JPH10101666A - 新規ベンゾオキサシクロトリデシン化合物およびそれを含有する医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 優れたキマーゼ阻害作用および／または抗菌
作用を有し、医薬として有用な化合物を提供する。 【解決手段】 式（Ｉ）： 【化１】 で示される化合物、その製薬上許容される塩、それらの
水和物、それらの製造方法、それらを含有する医薬組成
物およびそれらの生産能を有するスタキボトリスシリン
ドロスポラに属する微生物を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規化合物および
それを含有する医薬、詳しくは新規ベンゾオキサシクロ
トリデシン化合物を含有するキマーゼ阻害剤および／ま
たは抗菌剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】ヒト型キマーゼは、１９９０年に分離さ
れた分子量約３万の中性セリンプロテアーゼであり、主
として肥満細胞で合成、貯蔵、分泌され、心臓、血管、
皮膚に存在することが判明している。その主な作用とし
て、アンジオテンシンＩＩの産生が挙げられる。従来、
アンジオテンシンＩＩの産生にはアンジオテンシン変換
酵素（以下、ＡＣＥと略記する）が作用していると考え
られていたが、最近になって、ヒト心臓におけるアンジ
オテンシンＩＩの産生においてＡＣＥが作用しているの
はわずか１０〜１５％程度にすぎず、８０％以上はヒト
型キマーゼの作用であることが明らかとなってきた（サ
ーキュレーション・リサーチ（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ）第６６巻，第８８３頁，１９９０
年、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー
（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ），第２６６巻，第１７１７３頁，１９
９１年）。このため、新しいタイプの心血管障害治療剤
としてキマーゼ阻害剤が期待を集めている。また、キマ
ーゼは肥満細胞からのヒスタミン遊離促進にも関与して
いるとされており（ジャーナル・オブ・バイオケミスト
リー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ）第１０３巻，第８２０−８２２頁，１９８８年）、
その阻害剤は新しいタイプの抗炎症剤、抗アレルギー剤
になり得るとして有望視されている。

【０００３】その他にも、ヒト型キマーゼは様々な活性
を有しており、インビトロではマクロファージの泡沫細
胞化促進、プロコラゲナーゼから活性型コラゲナーゼの
産生、コラーゲン、フィブロネクチン、ビトロネクチン
等の細胞外マトリックスの限定分解、トロンビンやＩｇ
Ｇの限定分解等の作用を有することが既に明らかになっ
ている。また、病態生理学的には、バルーン障害後の血
管や心筋症の心臓においてキマーゼ活性が上昇している
ことも知られている。このような知見から、キマーゼは
動脈硬化、炎症、リウマチ等にも関与していることが予
測され得る。

【０００４】現在までに、国際特許出願公開第９３／２
５５７４号、同９５／２７０５３号、同９５／２７０５
５号にペプチド性キマーゼ阻害剤が開示されている。ま
た、非ペプチド性キマーゼ阻害剤としては、国際特許出
願公開第９６／０４２４８号にイミダゾリジン誘導体
が、ヨーロッパ特許公開第７１３８７６にトリアジン誘
導体が開示されているのみである。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】現在のところ、非ペプ
チド性キマーゼ阻害剤としては少数が見出されているの
みであり、キマーゼの生理学的な機能解明、さらには臨
床上有用な医薬開発のために、強い活性を有する非ペプ
チド性キマーゼ阻害剤が求められていた。

【０００６】

【課題を解決する手段】上記の現状に鑑み、本発明者ら
が鋭意検討を行った結果、糸状菌の一種である、スタキ
ボトリス シリンドロスポラ（Ｓｔａｃｈｙｂｏｔｒｙ
ｓ ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒａ）ＲＦ−５９００株の
培養液中に強いヒト型キマーゼ阻害活性を有する化合物
を見出し、その化合物を単離・精製し、本発明を完成し
た。さらに、本発明化合物（Ｉ）は抗菌作用をも併せて
有していることを見出した。

【０００７】即ち、本発明は式（Ｉ）：

【化２】

【０００８】（式中、Ｒ¹がヒドロキシであり、Ｒ²が−
ＣＨＯであり、かつＲ³がＲ¹の結合している炭素原子と
二重結合を形成するか、またはＲ¹が＝Ｏであり、かつ
Ｒ²およびＲ³が一緒になって−ＣＨ（ＯＲ⁴）−（ここ
でＲ⁴は水素またはアシル）もしくは−Ｃ（＝Ｏ）−を
形成する）で示される化合物もしくはその製薬上許容さ
れる塩またはそれらの水和物を提供するものである。ま
た、本発明は化合物（Ｉ）もしくはその製薬上許容され
る塩またはそれらの水和物を含有する医薬組成物、詳し
くはキマーゼ阻害剤および／または抗菌剤を提供するも
のである。さらに、スタキボトリス属に属し、化合物
（Ｉ）のいずれかを産生し得る微生物を培養し、得られ
た培養物から該化合物を採取し、所望によりさらに開
環、閉環、アシル化または酸化することを特徴とする、
化合物（Ｉ）の製造方法に関する。さらに、スタキボト
リス シリンドロスポラに属し、化合物（Ｉ）のいずれ
かを産生し得る微生物、詳しくはスタキボトリス シリ
ンドロスポラ ＲＦ−５９００に関する。

【０００９】以下に本発明化合物（Ｉ）の微生物培養に
よる製造方法および化学合成による製造方法を説明す
る。微生物培養による製造方法 本微生物培養法においては、本発明化合物（Ｉ）を産生
し得る微生物を通常の発酵生産に用いる培地組成、培地
条件で培養し、通常の発酵生産物を分離採取する方法に
より化合物（Ｉ）を単離する。本発明化合物（Ｉ）を産
生し得る微生物としては、スタキボトリス属に属する微
生物、例えばスタキボトリス シリンドロスポラ ＲＦ
−５９００株が例示される。スタキボトリス シリンド
ロスポラ ＲＦ−５９００株は以下のような形態学的性
状を有していた。

【００１０】コ−ンミ−ル寒天培地上でのコロニ−はや
や生育が遅く、その表面は湿潤し、分生子形成に従って
緑黒色を呈する。分生子柄は単生し、ほとんど分枝せ
ず、培地から直立する。栄養菌糸は無色で、巾は１．０
〜３．０ｍｍで多細胞からなり、分枝する。個々の分生
子柄は無色で３〜５細胞からなり、高さ６５〜９５ｍ
ｍ、巾は基部が５．０〜５．５ｍｍ、上部に向かって狭
まりフィアライド着生部分で３．０〜３．５ｍｍとな
る。表面は平滑もしくは粒状で、上部は特に粒状が強
い。フィアライドは高さ１０．０〜１３．５ｍｍ、巾は
６．０〜７．５ｍｍの単細胞で棍棒状を呈し、表面は平
滑で、分生子柄先端に４〜７個生じる。分生子は長さ１
１．０〜１３．０ｍｍ、巾は４．０〜４．５ｍｍの円筒
形の単細胞で、淡緑黒色を呈し、長軸に沿ったうね状の
表面構造をもち、フィアライド上に球形の湿潤した光沢
のある分生子塊として形成される。

【００１１】ポテトデキストロース寒天培地上におい
て、１０℃〜３２℃の範囲で生育し、生育至適温度は２
０℃〜２８℃である。この株は有性生殖器官を形成せ
ず、分生子柄先端のフィアライド頂端に球形の湿潤した
光沢のある分生子塊として分生子を形成する性状を有す
ることから、スタキボトリス属に属する株であると判断
される。

【００１２】これらの諸性状をデルマティアセオウス・
ハイフォミセーテス（Ｄｅｒｍａｔｉａｃｅｏｕｓ Ｈ
ｙｐｈｏｍｙｃｅｔｅｓ）、コモンウェルス・マイコロ
ジカル・インスティチュート、キュー、スレイ、イング
ランド（Ｃｏｍｍｏｎｗｅａｌｔｈ Ｍｙｃｏｌｏｇｉ
ｃａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、Ｋｅｗ，Ｓｕｒｒｅｙ，
Ｅｎｇｌａｎｄ）、第５４２頁〜５４４頁、１９７１
年；モア・デルマティアセオウス・ハイフォミセーテス
（Ｍｏｒｅ Ｄｅｒｍａｔｉａｃｅｏｕｓ Ｈｙｐｈｏ
ｍｙｃｅｔｅｓ）コモンウェルス・マイコロジカル・イ
ンスティチュート、キュー、スレイ、イングランド（Ｃ
ｏｍｍｏｎｗｅａｌｔｈ Ｍｙｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉ
ｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｋｅｗ，Ｓｕｒｒｅｙ，Ｅｎｇｌａ
ｎｄ）、第４６３頁〜４６４頁、１９７６年；コンペン
ディウム・オブ・ソイル・ファンジャイ・リプリント
（Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ Ｓｏｉｌ Fｕｎｇｉ
Ｒｅｐｒｉｎｔ １９９３年、第７４２頁〜７４３
頁；イコネス・ミクロフンゴル・ア・マツシマ・レクト
ルム、コウベ（Ｉｃｏｎｅｓ Ｍｉｃｒｏｆｕｎｇｏｒ
ｕｍ ａ Ｍａｔｓｕｓｈｉｍａ Ｌｅｃｔｏｒｕｍ、
Ｋｏｂｅ）、１９７５年；などの文献に記載されている
スタキボトリス属の既知種と比較した結果、分生子の形
状、サイズ、表面構造その他の性状からスタキボトリス
シリンドロスポラＣ．Ｗ．ジェンセン（Ｃ．Ｗ．Ｊｅ
ｎｓｅｎ）１９１２と同定した。尚、本菌株は工業技術
院生命工学工業技術研究所に受託番号「ＦＥＲＭ Ｐ−
１５７４２」として平成８年（１９９６年）７月１７日
より寄託されている。

【００１３】本発明化合物（Ｉ）の生産用培地として
は、炭素源、窒素源および無機塩を適当に含有するもの
であれば合成培地または天然培地のいずれでも好適に用
いることができる。必要に応じて、ビタミン類またはそ
の他栄養物質を適宜加えてもよい。

【００１４】炭素源としては例えば、グルコース、マル
トース、フラクトース、シュークロース、デンプン等の
糖類、グリセロール、マンニトール等のアルコール類、
グリシン、アラニン、アスパラギン等のアミノ酸類、大
豆油、オリーブ油等の油脂類等の一般的な炭素源より微
生物の資化性を考慮して１種または２種以上を適宜選択
して用いればよい。窒素源としては、大豆粉、コーンス
チープリカー、ビーフエキス、ペプトン、酵母エキス、
アミノ酸混合物、魚粉等の有機含窒素化合物またはアン
モニウム塩、硝酸塩等の無機窒素化合物等が挙げられ、
微生物の資化性を考慮して１種または２種以上を適宜選
択して用いればよい。無機塩としては、例えば炭酸カル
シウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシ
ウム、硫酸銅、塩化マンガン、硫酸亜鉛、塩化コバル
ト、各種リン酸塩を必要に応じて添加すればよい。ま
た、消泡剤、例えば植物油、ポリプロピレングリコール
等は必要に応じて添加することができる。

【００１５】培養温度は微生物が発育し、本発明化合物
（Ｉ）を生産する範囲で適宜変更できるが、好ましくは
１０℃〜３２℃であり、さらに好ましくは１８℃〜２５
℃である。ｐＨは６〜８付近が好ましく、培養時間は通
常数日〜数週間程度であるが、本発明化合物（Ｉ）の生
産量が最高に達したときに培養を終了すればよい。培養
法は固層培養、通気攪拌培養等の通常用いられる方法で
あればいずれも好適に用い得る。

【００１６】培養物から発酵生産物を分離採取する方法
には、濾過、遠心分離、各種イオン交換樹脂やその他の
活性吸着やクロマトグラフィー、各種有機溶媒による抽
出等を適当に組み合わせた通常の発酵生産物分離精製法
を用いることができる。例えば、培養物より分離精製し
た菌体を、酢酸エチル、アセトン、メチルエチルケトン
等の有機溶媒で抽出し、シリカゲルカラムクロマトグラ
フィーと薄層クロマトグラフィーを組み合わせて分離精
製すればよい。

【００１７】化学合成による製造法 所望により、発酵で得られた本発明化合物（Ｉ）を、適
当な条件下で開環反応、アシル化反応または酸化反応に
付してもよい。例えば、Ｒ¹が＝Ｏであり、Ｒ²およびＲ
³が一緒になって−ＣＨ（ＯＨ）−を形成する化合物
（Ｉ）をアセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキ
サン、エチルエーテル、メタノール、エタノール、シク
ロヘキサン等の溶媒中、氷冷〜加温下、好ましくは室温
付近で数分〜数時間、水酸化ナトリウム、水酸化カリウ
ム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム等のアルカリで処理
すれば、Ｒ¹がヒドロキシであり、Ｒ²が−ＣＨＯであ
り、かつＲ³がＲ¹の結合している炭素原子と二重結合を
形成する化合物（Ｉ）が得られる。

【００１８】また、上記と同様のＲ¹が＝Ｏであり、Ｒ²
およびＲ³が一緒になって−ＣＨ（ＯＨ）−を形成する
化合物（Ｉ）をテトラヒドロフラン、ジオキサン、エチ
ルエーテル等の溶媒中、ピリジン、トリエチルアミン等
の塩基存在下で、アセチルクロリド、プロピオニルクロ
リド等の酸クロリド、無水酢酸等の酸無水物と氷冷〜加
温下、好ましくは室温付近で数時間〜数十時間反応させ
てアシル化すれば、Ｒ¹が＝Ｏであり、Ｒ²およびＲ³が
一緒になって−ＣＨ（アシルオキシ）−を形成する化合
物（Ｉ）を得ることができる。この反応において、塩基
は溶媒量を用いてもよい。

【００１９】また、上記と同様のＲ¹が＝Ｏであり、Ｒ²
およびＲ³が一緒になって−ＣＨ（ＯＨ）−を形成する
化合物（Ｉ）をテトラヒドロフラン、ジオキサン、エチ
ルエーテル、アセトン、塩化メチル、ジクロロメタン、
１，２−ジクロロエタン等の適当な溶媒中でサレット
（Ｓａｒｅｔｔ）酸化（ＣｒＯ₃−ピリジン）に付す
か、ジョーンズ試薬（無水クロム酸＋硫酸）、次亜塩素
酸ナトリウム、亜塩素酸ナトリウム、二酸化マンガン等
の通常用いられる酸化剤を用い、氷冷〜室温下、好まし
くは氷冷下で数時間〜数十時間反応させれば、Ｒ¹が＝
Ｏであり、Ｒ²およびＲ³が一緒になって−Ｃ（＝Ｏ）−
を形成する化合物（Ｉ）を得る事ができる。

【００２０】本発明化合物（Ｉ）は、その製薬上許容さ
れる塩をも包含し、例えばナトリウム、カリウム等のア
ルカリ金属塩、カルシウム、バリウム等のアルカリ土類
金属塩等が挙げられる。これらの塩は、通常用いられる
反応を用いて形成させることができる。また、本発明化
合物はその水和物をも包含し、本発明化合物（Ｉ）１分
子に対して１以上の水分子と結合していてもよい。

【００２１】本発明化合物（Ｉ）は、強いキマーゼ阻害
活性および／または抗菌活性を有するため、医薬として
ヒトを含む動物に投与することができる。キマーゼ阻害
剤としては、具体的には心筋梗塞、心肥大、心不全、心
筋症、高血圧、ＰＴＣＡ（経皮的冠状動脈形成術）術後
の血管内膜肥厚、末梢循環障害、血管炎、動脈硬化、糖
尿病性および非糖尿病性腎障害等の慢性心血管障害並び
に炎症、アレルギー、リウマチ、アトピー等のアレルギ
ー性疾患の治療に有効である。抗菌剤としては、内臓カ
ンジダ症、肺アスペルギルス症等の深在性真菌症および
皮膚真菌症の治療に有効である。

【００２２】本発明化合物（Ｉ）を医薬として投与する
場合、経口的、非経口的のいずれの方法でも投与が可能
である。経口投与は常法に従って錠剤、顆粒剤、散剤、
カプセル剤、丸剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、バッカ
ル剤または舌下剤等の通常用いられる剤型に調製して投
与すればよい。非経口投与は、例えば筋肉内投与等の注
射剤、坐剤、経皮吸収剤、吸入剤等、通常用いられるい
ずれの剤型でも好適に投与することができるが、特に静
脈内投与が好ましい。

【００２３】本発明の医薬組成物は、有効成分の有効量
に最終投与剤型に適した賦形剤、結合剤、湿潤剤、崩壊
剤、滑沢剤および希釈剤等の各種医薬用添加剤を必要に
応じて混合して調製することができる。注射剤の場合に
は適当な担体と共に滅菌処理を行って製剤とすればよ
い。

【００２４】具体的には、賦形剤としては乳糖、白糖、
ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウムまたは結晶セルロ
ース等、結合剤としてはメチルセルロース、カルボキシ
メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ゼ
ラチンまたはポリビニルピロリドン等、崩壊剤としては
カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロ
ースナトリウム、デンプン、アルギン酸ナトリウム、カ
ンテン末またはラウリル硫酸ナトリウム等、滑沢剤とし
てはタルク、ステアリン酸マグネシウムまたはマクロゴ
ール等が挙げられる。坐剤の基剤としてはカカオ脂、マ
クロゴール、またはメチルセルロース等を用いることが
できる。さらに、液剤または乳濁性、懸濁性の注射剤と
して調製する場合には通常使用されている溶解補助剤、
懸濁化剤、乳化剤、安定化剤、保存剤、等張剤等を適宜
添加してもよく、経口投与の場合には嬌味剤、芳香剤等
を加えてもよい。

【００２５】キマーゼ阻害剤としての投与量は、患者の
年齢、体重、投与経路、病気の種類や程度等を考慮した
上で設定することが望ましいが、ヒトへ経口的に投与す
る場合には、成人に対して通常１μｇ〜１０００ｍｇ／
ｋｇ／日を１回〜数回に分けて投与すればよい。また、
非経口的に投与する場合には、投与経路により大きく異
なるが、通常、０．１μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ／日を１
回〜数回に分けて投与すればよい。抗菌剤としての投与
量も、同様に患者の年齢、体重、投与経路、病気の種類
や程度等を考慮した上で設定することが望ましいが、ヒ
トへ経口的に投与する場合には、成人に対して通常１μ
ｇ〜２００ｍｇ／ｋｇ／日、非経口的に投与する場合に
は、０．１μｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ／日を各々１回〜数回
に分けて投与すればよい。

【００２６】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳しく
説明するが、本発明はこれらに限定されるものではな
い。実施例１ 発酵による化合物（Ｉ）の生産 （１）発酵工
程 ポリペプトン１．０％、グルコース２．０％、ビーフエ
キストラクト０．３％、酵母エキストラクト０．２％、
塩化ナトリウム０．１％水道水（ｐＨ７．０滅菌前）か
らなる培地１００ｍｌを含む５００ｍｌ容マイヤーフラ
スコにスタキボトリス シリンドロスポラ ＲＦ−５９
００の胞子を種培養スラントから接種し、１８０回転／
分の回転振盪機上２８℃で３日間培養を行った。この培
養液４ｍｌずつを１２１℃で３０分間オートクレーブ滅
菌した玄米培地（玄米２５ｇ、グルコース０．５ｇ、デ
イフコイーストエキス０．１ｇ、水道水５０ｍｌ）を含
む５００ｍｌ容量のマイヤーフラスコ２００本に接種
し、２８℃で１４日間静置培養した。

【００２７】（２）分離工程 発酵工程によって得られた各マイヤーフラスコ中の発酵
物を集めてアセトン２０Ｌを加え撹拌抽出した。吸引濾
過後、アセトンを含む瀘液部を減圧下溶媒留去し、残渣
の水層を酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル層を濃縮乾固
して粗分画（１７８．０ｇ）を得た。この粗分画を２等
分し、粗分画（８９．０ｇ）をシリカゲルカラムクロマ
トグラフィー（メルクキーゼルゲル６０、５００ｇ、２
３０〜４００メッシュ、トルエン：アセトニトリル
（９：１））で精製した。トルエン：アセトニトリル
（９：１）合計１８００ｍｌで溶出し、最初の８００ｍ
ｌを集めてＡ分画、次の１０００ｍｌを集めてＢ分画と
し、２回分を合わせて減圧下溶媒留去して、Ａ分画
（５．３９ｇ）、Ｂ分画（３．６１ｇ）をそれぞれ得
た。

【００２８】Ａ分画（５．３９ｇ）は再度シリカゲルカ
ラムクロマトグラフィー（メルクキーゼルゲル６０、２
３０ｇ、２３０〜４００メッシュ、トルエン：アセトニ
トリル（９５：５））で精製し、粗化合物（Ｉ−１）９
２４ｍｇを得た。更にシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（メルクキーゼルゲル６０、１００ｇ、２３０〜４
００メッシュ、トルエン：酢酸エチル：イソプロパノー
ル（５９：８：１））で精製して１０ｇずつフラクショ
ンを集め、フラクション１３〜１８を集めて減圧下溶媒
留去した。そうして得られた油状残渣をｎ−ヘキサン５
ｍｌで再結晶後結晶瀘取し、淡黄色針状晶として化合物
（Ｉ−１）７２５ｍｇを得た。

【００２９】Ｂ分画（３．６１ｇ）はシリカゲルカラム
クロマトグラフィー（メルクキーゼルゲル６０、１７０
ｇ、２３０〜４００メッシュ、ｎ−ヘキサン：アセトン
（２：１））で精製した。１０ｇずつフラクションを集
め、フラクション４９〜８９を集めて減圧下溶媒留去
し、化合物（Ｉ−２）５８３ｍｇを得た。

【００３０】続いてフラクション３２〜３６を集めて減
圧下溶媒留去し、粗化合物（Ｉ−３）２８９ｍｇを得
た。これを薄層クロマトグラフィー（メルクプレコーテ
ッドTＬＣプレート、シリカゲルF−２５４、０．５ｍ
ｍ、ｎ−ヘキサン：アセトニトリル（２：１））、更に
薄層クロマトグラフィー（メルクプレコーテッドTＬＣ
プレート、シリカゲルF−２５４、０．５ｍｍ、トルエ
ン：アセトニトリル（２：１））で繰り返し精製し、化
合物（Ｉ−３）３５ｍｇを得た。

【００３１】化合物（Ｉ−１） Ｒ¹が＝Ｏ、Ｒ²およびＲ³が一緒になって−ＣＨ（Ｏ
Ｈ）−を形成 （物理化学的性状） 性状：淡黄色針状晶 溶解性：クロロホルム、ジエチルエーテル、アセトン、
酢酸エチル、メタノールに可溶、ｎ−ヘキサンにわずか
に可溶、水に不溶 融点：１４６〜１４６．５℃ [α]_D ²³＝−４０８．０±８．７°（ｃ＝０．５１４、
クロロホルム） 元素分析：（Ｃ₂₅Ｈ₂₆Ｏ₅として） 計算値；Ｃ：７３．８７％，Ｈ：６．４５％ 実測値；Ｃ：７３．８３％、Ｈ：６．５５％ Ｌ−ＳＩＭＳ，ｍ／ｚ：４０７（ＭＨ⁺）

【００３２】ＩＲ，λ_maxＫＢｒｃｍ^-1：３５６０，３
４３６，２９７９，２９６６，２９３３，２９１２，２
８５７，１７２２，１６９１，１６６６，１６３１，１
５９８，１５７９，１４７０，１４４６，１４０１，１
３８８，１２８６，１２５７，１２３８，１２２７，１
１８７，１１５３，１１１４，１００１，９５７，９０
９，８７８，８５７，７７９ ＵＶ（メタノール），ｎｍ（ε）：２６０（１０，６０
０），３２０（３，７００）

【００３３】¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，６００ＭＨｚ）
δ：１．０４（３Ｈ，ｓ ｌｉｋｅ），１．５２（３
Ｈ，ｓ ｌｉｋｅ），１．５８（３Ｈ，ｓ ｌｉｋ
ｅ），２．１４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ），２．２
３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．０，１４．２Ｈｚ），２．４
４（１Ｈ，ｍ），２．５８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１２．７Ｈ
ｚ），２．８６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０，１４．２Ｈ
ｚ），３．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ），４．
６２（１Ｈ，ｍ），４．７７（１Ｈ，ｍ），４．９５
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ），５．１８（１Ｈ，
ｍ），５．８８（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝０．８，１．０，
１２．５Ｈｚ），６．６８（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１．４Ｈ
ｚ），６．９６（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝０．８，１．２，
８．２Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．０，
１．２，７．２Ｈｚ），７．５８（１Ｈ，ｍ）

【００３４】¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，１５０ＭＨｚ）
δ：１１．３９（ｑ），１７．９４（ｑ），１９．６４
（ｑ），２５．８４（ｑ），３５．５６（ｔ），３６．
０５（ｔ），５５．９８（ｓ），６９．０６（ｄ），７
６．５４（ｔ），９１．１６（ｓ），１１５．７４
（ｄ），１１６．６７（ｄ），１２０．２４（ｄ），１
２１．４４（ｓ），１３１．６７（ｄ），１３１．７２
（ｄ），１３２．５７（ｓ），１３６．５８（ｄ），１
３６．６６（ｓ），１５２．３９（ｓ），１５３．５６
（ｓ），１５８．１６（ｓ），１８７．１３（ｓ），１
９１．０５（ｓ），２０５．１７（ｓ）

【００３５】化合物（Ｉ−２） Ｒ¹が−ＯＨ、Ｒ²が−ＣＨＯ、Ｒ³がＲ¹の結合している
炭素原子と二重結合を形成（７−ｔｒａｎｓ体） （物理化学的性状） 性状：淡黄色粉末 溶解性：クロロホルム、ジエチルエーテル、アセトン、
酢酸エチル、メタノールに可溶、ｎ−ヘキサンにわずか
に可溶、水に不溶 [α]_D ²³＝−４２５．２±９．１°（ｃ＝０．５０９，
クロロホルム） Ｌ−ＳＩＭＳ，ｍ／ｚ：４０７（ＭＨ⁺） ＨＲ−ＬＳＩＭＳ，ｍ／ｚ（Ｃ₂₅Ｈ₂₆Ｏ₅として） 計算値；４０７．１８５７ 実測値；４０７．１８５９（ＭＨ）^＋

【００３６】ＩＲ，λ_ｍａｘＣＨＣｌ₃ｃｍ^-1：３０２
８，３０１６，２９７８，２９２０，２８８９，２８５
７，２７３７，１７０３，１６５７，１６４３（ｓ
ｈ），１５６３，１４６５，１４１７，１３８６，１３
４７，１２５９，１０４０，１００９，９５５，９２
５，８６８ ＵＶ（メタノール），ｎｍ（ε）：２６５（８，５０
０），２７８（６，９００）

【００３７】¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，６００ＭＨｚ）
δ：１．３２（３Ｈ，ｓ ｌｉｋｅ），１．５４（３
Ｈ，ｓ ｌｉｋｅ），１．５９（３Ｈ，ｓ ｌｉｋ
ｅ），２．０９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ），２．２
７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，１４．８Ｈｚ），２．２
９（１Ｈ，ｍ），２．３８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１２．５Ｈ
ｚ），２．９０（１Ｈ，ｍ），４．４１（１Ｈ，ｄ ｌ
ｉｋｅ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ），４．５５（１Ｈ，ｍ），
４．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ），５．４４
（１Ｈ，ｍ），６．３７（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１．４Ｈ
ｚ），７．４７（１Ｈ，ｍ），７．５０（１Ｈ，ｍ），
７．６０（１Ｈ，ｍ），９．９６（１Ｈ，ｓ），１６．
４４（１Ｈ，ｓ）

【００３８】¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，１５０ＭＨｚ）
δ：１８．１０（ｑ），１９．９０（ｑ），２０．２８
（ｑ），２５．７４（ｑ），３４．２６（ｔ），３８．
４１（ｔ），５８．４６（ｓ），７６．７１（ｔ），１
１３．１７（ｓ），１１８．３８（ｄ），１２２．３５
（ｄ），１２５．１２（ｄ），１２６．２８（ｓ），１
２９．１１（ｄ），１２９．５０（ｄ），１３３．１７
（ｓ），１３４．３６（ｓ），１３４．８６（ｓ），１
３５．７２（ｓ），１５３．７０（ｓ），１６４．８５
（ｓ），１８２．０８（ｓ），１９０．５６（ｄ），１
９７．０２（ｓ），１９８．１２（ｓ）

【００３９】化合物（Ｉ−３） Ｒ¹が−ＯＨ、Ｒ²が−ＣＨＯ、Ｒ³がＲ¹の結合している
炭素原子と二重結合を形成（７−ｃｉｓ体） （物理化学的性状） 性状：淡黄色粉末 溶解性：クロロホルム、ジエチルエーテル、アセトン、
酢酸エチル、メタノールに可溶、ｎ−ヘキサンにわずか
に可溶、水に不溶 ［α］_D ²³＝−４０７．６±８．９°（ｃ＝０．５０
３，クロロホルム） Ｌ−ＳＩＭＳ，ｍ／ｚ：４０７（ＭＨ⁺） ＨＲ−ＬＳＩＭＳ，ｍ／ｚ（Ｃ₂₅Ｈ₂₆Ｏ₅として） 計算値；４０７．１８５７ 実測値；４０７．１８５９（ＭＨ）⁺

【００４０】ＩＲ，λ_maxＣＨＣｌ₃ｃｍ^-1：３０１２，
２９７４，２９１９，２８７８，１６９５，１６５４，
１６３８，１５６１，１４５９，１４１５，１３７８，
１３０６，１２６１，１１６７，１１０１，９５７，９
２７，８８０，８６５ ＵＶ（ＭｅＯＨ），ｎｍ（ε）：３３０（７，７００）

【００４１】¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，６００ＭＨｚ）
δ：１．５０（３Ｈ，ｂｒ．ｓ），１．５６（３Ｈ，ｂ
ｒ．ｓ），１．８３（３Ｈ，ｓ），２．１０（３Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ），２．２３（１Ｈ，ｍ），２．２
４（１Ｈ，ｍ），２．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．
０，１３．３Ｈｚ），２．８３（１Ｈ，ｍ），４．１３
（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），４．４１（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），４．５１（１Ｈ，ｍ），
５．２８（１Ｈ，ｍ），６．３４（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１．
４Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝０．８，８．２
Ｈｚ），７．５４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．
６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝０．８，８．２Ｈｚ），１０．
０２（１Ｈ，ｓ），１６．０３（１Ｈ，ｓ）

【００４２】¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，１５０ＭＨｚ）
δ：１８．１２（ｑ），２０．２５（ｑ），２２．９９
（ｑ），２５．７３（ｑ），３６．８１（ｔ），３９．
０９（ｔ），５９．１７（ｓ），７０．５５（ｔ），１
１３．０７（ｓ），１１７．７２（ｄ），１２１．８８
（ｄ），１２２．２５（ｄ），１２３．４６（ｄ），１
２３．９６（ｄ），１３０．７２（ｄ），１３４．１３
（ｓ），１３４．４０（ｓ），１３４．５０（ｓ），１
３５．６６（ｓ），１５６．０７（ｓ），１６４．７０
（ｓ），１８１．７２（ｓ），１９０．９１（ｄ），１
９６．７３（ｓ），１９８．５６（ｓ）

【００４３】実施例２ 化合物（Ｉ−１）から化合物
（Ｉ−２）への誘導 化合物（Ｉ−１）（５．２ｍｇ）のアセトニトリル
（０．２ｍｌ）溶液に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液
（０．０２ｍｌ）を加え室温下３０分撹拌した。反応液
に１Ｎ塩酸（０．０２ｍｌ）を加えた後、水（１ｍ
ｌ）、酢酸エチル（１ｍｌ）で分液した。酢酸エチル層
を硫酸ソーダで乾燥後、減圧下溶媒留去し化合物（Ｉ−
２）４．８ｍｇを得た。

【００４４】実施例３ 化合物（Ｉ−４）の製造 化合物（Ｉ−１）（４ｍｇ，０．０１ｍｍｏｌ）のピリ
ジン（０．１５ｍｌ）溶液に無水酢酸（０．０５ｍｌ）
を加え１４時間放置した。反応液にトルエンを加えて減
圧下溶媒留去し、化合物（Ｉ−４）４ｍｇを得た。 化合物（Ｉ−４） Ｒ¹が＝Ｏ、Ｒ²およびＲ³が一緒になって−ＣＨ（ＯＡ
ｃ）−を形成 ＥＩＭＳ，ｍ／ｚ：４４８（Ｍ）⁺ ＩＲ，λ_maxＣＨＣｌ₃ｃｍ^-1：２９３３，１７４４，１
７０５，１６７６，１６２７，１６０３，１５８３，１
４７４，１４５２，１３７７，１２９６，１２６１，１
２３３，１２２２，１２１０，１１９０，１１６５，１
１００，１０７８，１０４９，１０１７，９３６，８８
６，８２８

【００４５】¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，３００ＭＨｚ）
δ：１．０６（３Ｈ，ｓ），１．５７（６Ｈ，ｓ），
２．１２（３Ｈ，ｓ），２．１３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．
５Ｈｚ），２．２６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，１４．
０Ｈｚ），２．４０（１Ｈ，ｍ），２．５８（１Ｈ，
ｔ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ），２．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．５，１４．０Ｈｚ），４．６５（１Ｈ，ｍ），４．
７６（１Ｈ，ｍ），４．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．６
Ｈｚ），５．１５（１Ｈ，ｍ），６．６５（１Ｈ，
ｍ），６．８７（１Ｈ，ｍ），６．９６（１Ｈ，ｍ），
７．１０（１Ｈ，ｍ），７．５４（１Ｈ，ｍ）

【００４６】実施例４ 化合物（Ｉ−５）の製造 化合物（Ｉ−１）（８ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）のアセ
トン（０．４７ｍｌ）溶液にジョーンズ試薬（０．０２
５ｍｍｏｌ）を加え氷冷下１．５時間撹拌した。更にジ
ョーンズ試薬（０．１ｍｍｏｌ）を加え氷冷下５時間撹
拌した。反応液にイソプロパノール２滴を加えて反応を
停止させた後、１０％炭酸水素ナトリウム水溶液で中和
し減圧下溶媒留去した。残渣を酢酸エチル（２０ｍ
ｌ）、水（２０ｍｌ）で分配抽出し、酢酸エチル層を濃
縮後、薄層クロマトグラフィー（メルクプレコーテッド
ＴＬＣプレート、シリカゲルＦ−２５４、０．５ｍｍ、
ｎ−ヘキサン：アセトン（１：１））で精製し、化合物
（Ｉ−５）３．９ｍｇを得た。

【００４７】化合物（Ｉ−５） Ｒ¹が＝Ｏ、Ｒ²およびＲ³が一緒になって−Ｃ（＝Ｏ）
−を形成 Ｌ−ＳＩＭＳ，ｍ／ｚ：４０５（ＭＨ）⁺ ＩＲ，λ_maxＣＨＣｌ₃ｃｍ^-1：２９７６，２９３１，１
７７２，１７５６，１７１６，１７０３，１６７４，１
６２１，１５９８，１５７６，１４７４，１４５１，１
３７９，１２８０，１２６３，１２３８，１２２１，１
２１０，１１９８，１１４０，１１０９，１０６３，１
０４５，１０２０，９７０，８１９

【００４８】¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，３００ＭＨｚ）
δ：１．０８（３Ｈ，ｓ），１．５０（３Ｈ，ｓ），
１．６２（３Ｈ，ｓ），２．１４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．
２Ｈｚ），２．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．２，１４．
１Ｈｚ），２．４６（１Ｈ，ｍ），２．５８（１Ｈ，
ｔ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ），２．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．７，１４．１Ｈｚ），３．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
２．５Ｈｚ），４．６５（１Ｈ，ｍ），４．８７（１
Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ），
５．２６（１Ｈ，ｍ），６．６４（１Ｈ，ｍ），７．３
１（１Ｈ，ｍ），７．６２（１Ｈ，ｍ），７．６８（１
Ｈ，ｍ）

【００４９】¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，７５ＭＨｚ）
δ：１１．２０，１７．８７，１９．６４，２５．９
０，３５．４０，３６．１３，５７．６０，８８．９
８，１１５．５０，１１６．６０，１２６．８６，１２
８．５５，１３１．９２，１３２．２０，１３３．８
６，１３６．３８，１３７．０６，１４４．６６，１５
４．４０，１５８．５４，１８５．４７，１８８．１
３，１８８．３２，２０１．１９

【００５０】試験例１ キマーゼ酵素阻害活性 （１）化合物（Ｉ）の調製 化合物（Ｉ）はすべてジメチルスルフォキサイド（ＤＭ
ＳＯ）を用いて１０ｍｇ／ｍｌとなるように溶解した。
活性測定のために持ち込むＤＭＳＯ濃度は１％とした。 （２）キマーゼ阻害活性の測定 緩衝液（０．１ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ，１．８ＭＮａＣｌ
ｐＨ８．０）中に、ＤＭＳＯに溶解した化合物（Ｉ）
と浦田らの方法（ジャーナル・オブ・バイオロジカル・
ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉ
ｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）第２６５巻、第２２３４
８頁〜２２３５７頁）に準じて精製したヒトキマーゼを
加え３７℃で３０分間処理した後、基質としてＳｕｃ−
Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐＮＡ（バッケム社
（ＢＡＣＨＥＭ Ｆｅｉｎｃｈｅｍｉｋａｌｉｅｎ Ａ
Ｇ）製）を０．５ｍＭになるように添加し、３７℃で酵
素反応を行なった。反応後、溶液の吸光度（４０５ｎ
ｍ）を測定し、その阻害率を算出した。 （３）結果 上記の化合物に関して、そのヒトキマーゼ阻害活性の５
０％阻害濃度（以下ＩＣ₅₀とする）を表１に示す。

【００５１】

【表１】 表１より、本発明化合物（Ｉ）がキマーゼ阻害活性を有
していることがわかる。

【００５２】試験例２ 抗真菌活性 （１）検体の調製方法 本発明化合物は、すべてジメチルスルホキシド（ＤＭＳ
Ｏ）を用いて１０ｍｇ／ｍｌとなるように溶解した。 （２）活性の測定 カンジダ・アルビカンス Ｃａ−１５−３（Ｃａｎｄｉ
ｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）の凍結保存菌液（１０％ウシ
胎児血清を添加したサブローデキストロースブロス（Ｓ
ａｂｏｕｒａｕｄ ｄｅｘｔｒｏｓｅ ｂｒｏｔｈ）に
約２×１０⁸ｃｆｕ／ｍｌになるように懸濁し、−８０
℃に保存したもの）をイースト・ナイトロジェン・ベー
ス（Ｙｅａｓｔ Ｎｉｔｒｏｇｅｎ Ｂａｓｅ；ＹＮ
Ｂ，Ｄｉｆｃｏ社製）培地で１×１０⁵ｃｆｕ／ｍｌに
希釈し、９６穴マイクロプレートの各ウェルに１００μ
ｌずつ分注した。本発明化合物をこの菌液で希釈して２
倍希釈系列を作成し、増殖抑制を調べた。

【００５３】（３）培養条件と結果の判定 増殖抑制の判定は３０℃で２４時間培養した後、オート
リーダー（ＢＩＯ−ＲＡＤ）を使用して５９５ｎｍの吸
光度を測定し、本発明化合物非添加時の吸光度の５０％
以下に菌の増殖を抑制している濃度を最小有効濃度（Ｍ
ＩＣ₅₀）として表わした。結果を表２に示す。

【００５４】

【表２】 表２より、本発明化合物（Ｉ）が抗菌活性を有すること
がわかる。

【００５５】製剤例１ 本発明化合物（Ｉ） ３ｍｇ ゼラチン １５０ｍｇ フェノール ４ｍｇ 上記成分を適量の注射用精製水に溶解し、注射溶液を調
整した。

【００５６】

【発明の効果】以上の試験例から明らかなように、本発
明化合物（Ｉ）はキマーゼ阻害活性および／または抗菌
活性を示す。従って、本発明化合物（Ｉ）は、慢性心血
管障害治療剤、アレルギー性疾患治療剤および／または
抗菌剤として非常に有用である。

【図面の簡単な説明】

【図１】化合物Ｉ−１のＩＲスペクトルを示すグラフ。

【図２】化合物Ｉ−１の¹ＨＮＭＲスペクトルを示すグ
ラフ。

【図３】化合物Ｉ−１の¹³ＣＮＭＲスペクトルを示すグ
ラフ。

【図４】化合物Ｉ−２のＩＲスペクトルを示すグラフ。

【図５】化合物Ｉ−２の¹ＨＮＭＲスペクトルを示すグ
ラフ。

【図６】化合物Ｉ−２の¹³ＣＮＭＲスペクトルを示すグ
ラフ。

【図７】化合物Ｉ−３のＩＲスペクトルを示すグラフ。

【図８】化合物Ｉ−３の¹ＨＮＭＲスペクトルを示すグ
ラフ。

【図９】化合物Ｉ−３の¹³ＣＮＭＲスペクトルを示すグ
ラフ。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/335 ＡＤＺ Ａ６１Ｋ 31/335 ＡＤＺ ＡＥＤ ＡＥＤ Ｃ１２Ｐ 17/08 Ｃ１２Ｐ 17/08 //(Ｃ１２Ｐ 17/08 Ｃ１２Ｒ 1:645）

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式（Ｉ）： 【化１】 （式中、Ｒ¹がヒドロキシであり、Ｒ²が−ＣＨＯであ
   り、かつＲ³がＲ¹の結合している炭素原子と二重結合を
   形成するか、またはＲ¹が＝Ｏであり、かつＲ²およびＲ
   ³が一緒になって−ＣＨ（ＯＲ⁴）−（ここでＲ⁴は水素
   またはアシル）もしくは−Ｃ（＝Ｏ）−を形成する）で
   示される化合物もしくはその製薬上許容される塩または
   それらの水和物。
2. 【請求項２】 請求項１記載の化合物もしくはその製薬
   上許容される塩またはそれらの水和物を含有することを
   特徴とする医薬組成物。
3. 【請求項３】 請求項１記載の化合物もしくはその製薬
   上許容される塩またはそれらの水和物を含有することを
   特徴とするキマーゼ阻害剤。
4. 【請求項４】 請求項１記載の化合物もしくはその製薬
   上許容される塩またはそれらの水和物を含有することを
   特徴とする抗菌剤。
5. 【請求項５】 スタキボトリス（Ｓｔａｃｈｙｂｏｔｒ
   ｙｓ）属に属し、請求項１記載のいずれかの化合物を産
   生し得る微生物を培養し、得られた培養物から該化合物
   を採取し、所望によりさらに開環、閉環、アシル化また
   は酸化することを特徴とする、請求項１記載の化合物の
   製造方法。
6. 【請求項６】 スタキボトリス シリンドロスポラ（Ｓ
   ｔａｃｈｙｂｏｔｒｙｓｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒａ）
   に属し、請求項１記載のいずれかの化合物を産生する微
   生物。
7. 【請求項７】 スタキボトリス シリンドロスポラ Ｒ
   Ｆ−５９００（Ｓｔａｃｈｙｂｏｔｒｙｓ ｃｙｌｉｎ
   ｄｒｏｓｐｏｒａ ＲＦ−５９００）である請求項６記
   載の微生物。