JPH0987294A - 配糖体の製造方法 - Google Patents
配糖体の製造方法Info
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- JPH0987294A JPH0987294A JP7245803A JP24580395A JPH0987294A JP H0987294 A JPH0987294 A JP H0987294A JP 7245803 A JP7245803 A JP 7245803A JP 24580395 A JP24580395 A JP 24580395A JP H0987294 A JPH0987294 A JP H0987294A
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- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
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- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 操作工程が容易で、しかもアルコール性水酸
基を有する化合物の他に、フェノール性水酸基を有する
化合物やフラボノイド類縁化合物の配糖体を広く製造す
ることのできる配糖体の製造方法を提供する。 【解決手段】 水酸基を有する化合物とα−１、４結合
を持つグルカンにα−グルコシダーゼを作用させて配糖
体を製造するに際し、α−グルコシダーゼとしてバチル
ス ステアロサーモフィラス（Bacillus stearothermop
hilus ）由来のα−グルコシダーゼを用いることを特徴
とする配糖体の製造方法。
基を有する化合物の他に、フェノール性水酸基を有する
化合物やフラボノイド類縁化合物の配糖体を広く製造す
ることのできる配糖体の製造方法を提供する。 【解決手段】 水酸基を有する化合物とα−１、４結合
を持つグルカンにα−グルコシダーゼを作用させて配糖
体を製造するに際し、α−グルコシダーゼとしてバチル
ス ステアロサーモフィラス（Bacillus stearothermop
hilus ）由来のα−グルコシダーゼを用いることを特徴
とする配糖体の製造方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、好熱性菌バチルス
ステアロサーモフィラス（Bacillus stearothermophi
lus ）由来のα−グルコシダーゼを利用した配糖体の製
造方法に関するものである。
ステアロサーモフィラス（Bacillus stearothermophi
lus ）由来のα−グルコシダーゼを利用した配糖体の製
造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】配糖体の製造方法として、従来、α−グ
ルコシダーゼを用いて、マルトースをはじめとするマル
トオリゴ糖、アミロース、アミロペクチン又は各種デン
プン等のα−１、４結合を持つグルカンを糖供与体とし
て製造する方法が報告されている（特開平４−１１２７
９８号公報）が、この方法では、アルコール性水酸基を
有する化合物を糖受容体とすることは報告されているも
のの、フェノール性水酸基及びフラボノイド類縁化合物
を糖受容体とする配糖体の製造方法については、報告さ
れていない。
ルコシダーゼを用いて、マルトースをはじめとするマル
トオリゴ糖、アミロース、アミロペクチン又は各種デン
プン等のα−１、４結合を持つグルカンを糖供与体とし
て製造する方法が報告されている（特開平４−１１２７
９８号公報）が、この方法では、アルコール性水酸基を
有する化合物を糖受容体とすることは報告されているも
のの、フェノール性水酸基及びフラボノイド類縁化合物
を糖受容体とする配糖体の製造方法については、報告さ
れていない。
【０００３】また、アミラーゼの一種であるシクロデキ
ストリン生成酵素を用いて配糖体を製造する方法も報告
されている（日本農芸化学会誌Ｖｏｌ．６７、Ｎｏ．
５、１９９３、Ｐ９３）が、この方法では、アルコール
性水酸基を有する化合物の他に、フェノール性水酸基
や、フラボノイド類縁化合物の配糖体を製造することが
できるものの、反応組成物が複雑になるため、もう１段
酵素処理（グルコアミラーゼ処理）工程を経ねばなら
ず、操作工程及びコストの面から問題が多かった。
ストリン生成酵素を用いて配糖体を製造する方法も報告
されている（日本農芸化学会誌Ｖｏｌ．６７、Ｎｏ．
５、１９９３、Ｐ９３）が、この方法では、アルコール
性水酸基を有する化合物の他に、フェノール性水酸基
や、フラボノイド類縁化合物の配糖体を製造することが
できるものの、反応組成物が複雑になるため、もう１段
酵素処理（グルコアミラーゼ処理）工程を経ねばなら
ず、操作工程及びコストの面から問題が多かった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、操作工程が
容易で、しかもアルコール性水酸基を有する化合物の他
に、フェノール性水酸基を有する化合物やフラボノイド
類縁化合物の配糖体を製造することのできる配糖体の製
造方法を提供することを目的とするものである。
容易で、しかもアルコール性水酸基を有する化合物の他
に、フェノール性水酸基を有する化合物やフラボノイド
類縁化合物の配糖体を製造することのできる配糖体の製
造方法を提供することを目的とするものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、このよう
な課題を解決するために鋭意検討の結果、バチルスステ
アロサーモフィラス（Bacillus stearothermophilus ）
由来のα−グルコシダーゼが、水酸基を有する化合物に
対して広く糖転移能を有するということを見出し、本発
明に到達した。
な課題を解決するために鋭意検討の結果、バチルスステ
アロサーモフィラス（Bacillus stearothermophilus ）
由来のα−グルコシダーゼが、水酸基を有する化合物に
対して広く糖転移能を有するということを見出し、本発
明に到達した。
【０００６】すなわち、本発明は、水酸基を有する化合
物とα−１、４結合を持つグルカンにα−グルコシダー
ゼを作用させて配糖体を製造するに際し、α−グルコシ
ダーゼとしてバチルス ステアロサーモフィラス（Baci
llus stearothermophilus ）由来のα−グルコシダーゼ
を用いることを特徴とする配糖体の製造方法を要旨とす
るものである。
物とα−１、４結合を持つグルカンにα−グルコシダー
ゼを作用させて配糖体を製造するに際し、α−グルコシ
ダーゼとしてバチルス ステアロサーモフィラス（Baci
llus stearothermophilus ）由来のα−グルコシダーゼ
を用いることを特徴とする配糖体の製造方法を要旨とす
るものである。
【０００７】
【発明の実施の形態】本発明に用いられる水酸基を有す
る化合物としては、例えば、メタノール、エタノール、
１−プロパノール、１−フェニルエタノール、フェネチ
ルアルコール、ゲラニオール、アスコルビン酸、コウジ
酸、１−ブタノール、ベンジルアルコール、フェノキシ
エタノール、２−プロパノール、１−オクタノール、３
−オクタノール、シトロネロール等のアルコール性水酸
基を有する化合物や、ジメトキシフェノール、カテコー
ル、レゾルシノール、ヒドロキノン、バニリン、カテコ
ール、ピガノール、オイゲノール等のフェノール性水酸
基を有する化合物、ルチン、フラボノール、フラバノ
ン、フラボン等のフラボノイド類縁化合物等が挙げられ
る。
る化合物としては、例えば、メタノール、エタノール、
１−プロパノール、１−フェニルエタノール、フェネチ
ルアルコール、ゲラニオール、アスコルビン酸、コウジ
酸、１−ブタノール、ベンジルアルコール、フェノキシ
エタノール、２−プロパノール、１−オクタノール、３
−オクタノール、シトロネロール等のアルコール性水酸
基を有する化合物や、ジメトキシフェノール、カテコー
ル、レゾルシノール、ヒドロキノン、バニリン、カテコ
ール、ピガノール、オイゲノール等のフェノール性水酸
基を有する化合物、ルチン、フラボノール、フラバノ
ン、フラボン等のフラボノイド類縁化合物等が挙げられ
る。
【０００８】また、本発明に用いられるα−１、４結合
を持つグルカンとしては、例えば、マルトース等のマル
トオリゴ糖、アミロース、アミロペクチン、各種デンプ
ン等が挙げられる。
を持つグルカンとしては、例えば、マルトース等のマル
トオリゴ糖、アミロース、アミロペクチン、各種デンプ
ン等が挙げられる。
【０００９】本発明に用いられるバチルス ステアロサ
ーモフィラス（Bacillus stearothermophilus ）由来の
α−グルコシダーゼとしては、市販の酵素を用いてもよ
く（例えば、シグマ社製、Ｇ３６５１）、また、α−グ
ルコシダーゼ産生能を有するバチルス ステアロサーモ
フィラス（Bacillus stearothermophilus ）に属する細
菌、例えばバチルス ステアロサーモフィラス（Bacill
us stearothermophilus ）ＵＫ５６３株（ＦＥＲＭ Ｐ
−７２７５）を培養することによって得られたものを用
いてもよい。
ーモフィラス（Bacillus stearothermophilus ）由来の
α−グルコシダーゼとしては、市販の酵素を用いてもよ
く（例えば、シグマ社製、Ｇ３６５１）、また、α−グ
ルコシダーゼ産生能を有するバチルス ステアロサーモ
フィラス（Bacillus stearothermophilus ）に属する細
菌、例えばバチルス ステアロサーモフィラス（Bacill
us stearothermophilus ）ＵＫ５６３株（ＦＥＲＭ Ｐ
−７２７５）を培養することによって得られたものを用
いてもよい。
【００１０】以下、このバチルス ステアロサーモフィ
ラス（Bacillus stearothermophilus ）ＵＫ５６３株の
産生するα−グルコシダーゼの理化学的性質について説
明する。
ラス（Bacillus stearothermophilus ）ＵＫ５６３株の
産生するα−グルコシダーゼの理化学的性質について説
明する。
【００１１】（１）作用 α−１、４結合を持つグルカンの存在下で、アルコール
性水酸基を有する化合物、フェノール性水酸基を有する
化合物又はフラボノイド類縁化合物等の水酸基に、α結
合で糖転移を行う。
性水酸基を有する化合物、フェノール性水酸基を有する
化合物又はフラボノイド類縁化合物等の水酸基に、α結
合で糖転移を行う。
【００１２】（２）至適ｐＨ ａ．加水分解 ｐ−ニトロフェニル−α−グルコピラノシド（以下、Ｐ
ＮＰＧと略記する）を基質として各ｐＨのリン酸緩衝液
（ただし、ｐＨ６．０以下では酢酸緩衝液を、ＰＨ９．
０以上ではグリシン−ＮａＯＨ緩衝液を用いた）中で３
０℃で１５分間反応させた結果、図１に示すとおり、至
適ｐＨはｐＨ６．０であった。図１は、この酵素の加水
分解活性のｐＨによる変化を示すグラフであり、縦軸に
酵素活性を、横軸にｐＨを示している。なお、酵素活性
は測定値が最高値を示したとき（ｐＨ６．０）の活性を
１００とした相対活性で表した。
ＮＰＧと略記する）を基質として各ｐＨのリン酸緩衝液
（ただし、ｐＨ６．０以下では酢酸緩衝液を、ＰＨ９．
０以上ではグリシン−ＮａＯＨ緩衝液を用いた）中で３
０℃で１５分間反応させた結果、図１に示すとおり、至
適ｐＨはｐＨ６．０であった。図１は、この酵素の加水
分解活性のｐＨによる変化を示すグラフであり、縦軸に
酵素活性を、横軸にｐＨを示している。なお、酵素活性
は測定値が最高値を示したとき（ｐＨ６．０）の活性を
１００とした相対活性で表した。
【００１３】ｂ．糖転移 マルトースを糖供与体、ヒドロキノンを糖受容体として
各ｐＨのリン酸緩衝液（ただし、ｐＨ６．０以下では酢
酸緩衝液を、ＰＨ９．０以上ではグリシン−ＮａＯＨ緩
衝液を用いた）中で、４０℃で３時間反応させた結果、
図２に示すとおり、至適ｐＨは９．０であった。図２
は、この酵素の糖転移活性のｐＨによる変化を示すグラ
フであり、縦軸に糖転移率を、横軸にｐＨを示してい
る。なお、糖転移率は測定値が最高値を示したとき（ｐ
Ｈ９．０）の転移率を１００とした相対転移率で表し
た。
各ｐＨのリン酸緩衝液（ただし、ｐＨ６．０以下では酢
酸緩衝液を、ＰＨ９．０以上ではグリシン−ＮａＯＨ緩
衝液を用いた）中で、４０℃で３時間反応させた結果、
図２に示すとおり、至適ｐＨは９．０であった。図２
は、この酵素の糖転移活性のｐＨによる変化を示すグラ
フであり、縦軸に糖転移率を、横軸にｐＨを示してい
る。なお、糖転移率は測定値が最高値を示したとき（ｐ
Ｈ９．０）の転移率を１００とした相対転移率で表し
た。
【００１４】（３）作用適温の範囲 ＰＮＰＧを基質として０．１Ｍのリン酸カリウム緩衝液
（ｐＨ８．０）中で各温度で１５分間反応させた結果、
図３に示すとおり、作用適温の範囲は３０〜６０℃であ
った。図３は、この酵素の活性に対する温度の影響を示
すグラフであり、縦軸に酵素活性を、横軸に温度を示し
ており、酵素活性は４０℃での測定値を１００とした相
対活性で表した。
（ｐＨ８．０）中で各温度で１５分間反応させた結果、
図３に示すとおり、作用適温の範囲は３０〜６０℃であ
った。図３は、この酵素の活性に対する温度の影響を示
すグラフであり、縦軸に酵素活性を、横軸に温度を示し
ており、酵素活性は４０℃での測定値を１００とした相
対活性で表した。
【００１５】（４）温度による失活の条件 １００℃において２０分間処理することにより完全に失
活する。
活する。
【００１６】（５）分子量 ドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気
泳動による測定で約５０、０００である。
泳動による測定で約５０、０００である。
【００１７】このような酵素は、上記のようなバチルス
ステアロサーモフィラス（Bacillus stearothermophi
lus ）を培養、精製することにより得ることができる。
培養に用いられる培地としては、炭素源としては、例え
ば、グルコース、シュークロース、フルクトース、澱粉
加水分解物、糖蜜、亜硫酸パルプ廃液の糖類、酢酸、乳
酸等の有機酸類、さらに使用する細菌が資化しうるアル
コール類、油脂、脂肪酸及びグリセリン等が使用でき、
窒素源としては、例えば、硫酸アンモニウム、塩化アン
モニウム、リン酸アンモニウム、アンモニア、アミノ
酸、ペプトン、肉エキス、酵母エキス等の無機又は有機
物が使用できる。さらに無機塩類として、例えば、カリ
ウム、コバルト等の各塩類や、必要に応じて微量金属
塩、コーンスティープリカー、ビタミン類、核酸等を使
用してもよく、細菌の一般的培地が使用できる。
ステアロサーモフィラス（Bacillus stearothermophi
lus ）を培養、精製することにより得ることができる。
培養に用いられる培地としては、炭素源としては、例え
ば、グルコース、シュークロース、フルクトース、澱粉
加水分解物、糖蜜、亜硫酸パルプ廃液の糖類、酢酸、乳
酸等の有機酸類、さらに使用する細菌が資化しうるアル
コール類、油脂、脂肪酸及びグリセリン等が使用でき、
窒素源としては、例えば、硫酸アンモニウム、塩化アン
モニウム、リン酸アンモニウム、アンモニア、アミノ
酸、ペプトン、肉エキス、酵母エキス等の無機又は有機
物が使用できる。さらに無機塩類として、例えば、カリ
ウム、コバルト等の各塩類や、必要に応じて微量金属
塩、コーンスティープリカー、ビタミン類、核酸等を使
用してもよく、細菌の一般的培地が使用できる。
【００１８】また、培養条件としては、これらの培地を
用いて、３０〜６５℃、好ましくは４５〜６０℃、最適
には５８℃で、２〜６時間、好気的に培養すればよい。
用いて、３０〜６５℃、好ましくは４５〜６０℃、最適
には５８℃で、２〜６時間、好気的に培養すればよい。
【００１９】本発明に用いられるα−グルコシダーゼ
は、このようにして得られた菌体の菌体破砕液を、ゲル
ろ過クロマトグラフィー、疏水性クロマトグラフィー、
アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマ
トグラフィー等の各種クロマトグラフィーを用いて精製
することにより得ることができる。
は、このようにして得られた菌体の菌体破砕液を、ゲル
ろ過クロマトグラフィー、疏水性クロマトグラフィー、
アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマ
トグラフィー等の各種クロマトグラフィーを用いて精製
することにより得ることができる。
【００２０】本発明において、水酸基を有する化合物と
α−１、４結合を持つグルカンにα−グルコシダーゼを
作用させる際の、反応液中の水酸基を有する化合物の濃
度としては、０．１〜５０重量％であることが好まし
く、特に好ましくは１〜１０重量％である。この場合、
水に難溶な基質に対しては基質が溶解するように、アセ
トン、アセトニトリル等の水混和性有機溶媒を適当量添
加してもよい。また、α−１、４結合を持つグルカンの
濃度としては、１〜８０重量％が好ましく、特にこのま
しくは１０〜５０重量％である。また、酵素の添加量と
しては、５〜３０Ｕ／ミリリットルとなるように添加す
ることが好ましく、特に１０〜２０Ｕ／ミリリットルと
なるように添加することが好ましい。
α−１、４結合を持つグルカンにα−グルコシダーゼを
作用させる際の、反応液中の水酸基を有する化合物の濃
度としては、０．１〜５０重量％であることが好まし
く、特に好ましくは１〜１０重量％である。この場合、
水に難溶な基質に対しては基質が溶解するように、アセ
トン、アセトニトリル等の水混和性有機溶媒を適当量添
加してもよい。また、α−１、４結合を持つグルカンの
濃度としては、１〜８０重量％が好ましく、特にこのま
しくは１０〜５０重量％である。また、酵素の添加量と
しては、５〜３０Ｕ／ミリリットルとなるように添加す
ることが好ましく、特に１０〜２０Ｕ／ミリリットルと
なるように添加することが好ましい。
【００２１】反応条件としては、３０〜６０℃、好まし
くは４０〜５０℃で、３〜２０時間反応させればよい。
くは４０〜５０℃で、３〜２０時間反応させればよい。
【００２２】このようにして得られた配糖体は、反応後
にグルコアミラーゼ処理等の後処理を行う必要は全くな
い。反応終了後は各種溶媒による抽出及び各種クロマト
グラフィーによる精製により、配糖体の精製標品を得る
ことができる。
にグルコアミラーゼ処理等の後処理を行う必要は全くな
い。反応終了後は各種溶媒による抽出及び各種クロマト
グラフィーによる精製により、配糖体の精製標品を得る
ことができる。
【００２３】
【実施例】以下、本発明を実施例によって具体的に説明
する。なお、本発明におけるα−グルコシダーゼの活性
及び糖転移率は以下のようにして測定した。
する。なお、本発明におけるα−グルコシダーゼの活性
及び糖転移率は以下のようにして測定した。
【００２４】（１）α−グルコシダーゼ活性の測定 α−グルコシダーゼ酵素液（又は蒸留水に凍結乾燥した
酵素を溶解したもの）を、１０ｍＭのリン酸緩衝溶液
（ｐＨ７．５）で０．００６〜０．０２２Ｕ／ミリリッ
トルとなるように希釈して、酵素溶液を調整した。
酵素を溶解したもの）を、１０ｍＭのリン酸緩衝溶液
（ｐＨ７．５）で０．００６〜０．０２２Ｕ／ミリリッ
トルとなるように希釈して、酵素溶液を調整した。
【００２５】０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ６．３）
１．０ミリリットルに、２０ｍＭのＰＮＰＧ溶液０．５
ミリリットルを加え、３０℃で５分間インキュベーショ
ンした後、酵素溶液０．５ミリリットルを添加し、３０
℃で正確に１５分間インキュベーションした。その後、
０．２Ｍの炭酸ナトリウム溶液２．０ミリリットルを添
加し、４００ｎｍにおける吸光度（Ｃ）を測定した。ま
た、ブランクとして上記酵素溶液の代わりに精製水を用
いて同様の操作を行って４００ｎｍにおける吸光度（Ｃ
ｂ）を測定した。α−グルコシダーゼ活性（Ａ）は、以
下の式より算出した。
１．０ミリリットルに、２０ｍＭのＰＮＰＧ溶液０．５
ミリリットルを加え、３０℃で５分間インキュベーショ
ンした後、酵素溶液０．５ミリリットルを添加し、３０
℃で正確に１５分間インキュベーションした。その後、
０．２Ｍの炭酸ナトリウム溶液２．０ミリリットルを添
加し、４００ｎｍにおける吸光度（Ｃ）を測定した。ま
た、ブランクとして上記酵素溶液の代わりに精製水を用
いて同様の操作を行って４００ｎｍにおける吸光度（Ｃ
ｂ）を測定した。α−グルコシダーゼ活性（Ａ）は、以
下の式より算出した。
【００２６】
【数１】
【００２７】なお、本発明においてα−グルコシダーゼ
活性の１Ｕは、上記反応系で３０℃で１分間に１μｍｏ
ｌのＰＮＰＧを加水分解できる酵素量と定義する。
活性の１Ｕは、上記反応系で３０℃で１分間に１μｍｏ
ｌのＰＮＰＧを加水分解できる酵素量と定義する。
【００２８】（２）糖転移率の測定 α−１、４結合を持つグルカン（糖供与体）と水酸基を
有する化合物（糖受容体）を含む８０ｍＭのほう酸緩衝
溶液（ｐＨ９）に、α−グルコシダーゼを添加し、反応
させた後、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ、Ｏ
ＤＳカラムＣ−１８（ミリポア社製）を用い、４０％の
メタノール溶液で溶出し２５４ｎｍの吸光度により検出
した）にて分析を行った。また、コントロールとして酵
素無添加の溶液を調製し、同様の条件で分析を行った。
糖転移率は、以下の式より算出した。
有する化合物（糖受容体）を含む８０ｍＭのほう酸緩衝
溶液（ｐＨ９）に、α−グルコシダーゼを添加し、反応
させた後、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ、Ｏ
ＤＳカラムＣ−１８（ミリポア社製）を用い、４０％の
メタノール溶液で溶出し２５４ｎｍの吸光度により検出
した）にて分析を行った。また、コントロールとして酵
素無添加の溶液を調製し、同様の条件で分析を行った。
糖転移率は、以下の式より算出した。
【００２９】
【数２】
【００３０】参考例１（α−グルコシダーゼの調製） 培地（グルコース ０．３５重量％、酵母エキス ０．
３重量％、ペプトン０．２重量％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．
０４重量％、Ｎａ2 ＨＰＯ4 ・１２Ｈ2 Ｏ０．０４重量
％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．１重量％、ｐＨ７．
８）２０リットルに、バチルス ステアロサーモフィラ
ス（Bacillus stearothermophilus ）ＵＫ５６３（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−７２７５）を植菌し、５８℃で５時間培養を
行った後、培養液を遠心分離してバチルス ステアロサ
ーモフィラス（Bacillus stearothermophilus ）ＵＫ５
６３の湿菌体約６０ｇを得た。
３重量％、ペプトン０．２重量％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．
０４重量％、Ｎａ2 ＨＰＯ4 ・１２Ｈ2 Ｏ０．０４重量
％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．１重量％、ｐＨ７．
８）２０リットルに、バチルス ステアロサーモフィラ
ス（Bacillus stearothermophilus ）ＵＫ５６３（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−７２７５）を植菌し、５８℃で５時間培養を
行った後、培養液を遠心分離してバチルス ステアロサ
ーモフィラス（Bacillus stearothermophilus ）ＵＫ５
６３の湿菌体約６０ｇを得た。
【００３１】得られた湿菌体約６０ｇを２５ｍＭのリン
酸緩衝溶液（ｐＨ６）６００ミリリットルに懸濁した
後、フレンチプレンス（大日本製薬社製）で菌体を破砕
した。この菌体破砕液をＤＥＡＥ−セファロースカラム
クロマトグラフィー（２０ｃｍφ×１０ｃｍ、ファルマ
シア社製）にアプライし、２５ｍＭのリン酸緩衝溶液
（ｐＨ６）の０〜０．２ＭのＫＣｌ濃度勾配により溶出
を行った。得られた活性画分を限外ろ過膜（旭化成社
製）を用いて脱塩、濃縮を行った後、フェニルセファロ
ースカラムクロマトグラフィー（５ｃｍφ×１０ｃｍ、
ファルマシア社製）にアプライし、２５ｍＭのリン酸緩
衝液（ｐＨ６）の０．８〜０Ｍの硫安濃度勾配により溶
出を行った。得られた活性画分を限外ろ過膜（旭化成社
製）を用いて脱塩、濃縮を行った後、凍結乾燥させるこ
とによりα−グルコシダーゼの精製標品約２００ｍｇを
得た。このような方法で精製した酵素は、ＳＤＳ−ＰＡ
ＧＥで単一のバンドを示した。
酸緩衝溶液（ｐＨ６）６００ミリリットルに懸濁した
後、フレンチプレンス（大日本製薬社製）で菌体を破砕
した。この菌体破砕液をＤＥＡＥ−セファロースカラム
クロマトグラフィー（２０ｃｍφ×１０ｃｍ、ファルマ
シア社製）にアプライし、２５ｍＭのリン酸緩衝溶液
（ｐＨ６）の０〜０．２ＭのＫＣｌ濃度勾配により溶出
を行った。得られた活性画分を限外ろ過膜（旭化成社
製）を用いて脱塩、濃縮を行った後、フェニルセファロ
ースカラムクロマトグラフィー（５ｃｍφ×１０ｃｍ、
ファルマシア社製）にアプライし、２５ｍＭのリン酸緩
衝液（ｐＨ６）の０．８〜０Ｍの硫安濃度勾配により溶
出を行った。得られた活性画分を限外ろ過膜（旭化成社
製）を用いて脱塩、濃縮を行った後、凍結乾燥させるこ
とによりα−グルコシダーゼの精製標品約２００ｍｇを
得た。このような方法で精製した酵素は、ＳＤＳ−ＰＡ
ＧＥで単一のバンドを示した。
【００３２】実施例１ 糖受容体として、マルトース、ステビオシド、ヒドロキ
ノン、アスコルビン酸、コウジ酸、メタノール、エタノ
ール、１−プロパノール、１−ブタノール、ベンジルア
ルコール、フェネチルアルコール、フェノキシエタノー
ル、２−プロパノール、１−フェニルエタノール、ルチ
ン、バニリン、レゾルシノール、カテコール、ピロガノ
ール、ゲラニオール、１−オクタノール、３−オクタノ
ール、シトロネロール、オイゲノール、３，４−ジメト
キシフェノールを用いて、以下のようにして配糖体を製
造した。
ノン、アスコルビン酸、コウジ酸、メタノール、エタノ
ール、１−プロパノール、１−ブタノール、ベンジルア
ルコール、フェネチルアルコール、フェノキシエタノー
ル、２−プロパノール、１−フェニルエタノール、ルチ
ン、バニリン、レゾルシノール、カテコール、ピロガノ
ール、ゲラニオール、１−オクタノール、３−オクタノ
ール、シトロネロール、オイゲノール、３，４−ジメト
キシフェノールを用いて、以下のようにして配糖体を製
造した。
【００３３】マルトース１０重量％、糖受容体２重量％
（ステビオシドは１重量％）、参考例１で調製したα−
グルコシダーゼの１０Ｕ／ミリリットル溶液を含む反応
液１ミリリットルを４０℃で３時間反応させた。配糖体
が製造されているかどうかは、ＴＬＣを用いて確認し
た。その結果を表１に示す。
（ステビオシドは１重量％）、参考例１で調製したα−
グルコシダーゼの１０Ｕ／ミリリットル溶液を含む反応
液１ミリリットルを４０℃で３時間反応させた。配糖体
が製造されているかどうかは、ＴＬＣを用いて確認し
た。その結果を表１に示す。
【００３４】
【表１】
【００３５】表１からわかるように、本発明の方法によ
れば、アルコール性水酸基を有する化合物の他に、フェ
ノール性水酸基を有する化合物及びフラボノイド類縁化
合物においても配糖体を製造することができた。
れば、アルコール性水酸基を有する化合物の他に、フェ
ノール性水酸基を有する化合物及びフラボノイド類縁化
合物においても配糖体を製造することができた。
【００３６】実施例２（フェネチルグルコシドの製造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
にフェネチルアルコール１０ｇ及びマルトース５０ｇを
溶解し、この溶液に参考例１で調製したα−グルコシダ
ーゼを１０Ｕ／ミリリットルとなるように添加した。こ
の溶液を４０℃で１９時間反応させた後、１００℃で５
分間処理して反応を停止させた。この反応液の糖転移率
は３４％であった。
にフェネチルアルコール１０ｇ及びマルトース５０ｇを
溶解し、この溶液に参考例１で調製したα−グルコシダ
ーゼを１０Ｕ／ミリリットルとなるように添加した。こ
の溶液を４０℃で１９時間反応させた後、１００℃で５
分間処理して反応を停止させた。この反応液の糖転移率
は３４％であった。
【００３７】次に、得られた反応物中の未反応の原料を
クロロホルムにより抽出除去した。水層画分を５０ミリ
リットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）
カラムに通液し、フェネチルグルコシドを吸着させ、蒸
留水１リットルでカラムを洗浄した後、５００ミリリッ
トルのメタノールでフェネチルグルコシドを溶出させ
た。得られたフェネチルグルコシド画分を減圧濃縮した
後、凍結乾燥することによりフェネチルグルコシドの粉
末５．６ｇを得た。
クロロホルムにより抽出除去した。水層画分を５０ミリ
リットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）
カラムに通液し、フェネチルグルコシドを吸着させ、蒸
留水１リットルでカラムを洗浄した後、５００ミリリッ
トルのメタノールでフェネチルグルコシドを溶出させ
た。得られたフェネチルグルコシド画分を減圧濃縮した
後、凍結乾燥することによりフェネチルグルコシドの粉
末５．６ｇを得た。
【００３８】得られたフェネチルグルコシドをα−グル
コシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で処理した
後、ＨＰＬＣで分析を行ったところフェネチルグルコシ
ドのピークがなくなり、フェネチルアルコールのピーク
が増加したことから、このフェネチルグルコシドは、フ
ェネチルアルコールにグルコースがα結合した化合物で
あることがわかる。
コシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で処理した
後、ＨＰＬＣで分析を行ったところフェネチルグルコシ
ドのピークがなくなり、フェネチルアルコールのピーク
が増加したことから、このフェネチルグルコシドは、フ
ェネチルアルコールにグルコースがα結合した化合物で
あることがわかる。
【００３９】実施例３（１−フェニルエチルグルコシド
の製造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
に１−フェニルエタノール１０ｇ及びマルトース５０ｇ
を溶解し、この溶液に参考例１で調製したα−グルコシ
ダーゼを１０Ｕ／ミリリットルとなるように添加した。
この溶液を４０℃で１７時間反応させた後、１００℃で
５分間処理して反応を停止させた。この反応液の糖転移
率は１８％であった。
の製造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
に１−フェニルエタノール１０ｇ及びマルトース５０ｇ
を溶解し、この溶液に参考例１で調製したα−グルコシ
ダーゼを１０Ｕ／ミリリットルとなるように添加した。
この溶液を４０℃で１７時間反応させた後、１００℃で
５分間処理して反応を停止させた。この反応液の糖転移
率は１８％であった。
【００４０】次に、得られた反応物中の未反応の原料を
クロロホルムにより抽出除去した。水層画分を５０ミリ
リットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）
カラムに通液し、１−フェニルエチルグルコシドを吸着
させ、蒸留水１リットルでカラムを洗浄した後、５００
ミリリットルのメタノールで１−フェニルエチルグルコ
シドを溶出させた。得られた１−フェニルエチルグルコ
シド画分を減圧濃縮した後、凍結乾燥することにより１
−フェニルエチルグルコシドの粉末２．７ｇを得た。
クロロホルムにより抽出除去した。水層画分を５０ミリ
リットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）
カラムに通液し、１−フェニルエチルグルコシドを吸着
させ、蒸留水１リットルでカラムを洗浄した後、５００
ミリリットルのメタノールで１−フェニルエチルグルコ
シドを溶出させた。得られた１−フェニルエチルグルコ
シド画分を減圧濃縮した後、凍結乾燥することにより１
−フェニルエチルグルコシドの粉末２．７ｇを得た。
【００４１】得られた１−フェニルエチルグルコシドを
α−グルコシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で
処理した後、ＨＰＬＣで分析を行ったところ１−フェニ
ルエチルグルコシドのピークがなくなり、１−フェニル
エタノールのピークが増加したことから、この１−フェ
ニルエチルグルコシドは、１−フェニルエタノールにグ
ルコースがα結合した化合物であることがわかる。
α−グルコシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で
処理した後、ＨＰＬＣで分析を行ったところ１−フェニ
ルエチルグルコシドのピークがなくなり、１−フェニル
エタノールのピークが増加したことから、この１−フェ
ニルエチルグルコシドは、１−フェニルエタノールにグ
ルコースがα結合した化合物であることがわかる。
【００４２】実施例４（ヒドロキノングルコシドの製
造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
にヒドロキノン１０ｇ及びマルトース５０ｇを溶解し、
この溶液に参考例１で調製したα−グルコシダーゼを１
０Ｕ／ミリリットルとなるように添加した。この溶液を
４０℃で３時間反応させた後、１００℃で５分間処理し
て反応を停止させた。この反応液の糖転移率は３０％で
あった。
造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
にヒドロキノン１０ｇ及びマルトース５０ｇを溶解し、
この溶液に参考例１で調製したα−グルコシダーゼを１
０Ｕ／ミリリットルとなるように添加した。この溶液を
４０℃で３時間反応させた後、１００℃で５分間処理し
て反応を停止させた。この反応液の糖転移率は３０％で
あった。
【００４３】次に、得られた反応物中の未反応の原料を
酢酸エチルにより抽出除去した。水層画分を５０ミリリ
ットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）カ
ラムに通液し、ヒドロキノングルコシドを吸着させ、蒸
留水１リットルでカラムを洗浄した後、５００ミリリッ
トルのメタノールでヒドロキノングルコシドを溶出させ
た。得られたヒドロキノングルコシド画分を減圧濃縮し
た後、凍結乾燥することによりヒドロキノングルコシド
の粉末５．２ｇを得た。
酢酸エチルにより抽出除去した。水層画分を５０ミリリ
ットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）カ
ラムに通液し、ヒドロキノングルコシドを吸着させ、蒸
留水１リットルでカラムを洗浄した後、５００ミリリッ
トルのメタノールでヒドロキノングルコシドを溶出させ
た。得られたヒドロキノングルコシド画分を減圧濃縮し
た後、凍結乾燥することによりヒドロキノングルコシド
の粉末５．２ｇを得た。
【００４４】得られたヒドロキノングルコシドをα−グ
ルコシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で処理し
た後、ＨＰＬＣで分析を行ったところヒドロキノングル
コシドのピークがなくなり、ヒドロキノンのピークが増
加したことから、このヒドロキノングルコシドは、ヒド
ロキノンにグルコースがα結合した化合物であることが
わかる。
ルコシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で処理し
た後、ＨＰＬＣで分析を行ったところヒドロキノングル
コシドのピークがなくなり、ヒドロキノンのピークが増
加したことから、このヒドロキノングルコシドは、ヒド
ロキノンにグルコースがα結合した化合物であることが
わかる。
【００４５】実施例５（ルチングルコシドの製造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
にルチン１０ｇ及びマルトース５０ｇを溶解し、この溶
液に参考例１で調製したα−グルコシダーゼを１０Ｕ／
ミリリットルとなるように添加した。この溶液を４０℃
で１７時間反応させた後、１００℃で５分間処理して反
応を停止させた。この反応液の糖転移率は１２％であっ
た。
にルチン１０ｇ及びマルトース５０ｇを溶解し、この溶
液に参考例１で調製したα−グルコシダーゼを１０Ｕ／
ミリリットルとなるように添加した。この溶液を４０℃
で１７時間反応させた後、１００℃で５分間処理して反
応を停止させた。この反応液の糖転移率は１２％であっ
た。
【００４６】次に、得られた反応物中の未反応の原料を
クロロホルムにより抽出除去した。水層画分を５０ミリ
リットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）
カラムに通液し、ルチングルコシドを吸着させ、蒸留水
１リットルでカラムを洗浄した後、５００ミリリットル
のメタノールでルチングルコシドを溶出させた。得られ
たルチングルコシド画分を減圧濃縮した後、凍結乾燥す
ることによりルチングルコシドの粉末３．２ｇを得た。
クロロホルムにより抽出除去した。水層画分を５０ミリ
リットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）
カラムに通液し、ルチングルコシドを吸着させ、蒸留水
１リットルでカラムを洗浄した後、５００ミリリットル
のメタノールでルチングルコシドを溶出させた。得られ
たルチングルコシド画分を減圧濃縮した後、凍結乾燥す
ることによりルチングルコシドの粉末３．２ｇを得た。
【００４７】得られたルチングルコシドをα−グルコシ
ダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で処理した後、
ＨＰＬＣで分析を行ったところルチングルコシドのピー
クがなくなり、ルチンのピークが増加したことから、こ
のルチングルコシドは、ルチンにグルコースがα結合し
た化合物であることがわかる。
ダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で処理した後、
ＨＰＬＣで分析を行ったところルチングルコシドのピー
クがなくなり、ルチンのピークが増加したことから、こ
のルチングルコシドは、ルチンにグルコースがα結合し
た化合物であることがわかる。
【００４８】実施例６（３、４−ジメトキシフェニルグ
ルコシドの製造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
に３、４−ジメトキシフェノール１０ｇ及びマルトース
５０ｇを溶解し、この溶液に参考例１で調製したα−グ
ルコシダーゼを１０Ｕ／ミリリットルとなるように添加
した。この溶液を４０℃で３時間反応させた後、１００
℃で５分間処理して反応を停止させた。この反応液の糖
転移率は１２％であった。
ルコシドの製造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
に３、４−ジメトキシフェノール１０ｇ及びマルトース
５０ｇを溶解し、この溶液に参考例１で調製したα−グ
ルコシダーゼを１０Ｕ／ミリリットルとなるように添加
した。この溶液を４０℃で３時間反応させた後、１００
℃で５分間処理して反応を停止させた。この反応液の糖
転移率は１２％であった。
【００４９】次に、得られた反応物中の未反応の原料を
酢酸エチルにより抽出除去した。水層画分を５０ミリリ
ットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）カ
ラムに通液し、３、４−ジメトキシフェニルグルコシド
を吸着させ、蒸留水１リットルでカラムを洗浄した後、
５００ミリリットルのメタノールで３、４−ジメトキシ
フェニルグルコシドを溶出させた。得られた３、４−ジ
メトキシフェニルグルコシド画分を減圧濃縮した後、凍
結乾燥することにより３、４−ジメトキシフェニルグル
コシドの粉末１．８ｇを得た。
酢酸エチルにより抽出除去した。水層画分を５０ミリリ
ットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）カ
ラムに通液し、３、４−ジメトキシフェニルグルコシド
を吸着させ、蒸留水１リットルでカラムを洗浄した後、
５００ミリリットルのメタノールで３、４−ジメトキシ
フェニルグルコシドを溶出させた。得られた３、４−ジ
メトキシフェニルグルコシド画分を減圧濃縮した後、凍
結乾燥することにより３、４−ジメトキシフェニルグル
コシドの粉末１．８ｇを得た。
【００５０】得られた３、４−ジメトキシフェニルグル
コシドをα−グルコシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２
１１）で処理した後、ＨＰＬＣで分析を行ったところ
３、４−ジメトキシフェニルグルコシドのピークがなく
なり、３、４−ジメトキシフェノールのピークが増加し
たことから、この３、４−ジメトキシフェニルグルコシ
ドは、３、４−ジメトキシフェノールにグルコースがα
結合した化合物であることがわかる。
コシドをα−グルコシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２
１１）で処理した後、ＨＰＬＣで分析を行ったところ
３、４−ジメトキシフェニルグルコシドのピークがなく
なり、３、４−ジメトキシフェノールのピークが増加し
たことから、この３、４−ジメトキシフェニルグルコシ
ドは、３、４−ジメトキシフェノールにグルコースがα
結合した化合物であることがわかる。
【００５１】実施例７（フェネチルグルコシドの製造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
にフェネチルアルコール１０ｇ及びマルトース５０ｇを
溶解し、この溶液にバチルス ステアロサーモフィラス
（Bacillus stearothermophilus ）由来のα−グルコシ
ダーゼ（シグマ社製、Ｇ３６５１）を１０Ｕ／ミリリッ
トルとなるように添加した。この溶液を４０℃で１９時
間反応させた後、１００℃で５分間処理して反応を停止
させた。この反応液の糖転移率は３０％であった。
にフェネチルアルコール１０ｇ及びマルトース５０ｇを
溶解し、この溶液にバチルス ステアロサーモフィラス
（Bacillus stearothermophilus ）由来のα−グルコシ
ダーゼ（シグマ社製、Ｇ３６５１）を１０Ｕ／ミリリッ
トルとなるように添加した。この溶液を４０℃で１９時
間反応させた後、１００℃で５分間処理して反応を停止
させた。この反応液の糖転移率は３０％であった。
【００５２】次に、得られた反応物中の未反応の原料を
クロロホルムにより抽出除去した。水層画分を５０ミリ
リットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）
カラムに通液し、フェネチルグルコシドを吸着させ、蒸
留水１リットルでカラムを洗浄した後、５００ミリリッ
トルのメタノールでフェネチルグルコシドを溶出させ
た。得られたフェネチルグルコシド画分を減圧濃縮した
後、凍結乾燥することによりフェネチルグルコシドの粉
末５．６ｇを得た。
クロロホルムにより抽出除去した。水層画分を５０ミリ
リットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）
カラムに通液し、フェネチルグルコシドを吸着させ、蒸
留水１リットルでカラムを洗浄した後、５００ミリリッ
トルのメタノールでフェネチルグルコシドを溶出させ
た。得られたフェネチルグルコシド画分を減圧濃縮した
後、凍結乾燥することによりフェネチルグルコシドの粉
末５．６ｇを得た。
【００５３】得られたフェネチルグルコシドをα−グル
コシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で処理した
後、ＨＰＬＣで分析を行ったところフェネチルグルコシ
ドのピークがなくなり、フェネチルアルコールのピーク
が増加したことから、このフェネチルグルコシドは、フ
ェネチルアルコールにグルコースがα結合した化合物で
あることを確認した。
コシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で処理した
後、ＨＰＬＣで分析を行ったところフェネチルグルコシ
ドのピークがなくなり、フェネチルアルコールのピーク
が増加したことから、このフェネチルグルコシドは、フ
ェネチルアルコールにグルコースがα結合した化合物で
あることを確認した。
【００５４】実施例８（ヒドロキノングルコシドの製
造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
にヒドロキノン１０ｇ及びマルトース５０ｇを溶解し、
この溶液にバチルス ステアロサーモフィラス（Bacill
us stearothermophilus ）由来のα−グルコシダーゼ
（シグマ社製、Ｇ３６５１）を１０Ｕ／ミリリットルと
なるように添加した。この溶液を４０℃で３時間反応さ
せた後、１００℃で５分間処理して反応を停止させた。
この反応液の糖転移率は２８％であった。
造） ８０ｍＭのほう酸緩衝液（ｐＨ９）５００ミリリットル
にヒドロキノン１０ｇ及びマルトース５０ｇを溶解し、
この溶液にバチルス ステアロサーモフィラス（Bacill
us stearothermophilus ）由来のα−グルコシダーゼ
（シグマ社製、Ｇ３６５１）を１０Ｕ／ミリリットルと
なるように添加した。この溶液を４０℃で３時間反応さ
せた後、１００℃で５分間処理して反応を停止させた。
この反応液の糖転移率は２８％であった。
【００５５】次に、得られた反応物中の未反応の原料を
クロロホルムにより抽出除去した。水層画分を５０ミリ
リットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）
カラムに通液し、ヒドロキノングルコシドを吸着させ、
蒸留水１リットルでカラムを洗浄した後、５００ミリリ
ットルのメタノールでヒドロキノングルコシドを溶出さ
せた。得られたヒドロキノングルコシド画分を減圧濃縮
した後、凍結乾燥することによりヒドロキノングルコシ
ドの粉末４．６ｇを得た。
クロロホルムにより抽出除去した。水層画分を５０ミリ
リットルのＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０（三菱化学社製）
カラムに通液し、ヒドロキノングルコシドを吸着させ、
蒸留水１リットルでカラムを洗浄した後、５００ミリリ
ットルのメタノールでヒドロキノングルコシドを溶出さ
せた。得られたヒドロキノングルコシド画分を減圧濃縮
した後、凍結乾燥することによりヒドロキノングルコシ
ドの粉末４．６ｇを得た。
【００５６】得られたヒドロキノングルコシドをα−グ
ルコシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で処理し
た後、同様にＨＰＬＣで分析を行ったところヒドロキノ
ングルコシドのピークがなくなり、ヒドロキノンのピー
クが増加したことから、このヒドロキノングルコシド
は、ヒドロキノンにグルコースがα結合した化合物であ
ることがわかる。
ルコシダーゼ（東洋紡社製、ＡＧＨ−２１１）で処理し
た後、同様にＨＰＬＣで分析を行ったところヒドロキノ
ングルコシドのピークがなくなり、ヒドロキノンのピー
クが増加したことから、このヒドロキノングルコシド
は、ヒドロキノンにグルコースがα結合した化合物であ
ることがわかる。
【００５７】
【発明の効果】本発明によれば、アルコール性水酸基を
有する化合物の他に、フェノール性水酸基を有する化合
物や、フラボノイド類縁化合物の配糖体を製造すること
ができる。
有する化合物の他に、フェノール性水酸基を有する化合
物や、フラボノイド類縁化合物の配糖体を製造すること
ができる。
【図１】バチルス ステアロサーモフィラス（Bacillus
stearothermophilus ）ＵＫ５６３（ＦＥＲＭ Ｐ−７
２７５）由来のα−グルコシダーゼの加水分解活性に及
ぼすｐＨの影響を示すグラフである。
stearothermophilus ）ＵＫ５６３（ＦＥＲＭ Ｐ−７
２７５）由来のα−グルコシダーゼの加水分解活性に及
ぼすｐＨの影響を示すグラフである。
【図２】バチルス ステアロサーモフィラス（Bacillus
stearothermophilus ）ＵＫ５６３（ＦＥＲＭ Ｐ−７
２７５）由来のα−グルコシダーゼの糖転移活性に及ぼ
すｐＨの影響を示すグラフである。
stearothermophilus ）ＵＫ５６３（ＦＥＲＭ Ｐ−７
２７５）由来のα−グルコシダーゼの糖転移活性に及ぼ
すｐＨの影響を示すグラフである。
【図３】バチルス ステアロサーモフィラス（Bacillus
stearothermophilus ）ＵＫ５６３（ＦＥＲＭ Ｐ−７
２７５）由来のα−グルコシダーゼの活性に及ぼす温度
の影響を示すグラフである。
stearothermophilus ）ＵＫ５６３（ＦＥＲＭ Ｐ−７
２７５）由来のα−グルコシダーゼの活性に及ぼす温度
の影響を示すグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:07） (72)発明者 鈍宝 宗彦 京都府宇治市宇治小桜23番地 ユニチカ株 式会社中央研究所内 (72)発明者 中島 宏 京都府宇治市宇治小桜23番地 ユニチカ株 式会社中央研究所内
Claims (1)
- 【請求項１】 水酸基を有する化合物とα−１、４結合
を持つグルカンにα−グルコシダーゼを作用させて配糖
体を製造するに際し、α−グルコキシダーゼとしてバチ
ルス ステアロサーモフィラス（Bacillus stearotherm
ophilus ）由来のα−グルコシダーゼを用いることを特
徴とする配糖体の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24580395A JP3916682B2 (ja) | 1995-09-25 | 1995-09-25 | 配糖体の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24580395A JP3916682B2 (ja) | 1995-09-25 | 1995-09-25 | 配糖体の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0987294A true JPH0987294A (ja) | 1997-03-31 |
| JP3916682B2 JP3916682B2 (ja) | 2007-05-16 |
Family
ID=17139081
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24580395A Expired - Fee Related JP3916682B2 (ja) | 1995-09-25 | 1995-09-25 | 配糖体の製造方法 |
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| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3916682B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1304591C (zh) * | 2005-01-06 | 2007-03-14 | 清华大学 | 一种提高黄酮苷元极性的方法 |
| US7626006B2 (en) | 2004-05-22 | 2009-12-01 | Goldschmidt Gmbh | Process for preparing alkylglycosides |
-
1995
- 1995-09-25 JP JP24580395A patent/JP3916682B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7626006B2 (en) | 2004-05-22 | 2009-12-01 | Goldschmidt Gmbh | Process for preparing alkylglycosides |
| CN1304591C (zh) * | 2005-01-06 | 2007-03-14 | 清华大学 | 一种提高黄酮苷元极性的方法 |
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| JP3916682B2 (ja) | 2007-05-16 |
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