル酸及びその塩
の重合体、でんぷんおよびその誘導体、無水マレイン酸
及びその塩の重合体から選ばれる１種以上が用いられ
る。
は、電気絶縁性の基板、前記基板上に形成された作用極
と対極を有する電極系、前記電極系上に配置された少な
くとも酵素を含有する反応層および脂溶性高分子と両親
媒性高分子の混合物からなる高分子膜を具備することを
特徴とする。また、本発明のバイオセンサの製造方法
は、電気絶縁性の基板上に設けた作用極と対極を有する
電極上に、少なくとも酵素を含有する反応層を形成する
工程、および脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合物か
らなる高分子膜を形成する工程を有する。ここで、前記
酵素としては、グルコースオキシダーゼ、グルコースデ
ヒドロゲナーゼ、乳酸オキシダーゼ、乳酸デヒドロゲナ
ーゼ、フルクトースデヒドロゲナーゼ、ガラクトースオ
キシダーゼ、コレステロールオキシダーゼ、コレステロ
ールデヒドロゲナーゼ、コレステロールエステラーゼ、
アルコールデヒドロゲナーゼ、アルコールオキシダー
ゼ、アスコルビン酸オキシダーゼ、ビリルビンオキシダ
ーゼなどから選ばれる少なくとも１種が用いられる。ま
た、前記脂溶性高分子としては、エチルセルロース、エ
チルヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、
ベンジルセルロース、酢酸セルロース、三酢酸セルロー
ス、硝酸セルロース、ポリスチレン、ポリカーボネー
ト、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリアクリル酸エ
チル、ポリアクリル酸メチルから選ばれる少なくとも１
種が用いられる。さらに、前記両親媒性高分子として
は、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロ
ース、カルボキシメチルエチルセルロース、カルボキシ
メチルセルロース、ポリメタクリルアミドから選ばれる
少なくとも１種が用いられる。前記高分子層に含まれる
脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合比が、重量比で１
０：１から１：１であることが好ましい。前記高分子膜
は、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液を反応層
の上に接触させ、乾燥させることで形成することができ
る。脂溶性高分子および両親媒性高分子を溶解または分
散させた混合溶液の溶媒としては、メタノール、エタノ
ール、プロパノール、ブタノール、アセトン、トルエ
ン、キシレン、クロロホルム、およびエチルエーテルか
ら選ばれる１種の溶媒、または２種以上の混合溶媒が用
いられる。また、反応層に電子受容体を含有させること
ができ、電子受容体としてはフェリシアン化カリウム、
ｐ−ベンゾキノン、フェナジンメトサルフェート、イン
ドフェノール及びその誘導体、β−ナフトキノン−４−
スルホン酸カリウム、メチレンブルー、フェロセン及び
その誘導体から選ばれる１種以上が用いられる。さら
に、反応層に親水性高分子を含有させることができ、親
水性高分子としてはカルボキシメチルセルロース、ヒド
ロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロー
ス、カルボキシエチルメチルセルロース、ポリビニルピ
ロリドン、ポリビニルアルコール、ゼラチン及びその誘
導体、アクリル酸及びその塩やメタクリル酸及びその塩
の重合体、でんぷんおよびその誘導体、無水マレイン酸
及びその塩の重合体から選ばれる１種以上が用いられ
る。
【０００５】
【発明の実施の形態】本発明の実施の形態を説明する。
図１は本発明のバイオセンサの、カバーおよびスペーサ
ーを除いた断面模式図である。１はポリエチレンテレフ
タレートからなる電気絶縁性の基板を示す。この基板１
上にスクリーン印刷により銀ペーストを印刷してリード
２、３を形成してある。基板１上には、さらに、同様の
印刷法により、樹脂バインダーを含む導電性カーボンペ
ーストからなる作用極４と対極５を含む電極系及び電気
絶縁性ペーストからなる電気絶縁層６を形成してある。
電気絶縁層６は、作用極４及び対極６の露出部分の面積
を一定とし、かつリードを部分的に覆っている。このよ
うにして電極部分を形成した後に、反応層を作製する。
ここでは一例として、親水性高分子と酵素と電子受容体
を含む反応層について説明する。親水性高分子としてカ
ルボキシメチルセルロース（以下、ＣＭＣと略す。）の
水溶液を電極系表面に滴下し温風乾燥機中で乾燥させて
ＣＭＣ層７を形成する。前記ＣＭＣ層７の上に、酵素と
電子受容体を水に溶解した混合水溶液を滴下し、温風乾
燥機中で乾燥させて、酵素及び電子受容体を含む層８を
形成する。以上のＣＭＣ層７と酵素及び電子受容体を含
む層８を併せて反応層９と称する。
図１は本発明のバイオセンサの、カバーおよびスペーサ
ーを除いた断面模式図である。１はポリエチレンテレフ
タレートからなる電気絶縁性の基板を示す。この基板１
上にスクリーン印刷により銀ペーストを印刷してリード
２、３を形成してある。基板１上には、さらに、同様の
印刷法により、樹脂バインダーを含む導電性カーボンペ
ーストからなる作用極４と対極５を含む電極系及び電気
絶縁性ペーストからなる電気絶縁層６を形成してある。
電気絶縁層６は、作用極４及び対極６の露出部分の面積
を一定とし、かつリードを部分的に覆っている。このよ
うにして電極部分を形成した後に、反応層を作製する。
ここでは一例として、親水性高分子と酵素と電子受容体
を含む反応層について説明する。親水性高分子としてカ
ルボキシメチルセルロース（以下、ＣＭＣと略す。）の
水溶液を電極系表面に滴下し温風乾燥機中で乾燥させて
ＣＭＣ層７を形成する。前記ＣＭＣ層７の上に、酵素と
電子受容体を水に溶解した混合水溶液を滴下し、温風乾
燥機中で乾燥させて、酵素及び電子受容体を含む層８を
形成する。以上のＣＭＣ層７と酵素及び電子受容体を含
む層８を併せて反応層９と称する。
【０００６】前記のように、ＣＭＣ層７上に、酵素及び
電子受容体の混合水溶液を滴下すると、親水性高分子で
あるＣＭＣ層７は一度溶解し、その後の乾燥過程で酵素
などと混合された状態で親水性高分子、酵素および電子
受容体からなる層を形成する。しかし、攪拌を伴わない
ため完全な混合状態とはならず、電極系表面を直接被覆
するのはＣＭＣのみとなる。このＣＭＣ層７により、電
極系表面へのタンパク質の吸着などを防ぐことができ
る。つぎに、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液
を調製し、反応層９の上に滴下して、室温で乾燥させ
る。さらに、温風乾燥機中で乾燥させる。この際に、脂
溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶媒として、
有機溶媒を用いることで、反応層を乱すことなく脂溶性
高分子と両親媒性高分子の混合物からなる高分子膜が表
面に積層される。１０はこのようにして形成された高分
子膜を示す。上記のようにして反応層および高分子膜１
０を形成した後、カバー１２及びスペーサー１１を図２
中の一点鎖線で示すような位置関係をもって基板１に接
着してバイオセンサを作製する。
電子受容体の混合水溶液を滴下すると、親水性高分子で
あるＣＭＣ層７は一度溶解し、その後の乾燥過程で酵素
などと混合された状態で親水性高分子、酵素および電子
受容体からなる層を形成する。しかし、攪拌を伴わない
ため完全な混合状態とはならず、電極系表面を直接被覆
するのはＣＭＣのみとなる。このＣＭＣ層７により、電
極系表面へのタンパク質の吸着などを防ぐことができ
る。つぎに、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液
を調製し、反応層９の上に滴下して、室温で乾燥させ
る。さらに、温風乾燥機中で乾燥させる。この際に、脂
溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶媒として、
有機溶媒を用いることで、反応層を乱すことなく脂溶性
高分子と両親媒性高分子の混合物からなる高分子膜が表
面に積層される。１０はこのようにして形成された高分
子膜を示す。上記のようにして反応層および高分子膜１
０を形成した後、カバー１２及びスペーサー１１を図２
中の一点鎖線で示すような位置関係をもって基板１に接
着してバイオセンサを作製する。
【０００７】上記構成によるバイオセンサは、試料液に
含まれる固形状成分が、脂溶性高分子と両親媒性高分子
の混合物からなる高分子膜１０によってトラップされ
る。特に、血液試料中の赤血球などの血球成分によるセ
ンサの応答特性への影響を小さくすることができる。こ
こで、試料液が水性であるとき、試料液が導入される
と、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合物からなる高
分子膜は、溶解することはない。しかし、高分子膜中の
両親媒性高分子は溶解し、細孔が形成され、フィルター
状の膜となる。脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合比
を重量比で１０：１から１：１にすることで細孔の直径
を０．１μｍ〜５μｍに調整できる。このため、血液試
料に対して有効な濾過効果が得られる。
含まれる固形状成分が、脂溶性高分子と両親媒性高分子
の混合物からなる高分子膜１０によってトラップされ
る。特に、血液試料中の赤血球などの血球成分によるセ
ンサの応答特性への影響を小さくすることができる。こ
こで、試料液が水性であるとき、試料液が導入される
と、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合物からなる高
分子膜は、溶解することはない。しかし、高分子膜中の
両親媒性高分子は溶解し、細孔が形成され、フィルター
状の膜となる。脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合比
を重量比で１０：１から１：１にすることで細孔の直径
を０．１μｍ〜５μｍに調整できる。このため、血液試
料に対して有効な濾過効果が得られる。
【０００８】
【実施例】以下、具体的な実施例を説明する。 《実施例１》バイオセンサの一例として、グルコースセ
ンサについて説明する。図１のようにポリエチレンテレ
フタレートからなる電気絶縁性の基板上にリードと作用
極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形成する。この
ようにして電極部分を形成した後に、親水性高分子とし
てＣＭＣの０．５ｗｔ％水溶液を電極系表面に滴下し、
５０℃の温風乾燥機中で１０分間乾燥させてＣＭＣ層７
を形成した。前記ＣＭＣ層７の上に、酵素としてのグル
コースオキシダーゼ（ＥＣ１．１．３．４；以下ＧＯＤ
と略す）と電子受容体としてのフェリシアン化カリウム
を水に溶解した混合水溶液を滴下し、５０℃の温風乾燥
機中で１０分間乾燥させて、酵素及び電子受容体を含む
層８を形成した。ＣＭＣ層７と酵素及び電子受容体を含
む層８を併せて反応層９とする。
ンサについて説明する。図１のようにポリエチレンテレ
フタレートからなる電気絶縁性の基板上にリードと作用
極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形成する。この
ようにして電極部分を形成した後に、親水性高分子とし
てＣＭＣの０．５ｗｔ％水溶液を電極系表面に滴下し、
５０℃の温風乾燥機中で１０分間乾燥させてＣＭＣ層７
を形成した。前記ＣＭＣ層７の上に、酵素としてのグル
コースオキシダーゼ（ＥＣ１．１．３．４；以下ＧＯＤ
と略す）と電子受容体としてのフェリシアン化カリウム
を水に溶解した混合水溶液を滴下し、５０℃の温風乾燥
機中で１０分間乾燥させて、酵素及び電子受容体を含む
層８を形成した。ＣＭＣ層７と酵素及び電子受容体を含
む層８を併せて反応層９とする。
【０００９】つぎに、脂溶性高分子のエチルセルロース
０．５ｗｔ％と両親媒性高分子のヒドロキシプロピルセ
ルロース０．１ｗｔ％を溶解したエタノール溶液を調製
し、反応層の上に滴下して、室温で５分間乾燥させた。
さらに、５０℃の温風乾燥機中で５分間乾燥させた。こ
の際に、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶
媒として有機溶媒であるエタノールを用いることで、反
応層を乱すことなくエチルセルロースとヒドロキシプロ
ピルセルロースの混合物からなる高分子膜が表面に積層
された。１０はこのようにして形成された高分子膜を示
す。上記のようにして反応層と高分子膜を形成した後、
カバー１２及びスペーサー１１を図２中の一点鎖線で示
すような位置関係をもって基板１に接着してグルコース
センサを作製した。
０．５ｗｔ％と両親媒性高分子のヒドロキシプロピルセ
ルロース０．１ｗｔ％を溶解したエタノール溶液を調製
し、反応層の上に滴下して、室温で５分間乾燥させた。
さらに、５０℃の温風乾燥機中で５分間乾燥させた。こ
の際に、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶
媒として有機溶媒であるエタノールを用いることで、反
応層を乱すことなくエチルセルロースとヒドロキシプロ
ピルセルロースの混合物からなる高分子膜が表面に積層
された。１０はこのようにして形成された高分子膜を示
す。上記のようにして反応層と高分子膜を形成した後、
カバー１２及びスペーサー１１を図２中の一点鎖線で示
すような位置関係をもって基板１に接着してグルコース
センサを作製した。
【００１０】このグルコースセンサの試料液として、等
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
試料液３μｌを試料供給孔となるスペーサー１１のスリ
ット１３の入口に供給すると、試料液はスリット１３に
より形成される試料供給路を空気孔１４の部分まで達
し、高分子膜１０に浸透し、膜を透過した液体によって
反応層が溶解した。反応層においては、試料液中のグル
コースがグルコースオキシダーゼによって酸化され、そ
こで移動した電子によってフェリシアン化カリウムが還
元されてフェロシアン化カリウムを生じる。そこで、試
料を供給してから１分後に、電極系の対極５と作用極４
の間に＋０．５Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測
定したところ、グルコース水溶液、及び血液試料中のグ
ルコース濃度のみに依存する値が得られた。血液試料に
おけるグルコース濃度に対する電流応答値は、グルコー
ス水溶液の約９８％であった。
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
試料液３μｌを試料供給孔となるスペーサー１１のスリ
ット１３の入口に供給すると、試料液はスリット１３に
より形成される試料供給路を空気孔１４の部分まで達
し、高分子膜１０に浸透し、膜を透過した液体によって
反応層が溶解した。反応層においては、試料液中のグル
コースがグルコースオキシダーゼによって酸化され、そ
こで移動した電子によってフェリシアン化カリウムが還
元されてフェロシアン化カリウムを生じる。そこで、試
料を供給してから１分後に、電極系の対極５と作用極４
の間に＋０．５Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測
定したところ、グルコース水溶液、及び血液試料中のグ
ルコース濃度のみに依存する値が得られた。血液試料に
おけるグルコース濃度に対する電流応答値は、グルコー
ス水溶液の約９８％であった。
【００１１】《比較例１》高分子膜１０を設けない他は
実施例１と同じ構成のセンサを作製した。このセンサを
用いた場合は、血液に対する応答はグルコース水溶液の
７０〜８０％であった。
実施例１と同じ構成のセンサを作製した。このセンサを
用いた場合は、血液に対する応答はグルコース水溶液の
７０〜８０％であった。
【００１２】《実施例２》実施例１と同様にして、ポリ
エチレンテレフタレートからなる電気絶縁性の基板上に
リードと作用極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形
成した。さらに、実施例１と同様にして、ＣＭＣ層７と
酵素及び電子受容体を含む層８を形成した。つぎに、エ
チルセルロース０．５ｗｔ％とポリビニルピロリドン
０．０５ｗｔ％を含む混合エタノール溶液を調製し、反
応層の上に滴下し、室温で５分間乾燥させた。さらに、
５０℃の温風乾燥機中で５分間乾燥させた。この際に、
脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶媒として
有機溶媒であるエタノールを用いることで、反応層を乱
すことなくエチルセルロースとポリビニルピロリドンの
混合物からなる高分子膜１０が表面に積層された。さら
に、実施例１と同様にカバー及びスペーサーとともに一
体化してグルコースセンサを作製した。
エチレンテレフタレートからなる電気絶縁性の基板上に
リードと作用極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形
成した。さらに、実施例１と同様にして、ＣＭＣ層７と
酵素及び電子受容体を含む層８を形成した。つぎに、エ
チルセルロース０．５ｗｔ％とポリビニルピロリドン
０．０５ｗｔ％を含む混合エタノール溶液を調製し、反
応層の上に滴下し、室温で５分間乾燥させた。さらに、
５０℃の温風乾燥機中で５分間乾燥させた。この際に、
脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶媒として
有機溶媒であるエタノールを用いることで、反応層を乱
すことなくエチルセルロースとポリビニルピロリドンの
混合物からなる高分子膜１０が表面に積層された。さら
に、実施例１と同様にカバー及びスペーサーとともに一
体化してグルコースセンサを作製した。
【００１３】このグルコースセンサの試料液として、等
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
実施例１と同様に、試料液３μｌを試料供給孔より供給
してから１分後に、電極系の対極と作用極間に＋０．５
Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測定したところ、
グルコース水溶液、及び血液試料中のグルコース濃度の
みに依存する値が得られた。血液試料におけるグルコー
ス濃度に対する電流応答値はグルコース水溶液の約９５
％であった。
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
実施例１と同様に、試料液３μｌを試料供給孔より供給
してから１分後に、電極系の対極と作用極間に＋０．５
Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測定したところ、
グルコース水溶液、及び血液試料中のグルコース濃度の
みに依存する値が得られた。血液試料におけるグルコー
ス濃度に対する電流応答値はグルコース水溶液の約９５
％であった。
【００１４】《実施例３》実施例１と同様にして、ポリ
エチレンテレフタレートからなる電気絶縁性の基板上に
リードと作用極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形
成した。さらに、実施例１と同様にして、ＣＭＣ層７と
酵素及び電子受容体を含む層８を形成した。つぎに、エ
チルセルロース０．５ｗｔ％とポリビニルピロリドン
０．０５ｗｔ％を含む混合ブタノール溶液を調製し、反
応層の上に滴下して、室温で５分間乾燥させた。さら
に、５０℃の温風乾燥機中で５分間乾燥させた。この際
に、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶媒と
して有機溶媒であるブタノールを用いることで、反応層
を乱すことなくエチルセルロースとポリビニルピロリド
ンの混合物からなる高分子膜１０が表面に積層された。
さらに、実施例１と同様にカバー及びスペーサーととも
に一体化してグルコースセンサを作製した。
エチレンテレフタレートからなる電気絶縁性の基板上に
リードと作用極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形
成した。さらに、実施例１と同様にして、ＣＭＣ層７と
酵素及び電子受容体を含む層８を形成した。つぎに、エ
チルセルロース０．５ｗｔ％とポリビニルピロリドン
０．０５ｗｔ％を含む混合ブタノール溶液を調製し、反
応層の上に滴下して、室温で５分間乾燥させた。さら
に、５０℃の温風乾燥機中で５分間乾燥させた。この際
に、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶媒と
して有機溶媒であるブタノールを用いることで、反応層
を乱すことなくエチルセルロースとポリビニルピロリド
ンの混合物からなる高分子膜１０が表面に積層された。
さらに、実施例１と同様にカバー及びスペーサーととも
に一体化してグルコースセンサを作製した。
【００１５】このグルコースセンサの試料液として、等
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
実施例１と同様に、試料液３μｌを試料供給孔より供給
してから１分後に、電極系の対極と作用極間に＋０．５
Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測定したところ、
グルコース水溶液及び血液試料中のグルコース濃度のみ
に依存した値が得られた。血液試料ににおけるグルコー
ス濃度に対する電流応答値はグルコース水溶液の約９７
％であった。
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
実施例１と同様に、試料液３μｌを試料供給孔より供給
してから１分後に、電極系の対極と作用極間に＋０．５
Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測定したところ、
グルコース水溶液及び血液試料中のグルコース濃度のみ
に依存した値が得られた。血液試料ににおけるグルコー
ス濃度に対する電流応答値はグルコース水溶液の約９７
％であった。
【００１６】《実施例４》実施例１と同様にして、ポリ
エチレンテレフタレートからなる電気絶縁性の基板上に
リードと作用極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形
成した。さらに、実施例１と同様にして、ＣＭＣ層７と
酵素及び電子受容体を含む層８を形成した。つぎに、ポ
リスチレン０．３ｗｔ％とポリビニルピロリドン０．３
ｗｔ％を含む混合トルエン溶液を調製し、反応層の上に
滴下して、室温で５分間乾燥させた。さらに、５０℃の
温風乾燥機中で５分間乾燥させた。この際に、脂溶性高
分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶媒として有機溶媒
であるトルエンを用いることで、反応層を乱すことなく
ポリスチレンとポリビニルピロリドンの混合物からなる
高分子膜が表面に積層された。さらに、実施例１と同様
にカバー及びスペーサーとともに一体化してグルコース
センサを作製した。
エチレンテレフタレートからなる電気絶縁性の基板上に
リードと作用極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形
成した。さらに、実施例１と同様にして、ＣＭＣ層７と
酵素及び電子受容体を含む層８を形成した。つぎに、ポ
リスチレン０．３ｗｔ％とポリビニルピロリドン０．３
ｗｔ％を含む混合トルエン溶液を調製し、反応層の上に
滴下して、室温で５分間乾燥させた。さらに、５０℃の
温風乾燥機中で５分間乾燥させた。この際に、脂溶性高
分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶媒として有機溶媒
であるトルエンを用いることで、反応層を乱すことなく
ポリスチレンとポリビニルピロリドンの混合物からなる
高分子膜が表面に積層された。さらに、実施例１と同様
にカバー及びスペーサーとともに一体化してグルコース
センサを作製した。
【００１７】このグルコースセンサの試料液として、等
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
実施例１と同様に、試料液３μｌを試料供給孔より供給
してから１分後に、電極系の対極と作用極間に＋０．５
Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測定したところ、
グルコース水溶液、及び血液試料中のグルコース濃度の
みに依存する値が得られた。血液試料におけるグルコー
ス濃度に対する電流応答値はグルコース水溶液の約９５
％であった。
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
実施例１と同様に、試料液３μｌを試料供給孔より供給
してから１分後に、電極系の対極と作用極間に＋０．５
Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測定したところ、
グルコース水溶液、及び血液試料中のグルコース濃度の
みに依存する値が得られた。血液試料におけるグルコー
ス濃度に対する電流応答値はグルコース水溶液の約９５
％であった。
【００１８】《比較例２》実施例１と同様にして、ポリ
エチレンテレフタレートからなる電気絶縁性の基板上に
リードと作用極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形
成した。さらに、実施例１と同様にして、ＣＭＣ層７と
酵素及び電子受容体を含む層８を形成した。つぎに、エ
チルセルロース０．３ｗｔ％とヒドロキシプロピルセル
ロース０．５ｗｔ％を含む混合エタノール溶液を調製
し、反応層の上に滴下して、室温で５分間乾燥させた。
さらに、５０℃の温風乾燥機中で５分間乾燥させた。こ
の際に、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶
媒として有機溶媒であるエタノールを用いることで、反
応層を乱すことなくエチルセルロースとヒドロキシプロ
ピルセルロースの混合物からなる高分子膜が表面に積層
された。さらに、実施例１と同様にカバー及びスペーサ
ーとともに一体化してグルコースセンサを作製した。
エチレンテレフタレートからなる電気絶縁性の基板上に
リードと作用極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形
成した。さらに、実施例１と同様にして、ＣＭＣ層７と
酵素及び電子受容体を含む層８を形成した。つぎに、エ
チルセルロース０．３ｗｔ％とヒドロキシプロピルセル
ロース０．５ｗｔ％を含む混合エタノール溶液を調製
し、反応層の上に滴下して、室温で５分間乾燥させた。
さらに、５０℃の温風乾燥機中で５分間乾燥させた。こ
の際に、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶
媒として有機溶媒であるエタノールを用いることで、反
応層を乱すことなくエチルセルロースとヒドロキシプロ
ピルセルロースの混合物からなる高分子膜が表面に積層
された。さらに、実施例１と同様にカバー及びスペーサ
ーとともに一体化してグルコースセンサを作製した。
【００１９】このグルコースセンサの試料液として、等
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
実施例１と同様に、試料液３μｌを試料供給孔より供給
してから１分後に、電極系の対極と作用極間に＋０．５
Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測定したところ、
グルコース水溶液、及び血液試料中のグルコース濃度の
みに依存する値が得られた。血液試料におけるグルコー
ス濃度に対する電流応答値はグルコース水溶液の約６
６．５％であった。エチルセルロース０．３ｗｔ％とヒ
ドロキシプロピルセルロース０．５ｗｔ％を含む混合エ
タノール溶液をガラス板の上にキャストして作製した膜
は、水に濡れると崩壊し、膜の状態を保つことができな
かった。このことから、血液に対する濾過効果が得られ
なかったものと考えられる。
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
実施例１と同様に、試料液３μｌを試料供給孔より供給
してから１分後に、電極系の対極と作用極間に＋０．５
Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測定したところ、
グルコース水溶液、及び血液試料中のグルコース濃度の
みに依存する値が得られた。血液試料におけるグルコー
ス濃度に対する電流応答値はグルコース水溶液の約６
６．５％であった。エチルセルロース０．３ｗｔ％とヒ
ドロキシプロピルセルロース０．５ｗｔ％を含む混合エ
タノール溶液をガラス板の上にキャストして作製した膜
は、水に濡れると崩壊し、膜の状態を保つことができな
かった。このことから、血液に対する濾過効果が得られ
なかったものと考えられる。
【００２０】《比較例３》実施例１と同様にして、ポリ
エチレンテレフタレートからなる電気絶縁性の基板上に
リードと作用極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形
成した。さらに、実施例１と同様にして、ＣＭＣ層７と
酵素及び電子受容体を含む層８を形成した。つぎに、エ
チルセルロース０．５ｗｔ％とヒドロキシプロピルセル
ロース０．０１ｗｔ％を含む混合エタノール溶液を調製
し、反応層の上に滴下して、室温で５分間乾燥させた。
さらに、５０℃の温風乾燥機中で５分間乾燥させた。こ
の際に、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶
媒として有機溶媒であるエタノールを用いることで、反
応層を乱すことなくエチルセルロースとヒドロキシプロ
ピルセルロースの混合物からなる高分子膜が表面に積層
された。さらに、実施例１と同様にカバー及びスペーサ
ーとともに一体化してグルコースセンサを作製した。
エチレンテレフタレートからなる電気絶縁性の基板上に
リードと作用極、対極を含む電極系及び電気絶縁層を形
成した。さらに、実施例１と同様にして、ＣＭＣ層７と
酵素及び電子受容体を含む層８を形成した。つぎに、エ
チルセルロース０．５ｗｔ％とヒドロキシプロピルセル
ロース０．０１ｗｔ％を含む混合エタノール溶液を調製
し、反応層の上に滴下して、室温で５分間乾燥させた。
さらに、５０℃の温風乾燥機中で５分間乾燥させた。こ
の際に、脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合溶液の溶
媒として有機溶媒であるエタノールを用いることで、反
応層を乱すことなくエチルセルロースとヒドロキシプロ
ピルセルロースの混合物からなる高分子膜が表面に積層
された。さらに、実施例１と同様にカバー及びスペーサ
ーとともに一体化してグルコースセンサを作製した。
【００２１】このグルコースセンサの試料液として、等
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
実施例１と同様に、試料液３μｌを試料供給孔より供給
してから１分後に、電極系の対極と作用極間に＋０．５
Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測定したところ、
グルコース水溶液、及び血液試料のいずれにおいてもグ
ルコース濃度に依存する値は得られなかった。別に、エ
チルセルロース０．５ｗｔ％とヒドロキシプロピルセル
ロース０．０１ｗｔ％を含む混合エタノール溶液をガラ
ス板の上にキャストして作製した膜は、撥水性が高く１
０分経過しても、液体を通さなかった。このことから、
反応層が溶解できないため、センサ応答が得られなかっ
たものと考えられる。
グルコース濃度のグルコース水溶液と血液を用意した。
実施例１と同様に、試料液３μｌを試料供給孔より供給
してから１分後に、電極系の対極と作用極間に＋０．５
Ｖの電圧を印加し、５秒後の電流値を測定したところ、
グルコース水溶液、及び血液試料のいずれにおいてもグ
ルコース濃度に依存する値は得られなかった。別に、エ
チルセルロース０．５ｗｔ％とヒドロキシプロピルセル
ロース０．０１ｗｔ％を含む混合エタノール溶液をガラ
ス板の上にキャストして作製した膜は、撥水性が高く１
０分経過しても、液体を通さなかった。このことから、
反応層が溶解できないため、センサ応答が得られなかっ
たものと考えられる。
【００２２】上記実施例のように、脂溶性高分子と両親
媒性高分子を混合物からなる高分子膜１０を形成したグ
ルコースセンサにおいて、血液とグルコース水溶液でほ
ぼ同一の応答値が得られたのは、血液中の血球成分が、
両親媒性高分子の溶解によってできた細孔を有する高分
子膜によって濾過され、グルコースオキシダーゼとグル
コースの反応への物理的障害を取り除くことができたこ
とによるものと推定される。上記の実施例においては、
脂溶性高分子としてエチルセルロースとポリスチレンを
用いたが、エチルヒドロキシエチルセルロース、メチル
セルロース、ベンジルセルロース、酢酸セルロース、三
酢酸セルロース、硝酸セルロース、ポリカーボネート、
ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリアクリル酸エチ
ル、ポリアクリル酸メチルを用いても同様の効果が得ら
れる。脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合比は、種々
の混合比の溶液から高分子膜を形成し、水に濡れたとき
に膜の状態を保つかどうかと、高分子膜の表面の電子顕
微鏡による観察結果から、重量比にして１０：１から
１：１であることが好ましい。また、脂溶性高分子と両
親媒性高分子を溶解または分散させる溶媒として、エタ
ノールとブタノールとトルエンを用いたが、メタノー
ル、プロパノール、アセトン、キシレン、クロロホル
ム、エチルエーテルから選ばれる１種類の溶媒または２
種類以上の混合溶媒として用いることができる。
媒性高分子を混合物からなる高分子膜１０を形成したグ
ルコースセンサにおいて、血液とグルコース水溶液でほ
ぼ同一の応答値が得られたのは、血液中の血球成分が、
両親媒性高分子の溶解によってできた細孔を有する高分
子膜によって濾過され、グルコースオキシダーゼとグル
コースの反応への物理的障害を取り除くことができたこ
とによるものと推定される。上記の実施例においては、
脂溶性高分子としてエチルセルロースとポリスチレンを
用いたが、エチルヒドロキシエチルセルロース、メチル
セルロース、ベンジルセルロース、酢酸セルロース、三
酢酸セルロース、硝酸セルロース、ポリカーボネート、
ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリアクリル酸エチ
ル、ポリアクリル酸メチルを用いても同様の効果が得ら
れる。脂溶性高分子と両親媒性高分子の混合比は、種々
の混合比の溶液から高分子膜を形成し、水に濡れたとき
に膜の状態を保つかどうかと、高分子膜の表面の電子顕
微鏡による観察結果から、重量比にして１０：１から
１：１であることが好ましい。また、脂溶性高分子と両
親媒性高分子を溶解または分散させる溶媒として、エタ
ノールとブタノールとトルエンを用いたが、メタノー
ル、プロパノール、アセトン、キシレン、クロロホル
ム、エチルエーテルから選ばれる１種類の溶媒または２
種類以上の混合溶媒として用いることができる。
【００２３】なお、上記の実施例ではグルコースセンサ
について示したが、本発明はアルコールセンサ、スクロ
ースセンサ、コレステロールセンサ、乳酸センサやフル
クトースセンサなどの酵素の関与する反応系に広く用い
ることができる。酵素としては、グルコースオキシダー
ゼに限定されることはなく、グルコースデヒドロゲナー
ゼ、アルコールオキシダーゼ、アルコールデヒドロゲナ
ーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、コレステロールオキ
シダーゼ、コレステロールデヒドロゲナーゼ、コレステ
ロールエステラーゼ、乳酸オキシダーゼ、乳酸デヒドロ
ゲナーゼ、フルクトースデヒドロゲナーゼ、アスコルビ
ン酸オキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼなども用い
ることができる。さらに、上記実施例では、親水性高分
子としてＣＭＣを用いたが、これらに限定することはな
く、他のセルロース誘導体、ヒドロキシエチルセルロー
ス、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシエチル
メチルセルロースを用いても良く、さらには、ポリビニ
ルピロリドン、ポリビニルアルコール、ゼラチン及びそ
の誘導体、アクリル酸及びその塩やメタクリル酸及びそ
の塩の重合体、でんぷんおよびその誘導体、無水マレイ
ン酸及びその塩の重合体を用いても同様の効果が得られ
る。
について示したが、本発明はアルコールセンサ、スクロ
ースセンサ、コレステロールセンサ、乳酸センサやフル
クトースセンサなどの酵素の関与する反応系に広く用い
ることができる。酵素としては、グルコースオキシダー
ゼに限定されることはなく、グルコースデヒドロゲナー
ゼ、アルコールオキシダーゼ、アルコールデヒドロゲナ
ーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、コレステロールオキ
シダーゼ、コレステロールデヒドロゲナーゼ、コレステ
ロールエステラーゼ、乳酸オキシダーゼ、乳酸デヒドロ
ゲナーゼ、フルクトースデヒドロゲナーゼ、アスコルビ
ン酸オキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼなども用い
ることができる。さらに、上記実施例では、親水性高分
子としてＣＭＣを用いたが、これらに限定することはな
く、他のセルロース誘導体、ヒドロキシエチルセルロー
ス、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシエチル
メチルセルロースを用いても良く、さらには、ポリビニ
ルピロリドン、ポリビニルアルコール、ゼラチン及びそ
の誘導体、アクリル酸及びその塩やメタクリル酸及びそ
の塩の重合体、でんぷんおよびその誘導体、無水マレイ
ン酸及びその塩の重合体を用いても同様の効果が得られ
る。
【００２４】一方、電子受容体としては、上記実施例に
示したフェリシアン化カリウム以外に、ｐ−ベンゾキノ
ン、フェナジンメトサルフェート、インドフェノール及
びその誘導体、β−ナフトキノン−４−スルホン酸カリ
ウム、メチレンブルー、フェロセン及びその誘導体など
も使用できる。これらの親水性高分子及び、酵素と電子
受容体を溶解する溶媒として、上記実施例では水を用い
たが、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、ト
リス塩酸緩衝液などの各種緩衝液を用いることもでき
る。また、上記実施例において酵素および電子受容体に
ついては試料液に溶解する方式について示したが、これ
に制限されることはなく、固定化によって試料液に不溶
化させた場合にも適用することができる。また、上記実
施例では、親水性高分子と酵素と電子受容体を含む反応
層について示したが、親水性高分子または電子受容体の
両方もしくは片方を含有しない場合にも同様の結果が得
られた。また、上記実施例では、作用極と対極のみの二
極電極系について述べたが、参照極を加えた三電極方式
にすれば、より正確な測定が可能である。
示したフェリシアン化カリウム以外に、ｐ−ベンゾキノ
ン、フェナジンメトサルフェート、インドフェノール及
びその誘導体、β−ナフトキノン−４−スルホン酸カリ
ウム、メチレンブルー、フェロセン及びその誘導体など
も使用できる。これらの親水性高分子及び、酵素と電子
受容体を溶解する溶媒として、上記実施例では水を用い
たが、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、ト
リス塩酸緩衝液などの各種緩衝液を用いることもでき
る。また、上記実施例において酵素および電子受容体に
ついては試料液に溶解する方式について示したが、これ
に制限されることはなく、固定化によって試料液に不溶
化させた場合にも適用することができる。また、上記実
施例では、親水性高分子と酵素と電子受容体を含む反応
層について示したが、親水性高分子または電子受容体の
両方もしくは片方を含有しない場合にも同様の結果が得
られた。また、上記実施例では、作用極と対極のみの二
極電極系について述べたが、参照極を加えた三電極方式
にすれば、より正確な測定が可能である。
【００２５】
【発明の効果】以上のように本発明によると、試料液中
に共存する基質以外の成分の影響を受けず、高精度な定
量が可能なバイオセンサを提供することができる。
に共存する基質以外の成分の影響を受けず、高精度な定
量が可能なバイオセンサを提供することができる。
【図１】本発明のバイオセンサのカバーおよびスペーサ
ーを除いた縦断面略図である。
ーを除いた縦断面略図である。
【図２】同バイオセンサの反応層および高分子膜を除い
た分解斜視図である。
た分解斜視図である。
１ 電気絶縁性の基板 ２、３ リード ４ 作用極 ５ 対極 ６ 電気絶縁層 ７ ＣＭＣ層 ８ 酵素及び電子受容体を含む層 ９ 反応層 １０ 高分子膜 １１ スペーサー １２ カバー １３ スリット １４ 空気孔
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 南海 史朗 大阪府門真市大字門真1006番地 松下電器 産業株式会社内
Claims (7)
- 【請求項１】 電気絶縁性の基板、前記基板上に形成さ
れた作用極と対極を有する電極系、前記電極系上に配置
された少なくとも酵素を含有する反応層および脂溶性高
分子と両親媒性高分子の混合物からなる高分子膜を具備
することを特徴とするバイオセンサ。 - 【請求項２】 反応層がさらに電子受容体または親水性
高分子を含有する請求項１記載のバイオセンサ。 - 【請求項３】 脂溶性高分子が、エチルセルロース、エ
チルヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、
ベンジルセルロース、酢酸セルロース、三酢酸セルロー
ス、硝酸セルロース、ポリスチレン、ポリカーボネー
ト、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリアクリル酸エ
チル、およびポリアクリル酸メチルからなる群より選ば
れる少なくとも一種である請求項１または２記載のバイ
オセンサ。 - 【請求項４】 両親媒性高分子が、ポリビニルピロリド
ン、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチル
エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、およ
びポリメタクリルアミドからなる群より選ばれる少なく
とも一種である請求項１〜３のいずれかに記載のバイオ
センサ。 - 【請求項５】 高分子膜に含まれる脂溶性高分子と両親
媒性高分子の混合比が、重量比で１０：１から１：１で
ある請求項１〜４のいずれかに記載のバイオセンサ。 - 【請求項６】 電気絶縁性の基板上に作用極と対極を含
む電極系を形成する工程、前記電極系上に、少なくとも
酵素を含有する反応層を形成する工程、および脂溶性高
分子と両親媒性高分子の混合溶液から高分子膜を形成す
る工程を有することを特徴とするバイオセンサの製造方
法。 - 【請求項７】 脂溶性高分子および両親媒性高分子を溶
解または分散する溶媒が、メタノール、エタノール、プ
ロパノール、ブタノール、アセトン、トルエン、キシレ
ン、クロロホルム、およびエチルエーテルからなる群よ
り選ばれる１種の溶媒または２種以上の混合溶媒である
請求項６記載のバイオセンサの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13698296A JP3745452B2 (ja) | 1996-05-30 | 1996-05-30 | バイオセンサおよびその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13698296A JP3745452B2 (ja) | 1996-05-30 | 1996-05-30 | バイオセンサおよびその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09318588A true JPH09318588A (ja) | 1997-12-12 |
| JP3745452B2 JP3745452B2 (ja) | 2006-02-15 |
Family
ID=15188011
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13698296A Expired - Fee Related JP3745452B2 (ja) | 1996-05-30 | 1996-05-30 | バイオセンサおよびその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3745452B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002010734A1 (en) * | 2000-07-31 | 2002-02-07 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| WO2002010735A1 (en) * | 2000-07-31 | 2002-02-07 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| WO2002035222A1 (en) | 2000-10-27 | 2002-05-02 | Arkray, Inc. | Biosensor |
| WO2002054054A1 (en) * | 2000-12-27 | 2002-07-11 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| JP2009516168A (ja) * | 2005-11-14 | 2009-04-16 | バイエル・ヘルスケア・エルエルシー | セルロースポリマーを有する試験センサ試薬 |
-
1996
- 1996-05-30 JP JP13698296A patent/JP3745452B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002010734A1 (en) * | 2000-07-31 | 2002-02-07 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| WO2002010735A1 (en) * | 2000-07-31 | 2002-02-07 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| US6776888B2 (en) | 2000-07-31 | 2004-08-17 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| US6966977B2 (en) | 2000-07-31 | 2005-11-22 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| WO2002035222A1 (en) | 2000-10-27 | 2002-05-02 | Arkray, Inc. | Biosensor |
| US6982027B2 (en) | 2000-10-27 | 2006-01-03 | Arkray, Inc. | Biosensor |
| WO2002054054A1 (en) * | 2000-12-27 | 2002-07-11 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| US6719887B2 (en) | 2000-12-27 | 2004-04-13 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| JP2009516168A (ja) * | 2005-11-14 | 2009-04-16 | バイエル・ヘルスケア・エルエルシー | セルロースポリマーを有する試験センサ試薬 |
| US8940153B2 (en) | 2005-11-14 | 2015-01-27 | Bayer Healthcare Llc | Test sensor reagent having cellulose polymers |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3745452B2 (ja) | 2006-02-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0856586B1 (en) | Biosensor and method of manufacturing the same | |
| JP3370504B2 (ja) | バイオセンサ | |
| JP2517153B2 (ja) | バイオセンサおよびその製造法 | |
| JP3297630B2 (ja) | バイオセンサ | |
| EP1118675B1 (en) | Biosensor | |
| EP0849589B1 (en) | Cholesterol sensor and method for producing the same | |
| JP3102613B2 (ja) | バイオセンサ | |
| US20040020777A1 (en) | Biosensor | |
| JPH0262952A (ja) | バイオセンサ及びその製造方法 | |
| WO2003048756A1 (en) | Biosensor | |
| EP1124131B1 (en) | Biosensor and method of producing the same | |
| JPH0816664B2 (ja) | バイオセンサおよびその製造法 | |
| JP3272882B2 (ja) | バイオセンサおよびその製造方法 | |
| JP3745452B2 (ja) | バイオセンサおよびその製造方法 | |
| JP3437016B2 (ja) | バイオセンサおよびそれを用いた基質の定量方法 | |
| JP2004264247A (ja) | バイオセンサ | |
| JPH02245650A (ja) | バイオセンサ | |
| JP3214188B2 (ja) | バイオセンサおよびその製造法 | |
| JP3070818B2 (ja) | バイオセンサおよびその製造方法 | |
| JP3494394B2 (ja) | バイオセンサおよびその製造方法 | |
| JP3611268B2 (ja) | バイオセンサおよびその製造方法 | |
| JPH112618A (ja) | コレステロールセンサおよびその製造方法 | |
| JP3429581B2 (ja) | バイオセンサ | |
| JP2004061496A (ja) | バイオセンサ | |
| JP3163218B2 (ja) | バイオセンサの製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20040408 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050816 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20050921 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20051104 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20051117 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091202 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091202 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101202 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111202 Year of fee payment: 6 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |