JPH1036345A - カルボン酸スクシンイミジルエステルの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 カルボン酸スクシンイミジルエステルの製造
方法 【解決手段】 Ｎ- ヒドロキシスクシンイミドをカルボ
ン酸及び式Ｉ 【化１】 （式中Ｒ₁ 及びＲ₂ は同一か又は異なり、Ｃ₂-Ｃ₆ アル
キル基又はフエニル基を示すか、あるいはＲ₁ 及びＲ₂
は一緒になってＣ₆ アリール残基を形成する。）のハロ
ゲンリン酸エステルと、塩基の存在下に希釈剤中で０℃
〜１００℃の温度で反応させ、対応するカルボン酸スク
シンイミジルエステルを単離することを特徴とする、カ
ルボン酸スクシンイミジルエステルを製造する方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術】スクシンイミジルエステルは、特
に活性化されたアシル誘導体として、特に他のアシル化
剤、たとえば酸クロライド又は無水物を出発- 又は目的
化合物の不安定性によって使用できない場合に使用され
る。これは特にペプチド化学の領域に対して適用され
る。共有結合のペプチド結合を結合するために、活性化
されたカルボキシ- 成分が必要である。従来最もしばし
ば使用されるカルボキシ活性化法は、対応するカルボン
酸とカルボジイミド、たとえばＮ，Ｎ'-ジシクロヘキシ
ルカルボジイミド（ＤＣＣ）、及びＮ- ヒドロキシスク
シンイミドとの反応によるサクシンイミジルエステルの
形成に適する。この方法の欠点は、一方でカップリング
試剤ＤＣＣでそのアレルゲン性及び高い価格によって、
他方でその際に生じる副生成物Ｎ，Ｎ'-ジシクロヘキシ
ル尿素──これは第一にスクシンイミジルエステルを汚
染し、第二にこの問題を解決しなければならない──に
ある。この理由から、ＤＣＣ／Ｎ- ヒドロキシスクシン
イミド系を代えることが試みられている。可能な代替法
は、ハロゲンリン酸エステル／Ｎ- ヒドロキシスクシン
イミド／塩基のタイプの系である。

【０００２】Tetrahedron Letters 第２１巻、第１４６
７−１４６８頁、（１９８０）又はChemical Abstracts
第９５巻、２０３７４６から、ジフエニルスクシンイ
ミドイルホスフアート（ＳＤＰＰ）の製造方法は公知で
ある。この方法で、ジフエニルクロルホスフアートとヒ
ドロキシスクシンイミドとをショッテン- バウマン(Sch
otten-Baumann)- 反応に対する反応条件下で水性又は有
機溶剤、たとえばメチレンクロライド中で室温で反応さ
せる。ＳＤＰＰを単離し、場合により再結晶し、次いで
Ｚ- 又はＢｏｃ- 保護されたアミノ酸と塩基及びアセト
ニトリルの存在下に反応させ、対応するアミノ酸- スク
シンイミジルエステル──これはペプチドカップリング
に対する活性化されたカルボキシ成分として使用される
──とする。

【０００３】J. Org. Chem.,第４７巻、第１５、（１９
８２）第２９８５頁から、上記方法により改良されたＳ
ＤＰＰの製造方法は公知である。この方法によればＳＤ
ＰＰをより慎重な条件下で、すなわち氷／食塩溶液によ
る冷却下に製造する。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、簡単
な方法でかつＳＤＰＰの単離をせずに所望のスクシンイ
ミジルエステルのより一層高い全収量を生じ、多くのカ
ルボン酸を使用することができる、スクシンイミジルエ
ステルの製造方法を見い出すことである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】この課題は、カルボン酸
スクシンイミジルエステルへの変換を一槽反応でかつ１
００℃までの温度で実施し、この際反応成分の添加を任
意の順序で行うことができる方法によって解決されうる
ことは、予想されなかったことである。したがって本発
明の対象は、Ｎ- ヒドロキシスクシンイミドをカルボン
酸及び式Ｉ

【０００６】

【化２】

【０００７】（式中Ｒ₁ 及びＲ₂ は同一か又は異なり、
Ｃ₂-Ｃ₆ アルキル基又はフエニル基を示すか、あるいは
Ｒ₁ 及びＲ₂ は一緒になってＣ₆ アリール残基を形成す
る。）のハロゲンリン酸エステルと、塩基の存在下に希
釈剤中で０℃〜１００℃の温度で反応させ、対応するカ
ルボン酸スクシンイミジルエステルを単離することを特
徴とする、カルボン酸スクシンイミジルエステルを製造
する方法である。

【０００８】本発明の方法は、カルボン酸のスクシンイ
ミジルエステルの製造に適する。その際カルボン酸は、
すべての一般式 Ａ−ＣＯＯＨ ＩＩ の化合物を意味し、これらは本発明の反応条件下で安定
なスクシンイミジルエステルを生じる。

【０００９】この場合Ｎ- 置換されたアミノ酸のスクシ
ンイミジルエステルが特に重要である。式ＩＩに於て、
残基Ａは飽和又は１- 又は数回不飽和の、線状、分枝状
又は環状アルキル基、アリール基、アリールアルキル基
又はヘテロ環状基を示すことができる。

【００１０】残基Ａは置換されていないか又は反応条件
下で不活性基によって１- 又は数回置換されていてよ
い。置換基として、たとえばハロゲン、たとえば塩素又
は臭素、ヒドロキシ基、ニトロ基、（Ｃ₁-Ｃ₄)アルキル
基、（Ｃ₁-Ｃ₄)アルコキシ基、オキソ基、エステル基又
は第二又は第三アミン基が挙げられる。更に化合物はジ
サクシンイミジルエステルの生成を生じる様に更に２つ
目のカルボキシ基を有することができる。

【００１１】適するカルボン酸の例は次の通りである：
線状、分枝状又は環状、脂肪族、飽和の、非置換のＣ-
原子数２〜６０のモノ-又はジカルボン酸、たとえば酢
酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、バレリアン酸、イ
ソバレリアン酸、トリメチル酢酸、エチル- メチル酢
酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン
酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ピバリン酸、ｎ- ヘ
キサコン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピ
ン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼリン酸、セバシン
酸、線状又は分枝状、脂肪族、１- 又は数回不飽和の、
非置換のＣ- 原子数２〜２０のモノ- 又はジカルボン
酸、たとえばアクリル酸、メタアクリル酸、クロトン
酸、イソクロトン酸、ビニル酢酸、油酸、ソルビン酸、
リノール酸、リノレン酸、マレイン酸、フマール酸、ア
セチレンジカルボン酸、ヘキシンジ酸、ヘキセンジ酸、
非置換の、芳香族又は芳香脂肪族Ｃ- 原子数７〜２０の
モノ- 又はジカルボン酸、たとえば安息香酸、フエニル
酢酸、ケイヒ酸、フタル酸、イソフタル酸、テレフタル
酸、１- 又は２- ナスタリンカルボン酸、１，５- ナフ
タリンジカルボン酸又は非置換のヘテロ環状モノ- 又は
ジカルボン酸、たとえばピリジンカルボン酸、２，３-
ピリジンカルボン酸、キナルジン酸。置換されたカルボ
ン酸は、たとえばハロゲンカルボン酸、たとえばモノク
ロ酢酸、クロルプロピオン酸、ジクロク酢酸、トリクロ
ル酢酸、クロルバレリン酸、ヒドロキシカルボン酸、た
とえば乳酸、γ- ヒドロキシバレリン酸、グリコール
酸、ブトウ酸、サリチル酸、没食子酸、ｐ- クマール
酸、カフエ酸、マンデル酸、オキソカルボン酸、たとえ
ばグリオキシ酸、ピルビン酸、アセト酢酸、レヴリン
酸、プルビン酸、Ｅ- ９- オキソ -２- デセン酸、Ｎ-
置換されたアミノ酸、たとえばＺ- フエニルアラニン、
Ｚ- アスパラギン酸-β- ベンジルエステル、Ｎ- フエ
ニルグリシン、Ｚ- バリン、Ｎ-(１- エトキシカルボニ
ル -３- フエニルプロピル）アラニン、並びに更にＮＯ
₂ 、第二又は第三。アミン基、エステル基、（Ｃ₁-Ｃ₄)
アルキル- 又はアルコキシ基によって置換されたカルボ
ン酸、たとえばニトロ安息香酸、アセチルサリチル酸、
トルイル酸、等々である。

【００１２】本発明の方法に於て、対応するカルボン酸
をＮ- ヒドロキシスクシンイミド及び式Ｉのハロゲンリ
ン酸エステルと塩基の存在下に反応させる。ハロゲンリ
ン酸エステルとして式Ｉ（式中Ｒ₁ 及びＲ₂ は同一か又
は異なり、Ｃ₂-Ｃ₆-アルキル基又はフエニル基を示す
か、あるいはＲ₁ 及びＲ₂ は一緒になってＣ₆-アリール
残基を形成する。）化合物が適する。

【００１３】これに関する例は、ジフエニルクロルホス
フアート、ジエチルクロルホスフアート、ジブチルクロ
ルホスフアート及びレゾルシニルクロルホスフアートで
ある。ジフエニル又はジブチルクロルホスフアートが好
ましく、特にジフエニルクロルホスフアートを使用する
のが好ましい。反応に対する塩基として炭酸塩、たとえ
ば炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム
等々、水酸化物、たとえば水酸化ナトリウム、水酸化カ
リウム等々、アミン、たとえばトリエチルアミン、Ｎ-
メチルピロリドン、Ｎ- メチル- 又はＮ- エチル- モル
ホリン等々が適する。

【００１４】反応の際に、個々の反応成分の添加の順序
は任意に変化することができる。たとえば先ず反応成分
の１種のみ又は２種を希釈剤中に加える。その際塩基を
これらの化合物と同時に加えるか、前もって配量添加す
る。最後にまだ欠けている反応成分の添加は好ましくは
予め加えられた希釈剤中で任意の順序で行う。しかした
とえば先ず塩基を適当な希釈剤中に加え、その後Ｎ- ヒ
ドロキシスクシンイミド及びハロゲンリン酸エステルを
攪拌下に加え、その後に対応するカルボン酸を予め加え
られた希釈剤中に加え、混合することもできる。しかし
先ず塩基、Ｎ-ヒドロキシスクシンイミド及びカルボン
酸をバッチ中に入れ、その後ハロゲンリン酸エステル
を、好ましくは予め加えられた希釈剤中で反応混合物に
添加することもできる。

【００１５】反応は、等量の反応物を用いて行うのが好
ましく、過剰のＮ- ヒドロキシスクシンイミド、ハロゲ
ンリン酸エステル及び（又は）塩基が有用である。しか
だってカルボキシル基１モルあたり、Ｎ- ヒドロキシス
クシンイミド１〜２モル、特に好ましくは１〜１．５モ
ル、ハロゲンリン酸エステル１〜２モル、特に好ましく
は１〜１．５モル及び塩基２〜５モル、特に好ましくは
２〜４モルを添加する。より多くの量のＮ- ヒドロキシ
スクシンイミド、塩基又はハロゲンリン酸エステルを所
望の場合に使用することもできる。

【００１６】希釈剤として水とほとんど又は全く混和し
得ない有機希釈剤、たとえば酢酸エチル、メチレンクロ
ライド、メチル -ｔ.-ブチルエーテル等々又は水と混和
し得る有機希釈剤を、たとえばアセトン、アセトニトリ
ル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン等々を使用
することができる。水と混和しうる希釈剤を使用した場
合、場合により水／希釈剤混合物を使用することができ
る。この際溶剤の選択は、使用される反応物及び所望の
目的生成物の性質に依存する。

【００１７】反応温度は０〜１００℃であることができ
る。反応温度は好ましくは１０〜８０℃、特に好ましく
は２０〜６０℃である。所望の場合より低い温度も使用
できるが、その場合反応が徐々に進行する。反応の際に
反応混合物の温度上昇が生じうるが、外部のエネルギー
供給によって所望の反応温度を調整することもできる。

【００１８】その都度使用されるカルボン酸の化学構造
に従って、得られた反応混合物を反応の終了のために２
〜３分〜数時間反応温度に保つ。次いで反応混合物を必
要に応じて、好ましくは約１５〜３０℃に冷却し、所望
の場合にはカルボン酸スクシンイミジルエステルを単離
する。上記方法に従って得られたカルボン酸スクシンイ
ミジルエステルの単離は、スクシンイミジルエステルの
性質によって変化することができる。反応を水と全く又
はほとんど混和し得ない希釈剤中で実施した場合、本発
明の方法に従って得られた反応混合物を塩の分離のため
に水を加え、それによって相分離が生じ、対応するカル
ボン酸スクシンイミジルエステルを有機相から単離す
る。有機相からエステルを単離するために、これを常法
で水性相から分離し、洗滌し、場合により乾燥し、次い
で希釈剤を、たとえば蒸留によって、場合により減圧下
に除去する。

【００１９】反応のために水と混和しうる希釈剤を使用
した場合、希釈剤を先ず除去する。次いで残存する残留
物に水及び水と全く又はほとんど混和し得ない希釈剤を
加える場合、それによって相分離が生じ、エステルを有
機相から上述した様に単離する。あるいは適する希釈
剤、たとえば無機塩、たとえば塩化ナトリウム又は硫酸
ナトリウムの水溶液の添加によって相分離し、副生成物
のスクシンイミジルエステルの分離を生じさせる。

【００２０】得られた粗生成物を、所望の場合には更に
常法、たとえば再結晶、クロマトグラフィーによって精
製することができる。別の単離法に於て、たとえば反応
後に変られた反応混合物を蒸発し、残留物を適当な希釈
剤、たとえばエタノール中に取り、この際もう１つの反
応生成物が溶解し、カルボン酸スクシンイミジルエステ
ルが固体として残存する。次いでスクシンイミジルエス
テルを濾去し、後洗滌するか又は再結晶し、乾燥する。

【００２１】しかし本発明の方法に従って得られた反応
混合物は、次の反応のために、たとえばペプチドカップ
リング反応又は適する求核試薬を用いる他のアシル化反
応のためにカルボン酸スクシンイミジルエステルの後処
理又は単離をすることなく再使用される。たとえばカル
ボン酸スクシンイミジルエステルを含有する有機相を、
前もって後処理することなく、他の反応生成物を含有す
る水性相の分離後直ちにすぐ次の工程に使用することが
できる。夫々の次の反応によって、場合により有機相の
希釈剤を除去し、未精製のカルボン酸スクシンイミジル
エステルを夫々の次の反応に適する希釈剤中に溶解し、
対応する求核試薬、たとえばアミノ酸、アミノ酸誘導体
又はアミンと反応させ、その後所望の二次生成物を反応
混合物から単離する。調整すべき反応パラメーターは、
その都度選ばれる二次反応に左右され、したがって広い
範囲で変えることができる。

【００２２】二次反応としてペプチドカップリングを実
施するのが好ましい。その際カルボン酸スクシンイミジ
ルエステルをアミノ酸のアミノ基又はアミノ酸誘導体と
Ｎ-ヒドロキシスクシンイミドの離脱下にカップリング
して、対応するペプチドが生じる。本発明の方法によっ
て、カルボン酸スクシンイミジルエステル及びその二次
生成物が簡単な一槽反応で高収率及び優れた純度で得ら
れる。

【００２３】

【実施例】以下に、本発明を例によって説明する。 〔例１〕滴下漏斗、温度計、ＫＰＧ- 攪拌器及び導入管
を有する冷却器を備えた３頸丸底フラスコ中に、炭酸水
素ナトリウム３．４５ｇ（０．０４１モル）、Ｈ₂ Ｏ
０．１０ｇ及びアセトン３０ｍｌを予め存在させる。そ
の後（Ｓ，Ｓ)-Ｎ-(１-エトキシカルボニル -３- フエ
ニルプロピル）アラニン（ＥＣＰＡ）２．７９ｇ（０．
０１０モル）及びＮ- ヒドロキシスクシンイミド１．２
０ｇ（０．１０モル）を加え、反応混合物を５０℃に加
熱する。次いで１０分以内にジフエニルクロルホスフア
ート３．２２ｇ（０．０１２モル）を滴下し、得られた
反応混合物を１時間５０℃で攪拌する。その後水浴中で
２０℃に冷却し、アセトンを水流ポンプ減圧で還流冷却
器を介して反応フラスコ中で除去する。次いで残留物に
酢酸エチル３０ｍｌ及びＨ₂ Ｏ３０ｍｌを加える。分液
漏斗中で相分離を行った後、有機相をＮａＨＣＯ₃-溶液
３０ｍｌで抽出し、分析用（p.a.) Ｎａ₂ ＳＯ₄ を用い
て乾燥し、４０℃及び２０ミリバールで回転する。 ＥＣＰＡ- スクシンイミジルエステルの収量：３．２５
ｇ（理論値の８６．３％） 〔例２〕Ｎ- ヒドロキシスクシンイミド１．４ｇ（０．
０１２モル）、炭酸水素ナトリウム３．５ｇ（０．０４
１モル）及び酢酸エチル１０ｍｌを予め存在させる。次
いでジフエニルクロルホスフアート３．８ｇ（０．０１
４モル）を酢酸エチル１０ｍｌ中に滴下する。その後酢
酸エチル３０ｍｌ中にＥＣＰＡ２．８ｇ（０．０１０モ
ル）を有する懸濁液を５０℃で加え、１．５時間室温で
攪拌する。得られた反応混合物に蒸留水３０ｍｌを加え
る。その後相分離が行われる。次いで有機相を１回炭酸
水素ナトリウム３０ｍｌで抽出し、乾燥し約５０℃及び
２０ミリバールで回転する。 ＥＣＰＡ- スクシンイミジルエステルの収量：３．０ｇ
（理論値の８０％） 〔例３〕Ｎ- ヒドロキシサクシンイミド２．４２ｇ
（０．０２１モル）及びトリエチルアミン５．０６ｇ
（０．０５０モル）を、酢酸エチル５ｍｌ中に予め存在
させ、室温で攪拌する。この懸濁液に、固形の４- トル
イル酸２．７２ｇ（０．０２０モル）を５分間で加え、
次いでジフエニルクロルホスフアート５．６４ｇ（０．
０２１モル）の溶液を２０分以内で滴下する。この際反
応混合物は約３５℃に発熱する。

【００２４】反応の終了までに、１時間室温で攪拌す
る。次いで反応混合物を酢酸エチル１００ｍｌで希釈
し、有機相を夫々５０ｍｌの水、２Ｎ- 塩酸及び１０％
炭酸水素ナトリウム水溶液で洗滌し、次いで蒸発する。
粗生成物４．６５ｇを単離し、これを次いでメチル -
ｔ.-ブチルエーテル２０ｍｌで３０分間室温で攪拌す
る。白色結晶生固体を濾過し、５０℃及び１０ミリバー
ルで乾燥する。４- トルイル酸スクシンイミジルエステ
ル４．２８ｇ（９４％）を単離する。 融点：１７６−１８０℃（分解） 〔例４〕キナルジン酸１．７３ｇ（０．０１０モル）を
アセトン３０ｍｌ中を予め存在させ、固形のＮ- ヒドロ
キシスクシンイミド１．２７ｇ（０．１１モル）を加え
る。次いでこの懸濁液に、アセトン１０ｍｌ中にトリエ
チルアミン２．５３ｇ（０．０２５モル）を有する溶液
を５分間で加え、室温で攪拌する。３０分後、アセトン
１０ｍｌ中にジフエニルクロルホスフアート３．２２ｇ
（０．０１２モル）を有する溶液を１０分以内で滴下
し、その際溶液は弱い加熱下に赤色に呈色し、塩が沈澱
する。反応が終了するまで２０時間室温で攪拌する。得
られた懸濁液を蒸発し、エタノール５０ｍｌ中に取り、
室温で１時間攪拌する。次いで固体を濾過し、エタノー
ル２×３ｍｌで後洗滌し、１時間１ミリバールで乾燥す
る。キナルジン酸スクシンイミジルエステルのバラ色呈
色した粉末２．４５ｇ（９１％）が得られる。 融点：１９３−１９６℃（分解） 〔例５〕Ｎ- ヒドロキシスクシンイミド１．３８ｇ
（０．０１２モル）及び炭酸水素ナトリウム３．３６ｇ
（０．０４０モル）をアセトニトリル１０ｍｌ中に予め
存在させ、室温で攪拌する。アセトニトリル８０ｍｌ中
にキナルジン酸１．７３ｇ（０．０１０モル）を有する
溶液を３０分以内で加える。得られたバラ色呈色した懸
濁液を１６時間室温で攪拌し、次いで更に２４時間水浴
中で４０℃に加熱する。

【００２５】反応の終了後、反応混合物を減圧で蒸発
し、残留物をジクロルメタン５０ｍｌ中に取る。懸濁液
を濾過し、濾過残留物をジクロルメタン２×２０ｍｌで
後洗滌する。一緒にされた濾液を夫々１００ｍｌの水５
％ＮａＨＣＯ₃-水溶液、次いで再度水で洗滌する。有機
相の蒸発後、粗生成物２．０ｇが得られる。これをジク
ロルメタン３０ｍｌとｎ- ヘキサン１５０ｍｌから成る
混合物中で再沈澱する。沈澱を濾過し、ｎ- ヘキサン５
ｍｌで後洗滌し、減圧で乾燥する。

【００２６】キナルジン酸スクシンイミジルエステルの
ベージュ色固体１．９ｇ（７０％）が得られる。 融点：１９１−１９６℃（分解） 〔例６〕キナルジン酸１．７３ｇ（０．０１０モル）及
びＮ- ヒドロキシスクシンイミド１．３８ｇ（０．０１
２モル）をアセトニトリル１０ｍｌ中に予め存在させ、
室温で攪拌する。この懸濁液に、アセトニトリル１０ｍ
ｌ中にトリエチルアミン２．５３ｇ（０．０２５モル）
を有する溶液を１０分以内で加え、室温で３０分攪拌す
る。次いでアセトニトリル１０ｍｌ中にジフエニルクロ
ルホスフアート３．２２ｇ（０．０１２モル）を有する
溶液を１０分以内で滴下する。得られた暗赤色呈色した
懸濁液を２０時間室温で攪拌する。反応の終了後、反応
混合物を減圧で蒸発し、紫色残留物をジクロルメタン１
００ｍｌ中に取る。有機相を夫々１００ｍｌの水、１Ｎ
- 塩酸及び希ＮａＨＣＯ₃-溶液で洗滌する。有機相の蒸
発後、粗生成物２．５５ｇが得られる。これをエタノー
ル２５ｍｌ中で２．５時間十分に攪拌する。残留物を濾
過し、エタノール４ｍｌで後洗滌し、減圧で乾燥する。
キナジン酸スクシンイミジルエステルの紫色固体１．８
５ｇ（６９％）が得られる。 融点：１９０−１９４℃（分解） 〔例７〕キナルジン酸１．７３ｇ（０．０１０モル）及
びＮ- ヒドロキシスクシンイミド１．２７ｇ（０．０１
１モル）をアセトン３０ｍｌ中を予め存在させ、固形の
Ｎ- ヒドロキシスクシンイミド１．２７ｇ（０．１１モ
ル）を加える。この懸濁液にアセトン１０ｍｌ中にトリ
メチル -２- ピロリドン２．４８ｇ（０．０２５モル）
を有する溶液を５分以内で加え、室温で攪拌する。３０
分後、アセトン１０ｍｌ中にジフエニルクロルホスフア
ート３．２２ｇ（０．０１２モル）を有する溶液を滴下
する。得られた懸濁液を６９時間室温で攪拌する。反応
の終了後、帯黄色反応混合物を蒸発し、残留物をジクロ
ルメタン１００ｍｌ中に取り、有機相を夫々６０ｍｌの
水、２Ｎ- 塩酸、飽和ＮａＨＣＯ₃-溶液、次いで再度水
で洗滌する。有機相の蒸発後、残存する残留物をエタノ
ール２０ｍｌ中で３０分間十分に攪拌し、濾過し、エタ
ノール３ｍｌで後洗滌し、４時間１０ミリバールで３０
℃で乾燥する。キナルジン酸スクシンイミジルエステル
の紫色固体０．９５ｇ（３５％）が得られる。 融点：１９２−１９６℃（分解） 〔例８〕Ｚ- バリン２．５１ｇ（０．０１０モル）を、
酢酸エチル３０ｍｌ中に予め存在させ、固形のＮ- ヒド
ロキシスクシンイミド１．２７ｇ（０．０１１モル）を
加える。この懸濁液に酢酸エチル１０ｍｌ中にトリエチ
ルアミン２．５３ｇ（０．０２５モル）を有する溶液を
加え、室温で３０分間攪拌する。次いで酢酸エチル１０
ｍｌ中にジフエニルクロルホスフアート３．２２ｇ
（０．０１２モル）を有する溶液を滴下する。その際あ
らかじめ澄明な溶液から３２℃に弱く加熱して、濃厚な
懸濁液が生じ、これを２３時間室温で攪拌し、次いで濾
過する。濾過残留物を２回夫々１０ｍｌの酢酸エチルで
後洗滌する。一緒にされた濾液を夫々２５ｍｌの水５％
ＮａＨＣＯ₃-溶液、次いで再度２回２５ｍｌの水で洗滌
する。相分離後、酢酸エチル相を硫酸ナトリウムを介し
て乾燥し、濾過し、希釈剤を減圧で除去する。白色固体
３．２５ｇが得られる。この２．９８ｇがジクロルメタ
ン５ｍｌとジイソプロピルエーテル１５ｍｌとの混合物
から再沈澱し、それによってＺ- バリンスクシンイミジ
ルエステルの微細な白色結晶２．４１ｇ（７６％）が得
られる。 融点：１１７−１２０℃ 〔例９〕Ｚ- フエニルアニリン５．９９ｇ（０．０２０
モル）、Ｎ- ヒドロキシスクシンイミド２．４２ｇ
（０．０２１モル）及び固形の炭酸水素ナトリウム６．
７２ｇ（０．０８０モル）酢酸エチル１２ｍｌ中に予め
存在させ、室温で攪拌する。次いで酢酸エチル４０ｍｌ
中にジフエニルクロルホスフアート５．６４ｇ（０．０
２１モル）を有する溶液を２０分以内に滴下し、この際
懸濁液を濃縮する。酢酸エチル５０ｍｌで希釈後、反応
混合物をＤＣ- コントロールを用いて更なる反応が認め
られなくなるまで２時間５０℃に加熱する。反応混合物
を夫々５０ｍｌの水、飽和ＮａＨＣＯ₃-溶液で、再度水
で洗滌する。相分離を行った後、酢酸エチル相を５０℃
で減圧で蒸発する。結晶性粗生成物４．８１ｇが得ら
れ、これを２時間室温でメチル -ｔ.-ブチルエーテル２
０ｍｌと攪拌する。Ｚ- フエニルアラニンスクシンイミ
ジルエステルの収量は４．２９ｇ（５４％）である。 融点：１３５−１３９℃ 〔例１０〕Ｚ- アスパラギン酸 -β- ベンジルエステル
１．０７ｇ（０．０３０モル）を酢酸エチル１０ｍｌ中
を予め存在させ、固形のＮ- ヒドロキシスクシンイミド
０．３８ｇ（０．００３３モル）を加える。次いでこの
懸濁液に、酢酸エチル中にトリエチルアミン０．７６ｇ
（０．００７５モル）を有する溶液を加え、室温で１０
分間攪拌する。その後、酢酸エチル３ｍｌ中にジフエニ
ルクロルホスフアート０．９７ｇ（０．００７５モル）
を有する溶液を滴下し、それによって以前澄明な溶液か
ら最高３２℃に弱く加速して、濃厚な懸濁液が生じる。
これを反応を終了させるために２４時間室温で攪拌し、
次いで濾過する。濾過残留物を２回夫々３ｍｌの酢酸エ
チルで後洗滌する。一緒にされた濾液を夫々２回２５ｍ
ｌの水、５％ＮａＨＣＯ₃-溶液、次いで再度５０ｍｌの
水で洗滌する。相分離後、酢酸エチル相を硫酸ナトリウ
ムを介して乾燥し、濾過し、希釈剤を減圧で除去する。
無色の、粘稠性粗生成物１．３７ｇを単離し、これをジ
クロルメタン２．５ｍｌとジイソプロピルエーテル２５
ｍｌの混合物で、並びにヘキサン１０ｍｌで攪拌し、次
いでジイソプロピルエーテル５０ｍｌ中で４０℃に加熱
して結晶化する。濾過し、ジイソプロピルエーテル２×
５ｍｌで洗滌し、減圧で乾燥した後、白色結晶性Ｚ- ア
スパラギン酸 -β- ベンジルエステルスクシンイミジル
エステル０．９８ｇ（７２％）が得られる。 融点：８２−８４℃ 〔例１１〕アクリル酸０．７２ｇ（０．０１０モル）を
アセトン３０ｍｌ中を予め存在させ、固形のＮ- ヒドロ
キシスクシンイミド１．２７ｇ（０．１１モル）を加え
る。生じる溶液に固形の炭酸水素ナトリウム３．３６ｇ
（０．０４０モル）を加え、得られた白色懸濁液を室温
で攪拌する。次いでアセトン１０ｍｌ中にジフエニルク
ロルホスフエート３．２２ｇ（０．０１２モル）を有す
る溶液を滴下し、反応混合物を２４時間室温で攪拌し更
に３時間５０℃で攪拌する。この際濃縮された懸濁液を
アセトン２５ｍｌで希釈する。次いで希釈剤を減圧で除
去し、残留物をジクロルメタン６０ｍｌ中に取る。未溶
解固体を濾過し、２回夫々１０ｍｌのジクロルメタンで
洗滌する。一緒にされたジクロルメタン相を水４０ｍｌ
で洗滌し、相分離の後減圧で蒸発する。固形粗生成物
１．５３ｇが得られ、これを３時間ジイソプロピルエー
テル１５ｍｌと共に攪拌する。残存する白色固体を濾過
し、２回夫々３ｍｌのジイソプロピルエーテルで洗滌
し、減圧乾燥する。アクリル酸サクシンイミジルエステ
ル１．１ｇ（６５％）が得られる。 融点：６３−６８℃ 〔例１２〕Ｎ- ヒドロキシスクシンイミド１．２７ｇ
（０．０１１モル）を酢酸エチル１０ｍｌ中に予め存在
させ、酢酸エチル１０ｍｌ中にジフエニルクロルホスフ
アート３．２２ｇ（０．０１２モル）を有する溶液を加
え、次いで酢酸エチル１０ｍｌ中にトリエチルアミン
２．５３ｇ（０．０２５モル）を有する溶液を１０分以
内で滴下する。この際温度は４１℃に上昇する。濃厚な
白色懸濁液が生じ、これに酢酸エチル１０ｍｌ中に酢酸
０．６ｇ（０．０１モル）を有する溶液を加え、１６時
間４５〜５５℃に加熱する。反応の終了後、固体を濾過
し、酢酸エチル２×３ｍｌで後洗滌する。一緒にされた
濾液を減圧で蒸発し、残存する半結晶性残留物をエタノ
ール２０ｍｌと共に３０分間攪拌する。得られた白色固
体を濾過し、エタノール２×３ｍｌで洗滌し、乾燥吸引
し、次いでイソプロパノール１０ｍｌと共に攪拌する。
濾過し、イソプロパノール２×２ｍｌで洗滌し、減圧で
乾燥した後、白色酢酸スクシンイミジルエステル１．１
ｇ（７０％）が得られる。 融点：１３０−１３４℃ 〔例１３〕Ｎ- ヒドロキシスクシンイミド２．４２ｇ
（０．０２１モル）、４- トルイル酸２．７２ｇ（０．
０２１モル）及びトリエチルアミン４．０５ｇ（０．０
４０モル）を、酢酸エチル２０ｍｌ中に予め存在させ、
室温で攪拌する。この懸濁液に、２０分以内で酢酸エチ
ル４０ｍｌ中にジフエニルクロルホスフアート５．６４
ｇ（０．０２１モル）を有する溶液を滴下し、この際反
応混合物が約３５℃に熱せられる。反応の終了のため
に、更に１時間室温で攪拌する。次いで反応混合物を酢
酸エチル５０ｍｌで希釈し、夫々５０ｍｌの水、２Ｎ塩
酸、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で、再度水で洗滌す
る。有機相を分離し、トリエチルアミン４．０５ｇ
（０．０４０モル）及びＬ- バリンメチルエステル２．
６２ｇ（０．０２０モル）を加える。反応混合物を１．
５時間室温で攪拌し、次いで３．５時間還流加熱する。
室温で一晩攪拌後、油状の重い第二相を分離し、酢酸エ
チル- 相を夫々５０ｍｌの水、飽和ＮａＨＣＯ₃-溶液
で、更に３回夫々５０ｍｌの水で洗滌する。希釈剤を減
圧で除去した後、粗生成物３．４１ｇが残存する。この
３．０１ｇを１時間メチル -ｔ.-ブチルエーテル１０ｍ
ｌと共に攪拌する。残留物の濾過、５０℃で減圧での乾
燥後、白色結晶性４- トルイル酸 -Ｌ- バリンメチルエ
ステルアミド２．４２ｇ（５５％）が得られる。 融点：９８−１００℃ 〔例１４〕例１又は２によって得られたＥＣＰＡ- スク
シンイミジルエステル５．６５ｇ（０．０１５モル）を
エタノール４５ｍｌ中に溶解し、５分以内に水５．６５
ｍｌ中にＬ- プロリン３．４ｇ（０．０２９モル）を有
する溶液を、次いで１５分以内にトリエチルアミン８．
３ｍｌ（０．０６０モル）を加える。その際温度が２２
℃から３０℃に上昇する。次いで溶液を一晩室温で攪拌
し、次いでエタノールを４０℃及び２０ミリバールで回
転する。残留物を水１７ｍｌ中に溶解し、その後２回夫
々５５ｍｌ、１回２５ｍｌのメチル -ｔ.-ブチルエーテ
ル（ＭＴＢＥ）で抽出する。３つのＭＴＢＥ- 相を一緒
にし、４０℃及び２０ミリバールで回転する。その量は
０．９０ｇである。

【００２７】水性相をｐＨ６．３の２Ｍ硫酸６ｍｌでｐ
Ｈ２．８に調整する。次いで分析用硫酸ナトリウム１．
７ｇ（Ｈ₂ Ｏに対して０．７モル）を加える。次いで３
回夫々８０ｍｌ、２回夫々３０ｍｌの酢酸エチルで抽出
する。一緒にされた酢酸エチル- 相を硫酸ナトリウムで
乾燥し、４０℃及び２０ミリバールで回転する。（Ｓ，
Ｓ，Ｓ)-Ｎ- 〔（１- エトキシカルボニル -３- フエニ
ルプロピル)-アラニル〕- プロリンの量は５．２５ｇ
（９２．９％）である。 〔例１５〕例３と同様に、Ｎ- ヒドロキシスクシンイミ
ド２．７６ｇ（０．０２４モル）及びトリエチルアミン
５．０６ｇ（０．０５０モル）を酢酸エチル５ｍｌ中に
予め存在させ、室温で攪拌する。この懸濁液に、固形の
４- トルイル酸２．７２ｇ（０．０２０モル）を５分間
で加え、次いでジフエニルクロルホスフアート３．４７
ｇ（０．０２０モル）の溶液を２０分以内で滴下する。
この際反応混合物は約３５℃に発熱する。

【００２８】反応の終了までに、３時間室温で攪拌す
る。反応混合物の後処理を例３と同様に行う。粗４- ト
ルイル酸スクシンイミジルエステル２．８ｇを単離す
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ｃ０７Ｂ 61/00 ３００ Ｃ０７Ｂ 61/00 ３００ (72)発明者 ウオルフラーム・ヘンデル オーストリア国、4060レオンデイング、ガ ウムベルクストラーセ、82 (72)発明者 クリスチアン・ブルガー オーストリア国、4060レオンデイング、ハ イゼストラ−セ、14アー (72)発明者 アニタ・ラムプルマイル オーストリア国、4020リンツ、ニーツシエ ストラーセ、48／エー／１ (72)発明者 ハラルト・ペシユコ オーストリア国、4482エンスドルフ、アム ゼルガッセ、３ (72)発明者 アントニア・プラウス オーストリア国、4020リンツ、ミツテルバ ウエルウエーク、２ (72)発明者 ゲラルト・ズムマー オーストリア国、4020リンツ、カプランホ ーフストラセ、32／１／５

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 Ｎ- ヒドロキシスクシンイミドをカルボ
   ン酸及び式Ｉ 【化１】 （式中Ｒ₁ 及びＲ₂ は同一か又は異なり、Ｃ₂-Ｃ₆ アル
   キル基又はフエニル基を示すか、あるいはＲ₁ 及びＲ₂
   は一緒になってＣ₆ アリール残基を形成する。）のハロ
   ゲンリン酸エステルと、塩基の存在下に希釈剤中で０℃
   〜１００℃の温度で反応させ、そして対応するカルボン
   酸スクシンイミジルエステルを単離することを特徴とす
   る、カルボン酸スクシンイミジルエステルの製造方法。
2. 【請求項２】 式Ｉのハロゲンリン酸エステルとして、
   ジフエニルクロルホスフアート、ジエチルクロルホスフ
   アート、ジブチルクロルホスフアート又はレゾルシニル
   クロルホスフアートを使用する、請求項１記載の方法。
3. 【請求項３】 塩基として炭酸ナトリウム又は -カリウ
   ム、炭酸水素ナトリウム又は -カリウム、水酸化ナトリ
   ウム又は -カリウム、トリエチルアミン、Ｎ- メチルピ
   ロリドン、Ｎ- メチル- 又はＮ- エチル- モルホリンを
   使用する、請求項１記載の方法。
4. 【請求項４】 反応に対する希釈剤として水とほとんど
   又は全く混和し得ない有機希釈剤又は水と混和し得る有
   機希釈剤を、場合により水と共に使用する、請求項１記
   載の方法。
5. 【請求項５】 水と混和しうる希釈剤としてアセトン、
   アセトニトリル、テトラヒドロフラン又はジメトキシエ
   タンを使用する、請求項４記載の方法。
6. 【請求項６】 水と全く又はほとんど混和し得ない希釈
   剤として酢酸エチル、メチレンクロライド又はメチル -
   ｔ- ブチルエーテルを使用する、請求項４記載の方法。
7. 【請求項７】 カルボキシル基１モルあたり、少なくと
   も１モルのＮ- スクシンイミド、少なくとも１モルのハ
   ロゲンリン酸エステル及び少なくとも２モルの塩基を使
   用する、請求項１記載の方法。
8. 【請求項８】 カルボキシル基１モルあたり、Ｎ- ヒド
   ロキシスクシンイミド１〜２モル、ハロゲンリン酸エス
   テル１〜２モル及び塩基２〜５モルを使用する、請求項
   １記載の方法。
9. 【請求項９】 請求項１の方法を実施して生じる反応混
   合物──これはカルボン酸スクシンイミジルエステルを
   含有する──をアシル化に適する求核試薬と更に反応さ
   せることを特徴とする、カルボン酸スクシンイミジルエ
   ステルの二次生成物を製造する方法。
10. 【請求項１０】 カルボン酸スクシンイミジルエステル
    をアミノ酸又はアミノ酸誘導体のアミノ基でＮ- ヒドロ
    キシスクシンイミドの離脱下にカップリングさせて、ペ
    プチドを生じさせる、請求項９記載の方法。