JPH10175980A - セファロスポリンの合成に有用な新規中間体の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 塩素化溶剤を使用せずに、重要なセファロス
ポリンを製造するのに有用な新規な中間体を得る方法を
提供する。 【解決手段】 式Ｉ： 【化１】 ［式中、Ｒは硫黄もしくは酸素原子を含むまたは含まな
い少なくとも窒素原子を有する複素環式基であり、Ｒ¹
およびＲ²は両者とも水素原子であるか、またはその一
方が水素原子であると共に他方がアシル基である］の化
合物を製造するための新規な方法につき開示し、この方
法はグルタリル ７−ＡＣＡを式Ｒ−ＳＨ［式中、Ｒは
上記の意味を有する］の化合物と縮合させることを特徴
とする。得られる化合物は、重要なセファロスポリンを
製造するのに有用な新規な中間体である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、セファロスポリン
類の合成に有用である新規中間体の製造方法に関するも
のである。

【０００２】特に本発明は、たとえばセファゾリン、セ
ファゼドン、セフォペラゾン、セファマンドール、セフ
ァトリジン、セフトリアキソンのような公知の抗菌剤で
ある重要なセファロスポリンの製造において有用なセフ
ァロスポリン中間体の合成方法に関するものである。

【０００３】

【従来の技術】セファロスポリンの最も普及した合成法
は、セファロスポリンＣのナトリウム塩を単離し、その
７−アミノセファロスポラン酸（以下７−ＡＣＡとして
示す）へ化学的に変換し、７−ＡＣＡを精製し単離し、
次いで好適には３−置換誘導体まで変換させる（たとえ
ばセファゾリンの場合は３−チアジアゾリル誘導体（以
下３ＴＤとして示す）が得られる）。３−置換誘導体
は、７−ＡＣＡを対応のチオールもしくはその誘導体と
水性もしくは無水媒体中で反応させることにより得られ
る。

【０００４】水性媒体における反応は、たとえ廃棄物還
流（waste refluent）が容易であるという利点を有する
にせよ、より低品質（８０〜８５％のタイターおよび褐
色）を有する３−置換中間体がより低い収率（約６５
％）でしか得られない。他の欠点は中間生成物の単離に
ある。

【０００５】ＵＳ ４３１７９０７号およびＷＯ ９３
／０２０８５号に開示されたセファゾリンを製造するた
めの無水環境における反応はＢＦ₃またはその誘導体を
有機溶剤中で使用し、より高品質（約９０％に等しいタ
イターおよび白色）を有する３ＴＤを約８５％に等しい
収率で得ることができる。しかしながら、この方法はた
とえばＢＦ₃のような毒性ガスを使用し、フルオロボレ
ートを含有する廃棄物を排出する問題を示す。

【０００６】したがって最も有利な方法は、硼化物およ
び弗素硼化物を含有する還流物の処理と共に毒性ガスの
取扱いの問題を考慮して選択される。

【０００７】次いで、３ＴＤを有機溶剤中でテトラゾリ
ル酢酸によりアシル化すると酸セファゾリンが得られ
る。好適と認められる溶剤は一般にたとえば塩化メチレ
ンのような塩素化溶剤であるが、その使用は環境上望ま
しくない。

【０００８】代案合成法（ＵＳ ３５１６９９７号）
は、セファロスポリンＣの溶液を使用し、そのナトリウ
ム塩を得てこれを単離し、次いでその３−チアジアゾリ
ル誘導体を得、単離後該誘導体を使用して３ＴＤを得、
次いで単離すると共に、そこから酸セファゾリンを得る
ことからなる。この種の方法では、全サイクル収率が低
く、中間体を単離するのが困難である。

【０００９】セファゾリンを得る他の方法は、酵素的に
得られる７−ＡＣＡを使用することである（ＷＯ ９３
／０２０８５号）。この種の方法によれば、セファロス
ポリンＣの単離を回避して製造サイクルを単純化すると
共に、ＵＳ ３５１６９９７号に開示された方法を行っ
て得られるよりも高い全サイクル収率をもたらす。

【００１０】上記セファゾリンの製造方法に共通する工
程は、乾燥された３ＴＤのアシル化を塩素化溶剤（一般
に塩化メチレン）の存在下に行う点である。微量であっ
ても、この種の溶剤は最終生成物に望ましくない結果を
もたらす。

【００１１】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、重要なセフ
ァロスポリンを製造するのに有用な新規中間体を得るこ
とを目的とする。

【００１２】

【課題を解決するための手段】今回、式Ｉ：

【００１３】

【化５】

【００１４】［式中、Ｒは硫黄もしくは酸素原子を含む
かまたは含まない、少なくとも窒素原子を有する複素環
式基であり、Ｒ¹およびＲ²は両者とも水素原子であるか
またはその一方が水素原子であると共に他方がアシル基
である］の化合物を製造方法が見出された。この方法
は、水溶液中のグルタリル ７−ＡＣＡ

【００１５】

【化６】

【００１６】をグルタリル ７−ＡＣＡ１モル当たり３
〜５モル量の式ＩＩ： Ｒ−ＳＨ ＩＩ ［式中、Ｒは上記の意味を有する］の化合物と反応さ
せ；必要に応じ過剰の式ＩＩの化合物を回収して、水溶
液として次式ＩＩＩ：

【００１７】

【化７】

【００１８】［式中、Ｒは上記の意味を有する］の化合
物を得；式ＩＩＩの得られた化合物を脱アシル化するこ
とからなる。

【００１９】

【発明の実施の形態】特に、式ＩＩＩの化合物の脱アシ
ル化は有利には酵素的に行うことができ、グルタリル
７−ＡＣＡアシラーゼ酵素を分離して必要に応じ再使用
することができる。

【００２０】次いで得られた式Ｉの化合物を公知方法に
より回収する。

【００２１】特に、Ｒは置換もしくは未置換の、チアジ
アゾリル、トリアゾリル、テトラゾリルおよびテトラヒ
ドロトリアジニルであり、好ましくはＲは５−メチル−
１，３，４−チアジアゾール−２−イル、１Ｈ−１，
２，３−トリアゾール−４−イル、１−メチル−テトラ
ゾール−５−イル、１，２，５，６−テトラヒドロ−２
−メチル−５，６−ジオキソ−１，２，４−トリアジン
−３−イルである。

【００２２】さらに本発明は、新規な化合物、すなわち
７−アミノグルタリル−３−［（２，５−ジヒドロ−６
−ヒドロキシ−２−メチル−５−オキソ−１，２，４−
トリアジン−３−イル）−チオメチル］−セファロスポ
ラン酸：

【００２３】

【化８】

【００２４】をも開示する。

【００２５】本発明の方法は、水溶液中で約２０〜約９
０℃、好ましくは約４０〜約７０℃の温度にて約２〜約
１０時間にわたり行われる。

【００２６】有利には、本発明の方法はさらに或る種の
重要なセファロスポリン、たとえばセファゾリン、セフ
ァゼドン、セフォペラゾン、セファマンドール、セファ
トリジンおよびセフトリアキソンの製造についても使用
することができ、これらは式Ｉの化合物を公知技術によ
り上記したように変換させて得ることができる。

【００２７】さらに本発明は、上記方法により前記セフ
ァロスポリンを製造し、これを医薬上許容しうるベヒク
ルと処方することからなる医薬組成物の製造方法をも包
含する。

【００２８】本発明の方法によれば、セファゾリンの場
合、可溶化したセファロスポリンＣを生物変換させる第
１工程から生じたグルタリル ７−ＡＣＡの水溶液を加
熱（７０℃）下でメチルメルカプトチアジアゾール（以
下ＭＭＴＤと称する）と反応させて、依然として溶解し
ているグルタリル ３ＴＤ中間体を得る。

【００２９】公知技術により行われる水性媒体における
３位の求核置換反応は、温度と比較的長い反応時間（１
〜２時間）との作用に基づきβ−ラクタム環の顕著な分
解を伴う。

【００３０】驚くことに、本発明の実施によりβ−ラク
タム環の分解は極めて低くなることが見出された。

【００３１】脱アシル化はグルタリル ３ＴＤの側鎖を
水溶液中で酵素的に切断して行われ、これには７−ＡＣ
Ａにおけるグルタリル ７−ＡＣＡの変換の第２工程に
関するＷＯ ９５／３５０２０号に記載されたと同じ技
術を用いる。

【００３２】上記セファゾリンを得る方法は次の反応
式：

【００３３】

【化９】

【００３４】［式中、Ｒは上記の意味を有し、Ｒ¹＝Ｒ²
＝Ｈである］によって示すことができる。

【００３５】本発明の方法は新規であって、上記方法と
比較し３ＴＤのモル収率を約１０％増大させることがで
きる。

【００３６】公知方法と比較した他の利点は、７−ＡＣ
Ａ単離が回避され、より良好な品質（タイターおよび
色；この色は２％ＮａＨＣＯ₃における１％溶液にて４
２０ｎｍでの吸収；１ｃｍセルで測定される）を有する
３ＴＤが得られ、水溶液で操作して３ＴＤを得られるこ
とにある。

【００３７】溶剤使用の排除は、経済的に節約される他
にエコロジー的および環境上の利点をも示す。

【００３８】式Ｉの化合物を水相で製造する新規かつ有
利な合成法を示す他、本発明の方法は式Ｉの化合物のア
シル化工程においても塩素化溶剤を排除して最終セファ
ロスポリンを得ることもできる（たとえば本発明の方法
により得られる湿った３ＴＤはたとえばアセトン、ジメ
チルカーボネートなどの非塩素化溶剤の存在下にアシル
化される）。

【００３９】

【実施例】以下、限定はしないが実施例により本発明を
さらに説明する。

【００４０】実施例１ グルタリル ３ＴＤの合成 ２５００ｍＬのグルタリル ７−ＡＣＡの溶液を３Ｌフ
ラスコに充填した（濃度２５．４ｍｇ／ｍＬ、６３．５
活性ｇに等しい）。同時に７３．２ｇのＭＭＴＤを添加
し、熱を７０℃まで１０分間加えた。加熱の間、１５ｇ
の炭酸ナトリウムを５．６のｐＨに達するまで少しづつ
添加した。

【００４１】温度を７０℃に１２０分間維持して反応速
度を制御した。次のデータが得られた。

【００４２】

【表１】

【００４３】１２０分後、グルタリル ７−ＡＣＡの残
留濃度が２ｍｇ／ｍＬよりも低くなり反応は完結したと
見なした。

【００４４】過剰のＭＭＴＤの結晶化が始まる２０〜２
５℃への冷却を行った。ｐＨを濃硫酸により５．２に調
整し、６０分間にわたりゆっくり撹拌しながら結晶化を
完結させた。未反応のＭＭＴＤを濾過し、３５℃にて減
圧下に乾燥させた。９９％のタイターを有する回収ＭＭ
ＴＤ４５．８ｇが得られた。

【００４５】１．６ｍｇ／ｍＬのグルタリル ７−ＡＣ
Ａと２．８ｍｇ／ｍＬのＭＭＴＤと２１．０ｍｇ／ｍＬ
のグルタリル ３ＴＤとを含有する濾過された溶液を３
ＴＤへの生物変換の下記する工程に移した。

【００４６】実施例２ ３ＴＤの合成 グルタリル ３ＴＤの溶液（５４．６活性ｇに等しい２
１．０ｍｇ／ｍＬのタイターを有する２６００ｍＬ）
を、それぞれ８６６ｍＬづつに３等分した。

【００４７】酵素的脱アシル化を３サイクルで行い、そ
の際セファロスポリンＣから７−ＡＣＡへの生物変換サ
イクルの第２工程から生じたグルタリル ７−ＡＣＡア
シラーゼ酵素をジアイオンＨＰＡ ２５樹脂（三菱化成
工業（株）により製造）に担持して用いた。

【００４８】第１サイクル：この第１サイクルは酵素の
状態調節に役立つ。

【００４９】８６６ｍＬのグルタリル ３ＴＤの溶液と
８６．５ｇの担持酵素（約２００Ｕ／ｇのグルタリル
３ＴＤに等しい湿潤マトリックスのタイター４３ Ｕ／
ｇ）を充填した。温度を２０℃に維持し、ｐＨを４％ア
ンモニアにより最初の３０分間８．０まで調整し、次の
３０分間８．３に調整して反応速度を制御した。

【００５０】

【表２】

【００５１】この混合物を分離させると共に、溶液をサ
イホン処理して湿潤酵素から分離した。

【００５２】第２サイクル：グルタリル ３ＴＤ溶液の
第２フラクション８６６ｍＬを湿潤酵素に添加した。２
０℃の温度を維持すると共に、ｐＨを４％アンモニア溶
液で調整して最初の３０分間８．０に維持し、次の３０
分間８．３に維持して反応速度を制御した。

【００５３】

【表３】

【００５４】この溶液を湿潤酵素から分離した。溶液を
１０℃の温度で濃硫酸により５．２のｐＨとなし、ゆっ
くり撹拌しながら結晶化させた。湿潤酵素を次のサイク
ルに移した。

【００５５】第３サイクル：グルタリル ３ＴＤ溶液の
第３フラクション８６６ｍＬを、第１および第２サイク
ルにつき上記したと同じ手順にしたがい湿潤酵素に添加
した。速度制御は次の結果を示した：

【００５６】

【表４】

【００５７】再使用しうる湿潤酵素の溶液を分離した。
３ＴＤ溶液を第２サイクルの反応生成物の処理から生じ
た３ＴＤの水性懸濁物に添加し、１０℃に温度を維持し
ながらｐＨを濃硫酸により５．２に調整した。ゆっくり
撹拌しながら、これを６０分間にわたり結晶化させた。
濾過および４００ｍＬの水と２５０ｍＬのアセトンとに
よる洗浄を行った。次いで３５℃での減圧乾燥を行っ
た。

【００５８】９３．０％のタイター（ＨＰＬＣ純度９６
％、色９５）を有する２７．２ｇの３ＴＤが得られた。
母液中の３ＴＤの量は０．６ｇに等しかった（０．２５
ｍｇ／ｍＬの濃度を有する２３７０ｍＬ）。

【００５９】出発グルタリル ７−ＡＣＡ（０．１６４
３４モルに等しい６３．５活性ｇ）から９３％のタイタ
ー（活性ｇは３７．９４４であって０．１１０１４モル
に対応する）を有する３ＴＤまでの収率（２サイクルに
関する２７．２ｇは全部で４０．８に相当する）は６７
％に等しかった。

【００６０】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ／ＤＣｌ）（δ
ｐｐｍ）：２．７１（ｓ、３Ｈ、−ＣＨ₃）；３．７８
（ｂｒｏａｄ ｓ、２Ｈ、−ＣＨ₂−）；４．３１−
４．６０（Ａｂｑ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ、２Ｈ、−ＣＨ₂
−）；５．１４（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ−
６）；５．２４（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ−
７）。

【００６１】実施例３ グルタリル ３ＴＤの合成 ５６６ｋｇのグルタリル ７−ＡＣＡ溶液（密度＝１０
１９；濃度＝３２．１ｍｇ／ｍＬ、これは１７．８活性
ｋｇに等しい）を１５００Ｌ反応器に充填した。同時に
２１．０ｋｇのＭＭＴＤを添加すると共に、７０℃まで
７０分間にわたり加熱を行った。

【００６２】加熱の間３．１ｋｇのＮａ₂ＣＯ₃を添加し
て５．７のｐＨを維持した。

【００６３】この生成物を、９０分間の合成の後に２５
℃にて７５分間冷却した。

【００６４】反応速度をＨＰＬＣ分析により制御し、次
のデータが記録された：

【００６５】

【表５】

【００６６】ｐＨを４０％Ｈ₂ＳＯ₄により５．２に調整
して過剰のＭＭＴＤを結晶化させ、７５分後に濾過し、
パネルを７０Ｌの水で洗浄した。

【００６７】回収された１６．２ｋｇの湿潤ＭＭＴＤ
（１２．０ｋｇの乾燥生成物に等しい）および６４８ｋ
ｇのグルタリル ３ＴＤ溶液（密度＝１．０２８；濃度
＝２５．０ｍｇ／ｍＬ）が得られた。

【００６８】実施例４ ３ＴＤの合成 グルタリル ３ＴＤ溶液を、それぞれ２１６ｋｇづつに
３等分した。

【００６９】３ＴＤへの変換は酵素的脱アシル化によっ
て行い、これはジアイオン ＨＰＡ２５樹脂（三菱化成
工業（株）により製造）に担持されたグルタリル ７−
ＡＣＡアシラーゼ酵素を用いて３サイクルで行った。

【００７０】第１サイクル：この第１サイクルは酵素の
状態調節に役立つ。

【００７１】２１６ｋｇのグルタリル ３ＴＤの溶液と
２１ｋｇの酵素（約２００Ｕ／ｇのグルタリル ３ＴＤ
に等しいタイター５０Ｕ／ｇ−湿潤マトリックス）とを
３５０Ｌ反応器に充填した。

【００７２】２０℃の温度にて８．０のｐＨを１６Ｌの
４％アンモニアにより３０分間維持し、さらに３０分間
２Ｌの４％アンモニアにより８．３に維持した。

【００７３】反応速度は次の結果を示した：

【００７４】

【表６】

【００７５】２１６ｋｇのグルタリル ３ＴＤの溶液が
既に第２サイクルに移されている生物変換反応器に再充
填された酵素を、合成の終了後にブフナー漏斗で濾過し
た。

【００７６】３ＴＤ溶液を５００ Ｌ反応器に移し、
３．５Ｌの４０％Ｈ₂ＳＯ₄により２０℃でｐＨ＝５．２
に調整して生成物を結晶化させた。

【００７７】６０分後、３ＴＤを先ず最初に６０Ｌの
水、次いで３５Ｌのアセトンで洗浄して遠心分離した。

【００７８】３５℃での減圧乾燥により３．４２ｋｇの
３ＴＤ（タイター９４．５％、純度９５．２％、Ｋ．
Ｆ． ０．９％）が得られた。

【００７９】母液中の含有量は８３ｇであった（０．２
４ｍｇ／ｍＬの濃度を有する３４５Ｌ）。

【００８０】第２および第３サイクル：グルタリル ３
ＴＤ溶液の第２および第３アリコートを、第１サイクル
に示した作業手順にしたがい３ＴＤまで変換させた。

【００８１】第３サイクルの終了後、濾過された酵素を
他のサイクルに使用する一方、溶液を第２サイクルから
生じた３ＴＤ懸濁物に添加し、ｐＨを４０％硫酸により
５．２に調整し、ゆっくり撹拌しながら結晶化させた。

【００８２】６０分後、遠心分離すると共に１２０Ｌの
水および７０Ｌのアセトンによる洗浄を行った。

【００８３】３５℃での減圧乾燥により７．８６ｋｇの
３ＴＤ（タイター９０．４％、純度９４．２％、Ｋ．
Ｆ． １．０％）が得られた。母液中の含有量は２４７
ｇであった（０．３８ｍｇ／ｍＬの濃度を有する６５０
Ｌ）。

【００８４】出発グルタリル ７−ＡＣＡ（４６．０６
モルに等しい１７．８ＫＡ）から３ＴＤ（３０．９５モ
ルに等しい１０．０６ＫＡ）へのモル収率は６７．２％
に等しかった。

【００８５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ／ＤＣｌ）（δ
ｐｐｍ）：２．７１（ｓ、３Ｈ、−ＣＨ₃）；３．７８
（ｂｒｏａｄ ｓ、２Ｈ、−ＣＨ₂−）；４．３１−
４．６０（Ａｂｑ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ、２Ｈ、−ＣＨ₂
−）；５．１４（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ−
６）；５．２４（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ−
７）。

【００８６】実施例５ セファゾリンの合成（塩素化溶剤の不存在下における湿
潤３ＴＤのアシル化） １００ｍＬのアセトンと２１．６ｇのテトラゾリル酢酸
とを２５０ｍＬフラスコに充填した。ｐＨを０℃の温度
にて２３．８ｍＬのトリエチルアミンにより７．９に調
整し、次いで温度を１８〜２０℃まで上昇させ、さらに
２０．２ｍＬの塩化ピバロイルを添加した。

【００８７】混合無水物の合成を完了させるため、混合
物を同じ温度にて１時間撹拌した。

【００８８】２４ｍＬのアセトンと８８．６ｇの湿潤３
ＴＤ（３３．９活性ｇに等しいタイター３８．３、Ｈ₂
Ｏ含有量＝５４．２％）とを１０００ｍＬフラスコに充
填した。

【００８９】温度を−１２℃とし、２６．４ｍＬのトリ
エチルアミンを充填した。

【００９０】３ＴＤの溶解を完了させるため、混合物を
同じ温度にて撹拌下に１時間保ち、予め２５０ｍＬフラ
スコで調製された混合無水物をまだ−１２℃であるうち
に３０分間かけて充填した。

【００９１】反応は−１２℃にて４５分間で完結した。

【００９２】速度制御から次のデータを読取りうる：

【００９３】

【表７】

【００９４】アシル化工程が完了した後、２００ｍＬの
水による加水分解を行った。ｐＨを５℃にて３０分後に
氷酢酸により５に調整し、ジカライトパネルでの濾過を
行った。

【００９５】得られた溶液をアルミナで脱色すると共
に、１５℃にて１８％ＨＣｌによりｐＨ＝１．５とし、
粗製酸セファゾリンを結晶化させた。

【００９６】次いで濾過された生成物を、先ず最初にナ
トリウム塩としての沈澱、次いで最終酸型への変換を伴
う方法により精製した。

【００９７】３５．０ｇの酸セファゾリン［乾燥基準で
タイター９９．８％、純度＝９９．７％、Ｋ．Ｆ．
０．５％；色＝８０（８ｍＬの４．６％ＮａＨＣＯ₃溶
液中の２ｇの溶液、４２０ｎｍでの吸収；１ｃｍセ
ル）］が得られた。

【００９８】実施例６ 湿潤３ＴＤからのセファゾリンの合成 １４４ｍＬのジメチルカーボネートと２１．６ｇのテト
ラゾリル酢酸とを５００ｍＬフラスコに充填した。５℃
にて冷却し、２３．８ｍＬのトリエチルアミンによりｐ
Ｈ＝７．９とし、次いで同じ温度を保ちながら２０．２
ｇの塩化ピバロイルを添加した。

【００９９】混合無水物の合成を５℃にて１時間で完結
させた。

【０１００】５８ｍＬのジメチルカーボネートと２４ｍ
Ｌのイソプロピルアルコールと８８．６ｇの湿潤３ＴＤ
（３３．９活性ｇに等しいタイター＝３８．３％、Ｈ₂
Ｏ含有量＝５４．２％）とを、前の反応物を含む１００
０ｍＬフラスコに充填した。５℃まで冷却すると共に２
６．４ｍＬのトリエチルアミンの添加を行った。

【０１０１】この混合物を同じ温度にて撹拌下に１時間
保ち、次いでまだ５℃のうちに前もって製造された混合
無水物を３０分で充填した。

【０１０２】５℃にて４５分後、３５０ｍＬの水による
加水分解、３０分後に相の分離、さらに５０ｍＬの水に
よる有機相の再抽出を行った。

【０１０３】次いで、集めた水性抽出物を、ｐＨを５に
調整するための酢酸の添加から出発して実施例５に示し
た手順に従い処理した。

【０１０４】３４．５ｇの酸セファゾリン［タイター９
９．５％、純度９９．５％、Ｋ．Ｆ． ０．４％、色＝
１２０（８ｍＬの４．６％ＮａＨＣＯ₃溶液における溶
液２ｇ、４２０ｎｍにおける吸収；１ｃｍセル）］が得
られた。

【０１０５】実施例７ ７−アミノグルタリル−３−［（１Ｈ−１，２，３−ト
リアゾール−４−イル）−チオメチル］−セファロスポ
ラン酸（以下、グルタリル ３ＴＲとして示す）による
７−アミノ−３−［（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール
−４−イル）−チオメチル］−セファロスポラン酸（以
下、３ＴＲとして示す）の合成 ２７００ｍＬの水と７２．６ｇのナトリウム５−メルカ
プトトリアゾール（以下、５ＭＴＮａとして示す）とＮ
ａ₂ＣＯ₃（まだｐＨ＝５．５）とを３Ｌフラスコに充填
した。この溶液を７０℃まで加熱し、６６．６活性ｇに
等しい９５．５％のタイターを有するグルタリル ７−
ＡＣＡ６９．７ｇとｐＨを５．５まで戻すＮａ₂ＣＯ₃と
を前記温度で添加した。

【０１０６】７０℃の温度を１２０分間にわたり維持し
て反応速度を制御し、次の結果を得た。

【０１０７】

【表８】

【０１０８】反応が終了した後、２０℃まで冷却し、実
施例２に示した手順にしたがい次の生物変換工程を行っ
た。

【０１０９】３サイクルに関する速度データを下表に示
す。

【０１１０】

【表９】

【０１１１】９１．８％のタイターとＨＰＬＣ純度９
４．８％と色１８０（２％ＮａＨＣＯ₃の１％溶液；４
２０ｎｍにおける吸収；１ｃｍセル）とを有する３ＴＲ
２７．１ｇを、ｐＨ４．２での沈澱、濾過および乾燥の
後に第２および第３サイクルから得た。

【０１１２】母液（２２３０ｍＬ）における３ＴＲの損
失は０．７ｍｇ／ｍＬに等しかった。グルタリル ７−
ＡＣＡから３ＴＲへの化学論量収率は７０％であった。

【０１１３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ／ＤＣｌ）（δ
ｐｐｍ）：３．６７−３．７３（Ａｂｑ、Ｊ＝１８．１
Ｈｚ、２Ｈ、−ＣＨ₂−）；３．９１−４．０９（Ａｂ
ｑ、Ｊ＝１２．９Ｈｚ、２Ｈ、−ＣＨ₂）；５．００
（ｄ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ−６）；５．２０
（ｄ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ−７）；８．０４
（ｓ、１Ｈ、ビニルＨ）。

【０１１４】実施例８ ７−アミノ−グルタリル−３−［（１−メチル−テトラ
ゾール−５−イル）−チオメチル］−セファロスポラン
酸（以下、グルタリル ３ＴＺとして示す）による７−
アミノ−３−［（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５
−イル）−チオメチル］−セファロスポラン酸（以下、
３ＴＺとして示す）の合成 ５ＭＴＮａの代わりに６８．５ｇのメチルメルカプトテ
トラゾール（以下、ＭＭＴとして示す）と４８．０ｇの
Ｎａ₂ＣＯ₃とを用いて実施例７を反復した。

【０１１５】グルタリル ３ＴＺの合成の速度：

【０１１６】

【表１０】

【０１１７】９５．５％のタイターと９１．８％のＨＰ
ＬＣ純度と６０の色（２％ＮａＨＣＯ₃の１％溶液；４
２０ｎｍにおける吸収；１ｃｍセル）とを有する３ＴＺ
が、その後の生物変換、ｐＨ４．２における沈澱、濾過
および乾燥によって得られた。

【０１１８】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ／ＤＣｌ）（δ
ｐｐｍ）：３．８０−３．８６（Ａｂｑ、Ｊ＝１７．９
Ｈｚ、２Ｈ、−ＣＨ₂−）；３．９８（ｓ、３Ｈ、−Ｃ
Ｈ₃−）；４．３１−４．６６（Ａｂｑ、Ｊ＝１３．３
Ｈｚ、２Ｈ、−ＣＨ₂−）；５．１３（ｄ、Ｊ＝４．９
Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ−６）；５．２０（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈ
ｚ、１Ｈ、Ｃ−７）。

【０１１９】実施例９ ７−アミノグルタリル−３−［（１，２，５，６−テト
ラヒドロ−２−メチル−５，６−ジオキソ−１，２，４
−トリアジン−３−イル）−チオメチル］−セファロス
ポラン酸（以下、グルタリル ＡＣＴとして示す）によ
る７−アミノ−３−［（１，２，５，６−テトラヒドロ
−２−メチル−５，６−ジオキソ−１，２，４−トリア
ジン−３−イル）−トリメチル］−セファロスポラン酸
（以下、ＡＣＴとして示す）の合成 ５ＭＴＮａの代わりに１５ｇのチオトリアジノン（１，
４，５，６−テトラヒドロ−２−メチル−３−メルカプ
ト−５，６−ジオキソ−１，２，４−トリアジンと１３
ｇのＮａ₂ＣＯ₃とを用いて、実施例７と同じ手順にした
がった。

【０１２０】３位における求核置換反応をｐＨ６．６に
て行い、これは次の速度経過を特徴とした。

【０１２１】

【表１１】

【０１２２】９１．１％のタイターと９８．４％のＨＰ
ＬＣ純度とを有するＡＣＴが、溶液における生物変換工
程およびその後のｐＨ４．２における沈澱、濾過および
乾燥を行って得られた。

【０１２３】¹Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ／ＮａＨＣＯ₃）（δ
ｐｐｍ）：３．４５−３．７２（ＡＢｑ、Ｊ＝１７．
８Ｈｚ、２Ｈ、−ＣＨ₂−）；３．６４（ｓ、３Ｈ、−
ＣＨ₃）；４．０４−４．３５（ＡＢｑ、Ｊ＝１３．４
Ｈｚ、２Ｈ、−ＣＨ₂−）；４．７５（ｄ、Ｊ＝４．９
Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ−６）；５．０４ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝４．
９Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ−７）。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 エルマンノ・ベルナスコーニ イタリー国、バレーセ、イ−21040・カロ ンノ・バレシーノ、ビア・クアシモード、 ７ (72)発明者 フランシスコ・サルト スペイン国、エ−28223・マドリツド、ポ スエロ、カジエ・アブレーゴ・ヌメロ・33 −２・セ

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式： 【化１】 ［式中、Ｒは任意に硫黄もしくは酸素原子を含む、少な
   くとも窒素原子を有する複素環式基であり、Ｒ¹および
   Ｒ²は両者とも水素原子であるか、またはその一方が水
   素原子であり且つ他方がアシル基である］の化合物を製
   造する方法であって、水溶液中のグルタリル ７−ＡＣ
   Ａ 【化２】 をグルタリル ７−ＡＣＡ１モル当たり３〜５モルの式
   ＩＩ： Ｒ−ＳＨ ＩＩ ［式中、Ｒは上記の意味を有する］の化合物と反応さ
   せ；必要に応じ過剰の式ＩＩの化合物を回収して、次式
   ＩＩＩ： 【化３】 ［式中、Ｒは上記の意味を有する］の化合物を水溶液と
   して得；得られた式ＩＩＩの化合物を脱アシル化するこ
   とを特徴とする方法。
2. 【請求項２】 脱アシル化を酵素的に行い、得られた式
   Ｉの化合物を公知技術により回収する請求項１に記載の
   方法。
3. 【請求項３】 酵素的脱アシル化に使用した酵素を回収
   し、必要に応じ再使用する請求項１または２に記載の方
   法。
4. 【請求項４】 Ｒが置換もしくは未置換の、チアジアゾ
   リル、トリアゾリル、テトラゾリルもしくはテトラヒド
   ロトリアジニルである請求項１〜３のいずれか一項に記
   載の方法。
5. 【請求項５】 Ｒが５−メチル−１，３，４−チアジア
   ゾール−２−イル、１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−
   ４−イル、１−メチル−テトラゾール−５−イル、１，
   ２，５，６−テトラヒドロ−２−メチル−５，６−ジオ
   キソ−１，２，４−トリアジン−３−イルである請求項
   １〜４のいずれか一項に記載の方法。
6. 【請求項６】 Ｒが５−メチル−１，３，４−チアジア
   ゾール−２−イルである請求項１〜５のいずれか一項に
   記載の方法。
7. 【請求項７】 全反応工程を水相にて約２０〜約９０
   ℃、好ましくは約４０〜約７０℃の温度で約２〜約１０
   時間にわたり行う請求項１〜６のいずれか一項に記載の
   方法。
8. 【請求項８】 請求項１〜７のいずれか一項に記載の方
   法により製造された湿った請求項１に記載の式Ｉを有す
   る化合物を非塩素化溶剤の存在下にセファロスポリンま
   で変換させることを特徴とするセファゾリン、セファゼ
   ドン、セフォペラゾン、セファマンドール、セファトリ
   ジンもしくはセフトリアキソンの製造方法。
9. 【請求項９】 請求項１〜８のいずれか一項に記載の方
   法により製造したセファロスポリンを、医薬上許容しう
   るベヒクルもしくは希釈剤と処方することを特徴とする
   セファゾリン、セファゼドン、セフォペラゾン、セファ
   マンドール、セファトリジンもしくはセフトリアキソン
   を含む医薬組成物の製造方法。
10. 【請求項１０】 式： 【化４】 の化合物。