JPH0956286A - 組織培養を用いたGmelina属樹木の大量増殖法 - Google Patents

組織培養を用いたGmelina属樹木の大量増殖法

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JPH0956286A
JPH0956286A JP7210486A JP21048695A JPH0956286A JP H0956286 A JPH0956286 A JP H0956286A JP 7210486 A JP7210486 A JP 7210486A JP 21048695 A JP21048695 A JP 21048695A JP H0956286 A JPH0956286 A JP H0956286A
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中村  健太郎
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(57)【要約】 【課題】 組織培養を用いたGmelina属樹木の大
量増殖法 【解決手段】 Gmelina属樹木の茎頂を、ベンジ
ルアミノプリン(BAP)、あるいはBAPとインドー
ル酪酸(IBA)を添加したB5培地又はその改変培地
で培養し、定芽及び/又は不定芽を多数有する多芽体を
誘導、増殖し、次いで得られた多芽体から大量のシュー
トを生産した後、それらのシュートを植物成長調節物質
を添加しない前記培地、あるいはBAPとIBAを添加
した前記培地に移植することにより植物体を効率良く再
生することができ、Gmelina属樹木の大量増殖法
が可能である。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は、Gmelina属
樹木、特にGmelina属に属するGmelina
arborea ROXB.の組織培養による大量増殖法に
関する。
【0002】
【従来の技術】Gmelina属樹木は、世界の熱帯地
域(インド、東南アジア)における主要造林木であり、
その材は建築材、彫刻材、パルプ、ファイバーボード、
合板等に、樹皮、根、果実は薬用として用いられる早生
樹である。近年、組織培養技術の発達により、遺伝子資
源の保存を目的として、組織培養を用いた優良品種の保
存が多くの樹木で行われてきており、Gmelina属
樹木においても優良品種の保存等に組織培養技術の利用
が期待されている。また、一般に有用老齢木の増殖を試
みる際には、挿し木等の既存法を用いることができず、
精鋭樹の増殖は困難とされている。近年、幾つかの研究
グループによって、これらの問題点の解決を目的とし
て、Gmelina属樹木における組織培養技術の研究
がなされているが、成功例は今日まで2例のみである
(J.C.Yang,G.Y.Tsay,J.D.Ch
ung,Z.Z.Chen(1992) Microp
ropagationof Gmelina arbo
rea R.,Proceedings ofthe
SABRAO international symp
osium29:213−218,及びCrizald
o,E.N.(1980)Tissue cultur
e of fast−growing trees,S
ylvatrop 5(2);123−137)。しか
しながら、これらの方法は、無菌条件下で発芽させた幼
植物体を材料に用いており、フェノール性物質を多く含
む成木から採取した材料からの幼植物体の再生及び大量
増殖を達成することはできない。したがって、成木から
の効率的な培養方法の開発が望まれている。
【0003】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、Gm
elina属樹木、特にGmelina arbore
a ROXB.のクローン苗の大量生産を可能にする大量増
殖法を提供することにある。
【0004】
【課題を解決するための手段】本発明者は、Gmeli
na属樹木の苗木、あるいは成木を用いて、大量生産を
可能にする大量増殖法を開発することを目的として鋭意
研究した結果、Gmelina属樹木の茎頂を培養し
て、多数の定芽及び/又は不定芽を有する多芽体を誘導
し、更にこの多芽体を効率よく増殖させることに成功し
た。特に、多芽体を誘導させるために用いる培地と多芽
体を増殖させるために用いる培地に、ベンジルアミノプ
リン(BAP)、あるいはインドール酢酸(IBA)と
BAPを添加することにより、効率よく多芽体を誘導
し、かつ増殖することができ、かつ増殖させた多芽体か
ら効率よくシュート伸長を促すことができることを見出
した。増殖したシュートを植物成長調節物質を添加しな
い培地、あるいはBAP、あるいはBAPとIBAを添
加した培地で培養することにより、更なるシュート伸長
及び発根が可能になることを見出し本発明を完成した。
即ち、本発明は、Gmelina属樹木の茎頂を培養し
て、定芽及び/又は不定芽を多数有する多芽体を誘導、
増殖させ更に多芽体から大量のシュートを生産し、次い
でシュートを発根培地に移植して発根させ、植物体を再
生する、ことを特徴とするGmelina属樹木の大量
増殖法である。
【0005】本発明によれば、Gmelina属樹木の
苗木及び成木の茎頂から多芽体を誘導、増殖させ、次い
で得られた多芽体からシュートを伸長させ、これを発根
させることにより、大量の幼植物体を効率よく生産する
ことができる。本発明で対象とするGmelina属と
しては、より具体的には、Gmelina arbor
ea ROXB.を例示することができる。本発明で用いる
培養材料としては、Gmelina属樹木の苗木及び成
木から採取した茎頂が用いられる。採取した茎頂は、通
常の方法に従って、エタノール及び次亜塩素酸ナトリウ
ム、あるいは過酸化水素水、あるいは塩化水銀(昇汞
水)で表面殺菌を行い、滅菌水で洗浄後、培地中で培養
する。培養に用いる基本培地としては、無機成分及び炭
素源を必須成分とし、その他植物成長調節物質、ビタミ
ン、アミノ酸を含有する培地が用いられる。無機成分と
しては、窒素、燐、カリウム、ナトリウム、カルシウ
ム、硫黄、鉄、マンガン、亜鉛、沃素、硼素、モリブデ
ン、塩素、コバルト等の元素を含む無機化合物が用いら
れる。炭素源としては、炭水化物、例えばしょ糖又はブ
ドウ糖が用いられる。植物成長調節物質としては、オー
キシン、サイトカイニンを用いられる。オーキシンとし
ては、例えば3−インドール酪酸(IBA)、ナフタレ
ン酢酸(NAA)等が挙げられ、サイトカイニンとして
は、例えばベンジルアミノプリン(BAP)、カイネチ
ン、ゼアチン、4−フェニルウレア(4PU)等が挙げ
られる。ビタミンとしては、例えばチアミン、ピリドキ
シン、ニコチン酸等が挙げられる。アミノ酸としては、
例えばグリシン、グルタミン酸、リジン等が挙げられ
る。
【0006】実際に培養する際に用いられる培地として
は、植物組織培養に用いられる培地、例えばMS培地
(Murashige,T.(1962),Physi
ol.Plant.15:473−497)、B5培地
(Gamborg,O.L.(1968),Exp.C
ell.Res.50:151−158)、WP培地
(Lloyd,G.(1981),Int.Plant
Prop.Soc.30:421−427)、BTM
培地(Chalupa,V.(1984)Biolog
ia Plnt.(praha)26:374−37
7)等が挙げられる。特に、B5培地及びその改変培地
が好ましい。定芽、不定芽の誘導及びそれらの成長、多
芽体からのシュート伸長を促進するため、BAPを0.
01〜0.3mg/l、あるいはBAP0.01〜0.
3mg/lとIBAを0.002mg/l程度含有する
B5培地又はその改変培地を用いることが好ましい。
【0007】次いで、伸長したシュートを分割、あるい
は分割せずに発根培地に移植することにより、シュート
を更に伸長させ、かつ発根させることができる。発根培
地としては、前記の無機成分及び炭素源、ビタミン、ア
ミノ酸等を含有し、植物成長調節物質無添加、あるいは
BAP0.01〜0.3mg/lとIBA0.002m
g/l程度を含有する培地が好ましい。
【0008】
【発明の実施の形態】本発明の組織培養によるGmel
ina属樹木の大量増殖法の好ましい実施の形態の一つ
としては、先ずGmelina arborea R
OXB の成木から茎頂を採取し、IBAを0.002mg
/l及びBAPを0.01〜0.3mg/l添加した改
変B5培地で培養して、定芽及び/又は不定芽を多数有
する多芽体を誘導、増殖させ更に多芽体から大量のシュ
ートを生産させる。次いで得られたシュートを、BAP
0.01〜0.3mg/lとIBA0.02mg/l添
加した改変B5培地である発根培地に移植して発根さ
せ、植物体を効率良く再生することができる。
【0009】
【発明の効果】本発明によれば、Gmelina属樹木
の苗木、あるいは成木から採取した材料から、Gmel
ina属樹木の無菌幼植物体、苗及び挿し穂を、試験管
内で短期間に大量に生産することができ、Gmelin
a属樹木の苗の大量生産の可能性が高くなる。
【0010】
【実施例】以下、本発明を実施例により更に詳細に説明
する。Gmelina arborea ROXB.苗木
(高さ0.2〜0.5m)及び成木(6.0〜10.0
m)から材料を採取した。 (1)材料の殺菌 Gmelina arborea ROXB.の苗木及び成
木から頂芽を採取し、70%エタノール中で30秒、2
%次亜塩素酸ナトリウム中で6分間表面殺菌を行い、滅
菌水で数回洗浄後、滅菌濾紙上で風乾した。風乾後、光
学顕微鏡下で頂芽の外皮を取り除き、茎頂を摘出し、寒
天培地で培養した。その結果、苗木、成木から採取した
材料の生存率は、苗木から採取した材料の方が若干良好
であったが、本発明の方法によれは、苗木、あるいは成
木から採取した材料どちらも用いることができた。表1
に、苗木及び成木から採取した茎頂の生存率を比較した
データを示す。
【0011】
【表1】 採取材料の生存率. ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 材料 生存率(%) 枯死率(%) 雑菌汚染率(%) ────────────────────────────────── 茎頂(成木由来) 70 10 20 茎頂(苗木由来) 86 10 4 ──────────────────────────────────
【0012】(2)多芽体の誘導、増殖及びシュート伸
長 培地としては、改変B5培地(全培地成分を半分量にし
たB5培地)にしょ糖20g/l、ゲルライト3.4g
/l及び植物成長調節物質としてIBAを0.002m
g/l、BAPを0.01〜0.3mg/l添加し、p
Hを5.7に調整後、殺菌して用いた。培養温度は26
±2℃とし、1日当たり16時間蛍光灯(3,000〜
5,000lux)照明とした。培養2〜3ケ月後に多
芽体が誘導された。特に、IBA0.002mg/lと
BAP0.03mg/lを添加することが効果的であ
り、材料による大きな差は、見られなかった(図1,
3)。 (3)発根 (2)で得られた大量のシュートを一本ずつに切り分
け、発根培地に移植した。培地には、植物成長調節物質
を添加しない改変B5培地、あるいはBAP0.01〜
0.3mg/lとIBAを0.002mg/l添加した
改変B5培地(前記(2)と同じ)をpH5.7に調整
し、殺菌して用いた。培養温度は、26±2℃とし、1
日当たり16時間蛍光灯(3,000〜5,000lu
x)照明とした。その結果、培養1〜2カ月後には、3
3.3%の個体で発根が観察され、同時に3〜10cm
のシュートを伸長、2〜8枚の新葉を展開させることが
でき、特に、植物成長調節物質を添加しない培地、ある
いはBAP0.01〜0.03mg/lmg/lとIB
A0.002mg/lを添加することが効果的であり、
材料による大きな差は見られなかった(図2,4)。
【図面の簡単な説明】
【図1】苗木由来の材料を用いた場合の多芽体の誘導に
おけるIBAとBAP濃度の影響を示すグラフである。
【図2】苗木由来の材料を用いた場合の発根に対するI
BAとBAPの影響を示すグラフである。
【図3】成木由来の材料を用いた場合の多芽体の誘導に
おけるIBAとBAP濃度の影響を示すグラフである。
【図4】成木由来の材料を用いた場合の発根に対するI
BAとBAPの影響を示すグラフである。

Claims (5)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 Gmelina属樹木の茎頂を培養し
    て、定芽及び/又は不定芽を多数有する多芽体を誘導、
    増殖させ更に多芽体から大量のシュートを生産し、 次いでシュートを発根培地に移植して発根させ、植物体
    を再生する、 ことを特徴とするGmelina属樹木の大量増殖法。
  2. 【請求項2】 Gmelina属樹木の茎頂を培養し
    て、定芽及び/又は不定芽を多数有する多芽体を誘導、
    増殖させ更に多芽体から大量のシュートを生産するため
    の培地として、ベンジルアミノプリン(BAP)を0.
    01〜0.3mg/l、あるいはBAP0.01〜0.
    3mg/lとともにインドール酪酸(IBA)を0.0
    02mg/l含有するB5培地、又はその改変培地を用
    いる請求項1記載の大量増殖法。
  3. 【請求項3】 発根培地として、植物成長調節物質無添
    加、あるいはBAP0.01〜0.3mg/lとともに
    IBAを0.002mg/lを含有するB5培地、又は
    その改変培地を用いる請求項1または2記載の大量増殖
    法。
  4. 【請求項4】 Gmelina属樹木の苗木あるいは成
    木からの茎頂を用いる請求項1から3のいずれかに記載
    の大量増殖法。
  5. 【請求項5】 Gmelina属樹木がGmelina
    arboreaROXB.である請求項1から4のいずれ
    かに記載の大量増殖法。
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WO1999018773A1 (en) * 1997-10-14 1999-04-22 Sumitomo Forestry Co., Ltd. Method for mass proliferation of mahogany trees by tissue culture
JP2001309729A (ja) * 2000-02-22 2001-11-06 Sumitomo Forestry Co Ltd 組織培養によるサクラ属の大量増殖法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999018773A1 (en) * 1997-10-14 1999-04-22 Sumitomo Forestry Co., Ltd. Method for mass proliferation of mahogany trees by tissue culture
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