JPH09512012A

JPH09512012A - グリシンカチオン均等体への有機ハライドの亜鉛介在付加によるＮ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロパルギルグリシンの合成

Info

Publication number: JPH09512012A
Application number: JP7527008A
Authority: JP
Inventors: エイ．アブード，ノーマン; エイ．ノサル，ロジャー
Original assignee: ジー．ディー．サールアンドカンパニー
Priority date: 1994-04-13
Filing date: 1995-04-11
Publication date: 1997-12-02
Also published as: US5665598A; EP0755379A1; CA2187733A1; WO1995028385A1; AU2280895A; US5508466A

Abstract

(57)【要約】効力が高く，経口活性レニン阻害剤の製造に使用される鍵中間体，Ｎ- Ｂｏｃ- Ｌ- プロパルギルグリシンの合成方法が記載されている．この方法は，有機ハライドとグリシンカチオン均等体たとえばＮ- Ｂｏｃ-2- アセトキシグリシンとの，亜鉛末の存在下における反応を包含し，高収率でＢｏｃ- 保護アミノ酸誘導体を与える．有用な代表的有機ハライドはアリル，ベンジルおよびプロパルギルハライドである．Ｎ- Ｂｏｃ- プロパルギルグリシンメチルエステルをα- キモトリプシンで分割すると，Ｎ- Ｂｏｃ- Ｌ- プロパルギルグリシンが高収率で得られる．

Description

【発明の詳細な説明】グリシンカチオン均等体への有機ハライドの亜鉛介在付加によるＮ- Ｂｏｃ- Ｌ- プロパルギルグリシンの合成発明の分野レニン阻害化合物は高血圧のコントロール用として周知である．本発明はとくに，レニン阻害剤の製造のための鍵中間体の合成に有用な方法に関する．発明の背景レニンは腎臓の傍糸球体細胞によって産生され，血流中に分泌される蛋白分解酵素である．血流中において，レニンは血清蛋白質アンギオテンシノーゲン中のペプチド結合を切断し，アンギオテンシンＩとして知られているデカペプチドを産生させる．アンギオテンシン変換酵素として知られる第二の酵素がアンギオテンシンIIに切断する．アンギオテンシンIIは血管収縮および心脈管系圧力の上昇を司る強力な昇圧物質である．アンギオテンシンＩ変換酵素の阻害剤での生体内におけるレニン作用の遮断またはアンギオテンシンII形成の遮断によって高血圧をコントロールすることが試みられてきた．多くのクラスの化合物がレニンまたはアンギオテンシンノーゲンの作用の阻害剤として記載されている．とくに興味深いレニン阻害剤は，低コストの合成方法があり，効力の高い経口活性化合物である．高い効力と治療的に有効な経口バイオアベイラビリティーの医薬として重要な性質を有するレニン阻害化合物のいくつかのファミリーがこれまでに報告されている．疑似ペプチドレニン阻害剤のこれらのファミリーは疑似ペプチド構造の骨格内のグリシル残基に結合するプロパルギル基の存在によって特徴づけられる．疑似ペプチド化合物の他のファミリーは疑似ペプチド骨格内のグリシン残基に結合したアリル残基の存在を特徴とする．プロパルギルグリシルまたはアリルグリシル基を含有するレニン阻害剤が公開された特許明細書に記載されている．たとえば，1986年７月９日に公開されたＥＰ出願第186,977 号にはＮ末端とＣ末端の間の主鎖に結合したアルキニル残基とくにプロパルギルグリシン残基を含有するレニン阻害化合物，たとえばＮ-[4(Ｓ )-[(Ｎ)-[ビス(1- ナフチルメチル)アセチル]-D，L- プロパルギルグリシルアミノ]-3(Ｓ)-ヒドロキシ-6- メチルヘプタノイル]-L-イソロイシノールが記載されている．また1993年５月18日発行の米国特許第5,212,185 号にはピペリジニル- 末端アルキルアミノエチニルアラニンアミノジオール化合物がレニン阻害剤として記載されている．1993年６月29日発行の米国特許第5,223,535 号にはプロパルギルグリシンアミノプロパルギルジオール化合物がレニン阻害剤として記載されている．1993年７月13日発行の米国特許第5,227,401 号にはアルキルアミノ- アルキルアミノ- 末端エチニルアラニンアミノジオール化合物がレニン阻害剤として記載されている．1993年９月21日発行の米国特許第5,246,969 号にはジ- プロパルギル含有アリール- アルキルスルホニル- 末端アミノジオール化合物がレニン阻害剤として記載されている．1993年10月12日発行米国特許第5,252,591 号にはピリジニル／キノリニル- 末端アルキルアミノエチニルアラニンアミノジオール化合物がレニン阻害剤として記載されている．1994年３月３日公開のＰＣＴ出願ＷＯ94/04508号にはイミダゾリル／ベンズイミダゾリル- 末端アルキルアミノエチニルアラニンアミノジオール化合物がレニン阻害剤として記載されている． 1994年３月３日公開のＰＣＴ出願ＷＯ94/04518号には，モルホリノ- チオモルホリノ- 末端アルキルアミノエチニルアラニンアミノジオール化合物がレニン阻害剤として記載されている．1994年３月３日公開のＰＣＴ出願ＷＯ94/04536号には，ピペラジニル- 末端基またはピペラジニル- アルキルアミノ- 末端基を有するエチニルアラニンアミノジオール化合物がレニン阻害剤として記載されている．広範囲のペプチドおよび疑似ペプチドの合成に中間体として使用できる保護アミノ酸の調製のためには，多くの慣用方法が知られている［W.N．Speckamp ら，J.Org.Chem .，58，3259-3268（1993）］．たとえば，グリシンカチオン均等体によるＣ- 求核試薬のアミドアルキル化が保護α- 置換グリシン誘導体の調製に用いられている［P.Munster ら，Synthesis，223-225（1987）］．また，ある種の γ，δ不飽和Ｎ- 保護α- アミノ酸メチルエステルが，ルイス酸触媒の存在下にアリルシランをグリシンカチオン均等体とカップリングさせることによって調製されているが，この方法は，プロピニルトリメチルシランとグリシジルカチオン均等体の反応に用いた場合には使用不能なジールス・アルダー付加物が得られた［H.H.Mooiweerら，Tetrahedron，45，4627,-4636(1989)］．これらの方法の多くは，このような過程である種のアミノ酸保護基が感受性を示すルイス酸の存在を必要とする場合が多いことから，Ｎ- 保護α- 置換アミノ酸の製造には不適当である．前述のプロパルギルグリシンまたはエチニルアラニン含有レニン阻害剤はすべて，高価なまたは調製が難しい中間体による多重工程合成経路を包含することがその特徴である．とくに，これらの多重工程合成経路では，立体特異的なＮ- 保護α- 置換アミノ酸鍵中間体，すなわちＢｏｃ- 保護 L- プロパルギルグリシンの使用を必要とし，これは低コストで市販品を容易に入手できるものではない．この鍵中間体の製造にはいくつかの方法が知られている．たとえば，一つの初期の方法では，アセトアミドマロン酸ジエチルエステルをプロパルギルブロミドでアルキル化したのち，多重工程処理によりキラルなＮ- Ｂｏｃ-L-プロパルギルグリシンを得る［O.Leukart ら，Helv.Chem.Acta，59，2181-2183(1976)］．199 3年５月18日に公告された米国特許第5,212,185 号には，Ｂｏｃ- 保護 L- プロパルギルグリシン中間体を製造するための，炭酸カリウムの存在下における L- プロパルギルグリシンと炭酸ジ-tert-ブチルエステルの反応が記載されている．これらの複雑な多重工程合成およびこの L- プロパルギルグリシン中間体の高いコストのために，プロパルギルグリシン含有レニン阻害剤の上市のための開発は遅れている．したがって，ペプチド合成とくにレニン阻害剤のような医薬製品の製造に使用可能な低コストのＮ- 保護α- 置換アミノ酸の新規な合成経路の要求がある．発明の説明天然および非天然アミノ酸誘導体は，式Ｉ：のＮ- 保護- α- 置換−グリシンカチオン誘導体を式II：Ｒ³Ｘ (II) の有機ハライドと反応させ，式III：［式中，ＰはＮ- 保護基であり；Ｒ¹はヒドリド，アルキル，シクロアルキル，アルコキシアルキル，アシル，アラールキル，アリールおよびアロイルから選択され；Ｒ²はアルキル，シクロアルキル，アルコキシアルキル，アラールキルおよびアリールから選択され；Ｘはクロロ，ブロモおよびヨードから選択され；Ｒ³ はアルキル，シクロアルキル，アルコキシアルキル，アルコキシカルボニルアルキル，アリルおよびベンジルから選択される基であり，さらに上記シクロアルキル，アリルおよびベンジル基はいずれもアルキル，アルコキシ，シアノおよびフェニルから選択される１個または２個以上の残基で置換されていてもよく，Ｒ³ はさらに式：（式中，Ｒ⁴およびＲ⁵はそれぞれ独立にヒドリド，アルキル，アルケニルおよびフェニルから選択され；Ｒ⁶はヒドリド，アルキル，ベンジルおよびフェニルから選択され；ｐは０〜５（０および５を含む）から選択される数であり；ｑは０〜５（０および５を含む）から選択される数である）のプロパルギルおよび置換 - プロパルギル基から選択される］のＮ- 保護- α- 置換- グリシンラセミエステルを得ることによって調製できる．グリシン誘導体IIIを得るためのグリシンカチオン誘導体Ｉと有機ハライドII の反応は，好ましくは，亜鉛金属の存在下に進行する．さらに好ましくは，亜鉛金属はたとえば，亜鉛末のような微粉末化型の形態で用いられる．この反応は通常，極性非プロトン性溶媒中，好ましくはルイス酸の不存在下に行われる．適当な極性非プロトン性溶媒の例には，ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ），ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ），ヘキサメチルリ酸アミド（ＨＭＰＡ）および 1,3- ジメチル-3,4,5,6- テトラヒドロ-2(1Ｈ)-ピリミジノン（ＤＭＰＵ）がある．通常，反応混合物はラセミエステル誘導体IIIの形成時には約10℃〜約25℃の範囲の温度に維持される． α- 炭素分割酵素によるラセミエステルIIIの分割および加水分解で，Ｎ- 保護キラル遊離酸IV：（式中，ＰおよびＲ³は上に定義した通りである）が得られる．本明細書において用いられる「Ｎ- 保護基」または「Ｎ- 保護」の語は，合成操作時の望ましくない反応から窒素原子を保護することを意図する基を意味する．それぞれの語にはアシル基たとえばアセチルおよびt- ブチルアセチル，ピバロイル，アルコキシカルボニル基たとばメチルオキシカルボニルおよびｔ- ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ），アリールオキシカルボニル基たとえばベンジルオキシカルボニル（Cbz）およびフルオレニルメトキシカルボニル（Fmoc），アロイル基たとえばベンゾイル，ならびにそれ自身同様にＮ- 保護されていてもよいＬ- またはＤ- アミノアシル残基が包含される．加水分解反応は通常，約6.5 〜約8.5 の範囲内のｐＨ，好ましくはｐＨ約８で，適当な緩衝液の存在下に行われる．適当な緩衝液の例にはリン酸塩と塩化カリウムの水性緩衝液がある．「α−炭素分割酵素」の表現は，アミノ酸ラセミエステルIIIのα- キラル中心を認識できるヒドロラーゼ酵素を包含する．このようなヒドロラーゼ酵素の例にはα- キモトリプシン，パパイン，スブチリシンおよびトリプシンがある．好ましいヒドロラーゼ酵素はα- キモトリプシンである．この方法の好ましい実施態様においては，Ｐはアシル，ピバロイル，アルコキシカルボニル，アリールオキシカルボニルおよびアロイルから選択されるＮ- 保護基であり；Ｒ¹はヒドリド，アルキル，シクロアルキル，アシルおよびベンゾイル（この場合，アルキルまたはアシルのアルキル部分は１個〜約20個の炭素原子の直鎖状または分岐状残基である）から選択され；Ｒ²は１個〜約20個の炭素原子の直鎖状または分岐状アルキル残基であり；Ｘはクロロ，ブロモおよびヨードから選択され；Ｒ³はアルキル，シクロアルキル，アルコキシカルボニルアルキル，アリル，アルキル- 置換アリル，ベンジル，アルコキシベンジルおよびシアノベンジル（この場合，アルキルまたはＲ³基のアルキル部分は１個〜約20個の炭素原子の直鎖状または分岐状残基である）から選択される基であり，Ｒ³はさらに式：（式中，Ｒ⁶はヒドリドおよびアルキルから選択され；ｑは０〜３（０および３を含む）から選択される数である）のプロパルギルおよび置換プロパルギル基から選択される．この方法のさらに好ましい実施態様においては，Ｐはアセチル，ｔ- ブチルアセチル，ベンゾイル，メチルオキシカルボニル，ｔ- ブチルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルから選ばれる保護基であり；Ｒ¹はヒドリド，アルキル，アシルおよびベンゾイル（この場合，アルキルまたはアシルのアルキル部分はメチル，エチル，ｎ- プロピル，イソプロピル，ｎ- ブチル，イソブチル，sec-ブチル，tert- ブチル，ｎ- ペンチル，イソペンチルおよびネオペンチルから選ばれる）から選択され；Ｒ²はメチル，エチル，ｎ- プロピル，イソプロピル，ｎ- ブチル，イソブチル，sec-ブチル，tert- ブチル，ｎ- ペンチル，イソペンチルおよびネオペンチルから選択され；Ｘはクロロ，ブロモおよびヨードから選択され；Ｒ³はアルコキシカルボニルアルキル，アリル，アルキル置換- アリル，ベンジル，アルコキシベンジルおよびシアノベンジル（この場合，Ｒ³ 基のアルキル部分はメチル，エチルおよびｎ- プロピルから選択される）から選択され，Ｒ³はさらに式：（式中，Ｒ⁶はヒドリドまたはメチルであり；ｑは０〜３（０および３を含む）から選択される数である）から選択される．この方法のなおさらに好ましい実施態様においては，Ｐはアセチル，ｔ- ブチルアセチル，ベンゾイル，メチルオキシカルボニル，ｔ- ブチルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルから選ばれる保護基であり；Ｒ¹はメチル，エチル，ｎ- プロピル，アセチル，プロピオニルおよびベンゾイルから選ばれ，Ｒ²はメチル，エチルおよびｎ- プロピルから選択され；Ｘはクロロ，ブロモおよびヨードから選択され；Ｒ³はエトキシカルボニルメチル，アリル，メチルアリル，ベンジル，ｐ- メトキシベンジルおよびｐ- シアノベンジルから選ばれ；Ｒ³はさらに：（式中，Ｒ⁶はヒドリドまたはメチルであり；ｑは０〜２（０および２を含む）から選択される数である）から選択される．「ヒドリド」の語は１個の水素原子（Ｈ）を示す．このヒドリド基はたとえば酸素原子に結合してヒドロキシル基を形成していてもよく，また他の例として，１個のヒドリド基は炭素原子に結合して＞ＣＨ−基を形成してもよく，また他の例として，２個のヒドリド基は炭素原子に結合して−ＣＨ₂−基を形成してもよい．「アルキル」の語が単独であるいは他の語の中で使用される場合，「アルキル」の語は１個〜約20個の炭素原子，好ましくは１個〜約12個の炭素原子を有する直鎖状または分岐状の基を包含する．さらに好ましくは，アルキル基は１個〜約10個の炭素原子を有する「低級アルキル」基である．最も好ましくは，１個〜約６個の炭素原子を有する低級アルキル基である．「シクロアルキル」の語は３個〜約10個の環炭素原子，好ましくは３個〜約６個の炭素原子を有する環状基，たとえばシクロプロピル，シクロブチル，シクロペンチルおよびシクロヘキシルを包含する．「アルコキシ」の語は１個〜約10個の炭素原子のアルキル部分を有する直鎖状または分岐状のオキシ含有基，たとえばメトキシ基を包含する．「アルコキシ」基はさらに１個または２個以上のハロ原子，たとえばフルオロ，クロロまたはブロモで置換され，ハロアルキル基を提供してもよい．「アシル」の語は単独で，または他の語の中でたとえばアシルオキシのように用いられた場合いずれも，有機酸からヒドロキシルを取り除いた後の残基によって与えられる基を指示し，このような基の例にはアセチルがある．「低級アルカノイル」はアシルの好ましいサブクラスの例である．「アリール」の語は芳香族基，たとえばフェニル，ナフチルおよびビフェニルを包含する．好ましいアリール基は１個，２個または３個のベンゼン環から構成される基である．「アラールキル」の語は，アリール置換アルキル基，たとえばベンジル，ジフェニルメチル，トリフェニルメチル，フェニルエチル，フェニルブチルならびにジフェニルエチルを包含する．「ベンジル」と「フェニルメチル」は同義語である．「アロイル」の語はカルボニル基に結合したアリール基，たとえばベンゾイルを包含する．「アルケニル」の語は２個〜約20個の炭素原子，好ましくは３個〜約10個の炭素原子を有し，少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含有する直鎖状または分岐状の基を包含する．その炭素−炭素二重結合はアルケニル残基内でシスまたはトランスいずれの幾何学的配置にあってもよい．「アルケニル」の語には「アリル」および「メチルアリル」（または「メタリル」）基が包含される．「アルキニル」の語は，２個〜約20個の炭素原子，好ましくは２個〜約10個の炭素原子を有し，少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を有する直鎖状または分岐状の基を包含する．「アルキニル」の語は，「プロパルギル」および，置換可能な任意の炭素原子が１個または２個以上のアルキル，ベンジルまたはフェニルで置換されていてもよい「プロパルギル様」残基を包含する．上に定義されたいずれの基についても，好ましい基は１〜約15個の炭素原子を含有する．アルキル基の特定の例としては，メチル，エチル，ｎ- プロピル，イソプロピル，ｎ- ブチル，sec-ブチル，イソブチル，tert- ブチル，ｎ- ペンチル，イソペンチル，メチルブチル，ジメチルブチル，ジメチルブチルおよびネオペンチルがある．通常，アルケニルおよびアルキニル基は，たとえばアリル基のように１個の不飽和結合を有するか，または複数個の不飽和結合を有する．このような複数個の不飽和結合は，アレン型構造のように隣接して，または共役して，あるいは数個の飽和炭素によって分離して存在することができる．一般的反応式以下の一般的反応式には，本発明の一般的概念の実際的な応用を例示する．反応式Ｉ：反応式に示すように，グリオキザル酸メチルエステルヘミアセタール１をカルバミン酸ｔ- ブチルエステルと縮合させて，グリシン類縁体２を得る．アシル化（無水酢酸，ピリジン，ＴＨＦ）により鍵中間体，2-アセトキシ-2-[((1,1-ジメチルエトキシ)カルボニル)アミノ]酢酸メチルエステル３が得られる．中間体３を亜鉛末と有機ハライドで処理すると，アミノ酸類縁体４ａ〜ｇが得られる．アミノ酸類縁体４ａ〜ｇの合成に際しては，ＤＭＦ中で３の0.5 Ｍ溶液（2.0 ミリモル）と亜鉛末（4.0 ミリモル，325-メッシュ）を冷却しながら，これに，内温が 20〜25℃の間に保持される速度で２当量の有機ハライドを添加した．以下の表Ｉには抽出後処理およびシリカゲルクロマトグラフィー後のアミノ酸４ａ〜ｇの収率を示す．有機ハライドｇとの反応では期待されたｐ- シアノフェニルアラニン誘導体は生成せず，それに代えてもっぱら，以下の構造：を有する置換フェニルグリシン誘導体４ｇが57％の収率で得られた．選択する溶媒がアミノ酸エステル４の形成に重要な役割を果たすと考えられている．たとえば，ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を使用すると，中間体３との金属化反応が迅速に開始され，付加反応は通常１時間以内に完了する．反応をテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で行う場合には，ルイス酸たとえばＭｅ₂ＡｌＣｌ(0.5当量)を存在させないと反応は起こらない．これらの条件下でも，単離される生成物の収率は高く，Ｂｏc基およびエステルのいずれも影響されないままで残存する．したがって，本発明の他の態様は，ある種の溶媒中，たとえばテトラヒドロフランおよびジオキサンのような環状エーテル型溶媒として一般的に特徴づけられる溶媒中でのＮ- 保護α- 置換グリシン誘導体の合成において，ルイス酸の使用を可能にするものである．亜鉛付加反応を促進するためにエーテル溶媒との組合せで使用できるルイス酸の例には，塩化ジメチルアルミニウム，二塩化メチルアルミニウム，三フッ化ホウ素エーテラート付加物（ＢＦ・Ｅｔ₂Ｏ），塩化チタン（IV）およびチタン（IV）ジクロロジイソプロポキシドがある．反応式II： 0.1 Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８）中，25℃におけるラセミエステル４ａのα- キモトリプシンによる分割でＮ- Ｂｏｃ- Ｌ- プロパルギルグリシン５ａが，50％変換に基づき96％の収率（80％e.e.）で得られた．Ｅｔ₂Ｏ／石油エーテルから１回再結晶すると 99 ％e.e.に濃縮された５aが67％の収率で得られた．特定の方法上記の一般的反応式ＩおよびIIに示した一般的方法の更なる実例として，以下の実施例１〜５に，本発明の方法によって製造される中間体およびアミノ酸生成物の特定の製造方法を，反応原料，量，条件および処理とともに示す．例１ 2-[((1,1- ジメチルエトキシ)カルボニル)アミノ]-2-ヒドロキシ酢酸メチルエステルの調製ベンゼン（50 mL）中，グリオキザル酸メチルエステルヘミアセテート（5.66 g，47.2ミリモル）およびカルバミン酸ｔ- ブチルエステル（5.02 g，42.9ミリモル）の溶液を18時間還流した．反応混合物の容量を減圧下に1/5 に濃縮し，ついで速やかに撹拌しながら 100 ml の石油エーテルを添加した．分散した白色固体が形成するまで撹拌を続けた．生成物をろ過し，石油エーテルで洗浄し，乾燥すると，6.64 g（75％）の生成物が得られた（融点96〜97℃）．元素分析：Ｃ₈Ｈ₁₅ＮＯ₅として計算値，Ｃ，46.82；Ｈ，7.37；Ｎ，6.83. 分析値：Ｃ，47.04；Ｈ，7.71；Ｎ，6.90．例２ 2-アセトキシ-2-[((1,1-ジメチルエトキシ)カルボニル)アミノ]酢酸メチルエステルの調製ＴＨＦ（50 mL）中，例１における生成物（10.0 g，48.8ミリモル），ピリジン（7.71 g，97.6ミリモル）およびＤＭＡＰ（300 mg，2.5 ミリモル）の溶液に無水酢酸（5.47 g，53.6ミリモル）を室温で徐々に添加した．周囲温度で３時間撹拌したのち，反応混合物をＥｔｏＡｃで希釈し，１ＮＮａＨＳＯ₄および飽和ＮａＨＣＯ₃で順次洗浄した．有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ₄），ろ過し，減圧下に濃縮すると，11.8 g（98％）の生成物が無色油状物として得られた．元素分析：Ｃ₁₀Ｈ₁₇ＮＯ₆・1/4 Ｈ₂Ｏとして計算値，Ｃ，47.71；Ｈ，7.01；Ｎ，5.56．分析値：Ｃ，47.68；Ｈ，6.75；Ｎ，5.55．例３ 2-[((1,1-ジメチルエトキシ)カルボニル)アミノ]-4-ペンチン酸メチルエステルの調製ＤＭＦ（30 mL）中，例２の生成物（4.00 g，16.2ミリモル）ならびに亜鉛末（2.63 g，40.5ミリモル）の懸濁液を氷冷し，これに窒素下，プロパルギルブロミド（トルエン中80％w／w）（6.02 g，40.5ミリモル）をシリンジから徐々に添加した．ブロミドは内温が20〜25℃に維持される速度で添加し，ついでその温度でさらに１時間撹拌した．反応混合液を 100 mL のＥｔｏＡｃで希釈し，0.5ＮＨＣｌ（200 mL），飽和ＮａＨＣＯ₃（200 mL）および飽和ＮａＣｌで順次洗浄し，ついで乾燥した（ＭｇＳＯ₄）．ろ過し，減圧下に濃縮したのち，残留物をシリカゲル床（30％ＥｔｏＡｃ／ヘキサン）を通してろ過して精製し，減圧下に濃縮すると，無色油状物として3.59 g（97％）の生成物が得られた．元素分析：Ｃ₁₁Ｈ₁₇ＮＯ₄・1/3 Ｈ₂Ｏとして，計算値，Ｃ，56.64；Ｈ，7.63 ；Ｎ，6.01．分析値：Ｃ，56.96；Ｈ，7.60；Ｈ，6.03．例４ 2-[((1,1-ジメチルエトキシ)カルボニル)アミノ]-4-ペンテン酸メチルエステルの調製ＤＭＦ（４mL）中，例２の生成物（0.525 mg，2.12ミリモル）ならびに亜鉛末（278 mg，4.25ミリモル）の懸濁液を氷冷し，これに窒素下，純粋なアリルブロミド（514 mg，4.25ミリモル）をシリンジを介して徐々に添加した．ブロミドは内温が20〜25℃に維持される速度で添加し，ついでその温度でさらに１時間撹拌した．例３の記載と同様に抽出後処理およびシリカゲルクロマトグラフィーに付すと，生成物 486 mg（100 ％）が無色の油状物として得られた．例５ 2(Ｓ)-[((1,1-ジメチルエトキシ)カルボニル)アミノ]-4-ペンチン酸エステルの調製 60 mL の 0.1Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８）中例３の生成物（3.53 g，15.5ミリモル）の懸濁液にα- キモトリプシン（25 mg）を添加した．反応混合物を25℃で2 2時間撹拌し，この間１ＮＮａＯＨを周期的に添加してｐＨを7.5〜8 の範囲内で一定に保持した．未反応エステルをＥｔＯＡｃで抽出して回収したのち，水性分画を２ＮＨＣｌで酸性（ｐＨ３）とし，ＥｔＯＡｃで抽出した．酸性分画の最初の抽出時には，沈澱した酵素が２層の分離を困難にした．したがって，２相混合物はセライト床を通して濾過した．ついで層を分離し，水相をＥｔＯＡｃで再び抽出した．有機分画を合わせて，乾燥し（ＭｇＳＯ₄），ろ過し，減圧下に濃縮すると，1.53 g（50％変換に基づき92％）の生成物が，粘稠な油状物として得られた（88％ e.e．）．生成物をＥｔＯ／石油エーテルから結晶化すると，1. 00 g（61％）の生成物（融点84〜85℃，99％ e.e．）が得られた．エナンチオマー純度を０℃での Crownpak CR（＋）カラム（15 cm×4.6 mm）と１％ＨＣｌＯ₄ 水溶液による 0.5 mL/分でのアイソクラクチック溶出を用いるキラルＨＰＬＣ分析によって測定した．検出装置は 205 nmにセットした．元素分析：Ｃ₁₀Ｈ₁₅ＮＯ₄として計算値，Ｃ，56.32；Ｈ，7.09；Ｎ，6.57．分析値：Ｃ，56.27；Ｈ，7.25；Ｈ，6.51. ［α］_D ²⁵＝＋23.5°（ＭｅＯＨ，ｃ=9.1 mg/mL）．本発明の方法は，広範囲の多様な有機ハライドを用いてＮ- 保護アミノ酸エステルを製造するための，経済的で高収率の合成経路を提供する．とくに，プロパルギル型Ｎ- 保護アミノ酸ラセミエステルを加水分解酵素分割に付して，たとえば，効力の高い経口投与で生物学的利用が可能なレニン阻害化合物の製造に用いられる中間体，Ｎ- Ｂｏｃ-2- プロパルギルグリシンを提供することができる．このＮ- Ｂｏｃ-2- プロパルギルグリシン中間体から製造できるレニン阻害剤化合物の特定の例は，以下の表IIに，それらのレニン阻害化合物が示されている公開された特許文献とともに示す．以上，本発明を特定の実施態様に関して説明したが，これらの実施態様の詳細は本発明の限定と解釈されるべきではない．

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ノサル，ロジャーエイ. アメリカ合衆国 60089 イリノイ州バッファローグロウブ，アスペンドライブ 667

Claims

【特許請求の範囲】１．天然および非天然アミノ酸誘導体の製造方法において，式Ｉ：のＮ- 保護- α- 置換- グリシンカチオン誘導体を式II：Ｒ³Ｘ (II) の有機ハライドと反応させ，式III：［式中，ＰはＮ- 保護基であり；Ｒ¹はヒドリド，アルキル，シクロアルキル，アルコキシアルキル，アシル，アラールキル，アリールおよびアロイルから選択され；Ｒ²はアルキル，シクロアルキル，アルコキシアルキル，アラールキルおよびアリールから選択され；Ｘはクロロ，ブロモおよびヨードから選択され；Ｒ³ はアルキル，シクロアルキル，アルコキシアルキル，アルコキシカルボニルアルキル，アリルおよびベンジルから選択される基であり，さらに上記シクロアルキル，アリルおよびベンジル基はいずれもアルキル，アルコキシ，シアノおよびフェニルから選択される１個または２個以上の残基で置換されていてもよく；Ｒ³ はさらに式：（式中，Ｒ⁴およびＲ⁵はそれぞれ独立にヒドリド，アルキル，アルケニルおよびフェニルから選択され；Ｒ⁶はヒドリド，アルキル，ベンジルおよびフェニルから選択され；ｐは０〜５（０および５を含む）から選択される数であり；ｑは０〜５（０および５を含む）から選択される数である）のプロパルギルおよび置換- プロパルギル基から選択される］のＮ- 保護- α- 置換- グリシンラセミエステルを得ることからなる方法．２．さらに式Ｉのグリシンカチオン誘導体を亜鉛金属の存在下に式IIの有機ハライドと反応させることを特徴とする「請求項１」の方法．３．亜鉛金属は微粉末化型である「請求項２」の方法．４．さらに式Ｉのグリシンカチオン誘導体を，極性非プロトン性溶媒中，ルイス酸の不存在下に，式IIの有機ハライドと反応させることを特徴とする「請求項１」の方法．５．さらにラセミエステルIIIのα- 炭素分割酵素による分割および加水分解工程からなり，式IV：［式中，ＰはＮ- 保護基であり，Ｒ²はアルキル，シクロアルキル，アルコキシアルキルおよびアリールから選択され；Ｒ³はアルキル，シクロアルキル，アルコキシアルキル，アルコキシカルボニルアルキル，アリルおよびベンジルから選択される基であり，さらにこの場合，上記シクロアルキル，アリルおよびベンジル基はいずれもアルキル，アルコキシ，シアノおよびフェニルから選択される１個または２個以上の残基で置換されていてもよく，Ｒ³はさらに式：（式中，Ｒ⁴およびＲ⁵はそれぞれ独立にヒドリド，アルキル，アルケニルおよびフェニルから選択され；Ｒ⁶はヒドリド，アルキル，ベンジルおよびフェニルから選択され；ｐは０〜５（０および５を含む）から選択される数であり；ｑは０〜５（０および５を含む）から選択される数である）のプロパルギルおよび置換 - プロパルギル基から選ばれる］のＮ- 保護キラル遊離酸を得ることからなる「請求項１」の方法．６．分割および加水分解工程は約6.5 〜約8.5 の範囲内のｐＨを有する水溶液中で行う「請求項５」の方法．７．α- 炭素分割酵素はα- キモトリプシン，パパイン，スブチリシンおよびトリプシンから選択される「請求項５」の方法．８．Ｐはアシル，ピバロイル，アルコキシカルボニル，アリールオキシカルボニルおよびアロイルから選ばれるＮ- 保護基であり；Ｒ¹はヒドリド，アルキル，シクロアルキル，アシルおよびベンゾイル（この場合，アルキルまたはアシルのアルキル部分は１個〜約20個の炭素原子の直鎖状または分岐状残基である）から選択され；Ｒ²は１個〜約20個の炭素原子の直鎖状または分岐状アルキル残基であり；Ｘはクロロ，ブロモおよびヨードから選択され；Ｒ³はアルキル，シクロアルキル，アルコキシカルボニルアルキル，アリル，アルキル- 置換アリル，ベンジル，アルコキシベンジルおよびシアノベンジル（この場合，アルキルまたはＲ³基のアルキル部分は１個〜約20個の炭素原子の直鎖状または分岐状残基である）から選択される基であり，Ｒ³はさらに式：（式中，Ｒ⁶はヒドリドおよびアルキルから選択され；ｑは０〜３（０および３を含む）から選択される数である）のプロパルギルおよび置換プロパルギル基から選択される「請求項５」の方法．９．Ｐはアセチル，ｔ- ブチルアセチル，ベンゾイル，メチルオキシカルボニル，ｔ- ブチルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルから選択されるＮ- 保護基であり；Ｒ¹はヒドリド，アルキル，アシルおよびベンゾイル（この場合，アルキルまたはアシルのアルキル部分はメチル，エチル，ｎ- プロピル，イソプロピル，ｎ- ブチル，イソブチル，sec-ブチル，tert- ブチル，ｎ- ペンチル，イソペンチルおよびネオペンチルから選択される）から選択され；Ｒ²はメチル，エチル，ｎ- プロピル，イソプロピル，ｎ- ブチル，イソブチル，sec- ブチル，tert- ブチル，ｎ- ペンチル，イソペンチルおよびネオペンチルから選択され；Ｘはクロロ，ブロモおよびヨードから選択され；Ｒ³はアルコキシカルボニルアルキル，アリル，アルキル置換- アリル，ベンジル，アルコキシベンジルおよびシアノベンジル（この場合，Ｒ³基のアルキル部分はメチル，エチルおよびｎ- プロピルから選択される）から選択され，Ｒ³はさらに式：（式中，Ｒ⁶はヒドリドまたはメチルであり；ｑは０〜３（０および３を含む）から選択される数である）から選択される「請求項８」の方法． 10．Ｐはアセチル，ｔ- ブチルアセチル，ベンゾイル，メチルオキシカルボニル，ｔ- ブチルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルから選択されるＮ- 保護基であり；Ｒ¹はメチル，エチル，ｎ- プロピル，アセチル，プロピオニルおよびベンゾイルから選択され；Ｒ²はメチル，エチルおよびｎ- プロピルから選択され；Ｘはクロロ，ブロモおよびヨードから選択され；Ｒ³はエトキシカルボニルメチル，アリル，メチルアリル，ベンジル，ｐ- メトキシベンジルおよびｐ- シアノベンジルから選択され，Ｒ³はさらに式：（式中，Ｒ⁶はヒドリドまたはメチルであり；ｑは０〜２（０および２を含む）から選択される数である）から選択される「請求項９」の方法． 11．Ｎ- 保護キラル遊離酸は，Ｎ- Ｂｏｃ- Ｌ- プロパルギルグリシンである「請求項10」の方法． 12．式IV：のＮ- 保護キラル遊離酸を製造する方法において，式III：［式中，ＰはＮ- 保護基であり，Ｒ²アルキル，シクロアルキルおよびアルコキシアルキルから選択され；Ｒ³はアルキル，シクロアルキル，アルコキシアルキル，ハロアルキル，ヒドロキシアルキル，スルホニルアルキル，アルコキシカルボニルアルキルおよびベンジル（この場合，シクロアルキルおよびベンジルはさらにアルキル，アルコキシ，シアノおよびフェニルから選ばれる１個または２個以上の残基で置換されていてもよい）から選ばれる基であり，Ｒ³はさらに式：（式中，Ｒ⁴およびＲ⁵はそれぞれ独立にヒドリド，アルキル，アルケニルおよびフェニルから選択され；Ｒ⁶はヒドリド，アルキル，ベンジルおよびフェニルから選択され；ｐは０〜５（０および５を含む）から選択される数であり；ｑは０〜５（０および５を含む）から選択される数である）のプロパルギルおよび置換 - プロパルギル基から選ばれる］のＮ- 保護α- 置換グリシンラセミエステルを処理する工程からなる方法． 13．処理工程は約6.5 〜約8.5 の範囲内のｐＨで行う「請求項12」の方法． 14．α- 炭素分割酵素は式IIIのアミノ酸ラセミエステルのα- キラル中心を認識できるヒドロラーゼ酵素である「請求項12」の方法． 15．ヒドロラーゼ酵素はα- キモトリプシン，パパイン，スブチリシンおよびトリプシンから選択される「請求項14」の方法． 16．ヒドロラーゼ酵素はα- キモトリプシンである「請求項15」の方法． 17．Ｐはアシル，ピバロイル，アルコキシカルボニル，アリールオキシカルボニルおよびアロイルから選択されるＮ- 保護基であり；Ｒ²は１個〜約20個の炭素原子の直鎖状または分岐状アルキル残基であり；Ｒ³はアルキル，シクロアルキル，アルコキシカルボニルアルキル，ベンジル，アルコキシベンジルおよびシアノベンジル（この場合，アルキルまたはＲ³基のアルキル部分は１個〜約20個の炭素原子の直鎖状または分岐状残基である）から選択される基であり，Ｒ³はさらに式：（式中，Ｒ⁶はヒドリドおよびアルキルから選択され；ｑは０〜３（０および３を含む）から選択される数である）のプロパルギルおよび置換プロパルギル基から選択される「請求項12」の方法． 18．Ｐはアセチル，ｔ- ブチルアセチル，ベンゾイル，メチルオキシカルボニル，ｔ- ブチルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルから選択されるＮ- 保護基であり；Ｒ²はメチル，エチルおよびｎ- プロピル，イソプロピル，ｎ- ブチル，イソブチル，sec-ブチル，tert- ブチル，ｎ- ペンチル，イソペンチルおよびネオペンチルから選択され；Ｒ³はアルコキシカルボニルアルキル，ベンジル，アルコキシベンジルおよびシアノベンジル（この場合，Ｒ³基のアルキル部分はメチル，エチルおよびｎ- プロピルから選択される）から選択され，Ｒ³はさらに式：（式中，Ｒ⁶はヒドリドまたはメチルであり；ｑは０〜３（０および３を含む）から選択される数である）から選択される「請求項17」の方法． 19．Ｐはアセチル，ｔ- ブチルアセチル，ベンゾイル，メチルオキシカルボニル，ｔ- ブチルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルから選択されるＮ- 保護基であり；Ｒ²はメチル，エチルおよびｎ- プロピルから選択され；Ｒ³はエトキシカルボニルメチル，ベンジル，ｐ- メトキシベンジルおよびｐ- シアノベンジルから選択され，Ｒ³はさらに式：（式中，Ｒ⁶はヒドリドまたはメチルであり；ｑは０〜２（０および２を含む）から選択される数である）から選択される「請求項18」の方法． 20．Ｐはｔ- ブチルオキシカルボニルであり；Ｒ²はメチルもしくはエチルであり，Ｒ³はプロパルギルおよびアルキル置換プロパルギルから選択される「請求項19」の方法． 21．Ｎ- 保護キラル遊離酸は，Ｎ- Ｂｏｃ- Ｌ- プロパルギルグリシンである「請求項12」の方法．