JPH09506340A - 結腸直腸癌細胞に特異的に結合する組成物およびその使用方法 - Google Patents

結腸直腸癌細胞に特異的に結合する組成物およびその使用方法

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Abstract

(57)【要約】 ＳＴ受容体結合部分および放射安定性有効部分を有するコンジュゲート化合物が開示される。ＳＴ受容体結合部分および放射安定性有効部分、あるいはＳＴ受容体結合部分および放射活性有効部分を有するコンジュゲート化合物を含む薬剤組成物が開示される。転移した結腸直腸癌を病んでいると予想される個体の治療方法が開示される。転移した結腸直腸癌をラジオイメージするための方法は開示される。個体が転移した結腸直腸癌細胞を有するか否かを判断するための、腫瘍細胞が結腸直腸に由来するか否かを判断するたんの、そして結腸組織に由来する組織試料を分析して結腸直腸腫瘍細胞の転移の度合いを評価するためのｉｎ ｖｉｔｒｏの方法、キットおよび試薬が提供される。

Description

【発明の詳細な説明】 結腸直腸癌細胞に特異的に結合する組成物 およびその使用方法 発明の分野 本発明は、治療用部分またはイメージ形成部分に結合した、ＳＴ受容体（レセ プター）に結合する受容体リガンド部分を含む化合物、ならびに結腸直腸癌、特 に転移した腫瘍の検出および治療における用途に関するものである。本発明は、 試料中の転移した結腸直腸腫瘍細胞を検出するための、腫瘍が結腸直腸由来のも のであるか否かを判定するための、また結腸から得た試料中の結腸直腸腫瘍細胞 の侵襲活性の程度を評価するための、組成物およびキットならびに方法に関する ものである。本出願は、米国特許出願第０８／１４１，８９２号（１９９３年１ ０月２６日出願）および米国特許出願第０８／３０５，０５６号（１９９４年９ 月１３日出願）に関連するものであり、両者の開示事項が本明細書に参考として 含まれるものとする。 発明の背景 結腸直腸癌は世界的に３番目に極めて一般的な新生物である。新たに診断され た大腸癌の致死率は５０％に接近し、過去４０年間にわたってほとんど改善され ていない。これらの死亡の大部分が局所的、領域的および遠方への転移を示して いる。 手術が結腸直腸癌の治療の支えであるが、再発の頻度が高い。５−フルオロウ ラシルとレバミソールの併用によってわずかな成功が得られてはいるが、結腸直 腸癌は化学療法に対して耐性であることが分かっている。手術は生存に対する最 大の効果をもたらし、疾患が限定されている若干の患者においては治癒が得られ る。しかし手術は大部分の腫瘍を取り除くが、微小な残存疾患を後に残し、これ が最終的に再燃をもたらす。 一次疾患、転移性疾患および再発性疾患の早期検出は、結腸直腸癌を伴う個体 の予後に重要な効果をもつ可能性がある。初期の段階で診断された大腸癌は、よ り進行した段階において診断された場合より有意に良好な結果を示す。同様に、 早期の転移性疾患または再発性疾患の診断ほど良好な予後をもたらす可能性があ る。 現存する放射性治療剤、化学治療剤および生物毒素は有効な細胞毒素であるが 、それらは正常細胞と癌細胞を識別せず、不都合な作用および用量を制限する毒 性を生じる。過去十年間にわたって、薬剤を腫瘍細胞に対してより特異的に標的 を定めるために新しい方法が採用されている。これは、主として腫瘍細胞に存在 する抗原に優先的に結合する分子に有効薬剤をコンジュゲートさせることによる 。これらのコンジュゲートを全身的に投与し、標的とする腫瘍細胞に特異的に結 合させることができる。理論的には標的法は、正常組織において著しい毒性を生 じない濃度で、細胞に細胞毒性薬剤を取り込ませることができる。また標的とす る腫瘍細胞への選択的な結合は、潜在性腫瘍の検出を容易にし、従ってイメージ 形成剤の設計に有用である。分子標的法は主として、腫瘍細胞において選択的に 発現する抗原に対して産生されたモノクローナル抗体を用いている。 腫瘍特異性マーカー指向性のモノクローナル抗体を用いるイムノシンチグラフ ィーが結腸直腸癌の診断に利用されている。99テクネチウムで標識した癌胎児性 抗原（ＣＥＡ）に対するモノクローナル抗体が、再発性腫瘍を伴う患者の９４％ を同定した。同様に111インジウム標識された抗−ＣＥＡモノクローナル抗体が 、通常の方法では診断されなかった再発性結腸直腸癌を伴う患者の８５％の診断 に成功した。125ヨウ素標識された抗体は、ｉｎｔｒａｏｐｅｒａｔｉｖｅガン マプローブ走査によって病理学的に確認された再発の８０％以上の位置を判定す るのに有効であった。 モノクローナル抗体は、特異的治療剤が結腸直腸癌を標的とするのにも用いら れている。症状発現前の研究により、90イットリウムで標識された抗−ＣＥＡ抗 体がヌードマウスにおいてヒト結腸癌異種移植を阻害することが証明された。結 腸直腸癌細胞に対して産生され、マイトマイシンＣまたはネオカルジノスタチン にカップリングした抗体は、ヌードマウスおよび結腸癌を伴う３人の患者におい てヒト結腸癌異種移植に対し抗腫瘍作用を示した。リシン（ｒｉｃｉｎ）毒素Ａ 鎖にコンジュゲートしたモノクローナル抗体を用いて、動物において同様な結果 が得られた。 モノクローナル抗体の感受性、特異性および不都合な作用プロフィルのため、 モノクローナル抗体を基礎とする治療剤を用いて得られた結果はそれらが理想的 な標識手段には及ばないことを示した。モノクローナル抗体は腫瘍において選択 的に発現した抗原に対して産生されたが、真に癌特異性抗体は同定されていない 。新生細胞において発現した大部分の抗原は、正常細胞と比較してこれらの細胞 において量的に増加しているとは思われるが、それにもかかわらずそれらの抗原 は正常細胞にしばしば存在する。従ってそれらの抗原決定基に対する抗体は非新 生組織と反応して著しい毒性を生じる可能性がある。また抗体は比較的大型の分 子であり、そのためしばしば患者において免疫反応を誘発する。これらの免疫反 応は標的剤（ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｇｅｎｔ）に再暴露された際に著しい毒性 を生じる可能性があり、かつ分解および排泄を伴う免疫コンプレックス形成のた め、モノクローナル抗体による標的定めが阻害される可能性がある。最後に、腫 瘍細胞へのモノクローナル抗体の結合性が低く、運搬された標的剤が検出または 細胞毒性を達成するには不十分な量である可能性がある。 転移した結腸直腸癌細胞を特異的に標的としうる組成物が依然として求められ ている。転移した結腸直腸癌細胞に特異的に結合しうるイメージ形成剤が求めら れている。転移した結腸直腸癌細胞をイメージ化する改良法が求められている。 転移した結腸直腸癌細胞に特異的に結合しうる治療剤が求められている。結腸直 腸癌細胞を伴う疑いのある個体、特に転移段階の腸癌細胞を伴う疑いのある個体 を治療するための改良法が求められている。 発明の概要 本発明は、ＳＴ受容体結合性部分および放射安定性有効部分（ｒａｄｉｏｓｔ ａｂｌｅ ａｃｔｉｖｅ ｍｏｉｅｔｙ）を含むコンジュゲート化合物に関する ものである。 本発明は、薬剤学的に許容しうるキャリヤーまたは希釈剤、ならびにＳＴ受容 体結合性部分および放射安定性有効部分を含むコンジュゲート化合物を含む薬剤 組成物に関するものである。 本発明は、転移した結腸直腸癌を伴う疑いのある個体を治療する方法であって 、 薬剤学的に許容しうるキャリヤーまたは希釈剤、ならびに治療用として有効な量 の、ＳＴ受容体結合性部分および放射安定性有効部分を含むコンジュゲート化合 物を含む薬剤組成物を個体に投与する工程を含む方法に関するものである。 本発明は、薬剤学的に許容しうるキャリヤーまたは希釈剤、ならびにＳＴ受容 体結合性部分および放射性有効部分を含むコンジュゲート化合物を含み、コンジ ュゲート化合物が結腸直腸癌を伴うヒトの治療用または診断用として有効な量で 存在する薬剤組成物に関するものである。 本発明は、転移した結腸直腸癌細胞の放射線イメージ形成（ｒａｄｉｏｉｍａ ｇｉｎｇ）法であって、転移した腸癌細胞を有する疑いのある個体に、薬剤学的 に許容しうるキャリヤーまたは希釈剤、ならびにＳＴ受容体結合性部分および放 射性有効部分を含むコンジュゲート化合物を含み、コンジュゲート化合物が結腸 直腸癌を伴うヒトの診断用として有効な量で存在する薬剤組成物をまず投与し、 次いで個体の体内における放射能の局在および蓄積を検出する工程を含む方法に 関するものである。 本発明は、転移した結腸直腸癌を伴う疑いのある個体を治療する方法であって 、薬剤学的に許容しうるキャリヤーまたは希釈剤、ならびに治療用として有効な 量の、ＳＴ受容体結合性部分および放射性有効部分を含むコンジュゲート化合物 を含む薬剤組成物を個体に投与する工程を含む方法に関するものである。 本発明は、個体が転移した結腸直腸癌細胞を有するか否かを判定するインビト ロ法に関するものである。本発明は、個体から得た非−結腸直腸組織および体液 の試料を検査して、結腸直腸腫瘍細胞を含めた結腸直腸細胞に特異的な蛋白質で あるＳＴ受容体蛋白質を結腸直腸管外にある細胞が発現するか否かを判定するイ ンビトロ法に関するものである。ＳＴ受容体蛋白質、またはＳＴ受容体蛋白質の 発現を示唆する核酸分子の存在は、その個体が転移した結腸直腸癌を伴うことの 証拠である。 本発明は、腫瘍細胞が結腸直腸由来のものであるか否かを判定するインビトロ 法に関するものである。本発明は、癌を伴う個体が結腸直腸癌を伴うか否かを診 断するインビトロ法に関するものである。本発明は、個体から得た腫瘍の試料を 検査して、結腸直腸腫瘍細胞を含めた結腸直腸細胞に特異的な蛋白質であるＳＴ 受容体蛋白質を該腫瘍細胞が発現するか否かを判定するインビトロ法に関するも のである。ＳＴ受容体蛋白質、またはＳＴ受容体蛋白質の発現を示唆する核酸分 子の存在は、その個体が結腸直腸癌を伴うことの証拠である。 本発明は、本発明方法を実施するためのインビトロキット、ならびに本発明の これらのインビトロキットにおける成分として有用な試薬および組成物に関する ものである。 発明の好ましい態様の説明 本発明は、米国特許出願第０８／１４１，８９２号（１９９３年１０月２６日 出願）および米国特許出願第０８／３０５，０５６号（１９９４年９月１３日出 願）に関連するものであり、両者の開示事項が本明細書に参考として含まれるも のとする。 本明細書において用いる用語“ＳＴ”および“天然ＳＴ”は互換性をもって用 いられ、大腸菌（Ｅ. ｃｏｌｉ）および他の生物により産生されるペプチドであ る熱安定性毒素（ＳＴ）を表すものとする。ＳＴは１）生物により天然に産生さ れ、２）ＳＴ受容体に結合し、かつ３）ＳＴ誘発性下痢を仲介する一連のシグナ ルを始動させる、天然ペプチドである。 本明細書において用いる用語“ＳＴ受容体”は、局所的および転移した結腸直 腸癌細胞を含めた結腸直腸細胞上に見られる、ＳＴに結合する受容体を表すもの とする。正常な個体においては、ＳＴ受容体は専ら腸の細胞、特に十二指腸、小 腸（空腸および回腸）、大腸、結腸（盲腸、上行結腸、横行結腸、下行結腸およ びＳ状結腸）および直腸に見られる。 本明細書において用いる用語“ＳＴ受容体リガンド”は、ＳＴ受容体に特異的 に結合する化合物を表すものとする。ＳＴはＳＴ受容体リガンドである。ＳＴ受 容体リガンドはペプチドまたは非ペプチドであってもよい。 本明細書において用いる用語“ＳＴ受容体結合性ペプチド”は、ペプチドであ るＳＴ受容体リガンドを表すものとする。 本明細書において用いる用語”ＳＴペプチド”は、配列番号：２、配列番号： ３、配列番号：５−５４、ならびにそのフラグメントおよび誘導体よりなる群か ら選択されるＳＴ受容体結合性ペプチドを表すものとする。 本明細書において用いる用語“フラグメント”は、ａ）ＳＴ受容体結合性ペプ チドの一部に一致するアミノ酸配列を有し、かつｂ）ＳＴ受容体に結合しうる、 ペプチドを表すものとする。 本明細書において用いる用語“誘導体”は、ａ）ＳＴ受容体結合性ペプチドの 少なくとも一部に実質的に一致するアミノ酸配列を有し、かつｂ）ＳＴ受容体に 結合しうる、ペプチドを表すものとする。 本明細書において用いる用語“実質的に一致する”は、若干の残基が欠失する か、または保存アミノ酸もしくは付加アミノ酸が挿入されていること以外は、Ｓ Ｔペプチドのアミノ酸配列と同一であるアミノ酸配列を表すものとする。 本明細書において用いる用語“有効物質”は、治療剤またはイメージ形成剤で ある化合物を表すものとする。 本明細書において用いる用語“放射安定性”は、放射性崩壊を行わない化合物 、すなわち放射性でない化合物を表すものとする。 本明細書において用いる用語“治療剤”は、化学治療剤、毒素、放射性治療剤 、標的剤または放射線増感剤を表すものとする。 本明細書において用いる用語“化学治療剤”は、細胞と接触した際、および／ または細胞に取り込まれた際に、細胞の死滅を引き起こし、細胞分裂を阻害し、 または分化を誘導することを含めた作用を細胞に対して生じる化合物を表すもの とする。 本明細書において用いる用語“毒素”は、細胞と接触し、および／または細胞 に取り込まれた際に、細胞の死滅を生じる化合物を表すものとする。 本明細書において用いる用語“放射性治療剤”は、細胞と接触した際、および ／または細胞に取り込まれた際に、細胞の死滅を生じる放射性核種を表すものと する。 本明細書において用いる用語“標的剤”は、他の化合物が結合しうる、および ／または他の化合物と反応しうる化合物を表すものとする。標的剤は、結合した 標的剤を有する化学治療剤、毒素、酵素、放射性治療剤、抗体またはイメージ形 成剤を細胞へ運搬するために、および／または同時投与される有効物質を変換も しくは他の形で変形させ、もしくは増強するために、用いることができる。標的 剤は細胞に限局化される第１物質を構成する部分を含有することができ、これか 第２物質と接触した際に、目的活性をもつ第３物質に変換されるか、または第２ 物質を目的活性をもつ物質に変換させる。その結果、この限局化した物質は目的 活性をもつ物質が転移した細胞に提示されるのを促進する。 本明細書において用いる用語“放射線増感剤”は、電離線の有害な作用に対す る細胞の感受性を高める物質を表すものとする。放射線増感剤は、より少ない線 量の放射線を投与し、なおかつ治療上有効な線量を供給するのを可能にする。 本明細書において用いる用語“イメージ形成剤”は、検出可能な化合物を表す ものとする。 本明細書において用いる用語“ＳＴ受容体結合性部分”は、コンジュゲート化 合物のうちＳＴ受容体リガンドを構成する部分を表すものとする。 本明細書において用いる用語“有効部分”は、コンジュゲート化合物のうち有 効物質を構成する部分を表すものとする。 本明細書において用いる用語“コンジュゲート化合物”および“コンジュゲー ト組成物”は互換性をもって用いられ、ＳＴ受容体結合性部分および有効部分を 含み、ＳＴ受容体に結合しうる化合物を表すものとする。本発明によるコンジュ ゲート化合物は、ＳＴ受容体リガンドを構成する部分および有効物質を構成する 部分を含む。従って本発明のコンジュゲート化合物はＳＴ受容体に特異的に結合 することができ、かつ治療剤またはイメージ形成剤である部分を含有する。コン ジュゲート組成物は、架橋剤、および／または各部分間のスペーサーとして作用 する分子を含むことができる。 本明細書において用いる用語“架橋剤（ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｒ,ｃｒｏｓｓ ｌｉｎｋｉｎｇ ａｇｅｎｔ）”、“カップリング剤”、“縮合試薬”および“ 二官能性架橋剤”は互換性をもって用いられ、ＳＴ受容体リガンドと有効物質を 結合させ、これによりコンジュゲート化合物を形成する分子基を表すものとする 。 本明細書において用いる用語“結腸直腸癌”は、小腸より下方の腸管（すなわ ち大腸（結腸）−−盲腸、上行結腸、横行結腸、下行結腸およびＳ状結腸を含む −−、ならびに直腸）の細胞の癌を特色とする医学的状態としての結腸直腸癌を 規定する、十分に受け入れられた医学的定義を表すものとする。そのほか本明細 書において用いる用語“結腸直腸癌”は、十二指腸および小腸（空腸および回腸 ）の細胞の癌を特色とする医学的をさらに含むものとする。本明細書において用 いる結腸直腸癌の定義は一般の医学的定義より広いが、十二指腸および小腸の細 胞もＳＴ受容体を含有し、従って本発明の化合物を用いる本発明方法に従うので 、このように定める。 本明細書において用いる用語“転移”は、ある器官または身体部分に由来する 癌細胞が身体の他の部分へ移動して複製し続けるプロセスを表すものとする。転 移した細胞はその後腫瘍を形成し、これがさらに転移する可能性がある。従って 転移は、癌が最初に起こった身体部分から他の身体部分へ拡散することを表す。 本発明は、転移した結腸直腸癌細胞へ有効物質を運搬する方法に関するものであ る。 本明細書において用いる用語“転移した結腸直腸癌細胞”は、転移してしまっ た結腸直腸癌細胞、すなわち十二指腸、小腸（空腸および回腸）、大腸（結腸） −−盲腸、上行結腸、横行結腸、下行結腸およびS状結腸を含む−−、ならびに 直腸以外の身体部分に位置する結腸直腸癌細胞を表すものとする。 本明細書において用いる用語“非−結腸直腸試料”および“腸管外試料”は互 換性をもって用いられ、結腸直腸組織以外の供給源から得た組織または体液の試 料を表すものとする。ある好ましい態様においては、非−結腸直腸試料はリンパ 節などの組織の試料である。ある好ましい態様においては、非−結腸直腸試料は 由来が確認されていない腺癌など腸管外組織の試料である。ある好ましい態様に おいては、非−結腸直腸試料は血液試料である。 本明細書において用いる“由来が確認されていない腺癌を伴う個体”は、その 由来が確実に同定されていない腫瘍を有する個体を表すものとする。 本明細書において用いる“個体が転移した結腸直腸癌を生じやすい疑いがある ”は、転移した結腸直腸癌を発現する特別な危険性のある個体を表すものとする 。転移した結腸直腸癌を発現する特別な危険性のある個体の例は、その家族の病 歴が家族構成員内の結腸直腸癌の出現率が平均より高いことを示唆している個体 、および／または既に結腸直腸癌を発現し、そして有効に治療されており、従っ て 再発（ｒｅｌａｐｓｅ，ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ）の危険性に直面している個体で ある。 大腸菌および他の生物により産生されるＳＴは、地方者下痢（ｃｏｕｎｔｒｉ ｅｓ ｄｉａｒｒｈｅａ）および旅行者下痢を発現する地方流行性下痢に関与す る。ＳＴは、腸管を内張りする粘膜細胞の頂端刷子縁膜（ａｐｉｃａｌ ｂｒｕ ｓｈ ｂｏｒｄｅｒ ｍｅｍｂｒａｎｅ）にある特異的受容体、すなわちＳＴ受 容体に結合することにより、腸分泌を誘発する。ＳＴ受容体へのＳＴの結合は非 共有結合であり、濃度依存性かつ飽和性の様式で起こる。ＳＴ−ＳＴ受容体コン プレックスは腸管細胞によりインターナリゼーションされる、すなわち細胞の表 面から内部へ輸送されると思われる。ＳＴ受容体へのＳＴの結合がこれらの細胞 の頂端膜における一連の生化学反応を始動させ、その結果、腸管細胞を誘発して 液体および電解質を分泌させるシグナルを発し、結果的に下痢を生じる。 ＳＴ受容体は、腸管を内張りする粘膜細胞の頂端刷子縁膜にのみ局在するとい う点で特有である。事実、それらは胎盤性哺乳動物（ｐｌａｃｅｎｔａｌ ｍａ ｍｍａｌｓ）の他のいずれの細胞タイプにも見られない。さらにＳＴ受容体はほ とんど例外なく頂端膜にのみ局在し、腸管側面の基底外側膜（ｂａｓｏｌａｔｅ ｒａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ）にはほとんど見られない。 腸管を内張りする粘膜細胞は緊密な接合により互いに連結し、これにより腸管 内容物が血流中へ、また血流の成分が腸管内腔へ通過するのに対するバリヤーを 形成する。従ってＳＴ受容体が頂端に位置することによりこれらの受容体は循環 系から隔離され、従ってそれらは身体の残りの部分から分離された状態で存在す る、すなわち本質的に身体の“外側”であると考えることができる。従って身体 の残りの部分は腸管の“外側”であると考えることができる。腸管の“外側”に 投与された組成物は、正常な状態でＳＴ受容体を発現する唯一の細胞から分離お よび隔離された状態に維持される。逆の言い方をすれば、腸管の外側の組織から 採取した組織試料は、正常な状態ではＳＴ受容体を発現する細胞を含有しない。 結腸直腸癌を伴う個体においては、癌細胞がＳＴ受容体を産生および露呈する 細胞に由来する場合が多く、これらの癌細胞はそれらの細胞表面においてＳＴ受 容体を産生および露呈し続ける。事実、肺転移巣から単離されたヒト結腸腺癌細 胞であるＴ８４細胞は、それらの細胞表面にＳＴ受容体を発現する。同様にヒト 結腸腺癌細胞であるＨＴ２９ｇｌｕ−細胞も、ＳＴに対する受容体を発現する。 このように、結腸直腸癌を伴う個体においては、若干の転移した腸癌細胞がＳＴ 受容体を発現する。 ＳＴ受容体を有する結腸直腸腫瘍の割合を測定するために、ある試みを行った 。試験した腫瘍はそれぞれ独立して、外科病理学的標準法により結腸直腸癌であ ることが確認されている。局所結腸直腸腫瘍および転移した結腸直腸腫瘍（肝臓 、肺臓、リンパ節、腹腔、卵巣）を含めて、試験した結腸直腸癌腫はいずれもＳ Ｔ受容体を保有していた。それぞれの場合、受容体の親和性および密度は標的と されやすいものであった。正常な肝臓、リンパ節、腹腔、胆嚢、卵巣、胃、腎臓 および肺臓の細胞はＳＴ受容体を保有しないことが認められた。 これらの癌細胞が転移すると、転移した癌細胞はＳＴ受容体を産生および露呈 し続ける。転移腫瘍の表面におけるＳＴ受容体の発現は、コンジュゲート組成物 の選択的結合に対する標的を提供する。ＳＴ受容体は、ＳＴ受容体リガンドにコ ンジュゲートした治療剤および診断剤が転移性の結腸直腸癌細胞を確実に特異的 に標的とするのを可能にする。 本発明のある態様によれば、個体において結腸直腸腫瘍を検出、イメージ形成 または治療する組成物および方法が提供される。 本発明のコンジュゲート組成物は腸内壁を内張りする細胞−−それらの細胞に 由来する癌細胞、特にそれらの細胞に由来する転移した癌細胞を含む−−を標的 とするのに有用である。腸管の外側に投与される本発明のコンジュゲート組成物 、たとえば循環系に投与されたものは、腸管を内張りする細胞から隔離された状 態を維持し、腸管の外側にあって腸管に由来する細胞、たとえば転移した結腸直 腸細胞にのみ結合するであろう。コンジュゲート組成物は結腸直腸に由来しない 細胞には結合しないであろう。従って腸管の外側に投与されたコンジュゲート組 成物の有効部分は、腸管に由来する細胞、たとえば転移した結腸直腸細胞へは運 搬されるが、他のいずれの細胞にも運搬されないであろう。 本発明の治療用および診断用薬剤組成物には、転移性疾患を特異的に標的とす るコンジュゲート化合物が含有される。これらのコンジュゲート化合物は、腸管 の細胞以外の身体の正常組織の細胞には結合しないＳＴ受容体結合性部分を含有 する。他の組織の細胞はＳＴ受容体を保有しないからである。正常な結腸直腸細 胞および限局化した結腸直腸癌細胞と異なり、転移した結腸直腸癌細胞は腸管の 外側に投与された物質、たとえば循環系に投与されたものに到達しうる。正常組 織中の唯一のＳＴ受容体は腸管粘膜細胞の頂端膜に存在し、これらの受容体は腸 管の外側に投与された標的癌に対する化学治療剤およびイメージ形成剤から腸管 粘膜バリヤーによって効果的に隔離されている。従って転移した結腸直腸細胞は 本発明のコンジュゲート化合物によって、それらの化合物を腸管の外側に導入す ることにより、たとえばコンジュゲート化合物を含有する薬剤組成物を循環系に 投与することにより、標的とすることができる。 当業者は結腸直腸癌および転移した結腸直腸細胞を伴う疑いのある個体を容易 に識別することができる。結腸直腸癌を伴うと診断された個体においては、転移 を疑い、転移した細胞の根絶を積極的に試みるのが標準的な療法である。本発明 はイメージ形成のための薬剤組成物および方法を提供し、これによって転移がよ り的確に診断されるであろう。さらに本発明は、治療剤を含む薬剤組成物、およ び転移した結腸直腸癌細胞を特異的に標的とし、かつ排除する方法を提供する。 さらに本発明は、治療剤を含む薬剤組成物、および結腸直腸癌細胞を特異的に排 除する方法を提供する。 本発明のコンジュゲート組成物を含む薬剤組成物は、限局化した結腸直腸腫瘍 、すなわち一次または非転移−結腸直腸腫瘍が粘膜の下層にある基底膜を透過し て、大量の血液供給がある粘膜下組織内へ達し、血液に腫瘍が接している場合、 これらの腫瘍を伴う個体を診断または治療するために使用しうる。粘膜下組織内 にまで透過すると粘膜バリヤーが回避され、その結果、循環系に導入されたコン ジュゲート組成物はこれらの腫瘍と相互作用することができる。 本発明はコンジュゲート組成物中のＳＴ受容体結合性部分の利用に依存してい る。ＳＴ受容体結合性部分は本質的にコンジュゲート組成物の一部であり、ＳＴ 受容体に対するリガンドとして作用し、従ってこれらの受容体に特異的に結合す る。コンジュゲート組成物は、ＳＴ受容体結合性部分と結合した有効部分をも含 有する；有効部分は、細胞をイメージ化し、標的とし、中和し、または死滅させ るのに有用な有効物質である。 本発明によれば、ＳＴ受容体結合性部分はコンジュゲート組成物のＳＴ受容体 リガンド部分である。ある態様においては、ＳＴ受容体リガンドは天然のＳＴで あってもよい。 天然のＳＴは、大腸菌、エルジニア属（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）、エンテロバクタ ー属（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）などを含めた多様な生物から単離されている 。天然においては、これらの毒素は一般に、異なる種間を“ジャンプ”しうるプ ラスミド上にコードされている。数種類の異なる毒素が異なる種において生じる ことが報告されている。これらの毒素はすべて有意の配列相同性をもち、それら はすべてＳＴ受容体に結合し、かつそれらはすべてグアニル酸シクラーゼを活性 化して、下痢を生じる。 ＳＴはクローン化され、また化学的方法で合成されている。クローン化または 合成された分子は天然ＳＴに類似の結合特性を示す。大腸菌から単離された天然 ＳＴは、１８または１９アミノ酸の長さである。活性を保持する最小のＳＴ“フ ラグメント”はシステイン６からカルボキシ末端へ向かってシステイン１８（１ ９アミノ酸形の）にまで及ぶ１３アミノ酸のコアペプチドである。ＳＴ類似体が クローニング法および化学的方法で形成された。結合活性を与える構造決定因子 を含む天然のＳＴ構造体の小さなペプチドフラグメントを構築することができる 。ＳＴ受容体に結合する構造が確認されると、空間的にその構造を模倣した非ペ プチド類似体が設計される。 配列番号：１は、ＳＴ Ｉａと表示される１９アミノ酸ＳＴをコードするヌク レオチド配列を開示する；Ｓｏ ａｎｄ ＭｃＣａｒｔｈｙ（１９８０）Ｐｒｏ ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４０１１により報告、これは参 考として本明細書に含まれるものとする。 ＳＴ Ｉａのアミノ酸配列は配列番号：２に開示される。 配列番号：３は、ＳＴ Ｉ*と表示される、ＳＴ活性を示す１８アミノ酸ペプ チドを開示する；Ｃｈａｎ ａｎｄ Ｇｉａｎｎｅｌｌａ（１９８１）Ｊ．Ｂｉ ｏｌ．Ｃｈｅｍ，２５６：７７４４により報告、これは参考として本明細書に含 まれるものとする。 配列番号：４は、ＳＴ Ｉｂと表示される１９アミノ酸ＳＴをコードするヌク レオチド配列を開示する；Ｍｏｓｅｌｙ ｅｔ ａｌ.（１９８３）Ｉｎｆｅｃ ｔ．Ｉｍｍｕｎ.３９：１１６７により報告、これは参考として本明細書に含ま れるものとする。 ＳＴ Ｉｂのアミノ酸配列は配列番号：５に開示される。 ＳＴに対し約５０％の配列相同性をもつグアニリンと呼ばれる１５アミノ酸ペ プチドが哺乳動物の腸において同定された（Ｃｕｒｒｉｅ，Ｍ．Ｇ.,ｅｔ ａｌ ．（１９９２）Ｐｒｏ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：９４７− ９５１により報告、これは参考として本明細書に含まれる）。グアニリンはＳＴ 受容体に結合し、天然ＳＴより約１０−１００倍低い水準でグアニル酸シクラー ゼを活性化する。グアニリンは腸においては１５アミノ酸ペプチドとして存在す るのではなく、その器官のより大型の蛋白質の一部として存在する可能性がある 。げっ歯類由来のグアニリンのアミノ酸配列を配列番号：６として開示する。 配列番号：７は配列番号：２の１８アミノ酸フラグメントである。配列番号： ８は配列番号:２の１７アミノ酸フラグメントである。配列番号：９は配列番号: ２の１６アミノ酸フラグメントである。配列番号：１０は配列番号：２の１５ア ミノ酸フラグメントである。配列番号：１１は配列番号：２の１４アミノ酸フラ グメントである。配列番号：１２は配列番号：２の１３アミノ酸フラグメントで ある。配列番号：１３は配列番号：２の１８アミノ酸フラグメントである。配列 番号：１４は配列番号：２の１７アミノ酸フラグメントである。配列番号：１５ は配列番号:２の１６アミノ酸フラグメントである。配列番号：１６は配列番号: ２の１５アミノ酸フラグメントである。配列番号：１７は配列番号：２の１４ア ミノ酸フラグメントである。 配列番号:１８は配列番号：３の１７アミノ酸フラグメントである。配列番号: １９は配列番号：３の１６アミノ酸フラグメントである。配列番号：２０は配列 番号：３の１５アミノ酸フラグメントである。配列番号：２１は配列番号：３の １４アミノ酸フラグメントである。配列番号：２２は配列番号：３の１３アミノ 酸フラグメントである。配列番号：２３は配列番号：３の１７アミノ酸フラグメ ントである。配列番号：２４は配列番号：３の１６アミノ酸フラグメントである 。 配列番号：２５は配列番号：３の１５アミノ酸フラグメントである。配列番号： ２６は配列番号：３の１４アミノ酸フラグメントである。 配列番号:２７は配列番号：５の１８アミノ酸フラグメントである。配列番号: ２８は配列番号：５の１７アミノ酸フラグメントである。配列番号：２９は配列 番号：５の１６アミノ酸フラグメントである。配列番号：３０は配列番号：５の １５アミノ酸フラグメントである。配列番号：３１は配列番号：５の１４アミノ 酸フラグメントである。配列番号：３２は配列番号：５の１３アミノ酸フラグメ ントである。配列番号：３３は配列番号：５の１８アミノ酸フラグメントである 。配列番号：３４は配列番号：５の１７アミノ酸フラグメントである。配列番号 ：３５は配列番号：５の１６アミノ酸フラグメントである。配列番号：３６は配 列番号：５の１５アミノ酸フラグメントである。配列番号：３７は配列番号：５ の１４アミノ酸フラグメントである。 配列番号：２７、配列番号：３１、配列番号：３６および配列番号：３７はＹ ｏｓｈｉｍｕｒａ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．（１９８５）ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．１８ １：１３８に示されており、これは参考として本明細書に含まれるものとする。 配列番号:３の誘導体である配列番号：３８、配列番号：３９および配列番号: ４０はＷａｌｄｍａｎ，Ｓ．Ａ．ａｎｄ Ｏ’Ｈａｎｌｅｙ，Ｐ．（１９８９） Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ.５７：２４２０に示されており、これは参考として 本明細書に含まれるものとする。 配列番号：３の誘導体である配列番号：４１、配列番号：４２、配列番号：４ ３、配列番号：４４および配列番号：４５はＹｏｓｈｉｍｕｒａ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．（１９８５）ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．１８１：１３８に示されており、これ は参考として本明細書に含まれるものとする。 配列番号：４６はエルジニア・エンテロコリチカ（Ｙ．ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉ ｔｉｃａ）に由来する２５アミノ酸ペプチドであり、ＳＴ受容体に結合する。 配列番号：４７はコレラ菌（Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ）に由来する１６アミノ酸 ペプチドであり、ＳＴ受容体に結合する。配列番号:４７はＳｈｉｍｏｎｉｓｈ ｉ,Ｙ．，ｅｔ ａｌ．ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．２１５：１６５に示されており、 これは参考として本明細書に含まれるものとする。 配列番号４８はＹ．ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａに由来する１８アミノ酸ペ プチドであり、ＳＴ受容体に結合する。配列番号４８は、本明細書に援用される Ｏｋａｍｏｔｏ，Ｋ．等のＩｎｆｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．５５：２１２１に報告され る。 配列番号４９は配列番号５の誘導体である。 配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２及び配列番号５３は誘導体である 。 配列番号５４はヒトからのグアニリン（ｇｕａｎｙｌｉｎ）のアミノ酸配列で ある。 幾つかの好ましい実施態様では、コンジュゲート化合物は配列番号２、配列番 号３、配列番号５〜５４及びそのフラグメントと誘導体から成る群から選択され るアミノ酸配列を含むＳＴ結合部分を有する。 当業者は、アミノ酸が欠損及び／又は挿入及び／又は保存的置換された、ＳＴ ペプチドの実質的に同じアミノ酸配列を有する誘導体を容易に設計し、製造する ことができる。例えば、アミノ酸置換のＤａｙｈｏｆルールと呼ばれるものに従 って（Ｄａｙｈｏｆ，Ｍ．Ｄ．（１９７８）Ｎａｔ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆ ｏｕｎｄ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．５巻，増刊号３）、ペプチド配列 のアミノ酸残基を匹敵するアミノ酸残基と置換することができる。このような置 換は周知であり、各アミノ酸の電荷と構造特徴とに基づく。誘導体は欠損及び／ 又は挿入及び／又は保存的置換を有するＳＴ受容体結合ペプチドのフラグメント を含む。 幾つかの実施態様では、ＳＴ受容体結合ペプチドはＤアミノ酸を含む。本明細 書で用いるかぎり、“Ｄアミノ酸ペプチド”なる用語は、ＳＴ受容体に結合する ことができるＤアミノ酸を少なくとも１個、好ましくは複数個含むＳＴ受容体結 合ペプチド、フラグメント又は誘導体を表す意味である。Ｄアミノ酸ペプチドは 分解され難く、そのため長い半減期を有するので、Ｄアミノ酸ペプチドの使用が 望ましい。殆ど全てＤアミノ酸を含む又はＤアミノ酸から成るＤアミノ酸ペプチ ドは、Ｌアミノ酸から構成されるＳＴ受容体結合ペプチドの逆の順序でアミノ酸 配列を含む可能性がある。 幾つかの実施態様では、Ｄアミノ酸ペプチドを含むＳＴ受容体結合ペプチドは 、ＳＴ受容体に結合するために適当な構造コンホーメーションを有し、維持する よ うにコンホーメーション的に制限される。組成物は、環状化(circularization) 又は所望の折り畳みを容易にする残基を含めて、適当な三次元コンホーメーショ ンを得るために必要な、付加的なアミノ酸残基を含むことができる。 ＳＴ受容体結合部分として用いられるＳＴ受容体リガンドができるだけ小さい ことが好ましい。したがって、ＳＴ受容体リガンドが非ペプチド小分子又は、好 ましくは２５アミノ酸未満、より好ましくは２０アミノ酸未満の小ペプチドであ ることが好ましい。幾つかの実施態様では、コンジュゲート組成物のＳＴ受容体 結合部分を構成するＳＴ受容体リガンドは１５アミノ酸未満である。１０アミノ 酸未満を含むＳＴ受容体結合ペプチドと５アミノ酸未満を含むＳＴ受容体結合ペ プチドとが、本発明によるＳＴ結合部分として使用可能である。限定する訳では ないが、例えば抗体、ＦＡｂｓ及びＦ（Ａｂ）2ｓのような、特異的にＳＴ受容 体に結合する分子を含めて、ＳＴ受容体結合部分として役立つより大きい分子を 含むことも本発明の範囲内である。 ペプチド組成物と非ペプチド組成物の両方を試験して、それらがＳＴ受容体リ ガンドであるか否か調べるために、又はコンジュゲート組成物を試験して、それ らがＳＴ受容体結合活性を有するかどうかを調べるために検定法を用いることが できる。特異的にＳＴ受容体に結合するような組成物は競合結合分析によって確 認することができる。この競合結合分析は、当業者が容易に入手可能な出発物質 を用いて容易に実施することができる、薬理学的分野の標準方法である。競合結 合分析、ＳＴ受容体結合分析は特異的にＳＴ受容体に結合する組成物を確認する ために有効であると判明している。簡単に言うと、この分析はＳＴ受容体（例え ば、ラット腸、ヒト腸からの腸膜(intestinal membrane)、Ｔ８４細胞）の調製 物(preparation)を一定濃度（１ｘ１０-10Ｍ〜５ｘ１０-10Ｍ）の125１−ＳＴ（ 例えば、ネイティブ(native)ＳＴ 配列番号２、配列番号３又は配列番号５のよ うな、任意のＳＴ受容体リガンドが使用可能である）及び既知濃度の試験化合物 と共にインキュベートすることを含む。コントロールとして、ＳＴ受容体の二重 の調製物を二倍濃度の125Ｉ−ＳＴと共に試験化合物なしでインキュベートした 。分析物を平衡に達するまで（２時間）インキュベートし、受容体に結合した12 5 Ｉ−ＳＴ量を標準方法によって定量する。試験化合物の受容体結合能力をそ の125Ｉ−ＳＴ結合防止（125Ｉ−ＳＴとの競合）能力として測定する。したがっ て、受容体に結合する試験化合物を含む分析では、受容体に関連した、低い放射 能が存在する。任意の分子のＳＴ受容体結合能力を測定するために適当である、 この分析法は、当業者が容易に入手可能な出発物質を用いて容易に実施すること ができる、標準の競合結合分析法である。 ＳＴは標準方法を用いて天然ソースから単離することができる。さらに、ＳＴ 受容体結合ペプチドとコンジュゲート組成物又はそのペプチドである部分は、下 記の既知方法のいずれかによってルーチンに製造することができる。 ＳＴ受容体結合ペプチドとコンジュゲート組成物又はそのペプチドである部分 は、ＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄがＪ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１５：２１４９〜 ２１５４（１９６３）に初めて述べた固相合成方法を用いて製造することができ る。他のペプチド合成方法は、例えば、Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ等（１９７６） ，Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ ，第２版；ＫｅｎｔとＣｌａｒｋ−ＬｅｗｉｓのＳｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｐｅｐｔ ｉｄｅｓ ｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２９５〜３５８ 頁，Ａｌｉｔａｌｏ，Ｋ．等編集，Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒs，（ Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，１９８５）；並びに当業者に周知の他の参考文献に見いだ すことができる。ペプチド合成方法の概要は、本明細書に援用される、Ｊ．Ｓｔ ｕａｒｔとＪ．Ｄ．Ｙｏｕｎｇ，Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓ ｙｎｔｈｅｌｉａ，Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｒｏｃ ｋｆｏｒｄ ＩＬ（１９８４）に見いだすことができる。Ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅｉ ｎｓ，１１巻，第３版，１０５〜２３７頁（Ｎｅｕｒａｔｈ，Ｈ．等編集，Ａｋ ａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ（１９７６））に述べられ ている溶液方法によるペプチド合成も用いることができる。このような合成に用 いるための適当な保護基は、上記文献並びに、本明細書に援用される、Ｊ．Ｆ． Ｗ．ＭｃＯｍｉｅのＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉ ｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓs，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ （１９７３）に見い出される。一般に、これらの合成方法は、成長するペプチド 鎖への１個以上のアミノ酸残基又は適当な保護されたアミノ酸残基の逐次添加を 含む。 通常、第１アミノ酸残基のアミノ基又はカルボキシル基を選択的に除去可能な、 適当な保護基によって保護する。例えばリシンのような、反応性側基を含むアミ ノ酸に異なる選択的に除去可能な保護基を用いることができる。 １例として固相合成を用いて、保護アミノ酸又は誘導体化アミノ酸をその非保 護カルボキシル基又はアミノ基を介して不活性固体サポートに結合させる。次に 、アミノ基又はカルボキシル基の保護基を選択的に除去して、適当に保護された 相補的（アミノ又はカルボキシル）基を有する、配列中の次のアミノ酸を混合し 、固体サポートに既に結合した残基と反応させる。次に、この新たに添加したア ミノ酸残基からアミノ又はカルボキシル基の保護基を除去し、次いで、次のアミ ノ酸（適当に保護された）を加え、これを繰り返す。全ての所望のアミノ酸を適 当な配列で結合させた後に、残りの末端基及び側基の保護基（及び固体サポート ）を逐次又は同時に除去して、最終的ペプチドを形成する。本発明のペプチドは 好ましくはベンジル化又はメチルベンジル化アミノ酸を有さない。このような保 護基部分を合成の過程で用いることができるが、ペプチドの使用前に保護基を除 去する。他所に述べられるように、コンホーメーションを抑制する分子内結合を 形成するために、付加的反応が必要になる場合がある。 ＳＴ受容体結合ペプチドとそのコンジュゲート組成物又はそのペプチド部分も 組換えＤＮＡ方法によって製造することができる。所望のペプチドをコードする 適当なＤＮＡ配列の供給は、当該技術分野に現在知られた組換え方法を用いたペ プチドの製造を可能にする。コーディング配列は天然ソースから得ることができ るか、又は広範囲に入手可能な出発物質を用いてルーチン方法によって、合成す るか若しくは他のやり方で構成することができる。コーディングＤＮＡを合成的 に製造する場合に、ＤＮＡを発現させる予定宿主の既知コドン優先(codon prefe rence)を利用することができる。 自然に生ずるＳＴ受容体結合ペプチドを製造するために、当業者は、周知方法 を用いて、ＳＴ受容体結合ペプチドをコードするＤＮＡ分子をＳＴ受容体結合ペ プチドを産生する生物体のゲノムから得て、このＤＮＡ分子を周知の発現系に用 いるための、商業的に入手可能な発現ベクター中に挿入することができる。 同様に、当業者は、周知方法を用いて、ＳＴを産生する生物体のゲノムから入 手することができるＳＴ受容体結合ペプチド（例えば、配列番号１と配列番号４ ）をコードするＤＮＡ分子を、トキシン、ペプチドである他の活性剤、又は付加 的に、単一ペプチド内のＳＴ受容体結合ペプチドアミノ酸配列に隣接することが 望ましい、任意の他のアミノ酸配列をコードするＤＮＡと結合させて、このＤＮ Ａ分子を周知の発現系に用いるための、商業的に入手可能な発現ベクター中に挿 入することができる。 例えば、商業的に入手可能なプラスミドｐＳＥ４２０（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ，カルフォルニア州，サンジエゴ）を、大腸菌（E.coli）における組換え体産生 のために用いることができる。商業的に入手可能なプラスミドｐＹＥＳ２（Ｉｎ ｖｉｔｒｏｇｅｎ，カルフォルニア州，サンジエゴ）を、酵母のＳ．ｃｅｒｅｖ ｉｓｉａｅ 菌株における産生に用いることができる。商業的に入手可能なＭａｘ ＢａｃTM（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，カルフオルニア州，サンジエゴ）完全なバキ ュロウイルス発現系を、昆虫細胞における産生に用いることができる。商業的に 入手可能なプラスミドｐｃＤＮＡ Ｉ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，カルフォルニア 州，サンジエゴ）を、例えばチャイニーズハムスター卵巣細胞のような、哺乳動 物細胞における産生に用いることができる。 当業者は上記その他の商業的に入手可能な発現ベクター及び系を用いることが できる、又は周知方法と容易に入手可能な出発物質とを用いてベクターを製造す ることができる。例えばプロモーター及びポリアデニル化シグナル、好ましくは エンハンサーのような、必要な制御配列(control sequence)を含む発現系は、種 々な宿主に関して、容易に入手可能であり、技術上周知である。例えば、Ｓａｍ ｂｒｏｏｋ等，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ ｙ Ｍａｎｕａｌ，第２版，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓ ｓ（１９８９）を参照のこと。したがって、原核系と真核系の両方において所望 のタンパク質を製造して、タンパク質の処理形のスペクトルを得ることができる 。 最も一般的に用いられる原核系は大腸菌に留まるが、例えばＢ．ｓｕｂｔｉｌ ｉｓ 及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓのような、他の系も有用である。原核系の適当 な制御配列はｌａｃプロモーター、ｔｒｐプロモーター、ハイブリッドプロモー ター（例えばｔａｃプロモーター）、ラムダファージＰ１プロモーターを含めて 、 構成プロモーターと誘導プロモーターの両方を含む。一般に、異種(foreign)タ ンパク質はこれらの宿主において融合タンパク質又は成熟タンパク質として産生 される。所望の配列が成熟タンパク質として産生されるときに、得られる配列に 必ずしも効果的に除去されないメチオニンを先行させることができる。したがっ て、本明細書で特許請求するペプチドとタンパク質とに、細菌中で産生するとき に、Ｎ−末端Ｍｅｔを先行させることができる。さらに、ペプチドのコーディン グ配列に、タンパク質の分泌を生じる、作動可能な(operable)シグナルペプチド が先行する構造体(construct)を製造することができる。これに関して原核宿主 において産生される場合には、シグナル配列は分泌時に除去される。 広範囲な真核宿主も組換え異種タンパク質の産生のために現在入手可能である 。細菌におけるように、所望のタンパク質を直接産生する発現系によって真核宿 主を形質転換させることができるが、より一般的には、タンパク質を分泌させる ためにシグナル配列を供給する。真核系は、これらが高等生物体のタンパク質を コードするゲノム配列中で起こりうるイントロンを処理することができるという 付加的な利点を有する。真核系は例えば、ある種のアミノ酸残基のグリコシル化 、カルボキシ末端アミド化(amidation)、酸化若しくは誘導体化、コンホーメー ション制御等を生じる、多様な処理機構をも可能にする。 一般に用いられる真核系は、限定する訳ではなく、酵母、真菌細胞、昆虫細胞 、哺乳動物細胞、鳥類細胞及び高級植物の細胞を含む。これらの宿主種類の各々 に用いるために適合し、操作しやすく、かつ末端配列及びエンハンサーである、 適当なプロモーターは、例えばバキュロウイルス ポリヘドロンプロモーターと して入手可能である。上述したように、プロモーターは構成型又は誘導型のいず れでもよい。例えば、例えば、哺乳動物系では、重金属イオンの添加によってマ ウスのメタロチオネンプロモーターを誘導することができる。 所望の宿主に適した発現系を構成するための詳細は当業者に周知である。タン パク質の組換え体産生のために、それをコードするＤＮＡを、選択した発現ベク ターに結合させ、それを用いて適当な宿主を形質転換し、そして当該宿主を培養 し、異種遺伝子の発現が行われる条件下に維持する。このようにして産生された 、本発明のタンパク質を培養物から、細胞を溶解することによって、又は培地か ら 適当に、当業者に周知であるように回収する。 当業者は製造されたタンパク質を周知の方法を用いて単離することができる。 本発明によると、有効部分は治療剤又はイメージ形成剤であることができる。 当業者はＳＴ受容体リガンドによって、転移した結腸直腸細胞を特異的に標的と して、このようなリガンドに多様な有効剤をコンジュゲートすることができる利 益を容易に認識することができる。 ＳＴ受容体結合部分にコンジュゲートさせた場合に、転移した結腸直腸細胞に 特異的に運搬される有効部分として有用な化学治療剤は、典型的に、化学合成に よって製造される小さい化学的エンティティ(chemical entity)である。化学治 療剤は細胞障害薬及び細胞静止薬(cytostatic drug)を含む。化学治療剤は例え ば形質転換状態の分化状態(differentiated state)への逆転又は、細胞複製を阻 害する効果のような、細胞への他の効果を有するものを含む。化学治療剤の例は 、例えばメトトレキセート（アメトプテリン）、ドキソルビシン（アドリマイシ ン）、ダウノルビシン、サイトシンアラビノシド、エトポシド、５−４ フルオ ロウラシル、メルファラン、クロラムブシル及び他の窒素マスタード（例えば、 シクロホスファミド）、シス−プラチン、ビンデシン（及び他のビンカアルカロ イド）、マイトマイシン並びにブレオマイシンのような、一般的な細胞障害薬又 は細胞静止薬を含む。他の化学治療剤はプロチオニン（大麦粉オリゴペプチド） 、マクロマイシン、１，４−ベンゾキノン誘導体及びトレニモンを含む。 トキシンは有効部分として有用である。トキシンをＳＴ受容体結合部分にコン ジュゲートする場合には、ＳＴ受容体結合部分によって、コンジュゲート組成物 が転移した結腸直腸細胞に特異的に運搬されて、トキシン部分が細胞を殺す。ト キシンは、細菌、植物等を含めた種々な生物体の一般に複雑な有害産物である。 トキシンの例は、限定する訳ではなく、リシン(ricin)、リシンＡ鎖（リシント キシン）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素（ＰＥ）、ジフテリア毒素（ＤＴ）、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ） 、ウシ膵臓リボヌクレアーゼ（ＢＰＲ）、ｐｏｋｅｗｅｅｄ抗ウイルスタンパク 質（ＰＡＰ）、アブリン、アブリンＡ鎖（アブリントキシン）、コブラ毒因子（ ＣＶＦ）、ゲロニン（ＧＥＬ）、サポリン（ＳＡＰ）、モデシン、ビスクミン及 び ボルケンシンを含む。上述したように、タンパク質トキシンをＳＴ受容体結合ペ プチドと共に用いる場合には、組換えＤＮＡ方法を用いて、コンジュゲート組成 物を製造することができる。簡単に言うと、キメラ遺伝子上でＳＴ受容体リガン ドとトキシンとをコードする組換えＤＮＡ分子を構成することができる。キメラ 遺伝子が発現するときに、ＳＴ受容体結合部分と有効部分とを含む融合タンパク 質が産生される。タンパク質トキシンは、非ペプチジル結合によるＳＴ受容体結 合ペプチドを有するコンジュゲート組成物を作製するためにも有用である。 さらに、癌の治療のための有効剤を用いる他のアプローチも存在する。例えば 、ＳＴ受容体結合部分と、活性酵素である有効部分とを有するコンジュゲート組 成物を作製することができる。ＳＴ結合部分はコンジュゲート組成物を腫瘍細胞 に特異的に配置する。酵素によって活性薬物に転化することができる不活性プロ ドラッグを患者に投与する。プロドラッグは腫瘍に配置される酵素によってのみ 活性薬物に転化することができる。酵素／プロドラッグ対の例はアルカリホスフ ァターゼ／エトポシドホスフェートを含む。このような場合には、アルカリホス ファターゼをＳＴ受容体結合リガンドにコンジュゲートする。コンジュゲート化 合物を投与して、転移細胞に配置する。エトポシドホスフェート（プロドラッグ ）との接触時に、エトポシドホスフェートは癌細胞によって摂取される化学治療 剤であるエトポシドに転化する。 放射性増感剤は、放射線に対する細胞の感受性を高める物質である。放射性増 感剤の例はニトロイミダゾール、メトロニダゾール及びミソニダゾールを含む（ ＤｅＶｉｔａ，Ｖ．Ｔ．Ｊｒ．のＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，６８頁，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌ ｌＢｏｏｋ Ｃｏ．ニューヨーク，１９８３を参照のこと、これは本明細書に援 用される）。有効部分として放射性増感剤を含むコンジュゲート化合物を投与し て、転移した細胞に配置させる。個体を放射線に暴露すると、この放射性増感剤 は“励起”され、細胞の死亡を惹起する。 放射性核種は放射性療法又はイメージ形成処置に有用である薬剤組成物に用い られる。 放射線療法においてトキシンとして有用な放射性核種の例は、47Ｓｃ、67Ｃｕ 、90 Ｙ、109Ｐｄ、123Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、186Ｒｅ、188Ｒｅ、199Ａｕ、211Ａｔ、212 Ｐｂ及び212Ｂを含む。当業者によって用いられている他の放射性核種は、32 Ｐと33Ｐ、71Ｇｅ、77Ａｓ、103Ｐｂ、105Ｒｈ、111Ａｇ、119Ｓｂ、121Ｓｎ、1 31 Ｃｓ、143Ｐｒ、161Ｔｂ、177Ｌｕ、191Ｏｓ、193MＰｔ、197Ｈｇ、全てのβ 陰性及び／又はオーガーエミッターを含む。幾つかの好ましい放射性核種は90Ｙ 、131Ｉ、211Ａｔ及び212Ｐｂ/212Ｂｉを含む。 本発明によると、有効部分はイメージ形成剤でよい。イメージ形成剤は診断手 段並びに転移細胞の位置の確認に用いられる手段として有用である。イメージ形 成は当業者に周知の多くの手段によって実施されることができ、このような手段 に有用な、適当なイメージ形成剤を周知手段によってＳＴ受容体リガンドにコン ジュゲートさせることができる。イメージ形成は例えばラジオシンチグラフィー 、核磁気共鳴イメージ形成（ＭＲＩ）又はコンピューター断層装置（ＣＴスキャ ン）によって実施することができる。最も一般的に用いられる放射性核種イメー ジ形成剤は放射性ヨウ素とインジウムを含む。ＣＴスキャンによるイメージ形成 は例えば鉄キレートのような重金属を用いることができる。ＭＲＩスキャンはガ ドリニウム又はマンガンのキレートを用いることができる。さらに、酸素、窒素 、鉄、炭素又はガリウムの陽電子エミッターを用いる、陽電子放出断層装置（Ｐ ＥＴ）も可能である。イメージ形成手段に有用な放射性核種の例は、43Ｋ、52Ｆ ｅ、57Ｃｏ、67Ｃｕ、67Ｇａ、66Ｇａ、77Ｂｒ、81Ｒｂ／81MＫｒ、87MＳｒ、99 MＴｃ、111Ｉｎ、113MＩｎ、123Ｉ、125Ｉ、127Ｃｓ、129Ｃｓ、131Ｉ、132Ｉ、197 Ｈｇ、203Ｐｂ及び206Ｂｉを含む。 コンジュゲート組成物は非常に低レベルで非免疫遺伝性又は免疫遺伝性である ことが好ましい。したがって、ＳＴ受容体結合ペプチドが小さく、低い免疫遺伝 性又は非免疫遺伝性ペプチド又は非ペプチドであることが好ましい。同様に、有 効部分が小さく、低い免疫遺伝性又は非免疫遺伝性ペプチド又は非ペプチドであ ることが好ましい。小ペプチドであるネイティブＳＴが低免疫遺伝性であると判 明している（Ｋｌｉｐｓｔｅｉｎ，Ｆ．Ａ．等（１９８２），Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉ ｍｍｕｎ．３７：５５０〜５５７；Ｇｉａｎｎｅｌｌａ，Ｒ．Ａ．等（１９８１ ），Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．３３：１８６；Ｂｕｒｇｅｓｓ，Ｍ．Ｎ．等（ １ ９７８），Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．２１：６０；Ｅｖａｎｓ，Ｄ．Ｇ．等（ １９７３），Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．７：８７３；Ｇｙｌｅｓ，Ｃ．Ｌ．（ １９７９），Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１６：３１４；及びＳａｃｋ ，Ｒ．Ｂ．（１９７５），Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２９：３３３ を参照のこと）。同様に、ネイティブＳＴのフラグメント及びアミノ酸置換誘導 体は低免疫遺伝性である。したがって、ＳＴ受容体結合部分としてネイティブＳ Ｔの全て又は一部を含むコンジュゲート組成物は一般に、ネイティブＳＴが低免 疫遺伝性である程度に低免疫遺伝性である。 ＳＴ受容体リガンドを、当業者によって、過度の実験なしに容易に実施される 、多様な周知方法によって有効剤にコンジュゲートさせる。ＳＴ受容体リガンド を有効剤にコンジュゲートさせるために用いられる方法は、ＳＴ受容体リガンド と有効剤の分子性質に依存する。ＳＴ受容体リガンドを有効剤にコンジュゲート させて、単一分子を形成した後に、コンジュゲート分子が部分の活性を保持する ことを実証するために分析を実施することができる。上記ＳＴ受容体結合分析を コンジュゲート化合物を用いて実施して、それがＳＴ受容体に結合することがで きるかどうかを試験することができる。同様に、有効部分の活性を、有効剤の各 自の種類に関して、種々な分析を用いて試験することができる。放射性核種は活 性（すなわち、それらの放射能）をコンジュゲーションに関係なく保持する。ト キシン、薬物及び標的剤である有効剤に関して、これらの化合物の非コンジュゲ ート形の活性を実証するための標準分析法を用いて、活性が保持されることを確 認することができる。 コンジュゲーションはＳＴ受容体リガンドと有効剤との間で直接達成すること ができるか、又はＳＴ受容体リガンドと有効剤との間に連結用の中間分子基を与 えることができる。各部分に結合部位を与えて、コンジュゲーションを容易にす るために、架橋剤が特に有用である。架橋剤は、部分を相互から分離して、一方 が他方の活性を妨害することを防止するようにスペーサーとして役立つ付加的分 子基を含むことができる。 幾つかの好ましい実施態様では、ＳＴ受容体リガンドペプチドは配列番号２、 配列番号３、配列番号５〜５４又はこれらのフラグメント又は誘導体である。こ れらの分子へのコンジュゲーションが各ペプチドのアミノ末端において好ましく 実施されることが観察されている。配列番号２、配列番号３、配列番号５〜５４ と反対の順序でＤアミノ酸配列を含むＳＴ受容体リガンドペプチドでは、コンジ ュゲーションがカルボキシ末端において好ましく実施される。 当業者はＳＴ受容体リガンドペプチドを化学治療剤に周知方法を用いてコンジ ュゲートさせることができる。例えば、本明細書に援用される、Ｍａｇｅｒｓｔ ａｄｔ，Ｍ．，Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ａｎｄ Ｍａｌｉｇ ｎａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅ．（１９９１）ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａ ｔｏｎ，ＵＳＡ，１１０〜１５２頁は、抗体のアミノ酸への種々な細胞静止薬の コンジュゲーションを開示する。このような反応を適用して、化学治療剤をＳＴ 受容体結合ペプチドを含めた、ＳＴ受容体リガンドに適当なリンカーによってコ ンジュゲートさせることができる。例えばＳＴ受容体結合ペプチドのような、遊 離アミノ基を有するＳＴ受容体リガンドを有効剤にその基においてコンジュゲー トさせることができる。現在癌の治療に用いられている、大抵の化学治療剤は直 接タンパク質と化学的架橋を形成しやすい官能基を有する。例えば、メトトレキ セート、ドキソルビシン、ダウノルビシン、サイトシンアラビノシド、シス−プ ラチン、ビンデシン、マイトマイシン並びにブレオマイシンでは遊離アミノ基が 利用可能であり、メトトレキセート、メルファラン及びクロルアンブシルでは遊 離カルボン酸基が利用可能である。これらの官能基（すなわち、遊離のアミノ及 びカルボン酸）が、これらの薬物をＳＴの単一遊離アミノ基に直接架橋させるこ とができる、種々なホモ二官能性及びヘテロ二官能性の化学架橋剤の標的である 。例えば、配列番号２、配列番号３、配列番号５〜５４として、例えばＳＴ受容 体結合ペプチドのような遊離アミノ基を有するＳＴ受容体リガンドを、例えばメ トトレキセート、ドキソルビシン、ダウノルビシン、サイトシンアラビノシド、 シス−プラチン、ビンデシン、マイトマイシン並びにブレオマイシンのような、 遊離アミノ基を有する有効剤又はアルカリホスファターゼ又はタンパク質若しく はペプチド−ベースドトキシンに架橋させる１方法は、ホモ二官能性スクシニミ ジルエステルを、好ましくは例えばジスクシニミジルスベレート（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｏ．，イリノイ州，ロックフォード）のような炭素鎖スペーサーと共に用い る。 開裂可能なコンジュゲート化合物が必要な場合には、３，３’−ジチオビス（ス ルホスクシニミジルプロピオネート；Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｏ．）を用いて、同じプ ロトコールを利用する。 ＳＴ受容体リガンドペプチドをペプチド−ベースド有効剤（例えば、トキシン ）にコンジュゲートさせるために、ＳＴ受容体リガンドとトキシンとを標準ペプ チド合成法又は組換えＤＮＡ方法（これらの両方法は当業者によってルーチンに 実施可能）によって単一融合タンパク質として製造することができる。或いは、 ２ペプチド（ＳＴ受容体リガンドペプチドとペプチド−ベースドトキシン）を製 造することができる及び／又は別々のペプチドとして単離して、架橋剤を用いて コンジュゲートさせることができる。化学治療剤を含むコンジュゲート組成物と 同様に、ＳＴ受容体リガンドペプチドとトキシンとのコンジュゲーションは、Ｓ Ｔ受容体結合ペプチドの単一遊離アミノ基を修飾する能力を利用し、この分子の 受容体結合能力を保持することができる。 当業者は周知方法を用いて、ＳＴ受容体リガンドペプチドを放射性核種にコン ジュゲートさせることができる。例えば、それぞれ本明細書に援用される、Ｍａ ｇｅｒｓｔａｄｔ，Ｍ．，Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ａｎｄ Ｍａｌｉｇｎａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅ．（１９９１）ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏ ｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬＡと；Ｂａｒｃｈｅｌ，Ｓ．Ｗ．及びＲｈｏｄｅｓ，Ｂ ．Ｈ．（１９８３），Ｒａｄｉｏｉｍａｇｉｎｇ ａｎｄ Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ ａｐｙ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ（ニューヨーク州，ニューヨーク）は種々な治療用及 び診断用放射性核種の抗体アミノ酸へのコンジュゲーションを開示する。このよ うな反応を適用して、放射性核種をＳＴ受容体リガンドペプチドに又は、ＳＴ受 容体リガンドペプチドを含めたＳＴ受容体リガンドに、適当なリンカーによって コンジュゲートさせることができる。 本発明は本発明のコンジュゲート化合物と薬剤学的に受容されるキャリヤー又 は希釈剤とを含む薬剤組成物を提供する。当業者は本発明の薬剤組成物を製造す ることができると考えられる。適当なキャリヤーはこの分野の標準的テキストで あるＲｅｍｉｎｇｔｏｎのＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （Ａ．Ｏｓｏｌ）に記載され、このテキストは本明細書に援用される。本発明の 方法の実施においては、本発明のコンジュゲート化合物を単独で又は他の診断剤 、治療剤若しくは付加的な作用剤と組合せて用いることができる。このような付 加的作用剤は例えば着色剤、安定剤、浸透剤(osmotic agent)及び抗菌剤のよう な賦形剤を含む。 本発明のコンジュゲート組成物は、薬剤学的に受容される非経口的ビヒクルに 関連して、例えば、溶液、懸濁液又はエマルジョンとして調製することができる 。このようなビヒクルの例は、水、食塩水、リンガー溶液（Ringer's solution ）、デキストロース溶液および５％ヒト血清アルブミンである。このようなビヒ クルは等張性を維持する添加剤（例えば、塩化ナトリウム、マンニトール）及び 化学的安定性を維持する添加剤（例えば、緩衝剤、保存剤）を含むことができる 。組成物を一般に用いられる方法によって殺菌する。例えば、注射による投与に 適した非経口的組成物は１．５重量％の有効成分を０．９％塩化ナトリウム溶液 に溶解することによって調製する。 本発明による薬剤組成物は単回量として又は複数回量として投与することがで きる。本発明による薬剤組成物は単独治療剤として又は他の治療剤と組合せて投 与することができる。本発明の治療は慣習的な治療法と組合せて、連続して又は 同時に投与することができる。 本発明による薬剤組成物は、コンジュゲート組成物の標的細胞への到達を可能 にする任意の手段によって投与することができる。幾つかの実施態様では、投与 経路は静脈内投与、動脈内投与、腹腔内投与、腫瘍が存在する器官の血液供給源 への局所投与又は腫瘍自体への直接投与から成る群から選択される経路を含む。 静脈内投与が好ましい投与形式である。これは注入ポンプを用いて達成すること ができる。 投与量は、例えば、有効部分の性質；コンジュゲート組成物の性質；薬力学的 特徴；その投与形式と経路；レシピエントの年齢、健康状態及び体重；症状の性 質と重症度；同時治療の種類；及び治療頻度のような要素に依存して変化する。 コンジュゲート化合物はＳＴ受容体を有する細胞を特異的に標的とするので、 化学治療剤又はトキシンを含むコンジュゲート化合物は、化学治療剤又はトキシ ンが非コンジュゲート有効剤として用いられる場合の用量より低い用量で、好ま しくは１００分の１までの有効剤を含む用量で投与される。幾つかの実施態様で は、化学治療剤又はトキシンを含むコンジュゲート化合物を、非コンジュゲート 有効剤として投与される化学治療剤又はトキシンの用量の１０分の１〜１００分 の１量の有効剤を有効成分として含む用量で投与する。適当な用量を判定するた めに、化合物量を重量によってではなくモルで測定することが好ましい。この方 法において、種々なＳＴ結合部分の可変な重量はこの算出に影響を与えない。本 発明のコンジュゲート組成物におけるＳＴ結合部分対有効部分の１：１比を仮定 すると、非コンジュゲート化合物の投与モル数に比べて、低いモル数（好ましく は、１００分の１モル数まで）のコンジュゲート化合物を投与することができる 。 典型的には、化学治療剤コンジュゲートは複数回量に分割されて、静脈内投与 される。 ２０ｇまでのＩＶ／量のメトトレキセートが非コンジュゲート形で典型的に投 与される。メトトレキセートを本発明のコンジュゲート化合物の有効部分として 投与する場合には、用量が１０分の１〜１００分の１に減ぜられる。したがって 、各コンジュゲート化合物が１つのＳＴ受容体結合部分にコンジュゲートした１ 分子のメトトレキセートを含むと仮定すると、コンジュゲート化合物の総投与量 の中、約０．２〜２．０ｇまでのメトトレキセートが存在し、投与される。幾つ かの実施態様では、コンジュゲート化合物の総投与量の中、約２００ｍｇ〜２ｇ までのメトトレキセートが存在し、投与される。 メトトレキセートは４５５の分子量を有する。ＳＴペプチド−メトトレキセー トコンジュゲート １モルは、用いるＳＴペプチドに依存して、約１７５５〜２ ９５５の分子量を有する。ＳＴペプチド−メトトレキセートコンジュゲートの有 効用量範囲は約１０〜１０００ｍｇである。幾つかの実施態様では、５０〜５０ ０ｍｇの投与量(dosage)のＳＴペプチド−メトトレキセートコンジュゲートが投 与される。幾つかの実施態様では、８０〜２４０ｍｇの投与量のＳＴペプチド− メトトレキセートコンジュゲートが投与される。 ドキソルビシンとダウノルビシンとは、それぞれ、約５３５の分子量を有する 。したがって、ＳＴペプチド−ドキソルビシンとＳＴペプチド−ダウノルビシン とは、それぞれ、約１８３５〜２５５３．５の分子量を有する。各コンジュゲー ト 化合物が１つのＳＴ受容体結合部分にコンジュゲートした１分子のドキソルビシ ン又はダウノルビシンを含むと仮定すると、ＳＴペプチド−ドキソルビシン又は ＳＴペプチド−ダウノルビシンの有効用量範囲は約４０〜４０００ｍｇである。 幾つかの実施態様では、１００〜１０００ｍｇの投与量のＳＴペプチド−ドキソ ルビシン又はＳＴペプチド−ダウノルビシンコンジュゲートが投与される。幾つ かの実施態様では、２００〜６００ｍｇの１回量のＳＴペプチド−ドキソルビシ ン又はＳＴペプチド−ダウノルビシンコンジュゲートが投与される。 トキシン含有コンジュゲート化合物は静脈内投与用に配合される。このアプロ ーチを用いると、トキシン ６ナノモルまで／ｋg体重が単回量として投与され て、メラノーマを有する患者に顕著な治療効果を示している（Ｓｐｉｔｌｅｒ， Ｌ．Ｅ．等（１９８７），Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４７：１７１７）。幾つかの 実施態様では、約１１μｇまで／ｋｇ体重のＳＴペプチド−トキシンコンジュゲ ート化合物が治療のために投与される。 各コンジュゲート化合物がＳＴ受容体結合部分にコンジュゲートした１分子の リシントキシンＡ鎖を含むと仮定すると、リシントキシンＡ鎖を含むコンジュゲ ート組成物は、リシントキシンＡ鎖の重量割合がコンジュゲート化合物の総投与 重量の１〜５００μｇであるような用量で投与される。幾つかの好ましい実施態 様では、リシントキシンＡ鎖を含むコンジュゲート組成物は、リシントキシンＡ 鎖の重量割合がコンジュゲート化合物の総投与重量の１０〜１００μｇであるよ うな用量で投与される。幾つかの好ましい実施態様では、リシントキシンＡ鎖を 含むコンジュゲート組成物は、リシントキシンＡ鎖の重量割合がコンジュゲート 化合物の総投与重量の２〜５０μｇであるような用量で投与される。リシントキ シンＡ鎖の分子量は３２，０００である。したがって、ＳＴペプチドに結合した リシンＡ鎖を含むコンジュゲート化合物は約３３，３００〜３４，５００の分子 量を有する。このようなコンジュゲート化合物の投与量範囲は１〜５００μｇで ある。幾つかの実施態様では、このようなコンジュゲート化合物の１０〜１００ μｇが投与される。幾つかの実施態様では、このようなコンジュゲート化合物の ２０〜５０μｇが投与される。 各コンジュゲート化合物がＳＴ受容体結合部分にコンジュゲートした１分子の ジフテリア毒素Ａ鎖を含むと仮定すると、ジフテリア毒素Ａ鎖を含むコンジュゲ ート組成物は、ジフテリア毒素Ａ鎖の重量割合がコンジュゲート化合物の総投与 重量の１〜５００μｇであるような用量で投与される。幾つかの好ましい実施態 様では、ジフテリア毒素Ａ鎖を含むコンジュゲート組成物は、ジフテリア毒素Ａ 鎖の重量割合がコンジュゲート化合物の総投与重量の１０〜１００μｇであるよ うな用量で投与される。幾つかの好ましい実施態様では、ジフテリア毒素Ａ鎖を 含むコンジュゲート組成物は、ジフテリア毒素Ａ鎖の重量割合がコンジュゲート 化合物の総投与重量の４０〜８０μｇであるような用量で投与される。ジフテリ ア毒素Ａ鎖の分子量は６６，６００である。したがって、ＳＴペプチドに結合し たジフテリアＡ鎖を含むコンジュゲート化合物は約６７，９００〜６９，１００ の分子量を有する。このようなコンジュゲート化合物の投与量範囲は１〜５００ μｇである。幾つかの実施態様では、このようなコンジュゲート化合物の１０〜 １００μｇが投与される。幾つかの実施態様では、このようなコンジュゲート化 合物の４０〜８０μｇが投与される。 各コンジュゲート化合物がＳＴ受容体結合部分にコンジュゲートした１分子のＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ 外毒素を含むと仮定すると、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外 毒素を含むコンジュゲート組成物は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素の重量割合 がコンジュゲート化合物の総投与重量の０．０１〜１００μｇであるような用量 で投与される。幾つかの好ましい実施態様では、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素 を含むコンジュゲート組成物は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素の重量割合がコ ンジュゲート化合物の総投与重量の０．１〜１０μｇであるような用量で投与さ れる。幾つかの好ましい実施態様では、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素を含むコ ンジュゲート組成物は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素の重量割合がコンジュゲ ート化合物の総投与重量の０．３〜２．２μｇであるような用量で投与される。Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ 外毒素の分子量は２２，０００である。したがって、Ｓ Ｔペプチドに結合したＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素を含むコンジュゲート化合 物は約２３，３００〜２４，５００の分子量を有する。このような供試コンジュ ゲート化合物の投与量範囲は０．０１〜１００μｇである。幾つかの実施態様で は、このようなコンジュゲート化合物の１〜１０μｇが投与される。幾つかの実 施態様では、このようなコンジュゲート化合物の０．３〜２．２μｇが投与され る。 イメージ形成剤として有用な薬剤組成物中の放射性同位体である有効部分に結 合したＳＴ受容体結合部分を含むコンジュゲート組成物を投与するために、各Ｓ Ｔ受容体結合部分は１つの放射性有効部分に結合することが仮定される。放射性 同位体の投与量はその放射性同位体に依存する。当業者は有効部分として用いる 所定放射性核種の比活性とエネルギーとに基づいて、コンジュゲート化合物の投 与量を容易に配合することができる。イメージ形成剤の投与量につき典型的に０ ．１〜１００ミリキューリー、好ましくは１〜１０ミリキューリー、最も頻繁に は２〜５ミリキューリーが投与される。したがって、ＳＴ受容体結合部分と放射 性部分とを含むコンジュゲート組成物を包含する、イメージ形成剤として有用な 、本発明による薬剤組成物は０．１〜１００ミリキューリーを含み、幾つかの実 施態様では好ましくは１〜１０ミリキューリーを含み、幾つかの実施態様ではよ り好ましくは２〜５ミリキューリーを含む。投与量の例は、投与量あたり131Ｉ ＝約０．１〜１００ミリキューリー、幾つかの実施態様では、好ましくは１〜１ ０ミリキューリー、幾つかの実施態様では、２〜５ミリキューリー、幾つかの実 施態様では、約４ミリキューリー；投与量あたり111Ｉｎ＝約０．１〜１００ミ リキューリー、幾つかの実施態様では、好ましくは１〜１０ミリキューリー、幾 つかの実施態様では、１〜５ミリキューリー、幾つかの実施態様では、約２ミリ キューリー；投与量あたり99mＴｃ＝約０．１〜１００ミリキューリー、幾つか の実施態様では、好ましくは５〜７５ミリキューリー、幾つかの実施態様では、 １０〜５０ミリキューリー、幾つかの実施態様では、約２７ミリキューリーを含 む。放射性部分の比活性とＳＴ受容体結合部分の重量とに依存して、重量によっ て定義される投与量は変化する。ＳＴペプチドは約１３００〜２５００の分子量 を有する。131Ｉ−ＳＴペプチドの比活性が約２０００Ｃｉ／ミリモルである単 一131Ｉに結合したＳＴペプチドを含む薬剤組成物では、０．１〜１００ミリキ ューリーの用量の投与は０．１〜１００μｇの131Ｉ−ＳＴペプチドと等価であ り、１〜１０ミリキューリーの用量の投与は１〜１０μｇの131Ｉ−ＳＴペプチ ドと等価であり、２〜５ミリキューリーの用量の投与は２〜５μｇの131Ｉ−Ｓ Ｔペプ チドと等価であり、１〜５ミリキューリーの用量の投与は１〜５μｇの131Ｉ− ＳＴペプチドと等価である。111Ｉｎ−ＳＴペプチドの比活性が約１Ｃｉ／ミリ モルである単一111Ｉｎに結合したＳＴペプチドを含む薬剤組成物では、０．１ 〜１００ミリキューリーの用量の投与は０．２〜２００ｍｇの111Ｉｎ−ＳＴペ プチドと等価であり、１〜１０ミリキューリーの用量の投与は２〜２０ｍｇの11 1Ｉｎ−ＳＴペプチドと等価であり、２〜５ミリキューリーの用量の投与は４〜 １０ｍｇの111Ｉｎ−ＳＴペプチドと等価であり、１〜５ミリキューリーの用量 の投与は２〜１０ｍｇの111Ｉｎ−ＳＴペプチドと等価である。 治療剤として有用な薬剤組成物中の放射性同位体である有効部分に結合したＳ Ｔ受容体結合部分を含むコンジュゲート組成物を投与するために、各ＳＴ受容体 結合部分は１つの放射性有効部分に結合することが仮定される。放射性同位体の 投与量はその放射性同位体に依存する。当業者は有効部分として用いる所定放射 性核種の比活性とエネルギーとに基づいて、コンジュゲート化合物の投与量を容 易に配合することができる。131Ｉを含む治療剤に関しては、腫瘍部位において 腫瘍１ｇにつき１０〜１０００ｎＭ、好ましくは５０〜５００ｎＭ、より好まし くは約３００ｎＭの131Ｉが望ましい。したがって、約１ｇの腫瘍が存在し、投 与量の約０．１％が腫瘍に結合するならば、０．５〜１００ｍｇの131Ｉ−ＳＴ ペプチドコンジュゲート化合物を投与する。幾つかの実施態様では、１〜５０ｍ ｇの131Ｉ−ＳＴペプチドコンジュゲート化合物を投与する。幾つかの実施態様 では、５〜１０ｍｇの131Ｉ−ＳＴペプチドコンジュゲート化合物を投与する。 Ｗｅｓｓｅｌｓ，Ｂ．Ｗ．とＲ．Ｄ．Ｒｏｇｕｓ（１９８４），Ｍｅｄ．Ｐｈｙ ｓ．１１：６３８及びＫｗｏｋ，Ｃ．Ｓ．等（１９８５），Ｍｅｄ．Ｐｈｙｓ． １２：４０５（これらの両方は本明細書に援用される）は、放射性コンジュゲー ト化合物を含む、本発明の薬剤組成物の製造に使用可能である、診断用及び治療 用コンジュゲートの詳細な投与量算出を開示する。 本発明の１態様は転移結腸直腸癌に罹患したと疑われる個体の治療方法に関す る。このような個体は、薬剤学的に受容されるキャリヤー（担体）又は希釈剤と 、ＳＴ受容体結合部分及び放射安定性治療剤である有効部分を有するコンジュゲ ート化合物とを含む薬剤組成物をこのような個体に投与することによって治療す る ことができる。本発明の幾つかの実施態様では、薬剤組成物は薬剤学的に受容さ れるキャリヤー又は希釈剤と、ＳＴ受容体結合部分及び有効部分を有し、有効部 分が放射安定性治療剤であり、ＳＴ受容体結合部分がペプチドであるコンジュゲ ート化合物とを含む。本発明の幾つかの実施態様では、薬剤組成物は薬剤学的に 受容されるキャリヤー又は希釈剤と、ＳＴ受容体結合部分及び有効部分を有し、 有効部分が放射安定性有効剤であり、ＳＴ受容体結合部分が配列番号２、配列番 号３、配列番号５〜５４及びそれらのフラグメントと誘導体から成る群から選択 されるコンジュゲート化合物とを含む。本発明の幾つかの実施態様では、薬剤組 成物は薬剤学的に受容されるキャリヤー又は希釈剤と、ＳＴ受容体結合部分及び 有効部分を有し、有効部分が放射安定性有効剤であり、ＳＴ受容体結合部分が配 列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号６及び配列番号５４から成る群か ら選択されるコンジュゲート化合物とを含む。本発明の幾つかの実施態様では、 薬剤組成物は薬剤学的に受容されるキャリヤー又は希釈剤と、ＳＴ受容体結合部 分及び有効部分を有し、有効部分が放射安定性治療剤であるコンジュゲート化合 物とを含む。本発明の幾つかの実施態様では、薬剤組成物は薬剤学的に受容され るキャリヤー又は希釈剤と、ＳＴ受容体結合部分及び有効部分を有し、有効部分 がメトトレキセート、ドキソルビシン、ダウノルビシン、サイトシンアラビノシ ド、エトポシド、５−４ フルオロウラシル、メルファラン、クロラムブシル、 シス−プラチン、ビンデシン、マイトマイシン、ブレオマイシン、プロチオニン 、マクロマイシン、１，４−ベべンゾキノン誘導体、トレニモン、リシン、リシ ンＡ鎖、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素、ジフテリア毒素、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉ ｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓホスホリパーゼＣ、ウシ膵臓リボヌクレアーゼ、 ｐｏｋｅｗｅｅｄ抗ウイルスタンパク質、アブリン、アブリンＡ鎖、コブラ毒因 子、ゲロニン、サポリン、モデシン、ビスクミン、ボルケンシン、アルカリホス ファターゼ、ニトロイミダゾール、メトロニダゾール及びミソニダゾールから成 る群から選択される放射安定性有効剤であるコンジュゲート化合物とを含む。本 発明の幾つかの実施態様では、薬剤組成物は薬剤学的に受容されるキャリヤー又 は希釈剤と、ＳＴ受容体結合部分及び有効部分を有し、ＳＴ受容体結合部分が配 列番号２、配列番号３、配列番号５〜５４及びそれらのフラグメントと誘導体か ら成 る群から選択され、有効部分がメトトレキセート、ドキソルビシン、ダウノルビ シン、サイトシンアラビノシド、エトポシド、５−４ フルオロウラシル、メル ファラン、クロラムブシル、シス−プラチン、ビンデシン、マイトマイシン、ブ レオマイシン、プロチオニン、マクロマイシン、１，４−ベンゾキノン誘導体、 トレニモン、リシン、リシンＡ鎖、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素、ジフテリア 毒素、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓホスホリパーゼＣ、ウ シ膵臓リボヌクレアーゼ、ｐｏｋｅｗｅｅｄ抗ウイルスタンパク質、アブリン、 アブリンＡ鎖、コブラ毒因子、ゲロニン、サポリン、モデシン、ビスクミン、ボ ルケンシン、アルカリホスファターゼ、ニトロイミダゾール、メトロニダゾール 及びミソニダゾールから成る群から選択される放射安定性有効剤であるコンジュ ゲート化合物とを含む。 本発明の幾つかの実施態様では、薬剤組成物は薬剤学的に受容されるキャリヤ ー又は希釈剤と、ＳＴ受容体結合部分及び有効部分を有し、有効部分がメトトレ キセート、ドキソルビシン、ダウノルビシン、サイトシンアラビノシド、シス− プラチン、ビンデシン、マイトマイシン、ブレオマイシン、アルカリホスファタ ーゼ、リシンＡ鎖、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素及びジフテリア毒素から成る 群から選択される放射安定性有効剤であるコンジュゲート化合物とを含む。本発 明の幾つかの実施態様では、薬剤組成物は薬剤学的に受容されるキャリヤー又は 希釈剤と、ＳＴ受容体結合部分及び有効部分を有し、ＳＴ受容体結合部分が配列 番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号６及び配列番号５４から成る群から 選択され、有効部分がメトトレキセート、ドキソルビシン、ダウノルビシン、サ イトシンアラビノシド、シス−プラチン、ビンデシン、マイトマイシン、ブレオ マイシン、アルカリホスファターゼ、リシンＡ鎖、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒 素及びジフテリア毒素から成る群から選択される放射安定性有効剤であるコンジ ュゲート化合物とを含む。本発明の幾つかの実施態様では、薬剤組成物は薬剤学 的に受容されるキャリヤー又は希釈剤と、実施例１に記載した放射安定性コンジ ュゲート化合物とを含む。治療される個体は転移した結腸直腸癌を有すると診断 されるか若しくは局在結腸直腸癌を有すると診断されて、まだ検出されない転移 がある場合には、プロアクティブに(proactively)治療を受けることができる。 薬 剤組成物は治療有効量のコンジュゲート組成物を含む。治療有効量は転移した結 腸直腸癌に対して細胞障害性又は細胞静止性効果を惹起するために有効であり、 個体に対して致命的な副作用を及ぼさない量である。 本発明の一つの様相は、転移した結腸直腸癌に罹患していると思われる個体の 治療法に関する。そのような個体は、薬学的に受容可能な担体もしくは希釈液、 ならびにST受容体結合部分及び有効部分（ここで有効部分は放射性である）から なるコンジュゲート化合物を含む、薬剤組成物をその人に投与することにより治 療されうる。本発明のいくつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学的に受容可能 な担体もしくは希釈液、ならびにST受容体結合部分及び有効部分（ここで有効部 分は放射性であり、ST受容体結合部分はペプチドである）からなるコンジュゲー ト化合物を含んでいる。本発明のいくつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学的 に受容可能な担体もしくは希釈液、ならびにST受容体結合部分及び有効部分から なるコンジュゲート化合物を含んでおり、ここで有効部分は放射性であり、ST受 容体結合部分はSEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5-54並びにそれらの断片 および誘導体から成るグループから選択される。本発明のいくつかの態様では、 該薬剤組成物は、薬学的に受容可能な担体もしくは希釈液、ならびにST受容体結 合部分及び有効部分からなるコンジュゲート化合物を含んでおり、ここで有効部 分は放射性であり、ST受容体結合部分はSEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO:6, およびSEQ ID NO:54 から成るグループから選択される。本発 明のいくつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学的に受容可能な担体もしくは希 釈液、ならびにST受容体結合部分及び有効部分からなるコンジュゲート化合物を 含んでおり、ここで有効部分は47Sc, 67Cu, 90Y, 109Pd, 123I, 125I, 131I, 18 6 Re, 188Re, 199Au, 211At, 212Pb, 212B, 32Pおよび33P, 71Ge, 77As, 103Pb,1 05 Rh, 111Ag, 119Sb, 121Sn, 131Cs, 143Pr, 161Tb, 177Lu, 191Os, 193MPt な らびに197Hgから成るグループから選択される放射性同位体である。本発明のい くつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学的に受容可能な担体もしくは希釈液、 ならびにST受容体結合部分及び有効部分からなるコンジュゲート化合物を含んで おり、ここでST受容体部位はSEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5-54 並び にそれらの断片および誘導体から成るグループから選択され、有効部分は47Sc, 67 Cu, 90Y, 109Pd, 123I, 125I, 131I, 186Re, 188Re, 199Au, 211At, 212Pb, 2 12 B, 32Pおよび33P, 71Ge, 77As, 103Pb, 105Rh, 111Ag, 119Sb, 121Sn, 131Cs, 143Pr, 161Tb, 177Lu, 191Os, 193MPt, 197Hg, 全てのβ-および/もしくはオー ジェ放射物質から成るグループから選択される放射性同位体である。本発明のい くつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学的に受容可能な担体もしくは希釈液、 ならびにST受容体結合部分及び有効部分からなるコンジュゲート化合物を含んで おり、ここで有効部分は47Sc, 67Cu, 90Y, 109Pd, 123Ｉ, 125Ｉ, 131Ｉ, 186Re , 188Re, 199Au, 211At, 212Pb, 212B, 32Pおよび33P, 71Ge, 77As, 103Pb, 105 Rh, 111Ag, 119Sb, 121Sn, 131Cs, 143Pr, 161Tb, 177Lu, 191Os, 193MPt, 並び に197Hg から成るグループから選択される放射性同位体である。本発明のいくつ かの態様では、該薬剤組成物は、薬学的に受容可能な担体もしくは希釈液、なら びにST受容体結合部分及び有効部分からなるコンジュゲート化合物を含んでおり 、ここでST受容体部位はSEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6 , およびSEQ ID NO:54 から成るグループから選択され、有効部分は47Sc, 67Cu, 90Y, 109Pd, 123I, 125I, 131I, 186Re, 188Re, 199Au, 211At, 212Pb, 212B, 32 Pおよび33P, 71Ge, 77As, 103Pb, 105Rh, 111Ag, 119Sb, 121Sn, 13lCs, 143P r, 161Tb, 177Lu, 191Os, 193MPt, 並びに197Hg から成るグループから選択され る放射性同位体である。本発明のいくつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学的 に受容可能な担体もしくは希釈液、および実施例１に記載された放射性コンジュ ゲート化合物から成る。治療を受ける個体は、転移した結腸直腸癌を有す、若し くは限局した結腸直腸癌を有すと診断されることもあり、未検出の転移がある事 例においては、前もって治療を受ける場合もありうる。該薬剤組成物は、治療上 有効な量の該コンジュゲート化合物を含んでいる。治療上有効な量とは、個体に 致命的な副作用をもたらすことなく、転移した結腸直腸癌細胞に対して細胞傷害 もしくは増殖抑制を効果的に惹起させる量である。 本発明の一つの様相は、転移した結腸直腸癌を罹患していると思われる個体に おいて、ラジオイメージ（radioimaging）により転移した結腸直腸癌細胞を検出 する方法に関する。そのような個体は、転移した結腸直腸癌に罹患していると診 断され、薬学的に受容可能な担体もしくは希釈液、ならびにST受容体結合部分及 び有効部分（ここで有効部分は放射性である）からなるコンジュゲート化合物を 含む、薬剤組成物を、望ましくは静脈投与により個体に投与し、放射活性の局部 的な蓄積若しくは凝集の存在（ST受容体を持つ細胞の存在を示唆する）を検出す ることによって、転移した結腸直腸癌細胞が検出されるだろう。本発明のいくつ かの態様では、該薬剤組成物は、薬学的に受容可能な担体もしくは希釈液、なら びにST受容体結合部分及び有効部分（ここで有効部分は放射性であり、ＳＴ受容 体結合部分はペプチドである）からなるコンジュゲート化合物を含んでいる。本 発明のいくつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学的に受容可能な担体もしくは 希釈液、ならびにST受容体結合部分及び有効部分からなるコンジュゲート化合物 を含んでおり、ここで有効部分は放射性であり、ST受容体結合部分はSEQ ID NO: 2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5-54並びにそれらの断片および誘導体から成るグル ープから選択される。本発明のいくつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学的に 受容可能な担体もしくは希釈液、ならびにST受容体結合部分及び有効部分からな るコンジュゲート化合物を含んでおり、ここで有効部分は放射性であり、ST受容 体結合部分はSEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, およびSE Q ID NO:54 から成るグループから選択される。本発明のいくつかの態様では、 該薬剤組成物は、薬学的に受容可能な担体もしくは希釈液、ならびにST受容体結 合部分及び有効部分からなるコンジュゲート化合物を含んでおり、ここで有効部 分は、鉄キレートなどの放射性重金属、ガドリニウムもしくはマンガンの放射性 キレート、酸素、窒素、鉄、炭素、若しくはガリウムの陽電子放射体、43K, 52F e, 57Co, 67Cu, 67Ga, 68Ga, 77Br, 81Rb/81MKr, 87MSr, 99MTc, 111In, 113MIn , 123I, 125I, 127Cs, 129Cs, 131I, 132I, 197Hg, 203Pb, 並びに206Bi から成 るグループから選択される放射性同位体である。本発明のいくつかの態様では、 該薬剤組成物は、薬学的に受容可能な担体もしくは希釈液、ならびにST受容体結 合部分及び有効部分からなるコンジュゲート化合物を含んでおり、ここでST受容 体部位はSEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5-54 並びにそれらの断片およ び誘導体から成るグループから選択され、有効部分は、鉄キレートなどの放射性 重金属、ガドリニウムもしくはマンガンの放射性キレート、酸素、窒素、鉄、炭 素、若しくはガリウムの陽電子放射体、43K, 52Fe, 57Co, 67Cu, 67Ga, 68Ga, 7 7 Br, 81Rb/81MKr, 87MSr, 99MTc, 111In, 113MIn, 123I, 125I, 127Cs, 129Cs, 131 I, 132I, 197Hg, 203Pb, 並びに206Bi から成るグループから選択される放射 性同位体である。本発明のいくつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学的に受容 可能 な担体もしくは希釈液、ならびにST受容体結合部分及び有効部分からなるコンジ ュゲート化合物を含んでおり、ここで有効部分は、43K, 52Fe, 57Co, 67Cu, 67G a, 68Ga, 77Br, 81Rb/81MKr, 87MSr, 99MTc, 111In, 113MIn, 123I, 125I, 127C s, 129Cs, 131I, 132I, 197Hg, 203Pb, 及び206Bi から成るグループから選択さ れる放射性同位体である。本発明のいくつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学 的に受容可能な担体もしくは希釈液、ならびにST受容体結合部分及び有効部分か らなるコンジュゲート化合物を含んでおり、ここでST受容体部位はSEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, およびSEQ ID NO:54 から成るグル ープから選択され、有効部分は43K, 52Fe, 57Co, 67Cu, 67Ga, 68Ga, 77Br, 81R b/81MKr, 87MSr, 99MTc, 111In, 113MIn, 123I, 125I, 127Cs, 129Cs, 131I, 13 2 I, 197Hg, 203Pb, 及び206Bi から成るグループから選択される放射性同位体で ある。本発明のいくつかの態様では、該薬剤組成物は、薬学的に受容可能な担体 もしくは希釈液、および実施例１に記載された放射性コンジュゲート化合物から 成る。治療を受ける個体は、転移した結腸直腸癌を有す、若しくは限局した結腸 直腸癌を有すと診断されることもあり、未検出の転移がある事例においては前も って治療を受ける場合もありうる。該薬剤組成物は、診断上有効な量の該コンジ ュゲート化合物を含んでいる。診断上有効な量とは、個体に致命的な副作用をも たらすことなく、ST受容体を持つ細胞が限局している体の部分を検出できる量で ある。 本発明のまた別の様相は、ST受容体結合性リガンドおよび有効部分を含む非コ ンジュゲート組成物に関する。例えば、リポソームは脂質から成る小胞である。 薬剤をこれらの小胞の中央に導入することができる。これらの小胞の外殻はST受 容体結合性リガンドを含む。Liposomes 第１、２、及び３巻 CRC Press Inc. Bo ca Raton FLA（本明細書中で参考文献に取り入れられている）は、外殻にST受容 体リガンドに相当するターゲッティング試薬を含むリポソームに封入された、有 効成分の調製を開示している。リポソームのマトリクスにST受容体リガンドを、 内部に有効成分を含む非コンジュゲート組成物には、ST受容体がSEQ ID NO:2, S EQ ID NO:3, SEQ ID NO:5-54 並びにそれらの断片および誘導体から成るグルー プから選択され、有効成分がメトトレキセート、ドキソルビシン、ダウノルビシ ン、シトシンアラビノシド、エトポシド、5-4 フルオロウラシル、メルファラン 、クロランブシル、シス−プラチン、ビンデシン、マイトマイシン、ブレオマイ シン、プロチオニン、マクロモマイシン、1,4-ベンゾキノン誘導体、トレニモン 、リチン、リチンA鎖、Pseudomonas 外毒素、ジフテリア毒素、Clostridium per fringensホスホリパーゼ Ｃ、ウシ膵臓リボヌクレアーゼ、ｐｏｋｅｗｅｅｄ抗 ウイルス蛋白質、アブリン、アブリンA鎖、コブラ毒性因子、ゲロニン、サポリ ン、モデシン、ビスクミン、ボルケンシン、アルカリホスファターゼ、ニトロイ ミダゾール、メトロニダゾールおよびミソニダゾールから成るグループから選択 されるような組成物が含まれる。 本発明のまた別の様相は、転移した結腸直腸癌細胞以外の腸管正常細胞などの ST受容体を含む細胞に治療用核酸分子を運搬するのに使われるST受容体リガンド から成る、非コンジュゲートおよびコンジュゲート組成物に関する。いくつかの 態様では、遺伝子材料が転移した腫瘍細胞に運搬され、免疫系の標的となりうる 抗原が産生されるか、または細胞を殺す若しくはその増殖を阻害する蛋白質が産 生される。いくつかの態様では、ST受容体リガンドは、欠損している内因性遺伝 子と置き換わる、若しくは治療蛋白質をコードする核酸分子をコードする核酸を 運搬するのに利用される。従って、いくつかの態様では、ST受容体リガンドを用 いて腸管にある細胞に特異的に有効成分を運搬させ、この器官特異的な疾病を治 療する。本発明のこの様相によれば、組成物は、欠損遺伝子と置き換わりうる核 酸分子を含む。いくつかの態様では、本組成物は、遺伝的欠損を補うために必要 なそして／または望まれる遺伝子材料を個体に運搬する、遺伝子治療操作に使わ れる。 いくつかの態様では、ST受容体リガンドを、運搬体と組み合わせる、または運 搬体に取り込ませることによって、その運搬体を特定の標的を持つ運搬体に変換 させる。例えば、ST受容体結合性ペプチドをウイルス粒子の外縁部に挿入して、 ST受容体を持つ細胞に特異的なウイルスといったものを作ることもできる。同様 に、ウイルスのコート蛋白質を、（ウイルス粒子の外側に露出するか、そうでな ければ外側から接近可能な）ST受容体結合活性のあるペプチドを含む融合蛋白質 として生産されるように作り替えて、ST受容体を持つ細胞に特異的なウイルスと いったものを作ることも可能である。いくつかの態様では、ST受容体リガンドが リポソームの外側に露出するか、さもなければ外側から接近可能なように、ST受 容体リガンドをリポソームに挿入するか、そうでなければ取り込ませることによ り、ST受容体を持つ細胞を特異的に標的とするようなリポソームを作ることも可 能である。 本発明のこの様相によるコンジュゲート若しくは非コンジュゲート組成物中の 有効成分は核酸分子である。核酸はRNA若しくは望ましくはDNAであってもよい。 いくつかの態様では、核酸分子はアンチセンス分子であるか、または、細胞に存 在すると望ましくない蛋白質の産生を阻害するアンチセンス配列をコードする。 いくつかの態様では、核酸分子はリボザイム（細胞中に存在すると望ましくない 蛋白質の産生を阻害する）をコードする。いくつかの態様では、核酸分子は、細 胞において望ましく生産される蛋白質若しくはペプチドをコードする。いくつか の態様では、核酸分子は、標的細胞で欠損した遺伝子の機能的なコピーをコード する。核酸分子は、細胞中でコード配列を発現させるのに必要な調節エレメント を機能可能につなげられていると望ましい。 リポソームは脂質から成る小胞である。ST受容体を有す細胞で発現してほしい 蛋白質をコードする遺伝子コンストラクトを、これらの小胞の中央部に導入する 。これらの小胞の外殻にはST受容体リガンド（いくつかの態様ではSTペプチドが 望ましい）が含まれる。Liposome 第１、２、及び３巻 CRC Press Inc. Boca Ra ton FLA（本明細書中で参考文献に取り入れられている）は、外殻に抗体を含む リポソームに封入された、有効成分の調製を開示している。本発明では、例えば 、STペプチドのようなST受容体リガンドが外殻中の抗体に対応する。リポソーム のマトリクスにST受容体リガンドを、内部に有効成分を含む非コンジュゲート組 成物には、ST受容体リガンドがSEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5-54 並 びにそれらの断片および誘導体から成るグループから選択されるような組成物が 含まれる。 例えばある態様では、塩素輸送蛋白質をコードする特定の遺伝子の変異（最終 的に多くの組織、特に呼吸器および腸管に機能異常を生み出す）が存在する遺伝 病である嚢胞性繊維症は、正しい遺伝子を細胞に運搬するST受容体リガンドを用 いた、遺伝子治療技術により治療される。現行の治療は、呼吸器系の変異遺伝子 を、気管にある細胞にだけ結合するウイルスを用いてこれらの細胞に直接遺伝子 をターゲッティングする事によって、正常遺伝子に置換するよう方向で進められ てきた。同様に、ST受容体リガンドを表面に配され、腸管に運搬されるリポソー ムに、正常遺伝子をパッケージする。ST受容体リガンドは、嚢胞性繊維症の障害 を正す正常遺伝子を含むリポソームを、腸管（十二指腸から直腸まで）にある特 定の細胞を標的とし、向かわせる。その遺伝子材料がそれらの細胞に取り込まれ れば、腸管の嚢胞性繊維症が治癒されるはずである。 また別の態様では、p53腫瘍抑制因子の正常コピーの腸管への運搬は、ST受容 体リガンドを用いてなされ、遺伝子を治療に赴かせる。p53腫瘍抑制遺伝子の変 異は、腸管の結腸直腸癌の進行に主要な役割を担っていると考えられている。本 疾病に対抗する一つのアプローチ法は、この遺伝子の正常コピーを、腸管に、こ の遺伝子の変異型を発現する細胞に運搬することである。正常なp53腫瘍抑制遺 伝子を含む遺伝子コンストラクトを、ST受容体リガンドを含むリポソームに取り 込ませる。本組成物は腸管に運搬される。ST受容体結合性リガンドは、腸細胞中 のp53抑圧遺伝子の変異により生じた障害を正す正常遺伝子を含むリポソームを 、特異的に標的および方向付けする。 遺伝子コンストラクトの調製は当該分野に熟達したものの技術範囲内である。 本発明により、そのようなコンストラクトは、本発明のST受容体リガンドを用い ることで特異的な標的を持つことが可能となる。本発明の組成物は、運搬体と結 合したSTペプチドのようなST受容体リガンド、並びに腸管細胞において産生され てほしい蛋白質のコード配列（細胞での発現に必要な調節配列をつなげられてい る）から成る遺伝子コンストラクトを含む。腸管細胞に取り込ませるために、組 成物は経口若しくは浣腸によって投与され、これにより組成物は腸管に入りST受 容体を含む細胞と接触する。運搬体はST受容体リガンドによってST受容体と結合 し、運搬体は細胞内に取り入れられる、またはそうでなければ有効成分／遺伝子 コンストラクトが細胞に取り込まれる。いったん取り入れられれば、コンストラ クトは治療効果を個体に提供することができる。当該分野の熟達者ならば、経口 もしくは浣腸投与用にそのような組成物を容易に処方し、疾病もしくは障害治療 に投与すべきそのような組成物の有効量を決定できる。 イメージ用および治療用組成物、システム、方法並びにキットに加え、本発明 は、患者および患者試料のin vitro スクリーニング、診断並びに解析に有用な 方法、組成物、キットおよび方法に関する。患者及び患者試料のin vitro スク リーニング、診断並びに解析に有用な、本発明の組成物、キットおよび方法を用 いて細胞中のST受容体蛋白質発現を検出できる。ここでST受容体を発現する細胞 の存在は結腸直腸癌の転移の指標である。さらに、本発明は、細胞中のST受容体 蛋白質発現を検出する（ここでST受容体を発現する細胞の存在は、腫瘍が結腸直 腸癌由来であることを示唆するそして／または確認する）、患者および患者試料 のin vitro スクリーニング、診断並びに解析に有用な方法、組成物、キットお よび方法に関する。本発明の更なる態様では、結腸直腸細胞を視覚化する有用な 組成物、キットおよび方法が提供される。結腸組織からの組織試料を解析するそ のような組成物、キット、および方法により、結腸直腸腫瘍細胞の固有層への転 移若しくは侵入の程度を評価する。 in vitro スクリーニングおよび診断組成物、方法並びにキットは、結腸直腸 癌の高リスク群にある個体（例えば、限局した疾病および／若しくは転移した疾 病を有すと診断されている個体、並びに／または遺伝学的に疾病と連鎖している 個体）を監視するのに利用できる。in vitro スクリーニングおよび診断組成物 、方法並びにキットは、限局した結腸直腸癌の治療を受けている、および／もし くは受けたことのある個体を監視し、癌が転移したか否かを決定するのに利用で きる。in vitro スクリーニングおよび診断組成物、方法並びにキットは、転移 した結腸直腸癌の治療を受けている、および／もしくは受けたことのある個体を 監視し、転移した癌が排除されたか否かを決定するのに利用できる。in vitro スクリーニングおよび診断組成物、方法並びにキットは、それ以外の疑わしい個 体、即ち遺伝子スクリーニングおよび／もしくは家系図などによって遺伝学的傾 向があると同定された個体を監視するのに利用できる。疫学と同様に技術面での 遺伝学および発生学の理解の向上は、ある個体が結腸直腸癌にかかる可能性およ び危険性の評価決定を可能にする。健康に関する家系図および／もしくは遺伝子 スクリーニングを用いることで、特定の個人が結腸直腸癌を含めてあるタイプの 癌に かかる可能性を評価することが可能である。特定の型の癌にかかる傾向があると 同定されたことのある個体は、転移した結腸直腸癌の証拠検出に関して、監視ま たはスクリーニングすることができる。そのような証拠が発見されると、早期治 療がなされ、疾病に対抗することができる。従って、転移した結腸直腸癌にかか る危険にある個体を同定し、試料をそのような個体から分離することができる。 本発明は、結腸直腸癌を罹患したことのある親戚を含む健康家系図を持つと同定 された個体を監視するのに特に有用である。同様に、本発明は、結腸直腸癌を有 すと診断された個体、および特に、転移した結腸直腸癌の治療を受けたことのあ る個体を含め、治療を受け腫瘍を切除されたことのある、そして／または、さも なければ鎮静中の個体を監視するのに特に有用である。 in vitro スクリーニングおよび診断組成物、方法並びにキットは、腫瘍の解 析に利用できる。ST受容体の発現は、細胞型のマーカーであり、確認すべき結腸 直腸癌の初期診断を可能にするほか、結腸直腸腫瘍として、起源未確認のアデノ カルシノーマの起源同定を可能にする。結腸直腸であると考えられる腫瘍を、本 発明の組成物、方法およびキットを用いてそのように確認することができる。本 発明を用いて、腫瘍が結腸直腸由来であることを確認することによって結腸直腸 癌の診断を確認することができる。同様に、起源未知の腫瘍を、本発明の組成物 、方法およびキットを用いて解析して、結腸直腸起源であると同定することがで きる。本発明を用いて、起源未確認のアデノカルシノーマを罹患する個体から切 除された腫瘍サンプル中の結腸直腸腫瘍を同定することができる。 本発明のin vitro スクリーニングおよび診断組成物、キット並びに方法を用 いて、結腸組織からの組織試料を解析し、結腸直腸腫瘍細胞の固有層への転移も しくは侵入の程度を評価できる。固有層は、結腸直腸管および人体の残りの部分 の間の障壁である（Biley's Textbook of Histology，第16版，Coperhaven ら， 1975，Williams and Wilkens，バルチモア、メリーランド州、404頁；本明細書 中で参考文献に取り入れられている）。固有層の細胞中にST受容体若しくはST受 容体蛋白質をコードするmRNAを同定することによって、結腸直腸腫瘍細胞の非結 腸直腸組織への侵入／浸潤の程度を評価し、確認することができる。 本発明により、ST受容体蛋白質もしくは該受容体をコードするmRNAに結合する 化合物が提供される。体の正常組織は、腸管細胞を除き、ST受容体もしくはST受 容体をコードするmRNAを持たない。転移した結腸直腸細胞は、非結腸直腸試料に おいてST受容体もしくはST受容体をコードするmRNAを検出することによって同定 されうる。ST受容体の発現は、細胞型のマーカーであり、腸以外の試料中の結腸 直腸転移の同定を可能にする。ST受容体蛋白質もしくはそれをコードするmRNAを 用いて、結腸直腸腫瘍細胞の基底膜への侵入の程度を評価するために、管腔の他 の細胞から区別して結腸直腸由来の細胞を視覚化させることができる。 本発明のいくつかの態様では、結腸直腸でない組織および体液試料もしくは腫 瘍試料をスクリーニングしてST受容体蛋白質の有無を同定することができる。ST 受容体／リガンド結合アッセイ、EILSAアッセイおよびウェスタンブロットなど の技法を行うことで試料中にST受容体が存在するか否かを決定できる。 本発明のいくつかの態様では、結腸直腸でない組織および体液試料もしくは腫 瘍試料をスクリーニングして、ST受容体蛋白質をコードするmRNAの有無を検出す ることによって結腸直腸管の外側の細胞にST受容体蛋白質が発現しているかを同 定することができる。ST受容体蛋白質をコードするmRNAもしくはそれから作製さ れるcDNAの存在を、PCR増幅、ノザンブロット（mRNA）、サザンブロット（cDNA ）、もしくはオリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションなどの技術を用いて決 定できる。 本発明のいくつかの態様では、結腸直腸でない組織試料もしくは腫瘍試料を検 定して、ST受容体蛋白質の有無を同定できる。ST受容体／リガンド結合もしくは 免疫組織化学ブロットなどの技法を組織切片に対して行うことで、試料中にST受 容体が存在するか否かを決定できる。 本発明のいくつかの態様では、結腸直腸でない組織試料もしくは腫瘍試料の細 胞を検定して、ST受容体蛋白質をコードするmRNAの有無を検出することによって 結腸直腸管の外側の細胞にST受容体蛋白質が発現しているかを決定することがで きる。組織切片からの細胞中でのST受容体蛋白質をコードするmRNAもしくはそれ から作製されるcDNAの存在は、in situ ハイブリダイゼーションなどの技術を用 いて決定できる。 結腸直腸でない組織および体液試料中の、もしくは結腸直腸でない組織試料か らの細胞上でのST受容体の存在は、結腸直腸腫瘍転移を示唆する。腫瘍試料もし くは腫瘍細胞におけるST受容体の存在は、その腫瘍が結腸直腸結由来であること を示唆する。非結腸直腸組織及び体液試料または非結腸直腸組織試料由来細胞に おいて、ST受容体をコードするmRNAが存在することは、結腸直腸腫瘍の転移を示 唆する。腫瘍試料及び腫瘍細胞におけるST受容体をコードするmRNAの存在は、腫 瘍が結腸直腸に起源を持つことを示唆する。 本発明のいくつかの様相は、固有層における腫瘍細胞の転移性移動（結腸直腸 腫瘍細胞の基底膜への侵入の程度を示す）を評価する方法およびキットを提供す る。本発明のいくつかの態様では、固有層の切片を含む組織試料を、結腸直腸腫 瘍を切除する外科手術を受けている若しくは術後の回復期にある個体から分離す ることができる。組織は解析されて、結腸直腸新生物細胞による固有層の基底膜 への侵入の程度が決定される。ST受容体蛋白質の有無の同定により、転移を示唆 する腫瘍細胞の基底膜への移動評価が確認される。ST受容体／リガンド結合およ び免疫組織化学アッセイなどの技法を行って、ST受容体が組織試料中の細胞に発 現しているか（転移性移動の指標となる）を決定することができる。また、本発 明のいくつかの態様では、固有層を含む組織試料を解析して、ST受容体蛋白質を コードするmRNAの有無を検出することによって、ST受容体蛋白質が組織試料中の 細胞に発現しているか（転移性移動を示唆する）が同定される。ST受容体蛋白質 をコードするmRNAもしくはそこから作製されるcDNAの存在は、in situ ハイブリ ダイゼーションなどの技術を用いて決定できる。 本発明の方法を用いてST受容体の発現を同定することにより、腫瘍からの試料 を結腸直腸由来として同定することができる。起源未確認のアデノカルシノーマ を罹患している個体から切除された腫瘍試料を試験して、ST受容体蛋白質もしく はST受容体蛋白質をコードするmRNAを有すか否かを決定することができる。試料 が腸管から切除されていれば、凍結細胞の切片を検定して、腫瘍細胞がST受容体 蛋白質を発現するかを決定することができる。試料が腸の外側の組織から取られ ている場合、凍結細胞の切片を検定して、腫瘍細胞がST受容体蛋白質を発現する かを決定できる、または、癌でない細胞はST受容体を持たず、従ってバックグラ ウンドには存在しないことから、試料をホモジナイズして試験することもできる 。 試料は、切除した組織、若しくは針生検を含めた生検材料から得てもよい。外 科病理用の組織切片調製品を標準技術を用いて凍結、調製することができる。組 織切片に対するST結合アッセイにおいて、細胞を固定する前にSTを加える。組織 切片に対する免疫組織化学およびin situ ハイブリダイゼーション結合アッセイ を固定した細胞に行う。腸以外の試料を、超音波処理、機械的破壊または界面活 性剤溶解などの化学的溶解などの標準技術によりホモジナイズすることができる 。血液、尿、リンパ液、脳髄液、羊水、膣液、精液および糞便試料などの人体腫 瘍試料もスクリーニングして、そのような腫瘍が結腸直腸に起源を持つかを決定 できることも考慮される。 非結腸直腸組織試料は、結腸直腸管、即ち小腸以下の腸管（即ち、盲腸、上行 結腸、横行結腸、下行結腸およびＳ字結腸を含む大腸（結腸）並びに直腸）そし て付加的に十二指腸と小腸（空腸および回腸）を除いたいずれの組織から得ても よい。結腸直腸管以外の全ての細胞はST受容体を発現しない。従って、ST受容体 蛋白質若しくはST受容体蛋白質をコードするmRNAが非結腸直腸試料において検出 されれば、転移性結腸直腸癌細胞の存在が示唆される。いくつかの好適な態様で は、組織試料はリンパ節である。 組織試料は、生検針の使用を含め、標準的な外科技術により得ることができる 。当該分野の熟達者は、ST受容体蛋白質に関して検定されうる様々な試験試料を 容易に理解し、組織試料を得る方法に気づくであろう。 これらの試料をホモジナイズするか、さもなければ、超音波処理、機械的破壊 、界面活性剤溶解などの化学的溶解もしくはそれらの組み合わせなどのよく知ら れた技術によって、ST受容体蛋白質の存在に関してスクリーニングすることがで きる。 体液試料の例には、血液、尿、リンパ液、脳髄液、羊水、膣液および精液が含 まれる。いくつかの好適な態様では、血液が体液試料として使われる。遠心のよ うにして細胞を体液試料から分離できる。当該分野の熟達者は、ST受容体蛋白質 を検定できる種々の試験試料を容易に理解するであろう。試験試料は、シリンジ で液を抜き取るような方法、若しくは綿棒によって得ることができる。当該分野 の熟達者は、試験試料を得る他の方法を容易に気づくことだろう。 血液試料を用いたアッセイでは、血漿を血液細胞から分離してもよい。血漿を 、短縮型蛋白質（ST受容体蛋白質が転移した結腸直腸腫瘍細胞から切断されるか 、若しくは抜け落ちた際に血中に放出される）を含めたST受容体蛋白質に関して スクリーニングすることができる。いくつかの態様では、血液細胞画分を転移し た結腸直腸腫瘍細胞の存在に関してスクリーニングする。いくつかの態様では、 細胞を溶解させ、ST受容体蛋白質若しくはST受容体蛋白質をコードするmRNAの存 在（血液細胞により食されうる転移した結腸直腸腫瘍細胞が存在した結果として 存在しうる）を検出することによって、血液細胞画分中に存在するリンパ球をス クリーニングする。 管腔組織の解析に関する本発明の様相について、本発明は、外科患者から採取 される腫瘍部位およびその近辺の管腔試料を用いて、結腸直腸腫瘍細胞の転移性 移動のレベルを評価するのに有用である。本発明のいくつかの様相は、細胞を特 徴付け評価するために外科病理学者により日常的に調製される固定切片である組 織試料を解析する方法を、提供する。いくつかの態様では、細胞は固有層由来で 、解析されて、結腸直腸腫瘍細胞の転移の度合いが決定され評価される。固有層 は、結腸直腸管と人体の残りの部分との間の障壁を表す。固有層細胞におけるST 受容体若しくはST受容体蛋白質をコードするmRNAの存在を同定することによって 、結腸直腸腫瘍細胞の非結腸直腸組織への侵入／浸潤の程度を評価できる。いく つかの態様では、生検において、または未知の起源を持つアデノカルシノーマと して、細胞を切除し、解析して結腸直腸腫瘍細胞であるかを決定し評価する。い くつかの態様では、細胞を結腸直腸由来と思われる腫瘍から採取し、本発明の方 法及び組成物及びキットを用いて、腫瘍細胞の起源同定を確認する。 結腸直腸腫瘍除去の際に、切除もしくは結腸内視鏡などによって固有層の試料 を取る。基底膜細胞を含めた試料を凍結させる。ST結合アッセイを行うべきなら 、標識したSTを凍結させた切片に接触させ、次いで細胞を固定し染色する。免疫 組織化学もしくはin situ ハイブリダイゼーションを行うべきならば、凍結切片 を染色してからアッセイを実行する。当該分野の技術を有するものなら、標準的 技術を用いて固有層部分を含む試料を分離し、それらを固定して染色することが 容 易にできる。ST受容体検出技術に提供される視覚化に加えて、切片をより包括的 に解析し、結腸直腸新生物細胞の固有層への侵入レベルを決定することができる 。本発明を用いて、限局した結腸直腸腫瘍の進行度を解析し評価することができ る。即ち、それらが粘膜層にある基底膜を突き抜けて粘膜下組織へ侵出していれ ば、一次若しくは非転移性の結腸直腸腫瘍である。 ST受容体蛋白質への露出に応答して産生された抗体を用いて非結腸直腸組織若 しくは体液中のST受容体蛋白質の存在を検出することによって、結腸直腸癌転移 に罹患している個体を同定するのに、イムノアッセイ法を利用することもできる 。さらに、ST受容体蛋白質への露出に応答して産生された抗体を用いて腫瘍試料 中のST受容体蛋白質の存在を検出することによって、結腸直腸癌に罹患している 個体を同定するのに、イムノアッセイ法を利用することもできる。 抗体はモノクローナル抗体が望ましい。抗体はヒト細胞で作られたST受容体蛋 白質に対して作成されたものが望ましい。望ましくは、抗体はST受容体蛋白質の 細胞外ドメイン上のエピトープに結合する。イムノアッセイはよく知られており 、その設計は当該分野の熟達者により日常的に行われうるものである。当該分野 の熟達者は、ST受容体蛋白質に特異的に結合し、標準技術を用いた本発明の方法 及びキットに有用で容易に入手可能な開始材料であるモノクローナル抗体を産生 することができる。モノクローナル抗体産生技術は、Harlow, E. とD. Lane, （ 1988）ANTIBODIES: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Co ld Spring Harbor NY（本明細書中にて参考文献に取り入れられている）に概要 が記されており、ハイブリドーマ、および、標的蛋白質に特異的に結合するモノ クローナル抗体の作製に関する詳細な指導が提供される。抗体に代わりST受容体 に特異的に結合するFAbおよびF(Ab)2を含むことは、本発明の範囲内である。 簡単に述べれば、ST受容体をマウスに注射する。マウスの脾臓を取り、脾臓細 胞を分離して不死化したマウス細胞に融合させる。融合細胞即ちハイブリドーマ を培養して、抗体を分泌する細胞を選択する。抗体を解析し、ST受容体蛋白質に 特異的に結合することが分かれば、それを産生するハイブリドーマを培養して抗 ST受容体蛋白質特異的抗体を連続的に供給させる。 本発明は、ST受容体蛋白質への暴露に応答して産生された抗体に関する。抗体 は好適にはモノクローナル抗体である。抗体は、ヒト細胞で作られたST受容体蛋 白質に対して作成されることが望ましい。いくつかの態様では、抗体はST受容体 蛋白質の細胞外ドメインに特異的に結合する。いくつかの態様では、抗体は膜貫 通ドメインに特異的に結合する。いくつかの態様では、抗体は細胞質ドメインに 特異的に結合する。 試験試料における蛋白質の存在の検出手段はルーチンであり、当該分野の熟達 者は、よく知られた方法を用いて蛋白質若しくは抗体の有無を検出できる。蛋白 質の存在を検出するよく知られた方法は、イムノアッセイである。当該分野の熟 達者は、試料中のST受容体蛋白質の存在を検出するイムノアッセイを実践する多 くの方法を容易に理解できる。 いくつかの態様により、イムノアッセイは、試料中の蛋白質をプラスチック表 面などの固相支持体に結合させることを含む。次いで、ST受容体蛋白質に選択的 に結合する検出可能な抗体を添加する。検出可能な抗体の検出は、ST受容体蛋白 質の存在を示唆する。検出可能な抗体は、標識された、または標識されていない 抗体であってもよい。標識されていない抗体は、一次抗体に特異的に結合する標 識された二次抗体、または標識されたプロテインA（抗体と複合体を形成する蛋 白質）を用いて検出されうる非標識二次抗体を用いて検出することができる。種 々のイムノアッセイ操作は、Immunoassays for the 80's, A. Voller ら編, Uni versity Park, 1981（本明細書にて参考文献に取り入れられている）に記載され ている。 固相支持体を試験試料に接触させる単純なイムノアッセイを行ってもよい。試 験試料中に存在するいずれの蛋白質も固相支持体に結合し、特定の検出可能な抗 体調製品により検出できる。そのような技術はドットブロット、ウェスタンブロ ットおよび他の同様のアッセイの本質である。 他のイムノアッセイはより複雑であってもよいが、素晴らしい成果を提供でき る。典型的かつ好適なイムノ定量アッセイは、固相支持体に結合した第一の抗蛋 白質抗体を試験試料と接触させる、蛋白質検出に関する「前向き」アッセイを含 む。適当な時間インキュベートした後、固相支持体を洗って結合していない蛋白 質を除く。次に、第二の異なる抗蛋白質抗体（第一の抗体により認識されない特 定の蛋白質部分に特異的である）を添加する。第二の抗体は検出可能であること が望ましい。検出可能な抗体が、第一の抗体を通じて固相支持体に結合した特定 蛋白質と複合体を作れるように、二回目のインキュベーションをした後、固相支 持体を再度洗い結合しなかった検出可能な抗体を除く。また、第二の抗体は検出 可能でなくてもよい。この場合、第二の抗体に結合する第三の検出可能な抗体を 系に加える。このタイプの「前向きサンドイッチ」アッセイは、結合が生じたか 否かを決定する単純な「ある／なし」アッセイであるか、検出可能な抗体の量を 対照実験から得られる量と比較することにより定量化することができる。このよ うな「二部位」若しくは「サンドイッチ」アッセイは、Wide, Radioimmune Assa y Method, Kirkman編, E. & S. Livingstone, Edinburgh, 1970, 199-206頁（本 明細書中で参考文献に取り入れられている）に記載されている。 他のタイプのイムノアッセイは、いわゆる「同時」および「逆向き」アッセイ である。同時アッセイは単一のインキュベーション工程（ここで固相支持体に結 合した第一の抗体、検出可能な第二の抗体および試験試料を同時に加える）を要 す。インキュベーションが完了した後、固相支持体を洗い、結合していない蛋白 質を除く。次に、固相支持体に結合している検出可能な抗体の存在を、従来の「 前向きサンドイッチ」アッセイでなされるようにして決定する。同時アッセイは 、試験試料中の抗体の検出に関しても同様にして適応させることができる。 「逆向き」アッセイは検出可能な抗体溶液を試験試料に段階的に添加し、一定 時間インキュベートし、固相支持体に結合した抗体を添加し、さらに一定時間イ ンキュベートすることを含む。固相支持体を従来の様式で洗浄し、結合しなかっ た蛋白質／抗体複合体ならびに反応しなかった検出可能な抗体を除く。次いで、 固相支持体に結合した検出可能な抗体の決定を、「同時」および「前向き」アッ セイのようにして行う。逆向きアッセイは、試験試料中の抗体検出に関しても同 様にして適応させることができる。 イムノ定量アッセイの第一の要素は、ニトロセルロース若しくは蛋白質を固定 できる他の固相支持体に添加できる。試験試料中のST受容体の存在を決定する第 一の要素は、抗ST受容体抗体である。「固相支持体」もしくは「支持体」によっ て、蛋白質に結合できるいずれの材料も意図される。よく知られた固相支持体に は、ガラス、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリエチレン、デキストラン、ナ イロン、アミラーゼ、天然及び改変セルロース、ポリアクリルアミド、アガロー ス、および磁鉄鉱が含まれる。支持体の性質は、本発明の目的上、ある程度可溶 性であっても不溶性であってもよい。支持体の構成は、ビーズのように球形、ま たは試験管の内面もしくは竿の外面のような円柱状であってもよい。また、表面 は板、試験紙などのように平坦であってもよい。当該分野の熟達者は、蛋白質の 結合に関して他の多くの適当な「固相支持体」を知るだろうし、あるいは、ルー チン実験の利用によって同じものを確認することができるだろう。望ましい固相 支持体は96穴ミクロタイタープレートである。 ST受容体蛋白質の存在を検出するため、検出可能な抗ST受容体抗体が使われる 。抗体検出に関してはいくつかの方法が良く知られている。 抗体を検出できるように標識できる一つの方法は、抗体を酵素に連結させ、次 いで酵素イムノアッセイ（EIA）もしくは捕獲ELISAなどの酵素連結イムノソルベ ントアッセイ（ELISA）において抗体を用いることによってである。その酵素を 次に基質にさらすと、基質と反応して、例えば、分光光度、蛍光もしくは視覚手 段によって検出できる化学分子を作り出す。抗体を検出可能なように標識するの に利用できる酵素には、リンゴ酸デヒドロゲナーゼ、ブドウ球菌ヌクレアーゼ、 δ-5-ステロイドイソメラーゼ、酵母アルコールデヒドロゲナーゼ、α-グリセロ ホスフェートデヒドロゲナーゼ、トリオースリン酸イソメーラゼ、ホースラディ ッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、アスパラギナーゼ、グルコ ースオキシダーゼ、β-ガラクトシダーゼ、リボヌクレアーゼ、ウレアーゼ、カ タラーゼ、グルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ、グルコアミラーゼおよびア セチルコリンエステラーゼが含まれるがこれらに限定されない。当該分野の熟達 者は、利用可能な他の酵素を容易に気づくであろう。 抗体を検出可能に標識する別の方法は、放射性同位体によるものでラジオイム ノアッセイ（RIA）に使われうる（例えば、Work, T.S. ら, Laboratory Techniq ues and Biochemistry in Molecular Biology, North Holland Publishing Comp any, N.Y., 1978（本明細書中で参考文献に取り入れられている）を参照）。放 射性同位体は、ガンマカウンターもしくはシンチレーションカウンターを用いた 手段によって、またはオートラジオクラフィーによって検出することができる。 本発明の目的に特に有用なアイソトープは、3H, 125I, 131I, 35S, および14Cで ある。125Iはアイソトープなら望ましい。当該分野の熟達者は、他の利用可能な 放射性同位体に容易に気づくであろう。 蛍光性化合物で抗体を標識する事もできる。蛍光ラベルした抗体を適当な波長 の光に当てると、蛍光によりその存在を検出できる。もっとも普遍的に使われる 蛍光ラベル化合物は、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、フィコ エリトリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、o-フタルアルデヒドおよび フルオレスカミンである。当該分野の熟達者は、他の利用可能な蛍光化合物に容 易に気づくだろう。 抗体は、152Euあるいはランタノイド族の他の蛍光放射性金属を用いて検出可 能な標識を施すことも出来る。これらの金属はジエチレントリアミン五酢酸(DTP A)あるいはエチレンジアミン四酢酸(EDTA)などの金属キレート剤を用いて、タン パク質特異的な抗体に結合させることが出来る。当業者には、他の蛍光放射性金 属ならびに他の金属キレート剤も使えることが容易に理解できるだろう。 抗体は、化学発光性化合物と結合させることによって検出可能な標識を施すこ とも出来る。化学発光標識された抗体の存在は、化学発光の過程で発せられる発 光を検出することで決定される。特に有用な化学発光標識化合物は、ルミノール 、イソルミノール、ソレマティックアクリジンエステル（theromatic acridiniu m ester）、イミダゾール、アクリジン塩及びオキサル酸エステルである。当業 者は、他の化学発光化合物もまた使えることを容易に理解できるだろう。 同様に、生物発光性化合物も抗体を標識するために用いることが出来る。生物 発光とは、触媒タンパク質が化学発光反応効率を向上させる、生物系で見られる 一種の化学発光である。生物発光タンパク質の存在は、発光を検出することによ り決定する。標識するために重要な生物発光性化合物は、ルシフェリン、ルシフ ェラーゼまたはエクオリンである。当業者には、他の生物発光化合物を使えるこ とが容易に理解できるだろう。 タンパク質特異的抗体または断片、あるいは誘導体の検出は、例えば検出標識 が放射性γ線発生源である場合、シンチレーションカウンターによって行なうこ とが出来る。それ以外の方法として、例えば標識が蛍光物質である場合、蛍光光 度計で検出してもよい。酵素標識の場合、その酵素の基質を用いた比色法によっ て検出することが出来る。基質の酵素反応の度合は、同様にして調製した標準試 料と比較することによって検出することも出来る。当業者は、他の適当な検出法 も使えることを容易に認識するだろう。 或るロットの抗体の結合活性は、良く知られた方法によって決定することがで きる。当業者は通常の実験法を適用することで、それぞれの測定に有効でかつ最 適なアッセイ条件を決めることが出来るだろう。 アッセイに既知の量のST受容体タンパク質を添加した陽性対照、及びST受容体 タンパク質を添加しない陰性対照を、試験アッセイと平行して行なってもよい。 当業者は適切な対照実験を行なうために必要な知識を有するだろう。 ST受容体タンパク質は陽性対照のための試薬として常法により生産することが できる。当業者は、ST受容体タンパク質を生産し単離する種々の方法を理解する だろう。 「抗体組成物」とは、抗体あるいはタンパク質の検出に必要とされる複数の抗 体を示す。例えば、対照試料中のST受容体の検出に用いる抗体組成物は、ST受容 体タンパク質に結合する一次抗体ならびに一次抗体に結合する二次抗体、あるい は二次抗体に結合する三次抗体を含む。 ST受容体タンパク質の存在に関して試験試料を調べるために、以下に記載する 様な標準的な免疫学的アッセイ法を行なってもよい。ST受容体の細胞外領域ある いは細胞質部分などの特異的領域を認識する一次抗ST受容体タンパク質抗体を、 所変量の緩衝液と共に９６穴ミクロタイタープレートに添加する。このプレート を結合が起こるのに充分な時間インキュベーションし、続いて結合しなかった抗 体を除くためにPBSで洗浄する。次に試料タンパク質がミクロタイタープレート に非特異的に結合しないように、このプレートをPBS/BSAでブロックする。続い て試験試料をウエルに添加し、結合が起きるために充分な時間、プレートをイン キュベーションする。結合しなかったタンパク質を除くためにウエルをPBSで洗 浄する。一次抗体によって認識されないST受容体の領域を認識する、標識した抗 ST受容体抗体をウエルに加える。このプレートを結合が起こるのに充分な時間イ ンキュベーションし、続いて結合しなかった標識抗ST受容体抗体を除くためにPB Sで洗浄する。続いて、結合した標識抗ST受容体抗体の量を標準的な技術によっ て決定する。 試験試料中のST受容体の検出に有用なキットは、抗ST受容体抗体を含む容器と 対照試料を含む１つあるいは複数の容器からなる。対照試料はST受容体タンパク 質を含まない１つの対照試料及び／あるいは、ST受容体タンパク質を含むもう一 つ別の対照試料を含む。本キットで用いられる抗ST受容体抗体は、検出可能な標 識を施すなどすることによって検出できる。もしこの検出可能な抗ST抗体が標識 されていない場合、例えば別の容器に入ったいくつかのキットで提供することが できる二次抗体またはプロテインＡによってそれを検出することができる。いく つかのキットに追加される構成品は、固形支持体、緩衝液及びアッセイを行なう ための説明書を含む。本キットで用いられる抗ST受容体抗体は、ST受容体タンパ ク質の細胞外ドメインのエピトープに結合するものであることが好ましい。 免疫アッセイ法は、ホモジナイズした組織試料及び体液試料（その中の血漿部 分あるいは細胞も含む）において、ST受容体を検出するために有用である。 ウエスタンブロットは、非結腸直腸組織あるいは体液試料中のST受容体タンパ ク質の存在を検出することにより、結腸直腸癌の転移を被っている患者を同定す る方法で用いることができる。ウエスタンブロットはまた、腫瘍が結腸直腸原発 であることを同定あるいは確認するため、癌にかかった患者由来の腫瘍試料中の ST受容体タンパク質の存在を検出するために用いることができる。ウエスタンブ ロットは、試料中に存在するどんなST受容体にも結合して試料中の受容体の存在 を示すための検出可能な抗ST受容体抗体を用いる。 J.サムブルック(Sambrook)ら、(1989)Molecular Cloning: A Laboratory Manu al, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NYによって 記述され、本明細書に引用文献として取り入れられているウエスタンブロット技 術は、試料を抗体に曝す前に、試料中のタンパク質をゲル電気泳動で分離し、次 に分離したタンパク質を抗体で検索するという基本的な相違があるものの免疫ア ッセイ法と類似したものである。いくつかの好ましい態様では、マトリックスは SDS-PAGEゲルマトリックスであり、またマトリックス中で分離されたタンパク質 は、抗体で検索する前に漉紙などの担体に転移される。上述の抗ST受容体抗体は ウエスタンブロット法において有用である。 一般に試料はホモジナイズされており、また細胞はトライトン-Xなどの界面活 性剤で溶解されている。次に材料はJ.サムブルックら、(1989)Molecular Clonin g: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NYにおける標準的な技術によって分離される。 ウエスタンブロット法による試験試料中のST受容体の検出に有用なキットは、 抗ST受容体抗体を含む容器と、対照試料を含む１つあるいは複数の容器からなる 。対照試料はST受容体タンパク質を含まない１つの対照試料及び／あるいは、ST 受容体タンパク質を含むもう一つ別の対照試料を含む。本キットで用いられる抗 ST受容体抗体は、検出可能な標識を施すなどすることによって検出できる。もし この検出可能な抗ST抗体が標識されていない場合、例えば別の容器に入ったいく つかのキットで提供することができる二次抗体、あるいはプロテインＡによって それを検出することができる。いくつかのキットに追加される構成品は、アッセ イを行なうための説明書を含む。本キットの抗体は、ST受容体タンパク質の細胞 外ドメインのエピトープに結合するものであることが好ましい。 ウエスタンブロット法は、ホモジナイズした組織試料及び体液試料（その中の 血漿部分あるいは細胞も含む）において、ST受容体を検出するために有用である 。 ST結合アッセイは、非結腸直腸組織あるいは体液試料中のST受容体タンパク質 の存在を検出することにより、結腸直腸癌の転移を被っている患者を同定する方 法で用いることができる。ST結合アッセイはまた、腫瘍が結腸直腸原発であるこ とを同定あるいは確認するため、癌にかかった患者由来の腫瘍試料中のST受容体 タンパク質の存在を検出するために用いることができる。ST受容体結合アッセイ では、存在するどのようなST受容体にも結合し、そのため試料中の受容体の存在 を指示する検出可能なST受容体リガンドを用いる。 いくつかの態様では、ST受容体リガンドは本来のSTでもよい。いくつかの態様 では、ST受容体リガンドはST受容体結合ペプチドでもよい。いくつかの態様では 、ST受容体リガンドはSTペプチドでもよい。 上述のST受容体結合アッセイは、既存の出発材料を用いることにより、通常の 知識を有する当業者が容易に実施することが出来る。ST受容体結合アッセイは、 種々の方法で実施することができるが、それぞれの方法は基本的には検出可能な ST受容体リガンドが試料中の受容体に結合するかを調べることによって、試料中 にST受容体タンパク質が存在するかを同定する。簡単に述べると、このアッセイ 法は試料を1x10-10Mから5x10-10Mの125I-STなどの一定量のSTリガンドとともに インキュベーションすることから構成されている。対照として、ST受容体を含む ことが分かっている二連の試料を二連の濃度の125I-STとインキュベーションす る。平衡に達するまで（例えば２時間）アッセイをインキュベーションし、125I -STが試料中の物質に結合したかを調べるために試料を分析する。125I-ST/試料 を、125I-STは通過できるが、ST受容体は通過できない漉紙に通す。従って、も しST受容体が試料中に存在すれば、それは125I-STに結合し、次に漉紙によって 捕獲されるだろう。漉紙での125I-STの検出は、試料中にST受容体が存在するこ とを示す。いくつかの好ましい態様では、漉紙はホワットマンGFBガラス漉紙で ある。対照としては、ST受容体を含むことが分かっている試料、例えばラットの 腸由来の腸膜、ヒトの腸、T84細胞、単離ST受容体タンパク質、あるいはST受容 体タンパク質をコードするクローン化されたヌクレオチド配列を発現する細胞を 利用する。 125Iに結合させる事に加え、STに43K、52Fe、57Co、67Cu、67Ga、68Ga、77Br 、81Rb/81MKr、87MSr、99MTc、111In、113MIn、123I、125I、127Cs、129Cs、131 I、132I、197Hg、203Pb、206Bi、47Sc、67Cu、90Y、109Pd、123I、125I、131I、186 Re、188Re、199Au、211At、212Pb、212B、32P及び33P、71Ge、77AS、103Pb、105 Rh、111Ag、119Sb、121Sn、131Cs、143Pr、161Tb、177Lu、191Os、193MPt並 びに197Hgなどの他の放射性核種を結合することによってSTを検出するか、ある いはそれを蛍光物質または酵素などの他の標識に結合することによって用いる。 検出可能な標識をした抗体について上で述べた標識法のそれぞれは、ST受容体リ ガンドを標識するために応用する事ができ、それゆえまた本明細書において記述 されたものと見なす。 キットは陽性及び／あるいは陰性対照、即ちそれぞれST受容体を含む試料とST 受容体を含まない試料からなる容器とともに、検出可能なST受容体リガンドを含 む容器からなる。検出可能なST受容体リガンドは、標識されていることが好まし い。検出可能なST受容体リガンドは放射性標識されていることが好ましく、125I で標識されることが好ましい。検出可能なST受容体リガンドは、ST受容体結合ペ プチドであることが好ましい。検出可能なST受容体結合ペプチドはSTペプチドで あることが好ましい。いくつかの好ましい態様において、STペプチドはSEQ ID N O:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、及びSEQ ID NO:54から構成され るグループから選ばれる。いくつかのキットに追加される構成品は、固形支持体 、緩衝液及びアッセイを行なうための説明書を含む。 ST受容体結合アッセイは、ホモジナイズした組織試料及び体液試料（その中の 血漿部分あるいは細胞も含む）において、ST受容体を検出するために有用である 。 ST受容体タンパク質の検出に加えて、本発明の観点は、試料がST受容体を発現 する細胞を含むか否か、ヌクレオチド配列に基づく分子的な分析によって決定す るさまざまな方法を含んでいる。それを行なうために、ポリメラーゼ連鎖反応(P CR)技術、ノザンブロット技術、オリゴヌクレオチド・ハイブリダイゼーション 技術ならびにin situハイブリダイゼーション技術を含む、いくつかの異なる方 法を用いることが出来る。 本発明はST受容体をコードするmRNAを同定する方法で用いるオリゴヌクレオチ ドプローブ及びプライマー、ならびにそれらの構成要素を含む診断キットに関連 するものである。 ST受容体をコードする試料mRNAが存在するかを調べるための、mRNA配列に基づ く方法は、ポリメーラゼ連鎖反応技術ならびにノザン及びサザンブロット技術、 in situハイブリダイゼーション技術及びオリゴヌクレオチドハイブリダイゼー ション技術を含むが、それらに限定されるわけではない。 本明細書で記載される方法は、本発明をどのようにして実施することができる かと云う例であり、発明の範囲を限定するものではない。非結腸直腸試料におけ るST受容体をコードする特異的なmRNAの存在を検出する他の配列に基づく方法も 、本発明に基づいて用いることができると予想される。非結腸直腸試料由来の遺 伝学的材料中でST受容体をコードするmRNAを検出する好ましい方法では、ポリメ ラーゼ連鎖反応(PCR)技術を用いる。PCR技術は通常の知識を有する当業者によっ て日常的に実施されており、診断におけるその利用は良く知られかつ受け入れら れている。PCR技術の実施法は「PCR Protocols: A Guide to Methods and Appli cations」、イニス(Innis), M.A.ら編、Academic Press, Inc、San Diego、CA(1 990)において開示されており、本明細書の参考文献に含まれている。本明細書の 参考文献に含まれる米国特許第4,683,202号、米国特許第4,683,195号、米国特許 第4,965,188号、米国特許第5,075,216号明細書は、PCRを実施する方法について 記載している。PCRは、Perkin Elmer Cetus GENE AMP RNA PCRキット，Part. No . N808-0017を用いて、日常的に実施することができる。 PCR技術では、RNAあるいはDNA分子に存在する配列にハイブリダイゼーション する5'及び3'プライマーを提供し、更に遊離ヌクレオチドと、その遊離ヌクレオ チドを用いてプライマー間のヌクレオチド配列に相補的な塩基を加えてDNAの相 補鎖を生産する酵素を提供することによって、迅速にDNA配列の多数の複製を生 産することができる。酵素によってプライマーに隣接する相補的配列が埋められ る。もし5'プライマーと3'プライマーの両方が同一核酸の小断片上のヌクレオチ ド配列にハイブリダイゼーションすれば、特異的なサイズの二本鎖産物の指数関 数的増幅が起こる。もし一方のプライマーのみが核酸断片にハイブリダイゼーシ ョンすると、一次関数的な増幅によって種々の長さの一本鎖産物が生産される。 PCRプライマーは通常の知識を有する当業者により、配列情報を用いて日常的 方法で設計することが出来る。ST受容体タンパク質をコードするヌクレオチド配 列は、本明細書の参考文献に含まれる米国特許第5,237,051号明細書及びF.J.サ ベージ(Sauvage)ら、1991 J. Biol. Chem. 266:17912-17918などにおいて良く知 られている。この方法の実施には、試料中の細胞からRNAを抽出し、良く知られ る方法と容易に入手可能な出発物質を用いてcDNAを作製するために試験するかあ るいは用いる。 通常の知識を有する当業者は、容易にPCRプライマーを調製することが出来る 。１セットのプライマーは通常２つのプライマーを含んでいる。抽出したmRNAあ るいはそれから合成したcDNAについてPCRを実施すると、もしST受容体タンパク 質をコードするmRNAあるいはcDNAが存在する場合、多数のmRNAまたはcDNAコピー が合成されるだろう。もしST受容体タンパク質をコードするmRNAあるいはcDNAが 存在しなければ、PCRは独立した検出可能な産物を生じないだろう。プライマー は一般に8から50ヌクレオチド、好ましくは約15から35ヌクレオチドであり、ま たさらに好ましくは18から28ヌクレオチドであり、それはST受容体タンパク質を コードするmRNAまたはそれから合成されたcDNAと同一または相補的で、従ってハ イブリダイゼーションする。好ましい態様において、プライマーは米国特許第5, 237,051号明細書及びF.J.サベージら、1991 J. Biol. Chem. 266:17912-17918に おいて記載される、ST受容体タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核 酸分子のそれぞれ15から35ヌクレオチドの断片、さらに好ましくは18から28のヌ クレオチド断片である。そのプライマーは増幅されるべき配列にハイブリダイゼ ーションしなければならない。典型的なプライマーは18から28ヌクレオチド長で あり、一般に50%から60%のG+C組成を持つ。プライマーは全体が、それがハイブ リダイゼーションする配列に相補的であることが好ましい。プライマーは100塩 基対から2000塩基対のPCR産物を生成することが好ましい。しかし、50塩基対か ら1万塩基対以上の産物を生成することも可能である。もしmRNAを鋳型として用 いるなら、プライマーはmRNA配列にハイブリダイゼーションしなければならない 。もしcDNAを鋳型として用いるなら、プライマーはcDNAにハイブリダイゼーショ ンしなければならない。細胞外ドメインはST受容体タンパク質の最も特異的な領 域である。少なくとも１つのプライマーはST受容体タンパク質の細胞外ドメイン に対応するヌクレオチド配列にハイブリダイゼーションする。 いくつかの好ましい態様において、5'PCRプライマーは米国特許第5,237,051号 明細書記載のST受容体コード配列のヌクレオチド15から41に基づいて設計される 。いくつかの好ましい態様において、5’PCRプライマーは米国特許第5,237,051 号明細書記載のST受容体コード配列のヌクレオチド20から40に基づいて設計され る。いくつかの好ましい態様において、5'PCRプライマーは米国特許第5,237,051 号明細書記載のST受容体コード配列のヌクレオチド25から43に基づいて設計され る。いくつかの好ましい態様において、5'PCRプライマーは米国特許第5,237,051 号明細書記載のST受容体コード配列のヌクレオチド40から62に基づいて設計され る。いくつかの好ましい態様において、3'PCRプライマーは米国特許第5,237,051 号明細書記載のST受容体コード配列のヌクレオチド350から375に基づいて設計さ れる。いくつかの好ましい態様において、3'PCRプライマーは米国特許第5,237,0 51号明細書記載のST受容体コード配列のヌクレオチド290から308に基づいて設計 される。いくつかの好ましい態様において、3'PCRプライマーは米国特許第5,237 ,051号明細書記載のST受容体コード配列のヌクレオチド121から141に基づいて設 計される。いくつかの好ましい態様において、3'PCRプライマーは米国特許第5,2 37,051号明細書記載のST受容体コード配列のヌクレオチド171から196に基づいて 設計される。 標準的なPCR実験法に従い、mRNAあるいはcDNAをプライマー、遊離ヌクレオチ ド及び酵素と混合する。この混合液は一連の温度変化処理を受ける。もしST受容 体をコードするmRNAまたはcDNAが存在すれば、即ちもし両方のプライマーが同一 の分子上の配列にハイブリダイゼーションすれば、プライマーとその間の相補的 配列を含む分子が対数的に増幅されるだろう。増幅されたDNAは、様々な既知の 方法によって容易に検出することが出来る。もしST受容体をコードするmRNAまた はcDNAが全く存在しなければ、PCR産物は対数的に増幅されないだろう。従って 、PCR技術は試料中のST受容体タンパク質をコードするmRNAを検出するための、 極めて容易かつ直接的で信頼性のある方法を提供する。 PCR産物はいくつかの既知の方法によって検出することができる。増幅されたD NAの存在を検出するための好ましい方法は、PCR反応物質をゲル電気泳動で分離 し、もし増幅されたDNAが存在すればそれを可視化するために臭化エチジウムで ゲルを染色するものである。増幅されたDNAの予想されるサイズに対する標準試 料を、対照としてゲルに泳動することが好ましい。 通常少量のRNAが回収され、それから僅か少量のcDNAが合成される場合のよう ないくつかの例において、一次PCR反応産物についてPCR反応を実施することが求 められるか、または必須である。すなわち、もし一次反応で増幅されたDNAの量 を検出することが困難であれば、一次増幅DNAの複数コピーのDNA配列を得るため に二次PCRを行なうことが出来る。二次PCR反応では、ネステッド(nested)プライ マーセットを用いる。ネステッドプライマーセットは、一次反応で用いた5'プラ イマーの下流の配列と3'プライマーの上流の配列にハイブリダイゼーションする 。 本発明は、ST受容体タンパク質をコードするmRNAまたはcDNAを増幅するPCR法 を実施するためのプライマーとして有用なオリゴヌクレオチドを含む。 本発明に従い、非結腸直腸試料中のST受容体をコードするmRNAまたはcDNAの存 在の検出法を実施するために有用な診断用キットを構築することが出来る。その ような診断用キットはPCR法を実施するためのプライマーとして有用なオリゴヌ クレオチドを含む。本発明による診断用キットは、増幅されたDNAの存在を検出 するために用いるゲルで標準試料として泳動するサイズマーカーを入れた容器を 含むことが好ましい。サイズマーカーは、ST受容体をコードするmRNAまたはcDNA 存在下でプライマーによって合成されるDNAと同じサイズである。 PCRアッセイ法は、ホモジナイズした組織試料及び体液試料中の細胞において 、ST受容体をコードするmRNAを検出するために有用である。体液試料中の血漿部 分についてのPCRを、ST受容体タンパク質をコードするmRNAを検出するために用 いることもできると予想される。 試料がST受容体を発現する細胞を含むかを調べるもう一つ別の方法は、非結腸 直腸試料から抽出したmRNAに関するノザンブロット分析である。ノザンブロット 分析を実施する技術は、通常の知識を有する当業者によって良く知られており、 J.サムブルックら、(1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Sp ring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NYに記載されている。mR NA抽出、電気泳動によるmRNAの分離、ブロッティング、プローブの調製及びハイ ブリダイゼーションは全て、容易に得られる出発物質を用いて日常的方法で実施 することが出来る良く知られた技術である。 mRNAはポリdTカラムを用いて抽出し、抽出物を電気泳動で分離し、例えばニト ロセルロース漉紙に転移させる。単離した特定の断片（単数または複数）から作 製した標識プローブを、漉紙に固定された相補的な断片の存在を可視化するため に用いることが出来る。ノザンブロットでmRNAを同定するために有用なプローブ は、ST受容体タンパク質をコードする遺伝子から転写されたmRNAに相補的なヌク レオチド配列を持つ。当業者はそのようなプローブを設計するため、あるいはプ ローブとして用いることが出来るST受容体遺伝子またはcDNAを単離してクローン 化するために、米国特許第5,237,051号明細書及びF.J.サベージら、1991 J. Bio l. Chem. 266:17912-17918の配列情報を用いることが出来る。プローブはST受容 体タンパク質の細胞外ドメインに対応するmRNAの領域にハイブリダイゼーション することが好ましい。好ましい態様では、プローブは米国特許第5,237,051号明 細書及びF.J.サベージら、1991 J. Biol. Chem.で記載されるように、ST受容体 タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子の全長クローンまたは 断片である。このようなプローブは少なくとも15ヌクレオチドであり、好ましく は30から200ヌクレオチド、更に好ましくは40から100ヌクレオチド断片であり、 またST受容体のコード配列全体であるか、更に好ましくは米国特許第5,237,051 号明細書及びF.J.サベージら、1991 J. Biol. Chem. 266:17912-17918に記載さ れるST受容体タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、核酸分子の18か ら28ヌクレオチド断片でもよい。好ましいプローブは、ヌクレオチド50からヌク レオチド90のST受容体タンパク質をコードするRNAにハイブリダイゼーションす る。 本発明に従い、非結腸直腸試料中のST受容体をコードするmRNAの存在の検出法 を実施するために有用な診断用キットを構築することが出来る。そのような診断 用キットはそのmRNAにハイブリダイゼーションするプローブとして有用なオリゴ ヌクレオチドを含む。そのプローブは放射性標識されてもよい。本発明による診 断用キットは、ゲルで標準試料として泳動するサイズマーカーを入れた容器を含 むことが好ましい。本発明による診断用キットは、プローブにハイブリダイゼー ションする陽性対照を入れた容器を含むことが好ましい。 ノザンブロット分析は、ホモジナイズした組織試料及び体液試料中の細胞にお いて、ST受容体をコードするmRNAを検出するために有用である。体液試料中の血 漿部分についてのノザンブロット分析を、ST受容体タンパク質をコードするmRNA を検出するために用いることもできると予想される。 ST受容体タンパク質をコードするmRNAの存在を検出するもう一つの方法は、オ リゴヌクレオチド・ハイブリダイゼーション技術である。オリゴヌクレオチド・ ハイブリダイゼーション技術は、通常の知識を有する当業者に良く知られている 。簡単に説明すると、ST受容体タンパク質をコードするmRNAのヌクレオチド配列 にハイブリダイゼーションする特異的ヌクレオチド配列を含む検出可能なプロー ブを用いる。試料由来のRNAから得られたRNAまたはcDNAを、通常は漉紙あるいは それに類似したものに固定する。プローブを加え、プローブが固定された遺伝学 的物質に完全に相補的であるときにのみハイブリダイゼーションできる条件に維 持する。この条件は、ほんの一部のプローブのみが固定された物質にハイブリダ イゼーションするほど充分厳しくプローブを洗い落とすものである。この洗われ た漉紙上のプローブの検出は相補的配列が存在することを指示する。 オリゴヌクレオチドアッセイで有用なプローブは、少なくとも18ヌクレオチド の相補的DNAでもよく、またST受容体cDNAに相補的な全長の配列と同程度の大き さでもよい。いくつかの好ましい態様では、本発明のプローブは30から200ヌク レオチド、好ましくは40から100ヌクレオチドである。このプローブはST受容体 の細胞外ドメインをコードする部分に相補的な配列を含むことが好ましい。 通常の知識を持つ当業者は、米国特許第5,237,051号明細書及びF.J.サベージ ら、1991 J. Biol. Chem. 266:17912-17918において開示される配列情報を用い てmRNA配列に完全に相補的だがゲノム配列には相補的ではないプローブを設計す ることが出来る。ハイブリダイゼーション条件は完全に相補的ではないハイブリ ダイゼーションによるバックグラウンドシグナルを最少にするために、日常的な 方法で最適化することが出来る。プローブはST受容体タンパク質の細胞外ドメイ ンに対応するヌクレオチド配列を含むmRNAの領域にハイブリダイゼーションする ことが好ましい。好ましい態様において、プローブは米国特許第5,237,051号明 細書及びF.J.サベージら、1991 J. Biol. Chem.に記載されるような、ST受容体 タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子の全長クローンあるい は断片である。そのようなプローブは少なくとも15ヌクレオチドで、好ましくは 30から200ヌクレオチド、更に好ましくは40から100ヌクレオチド断片か、ST受容 体の全コード配列でもよく、また更に好ましくは米国特許第5,237,051号明細書 及びF.J.サベージら、1991 J. Biol. Chem. 266:17912-17918に記載されるST受 容体タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、18から28ヌクレオチドの 核酸分子断片である。好ましいプローブは、ST受容体タンパク質をコードするmR NAのヌクレオチド50からヌクレオチド90にハイブリダイゼーションする。 本発明はオリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションを実施するためのプロー ブとして有用な、標識されたオリゴヌクレオチドを含む。即ち、それらはmRNA配 列に完全に相補的だがゲノム配列には完全相補的でない。例えば、mRNA配列は異 なるエクソンによってコードされる部分を含む。本発明の標識プローブは放射性 ヌクレオチドで標識されるか、あるいはそうでなければ容易に入手できる非放射 性検出系を用いて検出される。 本発明により、本発明のオリゴヌクレオチドハイブリダイゼーション法を実施 するために有用な診断用キットを構築することが出来る。そのような診断用キッ トは、異なるエクソンによってコードされるST受容体の一部をコードする標識オ リゴヌクレオチドを含む。本発明によるオリゴヌクレオチド診断用キットの標識 プローブは、放射性ヌクレオチドで標識されていることが好ましい。本発明によ るオリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションに基づく診断用キットは、陽性及 び陰性対照となるDNA試料を含むことが好ましい。陽性対照DNA試料はキットのプ ローブに完全に相補的であり、そのためアッセイ条件下でプローブがその分子に ハイブリダイゼーションするようなヌクレオチド配列を持つ核酸分子を含むもの である。陰性対照DNA試料は少なくとも一種類の核酸分子を含むものであり、そ のヌクレオチド配列はキットのプローブの配列に部分的に相補的である。通常の 知識を有する当業者は、米国特許第5,237,051号明細書及びF.J.サベージら、199 1 J. Biol. Chem. 266:17912-17918の配列情報を用いてそのようなプローブを設 計するか、またはプローブとして利用できるST受容体遺伝子もしくはcDNAを単離 してクローン化することが出来るだろう。 オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーション技術は、ホモジナイズした組織試 料及び体液試料中の細胞において、ST受容体をコードするmRNAを検出するために 有用である。体液試料中の血漿部分についてのオリゴヌクレオチドハイブリダイ ゼーション技術を、ST受容体タンパク質をコードするmRNAを検出するために用い ることもできると予想される。 本発明は、転移の程度を調べるために組織試料を評価するin vitroキットに関 連し、またそれを実施するために有用な試薬及び組成物に関連するものである。 本発明のいくつかの態様において、粘膜層の一部を含む組織試料が、結腸直腸 腫瘍を除くための切除または結腸鏡検査法を含む手術を受けているかあるいはそ れから回復している患者から単離することができる。その組織はST受容体タンパ ク質の存否を同定するために分析される。ST受容体／受容体結合アッセイ及び免 疫組織化学法などの技術は、転移が起きていることを示すST受容体が組織試料中 の細胞に存在するかを調べるために実施することができる。それ以外に、本発明 のいくつかの態様において、組織試料はST受容体タンパク質が転移の生起を示す 組織試料中の細胞で発現されているかを、ST受容体タンパク質をコードするmRNA の存否を検出することによって同定するために分析される。ST受容体タンパク質 をコードするmRNAあるいはそれから合成されたcDNAの存在は、in situハイブリ ダイゼーション技術、免疫組織化学法及びin situ ST結合アッセイなどの技術を 用いて調べることが出来る。 本発明は腫瘍試料が結腸直腸由来であるか調べるために、それを評価するin v itroキットに関連し、またそれを実施するために有用な試薬及び組成物に関連す るものである。本発明のいくつかの態様において、腫瘍試料は結腸の腫瘍、その 他の器官の腫瘍を除く手術を受けている、またはそれから回復中の患者、または 生検試料から単離することができる。腫瘍試料はST受容体タンパク質の存否を同 定するために分析される。ST受容体／リガンド結合アッセイや免疫組織化学法な どの技術は、腫瘍試料の細胞中に直腸結腸起源である事を示すST受容体が存在す るかを調べるために実施することができる。あるいはそれ以外に、本発明のいく つかの態様において、内腔組織試料は腫瘍試料の細胞で直腸結腸起源を示すST受 容体タンパク質が発現さているかを同定するために、ST受容体タンパク質をコー ドするmRNAの存否を検出することによって分析される。ST受容体タンパク質をコ ードするmRNAまたはそれから合成されたcDNAの存在は、in situハイブリダイゼ ーション技術、免疫組織化学法及びin situ ST結合アッセイなどの技術を用いて 調べることが出来る。 in situハイブリダイゼーション技術は、通常の知識を有する当業者によって 良く知られている。簡単に述べると、細胞を固定し、特異的なヌクレオチド配列 を含む検出可能なプローブを固定した細胞に加える。もし細胞が相補的なヌクレ オチド配列を含めば、検出可能なプローブがそれらにハイブリダイゼーションす るだろう。 オリゴヌクレオチドアッセイで有用なプローブは少なくとも18ヌクレオチドの 相補的DNAであり、ST受容体mRNAの相補的配列の完全長であもよい。いくつかの 好ましい態様において、本発明のプローブは30から200ヌクレオチドであり、好 ましくは40から100ヌクレオチドである。プローブはST受容体の細胞外ドメイン をコードする部分に相補的な配列を含むことが好ましい。 通常の知識を持つ当業者は、米国特許第5,237,051号明細書及びF.J.サベージ ら、1991 J. Biol. Chem. 266:17912-17918において開示される配列情報を用い て、ST受容体を発現する細胞を同定するためのin situハイブリダイゼーション 技術に有用なプローブを設計することが出来る。プローブはST受容体タンパク質 の細胞外ドメインに対応するヌクレオチド配列にハイブリダイゼーションするこ とが好ましい。ハイブリダイゼーション条件は完全に相補的ではないハイブリダ イゼーションによるバックグラウンドシグナルを最少にするために、日常的な方 法で最適化することが出来る。プローブはST受容体タンパク質の細胞外ドメイン に対応するヌクレオチド配列を含むmRNAの領域にハイブリダイゼーションするこ とが好ましい。プローブはST受容体タンパク質の細胞外ドメインに対応するmRNA の領域にハイブリダイゼーションすることが好ましい。好ましい態様において、 プローブは米国特許第5,237,051号明細書及びF.J.サベージら、1991 J. Biol. C hem.に記載されるような、ST受容体タンパク質をコードするヌクレオチド配列を 含む核酸分子の全長クローンあるいは断片である。そのようなプローブは少なく とも15ヌクレオチドで、好ましくは30から200ヌクレオチド、更に好ましくは40 から100ヌクレオチド断片か、ST受容体の全コード配列でもよく、また更に好ま しくは米国特許第5,237,051号明細書及びF.J.サベージら、1991 J. Biol. Chem. 266:17912-17918に記載されるST受容体タンパク質をコードするヌクレオチド配 列を含む、18から28ヌクレオチドの核酸分子断片である。好ましいプローブは、 ST受容体タンパク質をコードするmRNAのヌクレオチド50からヌクレオチド90にハ イブリダイゼーションする。 プローブは完全に相補的であり、部分的に相補的な配列には良くハイブリダイ ゼーションしない。本発明のin situハイブリダイゼーションには、蛍光によっ て検出されるプローブが好ましい。一般的な方法は、プローブをビオチン修飾ヌ クレオチドで標識し、次に蛍光物質を付けたアビジンで検出するものである。従 って、プローブ自身を蛍光で標識する必要はなく、それに続く蛍光マーカーで検 出することが出来る。 本発明は、オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションを実施するためのプロ ーブに有用な標識オリゴヌクレオチドを含む。すなわち、それらはmRNA配列に完 全に相補的であるが、ゲノムの配列には祖補的ではない。例えば、mRNA配列は異 なるエクソンによってコードされる領域を含む。本発明の標識プローブは放射性 ヌクレオチドで標識されるか、あるいは容易に入手できる非放射性検出系で検出 される。 本発明は、ST受容体タンパク質を発現する細胞を同定するためのin situハイ ブリダイゼーションに有用なプローブに関連するものである。 細胞を固定し、プローブをその遺伝物質に加える。プローブは試料中に存在す る相補的な核酸配列にハイブリダイゼーションする。その蛍光マーカーのために プローブを蛍光顕微鏡で見ることが出来る。 本発明により、本発明のin situハイブリダイゼーション法を実施するために 有用な診断用キットを構築することが出来る。即ち、それらはmRNA配列に完全に 相補的だがゲノム配列には相補的でない。例えば、mRNA配列は異なるエクソンに よってコードされる部分を含む。本発明のin situ診断用キットの標識プローブ は、蛍光マーカーで標識することが好ましい。 通常の知識を有する当業者は、結腸癌細胞の転移の程度を調べるために、固定 した細胞を分析することが出来る。結腸由来の細胞を標識することで、分析法を 改善することが出来る。 免疫組織化学的技術はST受容体を有する細胞を同定し、基本的にはそれを染色 するために用いることができる。そうした「染色」は転移の分析を可能にする。 上述したような抗ST受容体抗体は固定した細胞と接触し、その細胞に存在するST 受容体が抗体と反応する。抗体は細胞を染色するために検出可能な標識を施して あるか、または標識した二次抗体またはプロテインＡを用いて検出される。 ST結合アッセイは、細胞切片を初めに凍結し、続いてST結合アッセイを行ない 、次に細胞を固定する点を除き免疫組織化学法の代りに実施することができる。 本明細書で述べた腫瘍切片の評価を行なうための技術は、結腸直腸腫瘍細胞の 存在を同定するために、リンパ節ならびに他の組織試料の組織切片を分析するた めに用いることも出来る。試料を調製し、ST受容体の発現を検出するために「染 色」することが出来る。 以下の実施例は、本発明を説明するものであり、その制限を意味するものでは ない。 実施例 実施例１ 以下に述べるのは本発明による代表的な化合物である。一連の化合物について の参照番号が以下に挙げられている場合、それらは効率化を図るためのものであ り、番号順に並んだ全ての化合物を含む連続したそれぞれの化合物に名称を与え るもので、例えば「3-D1から3-D16」とは、化合物3-D1、3-D2、3-D3、3-D4、3-D 5、3-D6、3-D7、3-D8、3-D9、3-D10、3-D11、3-D12、3-D13、3-D14、3-D15、及 び3-D16を示すことを意味する。同様に、一連のSEQ ID NO:についての参照番号 が以下に挙げられている場合、それらは効率化を図るためのものであり、番号順 に並んだ全てのSEQ ID NO:を含む連続したそれぞれのSEQ ID NO:に名称を与える もので、例えばSEQ ID NO:5からSEQ ID NO:54とは、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6 、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ I D NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21、SEQ IDN 0:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO: 27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:30,．SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:3 2、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:37 、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:42、 SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:47、SE Q ID NO:48、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53、及びSEQ ID NO:54を示すことを意味する。同様に、一連の化合物につ いての参照番号が以下に挙げられている場合、それらは効率化を図るためのもの であり、番号順に並んだ全ての化合物を含む連続したそれぞれの化合物に名称を 与えるもので、例えば「5-APから54-AP」とは、化合物5-AP、6-AP、7-AP、8-AP 、9-AP、10-AP、11-AP、12-AP、13-AP、14-AP、15-AP、16-AP、17-AP、18-AP、1 9-AP、20-AP、21-AP、22-AP、23-AP、24-AP、25-AP、26-AP、27-AP、28-AP、29- AP、30-AP、31-AP、32-AP、33-AP、34-AP、35-AP、36-AP、37-AP、38-AP、39-AP 、40-AP、41-AP、42-AP、43-AP、44-AP、45-AP、46-AP、47-AP、48-AP、49-AP、 50-AP、51-AP、52-AP、53-AP、及び54-APを示すことを意味する。 化合物2-D1はSEQ ID NO:2に結合したメトトレキセート（アメトプテリン）を 含む。 化合物2-D2はSEQ ID NO:2に結合したドクソルビシン（アドリマイシン）含む 。 化合物2-D3はSEQ ID NO:2に結合したダウノルビシンを含む。 化合物2-D4はSEQ ID NO:2に結合したサイトシンアラビノシドを含む。 化合物2-D5はSEQ ID NO:2に結合したエトポシドを含む。 化合物2-D6はSEQ ID NO:2に結合した5-4フルオロウラシルを含む。 化合物2-D7はSEQ ID NO:2に結合したメルファランを含む。 化合物2-D8はSEQ ID NO:2に結合したクロランブシルを含む。 化合物2-D9はSEQ ID NO:2に結合したシクロホスホアミドを含む。 化合物2-D10はSEQ ID NO:2に結合したシス-白金を含む。 化合物2-D11はSEQ ID NO:2に結合したビンデシンを含む。 化合物2-D12はSEQ ID NO:2に結合したミトマイシンを含む。 化合物2-D13はSEQ ID NO:2に結合したブレオマイシンを含む。 化合物2-D14はSEQ ID NO:2に結合したピューロチオニンを含む。 化合物2-D15はSEQ ID NO:2に結合したマクロモマイシンを含む。 化合物2-D16はSEQ ID NO:2に結合したトレニモンを含む。 化合物3-D1から3-D16は、化合物3-D1から3-D16がそれぞれST受容体結合部分と してSEQ ID NO:2を含む代りにST受容体結合部分としてSEQ ID NO:3を含む事を除 き、それぞれ2-D1から2-D16と同様である。 化合物5-D1から5-D16は、化合物5-D1から5-D16がそれぞれST受容体結合部分と してSEQ ID NO:2を含む代りに、ST受容体結合部分としてSEQ ID NO:5を含む事を 除き、それぞれ2-D1から2-D16と同様である。 化合物6-D1から6-D16は、化合物6-D1から6-D16がそれぞれST受容体結合部分と してSEQ ID NO:2を含む代りに、ST受容体結合部分としてSEQ ID NO:6を含む事を 除き、それぞれ2-D1から2-D16と同様である。 化合物7-D1から7-D16は、化合物7-D1から7-D16がそれぞれST受容体結合部分と してSEQ ID NO:2を含む代りに、ST受容体結合部分としてSEQ ID NO:7を含む事を 除き、それぞれ2-D1から2-D16と同様である。 化合物８−Ｄ１から８−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：８を含むこと以外は、化合物８−Ｄ１から８−Ｄ１６はそれぞれ化合物２−Ｄ １から２−Ｄ１６と同じである。 化合物９−Ｄ１から９−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：９を含むこと以外は、化合物９−Ｄ１から９−Ｄ１６はそれぞれ化合物２−Ｄ １から２−Ｄ１６と同じである。 化合物１０−Ｄ１から１０−Ｄ１６がそれそれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０を含むこと以外は、化合物１０−Ｄ１から１０−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物１２−Ｄ１から１２−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１を含むこと以外は、化合物１２−Ｄ１から１２−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物１２−Ｄ１から１２−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２を含むこと以外は、化合物１２−Ｄ１から１２−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物１３−Ｄ１から１３−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３を含むこと以外は、化合物１３−Ｄ１から１３−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物１４−Ｄ１から１４−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４を含むこと以外は、化合物１４−Ｄ１から１４−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物１５−Ｄ１から１５−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５を含むこと以外は、化合物１５−Ｄ１から１５−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物１６−Ｄ１から１６−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６を含むこと以外は、化合物１６−Ｄ１から１６−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物１７−Ｄ１から１７−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７を含むこと以外は、化合物１７−Ｄ１から１７−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物１８−Ｄ１から１８−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８を含むこと以外は、化合物１８−Ｄ１から１８−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物１９−Ｄ１から１９−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９を含むこと以外は、化合物１９−Ｄ１から１９−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２０−Ｄ１から２０−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２Ｏを含むこと以外は、化合物２０−Ｄ１から２０−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２２−Ｄ１から２２−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１を含むこと以外は、化合物２２−Ｄ１から２２−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２２−Ｄ１から２２−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２を含むこと以外は、化合物２２−Ｄ１から２２−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２３−Ｄ１から２３−Ｄ１６がそれそれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を含むこと以外は、化合物２３−Ｄ１から２３−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２４−Ｄ１から２４−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４を含むこと以外は、化合物２４−Ｄ１から２４−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２５−Ｄ１から２５−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５を含むこと以外は、化合物２５−Ｄ１から２５−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２６−Ｄ１から２６−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６を含むこと以外は、化合物２６−Ｄ１から２６−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２７−Ｄ１から２７−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含むこと以外は、化合物２７−Ｄ１から２７−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２８−Ｄ１から２８−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８を含むこと以外は、化合物２８−Ｄ１から２８−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２９−Ｄ１から２９−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９を含むこと以外は、化合物２９−Ｄ１から２９−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物３０−Ｄ１から３０−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０を含むこと以外は、化合物３０−Ｄ１から３０−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物３２−Ｄ１から３２−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１を含むこと以外は、化合物３２−Ｄ１から３２−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物３２−Ｄ１から３２−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２を含むこと以外は、化合物３２−Ｄ１から３２−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物３３−Ｄ１から３３−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３を含むこと以外は、化合物３３−Ｄ１から３３−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物３４−Ｄ１から３４−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４を含むこと以外は、化合物３４−Ｄ１から３４−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物３５−Ｄ１から３５−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含むこと以外は、化合物３５−Ｄ１から３５−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物３６−Ｄ１から３６−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６を含むこと以外は、化合物３６−Ｄ１から３６−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物３７−Ｄ１から３７−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７を含むこと以外は、化合物３７−Ｄ１から３７−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物３８−Ｄ１から３８−Ｄ１６がそれそれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８を含むこと以外は、化合物３８−Ｄ１から３８−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物３９−Ｄ１から３９−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９を含むこと以外は、化合物３９−Ｄ１から３９−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物４０−Ｄ１から４０−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０を含むこと以外は、化合物４０−Ｄ１から４０−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物４２−Ｄ１から４２−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１を含むこと以外は、化合物４２−Ｄ１から４２−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物４２−Ｄ１から４２−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２を含むこと以外は、化合物４２−Ｄ１から４２−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物４３−Ｄ１から４３−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３を含むこと以外は、化合物４３−Ｄ１から４３−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物４４−Ｄ１から４４−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４を含むこと以外は、化合物４４−Ｄ１か４４−Ｄ１６はそれぞれ化合 物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物４５−Ｄ１から４５−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５を含むこと以外は、化合物４５−Ｄ１から４５−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物４６−Ｄ１から４６−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６を含むこと以外は、化合物４６−Ｄ１から４６−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物４７−Ｄ１から４７−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７を含むこと以外は、化合物４７−Ｄ１から４７−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物４８−Ｄ１から４８−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８を含むこと以外は、化合物４８−Ｄ１から４８−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物４９−Ｄ１から４９−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９を含むこと以外は、化合物４９−Ｄ１から４９−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物５０−Ｄ１から５０−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０を含むこと以外は、化合物５０−Ｄ１から５０−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物５１−Ｄ１から５１８−Ｄ１６がそれそれＳＴ受容体結合部分としてＳ ＥＱ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含むこと以外は、化合物５１−Ｄ１から５１−Ｄ１６はそれぞれ 化合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物５２−Ｄ１から５２−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含むこと以外は、化合物５２−Ｄ１から５２−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物５３−Ｄ１から５３−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３を含むこと以外は、化合物５３−Ｄ１から５３−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物５４−Ｄ１から５４−Ｄ１６がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含むこと以外は、化合物５４−Ｄ１から５４−Ｄ１６はそれぞれ化 合物２−Ｄ１から２−Ｄ１６と同じである。 化合物２−Ｔ１はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたリシンを含む 。 化合物２−Ｔ２はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたリシンＡ鎖（ ライシン毒素）を含む。 化合物２−Ｔ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたＰｓｅｕｄｏ ｍｏｎａｓ 毒素（ＰＥ）を含む。 化合物２−Ｔ４はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたジフテリア毒 素（ＤＴ）を含む。 化合物２−Ｔ５はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたClostridium perfringens ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）を含む。 化合物２−Ｔ６はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたウシすい臓リ ボヌクレアーゼ（ＢＰＲ）を含む。 化合物２−Ｔ７はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたｐｏｋｅｗｅ ｅｄ坑ウイルスタンパク質（ＰＡＰ）を含む。 化合物２−Ｔ８はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたアブリンを含 む。 化合物２−Ｔ９はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたアブリンＡ鎖 （アブリン毒素）を含む。 化合物２−Ｔ１０はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたコブラ毒因 子（ＣＶＦ）を含む。 化合物２−Ｔ１１はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたゲロニン（ ＧＥＬ）を含む。 化合物２−Ｔ１２はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたサポリン（ ＳＡＰ）を含む。 化合物２−Ｔ１３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたモデシンを 含む。 化合物２−Ｔ１４はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたビスクミン を含む。 化合物２−Ｔ１５はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２にコンジュゲートしたボルケンシ ンを含む。 化合物３−Ｔ１から３−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：３を含むこと以外は、化合物３−Ｔ１から３−Ｔ１５はそれぞれ化合物２−Ｔ １から２−Ｔ１５と同じである。 化合物５−Ｔ１から５−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５を含むこと以外は、化合物５−Ｔ１から５−Ｔ１５はそれぞれ化合物２−Ｔ １から２−Ｔ１５と同じである。 化合物６−Ｔ１から６−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：６を含むこと以外は、化合物６−Ｔ１から６−Ｔ１５はそれぞれ化合物２−Ｔ １から２−Ｔ１５と同じである。 化合物７−Ｔ１から７−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：７を含むこと以外は、化合物７−Ｔ１から７−Ｔ１５はそれぞれ化合物２−Ｔ １から２−Ｔ１５と同じである。 化合物８−Ｔ１から８−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：８を含むこと以外は、化合物８−Ｔ１から８−Ｔ１５はそれぞれ化合物２−Ｔ １から２−Ｔ１５と同じである。 化合物９−Ｔ１から９−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：９を含むこと以外は、化合物９−Ｔ１から９−Ｔ１５はそれぞれ化合物２−Ｔ １から２−Ｔ１５と同じである。 化合物１０−Ｔ１から１０−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０を含むこと以外は、化合物１０−Ｔ１から１０−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物１１−Ｔ１から１１−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１を含むこと以外は、化合物１１−Ｔ１から１１−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物１２−Ｔ１から１２−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２を含むこと以外は、化合物１２−Ｔ１から１２−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物１３−Ｔ１から１３−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３を含むこと以外は、化合物１３−Ｔ１から１３−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物１４−Ｔ１から１４−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４を含むこと以外は、化合物１４−Ｔ１から１４−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物１５−Ｔ１から１５−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５を含むこと以外は、化合物１５−Ｔ１から１５−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物１６−Ｔ１から１６−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６を含むこと以外は、化合物１６−Ｔ１から１６−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物１７−Ｔ１から１７−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７を含むこと以外は、化合物１７−Ｔ１から１７−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物１８−Ｔ１から１８−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８を含むこと以外は、化合物１８−Ｔ１から１８−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物１９−Ｔ１から１９−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９を含むこと以外は、化合物１９−Ｔ１から１９−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２０−Ｔ１から２０−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０を含むこと以外は、化合物２０−Ｔ１から２０−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２１−Ｔ１から２１−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１を含むこと以外は、化合物２１−Ｔ１から２１−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２２−Ｔ１から２２−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２を含むこと以外は、化合物２２−Ｔ１から２２−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２３−Ｔ１から２３−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を含むこと以外は、化合物２３−Ｔ１から２３−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２４−Ｔ１から２４−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４を含むこと以外は、化合物２４−Ｔ１から２４−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２５−Ｔ１から２５−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５を含むこと以外は、化合物２５−Ｔ１から２５−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２６−Ｔ１から２６−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６を含むこと以外は、化合物２６−Ｔ１から２６−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２７−Ｔ１から２７−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含むこと以外は、化合物２７−Ｔ１から２７−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２８−Ｔ１から２８−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８を含むこと以外は、化合物２８−Ｔ１から２８−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２９−Ｔ１から２９−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９を含むこと以外は、化合物２９−Ｔ１から２９−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物３０−Ｔ１から３０−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０を含むこと以外は、化合物３０−Ｔ１から３０−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物３１−Ｔ１から３１−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１を含むこと以外は、化合物３１−Ｔ１から３１−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物３２−Ｔ１から３２−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２を含むこと以外は、化合物３２−Ｔ１から３２−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物３３−Ｔ１から３３−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３を含むこと以外は、化合物３３−Ｔ１から３３−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物３４−Ｔ１から３４−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４を含むこと以外は、化合物３４−Ｔ１から３４−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物３５−Ｔ１から３５−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含むこと以外は、化合物３５−Ｔ１から３５−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物３６−Ｔ１から３６−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６を含むこと以外は、化合物３６−Ｔ１から３６−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物３７−Ｔ１から３７−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７を含むこと以外は、化合物３７−Ｔ１から３７−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物３８−Ｔ１から３８−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８を含むこと以外は、化合物３８−Ｔ１から３８−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物３９−Ｔ１から３９−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９を含むこと以外は、化合物３９−Ｔ１から３９−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物４０−Ｔ１から４０−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０を含むこと以外は、化合物４０−Ｔ１から４０−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物４１−Ｔ１から４１−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１を含むこと以外は、化合物４１−Ｔ１から４１−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物４２−Ｔ１から４２−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２を含むこと以外は、化合物４２−Ｔ１から４２−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物４３−Ｔ１から４３−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３を含むこと以外は、化合物４３−Ｔ１から４３−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物４４−Ｔ１から４４−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４を含むこと以外は、化合物４４−Ｔ１から４４−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物４５−Ｔ１から４５−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５を含むこと以外は、化合物４５−Ｔ１から４５−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物４６−Ｔ１から４６−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６を含むこと以外は、化合物４６−Ｔ１から４６−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物４７−Ｔ１から４７−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７を含むこと以外は、化合物４７−Ｔ１から４７−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物４８−Ｔ１から４８−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８を含むこと以外は、化合物４８−Ｔ１から４８−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物４９−Ｔ１から４９−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９を含むこと以外は、化合物４９−Ｔ１から４９−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物５０−Ｔ１から５０−Ｔ１５がそれそれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０を含むこと以外は、化合物５０−Ｔ１から５０−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物５１−Ｔ１から５１−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含むこと以外は、化合物５１−Ｔ１から５１−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物５２−Ｔ１から５２−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含むこと以外は、化合物５２−Ｔ１から５２−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物５３−Ｔ１から５３−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３を含むこと以外は、化合物５３−Ｔ１から５３−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物５４−Ｔ１から５４−Ｔ１５がそれぞれＳＴ受容体結合部分としてＳＥ Ｑ ＩＤ ＮＯ：２を含む代わりに、ＳＴ受容体結合部分としてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含むこと以外は、化合物５４−Ｔ１から５４−Ｔ１５はそれぞれ化 合物２−Ｔ１から２−Ｔ１５と同じである。 化合物２−ＡＰ、３−ＡＰおよび５−ＡＰから５４−ＡＰは、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５から ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合したアルカリホスファターゼを含む５１種のコ ンジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−ＮＩＺ、３−ＮＩＺおよび５−ＮＩＺから５４−ＮＩＺは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合したニトロイミダゾールを含む５１種 のコンジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−ＭＥＺ、３−ＭＥＺおよび５−ＭＥＺから５４−ＭＥＺは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合したメトロニダゾールを含む５１種の コンジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−ＭＩＳ、３−ＭＩＳおよび５−ＭＩＳから５４−ＭＩＳは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合したミソニミダゾールを含む５１種の コンジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−47Ｓｃ、３−47Ｓｃおよび５−47Ｓｃから５４−47Ｓｃは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびSＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した47Ｓｃを含む５１種のコンジュゲ ート化合物をさして言う。 化合物２−67Ｃｕ、３−67Ｃｕおよび５−67Ｃｕから５４−67Ｃｕは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した67Ｃｕを含む５１種のコンジュゲ ート化合物をさして言う。 化合物２−90Ｙ、３−90Ｙおよび５−90Ｙから５４−90Ｙは、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５から ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した90Ｙを含む５１種のコンジュゲート化合物 をさして言う。 化合物２−109Ｐｄ、３−109Ｐｄおよび５−109Ｐｄから５４−109Ｐｄは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した109Ｐｄを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−123Ｉ、３−123Ｉおよび５−123Ｉから５４−123Ｉは、それぞれＳ ＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５ からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した123Ｉを含む５１種のコンジュゲート 化合物をさして言う。 化合物２−125Ｉ、３−125Ｉおよび５−125Ｉから５４−125Ｉは、それぞれＳ ＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５ からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した125Ｉを含む５１種のコンジュゲート 化合物をさして言う。 化合物２−131Ｉ、３−131Ｉおよび５−131Ｉから５４−131Ｉは、それぞれＳ ＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５ からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した131Ｉを含む５１種のコンジュゲート 化合物をさして言う。 化合物２−132Ｉ、３−132Ｉおよび５−132Ｉから５４−132Ｉは、それぞれＳ ＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５ からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した132Ｉを含む５１種のコンジュゲート 化合物をさして言う。 化合物２−186Ｒｅ、３−186Ｒｅおよび５−186Ｒｅから５４−186Ｒｅは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した186Ｒｅを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−188Ｒｅ、３−188Ｒｅおよび５−188Ｒｅから５４−188Ｒｅは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した188Ｒｅを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−199Ａｕ、３−199Ａｕおよび５−199Ａｕから５４−199Ａｕは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した199Ａｕを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−211Ａｔ、３−211Ａｔおよび５−211Ａｔから５４−211Ａｔは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した211Ａｔを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−212Ｐｂ、３−212Ｐｂおよび５−212Ｐｂから５４−212Ｐｂは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した212Ｐｂを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−212Ｂｉ、３−212Ｂｉおよび５−212Ｂｉから５４−212Ｂｉは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した212Ｂｉを含む５１種のコ ンジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−203Ｐｂ、３−203Ｐｂおよび５−203Ｐｂから５４−203Ｐｂは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した203Ｐｂを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−206Ｂｉ、３−206Ｂｉおよび５−206Ｂｉから５４−206Ｂｉは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した206Ｂｉを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−32Ｐ、３−32Ｐおよび５−32Ｐから５４−32Ｐは、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５から ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した32Ｐを含む５１種のコンジュゲート化合物 をさして言う。 化合物２−33Ｐ、３−33Ｐおよび５−33Ｐから５４−33Ｐは、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５から ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した33Ｐを含む５１種のコンジュゲート化合物 をさして言う。 化合物２−71Ｇｅ、３−71Ｇｅおよび５−71Ｇｅから５４−71Ｇｅは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した71Ｇｅを含む５１種のコンジュゲ ート化合物をさして言う。 化合物２−77Ａｓ、３−77Ａｓおよび５−77Ａｓから５４−77Ａｓは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した77Ａｓを含む５１種のコンジュゲ ート化合物をさして言う。 化合物２−103Ｐｂ、３−103Ｐｂおよび５−103Ｐｂから５４−103Ｐｂは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した103Ｐｂを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−105Ｒｈ、３−105Ｒｈおよび５−105Ｒｈから５４−105Ｒｈは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した105Ｒｈを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−111Ａｇ、３−111Ａｇおよび５−111Ａｇから５４−111Ａｇは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した111Ａｇを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−119Ｓｂ、３−119Ｓｂおよび５−119Ｓｂから５４−119Ｓｂは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した119Ｓｂを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−121Ｓｎ、３−121Ｓｎおよび５−121Ｓｎから５４−121Ｓｎは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した121Ｓｎを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−131Ｃｓ、３−131Ｃｓおよび５−131Ｃｓから５４−131Ｃｓは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した131Ｃｓを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−127Ｃｓ、３−127Ｃｓおよび５−127Ｃｓから５４−127Ｃｓは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した127Ｃｓを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−129Ｃｓ、３−129Ｃｓおよび５−129Ｃｓから５４−129Ｃｓは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した129Ｃｓを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−143Ｐｒ、３−143Ｐｒおよび５−143Ｐｒから５４−143Ｐｒは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した143Ｐｒを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−161Ｔｂ、３−161Ｔｂおよび５−161Ｔｂから５４−161Ｔｂは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した161Ｔｂを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−177Ｌｕ、３−177Ｌｕおよび５−177Ｌｕから５４−177Ｌｕは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した177Ｌｕを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−191Ｏｓ、３−191Ｏｓおよび５−191Ｏｓから５４−191Ｏｓは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した191Ｏｓを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−193mＰｔ、３−193mＰｔおよび５−193mｐｔから５４−193mＰｔは 、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ Ｉ Ｄ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した193MＰｔを含む５１種の コンジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−197Ｈｇ、３−197Ｈｇおよび５−197Ｈｇから５４−197Ｈｇは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した197Ｈｇを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−43Ｋ、３−43Ｋおよび５−43Ｋから５４−43Ｋは、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５から ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した43Ｋを含む５１種のコンジュゲート化合物 をさして言う。 化合物２−52Ｆｅ、３−52Ｆｅおよび５−52Ｆｅから５４−52Ｆｅは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した52Ｆｅを含む５１種のコンジュゲ ート化合物をさして言う。 化合物２−57Ｃｏ、３−57Ｃｏおよび５−57Ｃｏから５４−57Ｃｏは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した57Ｃｏを含む５１種のコンジュゲ ート化合物をさして言う。 化合物２−67Ｇａ、３−67Ｇａおよび５−67Ｇａから５４−67Ｇａは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した67Ｇａを含む５１種のコンジュゲ ート化合物をさして言う。 化合物２−68Ｇａ、３−68Ｇａおよび５−68Ｇａから５４−68Ｇａは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した68Ｇａを含む５１種のコンジュゲ ート化合物をさして言う。 化合物２−77Ｂｒ、３−77Ｂｒおよび５−77Ｂｒから５４−77Ｂｒは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した77Ｂｒを含む５１種のコンジュゲ ート化合物をさして言う。 化合物２−81Ｒｂ、３−81Ｒｂおよび５−81Ｒｂから５４−81Ｒｂは、それぞ れＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した81Ｒｂを含む５１種のコンジュゲ ート化合物をさして言う。 化合物２−81mＫｒ、３−81mＫｒおよび５−81mＫｒから５４−81mＫｒは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した81MＫｒを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−87mＳｒ、３−87mＳｒおよび５−87mＳｒから５４−87mＳｒは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した87MＳｒを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−99mＴｃ、３−99mＴｃおよび５−99mＴｃから５４−99mＴｃは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した99MＴｃを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−111Ｉｎ、３−111Ｉｎおよび５−111Ｉｎから５４−111Ｉｎは、そ れぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した111Ｉｎを含む５１種のコン ジュゲート化合物をさして言う。 化合物２−113mＩｎ、３−113mＩｎおよび５−113mＩｎから５４−113mＩｎは 、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３およびＳＥＱ Ｉ Ｄ ＮＯ：５からＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合した113MＩｎを含む５１種の コンジュゲート化合物をさして言う。 この実施例に記載されている化合物は、本発明の薬剤組成物を製造するため に薬学的に受容できるキャリアー（担体）または希釈液と組み合わされる。本明 細書中に記載されている放射安定性化合物は、転移が容易に認められるようにな る前の予防法／治療法としての局在した結腸直腸癌と診断された個体の治療を含 む、転移した結腸直腸癌の疑いのある個体の治療における治療法としての薬剤組 成物において有用である。治療学的に有効な量が存在するときには、本明細書中 に記載されている放射安定性化合物は、転移が容易に認められるようになる前の 予防法／治療法としての局在した結腸直腸癌と診断された個体の治療を含む、転 移した結腸直腸癌の疑いのある個体の治療における治療剤としての薬剤組成物に おいて有用である。診断上有効な量が存在するときには、本明細書中に記載され ている放射安定性化合物は、個体中の転移した結腸直腸癌の診断および同定にお けるイメージ形成剤としての薬剤組成物として有用である。 実施例２ ST受容体結合ペプチドのような遊離のアミノ基をもつST受容体のリガンド、例 えばSEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、およびSEQ ID NOS:5-54と、メトトロキサート 、ドクソルビシン、ダウノルビシン、サイトシンアラビノシド、シス−プラチン 、ビンデシン、マイトマイシンおよびブレオマイシンのような遊離のアミノ基を もつ活性剤、またはアルカリホスファターゼ、または、タンパク質またはペプチ ド由来の毒素とのクロスリンクのための一つの方法は、ホモ二官能性のスクシニ イミジルエステルを、好ましくは、ジスクシニイミジルスベリン酸塩のような炭 素鎖スペーサーと共に用いるものである（Pierce Co, Rockford, IL）。アミノ 基派生体のこの方法は、生来のSTの機能を保ったまま、生来のSTとビオチン、お よび究極的にはミクロンスケールのサイズの巨大なアガロースビーズとのクロス リンクに首尾良く利用されてきた（Hughes, M.ら、(1991) Biochem. 30:10738; Hakki, S.ら、(1993) Int. J. Biochem. 25:557; Almenoff, J. S.ら、(1992) M o1. Micro. 8:865; これらはどれも本明細書中に参考文献として組み込まれてい る）。 ST受容体結合ペプチドのような遊離のアミノ基をもつST結合リガンドを、等モ ル量の遊離のアミノ基をもつ化学クロスリンク剤および活性剤の存在下で室温で 15-30分間インキュベートする。インキュベーションはHPLCによるゲル濾過クロ マトグラフィーによって反応物を分離することで終結する。この技術によってコ ンジュゲート化合物を遊離の活性剤および遊離のST結合リガンド、活性剤-活性 剤コンジュゲートおよびST結合リガンド-ST結合リガンドコンジュゲートから分 離できる。遊離のアミノ基を通して結合し、1:1の好ましいモル比である均質の 調製物が得られる。上で示したように、STペプチドの遊離のアミノ基の合成は受 容体結合能を保持する。 実施例３ 切断可能なコンジュゲート化合物が必要な場合には、3, 3'-ジチオビス（スル ホスクシニミジルプロパネート(SPDP)；Pierce, IL.）を用いて上述したのと同 様の方法を利用することができるだろう。SPDPは、化合物を他の遊離のアミノ基 と結合させるのに利用できると思われるメルカプト基を、遊離のアミノ基から形 成する。例えば、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5-54のようなSTペプチ ドは、N-スクシニミジル-3 (2-ピリジルジチオ)-プロピオネート（SPDP, Pharma cia-LKB, NJ）を使用した確立された処理を用いて得られる。STペプチドは5倍モ ル量のSPDPと共に30分間室温でインキュベートする。ST-ピリジルチオプロピオ ネートコンジュゲートは、HPLCによるゲル濾過クロマトグラフィーを用いて未反 応試料から分離する。タンパク質由来の毒素のような遊離のアミノ基をもつ活性 剤は結合のために、室温で4時間ジチオスレイトールで還元して調製する。還元 した活性剤は、4℃で36時間、pH8.0で2倍モル量のST受容体リガンド-PDPコンジ ュゲートと共にインキュベートする。コンジュゲート化合物は、HPLCによるゲル 濾過クロマトグラフィーを用いて未反応剤から分離する。 コンジュゲートのためのこの方法はSTペプチドを、ジフテリア毒素A鎖およびP seudomonas外毒素、並びにリシン毒素A鎖を結合させるのに特に有用である（Mag erstadt, M. Antibody Conjugates and Malignant Disease (1991) CRC Press, Boca Raton, USA, pp. 110-152; Cawley, D.B.ら、(1980) Cell 22:563; Cumber , A.J.ら、(1985) Meth. Enz. 112:207; Gros, O. (1985) J. Immunol. Meth. 8 1:283; Worrel, N.R.ら、(1986) Anti-Cancer Drug Design 1:179; Thorpe, P.E .ら、(1987) Cancer Res. 47:5924、これらはどれも本明細書中に参考文献とし て組み込まれている）。 実施例４ 遊離のアミノ基をもつ活性剤は、上述したようにSPDPを用いて生成し、遊離の アミノ基をもちヨード酢酸のスクシニミジルエステル（Pierce Co., Rockford, IL）で修飾されたSTリガンドと結合する（Magerstadt, M. (1991) Antibody Con jugates And Malignant Disease, CRC Press Boca Raton; Cumber, A.J.ら、(19 85) Meth. Enz. 112:20、これらは本明細書中に参考文献として組み込まれてい る）。結合はSTリガンドのアミノ末端に導入されたヨードアセチル基と活性剤に 導入されたチオール基の選択的反応に依存する。上記の方法に従って、この方法 はホモポリマーの形成を防止する。しかしながら、産物は還元されない中心のチ オエーテル結合を介して結合する。 実施例５ 遊離のアミノ基をもつST受容体および遊離のアミノ基をもつ活性剤は、イミノ チオラン（Pierce, Rockford, IL）を用いたジスルフィド結合を介して結合する （Fitzgerald, D.J.P.ら、(1983) Cell 32:607; Magerstadt, M. (1991) Antibo dy Conjugates And Malignant Disease, CRC Press, Boca Raton; Bjorn, M.J. ら、(1985) Cancer Res. 45:1214; Bjorn, M.J.ら、(1986) Cancer Res. 46:326 2、これらは本明細書中に参考文献として組み込まれている）。遊離のアミノ基 をもつST受容体リガンドはアミノ末端においてイミノチオランで誘導し、活性剤 は上述したようにSPDPで誘導する。イミノチオラン誘導ST受容体リガンドとSPDP 誘導活性剤との反応の結果、還元可能なジスルフィド結合によって結合が起こる 。さらにイミノチオランは、ジスルフィド結合以外の結合を介してこれらのタン パク質を結合させるための多様性を提供する。このように、ヘテロ二官能性試薬 スルホスクシニミジル 4-(N-マレイミドメチル) シクロヘキサン(Pierce, Rockf ord, IL)による活性剤の誘導、およびイミノチオラン誘導のST受容体リガンドと の反応は、ジスルフィドを形成しないでこれらのペプチドを結合させるだろう。 実施例６ 治療剤である有効部分を含む本発明のコンジュゲート化合物は、in vitroにお いてT84細胞を特異的に阻害する。次の方法は、化学治療剤または毒素である有 効部分を含む本発明のコンジュゲート化合物が、in vitroにおいてT84細胞を特 異的に阻害することを示すために利用できる。T84細胞の阻害は、T84細胞が35S- ロイシンをタンパク質に、3H-チミジンをDNAに取り込み、コロニーを形成する能 力におけるコンジュゲート化合物の効果を測定することによって評価する。タン パク質およびDNAの合成の測定は、in vitroにおけるコンジュゲート化合物の細 胞毒性を決定する古典的な方法である。タンパク質合成の阻害は、有効部分とし て使用した毒素がこの過程の特異的阻害剤であるために測定する。それゆえに、 これらの分析はコンジュゲート化合物がT84細胞に結合して中に入るかどうかの 最も高感度な測定法である。いくつかの化学治療剤がDNA合成を阻害し、さらに これは培養液中での細胞の再生の生存率と密接に関連している細胞毒性分析であ るために、DNA合成の阻害が測定される。細胞毒性、または正常な細胞の代謝過 程の破壊は、常に細胞の生存能と関連しているわけではない。それゆえに、コロ ニー形成の測定は、腫瘍細胞の生存能を減少させる実験剤の性能を直接測定する もので、それはin vivoにおける生存率に対する治療剤の影響と密接に関連して いる。コントロールには、コンジュゲート化合物の代わりに、コンジュゲート化 合物を形成する活性剤が結合していない非コンジュゲート型、並びにST受容体リ ガンドが結合していない非コンジュゲート型を用いた同様の分析の実行を含む。 試験分析およびコントロール分析で得られた結果が比較される。 コンジュゲート化合物は、確立された方法で単層培養におけるコロニーの形成 を測定することによって、in vitroにおけるタンパク質およびDNA合成、並びに 生存能および増殖を阻害する活性を測定する（Wilson, A.P.(1987) "Cytotoxici ty and viability assays", Animal Cell Culture: A Practical Approach. Fre shney, R.I., ed. pp. 183-216, IRL Press, Oxford. これは本明細書中に参考 文献として組み込まれている）。 in vitroにおいてタンパク質合成を阻害するコンジュゲート化合物の活性を測 定するために、細胞を200μlの培地で1-2×105のサブコンフルエントの密度で培 養し、37℃で12時間以上かけて分裂細胞の単層をつくらせる。続いて培地を適当 な濃度のコンジュゲート化合物を含む新鮮な200μlの培地に換え、さまざまな時 間37℃で細胞をインキュベートする。指定のインキュベーション時間の終わりに 細胞を培地で2回洗浄し、0.5μCiのL35S-メチオニン(800Ci/mmol)を添加した0.5 mlのメチオニンを含まない培地中で37℃でインキュベートする。37℃でさらに2 時間インキュベーションした後、培地を吸引除去し、1mg/mlのメチオニンを含む 培地で細胞を2回洗浄し、それから12％の氷冷したTCAで沈澱させる。遠心によっ てTCA沈降物に得られた放射活性を、液体シンチレーション分光器で定量する。 これらの研究では細胞は対数増殖期に維持されており、分析は３重ウェルを用い て行う。データは試験薬の存在下で観察されるタンパク質合成の割合として未処 理の細胞と比較して示される。 in vitroにおいてDNA合成を阻害するコンジュゲート化合物の活性を測定する ために、細胞をサブコンフルエントの単層として培養し、上述したような試験薬 と共にインキュベートする。インキュベーション時間の終わりに細胞を培地で2 回洗浄し、2.5μCiの3H-チミジン(5Ci/mmol)を添加した0.5mlのメチオニンを含 まない培地中で37℃でインキュベートする。37℃でさらに1時間インキュベーシ ョンした後、細胞をTCAで処理し、沈降物を回収して、放射活性を上述したよう に定量する。上記のように、細胞は対数増殖期に維持されており、分析は3回同 じもので行う。データは試験薬の存在下で観察されるDNA合成の割合として未処 理の細胞と比較して示される。 単層培養におけるコロニーの形成を測定することによってコンジュゲート化合 物が生存および増殖を阻害する活性を測定するために、細胞は25cm2フラスコの 上にサブコンフルエントの単層として培養し、上述したように接着させる。培地 はさまざまな濃度の試験薬を含む培地に換え、さまざまな時間細胞と共にインキ ュベーションする。インキュベーションの終わりに、細胞をトリプシン消化によ って単細胞懸濁液として回収し、6cmプレート当たり100-200コロニーの濃度にな るように再培養する。細胞は7日間増殖させ、それからメタノールで固定し、1% クリスタルバイオレットで染色して、コロニーの数を定量する。分析は2回同じ もので行い、データは試験薬の存在下で観察されるコロニー形成の割合として未 処理の細胞と比較して示される。我々の研究室の結果では、T84細胞がトリプシ ン(10μg/ml)を用いて40％のプレーティング効率および18時間の倍加時間で単細 胞懸濁液になることを明らかにした。 実施例７ 123Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、および132Ｉのような放射性ヨウ素は、当技術分野にお いて通常の知識を有する者に良く理解されている標準的な方法を用いて、STペプ チドのようなST受容体結合ペプチドに加えることができる（Thompson, M.ら、(1 985) Analytical Biochemistry 148:26, これは本明細書中に参考文献として組 み込まれている）。放射性ヨウ素は、例えばSEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、または SEQ ID NO:5のようなSTペプチドにそれぞれチロシン-5、チロシン-4、またはチロシ ン-5の位置に直接結合させる。 簡単にはSTペプチドはバクテリアでつくられる。例えば、E. coliの株431は培 養液で増殖し、その培養液中にSTを分泌する。培養培地はそれから通常の方法を 用いて精製する。STは以前に行われているように標準的な技術を用いて固相合成 によってもつくることができる（Dreyfus, L.ら、(1983) Infec. Immun. 42:539 、これは本明細書中に参考文献として組み込まれている）。 10μgのSTペプチドを、ヨウ素ビーズ（Bio Rad Laboratories, CA）およびβ −D-グルコースの存在下で2mCiの放射性INa（Amarsham Corporation, Massachus etts）と反応させる。これらは30分間反応させ、その後産物はSepak逆相カート リッジ（Millipore Corp., MA）の上でクロマトグラフィーにかけ、続いて20-25 %のアセトニトリル勾配を用いたHPLCによってC18逆相カラムで分離する。放射性 ヨウ素がチロシン-4に結合したSEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、またはSEQ ID NO:5 を含むコンジュゲート化合物は45分で溶出される。これらの分子は完全な生化学 的および薬理学的活性を保持している。 実施例８ 125IをSEQ ID NO:13等のSTペプチドにチロシン-4の位置に直接結合させる。 SEQ ID NO:13は上記のように固相合成によってつくられる。10μgのSEQ ID NO :13は、ヨウ素ビーズ（Bio Rad Laboratories, CA）およびβ-D-グルコースの存 在下で2mCiの放射性125INa（Amarsham Corporation, Massachusetts）と反応さ せる。これらは30分間反応させ、その後産物はSepak逆相カートリッジ（Millipo re Corp., MA）の上でクロマトグラフィーにかけ、続いて20-25%のアセトニトリ ル勾配を用いたHPLCによってC18逆相カラムで分離する。放射性ヨウ素がチロシ ン-4に結合した125I-SEQ ID NO:13コンジュゲートは45分で溶出される。この分 子は完全な生化学的および薬理学的活性を保持している。 診断のイメージ化のための放射性ヨウ素の用量には、典型的な例では患者当た りおよそ4mCiが必要である（Steinstraber, A.ら、(1988) J. Nucl. Med. 29:87 5; Wessels, B.W.およびRogus, R.D. (1984) Med. Phys. 11:638; Kwok, C.S.ら 、 (1985) Med. Phys. 12:405）。2000Curies/mmolの特異的活性で標識されたタン パク質、例えばＳＴペプチドには、診断のイメージ化のために患者当たりおよそ 10μgの静脈注射される標識ペプチドを必要とするだろう。 実施例９ 131IはSEQ ID NO:13等のSTペプチドにチロシン-4の位置に直接結合させる。 SEQ ID NO:13は上記のように固相合成によってつくられる。10μgのSEQ ID NO :13は、ヨウ素ビーズ（Bio Rad Laboratories, CA）およびβ-D-グルコースの存 在下で2mCiの放射性131INa（Amarsham Corporation, Massachusetts）と反応さ せる。これらは30分間反応させ、その後産物はSepak逆相カートリッジ（Millipo re Corp., MA）の上でクロマトグラフィーにかけ、続いて20-25%のアセトニトリ ル勾配を用いたHPLCによってC18逆相カラムで分離する。放射性ヨウ素がチロシ ン-4に結合した131I-SEQ ID NO:13コンジュゲートは45分で溶出される。この分 子は完全な生化学的および薬理学的活性を保持している。 典型的な例では、放射性ヨウ素標識された抗体（分子量＝160,000Da）には、 患者の腫瘍のグラム当たり10,000Curies/mmolの特異的活性で標識されたおよそ1 50nmolのタンパク質（24mg）が必要である（Humm, J.L. (1986) J.Nucl. Med. 2 7:1490）。このように、STペプチドのような2,000 Daの分子量で2,000 Curies/m molの特異的活性で標識されたタンパク質には、静脈注射で患者当たりの腫瘍1グ ラム当たりおよそ3mgが必要であろう。 実施例１０ ある態様において、遊離のアミノ基を持つＳＴ受容体のリガンド、特にＳＴペ プチド等のＳＴ受容体結合ペプチドと、タンパク質性毒素のような遊離のアミノ 基を持つ活性剤とのカップリングは、２つの分子の間にジスルフィド結合を導入 することによって行なわれる。遊離のアミノ末端はＳＴ結合活性に影響を与えず にコンジュゲートを行なう場所として有用であることが分かっているために、こ の方法は、ＳＴペプチドをコンジュゲートするのに特に有用である。この方法は 、遊離のアミノ末端がこのような分子に利用できるため、タンパク質性毒素をコ ン ジュゲートするのに特に有用であり、とりわけＲＴＡコンジュゲートのようなあ る種のコンジュゲート化合物では、還元すると分離したタンパク質を生じるジス ルフィド結合が、モノクローナル坑体で標的される、機能を有するキメラを構築 するのに重要であることが示された（マガースタット、Ｍ．（１９９１）坑体の コンジュゲートおよび悪性の病気、ＣＲＣ印刷、ボカ ラトン；ブジョーン、Ｍ ．Ｊ．，ら．（１９８５）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４５：１２１４；ブジョーン 、Ｍ．Ｊ．，ら．（１９８６）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４６：３２６２；マスホ 、Ｙ．，ら．（１９８２）Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．９１：１５８３，各々本明細書 中に参考文献として取り入れている）。ある種の毒素は、クロスリンク剤を使用 してＳＴペプチドにカップルさせて個々の構成要素間に還元可能なジスルフィド 結合はできないが、機能のある細胞毒性を保持する一方、リシンＡ鎖毒素は（例 えばシュードモナス毒素が還元可能なジスルフィド結合を必要としないのに対し て）毒性のために還元可能なジスルフィド結合を必要とする。 ジスルフィドカップリングは、ヘテロ二官能性剤であるＮ−サクシイミジル− ３（２−ピリジルジチオ）−プロポチオネート（ＳＰＤＰ，ファルマシア−ＬＫ Ｂ，ピスカタウエイ、ニュージャージー州）を用いる既に確立された手法を使用 して行なわれる（マガースタット、Ｍ．（１９９１）坑体のコンジュゲートおよ び悪性の病気、ＣＲＣ印刷、ボカ ラトン；コーリー，Ｄ．Ｂ．ら，（１９８０ ）Ｃｅｌｌ ２２：５６３；カンバー，Ａ．Ｊ．，ら．（１９８５）Ｍｅｔｈ． Ｅｎｚ．１１２：２０；グロス，０．，ら．（１９８５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈ．８１：２８３；ウォーレル，Ｎ．Ｒ．，（１９８６）坑癌剤のデザイ ン１：１９；ソープ、Ｐ．Ｅ．，ら．（１９８７）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４： ５９２４、本明細書中に参考文献として取り入れている）。 ある態様において、脱グリコシル化したリシン（ricin）毒素のＡ鎖（ＲＴＡ ；シグマ化学．，セントルイス、ミズーリ州）、ジフテリア毒素Ａ（ＤＴＡ；カ ルバイオケム、ラジョラ、カリフォルニア州）およびシュードモナス外毒素（Ｐ ＥＡ）を含む毒素を、ＳＴペプチドとコンジュゲートさせて、本明細書中に記載 した方法を使用して本発明のコンジュゲート化合物を作製する。グリコシル化し た形態のＲＴＡ毒素は、肝細胞に対して特異的な結合を示さないので、脱グリコ シル化したＲＴＡ使用する。ＤＴＡは、既に確立された手法を用いてジフテリア 毒素から調製した（ミッチェル、Ａ．およびドリックス，Ｊ．（１９７５）Ｂｉ ｏｃｈeｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ３６５：１５；カンバー，Ａ．J．，ら． （１９８５）Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．１１２；２０７．，どちらも本明細書中に参考 文献として取り入れている）。 ある態様において、ＳＴペプチドを、本明細書中に記載した手法によって毒素 にコンジュゲートする。例えば、上記に記載した方法で作製するＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のＳＴペプチド（本明細書中に参考文献として取り入れている、ドレイ ファス、Ｌ．，ら．（１９８３）Ｉｎｆｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．４２：５３９，参照 ）。 毒素は、ｐＨ８．０の０．４Ｍトリス塩酸、および１ｍＭＥＤＴＡ中にて室温 で４時間０．１Ｍジチオスレオトール（ＤＴＴ）で還元することによってカップ リング用に調製する。還元した毒素は、ＴＥＳ緩衝液で平衡化したセファデック スＧ−２５カラムで脱塩し、２倍のモル数のＳＴ−ＰＤＰと混合する。反応液を 、ＴＥＳでｐＨ８．０に調節し、４℃で３６時間インキュベートする。ＳＴペプ チド−毒素コンジュゲートを、０．１Ｍ塩化ナトリウムを含むｐＨ８．０の２０ ｍＭ ＴＥＳ中でセファデックスＧ−７５にてゲルフィルトレーションを行い、 ＳＴペプチドおよび毒素の未反応産物およびホモポリマーから精製する。クロマ トグラフィーを行なった画分を、ＳＴペプチドと毒素との１：１のコンジュゲー トの存在を確認するために、非還元条件下で１０％ポリアクリルアミドゲルにて ＳＤＳ−ＰＡＧＥを行って調べる。また、ＳＴおよび細胞毒素が還元可能なジス ルフィド結合によってカップリングしていることを確認するために、これらのコ ンジュゲートを還元条件下で１０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分析する。コンジ ュゲートのモル濃度は、これらの試料中の放射活性を定量することによって計算 する。 ４番目のチロシンを125Ｉ（１０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）でトレースラベルしたＳＴ を、さまざまな分離およびクロマトグラフィーの段階を通じてコンジュゲートを 追跡するために使用し、これによって最終的に精製したコンジュゲート中の細胞 毒素に対するＳＴのモル比を計算できる。125ＩでトレースラベルしたＳＴは、 ｐＨ７．４のリン酸ナトリウム緩衝液中で室温にて３０分間５倍モル量のＳＰＤ Ｐとともに１ｍｇ／ｍｌをインキュベートすることによって誘導される。ＳＴ− ピリジルチオプロオピネート（ＳＴ−ＰＤＰ）コンジュゲートを、ｐＨ７．４の ２０ｍＭ Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）−メチル−２−アミノエタン硫酸（ ＴＥＳ）緩衝液で平衡化したセファデックスＧ−２５でクロマトフラフィーを行 なって、未反応のクロスリンク剤から精製する。ヒトの腸膜中で、コンジュゲー トしたＳＴペプチドの受容体結合活性が保存されていることを、濃度を上昇させ たＳＴ−ＰＤＰおよび126Ｉ−ＳＴ（５Ｘ１０10Ｍ）の競争阻害測定にて決定し 、この過程によってＳＴ受容体リガンドの機能が破壊されないことを確認した。 上述のカップリング手段は、さまざまな毒素をコンジュゲートするのにいくつ かの利点を持つ。第一に、この方法は、ＲＴＡ細胞毒性に重要なコンジュゲート 組成物中に還元可能なジスルフィド結合を導入する。また、この技術は、受容体 結合活性に重要な３つのタンパク内ジスルフィド結合を阻害するＤＴＴでＳＴペ プチドを量的に還元することを避ける。さらに、ＳＰＤＰで誘導するためにＳＴ ペプチドのアミノ末端には利用できる基が一つだけ存在し、先の実験から、この 基の誘導体はリガンドの結合特性を保持することが示されている。それゆえ、Ｓ Ｔが不活性化するような他のコンジュゲーションの形態は、不可能である。さら に、ＰＥＡは、上述の手法を利用して得られる最適な細胞毒性を獲得するために は、ＤＴＴであらかじめ不活性化することが必要である。 毒素を含む機能的なコンジュゲート化合物を作製するためには、分子の受容体 への結合および酵素活性が、コンジュゲーションの過程を通じて保存されている ことが必須である。それゆえ、一度このようなコンジュゲート化合物が得られた ら、これらの機能を保存しているかについて試験する。コンジュゲート化合物の ＳＴ受容体結合活性は、上記に記載したように、競争阻害結合測定によって調べ る。これらの実験において、コンジュゲート化合物の濃度を増加させて、一定濃 度（５Ｘ１０10Ｍ）の125Ｉ−ＳＴおよび平衡化するための腸膜（５０−１００ μｇのタンパク質）とともにインキュベートする。非特異的結合を測定するため にコントロールのインキュベーションは、過剰量のラベルしていないＳＴ（５Ｘ １０7Ｍ）を含む。コンジュゲート化合物による放射標識したＳＴの濃度依存的 な競合置換を、未処理のＳＴによる競合置換と比較する。置換曲線は、各々のコ ンジュゲート化合物の親和性（ＫD）を測定し、およびこの技術によって測定し た未処理のＳＴの親和性と比較するのに使用する。コントロール実験は、受容体 結合に関する未処理のＳＴに匹敵するコンジュゲートしていない毒素の能力を評 価することを含む。これらの実験は、コンジュゲートした構築物中のＳＴの結合 機能が保存されていることを確立する。 コンジュゲート化合物中の毒素活性の保存もまた測定する。ＰＥＡおよびＤＴ Ａは、伸長因子２（ＥＦ２）のＮＡＤ依存的なＡＤＰリボシル化を触媒して毒性 を誘導し、タンパク質合成を阻害する。ＡＤＰリボシル転移酵素活性は、既に確 立された測定法を使用して測定する（チャング，Ｄ．Ｗ．およびコリナー，Ｒ． Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．１６：８３２；フィツジェラルド，Ｄ．Ｊ．Ｐ ．（１９８７）Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．１５１：１３９，どちらも本明細書中に参考 文献として取り入れている）。反応は、全量５００μｌにて、４０ｍＭ ＤＴＴ 、５０ｍＣｉ14Ｃ−ＮＡＤ、並びに伸長因子２（ＥＦ−２；プロメガ、マディソ ン、ミズーリ州）を含む２０μｌのウサギ網膜芽細胞抽出液、を含むｐＨ８.２ の３０ｍＭトリス塩酸中で実施する。抽出液を添加して反応を開始し、３７度で ３０分間インキュベートし、氷で冷やした１２％ＴＣＡを添加して終了する。遠 心によって集めたタンパク質の沈澱中の放射活性を、液体シンチレーション分析 器によって定量する。ＤＴＡ又はＰＥＡを含むコンジュゲート化合物の、標識し たＡＤＰリボースのＥＦ−２への転移を触媒する能力を、同量のコンジュゲート していない毒素によって触媒されるものと比較する。コントロール実験は、コン ジュゲートしていない毒素またはＳＴのＡＤＰリボース転移を触媒する能力、お よびコンジュゲートしていない細胞毒素の酵素活性に対するＳＴの効果について 調べることを含む。 ＲＴＡは、６０Ｓリボソームサブユニットを触媒的に不活性化してタンパク質 合成を阻害する。ＲＴＡを含むコンジュゲート化合物の触媒活性は、既に確立さ れた手法を用いて無細胞系にてタンパク質合成の阻害能力によって測定する（レ オナルド、Ｊ．Ｅ．ら．（１９８５）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４５：５２６３ 本明細書中に参考文献として取り入れている）。測定は、全量５０μｌにて、３ ５μｌのヌクレアーゼで処理したウサギ網膜芽細胞抽出液、メチオニンが欠乏し たアミノ酸混合物１ｍＭを１μｌ、０．５μｇ／μｌのブロムモザイクＲＮＡ（ プロメガ、マディソン、ミズーリ州）を２μｌ、７μｌの滅菌水またはコンジュ ゲート溶液、並びに５μＣｉの35Ｓメチオニンを含む。抽出液を添加して反応を 開始し、３０℃で３０分インキュベートし、１２％ＴＣＡを添加して終結する。 遠心によって集めたタンパク質の沈澱中の放射活性を、液体シンチレーション分 析器によって定量する。コントロール実験は、コンジュゲートしていないＲＴＡ またはＳＴペプチドの無細胞系のタンパク質合成を阻害する能力、およびコンジ ュゲートしていない細胞毒素の阻害活性に対するＳＴペプチドの効果について調 べることを含む。 実施例１１ ジサクシイミジルスベリン酸塩（ピース、イリノイ州）のような長鎖炭素スペ ーサーを伴う、ホモ二官能性クロスリンカーであるサクシイミジルエステルによ って、メソトレキセートをＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に結合させる。ＳＥＱ Ｉ Ｄ ＮＯ：１２を、化学クロスリンク剤および等モル量のメソトレキセート存在 中にて室温で１５−３０分インキュベーションする。ＨＰＬＣによるゲル透過ク ロマトグラフィーによって反応物を分離してインキュベーションを終結する。こ の技術は、メソトレキセート／ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２コンジュゲートを遊離 の薬剤、遊離のＳＴペプチド、薬剤−薬剤コンジュゲートおよびＳＴペプチド− ＳＴペプチドコンジュゲートから分離する。遊離のアミノ基を通じて、好適には １：１のモル比で結合したＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２−メソトレキセートコンジ ュゲート均質な調製物が、得られる。ＳＴの遊離のアミノ基を結合しても、受容 体結合活性機能を保存している。 実施例１２ 111Ｉｎを、キレーターを使用して官能性のアミノ基においてＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７と結合する。ＳＴペプチドは、ＳＴペプチドのＳＴ受容体への結合活 性を変えることなく修飾できるアミノ末端において遊離のアミノ官能基を持つ。111 Ｉｎは、ＥＤＴＡ（エチレンジアミンテトラ酢酸）またはＤＴＰＡ（ジエチ ルエントリアミンエペタ酢酸）のいずれによっても急速におよび潜在的にキレー トされる。ＥＤＴＡはｉｎ ｖｉｖｏでより不安定なため、ＤＴＰＡがＥＤＴＡ よりも好まれる。111Ｉｎ−ＤＴＰＡを、遊離のアミノ基と反応できるＮ−ヒド ロキシサクシイミドエステル混合物に変換し、ＳＴと混合し、そして111Ｉｎ− ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７を含む反応産物をＨＰＬＣで分離した（ブレマー，Ｋ ．Ｈ．およびシュワルツ，Ａ．（１９８７）放射性薬剤の安全性およびその効果 。クライステンセン，Ｋ．およびノルバイガード、Ｅ．，編集。Ｍａｒｔｉｎｉ ｕｓ Ｎｉｊｈｏｆｆ，Ｄｏｒｄｒｅｃｈｔ，オランダ、Ｐ．４３；クレヤレッ ク，Ｇ．Ｅ．，およびタッカー、Ｋ．Ｌ．（１９７７）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏ ｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．７７：５８１；パキシトン，Ｒ．Ｊ．，ら． （１９８５）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４５：５６９４；リチャードソン，Ａ．Ｐ ．，ら．（１９８６）Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．１４：５６９、各々本明細 書中に参考文献として取り入れている）。 実施例１３ 99mＴｃは、インジウムと同様の方法を使用してＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６と コンジュゲートできる。従って、テクネチウムはＤＴＰＡによってキレート可能 であり、Ｎ−ヒドロキシサクシイミド無水化合物のような無水化合物に変換され 、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６と反応可能である。それからＳＴ−テクネチウムコ ンジュゲートは、ＨＰＬＣを使用して分離できる（マガースタット，Ｍ．（１９ ９１）坑体コンジュゲートおよび悪性の病気、ＣＲＣ印刷、ボカ ラートン；エ ッケルマン，Ｗ．Ｃ．およびパイク，Ｃ．Ｈ．（１９８６）Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ． Ｂｉｏｌ．１４：５６９）。 実施例１４ ジフテリア毒素Ａ鎖（ＤＴＡ）は、標準的な技術で未処理のジフテリア毒素か ら調製する。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２をＮ−サクシミニジル−３（２−ピリジ ルジチオ）−プロピネート（ＳＰＤＰ，ファルマシア−ＬＫＢ，ピスカタウェイ 、ニュージャージー州）に結合し、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２−ＰＤＰコンジュ ゲートを既に確立された手法でＨＰＬＣによって精製する。ＤＴＡを、ジチオス レイトールで還元し、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２−ＰＤＰとインキュベートする 。ＤＴＡ−ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２は、コンジュゲーションの後にＨＰＬＣに て精製する。 実施例１５ シュードモナス外毒素は、標準的な技術で未処理の源から調製する。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４をＮ−サクシイミジル−３（２−ピリジルジチオ）−プロピネ ート（ＳＰＤＰ，ファルマシア−ＬＫＢ，ピスカタウェイ、ニュージャージー州 ）に結合し、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４−ＰＤＰコンジュゲートを既に確 立された手法でＨＰＬＣによって精製する。シュードモナス毒素を、ジチオスレ イトールで還元し、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４−ＰＤＰとインキュベートする。 シュードモナス外毒素−ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４は、コンジュゲーションの後 にＨＰＬＣにて精製する。 実施例１６ ジサクシイミジルスベリン酸塩（ピース、イリノイ州）のような長鎖炭素スペ ーサーを伴う、ホモ二官能性クロスリンカーであるサクシイミジルエステルによ って、ドクソラビシンをＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に結合させる。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を、化学クロスリンク剤および等モル量のメソトレキセート存在中 にて室温で１５−３０分インキュベーションする。ＨＰＬＣによるゲル透過クロ マトグラフィーによって反応物を分離してインキュベーションを終結させる。こ の技術は、ドクソラビシン／ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４コンジュゲートを遊離の ドクソラビシン、遊離のＳＴペプチド、薬剤−薬剤コンジュゲートおよびＳＴペ プチド−ＳＴペプチドコンジュゲートから分離する。遊離のアミノ基を通じて、 好適には１：１のモル比で結合したＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４−ドクソラビシン コンジュゲートの均質な調製物が得られる。ＳＴの遊離のアミノ基を結合しても 、 受容体結合活性機能を保存している。 実施例１７ ジサクシイミジルスベリン酸塩（ピース、イリノイ州）のような長鎖炭素スペ ーサーを伴う、ホモ二官能性クロスリンカーであるサクシイミジルエステルによ って、ダウノラビシンをＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２に結合させる。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２を、化学クロスリンク剤および等モル量のメソトレキセート存在中 にて室温で１５−３０分インキュベーションする。ＨＰＬＣによるゲル透過クロ マトグラフィーによって反応物を分離してインキュベーションを終結させる。こ の技術は、ダウノラビシン／ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４コンジュゲートを遊離の ダウノラビシン、遊離のＳＴペプチド、薬剤−薬採コンジュゲートおよびＳＴペ プチド−ＳＴペプチドコンジュゲートから分離する。遊離のアミノ基を通じて、 好適には１：１のモル比で結合したＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４−ダウノラビシン コンジュゲート均質な調製物が得られる。ＳＴの遊離のアミノ基を結合しても、 受容体結合活性機能を保存している。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/28 9455−4Ｃ Ａ６１Ｋ 31/28 31/40 9454−4Ｃ 31/40 31/505 9454−4Ｃ 31/505 31/52 9454−4Ｃ 31/52 31/70 9051−4Ｃ 31/70 38/00 8415−4Ｃ 45/00 ＡＧＢ 38/45 8415−4Ｃ 45/05 38/46 7433−4Ｃ 47/48 Ｚ 45/00 ＡＧＢ 9356−4Ｈ Ｃ０７Ｋ 7/08 45/05 9356−4Ｈ 14/46 47/48 9356−4Ｈ 14/47 51/00 9356−4Ｈ 16/08 ＡＤＵ 9637−4Ｂ Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ Ｃ０７Ｋ 7/08 9453−4Ｂ Ｃ１２Ｑ 1/68 Ａ 14/46 0276−2Ｊ Ｇ０１Ｎ 33/53 Ｄ 14/47 0276−2Ｊ 33/574 Ｚ 16/08 9051−4Ｃ Ａ６１Ｋ 48/00 Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ 8415−4Ｃ 43/00 ＡＤＵ Ｃ１２Ｐ 21/02 9051−4Ｃ 37/54 Ｃ１２Ｑ 1/68 9051−4Ｃ 37/52 Ｇ０１Ｎ 33/53 9051−4Ｃ 37/02 33/574 9454−4Ｃ 49/02 Ａ // Ａ６１Ｋ 48/00 9162−4Ｂ Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ)，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，Ｃ Ｎ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ， ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，Ｎ Ｌ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １．ａ）ＳＴ受容体結合部分；および ｂ）有効部分；ここにおいて、有効部分は放射安定性な有効成分である を有するコンジュゲート化合物。 ２．ＳＴ受容体結合部分がペプチドである、請求項１の化合物。 ３．ＳＴ受容体結合部分が，配列番号２、配列番号３、配列番号５−５４、な らびにそれらの断片および変異体からなるグループから選択される、請求項１の 化合物。 ４．有効部分が治療剤である、請求項１の化合物。 ５．有効部分が、メトトレキセート、ドキソルビシン、ダウノルビシン、サイ トシンアラビノシド、エトポシド、５−４フルオロウラシル、メルファラン、ク ロランブシル、シス−プラチン、ビンデシン、マイトマイシン、ブレオマイシン 、プロチオニン、マクロモマイシン、１，４−ベンゾキノン誘導体、トレニモン 、リシン、リシンＡ鎖、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素、シフテリア毒素、Ｃｌ ｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ ホスホルパーゼＣ、ウシ膵臓リ ボヌクレアーゼ、ｐｏｋｅｗｅｅｄ抗ウイルスタンパク質、アブリン、アブリン Ａ鎖、コブラ毒因子、ゲロニン、サポリン、モデシン、ビスクミン、ボルケンシ ン、アルカリホスファターゼ、ニトロイミダゾール、メトロニダゾールおよびミ ソニダゾールからなる群から選択される、請求項１の化合物。 ６．ａ）薬学的に受容可能な担体または希釈剤、および ｂ）請求項１に記載のコンジュゲート化合物 を含む、薬剤組成物。 ７．転移した結腸直腸癌に罹患している疑いのある個体に請求項６の薬剤組成 物を投与する工程を含む、前記個体の治療方法。 ８．ａ）薬学的に受容可能な担体または希釈剤、ならびに ｂ） ｉ）ＳＴ受容体結合部分；および ii）有効部分； を有するコンジュゲート化合物 を含む薬剤組成物であって、ここにおいて、前記有効部分とは放射活性剤であり 、そして前記コンジュゲート化合物が、結腸直腸癌に罹患しているヒトの治療上 または診療上の用途に有効な量存在する、前記薬剤組成物。 ９．有効成分が、47Ｓｃ，67Ｃｕ，90Ｙ，109Ｐｄ，123Ｉ，125Ｉ，131Ｉ，18 6 Ｒｅ，188Ｒｅ，199Ａｕ，211Ａｔ，212Ｐｂ，212Ｂ，32Ｐおよび33Ｐ，71Ｇｅ ，77Ａｓ，103Ｐｂ，105Ｒｈ，111Ag，119Ｓｂ，121Ｓｎ，131Ｃｓ，143Ｐｒ，1 61 Ｔｂ，177Ｌｕ，191Ｏｓ，193MＰｔ，197Ｈｇ，43Ｋ，52Ｆｅ，57Ｃｏ，67Ｃ ｕ，67Ｇａ，68Ｇａ，77Ｂｒ，81Ｒｂ／81MＫｒ，87MＳｒ，99MＴｃ，111Ｉｎ，113M Ｉｎ，123Ｉ，125Ｉ，127Ｃｓ，129Ｃｓ，131Ｉ，132Ｉ，197Ｈｇ，203Ｐｂ ならびに206Ｂｉからなる群から選択される、請求項８に記載の薬剤組成物。 １０．ＳＴ受容体結合部分がペプチドである、請求項８に記載の薬剤組成物。 １１．ＳＴ受容体結合部分が，配列番号２、配列番号３、配列番号５−５４、な らびにそれらの断片および変異体からなるグループから選択される、請求項８に 記載の薬剤組成物。 １２．請求項８に記載の薬剤組成物を個体に投与する工程を含む、転移した結腸 直腸癌細胞を放射イメージングするための方法であって、前記コンジュゲート化 合物が結腸直腸癌に罹患しているヒトの診断用途に有効な量投与される、前記方 法。 １３．転移した結腸直腸癌に罹患している疑いのある個体に請求項８の薬剤組成 物を投与する工程を含む、前記個体を治療するための方法であって、前記コンジ ュゲート化合物が結腸直腸癌に罹患しているヒトの治療用途に有効な量投与され る、前記方法。 １４．個体の腸管細胞に核酸分子を運搬するための方法であって、前記個体に ａ）薬学的に受容可能な担体または希釈剤、ならびに ｂ） ｉ）ＳＴ受容体結合部分；および ii）核酸分子 を有する組成物 を含む薬剤組成物を前記個体に投与することを含む前記方法。 １５．個体が転移した結腸直腸癌細胞を有するか否かを判断するためのｉｎ ｖ ｉｔｒｏの方法であって、個体に由来する腸管外組織または体液の試料を分析し てＳＴ受容体細胞タンパク質が上記試料中で発現されているかを判断する、工程 を含む前記方法。 １６．細胞によるＳＴ受容体タンパク質の発現を、ＳＴ受容体に特異的に結合す る検出可能な抗体に前記試料を接触させるイムノアッセイ、標識したＳＴ受容体 リガンドに前記試料を接触させるＳＴ受容体結合分析、ＳＴ受容体タンパク質を コードするｍＲＮＡまたはｃＤＮＡを選択的に増幅するプライマーに前記試料を 接触させる複製連鎖反応、からなるグループから選択される方法によって判断す る、請求項１５に記載の方法。 １７．腫瘍細胞が結腸直腸腫瘍細胞であるか否かを決定するｉｎ ｖｉｔｒｏの 方法であって、前記腫瘍細胞がＳＴ受容体細胞を発現しているかどうかを判断す る工程を含む前記方法。 １８．細胞によるＳＴ受容体タンパク質の発現を、ＳＴ受容体に特異的に結合す る検出可能な抗体に前記試料を接触させるイムノアッセイ、標識したＳＴ受容体 リガンドに前記試料を接触させるＳＴ受容体結合分析、ＳＴ受容体タンパク質を コードするｍＲＮＡまたはｃＤＮＡを選択的に増幅するプライマーに前記試料を 接触させる複製連鎖反応、からなるグループから選択される方法によって判断す る、請求項１７に記載の方法。 １９．ＳＴ受容体タンパク質に結合する抗体を含む第一容器および単離されたＳ Ｔ受容体タンパク質を含む第二容器；または 検出可能なＳＴ受容体リガンドを含む第一容器および単離されたＳＴ受容 体タンパク質を含む第二容器；または ＰＣＲプライマーの組、ここにおいて前記プライマーの組を使用したＰＣ Ｒ反応はＳＴ受容体タンパク質をコードするｍＲＮＡ鋳型からＤＮＡ分子を増幅 する、あるいは，ＳＴ受容体タンパク質分子をコードするｍＲＮＡのｃＤＮＡ鋳 型からＤＮＡ分子を増幅するＰＣＲプライマーの組を含む第一容器、並びに、前 記第一ＰＣＲプライマーおよび第二ＰＣＲプライマー、および前記ｍＲＮＡまた はｃＤＮＡを用いたＰＣＲによって増幅されるＤＮＡ分子と同等の大きさのＤＮ Ａ分子を含む第二容器；または ＳＴ受容体タンパク質をコードするｍＲＮＡ若しくはｃＤＮＡと同一また は相補的な配列を有する核酸分子を含む第一容器および前記第一容器中の核酸分 子にハイブリダイズする核酸分子を含む第二容器 を含む、試料が結腸直腸細胞を有するか否かを判断するためのキット。
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