JPH0987134A - 細胞賦活性化粧料 - Google Patents
細胞賦活性化粧料Info
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- JPH0987134A JPH0987134A JP7273709A JP27370995A JPH0987134A JP H0987134 A JPH0987134 A JP H0987134A JP 7273709 A JP7273709 A JP 7273709A JP 27370995 A JP27370995 A JP 27370995A JP H0987134 A JPH0987134 A JP H0987134A
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- propionibacterium acnes
- cell
- cells
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Abstract
(57)【要約】
【目的】健康なヒトの皮膚常在菌であるプロピオニバク
テリア・アクネス菌から得られたヒト皮膚細胞賦活活性
物質を含有する化粧料を提供することにある。 【構成】本発明の細胞賦活剤は健康な肌から採取され、
選択されたプロピオニバクテリウム・アクネス菌を培養
して得られた培養上清及び菌体破砕抽出物に見いだされ
るもので、ヒト線維芽細胞に対して特異的に増殖効果を
示す化粧料である。
テリア・アクネス菌から得られたヒト皮膚細胞賦活活性
物質を含有する化粧料を提供することにある。 【構成】本発明の細胞賦活剤は健康な肌から採取され、
選択されたプロピオニバクテリウム・アクネス菌を培養
して得られた培養上清及び菌体破砕抽出物に見いだされ
るもので、ヒト線維芽細胞に対して特異的に増殖効果を
示す化粧料である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は細胞賦活組成物を含有す
る保湿性を高め若々しい皮膚を保つ化粧料及び該細胞賦
活成分を生産する微生物に関する。
る保湿性を高め若々しい皮膚を保つ化粧料及び該細胞賦
活成分を生産する微生物に関する。
【０００２】
【従来の技術】化粧品に使用されている細胞賦活剤とし
ては単一成分原料（感光素、ビタミン、コラーゲンな
ど）及び抽出成分原料（プラセンタエキス(特願昭59-19
0909)、ラクトバチルス・アシドフィルス(特願平3-1560
33)及びストレプトコッカス・サーモフィルス(特願昭57
-81287)からなる乳酸菌エキス、霊芝エキスなど）であ
る。
ては単一成分原料（感光素、ビタミン、コラーゲンな
ど）及び抽出成分原料（プラセンタエキス(特願昭59-19
0909)、ラクトバチルス・アシドフィルス(特願平3-1560
33)及びストレプトコッカス・サーモフィルス(特願昭57
-81287)からなる乳酸菌エキス、霊芝エキスなど）であ
る。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明は安全性の高い
細胞賦活作用を有し、かつ、保湿性が高く、皮膚を滑ら
かにし、若々しい皮膚を保つ性質の化粧料を提供するこ
とである。
細胞賦活作用を有し、かつ、保湿性が高く、皮膚を滑ら
かにし、若々しい皮膚を保つ性質の化粧料を提供するこ
とである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】皮膚には色々な皮膚常在
菌が棲息しマイクロフローラを形成している。面白いこ
とに健康な人の肌は一様に嫌気性菌のプロピオニバクテ
リウム・アクネス菌（Propionibacterium acnes）、好
気性菌のスタフィロコッカス・エピデルミデイス菌(Stap
hylococcus epidermides)がそれぞれ１０4−１０5個／
ｃｍ2、１０3−１０4個／ｃｍ2という高密度な棲息を示
し、皮膚常在菌の上位優勢菌種を成している。健康な肌
に、実験的に外来菌を塗布したとしても外来菌は速やか
に排除され元の菌叢が自然と回復するということがしば
しば観察される。このことはあたかも常在菌が皮膚の感
染防御機構の一端を担っているように見える。健康な皮
膚が持つ常在菌叢のこれら生態系が構築されるために
は、皮膚から供給される優勢常在菌の生産に必要な栄養
因子と常在菌が分泌する抗菌様物質などの存在が考えら
れている。そこで本発明は、まず健康な人の正常皮膚に
存在する細菌を採取し、分離培地プレート上で単コロニ
ーを得、その単離皮膚常在菌純粋液培養を行い、その培
養菌体及び培養液中にヒト線維芽細胞増殖作用物質があ
るかの否かの検索を試みた。その結果、プロピオニバク
テリウムに属する菌の培養液中に細胞増殖作用を示す成
分があること、さらにこれを含有する化粧料として有用
であることを見いだし、本発明を完成するに至った。即
ち、本発明はプロピオニバクテリウム・アクネスに属
し、線維芽細胞に対して細胞賦活作用を示す成分を産生
する菌を培養して得られる培養液あるいはその該菌体に
由来する物質で線維芽細胞の増殖能を高める成分を含有
する化粧料並びに微生物を提供するものである。
菌が棲息しマイクロフローラを形成している。面白いこ
とに健康な人の肌は一様に嫌気性菌のプロピオニバクテ
リウム・アクネス菌（Propionibacterium acnes）、好
気性菌のスタフィロコッカス・エピデルミデイス菌(Stap
hylococcus epidermides)がそれぞれ１０4−１０5個／
ｃｍ2、１０3−１０4個／ｃｍ2という高密度な棲息を示
し、皮膚常在菌の上位優勢菌種を成している。健康な肌
に、実験的に外来菌を塗布したとしても外来菌は速やか
に排除され元の菌叢が自然と回復するということがしば
しば観察される。このことはあたかも常在菌が皮膚の感
染防御機構の一端を担っているように見える。健康な皮
膚が持つ常在菌叢のこれら生態系が構築されるために
は、皮膚から供給される優勢常在菌の生産に必要な栄養
因子と常在菌が分泌する抗菌様物質などの存在が考えら
れている。そこで本発明は、まず健康な人の正常皮膚に
存在する細菌を採取し、分離培地プレート上で単コロニ
ーを得、その単離皮膚常在菌純粋液培養を行い、その培
養菌体及び培養液中にヒト線維芽細胞増殖作用物質があ
るかの否かの検索を試みた。その結果、プロピオニバク
テリウムに属する菌の培養液中に細胞増殖作用を示す成
分があること、さらにこれを含有する化粧料として有用
であることを見いだし、本発明を完成するに至った。即
ち、本発明はプロピオニバクテリウム・アクネスに属
し、線維芽細胞に対して細胞賦活作用を示す成分を産生
する菌を培養して得られる培養液あるいはその該菌体に
由来する物質で線維芽細胞の増殖能を高める成分を含有
する化粧料並びに微生物を提供するものである。
【０００５】本発明に用いられる培養液を生産する菌株
はプロピオニバクテリウム・アクネスに属し、線維芽細
胞に対して特異的に増殖作用を示す成分を生産する菌と
しては、例えばＡＤ３０００２株（以下本菌株と言う）
が挙げられる。本菌株の菌学的性質は以下の通りであ
る。 （ａ）菌の性状：桿菌 （ｂ）運動性：無 （ｃ）胞子形成：観察されず （ｄ）グラム染色性：陽性 （ｅ）ゼラチン：液化能あり （ｆ）インドール生成：あり （ｇ）硝酸還元反応：陽性 （ｈ）カタラーゼ反応：陽性 （ｉ）リパーゼ活性：あり （ｊ）ガス生成：なし （ｋ）ウレアーゼ反応：陽性 （ｌ）ヒアルロニダーゼ反応：陰性 （ｍ）生育範囲：ｐＨ５−９，温度２０−４０℃（最適
生育温度３２−４０℃） （ｎ）酸素要求性：偏性嫌気性。但し菌数の多い場合,
酸素耐性が認められる。 （ｏ）嫌気条件下での酸の産生能：マルトース（−） （ｐ）エスクリン加水分解：なし 以上の性質をもとにＢｅｒｇｅｙ’ｓ ｍａｎｕａｌ
ｏｆ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ Ｂａｃｔｅｒｉｏ
ｌｏｇｙ,第８版,（１９７４年）の記載から、本菌株を
プロピオニバクテリウム・アクネスＡＤ３０００２と命
名し、工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した。
（受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５１８６）
はプロピオニバクテリウム・アクネスに属し、線維芽細
胞に対して特異的に増殖作用を示す成分を生産する菌と
しては、例えばＡＤ３０００２株（以下本菌株と言う）
が挙げられる。本菌株の菌学的性質は以下の通りであ
る。 （ａ）菌の性状：桿菌 （ｂ）運動性：無 （ｃ）胞子形成：観察されず （ｄ）グラム染色性：陽性 （ｅ）ゼラチン：液化能あり （ｆ）インドール生成：あり （ｇ）硝酸還元反応：陽性 （ｈ）カタラーゼ反応：陽性 （ｉ）リパーゼ活性：あり （ｊ）ガス生成：なし （ｋ）ウレアーゼ反応：陽性 （ｌ）ヒアルロニダーゼ反応：陰性 （ｍ）生育範囲：ｐＨ５−９，温度２０−４０℃（最適
生育温度３２−４０℃） （ｎ）酸素要求性：偏性嫌気性。但し菌数の多い場合,
酸素耐性が認められる。 （ｏ）嫌気条件下での酸の産生能：マルトース（−） （ｐ）エスクリン加水分解：なし 以上の性質をもとにＢｅｒｇｅｙ’ｓ ｍａｎｕａｌ
ｏｆ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ Ｂａｃｔｅｒｉｏ
ｌｏｇｙ,第８版,（１９７４年）の記載から、本菌株を
プロピオニバクテリウム・アクネスＡＤ３０００２と命
名し、工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した。
（受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５１８６）
【０００６】本発明に用いる線維芽細胞に対して特異的
に賦活作用を示す成分は、上記菌株を栄養源含有培地に
接種し嫌気的に培養すれば培養中に生産される。かかる
菌株としては、上記ＡＤ３０００２株はもとより、人工
変異株あるいは自然変異株であっても上記成分を生産す
る能力を有するものであれば、全て本発明に使用するこ
とができる。
に賦活作用を示す成分は、上記菌株を栄養源含有培地に
接種し嫌気的に培養すれば培養中に生産される。かかる
菌株としては、上記ＡＤ３０００２株はもとより、人工
変異株あるいは自然変異株であっても上記成分を生産す
る能力を有するものであれば、全て本発明に使用するこ
とができる。
【０００７】
【実施例】次に実施例を挙げて本発明を更に具体的に説
明するが、本発明は、これにより限定するものではな
い。実施例１ プロピオニバクテリウム・アクネスＡＤ３０００２株を
下記のＧＡＭ液体培地に接種し、３７℃で嫌気培養を行
い、得られた培養液を１５，０００ｒｐｍの連続遠心分
離に付し、菌体上清を０.２２ミクロンのフィルターを
用いて無菌ろ過し培養上清液を得た。一方、菌体は生理
的食塩水でよく洗い洗浄菌体を得た。この洗浄菌体を８
０％アセトンで抽出し、次いで酢酸エチルで抽出したも
のをエバポレーターで蒸発乾固し菌体抽出物を得た。 ＧＡＭ液体培地の組成（１リットル当たり） ペプトン １０.０ｇ ダイズペプトン ３.０ｇ プロテオーゼペプトン １０．０ｇ 消化血清末 １３．５ｇ 酵母エキス ５．０ｇ 肉エキス ２．２ｇ 肝臓エキス末 １．２ｇ ブドウ糖 ３．０ｇ リン酸二水素カリウム ２．５ｇ 塩化ナトリウム ３．０ｇ 溶性デンプン ５．０ｇ Ｌ−システイン塩酸塩 ０．３ｇ チオグリコール酸 ０．３ｇ ｐＨ ７．３±０．１
明するが、本発明は、これにより限定するものではな
い。実施例１ プロピオニバクテリウム・アクネスＡＤ３０００２株を
下記のＧＡＭ液体培地に接種し、３７℃で嫌気培養を行
い、得られた培養液を１５，０００ｒｐｍの連続遠心分
離に付し、菌体上清を０.２２ミクロンのフィルターを
用いて無菌ろ過し培養上清液を得た。一方、菌体は生理
的食塩水でよく洗い洗浄菌体を得た。この洗浄菌体を８
０％アセトンで抽出し、次いで酢酸エチルで抽出したも
のをエバポレーターで蒸発乾固し菌体抽出物を得た。 ＧＡＭ液体培地の組成（１リットル当たり） ペプトン １０.０ｇ ダイズペプトン ３.０ｇ プロテオーゼペプトン １０．０ｇ 消化血清末 １３．５ｇ 酵母エキス ５．０ｇ 肉エキス ２．２ｇ 肝臓エキス末 １．２ｇ ブドウ糖 ３．０ｇ リン酸二水素カリウム ２．５ｇ 塩化ナトリウム ３．０ｇ 溶性デンプン ５．０ｇ Ｌ−システイン塩酸塩 ０．３ｇ チオグリコール酸 ０．３ｇ ｐＨ ７．３±０．１
【０００８】実験例 １（細胞賦活作用） ヒト繊維芽細胞（ＮＢＩＲＧＢ、理化学研究所より購
入）を予め、１０％ＦＣＳ加ＲＩＴＣ−８０培地にて５
％ＣＯ2，３７℃の条件下で４日間培養した。その培養
細胞は、その後、ＰＢＳ緩衝液で２度洗浄し、０.２５
％トリプシン処理にて細胞をはがし、同培地で ８ ×
１０3細胞／ｍｌ細胞浮遊液に調製した。これを９６穴
マイクロプレートに０.１ｍｌずつ分注し同培養条件下
で前培養（４時間）を行った。サンプルは同培地（無血
清）で１.０％，０.３％，０.０３％（濃度は実施例１
の容量％、但し菌体抽出液は培養液１ｍｌ相当量の容量
％）に希釈したものを各々０.０１１ｍｌずつ９６穴に
添加して培養した。判定はニュ−トラルレッドで生細胞
を染色（３７℃，１時間）し、０．１Ｍ ＮａＨ2ＰＯ4
・２Ｈ2Ｏ：エタノール（１：１）で溶出後、分光光度
計を用いて波長５４０ｎｍでの吸光度を測定し、細胞増
殖能を算出した。その結果を表１に示した。
入）を予め、１０％ＦＣＳ加ＲＩＴＣ−８０培地にて５
％ＣＯ2，３７℃の条件下で４日間培養した。その培養
細胞は、その後、ＰＢＳ緩衝液で２度洗浄し、０.２５
％トリプシン処理にて細胞をはがし、同培地で ８ ×
１０3細胞／ｍｌ細胞浮遊液に調製した。これを９６穴
マイクロプレートに０.１ｍｌずつ分注し同培養条件下
で前培養（４時間）を行った。サンプルは同培地（無血
清）で１.０％，０.３％，０.０３％（濃度は実施例１
の容量％、但し菌体抽出液は培養液１ｍｌ相当量の容量
％）に希釈したものを各々０.０１１ｍｌずつ９６穴に
添加して培養した。判定はニュ−トラルレッドで生細胞
を染色（３７℃，１時間）し、０．１Ｍ ＮａＨ2ＰＯ4
・２Ｈ2Ｏ：エタノール（１：１）で溶出後、分光光度
計を用いて波長５４０ｎｍでの吸光度を測定し、細胞増
殖能を算出した。その結果を表１に示した。
【表１】 上記のごとく、培養上清液（Ｐ＜０．０５）及び菌体抽
出液（Ｐ＜０．０１）には明らかに線維芽細胞に対して
有意に増殖効果が認められた。一方、皮膚常在菌である
スタフィロコッカス・エピデルミデス菌や皮膚有害菌で
あるスタフィロコッカス・アウレウス菌及びマイクロコ
ッカス菌属には増殖効果が認められず、本菌株の細胞賦
活作用の有用性が示された。
出液（Ｐ＜０．０１）には明らかに線維芽細胞に対して
有意に増殖効果が認められた。一方、皮膚常在菌である
スタフィロコッカス・エピデルミデス菌や皮膚有害菌で
あるスタフィロコッカス・アウレウス菌及びマイクロコ
ッカス菌属には増殖効果が認められず、本菌株の細胞賦
活作用の有用性が示された。
【０００９】安全性 実施例１で得られた菌体培養液をソニケーション処理
（氷冷で２０分間）し、その上清液を０．２２ミクロン
のフィルターを用いて無菌ろ過したものにグリセリンを
加えて試験液とした。これを成人男子（ｎ＝１）前腕曲
内側皮膚に貼付し、２４時間後の皮膚刺激性について観
察を行い表２に示す結果を得た。
（氷冷で２０分間）し、その上清液を０．２２ミクロン
のフィルターを用いて無菌ろ過したものにグリセリンを
加えて試験液とした。これを成人男子（ｎ＝１）前腕曲
内側皮膚に貼付し、２４時間後の皮膚刺激性について観
察を行い表２に示す結果を得た。
【表２】 上記のように、安全性になんら問題はない。
【００１０】実施例２ （ローション） 上記実施例１で得られた培養菌体（１０9細胞／ｍｌ相
当量)を８０％アセトンで抽出後、アセトンを除去す
る。この溶液を０．２２ミクロンのフィルターでろ過し
精製水で１０倍に希釈したもの９４.９ｇにグリセリン
５.０ｇ、パラオキシ安息香酸０.１ｇを攪拌添加してロ
ーションを得た。（配合量は重量％）
当量)を８０％アセトンで抽出後、アセトンを除去す
る。この溶液を０．２２ミクロンのフィルターでろ過し
精製水で１０倍に希釈したもの９４.９ｇにグリセリン
５.０ｇ、パラオキシ安息香酸０.１ｇを攪拌添加してロ
ーションを得た。（配合量は重量％）
【００１１】実施例３ （クリーム） 上記実施例２で得られた培養菌体抽出液５ｇ、グリセリ
ン５ｇ、ポリエチレングリコール（４００） ２ｇ及び
精製水７０ｇを７０℃加熱混合溶解した中へ、予めセタ
ノール４ｇ，スクワラン５ｇ，ステアリン酸１ｇ，ミツ
ロウ１ｇ，ワセリン２ｇ、グリセリンモノステアレート
２ｇ、パラオキシ安息香酸エチルエステル０.１ｇと少
量の香料を加熱混合溶解させたものを攪拌混合して、ホ
モジナイザーで乳化し室温まで冷却してクリームを得
た。（配合量は重量％）
ン５ｇ、ポリエチレングリコール（４００） ２ｇ及び
精製水７０ｇを７０℃加熱混合溶解した中へ、予めセタ
ノール４ｇ，スクワラン５ｇ，ステアリン酸１ｇ，ミツ
ロウ１ｇ，ワセリン２ｇ、グリセリンモノステアレート
２ｇ、パラオキシ安息香酸エチルエステル０.１ｇと少
量の香料を加熱混合溶解させたものを攪拌混合して、ホ
モジナイザーで乳化し室温まで冷却してクリームを得
た。（配合量は重量％）
【００１２】
【発明の効果】本発明のプロピオニバクテリウム・アク
ネスの培養上清あるいは菌体抽出液を含む化粧料は線維
芽細胞の増殖効果を有する。従ってこれを含有する化粧
料は皮膚の保湿性を高め、皮膚を滑らかにし、若々しい
皮膚を保つ効果が期待され、かつ安全性についても問題
はない。
ネスの培養上清あるいは菌体抽出液を含む化粧料は線維
芽細胞の増殖効果を有する。従ってこれを含有する化粧
料は皮膚の保湿性を高め、皮膚を滑らかにし、若々しい
皮膚を保つ効果が期待され、かつ安全性についても問題
はない。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 35/74 ＡＤＴ Ａ６１Ｋ 35/74 ＡＤＴＡ Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｎ 1/20 Ａ //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01）
Claims (2)
- 【請求項１】プロピオニバクテリウム・アクネス(Propi
onibacterium acnes)に属する菌を培養した菌体、その
菌体破砕物、それらの抽出物、及び、それらの培養液か
ら得られた抽出物のうちから選ばれた１種あるいは２種
以上含有する化粧料。 - 【請求項２】プロピオニバクテリウム・アクネスに属
し、皮膚の細胞に対して賦活作用を示す成分を生産する
前記菌体が、プロピオニバクテリウム・アクネスＡＤ３
０００２（生工研菌寄,第ＦＥＲＭ Ｐ−１５１８６
号）である請求項１記載の化粧料。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27370995A JP3580453B2 (ja) | 1995-09-28 | 1995-09-28 | 細胞賦活性化粧料 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27370995A JP3580453B2 (ja) | 1995-09-28 | 1995-09-28 | 細胞賦活性化粧料 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0987134A true JPH0987134A (ja) | 1997-03-31 |
| JP3580453B2 JP3580453B2 (ja) | 2004-10-20 |
Family
ID=17531469
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP27370995A Expired - Fee Related JP3580453B2 (ja) | 1995-09-28 | 1995-09-28 | 細胞賦活性化粧料 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3580453B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014530890A (ja) * | 2011-10-25 | 2014-11-20 | アーチ・パーソナル・ケアー・プロダクツ・リミテッド・パートナーシップ | 連続または同時発酵の抽出物を含有する組成物 |
| IT202000003233A1 (it) * | 2020-02-18 | 2021-08-18 | Aileens Pharma S R L | Ceppo batterico e suoi usi medici |
-
1995
- 1995-09-28 JP JP27370995A patent/JP3580453B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014530890A (ja) * | 2011-10-25 | 2014-11-20 | アーチ・パーソナル・ケアー・プロダクツ・リミテッド・パートナーシップ | 連続または同時発酵の抽出物を含有する組成物 |
| US10272121B2 (en) | 2011-10-25 | 2019-04-30 | Arch Personal Care Product, Lp | Composition containing an extract of a sequential or simultaneous fermentation |
| IT202000003233A1 (it) * | 2020-02-18 | 2021-08-18 | Aileens Pharma S R L | Ceppo batterico e suoi usi medici |
| WO2021165434A1 (en) * | 2020-02-18 | 2021-08-26 | Aileens Pharma S.R.L. | Cutibacterium acnes strain and medical uses thereof |
| JP2023518665A (ja) * | 2020-02-18 | 2023-05-08 | アイリーンズ ファルマ ソシエタ ア レスポンサビリタ リミタータ | キューティバクテリウム・アクネス（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ）株及びその医学的使用 |
| US12508288B2 (en) | 2020-02-18 | 2025-12-30 | Aileens Pharma S.R.L. | Bacterial strain and medical uses thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3580453B2 (ja) | 2004-10-20 |
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