JPH10174581A - 培養容器 - Google Patents

培養容器

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JPH10174581A
JPH10174581A JP35256696A JP35256696A JPH10174581A JP H10174581 A JPH10174581 A JP H10174581A JP 35256696 A JP35256696 A JP 35256696A JP 35256696 A JP35256696 A JP 35256696A JP H10174581 A JPH10174581 A JP H10174581A
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JP
Japan
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culture
medium
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container
vessel
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JP35256696A
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Ayumi Nagahara
歩 長原
Masaru Fukuda
賢 福田
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Kikkoman Corp
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Kikkoman Corp
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Publication date
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    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02Form or structure of the vessel
    • C12M23/08Flask, bottle or test tube
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
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    • C12M41/44Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of volume or liquid level

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Abstract

(57)【要約】 【課題】作業上、安全性の高い培養容器及び該培養容器
を用いる培養方法を提供すること。 【解決手段】(1)培地の供給口及び排出口を備えた容
器本体と、該排出口に装着され、かつ強制排出手段を備
えた分注装置からなり、強制排出手段により培地を一定
量ずつ排出することを特徴とする培養容器。 (2)培地の供給口及びノズルを備えた可撓性の容器本
体を有し、該容器本体を押圧することにより、ノズルか
ら培地を一定量ずつ排出することを特徴とする培養容
器。 (3)上記(1)、(2)または(3)記載の培養容器を用いる
ことを特徴とする生物体の培養法。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は、培養容器及びそれ
を用いた培養方法に関する。
【0002】
【従来の技術】植物細胞、動物細胞、微生物等の生物体
の培養は、医療現場、食品衛生検査、環境衛生検査、さ
らには医薬品・食品・酵素等の製造現場で広く行なわれ
ている。従来、生物体を培養する場合には、藁床、木
箱、木桶、試験官、フラスコ、中小ジャー、大型タンク
等の培養容器に、液体培地或いは寒天培地等の固体培地
を入れて培養を行なっていた。また、培養終了後に、培
養容器から培養物を取り出して他の容器等に分注する場
合には、杓子、スパーテル、スポイト、ピペット、各種
ポンプ等の器具を使用していた。
【0003】しかしながら、これらの器具を用いて分注
を行う場合には、培養容器から取り出した培養物を、誤
って周囲にこぼしてしまい、いわゆる二次汚染が起きる
恐れがあった。また、培養物を取り出す際には、他の微
生物等が培養容器に混入(コンタミネーション)する恐
れがあった。特に、食品衛生検査においては、検体の培
養物を、検査用のプレートや検出用容器等に分注すると
いう操作が不可欠である。この場合、病原性微生物を検
体として扱うことが必然的に生じるので、二次汚染及び
コンタミネーションを防止して、作業者及び作業環境の
安全を確保する方法の確立が急務であった。
【0004】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、作業
上、安全性の高い培養容器及び該培養容器を用いる培養
方法を提供することにある。
【0005】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、上記課題
を解決すべく鋭意検討を行なった。その結果、強制排出
手段等により培地を一定量ずつ排出できる培養容器を用
いれば、該容器中の培養物を、直接他の容器等に分注す
ることが可能となることを見いだし、本発明を完成し
た。すなわち本発明は、 培地の供給口及び排出口とを備えた容器本体と、該排
出口に装着され、かつ強制排出手段を備えた分注装置か
らなり、強制排出手段により培地を一定量ずつ排出する
ことを特徴とする培養容器(以下「強制排出手段を備え
た培養容器」という)。 培地の供給口及びノズルを備えた可撓性の容器本体を
有し、該容器本体を押圧することにより、ノズルから培
地を一定量ずつ排出することを特徴とする培養容器(以
下「ノズルを備えた培養容器」という)。 上記の培養容器を用いることを特徴とする生物体の培
養法。である。以下、本発明について詳細に説明する。
【0006】
【発明の実施の形態】
1.強制排出手段を備えた培養容器について (1)容器本体 容器本体は、培地を入れて生物体を培養するための部分
であり、培地の供給口及び排出口とを備えている。培地
の供給口及び排出口とは、別々であってもよいが、培養
容器の構造及び培養操作を簡便化するために、一方が他
方を兼ねていることが好ましい。容器本体の形状、素
材、容量、色、透明度等は特に限定されず、培養する生
物体、培養の目的及び規模等に従って適宜選択すれば良
い。容器本体の形状としては、例えば、試験管状、各種
フラスコ状、試薬瓶状、袋状等を広く採用することがで
きる。容器本体の素材としては、例えば、ポリプロピレ
ン、高密度ポリエチレン、PFAフッ素樹脂等のプラス
チック、ガラス、金属等を使用することができ、容量と
しては、例えば、1mlから3000mlのものが好適
に使用できる。培地の供給口及び排出口とが別々である
場合、該供給口は、着脱自在な蓋体により密閉可能であ
ることが好ましい。蓋体を使用することにより、二次汚
染及びコンタミネーションを防止することができる。蓋
体の装着方法、素材、形状等は特に限定されず、容器本
体或いは供給口の形状等に応じて適宜選択すればよい。
蓋体の装着方法としては、例えば、スクリュー式、摩擦
差込式等が挙げられる。素材としては、例えば、ポリプ
ロピレン、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル等のプラスチ
ック、ガラス、金属等を使用することができる。
【0007】(3)分注装置 分注装置は、培養後の培養物を他の容器等に分注するた
めの部分であり、容器本体の排出口に装着され、かつ強
制排出手段を備えている。分注装置が強制排出手段を備
えていることにより、培養容器中の培養物を、ピペッ
ト、スポイト等の器具を用いることなく、直接他の容器
等に分注することができる。強制排出手段は、培養物を
一定量ずつ排出できる手段であればいかなるものでもよ
く、例えば、手押しポンプ、電動ポンプ等が挙げられ
る。分注装置を容器本体の排出口に装着する方式として
は、例えば、スクリュー式、摩擦差込式等が挙げられ
る。また、分注装置は、キャップによって密閉可能であ
ることが好ましい。キャップを装着することにより、二
次汚染及びコンタミネーションを防止することができ
る。用いるキャップとしては、例えば、容器本体に着脱
自在であり、かつ分注装置を収納可能なキャップを使用
することができる。また、分注装置に着脱自在であり、
かつ分注装置の培地排出口を収納可能なキャップも使用
することができる。
【0008】キャップの容器本体或いは分注装置への装
着方法、素材、形状、色、透明度等は特に限定されず、
用いる容器本体或いは分注装置に応じて適宜選択すれば
よい。キャップの装着方法としては、例えば、スクリュ
ー式、摩擦差込式等が挙げられる。素材としては、例え
ば、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル等
のプラスチック、シリコーン樹脂、ガラス、金属等を使
用することができる。キャップの形状としては、円柱
状、円錐状、角柱状、角錐状のものを使用することがで
きる。 (4)強制排出手段を備えた培養容器の例 強制排出手段を備えた培養容器の例としては、市販の容
器、例えば手押しポンプ式液体用容器、具体的には手押
しポンプ式シャンプー用容器を利用することができる。
【0009】強制排出手段を備えた培養容器の一例を図
1に示した。図1の培養容器においては、培地の供給口
(7)が排出口を兼ねており、分注装置(1)の強制排
出手段は手押しポンプである。また、分注装置は、スク
リュー式により容器本体(2)に装着されている。ま
た、図2に、培地の供給口及び排出口とが別々である手
押しポンプ式培養容器の一例を示した。図2の培養容器
において、培地の供給口(7)は、スクリュー式の蓋体
(6)により密閉可能である。
【0010】2.ノズルを備えた培養容器について (1)容器本体 容器本体は、培地を入れて生物体を培養するための部分
であり、培地の供給口及びノズルを備え、かつ可撓性を
有している。容器本体が可撓性を有するので、容器本体
を押圧することにより、ノズルから培地を一定量ずつ排
出することができる。可撓性を有する限り、容器本体の
形状、素材、容量、色、透明度等は特に限定されず、培
養する生物体、培養の目的及び規模に従って適宜選択す
れば良い。容器本体の形状としては、例えば、試験管
状、各種フラスコ状、試薬瓶状、袋状のもの等を広く使
用することができる。容器本体の素材としては、例え
ば、ポリプロピレン、高密度ポリエチレン、PFAフッ
素樹脂等を使用することができ、容量としては、例え
ば、1mlから1000mlのものが好適に使用でき
る。
【0011】(2)ノズル ノズルは、押圧された培地を排出するための部分であ
る。ノズルの素材、形状、色、透明度等は特に限定され
ず、培養物を一定量ずつ分注することができ、かつ押圧
された培地の圧力に耐え得るものであればいかなるもの
でもよい。ノズルの素材としては、例えば、ポリプロピ
レン、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル等のプラスチッ
ク、シリコーン樹脂、金属等を使用することができる。
ノズルは、容器本体と一体になっていてもよいが、容器
本体に対して着脱自在であってもよい。着脱自在なノズ
ルを用いる場合は、該ノズルを、容器本体の培地の供給
口に対して装着することが好ましい。該ノズルを、培地
の供給口に装着することにより、培養容器の構造及び培
養操作を簡便化することができる。ノズルを培地の供給
口に装着する方法としては、例えば、スクリュー式が挙
げられる。ノズルと容器本体が一体となっている場合、
ノズルと培地の供給口とは、別々であることが好まし
く、該供給口は、該供給口は、着脱自在な蓋体により密
閉可能であることが好ましい。蓋体を使用することによ
り、二次汚染及びコンタミネーションを防止することが
できる。蓋体の装着方法、素材、形状等は特に限定され
ず、容器本体或いは供給口の形状等に応じて適宜選択す
ればよい。蓋体の装着方法としては、例えば、スクリュ
ー式、摩擦差込式等が挙げられる。蓋体の素材として
は、例えば、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリ塩化
ビニル等のプラスチック、ガラス、シリコーン樹脂、金
属等を使用することができる。
【0012】また、ノズルは、キャップによって密閉可
能であることが好ましい。キャップを装着することによ
り、二次汚染及びコンタミネーションを防止することが
できる。用いるキャップとしては、例えば、容器本体に
着脱自在であり、かつノズルを収納可能なキャップを使
用することができる。ノズルが容器本体に対して着脱自
在である場合、用いるキャップは、該ノズルに対して着
脱自在であることが好ましい。キャップの素材、形状、
色、透明度、容器本体或いはノズルに対する装着方法等
は特に限定されず、用いる容器本体或いはノズルに応じ
て適宜選択すればよい。キャップの装着方法としては、
例えば、スクリュー式、摩擦差込式等が挙げられる。キ
ャップの素材としては、例えば、ポリプロピレン、ポリ
エチレン、ポリ塩化ビニル等のプラスチック、ガラス、
金属等を使用することができる。キャップの形状として
は、円柱状、円錐状、角柱状、角錐状のものを使用する
ことができる。
【0013】(4)ノズルを備えた培養容器の例 ノズルを備えた培養容器としては、市販の容器、例えば
点眼用容器を利用することができる。点眼用容器は、培
養物を一滴ずつ分注することができるので、本発明の培
養容器として好適である。ノズルを備えた培養容器の一
例を図3に示した。図3の培養容器においては、ノズル
(5)は脱着可能であって、スクリュー式により容器本
体(2)の培地の供給口(7)に装着されている。ま
た、ノズルは、キャップ(4)により密閉可能であっ
て、キャップの装着方法はスクリュー式である。さら
に、ノズルと容器本体が一体となっている培養容器の断
面図を図4に示した。図4の培養容器においては、ノズ
ル(5)と培地の供給口(7)とは、別々であって、培
地の供給口は、スクリュー式の蓋体(6)により密閉可
能である。
【0014】(4)培養可能な生物体 本発明で培養できる生物体は、植物細胞、動物細胞、微
生物であって、通常の培養法の条件下で培養可能なもの
である。植物細胞としては、単子葉植物及び双子葉植物
由来のものが、また、動物細胞としては、公知の正常細
胞、ガン細胞、ハイブリドーマ細胞等が挙げられる。微
生物としては、細菌類、糸状菌類、、放線菌類、酵母
類、変形菌類、単細胞の藻類、原生動物、ウイルス等が
挙げられる。
【0015】(5)生物体の培養 容器本体に入れる培地は、培養終了後に培養物を分注で
きるものであれば、とくに限定されず、例えば、液体培
地、固体培地等を使用することができる。固体培地を用
いた場合には、培養終了後、容器本体に各種溶媒、液体
培地、水等を添加して培養物の流動性を高め、次いで分
注を行なえばよい。容器本体に培地を入れる場合は、滅
菌済みの培地を無菌的に分注してもよく、また開放系で
培地を分注した後に培養容器ごと滅菌処理してもよい。
温度、時間等の培養条件は、培養する生物体に応じて適
宜設定すればよい。例えば、好気性菌を培養するときに
は、容器本体に装着した分注装置或いはキャップ等を緩
めて空気の流通をはかり、また、嫌気性菌を培養すると
きには、上記のキャップ等を締めて空気の流通を遮断す
ればよい。具体的な方法を実施例に示した。
【0016】(6)培養物の分注 培養終了後は、培養容器中の培養物を、ピペット等の器
具を用いることなく、直接他の容器等に分注する。市販
の手押しポンプ式容器を用いた場合には、ホンプを押し
て、培養物を他の容器等に分注する。また、市販のキャ
ップ付き点眼ビンを用いた場合には、キャップをはずし
た後、容器本体を押圧して培養物を他の容器等に滴下す
ればよい。使用後の培養容器は、そのままで、または加
熱殺菌を行なった後に廃棄することができるので、作業
者及び作業環境の安全が確保される。
【0017】
【発明の効果】本発明の培養容器を用いることにより、
培養容器中の培養物を、ピペット等の器具を用いること
なく、直接他の容器等に分注することができる。本発明
により、二次汚染及びコンタミネーションを防止して、
作業者及び作業環境の安全を確保することができる。
【0018】
〔実施例〕
・培養容器 :点眼用容器(ニッコー社製、品番501
6−03) ・検 体A:黄色ブドウ球菌の一晩培養液(100μ
l)を添加した米飯(10g)を、室内で48時間放置し、
次いで10mlの生理食塩水に懸濁したもの。 ・検 体B:室内で48時間放置した米飯10gを、10m
lの生理食塩水に懸濁したもの。 ・陽性対照液:黄色ブドウ球菌の培養液を煮沸処理(1
00℃、15分)した後、該培養液より集めた菌体を生
理食塩水に再懸濁して調製した(培養容器と同型の点眼
用容器に保管)。 ・陰性対照液:生理食塩水(培養容器と同型の点眼用容
器に保管) ・抗黄色ブドウ球菌抗体:黄色ブドウ球菌を用いて免疫
したウサギより得たポリクローナル抗体 ・二次抗体溶液:黄色ブドウ球菌の産生するプロテイン
Aを用いて免疫した鶏より得た鶏卵抗体 ・基質溶液A:ABTS(KPA社製) ・基質溶液B:過酸化水素水(KPA社製) ・停止液:アジ化ナトリウム液(KPA社製)
【0019】1.培養容器のノズル及びキャップを一体
として外し、容器本体に、ブラインハートインフュージ
ョン培地(10ml)を無菌的に分注した。次いで、容器
本体にノズル及びキャップを装着し、培養容器を密閉し
た。 2.培養容器のノズル及びキャップを一体として外し、
容器本体中のブラインハートインフュージョン培地に、
検体(200μl)を添加した。検体の添加には滅菌済み
ピペット を用いた。 3.空気の流通をはかるためにキャップを若干緩め、3
7℃で18時間の静置培養を行なった。培養終了後、培
養容器を100℃、15分の湯煎に供し、培養容器中の
生菌を死滅させた。 4.抗黄色ブドウ球菌抗体を固定したマイクロプレート
の穴に、上記の検体培養液、陽性対照液、陰性対照液
を、直接培養容器から滴下(4滴:約 200μl)し、3
7℃で 30分 間放置した。次いで、マイクロプレート
の各穴中の溶液を捨てた後、各穴を水道水に て3回洗
浄した。 5.二次抗体溶液(100μl)を加え、37℃で30分
間放置した。次いで、マイクロ プレートの各穴中の溶
液を捨てた後、各穴を水道水にて3回洗浄した。 6.マイクロプレートの各穴に、基質溶液A及びBを50
μlずつ滴下した。室温で10分間放置した。次いで、マ
イクロプレートの各穴に、停止液を 100 μlずつ滴下
し、撹拌した。 7.マイクロプレートの各穴を目視にて観察した。マイ
クロプレートの穴中に黄色ブドウ球菌が固定されている
場合には、緑色の発色が観察される。観察結果を表1に
示した。
【0020】 表1の結果より本発明の培養容器は、黄色ブドウ球菌の
検出法に好適であることがわかる。また、培養作業中に
培養物を誤って周囲にこぼすことはなかった。
【0021】実施例の結果から、本発明の培養容器を用
いれば、培養容器中の培養物を、他の器具を用いること
なく、直接他の容器等に分注することができることがわ
かる。また、培養作業中に二次汚染を起こす恐れもない
ことがわかる。
【図面の簡単な説明】
【図1】強制排出手段を備えた培養容器の一例を示す説
明図
【図2】強制排出手段を備えた培養容器の一例を示す説
明図
【図3】ノズルを備えた培養容器の一例を示す説明図
【図4】ノズルを備えた培養容器の一例を示す説明図
【符号の説明】
1 分注装置 2 容器本体 3 蓋体 4 キャップ 5 ノズル 6 蓋体 7 培地の供給口

Claims (5)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】培地の供給口及び排出口を備えた容器本体
    と、該排出口に装着され、かつ強制排出手段を備えた分
    注装置からなり、強制排出手段により培地を一定量ずつ
    排出することを特徴とする培養容器。
  2. 【請求項2】培地の供給口及びノズルを備えた可撓性の
    容器本体を有し、該容器本体を押圧することにより、ノ
    ズルから培地を一定量ずつ排出することを特徴とする培
    養容器。
  3. 【請求項3】ノズルが容器本体に着脱自在であることを
    特徴とする請求項2記載の培養容器。
  4. 【請求項4】請求項1、2または3記載の培養容器を用
    いることを特徴とする生物体の培養法。
  5. 【請求項5】生物体が植物細胞、動物細胞、又は微生物
    である請求項4記載の培養方法。
JP35256696A 1996-12-16 1996-12-16 培養容器 Pending JPH10174581A (ja)

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JP35256696A JPH10174581A (ja) 1996-12-16 1996-12-16 培養容器

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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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