JPH10109999A - 新規な環状ペプチド及びこれを含有する強心剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 一般式（１） 【化１】 （式中、R¹は-CH₂-又は-CH₂CH₂-を、R²は水素原子又は
アルキル基又はフェニル基又はベンジル基を、R³は-NH-
又は-N(CH₃)-又は-CH₂-又は酸素原子を、それぞれ示
す）で表される環状ペプチド及びこれを有効成分とする
強心薬。 【効果】 強い強心作用を有すると共に、頻脈、不整脈
等の副作用を起こさない強心剤を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規な環状ペプチ
ド及びこれを有効成分とする抗不整脈作用を有する強心
剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来、心不全の治療薬としてジギタリス
が用いられてきたが、これは強心効果が弱く、しかも、
副作用は心臓に対するものも含めて非常に多く、安全域
が狭いものであった（Hoffman B. F. and Bigger J. T.
Jr.: Digitalis and allied cardiac glycosides. In
Goodman and Gilman's "The Pharmacological basis o
f therapeutics." eds.: Gilman A. G, et al. Pergamo
n Press, pp.814-839, 1990.；Poole-Whilson, P. A. a
nd Robinson K.: Digoxin-A redundant drug incongest
ive cardiac failure. Cardiovasc. Drugs Ther. 2, 73
3-741, 1989.）。

【０００３】また、近年開発されたβ₁受容体刺激薬及
びサイクリックAMP分解酵素阻害薬は、心拍数を増加さ
せる作用があり、副作用として不整脈をおこすという欠
点がある。更に、後者の薬剤は、長期治療に用いられた
場合、基礎疾患を増悪させることが報告されている（Pa
cker M. et al.: Hemodynamic and clinical limitatio
n of long-term inotropic therapy with amrinone in
patients with severe chronic heart failure. Circul
aton 70, 1038-1047, 1984.；Packer M. et al.:Effect
of oral milrinone on mortality in severe chronic
heart failure.New Engl. J. Med., 325, 1468-1475, 1
991.）。

【０００４】そこで、本発明者らは、強心作用が強く、
しかも、副作用の少ない強心剤を探索し、環状デプシペ
プチド骨格を有する化合物が強い強心作用を有し、副作
用が少ないことを見出し、これを特許出願した（特開平
7-138290、特開平7-188286）。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、強い強心作用を有すると共に、頻脈、不整脈等の副
作用を起こさない強心剤を提供することにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者は、環状デプシ
ペプチド骨格を有する化合物を種々合成し、その中から
副作用の少ない強心剤を得るべく鋭意探索を行った結
果、一般式（１）

【０００７】

【化２】

【０００８】（式中、R¹は-CH₂-又は-CH₂CH₂-を、R²は
水素原子又はアルキル基又はフェニル基又はベンジル基
を、R³は-NH-又は-N(CH₃)-又は-CH₂-又は酸素原子を、
それぞれ示す）で表される環状ペプチドが文献上新規な
ものであり、さらにこれらの化合物が抗不整脈作用を有
する強心作用の強い作用を有することを見出し、本発明
を完成した。

【０００９】なお、一般式（１）で表される化合物には
不斉炭素原子が複数存在するので、立体異性が存在する
が、本発明にはそのいずれの立体異性体も含まれる。ま
た本発明環状ペプチドには水和物及び溶媒和物も含まれ
る。

【００１０】

【発明の実施の形態】一般式（１）で表される化合物を
構造式で例示すれば、以下の化合物を挙げることができ
るが、これらに限定されるものではない。R¹が-CH₂-、R
²がイソブチル基（D体）、R³が-NH-であるものとして、

【００１１】

【化３】

【００１２】R¹が-CH₂-、R²がイソブチル基（L体）、R³
が-NH-であるものとして、

【００１３】

【化４】

【００１４】R¹が-CH₂-、R²がイソブチル基、R³が-N(CH
₃)-であるものとして、

【００１５】

【化５】

【００１６】なお、化５において、＊で示した不斉炭素
原子の立体配置がL体のものをTK2-6A、D体のものをTK2-
6Bと呼ぶ。

【００１７】R¹が-CH₂-、R²がイソプロピル基、R³が-N
(CH₃)-であるものとして、

【００１８】

【化６】

【００１９】R¹が-CH₂-、R²がメチル基、R³が-N(CH₃)-
であるものとして、

【００２０】

【化７】

【００２１】R¹が-CH₂-、R²が水素原子、R³が-N(CH₃)-
であるものとして、

【００２２】

【化８】

【００２３】R¹が-CH₂-、R²がイソブチル基、R³が酸素
原子であるものとして、

【００２４】

【化９】

【００２５】R¹が-CH₂-CH₂-、R²がイソブチル基、R³が
酸素原子であるるものとして、

【００２６】

【化１０】

【００２７】R¹が-CH₂-、R²がブチル基、R³が-N(CH₃)-
であるものとして、

【００２８】

【化１１】

【００２９】R¹が-CH₂-、R²がsec-ブチル基、R³が-N(CH
₃)-であるものとして、

【００３０】

【化１２】

【００３１】R¹が-CH₂-、R²がベンジル基、R³が-N(CH₃)
-であるものとして、

【００３２】

【化１３】

【００３３】R¹が-CH₂-CH₂-、R²がイソブチル基、R³が-
N(CH₃)-であるものとして、

【００３４】

【化１４】

【００３５】R¹が-CH₂-、R²がイソブチル基、R³が-CH₂-
であるものとして、

【００３６】

【化１５】

【００３７】なお、化１５において、＊で示した不斉炭
素原子の立体配置がL体のものをTK16-22A、D体のものを
TK16-22Bと呼ぶ。

【００３８】本発明の一般式（１）で表される化合物の
うち、R³が-NH又は-N(CH₃)-である化合物は、例えば以
下の化１６に示す反応式に従って製造することができ
る。一方、R³が-CH₂-又は酸素原子である化合物、すな
わち、TK3-8については実施例８、TK11-3については実
施例９、TK16-22A及びTK16-22Bについては実施例１４
に、それぞれ製造方法の例を示す。

【００３９】

【化１６】

【００４０】（式中、A.Aはアミノ酸を、Meはメチル基
を、R¹は-CH₂又は-CH₂CH₂-を、R⁴はアミノ酸の側鎖を、
R⁵は水素原子又はメチル基を、それぞれ示す）

【００４１】すなわち、t-ブトキシカルボニル−カルボ
ン酸誘導体（２）とプロリンベンジルエステル塩酸塩
（３）とを縮合してt-ブトキシカルボニル−A.A−プロ
リンベンジルエステル（４）を得、これから保護基を外
して−A.A−プロリンベンジルエステル塩酸塩（５）と
した後、（５）と別途製造しておいた製造中間体ベンジ
ルオキシカルボニル−イソロイシル−メチルバリル−メ
チルアラニル−β−アラニン（６）とを縮合させてベン
ジルオキシカルボニル−イソロイシル−メチルバリル−
メチルアラニル−β−アラニル−A.A−プロリンベンジ
ルエステル（７）を得る。（７）の保護基を外してイソ
ロイシル−メチルバリル−メチルアラニル−β−アラニ
ル−A.A−プロリン（８）を得、（８）に環化反応を行
わしめれば、本発明化合物（１）のうち、R³が-NH又は-
N(CH₃)-である化合物（１’）が得られる。

【００４２】まず、t-ブトキシカルボニル−カルボン酸
誘導体（２）とプロリンベンジルエステル塩酸塩（３）
との縮合反応は、例えば水溶性カルボジイミド（WSCD）
に代表される縮合剤を１−ヒドロキシベンゾトリアゾー
ル（以下HOBtという）等の添加剤存在下に反応させるこ
とにより行われる。t-ブトキシカルボニル−A.A−プロ
リンベンジルエステル（４）の脱保護（t-ブトキシカル
ボニル基の除去）は、トリフルオロ酢酸、塩酸／酢酸、
塩酸／ジオキサン等を反応させることにより行われる。
得られたA.A−プロリンベンジルエステル塩酸塩（５）
と製造中間体ベンジルオキシカルボニル−イソロイシル
−メチルバリル−メチルアラニル−β−アラニン（６）
との縮合反応は、例えばWSCDをHOBtの存在下に反応させ
ることにより行われる。得られた化合物ベンジルオキシ
カルボニル−イソロイシル−メチルバリル−メチルアラ
ニル−β−アラニル−A.A−プロリンベンジルエステル
（７）の脱保護（ベンジルオキシカルボニル基及びベン
ジル基の切断）は、パラジウム触媒の存在下水素ガスを
作用させる接触還元、無水フッ化水素、トリフルオロメ
タンスルホン酸等により行われる。得られた化合物イソ
ロイシル−メチルバリル−メチルアラニル−β−アラニ
ル−A.A−プロリン（８）の縮合・環化反応は、例えばO
−（７−アザベンゾトリアゾル）−１，１，３，３−テ
トラメチルウロニウム ヘキサフルオロフォスフェート
（HATU）及びジイソプロピルエチルアミン（DIEA）の存
在下に縮合反応を行わせることによりなされる。

【００４３】なお、製造中間体ベンジルオキシカルボニ
ル−イソロイシル−メチルバリル−メチルアラニル−β
−アラニン（６）の合成は、例えば以下に示す反応式に
従って製造する。

【００４４】

【化１７】

【００４５】すなわち、t-ブトキシカルボニル−β−ア
ラニン（９）を臭化フェナシル及びトリメチルアミンの
存在下でt-ブトキシカルボニル−β−アラニンフェナシ
ルエステル（１０）を得、（１０）のt-ブトキシカルボ
ニル基をトリフルオロ酢酸、塩酸／酢酸、塩酸／ジオキ
サン等で外してβ−アラニンフェナシルエステル塩酸塩
（１１）を得る。（１１）に市販のt-ブトキシカルボニ
ル−メチルアラニンを縮合反応させてt-ブトキシカルボ
ニル−メチルアラニル−β−アラニンフェナシルエステ
ル（１２）を得、これからt-ブトキシカルボニル基を外
してメチルアラニル−β−アラニンフェナシルエステル
塩酸塩（１３）を得る。続いて（１３）とt-ブトキシカ
ルボニル−メチルバリンとを縮合反応させ、t-ブトキシ
カルボニル基を外してメチルバリル−メチルアラニル−
β−アラニンフェナシルエステル塩酸塩（１４）を得
る。（１４）とベンジルオキシカルボニル−イソロイシ
ンとを縮合反応させてベンジルオキシカルボニル−イソ
ロイシル−メチルバリル−メチルアラニル−β−アラニ
ンフェナシルエステル（１５）を得、脱保護してベンジ
ルオキシカルボニル−イソロイシル−メチルバリル−メ
チルアラニル−β−アラニン（６）を得る。

【００４６】以上のようにして得られた一般式（１）で
表される化合物は、経口、非経口いずれの方法によって
も投与することが可能であり、また本発明の強心剤は、
各種の剤型、例えば散剤、顆粒剤、錠剤、糖衣錠、カプ
セル剤、アンプル剤等の経口投与剤；皮下、筋肉若しく
は静脈注射剤；坐剤等とすることができる。上記製剤
は、一般式（１）で表される化合物単独又は一般式
（１）で表される化合物と賦形剤、増量剤、結合剤、湿
潤化剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝
剤、保存剤、矯味剤、香料、被覆剤等を適宜組み合わせ
て処方することにより製造することができる。

【００４７】かくして得られた本発明強心剤の投与量
は、症状、投与ル―ト等によっても異なるが、―般的に
成人において、一般式（１）で表される化合物を0.5〜5
00mg/日、好ましくは1〜200mg/日であり、これを通常1
日3〜4回に分けて投与するのが好適である。

【００４８】

【発明の効果】本発明は、新規な環状ペプチド及びそれ
を有効成分とする抗不整脈効果をもつ有用な強心剤を提
供するものである。

【００４９】

【実施例】以下に、実施例及び試験例を挙げて更に具体
的に本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例によ
って限定されるものではない。また、アミノ酸の立体配
置は、特に記載のない限りL体である。

【００５０】また、Bocはt-ブトキシカルボニル基を、P
acはフェナシル基を、Zはベンジルオキシカルボニル基
を、Bzlはベンジルエステル基を、OLeuはロイシン酸
を、それぞれ意味する。

【００５１】更に、¹H-NMRは、日本電子社製のJNM-EX27
0 FT NMR SYSTEMを用い、重クロロホルム溶液中で270MH
z ¹H-NMRスペクトルを測定した。基準物質はテトラメチ
ルシランを用いた。

【００５２】HPLC分析は、カラムとしてカプセルパック
C18（4.6φx150mm、資生堂社製）を使用し、以下の組成
をもつ溶媒（A：B＝70：30の混液、アンモニア水でpH5.
6に調整）で、1ml/minの流速で溶出した。カラム温度は
35℃とし、検出はUV 220nmで行った。

【００５３】

【表１】

【００５４】実施例１（合成中間体Z-Ile-MeVal-MeAla-
β-Ala-OH（６）の合成） （ａ）Boc-β-Ala-OPacの合成 Boc-β-Ala-OH（10.0g）をアセトン（100ml）に溶か
し、氷冷下、トリエチルアミン（8.1ml）を滴下し、引
き続き臭化フェナシル（11.57g）を加え、氷冷下5分
間、さらに室温で24時間攪拌した。アセトンを減圧留去
した後、酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽和食塩
水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄
し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去
後、ヘキサンで結晶化しBoc-β-Ala-OPac（14.7g）を得
た。

【００５５】（ｂ）HCl・H-β-Ala-OPacの合成 Boc-β-Ala-OPac（14.54g）に5.0N、HCl／ジオキサン
（189ml）を加えた後、室温に1時間放置した。ジオキサ
ンを減圧留去し、エーテルを加えて結晶化した。沈殿を
エーテルで洗浄後、減圧下で乾燥して、HCl・H-β-Ala-O
Pac（11.2g）を得た。

【００５６】（ｃ）Boc-MeAla-β-Ala-OPacの合成 HCl・H-β-Ala-OPac（5.00g）をDMF（25ml）に溶かし氷
冷下、Boc-MeAla-OH（4.37g）、HOAt（3.07g）を加え、
WSCD（4.94ml）を滴下した。氷冷下30分間、さらに室温
で18時間攪拌した。DMFを減圧留去し、残渣を酢酸エチ
ルに溶かした。10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水
素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。これを、シリ
カゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル288g、ト
ルエン：酢酸エチル＝2:1）により精製し、Boc-MeAla-
β-Ala-OPac（8.13g）を得た。

【００５７】（ｄ）HCl・H-MeAla-β-Ala-OPacの合成 Boc-MeAla-β-Ala-OPac（8.92g）に4.5N HCl／ジオキサ
ン（101ml）を加えた後、室温で１時間放置した。ジオ
キサンを減圧留去し、エーテルを加えて結晶化した。沈
殿をエーテルで洗浄後、減圧下で乾燥して、HCl・H-MeAl
a-β-Ala-OPac（7.32g）を得た。

【００５８】（ｅ）HCl・H-MeVal-MeAla-β-Ala-OPacの
合成 HCl・H-MeAla-β-Ala-OPac（7.00g）、Boc-MeVal-OH（5.
18g）、HOAt（3.20g）をDMF（35ml）に溶かし、氷冷下W
SCD（5.15ml）を滴下した。氷冷下1時間、さらに室温で
16時間攪拌した。DMFを減圧留去し、残渣を酢酸エチル
に溶かした。10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素
ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネ
シウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、残渣11.2gを得
た。この残渣に、4.5N HCl／ジオキサン（95.1ml）を加
えた後、室温で1時間放置した。ジオキサンを減圧留去
し、エーテルを加え結晶化した。沈殿をエーテルで洗浄
後、減圧下で乾燥して、HCl・H-MeVal-MeAla-β-Ala-OPa
c（8.71g）を得た。

【００５９】（ｆ）Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OPacの
合成 HCl・H-MeVal-MeAla-β-Ala-OPac（8.50g）、Z-Ile-OH
（5.37g）、HOAt（2.89g）をDMF（45ml）に溶かし、氷
冷下WSCD（4.64ml）を滴下した。氷冷下1時間、さらに
室温で17時間攪拌した。DMFを減圧留去し、残渣を酢酸
エチルに溶かした。10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭
酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸
マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。シリカゲ
ルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル480g、クロロ
ホルム：メタノール＝100:1）により精製し、Z-Ile-MeV
al-MeAla-β-Ala-OPac（10.7g）を得た。

【００６０】（ｇ）Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH
（６）の合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OPac（10.7g）を90%酢酸水
溶液（200ml）に溶かし、亜鉛粉末（53.7g）を加え、2
時間超音波攪拌した。亜鉛粉末を濾過後、酢酸を減圧留
去し、残渣を酢酸エチルに溶かして、10%クエン酸で洗
浄後、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し
た。残渣をヘキサンで2回洗浄後、シリカゲルカラムク
ロマトグラフィー（シリカゲル450g、クロロホルム：メ
タノール＝19:1）により精製した。残渣をヘキサンで結
晶化し、Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（6.05g）を得
た。

【００６１】実施例２（TK1-19の製造：化１６記載の製
造工程において、A.AがD-ロイシン） （ａ）HCl・H-Pro-OBzlの合成 Boc-Pro-OH（2.00g）をアセトン（20ml）に溶かし、氷
冷下でトリエチルアミン（1.42ml）及び臭化ベンジル
（1.22ml）を加えた。氷冷下で5分間、さらに室温で23
時間、40度で4時間攪拌した。アセトンを減圧留去した
後、酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽和食塩水、
飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄し、
無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、残
渣を得た。この残渣に5.0N HCl／ジオキサン（55.6ml）
を加えた後、室温に1時間放置した。ジオキサンを減圧
留去し、エーテルを加えて結晶化した。沈殿をエーテル
で洗浄後、減圧下で乾燥して、HCl・H-Pro-OBzl（2.32
g）を得た。

【００６２】（ｂ）Boc-D-Leu-Pro-OBzlの合成 HCl・H-Pro-OBzl（1.00g）をDMF（5ml）に溶かし、氷冷
下Boc-D-Leu（1.08g）、HOBt（0.62g）を加えた。WSCD
（1.00ml）を滴下し、氷冷下1時間、さらに室温で17時
間攪拌した。DMFを減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶
かした。10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナト
リウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。シリカゲルカラムク
ロマトグラフィー（シリカゲル54g、トルエン：酢酸エ
チル＝10:1）により精製し、Boc-D-Leu-Pro-OBzl（1.70
g）を得た。

【００６３】（ｃ）HCl・H-D-Leu-Pro-OBzlの合成 Boc-D-Leu-Pro-OBzl（1.7g）に5.0N HCl／ジオキサン
（16.3ml）を加えた後、室温に1時間放置した。ジオキ
サンを減圧留去し、エーテルを加えて結晶化した。残渣
をエーテルで洗浄後、減圧下で乾燥して、HCl・H-D-Leu-
Pro-OBzl（1.20g）を得た。

【００６４】（ｄ）Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-D-Leu-P
ro-OBzl 実施例１で合成したZ-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（0.4
03g）をDMF（25ml）に溶かした。氷冷下、HCl・H-D-Leu-
Pro-OBzl（0.282g）、HOBt（112mg）加えた後、WSCD
（0.182ml）を滴下した。氷冷下2時間、さらに室温で20
時間攪拌した。DMFを減圧留去した後、酢酸エチルに溶
かし、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリ
ウム水、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、残渣を得た。シリカゲ
ルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル26g、クロロ
ホルムのみで溶出）により精製し、Z-Ile-MeVal-MeAla-
β-Ala-D-Leu-Pro-OBzl（0.485g）を得た。

【００６５】（ｅ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-D-Leu-P
ro-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-D-Leu-Pro-OBzl（360mg）を
メタノール：酢酸：水＝8:2:1（30ml）に溶かし、パラ
ジウム黒（スパーテル小匙2杯）を入れ、室温で攪拌下
水素ガスを1時間吹き込んだ。パラジウムを濾過し、母
液を減圧濃縮後、水に溶かし凍結乾燥して、H-Ile-MeVa
l-MeAla-β-Ala-D-Leu-Pro-OH（256mg）を得た。

【００６６】（ｆ）TK1-19の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-D-Leu-Pro-OH（49.7mg）
を、ジクロロメタン（25ml）に溶かし、DIEA（85.2μ
l）を加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（93.
0mg）の入ったジクロロメタン溶液（57ml）に2時間かけ
て滴下し、その後室温で17時間攪拌した。 ジクロロメ
タンを減圧留去した後、酢酸エチルに溶かし、10%クエ
ン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食
塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶
媒を減圧留去し、残渣を、シリカゲル薄層クロマトグラ
フィー（クロロホルム：メタノール＝9:1）により精製
し、TK1-19（8.82mg）を得た。

【００６７】¹H-NMR（270MHz、CDCl₃）：δ8.17（t, 1
H, β-Ala NH)、7.25(d, 1H, Ile NH)、5.78(d, 1H, Le
u NH)、5.20(q, 1H, MeAla α)、5.02(d, 1H, Pro
α)、4.82(q, 1H, Ile α)、4.64(d, 1H, MeVal α)、
4.38(m, 1H, Leu α)、4.10(t, 1H,Pro δ₁)、3.95(m,
1H, β-Ala β₁)、3.49(m, 1H, Pro δ₂)、3.22(s, 3H,
N-Me)、3.17(d, 1H, β-Ala β₂)、2.73(s, 3H, N-M
e）、2.36-2.26(m, 4H, Proβ β-Ala α)、2.08-1.96
(m, 4H, Ileβ Pro γMeVal β)、1.56-1.38(m, 5H,Ile
γ₁ Leu βγ)、1.01-0.82(m, 18H, Ile γ₂δ MeVal
γLeuδ)PD-MS：m/z 593.7(M+H)⁺C₃₀H₅₂O₆N₆としての計
算値：592.4

【００６８】実施例３（TK4-5の製造：化１６記載の製
造工程において、A.AがL-ロイシン） （ａ）Boc-L-Leu-Pro-OBzlの合成 HCl・H-Pro-OBzl（0.50g）をDMF（3ml）に溶かし、氷冷
下Boc-L-Leu（0.541g）、HOBt（0.31g）を加えた。WSCD
（0.50ml）を滴下し、氷冷下1時間、さらに室温で17時
間攪拌した。DMFを減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶
かした。10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナト
リウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。シリカゲルカラムク
ロマトグラフィー（シリカゲル40g、クロロホルム：メ
タノール＝100:1）により精製し、Boc-L-Leu-Pro-OBzl
（0.65g）を得た。

【００６９】（ｂ）HCl・H-L-Leu-Pro-OBzlの合成 Boc-L-Leu-Pro-OBZl（0.65g）に4.5N HCl／ジオキサン
（6.90ml）を加えた後、室温に1時間放置した。ジオキ
サンを減圧留去し、エーテルを加えて結晶化した。残渣
をエーテルで洗浄後、減圧下で乾燥して、HCl・H-L-Leu-
Pro-OBzl（0.493g）を得た。

【００７０】（ｃ）Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-Leu-P
ro-OBzlの合成 実施例１で合成したZ-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（0.2
11g）をDMF（3ml）に溶かした。氷冷下、HCl・H-L-Leu-P
ro-OBzl（0.147g）、HATU（0.225g）加えた後、DIEA
（0.206ml）を滴下した。氷冷下2時間、さらに室温で20
時間攪拌した。DMFを減圧留去した後、酢酸エチルに溶
かし、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリ
ウム水、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、残渣を得た。シリカゲ
ルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル25g、クロロ
ホルム：メタノール＝30:1）により精製し、Z-Ile-MeVa
l-MeAla-β-Ala-L-Leu-Pro-OBzl（0.237g）を得た。

【００７１】（ｄ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-Leu-P
ro-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-Leu-Pro-OBzl（0.237g）
をメタノール：酢酸：水＝8:2:1（30ml）に溶かし、パ
ラジウム黒（スパーテル小匙2杯）を入れ、室温で攪拌
下水素ガスを１時間吹き込んだ。パラジウムを濾過し、
母液を減圧濃縮後、 水に溶かし凍結乾燥して、H-Ile-M
eVal-MeAla-β-Ala-L-Leu-Pro-OH（0.175g）を得た。

【００７２】（ｅ）TK4-5の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-Leu-Pro-OH（50.0mg）を
ジクロロメタン（25ml）に溶かし、これにDIEA（85.6μ
l）を加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（93.
4mg）の入ったジクロロメタン溶液（57ml）に2時間かけ
て滴下し、その後室温で18時間攪拌した。 ジクロロメ
タンを減圧留去した後、酢酸エチルに溶かし、10%クエ
ン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食
塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。
溶媒を減圧留去し、残渣を得た。シリカゲル薄層クロマ
トグラフィー（クロロホルム：メタノール＝9:1）によ
り精製し、TK4-5（5.43mg）を得た。

【００７３】¹H-NMR（270MHz、CDCl₃)：δ8.56(d, 1H,
Ile NH)、7.90(d,1H, β-Ala NH)、5.86(s, 1H, Leu N
H)、5.05(d, 1H, MeVal α)、4.98(q, 1H, MeAla α)、
4.56(t1H, Ile α)、4.28(d, 1H, Leu α)、4.19(d, 1
H, Pro α)、3.99(m, 1H, β-Ala β₁)、3.65-3.59(m,
2H, Pro δ)、3.24(s, 3H, N-Me)、3.13(m, 1H, β-Ala
β₂)、2.72(s, 3H, N-Me)、2.42(m, 2H, β-Ala α)、
2.33(m, 1H, MeVal β)、2.27-2.17(m, 3H, Ile β Pro
β)、1.92(m, 2H, Pro γ)、1.33(d, 3H, MeAla β)、
1.28-1.25(m, 3H, Leu β Leu γ)、1.00-0.75(m, 18H,
Ile γ₂δ MeVal γ Leu δ) PD-MS：m/z 594.0(M+H)⁺ C₃₀H₅₂O₆N₆としての計算値：592.4

【００７４】実施例４（TK2-6-A及びTK2-6-Bの製造：化
１６記載の製造工程において、A.AがそれぞれL-メチル
ロイシン及びD-メチルロイシン） （ａ）Boc-DL-MeLeu-OHの合成 アルゴン雰囲気下でBoc-D-Leu-OH（4.63g）を無水THF
（10ml）に溶かし、これを氷冷下水素化カリウム（2.23
g）、18-クラウン-6（0.246g）を含むTHF（40ml）へ滴
下した。これに、ヨウ化メチル（2.32ml）を滴下した
後、水浴（20℃）中で15時間攪拌した。反応液に氷酢酸
（2ml）を加えて過剰の塩基を分解した後、2N水酸化ナ
トリウムを加えpHを8.5にして、酢酸エチルで洗浄し
た。分離した水層を2N HClでpH2.5にして、酢酸エチル
で抽出した。無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減
圧留去し、残渣を得た。シリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（シリカゲル400g、クロロホルム：メタノール＝
19:1）にて精製しBoc-DL-MeLeu-OH（1.37g）を得た。N
α−（２，４−ジヒドロ−５−フルオロフェニル）−L/
D−アラニンアミド（FDAA）誘導化し、HPLCにより分析
することにより、このメチル化反応の際にラセミ化が起
こったことを確認した。このD、L体を分離せずに、以下
の合成ではそのまま用いた。

【００７５】（ｂ）Boc-DL-MeLeu-L-Pro-OBzlの合成 HCl・H-Pro-OBzl（0.500g）、Boc-DL-MeLeu-OH（0.533
g）、HOAt（0.310g）をDMF（3ml）に溶かし、氷冷下WSC
D（0.498ml）を滴下し、氷冷下1時間、さらに室温で18
時間攪拌した。DMFを減圧留去した後、酢酸エチルに溶
かし、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリ
ウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネシウム
で乾燥後、溶媒を減圧留去し、残渣を得た。シリカゲル
カラムクロマトグラフィー（シリカゲル40g、クロロホ
ルム：メタノール＝50:1）により精製し、Boc-DL-MeLeu
-L-Pro-OBzl（0.520g）を得た。

【００７６】（ｃ）HCl・H-DL-MeLeu-L-Pro-OBzlの合成 Boc-DL-MeLeu-L-Pro-OBzl（0.52g）に4.5N HCl／ジオキ
サン（5.4ml）を加えた後、室温で1時間放置した。ジオ
キサンを減圧留去し、エーテルを加えて結晶化した。残
渣をエーテルで洗浄した後、減圧下で乾燥してHCl・H-DL
-MeLeu-L-Pro-OBzl（0.368g）を得た。

【００７７】（ｄ）Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-DL-MeLe
u-Pro-OBzlの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（0.219g）をDMF（3ml）
に溶かした。氷冷下HCl・H-DL-MeLeu-Pro-OBzl（0.159
g）、HATU（0.234g）加えた後、DIEA（0.214ml）を滴下
した。氷冷下1時間、さらに室温で17時間攪拌した。DMF
を減圧留去した後、酢酸エチルに溶かし、10％クエン
酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩
水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒
を減圧留去し、残渣を得た。シリカゲルカラムクロマト
グラフィー（シリカゲル25g、クロロホルム：メタノー
ル＝100：1）により精製し、Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala
-DL-MeLeu-Pro-OBzl（0.227g）を得た。

【００７８】（ｅ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-DL-MeLe
u-Pro-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-DL-MeLeu-Pro-OBzl（0.227
g）をメタノール：酢酸：水＝8:2:1（30ml）に溶かし、
パラジウム黒（スパーテル小匙2杯）を入れ、室温で攪
拌下水素ガスを1時間吹き込んだ。パラジウムを濾過
し、母液を減圧濃縮後、 水に溶かし凍結乾燥して、H-I
le-MeVal-MeAla-β-Ala-DL-MeLeu-Pro-OH（0.171g）を
得た。

【００７９】（ｆ）TK2-6-A及びTK2-6-Bの合成の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-DL-MeLeu-Pro-OH （0.50g）
をジクロロメタン（25ml）に溶かし、これにDIEA（83.8
μl）を加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（9
1.4mg）の入ったジクロロメタン溶液（55ml）に2時間か
けて滴下し、その後室温で17時間攪拌した。 ジクロロ
メタンを減圧留去した後、沈殿物を酢酸エチルに溶か
し、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウ
ム水、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウム
で乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲル薄層
クロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝19:
1）により分離し、TK2-6-A（6.48mg）及びTK2-6-B（5.1
0mg）を得た。

【００８０】TK2-6-Aの¹H-NMR（270MHz、CDCl₃）：δ9.
03(d, 1H, Ile NH), 7.83(1H, β-Ala NH), 4.99(q, 1
H, MeAla α), 4.94(d, 1H, Pro α), 4.82(q, 1H, Ile
α),4.50(q, 1H, MeVal α), 4.29(d, 1H, MeLeu α),
3.98-3.90(m, 1H, β-Alaβ₁), 3.59-3.30(m, 2H,Pro
δ), 3.14(s, 3H, N-Me), 3.07-3.04(m, 1H, β-Ala β
₂), 3.02(s, 3H, N-Me), 2.66(s, 3H, N-Me), 2.62-2.3
0(m, 2H, β-Ala α), 2.00-1.80(m, 4H, Ile β MeVal
β MeLeu β), 1.66-1.52(m, 3H, MeLeuγProγ), 1.3
3-1.18(m, 4H, Ile γ₁ Pro β), 1.25(d, 3H, MeAla
β), 0.95-0.72(m, 18H, Ile γ₂δ MeVal γ MeLeu
δ) PD-MS：m/z 607.9(M+H)⁺ C₃₁H₅₄O₆N₆としての計算値：606.4 HPLC分析：保持時間11.19分

【００８１】TK2-6-Bの¹H-NMR（270MHz、CDCl₃）：δ8.
12(d, 1H, β-Ala NH), 7.18(d, 1H, Ile NH), 5.22(q,
1H, MeAla α), 5.01(d, 1H, MeVal α), 4.84(q, 1H,
Ileα), 4.75(q, 1H, Pro α), 4.70(d, 1H, MeLeu
α), 4.03-3.94(m, 2H, β-Ala β₁ Pro δ₁), 3.50(q,
1H, Pro δ₂), 3.28-3.20(m, 1H, β-Ala β₂), 3.21
(s, 3H, N-Me), 3.12(s, 3H, N-Me), 2.73(s, 3H, N-M
e), 2.65-2.42(m, 2H, β-Ala α), 2.37-2.28(m, 1H,
MeVal β), 2.07-1.88(m, 7H, Ile β MeLeu β Pro β
γ), 1.46-1.33(m, 3H, Ile γ₁ MeLeu γ), 1.30(d,
3H, MeAla β), 1.02-0.81(m, 18H, Ile γ₂δ MeVal
γ MeLeu δ) PD-MS：m/z 607.8(M+H)⁺ C₃₁H₅₄O₆N₆としての計算値：606.4 HPLC分析：保持時間15.49分

【００８２】なお、D体及びL体の確認法は以下の通りで
ある。TK2-6-AおよびTK2-6-B（1μmol）をそれぞれ6N H
Clで150℃で1時間加水分解した後、塩酸を留去した。得
られた沈殿を、アセトン：水＝1:1（1.2ml）に溶かしFD
AA（4.2μmol）及び0.2M炭酸ナトリウム水溶液（60μ
l）を加え、40℃で1時間反応した。これに1N塩酸を加え
て反応を停止後、HPLC（YMCPack、ODS）により構成アミ
ノ酸の立体配置の分析を行った。その結果、TK2-6-Aが
［L-MeLeu⁵]−誘導体で、TK2-6-Bが［D-MeLeu⁵]−誘導
体であることが判明した。

【００８３】実施例５（TK6-5の製造：化１６記載の製
造工程において、A.AがL-メチルバリン） （ａ）HCl・H-L-MeVal-L-Pro-OBzlの合成 HCl・H-Pro-OBzl（0.551g）、Boc-L- MeVal-OH（0.502
g）及びHOAt（0.324g）をDMF（5ml）に溶かし、氷冷下W
SCD（0.521ml）を滴下した。氷冷下1時間、さらに室温
で18時間攪拌した。DMFを減圧留去した後、酢酸エチル
に溶かし、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナ
トリウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネシ
ウムで乾燥後、溶媒を減圧留去し、残渣（0.972g）を得
た。この残渣に4.5N HCl／ジオキサン（10.1ml）を加え
た後、室温に1時間放置した。ジオキサンを減圧留去
し、エーテルを加えて結晶化した。沈殿をエーテルで洗
浄後、減圧下で乾燥して、HCl・H-L-MeVal-L-Pro-OBzl
（0.664g）を得た。

【００８４】（ｂ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeVal
-Pro-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（0.200g）、HCl・H-L-MeV
al-Pro-OBzl（0.139g）及びHOAt（0.056g）をDMF（2m
l）に溶かし、氷冷下WSCD（0.090ml）を滴下した。氷冷
下1時間、さらに室温で16時間攪拌した。DMFを減圧留去
した後、酢酸エチルに溶かし、10％クエン酸、飽和食塩
水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄
し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧留去
し、残渣を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー
（シリカゲル20g、クロロホルム：メタノール＝50：1）
により精製した。これををメタノール：酢酸：水＝8:2:
1（30ml）に溶かし、パラジウム黒（スパーテル小匙2
杯）を入れ、室温で攪拌下水素ガスを１時間吹き込ん
だ。パラジウムを濾過し、母液を減圧濃縮後、 水に溶
かし凍結乾燥して、H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeVal
-Pro-OH（0.252g）を得た。

【００８５】（ｃ）TK6ー5の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeVal-Pro-OH（0.100g）
をジクロロメタン（25ml）に溶かし、DIEA（85.7μl）
を加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（93.5m
g）の入ったジクロロメタン溶液（139ml）に2時間かけ
て滴下し、その後室温で18時間攪拌した 。ジクロロメ
タンを減圧留去した後、沈殿物を酢酸エチルに溶かし、
10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム
水、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで
乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲル薄層ク
ロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝19:1）
により分離し、TK6-5(3.61mg）を得た。

【００８６】¹H-NMR（270MHz、CDCl₃）：δ8.84(d, 1H,
Ile NH), 8.33(d, 1H, β-Ala NH), 5.20(q, 1H, MeAl
a α), 5.06-5.02(2H, Ile α MeVal α), 4.75(d, 1H,
Proα), 4.66(d, 1H, MeVal α), 3.94-3.80(m, 2H,
β-Ala β₁ Pro δ₁), 3.28-3.23(m, 2H, β-Ala β₂
Pro δ₂), 3.19(s, 3H, N-Me), 3.14(s, 3H, N-Me),2.7
8(s, 3H, N-Me), 2.58-2.54(m, 1H, Pro γ₁), 2.40-
2.23(m, 3H, Ile βMeVal β), 1.94-1.83(m, 3H, β-A
la α Pro γ₂), 1.77-1.43(m, 2H, Pro β), 1.32(d,
3H, MeAla β), 1.19-1.06(m, 2H, Ile γ₁), 1.03-0.7
2(m, 18H, Ile γ₂δ MeVal γ)。 PD-MS：m/z 594.0(M+H)⁺ 分子式C₃₀H₅₂O₆N₆としての計算値：592.4 HPLC分析：保持時間7.93分

【００８７】実施例６（TK7-5の製造：化１６記載の製
造工程において、A.AがL-メチルアラニン） （ａ）HCl・H-L-MeAla-L-Pro-OBzlの合成 HCl・H-Pro-OBzl（0.624g）、Boc-L-MeAla-OH（0.500g）
及びHOAt（0.368g）をDMF（5ml）に溶かし、氷冷下WSCD
（0.593ml）を滴下し、氷冷下1時間、さらに室温で18時
間攪拌した。DMFを減圧留去した後、酢酸エチルに溶か
し、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウ
ム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネシウムで
乾燥後、溶媒を減圧留去し、残渣（1.05g）を得た。 残
渣に4.5N HCl／ジオキサン（10.9ml）を加えた後、室温
に1時間放置した。ジオキサンを減圧留去し、エーテル
を加えて結晶化した。残渣をエーテルで洗浄後、減圧下
で乾燥して、HCl・H-L-MeAla-L-Pro-OBzl（0.653g）を得
た。

【００８８】（ｂ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeAla
-Pro-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（0.200g）、HCl・H-L-MeA
la-Pro-OBzl（0.128g）及びHOAt（0.056g）をDMF（2m
l）に溶かし、氷冷下WSCD（0.090ml）を滴下した。氷冷
下1時間、さらに室温で16時間攪拌した。DMFを減圧留去
した後、酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽和食塩
水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄
し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧留去
し、残渣を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（シリカゲル20g、クロロホルム：メタノール＝5
0:1）により精製した。これをメタノール：酢酸：水＝
8:2:1（30ml）に溶かし、パラジウム黒（スパーテル小
匙2杯）を入れ、室温で攪拌下水素ガスを１時間吹き込
んだ。パラジウムを濾過し、母液を減圧濃縮後、 水に
溶かし凍結乾燥してH-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeAla
-Pro-OH（0.186g）を得た。

【００８９】（ｃ）TK7-5の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeAla-Pro-OH（58.2mg）
をジクロロメタン（25ml）に溶かし、DIEA（105μl）を
加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（114mg）
の入ったジクロロメタン溶液（75ml）に2時間かけて滴
下し、その後室温で18時間攪拌した。 ジクロロメタン
を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン
酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩
水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶
媒を減圧留去し、残渣をシリカゲル薄層クロマトグラフ
ィー（クロロホルム：メタノール＝19:1）により分離
し、TK7-5（1.5mg）を得た。

【００９０】¹H-NMR（270MHz、CDCl₃）：δ9.15(d, 1H,
Ile NH), 7.83(d, 1H, β-Ala NH), 5.10(q, 1H, MeAl
a α), 5.03-4.96(2H, Ile α MeVal α), 4,47(q, 1H,
MeAla α), 4.40(d, 1H, Pro α), 4.08-3.97(m, 1H,
β-Ala β₁), 3.73-3.62(m, 1H, Pro δ₁), 3.48-3.40
(m, 1H, Pro δ₂), 3.21(s, 3H, N-Me), 3.16-3.11(m,1
H, β-Ala β₂), 3.08(s,3H,N-Me), 2.72(s, 3H, N-M
e), 2.37-2.31(m, 1H, MeVal β), 2.61-2.52(m, 2H,
β-Ala α), 2.06-1.71(m, 5H, Pro γβ Ile β),1.45
-1.41(m, 2H, Ileγ₁), 1.38(d, 3H, MeAla β), 1.30
(d, 3H, MeAla β),0.94-0.77(m, 12H, Ile γ₂δ MeVa
l γ) PD-MSの測定値：m/z 565.9(M+H)⁺ 分子式C₂₈H₄₈O₆N₆としての計算値：564.3 HPLC分析：保持時間4.15分

【００９１】実施例７（TK8-5の合成：化１６記載の製
造工程において、A.AがSar（ザルコシン）） （ａ）HCl・H-Sar-L-Pro-OBzlの合成 HCl・H-Pro-OBzl（0.670g）、Boc-Sar-OH（0.500g）及び
HOAt（0.396g）をDMF（5ml）に溶かし、氷冷下WSCD（0.
637ml）を滴下し、氷冷下１時間、さらに室温で18時間
攪拌した。DMFを減圧留去した後、残渣を酢酸エチルに
溶かし、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナト
リウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣（1.07g）を得
た。 残渣に4.5N HCl／ジオキサン（11.7ml）を加えた
後、室温に１時間放置した。ジオキサンを減圧留去し、
エーテルを加えて結晶化した。残渣をエーテルで洗浄
後、減圧下で乾燥して、HCl・H-Sar-L-Pro-OBzl（0.575
g）を得た。

【００９２】（ｂ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-Sar-Pro
-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（0.200g）、HCl・HーSar-P
ro-OBzl（0.123g）及びHOAt（0.056g）をDMF（2ml）に
溶かし、氷冷下WSCD（0.090ml）を滴下した。氷冷下1時
間、さらに室温で16時間攪拌した。DMFを減圧留去し残
渣を、酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽和食塩
水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄
し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧留去
し、沈殿物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィー（シリカゲル20g、クロロホルム：メタノール
＝50:1）により精製した。これをメタノール：酢酸：水
＝8:2:1（30ml）に溶かし、パラジウム黒（スパーテル
小匙2杯）を入れ、室温で攪拌下水素ガスを1時間吹き込
んだ。パラジウムを濾過し、母液を減圧濃縮後、 水に
溶かし凍結乾燥して、H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-Sar-P
ro-OH（0.174g）を得た。

【００９３】（ｃ）TK8-5の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-Sar-Pro-OH（56.8mg）をジ
クロロメタン（25ml）に溶かし、DIEA（105μl）を加え
た。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（114mg）の入
ったジクロロメタン溶液（75ml）に2時間かけて滴下
し、その後室温で18時間攪拌した。 ジクロロメタンを
減圧留去した後、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエ
ン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食
塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。
溶媒を減圧留去し、残渣を得た。これをシリカゲル薄層
クロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝19:
1）により分離し、TK8-5（2.91mg）を得た。

【００９４】¹H-NMR（270MHz、CDCl₃）：δ8.05(d, 1H,
β-Ala NH), 7.42(d, 1H, Ile NH), 5.29(q, 1H, MeAl
a α), 4.99(q, 1H, MeVal α), 4.86(q, 1H, Ile α),
4.74(d, 1H, Pro α), 4.51(d, 1H, Sar α₁), 4.08-
3.97(m, 1H, β-Ala β₁), 3.91-3.85(m, 1H, Pro
δ₁), 3.48-3.45(m, 1H, Pro δ₂), 3.27(d, 1H, Sar
α₂), 3.22-3.13(m, 1H, β-Ala β₂), 3.21(s, 3H, N-
Me), 3.20(s, 3H, N-Me), 2.74(s, 3H, N-Me), 2.71-2.
65(m, 1H, β-Ala α₁), 2.47(m, 1H, β-Ala α₂),2.4
1-2.31(m, 1H, MeVal β), 2.07-1.95(m, 5H, Ile β P
ro γβ), 1.47-1.36(m, 2H, Ile γ₁), 1.30(d, 3H, M
eAla β), 0.95-0.80( m, 12H,Ile γ₂δ MeVal γ) PD-MSの測定値：m/z 551.7(M+H)⁺ 分子式C₂₇H₄₆O₆N₆としての計算値：550.3 HPLC分析：保持時間3.77分

【００９５】実施例８（TK3-8の製造） 本化合物は下記の製造方法に従って製造した。

【００９６】

【化１８】

【００９７】

【化１９】

【００９８】（ａ）L-ロイシン酸フェナシルエステルの
合成 L-ロイシン（3.00g）を水：1N塩酸：酢酸＝4.5:1:2の溶
媒（150ml）に溶かし、氷冷下これに、亜硝酸ナトリウ
ム水溶液（16.1g／水28ml）を40分かけて滴下後、さら
に室温で1時間攪拌した。溶媒を減圧留去後、水に溶か
し、塩酸でpH3にし、エーテルで抽出した。エーテル層
を飽和食塩水で洗浄後、減圧留去し、2.53gの沈殿を得
た。この沈殿のうち（2.00g）を酢酸エチルに溶かし、
氷冷下トリエチルアミン（2.32ml）を加えた後、さらに
臭化フェナシル（3.31g）を加え、室温で41時間攪拌し
た。溶媒を減圧留去後、酢酸エチルに溶かし、10%クエ
ン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食
塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、酢
酸エチルを減圧留去した。沈殿をクロロホルムに溶か
し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル
180g、クロロホルムのみにて溶出）により精製し、L-ロ
イシン酸フェナシルエステル（1.86g）を得た。

【００９９】（ｂ）Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-
OPacの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（0.500g）、L-ロイシン
酸フェナシルエステル（0.257g）及び4-ピロリジノピリ
ジン（41.6mg）をDMF（2ml）に溶かし、氷冷下DCC（213
mg）を加えて氷冷下30分、さらに室温で15時間攪拌し
た。反応液に酢酸エチルを加え不溶物を炉去した。これ
を10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム
水、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで
乾燥後、溶媒を減圧留去した。残渣をクロロホルム：メ
タノール＝100:1に溶かし、シリカゲルカラムクロマト
グラフィー（シリカゲル40g、クロロホルム：メタノー
ル＝100：1）で精製し、Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-O
Leu-OPac（378mg）を得た。

【０１００】（ｃ）Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-
OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-OPac（0.378g）を90
%酢酸水（20ml）に溶かし、亜鉛粉末（1.61g）を加え、
2時間ソニケーションした。 亜鉛粉末を濾過後、酢酸を
減圧留去した。残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン
酸で洗浄後、硫酸マグネシウム乾燥した。溶媒を減圧留
去した残渣をクロロホルム：メタノール＝19:1に溶か
し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル
40g、クロロホルム：メタノール＝19:1）で精製し、Z-I
le-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-OH（250mg）を得た。

【０１０１】（ｄ）Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-
Pro-OBzlの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-OH（100mg）、HCl・H
-Pro-OBzl（39.2mg）、HOAt（23.1mg）をDMF（2ml）に
溶かし、氷冷下WSCD（37.2μl）を滴下後、氷冷下1時
間、さらに室温で16時間攪拌した。DMFを減圧留去した
後、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽和食
塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗
浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留
去し、残渣をクロロホルム：メタノール＝100:1に溶か
し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル
10g、クロロホルム：メタノール＝100:1）で精製し、Z-
Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-Pro-OBzl（86.9mg）を
得た。

【０１０２】（ｅ）H-IleーMeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-
Pro-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-Pro-OBzl（86.9mg）
をメタノール：酢酸：水＝8:2:1（30ml）に溶かし、パ
ラジウム黒（スパーテル小匙2杯）を入れ、室温で攪拌
下水素ガスを１時間吹き込んだ。パラジウムを濾過し、
母液を減圧濃縮後、 水に溶かし凍結乾燥して、H-IleーM
eVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-Pro-OH（64.0mg）を得た。

【０１０３】（ｆ）TK3-8の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-Pro-OH（50.0mg）を
ジクロロメタン（25ml）に溶かし、DIEA（42.7μl）を
加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（46.9mg）
の入ったジクロロメタン溶液（57ml）に2時間かけて滴
下した。その後室温で16時間攪拌後、溶媒を減圧留去し
た。残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽和食
塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗
浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧留去
し、残渣を得た。これをシリカゲル薄層クロマトグラフ
ィー（クロロホルム：メタノール＝19:1）により分離
し、TK3-8（5.90mg）を得た。

【０１０４】TK3-8は次の物理化学的性質を示す。 (1)形状および色調 白色の粉末 (2)分子式 C₃₀H₅₁N₅O₇ (3)分子量 PD-MSの測定値m/z 594.6(M+H)⁺ (4)元素分析 FISONS社製EA1108型元素分析装置で測定した実験値は、
C59.33、H8.99、N11.73であった。 C₃₀H₅₁N₅O₇・H₂Oとしての計算値は、C58.90、H8.73、N1
1.45 (5)融点 ビュッヒ社製B-530型浸線付き温度計で測定したとこ
ろ、177.0〜180.0℃であった。 (6)比旋光度 堀場製作所製SEPA-300型旋光度形で測定したところ、
[α]²⁵ _D -235.6°（c 1.0、メタノール）であった。 (7)紫外線吸収スペクトル 紫外可視分光光度計（島津製作所製UV-160A型）で測定
した。 λmax（メタノール）nm（ε）：208（21300±900） (8)溶解性 可溶:メタノール、エタノール、クロロホルム 不溶:水 (9)赤外線吸収スペクトル KBr錠剤法によりFT-IR（パーキンエルマーSystem2000）
を用い、赤外線吸収スぺクトルを測定した。結果を図１
に示す。 (10)¹H-NMRスペクトル¹ H-NMR（270MHz, CDCl₃）：δ 7.92(d, 1H, Ile NH),
7.84(d, 1H, β-Ala NH), 5.03(d, 1H, MeVal α), 4.9
9-4.89(m, 2H, MeAla α, OLeu α), 4.58(t, 1H, Ile
α), 4.15(d, 1H, Pro α), 4.08-4.00(m, 1H, β-Ala
β₁), 3.65-3.60(m, 2H, Pro δ), 3.42-3.40(m, 1H,
β-Ala β₂), 3.25(s, 3H, N-Me), 2.71(s, 3H, N-Me),
2.60(m, 2H, β-Ala α), 2.49-2.31(m, 2H, Pro β),
2.28-2.07(m, 1H, MeVal β), 1.96-1.82(m, 1H, Ile
β), 1.80-1.67(m, 4H, OLeu β, Pro γ), 1.34(d, 3
H, MeAla β), 1.28-1.12(m, 1H, OLeu γ), 1.28-1.12
(m, 2H, Ile γ₁), 0.98-0.80(m, 18H, Ile γ₂δ, MeV
al γ, OLeu δ). (11)HPLC分析：保持時間14.59分

【０１０５】実施例９（TK11-3の製造） 本化合物は下記の製造方法に従って製造した。

【０１０６】

【化２０】

【０１０７】

【化２１】

【０１０８】（ａ）N-（t-ブトキシカルボニル）-L-ピ
ペコリン酸（以下、Boc-L-Pip-OHと表す）の合成 L-ピペコリン酸（2.00）をジオキサン：水＝2:1（50m
l）に溶かし、氷冷下炭酸ナトリウム（3.91g）、(Boc)₂
O（3.92ml）を加えた後、室温で2時間攪拌した。これに
1M NaOH（15ml）、(Boc)₂O（3.92ml）を追加し、さらに
室温で13時間攪拌した。溶媒を減圧留去後、水に溶かし
てエーテルで洗浄した。水層にクエン酸を加え、酢酸エ
チルで抽出した。洗浄酢酸エチルを濃縮後、ヘキサンで
結晶化、洗浄しBoc-L-Pip-OH（3.14g）を得た。

【０１０９】（ｂ）HCl・H-L-Pip-OBzlの合成 Boc-L-Pip-OH（2.50g）をメタノール水溶液（30ml）に
溶かし、炭酸セシウム水溶液（2.0g）を加えた後、減圧
濃縮した。DMFを加えて2回共沸し水を除いた。沈殿をDM
F（30ml）に溶かし、氷冷下臭化ベンジル（1.43ml）を
加え、氷冷下10分、さらに室温で20時間攪拌した。DMF
を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶かし、水で洗浄後
酢酸エチルを濃縮した。得られた残渣（3.48g）に4.5N
HCl／ジオキサン（48.4ml）を加えた後、室温に1時間放
置した。ジオキサンを減圧留去し、エーテルを加えて結
晶化した。残渣をエーテルで洗浄後、減圧下で乾燥して
HCl・H-L-Pip-OBzl（2.39g）を得た。

【０１１０】（ｃ）Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-
L-Pip-OBzlの合成 実施例８の工程（ａ）〜（ｃ）により合成されたZ-Ile-
MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-OH（87.0mg）、HCl・H-L-Pi
p-OBzl（36.0mg）及びHOAt（20.0mg）をDMF（2ml）に溶
かし、氷冷下WSCD（32.3μl）を滴下後、氷冷下1時間、
さらに室温で16時間攪拌した。DMFを減圧留去した後、
残渣を酢酸エチルに溶かし、10％クエン酸、飽和食塩
水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄
し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去
し、残渣を得た。これをクロロホルム：メタノール＝10
0：1に溶かし、シリカゲルカラムクロマトグラフィー
（シリカゲル6.5g、クロロホルム：メタノール＝100：
1）で精製し、Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-L-Pip
-OBzl（110mg）を得た。

【０１１１】（ｄ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-
L-Pip-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-L-Pip-OBzl（110m
g）をメタノール：酢酸：水＝8：2：1（30ml）に溶か
し、パラジウム黒（スパーテル小匙2杯）を入れ、室温
で攪拌下水素ガスを1時間吹き込んだ。パラジウムを濾
過し、母液を減圧濃縮後、 水に溶かし凍結乾燥して、H
-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-L-Pip-OH（75.4mg）
を得た。

【０１１２】（ｅ）TK11-3の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-OLeu-L-Pip-OH（50.0mg）
をジクロロメタン（25ml）に溶かし、これにDIEA（83.6
μl）を加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（9
1.3mg）の入ったジクロロメタン溶液（55ml）に2時間か
けて滴下し、その後室温で16時間攪拌後、溶媒を減圧留
去した。残渣を酢酸エチルに溶かし、10％クエン酸、飽
和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順
で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減
圧留去し、残渣をシリカゲル薄層クロマトグラフィー
（クロロホルム：メタノール＝19：1）により分離し、T
K11-3（13.6mg）を得た。

【０１１３】¹H-NMR（270MHz, CDCl₃）：δ 8.40(d, 1
H, Ile NH), 7.82(d, 1H, β-Ala NH), 5.08-4.99(m, 3
H, Ile α, MeAla α, OLeu α), 4.89(d, 1H, MeVal
α), 4.67(d, 1H, Pip α), 4.38(t, 2H, Pip ε), 4.1
2-4.02 (m, 1H, β-Ala β₁),3.23 (s, 3H, N-Me), 3.0
1-2.96 (m, 1H, β-Ala β₂), 2.70(s, 3H, N-Me), 2.6
6-2.52(m, 6H, β-Ala α, Pip βγ), 2.38-2.29(m, 1
H, MeVal β), 2.02-1.85(m, 3H, Ile β, OLeu β),
1.47-1.22(m, 5H, Ile γ₁, OLeu γ, Pip δ),1.35(d,
3H, MeAla β), 1.00-0.77(m, 18H, Ile γ₂δ, MeVal
γ, OLeu δ)PD-MSの測定値：m/z 608.4(M+H)⁺ 分子式C₃₁H₅₃O₇N₅としての計算値：607 HPLC分析：保持時間27.31分

【０１１４】実施例１０（TK14-6の合成：化１６記載の
製造工程において、A.AがL-メチルノルロイシン（MeNl
e）） （ａ）Boc-L-MeNle-OHの合成 Boc-L-Nle-OH（2.50g）を無水THF（30ml）に溶かし、氷
冷下NaH（0.78g）、CH₃I（5.38ml）を加えて、室温で29
時間攪拌した。THFを留去後、残渣を酢酸エチルに溶か
し、10%クエン酸、飽和食塩水で洗浄した。酢酸エチル
を減圧留去、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー（シリカゲル400g、クロロホルム：メタノール＝9：
1）により精製し、Boc-L-MeNle-OH（0.237g）を得た。

【０１１５】（ｂ）HCl・H-L-MeNle-L-Pro-OBzlの合成 HCl・H-Pro-OBzl（0.228g）、Boc-L-MeNle-OH（0.220g）
及びHOAt（0.134g）をDMF（5ml）に溶かし、氷冷下WSCD
（0.216ml）を滴下した。氷冷下1時間、さらに室温で7
時間攪拌した。DMFを減圧留去した後、残渣を酢酸エチ
ルに溶かし、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素
ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネ
シウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣（0.367g）
を得た。残渣に4.5N HCl／ジオキサン（3.8ml）を加え
た後、室温に1時間放置した。ジオキサンを減圧留去
し、エーテルを加えて結晶化した。残渣をエーテルで洗
浄後、減圧下で乾燥して、HCl・H-L-MeNle-L-Pro-OBzl
（0.266g）を得た。

【０１１６】（ｃ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeNle
-Pro-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（0.150g）、HCl・H-L-MeN
le-Pro-OBzl（0.109g）及びHOAt（0.042g）をDMF（2m
l）に溶かし、氷冷下WSCD（67.7μl）を滴下した。氷冷
下1時間、さらに室温で16時間攪拌した。DMFを減圧留去
した後、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽
和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順
で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減
圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー
（シリカゲル10g、クロロホルム：メタノール＝50：1）
により精製した。これをメタノール：酢酸：水＝8：2：
1（30ml）に溶かし、パラジウム黒（スパーテル小匙2
杯）を入れ、室温で攪拌下水素ガスを1時間吹き込ん
だ。パラジウムを濾過し、母液を減圧濃縮後、 水に溶
かし凍結乾燥して、H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeNle
-Pro-OH（0.156g）を得た。

【０１１７】（ｄ）TK14-6の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeNle-Pro-OH（50.0mg）
をジクロロメタン（25ml）に溶かし、これにDIEA（83.6
μl）を加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（9
1.3mg）の入ったジクロロメタン溶液（55ml）に2時間か
けて滴下し、その後室温で18時間攪拌した。ジクロロメ
タンを減圧留去した後、残渣を酢酸エチルに溶かし、10
%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、
飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥
した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲル薄層クロマ
トグラフィー（クロロホルム：メタノール＝19：1）に
より分離し、TK14-6（18.3mg）を得た。

【０１１８】¹H-NMR（270MHz、CDCl₃）：δ9.21(d, 1H,
Ile NH), 7.94(d, 1H,β-Ala NH),5.11(q, 1H, MeAla
α), 5.02-4.96(2H, Ile α MeNle α), 4.46-4.41(2H,
MeVal α Pro α), 4.02(m, 2H, β-Ala β), 3.70-3.
67(m, 1H,Pro δ₁), 3.40(m, 1H, Pro δ₂), 3.21(s, 3
H, N-Me), 3.09(s, 3H, N-Me), 2.73(s, 3H, N-Me),2.5
8-2.54(m, 2H, β-Ala α), 2.37-2.33(m, 1H, Ile
β), 2.07-1.81(m, 7H,MeVal β MeNle β Pro βγ),
1.35-1.14(m, 2H, MeNle γ), 1.31(d, 3H,MeAla β),
0.94-0.76(m, 19H, Ile γδ MeVal γ MeNle δε) PD-MSの測定値：607.9 分子式C₃₁H₅₄O₆N₆としての計算値：606.4 HPLC分析：保持時間14.01分

【０１１９】実施例１１（TK15-5の製造：化１６記載の
製造工程において、A.AがL-メチルイソロイシン） （ａ）HCl・H-L-MeIle-L-Pro-OBzlの合成 HCl・H-Pro-OBzl（0.500g）、Boc-L-MeIle-OH（0.533g）
及びHOAt（0.310g）をDMF（5ml）に溶かし、氷冷下WSCD
（0.498ml）を滴下した。氷冷下1時間、さらに室温で16
時間攪拌した。DMFを減圧留去した後、残渣を酢酸エチ
ルに溶かし、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素
ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネ
シウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣を得た。こ
の残渣に4.5N HCl／ジオキサン（9.2ml）を加えた後、
室温に1時間放置した。ジオキサンを減圧留去し、エー
テルを加えて結晶化した。残渣をエーテルで洗浄後、減
圧下で乾燥して、HCl・H-L-MeIle-L-Pro-OBzl（0.618g）
を得た。

【０１２０】（ｂ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeIle
-Pro-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（80.20g）、HCl・H-L-MeI
le-Pro-OBzl（0.145g）及びHOAt（56.1mg）をDMF（2m
l）に溶かし、氷冷下WSCD（90.2μl）を滴下した。氷冷
下1時間、さらに室温で5時間攪拌した。DMFを減圧留去
した後、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽
和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順
で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減
圧留去し、残渣ををシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー（シリカゲル10g、クロロホルム：メタノール＝50：
1）により精製した。これをメタノール：酢酸：水＝8：
2：1に溶かし、パラジウム黒を入れ、水素ガスを吹き込
みながら室温で1時間攪拌した。パラジウムを濾過し、
溶媒を減圧留去した。 水に溶かし凍結乾燥後、H-Ile-M
eVal-MeAla-β-Ala-L-MeIle-Pro-OH（0.201g）を得た。

【０１２１】（ｃ）TK15-5の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeIle-Pro-OH（100mg）を
ジクロロメタン（25ml）に溶かし、これにDIEA（167.4
μl）を加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（1
83mg）の入ったジクロロメタン溶液（135ml）に2時間か
けて滴下し、その後室温で18時間攪拌した。ジクロロメ
タンを減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%ク
エン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和
食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し
た。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲル薄層クロマト
グラフィー（クロロホルム：メタノール＝19：1）によ
り分離し、TK15-5（11.7mg）を得た。

【０１２２】¹H-NMR（270MHz、CDCl₃）：δ8.84(d, 1H,
Ile NH), 8.31(d, 1H, β-Ala NH), 5.19(q, 1H, MeAl
a α), 5.06-5.01(2H, Ile α MeIle α), 4.73-4.69
(d, 2H, MeVal α Pro α), 3.90-3.80(m, 2H, β-Ala
β₁ Pro δ₁), 3.28-3.21(m, 2H, β-Ala β₂ Pro
δ₂), 3.18(s, 3H, N-Me), 3.12(s, 3H, N-Me), 2.77
(s, 3H, N-Me), 2.58-2.54(m, 2H, Pro γ), 2.35-2.30
(m, 1H, MeIle β), 2.07-1.83(m, 4H, Ile β MeVal
β β-Ala α), 1.77-1.67(m, 2H, Pro β), 1.32(d, 3
H, MeAla β), 1.19-1.04(m, 4H, Ile γ₁ MeIle γ₁),
0.97-0.72(m, 18H, Ileγ₂δ MeVal γ MeIle γ₂δ) PD-MSの測定値：m/z 608.1(M+H)⁺ 分子式C₃₁H₅₄O₆N₆としての計算値：606.4 HPLC分析：保持時間11.64分

【０１２３】実施例１２（TK17-5の製造：化１６記載の
製造工程において、A.AがL-メチルフェニルアラニン） （ａ）HCl・H-L-MePhe-L-Pro-OBzlの合成 HCl・H-Pro-OBzl（0.362g）、Boc-L-MePhe-OH（0.400g）
及びHOAt（0.214g）をDMF（5ml）に溶かし、氷冷下WSCD
（0.344ml）を滴下した。氷冷下1時間、さらに室温で16
時間攪拌した。DMFを減圧留去し、残渣を酢酸エチルに
溶かし、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナト
リウム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣を得た。 この
残渣に4.5NHCl／ジオキサン（6.4ml）を加えた後、室温
に1時間放置した。ジオキサンを減圧留去し、エーテル
を加えて結晶化した。残渣をエーテルで洗浄後、減圧下
で乾燥して、HCl・H-L-MePhe-L-Pro-OBzl（0.545g）を得
た。

【０１２４】（ｂ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MePhe
-Pro-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（0.150g）、HCl・H-L-MeP
he-Pro-OBzl（0.119g）及びHOAt（42.1mg）をDMF（2m
l）に溶かし、氷冷下WSCD（67.7μl）を滴下した。氷冷
下1時間、さらに室温で18時間攪拌した。DMFを減圧留去
し、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽和食
塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗
浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留
去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シ
リカゲル10g、クロロホルム：メタノール＝50：1）によ
り精製した。これをメタノール：酢酸：水＝8：2：1（3
0ml）に溶かし、パラジウム黒（スパーテル小匙2杯）を
入れ、室温で攪拌下水素ガスを1時間吹き込んだ。パラ
ジウムを濾過し、母液を減圧濃縮後、 水に溶かし凍結
乾燥して、H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MePhe-Pro-OH
（0.152g）を得た。

【０１２５】（ｃ）TK17-5の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MePhe-Pro-OH（50mg）を
ジクロロメタン（25ml）に溶かし、これにDIEA（79.3μ
l）を加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（86.
5mg）の入ったジクロロメタン溶液（55ml）に2時間かけ
て滴下し、その後室温で18時間攪拌した。ジクロロメタ
ンを減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエ
ン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食
塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。
溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲル薄層クロマトグラ
フィー（クロロホルム：メタノール＝19：1）により分
離し、TK17-5（13.3mg）を得た。

【０１２６】¹H-NMR（270MHz、CDCl₃）：δ9.13(d, 1H,
Ile NH), 8.01(d, 1H, β-Ala NH), 7.35-7.20(m, 5H,
MePhe aromatic), 5.14(q, 1H, MeAla α), 5.07(d, 1
H, MeVal α), 4.93-4.90(m, 1H, Ile α), 4.82(t, 1
H, MePhe α), 4.06-3.96(m,1H, β-Ala β₁), 3.81(d,
1H, Pro α), 3.72-3.55(2H, MePhe β₁ Pro δ₁),3.4
5-3.24(m, 1H, Pro δ₂), 3.19(s, 3H, N-Me), 3.14(s,
3H, N-Me), 3.12-3.05(m, 2H, β-Ala β₂ MePhe
β₂), 2.73(s, 3H, N-Me), 2.57-2.55(m, 2H, β-Ala
α), 2.40-2.31(m, 1H, MeVal β), 2.29-2.15(m, 2H,
Pro β), 2.03-1.95(m, 1H, Ile β), 1.58-1.51(m, 2
H, Pro γ), 1.35-1.25(m, 2H, Ile γ₁), 1.32(d, 3H,
MeAla β), 0.94-0.90(m, 6H, MeVal γ), 0.82-0.73
(m, 6H, Ile γ₂δ) PD-MSの測定値：m/z 642.1(M+H)⁺ 分子式C₃₄H₅₁O₆N₆としての計算値：639.5 HPLC分析：保持時間12.31分

【０１２７】実施例１３（TK18-5の製造：化１６記載の
製造工程において、A.AがL-メチルロイシン） （ａ）HCl・H-L-MeLeu-L-Pip-OBzlの合成 HCl・Pip-OBzl（0.219g）、Boc-L-MeLeu-OH（0.200g）、
HOAt（0.122g）をDMF（2ml）に溶かし、氷冷下WSCD（0.
196ml）を滴下した。氷冷下1時間、さらに室温で16時間
攪拌した。DMFを減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶か
し、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウ
ム水、飽和食塩水の順で洗浄、無水硫酸マグネシウムで
乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣を得た。この残渣に
4.5N HCl／ジオキサン（3.6ml）を加えた後、室温に1時
間放置した。ジオキサンを減圧留去し、エーテルを加え
て結晶化した。残渣をエーテルで洗浄後、減圧下で乾燥
して、HCl・H-L-MeLeu-L-Pip-OBzl（0.302g）を得た。

【０１２８】（ｂ）H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeLeu
-Pip-OHの合成 Z-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-OH（0.150g）、HCl・H-L-MeL
eu-Pip-OBzl（0.113g）及びHOAt（42.1mg）をDMF（2m
l）に溶かし、氷冷下WSCD（67.7μl）を滴下した。氷冷
下1時間、さらに室温で18時間攪拌した。DMFを減圧留去
し、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽和食
塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗
浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留
去し、残渣を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィー（シリカゲル10g、クロロホルム：メタノール
＝50：1）により精製した。これをメタノール：酢酸：
水＝8：2：1（30ml）に溶かし、パラジウム黒（スパー
テル小匙2杯）を入れ、室温で攪拌下水素ガスを1時間吹
き込んだ。パラジウムを濾過し、母液を減圧濃縮後、
水に溶かし凍結乾燥して、H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L
-MeLeu-Pip-OH（0.121g）を得た。

【０１２９】（ｃ）TK18-5の合成 H-Ile-MeVal-MeAla-β-Ala-L-MeLeu-Pip-OH（50mg）を
ジクロロメタン（25ml）に溶かし、これにDIEA（81.9μ
l）を加えた。これを25mlのシリンジに入れ、HATU（89.
3mg）の入ったジクロロメタン溶液（55ml）に2時間かけ
て滴下し、その後室温で18時間攪拌した。 ジクロロメ
タンを減圧留去した後、残渣を酢酸エチルに溶かし、10
%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、
飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥
した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲル薄層クロマ
トグラフィー（クロロホルム：メタノール＝19：1）に
より分離し、TK18-5（24.7mg）を得た。

【０１３０】¹H-NMR（270MHz, CDCl₃）：δ 9.07(d, 1
H, Ile NH), 8.23(d, 1H, β-Ala NH), 5.19-5.13(2H,
Ile α MeAla α), 4.98 (d, 1H, MeVal α), 4.69-4.5
6(m,2H, Pip αε₁), 4.90(q, 1H, MeLeu α), 4.05-3.
76(m, 1H, β-Ala β₁), 3.90-3.81(m, 1H, Pip ε₂),
3.06(m, 1H, β-Ala β₂), 2.61-2.43(m, 4H, β-Ala
α, Pip β), 2.39(m, 2H, Ile β, MeVal β), 1.99-
1.82(q, 2H, MeLeu β),1.50-1.10(m, 7H, Ile γ₁, Me
Leu γ, Pip γδ), 1.32(d, 3H, MeAla β), 1.01-0.7
1(m, 18H, Ile γ₂δ, MeVal γ, MeLeu δ) PD-MSの測定値：m/z 621.8(M+H)⁺ 分子式C₃₁H₅₄O₆N₆としての計算値：620.4 HPLC分析：保持時間24.09分

【０１３１】実施例１４（TK16-22A及びTK16-22Bの製
造） 本化合物は下記の製造手順に従って製造した。

【０１３２】

【化２２】

【０１３３】

【化２３】

【０１３４】

【化２４】

【０１３５】

【化２５】

【０１３６】なお、製造中間化合物が不安定のため、TK
16-9までは精製せずに混合物の状態で反応を行った。 （ａ）TK16-1の合成 Boc-β-Ala-OH（5.00g）を酢酸エチル（80ml）に溶か
し、-20℃冷却下トリエチルアミン（3.67ml）、クロロ
ギ酸イソブチル（3.43ml）の順で滴下し、10分間攪拌
後、反応液を濾過した。濾液を氷冷し、ジアゾメタンの
エーテル溶液（400ml）を加え、氷冷下18時間攪拌し
た。 その後反応液にアルゴンガスを1時間吹き込み、未
反応のジアゾメタンを除いた。この反応液を水で洗浄
後、減圧留去し、残渣（5.32g）を得た。このうち、80m
gをシリカゲル薄層クロマトグラフィー（ベンゼン：酢
酸エチル=5:1）で分離し、TK16-1ができていることを確
認した。

【０１３７】（ｂ）TK16-7及びTK16-8の合成 TK16-1（3.3g）をエーテル（30ml）に溶かし、臭化水素
を吹き込みながら2分間攪拌した。エーテルを留去後、
クロロホルムで3回共沸した。残査をクロロホルムに懸
濁した。これに氷冷下(Boc)₂O（4.3ml）、トリエチルア
ミン（2.59ml）を滴下し、氷冷下5分、さらに室温で1時
間攪拌した。反応液を、10%クエン酸、飽和食塩水、飽
和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄し、無
水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、TK
16-8を（6.52g）得た。

【０１３８】（ｃ）TK16-9の合成 水素化ナトリウム（470mg）を無水THF（50ml）に懸濁
し、室温でジベンジルマロン酸（3.86ml）を加え1時間
攪拌した。その後、氷冷下TK16-8のTHF溶液（5ml）を滴
下し、氷冷下30分、さらに室温で1時間攪拌した。THFを
減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン
酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩
水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶
媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（シリカゲル400g、ヘキサン：酢酸エチル=4：
1）で精製し、TK16-9を（1.61g）得た。

【０１３９】（ｄ）TK16-12の合成 TK16-9（0.957g）を無水DMSO（3ml）に溶かし、水素化
ナトリウム（56.7mg）を加え、室温で1時間攪拌後、ヨ
ウ化イソブチル（0.47ml）を滴下し、さらに室温で22時
間攪拌した。反応液に酢酸エチルを加え、10%クエン
酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩
水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶
媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（シリカゲル80g、ヘキサン：酢酸エチル=4：1）
により精製し、TK16-12を（1.19g）得た。

【０１４０】（ｅ）TK16-13の合成 TK16-12（0.969g）をメタノール（30ml）に溶かし、パ
ラジウム黒（スパーテル小匙2杯）を入れ、室温で攪拌
下水素ガスを2時間吹き込んだ。パラジウムを濾過し、
母液を減圧濃縮後、残渣を得た。これにトルエン（30m
l）を加え、130℃で2時間攪拌した。トルエンを減圧留
去し、TK16-13を（0.474g）得た。

【０１４１】（ｆ）TK16-14の合成 TK16-13（0.474g）、HCl・H-Pro-OBzl（0.379g）、HOBt
（233mg）をDMF（10ml）に溶かし、氷冷下WSCD（0.379m
l、1.73mmol）を滴下し、氷冷下1時間、さらに室温で17
時間攪拌した。DMFを減圧留去し、残渣を酢酸エチルに
溶かし、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナト
リウム水、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシ
ウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲル
カラムクロマトグラフィー（シリカゲル65g、クロロホ
ルム：メタノール=100：1）で精製し、TK16-14を（0.44
4g）得た。

【０１４２】（ｇ）TK16-15の合成 TK16-14に4.5N HCl／ジオキサン（3.66ml）を加えた
後、室温に1時間放置した。ジオキサンを減圧留去し、T
K16-15を（0.332g）得た。

【０１４３】（ｈ）TK16-16の合成 TK16-15（332mg）、Boc-MeAla-OH（158mg）、HOAt（117
mg）をDMF（4ml）に溶かし、氷冷下WSCD（188μl）を滴
下し、氷冷下1時間、さらに室温で15時間攪拌した。DMF
を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン
酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩
水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶
媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（シリカゲル80g、クロロホルム：メタノール=10
0：1）で精製し、TK16-16を（347mg）得た。

【０１４４】（ｉ）TK16-17の合成 TK16-16（347mg）に 4.5N HCl／ジオキサン（12.1ml）
を加えた後、室温に1時間放置した。ジオキサンを減圧
留去し、TK16-17を（308mg）得た。

【０１４５】（ｊ）TK16-18の合成 TK16-17（308mg）、Boc-MeVal-OH（140mg）及びHOAt（9
0.6mg）をDMF（3ml）に溶かし、氷冷下WSCD（146μl）
を滴下し、氷冷下1時間 、さらに室温で6時間攪拌し
た。DMFを減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%
クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽
和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し
た。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマ
トグラフィー（シリカゲル40g、クロロホルム：メタノ
ール=50：1）で精製し、TK16-18を（347mg）得た。

【０１４６】（ｋ）TK16-19の合成 TK16-18（347mg）に4.5N HCl／ジオキサン（10.1ml）を
加えた後、室温に1時間放置した。ジオキサンを減圧留
去し、TK16-19を（312mg）得た。

【０１４７】（ｌ）TK16-20の合成 TK16-19（312mg）、Z-Ile-OH（133mg）及びHOAt（74.9m
g）をDMF（3ml）に溶かし、氷冷下WSCD（120μl）滴下
し、氷冷下1時間、さらに室温で18時間攪拌した。DMFを
減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶かし、10%クエン
酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩
水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶
媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（シリカゲル80g、クロロホルム：メタノール=10
0：1）で精製し、TK16-20を（341mg）得た。

【０１４８】（ｍ）TK16-21の合成 TK16-20（280mg）をメタノール：酢酸：水＝8：2：1（3
0ml）に溶かし、パラジウム黒（スパーテル小匙2杯）を
入れ、室温で攪拌下水素ガスを1時間吹き込んだ。パラ
ジウムを濾過し、母液を減圧濃縮後、水に溶かし凍結乾
燥して、TK16-21を（140mg）得た。

【０１４９】（ｎ）TK16-22の合成 TK16-21（50.0mg）をジクロロメタン（25ml）に溶か
し、これにDIEA（85.7μl）を加えた後、これを25mlの
シリンジに入れ、HATU（93.5mg）の入ったジクロロメタ
ン溶液（57ml）に2時間かけて滴下した。その後、室温
で18時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチ
ルに溶かし、10%クエン酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素
ナトリウム水、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥した。残渣をシリカゲル薄層クロマトク
ロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール=19：1）
により分離し、TK16-22-A（L体）17.8mg、TK16-22-B（D
体）4.8mgを得た。

【０１５０】TK16-22-Aの¹H-NMR（270MHz, CDCl₃）：δ
8.29(d, 1H, Ile NH), 7.80(m, 1H,β-Ala NH), 5.03
(d, 1H, MeVal α), 4.91(q, 1H, MeAla α), 4.71(t,
1H, Ile α), 4.34(d, 1H, Pro α), 3.96-3.88(m, 1H,
β-Ala β₁), 3.66-3.50(m,2H, Pro δ), 3.25(s, 3H,
N-Me), 3.17-3.02(m, 1H, β-Ala β₂), 2.85-2.75(m,
3H, β-Ala α, cLeu H-2), 2.70(s, 3H, N-Me), 2.50
(q, 2H, cLeu H-1), 2.41-2.28(m, 1H, MeVal β), 2.1
3-1.83(m, 5H, Ile β, Pro βγ), 1.66-1.51(m, 2H,
Ile γ₁), 1.47-1.37(m, 1H, cLeu H-3₁), 1.34(d, 3H,
MeAla β), 1.21-1.12(m, 2H, cLeu H-3₂,H-4), 0.93-
0.80(m, 18H, Ile γ₂δ, MeVal γ, cLeu H-5) SIMS：m/z 592.0(M+M)⁺ C₃₁H₅₃O₆N₅としての計算値：591.4 HPLC分析：保持時間13.80分

【０１５１】TK16-22-Bの¹H-NMR（270MHz, CDCl₃）δ8.
04(d, 1H, β-Ala NH), 7.42(d, 1H, Ile NH), 5.13(q,
1H, MeAla α), 5.00-4.90(m, 2H, Ile α, MeVal
α), 4.69(d, 1H, Pro α), 3.93-3.84(m, 2H, β-Ala
β₁, Pro δ₁), 3.65-3.48(m, 1H, Pro δ₂), 3.22(s,
3H, N-Me), 3.16-3.02(m, 3H, β-Ala β₂, cLeu H-1),
2.86-2.73(m, 2H, β-Ala α₂, cLeu H-2), 2.71(s, 3
H, N-Me), 2.57-2.42(m,1H, β-Ala α₁), 2.38-2.25
(m, 1H, MeVal β), 2.03-1.96(m, 5H, Ile β, Pro β
γ), 1.62-1.46(m, 3H, Ile γ₁, cLeu H-4), 1.40-1.3
2(m, 2H, cLeu H-3), 1.29(d, 3H, MeAla β), 0.95-0.
85(m, 18H, Ile γ₂δ, MeVal γ, cLeu H-5) SIMS：m/z 591.9(M+M)⁺ C₃₁H₅₃O₆N₅としての計算値：591.4 HPLC分析：保持時間22.43分

【０１５２】試験例１ TK3-8の効果を文献（Kumkawa M. and Tsunoo A.: Paras
ympathetic depression of vas deferens contraction
in the guinea-pig involves adenosine receptors. J.
Physiol.,407,135-153,1988、Tsunoo A. Kurokawa: M.
and TakahashiK.: Neurally evoked potentiation of t
onic contractions in the guinea-pigvas deferens in
volves adenosine receptors. J. Physiol., 433, 163-
181, 1991）の方法に従って試験した。

【０１５３】すなわち、SDラット（雄、200〜350g）の
摘出心筋を容積0.8mlの横型灌流槽に固定し、収縮力を
等尺性に記録した。灌流液は95%酸素、5%炭酸ガスで平
衡させたクレブス液、又は、塩化ナトリウム140mM、塩
化カリウム5mM、塩化カルシウム2.6mM、塩化マグネシウ
ム1.3mM、グルコース10mM、HEPES 5mMからなる組成を持
ち、通気させた塩溶液を使用した。灌流液は36〜37℃に
保ち、流速は3〜4ml/分とした。試験物質は灌流液に溶
かして標本に適用した。乳頭筋標本は灌流槽内の白金線
を通して2Hzで電気刺激した。

【０１５４】ラット右心房における灌流槽内のTK3-8濃
度と収縮力の関係を図２、収縮間隔時間との関係を図３
に示す。なお、値は薬物適用前の対照値に対する比率
（相対値）で示した。

【０１５５】TK3-8は、2μMから200μMの濃度範囲で用
量依存的に右心房筋の自動能による収縮を増強した（図
２）。また、図３に示すように収縮間隔はほとんど影響
を受けないか延長傾向が見られた。またTK3-8は右心房
筋の場合と同様に用量依存的に電気刺激による右心室乳
頭筋の収縮を増強した。

【０１５６】試験例２ TK3-8以外の本発明環状ペプチド（TK2-6-A、TK11-3、TK
14-6、TK16-22-A、TK17-5及びTK18-5）のラット摘出右
心房筋に対する収縮力増強効果を、試験例１に記載の方
法に従って測定した（薬物濃度は全て20μMとした）。
その結果を表２に示す。なお、表２の値は、薬物投与前
の対照値に対する比率として表した。

【０１５７】

【表２】

【０１５８】試験例３ ジギタリスにより誘発される異常収縮に対する抑制効果
を調べるために、モルモット（雄、100〜200g）の摘出
右心房に、ジゴキシン1μMを投与して異常収縮を誘発さ
せる実験を行った。すると図４のＡに示すように、右心
房自動収縮の振幅及びリズムは、共に著しく不整となっ
た。そこで、TK3-8を20μM投与すると、図４Ｂに示すよ
うに振幅及びリズム共に一定となり、ジゴキシンによる
異常収縮は抑制され、洞調律が回復した。このように、
TK3-8は、ジギタリスにより誘発される異常収縮を抑制
する作用を有することが認められた。

【０１５９】試験例４ 摘出臓器だけでなく、生体においても本発明化合物が有
効かどうかを検討した。心カテーテル法により、チオペ
ンタール麻酔下に雄SDラットの左室圧を測定し、その時
間微分値に対するTK3-8の効果を検討した。TK3-8は10%s
ulfolaneに溶解し、時間0において右大腿静脈からbolus
投与した。結果を図５に示す。

【０１６０】図５に示されるように、TK3-8（1mg/kg）
投与によって、持続性の左室圧時間微分値の増加が起こ
り、本発明環状ペプチドが生体でも強心作用を有するこ
とが明らかとなった。

【図面の簡単な説明】

【図１】 TK3-8の赤外線吸収スペクトルである。

【図２】 ラット右心房における灌流槽内のTK3-8濃度
と収縮力の関係を示す図である。

【図３】 ラット右心房における灌流槽内のTK3-8濃度
と収縮間隔時間との関係を示す図である。

【図４】 ジギタリスにより誘発される異常収縮に対す
るTK3-8の抑制効果を示す図である。

【図５】 ラットにおけるTK3-8による持続性の左室圧
時間微分値の増大作用を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 芝 哲夫 大阪府箕面市稲４丁目１番２号 財団法人 蛋白質研究奨励会内

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（１） 【化１】 （式中、R¹は-CH₂-又は-CH₂CH₂-を、R²は水素原子又は
   アルキル基又はフェニル基又はベンジル基を、R³は-NH-
   又は-N(CH₃)-又は-CH₂-又は酸素原子を、それぞれ示
   す）で表される環状ペプチド。
2. 【請求項２】 請求項１記載の環状ペブチドを有効成分
   とする強心薬。