JPH10500111A

JPH10500111A - アテローム硬化症及び他の心・血管疾患及び炎症性疾患のための治療

Info

Publication number: JPH10500111A
Application number: JP7529200A
Authority: JP
Inventors: メドフォード，ラッセル，エム; アレクサンダー，アール，ウエイン; パーササラシー，サンパス; カン，ボビー，ヴィー; オファーマン，マーガレット，ケイ
Original assignee: エモリー、ユニバーシティ
Priority date: 1994-05-10
Filing date: 1995-05-10
Publication date: 1998-01-06
Anticipated expiration: 2015-12-25
Also published as: US5773209A; CA2189336A1; PL180874B1; US5773231A; CN1152869A; US5750351A; EP0759752A4; NO964742L; GEP20012409B; US5846959A; EP0759752A1; CZ330896A3; BG101030A; BR9507716A; PL317193A1; WO1995030415A1; NO964742D0; SK136496A3; HU9603041D0; JP3120091B2

Abstract

(57)【要約】ジチオカルバメート類を含むジチオカルボキシレート類が、内皮細胞表面接着分子ＶＣＡＭ−１の誘導された発現をブロックし、従ってアテローム硬化症を含む心・血管疾病並びにＶＣＡＭ−１によって媒介される非心・血管系のの炎症性疾病の治療において有用である。

Description

【発明の詳細な説明】アテローム硬化症及び他の心・血管疾患及び炎症性疾患のための治療本発明の背景本出願は、アテローム硬化症及び他の心・血管疾患及び炎症性疾患の治療のための方法および組成物の領域にある。白血球の内皮への接着は、アテローム硬化症、自己免疫疾患そして細菌及びウイルス感染を含む、広範囲の炎症状態において基本的な早期の出来事を代表する。内皮への白血球の動員は、内皮細胞表面上の誘導可能な接着分子受容体が免疫細胞上の相手方受容体と相互作用するとき開始される。血管内皮細胞は、血管細胞接着分子−１（VCAM-1）、細胞内接着分子−１（ICAM-1）、およびＥ−セレクチン(E-selectin)等のような、選択的に発現した特異的接着分子によって、白血球のどのタイプ（単球、リンパ球、または好中球）が動員されるかを決定する。アテローム硬化病変の最も早期の段階において、VCAM-1の局在化された内皮発現およびインテグリン(integrin)相手方受容体VLA-4 を発現する単核白血球の選択的動員がある。好中球ではなく単球とリンパ球上でのVLA-4 の選択的発現のために、VCAM-1は単核白血球の選択的接着を媒介するのに重要である。白血球の泡沫マクロファージへのその後の変換は、白血球増殖及び血小板の動員、平滑筋増殖、内皮細胞活性化、及び成熟粥状斑の特徴である細胞外マトリックス合成を助ける、広範な炎症性サイトカイン、増殖因子、及び化学的誘引物質の合成をもたらす。ＶＣＡＭ−１は、リポ多糖類(LPS)及びインターロイキン−１（IL-1）及び腫瘍壊死因子(TNF-α)等のようなサイトカインによる活性化の後、培養ヒト血管内皮細胞中で発現される。これらの因子は細胞接着分子発現の活性化に対し選択的ではない。スキーム１は、血管内皮細胞におけるVCAM-1遺伝子発現のサイトカイン活性化のプロセスを図解している。血管内皮細胞における、ＮＦ−ｋβ等のような酸化還元感受性の制御因子を介した、血管細胞接着分子−１(VCAM-1)遺伝子発現のサイトカイン活性化に関する制御スキーム（Ikβは阻害性サブユニットである;ＮＦ−ｋＢは核因子−ｋＢである;ＮＨ₃は蛋白質のアミノ末端をいい、そしてRNA Pol IIはRNA ポリメラーゼ IIである。）その発現を制御する、ヒトVCAM-1遺伝子に対する制御因子の分子的分析は、VC AM-1遺伝子発現の酸化還元感受性制御における核因子−ｋＢ（ＮＦ−ｋＢ）、転写制御因子、又はＮＦ−ｋβ様の結合性蛋白質の重要な役割を示唆している。転写因子は、ＲＮＡ合成が開始されるところである「プロモーター」と呼ばれる遺伝子の領域の通常近くにある「エンハンサー因子」と呼ばれる特異的なＤＮＡの配列へ結合することによって、細胞核内で遺伝子発現を活性化する（または抑制する）蛋白質である。核因子−ｋＢは、TNF α、IL-1β、細菌内毒素、およびRNA ウイルス等のような炎症性因子の大きな及び多様な群によって幾つかの細胞タイプにおいて活性化される至る所て発現される複数サブユニット転写因子である。それは、炎症信号及び他のストレス信号を核制御装置へ媒介するのに中心的な役割を果たす。ＮＦ− ｋＢを活性化する明確な生化学的信号は知られていないが、この転写因子は、高脂血症、喫煙、高血圧症、及び糖尿病等のようなアテローム硬化の危険因子及び「原因」信号の多くを、共通の分子的経路にまとめることができる。重要なことには、多様な信号による血管内皮細胞におけるＮＦ−ｋＢの活性化は、Ｎ−アセチルシステイン及びピロリジンジチオカルバメート等のような抗酸化剤によって特異的に阻害することができる（今や許容されているU.S.S.N．07/ 969,934 を参照。）。これは、酸素ラジカルが、明らかになっていない酸化還元メカニズムを介してＮＦ−ｋβの活性化において重要な役割を果たすという仮説を導いた。ＮＦ−ｋＢ様の増強因子も酸化還元感受性の仕方でVCAM -1プロモータの転写を制御するので、アテローム硬化病変における酸化的ストレスが、この酸化還元感受性転写制御蛋白質を介してVCAM-1遺伝子発現を制御することにおいてある役割を果たしているのかも知れない。低密度リポ蛋白(LDL)の、反応性酸素種によって酸化的に変性されたLDL(ox-LD L)への変性が、アテローム硬化を開始させ拡大させる主要な出来事であるという仮説がたてられている。Steinberget al.，N．Engl．J．Med．1989; 320:915〜9 24。酸化されたLDL は、それぞれが単独又は組み合わせてサイトカイン活性化される接着分子遺伝子発現を修正することができる、少なくとも数種の化学的に異なった酸化された物質からなる複雑な構造である。リノール酸ハイドロパーオキシド(13-HPODE)等のような脂肪酸ハイドロパーオキシドは、リポキシゲナーゼによって遊離の脂肪酸から産生されそして酸化されたLDL の重要な成分である。酸化された脂質の発生が細胞リポキシゲナーゼ系の作用によって形成されるということ及び酸化された脂質がLDL にその後変換されるということことが提案されている。その後、遷移金属及び／又はスルフヒドリル化合物によって触媒された媒体中においてLDL 内で生長反応がある。以前の研究は、培養内皮細胞の脂肪酸変性が酸化損傷に対するそれらの感受性を変えることができることを明らかにした。培養内皮細胞への飽和またはモノ不飽和脂肪酸の補充は、酸化損傷に対するそれらの感受性を減少するのに対して、ポリ不飽和脂肪酸(PUFA)の補充は酸化損傷に対する感受性を高める。ＬＤＬの未処理及び鹸化された脂質抽出物による逆相HPLC分析を用いて、活性化されたヒト単球によって酸化されたLDL 中では13-H PODEが主要な酸化脂肪酸であることが明らかにされてきた。酸化されたLDL への慢性的暴露は、おそらく特異的な脂肪酸ヒドロパーオキシドによって、サイトカイン誘導されるVCAM-1遺伝子発現を選択的に増強する、血管内皮細胞へ酸化性信号を提供する。十分明らかにされていないメカニズムによって、前以ってアテローム硬化しやすくされた血管壁の領域は、循環しているLDL を優先的に隔離する。不十分にしか理解されていない径路によって、次いで内皮、平滑筋及び/ 又は炎症細胞がLD L を酸化型ＬＤＬ（ox-LDL）へ変換する。LDL 受容体によって取り込まれるLDL とは対照的に、単球は、その発現がLDL 受容体とは異なり細胞内脂質の含有量が上昇しても阻害されない「スカベンジャー」受容体によって、ox-LDLを盛んに取り込む。従って、単球はox-LDLを続けて取込み続け、そして脂肪縞を形成する、脂質を多量に取り込んだマクロファージ泡沫細胞になる。心・血管疾患が合衆国内の死亡の現在一番多い原因であり、心・血管の疾患の９０％がアテローム硬化症と現在診断されていることから、その治療のための新しい方法及び薬剤を見出す強い要求がある。この目標のために重要なのは、炎症プロセスのメディエイタの、特にVCAM-1の発現の選択的制御因子として働く特異的な酸化された生物学的化合物の同定および取り扱いである。より一般的な目標は、酸化還元感受性遺伝子の発現を抑制し又は抑制されている酸化還元感受性遺伝子を活性化するための、選択的な方法を同定することである。従って、本発明の一目的は、アテローム硬化及び他の心・血管疾患及び炎症性疾患のための治療を提供することである。本発明の他の一目的は、VCAM-1の選択的阻害のための方法を提供することである。本発明のさらなる他の一目的は、酸化還元感受性遺伝子の発現又は抑制によって媒介されるヒトの病気又は疾患の治療のための方法を提供することである。本発明の他の一目的は、アテローム硬化症及び他の心・血管疾患及び炎症性疾患の治療のための薬剤組成物を提供することである。本発明の要約酸化的に変性された低密度リポ蛋白(LDL)の重要な成分であるポリ不飽和脂肪酸（「PUFAs」）およびそれらのヒドロパーオキシド（「ox-PUFAs」）が、サイトカイン又は他の非サイトカイン信号によって媒介されるものでないメカニズムによって、ヒト大動脈内皮細胞中のVCAM-1の発現を誘導するが細胞内接着分子-1 (ICAM-1)又はE-セレクチンを誘導しないことが見出された。これは、VCAM-1媒介性の免疫応答における重要でこれまで知られていなかった生物学的径路の基本的な発見である。非制限的な例として、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、リノール酸ヒドロパーオキシド(13-HPODE)及びアラキドン酸ヒドロパーオキシド(15-HPETE)は VCAM-1の細胞表面遺伝子発現を誘導するが、ICAM-1又はE-セレクチンはしない。飽和脂肪酸（ステアリン酸等のような）及びモノ不飽和脂肪酸（オレイン酸等のような）はVCAM-1、ICAM-1、又はE-セレクチンの発現を誘導しない。 PUFAsおよびそれらの脂肪酸ヒドロパーオキシドによるVCAM-1の誘導は、抗酸化剤ピロリジンジチオカルバメート(PDTC)によって抑制される。このことは、誘導は酸化された信号分子によって媒介されること、及び分子の酸化が阻止されている（即ち、酸化が起こらない）か逆行している（即ち、信号分子が還元されている）、又は酸化還元改質された信号がその制御目標と相互作用することを他の方法で妨げられているときは、誘導が妨げられるということを示している。通常レベルよりも一層高いレベルのポリ不飽和脂肪酸又はそれらの酸化されたものに慢性的に暴露された細胞は、正常でない且つ与えられた脅威に不釣り合いな免疫応答を開始して、病気状態に導き得る。PUFAS 及びox-PUFASへの血管内皮細胞の過剰感作は、例えば粥状斑の形成を加速し得る。これらの発見に基づいて、酸化されたポリ不飽和脂肪酸〔酸化されたリノール酸(C₁₈Δ^9,12)、リノレン酸(C₁₈Δ^6,9,12)、アラキドン酸(C₂₀Δ^5,8,11,14)及びエイコサトリエン酸(C₂₀Δ^8、11、14)を制限としてではなく含む。〕を除去し、濃度を減少させ、又は形成を妨げることを含む、アテローム硬化症、血管形成術後再狭窄、冠状動脈疾患、狭心症、および他の心・血管疾患、並びにVCAM-1によって媒介される非心・血管炎症性疾患の治療のための方法が提供される。 VCAM-1によって媒介される非心・血管炎症性疾患の非制限的な例は、リウマトイド及び変形性関節症、喘息、皮膚炎、及び多発性硬化症を含む。この方法は、病気の進行を単に抑制するように設計された現在の治療法を超えるという点で、心・血管疾患の治療において有意な利点を示し、そして適切に使用されるときは、新しい病変の発生を妨げ及び確立された病変を消退させることによって、アテローム硬化症を医学的に「治す」可能性を提供する。代わりの具体例において、酸化信号の酸化、そして典型的にはポリ不飽和脂肪酸の酸化を防ぐ有効量の物質を投与することを含む、酸化還元感受性遺伝子の発現を抑制し又は酸化還元感受性径路によって抑制された遺伝子を活性化するための方法が提供される。免疫応答の発現に関わる代表的な酸化還元感受性遺伝子としては、（限定としてではなく）免疫応答を開始するのに関わるサイトカイン（例えば、IL-1β）、損傷点への炎症性細胞の移動を促進する化学的誘引物質（例えば、MCP-1）、増殖因子（例えば、IL-6及びトロンビン受容体）、及び接着分子（例えば、VCAM-1及びE-セレクチン）を発現する遺伝子が含まれる。 VCAM-1または酸化還元感受性遺伝子によって媒介される疾病のための、それらの疾患の代理マーカーの定量を含むスクリーニングもまた提供される。一具体例においては、（例えば宿主の）組織又は血液中における酸化されたポリ不飽和脂肪酸又は他の適当なマーカーのレベルが、宿主の「酸化性環境」及びVCAM-1又は酸化還元感受性遺伝子に媒介された疾病に対する宿主の罹りやすさの評価の手段として評価される。他の一具体例においては、循環中の又は細胞表面のVCAM-1又は他の適切なマーカーのレベル、及びそのレベルに対する適切な抗酸化剤の投与の影響が定量される。更なる他の一アッセイにおいては、ポリ不飽和脂肪酸又はそれらの酸化されたものに対する宿主の血管内皮細胞の感受性が評価される。これは、例えば、PUFA又はox-PUFA により宿主をチャレンジしそして得られた細胞表面又は循環中のVCAM-1又は他の代理マーカーの濃度と標準集団と比較することによって、達成できる。他の一具体例中では、VCAM-1によって媒介されるアテローム硬化症又は他の心臓疾患又は炎症性疾患の生体内モデルが、疾病を誘導するために過剰量のPUFA又は酸化されたポリ不飽和脂肪酸を宿主動物へ投与することによって提供できる。これらの動物は、これらの疾病の理解をさらに進めるために臨床研究において使用できる。本発明の更なる他の一具体例においては、ポリ不飽和脂肪酸の酸化を阻害する又は蛋白質標的とのPUFA又はox-PUFA の相互作用を阻害するそれらの能力に基づいて、VCAM-1によって媒介される疾病を治療する能力につき、化合物を評価することができる。これは、宿主、例えば、ヒト又はマウス等のような動物を高レベルのPUFA又は ox-PUFA でチャレンジし、次いで循環中又は細胞表面のVCAM-1濃度を減少させる能力に基づいて試験化合物の療法的効果性を決定することによって達成できる。代わりとしては、金属、例えば銅等のような酸化性物質又はペルオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、シクロオキシゲナーゼ、又はシトクロームP450等のような酵素の存在下で、PUFAの酸化又は蛋白質標的によるPUFA又はox-PUFA の相互作用を妨げる、試験化合物の能力に基づいた試験管内検査が使用できる。他の一具体例においては、血管内皮細胞は、適当な時間TNF-α又は他のVCAM-1 誘導物質へ暴露され、次いで任意の適当な手段によって、例えば音波破砕又は凍結融解によって破壊される。サイトゾルの及び膜コンパートメントが単離される。放射線標識されたＰＵＦＡが、コンパートメントの量を規定するために加えられる。試験化合物の存在下または不存在下においてPUFAをox-PUFA へと変換する液体の能力がアッセイされる。破壊された細胞系の代わりに完全な細胞も使用できる。 25〜50mg/kg/日で経口的に投与されたピロリジンジチオカルバメート(PDTC)が、アテローム発生の脂肪縞形成、動脈単球−マクロファージ炎症、内皮VCAM-1発現を劇的に阻害し、そして1000mg/dl を超える血清コレステロールレベルを有する食事誘導された高コレステロール血症家兎における内皮依存性弛緩機能を本質的に正常化した。同じ投与量において、抗酸化剤プロブコール及びビタミンＥ等のような他の推定の治療剤は、このモデル中の病変形成に対して効果がなかった。内皮依存性動脈弛緩は、実験上のアテローム硬化症においてPDTCの投与によって回復される。食事誘導された高コレステロール血症家兎モデルにおいて、経口的に投与された(25〜50mg/kg/日)PDTCは、内皮依存性血管反応性を回復した。これは、対照及び試験動物から切除された大動脈の環収縮の研究によって決定された。アテローム硬化症を有する患者において、これはそれ自体、非侵襲的ドップラー流れ研究によって測定されるものとしての、充血に応答した末梢血管反応性の正常化であることが明らかである。これは、経口服用量に対して機能的薬剤レベルを滴定するために使用することができる標準化された一般的に利用しうる且つ容易に管理される試験である。心・血管疾病及びアテローム硬化症に特徴的である内皮に誘導される動脈血管拡張の病的損失を急速に正常化することにより、 PDTCは抗虚血性治療として機能する。血管血流におけるこの改善は、症状及び虚血に制限された運動機能における改善として証明され、そして血管保護の非侵襲的評価を提供する。内皮誘導性の血管弛緩における異常の他の臨床的指標は、インポテンスを含む。 VCAM-1遺伝子転写を制御する分子制御工場は、ＡＰ−１ファミリーのｃ−ｆｏｓ及びｃ−ｊｕｎサブユニットへ交差結合されたＮＦ−ｋＢ／Ｒｅｌファミリーのｐ６５及びｐ５０サブユニットからなる新規な転写因子複合体である。構造及び機能の両方の研究によって、これらＡＰ−１因子はＶＣＡＭ−１遺伝子発現の治療的制御の中心となる可能性のあるＶＣＡＭ−１プロモーターの制御において重要な役割を果していることが確立されてきた。これは、内因性の遺伝子の制御におけるこの交差結合された転写複合体の機能的役割を最初に明らかにするものである。図面の簡潔な記述図１は、サイトカインＴＮＦ−α（黒丸）、リノール酸（黒三角）、及びリノール酸ヒドロパーオキシド（13-HPODE、黒四角）への暴露下における、及びこれらの物質への暴露がない（対照、白四角）ときの、ヒト大動脈内皮細胞における時間の関数としてのＶＣＡＭ−１の細胞表面発現（Ｏ．Ｄ．４５０ｎｍ）のグラフである。図２は、リノール酸（黒三角）及びリノール酸ヒドロパーオキシド（13-HPODE 、黒四角）への暴露下におけるヒト大動脈内皮細胞におけるＶＣＡＭ−１の細胞表面発現（Ｏ．Ｄ．４５０ｎｍ）の、脂肪酸の濃度（μＭ）の関数としてのグラフである。図３は、サイトカインＴＮＦ−α、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、及びアラキドン酸への暴露下におけるヒト大動脈内皮細胞におけるＶＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１及びＥ−セレクチンの細胞表面発現（Ｏ．Ｄ．４５０ｎｍ）の棒グラフである。図４は、抗酸化剤ピロリジンジチオカルバメート（ＰＤＴＣ）を含むときと（黒）、含まないとき（ハッチング）のリノール酸、１３−ＨＰＯＤＥ、アラキドン酸、及びアラキドン酸ヒドロパーオキシド（１５−ＨＰＥＴＥ）への暴露下におけるヒト大動脈内皮細胞におけるＶＣＡＭ−１の細胞表面発現（Ｏ．Ｄ．４５０ｎｍ）の棒グラフである。図５は、リノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥによるＶＣＡＭ−１ｍＲＮＡの急性誘導を示しているオートラジオグラムの図解である。ヒト大動脈内皮細胞（ＨＡＥＣ）は、リノール酸（７．５μＭ）、１３−ＨＰＯＤＥ（７．５μＭ）又はＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ）に暴露されたか又はされなかった。全てのＲＮＡが単離され、そして２０μｇが変性0.1 ％アガロース−ホルムアルデヒドゲル電気泳動によってサイズ分画され、ニトロセルロースに移転され、そして、³²Ｐ標識されたヒトのＡ）ＶＣＡＭ−１特異的又はＢ）β−アクチン特異的ｃＤＮＡのいずれかにハイブリダイズされた。洗浄後、フィルターは２４時間、１枚の増感紙と共に−７０°ＣでＸ線フィルムに暴露された。レーンの識別：１）対照；２）リノール酸（急性、８時間暴露）；３）リノール酸（４８時間暴露）；４）１３ −ＨＰＯＤＥ（急性、８時間暴露）；及び５）ＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ、４時間暴露）。図６は、ポリ不飽和脂肪酸によるＶＣＡＭ−１ｍＲＮＡの誘導が細胞蛋白質合成に無関係であることを示すオートラジオグラフの図解である。ヒト大動脈内皮細胞（ＨＡＥＣ）が、４時間の間、シクロヘキシミド（ＣＨＸ）（１０μｇ／ｍｌ）の存在下又は不存在において、リノール酸（Ｌ．Ａ．）（７．５μＭ）又はアラキドン酸（Ａ．Ａ．）（７．５μＭ）のいずれかに暴露され、そして次いで図５中に記述されるように処理された。図７は、リノール酸が酸化還元感受性ＮＦ−ｋＢ様因子によってＶＣＡＭ−１プロモーターの転写活性化を誘導することを示すオートラジオグラムの図解である。ヒト大動脈内皮細胞（ＨＡＥＣ）は、１００ｍｍ組織培養プレート中で約６０％コンフルエンスを与える比率で分けられた。ＨＡＥＣは、標準的な技術を用いた燐酸カルシウム共沈技術によって、３０μｇのｐ２８８ＶＣＡＭＣＡＴ、ｐ８５ＶＣＡＭＣＡＴ、又はｐＳＶ₂ＣＡＴプラスミドのいずれかによってトランスフェクトされた。２４時間の回復期間の後、ＨＡＥＣは５０μＭのピロリジンジチオカルバメート（ＰＤＴＣ）によって前処理され又は前処理されず、そして３０分後、プレートに直接添加されたリノール酸（７．５μＭ）又はＴＮＦ −α（１００Ｕ／ｍｌ）へ暴露された。１８時間後、０．２５Ｍトリス、ｐＨ８．０中での急速な凍結融解によって、細胞抽出物が調製された。各細胞抽出物の蛋白質が、前に記述されたように［Ausubel，1989］クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)活性に関してアッセイされた(Ac,アセチル化された；N，アセチル化されていないクロラムフェニコール)。図８は、ポリ不飽和脂肪酸が抗酸化剤ＰＤＴＣによってブロックされる、ＮＦ −ｋＢ様ＤＮＡ結合活性を活性化することを示すアクリルアミドゲル板の図解である。（図１中に記述されたような）４％ＦＢＳを含む培地中のコンルフエントＨＡＥＣが、３０分間ＰＤＴＣ（５０μ Ｍ）によって前処理され又はされず、次いでリノール酸（７．５μＭ）、オレイン酸（７．５μＭ）、又はＴＮＦα（１００Ｕ／ｍｌ）それぞれへ３時間暴露された。５μｇの核抽出物が二本鎖の³²Ｐ標識ｗｔＶＣＡＭと共にインキュベートされ、４％の無変性アクリルアミドゲル上でサイズ分画され、そして−７０°Ｃで１８時間オートラジオグラフィーフィルムに暴露された。ＮＦ−ｋＢ様の結合活性を示している二つのバンドＡ及びＣが示されている。弱いバンドＢが対照（非処理）細胞において観察された。図９Ａ及び９Ｂは、ＰＤＴＣの存在下又は不存在下での、アラキドン酸及び１５−ＨＰＥＴＥのそれぞれのチオバルビツール酸反応性物質（Ｏ．Ｄ．５３２ｎｍ）の棒グラフである。チオバルビツール酸反応性アッセイ（ＴＢＡＲＳ）は、細胞不含の培地不含の環境中での物質の酸化能力を測定する。図１０は、下で記述されるようにして得られた、³²Ｐ標識ヒトＶＣＡＭ−１特異的ｃＤＮＡ（パネルＡ）、Ｅ−セレクチン（ＥＬＡＭ−１）特異的ｃＤＮＡ（パネルＢ）、又はＩＣＡＭ−１特異的ｃＤＮＡ（パネルＣ）のいずれかでハイブリダイズされたｍＲＮＡのオートラジオグラフの図解である。５０μＭのピロリジンジチオカルバミン酸ナトリウム（ＰＤＴＣ）による３０分間の前処理に続いて、ＨＵＶＥ（ヒト臍帯静脈）細胞が５０μＭのＰＤＴＣの持続的存在下でＩＬ −１ｂ（１０Ｕ／ｍｌ）に暴露された。並列対照がＰＤＴＣ不存在下のものを除き、同様に実行された。示された時間において、全ＲＮＡが単離されそして２０ μｇの材料が変性１．０％アガロースホルムアルデヒドゲル電気泳動によってサイズ分画され、上に記述されたようにハイブリダイズされ、そしてオートラジオグラフィによって可視化された。レーン１〜０時間；レーン２，４，６，８−それぞれ２，４，８及び２４時間に関してはＯＬ−１単独，レーン３，５，７，９−それぞれ２，４，８及び２４時間に関してはＰＤＴＣを含むＩＬ−１。図１１は、下で記述されるようにして得られた、³²Ｐ標識されたヒトＶＣＡＭ −１特異的（パネルＡ）、Ｅ−セレクチン（ＥＬＡＭ−１）特異的ｃＤＮＡ（パネルＢ）、又はＩＣＡＭ−１特異的ｃＤＮＡ（パネルＣ）のいずれかにハイブリダイズされたｍＲＮＡのオートラジオグラフの図解である。ＨＵＶＥ細胞が示された濃度のＰＤＴＣによって前処理され、そして次いで４時間ＰＤＴＣの存在下でＩＬ−１ｂに暴露されそしてノーザンフィルターハイブリダイゼーション分析によってVCAM-1 mRNA の蓄積についてアッセイされた。レーン１−対照、レーン２−ＩＬ−１（１０Ｕ／ｍｌ）、レーン３−ＩＬ−１ｂ＋ＰＤＴＣ（０．０５μ Ｍ）、レーン４−ＩＬ−１ＬＢ＋ＰＤＴＣ（０．５μＭ）、レーン５−ＩＬ−１ｂ＋ＰＤＴＣ（５．０μＭ）、レーン６−ＩＬ−１ｂ＋ＰＤＴＣ（５０．０μＭ）、レーン７−ＩＬ−１ｂ＋ＰＤＴＣ（１００μＭ）。図１２は、下で記述されるようにして得られた、³²Ｐ標識されたヒトＶＣＡＭ −１特異的ｃＤＮＡ（パネルＡ）、Ｅ−セレクチン（ＥＬＡＭ−１）特異的ｃＤＮＡ（パネルＢ）、又はＩＣＡＭ−１特異的ｃＤＮＡ（パネルＣ）のいずれかにハイブリダイズされたｍＲＮＡのオートラジオグラフの図解である。ＨＵＶＥ細胞が５０μＭのＰＤＴＣによって図９中に記述されたように前処理され、下に示された薬剤に４時間暴露されそしてVCAM-1（パネルＡ）及びＩＣＡＭ−１（パネルＢ）の mRNA の蓄積についてアッセイされた。レーン１−ＴＮＦａ（１００Ｕ／ｍｌ）、レーン２−ＴＮＦａ＋ＰＤＴＣ、レーン３−リポ多糖類（ＬＰＳ）（１００ｇ／ｍｌ）、レーン４−ＬＰＳ＋ＰＤＴＣ、レーン５−多（Ｉ：Ｃ）（１００ｍｇ／ｍｌ）、レーン６−多（Ｉ：Ｃ）＋ＰＤＴＣ。図１３は、ＰＤＴＣの存在下（ハッチングを入れた棒）又は不存在下（白棒）における、複数のタイプの誘導刺激の存在下におけるＶＣＡＭ−１及びＩＣＡＭ −１の相対的な細胞表面発現のグラフである。コンルフエントＨＵＶＥＣｓが、５０μＭのＰＤＴＣによって３０分間前処理され又はされず（ＣＴＬのみ）、そして次いでＰＤＴＣの存在下又は不存在下（ＣＴＬのみ）に、示された薬剤へ示された時間暴露された。細胞表面発現は、ＶＣＡＭ−１特異的（４Ｂ９）及びＩＣＡＭ−１特異的（８４Ｈ１０）マウスモノクローナル抗体との一次結合とそれに続く西洋わさびペルオキシダーゼで標識ヤギ抗マウス（ＩｇＧ）との二次結合とによって決定された。定量が、ＴＭＢの４５０ｎｍにおける比色定量の測定によって実行された。図１３は、複数の制御信号がヒト血管内皮細胞においてよく知られたジチオカルバメート感受性径路を介してＶＣＡＭ−１を誘導するがＩＣＡＭ−１を誘導しないことを示している。図１４は、種々の抗酸化剤の濃度に対する、ＴＮＦａによって活性化されたヒト臍帯静脈内皮細胞における相対的なＶＣＡＭ−１細胞表面発現（Ｏ．Ｄ．５９５ｎＭ）のグラフである。（ＰＤＴＣはＮ−ピロリジンジチオカルバミン酸ナトリウム；ＤＥＴＣはＮ，Ｎ−ジエチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム、ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウムともいう；ＮＡＣはＮ−アセチルシステイン；及びＤＦはデスフェロキシミンである）図１５は、特定量の抗酸化剤の存在化における、ＴＮＦａによって活性化されたヒト臍帯静脈内皮細胞における相対的なＶＣＡＭ−１細胞表面発現（０．Ｄ．５９５ｎＭ）のグラフである。（ＰＤＴＣはＮ−ピロリジンジチオカルバミン酸ナトリウム；ＤＩＤＴＣはＮ，Ｎ−ジエチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム；ＳａｒＤＴＣはＮ−メチル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム；ＩＤＡＤＴＣはＮ，Ｎ−ジ（カルボキシメチル）−Ｎ−カルボジチオン酸三ナトリウム；ＭＧＤＴＣはＮ−メチル−Ｄ−グルカミン−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム；ＭｅＯＢＧＤＴＣはＮ−（４−メトキシベンジル）−Ｄ−グルカミン−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム；ＤＥＤＴＣはＮ，Ｎ−ジエチル− Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム；Ｄｉ−ＰＤＴＣはＮ，Ｎ−ジイソプロピル− Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム；ＮＡＣはＮ−アセチルシステインである）図１６は、ＰＤＴＣの存在下又は不存在下において、６時間ＴＮＦａ（１００Ｕ／ｍｌ）によって刺激されていない又は刺激されたＨＵＶＥ細胞へ結合しているＭｏｌｔ−４細胞のパーセントのグラフである。図１７は、以下の活性なジチオカルバメート類の化学構造の図解である：ピロリジン−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム、Ｎ−メチル−Ｎ−カルボキシメチル −Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ−ジ（カルボキシメチル）−Ｎ−カルボジチオン酸三ナトリウム、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム（ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウム）、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム。図１８は、ＰＤＴＣのμＭｏｌ濃度に対する蛍光単位として測定された、ＢＳＡ及び１３−ＨＰＯＤＥの蛍光付加体の生成におけるＰＴＤＣの影響の棒グラフである。１μＭｏｌの１３−ＨＰＯＤＥが、６日間ＰＤＴＣの存在下で２００μ ｇのＢＳＡと共にインキュベートされた。３３０〜３６０ｎｍにおける励起により、４３０〜４６０ｎｍにおける蛍光が測定された。図１９は、波長（ｎｍ）及びＰＤＴＣの濃度の関数としての、ＢＳＡ及びｏｘ −ＰＵＦＡの蛍光付加物の生成におけるＰＴＤＣの影響の棒グラフである。ＰＤＴＣの濃度が増加するにつれて、蛍光付加体の量が減少している。図２０は、様々な濃度のＰＤＴＣについて時間（分）対Ｏ．Ｄ．（２３４ｎｍ）の増加によって測定された、西洋わさびペルオキシダーセ（ＨＲＰ）によるＬＤＬの酸化におけるＰＤＴＣの効果のグラフである。培養期間後、ＰＤＴＣが濃度依存の仕方でＨＲＰによるＬＤＬの酸化を阻害することが観察される。図２１は、ヒト大動脈内皮細胞においてｏｘ−ＰＵＦＡのサイトカイン誘導された形成におけるＰＤＴＣの効果のチャートである。示されたように、ＴＮＦ− α及びＩＬ−１βの両方がリノール酸のｏｘ−リノール酸への酸化の原因となっている。酸化はＰＤＴＣによって有意に妨げられる。本発明の詳細な記述Ｉ．定義ここに使用されるように、語「ポリ不飽和脂肪酸」（ここに「ＰＵＦＡ」と同じく言われている）は、少なくとも２つのアルケニル結合を有する脂肪酸（典型的にはＣ₈〜Ｃ₂₄）をいい、そしてリノール酸(C₁₈Δ^9,12)、リノレン酸(C₁₈Δ^6, ^9,12 )、アラキドン酸(C₂₀Δ^5,8,11,14)及びエイコサトリエン酸(C₂₀Δ^8,11,14) を（限定としてではなく）含む。語「酸化されたポリ不飽和脂肪酸」は、その中のアルケニル結合の少なくとも一がヒドロパーオキシドに変換されている不飽和脂肪酸をいう。非限定的な例として以下のものがある。ここにいう語「アルキル」は、別に特記しない限り、飽和した直鎖の、分岐のある、又は（Ｃ₅又はより大きい場合において）環状の、Ｃ₁〜Ｃ₁₀の炭化水素（又はより小さいアルキル、即ちＣ₁〜Ｃ₅）をいい、具体的にはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、シクロヘキシルメチル、３−メチルペンチル、２，２−ジメチルブチル、及び２，３−ジメチルブチルを含む。アルキル基は、当業者に知られているように、例えばGreeneら「Protective Groups in Organic Synthesis」John Wil ey and Sons，Second Edition，1991の中で教示されているように、未保護又は必要に応じて保護されている、ヒドロキシル、アミノ、又は１置換又は２置換のアミノ（置換基は、独立して、アルキル、アリール、アルカリール又はアラルキルである。）、アリール、アルコキシ、アリールオキシ、ニトロ、シアノ、スルホン酸、サルフェート、ホスホン酸、ホスフェート、又はホスホネートよりなる群より選ばれた１または２以上の部分によって、いかなる炭素上においても所望により置換されていてよい。ここにいう「アルケニル」は、別に特記しない限り、少なくとも１個の二重結合を有する、Ｃ₂〜Ｃ₁₀の直鎖の、分岐のある、又は環状の炭化水素をいう。ここにいう語「アルキニル」は、別に特記しない限り、少なくとも１個の三重結合を有する、Ｃ₂〜Ｃ₁₀の直鎖の又は分岐のある炭化水素をいう。語「アラルキル」は、少なくとも１個のアルキル置換基を有するアリール基をいう。語「アルカリル」は、少なくとも１のアリール置換基を有するアルキル基をいう。語「ハロ（アルキル、アルケニル、又はアルキニル）」は、該基中の少なくとも一の水素がハロゲン原子によって置換されたアルキル、アルケニル、又はアルキニル基をいう。ここにいう語「アリール」は、別に特記しない限り、フェニル、ビフェニル、又はナフチルをいい、そして好ましくはフェニルをいう。アリール基は、当業者に知られているように、例えばGreeneら「Protective Groups in Organic Synth esis」John Wiley and Sons，Second Edition，1991の中で教示されているように、未保護の又は必要に応じて保護された、アルキル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、ニトロ、シアノ、スルホン酸、サルフェート、ホスホン酸、ホスフェート、ホスホネート、ＣＯ₂Ｈ、又はその薬剤学的に許容しうる塩、ＣＯ₂（アルキル、アリール、アルカリル、又はアラルキル）、又はグルカミンよりなる群より選ばれる１または２以上の部分によって所望により置換されていてよい。ここにいう語「アルコキシ」は、別に特記しない限り、構造−Ｏ−アルキルなる部分をいう。ここに用いるものとして語「アシル」は、式Ｃ（Ｏ）Ｒ’（式中、Ｒ’はアルキル、アリール、アルカリール又はアラルキル基である）なる基をいう。ここに用いるものとして語「ヘテロアリール」又は「ヘテロ芳香族」は、芳香族環に少なくとも１つの硫黄、酸素、又は窒素を含む芳香族部分をいう。限定的でない例としては、フェナジン、フェノチアジン、フリール、ピリジル、ピリミジル、チエニル、イソチアゾリル、イミダゾリル、テトラゾリル、ピラジニル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、キノリル、イソキノリル、ベンゾチエニル、イソベンゾフリル、ピラゾリル、インドリル、イソインドリル、ベンズイミダゾリル、プリニル、モフォリニル、カルバゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、イソオキサゾリル、ピロリル、ピラゾリル、キナゾリニル、ピリダジニル、ピラジニル、シンノリニル、フタラジニル、キノキサリニル、キサンチニル、ヒポキサンチニル、プテリジニル、５−アザシチジニル、５−アザウラシリル、トリアゾロピリジニル、イミダゾロピリジニル、ピロロピリミジニル、ピラゾロピリミジニル、アデニン、Ｎ⁶−アルキルプリン類、Ｎ⁶−ベンジルプリン、Ｎ⁶−ハロプリン、Ｎ⁶−ビニルプリン、Ｎ⁶−アセチレニックプリン、Ｎ⁶−アシルプリン、Ｎ⁶−ヒドロキシアルキルプリン、Ｎ⁶−チオアルキルプリン、チミン、シトシン、６−アザピリミジン、２−メルカプトピリミジン、ウラシル、Ｎ⁵−アルキルピリミジン、Ｎ⁵−ベンジルピリミジン、Ｎ⁵−ハロピリミジン、Ｎ⁵−ビニルピリミジン、Ｎ⁵−アセチレニックピリミジン、Ｎ⁵−アシルピリミジン、Ｎ⁵−ヒドロキシアルキルプリン、及びＮ⁶−チオアルキルプリン、及びイソキサゾリルである。ヘテロ芳香属基は、アリールについて上に記述したように所望により置換されることができる。ヘテロ芳香族は、所望により部分的に又は全体的に水素化されていてよい。非限定的な例として、ジヒドロピリジンがピリジンの代わりに使用できる。ヘテロ環ベース上の官能性の酸素及び窒素基は、反応手順の間必要により又は所望により保護されることができる。適した保護基は当業者に周知であり、そしてトリメチルシリル、ジメチルヘキシルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、及びｔ−ブチルジフェニルシリル、トリチルメチル、アルキル基、アセチル及びプロピオニル等のようなアシル基、メチルスルホニル、及びｐ−トルイルスルホニルを含む。ここに用いるものとして語「ヒドロキシアルキル」は、何れかの炭素原子に結合した少なくとも一つの水素がヒドロキシ基によって置換されている、Ｃ₁〜Ｃ₆ アルキル基をいう。語「チオール抗酸化剤」は、酸化を遅らせる硫黄含有化合物をいう。語「薬剤学的に許容しうる誘導体」は、患者への投与に際して、親化合物を直接的に又は間接的に提供する能力があるか、又はそれ自身活性を示す、活性な化合物の誘導体をいう。語「薬剤学的に許容しうる陽イオン」は、正荷電を担持しそして例えば塩中の対陽イオンとして薬剤と一緒に投与されることができる有機または無機部分をいう。薬剤学的に許容しうる陽イオンは、当業者に知られており、そしてナトリウム、カリウム、及び第４級アミンを、限定としてではなく含む。語「生理学的に開裂可能な残基」は、それが結合されている分子から生体内で開裂されることができる部分をいい、そして有機又は無機陰イオン、薬剤学的に許容しうる陽イオン、アシル〔（アルキル）Ｃ（Ｏ）を限定としてではなく含み、アセチル、プロピオニル、及びブチリルを含む〕、アルキル、ホスフェート、サルフェート及びスルホネートを、限定としてではなく含む。語「鏡像対的に濃厚化され組成物又は化合物」は、少なくとも重量で９５％、及び好ましくは少なくとも９７％、９８％、９９％又は１００％の、化合物の単一の鏡像体を含む組成物又は化合物をいう。語「アミノ酸」は、合成の及び自然由来のアミノ酸を含み、例えばアラニル、バリニル、ロイシニル、イソロイシニル、プロリニル、フェニルアラニニル、トリプトファニル、メチオニニル、グリシニル、セリニル、スレオニニル、システイニル、チロシニル、アスパラギニル、グルタミニル、アスパルトイル、グルタオイル、リシニル、アルギニニル、及びヒスチジニルを、限定としてではなく含む。ここに用いられる「結合部分」は、二つの化学的残基を結合する全ての２価の基をいい、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ポリアルキレンオキシ（例えば、−〔（ＣＨ₂）_nＯ−〕_n−）、−Ｃ_1-6アルコキシ−Ｃ_1-10アルキル −、−Ｃ_1-6アルキルチオ−Ｃ_1-10アルキル−、−ＮＲ³−、及び−（ＣＨＯＨ）_n ＣＨ₂ＯＨ、（ここにｎは独立して０、１、２、３、４、５、又は６である）を、限定としてではなく含む。 II．ＶＣＡＭ−１発現の直接的メディエーターとしての酸化された及び未酸化のポリ不飽和脂肪酸の同定ＰＵＦＡ又は酸化されたＰＵＦＡの何れが内皮細胞遺伝子発現の直接的免疫調節剤として働くかを確認するために、早期段階のヒト大動脈内皮細胞（ＨＡＥＣ）が、培地及び血清中で８時間培養され、そして飽和（ステアリン酸）、モノ不飽和（オレイン酸）、及びポリ不飽和（リノール酸及びアラキドン酸）脂肪酸に、並びにリノール酸（１３−ＨＰＯＤＥ）又はアラキドン酸（１５−ＨＰＥＴＥ）の脂肪酸ヒドロパーオキシドと共にに暴露された。ＨＡＥＣはまた、代わりとして、サイトカイン腫瘍壊死因子−αにも暴露された。ＨＡＥＣは、４８時間までの様々な時間リノール酸又は１３−ＨＰＯＤＥへ暴露され、そして次いでＥＬＩＳＡアッセイによって細胞表面ＶＣＡＭ−１発現についてアッセイされた。結果は同じ時間サイトカインＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ）に暴露されたＨＡＥＣと比較された。リノール酸又は１３−ＨＰＯＤＥとインキュベートされたＨＡＥＣにおけるＶＣＡＭ−１発現は、一時的に誘導される。発現は、２４時間での顕著な発現を伴って約８〜９時間で最大となり、そして次いで４８時間までには減少する。リノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥ両者によるＶＣＡＭ−１誘導の動力学は、ＴＮ−αのそれと同様であり、そして従ってポリ不飽和脂肪酸がＶＣＡＭ−１を誘導するメカニズムはＴＮＦ−αのそれと同様であるように見える。８時間でのＶＣＡＭ−１遺伝子発現におけるリノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥの投与量−作用の研究も行われた。７．５μＭが、リノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥが有意なＶＣＡＭ−１遺伝子発現を誘導する最低ピーク投与量であることが観察された。次いで、ポリ不飽和脂肪酸による内皮細胞の短期培養がＩＣＡＭ−１と同様Ｅ −セレクチン発現を誘導するかどうかが調べられた。ポリ不飽和脂肪酸であるリノール酸及びアラキドン酸は、ＴＮＦ誘導されたＶＣＡＭ−１遺伝子発現の約５９％まで、細胞表面遺伝子発現を誘導したことが測定された。驚くべきことに、ＩＣＡＭ−１又はＥ−セレクチンの何れも、これらの脂肪酸によって誘導されなかった。反対に、飽和脂肪酸であるステアリン酸及びモノ不飽和脂肪酸であるオレイン酸は、ＶＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１又はＥ−セレクチンの発現を誘導しなかった。ＶＣＡＭ−１遺伝子発現は、リノール酸（１３−ＨＰＯＤＥ）及びアラキドン酸（１５−ＨＰＥＴＥ）の酸化された代謝産物による、ＨＡＥＣの培養によっても観察された。ポリ不飽和脂肪酸及びそれらの酸化された代謝産物によって与えられる内皮細胞における酸化性ストレスが、酸化還元感受性メカニズムによってＶＣＡＭ−１を誘導するかどうかを調べるために、ＨＡＥＣが、抗酸化剤ピロリジンジチオカルバメート（ＰＤＴＣ，５０μＭ）によって３０分間前処理され、次いで細胞は、リノール酸、アラキドン酸、１３−ＨＰＯＤＥ、及び１５−ＨＰＥＴＥ（全て７．５μＭ）によって８時間別々にインキュベートされた。ＰＤＴＣが、ポリ不飽和脂肪酸及びそれらの酸化されたものによって誘導されるＶＣＡＭ−１の遺伝子発現を抑制することが測定された。これは、誘導は酸化された信号分子によって媒介されること、及び分子の酸化がブロックされているとき（即ち、酸化が起きない）、逆になるとき（即ち、信号分子が還元される）は誘導は阻止され、又は、おそらく酸化還元付加体によって、その標的タンパク質との相互作用が妨害されるということを示している。ＰＵＦＡｓ及びそれらの酸化された代謝産物によるＶＣＡＭ−１の選択的誘導がｍＲＮＡレベルで観察されるかどうか測定するために、ＨＡＥＣがリノール酸又は１３−ＨＰＯＤＥと共にインキュベートされた。リノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥは、ＴＮＦ−αによって誘導されたレベルと同様のＶＣＡＭ−１ｍＲＮＡ蓄積を誘導した。対照的に、リノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥによってインキュベートされたＨＡＥＣにおけるｍＲＮＡレベルでは、ＩＣＡＭ−１及びＥ−セレクチン遺伝子発現の誘導がなかった。この発見は細胞表面レベルにおいて発見されたのに似ている。これらの結果は、翻訳前制御メカニズムがポリ不飽和脂肪酸及びそれらの酸化性代謝産物によってＶＣＡＭ−１遺伝子発現の誘導を媒介していることを示している。ポリ不飽和脂肪酸が、ＶＣＡＭ−１遺伝子発現を誘導する際に一次信号として働くか又はサイトカインＩＬ−４が関与する制御蛋白質によって作動するかどうか測定することも望まれた。新たに合成されたＩＬ−４等のような蛋白質が、リノール酸等のようなＰＵＦＡｓによって誘導されたＶＣＡＭ−１の合成及び遺伝子発現に関与するかどうか調べるために、ＨＡＥＣは１３−ＨＰＯＤＥ（７．５ μＭ）とインキュベートされそして蛋白質合成阻害剤シクロヘキシミドに暴露された。１３−ＨＰＯＤＥと共にインキュベートされたＨＡＥＣ中のシクロヘキシミドによっては、ＶＣＡＭ−１のｍＲＮＡ蓄積の阻害はなかった。リノール酸又はアラキドン酸及びそれらの酸化性代謝産物と共にインキュベートされたＨＡＥＣによるＩＬ−４の生産も、ＥＬＩＳＡにより測定されるものとして、また測定された。これらＰＵＦＡｓ又はそれらの酸化された代謝産物と共にインキュベートされたＨＡＥＣによるＩＬ−４産生の増加はなかった。以前の研究は、削除及び異種のプロモーター研究を通じて、サイトカイン及び非サイトカインが、内皮細胞におけるＶＣＡＭ−１遺伝子発現を、二つのＮＦ− ｋＢ様ＤＮＡ結合要素を介して、少なくとも部分的には転写的に活性化することを明らかにしている。ＰＤＴＣは酸化還元感受性ＮＦ−ｋＢ様因子を介してＶＣＡＭ−１遺伝子発現を阻害するということも明らかにされてきた。ポリ不飽和脂肪酸が類似のメカニズムを通じてヒトＶＣＡＭ−１プロモーターの転写活性化を誘導するかどうかを調べるために、ヒトＶＣＡＭ−１プロモーターの座標−２８８から＋２２を含むキメラレポーター遺伝子ｐ２８８ＶＣＡＭ−ＣＡＴがＨＡＥＣ中へと一時的にトランスフェクトされた。リノール酸（７．５μ Ｍ）の添加がＶＣＡＭ−１プロモーターを誘導した。リノール酸（７．５μＭ）の添加は、対照のそれの２倍以上に且つＴＮＦ−αによって誘導された最大信号の約６０％までＶＣＡＭ−１プロモーター活性を誘導した。同様な結果が、−７７及び−６３ｂｐＮＦ−ｋＢ様部位を含むＶＣＡＭ−１遺伝子（ｐ８５ＶＣＡＭ −ＣＡＴ）の最少量のサイトカイン誘導可能なプロモーターによって得られた。リノール酸又はＴＮＦ−αの何れも、構成的に発現されるｐＳＶ２ＣＡＴ構成物を用いては、活性にいかなる効果も有さなかった。ＰＤＴＣは、リノール酸によって誘導される両方のＶＣＡＭ−１プロモーター構成物の転写活性化を阻害した。ＴＮＦ−αに類似の、リノール酸等のようなポリ不飽和脂肪酸は、ＮＦ−ｋＢ様酸化還元感受性メカニズムによってＶＣＡＭ−１の転写活性化を誘導することをデーターは示している。ポリ不飽和脂肪酸及びそれらの酸化性代謝産物がＮＦ−ｋＢ様転写制御因子によってＶＣＡＭ−１プロモーター活性を制御するかどうか調べるために、ＨＡＥＣからの核抽出物が、位置−７７及び−６３に位置するＶＣＡＭ−１ＮＦ−ｋＢ様プロモーター因子を含む二本鎖オリゴヌクレオチドへのＤＮＡ結合活性についてアッセイされた。図７に示されるように、ＮＦ−ｋＢ様活性を表す二つのバンドＡ及びＣが、リノール酸（７．５μＭ）への３時間暴露に応答して誘導された。同様の発見がサイトカインＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ）への暴露において観察された。弱いバンドＢは対照（無処理）細胞において観察された。ＮＦ−ｋＢ様結合の誘導はモノ不飽和脂肪酸であるオレイン酸によって観察されなかった。ＰＤＴＣによる３０分間の細胞の前処理は、リノール酸活性化の後のＡ及びＣ付加体ＤＮＡ結合活性を阻害した。これらの発見は、ＰＤＴＣが、これらＮＦ−ｋＢ様ＤＮＡ結合蛋白質の活性化を阻害することによってＨＵＶＥＣにおけるＶＣＡＭ−１遺伝子発現の活性化をブロックするという、以前に報告された発見に類似している。実施例１ＶＣＡＭ−１遺伝子発現の活性化の動力学に対する酸化された及び酸化されていないポリ不飽和脂肪酸の効果ヒト大動脈内皮細胞（ＨＡＥＣ）が９６ウエルプレート内に平板培養され、そして、リノール酸（７．５μＭ）、１３−ＨＰＯＤＥ（７．５μＭ）、又はＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ）と共に４８時間までの５つの異なった時点でインキュベートされた。Clonetics(Boston,MA)から得られたＨＡＥＣは、２０％胎仔牛血清（ＦＢＳ）、１６Ｕ／ｍｌ表皮増殖因子、５０μｇ／ｍｌ内皮細胞増殖補充剤、２ｍＭＬ−グルタミン、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、及び１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを補充されたMedium199 中で培養された。実験の１日前に、細胞は４％ＦＢＳを含む培地中で平板培養された。コンルフエントなＨＡＥＣが、ＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ）、又はステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、又はアラキドン酸（７．５μＭ）と共に４８時間までインキュベートされた。同様の試験が、異なった投与量のリノール酸又は１３ −ＨＰＯＤＥと共に８時間で実施された（１〜６０μＭ）（図２）。定量は、ＴＭＢの４５０ｎｍで比色定量の測定によって実行された。試験は３回実施された（各実験値に対してｎ＝４）。＊；値が対照と差がある（ｐ＜０．０５）。図１に示されるように、リノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥの両方ともＶＣＡＭ −１の発現を誘導した。暴露後１０時間において、リノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥによって誘導された細胞表面ＶＣＡＭ−１の量は、サイトカインＴＮＦ−α によって誘導されたものの半分より大きかった。図２に示されるように、リノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥによるＶＣＡＭ−１の誘導は濃度感受性である。これらの化合物の２〜１０μＭの間の濃度において、誘導された細胞表面ＶＣＡＭ−１の量は急激に増加し、次いで少なくとも１００μＭの濃度までほぼ一定に止まった。図２に示されたＰＵＦＡ濃度は、ＨＡＥＣにおいて内因性に見出されるものに加わったものであることを述べなければならない。実施例２ポリ不飽和脂肪酸はＶＣＡＭ−１の遺伝子発現を誘導するが、ＩＣＡＭ−１又はＥ−セレクチンの発現を誘導しない。ＶＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１及びＥ−セレクチンの細胞表面発現が、ＥＬＩＳＡによってＨＡＥＣにおいて測定された。Clonetics(California)から得られたＨＡＥＣは、２０％胎仔牛血清（ＦＢＳ）、１６Ｕ／ｍｌヘパリン、１０Ｕ／ｍｌ表皮増殖因子、５０μｇ／ｍｌ内皮細胞増殖補充剤、２ｍＭＬ−グルタミン、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、及び１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを補充されたMedium 199中で培養された。実験の１日前に、細胞は４％ＦＢＳを含む培地中で平板培養された。コンルフエントなＨＡＥＣが、ＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ）、又はステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、又はアラキドン酸（７．５μＭ）と共に８時間インキュベートされ、又はされなかった。Ａ）ＶＣＡＭ− １、Ｂ）ＩＣＡＭ−１、及びＣ）Ｅ−セレクチンの細胞表面発現が、ＶＣＡＭ− １特異的、ＩＣＡＭ−１特異的、及びＥ−セレクチン特異的マウス抗体による一次結合と、その後の西洋わさびペルオキシダーゼ標識されたヤギ抗マウス（ＩｇＧ）による二次結合とによって測定された。定量は、ＴＭＢの４５０ｎｍでの比色定量の測定によって実施された。試験は３回実施された（各実験値に対してｎ＝４）。＊；値が対照と差がある（ｐ＜０．０５）。図３に示されるように、リノール酸、リノレン酸、及びアラキドン酸はＶＣＡＭ−１の発現を誘導したが、ＩＣＡＭ−１又はＥ−セレクチンの細胞表面発現を誘導しなかった。ステアリン酸又はオレイン酸のいずれもＶＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１、又はＥ−セレクチンの発現を誘導しなかった。ＴＮＦ−αは、３種の全ての細胞表面分子の発現を強く誘導した。実施例３抗酸化剤ＰＤＴＣがポリ不飽和脂肪酸及びそれらの酸化性代謝産物によるＶＣＡＭ−１誘導を抑制する。コンルフエントなＨＡＥＣが、３０分間ＰＤＴＣ（ナトリウムピロリジンジチオカルバメート、５０μＭ）の存在下で又は不存在下に前処理された。次いで、細胞はＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ）、リノール酸、又はアラキドン酸（７．５μＭ）、又は脂肪酸ヒドロパーオキシド１３−ＨＰＯＤＥ（７．５μＭ）又は１５−ＨＰＥＴＥ（７．５μＭ）と共に８時間インキュベートされた。ＶＣＡＭ−１の細胞表面発現が、実施例１中に記述されたように、ＥＬＩＳＡによってＨＡＥＣにおいて測定された。実験は３回実施された（各実験値に対してｎ＝４）。＊；値が対照と差がある（ｐ＜０．０５）。図４に示されるように、ＰＤＴＣは、リノール酸、１３−ＨＰＯＤＥ、アラキドン酸及び１５−ＨＰＥＴＥによるＶＣＡＭ−１の誘導を抑制する。実施例４リノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥによる、ＶＣＡＭ−１ｍＲＮＡの急性誘導ＨＡＥＣがリノール酸（７．５μＭ）又は１３−ＨＰＯＤＥ（７．５μＭ）へ暴露された。総ＲＮＡが単離されそして変性１．０％アガロースホルムアルデヒドゲル電気泳動によって２０μｇがサイズ分画され、ニトロセルロースへ移され、そして³²Ｐ標識ヒトのＡ）ＶＣＡＭ−１特異的又はＢ）β−アクチン特異的ｃＤＮＡのいずれかにハイブリダイズされそしてオートラジオグラフィーによって可視化された。洗浄後、フィルターは、２４時間、１枚の増感紙と共に−７０° ＣでＸ線フィルムへ暴露された。レーンの同定：１）対照；２）リノール酸（急性、８時間暴露）；３）リノール酸（４８時間暴露）；４）１３−ＨＰＯＤＥ（急性、８時間暴露）；及び５）ＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ、４時間暴露）。図５に示されるように、リノール酸及び１３−ＨＰＯＤＥの両方とも８時間でＶＣＡＭ−１のｍＲＮＡの生産を誘導する。４８時間後、リノール酸はもはやＶＣＡＭ−１のｍＲＮＡを誘導しない。実施例５ＰＵＦＡｓによるＶＣＡＭ−１ｍＲＮＡの誘導は細胞蛋白質の合成に無関係である。ＨＡＥＣが、４時間シクロヘキシミド（１０μｇ／ｍｌ）の存在下又は不存在下に、リノール酸又はアラキドン酸（７．５μＭ）のいずれかへ暴露された。全てのＲＮＡが単離されそして２０μｇが変性１．０％アガロースホルムアルデヒドゲル電気泳動によってサイズ分画され、ニトロセルロースへ移され、そしてＡ）³²Ｐ標識ヒトＶＣＡＭ−１又はＢ）β−アクチン特異的ｃＤＮＡにハイブリダイズされそして次いでオートラジオグラフィーによって可視化された。洗浄後、フィルターは、２４時間、１枚の増感紙と共に−７０°ＣにてＸ線フィルムへ暴露された。図６に示されるように、リノール酸及びアラキドン酸によるＶＣＡＭ−１の誘導は、細胞蛋白質合成と無関係である。実施例６リノール酸は、酸化還元感受性ＮＦ−ｋＢ様因子によってＶＣＡＭ−１プロモーターの転写活性化を誘導する。ＨＡＥＣが、１００ｍｍ組織培養プレート中で約６０％のコンフルエンスを与える比率で分離された。ＨＡＥＣは、標準的な技術を用いた燐酸カルシウム共沈技術によって、３０μｇのｐ２８８ＶＣＡＭＣＡＴ、ｐ８５ＶＣＡＭＣＡＴ、又はｐＳＶ₂ＣＡＴプラスミドのいずれかによってトランスフェクトされた。２４時間の回復期間の後、ＨＡＥＣは５０μＭのＰＤＴＣによって前処理され、そしてリノール酸（７．５μＭ）又はＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ）への３０分間の暴露の後、プレートに直接加えられた。１８時間後、細胞抽出物が０．２５ＭＴｒｉｓ、ｐＨ８．０中で急速な凍結融解によって調製された。各細胞抽出物の蛋白質が、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)活性に関してアッセイされた(Ac,アセチル化された；N，アセチル化されていないクロラムフェニコール)。図７は、この実験の結果を示している。リノール酸が、酸化還元感受性ＮＦ− ｋＢ様因子によってＶＣＡＭ−１プロモーターの転写活性化を誘導している。これらの結果は、ＴＮＦ−α等のようなサイトカインによるＶＣＡＭ−１プロモーターの活性化によって観察されるものと同様である。これは、ＰＵＦＡｓがＶＣＡＭ−１のサイトカイン活性化をも媒介する酸化された中間体を介して働くことを示唆している。実施例７ポリ不飽和脂肪酸は、抗酸化剤ＰＤＴＣによってブロックされるＮＦ−ｋＢ様ＤＮＡ結合活性を活性化する。４％ＦＢＳを含む培地中のコンルフエントなＨＡＥＣ（図１中に記述されたように）が、３０分間ＰＤＴＣ（５０μＭ）によって前処理され、そして次いでリノール酸又はオレイン酸（７．５μＭ）、又はＴＮＦ−α（１００Ｕ／ｍｌ）へ３時間暴露された。５μｇの核抽出物が二本鎖³²Ｐ標識ｗｔＶＣＡＭと共にインキュベートされ、４％の無変性アクリルアミドゲル上でサイズ分画され、そして −７０°Ｃにて１８時間オートラジオグラフのフィルムに暴露された。ＮＦ−ｋＢ様の結合活性を示している二つのバンドＡ及びＣが示されている。弱いバンドＢが対照（無処理）細胞において観察された。図８は、リノール酸が酸化還元感受性の仕方でＶＣＡＭ−１プロモーターへのＮＦ−ｋＢ結合活性を誘導することを図解している。これはサイトカインＴＮＦ −αと同類でありそして作用の類似のメカニズムを示唆する。ＴＮＦ−αは、おそらくｏｘ−ＰＵＦＡによって媒介されるメカニズムを介してＶＣＡＭ−１を誘導する。実施例８酸化されていない及び酸化された（１５−ＨＰＥＴＥ）アラキドン酸の両方による、細胞不含、培地不含の構成における酸化図９Ａ及び９Ｂは、ＰＤＴＣの存在下又は不存在下に、アラキドン酸及び１５ −ＨＰＥＴＥの相対的チオバルビツール酸反応性物質（Ｏ．Ｄ．５３２ｎｍ）の棒グラフである。チオバルビツール酸反応性アッセイ（ＴＢＡＲＳ）は、細胞不含の培地不含の環境中での物質の酸化能力を測定する。図に示されたように、アラキドン酸及び１５−ＨＰＥＴＥの両者は、ＰＤＴＣによって阻害される有意なＴＢＡＲＳ活性を示した。 III．ＶＣＡＭ−１に媒介された疾病の治療方法ポリ不飽和脂肪酸及びそれらの酸化された代謝産物が選択的な、酸化還元感受性免疫調節剤であるという発見は、ＶＣＡＭ−１又は酸化還元感受性遺伝子によって媒介される疾病の治療に関する基礎を提供する。酸化されたポリ不飽和脂肪酸〔酸化されたリノール酸、リノレン酸、アラキドン酸を制限としてではなく含む〕を除去し、濃度を減少させ、又は形成を妨げることを含む、アテローム硬化症、血管形成術後再狭窄、冠状動脈疾患、狭心症、および他の心・血管疾患、並びにVCAM-1によって媒介される非心・血管系の炎症性疾患の治療のための方法が、提供される。代わりの具体例においては、ＶＣＡＭ−１発現を媒介する蛋白質又はペプチドとのＰＵＦＡ又はｏｘ− ＰＵＦＡの相互作用の阻止を含む、これらの疾病の治療のための方法が提供される。 VCAM-1の発現の阻害は、以下に一層詳細に記述されるように、ポリ不飽和脂肪酸の酸化を防止する抗酸化剤の投与によることを含む多数の方法において、ＰＵＦＡｓの代謝産物のｏｘ−ＰＵＦＡｓへの生体内での変性によって達成されることができる。１．抗酸化剤の投与ｏｘ−ＰＵＦＡを還元し又はＰＵＦＡの酸化を阻害し、及び比較的非毒性の及び生物学的利用性のある又はそれを生物学的利用性するよう変性できるいかなる化合物も、この治療に用いることができる。当業者は、標準的技術を用いて化合物がｏｘ−ＰＵＦＡを還元し又はＰＵＦＡの酸化を阻害するかどうかを容易に調べることができる。ジチオカルボキシレート抗酸化剤ジチオカルボキシレートが、アテローム硬化症及び他の心・血管及び炎症性疾患の治療において有用であることが発見された。ジチオカルバメートを含むジチオカルボキシレートは、ＶＣＡＭ−１を発現し又は酸化還元感受性遺伝子の発現を抑制し又は酸化還元感受性径路を介して抑制される遺伝子を活性化する、内皮細胞を含む細胞の能力をブロックするために使用されることができる。少なくとも一つの化合物、ピロリジンジチオカルバメート（ＰＤＴＣ）は、１．０μＭ未満の濃度でＶＣＡＭ−１遺伝子発現を阻害する。この化合物は増殖又は異常分割している血管平滑筋細胞に対して優先的毒性も示す。他のジチオカルバメートであるＮ−メチル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウムも、ＩＣＡＭ−１への有意な影響なしにＶＣＡＭ−１の発現を阻害するが、しかし異常分割している血管平滑筋細胞に対する優先的毒性は示さない。他のジチオカルバメートであるＮ−メチル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウムも、ＩＣＡＭ−１への有意な影響なしにＶＣＡＭ−１の発現を阻害するが、しかし異常分割している血管平滑筋細胞に対する優先的毒性は示さない。ピロリジンジチオカルバメートはＥＬＡＭ−１又はＩＣＡＭ−１発現を有意に阻止せず、従ってこの化合物による治療はＥＬＡＭ−１又はＩＣＡＭ−１により媒介される炎症性応答の諸相に対しては有害に作用しないことが発見された。従って、全般的免疫抑制が回避される。これは、それらを発現することの知られた他の多くの細胞タイプにおいて接着分子の全般的阻害から来る全身的合併症を回避することができる。ＰＤＴＣの他の薬剤学的に許容しうる塩も心・血管及び炎症性疾病の治療のための有効な薬剤である。ジチオカルバメートは、重金属中毒のために臨床的に使用される遷移金属キレート剤である。Baselt，R.C.,F.W.J．Sunderman，et al.(1977),"Comparisons o f antidotal efficacy of Sodium dieth yldithiocarbamate，D-penicillamine and triethylenetetramine upon acute t oxicity of nickel carbonyl in rats." Res Commun Chem Pathol Pharmacol 1 8(4):677-88; Menne，T．and K．Kaaber(1978)，"Treatment of pompholyx due to nickel allergy with chelating agents."Contact Dermatitis 4(5): 289-90 ; Sunderman，F.W．(1978)，"Clinical response to therapeutic agents in po isoning from mercury vapor" Ann Clin Lab Sci 8(4): 259-69; Sunderman，F .W．(1979)，"Efficacy of sodium dieethyldithiocarbamate（dithiocarb）in acute nickel carbonyl poisoning." Ann Clin Lab Sci 9(1): 1-10; Gale，G. R.，A.B．Smith，et al．(1981)，"Diethyldithiocarbamate in treatment of a cute cadmium poisoning." Ann Clin Lab Sci 11(6): 476-83; Jones，M.M．an d M.G．Cherian(1990)，"The search for chelate antagonists for chronic ca dmium intoxication."Toxicology 62(1): 1-25; Jones，S.G.，M.A．Basinger， et al．(1982)，"A comparison of diethyldithiocarbamate and EDTA as antid otes for acute cadmium intoxication." Res Commun Chem Pathol Pharmacol 38(2): 271-8; Pages，A.，J.S．Casas，et al．(1985)，"Dithiocarbamates in heavy metal poisoning: complexes of N,N-di(1-hydroxyethyl)dithiocarbama te with Zn(II)，Cd(II)，Hg(II)，CH₃Hg(II)，and C₆H₅Hg(II)．: J ．Inorg B iochem 25(1): 35-42; Tandon，S.K.，N.S．Hashmi，et al.(1990)，"The lead- chelating effects of substituted dithiocarbamate." Biomed Environ Sci 3( 3): 299-305．ジチオカルバメートは、腎臓毒素を防止するためにシス−白金化学療法においても補助的に使用されてきた。Hacker，M.P.，W.B．Ershler，et a l.(1982)．"Effect of disulfiram(tetraethylthiuram disulfide）and diethyl dithiocarbamate on the bladder toxicity and antitumor activity of cyclop hosphamide inmice." Can Bors，W．(1990)."Radical reactions in vivo--an overview." Radiat ．Enviro n．Biophys. 29(4):249-62．アルコール乱用の治療において最近用いられるジチオカルバメートは、ジスルフィラム、すなわちジエチルジチオカルバメートの２量体である。ジスルフィラムは肝臓のアルデヒドデヒドロゲナーゼを阻害する。Inoue，K.，and Fukunaga ，et al.，(1982)．"Effect of disulfiram and its reduced metabolite，diet hyldithiocarbamate on aldehyde dehydrogenase of human erythrocytes." Lif e Sci 30(5): 419-24。ジチオカルバメートはHIV ウイルスの複製を阻害し、及び特異的T 細胞複集団の成熟も高めることが報告されてきた。これは、AIDs患者集団におけるジエチルジチオカルバメートの臨床的試行へと導いた。Reisinger，E.，et al.，(1990) ．"Inhibition of HIV progression by dithiocarb." Lancet 335:679．ジチオカルボキシレートは、構造Ａ−ＳＣ（Ｓ）−Ｂの化合物であり、チオール抗酸化剤として知られた化合物の一般的なクラスに属し、そしてカルボジチオール類又はカルボジチオレート類とも呼ばれる。−ＳＣ（Ｓ）一部分が療法的活性に必須であり、そしてＡとＢは、化合物の効果又は毒性に有害に作用しないいかなる基であってもよいようにみえる。代わりの具体例においては、ジチオカルバメート中の硫黄原子の一又は両方がセレン原子によって置換されている。セレンによる硫黄の置換は、ある場合には分子の毒性を減少することができ、従って患者により一層許容され得る。Ａ及びＢは、化合物に所望の特性〔寸法、荷電、毒性、及び安定性の程度（胃等のような酸性環境、又は腸管等のような塩基性環境中での安定性を含む）〕を与えるために、当業者によって選択されることができる。Ａ及びＢの選択は、化合物の組織分布及び薬物動力学において重要な影響を有するであろう。一般的に、心・血管疾病の治療のためには、化合物は、血管内皮細胞を含む心臓内壁層中に蓄積又は局在することが望ましい。化合物は、好ましくは腎臓による排泄によって除去される。ジチオカルボキシレートを薬剤学的に投与することの一利点は、それがチオエステラーゼによって酵素的に生体内で分解されるように見えず、そして従って生体内で長い半減期を示すことができることである。好ましい一具体例においては、Ａは水素又はナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム、亜鉛、ビスマス、バリウム、銅、コバルト、ニッケル、又はカドミウムを含むがこれらに限定されない薬剤学的に許容しうる陽イオン；酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パモイック酸、アルギニン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、又はポリガラクツロン酸を含むがこれらに限定されない、典型的にはカルボン酸である、塩形成性有機酸；窒素原子を含むヘテロ環、又は式ＮＲ⁴Ｒ⁵Ｒ⁶ Ｒ⁷〔式中、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁶、及びＲ⁷は独立して水素、Ｃ_1-6直鎖、分岐した、又は（Ｃ_4-6の場合において）環状アルキル、ヒドロキシ（Ｃ_1-6）アルキル（ここに１又は２以上の水酸基は炭素原子の何れにでも位置する。）、又はアリールてある。〕の部分、Ｎ，Ｎ−ジベンジル−エチレンジアミン、Ｄ−グルコサミン、コリン、テトラエチルアンモニウム、又はエチレンジアミンを含むがこれらに限定されないアンモニア又は他の窒素原子を含む塩基から形成された陽イオンである。他の一具体例においては、Ａは取り付けられた分子から生体内で解離されることができる生理学的に解離可能な残基であることができ、アシル（アセチル、プロピオニル、及びブチリルを含む）、アルキル、ホスフェート、サルフェート又はスルホネートを含むがこれらに限定されない。一具体例においては、Ｂはアルキル、アルケニル、アルキニル、アルカリール、アラルキル、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニル、アリール、アルカリール、水素、Ｃ_1-6アルコキシ−Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_1-6アルキルチオ−Ｃ_1-10 アルキル、ＮＲ²Ｒ³、−（ＣＨＯＨ）_nＣＨ₂ＯＨ、（ここにｎは０、１、２、３、４、５、又は６である）、−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｒ¹、アルキルアセチル、アルキルプロピオニル、及びアルキルブチリルを含み、又はヒドロキシＣ_1-6アルキル−（ここに１又は２以上のヒドロキシル基は炭素原子の何れにも位置する。）である。他の一具体例においては、ＢはＮＲ²Ｒ³〔ここにＲ²及びＲ³は独立して、アルキル；一（ＣＨＯＨ）_n（ＣＨ₂）_nＯＨ（ここにｎは０、１、２、３、４、５、又は６である。）；−（ＣＨ₂）_n ＣＯ₂Ｒ¹、−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｒ⁴；ヒドロキシＣ_1-6アルキル−、アルケニル（ビニル、アリル、及びＣＨ₃ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂ＣＨ₂を含むがこれらに限定されない。）；アルキル（ＣＯ₂Ｈ）、アルケニル（ＣＯ₂Ｈ）、アルキニル（ＣＯ₂ Ｈ）、又はアリール（ここに該アリール基は、上で記述されたように、特に例えばＮＯ₂、ＣＨ₃、ｔ−ブチル、ＣＯ₂Ｈ、ハロ、又はｐ−ＯＨ基によって置換されていてよい。）であるか；又は、Ｒ²及びＲ³は一緒になって−（ＣＨ₂）_m−（ここにｍは３、４、５、又は６である）等のような架橋を構成することができ、そして、Ｒ⁴はアルキル、アリール、アルカリル、又はアラルキルでありアセチル、プロピオニル、及びブチリルを含むものである。さらなる他の一具体例においては、Ｂはヘテロ環基又はアルキルヘテロ環基であることができる。ヘテロ環は所望により部分的に又は完全に水素化されていてよい。限定的でない例は、フェナジン、フェノチアジン、ピリジン及びジヒドロピリジンを含む上に挙げられたものである。なおも他の一具体例においては、Ｂは薬剤学的に活性な化合物又は薬物の残基である。ここに用いる語「薬物」は、病気又は疾患の処置、治癒、又は予防のための薬として、内部又は外部に使用されるいかなる物質をもいう。限定的でない例としては、プロブコール等のような抗酸化剤；ニコチン酸；アスピリン等のような血小板の付着を妨げる薬剤；クマジン等のような抗血栓剤；ベラパミル、ジルチアゼム、及びニフェジピン等のようなカルシウムチャンネル遮断剤；カプトプリル及びエナロプリル等のようなアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤；プロプラノロール、テルブタロール及びラベタロール等のようなβ−遮断剤；イブプロフェン、インドメタシン、フェノプロフェン、メフェナム酸、フルフェナム酸、スリンダック等のような非ステロイド抗炎症剤、又は皮質ステロイドを含む、心・血管疾病の治療又は予防のための薬剤である。−Ｃ（Ｓ）ＳＡ基は、薬剤に直接的に結合されていても又はいかなる適した連結部分を介して結合されていてもよい。他の一具体例においては、ジチオカルバメートは、構造ＡＯ₂Ｃ−Ｒ⁹−ＮＲ¹⁰ −Ｃ（Ｓ）ＳＡ〔式中、Ｒ⁹は２価のＢ部分、連結部分、又はいかなる天然に存在するアミノ酸の内部残基（例えば、アラニンではＣＨ₃ＣＨ、グリシンではＣＨ₂、リジンではＣＨ（ＣＨ₂）₄ＮＨ₂等）であり、及びＲ¹⁰は水素又は低級アルキルである〕のアミノ酸誘導体である。Ｂは、１又は２以上のジチオカルバメート基が直接的に取り付けられているか又は任意の適した連結部分を通じて取り付けられているポリマーであってもよい。ジチオカルバメートは、治療上の利益を提供するのに適当な時間にわたって、生体内条件下で該ポリマーから好ましくは放出される。好ましい一具体例においては、ポリマー自身もまた生体内で分解可能である。ここに用いる語「生分解性」又は「生侵食性」は、２５〜３７°Ｃの温度を有するｐＨ６〜８の生理学的溶液へ暴露されたとき、所望の用途（通常、生体内治療において）において許容し得る期間（通常５年よりも短く、そして好ましくは１年よりも短い）内に溶解又は分解するポリマーをいう。好ましい一具体例においては、ポリマーは、用途により１時間乃至数週間の期間で分解する。多数の分解可能なポリマーが知られている。限定的でない例は、リジン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、グルタミン酸、グルタミン、ヒドロキシリジン、セリン、スレオニン、及びチロシンのポリマー及びコポリマーを含むがこれらに限定されない、ペプチド、蛋白質、核蛋白質、リポ蛋白質、糖蛋白質、合成及び天然のポリペプチド及びポリアミノ酸であり、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）等のポリ（α−ヒドロキシ酸）を含むポリオルトエステル、ポリ無水物、アルブミン又はコラーゲン、ラクトース等のような糖単位を含む多糖類、及びポリカプロラクトンである。ポリマーはランダム共重合体又はブロック共重合体であることができる。Ｂはジチオカルバメートの水溶性を高める基であることもでき、例えば、−低級アルキル−Ｏ−Ｒ⁸〔式中、Ｒ⁸は−ＰＯ₂（ＯＨ）−Ｍ⁺又はＰＯ₃（Ｍ⁺）₂（式中、Ｍ⁺は薬剤学的に許容しうる陽イオンである。）；−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ₂）₂ ＣＯ₂ ^-Ｍ⁺、又は−ＳＯ₃ ^-Ｍ⁺である。〕；−低級アルキルカルボニル−低級アルキル、−カルボキシ低級アルキル、−低級アルキルアミノ−低級アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ−置換アミノ低級アルキル−（式中、置換基は各々独立して低級アルキルを表す。）；ピリジル−低級アルキル−；イミダゾリル−低級アルキル−；イミダゾリル−Ｙ−低級アルキル（式中、Ｙはチオ又はアミノである）；モルフォリニル−低級アルキル；ピロリジニル−低級アルキル；チアゾリニル−低級アルキル−；ピペリジニル−低級アルキル；モルフォリニル−低級ヒドロキシアルキル、Ｎ−ピリル、ピペラジニル−低級アルキル、Ｎ−置換ピペラジニル−低級アルキル（式中、置換基は低級アルキルである。〕；トリアゾリル−低級アルキル；テトラゾリル−低級アルキル；テトラゾリルアミノ−低級アルキル；又はチアゾリル−低級アルキルである。代わりの具体例においては、Ｂ−Ｃ（Ｓ）Ｓ−ＳＣ（Ｓ）−Ｂ等のような２量体が投与されることができる。ジチオカルバメートの限定的でない例は次の構造のものである。アテローム硬化症及び他の心・血管及び炎症性疾病の治療における使用のために、罹患部位に位置するのに適した脂質親和性を有するジチオカルボキシレートが選ばれなければならない。化合物は、脂肪沈着物等のような低交替領域内に取り込まれるべきでない。心臓血管疾病の治療のための好ましい一具体例においては、化合物の薬物動力学はうっ血心臓不全又は腎不全によって劇的に影響されるべきではない。炎症性皮膚疾病の治療に関する局所的適用のためには、選択された化合物が患部へ治療効果を与えるのに十分な量で皮膚によって吸収されるように処方されなければならない。ジチオカルボキシレートは生理学的に許容しうるものでなければならない。一般的には、少なくとも２、好ましくは少なくとも５又は１０の治療係数を有する化合物が許容しうる。治療係数はＥＣ₅₀／ＩＣ₅₀として定義され、ここにＥＣ₅₀ はＶＣＡＭ−１の発現を５０％阻害する、化合物の濃度であり、ＩＣ₅₀は５０％の標的細胞に毒性である化合物の濃度である。細胞毒性は、当業者に知られているように、直接細胞計数、トリパンブルー排除、又は³Ｈ−チミジン導入等のような様々な代謝活性実験によって測定されることができる。ＰＤＴＣの組織培養中での治療係数は、ＨＵＶＥ細胞における、ＴＮＦａによって活性化されたＶＣＡＭ−１発現を阻害する能力によって細胞毒性を割ることによって測定するとき、１００を超えている。迅速に分裂する細胞タイプＨＴ−１８ヒト神経膠腫についての最初の研究は、治療濃度よりも１００倍大きい濃度において毒性を示していない。経口投与形のジエチルジチオカルバメートである、アルコール乱用の治療に用いられるジスルフィラムは、適正に投与される場合、通常大した臨床的毒性を示さない。遺伝子毒性であることが知られている幾つかのジチオカルバメートがある。これらの化合物は本発明の範囲内には入らず、本発明の範囲は生理学的に許容しうる物質の投与に限定される。遺伝子毒性のジチオカルバメートの例は、殺真菌薬ジメチルジチオカルバミン酸亜鉛である。そのうえ、あるジチオカルバメートの抗コリンエステラーゼ性は、神経毒作用に繋がる可能性がある。Miller，D.(198 2)．Neurotoxicity of the pesticidal carbamates．Neurobehav ．Toxicol．Ter atol． 4(6):779-87．ここに用いられるものとして、語「ジチオカルボキシレート」は、式・Ｒ¹ＳＣ（Ｓ）ＮＲ²Ｒ³又はＲ²Ｒ³Ｎ（Ｓ）ＣＳ−ＳＣ（Ｓ）ＮＲ²Ｒ³〔式中、Ｒ¹はＨ又はナトリウム、カリウム、又はＮＲ⁴Ｒ⁵Ｒ⁶Ｒ⁷（式中、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁶、及びＲ⁷は、独立して、水素、Ｃ_1-6の直鎖の、分岐のある、又は環状のアルキル、ヒドロキシ（Ｃ_1-6）アルキル（式中、１又は２以上のヒドロキシル基が炭素原子の任意のものに配置されている。）、又はアリールである。）を含むがこれらに限定されない薬剤学的に許容しうる陽イオンであり、そしてＲ²及びＲ³は、独立して、Ｃ_1-10の直鎖の、分岐のある、又は環状のアルキル；−（ＣＨＯＨ）_n（ＣＨ₂）_nＯＨ（式中、ｎは０、１、２、３、４、５、又は６である。）；−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｒ¹、−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｒ⁴；ヒドロキシ（Ｃ_1-6 ）アルキル−であるか、又はＲ²及びＲ³は、一緒になって、−（ＣＨ₂）_m− （ここに、ｍは３〜６である。）等のような架橋を構成し、そして式中Ｒ⁴はアルキル、アリール、アルカリール、又はアセチル、プロピオニル、及びブチリルを含むアラルキルである。〕のジチオカルバメートを含むがこれらに限定されない。図１５に示された有用なジチオカルバメートの具体例は、ピローリジン−Ｎ− カルボジチン酸ナトリウム、Ｎ−メチル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ−ジ（カルボキシメチル）−Ｎ−カルボジチオン酸三ナトリウム、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム（ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウム）、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウムを含む。活性ジチオカルボキシレート及び特にジチオカルバメートは商業的に入手可能であるか又は既知の方法を使用して製造できる。 II．生物学的活性ＶＣＡＭ−１の発現を阻害するジチオカルボキシレートの能力は、実施例９から１５において以下詳細に説明される方法によるものを含む様々な方法により測定できる。便宜上、実施例９〜１１及び１４〜１５がピロリジン−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム（ＰＤＴＣともいう。）の生物学的活性の評価を記述している。これらの実施例は、本発明の範囲を限定することを意図したものでなく、アテローム硬化症、及びＶＣＡＭ−１によって媒介される他のタイプの炎症性疾病及び心・血管疾病を治療するための、上に記述された化合物のいかなる使用をも具体的に含む。上に記述した何れの化合物も、いつでもＰＤＴＣに置き換えて同様の仕方で評価することができる。実施例１２及び１３はＶＣＡＭ−１の遺伝子発現を阻害する多数のジチオカルバメートの能力に関する相対的なデータを提供している。下の実施例は、請求の範囲に記載されたジチオカルバメートが、アテローム硬化症及び炎症性応答において活性であることが知られる多くの信号に応答して血管内皮細胞によってＶＣＡＭ−１が発現される能力を特異的にブロックすることを確立している。実験手順細胞培養ＨＵＶＥ細胞が、カニューレを挿入され血液を除去するためにハンクス溶液によって灌流されたヒト臍帯静脈から分離され、そして次いで３７°Ｃで１５分間、１％のコラゲナーゼと共にインキュベートされた。コラゲナーゼの除去の後、細胞は２０％胎仔牛血清（HyClone）、１６μｇ／ｍｌヘパリン（ESI Pharmaceuticals，Cherry Hill，NJ）、５０μｇ／ｍｌ内皮細胞増殖補充剤(Co llaborative Research Incorporated，Bedford MA)、２５ｍＭＨｅｐｅｓＢｕｆｆｅｒ、２ｍＭＬ−グルタミン、１００μｇ／ｍｌペニシリン及び１００ μｇ／ｍｌストレプトマイシンを補充されたＭ１９９培地中で培養され、そして０．１％ゼラチンでコートされた組織培養プレート上で３７°Ｃで増殖された。細胞はコンフルエントの時点で１：４に分離することにより継代培養された。細胞は最初の８培養以内に使用された。サイトカイン及び他の薬剤との培養コンルフエントなＨＵＶＥ細胞はリン酸塩緩衝食塩水によって洗浄され、次いで新鮮な培地に受け入れられた。ＰＤＴＣの示された各濃度が、サイトカインを添加３０分前に前処理として加えられた。サイトカイン及び他のインデューサーが、各実験において示されている時間及び濃度で培地に直接に加えられた。ヒト組み換えＩＬ−１ｂはUpjohn Company(K alamazoo，Michigan)の寛大な贈り物であった。ＴＮＦａはBohringer Engelheim から得た。細菌のリポ多糖類（ＬＰＳ）、ポリイノシン酸：ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ）、及びピロリジンジチオカルバメート（ＰＤＴＣ）はSigma Chemic al(St．Louis，MO)から得られた。全ての他の薬剤は試薬グレードであった。ＲＮＡ分離：全ての細胞ＲＮＡが、酸性グアニジウムチオシアネート−フェノール−クロロホルム混合物を用いて、一回の抽出によって分離された。細胞はリン酸塩緩衝食塩水ですすがれ、次いで２ｍｌのグアニジウムイソチオシアネートによって溶解された。溶液は０．２ｍｌの酢酸ナトリウム塩（ｐＨ４．０）によって酸性にされ、次いで２ｍｌフェノール及び０．４ｍｌクロロホルム：イソアミルアルコール（２４：１）によって抽出された。ＲＮＡは、ノーザンブロット分析のために使用される前に、２回のエタノール沈殿処理を受けた。ノーザンブロット分析：総細胞ＲＮＡ（２０μｇ）が、１μｇ／ｍｌの臭化エチジウムの存在下で１％アガロースホルムアルデヒドゲルを用いてサイズ分画された。ＲＮＡはニトロセルロースフィルターへ移され、そしてStratlinker UV 架橋装置（Stratagene，La Jolla，CA）を用いた紫外線照射によって共有結合的に結合された。ハイブリダイゼーションが、５×ＳＳＣ（１×＝１５０ｍＭＮａＣｌ，１５ｍＭクエン酸ナトリウム）、１％ドデシル硫酸ナトリウム、５× Denhardt溶液、５０％ホルムアミド、１０％デキストラン硫酸及び１００μｇ／ｍｌの剪断された変性サケ精子ＤＮＡ中で４２°Ｃで１８時間実施された。約１〜２×１０⁶ｃｐｍ／ｍｌの標識されたプローブ（比活性＞１０８ｃｐｍ／μｇＤＮＡ）がハイブリダイゼーションを通じて使用された。ハイブリダイゼーションに続いて、フィルターが５５°Ｃで０．２×ＳＳＣの最終的厳重さを以て洗浄された。ニトロセルロースは、他のプローブによる再ハイブリダイゼーションに先立ち、沸騰水を用いてストリップされた。オートラジオグラフィー、が−７０°Ｃにおいて増感紙を用いて実施された。 ³² プローブ： ³²Ｐ標識されたＤＮＡプローブがランダムプライマーオリゴヌクレオチド法を用いてつくられた。ＩＣＡＭ−１プローブは、ヒトｃＤＮＡのＥｃｏＲ１画分であった。ＥＬＡＭ−１プローブは、ヒトｃＤＮＡの１．８５ｋｂＨｉｎｄIII画分であった。ＶＣＡＭ−１プローブは、ヌクレオチド１３２〜１８１４からなるヒトｃＤＮＡのＨｉｎｄIII−ＸｈｏＩ画分であった。酵素結合されたイムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）：ＨＵＶＥ細胞が、アッセイの前に４８〜７２時間、９６ウエル組織培養プレート上で平板培養された。５％ＦＢＳを含むＭ１９９中の一次抗体が各ウエルへ加えられ、そして３７°Ｃで１時間インキュベートされた。次いて、細胞は洗浄されそして５％ＦＢＳを含むＭ１９９中で１／５００に希釈されたペルオキシダーゼ接合されたヤギ抗マウスＩｇＧ(Bio Rad)と共に１時間インキュベートされた。次いで、ウエルは洗浄されそして抗体の結合は、0.003％のＨ₂Ｏ₂を含む10mg/mlの3,3,5,5'−テトラメチルベンジジン(Sigma)の100μlの添加によって検出された。反応は25μl の８Ｎ硫酸の添加によって停止された。プレートは、第二ステップ抗体によってのみ染色された列のブランクの後、ＯＤ４５０ｎｍにおいてＥＬＩＳＡリーダー(Bio Rad)で読まれた。データは３回行った平均を表している。抗体：血管細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）を認識するモノクローナル抗体（ＭＡｂ）４Ｂ９は、John Harlan 博士(University of Washington)の寛大な贈り物であった。内皮細胞接着分子（ＥＬＡＭ−１）を認識するＭＡｂＥ９Ａ１Ｆ１は、Swerlick博士(Emory University)の寛大な贈り物であった。細胞間接着分子−１（ＩＣＡＭ−１）を認識するｍＡｂ８４Ｈ１０を生産するハイブリドーマは、我々の研究室内でいつもの手順で増殖され、抗体が組織培養上澄として用いられた。実施例９ＰＤＴＣは、ＩＬ−１ｂに媒介されたＨＵＶＥＣＶＣＡＭ−１の誘導をブロックするが、ＩＣＡＭ−１、ＥＬＡＭ−１又はｍＲＮＡの蓄積をブロックしない。内皮細胞の酸化性状態が細胞接着分子遺伝子の基礎的又は誘導された発現を変えることができるかどうかを測定するために、培養されたヒト血管内皮細胞が、２４時間までの間、チオール化された金属キレート抗酸化剤ピロリジンジチオカルバメート（ＰＤＴＣ，５０μＭ）の存在下又は不存在下に、誘導するサイトカインＩＬ−１ｂ（１０Ｕ／ｍｌ）へ暴露された。図１０中に示されるように、ＩＬ−１ｂ単独（レーン２、４、６、８）は、ＶＣＡＭ−１（パネルＡ）、Ｅ−セレクチン（ＥＬＡＭ−１、パネルＢ）及びＩＣＡＭ−１（パネルＣ）のｍＲＮＡ蓄積の予期された迅速且つ一時的な誘導（全て４時間においてピークになっている）を誘導する。しかしながら、ＰＤＴＣの存在下では、ＶＣＡＭ−１のｍＲＮＡ蓄積のＩＬ−１ｂ誘導は９０％を超えて劇的に阻害される（パネルＡ、レーン３、５、７、９）。対照的に、ＩＬ−１ｂに媒介されたＥＬＡＭ−１の誘導は２及び２４時間において若干阻害されているけれども（レーン２及び３、８及び９を比較せよ、パネルＢ）、ＰＤＴＣは４及び８時間において誘導を阻害していない（レーン５及び７、パネルＢ）。ＩＬ −１ｂに媒介された、ＩＣＡＭ−１のｍＲＮＡ蓄積の誘導は影響されない（パネルＢ、レーン３、５、７、９）。実際、ＩＣＡＭ−１のｍＲＮＡ蓄積のＩＬ−１ｂ誘導のゆるやかな増大（〜３０％）が観察される（レーン４及び５を比較せよ、パネルＢ）。レーン当たりのニトロセルロース移動されたＲＮＡの当量はエチジンブロマイド染色及び可視化によって確認された。投与量応答分析が、ＰＤＴＣが投与量依存の仕方でＩＬ−１ｂによるＶＣＡＭ −１遺伝子発現の誘導を阻害するかどうかを測定するために実施された。図１１中に示されたように、ＰＤＴＣは、約１０μＭの計算されたＥＣ₅₀による急な投与量応答曲線（図１１、パネルＡ）を伴ってＶＣＡＭ−１遺伝子発現のＩＬ−１ｂに媒介された誘導を阻害する一方、ＰＤＴＣはこれらの濃度によってＥＬＡＭ −１発現の、ＩＬ−１ｂに媒介された誘導を阻害しない（図１１、パネルＢ）。ＩＣＡＭ−１のｍＲＮＡ蓄積のＩＬ−１ｂに媒介された誘導は０．５μＭよりも高い濃度でＰＤＴＣにより高められる（図２、レーン２及びレーン４〜７を比較せよ、パネルＣ）。これらのデータは、ＩＬ−１ｂがジチオカルボキシレート、及び特にＶＣＡＭ −１遺伝子発現の誘導におけるその信号メカニズムの一部として、ジチオカルバメート感受性ステップを利用することを明示している。データは、このジチオカルバメート感受性ステップがＥＬＡＭ−１又はＩＣＡＭ−１遺伝子発現の、ＩＬ−１ｂに媒介された誘導において有意な役割を果さないことを示すようにもみえる。実施例１０ＰＤＴＣは、複数の刺激によるＨＵＶＥＣＶＣＡＭ −１のｍＲＮＡ蓄積の誘導をブロックする。ＶＣＡＭ−１遺伝子発現の他のよく記述された活性化剤もＰＤＴＣ感受性ステップを利用するかどうか測定するために、アクチベーターの３つの別のクラスが試験された。即ち、他の一典型的な受容体媒介された誘導剤（ＴＮＦａ）、受容体に媒介されないインデューサー（リポ多糖類（ＬＰＳ））及び最近記述された新規なインデューサー（二重鎖ＲＮＡ、ポリ（Ｉ：Ｃ））である。３つの場合全てにおいて、ＰＤＴＣは、４時間後ＨＵＶＥＣｓ中のＶＣＡＭ−１ｍＲＮＡ蓄積の誘導を劇的に阻害した（図１２、パネルＡ）。ＴＮＦａに媒介されたＥＬＡＭ−１遺伝子発現はある程度抑制されたが（図１２レーン１及び２、パネルＢ）、ＬＰＳ及びポリ（Ｉ：Ｃ）に媒介されたＥＬＡＭ−１ｍＲＮＡ蓄積は影響されなかった（図１２レーン３〜６、パネルＢ）。ＩＣＡＭ−１ｍＲＮＡ蓄積の誘導は影響されなかった（図１２、パネルＣ）。このデータは、別個の径路によって作用する構造的に別個の誘導剤が、ＶＣＡＭ−１遺伝子発現の誘導に特異的な共通の調節ステップを共有することを示している。実施例１１ＰＤＴＣは複数の刺激によって誘導された、ＶＣＡＭ −１のＨＵＶＥ細胞表面発現をブロックする。そのｍＲＮＡと同様に、ＶＣＡＭ−１の内皮細胞表面蛋白質発現の誘導もＰＤＴＣによって阻害できるかどうかを測定するために、モノクローナル抗体が、培養ＨＵＶＥ細胞における細胞表面ＶＣＡＭ−１及びＩＣＡＭ−１の誘導を定量するためにＥＬＩＳＡアッセイに使用された。図１３に示されるように、複数のクラスの活性化剤が、ＰＤＴＣの不存在下に（−ＰＤＴＣ）、６時間でピークになる、細胞表面でのＶＣＡＭ−１の迅速且つ一時的な蓄積（左上パネル）を誘導している。ＰＤＴＣの存在下では（＋ＰＤＴＣ、右上パネル）、試験された全ての薬剤によるＶＣＡＭ−１の細胞表面発現の誘導は、劇的に阻害されている（８０〜９０％）。対照的に、細胞表面ＩＣＡＭ−１の誘導された発現は、同一の条件下で影響されない（左下及び右下パネル）。これらのデータは、そのｍＲＮＡ蓄積と同様に、細胞表面ＶＣＡＭ−１発現がジチオカルバメートによって選択的に阻害されること、及び、複数のクラスの活性化剤が、ＶＣＡＭ−１遺伝子発現を誘導するために、同様なジチオカルバメート感受性メカニズムを利用することを明示している。実施例１２ＶＣＡＭ−１のＴＮＦａ誘導をブロックすることにおける抗酸化剤の比較有効性構造的に類似又は非類似の抗酸化剤もＶＣＡＭ−１遺伝子発現を阻害することができるかどうか、そしてどの程度の強さでで阻害するかを測定するために、ＨＵＶＥ細胞が、異なった濃度の４つの異なった抗酸化剤の存在下又は不存在下に、６時間ＴＮＦａに暴露された。図１４に示されるように、ジエチルジチオカルバメート（ＤＥＴＣ）及びＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）の両方が、それぞれ濃度５μＭ及び３０μＭでＶＣＡＭ− １発現を阻害した。対照的に、ＰＤＴＣ（ＰＤＴＣ）は５〜５０μＭで効果があった。鉄金属キレート剤であるデスフェロキシミンは、試験された濃度では効果がなかった。実施例１３ＰＤＴＣはＶＣＡＭ−１／ＶＬＡ−４に媒介された接着のＴＮＦ誘導を阻害する。ＨＵＶＥ細胞における様々な抗酸化剤のＶＣＡＭ−１のＴＮＦ−α誘導を阻害する能力が、実施例１２中に説明された方法によって評価された。図１５は、ＰＴＤＣ（Ｎ−ピローリジンジチオカルバミン酸ナトリウム）、ＤＩＤＴＣ（Ｎ，Ｎ−ジエチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム）、ＳａｒＤＴＣ（Ｎ−メチル −Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム）、ＩＤＡＤＴＣ（Ｎ，Ｎ−ジ（カルボキシメチル）−Ｎ−カルボジチオン酸三ナトリウム）、ＭＧＤＴＣ（Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム）、ＭｅＯＢＧＤＴＣ（Ｎ−（４−メトキシベンジル）−Ｄ−グルカミン−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム）、ＤＥＤＴＣ（Ｎ，Ｎ−ジエチル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム）、Ｄｉ−ＰＤＴＣ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−Ｎ−カルボジチオン酸ナトリウム）、及びＮＡＣ（Ｎ−アセチルシステイン）の種々の濃度に対する、ＴＮＦ−αに活性化されたＨＵＶＥ細胞における相対的ＶＣＡＭ−１細胞表面発現（Ｏ．Ｄ．５９５ｎＭ）のグラフである。実施例１３ＰＤＴＣはＶＣＡＭ−１／ＶＬＡ−４に媒介された接着のＴＮＦ誘導を抑制する。ＶＣＡＭ−１制御のＰＤＴＣ阻害が機能的結果に関係しているかどうかを明らかにするために、ＴＮＦａ（１００Ｕ／ｍｌ）によって刺激されていない又は刺激されたいずれかのＨＵＶＥＣ細胞へのＭｏｌｔ−４細胞の結合が、ＰＤＴＣの存在下又は不存在下に６時間試験された。Ｍｏｌｔ−４細胞は、ＶＣＡＭ−１依存メカニズムを通じて活性化されたＨＵＶＥＣへ結合することが従来示されている。図１６に示されるように、ＰＤＴＣが培地中に存在するとき、ＨＵＶＥＣ細胞に結合しているＭｏｌｔ−４の割合が減少した。実施例１４ＰＤＴＣは、コレステロール食家兎の胸部大動脈への単球の結合を阻害する。実験は、チオール抗酸化剤ＰＤＴＣが実験動物モデルにおいて、アテローム硬化症の構成要素と結合した第一の単球をブロックするのに効果的であるかどうか決定するために実施された。一匹の成熟ニュージーランド白色家兎（３．５ｋｇ）が毎日１回５日間ＰＤＴＣの静脈注射（２０ｍｇ／ｋｇ、ＰＢＳ中２０mg/ml の濃度として）を受けた。注射は周縁の耳静脈内に留置したカニューレを通じて与えられ、それはヘパリン化食塩水溶液によって洗い流すことにより開存した状態に維持された。ＰＤＴＣ溶液は毎日又は隔日に新たに混合され（４°Ｃで暗所で貯蔵され）、そして使用の直前に濾過（０．４５ｍｍ孔フィルター）された。最初の注射の後、カニューレが配置された時、薬剤が、明確な不快感又は他の病的作用を伴わずに意識のある状態でウサギに投与された。注射の２日目に、ウサギは重量で１％コレステロールを含んだ食事を与えられ、それは実験の残りを通して続けられた。５日目に、動物は安楽死させられ、そして胸部大動脈が切除され固定された。適切な調製の後、サンプルはＬａＢエミッターを取り付けられたＩＳＩＤＳ−１３０走査型電子顕微鏡の低ステージによって造影された。二重スクリーン造影及びＣＲＴスクリーン上の透明グリッドを用いて、６２０倍の倍率で６４箇所の隣接する視野が、約１．３mm³の面積をカバーするために評価された。各視野内において、接着した白血球（ＷＢＣ）及び赤血球（ＲＢＣ）の数がカウントされ記録された。弓サンプルからのデータは次の通りである。即ち、１．３mm³場所あたり５ＷＢＣ乃至約２５ＲＢＣ。ＷＢＣ接着のこのレベルは通常食を与えられた対照動物と同様である（１視野当たり約７が、２つの「陰性対照」実験からの弓及び胸部サンプルにおいて見られた）。４日間１％コレステロールを与えられしかし抗酸化剤を与えられなかった「陽性対照」家兎は、約５倍の増加、すなわち３８ＷＢＣ／１．３mm³までの接着を示す。殆ど細胞サイズの残滓が各弓サンプルに接着しているのが観察された。この物質が調製のアーティファクトであるかどうか、又は生体内で存在していたものかどうか、そしてもしそうならそれがＰＤＴＣ投与に関係するかどうかは、はっきりしない。これらの研究は、ＰＤＴＣ注入が、大動脈内皮への最初の単球の接着を効果的にブロックすることができることを示す。実施例１５ＰＤＴＣによるＢＳＡ１３−ＨＰＯＤＥ付加体の阻害図１８は、蛍光単位対ＰＤＴＣのマイクロモル濃度で測定したときの、ＢＳＡ及び１３−ＨＰＯＤＥの蛍光付加体の形成に対するＰＴＤＣの効果の棒グラフである。１μＭの１３−ＨＰＯＤＥが、ＰＤＴＣの存在下で６日間２００μｇのＢＳＡと共にインキュベートされた。蛍光が３３０〜３６０ｎｍでの励起により４３０〜４６０ｎｍで測定された。アッセイの詳細に関しては、Freebis，J.，Par thasarathy，S.，Steinberg，D，Proceedings of the National Academy of Sci ences 89，10588 〜10592，1992 を見よ。典型的反応において、100nmol のＬＯＯＨ（リノール酸のリポキシゲナーゼにより触媒された酸化によって生産される）が100 μg の牛血清アルブミンと共に48〜72時間インキュベートされ、そして蛍光性の生成物の形成の後、３６０ｎｍでの励起及び３９０〜５００ｎｍの発光により蛍光スペクトルを測定する。示されたように、ＰＤＴＣはＢＳＡ及び１３−ＨＰＯＤＥの蛍光付加体の濃度を減少する。図１９は、波長（ｎｍ）及びＰＤＴＣの濃度の関数としての、ＢＳＡ及びｏｘ −ＰＵＦＡの蛍光付加体の形成に対するＰＴＤＣの効果のグラフである。ＰＤＴＣの濃度が増加するにつれて、蛍光付加体の量は減少する。実施例１６西洋わさびペルオキシダーゼによる、ＬＤＬの酸化に対するＰＤＴＣの効果図２０は、ＰＤＴＣの様々な濃度に対して経時（分）的に測定された、西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）による、ＬＤＬの酸化に対するＰＤＴＣの効果のグラフである。ＬＤＬの酸化の後、２３４ｎｍでの光学密度の増加によって測定したときのＬＤＬの脂肪酸成分の酸化を測定した。ポリ不飽和脂肪酸が酸化されるとき、２３４ｎｍで吸収する共役ジエンの形成をもたらす二重結合のシフトがある。開始及び進行曲線（遅延相）の切片はＬＤＬの酸化されやすさの尺度であることが示唆される。遅延相が高い程、ＬＤＬは酸化に対して一層抵抗性である。典型的には１００μｇのヒトＬＤＬが５μＭのＨ₂Ｏ₂と共にインキュベートされそして２３４ｎｍの吸収の増加がそれに続いて起こった。インキュベーション期間の後、ＰＤＴＣは濃度依存性にＨＲＰによるＬＤＬの酸化を抑制することが観察される。実施例１７サイトカインに誘導されたｏｘ−ＰＵＦＡの形成に対するＰＤＴＣの効果図２１は、ヒト大動脈内皮細胞中の、サイトカインに誘導されたｏｘ−ＰＵＦＡの形成に対するＰＤＴＣの効果のチャートである。示されているように、ＴＮＦ−α及びＩＬ−１Ｂの両方とも、リノール酸のｏｘ−リノール酸への酸化を引き起こす。この酸化はＰＤＴＣによって有意に妨げられる。２．ＰＵＦＡｓ及びｏｘ−ＰＵＦＡｓの合成及び代謝の調節ＶＣＡＭ−１の発現の阻害は、ＰＵＦＡｓのｏｘ−ＰＵＦＡｓへの代謝の調節を通じて達成されることができる。例えば、ペルオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、シクロオキシゲナーゼ、及びサイトクロームｐ４５０を含む多数の酵素が、不飽和物質を酸化することが知られている。これらの酵素の阻害は生体内におけるＰＵＦＡｓの酸化を妨げることができる。ＰＵＦＡｓは、金属依存性の非酵素物質によって酸化されることもできる。 IV．酸化還元感受性遺伝子の発現を変更する方法代わりの具体例において、酸化還元感受性遺伝子の発現を抑制するための又は酸化還元感受性径路によって抑制された遺伝子を活性化するための方法が提供され、それは酸化信号の酸化、そして典型的にはポリ不飽和脂肪酸の酸化を妨げる物質の有効量を投与することを含む。免疫応答の提供に関与する代表的な酸化還元感受性遺伝子としては、免疫応答の開始に関与するサイトカイン（例えば、ＩＬ−１β）、損傷部位への炎症性細胞の移動を促進する化学誘引物質（例えば、ＭＣＰ−１）、増殖因子（ＩＬ−６、トロンビン受容体）、及び接着分子（例えば、ＶＣＡＭ−１及びＥ−セレクチン）を発現する遺伝子を含むがこれらに限定されない。この開示によって、当業者は、酸化還元感受性遺伝子の発現を抑制し又は酸化還元感受性径路によって抑制された遺伝子を活性化するそれらの能力について、広い範囲の抗酸化剤をスクリーニングすることができよう。これらの具体例は全て、本発明の範囲内にあることが意図されている。このスクリーニングの結果に基づいて、生体内で遺伝子発現を制御又は阻害するために使用できる、酸化還元感受性遺伝子の５’制御配列を含む核酸分子を同定することができる。プラスミド及び真核生物のウイルスベクターの両方を含むベクターは、熟練者の好み及び判断に依存して（例えば、Sambrookら、16章を見よ）、細胞中において特定の組換え５’−隣接領域遺伝子構造物を発現させるのに使用できる。さらに、生体内で核酸配列の導入が可能な、ウイルス性及び非ウイルス性の多数のベクターが開発されつつある（例えば、Mulligan，1993 Science，260，926〜932 、参照としてここに導入される米国特許番号4,980,286 及び米国特許番号4,868,116 を見よ）。最近、核酸が陽イオン型リポソーム中にカプセルに包埋された、哺乳類に静脈注射することのできる放出システムが開発された。このシステムは成熟マウスの複数の組織（内皮及び骨髄を含む）の細胞内にＤＮＡを導入するのに使用されてきた（例えば、参照としてここに導入されるZhu ら、1993 Science 261， 209 〜211 を見よ）。酸化還元感受性遺伝子の５’隣接配列は、酸化還元感受性遺伝子の発現を抑制するために使用できる。例えば、酸化還元感受性遺伝子の５’隣接領域の全て又は一部のアンチセンスＲＮＡが、生体内で遺伝子の発現を抑制するために使用できる。細胞内で発現される選択されたＤＮＡ配列のアンチセンスＲＮＡを発生するために使用することができる発現ベクター（例えば、レトロウイルス発現ベクター）は、当該技術分野において既に入手可能である（例えば、米国特許番号第 4,868,116 、米国特許番号第4,980,286 を見よ）。従って、細胞内受け渡されたとき、挿入されたＤＮＡの転写が、細胞中に通常見出される遺伝子のｍＲＮＡ転写物に相捕的であるアンチセンスＲＮＡを与えるよう、遺伝子の５’隣接領域の配列の全て又は一部を含むＤＮＡを、適切な発現ベクター中へと挿入できる。次いで、挿入されたＤＮＡのこのアンチセンスＲＮＡ転写物は、細胞内に見出される通常のｍＲＮＡ転写物と塩基対を作ることができ、そしてそれによってｍＲＮＡの翻訳を妨げることができる。もちろん、アンチセンスＲＮＡがｍＲＮＡ上に存在する相捕的配列を含むことを保証するために、酸化還元感受性遺伝子の転写開始部位から下流にある５’隣接領域の配列を選択することが必要である。アンチセンスＲＮＡは、インビトロでも産生でき、次いで細胞中へと挿入することができる。オリゴヌクレオチドは、自動化された合成装置（例えば、 Milligen-Biosearch,Burlington,MAの自動化された合成機Model 8700又はABI Mo del 380B）によって合成することができる。加えて、アンチセンスデオキシオリゴヌクレオチドは、遺伝子転写及びウイルス複製を阻害するのに効果的であることが示されている（例えば、Zamecnikら、1978 Proc ．Natl．Acad．Sci．USA 7 5，280〜284;Zamecnikら、1986 Proc ．Natl．Acad．Sci.，83，4143 〜4146; Wi ckstrom ら、1988 Proc ．Natl．Acad．Sci．USA 85，1028 〜1032; Crooke、19 93 FASEB J ． 7，533 〜539 を見よ）。そのうえさらに、最近の研究は、もし変更されたヌクレオチドをアンチセンスオリゴヌクレオチドが含むならば、アンチセンスオリゴヌクレオチドによる遺伝子発現の阻害の改善が可能であることを示している〔例えば、参照としてここに導入されるOffensperger et al.1993 EMBO J. 12，1257 〜1262（invi vo inhibition of duck hepatitis B viral re plication and gene expression by antisense phosphorothioate oligodeoxynu cleotides）；Rosenberg et al.,PCT WO 93/01286（synthesis of sulfurthioat e oligonucleotides）；Agrawal et al.,1988 Proc ．Natl．Acad．Sci．USA 85 ，7079 〜7083（synthesis of antisense oligonucleoside phosp horamidates and phosphorothioates to inhibit replication of human immuno deficiency virus-1）；Sarin et al.，1989 Proc ．Natl．Acad．Sci．USA 85 ，7448 〜7794（synthesis of antisense methylphosphonate oligonucleotides ）；Shaw et al.,1991 Nucleic Acid Res 19，747〜750（synthesis of 3’ex onuclease-resistant oligonucleotides containing 3’terminal phosphoroami date modifications）を見よ〕。酸化還元感受性遺伝子の５’隣接領域の配列は、三重螺旋（トリプレックス）遺伝子治療に使用もできる。ＤＮＡ鎖のうち片方の上の遺伝子プロモーター配列と相補的なオリゴヌクレオチドは、遺伝子の転写を阻害する局所的三重核酸螺旋を形成するようにプロモーター及び制御配列と結合することが示されてきた（例えば、1989 Maherら、Science 245，725 〜730；Orson ら、1991 Nucl.Acids R es. 19，3435 〜3441；Postal ら、1991 Proc ．Natl．Acad．Sci．USA 88，822 7 〜8231；Cooney ら、1988 Science 241，456 〜459；Young ら、1991 Proc ．Natl．Acad．Sci．USA 88,10023 〜10026；Duval-Valentinら、1992 Proc ．N atl．Acad．Sci．USA 89，504〜508；1992 Blumeら、Nucl ．Acids Res. 20,177 7〜1784；1992 Grigoriev ら、J ．Biol．Chem. 267，3389〜3395を見よ）。最近、遺伝子発現を抑制するための、オリゴヌクレオチドに向けられた三重螺旋形成において使用するためのオリゴヌクレオチドを設計するための手引きを提供する、理論計算及び実験的発見の両方が報告されてきた。例えば、オリゴヌクレオチドは、標的配列特異性を確実にするために一般的に長さで１４ヌクレオチドよりも長くあるべきである（例えば、Maher ら、(1989); Grigoriev ら、(1992)を見よ）。同様に、多くの細胞が５０ヌクレオチドよりも短い長さのオリゴヌクレオチドを熱心に取り込む（例えば、Orson ら、(1991)；Holt ら、1988 Mol ．Cell．Biol ． 8，963 〜973；Wickstrom ら、1988 Proc ．Natl．Acad．Sci．USA 85，1028 〜 1032 を見よ）。例えば３’エキソヌクレアーゼによる細胞内分解の受けやすさを減らすために、配列結合特異性の損失を伴わずにオリゴヌクレオチドの３ ’末端水酸基へ遊離アミンを導入されることができる（Orson ら、1991）。そのうえさらに、もしもオリゴヌクレオチド内に存在しうるいずれかのシトシンがメチル化され、そしてまたもしもアクリジン誘導体等のようなインターカレーション剤も５’末端リン酸へ共有結合により取り付けられるならば（例えば、ペンタメチレン架橋を経由して）、配列特異性の損失を伴わずに一層安定なトリプレックスが形成される（Maher ら、(1989)；Grigorievら、(1992)）。オリゴヌクレオチドを生産又は合成する方法は該技術分野において良く知られている。そのような方法は、標準の酵素的消化の後のヌクレオチド画分単離（例えば、Sambrookら、５、６章を見よ）から純粋に合成する方法、例えばMilligen 又はBeckman System 1Plus DNA合成装置を使用したシアノエチルホスホアミダイト法（同様に、Ikuta ら、in Ann ．Rev．Biochem． 1984 53，323 〜356（phosp hotriester and phosphite-triester methods）；Narang ら、in Methods Enzym ol ．，65，610〜620（1980）（phosphotriester method）を見よ）による方法までわたることができる。従って、ここに記述された酸化還元感受性遺伝子の５ ’隣接領域のＤＮＡ配列は、塩基変更又は薬剤誘導体のインターカレーションを伴って又は伴わずに、遺伝子の発現を抑制するために酸化還元感受性遺伝子の５’隣接領域内で三重螺旋を特異的に形成するのに使用するために、少なくとも１５の連続したヌクレオチドから本質的になる、ＤＮＡ配列を含むオリゴヌクレオチドを設計及び構成するために使用できる。いくつかの場合において、発現の操作のための方法及び薬剤のスクリーニングを容易にするために、制御配列のエンハンサー又は複数の複製を発現システム中へと挿入することは有利であるかもしれない。Ｖ．モデル及びスクリーニング疾病の代理マーカーの定量を含んだ、ＶＣＡＭ−１又は酸化還元感受性遺伝子によって媒介される疾病のスクリーニングも提供される。一具体例においては、（例えば宿主の）組織又は血液中の酸化されたポリ不飽和脂肪酸又は他の適当なマーカーのレベルが、宿主の「酸化性環境」及びＶＣＡＭ−１又は酸化還元感受性遺伝子に媒介された疾病に対する宿主の感受性を評価する手段として評価された。他の一具体例においては、循環中の又は細胞表面のＶＣＡＭ−１又は他の適当なマーカーのレベル、及び、適当な抗酸化剤の投与の該レベルに対する効果が定量される。更なる他の一アッセイにおいては、ポリ不飽和脂肪酸又はそれらの酸化されたものに対する宿主の血管内皮細胞の感受性が評価される。これは、例えば、ＰＵＦＡ又はｏｘ−ＰＵＦＡを用いて宿主をチャレンジし、そして細胞表面又は循環中の得られたＶＣＡＭ−１又は他の代理マーカー濃度を標準集団と比較することにより達成されることができる。他の一具体例においては、ＶＣＡＭ−１によって媒介されるアテローム硬化症又は他の心臓又は炎症性の疾患の生体内モデルが、疾病を誘導するために過剰量のＰＵＦＡ又は酸化されたポリ不飽和脂肪酸を宿主動物へ投与することにより提供できる。これらの動物はこれらの疾病の理解を更に高めるために臨床的研究において使用できる。本発明の更なる他の一具体例において、化合物は、ポリ不飽和脂肪酸の酸化を阻害するそれらの能力又はＰＵＦＡ又はｏｘ−ＰＵＦＡの蛋白質標的との相互作用に基づいて、ＶＣＡＭ−１によって媒介される疾病を治療するそれらの能力に関して評価されることができる。これは、宿主例えばヒト又はマウス等のような動物を高レベルのＰＵＦＡ又はｏｘ−ＰＵＦＡでチャレンジし、次いで循環中の又は細胞表面のＶＣＡＭ−１濃度を減少させるその能力に基づいて、試験化合物の治療効果を測定することによって達成することができる。代わりとしては、金属例えば銅、又はペルオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、シクロオキシゲナーゼ、又はサイトクロームＰ４５０等のような酵素等のような酸化性物質の存在下に、ＰＵＦＡの酸化を妨げる試験化合物の能力又はＰＵＦＡ又はｏｘ−ＰＵＦＡの蛋白質標的との相互作用に基づいた、インビトロスクリーンが使用できる。他の一具体例においては、血管内皮細胞が、適当な時間ＴＮＦ− α又は他のＶＣＡＭ−１誘導物質へ暴露され、次いで任意の適当な手段、例えば超音波破砕又は凍結融解によって破壊される。サイトゾルの及び細胞膜コンパートメントが単離される。放射標識されたＰＵＦＡが規定された量のコンパートメントへ加えられる。試験化合物の存在下又は不存在下に、ＰＵＦＡをｏｘ−ＰＵＦＡへ変換するその液の能力がアッセイされる。無傷の細胞が、破壊された細胞系に代えて使用できる。 III．薬学的化合物ＶＣＡＭ−１又は酸化還元感受性遺伝子によって媒介される心・血管疾患及び他の炎症性状態に患っているヒト、ウマ、イヌ、ウシ及び他の動物、特に哺乳類は、酸化されたポリ不飽和脂肪酸〔酸化されたリノール酸(C₁₈Δ^9,12)、リノレン酸(C₁₈Δ^6,9,12)、アラキドン酸(C₂₀Δ^5,8,11,14)及びエイコサトリエン酸(C₂ ₀ Δ^8,11,14)含むがこれらに限定されない。〕、他の酸化信号を除去し、濃度を減少させ、又は形成を妨げる化合物又は他の活性化合物又は薬学的に許容しうるキャリア又は希釈剤中のそれらの薬学的に許容しうる誘導体又は塩の有効量を患者に投与することによって、治療することができる。活性物質はいかなる適当な径路によっても、例えば経口、非経口、静脈内、皮内、皮下、又は局所的に投与されることができる。ここに用いるものとして語「薬学的に許容しうる塩又は付加体」とは、上で特定された化合物の所望の生物学的活性を維持しそして望ましくない中毒作用を最小にしか示さない塩又は付加体をいう。そのような塩の非限定的な例は、（ａ）無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、その他）によって形成された酸付加塩、及び酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パモイン酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、又はポリガラクツロン酸等のような有機酸によって形成された塩、（ｂ）亜鉛、カルシウム、ビスマス、バリウム、マグネシウム、アルミニウム、銅、コバルト、ニッケル、カドミウム、ナトリウム、カリウム、その他等のような多価金属陽イオンによって、又はＮ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、Ｄ−グルコサミン、アンモニウム、テトラエチルアンモニウム、又はエチレンジアミン等から形成される有機陽イオンによって形成される塩基付加塩、又は（ｃ）（ａ）と（ｂ）との組み合わせ（例えば、亜鉛タンニン酸塩その他）である。活性化合物又は化合物の混合物はいかなる適当な仕方（経口及び静脈内を含むがこれらに限定されない。）でも投与される。いかなる上記の状態についての投与量の一般的な範囲は、毎２日に１回から毎日数回までにわたる投与スケジュールによって０．５〜５００mg/kg 体重になろう。好ましい毎日の投与量は約１〜 3000mg/ 患者/ 日であり、より好ましくは約５〜500mg/患者/ 日であり、そして更により好ましくは約25〜500mg/患者/ 日である。活性成分は、約０．１〜１００μＭ、好ましくは約１〜１０μＭの活性化合物の血漿濃度ピークを達成するように投与されるべきである。これは例えば、活性成分の溶液又は組成物（所望により、食塩水中、又は水性媒体中）の、又は活性成分のボーラスとして投与される静脈注射によって達成することができる。この化合物は、冠状動脈又は他の動脈血管形成術の後又はそれに代えて灌流バルーンカテーテルを用いて血管壁に直接的に投与することもできる。実施例として、約１〜５００μＭの化合物又は化合物の混合物を含む２〜５ｍＬの生理学的に許容しうる溶液が１〜５気圧で投与される。その後、再狭窄の最大危険性の期間である次の６か月の過程を通して、活性化合物は他の適当な径路及び投与スケジュールによって投与される。活性化合物による比較的短期の治療は、血管形成術又は手術のいずれによっても治療することができない冠状動脈疾病の病変を「縮小」させるために使用される。短期治療の非限定的な例は、毎２日に１回から毎日３回にわたる期間で与えられる、0.5 〜500mg/kg体重にわたる２〜６か月の投与である。長期治療は高危険性の患者における進行した病変の拡張を防止するために用いることができる。長期治療は、毎２日に１回から毎日３回にわたる間隔で投与される、0.5 〜500mg/kg体重にわたる投与により何年もに延びることができる。臨床的に重要な再狭窄を現在では導いている異常増殖性及び炎症性応答を減少させ又は除去するための手段として、冠状血管形成術の直前又は直後の期間に、これらの活性化合物を投与することもできる。活性化合物は心・血管疾病の治療で使用される他の薬物（プロブコール及びニコチン酸等のような脂質低下剤、アスピリン等のような血小板凝集阻害剤、クマジン等のような抗トロンビン剤、バラパミル、ジルチアゼム、及びニフェジピン等のようなカルシウムチャンネル遮断剤、カプトプリル及びエナロプリル等のようなアンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、及びプロパナロール、ターブタロール、及びラベタロール等のようなβ遮断剤を含む。）と組み合わせて投与することができる。該化合物は、イブプロフェン、インドメタシン、フェノプロフェン、メフェナム酸、フルフェナム酸、スリンダック等のような非ステロイド抗炎症剤と組み合わせで投与することもできる。化合物は皮質ステロイドと共に投与することもできる。薬剤組成物中の活性化合物の濃度は、薬剤の吸収、分布、不活性化、及び排泄速度並びに当業者に知られた他の因子に依存するであろう。投与量は、緩和すべき状態の重症度によっても変化するであろうことも留意されるべきである。いかなる特定の対象に関しても、特定の投与処方は、個々の必要性及び組成物の投与を投与又は担当する専門家の判断に従って経時的に調節されるべきであり、そしてここに説明した濃度範囲は単に典型例であり請求の範囲に記載された組成物の範囲又は実施を制限すること意図したものでないというとを更に理解すべきである。活性成分は一度に投与されてよく、又は種々の時間間隔で投与されるように多数の小さな投与量へと分割されてよい。経口組成物は不活性な希釈剤又は食べられる担体を通常含むであろう。それらはゼラチンカプセル中に包まれ又は錠剤中へと圧縮されることができる。経口治療投与の目的のために、活性化合物は賦形剤と組合わされ、そして錠剤、トローチ、又はカプセルの形で使用されることができる。薬剤学的に適合性の結合剤、及び／又は補助薬物質が、組成物の一部として含まれてよい。錠剤、丸剤、カプセル、トローチその他は、類似の性質の次の成分又は化合物のいかなるものを含むことができる：即ち、微晶質セルロース、トラガカントゴム又はゼラチン等のような結合剤、澱粉又はラクトース等のような賦形剤、アルギン酸、Primogel、又はコーンスターチ等のような崩壊剤、クエン酸マグネシウム又はSterotes等のような潤滑剤、コロイド状酸化珪素等のような滑剤、ショ糖又はサッカリン等のような甘味剤、又はペパーミント、メチルサリシレート、又はオレンジ香料等のような香味剤等である。投与ユニットの形がカプセルである場合は、それは上記のタイプの材料に加えて、脂肪油等のような液体担体を収容することができる。加えて、投与ユニットの形は、投与ユニットの物理的形を変える様々な他の材料、例えば糖衣、シェラック、又は他の腸溶剤を含むことができる。活性化合物又は薬剤学的に許容しうるそれらの塩又は誘導体は、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ、ウエハー、チューインガムその他の成分として投与されることができる。シロップは、活性化合物に加えて、甘味剤としてのショ糖及びある保存剤、色素及び着色剤及び香味剤を含むことができる。活性化合物又は薬学的に許容しうるそれらの誘導体又は塩は、所望の作用を損なわない他の活性材料又は抗生物質、抗真菌剤、抗炎症剤、又は抗ウイルス化合物等のような所望の作用を補充する材料と共に投与されることもできる。非経口、皮内、皮下又は局所的適用のために用いられる溶液又は懸濁液は次の成分を含むことができる。即ち、注射用水、食塩水、不揮発油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の合成溶媒等のような無菌希釈剤、ベンジルアルコール又はメチルパラベン等のような抗微生物剤、アスコルビン酸又は重亜硫酸ナトリウム塩等のような抗酸化剤、エチレンジアミン四酢酸等のようなキレート剤、酢酸塩、クエン酸塩又はリン酸塩等のような緩衝剤及び塩化ナトリウム又はデキストロース等のような浸透圧調節のための薬剤である。非経口の製剤は、ガラス又はプラスチックによって製造されたアンプル、使い捨て注射器又は複数回投与バイアル中に包装することができる。。局所的適用に適したビヒクル又は担体が知られており、そしてローション剤、懸濁剤、軟膏剤、クリーム、ジェル、チンキ、スプレー、パウダー、ペースト、徐放性経皮パッチ、喘息のためのエアロゾル、及び直腸、膣、鼻又は口腔の粘膜に適用するための坐剤を含む。増粘剤、緩和剤、及び安定剤が局所的組成物を調製するために使用されることができる。増粘剤の例は、ワセリン、蜜ろう、キサンタンガム、又はポリエチレングリコール、ソルビトール等のような湿潤剤、鉱物油等のような緩和薬、ラノリン及びその誘導体、又はスクアレンを含む。多数の溶液又は軟膏が商業的に入手可能である。天然又は人工の香料又は甘味料が、局所作用のために粘膜表面へ適用される局所的製剤の味覚を高めるために加えられることができる。不活性染料又は色素を、特に口腔粘膜表面への適用のために設計される製剤の場合、加えることができる。活性化合物は、制御された放出組成等のような、早い放出に抗して化合物を保護する担体と共に調製されることができ、埋込物及びマイクロカプセル放出システムを含む。エチレンビニルアセテート、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸等のような生分解性、生体適合性ポリマーを使用することができる。そのような組成物の調製のための多くの方法が特許され又は当業者に一般的に知られている。もし血管内に投与されるならば、好ましい担体は生理食塩水又はリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）である。活性化合物は経皮的パッチによっても投与されることができる。経皮的パッチを調製するための方法が当業者に知られている。例えば、参照によりここに導入されるBrown，L.，and Langer，R.，Transdermal Delivery of Drugs，Annual R eview of Medicine, 39 :221〜229(1988)を見よ。他の一具体例においては、活性化合物は、制御された放出組成等のような、体からの早い除去に抗して化合物を保護するであろう担体によって調製され、埋込物及びマイクロカプセル放出システムを含む。エチレンビニルアセテート、ポリアンハイドライド、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸等のような生分解性、生相溶性ポリマーを使用することができる。そのような組成物の調製のための方法が当業者に明らかになろう。この材料がAlza C orporation及びNova Pharmaceuticals，Inc.から商業的に得ることもできる。リポソーム懸濁液も薬学的に許容しうる担体であることができる。これらは、当業者に知られた方法〔例えば米国特許番号第4,522,811（参照によってその全体がここに導入される）に記述されているように〕に従って調製されることができる。例えば、リポソーム組成が、適当な脂質（ステアロイルフォスファチジルエタノールアミン、ステアロイルフォスファチジルコリン、アラカドイルフォスファチジルコリン、及びコレステロール等のような）を、無機溶媒中に溶解し次いで蒸発させ、容器の表面上に乾燥された脂質の薄膜を後に残すことによって調製されることができる。次いで、活性化合物又はその一リン酸エステル、二リン酸エステル、及び／又は三リン酸エステル誘導体の水溶液が該容器中へと導入される。次いで、容器は、脂質材料を容器の側面から引き離し及び脂質の集合を分散させるために手で回転され、それによってリポソーム懸濁液を形成する。本発明の修正及び変更は、上記の本発明の詳細な記述から当業者に明らかであろう。そのような修正及び変更は添付の請求の範囲の範囲に入ることが意図されている。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/365 ＡＤＵ 9454−4ＣＡ６１Ｋ 31/365 ＡＤＵ 31/40 9454−4Ｃ 31/40 31/455 ＡＤＡ 9454−4Ｃ 31/455 ＡＤＡ 31/55 ＡＢＥ 9454−4Ｃ 31/55 ＡＢＥ 38/00 ＡＢＳ 9454−4Ｃ 49/00 ＡＣＤＡ 49/00 ＡＣＤ 0276−2ＪＧ０１Ｎ 33/15 ＺＧ０１Ｎ 33/15 0276−2Ｊ 33/50 Ｔ 33/50 9051−4ＣＡ６１Ｋ 37/02 ＡＢＳ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者カン，ボビー，ヴィーアメリカ合衆国30338ジョージア、ダンウッディー、ブルックリッジドライブ 5457 (72)発明者オファーマン，マーガレット，ケイアメリカ合衆国30345ジョージア、アトランタ、ガービートレイル 2965

Claims

【特許請求の範囲】１．ＶＣＡＭ−１の発現を抑制するための方法であって、ポリ不飽和脂肪酸の酸化を防止し又は最少にする物質の有効量を投与することを含む方法。２．酸化還元感受性遺伝子の発現を抑制するための方法であって、ポリ不飽和脂肪酸の酸化を防止し又は最少にする物質の有効量を投与することを含む方法。３．ポリ不飽和脂肪酸の酸化によって抑制されている遺伝子を活性化するための方法であって、ポリ不飽和脂肪酸の酸化を防止し又は最少にする物質の有効量を投与することを含む方法。４．ＶＣＡＭ−１の発現を抑制するための方法であって、ポリ不飽和脂肪酸と、ＶＣＡＭ−１の発現を媒介する蛋白質との間の相互作用を防止する物質の有効量を投与することを含む方法。５．該ポリ不飽和酸が、酸化されたリノール酸(C₁₈Δ^9,12)、リノレン酸(C₁₈ Δ^6,9,12)、アラキドン酸(C₂₀Δ^{5,8、11、14})及びエイコサトリエン酸(C₂₀Δ^8,11, ¹⁴ )よりなる群より選ばれるものである、請求項１乃至４のいずれかに記載の方法。６．該酸化還元感受性遺伝子が、免疫応答の開始に関与するサイトカイン（例えば、ＩＬ−１β）、損傷部位への炎症性細胞の移動を促進する化学誘導物質（例えば、ＭＣＰ−１）、増殖因子（例えば、ＩＬ−６及びトロンビン受容体）、及び接着分子（例えば、ＶＣＡＭ−１及びＥ−セレクチン）を発現するものよりなる群より選ばれるものである、請求項２又は３に記載の方法。７．該物質がピロリジンジチオカルバメート又はその薬剤学的に許容しうる塩である、請求項１乃至４のいずれかに記載の方法。８．生体内においてＶＣＡＭ−１によって媒介される疾病を予測又は評価するための方法であって、組織中又は血液中の酸化されたポリ不飽和脂肪酸のレベルを定量することを含む方法。９．生体内において酸化還元感受性遺伝子によって媒介される疾病を予測又は評価するための方法であって、組織中又は血液中の酸化されたポリ不飽和脂肪酸のレベルを定量することを含む方法。１１．生体内においてＶＣＡＭ−１によって媒介される疾病を予測又は評価するための方法であって、組織中又は血液中の酸化されたポリ不飽和脂肪酸のレベルについての代理マーカーを定量することを含む方法。１２．生体内において酸化還元感受性遺伝子によって媒介される疾病を予測又は評価するための方法であって、組織中又は血液中の酸化されたポリ不飽和脂肪酸のレベルに関する代理マーカーを定量することを含む方法。１３．該代理マーカーが循環中又は細胞表面のＶＣＡＭ−１である、請求項１１に記載の方法。１４．ポリ不飽和脂肪酸又はそれらの酸化されたものに対する宿主の血管内皮細胞の感作の評価のための方法であって、ＰＵＦＡ又はｏｘ−ＰＵＦＡによって宿主をチャレンジしそして得られた細胞表面又は循環中のＶＣＡＭ−１又は他の代理マーカーの濃度を標準集団と比較することを含む方法。１５．ＶＣＡＭ−１によって媒介される疾病を治療する能力について化合物をスクリーニングする方法であって、ポリ不飽和脂肪酸の酸化を阻害する該化合物の能力を評価することを含む方法。１６．ＶＣＡＭ−１によって媒介される疾病を治療する能力について化合物をスクリーニングする方法であって、蛋白質標的とのＰＵＦＡ又はｏｘ−ＰＵＦＡの相互作用を阻害する該化合物の能力を評価することを含む方法。１７．ヒトにおける心・血管疾病の治療のための方法であって、式Ａ−ＳＣ（Ｓ）−Ｂ〔式中、Ａは、水素、薬剤学的に許容しうる陽イオン、及び生理学的に切断可能な脱離基よりなる群より選はれるものであり、そしてＢはアルキル、アルケニル、アルキニル、アルカリル、アラルキル、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニル、アリール、アルカリール、水素、Ｃ_1-6 アルコキシ−Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_1-6アルキルチオ−Ｃ_1-10アルキル、ＮＲ²Ｒ³ 、−（ＣＨＯＨ）_nＣＨ₂ＯＨ、（ここにｎは０、１、２、３、４、５、又は６である）、−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｒ¹（アルキルアセチル、アルキルプロピオニル、及びアルキルブチリルを含む。）、及びＨＯＣ_1-6アルキル−よりなる群より選ばれるものである。〕のジチオカルバメートの有効量を投与することを含む方法。１８．Ａが、水素又は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム、亜鉛、ビスマス、バリウム、銅、コバルト、ニッケル、又はカドミウムよりなる群より選ばれる薬剤学的に許容しうる陽イオンである、請求項１７に記載の方法。１９．Ａが塩形成性有機酸である、請求項１７に記載の方法。２０．Ａがコリン、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パモイン酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、又はポリガラクツロン酸よりなる群より選ばれるものである、請求項１９に記載の方法。２１．Ａが、アンモニア又は他の窒素原子を含む塩基から形成された陽イオンである、請求項１７に記載の方法。２２．Ａが、窒素原子を含むヘテロ環であるか、又は式ＮＲ⁴Ｒ⁵Ｒ⁶Ｒ⁷〔式中、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁶、及びＲ⁷は独立して水素、Ｃ_1-6アルキル、ヒドロキシ（Ｃ_1-6 ）アルキル、アリールである。〕、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、Ｄ− グルコサミン、テトラエチルアンモニウム、又はエチレンジアミンである、請求項２１に記載の方法。２３．Ａが生理学的に切断可能な脱離基である、請求項１７に記載の方法。２４．Ａがアシル基である、請求項１７に記載の方法。２５．ＢがＮＲ²Ｒ³〔ここにＲ²及びＲ³は、アルキル、−（ＣＨＯＨ）_n（ＣＨ₂）_nＯＨ（ここにｎは０、１、２、３、４、５、又は６である）、−（ＣＨ₂ ）_nＣＯ₂Ｒ¹、−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｒ⁴、ＨＯ（Ｃ_1-6）アルキル−、アルケニル、アルキル（ＣＯ₂Ｈ）、アルケニル（ＣＯ₂Ｈ）、アルキニル（ＣＯ₂Ｈ）、又はアリールである。〕よりなる群より選ばれるものであるか、又は、Ｒ²及びＲ³は一緒になって式−（ＣＨ₂）_n−（ここにｍは３、４、５、又は６であり、そしてＲ⁴は、アセチル、プロピオニル、及びブチリルを含むアリール、アルカリル、又はアラルキルよりなる群より選ばれるものである。）の架橋を構成することができるものである、請求項１７に記載の方法。２６．Ｂはヘテロ環又はアルキルヘテロ環基である、請求項１７に記載の方法。２７．該ヘテロ環が部分的に又は完全に水素添加されたものである、請求項２６に記載の方法。２８．Ｂが、Ａ−ＳＣ（Ｓ）−に直接に結合されているか又は２価の結合部分を通じて結合されている薬学的に活性な化合物又は薬物の残基である、請求項１７に記載の方法。２９．Ｂが、プロブコール、ニコチン酸、アスピリン、クマジン、バラパミル、ジルチアゼム、ニフェジピン、カプトプリル、エナロプリル、プロパナロール、テルブタロール、ラベタロール、イブプロフェン、インドメタシン、フェノプロフェン、メフェナム酸、フルフェナム酸、スリンダック、及び皮質ステロイドよりなる群より選ばれるものである、請求項１７に記載の方法。３０．該ジチオカルバメートが、構造ＡＯ₂Ｃ−Ｒ⁹−ＮＲ¹⁰−Ｃ（Ｓ）ＳＡ（式中、Ｒ⁹はＢであるか又はアミノ酸の内部残基であり、Ｒ¹⁰は水素又は低級アルキルである）のアミノ酸誘導体である、請求項１７に記載の方法。３１．Ｂが、１は２以上のジチオカルバメート基が直接に又は任意の適した結合部分を介して取り付けられているポリマーである、請求項１７に記載の方法。３２．該ポリマーが生分解性である、請求項１７に記載の方法。３３．該ポリマーがペプチド、蛋白質、核蛋白質、リポ蛋白質、糖蛋白質、合成の及び天然のポリペプチド及びポリアミノ酸、ポリオルトエステル、ポリ（α −ヒドロキシ酸）、ポリ酸無水物、多糖類、及びポリカプロラクトンよりなる群より選ばれるものである、請求項３２に記載の方法。３４．Ｂ−Ｃ（Ｓ）Ｓ−が、ピロリジン−Ｎ−カルボジチオエートである、請求項１に記載の方法。３５．該心・血管疾病がアテローム硬化症である、請求項１７に記載の方法。３６．該心・血管疾病が血管形成術再狭窄である、請求項１７に記載の方法。３７．該心・血管疾病が冠状動脈疾病である、請求項１７に記載の方法。３８．該心・血管疾病が狭心症である、請求項１７に記載の方法。３９．該心臓血管疾病が小血管疾病である、請求項１７に記載の方法。４０．該ジチオカルバメートが０．５乃至５００ｍｇ／ｋｇ体重の投与量で投与されるものである、請求項１７に記載の方法。４１．該ジチオカルバメートが灌流バルーンカテーテルによって投与されるものである、請求項１７に記載の方法。４２．該ジチオカルバメートが、脂質低下剤、血小板凝集阻害剤、抗トロンビン剤、カルシウムチャンネル遮断剤、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、β遮断剤、非ステロイド性抗炎症剤、及び皮質ステロイドよりなる群より選ばれる薬剤と組み合わせて投与されるものである、請求項１７に記載の方法。４３．ヒト細胞中のＶＣＡＭ−１発現の抑制のための方法であって、請求項１７に記載のジチオカルバメートの有効量を投与することを含む方法。４４．ＶＣＡＭ−１によって媒介される炎症性皮膚疾病の治療のための方法であって、請求項１７に記載のジチオカルバメートの有効量を投与することを含む方法。４５．ＶＣＡＭ−１によって媒介されるヒト内皮疾病の治療のための方法であって、請求項１７に記載のジチオカルバメートの有効量を投与することを含む方法。４６．該疾病が、喘息、乾癬、湿疹様皮膚炎、カポシ肉腫、多発性硬化症、及び平滑筋細胞の増殖性疾病よりなる群より選ばれるものである、請求項４５に記載の方法。４７．単核白血球によって媒介される炎症性状態の治療のための方法であって、請求項１７に記載のジチオカルバメートの有効量を投与することを含む方法。４８．請求項１７乃至３４のいずれかに記載のジチオカルバメート。４９．心・血管疾病の治療に有効な量の請求項１７乃至３４のいずれかに記載の化合物を含む薬剤組成物。５０．ＶＣＡＭ−１によって媒介される疾病の治療に有効な量の請求項１７乃至３４のいずれかに記載の化合物を含む薬剤組成物。