JPH1036676A - タンパク質水溶液の濃縮方法 - Google Patents
タンパク質水溶液の濃縮方法Info
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- JPH1036676A JPH1036676A JP21522496A JP21522496A JPH1036676A JP H1036676 A JPH1036676 A JP H1036676A JP 21522496 A JP21522496 A JP 21522496A JP 21522496 A JP21522496 A JP 21522496A JP H1036676 A JPH1036676 A JP H1036676A
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- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】本発明の課題は、立体構造の変化やゲル化等の
変性をおこし易いタンパク質の水溶液の濃縮に適した高
効率の方法に関する。 【解決手段】タンパク質水溶液を透析膜を介して液状の
ポリエーテル系高分子或いはポリオール系高分子の水溶
液に接触させることを特徴とするタンパク質水溶液の濃
縮方法。
変性をおこし易いタンパク質の水溶液の濃縮に適した高
効率の方法に関する。 【解決手段】タンパク質水溶液を透析膜を介して液状の
ポリエーテル系高分子或いはポリオール系高分子の水溶
液に接触させることを特徴とするタンパク質水溶液の濃
縮方法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、タンパク質水溶液の濃
縮方法に関する。
縮方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】タンパク質は一般に変性し易いことか
ら、水溶液中のタンパク質を濃縮する方法としては、塩
析や有機溶媒沈殿、凍結乾燥などにより固体として濃縮
する方法、吸着を利用する方法、半透膜を用いる方法、
吸水性ゲルを用いる方法などが用いられている。しか
し、濃縮処理速度の点で満足できなかったり、立体構造
の変化やゲル化等が遅こり易いタンパク質については、
こうした方法の適用も困難な場合があるなどの問題があ
った。
ら、水溶液中のタンパク質を濃縮する方法としては、塩
析や有機溶媒沈殿、凍結乾燥などにより固体として濃縮
する方法、吸着を利用する方法、半透膜を用いる方法、
吸水性ゲルを用いる方法などが用いられている。しか
し、濃縮処理速度の点で満足できなかったり、立体構造
の変化やゲル化等が遅こり易いタンパク質については、
こうした方法の適用も困難な場合があるなどの問題があ
った。
【０００３】特に、絹タンパク質フィブロインは高濃度
の塩溶液に溶解させた後、透析することにより水溶液と
することができる。この水溶液は、シルクペプチドの製
造原料としてばかりでなく、塩析や乾燥、攪拌（ズリ応
カ）等の処理が加えられると、フィブロインが部分的に
結晶化して不溶化する。この現象を利用して膜、粉末、
ゲルなどに成形することができることから、化粧品用の
絹粉末（特公昭５８−３８４４９）や、酵素や抗体等の
固定化膜の製造に有効に応用されている（特公昭５６−
３８１９３、特公昭６０−１３６７２、特公平４−３９
６２３）が、目的によってはこの水溶液を濃縮して用い
ることが多い。
の塩溶液に溶解させた後、透析することにより水溶液と
することができる。この水溶液は、シルクペプチドの製
造原料としてばかりでなく、塩析や乾燥、攪拌（ズリ応
カ）等の処理が加えられると、フィブロインが部分的に
結晶化して不溶化する。この現象を利用して膜、粉末、
ゲルなどに成形することができることから、化粧品用の
絹粉末（特公昭５８−３８４４９）や、酵素や抗体等の
固定化膜の製造に有効に応用されている（特公昭５６−
３８１９３、特公昭６０−１３６７２、特公平４−３９
６２３）が、目的によってはこの水溶液を濃縮して用い
ることが多い。
【０００４】しかし、この水溶液は、上述したように容
易にゲル化したり、フィブロインの析出を招いたりする
ため、その濃縮に際してはこれらの点に十分配慮する必
要があった。一つの方法として、水の加熱留去により濃
縮することができるが、この場合も一部析出やゲル化が
おこるため、歩留まりの低下を招くばかりでなく、微少
なゲル状部はろ過によっても除去し難いことから、得ら
れた膜に粒状の不均一部を与えることがある。また、半
透膜を用いる方法のうち、限外ろ過法においては膜表面
の物質濃縮による効率低下を解消するため、膜内液を攪
拌する必要があるが、攪拌により加えられるズリ応力に
よりフィブロインの析出がおこる。また、タンパク質水
溶液を入れた透析膜表面に送風したり、ポリエチレング
リコール粉末を接触させる方法（Agr.Biol.Che.３０，
５７６−５８４，１９６６）も用いることができるが濃
縮効率、処理速度に問題があった。
易にゲル化したり、フィブロインの析出を招いたりする
ため、その濃縮に際してはこれらの点に十分配慮する必
要があった。一つの方法として、水の加熱留去により濃
縮することができるが、この場合も一部析出やゲル化が
おこるため、歩留まりの低下を招くばかりでなく、微少
なゲル状部はろ過によっても除去し難いことから、得ら
れた膜に粒状の不均一部を与えることがある。また、半
透膜を用いる方法のうち、限外ろ過法においては膜表面
の物質濃縮による効率低下を解消するため、膜内液を攪
拌する必要があるが、攪拌により加えられるズリ応力に
よりフィブロインの析出がおこる。また、タンパク質水
溶液を入れた透析膜表面に送風したり、ポリエチレング
リコール粉末を接触させる方法（Agr.Biol.Che.３０，
５７６−５８４，１９６６）も用いることができるが濃
縮効率、処理速度に問題があった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、立体
構造の変化やゲル化等の変性をおこし易いタンパク質の
水溶液の濃縮に適した高効率の方法を提供することであ
る。
構造の変化やゲル化等の変性をおこし易いタンパク質の
水溶液の濃縮に適した高効率の方法を提供することであ
る。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明は、タンパク質水
溶液を透析膜を介して液状のポリエーテル系高分子或い
はポリオール系高分子の水溶液に接触させることを特徴
とするタンパク質水溶液の濃縮方法であり、前述の課題
を解決するものである。
溶液を透析膜を介して液状のポリエーテル系高分子或い
はポリオール系高分子の水溶液に接触させることを特徴
とするタンパク質水溶液の濃縮方法であり、前述の課題
を解決するものである。
【０００７】
【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。
本発明で使用するポリエーテル系高分子としては、エチ
レングリコール誘導体として、ポリエチレングリコー
ル、エチレングリコール−プロピレングリコール共重合
体などが用いられ、末端がメチル基、エチル基、プロピ
ル基、ブチル基等のアルキル基で置換されているもの、
或いはその他の誘導体も同様に用いられる。更にこれら
を混合して用いることもできる。エチレングリコール−
プロピレングリコール共重合体としては、ブロック重合
体、ランダム共重合体の何れであってもよいが、高分子
量でも液状になり易い点からランダム共重合体が更に好
ましい。
本発明で使用するポリエーテル系高分子としては、エチ
レングリコール誘導体として、ポリエチレングリコー
ル、エチレングリコール−プロピレングリコール共重合
体などが用いられ、末端がメチル基、エチル基、プロピ
ル基、ブチル基等のアルキル基で置換されているもの、
或いはその他の誘導体も同様に用いられる。更にこれら
を混合して用いることもできる。エチレングリコール−
プロピレングリコール共重合体としては、ブロック重合
体、ランダム共重合体の何れであってもよいが、高分子
量でも液状になり易い点からランダム共重合体が更に好
ましい。
【０００８】また、本発明で使用するポリオール系高分
子としては、デキストラン、プルラン等の多糖類、ヒド
ロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロー
ス等の多糖類誘導体、及びポリビニルアルコールなどを
用いることができる。更に、これらのポリエーテル系高
分子やポリオール系高分子を適宜混合して用いることも
できる。
子としては、デキストラン、プルラン等の多糖類、ヒド
ロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロー
ス等の多糖類誘導体、及びポリビニルアルコールなどを
用いることができる。更に、これらのポリエーテル系高
分子やポリオール系高分子を適宜混合して用いることも
できる。
【０００９】これらの外系に用いるポリエーテル高分子
或いはポリオール高分子の分子量については、小さいも
のであっても濃縮効果の面では使用できるが、分子量が
小さくなるに従いタンパク質水溶液中に混入する割合が
増加する傾向にある。この程度はポリエチレングリコー
ル等の高分子の構造によっても異なるが、これを抑制す
るため、一般に分子量が１５００以上のものを使用する
ことが好ましく、２０００以上のものが更に好ましい。
或いはポリオール高分子の分子量については、小さいも
のであっても濃縮効果の面では使用できるが、分子量が
小さくなるに従いタンパク質水溶液中に混入する割合が
増加する傾向にある。この程度はポリエチレングリコー
ル等の高分子の構造によっても異なるが、これを抑制す
るため、一般に分子量が１５００以上のものを使用する
ことが好ましく、２０００以上のものが更に好ましい。
【００１０】本発明の濃縮方法を用いた場合の濃縮効率
は、用いるポリエーテル系高分子やポリオール系高分子
の種類、濃度、温度、及び攪拌の有無などに依存する。
また、内系の目的となるタンパク質の物性や濃度にも左
右されるが、一般に濃度が低く、粘性が小さいほど濃縮
速度は大きい。外系に用いる高分子としては、高濃度の
水溶液とした際の粘性が小さく、効率の高い濃縮効果を
与える点で、ポリエチレングリコールやランダム型のエ
チレングリコール−プロピレングリコール共重合体及び
それらの誘導体が好適に用いられる。
は、用いるポリエーテル系高分子やポリオール系高分子
の種類、濃度、温度、及び攪拌の有無などに依存する。
また、内系の目的となるタンパク質の物性や濃度にも左
右されるが、一般に濃度が低く、粘性が小さいほど濃縮
速度は大きい。外系に用いる高分子としては、高濃度の
水溶液とした際の粘性が小さく、効率の高い濃縮効果を
与える点で、ポリエチレングリコールやランダム型のエ
チレングリコール−プロピレングリコール共重合体及び
それらの誘導体が好適に用いられる。
【００１１】外系の高分子濃度としては、用いる高分子
の種類によっても異なるが、一般に、２０％以上で用い
ることができる。更に濃縮効率及び速度の点で、５０％
以上であることが好ましい。
の種類によっても異なるが、一般に、２０％以上で用い
ることができる。更に濃縮効率及び速度の点で、５０％
以上であることが好ましい。
【００１２】また、ポリエーテル系高分子の１つである
ポリエチレングリコールは分子量が大きくなるに従い融
点が高くなり、１０００以上のものは室温ではワックス
状から固体状となる。そこで濃縮を行うタンパク質が熱
変性を起こさない範囲内で、加温によりポリエチレング
リコールを融解させ液状として本発明を実施することが
できるが、平均分子量１５００〜２０００のポリエチレ
ングリコールを用いて５０℃以下の温度で行うか、又は
液状エチレングリコール−プロピレングリコール共重合
体と混合して行うことが好ましい。
ポリエチレングリコールは分子量が大きくなるに従い融
点が高くなり、１０００以上のものは室温ではワックス
状から固体状となる。そこで濃縮を行うタンパク質が熱
変性を起こさない範囲内で、加温によりポリエチレング
リコールを融解させ液状として本発明を実施することが
できるが、平均分子量１５００〜２０００のポリエチレ
ングリコールを用いて５０℃以下の温度で行うか、又は
液状エチレングリコール−プロピレングリコール共重合
体と混合して行うことが好ましい。
【００１３】更に、エチレングリコーループロピレング
リコール共重合体、なかでもランダム共重合体は、室温
領域で液状であるため、変性し易いタンパク質の濃縮に
も利用できる点で本発明に最も好適に用いることができ
るが、濃縮効率の点から分子量１５００以上、エチレン
グリコール分率２０％以上のものを用いることが好まし
い。
リコール共重合体、なかでもランダム共重合体は、室温
領域で液状であるため、変性し易いタンパク質の濃縮に
も利用できる点で本発明に最も好適に用いることができ
るが、濃縮効率の点から分子量１５００以上、エチレン
グリコール分率２０％以上のものを用いることが好まし
い。
【００１４】本発明を実施するに際し、濃縮速度を高め
効率向上を計るために透析膜の外系のポリエチレングリ
コール誘導体液を攪拌することが好ましい。また、変性
などの問題のない範囲で加温することは外系の粘性を低
下させるので、攪拌効果の点からは好ましく、目的に応
じて適切な条件を選ぶことができる。
効率向上を計るために透析膜の外系のポリエチレングリ
コール誘導体液を攪拌することが好ましい。また、変性
などの問題のない範囲で加温することは外系の粘性を低
下させるので、攪拌効果の点からは好ましく、目的に応
じて適切な条件を選ぶことができる。
【００１５】以下、実施例を挙げて本発明の効果を詳述
する。
する。
【００１６】
【実施例１】生糸を精錬後、エタノールを混合した４５
重量％塩化カルシウム水溶液に溶解し、これを透析して
絹フィブロイン水溶液（５．０重量％）を得た。この１
０ｇをセルロース透析チュープ（三光純薬株式会社：サ
イズ１８／３２）に入れ、２９℃で攪拌下、分子量の異
なる各種ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の５０重量
％水溶液０．１Ｌ中に浸漬した。６０分間浸漬後、ＰＥ
Ｇ水溶被より透析チェーブを取り出し、濃縮率及び絹フ
ィブロイン溶液中へのＰＥＧ混入量を測定した。絹フィ
ブロイン水溶液の濃縮率ほ、浸漬前後の重重変化を測定
し、元のフィブロィン濃度に対する攪拌後の濃度倍率を
算出した。またＰＥＧ混入量は、絹フィブロイン水溶液
の屈折率測定結果と、濃縮率より算出された絹フィブロ
イン濃度に対応する屈析率との差分を混入ＰＥＧによる
ものとして求めた。表１の結果より明らかなように、Ｐ
ＥＧの分子量に拘らず濃縮率はほぼ一定の値を与えた
が、ＰＥＧ平均分子量が小さくなるに従い、ＰＥＧ混入
量が増大する傾向が認められる。また、絹フィブロイン
溶液中へのＰＥＧ混入量は、ＰＥＧ平均分子量が小さく
なるに従い減少し、特に分子量２０００以上ではその値
を非常に小さくすることができる。尚、対照実験として
平均分子量１０００のポリプロピレングリコール（ＰＰ
Ｇ）に対して、２５℃で１時間浸漬処理を行ったが、濃
縮率１．０５倍と殆ど濃縮効果は認められなかった。ま
た、平均分子量２００００のＰＥＧ粉末を透析チェープ
表面に付着せしめ、２５℃で１時間放置する方法で濃縮
実験を行った結果、濃縮率は１．２倍であり、本発明の
方法に比較して低い効果しか得られなかった。
重量％塩化カルシウム水溶液に溶解し、これを透析して
絹フィブロイン水溶液（５．０重量％）を得た。この１
０ｇをセルロース透析チュープ（三光純薬株式会社：サ
イズ１８／３２）に入れ、２９℃で攪拌下、分子量の異
なる各種ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の５０重量
％水溶液０．１Ｌ中に浸漬した。６０分間浸漬後、ＰＥ
Ｇ水溶被より透析チェーブを取り出し、濃縮率及び絹フ
ィブロイン溶液中へのＰＥＧ混入量を測定した。絹フィ
ブロイン水溶液の濃縮率ほ、浸漬前後の重重変化を測定
し、元のフィブロィン濃度に対する攪拌後の濃度倍率を
算出した。またＰＥＧ混入量は、絹フィブロイン水溶液
の屈折率測定結果と、濃縮率より算出された絹フィブロ
イン濃度に対応する屈析率との差分を混入ＰＥＧによる
ものとして求めた。表１の結果より明らかなように、Ｐ
ＥＧの分子量に拘らず濃縮率はほぼ一定の値を与えた
が、ＰＥＧ平均分子量が小さくなるに従い、ＰＥＧ混入
量が増大する傾向が認められる。また、絹フィブロイン
溶液中へのＰＥＧ混入量は、ＰＥＧ平均分子量が小さく
なるに従い減少し、特に分子量２０００以上ではその値
を非常に小さくすることができる。尚、対照実験として
平均分子量１０００のポリプロピレングリコール（ＰＰ
Ｇ）に対して、２５℃で１時間浸漬処理を行ったが、濃
縮率１．０５倍と殆ど濃縮効果は認められなかった。ま
た、平均分子量２００００のＰＥＧ粉末を透析チェープ
表面に付着せしめ、２５℃で１時間放置する方法で濃縮
実験を行った結果、濃縮率は１．２倍であり、本発明の
方法に比較して低い効果しか得られなかった。
【００１７】
【表１】
【００１８】
【実施例２】実施例１と同様にして調製した絹フィブロ
イン水溶液（濃度５．５重量％）１０ｇをセルロース透
析チューブに入れ、これを表２に示す各種濃度のＰＥＧ
（分子量３０００）水溶液０．１Ｌ中に攪拌下、各温度
で１時間浸漬した後取り出し、実施例１と同様の方法で
濃縮率を測定した。表２に示す限り、ＰＥＧ濃度が高
く、温度が高いほど絹フィブロイン水溶液の濃縮率が大
きいことがわかる。ＰＥＧ濃度が２０％以下では濃縮効
率が低く実用的ではない。
イン水溶液（濃度５．５重量％）１０ｇをセルロース透
析チューブに入れ、これを表２に示す各種濃度のＰＥＧ
（分子量３０００）水溶液０．１Ｌ中に攪拌下、各温度
で１時間浸漬した後取り出し、実施例１と同様の方法で
濃縮率を測定した。表２に示す限り、ＰＥＧ濃度が高
く、温度が高いほど絹フィブロイン水溶液の濃縮率が大
きいことがわかる。ＰＥＧ濃度が２０％以下では濃縮効
率が低く実用的ではない。
【００１９】
【表２】
【００２０】
【実施例３】実施例１と同様にして調整した絹フィブロ
イン水溶液（濃度４．９重量％）２０ｇをセルロース透
析チェープに入れ、これを５０重量％のＰＥＧ水溶液
（平均分子量６０００）２００ｍｌ中に攪拌下２３．５
℃で浸漬した後、経時的に取り出し、実施例１と同様の
方法で濃縮率を測定し、濃縮速度を求めた。結果を表３
に示す。
イン水溶液（濃度４．９重量％）２０ｇをセルロース透
析チェープに入れ、これを５０重量％のＰＥＧ水溶液
（平均分子量６０００）２００ｍｌ中に攪拌下２３．５
℃で浸漬した後、経時的に取り出し、実施例１と同様の
方法で濃縮率を測定し、濃縮速度を求めた。結果を表３
に示す。
【００２１】
【表３】
【００２２】
【実施例４】実施例１と同様にして調整した絹フィブロ
イン水溶液（濃度４．８重量％）１０ｇをセルロース透
析チュープに入れ、これを表４に示す各種水溶液１５０
ｍｌ中に攪拌下、２７．０℃で６０分間浸漬した後取り
出し、実施例１と同様の方法で濃縮率を測定した。結果
を表４に示すが、ＰＥＧまたはその誘導体を用いた系が
特に良好な濃縮効果を与えた。また、いずれも外系高分
子のフィブロイン水溶液への混入は見られなかった。エ
チレングリコール（ＥＧ）−プロピレングリコール（Ｐ
Ｇ）共重合体のＥＧ／ＰＧ比は、 1Ｈ−ＮＭＲにより決
定し、ＥＧモル分率を示した。
イン水溶液（濃度４．８重量％）１０ｇをセルロース透
析チュープに入れ、これを表４に示す各種水溶液１５０
ｍｌ中に攪拌下、２７．０℃で６０分間浸漬した後取り
出し、実施例１と同様の方法で濃縮率を測定した。結果
を表４に示すが、ＰＥＧまたはその誘導体を用いた系が
特に良好な濃縮効果を与えた。また、いずれも外系高分
子のフィブロイン水溶液への混入は見られなかった。エ
チレングリコール（ＥＧ）−プロピレングリコール（Ｐ
Ｇ）共重合体のＥＧ／ＰＧ比は、 1Ｈ−ＮＭＲにより決
定し、ＥＧモル分率を示した。
【００２３】
【表４】
【００２４】
【実施例５】５０重量％のＰＥＧ水溶液２００ｍｌ（平
均分子量３０００）中に、表５に示した各種タンパク質
水溶液２５ｍｌを入れたセルロース透析チェーブを浸漬
し、外液を攪拌下、各所定の温度で２０分問の濃縮処理
を行った後、濃縮率を測定した。但し、タンパク質濃度
は、２８０ｎｍの吸光度測定により求めた。表５より明
らかなように濃縮速度に対し大きな温度効果が認めれ
た。また、いずれもタンパク質水溶液へのＰＥＧの混入
は認められなかった。
均分子量３０００）中に、表５に示した各種タンパク質
水溶液２５ｍｌを入れたセルロース透析チェーブを浸漬
し、外液を攪拌下、各所定の温度で２０分問の濃縮処理
を行った後、濃縮率を測定した。但し、タンパク質濃度
は、２８０ｎｍの吸光度測定により求めた。表５より明
らかなように濃縮速度に対し大きな温度効果が認めれ
た。また、いずれもタンパク質水溶液へのＰＥＧの混入
は認められなかった。
【００２５】
【表５】
【００２６】
【実施例６】実施例１と同様にして調整した絹フィブロ
イン水溶液（濃度５．３重量％）１０ｇを透析チェーブ
に入れ、これを各種の液状エチレングリコール−プロピ
レングリコール共重合体０．１Ｌ中に２４．５℃で１時
間浸漬した後取り出し、実施例１と同様の方法で濃縮率
を測定した。結果を表６に示す。エチレングリコール
（ＥＧ）−プロピレングリコール（ＰＧ）共重合体のＥ
Ｇ／ＰＧ比は、 1Ｈ−ＮＭＲにより決定し、ＥＧモル分
率を示した。表６の中で、ＥＧ／ＰＧ，Ｂはエチレング
リコール−プロピレングリコールのプロック共重合体、
ＥＧ／ＰＧ，Ｒはランダム共重合体を示す。表６の結果
より、液状のポリエチレングリコール誘導体を用いるこ
とにより、室温でも有効な濃縮ができる。また、ＰＥＧ
誘導体の混入量はいずれも０．３％以下であり、濃縮後
のフィブロイン水溶液にはゲル化部や析出部が全く見ら
れなかった。Ｎｏ．２の例では、濃縮が進み水がＥＧ／
ＰＧ系に移行するに従い、外系の粘性が増大したため、
濃縮率が他の例より小さくなったものと考えられる。
イン水溶液（濃度５．３重量％）１０ｇを透析チェーブ
に入れ、これを各種の液状エチレングリコール−プロピ
レングリコール共重合体０．１Ｌ中に２４．５℃で１時
間浸漬した後取り出し、実施例１と同様の方法で濃縮率
を測定した。結果を表６に示す。エチレングリコール
（ＥＧ）−プロピレングリコール（ＰＧ）共重合体のＥ
Ｇ／ＰＧ比は、 1Ｈ−ＮＭＲにより決定し、ＥＧモル分
率を示した。表６の中で、ＥＧ／ＰＧ，Ｂはエチレング
リコール−プロピレングリコールのプロック共重合体、
ＥＧ／ＰＧ，Ｒはランダム共重合体を示す。表６の結果
より、液状のポリエチレングリコール誘導体を用いるこ
とにより、室温でも有効な濃縮ができる。また、ＰＥＧ
誘導体の混入量はいずれも０．３％以下であり、濃縮後
のフィブロイン水溶液にはゲル化部や析出部が全く見ら
れなかった。Ｎｏ．２の例では、濃縮が進み水がＥＧ／
ＰＧ系に移行するに従い、外系の粘性が増大したため、
濃縮率が他の例より小さくなったものと考えられる。
【００２７】
【表６】
【００２８】
【実施例７】実施例１と同様にして調製した絹フィブロ
イン水溶被（濃度４．９重量％）１０ｇを透析チューブ
に入れ、これを平均分子量３０００のポリエチレングリ
コールとエチレングリコール−プロピレングリコールラ
ンダム共重合体（平均分子量５０００、ＥＧモル分率８
７％）とを重量比で１：１に混合した溶液中に浸漬し、
２５℃、攪拌条件下で濃縮を行った。実施例１と同様の
方法で経時的に濃縮率を測定した。結果を表７に示す。
約１時間で２倍の濃縮率を得ることができる。
イン水溶被（濃度４．９重量％）１０ｇを透析チューブ
に入れ、これを平均分子量３０００のポリエチレングリ
コールとエチレングリコール−プロピレングリコールラ
ンダム共重合体（平均分子量５０００、ＥＧモル分率８
７％）とを重量比で１：１に混合した溶液中に浸漬し、
２５℃、攪拌条件下で濃縮を行った。実施例１と同様の
方法で経時的に濃縮率を測定した。結果を表７に示す。
約１時間で２倍の濃縮率を得ることができる。
【００２９】
【表７】
【００３０】
【実施例８】実施例７と同じ濃縮系を用いて、表８に示
した各種タンパク質水溶液の濃縮試験を行った。温度２
２．５℃、１時間の濃縮処理を行った後、濃縮率を測定
した。 但し、タンパク質濃度は２８０ｎｍの吸光度測
定により求めた。表８より明らかなようにいずれも高い
濃縮効果が認められた。
した各種タンパク質水溶液の濃縮試験を行った。温度２
２．５℃、１時間の濃縮処理を行った後、濃縮率を測定
した。 但し、タンパク質濃度は２８０ｎｍの吸光度測
定により求めた。表８より明らかなようにいずれも高い
濃縮効果が認められた。
【００３１】
【表８】
【００３２】
【発明の効果】本発明の濃縮方法によれば、タンパク質
水溶液をタンパク質の変性を招くことなく短時間に濃縮
でき、透析膜表面に送風したり、ポリエチレングリコー
ル粉末を付着せしめる方法に較ぺて優れた濃縮効率を与
えるものである。特に、タンパク質が絹フィブロインの
場合、水を加熱留去する方法のように分子量低下、部分
ゲル化や析出、更に歩留まり低下を招くことがなく、工
業的に有効な濃縮法を与えるのみならず、酵素固定化膜
などの絹膜の製造に対しても、欠陥のない均一性の高い
膜を調製できる絹水溶液原料を提供できるものである。
水溶液をタンパク質の変性を招くことなく短時間に濃縮
でき、透析膜表面に送風したり、ポリエチレングリコー
ル粉末を付着せしめる方法に較ぺて優れた濃縮効率を与
えるものである。特に、タンパク質が絹フィブロインの
場合、水を加熱留去する方法のように分子量低下、部分
ゲル化や析出、更に歩留まり低下を招くことがなく、工
業的に有効な濃縮法を与えるのみならず、酵素固定化膜
などの絹膜の製造に対しても、欠陥のない均一性の高い
膜を調製できる絹水溶液原料を提供できるものである。
【手続補正書】
【提出日】平成８年９月２５日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正内容】
【発明の名称】 タンパク質水溶液の濃縮方法
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 杉本 雅俊 大阪府八尾市山城町４丁目２番６号 (72)発明者 中山 博 大阪府枚方市東山１丁目38番５号
Claims (3)
- 【請求項１】 タンパク質水溶液を透析膜を介してポリ
エーテル系高分子或いはポリオール系高分子の水溶液に
接触させることを特徴とするタンパク質水溶液の濃縮方
法。 - 【請求項２】 タンパク質が絹タンパクフィブロインで
ある請求項１の濃縮方法。 - 【請求項３】 ポリエーテル系高分子が分子量１５００
以上のポリエチレングリコールである請求項１の濃縮方
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21522496A JPH1036676A (ja) | 1996-07-26 | 1996-07-26 | タンパク質水溶液の濃縮方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21522496A JPH1036676A (ja) | 1996-07-26 | 1996-07-26 | タンパク質水溶液の濃縮方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1036676A true JPH1036676A (ja) | 1998-02-10 |
Family
ID=16668769
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21522496A Pending JPH1036676A (ja) | 1996-07-26 | 1996-07-26 | タンパク質水溶液の濃縮方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH1036676A (ja) |
Cited By (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007515391A (ja) * | 2003-04-10 | 2007-06-14 | タフツ ユニバーシティー | 濃縮された水性シルクフィブロイン溶液およびそれらの使用 |
| US8071722B2 (en) | 2002-06-24 | 2011-12-06 | Trustees Of Tufts College | Silk biomaterials and methods of use thereof |
| US8715740B2 (en) | 2009-09-29 | 2014-05-06 | Trustees Of Tufts College | Silk nanospheres and microspheres and methods of making same |
| US8722067B2 (en) | 2007-05-29 | 2014-05-13 | Trustees Of Tufts College | Method for silk fibroin gelation using sonication |
| US8728498B2 (en) | 2009-07-14 | 2014-05-20 | Trustees Of Tufts College | Electrospun silk material systems for wound healing |
| US9040073B2 (en) | 2008-05-15 | 2015-05-26 | Trustees Of Tufts College | Silk polymer-based adenosine release: therapeutic potential for epilepsy |
| US9074302B2 (en) | 2009-09-28 | 2015-07-07 | Trustees Of Tufts College | Methods of making drawn silk fibers |
| US9102916B2 (en) | 2007-02-27 | 2015-08-11 | Trustees Of Tufts College | Tissue-engineered silk organs |
| US9132197B2 (en) | 2003-01-07 | 2015-09-15 | Massachusetts Institute Of Technology | Silk fibroin materials and use thereof |
| US9504575B2 (en) | 2008-02-07 | 2016-11-29 | Trustees Of Tufts College | 3-dimensional silk hydroxyapatite compositions |
| US9539362B2 (en) | 2003-06-06 | 2017-01-10 | Trustees Of Tufts College | Method for forming inorganic coatings |
| US9566365B2 (en) | 2010-09-01 | 2017-02-14 | Trustees Of Tufts College | Silk fibroin and polyethylene glycol-based biomaterials |
| US9603971B2 (en) | 2010-03-05 | 2017-03-28 | Trustees Of Tufts College | Silk-based ionomeric compositions |
| US9694082B2 (en) | 2008-09-26 | 2017-07-04 | Trustees Of Tufts College | pH induced silk gels and uses thereof |
| US10335519B2 (en) | 2011-04-20 | 2019-07-02 | Trustees Of Tufts College | Dynamic silk coatings for implantable devices |
| US10493179B2 (en) | 2008-10-09 | 2019-12-03 | Trustees Of Tufts College | Modified silk films containing glycerol |
| US10912862B2 (en) | 2012-02-06 | 2021-02-09 | Children's Medical Center Corporation | Multi-layer biomaterial for tissue regeneration and wound healing |
| US10933173B2 (en) | 2010-10-19 | 2021-03-02 | Trustees Of Tufts College | Silk fibroin-based microneedles and methods of making the same |
-
1996
- 1996-07-26 JP JP21522496A patent/JPH1036676A/ja active Pending
Cited By (32)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| US9993527B2 (en) | 2003-01-07 | 2018-06-12 | Trustees Of Tufts College | Silk fibroin materials and use thereof |
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| US8614293B2 (en) | 2003-04-10 | 2013-12-24 | Trustees Of Tufts College | Concentrated aqueous silk fibroin solution and use thereof |
| US11129921B2 (en) | 2003-04-10 | 2021-09-28 | Trustees Of Tufts College | Concentrated aqueous silk fibroin solution and use thereof |
| US9623147B2 (en) | 2003-04-10 | 2017-04-18 | Trustees Of Tufts College | Concentrated aqueous silk fibroin solution and use thereof |
| US8742069B2 (en) | 2003-04-10 | 2014-06-03 | Trustees Of Tufts College | Concentrated aqueous silk fibroin solution and use thereof |
| JP2007515391A (ja) * | 2003-04-10 | 2007-06-14 | タフツ ユニバーシティー | 濃縮された水性シルクフィブロイン溶液およびそれらの使用 |
| US9084840B2 (en) | 2003-04-10 | 2015-07-21 | Trustees Of Tufts College | Concentrated aqueous silk fibroin solution and use thereof |
| US10314938B2 (en) | 2003-04-10 | 2019-06-11 | Trustees Of Tufts College | Concentrated aqueous silk fibroin solution and use thereof |
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| US9102916B2 (en) | 2007-02-27 | 2015-08-11 | Trustees Of Tufts College | Tissue-engineered silk organs |
| US10478524B2 (en) | 2007-02-27 | 2019-11-19 | Trustees Of Tufts College | Tissue-engineered silk organs |
| US9655993B2 (en) | 2007-02-27 | 2017-05-23 | Trustees Of Tufts College | Tissue-engineered silk organs |
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