JPH10279501A

JPH10279501A - 育毛剤

Info

Publication number: JPH10279501A
Application number: JP10038066A
Authority: JP
Inventors: Kenji Hamada; 健司濱田; Yoko Makino; 洋子牧野
Original assignee: Rohto Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Rohto Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1997-02-10
Filing date: 1998-02-04
Publication date: 1998-10-20
Also published as: GB2321852A; DE19805298A1; GB2321852B; GB9802821D0

Abstract

(57)【要約】【課題】毛包組織間の相互作用に関与しうるパラクリ
ン因子、特に、毛の発育を司る鍵となっている毛乳頭細
胞に発現するパラクリン因子を提供することを課題とす
る。そして、これにより該因子を有効成分とする育毛剤
を提供することを課題とする。【解決手段】毛乳頭細胞、上皮系の表皮角化細胞およ
び外毛根鞘細胞を単離し、これら細胞内の全RNAに対しR
T-PCRを行った結果、FGF-10がこれら細胞の内、毛の生
育の中心的な役割を果たす毛乳頭細胞に発現しているこ
とを見出した。さらに、本発明者らは、単離した毛包よ
り調製した毛包組織にFGF-10を作用させて毛包の成長に
ついて評価を行い、FGF-10が実際に毛包の成長促進作用
を有することを見出した。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、繊維芽細胞成長因
子（FGF：fibroblast growth factor）ファミリーに属
するFGF-10を有効成分とする育毛剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】これまでの育毛剤は、「細胞賦活」ある
いは「活性化」作用をメルクマールとして、毛包周辺組
織の新陳代謝の促進、毛包周辺組織の毛細血管の血流の
増大など、毛包上皮細胞（毛母細胞など）の増殖を促進
することを中心に開発が行われてきた。この結果、プラ
センタエキス、ニンジンエキス、センブリエキス、パン
トテン酸およびその誘導体、ビタミンＥおよびその誘導
体、トウガラシチンキ、ニコチン酸誘導体などが細胞賦
活作用、血行促進作用を有する有効成分として育毛剤に
用いられてきた。

【０００３】しかし、毛の構成細胞となる毛包上皮細胞
の活性化だけを期待された汎用性の高い細胞賦活、活性
化剤などは、その配合量の制限から、大量頻回投与が行
われ、必然的に多くの欠点（刺激性など）を生み出す結
果となってしまっている。

【０００４】ところで、毛の発育に関わる毛包組織、特
にその下部では、上皮系で未分化な毛母細胞が間葉系の
毛乳頭細胞と基底膜を境に取り囲むように存在してお
り、毛の正常な発育はこれら組織間相互作用により毛母
細胞が増殖、分化することにより引き起こされると考え
られている。即ち、毛乳頭細胞により司られた毛母細胞
が増殖、分化し、毛の主体をなす毛髄、毛皮質、毛小皮
等の毛幹、内毛根鞘が形成され、毛母細胞の活発な増
殖、分化により毛母細胞が上方へ移動することによって
毛が伸長すると考えられている。

【０００５】例えば、毛包のないマウスやラット足底皮
膚の表皮真皮間に毛乳頭、培養毛乳頭細胞を埋め込み移
植床内に移すと、本来毛包を誘導しない足底表皮が毛乳
頭、培養毛乳頭細胞を包み込み毛包を誘導することが報
告されている（Kobayashi,K.,et al.,J.Invest.Dermato
l.,92,p278-282(1989)、Reynolds,A.,et al.,Ann.NYAca
d.Aci.,642,p226-242(1991)）。また埋め込んだ毛乳頭
の種類や大きさにより、誘導毛包が規定されることも報
告されている（Jahoda,C.,Development,115,p1103-1109
(1992)）。

【０００６】一方、毛包組織間の相互作用については、
男性ホルモン依存性の毛の生育に関して報告がある。例
えば、男性ホルモン依存性の髭毛乳頭細胞存在下での髭
上皮系細胞の増殖がインシュリン様増殖因子-I（insuli
n-like growth factor-I（IGF-I））に対する中和抗体
にて完全に抑制されることや、髭毛乳頭細胞ではIGF-I
のmRNAが発現しており、この発現は男性ホルモンにより
コントロールされていることなどから、少なくともIGF-
Iが毛乳頭細胞由来の男性ホルモン依存性の毛包組織間
相互作用において、分泌により隣接細胞に直接作用する
（パラクリン）増殖因子のひとつであることが明らかに
されている（Itami,S.,et al.,Biochem.Biophys.Res.Co
mmun.212,p988-994(1995)、Itami,S.,et al.,Hair Rese
ach for the Next Millenium p297-302(1996) Elsevier
Science）。

【０００７】現時点において、間葉系細胞である毛乳頭
細胞が毛の発育を司る鍵となっていることは間違いない
が、いまだ毛包組織間の相互作用の機構については不明
な点が多く、その解明が待たれている。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】そこで、本発明は、毛
包組織間の相互作用に関与しうるパラクリン因子、特
に、毛の発育を司る鍵となっている毛乳頭細胞に発現す
るパラクリン因子を提供することを課題とする。そし
て、これにより該因子を有効成分とする育毛剤を提供す
ることを課題とする。

【０００９】

【課題を解決するための手段】毛乳頭は、皮膚組織から
毛包組織への分化誘導のみならず、毛周期の維持や成長
期における毛母細胞の分化、増殖などに重要な役割を果
たしていると考えられている細胞である。そして、これ
ら毛乳頭細胞の役割には、毛乳頭細胞から出されるシグ
ナルが深く関わっていると考えられている。従って、こ
のシグナルを決定することは、毛包組織間の相互作用の
機構を解明する上で、非常に重要であるといえる。

【００１０】本発明者らは、上記課題の解決のために誠
意研究を重ねた結果、近年見出された、繊維芽細胞増殖
因子-10（FGF-10）（Yamasaki,M.,et al.,J.Biol.Chem.
271,p15918-15921(1996)、江本ら,第69回日本生物化学
会大会・第19回日本分子生物学会年会合同年会講演
要旨集,163(1996)）として知られる因子が、ヒト毛乳頭
細胞に発現し、さらに、FGF-10が毛包の成長作用を有す
ることを解明した。これにより本発明者らは、FGF-10を
育毛剤として利用することが可能であることを見出し、
本発明を完成するに至った。

【００１１】FGF-10は、FGFファミリー間で相同性が高
いアミノ酸配列を保持する領域の一部をプライマーとし
て、PCR法により胎児期のラットcDNAライブラリーの中
から単離されたFGFファミリーに属する10番目の因子で
ある（Yamasaki,M.,et al.,J.Biol.Chem.271,p15918-15
921(1996)）。FGFファミリーに属するメンバーに関して
は、これまでメラニン合成阻害剤としての利用（特開平
7-304686号公報）、肝機能改善剤としての利用（特開平
6-345666号公報）、さらに皮膚化粧料としての利用（特
開平4-187613号公報）が報告されている。また、禿頭症
の治療、予防のための利用（特開平4-224522号公報）
や、養毛化粧料、白髪改善化粧料としての利用（特開平
8-208440号公報）についても報告されている。一方、FG
F-10に関しては、ラットにおいて報告例があり、胚では
脳下垂体後葉（posterior pitutiary）, 第一頚椎（fir
st cervical vertebra）, 十二指腸（duodenum）,肺（l
ung）, 仙骨および尾骨の脊椎分節（sacral and coccyg
eal segments of the spinal cord）に、成体では肺に
特異的に発現（Yamasaki,M.,et al.,J.Biol.Chem.271,p
15918-15921(1996)）することが報告されている。ま
た、上皮細胞の増殖活性を有することも報告されてい
る。しかし、これまでヒトの毛組織特に毛の生育を司る
毛乳頭細胞とFGF-10との関係については一切知られてい
なかった。

【００１２】本発明者らは、毛乳頭細胞、上皮系の表皮
角化細胞および外毛根鞘細胞を単離し、これら細胞内の
全RNAに対しRT-PCRを行った結果、FGF-10がこれら細胞
の内、毛の生育の中心的な役割を果たす毛乳頭細胞に発
現していることを初めて明らかにした。さらに、本発明
者らは、単離した毛包より調製した毛包組織にFGF-10を
作用させて毛包の成長について評価を行い、FGF-10が実
際に毛包の成長促進作用を有することを初めて明らかに
した。

【００１３】本発明は、毛包の成長促進作用を有するパ
ラクリン因子「FGF-10」に関し、より具体的にはFGF-10
を有効成分とする育毛剤に関する。

【００１４】

【発明の実施の形態】本発明の育毛剤の有効成分として
用いられるFGF-10は、温血動物の組織もしくは細胞から
公知の蛋白質の精製方法により製造することもでき、ま
た組換えDNA技術を用いて製造することもできる。天然
のFGF-10は、例えば、一般に広く用いられるクロマトグ
ラフィー手法や塩析法、溶媒抽出法、限外濾過濃縮法、
再結晶、遠心分離法、蒸留などを適宜組み合わせて用い
ることで、精製単離することができる。組換え技術を用
いてFGF-10を製造する場合には、FGF-10を発現させるた
めに用いる塩基配列としては、配列番号：１に記載の塩
基配列の他に、配列番号：２に記載のアミノ酸配列と実
質的に同一のタンパク質をコードする塩基配列を有する
ものであればいかなる塩基配列を用いることも可能であ
る。FGF-10の組み換え体は、例えば、FGF-10の全アミノ
酸配列もしくは部分アミノ酸配列をコードする塩基配列
からなるクローンを含有する組換え発現ベクターによっ
て宿主細胞を形質転換し、得られた形質転換体を適当な
培地及び培養条件で培養し、該形質転換体から抽出、精
製することによって製造することができる。使用する発
現ベクターとしては、宿主内で複製、増殖、転写、翻訳
されるものであれば特に制限はない。ベクターの導入さ
れる宿主としては、例えば、大腸菌、酵母菌、昆虫細
胞、哺乳細胞等を用いることが可能である。

【００１５】また、本発明においては、改変されたFGF-
10ポリペプチドを用いることも可能である。改変された
ポリペプチドは天然に生じることもあり、また翻訳後の
修飾により生ずることもある。また、遺伝子工学的手
法、例えば部位特異的変異誘発法［Methods in Enzymol
ogy,154,p350,367-382(1987)、同 100,p468(1983)、Nuc
leic Acids Research,12,p9441(1984)］等の方法や、リ
ン酸トリエステル法やリン酸アミダイト法等の化学合成
手段［J.Am.Chem.Soc.,89,p4801(1967)、同91,p3350 (1
969)；Science,150,p178(1968)、Tetrahedron Lett.,2
2,p1859(1981)、同24,p245(1983)］により変異させたDN
Aを用いることにより調製することも可能である。さら
に、これらの方法を適宜組合せて調製することも可能で
ある。

【００１６】本発明のFGF-10は単独で育毛剤として用い
ることも可能であるが、他の成分と配合して用いること
も可能である。他の成分としては、細胞賦活効果、血行
促進効果、抗男性ホルモン等が挙げられる。具体的に
は、パントテン酸およびその誘導体、プラセンタエキ
ス、感光素、ニンジンエキス、ビオチン、モノニトログ
アヤコール、塩化カルプロニウム、ビタミンＥおよびそ
の誘導体、センブリエキス、トウガラシチンキ、セファ
ランチン、ニコチン酸およびその誘導体、エストラジオ
ール、エチニルエストラジオール、ランジック酸、ミノ
キシジルおよびその類縁体や誘導体、5α還元酵素阻害
剤、12-テトラデカノイルフォルボル-13-アセテート（1
2-Tetradecanoylphorbol-13-acetate）、オウセイ、カ
ギカズラ、オオアザミ、ヘンナ、カンゾウといった生薬
等が挙げられるがこれに限らない。これらの成分は、2
種以上を組み合わせて用いることも可能である。これら
の配合は、毛髪の成長を効果的に促進するか、脱毛を防
止することができるのであればいかなる比率でもよい。

【００１７】また、本発明のFGF-10には、局所投与剤と
して投与される場合、通常、許容される担体もしくは媒
体とともに投与することも可能である。例えば、化粧
品、医薬品、医薬部外品に用いられる水性成分、粉末、
界面活性剤、油剤、保湿剤、アルコール、pH調製剤、防
腐剤、酸化防止剤、増粘剤、ビタミン類、皮脂溶解剤、
殺菌剤、角質溶解剤、香料、色素などを配合することも
できる。局所投与の場合には、より効果的に用いるため
に、リポソームのような公知のDDS担体とともに用いる
ことも可能である。

【００１８】本発明の育毛剤の投与量は、通常約0.001
〜約100μg/日/cm²であり、配合量は0.0001〜0.1w/v％
であり、好ましくは、約0.01〜約10μg/日/cm²、0.0005
〜0.05w/v％である。一日の投与量は、頭皮の状態など
に応じて適宜選択され、必要な投与量を、一日に１〜
数回に分けて、投与することができる。

【００１９】本発明の育毛剤は、クリーム、ローショ
ン、軟膏、ゲル、シャンプー、エアゾールなどの医薬品
剤型や、化粧品剤型とすることが可能である。

【００２０】本発明のFGF-10は、育毛効果を有し、脱毛
治療効果、脱毛予防効果などをも有すると考えられるた
め、本発明の育毛剤は、脱毛症予防剤や脱毛治療剤など
として用いることも可能である。また、生体由来のもの
であって安全性も高いことから、育毛・養毛化粧料や脱
毛防止化粧料として用いることも可能である。

【００２１】

【実施例】

[実施例１] 毛乳頭細胞の単離形成外科手術時の際に得られた全層皮膚から、常法（Me
ssenger,A.G.,Br.J.Dermatology.,110,p685-689(198
4)）にしたがい毛乳頭細胞を単離した。以下の操作はす
べてクリーンベンチ内で実体顕微鏡下にて実施した。全
層皮膚より21Gの注射針を用いて周辺部組織を含む毛包
を選別し摘出した。摘出した毛包組織より、付着してい
る周辺部組織を外科的に取り除き、毛球部のみ切り取っ
た後、毛球部を切開し毛乳頭のみを摘出し初代培養に用
いた。上記のようにして得られた毛乳頭を35mm培養用デ
ィッシュ１枚当たり４から５個いれ、37℃、5％CO₂、加
湿条件下、ペニシリン（100U/ml）、ストレプトマイシ
ン（100μg/ml）、グルタミン（2mmol/ml）、20％ウシ
胎児血清を含む199培地（GIBCO BRL社）を用いて培養を
行い、培地の交換は毛乳頭がディッシュ底面に付着後、
3日ごとに行なった。なお、表皮角化細胞としては「Epi
dercell NHEK(F)」（クラボウ社）を用い、該細胞は「H
uMedia-KG2培地」（クラボウ社）にて培養を行った。ま
た、外毛根鞘細胞は公知の方法で単離し、「MCDB153培
地」（シグマ社）にて培養を行った。上記のいずれの細
胞も、継代は、サブコンフルエント後、0.05％トリプシ
ン、0.02％EDTAを含むPBS(-)溶液を用いて常法にしたが
って行った。実験には、3〜4代培養した細胞を用いた。

【００２２】[実施例２] RT-PCR（Reverse transcript
ase-polymerase chain reaction）（１）総RNAの精製培養毛乳頭細胞からの総RNAの精製は、常法にしたがっ
て行うことができる。具体的には、グアニジウムチオシ
アネート−フェノール−クロロホルム法（Chomczynski,
P.,et.al.,Anal.Biochem.,162,p156-159(1987)）による
ISOGEN（株式会社ニッポンジーン社）を用いて精製し
た。なお、表皮角化細胞および外毛根鞘細胞からの総RN
Aも同様に調製した。（２）一本鎖cDNAの合成（逆転写酵素反応）精製された総RNAから一本鎖cDNAの合成は、常法に従っ
て行うことができる。具体的には、「2.5μM ランダム
ヘキサマー(Random Hexamers), 5mM MgCl₂，50mM KCl,
10mM Tris-HCl(pH8.3), 各1mMのデオキシリボヌクレオ
チド三リン酸(deoxynucleotide triphosphate)(dNTP),
1.0U/μl リボヌクレアーゼ阻害剤(Ribonuclease Inhib
itor)（以上宝酒造社）、2.5U/μl M-MLV 逆転写酵素(R
everse Transcriptase)(Gibco-BRL社)」に2μgの総RNA
を混合し総量100μlとし、変性後にチューブをサーマル
サイクラーにセットし、以下のプログラムで合成反応を
行った。即ち、サイクル数は1回で、「25℃で15分、42
℃で45分、99℃で5分、4℃で10分」の反応を行った。（３） PCR（polymerase chain reaction） PCRは常法に従って行うことができる。具体的には、「2
mM MgCl₂，50mM KCl,10mM Tris-HCl(pH8.3),0.025U/μl
組み換えTaq DNAポリメラーゼ(recombinant Taq DNA po
lymerase)（宝酒造社）、各0.5μMのプライマー」を混
合した総量20μl入ったチューブに上記逆転写酵素反応
したサンプル5μlを混合して得たPCR混合液を調製し
た。プライマーとしては、「5'-ACCAACTCTTCTTCCTCCTC-
3'」（配列番号：３）および「5'-CCTCTATCCTCTCCTTCAG
C-3'」（配列番号：４）を用いた。この混合液にミネラ
ルオイル（パーキンエルマー社）を1滴、滴下した
後、サーマルサイクラーにセットし、「94℃で1分」を1
サイクル、「94℃で1分、60℃で1分、72℃で1分」を35
サイクル、「72℃で10分」を1サイクル、「4℃で10分」
を1サイクルのPCR反応を行った。PCR反応後、増幅産物
は0.5μg/mlの臭化エチジウムを含む2％アガロースゲル
上で電気泳動を行い可視化した。

【００２３】この結果、間葉系の細胞である毛乳頭細胞
にFGF10の発現が認められた（図1Aのa、b、g、h）。なお、
図1A中の「M」は100bp分子量マーカーを示す。また、
「a」「ｂ」は、前頭部毛乳頭細胞、「c」「d」は表皮
角化細胞、「e」「f」は外毛根鞘細胞、「g」「h」は髭毛
乳頭細胞を用いた結果を示す。

【００２４】また、異なる被験者由来の毛乳頭細胞を用
いて同様にRT-PCRを行った（図1B）。なお、図1B中の
「M」はマーカーを示し、「a」〜「f」は異なる被験者
由来の毛乳頭細胞での実験結果を示す。実験を行った全
ての被験者の毛乳頭細胞に325bpの位置にバンドが検出
された。増幅された断片の塩基配列を配列番号:5に示
す。

【００２５】検出されたバンドがFGF-10のバンドである
ことを確認するために、制限酵素消化解析を行った。具
体的には、電気泳動にて確認された単一バンドを切り出
し、「The GENECLEAN II Kit」(BIO 101社)を用いてDNA
回収を行った。回収したPCR増幅産物を制限酵素ScaＩ
（宝酒造社）にて消化を行い、その生成物を上述の電気
泳動にて可視化した。この結果、FGF-10の配列から予想
されうる210bpおよび115bpのバンドが認められた（図1
C）。なお、図1C中の左のレーンは、100bp分子量マーカ
ー（BRL Life Technology社）、中のレーンはScaI未添
加サンプル、右のレーンはScaＩ消化サンプルを電気泳
動したものである。

【００２６】[実施例３] FGF10組み換えタンパク質の
調製 FGF10組み換えタンパク質の調製を行うために、まず、P
CRによるFGF10cDNAの調製を行った。具体的には5μl 10
×Pfu buffer（Stratagene社）、0.4mM dNTPmixture
（宝酒造社）、5U Pfu DNA polymerase（Stratagene
社）、各0.5μMのプライマー、実施例2(2)で調製した逆
転写酵素反応後の反応溶液5μlを混合して総量50μlのP
CR混合液を調製した。プライマーとしては、「5'−AAGC
TTATGTGGAAATGGATACTG−3'」（配列番号：６）および
「5'−AAGCTTCTATGAGTGTACCACCAT−3'」（配列番号：
７）を用いた。PCR反応は94℃で1分を1サイクル、「94
℃で1分、56℃で1分、72℃で2分」を35サイクル、72℃
で10分を1サイクル、4℃で10分を1サイクルで行った。P
CR産物は、アガロースゲル電気泳動を行い、640bpのバ
ンドを精製後、制限酵素HindIIIにて消化した。ヒトFGF
10をコードする領域を含むHindIII断片を、プラスミドp
Rc/CMV（インビトーゲン社）のHindIIIサイトに挿入
し、pRc/CMV-hFGF10を構築した。トランスフェクション
の24時間前に、10％牛胎児血清を含むDMEM培地(Gibco B
RL社)に、COS1細胞（American Type Culture collectio
n）を6cm組織培養用ディッシュあたり2x10⁵細胞となる
ように植え込んだ。リン酸カルシウム法（Graham et a
l, Virolozy, 52, 456,1973）によりpRc/CMV-hFGF10を5
μgと、対照として組換え分子を導入していないpRc/CMV
を同様にトランスフェクトした。翌日、培地を0.1％牛
胎児血清を含むDMEM培地に替えて更に40時間培養を続け
た。形質転換したCOS-1細胞と培養上清を収集した。細
胞はPBSで2回洗浄ののちに1M NaCl、20mMTris-HCl(pH=
7.6)に懸濁し、超音波破砕した後、15000g、4℃、15分
間の遠心分離を行い上清のみを採取した。これにより得
られた細胞抽出液と培養上清を、限外濾過（分子量1
万）により濃縮した。得られた限外ろ過液をＡ液（pRc/
CMV-hFGF10をトランスフェクトしたCOS1細胞由来）、Ｂ
液（pRc/CMV をトランスフェクトしたCOS-1細胞由来）
とした。

【００２７】[実施例４] ヒト毛包の単離形成外科手術時の際に得られた正常頭皮から、常法(Phi
lpott, M. P. et. al., J. Cell. Sci.,97, p463-471(1
990))にしたがいヒト毛包を単離した。以下の操作はす
べてクリーンベンチ内で実体顕微鏡下にて実施した。

【００２８】具体的には、得られた正常頭皮を幅5mm以
下になるよう短冊状にカットし、表皮及び真皮上層を、
毛球部が残るようにした脂肪層から分離した。更に実体
顕微鏡（ライカ社WILD MZ8）下で先の毛球部を含んだ脂
肪組織を培地中に置き、毛包だけを慎重に単離した。

【００２９】[実施例５] 毛包組織の器官培養および毛
包成長評価法毛包組織の毛包成長評価のための培地としは、限外濾過
液Ａ液、Ｂ液をそれぞれ培養用培地（グルタミン(2m
M)、インスリン(10μg/ml)、トランスフェリン(10μg/m
l)、ハイドロコルチゾン(10ng/ml)、亜セレン酸(10ng/m
l)、ペニシリン(50μg/ml)、ストレプトマイシン(50IU/
ml)を含むWilliam's Medium E（Gibco BRL社））にて1
万倍、10万倍に希釈したものを用いた。実施例4で得ら
れた個々の単離毛包を12穴培養用プレート（コーニング
コースタージャパン）に入れ37℃、5%CO₂、加湿条
件下、5日間の培養を行い、毛包組織の毛包成長評価を
行った。毛包の成長は、一定期間培養した毛包全体の長
さの伸びとした。毛包成長の評価は、倒立型顕微鏡（オ
リンパスIX70）による検鏡下、接眼部の計測目盛りによ
り換算測定を行った。その結果、限外濾過液Ａ液を10万
倍希釈した培地にて培養した毛包は約1.3mmの伸長が認
められ、同様に希釈した限外濾過液Ｂ液を希釈した場合
よりも約15％の毛包成長が促進された。また、限外濾過
液Ａ液を1万倍希釈した培地にて培養した毛包では約1.4
mmの伸長が認められ、同様に限外濾過液Ｂ液を希釈した
場合よりも約26％の毛包成長が促進された。

【００３０】

【発明の効果】本発明により、FGF-10が、毛乳頭細胞に
発現し、毛の発育を司る鍵となるパラクリン因子である
ことが解明され、これによりFGF-10を有効成分とする育
毛剤が提供された。

【００３１】

【配列表】

（１）出願人氏名又は名称：ロート製薬株式会社（２）発明の名称：育毛剤（３）整理番号：Ｒ１−９０１ＤＰ１（４）出願番号：（５）出願日：（６）優先権の基となった出願をした国名及び出願の番
号：日本国平成９年特許願第４１６５８号（７）優先日：１９９７年２月１０日（８）配列の数：７配列番号 : 1 配列の長さ : 627 配列の型 : 核酸鎖の数 : 二本鎖トポロジー : 直鎖状配列の種類 : cDNA to mRNA 配列 ATG TGG AAA TGG ATA CTG ACA CAT TGT GCC TCA GCC TTT CCC CAC CTG 48 Met Trp Lys Trp Ile Leu Thr His Cys Ala Ser Ala Phe Pro His Leu 1 5 10 15 CCC GGC TGC TGC TGC TGC TGC TTT TTG TTG CTG TTC TTG GTG TCT TCC 96 Pro Gly Cys Cys Cys Cys Cys Phe Leu Leu Leu Phe Leu Val Ser Ser 20 25 30 GTC CCT GTC ACC TGC CAA GCC CTT GGT CAG GAC ATG GTG TCA CCA GAG 144 Val Pro Val Thr Cys Gln Ala Leu Gly Gln Asp Met Val Ser Pro Glu 35 40 45 GCC ACC AAC TCT TCT TCC TCC TCC TTC TCC TCT CCT TCC AGC GCG GGA 192 Ala Thr Asn Ser Ser Ser Ser Ser Phe Ser Ser Pro Ser Ser Ala Gly 50 55 60 AGG CAT GTG CGG AGC TAC AAT CAC CTT CAA GGA GAT GTC CGC TGG AGA 240 Arg His Val Arg Ser Tyr Asn His Leu Gln Gly Asp Val Arg Trp Arg 65 70 75 80 AAG CTA TTC TCT TTC ACC AAG TAC TTT CTC AAG ATT GAG AAG AAC GGG 288 Lys Leu Phe Ser Phe Thr Lys Tyr Phe Leu Lys Ile Glu Lys Asn Gly 85 90 95 AAG GTC AGC GGG ACC AAG AAG GAG AAC TGC CCG TAC AGC ATC CTG GAG 336 Lys Val Ser Gly Thr Lys Lys Glu Asn Cys Pro Tyr Ser Ile Leu Glu 100 105 110 ATA ACA TCA GTA GAA ATC GGA GTT GTT GCC GTC AAA GCC ATT AAC AGC 384 Ile Thr Ser Val Glu Ile Gly Val Val Ala Val Lys Ala Ile Asn Ser 115 120 125 AAC TAT TAC TTA GCC ATG AAC AAG AAG GGG AAA CTC TAT GGC TCA AAA 432 Asn Tyr Tyr Leu Ala Met Asn Lys Lys Gly Lys Leu Tyr Gly Ser Lys 130 135 140 GAA TTT AAC AAT GAC TGT AAG CTG AAG GAG AGG ATA GAG GAA AAT GGA 480 Glu Phe Asn Asn Asp Cys Lys Leu Lys Glu Arg Ile Glu Glu Asn Gly 145 150 155 160 TAC AAT ACC TAT GCA TCA TTT AAC TGG CAG CAT AAT GGG AGG CAA ATG 528 Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Phe Asn Trp Gln His Asn Gly Arg Gln Met 165 170 175 TAT GTG GCA TTG AAT GGA AAA GGA GCT CCA AGG AGA GGA CAC AAA ACA 576 Tyr Val Ala Leu Asn Gly Lys Gly Ala Pro Arg Arg Gly His Lys Thr 180 185 190 CGA AGG AAA AAC ACC TCT GCT CAC TTT CTT CCA ATG GTG GTA CAC TCA 624 Arg Arg Lys Asn Thr Ser Ala His Phe Leu Pro Met Val Val His Ser 195 200 205 TAG 627 配列番号 : 2 配列の長さ : 208 配列の型 : アミノ酸トポロジー : 直鎖状配列の種類 : ペプチド配列 Met Trp Lys Trp Ile Leu Thr His Cys Ala Ser Ala Phe Pro His Leu 1 5 10 15 Pro Gly Cys Cys Cys Cys Cys Phe Leu Leu Leu Phe Leu Val Ser Ser 20 25 30 Val Pro Val Thr Cys Gln Ala Leu Gly Gln Asp Met Val Ser Pro Glu 35 40 45 Ala Thr Asn Ser Ser Ser Ser Ser Phe Ser Ser Pro Ser Ser Ala Gly 50 55 60 Arg His Val Arg Ser Tyr Asn His Leu Gln Gly Asp Val Arg Trp Arg 65 70 75 80 Lys Leu Phe Ser Phe Thr Lys Tyr Phe Leu Lys Ile Glu Lys Asn Gly 85 90 95 Lys Val Ser Gly Thr Lys Lys Glu Asn Cys Pro Tyr Ser Ile Leu Glu 100 105 110 Ile Thr Ser Val Glu Ile Gly Val Val Ala Val Lys Ala Ile Asn Ser 115 120 125 Asn Tyr Tyr Leu Ala Met Asn Lys Lys Gly Lys Leu Tyr Gly Ser Lys 130 135 140 Glu Phe Asn Asn Asp Cys Lys Leu Lys Glu Arg Ile Glu Glu Asn Gly 145 150 155 160 Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Phe Asn Trp Gln His Asn Gly Arg Gln Met 165 170 175 Tyr Val Ala Leu Asn Gly Lys Gly Ala Pro Arg Arg Gly His Lys Thr 180 185 190 Arg Arg Lys Asn Thr Ser Ala His Phe Leu Pro Met Val Val His Ser 195 200 205 配列番号 : 3 配列の長さ : 20 配列の型 : 核酸鎖の数 : 一本鎖トポロジー : 直鎖状配列の種類 : 他の核酸合成DNA 配列 ACCAACTCTT CTTCCTCCTC 20 配列番号 : 4 配列の長さ : 20 配列の型 : 核酸鎖の数 : 一本鎖トポロジー : 直鎖状配列の種類 : 他の核酸合成DNA 配列 CCTCTATCCT CTCCTTCAGC 20 配列番号 : 5 配列の長さ : 325 配列の型 : 核酸鎖の数 : 二本鎖トポロジー : 直鎖状配列の種類 : cDNA to mRNA 配列 ACCAACTCTT CTTCCTCCTC CTTCTCCTCT CCTTCCAGCG CGGGAAGGCA TGTGCGGAGC 60 TACAATCACC TTCAAGGAGA TGTCCGCTGG AGAAAGCTAT TCTCTTTCAC CAAGTACTTT 120 CTCAAGATTG AGAAGAACGG GAAGGTCAGC GGGACCAAGA AGGAGAACTG CCCGTACAGC 180 ATCCTGGAGA TAACATCAGT AGAAATCGGA GTTGTTGCCG TCAAAGCCAT TAACAGCAAC 240 TATTACTTAG CCATGAACAA GAAGGGGAAA CTCTATGGCT CAAAAGAATT TAACAATGAC 300 TGTAAGCTGA AGGAGAGGAT AGAGG 325 配列番号 : 6 配列の長さ : 24 配列の型 : 核酸鎖の数 : 一本鎖トポロジー : 直鎖状配列の種類 : 他の核酸合成DNA 配列 AAGCTTATGT GGAAATGGAT ACTG 24 配列番号 : 7 配列の長さ : 24 配列の型 : 核酸鎖の数 : 一本鎖トポロジー : 直鎖状配列の種類 : 他の核酸合成DNA 配列 AAGCTTCTAT GAGTGTACCA CCAT 24

【図面の簡単な説明】

【図１】Ａは、前頭部毛乳頭細胞、表皮角化細胞、外毛
根鞘細胞、髭毛乳頭細胞におけるFGF10の発現をRT-PCR
により検出した電気泳動像である。Ｂは、異なる被験者
由来の毛乳頭細胞におけるFGF10の発現をRT-PCRにより
検出した電気泳動像である。Ｃは、制限酵素処理したFG
F-10の電気泳動像である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】 FGF-10を有効成分として含むことを特徴
とする育毛剤。