JPH10111248A - 時間とともに変化する測定された変数の機器測定方法 - Google Patents
時間とともに変化する測定された変数の機器測定方法Info
- Publication number
- JPH10111248A JPH10111248A JP9277950A JP27795097A JPH10111248A JP H10111248 A JPH10111248 A JP H10111248A JP 9277950 A JP9277950 A JP 9277950A JP 27795097 A JP27795097 A JP 27795097A JP H10111248 A JPH10111248 A JP H10111248A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reaction
- time window
- time
- test
- linear
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/557—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using kinetic measurement, i.e. time rate of progress of an antigen-antibody interaction
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Spectrometry And Color Measurement (AREA)
- Lock And Its Accessories (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 時間とともに変化する測定される変数Ｌ(ｔ)
を計測器により定量化すること。 【解決手段】 反応プロフィルが直線状である領域での
Ｌ(ｔ)の最大値を決定し、また反応のタイムウィンドー
の始期および長さを直線状領域に応じて変化させそして
反応および反応条件に関係させる。
を計測器により定量化すること。 【解決手段】 反応プロフィルが直線状である領域での
Ｌ(ｔ)の最大値を決定し、また反応のタイムウィンドー
の始期および長さを直線状領域に応じて変化させそして
反応および反応条件に関係させる。
Description
【０００１】本発明は時間とともに変化する測定された
変数Ｌ(ｔ)を機器測定する方法に関するものであり、反
応プロフィルが直線状である領域においてＬ(ｔ)の最大
値、時間並びに反応のタイムウィンドー（time windo
w）の大きさを決定することを目的とし、ここで反応の
タイムウィンドーは直線状領域で変化しそして反応の性
質および反応条件に依存するものであるものとする。と
りわけ本発明は、均一溶液内で特異抗体により発生され
る光の散乱による蛋白質濃度の測定に関する。特に本発
明は、緩慢に生起しそして比較的長い時間にわたってお
おむね直線状であるプロフィルを有し、反応の直線状部
分における抗原−抗体複合体の生成速度が測定変数とし
て決定される反応に関するものである。
変数Ｌ(ｔ)を機器測定する方法に関するものであり、反
応プロフィルが直線状である領域においてＬ(ｔ)の最大
値、時間並びに反応のタイムウィンドー（time windo
w）の大きさを決定することを目的とし、ここで反応の
タイムウィンドーは直線状領域で変化しそして反応の性
質および反応条件に依存するものであるものとする。と
りわけ本発明は、均一溶液内で特異抗体により発生され
る光の散乱による蛋白質濃度の測定に関する。特に本発
明は、緩慢に生起しそして比較的長い時間にわたってお
おむね直線状であるプロフィルを有し、反応の直線状部
分における抗原−抗体複合体の生成速度が測定変数とし
て決定される反応に関するものである。
【０００２】均質な媒体中の粒子上での光の散乱現象
は、散乱された光線の強度を測定すること（比濁分析）
および媒体を通過する光線ビームの強度損失を測定する
こと（濁度測定）の双方によって、濃度の決定のために
用いられる。可溶性抗原と２価または多価の抗体との間
の免疫化学反応は、光線を著しく散乱する分子の大群を
生み出す。このような反応の時間プロフィルは、連続す
る１次反応の一般的な反応動力学論プロフィルに極めて
しばしば合致し、また屈曲点を有するので、反応の経過
中には最大反応速度は現れない（例えば図１〜３参
照）。図１〜３の信号−時間曲線からは、濃度に関係す
る測定信号を様々な方法で得ることができる。
は、散乱された光線の強度を測定すること（比濁分析）
および媒体を通過する光線ビームの強度損失を測定する
こと（濁度測定）の双方によって、濃度の決定のために
用いられる。可溶性抗原と２価または多価の抗体との間
の免疫化学反応は、光線を著しく散乱する分子の大群を
生み出す。このような反応の時間プロフィルは、連続す
る１次反応の一般的な反応動力学論プロフィルに極めて
しばしば合致し、また屈曲点を有するので、反応の経過
中には最大反応速度は現れない（例えば図１〜３参
照）。図１〜３の信号−時間曲線からは、濃度に関係す
る測定信号を様々な方法で得ることができる。
【０００３】信号変化の強さは、例えば技術上熟達する
者にとってそれ自体知られた「粒子増強アッセイ」
（“particle-enhanced assays"）において反応しあう
物質の一つを粒子に結合することにより増大させること
ができる。終点法においては、測定信号は遅すぎる時点
で測定されるので、経験上、信号はもはや変化していな
く、沈澱は何ら起きない。「固定時間」法における実際
の測定方法は、予め設定された異なる時間で測定される
二つの信号の差による。動的な「尖端速度法（peak rat
e method）」においては、最大反応速度（ＶMAX）すな
わち単位時間（δｔ）あたりの信号（ｓ）の最大変化
（δ）が、 ａ） 十分に短い時間間隔（δｔ）でδｓを測定しそし
てδｓ／δｔの最大の比を決定する、 ｂ） δｓ／δｔを電子工学的に微分しそして最大値を
決定する、 ｃ） 信号／時間曲線への接線をとりそして最大勾配
（ｓ＝信号、ｔ＝時間）を決定することにより決定され
る。
者にとってそれ自体知られた「粒子増強アッセイ」
（“particle-enhanced assays"）において反応しあう
物質の一つを粒子に結合することにより増大させること
ができる。終点法においては、測定信号は遅すぎる時点
で測定されるので、経験上、信号はもはや変化していな
く、沈澱は何ら起きない。「固定時間」法における実際
の測定方法は、予め設定された異なる時間で測定される
二つの信号の差による。動的な「尖端速度法（peak rat
e method）」においては、最大反応速度（ＶMAX）すな
わち単位時間（δｔ）あたりの信号（ｓ）の最大変化
（δ）が、 ａ） 十分に短い時間間隔（δｔ）でδｓを測定しそし
てδｓ／δｔの最大の比を決定する、 ｂ） δｓ／δｔを電子工学的に微分しそして最大値を
決定する、 ｃ） 信号／時間曲線への接線をとりそして最大勾配
（ｓ＝信号、ｔ＝時間）を決定することにより決定され
る。
【０００４】原則として、本発明の方法は、測定値の変
化が部分的領域においてのみ直線状でありまたそれを直
線状部分を評価するのに使用することが意図される限
り、時間とともに変化する測定値のすべての決定のため
に使用することができる。ここに述べる方法を使用する
と、直接的または間接的な散乱光の測定により多くの分
析対象物質の定量を行うことが今や可能である。反応パ
ートナーの一方を一定濃度で使用する際に、適当な測定
信号が、反応パートナーの他方例えば抗原の濃度に依存
すると考えるならば、免疫化学反応の場合、低濃度の分
析対象物質と高濃度の分析対象物質との双方によって同
一の測定信号が発せられることがありうるということを
認めることができる。このことは、抗原過剰現象、「高
投与量フック（“high-dose hook"）」あるいはHeidelp
erger曲線として技術上熟達する者にとって知られた、
信号と濃度との関係のあいまいさを生む。このあいまい
さは、反応に関与する物質の一方または他方の量が過剰
であるのに左右されて異なる化学量論による複合体が可
能であり、またこれらの複合体の信号特性が異ならな
い、例えば散乱光が異ならない場合は、原則的に認めら
れる。
化が部分的領域においてのみ直線状でありまたそれを直
線状部分を評価するのに使用することが意図される限
り、時間とともに変化する測定値のすべての決定のため
に使用することができる。ここに述べる方法を使用する
と、直接的または間接的な散乱光の測定により多くの分
析対象物質の定量を行うことが今や可能である。反応パ
ートナーの一方を一定濃度で使用する際に、適当な測定
信号が、反応パートナーの他方例えば抗原の濃度に依存
すると考えるならば、免疫化学反応の場合、低濃度の分
析対象物質と高濃度の分析対象物質との双方によって同
一の測定信号が発せられることがありうるということを
認めることができる。このことは、抗原過剰現象、「高
投与量フック（“high-dose hook"）」あるいはHeidelp
erger曲線として技術上熟達する者にとって知られた、
信号と濃度との関係のあいまいさを生む。このあいまい
さは、反応に関与する物質の一方または他方の量が過剰
であるのに左右されて異なる化学量論による複合体が可
能であり、またこれらの複合体の信号特性が異ならな
い、例えば散乱光が異ならない場合は、原則的に認めら
れる。
【０００５】このような免疫化学的定量法はそれ自体、
例えば EP 0 252 127 から、技術上熟達する者にとって
知られている。信号と濃度との関係にあいまいさがあり
うることに加えて別な問題は、低い濃度の測定および緩
慢に起きる反応の評価である。抗原−抗体結合の反応プ
ロフィルには、出発時における遅延相、反応速度が最大
の領域および飽和領域がある（図１〜３）。これらの三
つの相が顕著である程度は、抗体の抗原の濃度に極めて
大きく依存し、さらに温度および希釈媒体といった多数
の別な要因を試験システムにおいてできるだけ一定に保
持するにしても、これらの要因に依存する。以上のこと
から、本発明は特定の抗原によって生み出される光の散
乱の助けをかりる免疫化学的定量法を提供することに関
する技術的問題に基礎をおいたものであった。この方法
は極めて低い濃度の測定を可能とするのみならず、「高
投与量フック」効果に対して高水準の保護を与える。
例えば EP 0 252 127 から、技術上熟達する者にとって
知られている。信号と濃度との関係にあいまいさがあり
うることに加えて別な問題は、低い濃度の測定および緩
慢に起きる反応の評価である。抗原−抗体結合の反応プ
ロフィルには、出発時における遅延相、反応速度が最大
の領域および飽和領域がある（図１〜３）。これらの三
つの相が顕著である程度は、抗体の抗原の濃度に極めて
大きく依存し、さらに温度および希釈媒体といった多数
の別な要因を試験システムにおいてできるだけ一定に保
持するにしても、これらの要因に依存する。以上のこと
から、本発明は特定の抗原によって生み出される光の散
乱の助けをかりる免疫化学的定量法を提供することに関
する技術的問題に基礎をおいたものであった。この方法
は極めて低い濃度の測定を可能とするのみならず、「高
投与量フック」効果に対して高水準の保護を与える。
【０００６】この技術的問題は特許請求の範囲に記載す
る実施態様を提供することにより解決される。本発明の
方法の必須的な部分は、直線状領域および時間依存性反
応の反応速度が最大である領域における評価が信頼でき
るように、それぞれの反応の測定上のタイムウィンドー
が、然るべき技術的手段によって調節されるということ
である。このような評価の結果は、時にはＸlinとも称
されるＶMaxLinである。本発明の方法は様々な技術的態
様によって確実なものにすることができる。本発明の目
的のための分析対象物質は、フェリチン、ＰＳＡ、Ｉｇ
Ａ、ＩｇＧおよびＤ−Dimerや凝固因子特にその遺伝学
的変異体のように凝固の分野に帰することのできる蛋白
質、そしてさらにホルモンおよびメッセンジャーペプチ
ドのようなハプテンのような血漿蛋白質である。
る実施態様を提供することにより解決される。本発明の
方法の必須的な部分は、直線状領域および時間依存性反
応の反応速度が最大である領域における評価が信頼でき
るように、それぞれの反応の測定上のタイムウィンドー
が、然るべき技術的手段によって調節されるということ
である。このような評価の結果は、時にはＸlinとも称
されるＶMaxLinである。本発明の方法は様々な技術的態
様によって確実なものにすることができる。本発明の目
的のための分析対象物質は、フェリチン、ＰＳＡ、Ｉｇ
Ａ、ＩｇＧおよびＤ−Dimerや凝固因子特にその遺伝学
的変異体のように凝固の分野に帰することのできる蛋白
質、そしてさらにホルモンおよびメッセンジャーペプチ
ドのようなハプテンのような血漿蛋白質である。
【０００７】本発明の方法は、迅速試験およびＡＰＴＴ
のように、凝固系の官能性を測定するのに使用するのが
やはり有利である。従って以下の本文に記載する定量方
法は低濃度の測定を可能にするのみならず、「高投与量
フック」効果に対する一層の保護を確実にもする。本発
明の方法は２段階で実施され、試料が測定されそして保
存されている反応速度（kinetic）が各段階に対して用
いられる。反応の初期の最大速度を決定するために第１
段階には比較的短いタイムウィンドーが用いられる。タ
イムウィンドーｔTestの長さは、それが、平均的にみて
そして多数の測定およびバッチにわたって、濃度が測定
範囲の上限にある試料の反応速度の直線状の反応部分の
長さに一致するように設定するのが好ましい。このこと
から、初期の反応ウィンドーの大きさは、分析対象物質
および用いられる試験システムまたは検証システムに特
に依存する試験にとって特定的なパラメータであること
も明らかとなる。このようにして決定されるＶ
MaxPreは、最適な反応タイムウィンドーを決定するのに
用いられる。ＶMaxPreと最適の反応タイムウィンドーｔ
Linとの依存関係は予備実験において試験に特有な仕方
で決定せねばならない（図４）。この場合重要な事柄
は、一方ではできるだけ多くの測定点を含むが、他方、
反応の直線部分にある測定点のみを対象とする反応のウ
ィンドーがそれぞれのＶMaxPreについて決定されること
である。
のように、凝固系の官能性を測定するのに使用するのが
やはり有利である。従って以下の本文に記載する定量方
法は低濃度の測定を可能にするのみならず、「高投与量
フック」効果に対する一層の保護を確実にもする。本発
明の方法は２段階で実施され、試料が測定されそして保
存されている反応速度（kinetic）が各段階に対して用
いられる。反応の初期の最大速度を決定するために第１
段階には比較的短いタイムウィンドーが用いられる。タ
イムウィンドーｔTestの長さは、それが、平均的にみて
そして多数の測定およびバッチにわたって、濃度が測定
範囲の上限にある試料の反応速度の直線状の反応部分の
長さに一致するように設定するのが好ましい。このこと
から、初期の反応ウィンドーの大きさは、分析対象物質
および用いられる試験システムまたは検証システムに特
に依存する試験にとって特定的なパラメータであること
も明らかとなる。このようにして決定されるＶ
MaxPreは、最適な反応タイムウィンドーを決定するのに
用いられる。ＶMaxPreと最適の反応タイムウィンドーｔ
Linとの依存関係は予備実験において試験に特有な仕方
で決定せねばならない（図４）。この場合重要な事柄
は、一方ではできるだけ多くの測定点を含むが、他方、
反応の直線部分にある測定点のみを対象とする反応のウ
ィンドーがそれぞれのＶMaxPreについて決定されること
である。
【０００８】試験にとって特有な依存関係を決定するの
に種々の方法を用いることができる。この場合重要な事
柄は、ＶMaxPreと反応のタイムウィンドーとの依存関係
が、精度と正しさとが最適になるように規定されること
である。この依存関係は例えば分析対象物質濃度の異な
る血清試料のプール、あるいは希釈度の異なる血清標本
について測定することにより規定することができる。こ
の場合濃度は所望とする測定範囲の全体にわたっている
のが好ましい。第１段階においてすべての試料が測定さ
れ、反応速度が保存されそしてＶMaxPreの値が決定され
る。反応のウィンドーを段階的に変化させることによ
り、それぞれの試料測定について異なる相関係数がこの
時得られる。最も良い相関係数を有するウィンドーの大
きさは、反応の直線状部分をやはり最も良くとり込む大
きさである。直線性に関する好適な別な指標は、測定点
と１次回帰線との平均距離である。従ってまず第１に特
定のＶMaxPreを有する各試料について直線性の最も良い
ｔLinが得られる。ＶMaxPreの異なるすべての試料に関
して得られる結果は、反応ウィンドーにおける直線性を
最良とする、ＶMaxPreと主過程（main run）の反応ウィ
ンドーの大きさｔLinとの関係である。例をあげるな
ら、図４は最良の相関係数について、主過程の反応ウィ
ンドーの大きさｔLinとＶMaxPreとの関係を示す。
に種々の方法を用いることができる。この場合重要な事
柄は、ＶMaxPreと反応のタイムウィンドーとの依存関係
が、精度と正しさとが最適になるように規定されること
である。この依存関係は例えば分析対象物質濃度の異な
る血清試料のプール、あるいは希釈度の異なる血清標本
について測定することにより規定することができる。こ
の場合濃度は所望とする測定範囲の全体にわたっている
のが好ましい。第１段階においてすべての試料が測定さ
れ、反応速度が保存されそしてＶMaxPreの値が決定され
る。反応のウィンドーを段階的に変化させることによ
り、それぞれの試料測定について異なる相関係数がこの
時得られる。最も良い相関係数を有するウィンドーの大
きさは、反応の直線状部分をやはり最も良くとり込む大
きさである。直線性に関する好適な別な指標は、測定点
と１次回帰線との平均距離である。従ってまず第１に特
定のＶMaxPreを有する各試料について直線性の最も良い
ｔLinが得られる。ＶMaxPreの異なるすべての試料に関
して得られる結果は、反応ウィンドーにおける直線性を
最良とする、ＶMaxPreと主過程（main run）の反応ウィ
ンドーの大きさｔLinとの関係である。例をあげるな
ら、図４は最良の相関係数について、主過程の反応ウィ
ンドーの大きさｔLinとＶMaxPreとの関係を示す。
【０００９】この関係は標準の血清を既知の濃度に希釈
する諸段階に関する反応曲線をつくるのに用いられる
（ＶMaxPre→主過程の反応ウィンドーの大きさ→主過程
のＶMax）。直線性という基準が、精度の測定および対
照物の回収に関して最良の結果をやはり与えるというこ
とは確実ではないので、主過程の反応ウィンドーとＶ
MaxPreとの関係が次いで微調整される。本例では、同時
にあまり多くのパラメータを変更するのを避けるため上
記に得た参照曲線は変更されない。いろいろな濃度水準
の試料、標本および対照物に対してイントラ−アッセイ
およびインター−アッセイ（イントラアッセイ＝一連の
アッセイ、インター−アッセイ＝日程の異なるアッセ
イ）の精度測定が行われ、主過程の反応のＶMaxの決定
は大きさの異なる反応ウィンドーを用いて実施される。
この結果、各測定について、従って各々のＶMaxPreにつ
いて、最良の精度（precision）を与える主過程の反応
ウィンドーの大きさが得られる。すべての測定を組合わ
せると、直線性の場合におけるのと類似した依存関係が
得られる。
する諸段階に関する反応曲線をつくるのに用いられる
（ＶMaxPre→主過程の反応ウィンドーの大きさ→主過程
のＶMax）。直線性という基準が、精度の測定および対
照物の回収に関して最良の結果をやはり与えるというこ
とは確実ではないので、主過程の反応ウィンドーとＶ
MaxPreとの関係が次いで微調整される。本例では、同時
にあまり多くのパラメータを変更するのを避けるため上
記に得た参照曲線は変更されない。いろいろな濃度水準
の試料、標本および対照物に対してイントラ−アッセイ
およびインター−アッセイ（イントラアッセイ＝一連の
アッセイ、インター−アッセイ＝日程の異なるアッセ
イ）の精度測定が行われ、主過程の反応のＶMaxの決定
は大きさの異なる反応ウィンドーを用いて実施される。
この結果、各測定について、従って各々のＶMaxPreにつ
いて、最良の精度（precision）を与える主過程の反応
ウィンドーの大きさが得られる。すべての測定を組合わ
せると、直線性の場合におけるのと類似した依存関係が
得られる。
【００１０】対照用物質を測定するための、原理的に同
じ手順によって最良の正しさ（correctness）が得られ
る（図４）。良好な精度を確保するのみならず、対照物
の公称値の良好な回収を確実にもする、ＶMaxPreへの主
過程の反応ウィンドーの大きさｔLinの割付けを選定す
ることが今や可能となる。表１はフェリチンに関する結
果を示す。ｔLinとＶMaxPreとのこの関係が一旦規定さ
れると、参照曲線の計算は新しい基準を用いて反復され
ねばならない。この新規な方法は、フェリチンの例を用
いて表１に要約の形で示されるように、今や完全に特徴
づけることが可能になる。
じ手順によって最良の正しさ（correctness）が得られ
る（図４）。良好な精度を確保するのみならず、対照物
の公称値の良好な回収を確実にもする、ＶMaxPreへの主
過程の反応ウィンドーの大きさｔLinの割付けを選定す
ることが今や可能となる。表１はフェリチンに関する結
果を示す。ｔLinとＶMaxPreとのこの関係が一旦規定さ
れると、参照曲線の計算は新しい基準を用いて反復され
ねばならない。この新規な方法は、フェリチンの例を用
いて表１に要約の形で示されるように、今や完全に特徴
づけることが可能になる。
【００１１】
【表１】フェリチンの例を用いるＶMaxLin法フェリチンに関するＶMaxLinパラメータ 最小の反応ウィンドー：４０秒 初期過程の反応ウィンドー：８０秒 ＶMaxLin ｔLin ＞２５ビット／秒 ８０秒 ２０〜２５ビット／秒 ２４０〜１６０秒 １０〜２０ビット／秒 ３６０〜２４０秒 ＜１０ビット／秒 ３６０秒ａ）最小値を有する低濃度試料（図５） 最小値の見つかった時間：３８秒 ＶMaxPre：０.２７０ビット／秒（３８〜１１８秒） ｔLin：３６０秒 ＶMaxLin：０.１２３ビット／秒（３８〜３６０秒）ｂ）最小値のない通常濃度試料（図５） 最小値の見つかった時間：０秒 ＶMaxPre：２４.０２ビット／秒（０〜８０秒） ｔLin：１７５秒 ＶMaxLin：２３.６４ビット／秒
【００１２】このようにして決定されるパラメータは試
験システムにとって極めて特定的であることを強調せね
ばならない。試験システムには分析器、測定に関する指
示およびバッチに特有な差異を必要なら有する特定の分
析対象物質を測定するための試薬、そして勿論試料物質
が含まれる。
験システムにとって極めて特定的であることを強調せね
ばならない。試験システムには分析器、測定に関する指
示およびバッチに特有な差異を必要なら有する特定の分
析対象物質を測定するための試薬、そして勿論試料物質
が含まれる。
【００１３】数学的直線性の基準を用いて各測定につい
ての測定曲線の直線性を評価しそしてこの予め決めた基
準に合致する曲線部分のみを評価することも可能であ
る。しかしながらこれによると、低濃度の分析対象物質
に対してさえ、得られる精度は低い。ＶMaxを決定する
ための別に選択される方法は、所与の試料の測定曲線に
多項式をあてはめそして多項式の１次導関数をつくるこ
とであろう。１次導関数の最大値は最大の反応速度を示
すが、ただし高水準の散乱を伴う反応においては特に、
このようにして決定されるＶMaxは例えば表２（多項
式）から知りうるように信頼できることが判っている。
ての測定曲線の直線性を評価しそしてこの予め決めた基
準に合致する曲線部分のみを評価することも可能であ
る。しかしながらこれによると、低濃度の分析対象物質
に対してさえ、得られる精度は低い。ＶMaxを決定する
ための別に選択される方法は、所与の試料の測定曲線に
多項式をあてはめそして多項式の１次導関数をつくるこ
とであろう。１次導関数の最大値は最大の反応速度を示
すが、ただし高水準の散乱を伴う反応においては特に、
このようにして決定されるＶMaxは例えば表２（多項
式）から知りうるように信頼できることが判っている。
【００１４】
【表２】
【００１５】多項式の１次導関数の下方にある試験にと
って特定的である面積を調節することにより、１次回帰
を用いて測定曲線を評価しうる測定期間ｔLinを決定す
ることができ、またこの測定期間によって、直線性、精
度および正しさに関して上記した方法と同等な結果が得
られる。積分された面積の大きさは試験にとって特定的
である。つまり面積は各々の試験方法および各々の分析
対象物質に関して、そしておそらくはやはり試験装置に
関連させて経験的に決定されるのが好ましい。例えばフ
ェリチンおよび前立腺特異性抗原についての（図６およ
び７）、特定の装置（MarburgのBehringwerke AGのBN I
I）を用いる様々なラテックス増強試験に関して、積分
面積１００で最良の結果が得られることが例えば見出さ
れている。同じ装置について、ラテックス増強されてい
ない試験に関して得られた最良の積分面積は１０である
（図９および１０）。別な装置（MarburgのBehringwerk
eのBCS）の場合、測光学的測定を伴うラテックス増強試
験に関して得られる最良の面積は２０である（図８）。
って特定的である面積を調節することにより、１次回帰
を用いて測定曲線を評価しうる測定期間ｔLinを決定す
ることができ、またこの測定期間によって、直線性、精
度および正しさに関して上記した方法と同等な結果が得
られる。積分された面積の大きさは試験にとって特定的
である。つまり面積は各々の試験方法および各々の分析
対象物質に関して、そしておそらくはやはり試験装置に
関連させて経験的に決定されるのが好ましい。例えばフ
ェリチンおよび前立腺特異性抗原についての（図６およ
び７）、特定の装置（MarburgのBehringwerke AGのBN I
I）を用いる様々なラテックス増強試験に関して、積分
面積１００で最良の結果が得られることが例えば見出さ
れている。同じ装置について、ラテックス増強されてい
ない試験に関して得られた最良の積分面積は１０である
（図９および１０）。別な装置（MarburgのBehringwerk
eのBCS）の場合、測光学的測定を伴うラテックス増強試
験に関して得られる最良の面積は２０である（図８）。
【００１６】最適な積分面積の経験的な決定は、Ｖ
MaxPreとｔLinとの間の依存関係の決定として別個な操
作で実施されるが、この変形操作に関して決定される積
分面積は、あらゆる濃度にあてはまる定数である。図６
〜１０の実施例はそれぞれ極めて高いおよび極めて低い
濃度を示す。従って例えば、Behringの比濁計（Marburg
のBehringwerke AG）を使用する様々なラテックス増強
試験の精度を決定するために各参照点について一連の精
度測定が実施された。各測定について、一次回帰の相関
係数によって直線性が得られた。対照用血清を測定する
ことにより正しさが決定されそして積分法を用いて参照
曲線についてのたたみ込み（convolution）が同様に評
価された。このようにして決定された積分面積は、多項
式の１次導関数がこの面積の上部限界であり、そして下
方においては、下部の限界である直線の曲線との交点
が、測定期間の開始と終了の位置をＸ軸上で示すよう
に、各測定の１次導関数の下方にあてがわれる（図１
１）。
MaxPreとｔLinとの間の依存関係の決定として別個な操
作で実施されるが、この変形操作に関して決定される積
分面積は、あらゆる濃度にあてはまる定数である。図６
〜１０の実施例はそれぞれ極めて高いおよび極めて低い
濃度を示す。従って例えば、Behringの比濁計（Marburg
のBehringwerke AG）を使用する様々なラテックス増強
試験の精度を決定するために各参照点について一連の精
度測定が実施された。各測定について、一次回帰の相関
係数によって直線性が得られた。対照用血清を測定する
ことにより正しさが決定されそして積分法を用いて参照
曲線についてのたたみ込み（convolution）が同様に評
価された。このようにして決定された積分面積は、多項
式の１次導関数がこの面積の上部限界であり、そして下
方においては、下部の限界である直線の曲線との交点
が、測定期間の開始と終了の位置をＸ軸上で示すよう
に、各測定の１次導関数の下方にあてがわれる（図１
１）。
【００１７】多項式は最小二乗原理を用いて、一対の反
応動力学値から計算される。正規化された方程式の系は
ガウスアルゴリズム、つまり非線形回帰を解くために技
術上熟達する者にとってそれ自体知られている方法によ
って解かれる。あてはめられる多項式は３次式であるの
が有利であるが、より高次の多項式も使用されてよい。
応動力学値から計算される。正規化された方程式の系は
ガウスアルゴリズム、つまり非線形回帰を解くために技
術上熟達する者にとってそれ自体知られている方法によ
って解かれる。あてはめられる多項式は３次式であるの
が有利であるが、より高次の多項式も使用されてよい。
【００１８】以下の実施例は本発明を例示する。
比較例： ａ）尖端速度法 BehringwerkeのTurbi Time Systemは動的評価法（DE 33
47 162）の良い例である。この装置は測定チャンバー
を有し、その中で各々の場合、単一セル内で反応が起き
る。測定結果である最大反応速度ＶMaxに達するまで光
学濃度の測定が続けられ、次いで終了される。系のため
の反応剤が急速な反応を可能にしそして理想的な場合に
はたった数秒後に測定を終了することができる。ＶMax
に到達する時間もまた評価される。これによって、関与
するHeidelberger曲線の側から決定することができ、ま
た過度に低い、正しくない結果を事実上排除できる。
47 162）の良い例である。この装置は測定チャンバー
を有し、その中で各々の場合、単一セル内で反応が起き
る。測定結果である最大反応速度ＶMaxに達するまで光
学濃度の測定が続けられ、次いで終了される。系のため
の反応剤が急速な反応を可能にしそして理想的な場合に
はたった数秒後に測定を終了することができる。ＶMax
に到達する時間もまた評価される。これによって、関与
するHeidelberger曲線の側から決定することができ、ま
た過度に低い、正しくない結果を事実上排除できる。
【００１９】ｂ）固定時間法 Behringwerkeの比濁計（ＢＮ、ＢＮ１００、ＢＮ II）
は光散乱として濁度の増加を測定する。この評価方法は
固定した反応時間に基礎をおく「固定時間法」と称され
る。測定結果は濁度の初期値と最終値との差である。比
濁計は大きな処理量を可能とするように多数のセル内で
試料が同時にインキュベートされる全自動装置である。
測定値を記録するために、測定用光学系を通過するよう
にセルがローターにより規則的な時間間隔で移動され
る。ＢＮ IIの場合は従って、比較的長い時間間隔例え
ば１６秒毎の測定点において反応速度が得られる。
は光散乱として濁度の増加を測定する。この評価方法は
固定した反応時間に基礎をおく「固定時間法」と称され
る。測定結果は濁度の初期値と最終値との差である。比
濁計は大きな処理量を可能とするように多数のセル内で
試料が同時にインキュベートされる全自動装置である。
測定値を記録するために、測定用光学系を通過するよう
にセルがローターにより規則的な時間間隔で移動され
る。ＢＮ IIの場合は従って、比較的長い時間間隔例え
ば１６秒毎の測定点において反応速度が得られる。
【００２０】実施例１ ２段階評価を伴う新規のＶMaxLin法 この方法は二つの段階を有する（図５、表１）。 １．主過程の反応ウィンドー（ｔLin）の最適長さの決
定 第１の操作において、初期過程の短い反応ウィンドーを
用いることにより全体の反応動力学のプロフィルにわた
って最大反応速度ＶMaxPreを探索した。ウィンドーの大
きさは、それが抗原濃度が高い場合でさえ、反応の直線
状領域内に未だあるようにそれぞれの試験について特定
的に規定した。このようにして決定した反応速度はまだ
比較的不正確であった。それは、この抗原濃度に対し
て、主過程の反応ウィンドー（ｔLin）の理想的な大き
さを規定するのに用いられる。この関係からいうと、理
想的なとは、反応速度を規定するために、反応の直線状
のプロフィルを有する領域が事実上すべて用いられるこ
とを意味する。反応速度に主過程の反応ウィンドーの大
きさを割付けるための参照表は試験にとって特定的な基
準に基づいて同様に経験的に決定される（図４、表
１）。
定 第１の操作において、初期過程の短い反応ウィンドーを
用いることにより全体の反応動力学のプロフィルにわた
って最大反応速度ＶMaxPreを探索した。ウィンドーの大
きさは、それが抗原濃度が高い場合でさえ、反応の直線
状領域内に未だあるようにそれぞれの試験について特定
的に規定した。このようにして決定した反応速度はまだ
比較的不正確であった。それは、この抗原濃度に対し
て、主過程の反応ウィンドー（ｔLin）の理想的な大き
さを規定するのに用いられる。この関係からいうと、理
想的なとは、反応速度を規定するために、反応の直線状
のプロフィルを有する領域が事実上すべて用いられるこ
とを意味する。反応速度に主過程の反応ウィンドーの大
きさを割付けるための参照表は試験にとって特定的な基
準に基づいて同様に経験的に決定される（図４、表
１）。
【００２１】２．最高反応速度（ＶMaxLin）の決定 ａ）最小値の同定 反応動力学的な過程が始まる時、反応が実際に始まる以
前に濁度が低下することがありうる。この結果、長いｔ
Lin（例えば３６０秒）に対して過度に低くて正しくな
いＶMaxLinが決まるであろう。これによって最小値が同
定されるのが防がれた。反応の開始時間を規定するため
に極めて短い反応のウィンドーを用いた。図５および表
１における実施例では、これは４０秒の期間であった。
反応ウィンドーは時刻零から始まり、そして勾配が負で
ある限り続いた。ウィンドーが最初の正値に達するやい
なや、反応ウィンドーの最初の測定点もまた、ＶMaxLin
の計算のために考慮に入れることのできる最初の値であ
った。 ｂ）ＶMaxLinの探索 プロフィル全体にわたって最大反応速度を探すために、
初期過程で決定される主過程の反応ウィンドー
（ｔLin）を用いた。（ｔLin）が実際の反応継続時間よ
り長いならば、反応全体にわたって（最小値から反応時
間の終了まで）、反応速度の平均をとった。このように
して決定される反応速度ＶMaxLinは、参照曲線を作成す
るのに用い、また参照曲線は濃度を計算するために用い
た。
前に濁度が低下することがありうる。この結果、長いｔ
Lin（例えば３６０秒）に対して過度に低くて正しくな
いＶMaxLinが決まるであろう。これによって最小値が同
定されるのが防がれた。反応の開始時間を規定するため
に極めて短い反応のウィンドーを用いた。図５および表
１における実施例では、これは４０秒の期間であった。
反応ウィンドーは時刻零から始まり、そして勾配が負で
ある限り続いた。ウィンドーが最初の正値に達するやい
なや、反応ウィンドーの最初の測定点もまた、ＶMaxLin
の計算のために考慮に入れることのできる最初の値であ
った。 ｂ）ＶMaxLinの探索 プロフィル全体にわたって最大反応速度を探すために、
初期過程で決定される主過程の反応ウィンドー
（ｔLin）を用いた。（ｔLin）が実際の反応継続時間よ
り長いならば、反応全体にわたって（最小値から反応時
間の終了まで）、反応速度の平均をとった。このように
して決定される反応速度ＶMaxLinは、参照曲線を作成す
るのに用い、また参照曲線は濃度を計算するために用い
た。
【００２２】実施例２ フェリチン試験のための、積分評価を伴うＶMaxLin法 本例ではフェリチンに対して実施例１と同じ対の測定を
用いた。 ａ）最小値の同定 実施例１について２ａ）で述べたように最小値の同定を
行った。つまり、低濃度の試料については（表１）、最
小値はやはり３８秒で見出され、高濃度の試料について
は０秒で見出された。最小値より前のすべての測定点は
もはや考慮にいれなかった。 ｂ）多項式のあてはめ（matching） 最小値より後の曲線に３次の多項式をあてはめ、そして
その１次導関数をつくった（やはり図１１を参照）。１
次導関数の最大値は低濃度試料の場合は１５３秒にまた
高濃度試料の場合は８７秒にあった。 ｃ）評価領域ｔLinを見出すこと １次導関数の最大値の下方の積分面積を、この例では１
００である限界値に到達するまで繰り返し拡大した（や
はり図１１を参照）。同時に、公称面積に到達するま
で、１次導関数を最大とする時刻の左および右の面積を
別個に拡大した。このようにして反応のタイムウィンド
ーを得た。右側の公称面積が最後の測定点まで延びない
場合、右側の評価領域を最後の測定点まで延ばした。左
側の公称面積が最小値まで延びない場合、そこの反応の
タイムウィンドーは最小値まで延ばした。低濃度の場
合、反応のタイムウィンドーは２段階の評価を伴うＶ
MaxLin法の３８〜３６０秒と同じであり、また高濃度の
場合、反応のタイムウィンドーは０秒から１９６秒に至
った。 ｄ）生の値の決定 反応のタイムウィンドー内での一次回帰により生の値を
得た。この値は低濃度の場合０.１２３ビット／秒であ
りまた高濃度の場合、例１での２３.６４ビット／秒と
比べ、２３.４６ビット／秒であった。この値は参照曲
線に入力するかあるいは濃度を決定するために既存の参
照曲線とともに使用した。
用いた。 ａ）最小値の同定 実施例１について２ａ）で述べたように最小値の同定を
行った。つまり、低濃度の試料については（表１）、最
小値はやはり３８秒で見出され、高濃度の試料について
は０秒で見出された。最小値より前のすべての測定点は
もはや考慮にいれなかった。 ｂ）多項式のあてはめ（matching） 最小値より後の曲線に３次の多項式をあてはめ、そして
その１次導関数をつくった（やはり図１１を参照）。１
次導関数の最大値は低濃度試料の場合は１５３秒にまた
高濃度試料の場合は８７秒にあった。 ｃ）評価領域ｔLinを見出すこと １次導関数の最大値の下方の積分面積を、この例では１
００である限界値に到達するまで繰り返し拡大した（や
はり図１１を参照）。同時に、公称面積に到達するま
で、１次導関数を最大とする時刻の左および右の面積を
別個に拡大した。このようにして反応のタイムウィンド
ーを得た。右側の公称面積が最後の測定点まで延びない
場合、右側の評価領域を最後の測定点まで延ばした。左
側の公称面積が最小値まで延びない場合、そこの反応の
タイムウィンドーは最小値まで延ばした。低濃度の場
合、反応のタイムウィンドーは２段階の評価を伴うＶ
MaxLin法の３８〜３６０秒と同じであり、また高濃度の
場合、反応のタイムウィンドーは０秒から１９６秒に至
った。 ｄ）生の値の決定 反応のタイムウィンドー内での一次回帰により生の値を
得た。この値は低濃度の場合０.１２３ビット／秒であ
りまた高濃度の場合、例１での２３.６４ビット／秒と
比べ、２３.４６ビット／秒であった。この値は参照曲
線に入力するかあるいは濃度を決定するために既存の参
照曲線とともに使用した。
【００２３】ＶMaxLin法の従来の技術を上まわる基本的
な利点は、経験的に規定された、試験にとって特定的な
パラメータを使用する２段階法または積分法によって、
個々の反応の動力学に対して反応ウィンドーを理想的に
適合させることである。必要なら上記のパラメータはバ
ッチに特有な基準に基づいて規定することさえできるだ
ろう。この極めて特定的な適合により、評価しようとす
る各々の場合に最大数の測定点が使用されることが確実
になった。この利点は、ＢＮIIでのラテックス増強試験
の場合におけるように信号対騒音比が大きい場合、そし
て殊にこの場合に分析対象物質の濃度が低いとき、特に
明白であった。信号の精度は、初期値と最終値との間の
差だけを用いる（図１２）固定時間法によるものより良
かった。
な利点は、経験的に規定された、試験にとって特定的な
パラメータを使用する２段階法または積分法によって、
個々の反応の動力学に対して反応ウィンドーを理想的に
適合させることである。必要なら上記のパラメータはバ
ッチに特有な基準に基づいて規定することさえできるだ
ろう。この極めて特定的な適合により、評価しようとす
る各々の場合に最大数の測定点が使用されることが確実
になった。この利点は、ＢＮIIでのラテックス増強試験
の場合におけるように信号対騒音比が大きい場合、そし
て殊にこの場合に分析対象物質の濃度が低いとき、特に
明白であった。信号の精度は、初期値と最終値との間の
差だけを用いる（図１２）固定時間法によるものより良
かった。
【００２４】尖端速度法は、遅延相、反応速度が最大の
領域および飽和領域の間が離れているプロフィルを有す
る反応動力学に適合している（米国特許第4,157,871
号）。ＢＮIIでのラテックス試験に関する反応プロフィ
ル（例えばＮラテックスフェリチン）の場合、遅延相お
よび飽和相をほとんど同定できないことがしばしばあっ
た（図１〜３）。反応の出発時に最初の測定を行うのは
遅きにすぎ、そして測定を行う頻度もまた未だ記録すべ
き遅延相にとっては低すぎた。６分後飽和領域にははる
かに到達しなかった。三つの領域が明白に分かれていず
また加えて測定を行う頻度が比較的低いならば、尖端速
度法によって過度に高い速度が不正確に与えられる危険
がある。例えば図１〜３におけるように特に低濃度の試
料の場合、反応速度が低水準で一定であるので、尖端速
度を決定する利益はなかった。このことは、それを用い
て尖端速度の検出が依然行われる８０秒という短いタイ
ムウィンドーによる正確さを３６０秒のタイムウィンド
ーによるそれと比較することによっても示された（図１
３）。
領域および飽和領域の間が離れているプロフィルを有す
る反応動力学に適合している（米国特許第4,157,871
号）。ＢＮIIでのラテックス試験に関する反応プロフィ
ル（例えばＮラテックスフェリチン）の場合、遅延相お
よび飽和相をほとんど同定できないことがしばしばあっ
た（図１〜３）。反応の出発時に最初の測定を行うのは
遅きにすぎ、そして測定を行う頻度もまた未だ記録すべ
き遅延相にとっては低すぎた。６分後飽和領域にははる
かに到達しなかった。三つの領域が明白に分かれていず
また加えて測定を行う頻度が比較的低いならば、尖端速
度法によって過度に高い速度が不正確に与えられる危険
がある。例えば図１〜３におけるように特に低濃度の試
料の場合、反応速度が低水準で一定であるので、尖端速
度を決定する利益はなかった。このことは、それを用い
て尖端速度の検出が依然行われる８０秒という短いタイ
ムウィンドーによる正確さを３６０秒のタイムウィンド
ーによるそれと比較することによっても示された（図１
３）。
【００２５】この新規な評価方法の価値を比較しながら
比べるために、ある範囲の基準が使用された（表３）。
すべての実験において、慣用の固定時間法およびこの新
規な方法を用いて同一の反応動力学を評価した。この場
合、試験時間をＶMaxLinのための以前の１２分から６分
に短縮し、そして参照曲線を延長した。この結果、５〜
３５０μｇ／ｌの代わりに２.５〜７００μｇ／ｌの測
定範囲が得られた（試料の最初の希釈度は１：５、図１
７）。次の表３は、フェリチン−固定時間法とＶMaxLin
評価法とを比較するための試験特性を示す。両法のため
の参照曲線のためにＬｏｇｉｔＬｏｇ関数を用いた。各
々の結果は、測定の平均回数が１０であることを示す。
一層の詳細は試験において示す。
比べるために、ある範囲の基準が使用された（表３）。
すべての実験において、慣用の固定時間法およびこの新
規な方法を用いて同一の反応動力学を評価した。この場
合、試験時間をＶMaxLinのための以前の１２分から６分
に短縮し、そして参照曲線を延長した。この結果、５〜
３５０μｇ／ｌの代わりに２.５〜７００μｇ／ｌの測
定範囲が得られた（試料の最初の希釈度は１：５、図１
７）。次の表３は、フェリチン−固定時間法とＶMaxLin
評価法とを比較するための試験特性を示す。両法のため
の参照曲線のためにＬｏｇｉｔＬｏｇ関数を用いた。各
々の結果は、測定の平均回数が１０であることを示す。
一層の詳細は試験において示す。
【００２６】
【表３】
【００２７】分析対象物質の濃度が高い場合および中程
度である場合について、精度は一連のアッセイ（イント
ラアッセイ）および日程の異なるアッセイ（インターア
ッセイ）の双方で同様に良かった。分析対象物質の濃度
が低い場合、ＶMaxLinに関する精度は慣用的方法に関す
るそれよりかなり良かった（表３）。希釈率の正しさは
ＶMaxLinの場合かなり良かった（表３、図１５）。特
に、濃度が測定範囲の上端にある場合、次に大きい試料
の希釈率（１：２０）での測定を反復すると、平均して
１６％大きい値が得られた。拡大された測定範囲に対し
て濃度を２倍にして同じ実験をすると、ＶMaxLinについ
てたった７％大きい濃度が得られた。図１５もまた希釈
の正しさが改善したことを示す。
度である場合について、精度は一連のアッセイ（イント
ラアッセイ）および日程の異なるアッセイ（インターア
ッセイ）の双方で同様に良かった。分析対象物質の濃度
が低い場合、ＶMaxLinに関する精度は慣用的方法に関す
るそれよりかなり良かった（表３）。希釈率の正しさは
ＶMaxLinの場合かなり良かった（表３、図１５）。特
に、濃度が測定範囲の上端にある場合、次に大きい試料
の希釈率（１：２０）での測定を反復すると、平均して
１６％大きい値が得られた。拡大された測定範囲に対し
て濃度を２倍にして同じ実験をすると、ＶMaxLinについ
てたった７％大きい濃度が得られた。図１５もまた希釈
の正しさが改善したことを示す。
【００２８】対照物の回収は両方の評価法について同様
に良かった（表３）。この場合、公称値の決定は固定時
間法を用いて実施したので、その場合、転化によってさ
らに良い回収を期待できることを想起せねばならない。
両法での結果は極めて良く相関した（図１６）。過剰抗
原での確かさは固定時間については約２５,０００ｇ／
ｌまでまたＶMaxLinについては約５０,０００ｇ／ｌま
で確保された（図１７）。別な例としてＰＳＡ（前立腺
特異性抗原）に関する試験を用いることができる。図１
４からわかるように、ＶMaxLinを用いることにより同様
に良い参照曲線をつくることができ、この曲線は測定範
囲が上方に延びうることを確かにする。この場合Ｖ
MaxLinに関する測定時間は固定時間法についての１８分
と比べただの６分であった。
に良かった（表３）。この場合、公称値の決定は固定時
間法を用いて実施したので、その場合、転化によってさ
らに良い回収を期待できることを想起せねばならない。
両法での結果は極めて良く相関した（図１６）。過剰抗
原での確かさは固定時間については約２５,０００ｇ／
ｌまでまたＶMaxLinについては約５０,０００ｇ／ｌま
で確保された（図１７）。別な例としてＰＳＡ（前立腺
特異性抗原）に関する試験を用いることができる。図１
４からわかるように、ＶMaxLinを用いることにより同様
に良い参照曲線をつくることができ、この曲線は測定範
囲が上方に延びうることを確かにする。この場合Ｖ
MaxLinに関する測定時間は固定時間法についての１８分
と比べただの６分であった。
【００２９】表４は様々なラテックス増強試験のために
固定時間、積分および２段階の各評価を用いて標本を１
０回測定したものからのイントラアッセイの精度（Ｃ
Ｖ，％）を比較する。ＶMaxLin法の二つの変形は大まか
にみると同等でありまた低濃度に関する固定時間法より
かなり良い正確さを与えた。
固定時間、積分および２段階の各評価を用いて標本を１
０回測定したものからのイントラアッセイの精度（Ｃ
Ｖ，％）を比較する。ＶMaxLin法の二つの変形は大まか
にみると同等でありまた低濃度に関する固定時間法より
かなり良い正確さを与えた。
【００３０】
【表４】
【００３１】実施例３（図１８） ａＰＴＴ試験のための、積分評価を伴うＶMaxLin法 光吸収の特定の閾値を超える時間が決定される（固定吸
収率評価）ように、Behringのもともとの試験に関して
評価を行った。積分評価を伴うＶMaxLin法も同様に用い
うることを示すことができた。標本および標本を１：３
に希釈したものとの間の信号の差（１２５.７mE／秒に
対して２８.２mE／秒）は、固定吸収率評価での差（３
３.９秒に対して８１.４秒）より大きかった。ＶMaxLin
評価〔試験システム：BCS、Behring反応剤OQGS、Behrin
g試験番号：28、公称面積：10、多項式次数：５、評価
範囲：30〜100秒（希釈しない標本）、70〜150秒（１：
３に希釈した標本）、図１８〕に対して、閾値を越える
ことが必要でないのは有利であった。
収率評価）ように、Behringのもともとの試験に関して
評価を行った。積分評価を伴うＶMaxLin法も同様に用い
うることを示すことができた。標本および標本を１：３
に希釈したものとの間の信号の差（１２５.７mE／秒に
対して２８.２mE／秒）は、固定吸収率評価での差（３
３.９秒に対して８１.４秒）より大きかった。ＶMaxLin
評価〔試験システム：BCS、Behring反応剤OQGS、Behrin
g試験番号：28、公称面積：10、多項式次数：５、評価
範囲：30〜100秒（希釈しない標本）、70〜150秒（１：
３に希釈した標本）、図１８〕に対して、閾値を越える
ことが必要でないのは有利であった。
【００３２】遅延相が長い試験でのＶMaxLin評価のため
には、評価のための開始時間を可変に保たねばならな
い。これは例えば、最小値を探索するのと似た仕方で正
の限界勾配を探索するアルゴリズムによって行われ、こ
の限界勾配の値は規定可能なものでなければならずそし
て試験システムに依存する。限界勾配に到達する時、探
索タイムウィンドーの開始点が、ＶMaxLin評価のための
開始時間を与える。 実施例４（図１８） ＡＴIII試験のための、積分評価を伴うＶMaxLin法 ＡＴIIIによって阻害されていないトロンビンによって
色原体物質が転化されるＡＴIII試験もまたＶ
MaxLin（試験システム：BCS、Behring反応剤OWWR、Behr
ing試験番号：28、評価範囲：０〜45秒、公称面積：
１、多項式次数：５）を用いて評価することができる。
測定を１０回実施した時、正確さは慣用的な評価でのそ
れとおおまかにみて丁度同じであった（１５〜４５秒の
勾配）。
には、評価のための開始時間を可変に保たねばならな
い。これは例えば、最小値を探索するのと似た仕方で正
の限界勾配を探索するアルゴリズムによって行われ、こ
の限界勾配の値は規定可能なものでなければならずそし
て試験システムに依存する。限界勾配に到達する時、探
索タイムウィンドーの開始点が、ＶMaxLin評価のための
開始時間を与える。 実施例４（図１８） ＡＴIII試験のための、積分評価を伴うＶMaxLin法 ＡＴIIIによって阻害されていないトロンビンによって
色原体物質が転化されるＡＴIII試験もまたＶ
MaxLin（試験システム：BCS、Behring反応剤OWWR、Behr
ing試験番号：28、評価範囲：０〜45秒、公称面積：
１、多項式次数：５）を用いて評価することができる。
測定を１０回実施した時、正確さは慣用的な評価でのそ
れとおおまかにみて丁度同じであった（１５〜４５秒の
勾配）。
【００３３】実施例５（図１８） 血小板凝集試験のための、積分評価を伴うＶMaxLin法 血小板の凝集に関しては大巾に異なる反応の動力学が認
められるであろう。血漿の光透過は凝集が進むにつれ増
加する。図１８の実施例を用いるとし、プロフィルは血
液の採取後２時間および１０時間にして試料の細胞の凝
集を示した。両方のプロフィルにおいて、積分評価を伴
うＶMaxLinでは直線状部分が極めてよく認められそして
新規な試料については２２.４、そして古い試料につい
ては１４.５の凝集速度が測定された（試験システム：
ＢＣＴ、試料：１５０μｌの血小板に富む血漿と混合さ
れた、米国、St. LouisのSigma社の５０μｌ ＡＤＰ
（１.２５μＭ）、評価範囲：７〜８０秒、公称面積：
５、多項式次数：５）。
められるであろう。血漿の光透過は凝集が進むにつれ増
加する。図１８の実施例を用いるとし、プロフィルは血
液の採取後２時間および１０時間にして試料の細胞の凝
集を示した。両方のプロフィルにおいて、積分評価を伴
うＶMaxLinでは直線状部分が極めてよく認められそして
新規な試料については２２.４、そして古い試料につい
ては１４.５の凝集速度が測定された（試験システム：
ＢＣＴ、試料：１５０μｌの血小板に富む血漿と混合さ
れた、米国、St. LouisのSigma社の５０μｌ ＡＤＰ
（１.２５μＭ）、評価範囲：７〜８０秒、公称面積：
５、多項式次数：５）。
【００３４】実施例６（図１９） Von-Willebrand試験のための、積分評価を伴うＶMaxLin
法 固定された血小板とリストセチンとを含有する反応剤を
用い、Behring Von-Willebrand試験によりVon-Willebra
nd因子による血小板の凝集を定量化した。光吸収の特定
的閾値（１００mE）に到達しない時間を決定する（固定
吸収率評価）ように、Behringのもともとの試験を用い
て評価を行った。慣用の固定吸収率評価による参照曲線
の決定はリストセチン共因子の濃度２０％（ヒトの血漿
の標準的な希釈度）の点までしか行わなかった。なぜな
ら、これを下回ると反応が弱いためもはや閾値には到達
せず、従って何らかの結果を得ることはもはや不可能で
あるからである。これとは対照的に、積分評価を伴うＶ
MaxLinは、同じ測定（試験システム：BCT、Behring反応
剤OUBD、Behring試験番号390、評価範囲７〜80秒、公称
面積：５、多項式次数：５）について約５％までの参照
曲線を可能とした。
法 固定された血小板とリストセチンとを含有する反応剤を
用い、Behring Von-Willebrand試験によりVon-Willebra
nd因子による血小板の凝集を定量化した。光吸収の特定
的閾値（１００mE）に到達しない時間を決定する（固定
吸収率評価）ように、Behringのもともとの試験を用い
て評価を行った。慣用の固定吸収率評価による参照曲線
の決定はリストセチン共因子の濃度２０％（ヒトの血漿
の標準的な希釈度）の点までしか行わなかった。なぜな
ら、これを下回ると反応が弱いためもはや閾値には到達
せず、従って何らかの結果を得ることはもはや不可能で
あるからである。これとは対照的に、積分評価を伴うＶ
MaxLinは、同じ測定（試験システム：BCT、Behring反応
剤OUBD、Behring試験番号390、評価範囲７〜80秒、公称
面積：５、多項式次数：５）について約５％までの参照
曲線を可能とした。
【図１】異なった濃度のフェリチンを用いる抗原−抗体
結合の反応プロフィルを示す。
結合の反応プロフィルを示す。
【図２】異なった濃度のフェリチンを用いる抗原−抗体
結合の反応プロフィルを示す。
結合の反応プロフィルを示す。
【図３】異なった濃度のフェリチンを用いる抗原−抗体
結合の反応プロフィルを示す。
結合の反応プロフィルを示す。
【図４】最良の相関係数について主過程の反応ウィンド
ーの大きさｔLinとＶMaxPreとの関係を示す。
ーの大きさｔLinとＶMaxPreとの関係を示す。
【図５】最小値を有する低濃度試料と最小値のない通常
濃度試料とについての光散乱（ビット）と時間との関係
を示す。
濃度試料とについての光散乱（ビット）と時間との関係
を示す。
【図６】非常に高いまたは低い濃度のフェリチンについ
てのラテックス増強試験の結果を示す。
てのラテックス増強試験の結果を示す。
【図７】非常に高いまたは低い濃度の前立腺特異抗原Ｐ
ＳＡについてのラテックス増強試験の結果を示す。
ＳＡについてのラテックス増強試験の結果を示す。
【図８】非常に高いまたは低い濃度のＤ−Dimerについ
ての試験結果を示す。
ての試験結果を示す。
【図９】非常に高いまたは低い濃度のＩｇＡについての
試験結果を示す。
試験結果を示す。
【図１０】非常に高いまたは低い濃度のＩｇＧについて
の試験結果を示す。
の試験結果を示す。
【図１１】最適な積分面積の決定方法を示す。
【図１２】信号精度の比較を示す。
【図１３】ヒトＮ−フェリチン標本の一連の希釈におけ
る測定からの変動係数および測定変数の決定の仕方を示
す。
る測定からの変動係数および測定変数の決定の仕方を示
す。
【図１４】ＰＳＡの参照曲線を示す。
【図１５】３つの血清試料の直線性を示す。
【図１６】両方法の相関性の良さを示す。
【図１７】過剰抗原での確かさを示す。
【図１８】実施例３、４および５における測定の結果を
示す。
示す。
【図１９】実施例６における測定の結果を示す。
Claims (12)
- 【請求項１】 反応プロフィルが直線状である領域にお
いて時間とともに変化する測定された変数Ｌ(ｔ)の最大
値、時間並びに反応のタイムウィンドーの大きさを決定
することを目的とし、この反応のタイムウィンドーが、
直線状領域で変化しそして反応の性質および反応条件に
依存するものである、変数Ｌ(ｔ)の機器測定方法であっ
て、 ａ） 特定の反応に関するパラメータが、特定の反応条
件において試験のために特に規定され、そして ｂ） 直線状プロフィルを有する反応のタイムウィンド
ーの時間および大きさが次いでパラメータの助けをかり
て段階的に評価し規定される、測定される変数Ｌ(ｔ)の
機器測定方法。 - 【請求項２】 試料と試薬との反応の結果、測定される
変数Ｌに時間依存性の変化Ｌ(ｔ)が得られ、また試料中
の分析対象物質の濃度Ｃが、評価曲線Ｃ(ＶMax)に従っ
て、Ｌ(ｔ)から導出される入力変数ＶMaxと相関され、
Ｌ(ｔ)は部分的にのみ直線状であり、またＶMaxLinの導
出のために直線状の部分またはその一部分だけの使用が
意図されそしてＶMaxLinの導出が、検査すべき試料の反
応プロフィルに依存する反応のタイムウィンドーｔLin
において実施される請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 測定される変数が、 ｉ） 予め決定された、試験にとって特異な反応のタイ
ムウィンドーｔTestによって最初の入力変数ＶMaxPreが
すべてに先んじて決定され、次いで ii） 試験にとって特異な関数ｔLin（ＶMaxPre）によ
ってｔLinが決定され、次いで iii) 反応のタイムウィンドーｔLinに対してＶMaxLin
が導出されることで定められる請求項１および２に記載
の方法。 - 【請求項４】 測定される変数が、 ｉ） 関数Ｌ(ｔ)に対する数学的あてはめが行われ、 ii） 見出された数学的あてはめの１次導関数をつく
り、 iii) 試験にとって特定な面積がこの１次導関数の下方
にあてはめられ、この面積の下方の限界がこの１次導関
数と接する点によりｔLinの上限と下限とが指示されそ
して iv） 反応のタイムウィンドーｔLinに対してＶMaxLin
が導出されることで定められる請求項１および２記載の
方法。 - 【請求項５】 数学的あてはめが多項式による請求項４
記載の方法。 - 【請求項６】 分析対象物質と試薬とが、特異的結合ペ
アーのパートナーである請求項１から５のいずれか１項
に記載の方法。 - 【請求項７】 分析対象物質と試薬とが、抗原と抗体と
である請求項６記載の方法。 - 【請求項８】 測定変数が濁度である請求項１から７の
いずれか１項に記載の方法。 - 【請求項９】 測定変数が光の散乱度である請求項１か
ら７のいずれか１項に記載の方法。 - 【請求項１０】 分析対象物質が血清蛋白質である請求
項１から９のいずれか１項に記載の方法。 - 【請求項１１】 分析対象物質がハプテンである請求項
１から９のいずれか１項に記載の方法。 - 【請求項１２】 凝固分析のための方法としての請求項
１から５のいずれか１項に記載の方法の使用。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19640121:6 | 1996-09-28 | ||
| DE19640121A DE19640121B4 (de) | 1996-09-28 | 1996-09-28 | Verfahren zur Bestimmung einer sich zeitabhängig ändernden Meßgröße |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10111248A true JPH10111248A (ja) | 1998-04-28 |
| JP4015726B2 JP4015726B2 (ja) | 2007-11-28 |
Family
ID=7807310
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP27795097A Expired - Fee Related JP4015726B2 (ja) | 1996-09-28 | 1997-09-26 | 時間とともに変化する測定された変数の機器測定方法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6044330A (ja) |
| EP (1) | EP0833153B1 (ja) |
| JP (1) | JP4015726B2 (ja) |
| AT (1) | ATE329265T1 (ja) |
| CA (1) | CA2216895C (ja) |
| DE (2) | DE19640121B4 (ja) |
| ES (1) | ES2264151T3 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011226909A (ja) * | 2010-04-20 | 2011-11-10 | Hitachi High-Technologies Corp | 自動分析装置及び自動分析方法 |
| WO2018110006A1 (ja) * | 2016-12-15 | 2018-06-21 | 株式会社堀場製作所 | 免疫凝集反応を用いた濃度測定における被験物質濃度の適正性の判定方法およびそのための処理部を有する試料分析装置 |
| JP2021076524A (ja) * | 2019-11-12 | 2021-05-20 | キヤノンメディカルシステムズ株式会社 | 検量線生成装置及び自動分析装置 |
| JP2021110649A (ja) * | 2020-01-10 | 2021-08-02 | 日本無線株式会社 | 濃度検出プログラム及び濃度検出システム |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19919539C5 (de) * | 1999-04-29 | 2004-12-09 | Gerhard Lewandovski | Verfahren zur Messung der Aktivität einer biologisch wirksamen Substanz in einem histologischen Präparat |
| EP1496362B1 (en) * | 2003-07-09 | 2006-12-13 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Turbidimetric immunoassay and an apparatus therefor |
| DE102007017906A1 (de) * | 2007-04-17 | 2008-10-23 | Dade Behring Marburg Gmbh | Verfahren zur Bestimmung der Reaktions-Lag-Phase in einer analytabhängigen Reaktion |
| CA2804843C (en) * | 2012-02-06 | 2021-02-02 | Ortho-Clinical Diagnostics, Inc. | Multiple time windows for extending the range of an assay |
| EP2790019A1 (de) * | 2013-04-10 | 2014-10-15 | Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH | High Dose Hook Erkennung |
| KR20190076624A (ko) * | 2017-12-22 | 2019-07-02 | 삼성전자주식회사 | 검사 장치 및 그 제어방법 |
| WO2021042308A1 (zh) | 2019-09-04 | 2021-03-11 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 识别免疫比浊法中钩状效应的方法、装置及计算机可读介质 |
| US20210311046A1 (en) * | 2020-04-07 | 2021-10-07 | Washington University | Methods of reducing interference in immunoassays |
| CN114152761B (zh) * | 2020-09-08 | 2025-07-04 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 钩状效应识别方法及相关设备 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0224337B2 (ja) * | 1980-05-02 | 1990-05-29 | Olympus Optical Co | |
| JPH0450752A (ja) * | 1990-06-20 | 1992-02-19 | Nittec Co Ltd | 自動分析装置 |
| JPH06194313A (ja) * | 1992-12-24 | 1994-07-15 | Jeol Ltd | 反応測定方法 |
| JPH06324029A (ja) * | 1993-03-15 | 1994-11-25 | Hitachi Ltd | クロマトグラム解析表示方法及びその装置 |
| JPH08240524A (ja) * | 1995-03-03 | 1996-09-17 | Shimadzu Corp | 自動化学分析装置 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2409273A1 (de) * | 1974-02-27 | 1975-09-04 | Behringwerke Ag | Verfahren und vorrichtung zum messen von antigen-antikoerper-reaktionen |
| JPS5247345B2 (ja) * | 1974-12-26 | 1977-12-01 | ||
| DE2529117A1 (de) * | 1975-06-30 | 1977-01-13 | Carrol Wallace E | Verfahren und vorrichtung zur messung der optischen dichte |
| CA1081497A (en) * | 1976-06-02 | 1980-07-15 | Robert J. Anderson | System for rate immunonephelometric analysis |
| US4157871A (en) * | 1976-06-02 | 1979-06-12 | Beckman Instruments, Inc. | System for rate immunonephelometric analysis |
| JPS54108694A (en) * | 1978-02-14 | 1979-08-25 | Mitsubishi Chem Ind | Method of measuring antigennantibody reaction |
| JPS54108693A (en) * | 1978-02-14 | 1979-08-25 | Mitsubishi Chem Ind | Method and device for optically measuring antigennantibody reaction |
| US4581337A (en) * | 1983-07-07 | 1986-04-08 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Polyether polyamines as linking agents for particle reagents useful in immunoassays |
| JPS5798391A (en) * | 1980-12-12 | 1982-06-18 | Mitsui Toatsu Chem Inc | Microcapsule liquid containing coloring matter for recording material |
| US4766083A (en) * | 1982-04-04 | 1988-08-23 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Method for the photometric determination of biological agglutination |
| DE3347162A1 (de) * | 1983-12-27 | 1985-07-04 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Photometrisches verfahren zur konzentrationsbestimmung bei reaktionen, die unter bildung oder verbrauch von streuzentren verlaufen |
| JPS63502372A (ja) * | 1985-12-23 | 1988-09-08 | ベツクマン インスツルメンツ インコ−ポレ−テツド | 速度比濁分析反応中に散乱する不特定光線の動態的帰線消去装置及び方法 |
| JP2591750B2 (ja) * | 1986-06-26 | 1997-03-19 | オ−ソ・ダイアグノステイツク・システムズ・インコ−ポレ−テツド | 免疫分析システム |
| US5244815A (en) * | 1990-01-19 | 1993-09-14 | Lamina Ltd. | Fingerprint test pad and method for fingerprinting using particle based immunoassay |
| US5635602A (en) * | 1993-08-13 | 1997-06-03 | The Regents Of The University Of California | Design and synthesis of bispecific DNA-antibody conjugates |
| US5705353A (en) * | 1995-06-07 | 1998-01-06 | Beckman Instruments, Inc. | Method of reducing interferences in assays |
-
1996
- 1996-09-28 DE DE19640121A patent/DE19640121B4/de not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-09-03 DE DE59712670T patent/DE59712670D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-03 ES ES97115223T patent/ES2264151T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-03 EP EP97115223A patent/EP0833153B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-03 AT AT97115223T patent/ATE329265T1/de active
- 1997-09-24 US US08/936,544 patent/US6044330A/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-26 JP JP27795097A patent/JP4015726B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1997-09-26 CA CA002216895A patent/CA2216895C/en not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-02-11 US US09/503,152 patent/US6317702B1/en not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0224337B2 (ja) * | 1980-05-02 | 1990-05-29 | Olympus Optical Co | |
| JPH0450752A (ja) * | 1990-06-20 | 1992-02-19 | Nittec Co Ltd | 自動分析装置 |
| JPH06194313A (ja) * | 1992-12-24 | 1994-07-15 | Jeol Ltd | 反応測定方法 |
| JPH06324029A (ja) * | 1993-03-15 | 1994-11-25 | Hitachi Ltd | クロマトグラム解析表示方法及びその装置 |
| JPH08240524A (ja) * | 1995-03-03 | 1996-09-17 | Shimadzu Corp | 自動化学分析装置 |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011226909A (ja) * | 2010-04-20 | 2011-11-10 | Hitachi High-Technologies Corp | 自動分析装置及び自動分析方法 |
| US10203277B2 (en) | 2010-04-20 | 2019-02-12 | Hitachi High-Technologies Corporation | Automatic analysis device and automatic analysis method |
| WO2018110006A1 (ja) * | 2016-12-15 | 2018-06-21 | 株式会社堀場製作所 | 免疫凝集反応を用いた濃度測定における被験物質濃度の適正性の判定方法およびそのための処理部を有する試料分析装置 |
| JPWO2018110006A1 (ja) * | 2016-12-15 | 2019-10-24 | 株式会社堀場製作所 | 免疫凝集反応を用いた濃度測定における被験物質濃度の適正性の判定方法およびそのための処理部を有する試料分析装置 |
| JP2022046716A (ja) * | 2016-12-15 | 2022-03-23 | 株式会社堀場製作所 | 免疫凝集反応を用いた濃度測定における被験物質濃度の適正性の判定方法およびそのための処理部を有する試料分析装置 |
| JP2021076524A (ja) * | 2019-11-12 | 2021-05-20 | キヤノンメディカルシステムズ株式会社 | 検量線生成装置及び自動分析装置 |
| JP2021110649A (ja) * | 2020-01-10 | 2021-08-02 | 日本無線株式会社 | 濃度検出プログラム及び濃度検出システム |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2216895A1 (en) | 1998-03-28 |
| ATE329265T1 (de) | 2006-06-15 |
| DE19640121B4 (de) | 2007-04-26 |
| DE59712670D1 (de) | 2006-07-20 |
| CA2216895C (en) | 2008-12-30 |
| EP0833153A3 (de) | 2002-09-11 |
| DE19640121A1 (de) | 1998-04-02 |
| EP0833153B1 (de) | 2006-06-07 |
| EP0833153A2 (de) | 1998-04-01 |
| US6317702B1 (en) | 2001-11-13 |
| JP4015726B2 (ja) | 2007-11-28 |
| US6044330A (en) | 2000-03-28 |
| ES2264151T3 (es) | 2006-12-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4015726B2 (ja) | 時間とともに変化する測定された変数の機器測定方法 | |
| JP6367942B2 (ja) | 測光アッセイのプロゾーン効果の検出方法 | |
| US4157871A (en) | System for rate immunonephelometric analysis | |
| US5571728A (en) | Method for analyzing particle-enhanced agglutination reactions in centrifugal analyzers by determining the brightening of turbidity | |
| US20090075324A1 (en) | Method and System for Quantitative Hemoglobin Determination | |
| EP4083630A1 (en) | Blood coagulation time measurement method | |
| US12099049B2 (en) | Method and device for detecting hook effect in turbidimetric inhibition immunoassay, and computer readable medium | |
| JP2010522336A (ja) | 全血分析 | |
| US4204837A (en) | Method of rate immunonephelometric analysis | |
| CA1081497A (en) | System for rate immunonephelometric analysis | |
| US9568488B2 (en) | Biological sample analyzing apparatus | |
| CN115443409A (zh) | 血液凝固时间测定方法 | |
| CN115876995A (zh) | 一种免疫荧光层析动力学检测方法及系统 | |
| CA2283154A1 (en) | Method and apparatus for measurement of blood substitutes | |
| US7981622B2 (en) | Procedure for the determination of the reaction lag phase in an analyte-dependent reaction | |
| WO2003083490A3 (en) | Method for predicting antiphospholid syndrome | |
| Pattenden et al. | Serum free light chains; the need to establish local reference intervals | |
| JPH02163658A (ja) | 免疫化学的分析法 | |
| JP7771404B2 (ja) | 反応曲線の曲率に基づいて検出待ちサンプルのプロゾーン現象を検出するための方法及び装置 | |
| US20140212991A1 (en) | Immunoassay method and immunoassay apparatus | |
| CA2180521C (en) | Nephelometric and turbidimetric protein determinations free of an excess of antigen | |
| JP4404994B2 (ja) | 免疫分析方法 | |
| JPH07270424A (ja) | ラテックス免疫凝集分析方法 | |
| CN114544568A (zh) | 一种直接化学发光荧光光谱理论模型 | |
| JPH10246695A (ja) | 吸光光度法式自動分析装置における定量方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20040709 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060523 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20060816 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20060821 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20061116 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20070206 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070606 |
|
| A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20070724 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20070821 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20070914 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100921 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100921 Year of fee payment: 3 |
|
| S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100921 Year of fee payment: 3 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110921 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110921 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120921 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130921 Year of fee payment: 6 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |