JPH0967376A - 癌遺伝子機能抑制剤 - Google Patents
癌遺伝子機能抑制剤Info
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- JPH0967376A JPH0967376A JP7228355A JP22835595A JPH0967376A JP H0967376 A JPH0967376 A JP H0967376A JP 7228355 A JP7228355 A JP 7228355A JP 22835595 A JP22835595 A JP 22835595A JP H0967376 A JPH0967376 A JP H0967376A
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- JP
- Japan
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- ras
- aglaiastatin
- morphology
- cancer
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 新規な抗癌剤を提供すること。
【解決手段】 熱帯植物アグライア・オドラータ抽出物
である化学式（１）であらわされる化合物を有効成分と
して含有する癌遺伝子機能抑制剤。 【化１】
である化学式（１）であらわされる化合物を有効成分と
して含有する癌遺伝子機能抑制剤。 【化１】
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、癌遺伝子機能抑制活性
を有する本発明化合物を有効成分として含有する抗癌剤
に関する。
を有する本発明化合物を有効成分として含有する抗癌剤
に関する。
【０００２】
【従来の技術】細胞の発癌やプロモーションの過程で、
癌遺伝子が重要な役割を果たしていることが知られてい
る。癌遺伝子は、正常細胞の染色体ＤＮＡ上にあるプロ
ト癌遺伝子に点突然変異、転座、増幅等の異常が起こる
ことによって発生し、これまでに７０種あまりが見出さ
れている。その中でもｒａｓ癌遺伝子は大腸癌、乳癌、
白血病等から見出され、ヒト癌組織全体の２０％位に存
在するといわれる代表的なものである。そこで、このｒ
ａｓ癌遺伝子産物の作用を阻害する物質が、新しいコン
セプトの癌治療薬として期待されている。現在までに、
そのような阻害物質としては放線菌から単離されたオキ
ザノシン（O.Itoら、Cancer Research,vol.49,996-100
0,1989）、かびから単離されたコンパクチン（N.Matsud
aら、Cellular Pharmacology,vol.1,219-223,1994）等
が知られている。
癌遺伝子が重要な役割を果たしていることが知られてい
る。癌遺伝子は、正常細胞の染色体ＤＮＡ上にあるプロ
ト癌遺伝子に点突然変異、転座、増幅等の異常が起こる
ことによって発生し、これまでに７０種あまりが見出さ
れている。その中でもｒａｓ癌遺伝子は大腸癌、乳癌、
白血病等から見出され、ヒト癌組織全体の２０％位に存
在するといわれる代表的なものである。そこで、このｒ
ａｓ癌遺伝子産物の作用を阻害する物質が、新しいコン
セプトの癌治療薬として期待されている。現在までに、
そのような阻害物質としては放線菌から単離されたオキ
ザノシン（O.Itoら、Cancer Research,vol.49,996-100
0,1989）、かびから単離されたコンパクチン（N.Matsud
aら、Cellular Pharmacology,vol.1,219-223,1994）等
が知られている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかし、これまでに発
見されたｒａｓ癌遺伝子作用阻害物質は、いずれも安定
性や毒性に問題があり、臨床応用可能なものはまだな
い。そのため、現在までに知られている阻害物質には見
られない作用機構を有し且つ、臨床応用が可能な薬剤の
開発が望まれている。
見されたｒａｓ癌遺伝子作用阻害物質は、いずれも安定
性や毒性に問題があり、臨床応用可能なものはまだな
い。そのため、現在までに知られている阻害物質には見
られない作用機構を有し且つ、臨床応用が可能な薬剤の
開発が望まれている。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、臨床応用
可能な阻害物質を得るために、癌細胞の形態を正常化さ
せる作用を指標としてスクリーニングすることにより、
植物由来でｒａｓ癌遺伝子産物の作用を阻害する物質の
探索を行った結果、熱帯植物アグライア・オドラータ
（Aglaia odorata LOUR）の葉の抽出物中にｒａｓ癌遺
伝子産物の作用を阻害する活性を見出し、活性成分を特
定することにより化学式（１）で表される化合物を得、
本発明を完成させた。
可能な阻害物質を得るために、癌細胞の形態を正常化さ
せる作用を指標としてスクリーニングすることにより、
植物由来でｒａｓ癌遺伝子産物の作用を阻害する物質の
探索を行った結果、熱帯植物アグライア・オドラータ
（Aglaia odorata LOUR）の葉の抽出物中にｒａｓ癌遺
伝子産物の作用を阻害する活性を見出し、活性成分を特
定することにより化学式（１）で表される化合物を得、
本発明を完成させた。
【０００５】
【化３】
【０００６】すなわち、本発明は有効成分として化学式
（１）で表される化合物および任意に医薬上許容可能な
担体を含有する抗癌剤を提供することにある。アグライ
ア・オドラータから単離された化学式（１）で表される
本発明の化合物（以下、本明細書中この物質を便宜上
「aglaiastatin Ｃ」と称す）は分子量５２６（FAB-MS
スペクトル測定による）の無色の粉末である。シリカゲ
ル薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値は0.42（展開
溶媒：クロロホルム：メタノール＝20：１)、0.49（展
開溶媒：トルエン：アセトン＝１：１) であった。また
元素分析の結果、分子式はＣ31Ｈ3０Ｎ2Ｏ6であった。
紫外線吸収スペクトルは図１から図３、赤外線吸収スペ
クトルは図４の通りである。また1Ｈ-ＮＭＲスペクトル
及び13Ｃ-ＮＭＲの測定結果は、図５および図６の通り
である。検討の結果、アグライア・オドラータから単離
された本発明化合物は上記化学式（１）で表される構造
であることが支持された。
（１）で表される化合物および任意に医薬上許容可能な
担体を含有する抗癌剤を提供することにある。アグライ
ア・オドラータから単離された化学式（１）で表される
本発明の化合物（以下、本明細書中この物質を便宜上
「aglaiastatin Ｃ」と称す）は分子量５２６（FAB-MS
スペクトル測定による）の無色の粉末である。シリカゲ
ル薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値は0.42（展開
溶媒：クロロホルム：メタノール＝20：１)、0.49（展
開溶媒：トルエン：アセトン＝１：１) であった。また
元素分析の結果、分子式はＣ31Ｈ3０Ｎ2Ｏ6であった。
紫外線吸収スペクトルは図１から図３、赤外線吸収スペ
クトルは図４の通りである。また1Ｈ-ＮＭＲスペクトル
及び13Ｃ-ＮＭＲの測定結果は、図５および図６の通り
である。検討の結果、アグライア・オドラータから単離
された本発明化合物は上記化学式（１）で表される構造
であることが支持された。
【０００７】aglaiastatin Ｃを、ｒａｓ癌遺伝子等を
有する癌細胞に与えると細胞の形態が正常化され且つそ
の増殖が抑制されたので、本化合物は癌遺伝子産物の作
用を阻害する効果を有することが判明した。本発明の抗
癌剤に使用される医薬上許容可能な担体としては、例え
ば天然もしくは合成ケイ酸アルミニウム、微結晶セルロ
ース、タルク、デキストリン、澱粉、乳糖などの賦形剤
および植物油、プロピレングリコールなどの希釈剤が挙
げられる。これに加えて、その他の任意成分として、医
薬上許容可能な安定剤、コーティング剤、懸濁化剤、乳
化剤、溶解補助剤、保存剤、緩衝剤、甘味剤なども存在
させ得る。これらの添加剤としては、公知のものを適宜
組み合わせて使用し得る。また剤形としては粉剤、顆粒
剤、錠剤、カプセル剤、注射剤等の任意の形態で用いら
れる。本発明の抗癌剤は主として経口投与されるが、本
発明は投与方法によって限定されない。成人一日あたり
の投与量は投与方法及び病状等によって異なる。主たる
投与方法である経口投与の場合は、成人１日当たり１０
０〜５００ｍｇが通常の投与量である。しかし、本発明
は投与量によって限定されない。
有する癌細胞に与えると細胞の形態が正常化され且つそ
の増殖が抑制されたので、本化合物は癌遺伝子産物の作
用を阻害する効果を有することが判明した。本発明の抗
癌剤に使用される医薬上許容可能な担体としては、例え
ば天然もしくは合成ケイ酸アルミニウム、微結晶セルロ
ース、タルク、デキストリン、澱粉、乳糖などの賦形剤
および植物油、プロピレングリコールなどの希釈剤が挙
げられる。これに加えて、その他の任意成分として、医
薬上許容可能な安定剤、コーティング剤、懸濁化剤、乳
化剤、溶解補助剤、保存剤、緩衝剤、甘味剤なども存在
させ得る。これらの添加剤としては、公知のものを適宜
組み合わせて使用し得る。また剤形としては粉剤、顆粒
剤、錠剤、カプセル剤、注射剤等の任意の形態で用いら
れる。本発明の抗癌剤は主として経口投与されるが、本
発明は投与方法によって限定されない。成人一日あたり
の投与量は投与方法及び病状等によって異なる。主たる
投与方法である経口投与の場合は、成人１日当たり１０
０〜５００ｍｇが通常の投与量である。しかし、本発明
は投与量によって限定されない。
【０００８】アグライア・オドラータはセンダン科の小
木であり東南アジアに自生し、あるいは一部栽培され観
賞用、香料等として使用されている。原料植物は、保
存、運搬等の理由から乾燥してもよく、その場合は天日
で、あるいは６０℃以下のオーブンで乾燥するのが好ま
しい。また、抽出に際しては粉砕したものが好ましい。
抽出に用いる溶媒はaglaiastatin Ｃを安定に抽出し得
る溶媒であれば全て使用することができるが、非極性溶
媒が好ましく、特に炭化水素系溶媒またはハロゲン化炭
化水素溶媒が好ましい。炭化水素系溶媒としてはペンタ
ン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン、ベンゼン、トルエ
ン、キシレン等が挙げられ、特にトルエンが好ましい。
またハロゲン化炭化水素溶媒としては、例えばクロロホ
ルム、二塩化メチレン、四塩化炭素等が挙げられ、特に
クロロホルムが好ましい。もちろんこれらの溶媒の種類
に限定されるものではない。抽出時の溶媒量、温度、時
間などの操作は、aglaiastatin Ｃが分解を起こすこと
なく安定に、且つ高収量で得られる範囲であれば特に限
定されるものではない。
木であり東南アジアに自生し、あるいは一部栽培され観
賞用、香料等として使用されている。原料植物は、保
存、運搬等の理由から乾燥してもよく、その場合は天日
で、あるいは６０℃以下のオーブンで乾燥するのが好ま
しい。また、抽出に際しては粉砕したものが好ましい。
抽出に用いる溶媒はaglaiastatin Ｃを安定に抽出し得
る溶媒であれば全て使用することができるが、非極性溶
媒が好ましく、特に炭化水素系溶媒またはハロゲン化炭
化水素溶媒が好ましい。炭化水素系溶媒としてはペンタ
ン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン、ベンゼン、トルエ
ン、キシレン等が挙げられ、特にトルエンが好ましい。
またハロゲン化炭化水素溶媒としては、例えばクロロホ
ルム、二塩化メチレン、四塩化炭素等が挙げられ、特に
クロロホルムが好ましい。もちろんこれらの溶媒の種類
に限定されるものではない。抽出時の溶媒量、温度、時
間などの操作は、aglaiastatin Ｃが分解を起こすこと
なく安定に、且つ高収量で得られる範囲であれば特に限
定されるものではない。
【０００９】aglaiastatin Ｃの単離精製法は、本化合
物が抽出物から安定に得られる方法であれば特に限定さ
れるものではない。好適な単離精製法の例としてクロマ
トグラフィーを挙げることができる。クロマトグラフィ
ーは好ましくはカラムクロマトグラフィー、ゲル濾過ク
ロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、薄層
クロマトグラフィーまたはこれらの組み合わせを包含し
得る。カラムクロマトグラフィーに用いる担体としては
シリカゲル 、アルミナなどが使用でき、展開溶媒とし
ては炭化水素系溶媒、ハロゲン化炭化水素、アルコール
類などを用いることができる。またゲル濾過クロマトグ
ラフィーとしては担体としてトヨパールＨＷ-４０（東
ソー社製）、溶媒としてアルコール類を用いることがで
きる。しかしクロマトグラフィー担体および溶媒の種類
は上記のものに限定されない。そして、aglaiastatin
Ｃの構造を解析した結果、化学式（１）で表されること
が判明した。以下、実施例により本発明をさらに詳細に
説明するが、本発明はその実施例に限定されるものでは
ない。
物が抽出物から安定に得られる方法であれば特に限定さ
れるものではない。好適な単離精製法の例としてクロマ
トグラフィーを挙げることができる。クロマトグラフィ
ーは好ましくはカラムクロマトグラフィー、ゲル濾過ク
ロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、薄層
クロマトグラフィーまたはこれらの組み合わせを包含し
得る。カラムクロマトグラフィーに用いる担体としては
シリカゲル 、アルミナなどが使用でき、展開溶媒とし
ては炭化水素系溶媒、ハロゲン化炭化水素、アルコール
類などを用いることができる。またゲル濾過クロマトグ
ラフィーとしては担体としてトヨパールＨＷ-４０（東
ソー社製）、溶媒としてアルコール類を用いることがで
きる。しかしクロマトグラフィー担体および溶媒の種類
は上記のものに限定されない。そして、aglaiastatin
Ｃの構造を解析した結果、化学式（１）で表されること
が判明した。以下、実施例により本発明をさらに詳細に
説明するが、本発明はその実施例に限定されるものでは
ない。
【００１０】
【実施例】１． アグライア・オドラータからの活性物質の抽出 ６０℃のオーブンで乾燥したアグライア・オドラータの
葉１６７ｇを粉砕した後、２Ｌの三角フラスコに入れ、
クロロホルム1000mlを加えて室温で５時間撹拌した。溶
媒を新しくして同様の操作を繰り返し、合計３回の抽出
を行った。３回分の抽出液を合わせて減圧下でクロロホ
ルムを留去し、暗緑色シラップ5.7ｇを得た。このシラ
ップを次の精製の原料とした。
葉１６７ｇを粉砕した後、２Ｌの三角フラスコに入れ、
クロロホルム1000mlを加えて室温で５時間撹拌した。溶
媒を新しくして同様の操作を繰り返し、合計３回の抽出
を行った。３回分の抽出液を合わせて減圧下でクロロホ
ルムを留去し、暗緑色シラップ5.7ｇを得た。このシラ
ップを次の精製の原料とした。
【００１１】２．抽出物からの活性物質の精製 クロロホルム抽出物3.9ｇを少量のトルエンに溶かし、
カラムに充填した120ｇのシリカゲル（商品名：Merck s
ilicagel 60,メルク社製）の上に添加し、トルエン：ア
セトン＝20：1，16：１，６：１，３：１，２：１，
１：１の溶媒で順次溶出し、約20mlずつ分画した。各画
分を「４．aglaiastatin Ｃの各種細胞に対する形態変
化誘導効果」で用いた細胞形態変化誘導試験に付したと
ころ、トルエン：アセトン＝３：１から１：１溶出画分
に形態正常化作用が認められた。活性画分を集めたとこ
ろ重量は６３９mgであった。この活性画分を、メタノー
ルで平衡化したトヨパールＨＷ-４０で約２mlずつ分画
し、さらにカラムに充填したMerck silicagel 60（sila
nisied）に添加し７０％メタノールで溶出し約４mlずつ
分画した。各画分を細胞形態変化誘導試験に付し、活性
が認められた画分を集めた。さらにこの活性画分につい
てＨＰＬＣ分取（カラム：PEGASIL ODS，(株)センシュ
ウ科学製、溶出溶媒：６５％メタノール、流速：５ml/m
in、検出：U.V.210nm）を行い約１mlずつ分画した。各
画分を細胞形態変化誘導試験に付したところリテンショ
ンタイム４２分に溶出される画分に活性が確認された。
この画分を集め、無色の粉末（aglaiastatin Ｃ 2.1m
g）を得た。シリカゲル薄層クロマトグラフィーを行っ
たところこの画分は単一スポットであった。
カラムに充填した120ｇのシリカゲル（商品名：Merck s
ilicagel 60,メルク社製）の上に添加し、トルエン：ア
セトン＝20：1，16：１，６：１，３：１，２：１，
１：１の溶媒で順次溶出し、約20mlずつ分画した。各画
分を「４．aglaiastatin Ｃの各種細胞に対する形態変
化誘導効果」で用いた細胞形態変化誘導試験に付したと
ころ、トルエン：アセトン＝３：１から１：１溶出画分
に形態正常化作用が認められた。活性画分を集めたとこ
ろ重量は６３９mgであった。この活性画分を、メタノー
ルで平衡化したトヨパールＨＷ-４０で約２mlずつ分画
し、さらにカラムに充填したMerck silicagel 60（sila
nisied）に添加し７０％メタノールで溶出し約４mlずつ
分画した。各画分を細胞形態変化誘導試験に付し、活性
が認められた画分を集めた。さらにこの活性画分につい
てＨＰＬＣ分取（カラム：PEGASIL ODS，(株)センシュ
ウ科学製、溶出溶媒：６５％メタノール、流速：５ml/m
in、検出：U.V.210nm）を行い約１mlずつ分画した。各
画分を細胞形態変化誘導試験に付したところリテンショ
ンタイム４２分に溶出される画分に活性が確認された。
この画分を集め、無色の粉末（aglaiastatin Ｃ 2.1m
g）を得た。シリカゲル薄層クロマトグラフィーを行っ
たところこの画分は単一スポットであった。
【００１２】３． aglaiastatin Ｃの物理化学的性質 無色粉末（aglaiastatin Ｃ）の各種物理化学的性質を
測定した。本化合物のシリカゲル薄層クロマトグラフィ
ーにおけるＲｆ値は0.42（展開溶媒：クロロホルム：メ
タノール＝20：１）、0.49（展開溶媒：トルエン：アセ
トン＝１：１）であった。また、融点は157〜160℃であ
った。各種スペクトルの測定を行った結果はを図１から
図６に示した。
測定した。本化合物のシリカゲル薄層クロマトグラフィ
ーにおけるＲｆ値は0.42（展開溶媒：クロロホルム：メ
タノール＝20：１）、0.49（展開溶媒：トルエン：アセ
トン＝１：１）であった。また、融点は157〜160℃であ
った。各種スペクトルの測定を行った結果はを図１から
図６に示した。
【００１３】４． aglaiastatin Ｃの各種細胞に対する
形態変化誘導効果 ａ．各種細胞の培養 Ｋ-ｒａｓts-ＮＲＫ細胞(米国ＮＩＨ）は、癌細胞の形
態を示す３３℃および正常細胞の形態を示す３９℃にお
いて、５％仔牛血清（Gibco Laboratories社製）を含む
ダルベッコ変法イーグル培地（日水製薬(株)製）にグル
タミン 0.6g/l、カナマイシン 0.2g/l、NaHCO3 2.25g/l
を加えたものを培養液（以下、この培養液を「培地」と
いう）として、５％ ＣＯ2インキュベーター中で培養し
た。また、正常なラット腎細胞であるＮＲＫ-４９細胞
（大日本製薬(株)）およびマウスＮＩＨ３Ｔ３細胞（Ｊ
ＣＲＳ細胞バンク）ならびに癌細胞であるＫ-ｒａｓ-Ｎ
ＲＫ細胞（昭和薬科大学）、Ｋ-ｒａｓ-ＮＩＨ３Ｔ３細
胞、Ｈ-ｒａｓ-ＮＩＨ３Ｔ３細胞、Ｎ-ｒａｓ-ＮＩＨ３
Ｔ３細胞（東京大学医科学研究所）は、３７℃で同様に
培養した。また、細胞は、カルシウム・マグネシウム不
含リン酸塩緩衝液(PBS(-)：NaCl8.0g/l ，Na2PO4・12H2O
2.31g/l，KH2PO4 0.2g/l；pH 7.4）で洗浄した後、ト
リプシン-ＥＤＴＡ溶液（trypsin 0.5g/l，NaCl 8.0g/
l，glucose 1.0g/l，phenolred 0.02g/l，KH2PO4 0.35g
/l，EDTA 0.2g/l）で培養フラスコより細胞をはがし、
新しい培地を入れたフラスコ中に移すことにより継代し
た。
形態変化誘導効果 ａ．各種細胞の培養 Ｋ-ｒａｓts-ＮＲＫ細胞(米国ＮＩＨ）は、癌細胞の形
態を示す３３℃および正常細胞の形態を示す３９℃にお
いて、５％仔牛血清（Gibco Laboratories社製）を含む
ダルベッコ変法イーグル培地（日水製薬(株)製）にグル
タミン 0.6g/l、カナマイシン 0.2g/l、NaHCO3 2.25g/l
を加えたものを培養液（以下、この培養液を「培地」と
いう）として、５％ ＣＯ2インキュベーター中で培養し
た。また、正常なラット腎細胞であるＮＲＫ-４９細胞
（大日本製薬(株)）およびマウスＮＩＨ３Ｔ３細胞（Ｊ
ＣＲＳ細胞バンク）ならびに癌細胞であるＫ-ｒａｓ-Ｎ
ＲＫ細胞（昭和薬科大学）、Ｋ-ｒａｓ-ＮＩＨ３Ｔ３細
胞、Ｈ-ｒａｓ-ＮＩＨ３Ｔ３細胞、Ｎ-ｒａｓ-ＮＩＨ３
Ｔ３細胞（東京大学医科学研究所）は、３７℃で同様に
培養した。また、細胞は、カルシウム・マグネシウム不
含リン酸塩緩衝液(PBS(-)：NaCl8.0g/l ，Na2PO4・12H2O
2.31g/l，KH2PO4 0.2g/l；pH 7.4）で洗浄した後、ト
リプシン-ＥＤＴＡ溶液（trypsin 0.5g/l，NaCl 8.0g/
l，glucose 1.0g/l，phenolred 0.02g/l，KH2PO4 0.35g
/l，EDTA 0.2g/l）で培養フラスコより細胞をはがし、
新しい培地を入れたフラスコ中に移すことにより継代し
た。
【００１４】ｂ．形態変化誘導効果の観察 各種細胞を、４８穴プラスチックプレート（コースター
社製）に1.0×104個/0.5ml培地/wellでまき、５％ ＣＯ
2インキュベター中で１日培養した。翌日被検物質を加
え、その後３日目までの細胞の形態変化を観察した。 ｉ）Ｋ-ｒａｓts-ＮＲＫ細胞に対するaglaiastatin Ｃ
の効果 Ｋ-ｒａｓts-ＮＲＫ細胞は、３３℃では細胞からいくつ
もの細い突起が見られ、また細胞同士が重なり合って癌
細胞の形態を示し、３９℃では細胞は平らで突起も見ら
れず重なり合うこともなく正常細胞の形態を示す。そこ
で、３３℃でaglaiastatin Ｃ 10ng/mlを添加して３日
間培養した結果、突起もなく平で重なり合うこともない
正常細胞の形態を示した。また、３９℃では、細胞の形
態に大きな変化はなかった。 ii）Ｋ-ｒａｓ-ＮＲＫ細胞に対するaglaiastatin Ｃの
効果 癌細胞であるＫ-ｒａｓ-ＮＲＫ細胞は、形が丸く盛り上
がっているが、これにaglaiastatin Ｃ 20ng/mlを添加
して３７℃で３日間培養した結果、細胞の形態が平らに
なり、接着面も増して正常細胞の形態を示した。 iii）Ｋ-ｒａｓ-ＮＩＨ３Ｔ３細胞に対するaglaiastati
n Ｃの効果 癌細胞であるＫ-ｒａｓ-ＮＩＨ３Ｔ３細胞はそれぞれ細
長い突起状の形態をしており、さらに細胞同士が重なり
合っている。これにaglaiastatin Ｃを20ng/ml添加して
３７℃で３日間培養したところ、平らになり接着面も増
大し、正常細胞であるＮＩＨ３Ｔ３細胞の形態になって
いるのが観察された。
社製）に1.0×104個/0.5ml培地/wellでまき、５％ ＣＯ
2インキュベター中で１日培養した。翌日被検物質を加
え、その後３日目までの細胞の形態変化を観察した。 ｉ）Ｋ-ｒａｓts-ＮＲＫ細胞に対するaglaiastatin Ｃ
の効果 Ｋ-ｒａｓts-ＮＲＫ細胞は、３３℃では細胞からいくつ
もの細い突起が見られ、また細胞同士が重なり合って癌
細胞の形態を示し、３９℃では細胞は平らで突起も見ら
れず重なり合うこともなく正常細胞の形態を示す。そこ
で、３３℃でaglaiastatin Ｃ 10ng/mlを添加して３日
間培養した結果、突起もなく平で重なり合うこともない
正常細胞の形態を示した。また、３９℃では、細胞の形
態に大きな変化はなかった。 ii）Ｋ-ｒａｓ-ＮＲＫ細胞に対するaglaiastatin Ｃの
効果 癌細胞であるＫ-ｒａｓ-ＮＲＫ細胞は、形が丸く盛り上
がっているが、これにaglaiastatin Ｃ 20ng/mlを添加
して３７℃で３日間培養した結果、細胞の形態が平らに
なり、接着面も増して正常細胞の形態を示した。 iii）Ｋ-ｒａｓ-ＮＩＨ３Ｔ３細胞に対するaglaiastati
n Ｃの効果 癌細胞であるＫ-ｒａｓ-ＮＩＨ３Ｔ３細胞はそれぞれ細
長い突起状の形態をしており、さらに細胞同士が重なり
合っている。これにaglaiastatin Ｃを20ng/ml添加して
３７℃で３日間培養したところ、平らになり接着面も増
大し、正常細胞であるＮＩＨ３Ｔ３細胞の形態になって
いるのが観察された。
【００１５】５．aglaiastatin Ｃの各種細胞に対する
細胞増殖抑制効果 各種細胞を、４８穴プラスチックプレート（コースター
社製）に1.0×104個/0.5ml 培地/wellでまき、１日適温
５％ ＣＯ2インキュベーター中で培養した。翌日aglaia
statin Ｃを加え更に３日間培養し、PBS(-)で２回洗っ
た後、トリプシンを100μl/wellずつ加え、数分０％ Ｃ
Ｏ2条件下のインキュベーター中で細胞をはがし、培地
を900μl/wellずつ加えて均一にした。この溶液の細胞
濃度をコールターカウンター（ＺＭ型）を用いて測定
し、細胞増殖を５０％阻害する濃度（ＩＣ50）を求め
た。結果は表１に示した通りであり、癌細胞に対するag
laiastatin ＣのＩＣ50は、１.０〜５.６ng/mlである。
細胞増殖抑制効果 各種細胞を、４８穴プラスチックプレート（コースター
社製）に1.0×104個/0.5ml 培地/wellでまき、１日適温
５％ ＣＯ2インキュベーター中で培養した。翌日aglaia
statin Ｃを加え更に３日間培養し、PBS(-)で２回洗っ
た後、トリプシンを100μl/wellずつ加え、数分０％ Ｃ
Ｏ2条件下のインキュベーター中で細胞をはがし、培地
を900μl/wellずつ加えて均一にした。この溶液の細胞
濃度をコールターカウンター（ＺＭ型）を用いて測定
し、細胞増殖を５０％阻害する濃度（ＩＣ50）を求め
た。結果は表１に示した通りであり、癌細胞に対するag
laiastatin ＣのＩＣ50は、１.０〜５.６ng/mlである。
【００１６】 〔表１〕 細胞名 ＩＣ50 （ng/ml） K-ras-NRK 2.8 K-ras-NIH3T3 5.6 H-ras-NIH3T3 1.0 N-ras-NIH3T3 1.8 NRK 2.1 NIH3T3 4.1
【００１７】
【発明の効果】化学式（１）で示される熱帯植物アグラ
イア・オドラータから抽出された本発明化合物は、癌細
胞の増殖を阻止しその形態を正常化させる活性を有し、
抗癌剤として有効に使用できる。
イア・オドラータから抽出された本発明化合物は、癌細
胞の増殖を阻止しその形態を正常化させる活性を有し、
抗癌剤として有効に使用できる。
【図１】 紫外線吸収スペクトル中性条件（ＭｅＯＨ）
での測定結果
での測定結果
【図２】 紫外線吸収スペクトル酸性条件（0.1N HCl-M
eOH）での測定結果
eOH）での測定結果
【図３】 紫外線吸収スペクトル塩基性条件（0.1N NaO
H-MeOH）での測定結果
H-MeOH）での測定結果
【図４】 赤外線吸収スペクトル測定結果
【図５】 1Ｈ-ＮＭＲスペクトル測定結果
【図６】 13Ｃ-ＮＭＲスペクトル測定結果
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 小谷野 喬 神奈川県足柄上郡中井町井ノ口1500番地 テルモ株式会社内 (72)発明者 梅澤 一夫 東京都渋谷区広尾３−１−２−505
Claims (2)
- 【請求項１】 化学式（１）で表される化合物。 【化１】
- 【請求項２】 化学式（１）で表される化合物を有効成
分として含有することを特徴とする癌遺伝子機能抑制
剤。 【化２】
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7228355A JPH0967376A (ja) | 1995-09-05 | 1995-09-05 | 癌遺伝子機能抑制剤 |
| PCT/JP1996/002411 WO1997008161A1 (en) | 1995-08-28 | 1996-08-28 | Oncogene function depressant |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7228355A JPH0967376A (ja) | 1995-09-05 | 1995-09-05 | 癌遺伝子機能抑制剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0967376A true JPH0967376A (ja) | 1997-03-11 |
Family
ID=16875167
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7228355A Pending JPH0967376A (ja) | 1995-08-28 | 1995-09-05 | 癌遺伝子機能抑制剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0967376A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115385924A (zh) * | 2022-10-06 | 2022-11-25 | 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室(贵州医科大学天然产物化学重点实验室) | 一种具有抗肿瘤活性的环戊烷苯并呋喃类化合物及其应用 |
-
1995
- 1995-09-05 JP JP7228355A patent/JPH0967376A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115385924A (zh) * | 2022-10-06 | 2022-11-25 | 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室(贵州医科大学天然产物化学重点实验室) | 一种具有抗肿瘤活性的环戊烷苯并呋喃类化合物及其应用 |
| CN115385924B (zh) * | 2022-10-06 | 2023-10-13 | 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室(贵州医科大学天然产物化学重点实验室) | 一种具有抗肿瘤活性的环戊烷苯并呋喃类化合物及其应用 |
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