JPH09509646A

JPH09509646A - 多発性硬化症を治療する方法

Info

Publication number: JPH09509646A
Application number: JP7505635A
Authority: JP
Inventors: レスリーターク，ジョン; ベイカー，デイビッド; フェルドマン，マーク
Original assignee: ケネディーインスティチュートオブリューマトロジー
Priority date: 1993-07-30
Filing date: 1993-07-30
Publication date: 1997-09-30
Also published as: US5958409A; DE69329558T2; EP0710121A1; DK0710121T3; ES2153384T3; GR3035196T3; WO1995003827A1; AU4719093A; EP0710121B1; DE69329558D1; EP1004312A1; PT710121E; ATE196849T1

Abstract

(57)【要約】抗腫瘍壊死因子抗体の投与、可溶性腫瘍壊死因子受容体の投与又は腫瘍壊死因子の生産、その効果及び／又は腫瘍壊死因子受容体シグナルトランスダクションを阻止することができる化合物の投与により、多発性硬化症を治療する方法が開示される。この方法はヒト及び他の哺乳動物の治療の補助として用いることができる。

Description

【発明の詳細な説明】多発性硬化症を治療する方法背景多発性硬化症（ＭＳ）は、単病巣又は多病巣神経機能障害の再発性発作の形で通常現れる中枢神経系の自己免疫性脱髄性疾患である。発作は発生し、寛解し、そして外観上不規則に何年にもわたって再発する。寛解は不完全なことがあり、一つの発作の後に他の発作が起こるように、段階的悪化進行が永続的異常の増大に続いて発生する。臨床的な疾患は、血液脳関門機能障害、単核細胞、主としてマクロファージやＴリンパ球、および血清産物による中枢神経系の浸潤、そして脱髄（ハリスら（ Harris J．O.，et al.,）Ann．Neurol．29:548（1991）、ケルモンデら（Kermon de A．G.，et al.，Brain 113:1477(1990)）と関連する。現在でも多発性硬化症の原因となる自己抗原の性質は知られておらず、自己免疫応答の引金となるその作用についても知られていない。一つの一般的理論は、自己抗原とウイルスタンパク質の類似性に関するものであり、この類似性が自己抗原を認識する自己反応性のＴ細胞やＢ細胞を生じさせるとする。Ｂリンパ球は抗体を産生するが、胸腺由来の細胞すなわち“Ｔ−細胞”は細胞性免疫機能と関連する。Ｔ−細胞は細胞の表面に提示される抗原を認識し、そして“抗原提示” 細胞と共同してその機能を果たす。多発性硬化症のための実用的かつ効果的な治療法は今日存在しない。従って、多発性硬化症を治療するための方法を開発することは大きな利益となろう。発明の概要本発明は哺乳動物の多発性硬化症を治療する方法に関する。本発明は腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）が多発性硬化症および実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）の病態発生に一つの役割を果しているという発見に基づいている。本発明の方法は、多発性硬化症の効果を軽減する抗腫瘍壊死因子（抗−ＴＮＦ）抗体の治療上有効量を哺乳動物に投与することを含む。治療上有効量は、単回投与または数日、数週間又は数か月の間隔でなされる一連の投与の形で投与される。他の方法は、多発性硬化症の効果を軽減する可溶性ＴＮＦ受容体の治療上有効量を哺乳動物に投与することを含む。治療上有効量は、単回投与または数日、数週間又は数か月の間隔でなされる一連の投与の形で投与される。他の方法は、ＴＮＦ生産、その効果及び／又は腫瘍壊死因子受容体シグナルトランスダクション(signal transduction)を阻止することができる化合物（抗ＴＮＦ化合物）の治療上有効量を哺乳動物に投与することを含む。これらの抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体又は抗ＴＮＦ化合物は薬学的に許容される担体と共に投与することができる。好ましい態様では、該抗体、可溶性受容体又は抗ＴＮＦ化合物はヒトの中枢神経系に直接注射することにより投与される。中枢神経系への直接注射は、腰部の髄液中（膜内(intrathecally)）への直接注射によりすることができる。他の態様では、該抗体、可溶性ＴＮＦ受容体又は抗ＴＮＦ化合物は静脈内に投与される。本発明はさらに、薬学的に許容される担体および多発性硬化症の効果を軽減する抗ＴＮＦ抗体の多発性硬化症治療上の有効量、多発性硬化症の効果を軽減する可溶性ＴＮＦ受容体又は抗ＴＮＦ化合物を含んでなる薬学的組成物に関する。本発明の主題である治療方法の利益は、それが多発性硬化症の有効な治療法を提供することにある。図面の簡単な説明図１は、ビオッジＡＢ／Ｈマウスに誘導された慢性再発性実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＣＲＥＡＥ）の急性期中における体重変化と臨床徴候の動力学を示すヒストグラム及びグラフである。図２は、急性期のＣＲＥＡＥにおける細胞及びタンパク質に対する血液脳関門透過性を示すヒストグラムである。図３は、ＣＲＥＡＥ中における脊髄病巣内のＴＮＦαの免疫検出を示す１対の写真である。図４は、ＣＲＥＡＥ中における脊髄病巣内のＣＤ４⁺Ｔリンパ球、星状細胞及びマクロファージ上のＴＮＦαの免疫蛍光検出を示す一連の写真である。図５は、ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体の１回注射のＥＡＥに対する効果を示すグラフである。図６は、ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体の注射後における臨床上の疾患の発現の阻害を示す１対のグラフである。図７は、抗ＣＤ４と異なり、抗ＴＮＦが免疫抑制的でなく、接触感作体オキサゾロンに対する増殖性応答を減少させないことを示す１対のグラフである。図８は、中枢神経系中へのＴＮＦ特異的モノクローナル抗体の直接注射後の臨床的ＥＡＥの進行の投与依存性阻害を示すグラフである。図９は、中枢神経系中へのＴＮＦ特異的モノクローナル抗体の直接注射後における臨床上の疾患の発現の阻害を示すグラフである。図１０は、中枢神経系中へのＴＮＦ特異的モノクローナル抗体の直接注射及び腹腔内注射後の、５種類の異なる動物（それぞれのグループ内で）個体の臨床的グレードを示す一連の３つのヒストグラムである。図１１は、ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体又は可溶性ヒトｐ５５−ＴＮＦ受容体の脳内注射が腹腔内注射よりもＥＡＥをより大きく阻害することを示すグラフである。図１２は、可溶性ヒトｐ５５−ＴＮＦ受容体の全身的注射によるＥＡＥの阻害を示すグラフである。発明の詳細な説明本発明は、抗ＴＮＦ抗体の投与、可溶性腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦ−Ｒ）の投与、または腫瘍壊死因子生産、その作用、および／または腫瘍壊死因子受容体シグナルトランスダクションを阻止しうる化合物（抗ＴＮＦ化合物）の投与による多発性硬化症の治療に関する。多発性硬化症は中枢神経系の自己免疫疾患である。この疾患は血液脳関門機能不全、単核細胞（主にマクロファージ、Ｔリンパ球、血清産物）の中枢神経系浸潤、および脱髄と関係がある［ハリスら（Harris，J.O.，et al.）、Ann．Neurol. 29:548(1991)；ケルモンデら(Kermonde，A.G.，et al.)、Brain 113:1477(1990)］。ＣＤ４＋のＴリンパ球がこの疾患（ＭＳ）の誘導に関与しているが［モクフタリアンら（Mokhtarian ，F.，et al.）、Nature 309:356-358（1984）；ワルドールら（Waldor，M.K.， et al.）、Science 227:415(1985)］、ＭＳの病態発生に介在するエフェクター機構については不明である。腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）は、グラム陰性菌敗血症やリューマチ性関節炎などの様々なヒト疾患および動物モデルにおける病態発生に重要な役目を果たすエフェクター分子であると考えられている［トレイシーら（Tracey，K.J.，et al.）、Nature 330:662（1987）；ブレナンら（Brennan，F.M.，et al．）、Lancet 2:2 44（1989）；ウイリアムスら（Williams，R.O.，et al.）、Proc．Natl．Acad． Sci. 89:9784（1992）］。ＴＮＦαは、エンドトキシンやその他の刺激物質に応答して主に単球とマクロファージによって１７ｋＤのタンパク質サブユニットが重合した可溶性ホモトライマーとして分泌されるタンパク質である［スミスら（Smith，R.A.，et al．）、J．Biol．Chem. 262:6951-6954（1987）］。膜結合２６ｋＤ前駆体型のＴＮＦも記載されている［クリーグラーら（Kriegler，M.，et al.）、Cell 53:45-53( 1988)］。ＴＮＦα をコードする遺伝子の発現は単球／マクロファージファミリーの細胞に限定されない。ＴＮＦはＣＤ４＋やＣＤ８＋の末梢血Ｔリンパ球、および様々な培養Ｔ細胞株やＢ細胞株によっても産生される［キュテュリら（Cuturi，M.C.，et al.）、J．Exp．Med. 165:1581(1987)；スングら（Sung，S.-S.J.，et al．）、J．Ex p．Med. 168:1539(1988)；ターナーら（Turner，M.，et al.）、Eur．J．Immuno l. 17:1807-1814(1987)］。抗体という用語は、ポリクローナル抗体とモノクローナル抗体の両者を包含するものとする。抗体という用語は、ＴＮＦに対して反応性を示す複数抗体の混合物（たとえばＴＮＦ反応性モノクローナル抗体の異なるタイプの混合物）も包含するものとする。抗体という用語はさらに、抗体全体、その生物機能性断片、および複数種由来の部分や二官能性抗体などを含むキメラ抗体を包含するものとする。使用可能な生物機能性抗体断片とは、ＴＮＦへの抗体断片の結合が起きるのに十分な断片をいう。キメラ抗体は、２つの異なる種（たとえばヒトの定常領域およびネズミの可変領域または結合領域）に由来する部分を含むことができる。２つの異なる種に由来する部分は従来技術を用いて化学的に結合させることができる。また、遺伝子工学技術を用いて単一の隣接するタンパク質として一体的に作成することもできる。また、キメラ抗体の軽鎖部分と重鎖部分の両者のタンパク質をコードするＤＮＡを隣接するタンパク質として発現させることができる。ＴＮＦに対して反応性を示すモノクローナル抗体は、体細胞ハイブリダイゼーション技術［コホラーとミルステイン（Kohler and Milstein）、Nature 256:49 5（1975）］やその他の技術を用いて製造することができる。典型的なハイブリダイゼーション手順では、少なくともＴＮＦの一部分を含む粗製または精製タンパク質またはペプチドを免疫原として使用することができる。この免疫原で動物をワクチン処理して、抗ＴＮＦ抗体生産性脾臓細胞を得る。免疫される動物の種は目的とするモノクローナル抗体の種類によって異なる。抗体生産性細胞を不死化誘導細胞（たとえば骨髄腫細胞）と融合させて、抗ＴＮＦ抗体分泌能力を有するハイブリドーマを作成する。未融合のまま残った抗体生産性細胞と不死化誘導細胞を除去する。従来技術を用いて目的とする抗体を生産するハイブリドーマを選択し、選択したハイブリドーマをクローン化し、培養する。ポリクローナル抗体は、少なくともＴＮＦの一部分を含む粗製または精製タンパク質またはペプチドで動物を免疫することによって作成することができる。動物は、ＴＮＦに対して反応性を示す抗体が産生される条件下に維持される。目標の抗体価に到達したら、動物から採血する。ポリクローナル抗体を含む血清（抗血清）を他の血液成分から分離する。得られたポリクローナル抗体含有血清は、必要に応じ特定タイプの抗体の画分（たとえばＩｇＧ、ＩｇＭ）へとさらに分離してもよい。マウス骨髄腫細胞とＴＮＦ陽性Ｔ細胞、精製ＴＮＦ、またはＴＮＦを含むその他の生物学的調製物に対して免疫されたマウスから得た脾臓細胞を融合させることによって、ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体を産生するネズミハイブリドーマを作成する。マウスの免疫処理にあたっては、様々なプロトコルを利用できる。たとえば、マウスに対し、ＴＮＦの一次免疫と増強免疫を行なってもよい。融合は、免疫学の分野の熟練者にとってよく知られた常法によって達成される［コホラーとミルステイン（Kohler and Milstein）、Nature 256: 495（1975）；ケネットら（Kennet，et al.）、Monoclonal Antibodies，Kennet ，et al.，Eds．pp．365，Plenum Press，N.Y.，1980］。次いで、共トランスフェクトによって得られたクローンを対象として、ＴＮＦまたはＴＮＦを含む生物学的調製物に対して反応性を示す抗体の産生を検出するスクリーニングを行なう。適当な反応性と特異性を示す抗体を分泌するものをクローニングして、抗ＴＮＦ抗体を分泌する均一細胞株を得る。抗ＴＮＦモノクローナル抗体を産生するヒトハイブリドーマは、抗ＴＮＦ抗体産生個体由来のＢ細胞とヒトＢリンパ芽球細胞株を融合させることによって作成する。あるいは、骨髄腫細胞の融合相手は末梢血抗ＴＮＦ生産性リンパ球であってもよい。融合およびスクリーニングの方法は、ネズミ抗ＴＮＦ産生ハイブリドーマの製造と選択に使用されるものと実質的に同じである。また、ヒト抗ＴＮＦ抗体を産生するマウスハイブリドーマおよびヒトハイブリドーマは、ヒト抗体産生細胞とネズミ形質細胞腫細胞またはそれ自体が高頻度でヒトリンパ球と融合する能力や高レベルの抗体合成と分泌を支持する能力や培養時の長期抗体分泌を支持する能力などの適当な性質を有するハイブリッドである細胞とを融合させることによって作成することもできる。抗ＴＮＦ生産性細胞株を作成する別の方法として、抗体産生細胞の形質転換によるものがある。たとえば、抗ＴＮＦ産生Ｂリンパ球を、Ｂリンパ球の場合はエプスタイン−バーウイルスなどのウイルスに感染させて形質転換を行なうことで、不死化抗ＴＮＦ生産性細胞を得ることができる［たとえばコズボールとロデル（Kozbor and Roder）、Immunology Today，4(3):72(1983)参照］。あるいは、Ｂリンパ球は形質転換遺伝子や形質転換遺伝子産物によって形質転換させてもよい。ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体は、抗ＴＮＦ抗体産生ハイブリドーマをマウスまたはその他の適当な動物宿主の腹腔内に注入し、適当な時間が経過した後に、生じた高抗体価の腹水を集め、抗ＴＮＦモノクローナル抗体をそれから単離することによって大量に製造される。同種または異種ハイブリドーマを免疫抑制ヌードマウスや照射処理ヌードマウスや無胸腺ヌードマウスに注入しなければならない。あるいは、抗体は、抗ＴＮＦ生産性細胞をイン・ビトロで培養し、分泌された抗ＴＮＦモノクローナル抗体を細胞培養培地から単離することによっても製造することができる。キメラ抗ＴＮＦ抗体は、ＴＮＦ特異的非ヒト抗体の重鎖および軽鎖可変領域をコードするＤＮＡセグメントをクローニングし、これらのＤＮＡセグメントをヒト重鎖および軽鎖定常領域をコードするＤＮＡセグメントに連結して、キメラ免疫グロブリンコード遺伝子を得ることで製造される。生じた軽鎖および重鎖をコードする融合遺伝子構築物を発現ベクター中に組み込む、すなわち挿入する。免疫グロブリンの合成、会合、および分泌が可能なリンパ系レシピエント細胞（たとえば骨髄腫細胞）に遺伝子をトランスフェクトさせる。トランスフェクトされたレシピエント細胞を培養し、発現された免疫グロブリンを採取する。抗ＴＮＦ抗体およびそれらの疾患治療用途についてのさらに詳細な説明が以下の参考文献に記載されているが、これら文献の内容も引例により本明細書に含まれるものとする［米国特許出願番号０７／９４３，８５２、１９９２年９月１１日出願；ルビンら（Rubin，et al．）、ＥＰＯ特許公報第０２１８８６８号、１９８７年４月２２日；ヨネら（Yone，et al.）、ＥＰＯ特許公報第０２８８０８８号、１９８８年１０月２６日；リアングら（Liang，C.-M.，et al.）、Bioche m．Biophys．Res．Comm. 137:847（1986）；ミーガーら（Meager，A.，et al.）、Hybridoma 6:305(1987)；フェンドリーら（Fendly，et al.）、Hybridoma 6:3 59(1987)；ブリングマンら（Bringman，T.S.，et al.）、Hybridoma 6:489（198 7)；ヒライら（Hirai，M.，et al.）、J. Immunol．Meth．96:57(1987)；モラーら（Moller，A.，et al.）、Cytoki ne 2:162（1990）；マティソンら（Mathison，J.C.，et al.）、J．Clin．Inves t. 81:1925（1988）；ベウトラーら（Bautler，B.，et al．）、Science 229:86 9（1985）；トレイシーら（Tracey，K.J.，et al.）、Nature 330:662（1987）；シマモトら（Shimamoto，Y.，et al．）、Immunol．Lett. 17:311(1988)；シルバら（Silva，A.T.，et al．）、J．Infect．Dis．162:421(1990)；オパールら（Opal，S.M.，et al.）、J．Infect．Dis．161:1148（1990）；ヒンショーら（Hinshaw，L.B.，et al．）、Circ．Shock 30:279（1990）］。高い結合親和性すなわち１モルあたり少なくとも１０⁸リットルの会合定数Ｋを有するＴＮＦ特異的抗体がとくに好ましい抗体である。会合定数Ｋは、クビー（Kuby，J.）、Immunology，W.H．Freeman & Co.，Ney York，1992，pp．122-12 4に記載されているようにして平衡透析法で決定することができる。抗体親和性および会合定数Ｋについてのさらに詳細な説明が以下の参考文献に記載されているが、これら文献の内容も引例により本明細書に含まれるものとする［クビー（Kuby，J.）、Immunology，W.H．Freeman & Co.，Ney York，1992， pp．122-124；フードら（Hood，L.E.，et al.）、Immunology，Second Edition ，The Benjamin/Cummings Publishing Co.，Menlo Park，CA，1984，pp．58-60 ；アッバスら（Abbas，A.K.，et al．）、Cellular and Molecular Immunology, W.B．Saunders Co.，Philadelphia，1991，pp．53-54］。可溶性受容体という用語は、クローニングされた可溶性受容体全体、その生物機能性断片、およびクローニングされた可溶性キメラ受容体を包含するものとする。可溶性受容体という用語はさらに、腫瘍壊死因子を中和（すなわちＴＮＦと結合）するかＴＮＦの生物活性を阻害するクローニングされた可溶性分子すべてを包含するものとする。使用可能な生物機能性受容体断片とは、腫瘍壊死因子の結合に十分なこれらの断片またはＴＮＦの生物活性を阻害する能力を有するこれらの断片をいう。クローニングされた可溶性キメラ受容体には、ＴＮＦ受容体の一部分と少なくとも１つの免疫グロブリン重鎖または軽鎖との融合によって作成されるＴＮＦ結合能力を有するこれらの分子が含まれる。クローニングされたキメラ受容体の中に存在するＴＮＦ受容体の部分は少なくともＴＮＦ受容体の細胞外領域の一部分から成る。ＴＮＦ結合能力を有する分子ができる他の融合タイプもこの範囲に含まれる。キメラ受容体は、２つの異なる種（たとえばヒトＴＮＦ受容体の細胞外ドメインおよびネズミＩｇＧ１重鎖のＣ_H２ないしＣ_H３ドメイン）に由来する部分を含むものであってよい。この２つの異なる種に由来する部分は従来技術を用いて化学的に結合させることができるが、ペッペルら（Peppel，K.，et al.）、J．Exp ．Med. 174:1483-1489（1991）の記載に従い、遺伝子工学技術を用いて単一の隣接するタンパク質として作成することもできる。キメラ受容体の両方の部分をコードするＤＮＡを一つの隣接するキメラ受容体タンパク質として発現させることができる。キメラ受容体は、同一の種（たとえばヒトＴＮＦ受容体の細胞外ドメインおよびヒトＩｇＧ重鎖の定常ドメイン）に由来する２つの部分を含むものであってよい。この２つの部分は従来技術を用いて化学的に結合させることができるが、レスラウエルら（Lesslauer，W.，et al．）、Eur．J．Immunol. 21:2883-2886(19 91)；アシュケナジら（Ashkenazi，A.，et al．）、Proc．Natl．Acad．Sci．US A 88:10535-10539(1991)の記載に従い、遺伝子工学技術を用いて単一の隣接するタンパク質として作成することもできる。キメラ受容体の両方の部分をコードするＤＮＡを隣接するキメラ受容体タンパク質として発現させることができる。これら以外のキメラＴＮＦ受容体組成物も可能であり、本発明に使用することができる［たとえばスカロンら（Scallon，B.，et al．）、米国特許出願番号０８／０１０，４０６、１９９３年１月２９日出願参照］。キメラＴＮＦ受容体およびそれらのＴＮＦ結合能力についてのさらに詳細な説明が以下の参考文献に記載されているが、これら文献の内容も引例により本明細書に含まれるものとする［スカロンら（Scallon，B.，et al．）、米国特許出願番号０８／０１０，４０６、１９９３年１月２９日出願；ペッペルら（Peppel，K.，et al.）、J．Exp． Med. 174:1483(1991)；レスラウエルら（Lesslauer，W.，et al．）、Eur．J．I mmunol. 21:2883（1991）：アシュケナジら（Ashkenazi，A.，et al．）、Proc ．Natl．Acad．Sci．USA 88:10535(1991)］。ＴＮＦ生産、ＴＮＦの作用、および／または腫瘍壊死因子受容体シグナルトランスダクションを阻止しうるがそれ自体は受容体ではない化合物およびリガンドも本発明に使用することができる。そのような化合物としては、ペプチド、抗ＴＮＦ薬物、および抗ＴＮＦシグナルトランスダクション化合物などが挙げられるが、これらに限定されない。宿主に有効量で投与したときに多発性硬化症の臨床症状や原因が軽減されるのであれば、抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、または抗ＴＮＦ化合物は有用である。症状や原因は、それが有意に軽減したり完全に除去された場合に軽減されたという。本発明に使用される抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、および抗ＴＮＦ化合物は中枢神経系に直接投与するのが望ましいが、血液脳関門が存在するために、多くのタイプの分子は血液中から中枢神経系細胞への自由な通過が制限されている（たとえば抗ＴＮＦ抗体や可溶性ＴＮＦ受容体などの潜在的に有用な治療剤）。ＭＳやＥＡＥなどの炎症性疾患の活動期には血液脳関門の漏出が知られており、これによって抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、または抗ＴＮＦ化合物が中枢神経系に進入することができる。それでも血液脳関門を物理的に突破するか迂回することで治療剤の送達を図る技術がいくつか存在する。これらの技術の具体例としては、膜内注射(intrathecally injection)、外科的インプラント、および浸透圧法などが挙げられる。また、血液脳関門透過性を有するブラジキニンアゴニスト（たとえばＮ−アセチル［Ｐｈｅ⁸（ＣＨ₂−ＮＨ）Ａｒｇ⁹］ブラジキニン）を投与することによって、抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、および抗ＴＮＦ化合物に対する血液脳関門透過性を上げることができる。血液脳関門を物理的に突破するか迂回するこれらの技術についてのさらに詳細な説明が、マルフロイ−カミン（Malfroy-Camine）、米国特許番号５，１１２，５９６、１９９２年５月１２日に記載されているが、この文献の内容も引例により本明細書に含まれるものとする。上記抗体、可溶性受容体、および抗ＴＮＦ化合物の投与の好ましい態様として膜内注射、すなわち中枢神経系を取り囲む膜を穿剌することによって髄液に直接的に注射する方法がある。中枢神経系を取り囲む膜の穿刺は腰椎穿刺によるのが普通である。外科的にインプラント留置されるインフュージョンポンプを使用すれば、一定量の薬剤を持続的に髄液に直接的に投与することができる。抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、および抗ＴＮＦ化合物の投与のもう１つの好ましい態様として、腰椎髄液中への直接注射（膜内注射）または静脈内注射によるものがある。これら以外の投与方法や手段も使用することができる。抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、または抗ＴＮＦ化合物が投与される薬学的に許容される剤型は、少なくとも一部はその投与経路に依存する。たとえば、注射による投与の場合、抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、または抗ＴＮＦ化合物は、投与経路に見合った通常のやり方で従来の薬学的に許容される担体とともに処方して医薬組成物とすることができる。このような担体は本来、無毒で治療効果を有さないものである。抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、または抗ＴＮＦ化合物の治療上有効な量とは、多発性硬化症に関連する症状を有意に軽減または除去するのに必要な量をいう。マウスにおける抗ＴＮＦ抗体の有効量は注射１回あたり１５０μｇ〜１ｍｇの範囲である。したがって、ヒトにおける抗ＴＮＦ抗体の治療上有効量として妥当かつ好ましい量は投与１回あたり０．１〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲である。同様に、マウスにおける可溶性ＴＮＦ受容体の治療上有効量として好ましい量は注射１回あたり１５〜１５０μｇの範囲である。したがって、ヒトにおける可溶性ＴＮＦ受容体の治療上有効量として妥当かつ好ましい量は投与１回あたり０．１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。治療上有効な量は個体ごとに決定され、少なくとも一部は個体のサイズ、治療対象症状の重篤度、目標とする成績などを考慮した上で決定される。したがって、治療上有効な量は、普通の熟練者が上記因子を用いて常法により決定することができる。治療上有効な量は単回投与の形で投与してもよいし、数日、数週、または数カ月の間隔をおいて複数回投与してもよい。治療上有効な量が投与されたら、維持量の抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、または抗ＴＮＦ化合物を投与することができる。維持量とは、治療上有効な量によって達成された症状の軽減または除去の状態を維持するのに必要な抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、または抗ＴＮＦ化合物の量をいう。維持量は単回投与の形で投与してもよいし、数日、数週、または数カ月の間隔をおいて複数回投与してもよい。治療上有効な量と同様に、維持量も個体ごとに決定される。メトトレキセートやシクロスポリンＡなど上記以外の抗炎症薬や免疫抑制薬、または抗ＣＤ４抗体などの抗体を抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、または抗ＴＮＦ化合物と併用投与することができる［たとえばフェルドマンら（Feldmann ，M.，et al.）、米国特許出願番号０７／９５８，２４８、１９９２年１０月８日出願参照］。本発明の方法は、あらゆる哺乳動物における多発性硬化症や関連疾患の治療に使用することができる。好ましい態様においては、本発明の方法はヒトの多発性硬化症の治療に使用される。ＥＡＥにおける抗ＴＮＦ抗体および可溶性ＴＮＦ−ＲＩｇＧ融合タンパク質の効果について調べて、ＴＮＦの生物活性やその他のＴＮＦの作用を阻止するかＴＮＦ受容体シグナルトランスダクションを阻止することがＭＳの治療に有用であることを示す成績について説明する。本明細書で説明する実験は、ヒトの脱髄性疾患である多発性硬化症の実験モデルとしてＥＡＥを利用している。慢性再発性ＥＡＥは、ＭＳの実験モデルとして使用される中枢神経系の自己免疫性脱髄性疾患である。このマウスＥＡＥ誘導モデルは臨床徴候の点でヒトのＭＳと類似している。ＥＡＥとＭＳはいずれも、臨床疾患が血液脳関門（ＢＢＢ）の機能不全、単核細胞（主にマクロファージ、Ｔリンパ球、血清産物）の中枢神経系浸潤、および脱髄と関連している［ベイカーら（Baker，D .，et al．）、J．Neuroimmunol. 28:261(1990)；ブッターら（Butter，C.，et al.）、J．Neurol．Sci．104:9(1991)；ハリスら（Harris J.O.，et al．）、An n．Neurol. 29:548(1991)；ケルモンデら（Kermonde A.G.，et al．）、Brain 1 13:1477（1990）］。したがって、このマウスモデルはヒト疾患を極めてよく再現したモデルとして使用できる。ＥＡＥやＭＳなどの神経免疫疾患の病態発生にＴＮＦが重要であるかどうかを判定しやすくするために、誘導ＥＡＥの活動期（実施例１）、ＢＢＢ機能不全と中枢神経系浸潤が明白となった前臨床的体重減少の少し前の時点（１〜２日前）（実施例２）［ブッターら（Butter，C.，et al.）、J．Neurol．Sci．104:9(19 91)］、および神経学的徴候が発現した臨床疾患活動期（実施例１）で、実施例５、６、および７で説明するようにしてＴＮＦ特異的モノクローナル抗体（ＴＮ３．１９．１２）を投与し、そして誘導ＥＡＥの活動期、および臨床徴候発現の少し後の時点で、実施例８および９で説明するようにして可溶性ヒトＴＮＦ受容体（ヒトｐ５５ＴＮＦ−Ｒ）を投与した。実施例５、６、７、８、および９で説明するように、ＴＮＦ免疫療法は慢性再発性ＥＡＥの進行を阻害することがわかったので、ヒトの疾患である多発性硬化症の治療戦略上有意義である。実施例２で説明するように、慢性再発性ＥＡＥの疾患事象はＢＢＢ機能障害（図２）や中枢神経系の顕著な細胞浸潤と関連している［ベイカーら（Baker，D.，et al．）、J．Neuroimmunol. 28:261(1990)；ブッターら（Butter，C.，et al.）、J．Neurol．Sci．104:9(1991)］。実施例１、２、および３で説明するように、抗ＴＮＦ抗体によって調節されるこれらのパラメータは（表２）、臨床的な神経学的異常が検出されるより少し前の時点で起きる進行性の体重減少と相関していた（図１）。ＴＮＦは臨床疾患を悪化させたり［クロダら（Kuroda，Y.，et al.）、J．Neu roimmunol. 34:159-164(1991)］、その他の炎症前駆サイトカインの産生を誘導する能力があること［ベウトラーら（Beutler，B.，et al．）、Science 229:86 9(1985)；ブレナンら（Brennan，F.M.，et al．）、Lancet 2:244（1989）］、及び本明細書で説明するようにＴＮＦ中和後にＥＡＥを阻害することから、ＴＮＦがＥＡＥの病態発生に重要な炎症前駆的役目を果たしていると思われる。実施例５、６、及び７で説明するように、抗体治療を中止すると臨床上のＥＡＥが発現したことからＴＮＦ免疫療法は一般的免疫抑制により効果を発揮しているのではないと思われる。実施例４で説明するように、ＣＤ４特異的モノクローナル抗体がＥＡＥおよびＴ細胞増殖に及ぼす免疫抑制作用とは対照的に、ＴＮＦ活性を阻害したところＴ細胞増殖応答にはほとんど影響しなかったことから（図７）、対ＴＮＦ免疫療法は疾患の誘導を標的とするのではなくエフェクター細胞の機能を標的とするものであると思われ、脳炎誘発細胞をイン・ビトロで処理しても疾患の適応転移を阻害することができないという事実と一致する［セルマジら（Selmaj，K.，et al.）、Ann．Neurol. 30:694(1991)］。したがって、阻害効果を得るためには、抗体投与の相対的タイミングが重要である。たとえば、疾患発現が予期される“時期”に投与した場合に見られる多数回投与の阻害効果（表１）とは対照的に、同じ治療（３ｘ２５０μｇのＴＮ３．１９．１２を腹腔内注射）を臨床疾患発現が予期される時期の“前の時点”で中止すると、ＥＡＥの臨床発現を予防することができなかった（被験者８名全員がＥＡＥを発現し、群平均スコアは３．３±０．５であった）。実施例５、６、および７で説明するように、中和ＴＮＦ抗体の全身投与によりＥＡＥが阻害されたが（図６、９、および１０）、極めて有益であったのは、ＴＮＦを中枢神経系に直接投与した場合であった（図９および１０）。したがって、大部分のＴＮＦ活性は中枢神経系内で生じることが明らかである。抗体は無傷の血液脳関門を通過する能力に限界があるが［ハフラーら（Hafler，D.A.，et a l.）、Ann．Neurol. 21:89（1987）］、多発性硬化症患者にＴＮＦ特異的モノクローナル抗体を全身投与すると、臨床的に潜在しているＭＳにおいてよく見られる［ハリスら（Harris，J.O.，et al.）、Ann．Nuurol. 29:548(1991)；ケルモンデら（Kermonde A.G．et al.）、Brain 113:1477（1990）］血液脳関門機能障害がある場合および臨床事象発現中の場合に、中枢神経系への抗体標的化が増大するであろう。本明細書で説明する実施例は、ＭＳの実験モデルである脱髄性疾患ＥＡＥにおいてＴＮＦが重要な役目を果たしていることを明らかにしているので、ＴＮＦは免疫介入の標的として適当であること、および多発性硬化症の治療方法となることが示される。さらに、本明細書で説明する研究は、ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体、または抗ＴＮＦ化合物を中枢神経系に直接投与することの利点を指摘している。また、ＥＡＥに抗ＴＮＦを使用した過去の研究では、抗体を臨床徴候が発現する前、すなわち予防的に投与した場合に限ってＥＡＥに対する効果が制限されたが［セルマジら（Selmaj，K.，et al.）、Ann．Neurol. 30:694(1991)；ルッドル（Ruddle，N.J.）、J．Exp．Med. 172:1193(1990)]、本明細書で説明する研究はこれらの研究と異なり、ヒトの多発性硬化症の治療において見られるように臨床徴候が発現した“後”での療法の効果を明らかにしたものである。本発明について次の実施例によりさらに説明するが、これらに限定されるものではない。実施例１：実験的アレルギー性脳脊髄炎の誘導前述のように、６０μｇのマイコバクテリウム（結核菌Ｈ３７Ｒａと牛酪菌を８：１で含む）を追加したフロイントの不完全アジュバントで乳化した脊髄ホモジネート（ＳＣＨ）の１ｍｇを、０日目と７日目に同系繁殖系のビオジー（Bioz zi）ＡＢ／Ｈ（Ｈ−２^dq1）系マウスに注射した〔ベイカーら（Baker,D.et al. ）、J．Neuroimmunol．28:261（1990）〕。接種後（p.i.）11日（Ｄ11）以降、マウスの体重を測定し臨床的徴候をチェックした（図１）。これらの徴候を次のようなグレードに分けた：０＝正常、１＝全体的に弱々しい尾、２＝正向反射の減少、３＝部分的後肢の麻痺と４＝完全な後肢の麻痺。典型的症状より軽度の神経学的徴候を上記のグレードよりも低い０．５とした〔ベイカーら（Baker,D.et al.）、J．Neuroimmunol．28：261(199 0)〕。急性ＥＡＥの臨床的状態については既に報告されている〔アレンら(Allen,S.J .,et.al.),Cell Immunol. １４６：３３５（１９９３）〕。要約すると、通常は p.i.１３から１５日目に、当初１日当たり１．５グラム以上の体重減少が起こった。この後に徴候の開始（OS）が起こり、p.i.１５から１７日目に弱々しい尾が明確になり、そしてp.i.１７から１９日までに動物は、グレード３ないし４の急性期の麻痺を体験した。結局、麻痺した動物（グレード３−４）は体重増加（WG ）を示し、通常は、p.i.２１から２３日までに、後−急性期（PA）の間、臨床的徴候が軽減し始め、動物はグレード２から１の疾病を示した（図１）。典型的にはp.i.24日までに、中枢神経系が再度リンパ球や血清タンパク質の浸入に対し比較的不透過性になるとき〔バッターら(Butter,C.,et al.)，J．Neurol．Sci．１０４（１９９１）〕、動物は、臨床上そして組織学上緩和期に入った〔ベイカーら（Baker,D.et al.）、J．Neuroimmunol．２８：２６１（１９９０）〕。ビオジーＡＢ／Ｈマウスで誘導された慢性再発性実験的アレルギー性脳脊髄炎 (CREAE)の急性期における体重変化と臨床徴候の動力学を図１に示す。このデータは、活性化した臨床上の疾病と体重変化の進行は相関していることを示している。ヒストグラムの各棒線は、臨床上の疾病の開始の３日前の指示値と比べた体重減少の平均パーセントを表し、グラフ上の各円は、臨床疾病の開始日、０日と比べた平均臨床スコアを表す。データは、１３個体のマウスの平均±ＳＥＭを表す。疾病の異なる相の相対時間を示す。略号は、次の相に対応する：WL＝体重減少；OS＝徴候の開始;AP＝急性麻痺;WG＝体重増加；そしてPA＝後−急性。実施例２：血液脳関門の機能ＥＡＥ誘導後のいろいろな時期に（実施例１）、前述のように、２．５ｘ１０⁷の⁵¹Ｃｒ標識リンパ節細胞と５μＣｉの¹²⁵Ｉ−アルブミンをマウスに静脈注射した〔バッターら(Butter,C.,et al.)，J．Neurol．Sci．１０４：９（９１）〕。１８時間後、麻酔した動物に左心室経由で、ＲＰＭＩ−１６４０培地を灌流した後、２０μｌの血液検体を除去し、グループ当たり４ないし１４匹の動物の脳と脊髄を集め、γ線検出器で放射性同位元素濃度の評価を行った。その結果を、標的組織１グラム当たり、脈管外血液等量（EVBE）当たりのドナー細胞数で表す。前述のように、１００ＥＶＢＥは、サンプリング時の血中¹²⁵Ｉ−アルブミン血漿タンパク質濃度に相当する〔バッターら(Butter,C.,et al.)，J．Neurol ．Sci. １０４：９（１９９１）〕。慢性再発性ＥＡＥの急性期中の血液脳関門の透過性を図２に示す。白抜きの棒線は、細胞に対する脊髄の透過性を表し、斜線の棒線は、血漿タンパク質に対する脊髄の透過性を表す。結果は、グループ当たり４ないし１４匹の動物の平均±ＳＥＭを表す。正常動物(N)及びＥＡＥ誘導後の接種後１１日目までの動物では、中枢神経系はリンパ節細胞や血漿タンパク質の通行に対して比較的不透過性であった（図２）。血漿タンパク質の溢出と細胞輸送の両者とも臨床上の疾病の発現と相関していた。ＢＢＢの破壊は、最初、脳で検出可能であったが（データは示さず）それはＡＢ／ＨマウスではＥＡＥには比較的見られない〔ベイカーら（Baker,D.et al.）、J．Neuroimmunol．２８：２６１（１９９０）〕；〔バッターら（Butter,C.,e t al.) ，J．Neurol．Sci．１０４：９（１９９１）〕、そして動物が体重減少を起こした時脊髄で検出可能であった。血液脳関門の透過性は、臨床徴候（OSとAP ）が発現したり、体重減少（１２日目に比べて全体で体重の２５から３５％）が進行した時、劇的に上昇した。麻痺した動物で体重増加が明らかになると、ＢＢＢ透過性は顕著に減少した。以前報告されたように〔バッターら(Butter,C.,et al.) ，J．Neurol. Sci．１０４：９（１９９１）〕臨床徴候は後−急性期中は軽減し、寛解動物ではＢＢＢの完全性が回復した。この結果は、ＢＢＢの機能障害と体重変化の進行の相関を明らかにする。実施例３：腫瘍壊死因子活性の検出組織液ＥＡＥの種々の相にある動物の神経末梢部を麻酔し、胸腔への瀉血後に血清試料を調製した。脳脊髄液(CSF)試料（１−３μｌ／動物）を大孔からヘマトクリット管へ回収した。遠心分離して細胞を除去した後、検査前にこれらの検体を− ２０°Ｃで保存した。前述のように〔ビュートラー(Beutler B.),Science ２２９：８６９（１９８５）〕、ＴＮＦ感受性マウス繊維芽細胞株Ｌ９２９を使用して、または製造業者の指示書に従いファクターテストマウスＴＮＦαＥＬＩＳＡキット（Genzyme,UK）を使用して、１：２希釈の血清と１：５０希釈のCSFを使用して腫瘍壊死活性を測定した。ＥＬＩＳＡ法は５０ｐｇ／ｍｌから３．２ｎｇ／ｍｌまでのＴＮＦαを検出できた。組織切片間接免疫ペルオキシダーゼ法により、頸部脊髄のアセトン固定したクリオスタット切片を、調製後１週間以内に染色した。本質的には前述の方法に従った〔ベイカーら（Baker,D.et al.）、J．Neuroimmunol．２８：２６１（１９９０）〕。要約すると、内在するペルオキシダーゼ活性を阻止した。切片を５％の正常マウス血清(NMS)と共に３０分間インキュベートし、ついでマウスＴＮＦα／βに反応する一次モノクローナル抗体と共に１時間インキュベートした。このような抗体としては、例えばＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体、すなわちマウスＴＮＦαとＴＮＦβで中和するハムスター免疫グロブリンＧ１（IgG1）モノクローナル抗体〔シェーハンら(Sheehan,K.C.F.,et al.),J.Immunol．１４２：３８８４（１９８９）〕〔シュライバー博士（Dr.R.Schreiber）Washington Univers ity Medical School,St.Louis,USAより供与、Celltech,Slough,UKと共同〕、または、ラット抗マウスＴＮＦαに反応する一次モノクローナル抗体、例えばＭＰ６−ＸＴ３（HB10649）またはＭＸ６−ＸＴ２２（HB10697）、両者ともハイブリドーマ細胞培養により生産されたラットＩｇＧ１モノクローナル抗体〔ATCCより入手、アブラムス博士(Dr.J.Abrams)、DNAX,USAの贈与〕が用いられた。ビオチン化したヤギ抗ハムスター免疫グロブリンまたはラビット抗ラット免疫グロブリン、アビジン：ビオチンペルオキシダーゼ複合体とペルオキシダーゼ結合ラビット抗ヤギ免疫グロブリンまたはブタ抗ラビット免疫グロブリンをそれぞれ使用して、一次モノクローナル抗体を逐次３０分間インキュベーションすることにより検出した。反応生成物を色素原ジアミノベンチジンで発色させた。切片をヘマトキシリンで対比染色した。例えば、免疫細胞化学のための使用前に、一次モノクローナル抗体を過剰の組換えマウスＴＮＦα（２００−５００μｇ／ｍｌ）で希釈した。この過程は、ＣＤ８特異的モノクローナル抗体での切片染色の阻害に失敗した。二重標識のために、ラット抗マウスＴＮＦα、ラビット抗ラット免疫グロブリンそして、テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）あるいはフルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）を結合したブタ抗ラビット免疫グロブリンの１：１００希釈液（５％ＮＭＳを含むリン酸緩衝食塩水）と共に切片をインキュベートした。ラビット抗ファクターVIII−関連抗原とラビット抗神経膠原線維酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）をＦＩＴＣに結合し充分に透析した。それから、これらの切片を１：５０−１：100希釈液（５％ＮＭＳを含む）と３０分間インキュベートすることにより、二重免疫蛍光染色を行った。それはＦＩＴＣ結合抗ファクターVIII、抗ＧＦＡＰ、Ｈ−２Ａ特異的マウスモノクローナル抗体、またはＢ細胞拘束性Ｂ２２０、ＣＤ４あるいはＣＤ８抗原に特異的なフィコエリトリン結合ラット免疫グロブリンモノクローナル抗体の希釈液である。切片を蛍光顕微鏡で観察した。ＴＮＦの検出図２で示すデータは、血液脳関門機能障害が動物の体重減少と相関していることを示唆した。しかし、ＷＬ動物とＡＰ動物由来の血清とＬ９２９細胞株との最初の実験は、生物活性なＴＮＦの存在を明確にすることに失敗した。さらに、ＷＬ、ＯＳ、ＡＰ、ＰＡの各動物由来血清の５つの個体試料そして５匹の麻痺（ＡＰ）動物由来のＣＳＦ試料の分析は、ＴＮＦの存在水準が、使用したＴＮＦαＥＬＩＳＡ法の感度以下であったことを示し、血清試料中には少なくとも１００ｐｇ／ｍｌ以下のＴＮＦαしか存在しなかったことを示す。しかし、図３は免疫細胞化学を使用して慢性再発性ＥＡＥ動物の中枢神経系内にあるＴＮＦを検出できることを示す。いくつかのＴＮＦ特異的モノクローナル抗体〔ＭＸ６−ＸＴ２２（HB10649）とＴＮ３．１９．１２〕は用量範囲では充分な染色を行えなかったけれども、これらの抗体で認識する組織領域が変性している可能性を示唆しており、ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体ＭＰ６−ＸＴ３（４−８μｇ／ｍｌの２０μｌ）では染色が明確になり（図３ａ）、組換えマウスＴＮＦαとそのモノクローナル抗体との共同インキュベーションでは染色が阻害された（図３ｂ）。麻痺（ＡＰ）動物に観察されたのに比べて染色強度は減少しているけれども、免疫染色は、麻痺動物の頸部脊髄にある病巣内（図３ａ）と後−急性動物のいくつかの病巣上にＴＮＦα活性があることを明らかにした。ＴＮＦαは血管周囲の病巣内の単核細胞内に存在し、陽性細胞がマクロファージ／神経膠様に見える実質／病巣の縁に濃縮されていることが少なくなかった。いくつかの陽性細胞も星状細胞の形態をしているように見えたけれども、免疫ペルオキシダーゼ染色組織の分解能ではＴＮＦ発現細胞の正確な同定は困難であった。図４ａから４ｈまでは、慢性再発性ＥＡＥにおける脊髄病巣内のＣＤ４⁺Ｔリンパ球、星状細胞およびマクロファージの上のＴＮＦαの免疫蛍光検出を示す。この分布は多発性硬化症の病巣に見られるそれに似ている〔ホフマンら（Hoffma n，F．M. et al.)、J．Exp．Med. 170:607(1989)；セルマジら(Selmaj，K．et a l. )、J．Clin．Invest. 87:949(199 1)〕。麻痺したＥＡＥ動物の脊髄病巣中の腫瘍壊死因子（ＴＮＦα）を、ＦＩＴＣ（図４ａ）あるいはＴＲＩＴＣ（図４ｃ、４ｅと４ｇ）結合抗体により検出した。フィコエリスリン結合ＣＤ４特異モノクローナル抗体（図４ｂ）またはＦＩＴＣを結合したファクターVIII関連抗原（図４ｄ）、ＧＦＡＰ（図４ｆ）もしくはＨ −２Ａ特異抗体（図４ｈ）と共に切片をインキュベートした。慢性再発性ＥＡＥの急性相中、Ｂ細胞とＣＤ８⁺Ｔリンパ球は共に細胞の浸潤の少数成分であり、Ｂ細胞は通常二重免疫蛍光染色ではＴＮＦα活性を明確に示さなかった。時々、血管周囲の病巣内のＣＤ４⁺Ｔリンパ球の一部がＴＮＦαを発現した（図４ａと４ｂ）。図４ｂ中の小さな矢印は、ＣＤ４⁺Ｔリンパ球の一部が図４ａで示したＣＤ４⁺Ｔリンパ球の検出可能なＴＮＦα活性を発現しないことを示し、図４ａと４ｂ中の大きな矢印は、ＣＤ４抗原を発現する細胞と時々共に局在するＴＮＦα活性を示す。ＴＮＦ活性は血管にきわめて接近して検出されるけれども、ＴＮＦ染色は抗ファクターVIII関連抗原により染色した内皮細胞と共に局在しないのが通常であった（図４ｃと４ｄ）。図４ｃと４ｄ中の矢印は、ＴＮＦαを共発現しない細胞内の血管周囲病巣内の血管を示す。ＧＦＡＰ⁺星状細胞の一部は、特に血管周囲病巣の近接領域にある星状細胞はＴＮＦαを発現したが（図４ｅと４ｆ）、検出可能なＴＮＦ活性の大部分は、ＭＨＣクラスII抗原を発現しているマクロファージ／小膠細胞と共に局在していた（図４ｇと４ｆ）。図４ｅと４ｆ中の大きな矢印は、ＴＮＦαを発現している星状膠細胞を示し、小さな矢印は病巣周囲の星状細胞化過程の部分に局在するＴＮＦαを発現する星状細胞を示す。このＴＮＦαの星状細胞の染色輪郭は、図４ａ、４ｃと４ｇでも図示されている。図４ｇと４ｈの矢印は、中枢神経系病巣内のＴＮＦαのＥＡＥにおける発現を示す。実施例４：オキサゾロン増殖測定４：１のアセトン：オリーブ油（ＡＯＯ）で溶解した２．５％のオキサゾロン（OX，Sigma，Poole，UK）２５μｌを０日目に動物の片方の耳に塗った〔オニールら（O’Neill，J.K.，et al.、J．Neuroimmunol．35:53（1992）〕。２日目（こ動物（グループ当たり３〜４）にＰＢＳで希釈した０．１ｍｌのＴＮＦまたはＣＤ４特異的モノクローナル抗体を腹腔内（ｉ．ｐ．）に注射した〔５００μｇのＴＮ３．１９．１２、ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体、または約２５０μｇのＹＴＳ１７７．９、腹水中で生産された非欠乏マウスＣＤ４特異的抗体であるラットＩｇＧ２ａモノクローナル抗体〔クウィンら(Qin，S.，et al.)、Eur．J ．Immunol. 20:2737（1990）〕。オキサゾロンの局所適用の３日後、グループ当たり３〜４個体の動物から心房性リンパ節の排出を取り除いて貯め、前述のように誘導された増殖応答を評価した〔オニールら（O' Neill，J．K.，et al.、J．Neuroimmunol．35:53（1992）〕。要約すると、空気に５％ＣＯ₂を含む加湿雰囲気下に３７℃で５×１０⁵細胞／ウエルを２μＣｉの〔メチル−³Ｈ〕チミジン（比活性は２Ｃｉ／ｍｍｏｌ）と共に一晩培養した（外来性オキサゾロンのない状態で）。培養物を集め、β−シンチレーション計測により〔³Ｈ〕チミジンの取り込みを測定した。図７は、２つの別個の実験によるイン・ビボで誘導したＴ細胞増殖応答に対するＴＮＦ免疫治療法の効果の結果を示す。このデータによれば、ＣＤ４特異的抗体の免疫抑制作用とは対照的に、この試験条件下では抗ＴＮＦ抗体はＴ細胞増殖機能を阻害しなかった。この事実はこれらの免疫調節化合物が異なった機作により作用することを示す。結果は５つの反復したウエルの最小値の平均±ＳＤを表す。実施例５：全身的抗ＴＮＦ免疫療法慢性再発性ＥＡＥモデルにおけるＴＮＦの潜在的役割を解明するために、ＴＮ３．１９．１２すなわち抗ＴＮＦモノクローナル抗体を動物に注射した。ＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体〔シュライバー博士（Dr．R．Schreiber）、Wa shington University Medical School,St.Louis,USAより供与〕は、血清半減期が約７日であり〔シェーハンら（Sheehan,K.C.F.,et al.),J．Immunol．１４２：３８８４（１９８９）〕、細胞の転移により誘導される再発性ＥＡＥの発生を阻害するのに、ＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体を３００μｇ１回の注射で済むとの報告がある〔ルドルら（Ruddle N．H.，et al.）、J．Exp．Med. 172:1193(1990)〕。しかし、接種後１２日目に感受性の活性化後、対照として、マウスインターロイキン−２に反応する非中和性のハムスターＩｇＧ１モノクローナル抗体であるＬ２３Ｄ９を注射した場合（８匹中８匹）と比べて〔Celltech，Slough，UKと共同でシュライバー博士（Dr．R．Schreiber）より供与〕、ＴＮ３．１９．１２、モノクローナル抗体を２５０μｇ１回の腹腔内注射だけでは、ＥＡＥの発現から動物（８匹中７匹）を防ぐことに失敗した。しかし、臨床症状の程度は低減していた（図５）。図５はＴＮＦ特異的モノクローナル抗体の１回注射のＥＡＥに対する効果、特に、臨床徴候に対する効果を示す。矢印は、腹腔内注射したマウスの接種後の日を示し、三角はＴＮＦ特異的モノクローナル抗体であるＴＮ３．１９．１２の２５０μｇを腹腔内注射したマウスで得られた結果を示し、逆向きの三角は、マウスインターロイキン−２と反応する対照モノクローナル抗体であるＬ２３Ｄ９の２５０μｇを腹腔内注射したマウスで得られた結果を示す。結果は、接種後の様々な時期に、それぞれのグループ中の動物の平均臨床スコア±ＳＥＭを表す。得られたデータは統計的有意性を得られなかったけれど、にもかかわらずこれらの結果は次のことを示す、ＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体注射のマウスとＬ２３Ｄ９モノクローナル抗体注射マウスを比較して、体重減少の開始の遅れ（１６．１±２．５日対１４．０±０．９日）そして臨床徴候の開始の遅れ（１７．０±２．０日対１５．４±１．２日）そして最大臨床徴候の重篤度の低下（２．１±１．１対３．１±０．９）そして体重減少の程度の低下（２５．５ ±４．６％対２９．０±４．８％）を示しているように見受けられる。さらに、接種後５５日まで観察した時、ＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体処置後臨床疾病を発現した動物がその後７匹中６匹で再発（３８．３±７．５開始日）したけれども、対照動物も同様に３９．６±５．３日目に６匹中５匹で再発した。このように、臨床的発現の開始直前に投与したＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体は部分的にＥＡＥの開始を２、３日だけ阻害することができる。それゆえ、臨床疾病（例えば、体重減少）の予想される発現に先立ちかつその期間中に開始し、３日の間隔で（１４、１７、２０日）腹腔内に多数回抗体（２５０μｇ）投与を動物に行った（表１）。ＰＢＳやＬ２３Ｄ９処置対照に比べ、処置休止後３日までに評価したとき、ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体の多数回投与はＥＡＥの発現を有意に阻害した。体重減少が最初に発現した時に注射した動物のいくつかの例では、ＴＮ３．１９．１２の処置は体重の減少を安定化するように見えた。しかし、表１に示すように、モノクローナル抗体処置の１０日以内に、この期間中臨床上のＥＡＥを体験した動物は１６匹中４匹だけだったけれど、大部分の動物（１６匹中１３匹）はその後臨床徴候を発現した。このことは臨床徴候の開始における有意な遅れを示すものであったが。ＰＢＳを注射した動物とは有意な差異はないけれども、Ｌ２３Ｄ９の処置は、発現した臨床徴候の重篤度を減少させるように見えた（表１）。実施例６：臨床疾病の開始後の全身的抗ＴＮＦ免疫療法臨床徴候が最初に表れ（０日）、動物が弱々しい尾を示した時（グレード１）、ＳＣＨで免疫したＥＡＥ動物にＴＮＦ特異的モノクローナル抗体を注射した。マウスに次のようにｉ．ｐ．注射した。臨床徴候の開始後０、１、２日目に０．１ｍｌのＰＢＳ、またはＰＢＳで希釈したＴＮＦ特異的モノクローナル抗体であるＴＮ３．１９．１２の２５０μｇもしくは１ｍｇ、またはＰＢＳで希釈したハムスター免疫グロブリンモノクローナル抗体であるＬ２３Ｄ９の２５０μｇを注射した。また０日目にＰＢＳで希釈したＣＤ４特異的モノクローナル抗体であるＹＴＳ１７７．９の２５０μｇ１回ｉ．ｐ．を注射した。図６は、ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体の注射後における臨床疾病の発現阻害を示す。矢印はマウスにｉ．ｐ．注射した日を示し、丸印は０．１ｍｌのＰＢＳをｉ．ｐ．注射したマウスでの結果を示し、三角形はＴＮＦ特異的抗体をｉ．ｐ．注射したマウスでの結果を示し、逆向きの三角形は２５０μｇのＬ２３Ｄ９モノクローナル抗体をｉ．ｐ．注射したマウスでの結果を示し、ひし形は０日目に２５０μｇのＹＴＳ１７７．９モノクローナル抗体をｉ．ｐ．注射したマウスでの結果を示す。図６ａは２５０μｇのＴＮＦ特異的抗体のｉ．ｐ．注射後の結果を示す。図６ｂは１ｍｇのＴＮＦ特異的抗体のｉ．ｐ．注射後の結果を示す。結果は徴候の開始後におけるグループ平均臨床スコア±ＳＥＭ（ｎ＝５−７）を表す。ＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体の第１回注射後に臨床徴候が進行した（図６）。それ故、さらに２日間毎日抗体処置を続けた。２５０μｇのＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体の投与開始２日以内に、臨床徴候は軽減し、より厳しい疾病となったＬ２３Ｄ９処置動物で見られた臨床徴候とは有意に異なっていた。しかし、Ｌ２３Ｄ９処置動物はＰＢＳ処置動物よりも速い割合で寛解するように見え、このことは、この非中和ＩＬ−２特異的抗体がある生物学的阻害効果を発揮している可能性を示すものである（図６ａ）。ＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体の投与量を１ｍｇまで増やしても、ＰＢＳ処置動物に比べれば臨床疾病の重篤度は有意に低減しているものの、２５０μｇのＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体の投与で見られた阻害効果を改善することはできなかった（図６ｂ）。対照的に、非欠乏ＣＤ４特異的モノクローナル抗体は迅速に臨床的進行を安定化し逆転させることができた（図６ｂ）。これらの抗体が作用する機作については確立されずに残っているけれども、ＴＮＦ特異的免疫治療法がイン・ビボで誘導された増殖応答を阻害できず、一方抗ＣＤ４処置は顕著に免疫抑制する（図７）という所見は、これらの機作が異なっていることを明らかにするものであった。実施例７：中枢神経系直接のＴＮＦ免疫療法臨床徴候開始、すなわち動物が弱々しい尾を示した時（０日）の後で、前述のように〔オニールら（O'Neill，J．K.，et al.、J．Neuroimmunol. 35:53（1992）〕、ＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体の用量を変化させ：１５０μｇ、１５μｇ、１．５μｇ、そして０μｇを、ＳＣＨで免疫したＥＡＥマウスに右前頭葉の皮質中に脳内（ｉ．ｃ．）注射した（図８）。１．５μｇのＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体は臨床疾病の進行を変化させることに成功しなったけれども、１５０μｇのモノクローナル抗体は臨床疾病を安定化した（図８）。このように図８は、ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体を直接中枢神経系に注射後における臨床ＥＡＥの進行の用量依存性阻害を示す。矢印は動物が弱々しい尾を示していた（０日）臨床徴候の開始を示し、丸印は３０μｌのＰＢＳで脳内注射したマウスでの結果を表し、逆向きの三角形は１５０μｇのＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体を脳内注射したマウスでの結果を表し、三角形は１５μｇのＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体を脳内注射したマウスでの結果を表し、ひし形は１．５μｇのＴＮＦ特異的ＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体を脳内注射したマウスでの結果を表す。結果はグループ当たり５匹の動物のグループ平均スコア±ＳＥＭを表す。追加した実験で、臨床徴候の開始、つまり動物が弱々しい尾を示してた時（０日）の後、ＳＣＨ免疫ＥＡＥマウスに未処置、または３０μｌのＰＢＳｉ．ｃ．と１５０μｇのＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体ｉ．ｐ．注射、または１５０μｇのＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体ｉ．ｃ．と３０μｌのＰＢＳｉ．ｐ．注射を行った（図９）。前述のように〔オニールら（O'Neill，J．K.，et al.、J．Neuroimmunol．35:53（1992）〕、右前頭葉の皮質中に脳内注射を行った。図９は、直接中枢神経系へＴＮＦ特異的モノクローナル抗体を注射した後におけるより顕著な臨床疾病の発現の阻害を表す。矢印は動物が弱々しい尾を示していた時（０日）すなわち臨床徴候の開始での処置を示し、丸印は未処置のマウスでの結果を表し、三角は３０μｌのＰＢＳｉ．ｃ．と１５０μｇのＴＮＦ特異的モノクローナル抗体ｉ．ｐ．を注射したマウスでの結果を表し、逆向きの三角は１５０μｇのＴＮＦ特異的モノクローナル抗体ｉ．ｃ．と３０μｌのＰＢＳｉ．ｐ．を注射したマウスでの結果を表す（図９）。臨床徴候の開始後におけるグループ当たり５−７匹の動物のグループ平均臨床スコアを示す。１５０μｇのモノクローナル抗体ＴＮ３．１９．１２を臨床的に冒された動物に全身的ｉ．ｐ．注射をしたところ、初めに疾病の進行を迅速に予防することに再度失敗した（図９）。しかし、全身投与に比べて、ＴＮＦ免疫療法（１５０μ ｇのモノクローナル抗体）を直接中枢神経系へ投与したときは（図９）、有意な利益（二重星印＝ｐ＜０．００２；１つ星印＝ｐ＜０．０５）が観察された。対照や、ＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体で全身処置された動物と比べ、そこでは疾病開始後常に臨床徴候がより厳しくなるが、中枢神経系への直接処置は、一般的に寛解前に臨床疾病が安定した、しかし、いくつかの例では動物は安定期後に徴候の厳しさにおいて一過性の増悪を体験した（図１０）。もう１つの実験では、臨床徴候の開始後、ＳＣＨで免疫したＥＡＥマウスを次のように処置した：未処置；ＣＤ４特異的モノクローナル抗体であるＹＴＳ．１７７．９の２５０μｇを腹腔内注射；ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体であるＴＮ３．１９．１２の１５０μｇを腹腔内注射そしてＰＢＳの３０μｌを脳内注射；または、３０μｌのＰＢＳの腹腔内注射と１５０μｇのＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体の脳内注射。表２に示すように、この実験の結果は、未処置の動物やＴＮＦ特異的抗体を腹腔内注射した動物に比べて、ＴＮ３．１９．１２モノクローナル抗体の脳内注射が有意に体重減少の進行を阻害したことを示す。さらに追加すると、抗ＴＮＦｉ．ｃ．処置動物の大部分（６匹中５匹）は、続いて３５．６±５．３日目に再発し、対照動物の大部分（６匹中５匹）もまた３８．４±３．４日目に再発したけれども、この結果はこの処置が臨床疾病の重篤度を調節することを示す。このように、ＣＤ４⁺細胞は中枢神経系への溢出の前に末梢循環において標的になり得るけれども、ＴＮＦ−病態発生／活性／分泌が主として中枢神経系で起こり、そして中枢神経系へ適切に投与したＴＮＦ特異的免疫療法は神経免疫学的疾病の進行を阻害することができることを上記のデータは明らかにする。実施例８：中枢神経系に対する腫瘍壊死因子受容体免疫療法動物が弱々しい尾を示していた時（０日）すなわち臨床徴候の開始の後に、ＴＮＦ受容体である可溶性ヒトｐ５５ＳＦ２の１５μｇまたはＴＮＦ特異的モノクローナル抗体であるＴＮ３．１９．１２の種々の用量（０μｇ、１５μｇまたは１５０μｇ）を、ＳＣＨ免疫ＥＡＥマウスにｉ．ｃ．注射した（図１１）。図１１は、ＴＮＦ特異的モノクローナル抗体の注射後そして可溶性ヒトｐ５５ＴＮＦ受容体の注射後における臨床疾病の発現阻害を示す。矢印は動物が弱々しい尾を示していた時（０日）すなわち臨床徴候の開始日における処置を示し、丸印は３０μｌのＰＢＳをｉ．ｃ．注射したマウスでの結果を表し；三角は１５ μｇのＴＮＦ特異的モノクローナル抗体をｉ．ｃ．注射したマウスでの結果を表し；逆三角は１５０μｇのＴＮＦ特異的モノクローナル抗体をｉ．ｃ．注射したマウスでの結果を表し；ひし形は１５μｇの可溶性ヒトｐ５５ＴＮＦ−Ｒをｉ．ｃ．注射したマウスでの結果を表す。結果はグループ当たり５〜６匹の動物の平均臨床スコア±ＳＥＭを表す。１５μｇの可溶性ヒトｐ５５ＳＦ２ＴＮＦ− Ｒをｉ．ｃ．注射したときに見られる結果は、１５０μｇの抗ＴＮＦモノクローナル抗をｉ．ｃ．注射したときに見られる結果と類似している。このことは、この例においては、ＳＦ２ＴＮＦ−Ｒがより大きな能力を有することを示している。実施例９：全身的腫瘍壊死因子受容体免疫療法臨床徴候の開始すなわち動物が弱々しい尾を示していた時（０日）の後、可溶性ヒトｐ５５ｓＴＮＦ−Ｒの用量を：１５０μｇ、１５μｇと０μｇ変化させてＳＣＨ免疫ＥＡＥマウスにｉ．ｐ．注射した（図１２）。図１２は、可溶性ヒトｐ５５ｓＴＮＦ−Ｒの注射後における臨床ＥＡＥ進行の用量依存性阻害を示す。矢印は動物が弱々しい尾を示していた時（０日）である臨床徴候の開始日における処置を示し、丸印は３０μｌのＰＢＳでｉ．ｐ．注射したマウスでの結果を表し；ひし形は１５μｇのＳＦ２ＴＮＦ−Ｒをｉ．ｐ．注射したマウスでの結果を表し；三角は１５０μｇのＳＦ２ＴＮＦ−Ｒをｉ．ｐ．注射したマウスでの結果を表す。結果はグループ当たり５〜６匹の動物の平均臨床スコア±ＳＥＭを表す。結果は、可溶性ヒトｐ５５ＴＮＦ受容体の全身効果が注射当たり１５〜１５０μｇでみられ、従って、ＴＮＦモノクローナル抗体ＴＮ３．１９．１２の全身効果よりも有効であることを明らかにする。均等物当業者であれば、単なる日常的実験手法により、本明細書に具体的に記載された発明の具体的態様に対する多くの均等物を認識し、あるいは確認することができるであろう。そのような均等物は下記クレームの範疇に含まれるものである。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年８月１８日【補正内容】２３．該可溶性腫瘍壊死因子受容体が可溶性ヒトｐ５５−腫瘍壊死因子受容体である、請求項２１記載の組成物。２４．該可溶性ヒトｐ５５−腫瘍壊死因子受容体がその結合性部分である、請求項２３記載の組成物。２５．ヒトの多発性硬化症を治療する方法であって、抗腫瘍壊死因子抗体の治療上有効量を該ヒトの中枢神経系に直接投与することを含む方法。２６．哺乳動物の多発性硬化症を治療する方法であって、腫瘍壊死因子の効果又は腫瘍壊死因子受容体シグナルトランスダクションを阻止することができる化合物の治療上有効量を該哺乳動物に投与することを含む方法。２７．多発性硬化症の治療に使用する医薬品の製造のための、（１）腫瘍壊死因子の効果及び／又は（２）腫瘍壊死因子受容体シグナルトランスダクション、を阻止することができる物質の使用。２８．該物質が請求項９〜請求項１２または請求項２１〜請求項２４いずれか１項に記載の組成物を含むものである、請求項２８記載の使用。２９．該治療が請求項１〜請求項８、請求項１３〜請求項２０又は請求項２５〜請求項２６いずれか１項に記載の方法を含むものである、請求項２７又は請求項２８記載の使用。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ，ＶＮ (72)発明者フェルドマン，マーク英国，ロンドンエヌ６４キューティー，ハイゲイト，チャーチロード２

Claims

【特許請求の範囲】１．哺乳動物の多発性硬化症を治療するための方法であって、多発性硬化症の効果を軽減する抗腫瘍壊死因子抗体の治療上有効量を該哺乳動物に投与することを含む方法。２．該哺乳動物がヒトである、請求項１記載の方法。３．該抗腫瘍壊死因子抗体を薬学上許容される担体中に含有させて投与する、請求項２記載の方法。４．抗腫瘍壊死因子抗体の治療上有効量をヒトの中枢神経系に直接投与する、請求項２記載の方法。５．抗腫瘍壊死因子抗体を膜内(intrathecally)に投与する、請求項４記載の方法。６．抗腫瘍壊死因子抗体がポリクローナル抗体である、請求項２記載の方法。７．抗腫瘍壊死因子抗体がモノクローナル抗体である、請求項２記載の方法。８．抗腫瘍壊死因子抗体が抗体断片である、請求項２記載の方法。９．薬学的に許容される担体、及び多発性硬化症の効果を軽減する抗腫瘍壊死因子抗体の多発性硬化症に対する治療上の有効量を含む医薬組成物。１０．該抗腫瘍壊死因子抗体がポリクローナル抗体である、請求項９記載の組成物。１１．該抗腫瘍壊死因子抗体がモノクローナル抗体である、請求項９記載の組成物。１２．該抗腫瘍壊死因子抗体が抗体断片である、請求項９記載の組成物。１３．哺乳動物の多発性硬化症を治療する方法であって、多発性硬化症の効果を軽減する可溶性腫瘍壊死因子受容体の治療上有効量を該哺乳動物に投与することを含む方法。１４．該哺乳動物がヒトである、請求項１３記載の方法。１５．該可溶性腫瘍壊死因子受容体を薬学上許容される担体中に含有させて投与する、請求項１４記載の方法。１６．可溶性腫瘍壊死因子受容体の治療上有効量を中枢神経系に直接投与する、請求項１４記載の方法。１７．該可溶性腫瘍壊死因子受容体を膜内（intrathecally）に投与する、請求項１４記載の方法。１８．該可溶性腫瘍壊死因子受容体がその結合性断片である、請求項１４記載の方法。１９．該可溶性腫瘍壊死因子受容体が可溶性ヒトｐ５５−腫瘍壊死因子受容体である、請求項１４記載の方法。２０．該可溶性ヒトｐ５５−腫瘍壊死因子受容体がその結合性断片である、請求項１９記載の方法。２１．薬学的に許容される担体、及び多発性硬化症の効果を軽減する可溶性腫瘍壊死因子受容体の多発性硬化症に対する治療上の有効量を含む医薬組成物。２２．該可溶性腫瘍壊死因子受容体がその結合性部分である、請求項２１記載の組成物。２３．該可溶性腫瘍壊死因子受容体が可溶性ヒトｐ５５−腫瘍壊死因子受容体である、請求項２１記載の組成物。２４．該可溶性ヒトｐ５５−腫瘍壊死因子受容体がその結合性部分である、請求項２３記載の組成物。２５．ヒトの多発性硬化症を治療する方法であって、抗腫瘍壊死因子抗体の治療上有効量を該ヒトの中枢神経系に直接投与することを含む方法。２６．哺乳動物の多発性硬化症を治療する方法であって、腫瘍壊死因子生産、その効果及び／又は腫瘍壊死因子受容体シグナルトランスダクションを阻止することができる化合物の治療上有効量を該哺乳動物に投与することを含む方法。２７．治療、例えば多発性硬化症の治療に使用するための、（１）腫瘍壊死因子の生産またはその効果及び／又は（２）腫瘍壊死因子受容体シグナルトランスダクション、を阻止することができる物質。２８．治療、例えば多発性硬化症の治療に使用するための、（１）腫瘍壊死因子の生産またはその効果及び／又は（２）腫瘍壊死因子受容体シグナルトランスダクション、を阻止することができる物質の使用。２９．該物質が請求項９〜請求項１２または請求項２１〜請求項２４いずれか１項に記載の組成物を含むものである、請求項２７記載の物質又は請求項２８記載の使用。３０．該治療が請求項１〜請求項８、請求項１３〜請求項２０又は請求項２５〜請求項２６いずれか１項に記載の方法を含むものである、請求項２７〜２９いずれか１項に記載の物質又は使用。