JPH10287667A

JPH10287667A - イソクマリン誘導体およびそれらの製薬学的組成物

Info

Publication number: JPH10287667A
Application number: JP9104023A
Authority: JP
Inventors: Takashi Nakajima; 崇中島; Shinichi Hirano; 伸一平野; Kunio Isshiki; 邦夫一色; Hiroshi Iguchi; 博史井口; Takeo Yoshioka; 武男吉岡; Masaaki Ishizuka; 雅章石塚; Tomio Takeuchi; 富雄竹内
Original assignee: Mercian Corp
Current assignee: Mercian Corp
Priority date: 1997-04-08
Filing date: 1997-04-08
Publication date: 1998-10-27
Anticipated expiration: 2017-04-08
Also published as: JP3757024B2

Abstract

(57)【要約】【課題】製薬学的組成物の有効成分として利用できる
イソクマリン誘導体の提供。【解決手段】式【化１】（式中、Ａ、Ｂ、Ｒ¹、Ｒ²およびＲ³は特定の置換基で
ある）で表されるイソクマリン誘導体、ならびにそれら
を有効成分として含む製薬学的組成物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、イソクマリン誘導
体類およびそれらを含む医薬製剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】イソクマリン誘導体、特に式

【０００３】

【化２】

【０００４】で表される、３−ヒドロキシメチル−６−
メトキシ−８−ヒドロキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−
１−オンは、ストレプトバーチシリウムユーロシディ
クム（Streptoverticillium eurocidicum）が産生する
化合物として、初めて見い出され、各種動物細胞および
人癌細胞に対する増殖阻害活性を示す抗生物質ＭＩ４３
−３７Ｆ１１として注目されている（特開平３−２１７
７号）。その後、前記抗生物質ＭＩ４３−３７Ｆ１１
（以下、ＭＩ４３と略記する）の化学合成方法について
研究され、イソクマリン骨格の３位にベンジルオキシメ
チルやハロゲン化メチル基のような脱離基含有メチル基
を有するイソクマリン誘導体等が中間体として、（特開
平４−１１２８８４号）、また前記の３位に式

【０００５】

【化３】

【０００６】（ここで、Ｒ₃およびＲ₄は各々独立に置換
または未置換アルキル基、アルコキシ、アルカノイルオ
キシ、モノ−もしくはジ−置換アミノ、フェニルチオ、
またはＮ₃などの基を有するイソクマリン誘導体がＭＩ
４３と同様な薬理活性を示す化合物として（特開平５−
９７８４１号）提供されてきた。

【０００７】一方、ＭＩ４３は、経口投与でラットのア
ジュバント関節炎およびマウスのコラーゲン誘発関節塩
を有意に抑制することから、免疫調節剤としての使用も
提案されている（特開平６−１８３９６６号）。また、
これらの疾患に対してさらに優れた効能を有するイソク
マリン誘導体として、イソクマリン骨格の３位に基−Ｃ
ＨＲＣＯＯＨ（ここで、Ｒは水素原子または低級アルキ
ル基である）が結合した化合物も提案されている（特開
平８−１７６１３８号）。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】上記特開平８−１７６
１３８号公報に記載された化合物は、殊に生物学的利用
能にも優れている点で興味深いものであるが、さらなる
優れた効能を有する化合物に対する欲求は依然として存
在する。したがって、本発明の目的は、上記公報に記載
の化合物以外の上記疾患に優れた効能を示す化合物を提
供することにある。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、例えば、
特開平８−１７６１３８号公報に記載されたイソクマリ
ン誘導体の基−ＣＨＲＣＯＯＨ（ここで、Ｒは低級アル
キル基である）のメチン（−ＣＨ＝）部分がより嵩高い
置換基を有する化合物も、ある一定の薬理活性を示すと
ともに、既知イソクマリン誘導体と異なる生体内動態を
示すことを見い出した。また、かかる化合物を効率よく
製造するための新規合成中間体も見い出した。

【００１０】したがって、本発明によれば、下記式
（Ｉ）で表されるイソクマリン誘導体および、適当な場
合にはそれらの塩が提供される。

【００１１】式（Ｉ）：

【００１２】

【化４】

【００１３】式中、Ａは水素原子または低級アルキル基
を示し、Ｂは水素原子または水酸基の保護基を示し、Ｒ
¹はシアノ基、Ｎ−モノ−もしくはジ−アルキル置換さ
れていてもよいカルバモイル基またはカルボキシル基を
示し、Ｒ²およびＲ³は、相互に独立して、水素、低級ア
ルキルまたはアリール−低級アルキルを示し、ここでア
リール部分は、場合によって１個以上の置換基で置換さ
れていてもよく、あるいはＲ²とＲ³は、それらが結合す
る炭素原子と一緒になって、３〜７員のいずれかの脂環
式環を形成するＣ_2-6アルキレン基を示すが、但し、Ａ
がメチル基で、Ｒ²およびＲ³が同時に水素原子を示す
か、または一方が水素原子で、他方が低級アルキル基を
示す場合には、Ｒ¹はシアノ基またはカルボキシル基以
外の基である。

【００１４】これらのうち、Ａが水素原子または低級ア
ルキル基であり、Ｂが水素原子であり、Ｒ¹がカルボキ
シル基またはＮ−モノ−もしくはジ−低級アルキル置換
されていてもよいカルバモイル基である、式（Ｉ）の化
合物は、例えば、優れた血管新生阻害活性を有する。一
方、Ａが低級アルキル基であり、Ｂが水酸基の保護基で
あり、そしてＲ¹がシアノ基である、式（Ｉ）の化合物
は、上記生物活性を示す化合物の合成中間体として有用
である。

【００１５】

【発明の具体的な記載】本発明のイソクマリン誘導体を
特定するのに用いる、低級アルキル基は、炭素数１〜６
個の直鎖もしくは分枝のアルキル基を意味し、具体的な
ものとしては、メチル、エチル、ｎ−もしくはｉｓｏ−
プロピル、ｎ−、ｉｓｏ−、ｓｅｃ−もしくはｔ−ブチ
ル、ｎ−ペンチル、イソアミル、およびｎ−ヘキシル基
などが挙げられる。

【００１６】アリール−低級アルキル基は、上記低級ア
ルキル基がアリール基、好ましくはフェニル基により置
換されている基を意味し、このアリール基は、場合によ
って、ハロゲン、好ましくは塩素、臭素、フッ素、水酸
基、低級アルキル基、カルボキシル基、ニトロ基、アミ
ノ基から選ばれる同一もしくは異なる置換基１個以上、
好ましくは１個もしくは２個により置換されていてもよ
い。

【００１７】水酸基の保護基は、低級アルキルシリル
（例えば、ｔ−ブチルジメチルシリル、トリメチルシリ
ル等）、アシル（例えば、アセチル、プロピオニル、ベ
ンゾイル等）、置換されていてもよいアルコキシメチル
（例えば、メトキシメチル、メトキシエトキシメチル、
ベンジルオキシメチル等）をはじめとする有機合成化学
の分野で水酸基の保護基として使用できるいかなる基も
包含される。

【００１８】カルバモイル基（−ＣＯＮＨ₂）は、場合
によって、Ｎ−モノ−もしくはジ−低級アルキル置換さ
れていてもよく、ジ−低級アルキル置換されている場合
の低級アルキル基は、同一もしくは異なる基であっても
よい。

【００１９】以上の各基が組み合わさった本発明に従う
イソクマリン誘導体の具体的なものとしては、限定され
るものでないが、次表Ｉで表されるものを挙げることが
できる。

【００２０】

【表１】

【００２１】

【表２】

【００２２】

【表３】

【００２３】

【表４】

【００２４】

【表５】

【００２５】

【表６】

【００２６】

【表７】

【００２７】

【表８】

【００２８】

【表９】

【００２９】上記式（Ｉ）のＲ¹がカルボキシル基を示
す化合物と塩基性化合物との塩形態で提供することがで
きる。これらの塩としては本発明の目的に沿う限り、何
如なる塩であってもよい。しかし、好ましくは、通常の
カルボキシル基含有薬物の製薬学的に許容される塩を生
成するのに用いられる塩基性化合物との塩が好ましい。
具体的な塩としては、リチウム、ナトリウムおよびカリ
ウムなどのアルカリ金属、カルシウムおよびマグネシウ
ムなどのアルカリ土類金属、ならびにメチルアミン、エ
チルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリ
エチルアミン、ピリジン、ピペラジンおよびピペリジン
などの有機塩基との塩が挙げられる。

【００３０】上記式（Ｉ）で表される活性化合物は、例
えば、特開平８−１７６１３８号公報に記載の方法また
はその変法に従って得られる。

【００３１】

【化５】

【００３２】を出発原料にし、代表的な具体例について
は後述方法またはその変法によって、シアノメチル基メ
チル部分に１もしくは２個の低級アルキル基、１もしく
は２個のアリール−低級アルキル基またはアルキレン鎖
を導入し、本発明に従う合成中間体を生成した後、シア
ノ基を加水分解することによって得ることができる。

【００３３】上記の本発明に従う化合物またはその製薬
学的に許容される塩は、詳細には後述するように、例え
ば、コラーゲン誘発関節炎に対する抑制作用を示し、慢
性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、全身性硬化
症、結節性動脈周囲炎、潰瘍性大腸炎および若年性糖尿
病などの自己免疫疾患あるいは悪性腫瘍、重症感染症な
ど、主として、免疫調節作用の異常に随伴する疾患の予
防または治療に使用できるものと思われる。

【００３４】また、例えば、マウス背部皮下法において
腫瘍細胞が誘導する血管新生の阻害作用を示し、主とし
て、血管新生に随伴する疾患、例えば悪性固形腫瘍の増
殖と転移、糖尿病性網膜症、各種慢性炎症、乾癬、角膜
移植に伴う血管新生、さらに動脈硬化の予防および治療
にも適用できるものと思われる。

【００３５】その上、本発明の化合物は、免疫調節作用
を有することが知られているＭＩ４３に比べて、生体内
で高い安定性を示し、殊に経口投与において、有意に高
い生体内安定性をはじめとする、優れた生物学的利用能
を示す。しかも、毒性も殆ど見られず、有効かつ安全に
使用することができる。

【００３６】本発明の化合物は、それら単独で、例え
ば、免疫調節作用の異常または血管新生に随伴する疾患
の予防または治療用の医薬製剤とすることもできるが、
好ましくは製薬学的に許容される助剤と組み合わせて使
用することができる。かかる助剤としては、当該技術分
野で常用されている、充填剤、増量剤、結合剤、保湿
剤、崩壊剤、崩壊抑制剤、表面活性剤、滑沢剤などの希
釈剤あるいは賦形剤を挙げることができる。この医薬製
剤としては各種の剤形がその治療目的に応じて選択で
き、その代表的なものとしては錠剤、丸剤、散剤、液
剤、懸濁シロップ剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐
剤、注射剤（液剤、懸濁剤など）などを挙げられる。ま
た、本発明に従う化合物の作用を発揮される際の特に好
適な投与経路は、経口投与に認められるので、上記の剤
形のうち、経口投与用の剤形を好ましいものとして提供
できる。

【００３７】錠剤の形態に成型するに際しては、担体と
して公知のものを広く使用でき、例えば乳糖、白糖、塩
化ナトリウム、ぶどう糖、尿素、澱粉、炭酸カルシウ
ム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸などの賦形剤、
水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ぶどう糖
液、澱粉液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロー
ス、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポ
リビニルピロリドンなどの結合剤、乾燥澱粉、アルギン
酸ナトリウム、寒天末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリ
ウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン
脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリ
ン酸モノグリセリド、澱粉、乳糖などの崩壊剤、白糖、
カカオバター、水素添加油などの崩壊抑制剤、第四級ア
ンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウムなどの吸収促
進剤、グリセリン、澱粉などの保湿剤、澱粉、乳糖、カ
オリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸などの吸着
剤、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチ
レングリコールなどの滑沢剤などを使用できる。

【００３８】さらに錠剤は必要に応じて通常の剤皮を施
した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、フィルムコ
ーティング錠、二重錠、多層錠とすることができる。丸
剤の形態に成型するに際しては、担体としてこの分野で
従来公知のものを広く使用でき、例えばぶどう糖、乳
糖、澱粉、カカオバター、硬化植物油、カオリン、タル
クなどの賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラ
チン、エタノールなどの結合剤、ラミナラン、寒天など
の崩壊剤などを使用できる。

【００３９】坐剤の形態に成型するに際しては、担体と
してこの分野で従来公知のものを広く使用でき、ポリエ
チレングリコール、カカオバター、高級アルコール高級
アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセリド
などを挙げることができる。注射剤として調製される場
合は、液剤および懸濁剤は殺菌され、かつ血液と等張で
あるものが好ましく、これら液剤、懸濁剤の形態に調製
するに際しては、希釈剤としてこの分野において常用さ
れているものが全て使用でき、例えば水、エタノール、
プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアル
コール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリ
オキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類を使用する
ことができる。なお、この場合等張性の溶液を調製する
に十分な量の塩化ナトリウム、ぶどう糖あるいはグリセ
リンを該製剤中に含有させてもよく、また通常の溶解補
助剤、緩衝剤、無痛化剤などを使用してもよい。また経
口投与用には必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味
剤、甘味剤などや他の医薬品を該製剤中に含有させても
よい。

【００４０】本発明に従う医薬製剤に含められる本発明
の上記化合物の量は特に限定されず、広範囲に選択され
るが、通常、錠剤、顆粒剤、カプセル剤などの固形剤の
場合は、全組成物の１〜７０重量％、このましくは５〜
５０重量％であり、液剤、注射剤、懸濁剤などの液剤の
場合は、０.１〜１０重量％である。

【００４１】本発明の化合物の投与方法は、特に制限は
なく、各種製剤形態、患者の年齢、性別、その他の条
件、疾患の程度などに応じた方法で投与される。例え
ば、錠剤、丸剤、液剤、懸濁シロップ剤、乳剤、顆粒剤
およびカプセル剤の場合には経口投与される。上述した
ように、経口投与が好ましいが、注射剤の場合には単独
でまたはぶどう糖、アミノ酸などの通常の補液と混合し
て静脈内投与し、さらに必要に応じて単独で筋肉内、皮
内、皮下もしくは腹腔内投与してもよい。坐剤の場合に
は、直腸内投与される。

【００４２】本発明の化合物の投与量は、用法、患者の
年齢、性別、その他の条件、疾患の程度などにより適宜
増減することができるが、投与された動物の生体内で薬
理学的に有効なレベルを達成できるように、例えば、経
口投与の場合、１日当り０.３〜３００ｍｇ／ｋｇ体
重、非経口投与の場合、０.０３〜３０ｍｇ／ｋｇ体重
が適当である。

【００４３】本発明に従う化合物のうち、化合物１およ
び化合物３６を、それぞれ３０ｍｇ／ｋｇ体重でＤＢＡ
／１Ｊ雄性マウス７匹に経口投与したが、死亡した個体
はなく、また毒性症状を示す個体も全く認められなかっ
た。このことより、本発明で使用する化合物は、急性毒
性を全く示さないと思われる。また、同じく化合物１お
よび化合物３６を上記マウス７匹に２０ｍｇ／ｋｇ／日
で３週間経口投与したが、死亡個体はなく、毒性症状を
示す個体も全く認められなかった。このように、本発明
の化合物は、亜急性毒性も殆ど示さない。また、その他
の本発明に従う化合物も、同様の性状を示すことが推定
できるように、式（I）で表される本発明の化合物は極
めて安全に使用することができる。

【００４４】さらに、具体的には後述するように、本発
明に従う化合物は、慢性関節リウマチのモデル動物や血
管新生試験用のモデル動物を使用する試験において、著
効を示す。また、具体的には後述するように、本発明に
従う化合物は、マウスに経口投与した場合、時間にわた
り高い血中濃度を示し、特に、経口投与剤としても優れ
た特性を有する。

【００４５】

【実施例】以下、本発明を具体例を挙げてさらに詳細に
説明するが、本発明をこれらの態様に限定することを意
図するものでない。

【００４６】例１（参考）：８−ｔ−ブチルジメチルシ
リルオキシ−３−シアノメチル−６−メトキシ−１Ｈ−
２−ベンゾピラン−１−オンの製造

【００４７】

【化６】

【００４８】３−シアノメチル−８−ヒドロキシ−６−
メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−１−オン１９.２
０ｇ（８３.１１ｍｍｏｌ）をＮ,Ｎ’−ジメチルホルム
アミド１６０ｍｌに溶解し、０℃に冷却後、イミダゾー
ル１１.９０ｇ（１７５.１６ｍｍｏｌ）、ｔ−ブチルジ
メチルシリルクロリド２１.１４ｇ（１４０.１３ｍｍｏ
ｌ）を加え、そのまま２時間撹拌した。反応液に水を３
００ｍｌ加え、トルエン４００ｍｌ−酢酸エチル２００
ｍｌの混合溶媒で２回抽出した。有機層を水（１００ｍ
ｌ）、飽和食塩水（２００ｍｌ）で洗浄した後、減圧下
に溶媒を留去した。残留物にエタノールを２００ｍｌ加
え、加熱溶解後、室温で１３時間撹拌し、生じた結晶を
濾別することにより標記化合物を２１.６２ｇ得た。

【００４９】¹Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)；δ ６.４６(１
Ｈ,ｓ), ６.４５(２Ｈ,ｓ), ３.８７(３Ｈ,ｓ), ３.５
９(２Ｈ,ｄ,Ｊ＝１.４Ｈｚ)，１.０５(９Ｈ,ｓ), ０.２
７(６Ｈ,ｓ)例２：２−（８−ヒドロキシ−６−メトキシ−１Ｈ−２
−ベンゾピラン−１−オン−３−イル）−２−メチルプ
ロピオン酸の製造

【００５０】

【化７】

【００５１】８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３
−シアノメチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラ
ン−１−オン４００ｍｇ（１.１６ｍｍｏｌ）をテトラ
ヒドロフラン４ｍｌに溶解し、−３０℃に冷却した後、
６０％油状水素化ナトリウムを１１６ｍｇ（２.９０ｍ
ｍｏｌ）、ヨウ化メチルを４４０μｌ（６.９６ｍｍｏ
ｌ）加え、そのまま１時間撹拌した。反応液を酢酸エチ
ル１００ｍｌに希釈し、水、飽和食塩水で洗浄した。無
水硫酸ナトリウムにて脱水乾燥後、減圧下に溶媒を留去
した。残留物をシリカゲルカラムに供して精製し、８−
ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３−シアノジメチル
メチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−１−
オンを３６９ｍｇ得た。

【００５２】得られた８−ｔ−ブチルジメチルシリルオ
キシ−３−シアノジメチルメチル−６−メトキシ−１Ｈ
−２−ベンゾピラン−１−オン３６９ｍｇを酢酸４ｍｌ
に溶解し、濃塩酸４ｍｌを加え、７０℃で１５時間撹拌
した。反応液に水を１５ｍｌ加え、室温で１５分間撹拌
し、析出した結晶を濾別した。得られた結晶２１９ｍｇ
をエタノール１０ｍｌに溶解し、活性炭を１００ｍｇ加
え、５０℃で１時間撹拌した。活性炭を除き、減圧下に
溶媒を留去した。残留物をエタノール４ｍｌに溶解し、
ヘキサン９ｍｌを加えて室温で撹拌し、析出した結晶を
濾別することにより標記化合物を１２６ｍｇ得た。

【００５３】¹Ｈ-ＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ₆) ;δ １０.８７
(１Ｈ,ｓ), ６.７４(１Ｈ,ｓ), ６.７１(１Ｈ,ｄ,Ｊ＝
２.２Ｈｚ), ６.５５(１Ｈ,ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ)，３.８
６(３Ｈ,ｓ), １.４５(６Ｈ,ｓ)例３：２−（８−ヒドロキシ−６−メトキシ−１Ｈ−２
-ベンゾピラン−１−オン−３−イル）−３−フェニル
プロピオン酸の製造

【００５４】

【化８】

【００５５】８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３
−シアノメチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラ
ン−１−オン５００ｍｇ（１.４５ｍｍｏｌ）をジクロ
ロメタン２ｍｌに溶解し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液
を２ｍｌ加え、０℃に冷却した後、ｎ−テトラブチルア
ンモニウムブロミドを１１７ｍｇ（０.３６ｍｍｏ
ｌ）、ベンジルブロミドを１８０μｌ（１.４５ｍｍｏ
ｌ）加え、そのまま１５分間激しく撹拌した。反応液を
酢酸エチル５０ｍｌに希釈し、水、飽和食塩水で洗浄し
た。無水硫酸ナトリウムにて脱水乾燥後、減圧下に溶媒
を留去した。残留物をシリカゲルカラムに供して精製
し、３−ベンジルシアノメチル−８−ｔ−ブチルジメチ
ルシリルオキシ−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラ
ン−１−オンを１２４ｍｇ得た。

【００５６】上記の方法にて得られた３−ベンジルシア
ノメチル−８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−６−
メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−１−オン２９２ｍ
ｇ（０.６７ｍｍｏｌ）を酢酸２ｍｌに溶解し、濃塩酸
２ｍｌを加え、７０℃で１６時間撹拌した。反応液に水
を１０ｍｌ加え、室温で撹拌し、析出した結晶を濾別し
た。得られた結晶２０３ｍｇをエタノール１０ｍｌに溶
解し、活性炭を１００ｍｇ加え、５０℃で１時間撹拌し
た。活性炭を濾去した後、減圧下に溶媒を留去して標題
化合物を１９１ｍｇ得た。

【００５７】¹Ｈ-ＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ₆) ;δ １１.２２
(１Ｈ,ｓ), ７.１２-７.２７(５Ｈ,ｍ), ６.５９(１Ｈ,
ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ), ６.５８(１Ｈ,ｓ)，６.５４(１Ｈ,
ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ), ３.９３(１Ｈ,ｔ,Ｊ＝７.３Ｈｚ,
８,１Ｈｚ), ３.８３(３Ｈ,ｓ), ３.２６(１Ｈ,ｄｄ,Ｊ
＝６.６Ｈｚ,１４.０Ｈｚ)，３.０８(１Ｈ,ｄｄ,Ｊ＝
８.８Ｈｚ,１４.０Ｈｚ)例４：２−（８−ヒドロキシ−６−メトキシ−１Ｈ−２
−ベンゾピラン−１−オン−３−イル）プロピオナミド
の製造

【００５８】

【化９】

【００５９】８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３
−シアノメチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラ
ン−１−オン２.６４ｇ（７.６５ｍｍｏｌ）をジクロロ
メタン３０ｍｌに溶解し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液
を３０ｍｌ加え、０℃に冷却した後、ｎ−テトラブチル
アンモニウムブロミドを６３５ｍｇ（１.９１ｍｍｏ
ｌ）、ヨウ化メチルを２.１ｍｌ（３０.６０ｍｍｏｌ）
加え、そのまま１時間激しく撹拌した。ジクロロメタン
層を無水硫酸ナトリウムにて脱水乾燥後、減圧下に溶媒
を留去した。残留物をシリカゲルカラムに供して精製
し、８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３−シアノ
メチルメチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン
−１−オンを１.０６ｇ得た。

【００６０】８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３
−シアノメチルメチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベン
ゾピラン−１−オン５３１ｍｇ（１.４８ｍｍｏｌ）を
ジオキサン１０ｍｌに溶解し、濃塩酸１０ｍｌを加え、
５０℃で２.５時間撹拌した。反応液を酢酸エチル１０
０ｍｌに希釈し、水、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸
ナトリウムにて脱水乾燥した後、減圧下に溶媒を留去し
た。残留物をシリカゲルカラムに供して精製し、標題化
合物を３３４ｍｇ得た。

【００６１】¹Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) ;δ １０.９３(１
Ｈ,ｓ), ６.５０(１Ｈ,ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ), ６.４０(１
Ｈ,ｓ), ６.３８(１Ｈ,ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ)，５.９０(１
Ｈ,ｓ), ５.５６(１Ｈ,ｓ), ３.８７(３Ｈ,ｓ), ３.４
７(１Ｈ,ｑ,Ｊ＝６.６Ｈｚ),１.５４(３Ｈ,ｄ,Ｊ＝６.
６Ｈｚ)例５：２−（８−ヒドロキシ−６−メトキシ−１Ｈ−２
−ベンゾピラン−１−オン−３−イル)−２−ジプロピ
ルペンタナミドの製造

【００６２】

【化１０】

【００６３】８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３
−シアノメチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラ
ン−１−オン５００ｍｇ（１.４５ｍｍｏｌ）をテトラ
ヒドロフラン３ｍｌに溶解し、−３０℃に冷却した後、
６０％油状水素化ナトリウムを１７４ｍｇ（４.３５ｍ
ｍｏｌ）、ｎ−ヨウ化プロピルを１.５ｍｌ（１１.６０
ｍｍｏｌ）加え、そのまま１.５時間撹拌した。反応液
を酢酸エチル１００ｍｌに希釈し、水、飽和食塩水で洗
浄した。無水硫酸ナトリウムにて脱水乾燥後、減圧下に
溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムに供して精
製し、８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３−ジプ
ロピルシアノメチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾ
ピラン−１−オンを１８９ｍｇ得た。

【００６４】上記の方法にて得られた８−ｔ−ブチルジ
メチルシリルオキシ−３−ジプロピルシアノメチル−６
−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−１−オン３４６
ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）を酢酸２ｍｌに溶解し、濃硫
酸２ｍｌを加え、７０℃で１６時間撹拌した。反応液に
酢酸エチル５０ｍｌに希釈し、水、飽和食塩水で洗浄し
た。無水硫酸ナトリウムにて脱水乾燥後、減圧下に溶媒
を留去した。残留物をシリカゲルカラムに供して精製
し、標題化合物を２０１ｍｇ得た。

【００６５】¹Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) ;δ ６.５０(１
Ｈ,ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ), ６.４３(１Ｈ,ｓ), ６.３９(１
Ｈ,ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ), ５.７３(１Ｈ,ｂｒｓ)，５.４
８(１Ｈ,ｂｒｓ), ３.８７(３Ｈ,ｓ)，１.８７-１.９９
(４Ｈ,ｍ), １.１８-１.３３(４Ｈ,ｍ), ０.９７(３Ｈ,
ｔ,Ｊ＝６.０Ｈｚ)例６：２−（８−ヒドロキシ−６−メトキシ−１Ｈ−２
−ベンゾピラン−１−オン−３−イル）−３−ジフェニ
ルメチルプロピオナミドの製造

【００６６】

【化１１】

【００６７】８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３
−シアノメチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラ
ン−１−オン３００ｍｇ（０.８７ｍｍｏｌ）をテトラ
ヒドロフラン２ｍｌに溶解し、−３０℃に冷却した後、
６０％油状水素化ナトリウムを８７ｍｇ（２.１７ｍｍ
ｏｌ）、ベンジルブロミドを８５０ｍｌ（１１.６０ｍ
ｍｏｌ）加え、そのまま０.５時間撹拌した。反応液を
酢酸エチル５０ｍｌに希釈し、水、飽和食塩水で洗浄し
た。無水硫酸ナトリウムにて脱水乾燥後、減圧下に溶媒
を留去した。残留物をシリカゲルカラムに供して精製
し、８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３−シアノ
ジベンジルメチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピ
ラン−１−オンを３９５ｍｇ得た。

【００６８】得られた８−ｔ−ブチルジメチルシリルオ
キシ−３−シアノジベンジルメチル−６−メトキシ−１
Ｈ−２−ベンゾピラン−１−オン３９５ｍｇ（０.７１
ｍｍｏｌ）を酢酸２ｍｌに溶解し、濃硫酸２ｍｌを加
え、７０℃で１６時間撹拌した。反応液ヲ酢酸エチル５
０ｍｌに希釈し、水、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸
ナトリウムにて脱水乾燥後、減圧下に溶媒を留去した。
残留物をシリカゲルカラムに供して精製し、標題化合物
を２５８ｍｇ得た。

【００６９】¹Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) ;δ １０.９７(１
Ｈ,ｓ), ７.１４-７.２４(１０Ｈ,ｍ), ６.５１(１Ｈ,
ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ), ６.２５(１Ｈ,ｓ)，６.２３(１Ｈ,
ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ), ５.６０(２Ｈ,ｂｒｓ), ３.８４
(３Ｈ,ｓ), ３.３４(２Ｈ,ｄ,Ｊ＝１４.０Ｈｚ), ３.２
９(２Ｈ,ｄ,Ｊ＝１３.２Ｈｚ)例７：２−（８−ヒドロキシ−６−メトキシ−１Ｈ−２
−ベンゾピラン−１−オン−３−イル）−２−シクロプ
ロパンアセタミドの製造

【００７０】

【化１２】

【００７１】８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−３
−シアノメチル−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラ
ン−１−オン１００ｍｇ（０.２９ｍｍｏｌ）をテトラ
ヒドロフラン１ｍｌに溶解し、−３０℃に冷却した後、
６０％油状水素化ナトリウムを２９ｍｇ（０.７３ｍｍ
ｏｌ）加え、さらに１,３−ジヨードプロパンを４０ｍ
ｌ（０.３５ｍｍｏｌ）加え、そのまま１時間撹拌し
た。反応液を酢酸エチル５０ｍｌに希釈し、水、飽和食
塩水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムにて脱水乾燥後、
減圧下に溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムに
供して精製し、８−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−
３−シアノシクロプロピルメチル−６−メトキシ−１Ｈ
−２−ベンゾピラン−１−オンを１５.７ｍｇ得た。

【００７２】上記の方法にて得られた８−ｔ−ブチルジ
メチルシリルオキシ−３−シアノシクロプロピルメチル
−６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−１−オン１
９ｍｇを酢酸１.５ｍｌに溶解し、硫酸０.５ｍｌを加え
て、７０℃で１６時間撹拌した。反応液を酢酸エチル２
５ｍｌに希釈し、水、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸
ナトリウムにて脱水乾燥後、減圧下に溶媒を留去した。
残留物を分取ＴＬＣに供して精製し、標題化合物を１０
ｍｇ得た。

【００７３】¹Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) δ:１０.９４(１
Ｈ,ｓ), ６.５０(１Ｈ,ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ), ６.４５(１
Ｈ,ｓ), ６.３９(１Ｈ,ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ)，５.８３(１
Ｈ,ｓ), ５.５８(１Ｈ,ｓ), ３.８８(３Ｈ,ｓ), ２.７
２-２.７９(２Ｈ,ｍ), ２.４８-２.５５(２Ｈ,ｍ), １.
９８-２.０９(２Ｈ,ｍ)例８：２−（６,８−ヒドロキシ−１Ｈ−２−ベンゾピ
ラン−１−オン−３−イル）プロピオン酸の製造

【００７４】

【化１３】

【００７５】例４の方法に従って得られた８−ｔ−ブチ
ルジメチルシリルオキシ−３−シアノメチルメチル−６
−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−１−オン２８０
ｍｇ（０.７８ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン１６ｍ
ｌに溶解し、０℃に冷却後、１Ｎ三臭化ボロン溶液を４
ｍｌ加え、室温で４８時間撹拌した。反応液をジクロロ
メタン５０ｍｌに希釈し、水、飽和食塩水で洗浄した。
無水硫酸ナトリウムにて脱水乾燥後、減圧下に溶媒を留
去した。残留物をシリカゲルカラムに供して精製し、３
−シアノメチルメチル−６,８−ヒドロキシ−１Ｈ−２
−ベンゾピラン-１−オンを１１６ｍｇ得た。

【００７６】上記の方法にて得られた３−シアノメチル
メチル−６,８−ヒドロキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン
−１−オン１８６ｍｇ（０.８１ｍｍｏｌ）を酢酸２ｍ
ｌに溶解し、濃塩酸を２ｍｌ加え、７０℃で１６時間撹
拌した。反応液を酢酸エチル５０ｍｌに希釈し、水、飽
和食塩水にて洗浄した。無水硫酸ナトリウムにて脱水乾
燥後、減圧下に溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカ
ラムに供して精製し、標題化合物を５４ｍｇ得た。

【００７７】¹Ｈ-ＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ₆) ;δ １０.８８
(２Ｈ,ｓ), ６.６２(１Ｈ,ｓ), ６.４３(１Ｈ,ｄ,Ｊ＝
２.２Ｈｚ), ６.３５(１Ｈ,ｄ,Ｊ＝１.５Ｈｚ)，３.６
５(１Ｈ,ｑ,Ｊ＝７.３Ｈｚ), １.３８(３Ｈ,ｄ,Ｊ＝７.
３Ｈｚ)例９：２−（６,８−ジヒドロキシ−１Ｈ−２−ベンゾ
ピラン−１−オン−３−イル）−２−メチルプロピオン
酸の製造

【００７８】

【化１４】

【００７９】例２の方法に従って得られた８−ｔ−ブチ
ルジメチルシリルオキシ−３−シアノジメチルメチル−
６−メトキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−１−オン１７
８ｍｇ（０.４８ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン８ｍ
ｌに溶解し、０℃に冷却後、１Ｎ三臭化ボロン溶液を２
ｍｌ加え、室温で１９時間撹拌した。１９時間後、１Ｎ
三臭化ボロン溶液を２ｍｌ加え、さらに２４時間撹拌し
た。反応液を塩化メチレン１００ｍｌに希釈し、水、飽
和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムにて脱水乾燥
後、減圧下に溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラ
ムに供して精製し、３−シアノジメチルメチル−６,８
−ヒドロキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−１−オンを９
３ｍｇ得た。

【００８０】得られた３−シアノジメチルメチル−６,
８−ヒドロキシ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−１−オン９
３ｍｇ（０.３８ｍｍｏｌ）を酢酸２ｍｌに溶解し、濃
塩酸を２ｍｌ加え、７０℃で１６時間撹拌した。反応液
を酢酸エチル５０ｍｌに希釈し、水、飽和食塩水にて洗
浄した。無水硫酸ナトリウムにて脱水乾燥後、減圧下に
溶媒を留去し、標題化合物を９０ｍｇ得た。

【００８１】¹Ｈ-ＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ₆) ;δ １０.９０
(１Ｈ,ｓ), １０.８６(１Ｈ,ｓ),６.６８(１Ｈ,ｓ),
６.４８(１Ｈ,ｄ,Ｊ＝２.２Ｈｚ)，６.３５(１Ｈ,ｄ,Ｊ
＝２.２Ｈｚ), １.４４(６Ｈ,ｓ)例１０：マウス背部皮下法を用いる血管新生阻害作用本発明に従う化合物が優れた薬理活性を有することの例
証の一端として、以下にマウスを用いる血管新生阻害試
験について記述する。

【００８２】試験方法は、マウス背部皮下法により、マ
ウス移植腫瘍Ｓ１８０が誘導する腫瘍血管新生に対する
本発明の化合物１および３６の抑制効果を、それぞれ検
討した。すなわち、ミリポアリングの両面にポアサイズ
０.４５μｍのミリポアフィルターを貼って作成したチ
ャンバー内に１×１０⁷個のＳ１８０細胞を注入した。
注入口を塞いだ後、このチャンバーをＩＣＲ系雌性マウ
ス（９〜１０週齢）の背部皮下に作成したエアーサック
内に移植した。被検化合物および溶媒対照の０.５％カ
ルボキシメチルセルロース溶液を移植当日から５日間経
口投与した。移植５日目に皮膚を剥離し、皮膚側のチャ
ンバー接触部分にリングと同形の内径１０ｍｍのＯリン
グをおき、実体顕微鏡下にて観察し、さらに写真撮影を
行った。得られた写真より血管新生の強度を腫瘍血管に
特有な長さ３ｍｍ以上の屈曲した血管の数に基づいて
０、１、２、３の４段階に分け、下記基準に基づいてス
コア化した。

【００８３】スコア０：腫瘍血管の数が０１：腫瘍血管の数が１本２：腫瘍血管の数が２本３：腫瘍血管の数が３本以上結果を下記表ＩＩに示す。

【００８４】

【表１０】

【００８５】上記表より、化合物３６は１０ｍｇ／ｋｇ
および３０ｍｇ／ｋｇの経口投与で、また化合物１は１
０ｍｇ／ｋｇの経口投与で、マウス背部皮下法において
腫瘍細胞Ｓ１８０が誘導する血管新生をそれぞれ有意に
阻害することがわかる。

【００８６】

【発明の効果】本発明によれば、製薬学的組成物、例え
ば血管新生阻害剤の従来のイソクマリン誘導体とは異な
る生体内動態を示す有効成分として利用できる新規イソ
クマリン誘導体が提供される。また、これらの誘導体を
効率的に製造するための新規合成中間体も提供される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者井口博史神奈川県横浜市保土ヶ谷区桜ケ丘１−37− 10 (72)発明者吉岡武男神奈川県綾瀬市吉岡1782−10 (72)発明者石塚雅章静岡県三島市西若町６番５号 (72)発明者竹内富雄東京都品川区東五反田５−１−11 701− Ａ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式（I）で表されるイソクマリン誘
導体または適当な場合にはその塩。式（Ｉ）：【化１】式中、Ａは水素原子または低級アルキル基を示し、Ｂは
水素原子または水酸基の保護基を示し、Ｒ¹はシアノ
基、Ｎ−モノ−もしくはジ−アルキル置換されていても
よいカルバモイル基またはカルボキシル基を示し、Ｒ²
およびＲ³は、相互に独立して、水素、低級アルキル基
またはアリール−低級アルキル基を示し、ここでアリー
ル部分は、場合によって１個以上の置換基で置換されて
いてもよく、あるいはＲ²とＲ³は、それらが結合する炭
素原子と一緒になって、３〜７員のいずれかの脂環式環
を形成するＣ_2-6アルキレン基を示すが、但し、Ａが低
級アルキル基で、Ｒ²およびＲ³が同時に水素原子を示す
か、または一方が水素原子で、他方が低級アルキル基を
示す場合には、Ｒ¹はシアノ基またはカルボキシル基以
外の基である。
【請求項２】Ａが水素原子または低級アルキル基であ
り、Ｂが水素原子であり、Ｒ¹がカルボキシル基または
Ｎ−モノ−もしくはジ−低級アルキル置換されていても
よいカルバモイル基である請求項１記載の化合物。
【請求項３】Ａが低級アルキル基であり、Ｂが水酸基
の保護基であり、Ｒ¹がシアノ基である請求項１記載の
化合物。
【請求項４】請求項２記載の化合物を有効成分として
含む医薬製剤。