JPH10500112A - 組合せ ジヒドロベンゾピラン ライブラリー - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 によって代表される組合せライブラリーが開示される。これらのライブラリーは、(即ち、作用薬又は拮抗薬として)αアドレナリン作用性受容体、ドパミン受容体、σ-アヘン誘導体受容体、及びＫ⁺チャネルとの相互作用を有してカルボネートデヒドラターゼ イソチームの抑制因子である、化学式(II)のジヒドロベンゾピランを包含する。このライブラリーは緑内障のような眼病治療に役立つ。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称 組合せ ジヒドロベンゾピラン ライブラリー発明の背景 種々可能な生理学上の、或いはその他の活性についてのふるい分け可能な多数 の多様な化合物の合成方法に関する。それぞれの系統的な合成段階で可能な別々 の選択枝の全てから生まれ得る全て或いは大多数の可能な化合物を生産するため の化学合成の一部として個別のユニットを逐次加えて行く技術が開発されて来た 。これらの技術を成功させるためには、このようにして作られた化合物の構造決 定を可能にする方法に化合物を適合させることが必要である。ブレンナー及びラ ーナー（米国国内科学アカデミー会報第81巻第5381〜83頁（1992年））及びＷＯ 93／20242は、例えば、オリゴヌクレオチドが関連のある化合物として並列的に 生産され、遺伝的標識としてのオリゴペプチドに化学的関連を採られているよう な合成について記述している。ＷＯ93／06121は、合成されたオリゴマー系列の 識別を容易化するために粒子上の識別標識を利用する、粒子基準の任意のオリゴ マーの合成方法を教唆する。検出可能な標準付けシステムは、オールメーヤー他 の米国国内科学アカデミー会報第90巻第10922〜10926頁1993年12月の中に記載さ れている。発明の概要 本発明は、標識暗号化された化合物の組合せ化学ライブラリーに係り、これら のライブラリーの生物活性化合物の検出分析への利用に関する。本発明は、又、 ジヒドロベンゾピランを含むカルボネート デヒドラターゼ イソチーム抑制選 別によって生物活性メンバーを鑑別するのに使用されるライブラリーに関係する 。本発明は、又、αアドレナリン作用性受容体、ドパミン受容体、σ−アヘン誘 導体受容体、及びＫ⁺チャネルと相互作用を持つ（即ち、作用薬又は拮抗薬とし ての）ライブラリー メンバーに関係する。特に、本発明は、又、カルボネート デヒドラターゼ抑制因子であるライブラリー メンバーに関係する。本発明は 、又、これらの調剤及び中間生成物に関する方法と、これらのジヒドロベンゾピ ランを哺乳類、特に人類における治療に使用する方法及び薬剤処方化方法とに関 係する。 カルボネート デヒドラターゼ イソチーム抑制因子としてのこれらの化合物 の活性の故に、本発明の化合物は縁内障のような病気の治療に役立つものである 。発明の詳細な説明 本発明の組合せライブラリーは化学式Ｉで代表される。即ち ここに、 Ｔ'-Ｌ- は識別体残分であり、 -Ｌ-II' はリガンド／リンカー残分であり、 ｑは３〜30である。 化学式Ｉの好適な化合物は、 Ｔ'-Ｌ- が化学式IIIのもの、即ち であり、ここに、 Ａrがペンタクロロフェニルの時 ｎ＝３〜12 であり、 Ａrが２，４，６−トリクロロフェニルの時 ｎ＝３〜６ であり、 ｑは４〜12であり、 -Ｌ'- は であり、ここに図示の左手ボンドは固体支持体に結合する点であり、右手ボンド はリガンドに結合する点であり、又、Ｂは Ｏ 又は Ｎ（ＣＨ₂）_1-6Ｒ¹⁷ で あるが、(b)においてＢが Ｎ（ＣＨ₂）_1-6Ｒ¹⁷の時リガンドはカルボニル基を 介して結合される。 他の化学式Ｉの好適な化合物は化学式Ｉａ、Ｉｂ、又はＩｃのものであり、こ こに、-Ｃ(〇)-Ｌ'-II' は 又は である。 Ｌ' の選択に従って（表Ｉ参照）、化学式IIのリガンドは、光分解性、酸化性 或いはその他の開裂技術によって解離され得る。例えば、-Ｌ'- が(b)でＢが Ｏ（又は Ｎ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷）である時、光分解解離は以下によって代表され得 る。即ち、 又は ＋II'ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷ (Ｂ＝Ｎ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷) で、ここにＬ”はＬ’からの残分であり、II"ＯＨ(又はII'ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷) はIIである。 それ故、本発明の化合物は、又、化学式II或いはその製薬上受容可能な塩によ って代表される。即ち、化学式IIは、 であり、ここに、 Ｒ¹は、ＯＨ、Ｏ(ＣＨ₂)_1-2ＯＨ、ＯＣＨ₂ＣＯ₂Ｈ、ＣＯ₂Ｈ、Ｏ-Ｚ-Ｃ(Ｏ)ＮＨ (ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷、又はＯＣＨ₂-４-Ｐhe-Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷であり、 Ｒ²は、Ｈ又は低級アルキルであり、 Ｒ³は、Ｈ、アルキル、アリール、又はアリールアルキルであり、 Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれ独立にＨ、低級アルキル、又は置換基が１〜３アルコキ シ、アリール、置換アリール、カルボアルコキシ、カルボキシアミド、又はジ低 級アルキルアミドである置換低級アルキルであるか、或いはＲ⁴とＲ⁵とを一緒に して -(ＣＨ₂)_n-、-(ＣＨ₂)₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₂-、-ＣＨ₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₃-、-(ＣＨ₂)₂ -ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、-ＣＨ₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)_m-、-(ＣＨ₂)₂ＣＨ(ＮＨＲ⁸)(ＣＨ₂)₂ -、-(ＣＨ₂)₂-Ｓ(Ｏ)_0-2-(ＣＨ₂)₂-、又は はＨで他方はＨ、ＯＨ、又はＮ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁴Ｒ¹⁵であるか或いはＲ⁶とＲ⁷とを 一緒にして であり、 Ｒ⁸は、Ｈ、ＣＯＯＲ⁹、ＣＯＮＨＲ¹⁰、ＣＳＮＨＲ¹¹、ＣＯＲ¹²、ＳＯ₂Ｒ¹³、 低級アルキル、アリール低級アルキル、ヘテロアリール、又はヘテロアリール低 級アルキルで、ここに、アリールは、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロ、Ｃ Ｎ、ＮＨ₂、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ₂、カルボアルコキシ、及びモノ又はジ低級アル キルアミノから選定される１〜３置換基によって随意に置換され、ヘテロアリー ルは、Ｏ、Ｎ、及びＳから選定される１乃至３個の異原子とハロ、アミノ、シア ノ、低級アルキル、カルボアルコシ、ＣＯＮＨ₂、及びＳ-低級アルキルから選定 される０〜３置換基とを包含する５乃至１０個のメンバーの単環又は２重環複素 環式芳香族化合物環状組織であり、 Ｒ⁹は、低級アルキルか、アリールか、アリール低級アルキルか、ヘテロアリー ルか、アルキル、アルケニル、アルコキシ、メチレンジオキシ、及びハロから選 定された１〜３置換基によって置換されたアリールか、或いは５乃至６メンバー の複素環式環かであり、ここに異原子はＯ又はＮであり、そしてヘテロアリール はＯ、Ｎ、及びＳから選定される１乃至２異原子と低級アルキル、ジアキルアミ ノ、低級アルコキシ、及びハロから選定される０〜２置換基とを包含する５乃至 ６メンバーの複素環式芳香族化合物環であり、 Ｒ¹⁰及びＲ¹¹は、それぞれ独立に低級アルキル、アリール、アリール低級アルキ ル、又は低級アルキル、ハロ、アルコキシ、及びハロアルキルから選定される１ 〜３置換基によって置換されたアリールであり、 Ｒ¹²は、低級アルキルか、アリールか、ヘテロアリールか、アリール低級アルキ ルか、ヘテロアリール低級アルキルか、Ｏ、Ｓ、及びＮから選定された１〜２異 原子を包含する５乃至６メンバーの複素環式環か、Ｏ、Ｓ、及びＮ低級アルキル から選定される１〜２異原子を包含する５乃至６メンバーの複素環式環か、或い は低級アルキル、アルコキシ、ハロ、スルファモイル、低級アルキルスルファモ イル、シアノ、及びフェニルから選定される１〜３置換基で置換されたアリール かであり、 Ｒ¹³は、低級アルキルか、アリールか、或いは低級アルキル、アルコキシ、ハロ 、ＣＮ、及びハロアルキルから選定される１〜３置換基で置換されたアリールで あり、 Ｒ¹⁴は、Ｈか、１〜３個のアルコキシ、Ｓ-低級アルキル、スルファモイル、ハ ロ、アルキルスルホンアミド、又はアリールスルホンアミドで置換されたアルキ ルか、アルケニルか、アルキニルか、アリールか、置換アリールか、ヘテロアリ ールか、置換ヘテロアリールか、ヘテロシクロアルキルか、-ＣＨ₂ＮＲ¹⁶Ｃ(Ｏ) Ｒ¹⁶か、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ¹⁶Ｒ¹⁶か、-ＣＨ₂ＯＣ(Ｏ)Ｒ¹⁶か、或いは-ＣＨ₂ＳＣ(Ｏ) Ｒ¹⁶かであり、 Ｒ¹⁵は、Ｈ、アルキル、-Ｃ(Ｏ)Ｘ、 -Ｃ(Ｓ)Ｘ或いは -Ｃ(ＮＣＮ)ＮＲ³Ｒ³ であり、 Ｒ¹⁶は、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、或いは置換アリールであ り、 Ｒ¹⁷は、Ｈか、１〜３個のアルコキシ、Ｓ-低級アルキル、スルファモイル、ハ ロ、アルキルスルホンアミド、又はアリールスルホンアミドで置換されたアルキ ルか、アルケニルか、アルキニルか、アリールか、置換アリールか、ヘテロアリ ールか、置換ヘテロアリールか、ヘテロシクロアルキルか、-ＣＨ₂ＮＲ¹⁶Ｃ(Ｏ) Ｒ¹⁶か、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ¹⁶Ｒ¹⁶か、-ＣＨ₂ＯＣ(Ｏ)Ｒ¹⁶か、或いは -ＣＨ₂ＳＣ(Ｏ )Ｒ¹⁶かであり、 Ｘは、アルキル、アリール、アリールアルキル、Ｏ-低級アルキル、或いはＮＲ³ Ｒ³であり、 Ｚは、１〜３低級アルキルで随意置換された -(ＣＨ₂)_1-6- か、ＣＨＲ²か、 Ｐheがハロゲン、低級アルキル、又はアルコキシで随意にモノ置換されたＰhe- ＣＨ₂- か、或いはヘテロアリレン-(ＣＨ₂)- かであり、 ｍは、２又は３であり、 ｎは、４〜９である。 化学式IIの好適な化合物は、Ｒ¹²がスルファモイルフェニルであるものであり 、最も望ましいのは、Ｒ¹²がp-スルファモイルフェニルであるものである。 本発明の好適なる実施例は、化学式IIの化合物或いはその製薬上受容可能な塩 であり、ここに、 Ｒ¹は、ＯＨ、ＯＣＨ₂Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁴、或いは ＯＣＨ₂-４-Ｐhe- Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁴であり、 Ｒ²は、Ｈ、或いは低級アルキルであり、 Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれ低級アルキルであるか、或いはＲ⁴とＲ⁵とを一緒にして -(ＣＨ₂)₅-、-(ＣＨ₂)₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂ -ＣＨ(ＮＨＲ⁸)(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-Ｓ-(ＣＨ₂)₂-、又は Ｒ⁶／Ｒ⁷は、Ｈ／ＯＨ、＝Ｏ、或いは -Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｓ- であり、 Ｒ⁸は、Ｈ、ＣＯＯＲ⁹、ＣＯＮＨＲ¹⁰、ＣＳＮＨＲ¹¹、ＣＯＲ¹²、ＳＯ₂Ｒ¹³、 低級アルキル、アリール低級アルキル、ヘテロアリールで、ここに、環構成メン バーには１〜３個のＮ原子が含まれ、置換基はハロ又はアミノ、ヘテロアリール が６個のメンバーのもので異原子がＮであるヘテロアリール低級アルキル、或い は低級アルキル、アルコキシ、及びハロから選定される１置換基で置換されたア リール低級アルキルであり、 Ｒ⁹は、低級アルキル、アリール低級アルキル、アリール、テトラヒドロフラニ ル、テロラヒドロピラニル、或いは低級アルキル、アルケニル、アルコキシ、メ チレンジオキシ、及びハロから選定される１〜２置換基で置換されたアリールで あり、 Ｒ¹⁰及びＲ¹¹は、それぞれ独立にアリール、アリール低級アルキル、或いは低級 アルキル、ハロ、アルコキシ、トリフルオルメチル、及びペンタフルオルエチル から選定される１置換基で置換されたアリールであり、 Ｒ¹²は、低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、異原子がＮであるヘ テロアリール低級アルキル、Ｓ及びＮ低級アルキルから選定される１〜２個の異 原子を包含する５乃至６メンバーの複素環状環、或いは低級アルキル、アルコキ シ、ハロ、スルファモイル、シアノ、又はフェニルから選定される１置換基によ って置換されたアリールであり、 Ｒ¹³は、低級アルキル、アリール、或いは低級アルキル、アルコキシ、及びハロ から選定される１置換基で置換されたアリールである。 本発明の最適化合物は、化学式、 によって代表されるもの或いはその製薬上受容可能な塩であり、ここに、Ｒ¹は 、６- 又は ７-ＯＨであり、 Ｒ²は、Ｈ或いは低級アルキルであり、 Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれメチルであるか、或いはＲ⁴とＲ⁵とを一緒にして -(Ｃ Ｈ₂)₅-、-(ＣＨ₂)₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、-ＣＨ₂-ＮＲ⁸- (ＣＨ₂)₃-、-ＣＨ₂ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、又は -(ＣＨ₂)₂-ＣＨ(ＮＨＲ⁸)(ＣＨ₂)₂- であり、 Ｒ⁶とＲ⁷との一方がＨで他方がＯＨであるか、或いはＲ⁶とＲ⁷とを一緒にして＝ Ｏ又は -Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｓ- であり、 Ｒ⁸は、Ｈ、ＣＯＯＲ⁹、ＣＯＮＨＲ¹⁰、ＣＳＮＨＲ¹¹、ＣＯＲ¹²、ＳＯ₂Ｒ¹³、 ベンジル、-ＣＨ₂-Ｐh-４-Ｆ、-ＣＨ₂-Ｐh-４-ＯＣＨ₃、-ＣＨ₂-４-Ｐy，n-ブチ ル、-ＣＨ₂-c-プロピル、 であり、 Ｒ⁹は、i-プロピル、フェニル、フェネチル、t-ブチル、 であり、 Ｒ¹⁰は、フェニル、p-クロロフェニル、或いは p-トリフルオルメチルフェニル であり、 Ｒ¹¹はフェニル、ベンジル、或いは １-ナフチルであり、 Ｒ¹²は、 であり、 Ｒ¹³は、１- 又は ２−ナフチル、フェニル、４-クロロフェニル、４-メチル フェニル、４-t-ブチルフェニル、n-ブチル、或いは i-プロピルである。 本発明の最適化合物は、又、化学式 によって代表され、ここに、 Ｒ¹は、Ｒ²がＨの時６- 又は ７-ＯＨであり、 Ｒ¹は、Ｒ²がＣＨ₃の時 ７-ＯＨであり、 Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれメチルであるか、或いはＲ⁴とＲ⁵とを一緒にして -(Ｃ Ｈ₂)₅-、-(ＣＨ₂)₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、-ＣＨ₂-ＮＲ⁸- (ＣＨ₂)₃-、-(ＣＨ₂)₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、又は -(ＣＨ₂)₂-ＣＨ(ＮＨＲ⁸)(ＣＨ₂ )₂- であり、 Ｒ⁶とＲ⁷との一方はＨで他方はＯＨであるか、或いはＲ⁶とＲ⁷とを一緒にして＝ Ｏ又は -Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｓ- であり、 Ｒ⁸は、 である。 本発明の最適化合物は、化学式 で代表されるもの或いはその製薬上受容可能な塩であり、ここに、 Ｒ¹は、Ｒ²がＨの時 ６-又は ７-ＯＣＨ₂Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷、或いは ６- 又は ７-ＯＣＨ₂-４-Ｐhe-Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷であり、 Ｒ¹は、Ｒ²がＣＨ₃の時 ７-ＯＣＨ₂Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷、或いは ７-Ｏ ＣＨ₂-４-Ｐhe-Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷であり、 Ｒ⁴及びＲ⁵はそれぞれメチルであるか、或いはＲ⁴とＲ⁵とを一緒にして-(ＣＨ₂)₅ -、-(ＣＨ₂)₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-ＣＨ(Ｎ ＨＲ⁸)(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-Ｓ-(ＣＨ₂)₂-、又は がＣＨ₂ＯＣＨ₃又は -(ＣＨ₂)₃Ｎ(Ｅt)₂であり、 Ｒ⁶とＲ⁷との一方はＨで他方はＯＨであるか、或いはＲ⁶とＲ⁷とを一緒にして＝ Ｏ 又は -Ｓ-(ＣＨ₂)₂-Ｓ- であるか、或いはＲ⁶とＲ⁷との一方はＨで他方は Ａがメチル、２-メトキシエチル、２-フェニルエチル、４-メトキシベシジル、 ２テトラヒドロフラニルメチル、２(３，４-ジメトキシフェニル)メチル、又は ２，２ジフェニルエチルで、ＢがＨ、-ＳＯ₂ＣＨ₃-、 であるＮＡＢであり、 Ｒ⁸は、Ｈ、ＣＯＮＨＣＨ₃、ＳＯ₂Ｐh、(ＣＨ₂)₃ＣＨ₃、ＣＯ(ＣＨ₂)₂ＣＨ₃、ベ ンジル、-Ｃ(Ｏ)-(４-Ｐhe)-ＳＯ₂ＮＨ₂、或いは であり、 Ｒ¹³は、Ｈ、ＳＯ₂ＣＨ₃-、 であり、(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁴は、メチル、n-ブチル、３-メトキシ-n-プロピル、ＣＨ₂ -c-プロピル、或いは -(ＣＨ₂)_1-3-フェニルであり、 (ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷は、メチル、２-メトキシエチル、２-フェニルエチル、４-メト キシベンジル、メチル-２-テトラヒドロフラニル、２(３，４-ジメトキシフェニ ル)エチル、或いは２，２-ジフェニルエチルである。 カルボネート デヒドラターゼの抑制因子として特別に好適なものは、IIｂ、 IIｃ、及びIIｄの化学式の化合物である。即ち、 であり、ここに、 Ｒ¹は、６- 又は ７-ＯＨ、６- 又は ７-ＯＣＨ₂Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷ 、或いは６- 又は ７-ＯＣＨ₂-４-Ｐhe-Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷であり、 Ｒ²は、Ｈ、或いはＣＨ₃であり、 Ｒ⁸は、-ＣＯ-Ｐh-p-ＳＯ₂ＮＨ₂であり、 Ｒ⁶とＲ⁷は一緒にして＝Ｏ、或いは -ＳＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ- である。 これらの中で最も好適なのは、次の化合物である。即ち、 Ｒ¹⁴及びＲ¹⁷は、それぞれ、次の化合物から Ｈ₂ＮＣＨ₂- を減成して誘導さ れるようなものと薬学的に等価な有機塩基であり得る。化合物は即ち、 本発明の１実施例は、化学式IIの生物活性化合物（リガンド）の検出試験に化 学式Ｉの組合せライブラリーを使用することである。このように、本発明の１つ の観点は、化学式Ｉの組合せライブラリーを総合することと、望みの特性を有す る化合物を鑑定する分析において化学式Ｉの化合物及び固体支持体に結合したか 或いは固体支持体から解離したかのいづれかの化学式IIのリガンドを試験するこ とと包含する、望みの特性を有する化合物鑑定の方法である。本発明の更なる１ 実施例は、そのようにして鑑定された化合物の構造を決定することである。 本発明の他の１実施例は、Ｒ²がＨ又は低級アルキルを示す化学式 の化合物を調合するプロセスであるが、このプロセスは、 ａ）トリフェニルホスフィン、トルエン、及びＤＥＡＤの存在下でアニル又はメ チル４-(ヒドロキシメチル)-３-ニトロベンゾアートを化学式 の化合物と反応させて、Ｒがアリル又はメチルを示す を生産するために混合物を室温で撹拌することと、 ｂ）Ｒがアリルの時該化合物を塩化メチレン、テトラキストリフェニルホスフィ ン パラジウム(Ｏ)、及びピロリジンと反応させて混合物を０℃で撹拌するか、 或いはＲがメチルの時該化合物を希釈ＮaＯＨ及びＴＨＦと反応させて混合物を ０℃で撹拌するかすること、との両方を包含する。 この反応に関しては、より軟弱な条件では分子のアセトフェノン部にアルドー ル型濃縮を誘発しないであろうが故に、t-ブチルエステル又はメチルエステルに 対してはＲ＝アリルが望ましい。 本発明の他の１実施例は、カルボネート デヒドラターゼの抑制因子である化 合物の鑑定方法で、この鑑定方法は、20〜300pモルの試験化合物と0.03〜0.12μ モル、望ましくは約0.06μモルのカルボネート デヒドラターゼの(全体量：25 〜100μl、望ましくは約50μlの)水溶液と0.04〜0.16μモル、望ましくは約0.08 μモルのダンシルアミド(dansylamide)との混合液を調合することと、該混合液 を(望ましくは274nmの)紫外線で照射することと、(望ましくは454nmの)放射紫外 線量を決定することとを包含する。 本発明の他の１実施例は、ローン分析法である、酵素抑制因子化合物の鑑定方 法であり、この鑑定方法は、中に添加リガンドと一層の蛍光発生基質包含材料と を伴っている単一層固体支持体を包埋した酵素含有コロイド状マトリックスに接 触させることと、該リガンドを紫外線に露光して溶離することと、それによって コロイド状マトリックス中に生成された抑制ゾーンを検出することとを包含する 。この種で好適なローン分析は、アガロースのフルオレセイン ジアセテート含 有層を伴ったウシのカルボネート デヒドラターゼ含有アガロース マトリック スに接触させることを包含する。 本発明の他の１実施例は、化学式 の化合物であり、ここに、 Ｒは、Ｈ、或いはアルキルであり、 Ｒ¹⁶は、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、或いは置換アリールであ り、 Ｒ¹⁷は、Ｈ、１〜３個のアルコキシ、Ｓ-低級アルキル、スルファモイル、ハロ 、アルキルスルホンアミド、又はアリールスルホンアミドで置換したアルキル、 アルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、 ヘテロシクロアルキル、-ＣＨ₂ＮＲ¹⁶Ｃ(Ｏ)Ｒ¹⁶、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ¹⁶Ｒ¹⁶、-ＣＨ₂ ＯＣ(Ｏ)Ｒ¹⁶、或いは-ＣＨ₂ＳＣ(Ｏ)Ｒ¹⁶であり、 Ｙは、アリール、或いはヘテロアリールである。 化学式１４の化合物は組合せライブラリーの構造の中での中間生物として役立 つものであり、特にその自動化合成においても或いはバッチ モード合成におい ても役立つものである。定義 以下の略号は、指定の意味を有する。即ち、 Ｂｏｃ ＝ｔ-ブチルオキシカルボニル ｃ- ＝シクロ ＤＥＡＤ ＝アゾジカルボン酸ジエチル ＤＢＵ ＝１，８-ジアザビシクロ〔５，４，０〕ウンデッス-７-エン ＤＣＭ ＝ジクロロメタン＝塩化メチレン ＤＩＣ ＝ジイソプピルカルボジイミド ＤＭＡＰ ＝４-Ｎ，Ｎ-ジメチルアミノピリジン ＤＭＦ ＝Ｎ，Ｎ-ジメチルホルムアミド ＤＭＳＯ ＝ジメチル スルホキシド ＤＶＢ ＝１，４-ジビニールベンゼン ＥＤＴ ＝１，２-エタンジチオール equiv． ＝当量 Ｅｔ ＝エチル ＦＡＶＳ ＝蛍光活性化細胞選別 Ｆｍｏｃ ＝９-フルオレニルメトキシカルボニル ＧＣ ＝ガスクロマトグラフィ ＨＯＢｔ ＝Ｎ-オキシベンゾトリアゾール ｈｒ ＝時間 ｉｍ ＝イミダゾール ｉｎ ＝インドール ｍ- ＝メタ Ｍｅ ＝メチル Ｍｔｒ ＝４-メトキシ-２，３，６-トリメチルベンゼンスルホニル ｎ- ＝ノルマル Ｎａｐｈ ＝ナフチル ｐ- ＝パラ ＰＥＧ ＝ポリエチレン グリコール ｐｈ ＝フェニル ｐｈｅ ＝フェニレン Ｐｍｃ ＝２，２，５，７，８-ペンタメチルクロマン-６-スルファモイル ｐｙ ＝ピリジル ｒ．ｔ． ＝室温 ｓａｔ'ｄ ＝飽和 ｓ- ＝第２ ｔ- ＝第３ ｔ-Ｂｏｃ ＝ｔ-ブチルオキシカルボニル ＴＦＡ＝トリフルオル酢酸 ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン “アルキル”は１乃至２０の炭素原子の直線構造、分枝構造又は環状構造及び その組合せを含ませることを意図している。“低級アルキル”は１乃至８炭素原 子含有のアルキル基を包含する。低級アルキル基の例としては、メチル、エチル 、プロピル、イソプロピル、ブチル、Ｓ- 及び t-ブチル、ペンチル、ヘキシ ル、オクチル、c-プロピル、c-ブチル、その他が含まれる。“低級シクロアルキ ル”は３乃至８炭素原子のシクロアルキル基を包含する。低級シクロアルキル基 の例には、c-プロピル、c-ブチル、c-ペンチル、２-メチルシクロプロピル、シ クロプロピルメチル、その他が含まれる。 “アルケニル”は(Ｃ₅-Ｃ₆)直線配列、(Ｃ₅-Ｃ₆)分枝配列、又は(Ｃ₅-Ｃ₆)環 状配列及びその組合せのＣ₂〜Ｃ₆アルケニルである。アルケニル基の例には、ア リル、イソプロペニル、ペンテニル、ヘキセニル、c-ヘキセニル、１-プロペニ ル、２-ブテニル、２-メチル-２-ブテニル、その他が含まれる。 “アルキニル”は、(Ｃ₅-Ｃ₆)直線配列、(Ｃ₅-Ｃ₆)分枝配列、又は(Ｃ₅-Ｃ₆) 環状配列及びその組合せのＣ₂〜Ｃ₆アルキニルである。アルキニル基の例には、 エチニル、プロパルギル、３-メチル-１-ペンチニル、２-ペプチニル、イソプロ ピニル、ペンチニル、ヘキシニル、c-ヘキシニル、１-プロピニル、２-ブチニル 、２-メチル-２-ブチニル、その他が含まれる。 “アルコキシ”は、直線配列、分枝配列、又は環状配列の１乃至６炭素原子の アルコキシ基を意味する。アルコキシ基の例には、メトキシ、エトキシ、プロポ キシ、イソプロポキシ、シクロプロピロキシ、シクロヘキシロキシ、その他が含 まれる。 “置換低級アルキル”は、１〜３個のアルコキシ、カルボアルコキシ、カルボ キシアミド、ジ-低級アルキルアミノ、アリール、置換アリール、又はヘテロア リールで置換された低級アルキルを意味する。 “アリール”は、フェニル又はナフチルを意味する。 “置換アリール”は、１〜３個のハロ、低級アルキル、アルコキシ、アリール 、Ｓ-低級アルキル、アルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミド、又は スルファモイルで置換されたアリールを意味する。 “ヘテロアリール”は、Ｏ、Ｎ、及びＳから選定される１〜３異原子含有の５ 乃至６メンバーの芳香属環を意味する。 “置換ヘテロアリール”は、１〜３個のハロ、低級アルキル、アルコキシ、ア リール、Ｓ-低級アルキル、アルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミド 、又はスルファモイルで置換されたヘテロアリールを意味する。 “ヘテロシクロアルキル”はＯ、Ｎ、及びＳから選定される１〜３個の異原子 を包含する低級シクロアルキルを意味する。 ハロゲンは、Ｆ、Ｃl、Ｂr、及びＩを包含する。 Ｌ及びＬ’は表１に示されているが、これは開裂試薬を示している。合成体系 の立案においては、Ｌ及びＬ’は直交反応性である、即ち、他のものを除去する ことなく(Ｔ＝Ｔ’−ＯＨの場合の)Ｔ又はIIのいづれかの除去を許容しなければ ならないように選定されている。その理由は、固体支持体からのＴ及びII両者の 同時開裂は不利益になるからである。図示のような構造においては、左手ボンド は固体支持体への結合点であり、右手ボンドはＴ又はIIのいづれかへの結合点で ある。 本発明の付箋Ｔは、幾つかの固有特性を有する化学的実態である。即ち、付箋 は望ましくは光分解又は酸化により固体支持体からの解離が可能になっていなけ ればならないし、付箋は個別に区別可能で且つ望ましくは分離可能になっていな ければならないし、付箋は合成条件下で安定でなければならないし、付箋は極め て低濃度で、例えば１０^-18至１０^-9モルで検出され得る能力を有しなければな らないし、付箋は精巧な運転技術能力を必要とせずに何時でも容易に利用可能な 装置を使っての鑑定が可能になっていなければならないし、又付箋は、比較的経 済的でなければならない。付箋は構造的関連を有するものであり得るし、或いは 構造的には関連を有しないものであり得て、例えば、同族列、繰返し機能基、過 沃素酸図表関連メンバー、相異なるアイソトープ、組合せアイソトープ、その他 であり得る。各固体支持体に対する組合せ合成の端縁には、少なくとも0.01フェ ムトモル、通常は0.001〜50pモルの各付箋が通常取付けられる。この付箋は、脂 肪族系、脂環式系、芳香族系、複素環式系、或いはこれらの組合せのものであり 得る。特徴のある特質は、アルキル成分中のメチレン基、ポリアルキレンオキシ 成分中のアルキレンオキシ基、ポリハロ化合物中のハロ基、置換基がアルキル基 、オキシ、カルボキシ、アミノ、ハロ、その他であり得るα-及び／又はβ-置換 エチレン基、アイソトープ等のような繰返しユニットの数にあるのかも知れない 。 本発明の組合せ合成を施す材料は、固体支持体、ビーズ及び樹脂と呼ばれる。 これらの用語は、以下のものを包含するように考えている。即ち、 ａ）ビーズ、ペレット、デイスク、ファイバー、ゲル、或いは、セルロースビー ズ、調整気孔ガラス ビーズ、シリカ ゲル、ジビニールベンゼンとの随意交差 結合とポリエチレングリコールの随意グラフトとを有してアミノ基、ヒドロキシ 基、カルボキシ基、又はハロ基で随意に機能化されたポリスチレン ビーズ、グ ラフト共重合ビーズ、ポリアクリルアミド ビーズ、ラテックス ビーズ、Ｎ， Ｎ’-ビス-アクリロイルエチレンジアミンとの随意交差結合を有するジメチルア クリルアミド ビーズ、疎水性ポリマー コートのガラス粒子等、即ち固体又は 半固体表面を有する材料のような粒子、 ｂ）低分子量の非交差結合ポリスチレンのような可溶性支持体、 を包含する。 或る特定分子中の置換基或いは記号(例えばＲ³)の定義は、その分子中の別の 場所での定義から独立しているものと考える。かくて、ＮＲ³Ｒ³はＮＨ₂、ＮＨ ＣＨ₃、Ｎ(ＣＨ₃)₂等を表わす。光学異性体−ジアステレオマー−幾何学的異性体−互変異性体 ここに記述する化合物のある物は、１以上の非対称中心を含んでいて、かくし て、鏡像異性体、ジアステレオマー、及び絶対立体化学用語で(Ｒ)又は(Ｓ)とし て定義され得るその他の立体異性体形態を生ぜしめ得る。本発明は、そのラセミ 体や光学純正形態やその混合体と共に、全ての可能性のあるこのようなジアステ レオマーを把握することを意図している。光学的に活性な(Ｒ)又は(Ｓ)形態はキ ラル シントーン又はキラル試薬を使って調合され得るし或いは在来技術を使っ て分離され得る。ここに記述する化合物かオレフィン２重結合又は他の幾何学的 非対称中心を有する時及び別な方法で特記しない限り、Ｅ及びＺ両方の幾何学的 異性体を包含するものと考える。同様に全ての互換異性体形態が包含されるもの と考える。塩 本発明の製薬組成は、活性成分として化学式IIの化合物又はその製薬上受容可 能な塩を包含し、又、製薬上受容可能な担体及び随意に他の治療成分を包含し得 る。用語“製薬上受容可能な塩”は、有機及び無機の酸又は塩基を含む製薬上受 容可能な非毒性の酸又は塩基から調合される塩に属するものと考える。 本発明の化合物が酸性のものである時、塩は製薬上受容可能な非毒性塩基から 調合され得る。無機塩基の全ての安定形態から誘導される塩は、アルミニウム、 アンモニウム、カルシウム、銅、鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン、カリ ウム、ナトリウム、亜鉛等を包含する。特に望ましいのは、アンモニウム、カル シウム、マグネシウム、カリウム、及びナトリウムの塩である。製薬上受容可能 な非毒性塩基からの誘導塩は、１次、２次及び３次のアミン、天然発生置換アミ ンを含む置換アミン、環状アミン、及びアルギニン、ベタイン、カフェイン、コ リン、Ｎ，Ｎ’-ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２-ジエチルア ミノエタノール、２-ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレン ジアミン、Ｎ-エチルモルホリン、Ｎ-エチルピペリジン、グルカミン、グルコサ ミン、ヒスチジン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルコサミン、モルホ リン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブ ロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、等のよう な塩基性イオン交換樹脂の塩を包含する。 本発明の化合物が塩基性のものである時、塩は製薬上受容可能な非毒性酸から 調合され得る。このような酸は、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、樟脳ス ルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸 、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、マンデル酸、メタンス ルホン酸、ムチン酸、硝酸、パモイン酸(pamoic acid)、パントテン酸、リン酸 、コハク酸、硫酸、酒石酸、p-トルエンスルホン酸、等を包含する。特に望まし いのは、クエン酸、臭化水素酸、マレイン酸、リン酸、硫酸、及び酒石酸である 。 この中での処理方法の論点では、化学式IIの化合物の引用は、又、その製薬上 受容可能な塩を包含させことを意図する。 効用 αアドレナリン作用性受容体との相互作用を有する化学式IIの化合物の能力は 、哺乳類、特に人体の中での高血圧及び良性の前立腺肥大の治療、予防或いは回 復にこの化合物が役立つことを示している。 ドパミン受容体との相互作用を有する化学式IIの化合物の能力は、人体内のア ルツハイマー病及びうつ病の治療、予防或いは回復にこの化合物が役立つことを 示している。 α-アヘン薬受容体との相互作用を有する化学式IIの化合物の能力は、哺乳類 、特に人体の中での精神分裂病の治療、予防或いは回復にこの化合物が役立つこ とを示している。 Ｋ チャネルとの相互作用を有する化学式IIの化合物の能力は、哺乳類、特に 人体の中での高血圧、ぜん息及び肺機能不全の治療、予防或いは回復にこの化合 物が役立つことを示している。 カルボネート デヒドラターゼ イソチームを抑制する化学式IIの或る化合物 の能力は、哺乳類の中でこの酵素によって誘発される症状の抑制乃至は復帰にお いてこの化合物を役立つものたらしめている。この酵素の抑制は、哺乳類、特に 人体の中での眼病、特に、緑内障の治療、予防或いは回復においてこの化合物が 役立つことを示す。１回服用量の範囲 化学式IIの化合物の予防乃至は治療に対しての１回服用量の値は、治療される べき状態の性質及びきびしさによって、又、化学式IIの化合物の中の特定品の差 異及びその投薬経路によって変動するであろう。一般に、酵素抑制薬に対する毎 日の１回服用量範囲は、哺乳類の体重を基準に20乃至0.001mg／kg、望ましくは1 0乃至0.01mg／kg、最も望ましいのは1.0乃至0.1mg／kgの範囲の単一乃至は分割 服用量に納まっている。場合によっては、これらの範囲を逸脱した１回服用量の 使用が必要となり得る。 静脈内投与用組成を採用する場合、適切な毎日の投薬量範囲は、体重１kg当た り約10乃至0.0005mg(望ましくは５乃至0.01mg)の化学式IIの化合物となる。 経口投与用組成を採用する場合、適切な毎日の投薬量範囲は、体重１kg当たり 約20乃至0.001mg(望ましくは10乃至0.01mg)の化学式IIの化合物となる。 眼薬用組成を採用する場合、適切な毎日の投薬量範囲は、約10〜0.01％(望ま しくは5.0〜0.5％の化学式IIの化合物からであり、典型的には、受容可能眼薬の 処方箋において2.0〜0.1重量％の化学式IIの化合物の溶液又は懸濁液として調合 される。 化学式IIの化合物は、又、他の薬学的に活性な成分との組合せで使用され得る 。例えば、典型的な眼薬処方は、この化合物単独で、或いは、マレイン酸チモロ ールのようなβ-アドレナリン作用遮断作用物質、或いはピロカルピンのような 副交感神経作用性物質との組合せで構成され得る。組合せ使用の場合、2つの活 性成分がほぼ同じ部分に存在する。製薬組成 どの適切な投薬ルートをも、化学式IIの化合物の効果のある服用量を哺乳類、 特に人間に提供するために採用することが可能である。例えば、口、直腸、局所 、直腸外、眼、肺、鼻等の経路が採用され得る。投薬形態は、錠剤、トローチ、 散剤、懸濁剤、液剤、カプセル剤、クリーム、軟膏、エーロゾルその他を包含す る。 本発明の製薬組成は、化学式IIの化合物、又はその製薬上受容可能な塩を活性 成分として含み、又、製薬上受容可能な担体及び随意に他の治療活性成分をも包 含し得る。 この製薬組成は、経口の、直腸の、(経皮性装置、エーロゾル、クリーム、軟 膏、ローション、及び振掛け散剤を含む)局所性の、(皮下、筋内、及び静脈内を 含む)直腸外の、眼の、肺(鼻又は頬吸入)の、或いは鼻の投薬に適した組成を包 含するけれども、どのような所与の場合でも、最適な経路は、治療されるべき状 態の性質及びきびしさと活性成分の性質とに大いに依存するであろう。組成は、 便宣的に単位投薬形態で提供され得るし、調剤技術で良く知られている如何な方 法で調合されても良い。 化学式IIの化合物は、在来の製薬混合技法に従って製薬担体との親和性添加物 中の活性成分として組合わされ得る。製薬担体は、投与即ち経口、非経口等に必 要な調合の性質に依存して種々雑多な形態を採り得る。経口投薬形態調合におい ては、経口液剤調合(例えば懸濁剤、エリキシル剤及び液剤)の場合、水、グリコ ール、油、アルコール、香料、保存薬、着色剤、その他のようないづれかの通常 の製薬媒体が、或いは散在やカプセル剤や錠剤のような経口固形剤調合の場合、 デンプン、砂糖、微晶性セルロース、希釈薬、造粒剤、滑剤、結合剤、崩壊作用 物質、等のような担体が使用され得る。固体経口調剤は液体経口調剤よりも好ま れる。投与が容易なるが故に、錠剤とカプセルとが好適な経口投薬単位形態であ る。望みとあらば、カプセルは標準的な水性或いは非水性技法によって被覆を施 され得る。 上記の投薬形態に加えて、化学式IIの化合物は、米国特許第3,536,809号公報 、第3,598,123号公報、第3,630,200号公報第3,845,770号公報、第3,916,899号公 報、及び第4,008,719号公報に記載されたような制御された放免手段及び装置に よって投薬することが可能であり、これらの特許公報を引用することによって本 願の中に組入れるものとする。 経口投薬に適した本発明の製薬組成は、粉末又は顆粒状で事前に定められた量 の活性成分をそれぞれ含有するカプセル剤、カシェ剤又は錠剤のような離散ユニ ットとして、或いは、水性又は非水性液中の、又は水中油乳剤又は油中水乳剤中 の液剤又は懸濁剤として調合され得る。このような組成は、調剤分野で知られて いるどのような方法ででも調合され得る。一般に、この組成は、活性成分に液状 担体、又は微細分割の固形担体、或いは両者を一様に親密に添加して、それから 必要なら製品を望みの形状に型付けして調合する。例えば、錠剤は随意に1以上 の補助成分と共に圧縮成形又は型付けによって調合され得る。圧縮成形錠剤は、 随意に結合剤、滑剤、不活性希釈剤、又は表面活性乃至は分散作用物質と混合し た粉末又は顆粒のような自由流動性形態にされた活性成分を適当な機械中で圧縮 成形することによって調合され得る。型付け錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らさ れた粉体化合物混合剤を適当な機械中でモールドすることによって作成され得る 。眼の差込み剤は、粉末状にした活性成分とＨＰＣとの混材に12,000ポンド(ゲ ージ)の圧縮力を149℃で１〜４分間受けさせることによってカバー プレスで用 意される圧縮モールド フィルムから作られる。このフィルムはローラ内に冷水 循環をすることによって加圧下冷却される。差込み剤は、それから棒状パンチを 使ってこのフィルムから個々に切り取られる。各差込み剤は、薬びんの中に置か れ、それから薬びんを湿潤容器(30℃で相対湿度88％)の中に２〜４日間入れて置 く。この容器から薬びんを取り出してからは、薬びんに蓋を被せ、それから121 ℃で0.5時間圧熱滅菌する。 以下は化学式IIIの化合物の代表的な投薬形態である。筋内注入可能懸濁剤 mg ／ml 化学式IIの化合物 10 メチルセルロース 5 トウィーン(Ｔween)80 0.5 ベンジルアルコール 9 塩化ベンザルコニウム 1 全体体積1mlに対する注入用水錠剤 mg ／錠 化学式IIの化合物 25 微晶性セルロース 415 ポビドン 14 事前ゼラチン化デンプン 43.5 ステアリン酸マグネシウム 2.5 500カプセル剤 mg ／カプセル 化学式IIの化合物 25 ラクトース粉末 573.5 ステアリン酸マグネシウム 1.5 600エーロゾル 入れ物当り 化学式IIの化合物 24mg レシチン、NF液濃縮物 1.2mg トリクロロフルオルメタン、ＮＦ 4.025gm ジクロロジフルオルメタン、ＮＦ 12.15gm眼薬液 mg ／ml 化学式IIの化合物 1 一塩基性リン酸ナトリウム・２Ｈ₂Ｏ 9.38 二塩基性リン酸ナトリウム・12Ｈ₂Ｏ 28.48 塩化ベンザルコニウム 1 全体体積1mlに対する注入用水眼薬懸濁剤 mg ／g 化学式IIの化合物 1 全体体積1gに対するペトロラタム液眼差込み剤 mg ／差込み剤 化学式IIの化合物 1 オキシプロピルセルロース 12 これら化学式Ｉ及びIIの化合物は、又、イソチームの中からの選択的抑制パタ ーンの発掘を含む、一連の生物学的分析の中での評価による新しい先導構造発見 用のライブラリーとして使用され得る。これらのライブラリーは、このようにし て薬剤発見用の、即ち、種々な生物学的目標に対するライブラリー鑑別による斬 新な先導化合物の発見用、及び関連化合物の大ファミリー内での構造上の活性関 係の開発用の手段としてのツールなのである。ライブラリーは化学式Ｉの中に示 されるような固体支持体に結合するリガンドで試験され得るし、或いは個々の化 合物IIは評価に先立って解離され得る。化学式Ｉの化合物によって、ＦＡＣＳ検 索、ビーズ ローン分析、及び細胞ローン分析のような鑑別試験が利用され得る 。評価に先立って化合物が解離される時、この化合物の固体支持体に対する関係 は、例えば、標準の96井戸プレートのグリッド内の場所又は井戸のローン上の活 性場所で維持される。生物活性に関連する固体支持体又は解離リガンドに関係す る固体支持体は、それから活性化合物の構造或いは合成経緯を解明するために解 読され得る(オールメーヤ他、米国国内科学アカデミー会報第90巻第10922〜1092 6頁、 1993年12月)。生物活性決定試験 本発明の化合物は、等業界で良く知られた検定方法によって、αアドレナリン 作用性受容体との相互作用、ドパミン受容体との相互作用、α-アヘン誘導体受 容体との相互作用、Ｋ⁺チャネルとの相互作用、及びカルボネート デヒドラタ ーゼ抑制に対して試験され得る。例えば、カルボネート デヒドラターゼ抑制分 析を示唆する代表的な引用例は、 カルボネート デヒドラターゼ抑制−マレン及びコウトの“人間の赤血球カル ボネート デヒドラターゼの陰イオン抑制の性質”、生物化学及び生物物理学の 公式記録第196巻第２号９月号、第501〜510頁、(1979年)、 カルボネート デヒドラターゼ抑制−ポンチセロ他の“チエノチオピラン-２- スルホンアミド：水溶性カルボネート デヒドラターゼ抑制因子の漸新なクラス 、”医療化学学会誌第30巻第591〜597頁(1987年)。 カルボネート デヒドラターゼ抑制−カルボネート デヒドラターゼ抑制用試 験用化合物分析のための極低初期濃度のダンシルアミド(0.04〜1.6、望ましくは 約0.6μモル)とカルボネート デヒドラターゼ(0.03〜1.2、望ましくは約0.3μ モル)との使用は、1分析当たりの極小全体量(約25〜100、望ましくは約50μl)の 使用量を許容するだけでなく、試験用化合物の再溶離又は再合成のいづれをも必 要とせずに低親和性化合物からの高親和性化合物の区別を許容することが今回発 見された。ダンシルアミドの濃度を試験サンプル中で直接〜0.1μモルから〜200 μモルに増大させることにより、比較的弱い抑制因子が試験用化合物の同一分割 試料上で比較的強力な抑制因子から区別され得る。小全体量は、有利なことには 、例えば96井戸プレートの中の少量の試験用化合物で高スループットの分析を可 能にし、低減濃度のダンシルアミドは、有利なことに、幅広い範囲(＜500nモ ル)の固有解離定数を有する試験用化合物の検出を可能にする。以下の材料が使 用される。即ち、 100mモルのリン酸ナトリウム緩衝剤、ｐＨ7.4 0.6μモルのダンシルアミド(シグマＤ-3882) 0.3μモルのウシのカルボネート デヒドラターゼ(シグマＣ-3934)抑制因子 反応は、試験用化合物を包含する‘Ｕ’底で白色化した96井戸プレート、望ま しくはダイナテック マイクロ フルアー プレートの中の50μlの全体量の中 で実行される。検定混合物は使用直前に用意され、50μlの分析溶液がプレート の各井戸の中にピペットで移されるが、試験用化合物は井戸の中で予め乾燥され ている。プレートは蛍光を読み取る前に卓上遠心分離器の中で短時間廻される。 蛍光は、390nmのカットオフフィルターを取り付けて励磁波長274nm(2.5nm間隙) 及び放射波長454nm(20nm間隙)を使用する、井戸プレート リーダ アクセサリ を嵌め込んだパーキン-エルマーＬＳ50Ｂ蛍光分光光度計の中で読み取られる。 蛍光計測値は、各井戸毎に１秒間に亘っての平均値が採られている。抑制因子が 存在する井戸の特定のために、最初外因性抑制因子のいないプレートが読まれ、 これは所与の分析液に対して典型的には2.6〜3.1(典型的標準偏差±0.06)の蛍光 値の読みを与える。抑制因子候補を包含するプレート中では、活性抑制因子が5 倍より大きな標準偏差の蛍光信号に減退する要因となる。 低親和性候補から高親和性候補を区別するため、ＤＮＳＯ中のダンシルアミド の２mモル貯蔵中の５μlが上記試験液に加えられて上記のような分析が繰返され た。典型的読み取り値は、既に特定されている抑制因子の間では7.5乃至8.5±0. 4(標準偏差)である。高親和性化合物は、３倍より大きな標準偏差分だけ信号を 弱める。かくてダンシルアミドの上昇濃度は、相対的に強力な抑制因子(例えば 、アセタゾールアミド、Ｋｉ〜7.5nモル)を置換することなく比較的弱い抑制因 子(例えばクロロチアジド、Ｋｉ〜75nモル)を置換するのに充分である。 ビーズローンアッセイ（一般的方法） 興味の対象である酵素が、シリカゲル、寒天、アガロース、ペクチン、ポリア クリルアミド、ゼラチン、澱粉及びゲル化ゴム等のゲル化できるゴム、望ましく は低融点アガロースゲル(0.5-2.0％，重量／体積)中に組み入れられている。こ のアガロースゲルは、１個のビーズよりも厚くないような厚さにリガンドと共に 固体の支持具であるローンの最上層に積層される。活性結合ライブラリー部材を 、紫外線に対して暴露することにより、ビーズからリガンドをもとの場所に光溶 離して検出する。時期尚早の光溶離を最小化するために、ビーズを紫外線の暴露 の前に環境光光源から保護することが望ましい。第２の層、望ましくは低融点ア ガロースゲル、を配置し、酵素と光により開放されたライブラリー部材とを含む 層の頂部に基質を含め、基質の酵素含有ゲル中への拡散による生成物中への基質 の酵素による転化を許すことにより、ビーズを評価する。基質は、生成物への転 化のときに光度計の変化を生じる基質、例えば、着色された生成物、蛍光性生成 物、あるいは(生成物の１つが光子である)化学ルミネセンス反応、であることが 望ましい。第２の層は、シリカゲル、寒天、アガロース、ペクチン、ポリアクリ ルアミド、ゼラチン、澱粉及びゲル化ゴム等のゲル化し得るゴム又は蛍光生成球 粒の配列を含む基質等の固体物質で構成してもよい。ライブラリー部材により酵 素を抑制することにより、取り付けたビーズの近傍で外観上の差が生じ、ビーズ と、インヒビターのために符号化する同定子とを選択することができる。この技 術は種々の酵素を用いて使用される。例えば、酸性ホスファターゼ、活性蛋白質 Ｃ、アルカリフォスファターゼ、アミノペプチダーゼＢ＆Ｍ、酵素を生じるアミ ロイドＡ４、アンギオテンシナーゼ、アリルスルファターゼ、βガラクトシダー ゼ、βグルコシダーゼ、βグルクロニダーゼ、カルパインＩ＆II、カテプシンス Ｂ，Ｃ，Ｄ＆Ｇ、コリネステラーゼ、チモトリプシン、コラゲナーゼ、ジペプチ ジルペプチダーゼＩ-IV、エラスターゼ、酵素転化エンドセリン、要素Ｘａ、要 素XI ａ、要素XIIａＤｆ-プロテアーゼ、フリン、γ-グルタミルトランスペプチダー ゼ、グランジームＡ＆Ｂ、ＨＩＶプロテアーゼ、ＩＬ-１Ｂコンバーターゼ、カ リクライン、リゾチーム、マストセルプロテアーゼ、ペロキシダーゼ、プラスミ ン、プロホルモンコンバーターゼ、ｒＡＮＰ前駆物質処理酵素、レニン、スプリ ーンフィブリノリチックプロテナーゼ、スタフィロコアグラーゼ、テロンビン、 ティッシュープラスミノーゲンアクチベータ、トリプシン、トリプターゼ、ウロ キナーゼ等である。 カーボニックアンヒドラーゼインヒビションを検査するためのビーズローンア ッセイは、望ましくは、両層のためのアガロース、ボヴァインカーボニックアン ヒドラーゼ、及びフルオレセインダイアセテートにより構成することが望ましい 。 ビーズローンアッセイ（カーボニックアンヒドラーゼ） 検査すべきビーズを60mmポリスチレン組織培養皿中の最小量のメタノール中に 配列し、全てのメタノールを蒸発させる。20mＭ燐酸ナトリウムバッファ(pＨ7.4 )中の2.5％(重量／体積)アガロース混合物を、アガロースが溶解するまで加熱し 、水槽中で37°Ｃに平衡化させる。同一のバッファの別のストックをもう１つ37 °Ｃに平衡化させる。酵素層は、次のように準備する。すなわち、100μＬのボ バインカーボニックアンヒドラーゼストック(280nmでの吸収に基づいて0.5mg／m Ｌ又は53μＭ、シグマ＃Ｃ-3934)を2.15mＬのバッファに加え、1.25mＬアガロー ス溶液をその混合物に加える。このアガロース／酵素溶液をビーズを入れた溶液 に注ぎ、アガロースが室温で３-５分間で凝固できるようにする。インヒビショ ン領域を識別するために、4.7-６mＷ／cm²365nm紫外光を５秒間ないし１時間照 射して選択的に光溶離される混合物を、10μＬ ＦＬＤＡストック(-20°ＣでＤ ＭＦ中に10mＭ)と1.25mＬアガロース(最終ＦＬＤＡ濃度：30μＭ)とを2.25mＬフ ォスフェイトバッファに加えて準備したフルオロセンジアセテート(ＦＬＤＡ， モ レキュラープローブズ、オイゲンス、ＯＲ)と共にかぶせる。この溶液は完全に 混合され、皿の中の酵素層の上に注がれる。１-２分後にインヒビテーション層 が現れ、30-45分後に強まる。これらの層は、短波長紫外光(λmax＝254nm)で照 明したときには黄緑の背景に対して暗い。 ビーズローンアッセイ（イノシトールモノフォスファターゼ） このアッセイはカーボニックアンヒドラーゼに対するアッセイと次のように置 き換えると類似のものとなる。すなわち、このバッファは２０mＭ Ｔris，１m Ｍ ＥＧＴＡ，pＨ7.8で用いられる。酵素層には、(Ｅ．大腸菌(Ｅ．coli)から 純化した)１mg／mＬ組替えイノシトールモノフォスファターゼと10mＭのＭgＣl₂ とが含まれる。３つの基質が選択的に用いられている。すなわち、メチラムベリ フェリルフオスファターゼ(シグマ、Ｍ-8883)、λex＝388nm及びλem＝420nmの 近辺でフィルタを用いて検出したフルオロジェニック基質、又はフィルタを用い ずに直接に検出したＣＳＰＤ若しくはＣＤＰ-Ｓtar(アルカリフォスターゼに対 する化学ルミネセンス基質、トロピックス、ベッドフォードＭＡ)である。望ま しい基質はＣＳＰＤである。合成方法 本発明の化合物は次の方法により調整できる。合成の各工程で、化合物がその 上に合成される各固体支持体には、その工程の間に生じる特別の化学的出来事を 特定するために固有の標識を付す。標識付けは、合成の間支持体がさらされる順 次の出来事を記録する式IVなどのような同定子を用いて行われ、このようにする ことにより、各支持体上に生成された化合物に対する反応歴が提供される。同定 子は互いに結び付けて用いられ、比較的少数の同定子を用いて比較的多数の反応 生成物をエンコードできるようなバイナリーあるいはより高次のエンコーディン グの図式を形成する。例えば、バイナリーコードを用いた場合には、Ｎ個の同定 子により２のＮ乗までの異なった化合物又は条件をエンコードできる。合成の各 工程の各変数又は変数の組合せを、反応物、試薬、反応条件あるいはこれらの組 合せ等の選択された変数を個別に定義する同定子の組合せと結合させることによ り、同定子を、それが各固体支持体の反応歴を定義するように用いることができ る。 合成の実行においては、少なくとも１０³個、望ましくは１０⁴個、の固体支持 対から初め、一般には１０¹⁵個の固体支持体を超えない。第１の工程に対する所 定数のＲ¹／Ｒ²の選択によって、それに応じて支持体を多くの容器として分割す る。適当な試薬と反応条件とを各容器に適用し、各Ｒ¹／Ｒ²の選択をエンコード する同定子の組合せをつけ加えて取り付ける。含まれる化学的性質に応じて、標 識付けは、各選択を構成する反応に先行して、あるいは同時又は以後になされる 。制御体として、サンプル支持体を各工程で摘出し、それらの標識の一部を取り 外してデコードすることにより、サンプル支持体に付された標識が正しいことを 検証する。必要なときは、各工程を進める前に、何らかの過剰な試薬又は副産物 を除去するためにビーズを洗浄してもよい。各工程の最後に、通常支持体を化合 し、混合し、また、合成の第２の工程に対する選択の数に対して所定の数と同数 の容器に今回は再分割する。この分割、反応、標識付け及び再混合を化合合成が 完了するまで繰り返す。図式１ アミノ機能化又はヒドロキシ終端ＰＥＧでグラフトしたポリスチレンビーズを 所定の数の反応容器に分割し、予め形成した分離可能なリンカー／リガンド要素３ と反応させ、４を生成する。例えばＲ¹及びＲ²の３個の選択に対して表１-１ に記載したように、バイナリー図式でエンコードした同定子の組合せを用いて各 反応容器中の支持体に個別に標識を付す。(1.5%重量／重量 同定子：固体支持 体率の)同定子の溶液をＣＨ₂ＣＬ₂中に懸濁した１バッチの支持体に付加し、こ の混合物を３０分加振することにより同定子を付加する。ロジウムトリフルオロ アセテート二量体の希釈溶液を添加し、混合物を直ちに４時間加振し、ＣＨ₂Ｃl₂ 中で洗浄する。この手続を繰返し、混合物を１４時間加振した後ＤＭＦ／ＤＣ Ｍ中で洗浄する。図式２ 化合物４を貯留し、混合し、所定の数の反応容器中に分割して、５ａ，５ｂ及 び５ｃを生成するためのピロリジンの存在下で、リガンド要素ＣＲ⁴Ｒ⁵に対応す る１個のリガンドで各反応容器を処理する。例えば、Ｒ⁴Ｒ⁵の７種類の選択につ いて表１-２に示したように、バイナリー図式でエンコードした追加的な同定子 を組み合わせて、各反応容器中の支持体に個別に標識を付す。図式３ Ｒ⁴／Ｒ⁵／Ｘがピペリジン、ピロリジン又はアミノシクロヘキサンの残基を表 わす化合物５ｃを貯留し、混合し、所定の数の反応容器に分割する。例えば、Ｒ⁸ の30種類の選択について表１-３に示し、Ｒ¹⁴の６種類の選択とヘテロアリル群 の４種類の選択とについて表１-５に示したように、バイナリー図式でエンコー ドした追加的な同定子を組み合わせて、各反応容器中の支持体に個別に標識を付 す。Ｒ⁴Ｒ⁵中のＮ保護Ｂoc群を除去した後、ＣＨ₂Ｃl₂，ＤＭＦ又はＥtＯＨ等の 溶媒、及び必要なときにはトリエチルアミン又は２，６-ルチジン等の基、の存 在下でリガンド要素Ｒ⁸に対応する１つの試薬で各反応容器を処理し、例えばＲ⁶ Ｒ⁷が共にＯであるときは、Ｃ-２にＲ⁸置換基、Ｃ-４にケトンを有する６を生成 する。図式３においては、Ｒ¹⁴は、ベンジル、-ＣＨ₂-Ｐh-４-Ｆ、-ＣＨ₂- Ｐh-４-ＯＣＨ₃、-ＣＨ₂-４-Ｐy，n-ペンチル、又は-ＣＨ₂-c-プロピルであり、 ヘテロアクリルは以下の如くである。 図式４ 化合物５ａ，５ｂ，５ｃ及び６の一部を貯蔵し、混合し、例えばＲ⁶／Ｒ⁷の３ 個の選択方法に対する表１-４に示したようなバイナリー図式でエンコードした 追加的な同定子の組合せを用いて個別に標識を付すことのできる所定数の反応容 器中に分割する。各容器を水酸化硼素ナトリウムで処理してＣ-４のアルコール として７を生成する。若しくは、１，２ジチオエタンとＢＦ₃・Ｅt₂Ｏ等のルイ ス酸で処理してＣ-４のジチオエタンとして８を生成する。若しくは、ＭeＯＨ中 のＮaＣＮＢＨ₃の存在下、あるいは選択的に酢酸を用いて、適当な非ベータ分岐 した第一級アミンで処理して第二級アミンを生成する。又は、処理せずにそのま ま残す。 次に、化合物５ａ，５ｂ，５ｃ，５ｄ，６，７，８及び９をＤＭＳＯ、水等の 極性溶媒又はＭeＯＨ等の低アルカノール中で紫外線(〜360nm)に暴露し、式IIの 化合物を支持体／リンカー化合物から分離する。図式５ テンタゲル樹脂を二Ｂocリジンを用いて改変し、配位子を付着させるための有 用な反応位置を増加させることができる。ＤＭＦ、ＨＯＢt及びＤＩＣ中の二Ｂo c樹脂を室温で加振し、乾燥したテンタゲル樹脂を添加する。この混合物を室温 で17時間加振し、メタノールとＤＣＭで交互に洗浄し、その後ＴＨＦで洗浄し、 真空中で乾燥させる。樹脂の保護を外すために、ＤＣＭを添加し、ＤＣＭ(100m Ｌ)中の30％ＴＦＡ溶質を添加する。純粋のＴＦＡを添加する前に、この容器を 室温で15分間加振する。この容器を室温で2.5時間加振し、この間樹脂をＤＣＭ で洗浄し、続いてＤＣＭ中の10％トリエチルアミン溶液で処理し、更にＤＣＭ及 びＤＭＦで洗浄する。 簡明にするために、この方式ではこの二変形の使用は示さない。図式６ アミノ機能化又はポリスチレンビーズでグラフトしたヒドロキシ終端ＰＥＧ等 の機能化した支持体を所定の数の反応容器に分割し、予め形成した分離可能なリ ンカー／リガンド要素10と反応させ、11を生成する。例えば-(ＣＨ₂)₁-₆Ｒ¹⁷の ７個の選択に対して表２-１に記載したように、バイナリー図式でエンコードし た同定子の組合せを用いて各反応容器中の支持体に個別に標識を付す。(７％重 量／重量 同定子：固体支持体率の)同定子の溶液をＥtＯＡc中に懸濁した各バ ッチの支持体に添加し、この混合物を１時間加振することにより同定子を付加す る。ロジウムトリフルオロアセテート二量体のＤＣＭ希釈溶液を添加し、混合物 を15時間加振し、ＤＣＭ(４Ｘ)及びＥtＯＡcで洗浄する。この手続を各同定子に ついて繰返す。 エンコードした樹脂の保護を外すために、ＤＣＭ中にこの樹脂を懸濁し、続い てＤＣＭ中でＴＦＡ溶液を用いて撹拌する。次に、この樹脂をＤＣＭで洗浄し、 続いてＤＣＭ中のトリエチルアミンで処理し、更にＤＣＭで洗浄する。図式７ 化合物12を貯留し、混合し、所定の数の反応容器中に分割して、４’を生成す るためのＤＩＣ，ＨＯＢt及びＤＭＦの存在下で、リガンド要素Ｒ²に対応する１ 個のアセトフェノンリガンドで各容器を処理する。表２-１に示したのと同様な バイナリー図式でエンコードした追加的な同定子を組み合わせて、各反応容器中 の支持体に個別に標識を付す。図式８ 化合物４’を混合し、貯留し、所定の数の反応容器中に分割して、化合物５ａ ’ ，５ｂ’及び５ｃ’を生成するための75°Ｃメタノール中のピロリジンの存在 下で、Ｒ⁴／Ｒ⁵に対応するアルデヒド又はケトンで各容器を処理する。表２-１ に示したのと同様なバイナリー図式でエンコードした追加的な同定子を組み合わ せて、各反応容器中の支持体に個別に標識を付す。図式９ Ｒ⁴／Ｒ⁵／Ｘが、t-Ｂocで保護されたピペリジン、t-Ｂocで保護されたアミノ シクロヘキサン又は他のアミン機能化分子の残基を表わす化合物５ｃ’を混合し 、貯留し、所定の数の反応容器に分割する。表２-１に示したのと同様なバイナ リー図式でエンコードした追加的な同定子を組み合わせて、各反応容器中の支持 体に個別に標識を付す。Ｒ⁴／Ｒ⁵中の全てのＮ保護群を除去した後、ＣＨ₂Ｃl₂ ，ＤＭＦ，ＥtＯＨ又はメタノール等の溶媒の存在下で、クロロホルメイト、イ ソシアネート、チオイソシアネート、カルボン酸、アルキル若しくはアリルスル フォニルハライド、アルデヒド、又はリガンド要素Ｒ⁸に対応するハロヘトロア ロマチック化合物等の１つの試薬で各反応容器を処理する。必要なときには、ト リエチルアミン、ＤＢＵ又は２，６-ルチジン等の基、並びにＤＩＣ，ＮaＣＮＢ Ｈ₃，ＨＯＢt及び酢酸等の他の試薬又は化合物の双方又は基若しくは試薬若しく は化合物を加えて、例えばＲ⁶Ｒ⁷が共にＯであるときに、Ｃ-２にＲ⁸置換 基及びＣ-４にケトンを有する６’を生成する。図式１０ 化合物５ａ’，５ｂ’，５ｃ’及び６’の一部を貯蔵し、混合し、表２-１に 示したものと同様なバイナリー図式でエンコードした追加的な同定子の組合せを 用いて個別に標識を付すことのできる所定数の反応容器中に分割する。各容器を 、１)Ｃ-４にアルコールとしての７’を生成するためのメタノール中の水酸化硼 素ナトリウム、２)Ｃ-４にジチオレンとしての８’を生成するための１，２ジチ オエタン及びボロントリフルオライドエチレート等のルイス酸、３)Ｃ-４にアミ ンとしての９’を生成するための約75°Ｃの酢酸／メタノール溶液中のＮaＣＮ ＢＨ₃に加えて妨害されていない第一級アミンで処理するか、処理せずにそのま ま残す。図式１１ 化合物９又は９’を所定数の反応容器に分割する。クロロホルメイト、イソシ アネート、チオイソシアネート、カルボン酸、アルキル若しくはアリルスルフォ ニルハライド、アルデヒド、又はリガンド要素Ｒ¹⁵に対応するハロヘトロアロマ チック化合物等の１つの試薬で、ＣＨ₂Ｃl₂，ＤＭＦ，ＥtＯＨ又はメタノール等 の溶媒の存在下で、各反応容器を処理する。必要なときには、トリエチルアミン 、ＤＢＵ又は２，６-ルチジン等の基、並びにＤＩＣ，ＮaＣＮＢＨ₃，ＨＯＢt及 び酢酸等の他の試薬又は化合物の双方又は基若しくは試薬若しくは化合物を加え て、対応する化合物13又は13'を生成する。図式１２ アミノ機能化又はヒドロキシ終端ＰＥＧでグラフトしたポリスチレンビーズ等 の機能化した支持体を反応容器中に置いて、予め形成した分離可能なリンカー／ リガンド要素３と反応させ、11'を生成する。この樹脂を非保護化するために、 ＤＣＭ中に懸濁し、続いてＤＣＭ中でＴＦＡ溶液を用いて撹拌する。次に、この 樹脂をＤＣＭで洗浄し、続いてＤＣＭ中のトリエチルアミンで処理し、更にＤＣ Ｍで洗浄して12'を生成する。 適当な大きさの合成容器中にＨＯＢt(３当量)を置き、ＤＭＦ．ＤＩＣ(３当量 )等の溶媒中のカルボン酸Ｑ(Ｘ＝ＯＨ)(３当量)を添加し、この容器を15分間撹 拌し、アミノ樹脂12'(アミノサイトの１当量)を添加する。この樹脂を５時間撹 拌し、続いてＤＣＭ及びＭeＯＨ(それぞれ５Ｘ)で交互に洗浄し、更にＴＨＦ(２ Ｘ)で洗浄して14を生成する。 適当な大きさの合成容器中にアミノ樹脂12'(アミノサイトの１当量)を置く。 ＤＣＭ等の溶媒を添加し、トリエチルアミン、ピリジン、ヒューニッヒ基(ジイ ソプロピルエチルアミン)又は２，６ルチジン(１０当量)等の有機基を更に添加 する。この樹脂を15分間撹拌し、ＤＣＭ等の溶媒中の希釈溶液としての酸ハロゲ ン化物Ｑ(Ｘ＝Ｃl，Ｂr)(５当量)を添加する。続いて、この樹脂を４時間撹拌し 、更にＤＣＭ及びＭeＯＨ(それぞれ５Ｘ)で洗浄して１４を生成する。 表２は本発明を表わす式IIの化合物を示す 表３は表２は本発明を表わす式IIの追加的化合物を示す 本発明は、説明を目的とし制限を意図していない以下の例を参照することによ って更に明確となる。 準備１ 同定子 一般式が以下のような12個の化合物を図式13と以下の説明のための例とに従っ て準備した。 ここで、 n＝３-12及びＡrはペンタクロロフェニル又は n＝５-６及びＡrは２，４，６-トリクロロフェニル である。 ａ）メチルバニレート(0.79g，4.0ミリモル)、１-ヒドロキシ-９-(２，３，４ ，５，６-ペンタクロロフェノキシ)ノナン(1.634g，4.0ミリモル)及びトリフェ ニロホスフィン(1,258g，4.8ミリモル)をアルゴンの下で20mＬ乾燥トルエン中で 溶解した。ＤＥＡＤ(0.76mＬ，0.836g,4.8ミリモル)を滴下して添加し、混合物 を１時間25°Ｃで撹拌した。この溶液を半分の堆積に凝縮し、ＤＣＭで溶離する フラッシュクロマトグラフィーにより純化し、白色結晶の固体として1.0g(1.7ミ リモル，43％)析出させた。 ｂ）工程(a)（1.0g，1.7ミリモル）から50mＬのＴＨＦ中でメチルエステルを 溶解し、２mＬの水を加え、続いてＬiＯＨ(１．２g,50ミリモル)を加えた。この 混合物を25°Ｃで１時間撹拌し、続いて５時間還流した。25°Ｃまで冷却した後 に、この混合物をエチルアセテート(200mＬ)上に注ぎ、その溶液を１モルの塩酸 (３ｘ50mＬ)で洗浄し、続いて飽和食塩水(１ｘ50mＬ)で洗浄して、硫酸ナトリウ ム上で乾燥した。溶媒を除去し、粗酸アゼオトロープをトルエンで一度除去した 。この粗材料を100mＬトルエンで溶解し、10mＬ(1.63g，14ミリモル)チオニルク ロライドを添加し、この混合物を90分間還流した。蒸留により溶液の体積を約30 mＬまで減少させ、続いて残留トルエンを蒸発させて除去した。 ｃ）工程ｂ）で得た粗酸クロライドを20mＬ乾燥ＤＣＭ中で溶解し、アルゴン 下で-70°Ｃまで冷却し、50mＬ無水エーテル中の約10ミリモルジアゾメタン溶液 を加えた。この混合物を室温まで温め、90分間撹拌した。アルゴンを溶液を介し て１０分間泡立て、次に溶媒を蒸発させて取り除き、粗材料をフラシュクロマト グラフィーで純化して、ヘキサン中の10-20％エチルアセテートを用いて溶離し た。ジアゾケトン(0.85g，1.4ミリモル，３工程を通じて82％の収率)を薄い黄色 の固体として得た。 代替的な工程ｃ）においては、最終的なジアゾメタン下工程を変化させ、酸塩 化物を(トリメチルシリル)ジアゾメタン及びトリエチルアミンと反応させ、それ 以上純化することなく用いることのできる同定子を与える。この代替的項手医を 用いて、副産物のクロロメチルケトンを生じることなく高い収率で同定子を得る ことができる。また、ある場合には同定子の重要な酸触媒作用による分解を生じ るフラシュクロマトグラフィーによる純化はもはや必要ない。 代替工程ｃ）。アルゴン下０°Ｃ酸塩化物（3.8ミリモル，1000当量）及び無 水ＴＨＦ／アセトニトリル(１：１)中のトリエチルアミン1.85mＬ(13.3ミリモル ，3.50当量)にヘキサン中の(トリメチルシリル)ジアゾメタン2.0モル溶液5.7mＬ (11.4ミリモル，3.00当量)を添加した。これにより生じた有機溶液を０°Ｃで ２時間撹拌し、続いて25°Ｃで17時間撹拌した。((トリメチルシリル)ジアゾメ タンを添加するときに直ちに沈殿物が生じた場合には、この沈殿物を再分解する までＣＨ₂Ｃl₂を加える)。ＥtＯＡcを加え(250mＬ)、ＮaＨＣＯ₃(100mＬ)とＨ₂ Ｏ(100mＬ)の飽和水溶液で有機層を洗浄し、その後乾燥させた(無水ＭgＳＯ₄真 空中で揮発性物質を除去すると60-100％の収率で黄色い結晶が得られた。 式IVの他の11個の同定子を工程ａ），ｂ），ｃ）と同様な方法で準備した。 例１の合成において、１２個の同定子を用いて結合ライブラリーをエンコード した。工程１においては、n＝11-12(略記したＣ₁₁Ｃl₅及びＣ₁₂Ｃl₅)のペンタク ロロフェニル同定子を以下のバイナリーエンコード方式、すなわち０１＝(n＝12 )及び10=(n＝11)、において用いた。工程２においては、n＝８-１０(略記したＣ₈ Ｃl₅，Ｃ₉Ｃl₅及びＣ₁₀Ｃl₅)のペンタクロロフェニル同定子を用い、次のよう にエンコードした。すなわち001＝(n＝10)及び100＝(n＝８)。工程３においては 、n＝３-７(略記したＣ₃Ｃl₅，Ｃ₄Ｃl₅，Ｃ₅Ｃl₅，Ｃ₆Ｃl₅及びＣ₇Ｃl₅)のペン タクロロフェニル同定子を用い、次のようにエンコードした。すなわち00001＝( n＝７)，00010＝(n＝６)，00100＝(n＝５)，01000＝(n＝４)及び10000＝(n＝３) 。工程４においては、n＝５-６(略記したＣ₅Ｃl₃及びＣ₆Ｃl₃)のトリクロロフェ ニル同定子を用い、次のようにエンコードした。すなわち０１＝(n＝６)及び１ ０＝(n＝５)。 かくして、工程１において試薬３(表１-１)は、n＝11及び12である２個のペン タクロロフェニル同定子を用いた合成におけるこの選択を標識付けして表すエン コードされた”11”となる。 調合 ２ 第三ブチル４-(ヒドロキシメチル)-３-ニトロベンゾエート 第三ブチル４-(アセトキシメチル)-３-ニトロベンゾエートをＪ，ＡＭ．Ｃhem .Ｓoc．1985,107,4936-4942にベラニイとアルベチオにより記載されたように準 備した。25℃のＣＨＣＬ₃中でヒドラジン水化物を用いてアセテートのヒドラジ ン分解するためのこの参照文献記載の最終工程ではほんのわずかな量の所望のヒ ドロキシメチル最終製品しか生じない。それはここで用いられた光付着性リンカ ーの第３ブチルエステル前駆物質である。然しながら、25℃のＭeＯＨにヒドラ ジンヒドレートを用いるヒドラジン分解は高い産出率で第３ブチル４-(ヒドロキ シメチル)-３-ニトロベンゾエートを生産した。溶剤としてＭeＯＨを用いること により、定量産出率(93％)近い率で所望の最終製品が得られる。 第三ブチル４-(ヒドロキシメチル)-３-ニトロベンゾエート：ＭeＯＨ(200mＬ) 中の第三ブチル４-(アセトキシメチル)-３-ニトロベンゾエートの1.41gの溶液(4 7.7mmol,1,00equiv.)にヒドラジンヒドレート(55％ヒドラジン)の27.0mＬ(477mm ol,10.0equiv.)を加えた。出来上った黄色の溶液を25℃で４時間かきまぜた。Ｅ ＴＯＡＣ(250mＬ)と飽和水溶性ＮaＣl(85mＬ)を加え、振りまぜた後有機層を採 集した。有機層を更に飽和水溶性ＮaＣl(２×85mＬ)と共に洗滌し、そして乾燥 した(ＭgＳＯ₄)。vacuo内で揮発生物質を除去することにより黄色の触媒として9 3％の産出率で製品が与えられた。 調合 ３ アクリル４-(ヒドロキシメチル)-３-ニトロベンゾエート 100mＬの丸底フラスコに４-(５ドロキシメチル)-３-ニトロベンゼン酸(1.97g, 10mmol)を入れた。アリルアルコール(20mＬ)を加え、更にp-トルエンスルホン酸 (0.190g,１mmol)を加えた。混合物を24時間環流状態に加熱した。その時間で全 ての揮発物はvacuo内で除去された。残りをＥtＯＡＣ．中に取り出し、飽和ＫＨ ＣＯ₃で洗滌した。有機層をＭgＳＯ₄上で乾燥し、これを濃縮してクリーム色の 溶液としての上記混合物2.4g,(100％)が与えられた。 調合 ４ メチル４-(ヒドロキシメチル)-３-ニトロベンゾエート 調合３の工程に準ずるが、アリルアルコールの代りにメタノールを用いて、上 記混合物は5.7％の産出率で調合された。 調合 ５ ＢＩＳ−リンカー改変樹脂 工程１ ｂis-Ｂocリジンの付加 250mＬの合成容器中にｂis-Ｂoc-(Ｌ)-リジン(7.71g,22.2mmol)を入れ、ＤＭ Ｆ（150mＬ）の溶液とした。ＨＯＢＴ(2.84g,21.0mmol)が加えられ、続いてＤＩ Ｃ(3.25mＬ,21.0mmol)を加えた。溶液を15分間室温で振りまぜた後、ＴentaＧel 樹脂(25.8g,約7.2mmolのアミノサイト)を加えた。混合物をr.t.で17時間振りま ぜ、メタノールとＤＣＭ(各５Ｘ)及びＴＨＦ(２Ｘ)で交互に洗滌し、真空中で乾 燥した。工程２ デプロテクション ７つの250mＬ合成容器の各に改変ＴentaＧel樹脂(8.0g略4.5mmolのＮ-Ｂocア ミンサイト)を入れた。ＤＣＭ(75mＬ)を加え、ＤＣＭ(100mＬ)中の30％ＴＦＡを 加えた。容器を室温で15分間振って、生のＴＦＡ(15mＬ)を加えた。容器を室温 で2.5時間振って、その時間で樹脂をＤＣＭ(２Ｘ)をもって洗滌した。次に樹脂 をＤＣＭ(２×150mＬ)中の10％トリエチルアミンの溶液で処理し、各20分振った 。次に樹脂をＤＣＭ(４Ｘ)とＤＭＦ(１Ｘ)で洗滌した。 調合 ６ t- Ｂoc-プロテクトしたアミノ酸 １Ｌフラスコ中に３-ニトロ-４-(ブロモメチル)ベンゼン酸(20.03g,77.0mmol) を入れた。ＴＨＦ(300mＬ)を加え、次に4-メトキシベンジラミン(10.0mＬ、77.0 mmol)とトリエチラミン(35mＬ)を加えた。出来上った澄んだ溶液を室温で17.5時 間かきまぜた。固体ジテルト-ブチル ジカーボネート(16.8g,77.0mmol)を加え、 次にＤＭＦ(100)mＬを加えて、出来上がった懸濁液を室温で72時間かきまぜた。 反応混合物をvacuo中に集め、残留物をエチルアロテート中に取出し、1ＮＨＣＬ (Ｘ２)洗滌し、乾燥し(Ｎa₂ＳＯ₄)、ろ過し、集めて黒茶色の油を産出した。フ ラッシュクロマトグラフィー(エチルアセテート：ヘクサンにより純化して黄色 い泡となった。それをアセトニトリルで粉末化し、細かい白粉末(9.91g,31％)と しての所望のプロテクトしたアミノ酸(表２-１、混合物４)を作り出した。 調合 ７ t- Ｂoc-プロテクトしたアミノ酸 ほぼ調合６の工程に従うが、４-メトキシベンジラミンの代りに適当なアミン に代え、表２-１の残りの混合物を調合した。 実施例１ １２９９混合物ライブラリー 工程１ ａ）Ｒ１／Ｒ２ 第三ブチル４-(ヒドロキシメチル)-３-ニトンベンゾナーテ(２g,7.89mmol,１当 量)の溶液に、２，４-ジヒドロキシアセトフェノン(1.20g,7.89mmol,１当量)と トルエン(20mＬ)中のトリフェニルホスフィン(2.69g,10.26mmol,1.3当量)を加え 、ＤＥＡＤ(1.79g,10.26mmol,1.3当量)を滴下した。付加が完了した後、混合物 を室温で16時間かきまぜた。溶媒をvacuoで除去し、残留物をフラッシュクロマ トグラフィー(ＳiＯ₂、ヘクサン中10％エチルアセテートで希釈)で純化し、1.47 gの製品(48％の産出率)を作り出した。 上記第三ブチルエステル(500mg,1.29mmol,１当量)をＤＣＭ(８mＬ)に溶解／懸 濁させ、ＴＦＡ(３mＬ)で処理した。ＤＣＭとＴＦＡをvacuo内でかきまぜ、白い 固体を作り出した。これを一旦トルエンと共に沸騰し、次にvacuoで乾燥し、427 mgのカルボキシ酸(100％の産出率)を得た。 上記調合された酸(636mg,1.92mmol,1.5当量)をＤＭＦ(40mＬ)中に溶解し、メ リフィールド反応容器中ジビニルベンゼン交差結合ポリエチレングリコルグラフ トポリスチレンビード(ＴentaＧel Ｒ ＳＮＨ₂，Ｒapp Ｐolymere)(4.0g,0.32mm ol／g,1.28mmol当量)に加えた。樹脂をゆり動かして懸濁化し、次にＨＯＢt(259 mg,1.92mmol,1.5当量)とＤＩＣ(0.3mＬ,1.92mmol,1.5当量)をこの順序で加えた 。樹脂は室温で7時間ゆり動かし、その時間に陰性カイザーテストを与える。樹 脂はろ過され、且つ洗滌され(ＤＭＦ３×50mＬ，ＤＣＭ３×50mＬ)，次にvacuo で乾燥する。 ２つの他のジヒドロキシアセトフェノンを表１-１の試剤を用いる同様な方法 で光接着リンカーによって樹脂に取り付けた。 改変ａ） 同様のやり方で、アリル及びメチルのエステルをアクリル４-ヒドロキシメチ ル)-３-ニトロベンゾエート(調合３)とメチル４-ヒドロキシメチル)-３-ニトロ ベンゾナート(調合４)から調合した。 10mＬフラスコにアクリルエステル(110mg,0.3mmol)を入れた。メチレンクロリド (２mol)を加え、更にテトラキストリフェニルフオスピンパラジウム(０)(11.5mg ,0.01mmol)を加え、混合物を０℃に冷却した。ピロリジン(50mＬ,0.6mmol)を加 え、反応物を０℃で45分ゆり動かした。混合物をＥtOAc(10mＬ)で希釈し、3.5Ｎ ＨＣＬで洗滌した。有機層を乾燥し、(ＭgＳＯ₄)し、ろ過し、濃縮して、黄色の 固体、90.6mgを作り出した。 同様な方法で、メチルエステルを希釈したＮaＯＨとＴＨＦの混合物を用いる 基本的加水分解により脱プロテクト化した。 ｂ）工程1のエンコーディング 工程１(ａ)から三つの樹脂バッチ(2.5g)量を別々の合成容器に入れ、各ＤＣＭ (20mＬ)に懸濁した。各樹脂バッチに適当な二進コード混合物(表１-１)をＤＣＭ (各溶液に１mＬ)にＣ₁₂Ｃl₅Ｃ₁₁Ｃl₅リンカージアゾケトン(調合１)の適当なチ ョイス(37.5mg)又は(各の37.5g)を分解して調合した。これらの調合容器に加え 、樹脂を30分間かきまぜた。 ロジウムトリフルオロアセテートのダイマー(ＤＣＭ中１mg／mＬの１mＬ溶液) を各容器に加え、樹脂を室温で４時間かきまぜた。各樹脂バッチをろ過し、ＤＣ Ｍ(２×20mＬ)で、洗滌し、次にＤＣＭ(20mＬ)に懸濁し、上記した適当な二進エ ンコーディング混合物で再たび処理した。樹脂を再たび30分間かきまぜ、ロジウ ムトリフルオロアセテートのダイマーを加えた。同量の触媒とジアゾケトン混合 物を第１工程同様第２の結合工程で用いた。樹脂を14時間かきまぜた。次に各樹 脂バッチをＤＣＭ(５×20mL)で洗滌し、更にバッチを結合し、全ライブラリー( 三つの混合物)をＤＣＭ(10×50mＬ)で洗滌した。工程２ ａ）サイクロコデンセイション反応 工程１(b)からの乾いた樹脂を1.5g(Ｃa，0.42mmol)の四つのバッチに分割し、 0.2g(Ｃa,0.056mmol)の三つのバッチを加えた。1.5gのバッチを25mＬの丸底フラ スコに入れ、0.2gのバチを５mＬの丸底フラスコに入れた。樹脂の一部はメタノ ール(1.5gの樹脂を備えた四つのフラスコ中15mＬ．0.2gの樹脂を備えた三つのフ ラスコ内で２mＬ)中に懸濁させて、各フラスコにピロジン(1.5gの樹脂を備えた フラスコに0.6mＬ,7.2mＬ,Ｃa，15当量,0.2gの樹脂を備えたフラスコに0.08mＬ, 0.96mmol,Ｃa，15当量)を加えた。次に反応容器を５分間停止状態とし、反応物 が混合するようにした。次に適当なケトン(＞10当量)を容器に加えた。四つのＢ ＯＣプロテクトしたアミノケトンを1.5gの樹脂を含むフラスコに加え、他のケト ンを0.2gの樹脂を含むフラスコに加えた。混合物を75℃で16時間加熱した。次に フラスコを室温に冷却し、樹脂の各バッチを別の焼結じょうごに注入し、ＤＭＦ (３×20mＬ)とＤＣＭ(３×20mＬ)で全体的に洗滌した。 ｂ）工程２のエンコーディング 工程２(a)からの各バッチを別の合成容器を入れ、ＤＣＭ(1.5gの樹脂のバッチ には５mＬ，0.2gの樹脂を含むバッチには１mＬ)中に懸濁された。各樹脂のバッ チに七つの適当な２進コード混合物(表１-２参照)をＤＣＭ(各溶液に１mＬ)中の Ｃ₁₀Ｃl₁₅，Ｃ₉Ｃl₅，及びＣ₈Ｃl₅のリンカー-ジアゾケトン(調合１)の適当なチ ョイス(1.5gの樹脂に加えるならば22.5mg,0.2gの樹脂のバッチに加えるならば3. 0mg)或いは複数のチョイス(1.5gの樹脂のバッチに加えるならば、各22.5mg, 0.2gの樹脂のバッチに加えるならば、各3.0mg)を溶解して調合された。これらの 溶液を適当な合成容器に加え、樹脂を30分間かきまぜた。 ロジウムインフルオロアセテートのダイマー(ＤＣＭ中１mＬの１mg／mＬ溶液) を各容器に加え、樹脂を４時間室温でかきまぜた。次に各樹脂をろ過し、ＤＣＭ (２×20mＬ)で洗滌し、各を(1.5g樹脂のバッチには5mＬ,0.2gの樹脂のバッチに は１mＬ)中に再懸濁させ、上記した適当な二進エンコーディング混合物で再度処 理した。樹脂を再たび30分かきまぜ、次にロジウムトリフルオロアセテートのダ イマーを加えた。(等量の触媒とジアゾケトンの混合物を第１工程同様に第２結 合工程に用いた。)次に樹脂を16時間かきまぜた。各樹脂バッチはＤＣＭ(５×20 mＬ)で洗滌された。1.5gの樹脂の四つのバッチを結合し、ＤＣＭ(10×50mＬ)で 洗滌した。これらの結合したバッチを更に工程３で反応させた。 三つの0.2gの樹脂のバッチを結合し、ＤＣＭ(10×20mＬ)で洗滌した。これら の結合したバッチは工程3では使用されず、工程4のために保存された。工程３ ａ）工程３のエンコーディング 工程２(b)中で結合された1.5gの樹脂の４つのバッチを今度は各１ドラムのシ ェルバイアル(フィッシャーサイエンティフック)に170mgの30のロットに分割し 、各ＤＣＭ(２mＬ)中に懸濁させた。各樹脂のバッチに30の適当な二進コード混 合物(表１-３参照)をＤＣＭ(各溶液に１mＬ)中にＣ₇Ｃl₅，Ｃ₆ＣＬ₅，Ｃ₅Ｃl₅， Ｃ₄ＣＬ₅，Ｃ₃Ｃl₅リンカー-ジアゾケトン(調合１)の適当なチョイス(３mg)又は 複数のチョイス(各３mg)を溶解することにより調合された。これらの溶液を適当 な合成容器に加え、樹脂を30分かきまぜた。 ロジウムトリフルオロアセテートのダイマー(ＤＣＭ中１mg／mＬ溶液)を各の 容器に加え、樹脂を室温で４時間かきまぜた。次に上ずみの溶液をパスツールヒ ペットで樹脂から移した。樹脂をＤＣＭ(３mＬ)で二度洗いし、洗滌物をパスツ ールピペットで取出した。各樹脂のバッチをＤＣＭ(２mＬ)中で再度懸濁させ、 上記した適当な二進エンコーディング混合物で再たび処理した。樹脂を更に30分 間かきまぜて、ロジウムトリフルオロアセテートのダイマーを加えた。(等量の 触媒とジアゾケトンの混合物を第１の工程同様第２の結合工程に使用した)。次 に樹脂のバッチを16時間かきまぜた。次に各樹脂のバッチを小さなメリフィール ド反応容器に移し、ＤＣＭ(３×15mＬ)。ＤＭＦ(２×15mＬ),及びＤＣＭ(２×15 mＬ)で洗滌した。 ｂ）脱プロテクション 各樹脂のバッチをＤＣＭ(６mＬ：６mＬ)中のＴＦＡの50％溶液で処理した。樹 脂を２時間かきまぜて、ろ過し、ＤＣＭ(３×15mＬ)で洗滌した。次に樹脂をＤ ＣＭ(１mＬ：９mＬ)中トリエチラミンの10％溶液で処理し、10分間かきまぜた。 この処理をもう１度くり返した。樹脂をろ過し、ＤＣＭ(４×10mＬ)で洗滌した 。 ｃ）Ｒ⁸の追加 最初の六つのフラスコの各にＤＣＭ(５mＬ)を加え、樹脂を10分間かきまぜた 。２，６ジメチルビリジン(0.11mＬ,20当量)を各フラスコに加え、次にＤＣＭ( ５mＬ)中適当なクロロフォルメート(表１-３)の溶液を加え、樹脂をかきまぜた 。イソプロピルクロロフォルメート(アルドリッチ)を除いて、クロロフオルメー トを適当なアルコールから、アルコール(0.1g)をトルエン(５mＬの1.8Ｍ溶液)中 のフォスゲン溶液で１時間処理し、次にvacuo中乾燥状態に揮発させ、ＤＣＭ(５ mＬ)に溶解させることにより調合した。 フラスコ８，９，10にエタノール(10mＬ)と適当なイソシアンテ(表１-３)(0.1 mＬ,Ｃa,10等価)を加え、樹脂を４時間かきまぜた。 フラスコ11,12,13にエタノール(10mＬ)と適当なイソチオシアネート(0.1mＬ0. 1gのナフタレンイソシオシアネート,Ｃa，10等価)を加え、樹脂を４時間かきま ぜた。 フラスコ７と14-22にＤＭＦ(10mＬ)と適当なカルボキシル酸(Ｃa，10等価)と ＨＯＢt(0.103g,Ｃa，15等価)を加えた。フラスコを30分かきまぜ、次に(0.12m Ｌ,Ｃa，15等価)を各フラスコに加え、樹脂を４時間かきまぜた。 フラスコ23-30にＤＣＭ(10mＬ)とトリエチラミン(0.15mＬ,Ｃa，15等価)を加 え、樹脂を15分かきまぜた。適当なスルホニルクロリド(Ｃa，10等価)を反応容 器に加え、樹脂を４時間かきまぜた。 フラスコをろ過し、樹脂をＤＣＭ(３×10mＬ)で洗滌した。全ての樹脂を一つ の大きな合成容器内で結合し、そしてＤＣＭ(３×50mＬ),ＤＭＦ(３×50mＬ),再 度のＤＣＭ(３×50mＬ)で洗滌した。樹脂はvacuoで乾した。改変工程３ ａ）改変工程３のエンコーディング 工程３で使われなかった工程２(b)からの四つの結合した1.5gのバッチから残 りの900mg樹脂を90mgの10部分に分割し、各部分を別の１ドラムのシエルバイア ル(フィッシャーサイエンティフィック)に入れた。各樹脂のバッチに十の適当な 二進コード混合物(表１-５参照)をＤＣＭ(各溶液に１mＬ)中にＣ₇Ｃl₅，Ｃ₆ＣＬ₅ ，Ｃ₅Ｃl₅，Ｃ₄ＣＬ₅，Ｃ₃Ｃl₅リンカー-ジアゾケトン(調合１)の適当なチョイ ス(1.5mg)又は複数のチョイス(各1.5mg)を溶解することにより調合された。これ らの溶液を適当な合成容器に加え、樹脂を30分かきまぜた。 ロジウムインフルオロアセテートのダイマー(ＤＣＭ中１mＬの１mg／mＬ溶液) を各容器に入れ、樹脂を室温で４時間かきまぜた。次に上澄液を樹脂から移した 。樹脂を洗滌し、(ＤＣＭ２×３mＬ)，洗滌物をパスツールピペットにより取り 出した。次に樹脂を適当な二進コード混合物の溶液で再度処理し、30分かきまぜ 、ロジウムトリフルオロアセテートのダイマーを加えた。同量の触媒とジアゾケ ト ン混合物を第連結工程同様に第２連結工程で用いた。次に樹脂のバッチを16時間 かきまぜた。次に樹脂を小さなメリフィールド結合容器に移し、洗滌した(ＤＣ Ｍ６×15mＬ)。 ｂ）脱プロテクション 各樹脂からのバッチをＤＣＭ(４mＬ：４mＬ)中のＴＦＡの溶液で処理した。樹 脂を１時間かきまぜてから、ろ過し、ＤＣＭ(２×15mＬ)で洗滌した。次に樹脂 をＤＣＭ(４mＬ：４mＬ)中のピペリジン溶液で処理し、15分かきまぜた。この処 理をもう一度くり返した。各ビードのバッチをメタノール(２×15mＬ)とＤＣＭ( ４×15mＬ)で洗滌した。フラスコ１-４はＴＨＦ(３×15mＬ)で洗滌した。 ｃ）ヘテロアリール化反応 フラスコ１-４中の樹脂をＴＨＦ(６mＬ)中に懸濁させた。次にフラスコ１-３ をＤＢＵ(190mＬ,Ｃa，40等価)で、次に適当なヘテロアリルクロリド(Ｃa，20等 価)で処理した。フラスコ１と２を55°で16時間加熱した。フラスコ３を環流で1 6時間加熱した。フラスコ４をトリエチラミン(700μＬ)と適当なヘテロアリール クロリド(Ｃa，20等価)で処理した。樹脂を室温で16時間振動させた。次に各樹 脂のバッチをＴＨＦ(２×15mＬ)で洗滌し、vacuo内で乾かした。 ｄ）還元的アルキル化 フラスコ５-10内の樹脂をＤＭＦ(８mＬ)中に懸濁させ、適当なアルデヒド(Ｃa ，67等価)を加えた。酢酸(160μＬ)を各フラスコに加え、更にソジウムシアノボ ロヒドリド(Ｃa，67等価)を加えた。フラスコ５,６，７，９,10を室温で16時間 振動させた。フラスコ８を55°に16時間加熱した。各樹脂のバッチをろ過し、Ｄ ＭF(３×15mＬ)で洗滌した。各還元的アルキル化反応を同じ条件でくり返した。 樹脂のバッチをＤＭＦ(２×15mＬ),メタノール(３×15mＬ)及びＤＣＭ(３×15m Ｌ)で洗滌した。次に樹脂を混合し、ＤＣＭ(２×20mＬ)で洗滌し、vacuo内で乾 かした。 ライブラリーのこの部分は更なる作業を経なかった。工程４ ａ）工程４のエンコーディング 工程３(C)からの結合した樹脂に、工程２(B)からの７つのフラスコの各からの 樹脂45mgを加え、樹脂を、ＤＣＭ(３×50mＬ)で洗滌し、全体的に混合した。こ の混合物から三つのの800mgの樹脂部分が計量され、これらを別々の三つのメリ フィールド合成容器に入れ、ＤＣＭ(10mＬ)中に懸濁させた。各樹脂のバッチに 三つの適当な二進コード混合物(表１-４参照)をＤＣＭ(各溶液１mＬ)中にＣ₆Ｃl₁₃ ，Ｃ₅ＣＬ₁₃，リンカー-ジアゾケトン(調合１)の適当なチョイス(24mg)又は複 数のチョイス(各24mg)を溶解することにより調合した。これらの溶液を適当な合 成容器に加え、樹脂を30分かきまぜた。 ロジウムインフルオロアセテートのダイマー(ＤＣＭ中１mＬの１mg／mＬ溶液) を各容器に加え、樹脂を４時間室温でかきまぜた。次に各樹脂をろ過し、ＤＣＭ (２×20mＬ)で洗滌し、各をＤＣＭ(10mL)中に懸濁させ、上記の適当な二進エン コーディング混合物で再度処理した。樹脂を再たび30分かきまぜ、次にロジウム トリフルオロアセテートのダイマーを加えた。等量の触媒とジアゾケトンの混合 物を第１工程同様に第２結合工程に使った。樹脂を14時間かきまぜた。次に各樹 脂のバッチをＤＣＭ(３×20mＬ)で洗滌し、ろ過した。 ｂ）カルボニル反応(Ｒ⁶とＲ⁷の追加) フラスコ１の樹脂をＤＣＭ(６mＬ)に再懸濁化し、１，２-エタンジチオール( １mＬ)と三フッ化ホウ素エーテレート(１mＬ)を加えた。フラスコを室温で６時 間振動させた。次に樹脂をＤＣＭ(20mＬ)で洗滌し、ＤＣＭ(６mＬ)中に懸濁させ 、エタンジチオール(１mＬ)とフッ化ホウ素エーテレイト(１mＬ)で再度処理した 。樹脂を室温で14時間かきまぜた。次に樹脂をろ過し、ＤＣＭ(５×20mL)で洗滌 した。 フラスコ２内の樹脂をメタノール(５mＬ)中で懸濁させ、ソジウムボロヒドッ ト(200mg)を注意深く加えた。フラスコに開口をつけて、１時間やさしく振動で きるようにした。樹脂をろ過し、メタノール中に再懸濁させ、還元処理を１時間 毎に合計５回、各回とも200mgのソジウムボロヒドットを用いてくり返した。最 終サイクル後にメタノール(３×20mＬ)とＤＣＭ(３×20mＬ)で樹脂を洗滌した。 フラスコ３の樹脂は更には反応されなかった。 三つのフラスコからの樹脂を結合し、ＤＣＭ(５×50mＬ)で洗滌し、次にvacuo で乾かした。樹脂の一部(500mg)をＤＣＭ(５mＬ)とＴＦＡ(５mＬ)中に懸濁させ 、２時間振動させた。次に樹脂をＤＣＭ(10mＬ)中のトリエチラミン10％溶液で 再度処理し、ＤＣＭ(５×20mＬ)で洗滌した。次に樹脂をvacuoで乾燥させた。 ｄ）デコーディング処理 ビードを２μＬのアセトニトリルを備えた1.3mm外径のパイレックス毛細管に 入れた。セリウムアンモニウム硝酸エステル溶液(２μＬの0.1M水溶液)とヘクサ ン(３μＬ)を加え、二相混合物をしばらく遠心分離させた。管を密閉し、35℃で １６時間放置してから開いた。有機層をスポイトで取出し、１μＬのＮ，Ｏ-ビ ス(トリメチルシリ)アセトミドと混合した。シレーテッドタグ溶液(１μＬ)を電 子捕獲(ＥＣ)を備えたＧＣで分折される。 ＧＣ分析はヒュウレットパッカード5980とガスリロマトグラフとで実行された 。５mにカラム注入する際、25mに接続した0.32mmの保持ギャップ、0.2mmのクロ スリンクした５％のフェニルメチルシリコンカラムを使用した。温度プログラム は１分間200℃に設定され、200-320℃から15Ｃ／minの速度で上昇するようにし た。圧力プログラムは１分間は20psiに、次に全10分の運転時間で２psi／minで 、40psiまで増加するように設定された。ＥＣ検出器は400℃に保たれ、補助ガス は35psiに設定された。 実施例 ２ ８７．９０６混合物ライブラリイ 工程１ ａ）(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷の添加 250mＬ合成容器に調合５からの脱プロテクトした改変ＴentaＧel樹脂(アミン サイトの8.0g,略4.5mmol)を入れた。ＨＯＢt(1.81g,1.34mmol)を加え、更にＮ− Ｂoc−ｐ−メトキシジルアミノ酸(表２−１，化合物４)(5.60g,13.4mmol)とＤＭ Ｆ(150mＬ)を加えた。混合物を室温で10分間振動させ、ＤＩＣ(21mＬ,13.4mmol) を加えた。混合物を室温で16時間振動させ、次にメタノールとＤＣＭ(各４Ｘ)及 びＥtＯＡc(２Ｘ)とで交互に洗浄した。規準のカイザーニンヒドリン試験は結合 反応が完全であることを示した。 六つの分離した容器で、同様の結合を表２−１にあげた六つの他のＢocプロテ クトしたアミノ酸で行った。全ての結合反応を満足すべきカイザーニンヒドリン 試験が得られるまで(全ての場合１回か２回の結合)くり返された。 ｂ）工程１のエンコーディング 別の250mＬ合成容器にある間、工程１からの樹脂バッチナンバー４，５，６， ７をＥtＯＡc(100mＬ)中に懸濁させた。四つの容器の各にＣl₅Ｃ₇のリンカー− ジアゾケトン(0.56g)を入れ、混合物を１時間かきまぜた。次に四つの各にロジ ウムトリフルオロアセテートのダイマー(ＤＣＭ中６mＬの１mg／mＬ溶液)を加え 、樹脂を15時間かきまぜた。次に樹脂をＤＣＭ(４Ｘ)とＥtＯＡc(２Ｘ)で洗浄し た。 一方、Ｃl₅Ｃ₈−リンカー−ジアゾケトンを樹脂バッチナンバー２，３，６， ７に当て、Ｃl₅Ｃ₁₁−リンカー−ジアゾケトンを樹脂バッチ１，３，５，７に当 てた。各標識分子の取付けは別個に、上に概略示したＣ₁₅Ｃ₇−リンカー−ジ アゾケトンと同様になされた。エンコード樹脂の７つのバッチは全て２Ｌエルレ ンマイヤー・フラスコ中にＴＨＦ(１Ｌ)と共に結合され、ガラス棒でやさしくか き回し、かきまぜながら全体を混合した。次に樹脂をろ過と真空乾燥で元に戻し た。 工程２；Ｒ²の添加 ａ）脱プロテクション 250mＬ合成容器に工程1からの混合し、エンコードした樹脂（９g）をＤＣＭ( 樹脂を懸濁するのにちょうどの)と共に入れた。ＴＨＦ(ＤＣＭ中75Ｌの30％溶液 )を加え、樹脂を3.5時間かきまぜた。次に樹脂をＤＣＭ(２Ｘ)で洗浄し、ＤＣＭ (各２×20min)中の１０％トリエチラミンで処理し、ＤＣＭ(４Ｘ)で洗浄した。 ｂ）結合 工程２(a)からの脱プロテクトした樹脂(９g)をＤＭＦ(７mＬ)中に懸濁させた 。ＨＯＢt(2.04g,15mmlo)を加え、アセトフェノン酸(表２−２，合成物３)(3.36 g,15mmol)を更に加え、混合物を15分かきまぜた。ＤＩＣ(21.3mＬ,15mmol)を加 え、混合物を21時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメタノール(各５Ｘ)及びＥtＯ Ａc(４Ｘ)の交互で洗浄した。 五つの離れた容器中で表２−２にあげた五つの他のアセトフェノン酸で同様の 結合を行った。 ｃ）工程２のエンコーディング 工程２のからの六つの樹脂のバッチを工程１のエンコーディングのため上記し たものと同様な方法で二進コード化した。 エンコードした樹脂の六つのバッチを２Ｌエルレンマイヤー・フラスコ中ＴＨ Ｆ(１Ｌ)と共に結合し、ガラス棒でやさしくかき回し、かきまぜて全体を混合し た。樹脂はろ過と真空乾燥により元に戻した。工程３ Ｒ⁴Ｒ⁵の添加 ａ）シクロ凝縮反応 工程２からの混合樹脂を14.4g(Ｃa，8.1mmol)の三つのバッチと1.5g(Ｃa，0.8 4mmol)の７つの別のバッチに分割した。14.4gのバッチを250mＬの丸底フラスコ に入れ、1.5gのバッチを25mＬの丸底フラスコに入れた。樹脂の一部をメタノー ル(14.4g樹脂で三つのフラスコに150mＬ，1.5gの樹脂で７つのフラスコに15mＬ) 中に懸濁させ、ピロリドリン(14.4gの樹脂でフラスコ中10.1mＬ，121mmol,Ｃa， 15当量、1.5gの樹脂でフラスコ中1.0mＬ．12.6mmol,Ｃa，15当量)を各フラスコ に加えた。次に反応容器を15分そのままにし、反応物の混合を可能にした。次に 適当なケトン(５乃至10等価)を容器に加えた。表２−３からの三つのＢocプロテ クトしたアミノケトンを14.4gの樹脂を含むフラスコに、表２−４からの他のケ トンを1.5gの樹脂を含むフラスコに加えた。混合物を75℃で16時間加熱した。次 にフラスコを室温に冷却し、各樹脂のバッチを適当な大きさの別の合成容器に注 ぎ、ＤＣＭ，ＤＭＦ及びメタノール(交互：各５Ｘ)で全体的に洗滌した。 ｂ）工程３のエンコーディング 工程３(a)からの各の樹脂のバッチをエンコーディング工程１に記載したのと 同様な方法で二進コード化した。 ｃ）混合と分割 エンコードした樹脂の７つの1.5gのバッチを500mＬエルレンマイヤー・フラス コ中でＴＨＦ(250mＬ)と共に結合し、ガラス棒でそっとかき回し、かきまぜて全 体的に混合させた。次に樹脂をろ過と真空乾燥により元に戻した。この結合した 樹脂を三つの14.4gの樹脂バッチから離しておき、工程４の反応条件にさらすこ となく、むしろ三つの0.2g部分と７つの1.4g部分に分割し、工程５と改変工程５ に用いるよう保存する。エンコードした樹脂の三つの14.4gのバッチをＴＨＦ(１ Ｌ)と共にエルレンマイヤー・フラスコ内で結合し、ガラス棒でそっとかき回し 、かきまぜて全体的に混合させた。次に樹脂をろ過と真空乾燥により元に戻し、 工程４に用いた。 工程４ ａ）脱プロテクション ７つの250mＬ合成容器の各に工程３からの三つの結合した14.4gのバッチから エンコードした樹脂(６g)をＤＣＭ(樹脂を懸濁させるのに充分な量)と共に入れ た。ＴＦＡ(ＤＣＭ中mＬの30％溶液)を加え、樹脂を3.5時間かきまぜた。次に樹 脂をＤＣＭ(２Ｘ)で洗滌し、ＤＣＭ(各２×20)中の10％トリエチラミンで処理し 、更にＤＣＭ(４Ｘ)で洗滌した。 ｂ）ニトロゲン加工 工程４(a)からの脱プロテクトした樹脂(６g,Ｃa，3.4mmol)を含む七つの合成 容器の最初のものに、ＤＣＭ(150mＬ)とトリエチルアミン(15当量)を入れた。フ ェニルスルホニクロリド(Ｃa，10等量)を加え、樹脂を４時間かきまぜた。樹脂 をＤＣＭとメタノール(５Ｘ)の交互と、次にＥtＯＡc(２Ｘ)とで洗滌した。 工程(４ａ)からの脱プロテクトした樹脂(６g,Ｃa，3.4mmol)を含む七つの250m Ｌ合成容器の２番目にＤＣＭ(150mＬ)とトリエチルアミン(15当量)を入れた。ブ チルクロリド(Ｃa，10等量)を加え、樹脂を４時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭと メタノール(各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)とで洗滌した。 工程(４ａ)からの脱プロテクトした樹脂(６g,Ｃa，3.4mmol)を含む７つの250m Ｌ結合容器の３番目にＤＭＦ(150mＬ)とＨＯＢt(Ｃa，15等量)を入れた。４-カ ルボキシベンゼンスルホンアミド(Ｃa，10等量)を加え、樹脂を30分かきまわし た。ＤＩＣ(Ｃa，10等量)を加え、樹脂を４時間かきまわした。樹脂をＤＣＭと メタノール(各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 工程４(a)からの脱プロテクトした樹脂(６g,Ｃa，3.4mmol)を含む七つの250m Ｌ結合容器の四番目にＤＭＦ(150mＬ)と酢酸(３mＬ)を入れた。ブチルアルデヒ ド(Ｃa，50等量)を加え、樹脂を16時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメタノール( 各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 工程４(a)からの脱プロテクトした樹脂(６g,Ｃa，3.4mmol)を含む七つの250m Ｌ合成容器の五番目にＤＭＦ(150mＬ)と酢酸(３mＬ)を入れた。ブチルアルデヒ ド(Ｃa，50等量)を加え、樹脂を30時間かきまぜた。ソジウムシアノドリド(Ｃa ，15等量)を加え、樹脂を16時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメタノール(各５Ｘ )の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 工程４(a)からの脱プロテクトした樹脂(６g,Ｃa，3.4mmol)を含む７つの250m Ｌ結合容器の６番目から樹脂を250mＬの丸底フラスコに移した。ＴＨＦ(150mＬ) を加え、更にＤＢＵ(Ｃa，40等量)を加えた。２-クロロピリミジン(Ｃa，20等量 )を加えた。混合物を55℃に16時間加熱した。樹脂を250mＬ合成容器に移し戻し 、ＤＣＭとメタノール(各５Ｘ)の交互と、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 工程４(a)からの脱プロテクトした樹脂(６g,Ｃa，3.4mmol)を含む７つの250m Ｌ結合容器の７番目に無水エタノール(150mＬ)を入れた。メチルイソシアン酸塩 (Ｃa，15等量)を加え、樹脂を12時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメタノール(各 ５Ｘ)の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 ｃ）工程４のエンコーディング 工程４(a)からの７つの樹脂バッチの各を工程１のエンコーディングに記載し たものと同様な方法で二進コード化した。 コード化した樹脂の七つのバッチをＴＨＬ(１Ｌ)ともに２Ｌエルレンマイヤー ・フラスコ内で結合し、ガラス棒でそっとかき回し、かきまぜて全体的に混合さ せた。次に樹脂をろ過と真空乾燥により元に戻した。次に樹脂を各0.7gの三つの バッチと各5.7gの７つのバッチに分割した。７つの5.7gのバッチを工程５に付し た。 三つの0.7gのバッチを改変工程５に付した。工程５ ａ）エンコーディング 工程４(c)からの７つの5.7gの樹脂バッチと工程３(b)からの七つの1.4gのバッ チの各を工程１のエンコーディングに記載したものと同様な方法で二進コード化 した。 ｂ）還元的アミノ化 工程５(a)からの７つのコード化した5.7gの樹脂バッチを200mＬの丸底フラス コに入れた。工程３(c)からの７つのコード化した1.4gのバッチを500mＬの丸底 フラスコに入れた。14のフラスコの各にメタノール(200mＬフラスコに60mＬ,50m Ｌフラスコに15mＬ)中10％氷酢酸溶液を加えた。表２-６からの適当なアミン(Ｃ a，40等量)を加え、更にソジウムシアノボロヒドリド(Ｃa，40等量)を加えた。 コンデンサーを取りつけ、混合物を75℃に48時間加熱した。樹脂をＤＣＭ及びメ タノール(各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。改変工程５ ａ）チオケタール化 工程４(c)からの三つの0.7gの樹脂バッチの一つと工程３(c)からの0.2gの樹脂 バッチの一つを二つの離れた30mＬ合成容器に入れた。その各にＤＣＭ(６mＬ)を 加え、更に１，２-エタンジチオール(１mＬ)とフッ化ホウ素エーテラート(１mＬ )を加えた。樹脂を室温で14時間かきまぜた。次に樹脂をろ過し、ＤＣＭとメタ ノール(各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 ｂ）還元 工程４(c)からの三つの0.7gの樹脂バッチの一つと工程３(c)からの0.2gの樹脂 バッチの一つを二つの離れた30mＬ合成容器に入れた。その各にＤＣＭ(６mＬ)と 固体水素化ホウ素ナトリウム(注意深く)を加えた。フラスコに口を開け、１時間 そっと振動するようにした。樹脂をろ過し、メタノール(６mＬ)中に懸濁させ、 還元処理を１時間間隔で全５回にわたり、各回200gの水素化ホウ素の一部を用い てくり返した。最終サイクル後、樹脂をＤＣＭとメタノール(各５Ｘ)の交互で、 次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 ｃ） 工程４(c)からの三つの0.7gの樹脂バッチの一つと工程３(c)からの0.2gの樹脂 バッチの一つを改変しないでおいた。工程６ ａ）混合 工程５(b)からのコード化した樹脂の７つのバッチを２Ｌエルレンマイヤー・ フラスコ内でＴＨＦ(１Ｌ)と共に結合した。工程５(b)からのコード化した樹脂 の1.4gの７つのバッチを500mＬエルレンマイヤー・フラスコ内で結合した。樹脂 の各バッチをガラス棒でそっとかき回し、かきまぜて全体的に混合した。各フラ スコからの樹脂をろ過と真空乾燥により元に戻し、分離した状態にした。 ｂ）ニトロゲン加工 工程６(a)中の結合した5.7gのバッチからの混合し且つ乾燥した樹脂(全体Ｃa ，32.5g)を10の3.2gのバッチに分割し、100mＬ合成容器に入れた。工程６(a)に おける結合した1.4gのバッチからの混合し且つ乾燥した樹脂(全体Ｃa，9.8g)を1 0の0.98gのバッチに分割し、30mＬ合成容器に入れた。これらの容器は各セット 一つの容器と一つのmＬ容器を有する二つの一組のセットに分けられた。各セッ トの両構成要素とも以下略述するように同じ反応条件にさらされる。 第１セットの容器に、ＤＭＦ(大きいほうの容器に６０mＬ，小さいほうの容器 に 15mＬ)中の溶液としてＮ,Ｎ'-bis Ｂoc-(Ｌ)-リジン(Ｃa，10等価)を入れた。Ｈ ＯＢt(Ｃa，15等量)を加え、次に樹脂を15分かきまぜた。ＤＩＣ(Ｃa，10等価) を加え、樹脂を４時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭ(２Ｘ)で洗滌し、次にＴＦＡ( ＤＣＭ中30％溶液)で処理した(1.5時間)。次に樹脂をＤＣＭ(２Ｘ)で洗滌し、Ｄ ＭＦ中10％のトリエチラミンで処理した(２Ｘ各30分)。樹脂をＤＣＭとメタノー ル(各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 第２セットの容器に、ＤＭＦ(大きいほうの容器に60mＬ、小さいほうの容器に 15mＬ)中の溶液としてＮ,α-Fmoc Ｎ-ω-Pmc-(Ｌ)-アルニジン(Ｃa，10等価)を 入れた。ＨＯＢt(Ｃa，15等価)を加え、次に樹脂を15分かきまぜた。ＤＩＣ(Ｃa ，10等量)を加え、樹脂を４時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭ(２Ｘ)で洗滌し、次 にＴＦＡ(ＤＣＭ中50％溶液)で処理した(1.5時間)。次に樹脂をＤＣＭ(２Ｘ)で 洗滌し、ＤＭＦ中50％ピペリジンで処理した(２Ｘ各30分)。樹脂をＤＣＭとメタ ノール(各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 第３セットの容器に、ＤＭＦ(大きいほうの容器に60mＬ、小さいほうの容器に 15mＬ)を入れた。Ｎ,Ｎ'di-n-プロピル-Ｎ’-シアノ-エチルチオホルムアミジン (Ｃa，15等量)を加え、次にトリエチラミン(Ｃa，20等量)を加え、樹脂を12時間 かきまぜた。樹脂をＤＣＭとＭｅＯＨ(各５Ｘ)交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗 滌した。 第４セットの容器に、無水エタノール(大きいほうの容器に60mＬ，小さいほう の容器に15mＬ)を入れた。イソシアン酸メチル(Ｃa，15等量)を加え、樹脂を12 時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメタノール(各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯＡc( ２Ｘ)で洗滌した。 第５セットの容器に、無水エタノール(大きいほうの容器に60mＬ、小さいほう の容器に15mＬ)を入れた。イソチオシアン酸メチル(Ｃa，15等量)を加え、樹脂 を12時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメタノール(各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯ Ａc(２Ｘ)で洗滌した。 第６セットの容器に、無水エタノール(大きいほうの容器に60mＬ、小さいほう の容器に15mＬ)を入れた。イソシアン酸フェニール(Ｃa，15等量)を加え、樹脂 を12時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメタノール(各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯ Ａc(２Ｘ)で洗滌した。 第７セットの容器に、無水エタノール(大きいほうの容器に60mＬ，小さいほう の容器に15mＬ)を入れた。イソチオシアン酸フェニール(Ｃa，15等量)を加え、 樹脂を12時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメタノール(各５Ｘ)の交互で、次にＥ tＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 第８セットの容器に、ＤＣＭ(大きいほうの容器に60mＬ，小さいほうの容器に 15mＬ)と２，６-ジメチルビリジン(Ｃa，20等価)を入れた。イソプロピルクロロ ホルメート(Ｃa，15等量)を加え、樹脂を４時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメ タノール(各５Ｘ)の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 第９セットの容器に、ＤＣＭ(大きいほうの容器に60mＬ，小さいほうの容器に 15mＬ)とトリエチラミン(15等量)を入れた。イソブチルクロリド(Ｃa，10等量） を加え、樹脂を４時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメタノール(各５Ｘ)の交互で 、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。 第１０セットの容器に、ＤＣＭ(大きいほうの容器に60mL、小さいほうの容器 に15mＬ)とトリエチラミン(15当量)を入れた。メタンスルホニルクロリド(Ｃa， 10等量)を加え、樹脂を４時間かきまぜた。樹脂をＤＣＭとメタノール(各５Ｘ) の交互で、次にＥtＯＡc(２Ｘ)で洗滌した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ｃ０７Ｄ 311/96 9360−4Ｃ Ｃ０７Ｄ 311/96 405/12 9159−4Ｃ 405/12 407/12 9159−4Ｃ 407/12 417/12 9053−4Ｃ 417/12 491/107 9271−4Ｃ 491/107 493/10 9053−4Ｃ 493/10 Ｃ 495/10 9053−4Ｃ 495/10 497/10 9053−4Ｃ 497/10 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，Ｂ Ｇ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ， ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，Ｍ Ｇ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ， ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 ディラード，ローレンス，ダブリュー. アメリカ合衆国，08525 ニュージャージ ー州，ホープウェル，イースト ブロード ストリート 23， サード フロア (72)発明者 バーボウム，ジョナサン，ジェー アメリカ合衆国，07090 ニュージャージ ー州，ウェストフィールド，リンデン ア ベニュー 415 (72)発明者 ゼン，ウェングァン アメリカ合衆国，08648 ニュージャージ ー州，ローレンスビル，トラファルガー コート 50 (72)発明者 リー，グー アメリカ合衆国，08823 ニュージャージ ー州，フランクリン パーク，マルコ ポ ーロ コート 27

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 Ｔ'-Ｌ- は識別体残分であり、 -Ｌ'-II' はリガンド／リンカー残分であり、 ｑは３〜30である。 化学式 の化合物。 ２．Ｔ'-Ｌ'- が化学式 のものであり、ここに、 Ａrがペンタクロロフェニルの時 ｎ＝３〜12であり、 Ａrが２，４，６−トリクロロフェニルの時 ｎ＝３〜６であり、 ｑは４〜12であり、 -Ｌ'- は であり、ここに図示の左手ボンドは固体支持体に結合する点であり、右手ボンド はリガンドに結合する点であり、又、Ｂは Ｏ 又は Ｎ（ＣＨ₂）_1-6Ｒ¹⁷、但 し(b)においてはＢが Ｎ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷の時リガンドはカルボニル基を介して 結合される、請求項１に記載した化合物。 ３．-Ｃ(Ｏ)-Ｌ'-II'が 又は である、請求項１に記載した化合物。 ４．Ｒ¹は、ＯＨ、Ｏ(ＣＨ₂)_1-2ＯＨ、ＯＣＨ₂ＣＯ₂Ｈ、ＣＯ₂Ｈ、Ｏ-Ｚ-Ｃ(Ｏ) ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷、又はＯＣＨ₂-４-Ｐhe-Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷であり、 Ｒ²は、Ｈ又は低級アルキルであり、 Ｒ³は、Ｈ、アルキル、アリール、又はアリールアルキルであり、 Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれ独立にＨ、低級アルキル、又は置換基が１〜３アルコキ シ、アリール、置換アリール、カルボアルコキシ、カルボキシアミド、又はジ低 級アルキルアミドである置換低級アルキルであるか、或いはＲ⁴とＲ⁵とを一緒に して -(ＣＨ₂)_n-、-(ＣＨ₂)₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₂-、-ＣＨ₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₃-、-(ＣＨ₂)₂ -ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、-ＣＨ₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)_m-、-(ＣＨ₂)₂ＣＨ(ＮＨＲ⁸)(ＣＨ₂)₂ -、-(ＣＨ₂)₂-Ｓ(Ｏ)_0-2-(ＣＨ₂)₂-、又は はＨで他方はＨ、ＯＨ、又は Ｎ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁴Ｒ¹⁵であるか或いはＲ⁶とＲ⁷と を一緒にして であり、 Ｒ⁸は、Ｈ、ＣＯＯＲ⁹、ＣＯＮＨＲ¹⁰、ＣＳＮＨＲ¹¹、ＣＯＲ¹²、ＳＯ₂Ｒ¹³、 低級アルキル、アリール低級アルキル、ヘテロアリール、又はヘテロアリール低 級アルキルで、ここに、アリールは、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロ、Ｃ Ｎ、ＮＨ₂、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ₂、カルボアルコキシ、及びモノ又はジ低級アル キルアミノから選定される１〜３置換基によって随意に置換され、ヘテロアリー ルは、Ｏ、Ｎ、及びＳから選定される１乃至３個の異原子とハロ、アミノ、シア ノ、低級アルキル、カルボアルコキシ、ＣＯＮＨ₂、及びＳ-低級アルキルから選 定される０〜３置換基とを包含する５乃至１０個のメンバーの単環又は２重環複 素環式芳香族化合物環状組織であり、 Ｒ⁹は、低級アルキルか、アリールか、アリール低級アルキルか、ヘテロアリー ルか、アルキル、アルケニル、アルコキシ、メチレンジオキシ、及びハロから選 定された１〜３置換基によって置換されたアリールか、或いは５乃至６メンバー の複素環式環かであり、ここに異原子はＯ又はＮであり、そしてヘテロアリール はＯ、Ｎ、及びＳから選定される１乃至２異原子と低級アルキル、ジアルキルア ミノ、低級アルコキシ、及びハロから選定される０〜２置換基とを包含する５乃 至６メンバーの複素環式芳香族化合物環であり、 Ｒ¹⁰及びＲ¹¹は、それぞれ独立に低級アルキル、アリール、アリール低級アルキ ル、又は低級アルキル、ハロ、アルコキシ、及びハロアルキルから選定される１ 〜３置換基によって置換されたアリールであり、 Ｒ¹²は、低級アルキルか、アリールか、ヘテロアリールか、アリール低級アルキ ルか、ヘテロアリール低級アルキルか、Ｏ、Ｓ、及びＮから選定された１〜２異 原子を包含する５乃至６メンバーの複素環式環か、Ｏ、Ｓ、及びＮ低級アルキル から選定される１〜２異原子を包含する５乃至６メンバーの複素環式環か、或い は低級アルキル、アルコキシ、ハロ、スルファモイル、低級アルキルスルファモ イル、シアノ、及びフェニルから選定される１〜３置換基で置換されたアリール かであり、 Ｒ¹³は、低級アルキルか、アリールか、或いは低級アルキル、アルコキシ、ハロ 、ＣＮ、及びハロアルキルから選定される１〜３置換基で置換されたアリールで あり、 Ｒ¹⁴は、Ｈか、１〜３個のアルコキシ、Ｓ-低級アルキル、スルファモイル、ハ ロ、アルキルスルホンアミド、又はアリールスルホンアミドで置換されたアルキ ルか、アルケニルか、アルキニルか、アリールか、置換アリールか、ヘテロアリ ールか、置換ヘテロアリールか、ヘテロシクロアルキルか、-ＣＨ₂ＮＲ¹⁶Ｃ(Ｏ) Ｒ¹⁶か、 -Ｃ(Ｏ)ＮＲ¹⁶Ｒ¹⁶か、-ＣＨ₂ＯＣ(Ｏ)Ｒ¹⁶か、或いは -ＣＨ₂ＳＣ(Ｏ)Ｒ¹⁶か であり、 Ｒ¹⁵は、Ｈ、アルキル、-Ｃ(Ｏ)Ｘ、-Ｃ(Ｓ)Ｘ、或いは -Ｃ(ＮＣＮ)ＮＲ³Ｒ³ であり、 Ｒ¹⁶は、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、或いは置換アリールであ り、 Ｒ¹⁷は、Ｈか、１〜３個のアルコキシ、Ｓ-低級アルキル、スルファモイル、ハ ロ、アルキルスルホンアミド、又はアリールスルホンアミドで置換されたアルキ ルか、アルケニルか、アルキニルか、アリールか、置換アリールか、ヘテロアリ ールか、置換ヘテロアリールか、ヘテロシクロアルキルか、 -ＣＨ₂ＮＲ¹⁶Ｃ(Ｏ)Ｒ¹⁶か、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ¹⁶Ｒ¹⁶か、-ＣＨ₂ＯＣ(Ｏ)Ｒ¹⁶か、或 いは -ＣＨ₂ＳＣ(Ｏ)Ｒ¹⁶かであり、 Ｘは、アルキル、アリール、アリールアルキル、Ｏ-低級アルキル、或いはＮＲ³ Ｒ³であり、 Ｚは、１〜３低級アルキルで随意置換された -(ＣＨ₂)_1-6- か、ＣＨＲ²か、 Ｐheがハロゲン、低級アルキル、又はアルコキシで随意にモノ置換されたＰhe- ＣＨ₂- か、或いはヘテロアリレン-(ＣＨ₂)- かであり、 ｍは、２又は３であり、 ｎは、４〜９である、 化学式 の化合物、若しくは該化合物の製薬上受容可能な塩。 ５．Ｒ¹²がスルファモイルフェニルである、請求項３に記載した化合物。 ６．Ｒ¹²が p-スルファモイルフェニルである、請求項３に記載した化合物。 ７． Ｒ¹は、ＯＨ、ＯＣＨ₂Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁴、或いはＯＣＨ₂-４-Ｐh e-Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁴であり、 Ｒ²は、Ｈ、或いは低級アルキルであり、 Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれ低級アルキルであるか、或いはＲ⁴とＲ⁵とを一緒にして -(ＣＨ₂)₅-、-(ＣＨ₂)₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂ -ＣＨ(ＮＨＲ⁸)(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-Ｓ-(ＣＨ₂)₂-、 又は Ｒ⁶／Ｒ⁷は、Ｈ／ＯＨ、＝Ｏ、或いは -Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｓ- であり、 Ｒ⁸は、Ｈ，ＣＯＯＲ⁹、ＣＯＮＨＲ¹⁰、ＣＳＮＨＲ¹¹、ＣＯＲ¹²、ＳＯ₂Ｒ¹³、 低級アルキル、アリール低級アルキル、ヘテロアリールで、ここに環構成メンバ ーには１〜３個のＮ原子が含まれ、置換基はハロ又はアミノ、ヘテロアリールが ６個のメンバーのもので異原子がＮであるヘテロアリール低級アルキル、或いは 低級アルキル、アルコキシ、及びハロから選定される１置換基で置換されたアリ ール低級アルキルであり、 Ｒ⁹は、低級アルキル、アリール低級アルキル、アリール、テトラヒドロフラニ ル、テロラヒドロピラニル、或いは低級アルキル、アルケニル、アルコキシ、メ チレンジオキシ、及びハロから選定される１〜２置換基で置換されたアリールで あり、 Ｒ¹⁰及びＲ¹¹はそれぞれ独立にアリール、アリール低級アルキル、或いは低級ア ルキル、ハロ、アルコキシ、トリルオルメチル、及びペンタフルオルエチルから 選定される１置換基で置換されたアリールであり、 Ｒ¹²は、低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、異原子がＮであるヘ テロアリールに低級アルキル、Ｓ及びＮ低級アルキルから選定される１〜２個の 異原子を包含する５乃至６メンバーの複素環状環、或いは低級アルキル、アルコ キシ、ハロ、スルファモイル、シアノ、又はフェニルから選定される１置換基に よって置換されたアリールであり、 Ｒ¹³は、低級アルキル、アリール、或いは低級アルキル、アルコキシ、及びハロ から選定される１置換基で置換されたアリールである、 請求項４に記載した化合物、若しくは該化合物の製薬上受容可能な塩。 ８．Ｒ¹は、６- 又は ７-ＯＨであり、 Ｒ²は、Ｈ或いは低級アルキルであり、 Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれメチルであるか、或いはＲ⁴とＲ⁵とを一緒にして -(Ｃ Ｈ₂)₅-、-(ＣＨ₂)₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、-ＣＨ₂-ＮＲ⁸- (ＣＨ₂)₃-、-ＣＨ₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、又は-(ＣＨ₂)₂-ＣＨ(ＮＨＲ⁸)(ＣＨ₂)₂- であり、 Ｒ⁶とＲ⁷との一方がＨで他方がＯＨであるか、或いはＲ⁶とＲ⁷とを一緒にして＝ Ｏ又は -Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｓ- であり、 Ｒ⁸は、Ｈ、ＣＯＯＲ⁹、ＣＯＮＨＲ¹⁰、ＣＳＮＨＲ¹¹、ＣＯＲ¹²、ＳＯ₂Ｒ¹³、 ベンジル、-ＣＨ₂-Ｐh-４-Ｆ、-ＣＨ₂-Ｐh-４-ＯＣＨ₃、-ＣＨ₂-４-Ｐy，n-ブチ ル、-ＣＨ₂-c-プロピル、 であり、 Ｒ⁹は、i-プロピル、フェニル、フェネチル、t-ブチル、 であり、 Ｒ¹⁰は、フェニル、p-クロロフェニル、或いは p-トリフルオルメチルフェニル であり、 Ｒ¹¹はフェニル、ベンジル、或いは １-ナフチルであり、 Ｒ¹²は、 であり、 Ｒ¹³は、１- 又は ２−ナフチル、フェニル、４-クロロフェニル、４-メチル フェニル、４-t-ブチルフェニル、n-ブチル、或いはi-プロピルである、化学式 が の請求項４に記載した化合物、若しくは該化合物の製薬上受容可能な塩。 ９．Ｒ¹は、Ｒ²がＨの時 ６- 又は ７-ＯＨであり、 Ｒ¹は、Ｒ²がＣＨ₃の時 ７-ＯＨであり、 Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれメチルであるか、或いはＲ⁴とＲ⁵とを一緒にして -(Ｃ Ｈ₂)₅-、-(ＣＨ₂)₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、-ＣＨ₂-ＮＲ⁸- (ＣＨ₂)₃-、-(ＣＨ₂)₂-ＮＲ₈-(ＣＨ₂)₂-、又は -(ＣＨ₂)₂-ＣＨ(ＮＨＲ⁸)(ＣＨ₂ )₂- であり、 Ｒ⁶とＲ⁷との一方はＨで他方はＯＨであるか、或いはＲ⁶とＲ⁷とを一緒にして ＝Ｏ又は -Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｓ- であり、 Ｒ⁸は、 である、化学式が、 の請求項４に記載した化合物。 １０．Ｒ¹は、Ｒ²がＨの時 ６- 又は ７-ＯＣＨ₂Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷ 、或いは６- 又は ７-ＯＣＨ₂-４-Ｐhe-Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ₁₇であり、 Ｒ¹は、Ｒ²がＣＨ₃の時 ７-ＯＣＨ₂Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷、或いは７-ＯＣ Ｈ₂-４-Ｐhe-Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷であり、 Ｒ⁴及びＲ⁵はそれぞれメチルであるか或いはＲ⁴とＲ⁵とを一緒にして-(ＣＨ₂)₅- 、-(ＣＨ₂)₂-Ｏ-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-ＮＲ⁸-(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-ＣＨ(ＮＨ Ｒ⁸)(ＣＨ₂)₂-、-(ＣＨ₂)₂-Ｓ-(ＣＨ₂)₂-、又は がＣＨ₂ＯＣＨ₃又は -(ＣＨ₂)₃Ｎ(Ｅt)₂であり、 Ｒ⁶とＲ⁷との一方はＨで他方はＯＨであるか、或いはＲ⁶とＲ⁷とを一緒にして＝ Ｏ又は -Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｓ- であるか、或いはＲ⁶とＲ⁷との一方はＨで他方はＡが メチル、２-メトキシエチル、２-フェニルエチル、４-メトキシベンジル、２テ トラヒドロフラニルメチル、２(３，４-ジメトキシフェニル)エチル、又は２， ２ジフェニルエチルで、ＢがＨ、-ＳＯ₂ＣＨ₃- であるＮＡＢであり、 Ｒ⁸は、Ｈ、ＣＯＮＨＣＨ₃、ＳＯ₃Ｐh、(ＣＨ₂)₃ＣＨ₃、ＣＯ(ＣＨ₂)₂ＣＨ₃、ベ ンジル、-Ｃ(Ｏ)-(４-Ｐhe)-ＳＯ₂ＮＨ₂、或いは であり、 Ｒ¹³は、Ｈ、-ＳＯ₂ＣＨ₃-、 であり、 (ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁴は、メチル、n-ブチル、３-メトキシ-n-プロピル、ＣＨ₂-c-プロ ピル、或いは -(ＣＨ₂)_1-3-フェニルであり、 (ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷は、メチル、２-メトキシエチル、２-フェニルエチル、４-メト キシベンジル、メチル-２-テトラヒドロフラニル、２(３，４-ジメトキシフェニ ル)エチル、或いは２，２-ジフェニルエチルである、 化学式が の請求項４に記載した化合物、若しくは該化合物の製薬上受容可能な塩。 １１．Ｒ¹は、６- 又は ７-ＯＨ、６- 又は ７-ＯＣＨ₂Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_{1 -6} Ｒ¹⁷、或いは６- 又は ７-ＯＣＨ₂-４-Ｐhe-Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ＣＨ₂)_1-6Ｒ¹⁷であ り、 Ｒ²は、Ｈ、或いはＣＨ₃であり、 Ｒ⁸は、-ＣＯ-Ｐh-p-ＳＯ₂ＮＨ₂であり、 Ｒ⁶とＲ⁷とは一緒にして＝Ｏ、或いは -ＳＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ- である、 化学式がIIb，IIc，及びIId，即ち の請求項４に記載した化合物。 １２．置換基が次表、即ち のものである、請求項11に記載した化合物。 １３．置換基が次表、即ち のものである、化学式が の請求項４に記載した化合物。 １４．置換基が次表、即ち のものである、化学式が の請求項４に記載した化合物。 １５．治療上効果のある量の請求項４に記載した化合物と製薬上受容可能な担体 とを包含する製薬組成。 １６．治療上効果のある量の請求項９に記載した化合物と製薬上受容可能な担体 とを包含する製薬組成。 １７．治療上効果のある量の請求項10に記載した化合物と製薬上受容可能な担体 とを包含する製薬組成。 １８．治療上効果のある量の請求項11に記載した化合物と製薬上受容可能な担体 とを包含する哺乳類体内でのカルボネート デヒドラターゼを抑制するための製 薬組成。 １９．効果のある量を請求項11に記載した化合物の哺乳類への投与を包含する該 哺乳類体内でのカルボネート デヒドラターゼ イソチーム抑制方法。 ２０．治療の必要に応じて効果のある量の請求項11に記載した化合物を哺乳類に 投与することを包含する哺乳類の緑内障の治療方法。 ２１．請求項１に記載した組合せライブラリーを合成することと、望みの特性を 有する化合物鑑定用の分析法で該ライブラリー内の化合物を試験することとを包 含する、望みの特性を有するリガンドの鑑定方法。 ２２．前記ライブラリー内化合物が-Ｃ(Ｏ)-Ｌ' -II'を化学式Ｉaのものとする ような化合物である、請求項２１に記載した方法。 ２３．更に鑑定されるリガンドの構造決定を包含する、請求項21に記載した方法 。 ２４．前記望みの特性がカルボネート デヒドラターゼ抑制である、請求項21に 記載した方法。 ２５．20〜300pモルの試験用化合物と0.03〜1.2μモルのカルボネート デヒド ラターゼの(全体量：25〜100μlの)水溶液と0.04〜1.6μモルのダンシルアミド との混合物を準備することと、該混合物を(望ましくは274nmの)紫外線照射する ことと、(望ましくは454nmの)放射紫外線量を決定することとを包含する、カル ボネート デヒドラターゼ抑制因子である化合物を鑑定する方法。 ２６．前記混合物全体量が約50μlであり、カルボネート デヒドラターゼ濃度 が0.3μモルであり、ダンシルアミド濃度が約0.6μモルであり、前記混合物が27 4nmの紫外線に照射され、放射紫外線が454nmである、請求項25に記載した方法。 ２７．中に添加リガンドと酵素による製品への転換中の光学的監視の可能な基質 を含有する第２層とを伴っている単一層固体支持体を包埋した酵素含有コロイド 状マトリックスである第１層に接触させることと、該リガンドを紫外線に露光し て溶離することと、該露光によって該第１層中に生成された抑制ゾーンを検出す ることを包含するローン分析法である酵素抑制因子化合物の鑑定方法。 ２８．前記第１層がウシのカルボネート デヒドラターゼ含有のアガロース マ トリックスであり、前記第２層がアガロースのフルオレセイン ジアセテート含 有層である、請求項27に記載した方法。 ２９．請求項１の組合せライブラリーを合成することと、該ライブラリー中のリ ガンドを固体支持体から解離することと、望みの特性を有する化合物を鑑定する 分析方法の中で該リガンドライブラリーを試験することとを包含する、望みの特 性を有するリガンドの鑑定方法。 ３０．更に鑑定されたリガンドの構造決定を包含する、請求項29に記載した方法 。 ３１．請求項１の組合せライブラリー構築のための固体支持体としてのジビニル ベンゼン交差結合のポリエチレングリコール接合ポリエチレン ビーズの使用。 ３２．リガンドが前記固体支持体から光分解によって解離されてなる、請求項31 に記載した方法。 ３３．ａ）トリフェニルホスフィン、トルエン、及びＤＥＡＤの存在下でアニル 又はメチル４-(ヒドロキシメチル)-3-ニトロベンゾアートを化学式 の化合物と反応させて、Ｒがアリル又はメチルを示す を生産するために混合物を室温で撹拌することと、 ｂ）Ｒがアリルの時 該化合物を塩化メチレン、テトラキストリフェニル ホスフィン パラジウム(Ｏ)、及びピロリジンと反応させて混合物を０℃で撹拌 するか、或いはＲがメチルの時 該化合物を希釈ＮaＯＨ及びＴＨＦと反応させ て混合物を０℃で撹拌するかすることと、との両方を包含する、 Ｒ²がＨ又は低級アルキルを示す化学式 の化合物を調合するプロセス。 Ｒ¹⁶は、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、或いは置換アリールであ り、 Ｒ¹⁷は、Ｈ、１〜３個のアルコキシ、Ｓ-低級アルキル、スルファモイル、ハロ 、アルキルスルホンアミド、又はアリールスルホンアミドで置換したアルキル、 アルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、 ヘテロシクロアルキル、-ＣＨ₂ＳＣ(Ｏ)Ｒ¹⁶、-ＣＨ₂ＮＲ¹⁶Ｃ(Ｏ)Ｒ¹⁶、-Ｃ(Ｏ )ＮＲ¹⁶Ｒ¹⁶、或いは -ＣＨ₂ＯＣ(Ｏ)Ｒ¹⁶であり、 Ｒは、Ｈ、或いはアルキルであり、 Ｙは、アリール、或いはヘテロアリールである、 化学式 の化合物。