JPH10500976A

JPH10500976A - 安定なフルオロカーボン逆エマルションおよび複エマルション

Info

Publication number: JPH10500976A
Application number: JP8500370A
Authority: JP
Inventors: リエス，ジャン，ゼ．; クラフ，マリー−ピエール
Original assignee: アライアンスファーマシューティカルコーポレイション
Priority date: 1994-06-09
Filing date: 1995-06-07
Publication date: 1998-01-27
Also published as: DE69511423T2; US5904933A; FR2720943B1; EP0788347A1; GR3031523T3; EP0788347B1; DE69511423D1; FR2720943A1; WO1995033447A1; DK0788347T3; ES2137524T3; ATE183079T1; AU2788795A; AU706236B2; CA2191436A1

Abstract

(57)【要約】フルオロカーボン逆エマルションを含む安定なフルオロカーボン中水型逆エマルションと水中フルオロカーボン中水型複エマルション。この逆エマルションは高フッ素化または過フッ素化化合物である連続相と、不連続水相と、フッ素化界面活性剤または界面活性剤混合物とを含む。また、複エマルションは連続水相と、高フッ素化または過フッ素化化合物中に分散された水滴から形成される小球を含む不連続相とを含む。これらのエマルションは薬理活性物質を含むことができ、特に肺薬物送達に適する。

Description

【発明の詳細な説明】安定なフルオロカーボン逆エマルションおよび複エマルション発明の分野本発明は、安定なフルオロカーボン中水型(water-in-fluorocarbon)逆エマルションおよびフルオロカーボン逆エマルションを含む水中フルオロカーボン中水型(water-in-fluorocarbon-in-water)複エマルションに関する。また、本発明はフルオロカーボン逆エマルションへの薬物の導入と、これらエマルションの製造と投与の方法に関する。発明の背景従来の正(direct)エマルションは連続水相中に小滴の形で分散された油相から成る。フルオロカーボンが油相となるフルオロカーボン正エマルションは種々の生物医学の用途に使用されている。フルオロカーボンの酸素運搬能が高いので、このようなフルオロカーボンエマルションは特に血管系に酸素を供給するための代用血液として有用である。このエマルションの導入後、フルオロカーボン分散相中に溶解した酸素が血液中に放出される。その他の医療用途には心臓血管疾患および脳血管疾患の治療、冠動脈血管形成術、臓器保存癌治療、および核磁気共鳴、超音波などの診断的用途、獣医学治療が含まれる（Riess J．G.，”Blood Compatible Materials and Devices"：Perspective Towards the 21st Century ，Technomics Publishing Co.，Lancaster，PA，Ch．14，1991；Riess，J．G.， Vox．Sang.，61:225，1991）。従来のフルオロカーボン正エマルションは、例えば欧州特許出願公開第0 255 443号、フランス特許出願公開第2 665 705号、フランス特許出願公開第2 677 360号、フランス特許出願公開第2 694 559号、フランス特許出願公開第2 679 150号、国際出願公開第ＷＯ93/01798号、国際出願公開第ＷＯ90/15807号、欧州特許公開第311473号、および米国特許第3,975,512号に記載されている。薬物の肺投与は、薬物の肺への直接導入が水溶液によって効果的に達成できないため困難な問題である。同じ理由で連続相が水のフルオロカーボン正エマルションは肺への薬物送達(delivery)に適さない。肺換気および薬物経肺投与にフルオロカーボン液を使用する方法はShafferらによって記載され(Art．Blood Subs．and Cells Immob．Biotech.，22:1994 ；Pediatr．Pulmonol.，14：102，1992)、Shafferらが提案したものは固体粉末状の薬物分散液を含む純フルオロカーボン液であった。しかしながら、この組成物はフルオロカーボン相中に粉末薬剤を分散させるので、薬物送達が不均一となり信頼性と再現性に欠けている。国際出願公開第ＷＯ91/18613号には適当な水相を「ガラス」に接触させることによる逆(reverse)エマルションまたは複(multiple)エマルションの生成に有用な自動乳化「ガラス」が記載されている。この文献に記載されたエマルションにはフッ素化界面活性剤も非フッ素化界面活性剤も含まれていない。効果的な肺内薬物送達が可能な安定なフルオロカーボン逆エマルションは開示されていない。欧州特許出願公開第0,250,766号は潤滑剤として使用する油中水型過フッ化ポリエステルミクロエマルションを開示している。それには少量のフルオロカーボン（約１３〜３０体積％）が含まれる。特公昭57−109714号は、抗癌剤を磁性流体と混合し、その結果得られる混合物に磁界を作用させることによって抗癌剤を所望の部位に送達する方法を記載している。この流体は静脈内投与を行うために正エマルション、逆エマルションまたは複エマルションの形にすることができる。また、この文献も肺内薬物送達に適した安定な逆エマルションについては記載していない。このように、制御された様式で均一かつ再現性のある肺内薬物送達が可能な安定なフルオロカーボンエマルションが必要とされている。本発明はこの必要に応えるものである。さらに、フルオロカーボンを連続相とした同じ製剤を、薬物や他の物質を胃腸管、腹腔、胸腔、クモ膜下腔等の他の体腔に送達するためにも利用することができる。発明の概要本発明の一実施態様は、 70〜99.95％（体積／体積）を構成する少なくとも一種の高フッ素化または過フッ素化有機化合物の連続油相と、エマルションの0.05〜30％（体積／体積）である、連続相に分散した本質的に水の不連続相と、フッ素化界面活性剤または少なくとも一種のフッ素化界面活性剤を含む界面活性剤混合物とを水相に含み、界面活性剤の全量がエマルションの0.01〜10％（重量／体積）である、安定な油中水型フルオロカーボンエマルションである。エマルションは連続油相を80〜99.95％（体積／体積）含むことが好ましく、連続油相を90〜99.95％（体積／体積）含むことが最も好ましい。連続油相は、少なくとも一つのヘテロ原子および／または臭素もしくは塩素原子を任意に含む、直鎖、枝分れ鎖、環式の飽和または不飽和フッ化炭化水素などの高フッ素化化合物を含み、前記炭化水素化合物の水素原子の30％以上がフッ素原子で置換されていることが好ましい。また、このエマルションは、フッ素化領域と水素化領域とを有する少なくとも一種の有機化合物をさらに含むことができる。この化合物は式Ｒ_F−Ｗ−Ｒ_Hを有することが有利であり、式中、Ｒ_Fは炭素原子２〜４個を有する直鎖、枝分れ鎖または環式の高フッ素化基であって、少なくとも一つの酸素原子、少なくとも一つのハロゲン化置換基またはその両方を任意に含み、Ｒ_Hは最高約１８個までの炭素原子を有する直鎖、枝分れ鎖、環式の飽和または不飽和炭化水素基であって、−Ｏ−または−Ｓ−を任意に含み、Ｗは単結合、または酸素もしくはイオウである。適切には、Ｒ_Fは水素含有基の水素原子の少なくとも３０％をフッ素原子で置換した等価な水素含有基に対応する。また、このエマルションは式Ｒ_F−Ｗ−Ｒ_Hで表される化合物を含んでもよく、式中、Ｒ_FはＣＦ₃−（ＣＦ₂）_t（１≦t≦１１）、Ｗは単結合、Ｒ_Hは炭素原子１〜１８個を有するアルキル基である。本発明のエマルションの形成に有用なフッ素化界面活性剤は少なくとも４個のフッ素原子を含むことが望ましい。このフッ素化界面活性剤は異なるタイプとすることができる。本発明において使用されると考えられるフッ素化界面活性剤の種類には、例えばアミノ酸誘導体、リン含有両親媒性化合物（例えばペルフルオロアルキルまたはアルキレンモノ−またはジモルホリノホスフェートやフッ素化ホスホリピド）やポリヒドロキシル化またはアミノ化誘導体が含まれる。このようなフッ素化界面活性剤は、例えば欧州特許出願公開第0 255 443号、フランス特許出願公開第2 665 705号、フランス特許出願公開第2 677 360号、フランス特許出願公開第2 694 559号、フランス特許出願公開第2 679 150号、国際出願公開第W090/15807号、および欧州特許出願公開0311473号に記載されている。フッ素化界面活性剤は、式Ｒ_F−Ｒ₁−ＯＰ（Ｏ）［（Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₂）₂Ｏ］₂ で表される（ペルフルオロアルキル）アルキレンジモルホリノホスフェートであることがより好ましく、式中、Ｒ_Fは炭素原子２〜１２個を有する直鎖、枝分れ鎖または環式の高フッ素化基であって、少なくとも一つの酸素原子および／または少なくとも一つのＣｌまたはＢｒを任意に含み、Ｒ₁は、少なくとも一つの酸素原子および／または少なくとも一つのイオウ原子を任意に含む飽和または不飽和の直鎖または枝分れ鎖炭化水素である。本実施態様の他の態様によれば、フッ素化界面活性剤は、（ペルフルオロアルキル）アルキレンモノ−またはジモルホリノホスフェート、好ましくは５−（ペルフルオロオクチル）ペンチルジモルホリノホスフェート、２−（ペルフルオロオクチル）ウンデシルジモルホリノホスフェートまたは11−（ペルフルオロオクチル）ウンデシルジモルホリノホスフェートである。あるいは、本エマルションは少なくとも一つのフッ素化界面活性剤と少なくとも一つの水素化界面活性剤とを含むことができる。この水素化界面活性剤は、ホスホリピド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン型共重合体またはポリオキシエチレンのソルビタンエステルであることが好ましい。また、このエマルションは、鉱物塩、緩衝剤、溶媒および分散剤、膨張(oncot ic)剤および浸透剤、栄養剤、親水性または親油性薬理活性物質の添加剤の一つ以上をさらに含んでもよく、該物質は、水相、油相、相の界面、またはこれらの相の両方に存在する。この添加剤は水溶性または水分散性薬理活性物質であることが好ましく、この薬理活性物質は、抗生物質、抗結核剤、抗ミコバクテリア剤、抗癌剤、肺血管作用薬、粘液溶解薬(mucolytic agent)、抗ウイルス剤、薬剤活性ぺプチド、核酸、遺伝物質、免疫活性剤(immuno active agent)または界面活性剤であることが最も好ましい。この肺血管作用物質は肺血管作用気管支拡張剤または呼吸刺激剤とすることができる。本発明の他の実施態様は、（ａ）フッ素化界面活性剤または少なくとも一つのフッ素化界面活性剤を含む界面活性剤混合物を高フッ素化または過フッ素化連続相に可溶化または分散する段階と、（ｂ）一つ以上の分散剤または添加剤を任意に含む水相を段階（ａ）の連続相生成物に添加してフルオロカーボンと水相の混合物を形成する段階と、（ｃ）段階（ｂ）の混合物を乳化してフルオロカーボン中水型逆エマルションを形成する段階とを含むフルオロカーボン中水型逆エマルションを製造する方法である。この方法はこの逆エマルションを熱処理またはろ過によって滅菌する段階をさらに含んでもよい。この乳化段階（ｃ）は機械的ホモジナイゼーションによって実施されることが好ましい。また、本発明は上記の逆エマルションと少なくとも一つの界面活性剤を分散させた水相とを含む水中フルオロカーボン中水型複エマルションも提供する。さらに、逆エマルションまたは複エマルションの内部水性区画(internal aque ous compartment)は、ミセル、小胞、または特にこの内部空間をさらに区画化することができる他のコロイド状アグリゲートを含むことができる。また、本発明は、連続油相がフッ素化領域と水素化領域を有する少なくとも一つの有機化合物をさらに含む上記の複エマルションも提供する。この複エマルションは、式Ｒ_F−Ｗ−Ｒ_Hで表される化合物を含むことが好ましく、式中、Ｒ_FはＣＦ₃−（ＣＦ₂）_t（１≦t≦１１）、Ｗは単結合、Ｒ_Hは炭素原子１〜１８個を有する飽和または不飽和アルキル基である。この好ましい実施態様の他の態様において、フッ素化界面活性剤は式Ｒ_F−Ｒ₁−ＯＰ（Ｏ）［（Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₂）₂ Ｏ］₂で表される（ペルフルオロアルキル）アルキレンジモルホリノホスフェートであることがより好ましく、式中、Ｒ_Fは炭素原子２〜１２個を有する直鎖、枝分れ鎖または環式の高フッ素化基であって、少なくとも一つの酸素原子および／またはＣｌおよびＢｒから選ばれる１個以上のハロゲン原子を任意に含み、Ｒ₁ は、少なくとも一つの酸素原子および／または少なくとも一つのイオウ原子を含む飽和または不飽和の直鎖または枝分れ鎖炭化水素である。この複エマルションは少なくとも一つのフッ素化界面活性剤と少なくとも一つの水素化界面活性剤とを含むようにすると有利である。この水素化界面活性剤は、ホスホリピド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン型共重合体またはポリオキシエチレンのソルビタンエステルのいずれかにすると有利である。さらに、フッ素化界面活性剤はペルフルオロアルキルホスファチジルコリンまたはペルフルオロアルキルアミンオキシドとすることができる。また、フッ素化界面活性剤は（ペルフルオロアルキル）アルキレンモノ−またはジモルホリノホスフェートであることが好ましく、このフッ素化界面活性剤は11−（ペルフルオロオクチル）ウンデシルジモルホリノホスフェートまたは2−（ペルフルオロオクチル）エチルジモルホリノホスフェートであることがより好ましい。さらにまた、複エマルションは、鉱物塩、溶媒および分散剤、緩衝剤、膨張剤および浸透剤、栄養剤、親水性または親油性薬理活性物質の添加剤の一つ以上をさらに含むことができ、該物質は、内部もしくは外部の水相、油相、相の界面、またはこれらの相のいずれにも存在する。添加剤は親水性または親油性薬理活性物質であることが好ましい。この好ましい実施態様の他の態様によれば、薬理活性物質は、抗生物質、抗結核剤、抗ミコバクテリア剤、抗癌剤、肺血管作用物質、粘液溶解剤、抗ウイルス剤、遺伝物質、免疫活性剤または界面活性剤である。本発明の他の実施態様は、（ａ）フッ素化界面活性剤または少なくとも一つのフッ素化界面活性剤を含む界面活性剤混合物を高フッ素化または過フッ素化連続相に可溶化または分散する段階と、（ｂ）一つ以上の助溶媒、分散剤および活性添加剤を任意に含む水相を段階（ａ）の連続相生成物に添加してフルオロカーボンと水相の混合物を形成する段階と、（ｃ）段階（ｂ）の混合物を乳化してフルオロカーボン中水型逆エマルションを形成する段階と、（ｄ）前記逆エマルションをフッ素化または非フッ素化界面活性剤と任意に活性物質を含めた他の添加剤とを含む水溶液または分散液に添加する段階と、（ｅ）段階（ｄ）の混合物を乳化して水中フルオロカーボン中水型複エマルションを形成する段階とを含む水中フルオロカーボン中水型複エマルションを製造する方法である。また、本発明は、上記の複エマルションのいずれかを水または水性媒体または極性溶媒で希釈する段階を含む、活性剤の濃度を調整する方法も提供する。内部水性区画は、ミセル、小胞、または他のコロイド状アグリゲートを含むことが好ましい。発明の詳細な説明本発明は、水相の小滴を中に分散させたフルオロカーボン連続相を含む安定な逆エマルションを提供する。この逆エマルションは親水性または親油性薬剤を含むことができ、それによって肺経路および他の経路をとおして薬剤を投与するためのビヒクルを構成する。従って、本発明のフルオロカーボン逆エマルションを使用する薬剤の投与方法は、肺および他の体腔の中に薬剤を均一に分散させて薬剤を徐放させる方法を提供するので、重要な前進となる。フルオロカーボン連続相の高フッ素化または過フッ素化有機化合物は、その毒性、表面張力および拡散係数(spreading coeficient)の低さによって選択され得る。フッ素化界面活性剤または少なくとも一つのフッ素化界面活性剤を含む界面活性剤混合物を使用すると、安定な逆エマルションの形成が可能となる。本発明によれば、安定なフルオロカーボン逆エマルションは、高フッ素化または過フッ素化有機化合物から成る連続油相70〜99.95％（体積／体積）と、連続油相に小滴の形態で分散した水相0.05〜30％（体積／体積）と、フッ素化界面活性剤または少なくとも一つのフッ素化界面活性剤を含む界面活性剤混合物0.01〜 10％（重量／体積）とを含む。水相の体積百分率とフルオロカーボン油相の体積百分率には、それらが含む界面活性剤が含まれる。好ましい実施態様において、本発明の逆エマルションは連続油相を80〜99.95 ％（体積／体積）、より好ましくは90〜99.95％（体積／体積）含む。この高フッ素化または過フッ素化化合物は直鎖、枝分れ鎖または環式の飽和または不飽和フルオロカーボンとすることができる。また、本発明はこれらの化合物の従来の構造誘導体の使用も含む。加えて、これらの完全フッ素化または部分フッ素化化合物は一つ以上のヘテロ原子および／または臭素原子もしくは塩素原子を含むことができる。「部分フッ素化」の語は炭化水素またはその誘導体の水素原子の30％以上がフッ素原子で置換されていることを指す。一般にこれらの炭化水素は炭素原子６〜１６個を含む。このようなフッ素化化合物には、直鎖、環式または多環式のペルフルオロアルカン、ペロフルオロアルケン、ペロフルオロアミンおよびペロフルオロアルキルブロミドが含まれるが、これらに限定されない。これらの化合物は単独で、または組み合わせて使用される。本発明の好ましい実施態様において、フッ素化化合物はペロフルオロオクチルブロミドＣ₈Ｆ₁₇ Ｂｒ（ＰＦＯＢ）またはペロフルオロオクチルエタンＣ₈Ｆ₁₇Ｃ₂Ｈ₅（ＰＦＯＥ）から成る。さらに、フルオロカーボン連続相には少なくとも一つのフッ素化領域と少なくとも一つの水素化領域を有する化合物、例えば式Ｒ_F−Ｗ−Ｒ_Hで表される化合物が含まれてもよく、式中、Ｒ_Fは、少なくとも一つの酸素原子および／または少なくとも一つのハロゲン化置換基を任意に含む、炭素原子約２〜約１４個を有する直鎖、枝分れ鎖または環式の高フッ素化基であり、Ｒ_Hは、−Ｏ−または−Ｓ −基を任意に含む、最高約１８個までの炭素原子を有する直鎖、枝分れ鎖または環式の飽和または不飽和炭化水素基であり、Ｗは、単結合、酸素またはイオウである。好ましい実施態様において、フッ素化および水素化化合物のＲ_FはＣＦ₃（ＣＦ₂ ）_tであり、式中、tは１〜１１、Ｗは単結合、Ｒ_Hは炭素原子１〜１８個の飽和または不飽和アルキル基である。他の好ましい実施態様において、本発明のエマルションを形成するのに役立つフッ素化界面活性剤は少なくとも４個のフッ素原子を含む。このフッ素化界面活性剤は異なるタイプから成っていてもよい。本発明に使用されると考えられるフッ素化界面活性剤の種類には、例えばアミノ酸誘導体、リン含有両親媒性化合物（例えば（ペルフルオロアルキル）アルキレンモノ−またはジモルホリノホスフェートやフッ素化ホスホリピド）や、アミンオキシドなどのポリヒドロキシル化またはアミノ化誘導体が含まれる。このようなフッ素化界面活性剤は、例えば欧州特許出願公開第0255443号、フランス特許出願公開第2665705号、フランス特許出願公開2677360号、フランス特許出願公開第2694559号、フランス特許出願公開第2679150号、国際出願公開第W090/15807号、米国特許第3,828,085号および欧州特許出願公開第0311473号に記載されている。特に好ましい実施態様において、本発明の逆エマルションは、式Ｒ_F−Ｒ₁−ＯＰ（Ｏ）［（Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₂）₂Ｏ］₂で表される（ペルフルオロアルキル）アルキレン界面活性剤を含み、式中、Ｒ_Fは前述の通りであり、Ｒ₁は、少なくとも一つの酸素および／またはイオウ原子を含んでもよい飽和または不飽和の直鎖または枝分れ鎖炭化水素である。フッ素化界面活性剤はまた、水素化界面活性剤、非イオン界面活性剤、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤または両性イオン界面活性剤と組み合わせることもできる。このような水素化界面活性剤は、例えばホスホリピド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン型共重合体（例えばプルロニック(Pluronic) また、本発明の逆エマルションは、小滴の形態で分散された水相、フルオロカーボン相、これらの両相、またはその相の界面に存在する１種以上の添加剤も含んでよい。この添加剤は、例えば鉱物塩、緩衝剤、膨張剤および浸透剤、栄養剤、有効成分、薬剤活性物質、核酸、遺伝物質、免疫活性剤、または、安定性、治療効果および許容性を含む逆エマルションの有利な性質を増強する他の成分も含む。好ましい実施態様において、逆エマルションの水相に分散された薬理活性物質を含む、薬物肺投与のための医薬が提供される。適当な生理活性物質の例は、ゲンタマイシン、エリトロマイシンおよびドキシサイクリンなどの抗生物質、ピラジナミド、エタンブトールおよびイソニアジドなどの抗結核性抗ミコバクテリア剤、シスプラチン、シクロホスファミド、５−フルオロウラシルおよびドキソルビシンなどの抗癌性化合物、トラゾリンなどの肺血管作用物質および肺高血圧の調節剤、ドキサプラムなどの呼吸刺激薬、エピネフリンおよびテオフィリンなどの血管作用性気管支拡張薬、アセチルシステインなどの粘液溶解剤、リバビリン (ribavirin)などの抗ウイルス剤、およびジパルミトイルホスファチジルコリンなどの界面活性剤である。通常、本発明の逆エマルションは、機械的撹拌により、フッ素化界面活性剤または界面活性剤混合物をフルオロカーボン相中に可溶化または分散し、界面活性剤、分散剤または添加剤の一つ以上を含んでもよい適量の水相をフルオロカーボン相に添加し、例えばミクロ流動化(microfluidization)、音波処理または圧力下におけるホモジナイゼーションなどの従来のホモジナイゼーションによってこの混合物を乳化することにより製造される。ある状況においては、フッ素化界面活性剤を用いて単純な撹拌だけによって水分含量の低い逆エマルションが製造され、高圧ホモジナイゼーションが必要ないことがある。本発明の逆エマルションは、例えば121℃で15分間オートクレーブにかけることによって、または0.22μmフィルタでろ過することによって滅菌することができる。また、都合のよいことにはこの逆エマルションはフルオロカーボンで希釈して用量・用法を非常に容易に調整することもできる。この逆エマルションをまた、第二連続水相内にフルオロカーボン小球の形で分散させ、各小球が分散された第一水相の小滴を含むように構成することもできる。このような複エマルションは、逆エマルションを上記の少なくとも一つのフッ素化または非フッ素化界面活性剤を分散させた水相に添加することによって製造することができる。複エマルションの形成に使用される界面活性剤の量は、使用される水相と逆エマルション相の量による。通常、逆エマルションの50％〜99.9 5％（体積／体積）を占める水相に対して使用する界面活性剤の量は水相の約0.0 1〜約10％（重量／体積）である。また、第二連続相は例えばグリコール、グリセロール、ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシド、ならびに鉱物塩、緩衝剤、膨張剤および浸透剤、栄養剤、親水性または親油性薬理活性物質から成るグループから選択される添加剤をも含んでもよく、これらの化合物は水相、油相、相の界面、または両相中に存在する。また、逆または複エマルションのいずれか一方の内部水性区画は、活性物質の捕捉と放出の制御にさらに寄与することを考慮して、ミセル、小胞または他のコロイド状アグリゲートをも含むことができる。本発明のフルオロカーボン逆エマルションの調製法を以下の実施例に記載する。水相の体積百分率とフルオロカーボン油相の体積百分率はそれらに含まれる界面活性剤を含む。実施例１ＰＦＯＢ（95体積／体積％）、水（５体積／体積％）、Ｆ８Ｃ１１ＤＭＰ（0.6 重量／体積％）、高圧ホモジナイゼーション、ラニー(Rannie) 11−（Ｆ−オクチル）ウンデシルジモルホリノホスフェート（Ｆ８Ｃ１１ＤＭＰ、Ｃ₈Ｆ₁₇Ｃ₁₁Ｈ₂₂ＯＰ（Ｏ）［（Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₂）Ｏ］₂(0.60g)をペルフルオロオクチルブロミド（ＰＦＯＢ）（95 mL、182.4g）中に機械的撹拌（ウルトラ−タラックス(Ultra-Turrax)T25 IKA、５分間）によって分散させた。フルオロカーボン相に精製水（5 mL）を滴下して撹拌しながら加えた。次に、混合物を機械的撹拌（ウルトラ−タラックス、５分間）によって予備乳化した。こうして得られた予備エマルションを高圧下でホモジナイゼーションした（ラニーミニ− ラブ(Rannie Mini-Lab)8.30H、 APVラニー、15分間、5000〜8000 psi）。その結果得られた逆エマルションは極めて流動性で乳光を放った。調製後直ちに測定した平均粒径は600±350 nmであった（レーザ光散乱法）。４日後に遠心沈降法によって測定した平均粒径は2±0.2μmであった。4℃または25℃に１ヶ月間保存したが、その間に粒径の有意な変化はこれ以上観察されなかった。実施例２ＰＦＯＢ（95体積／体積％）、水（5体積／体積％）、Ｆ８Ｃ２ＤＭＰ（0.6重量／体積％）、音波処理 2−（Ｆ−オクチル）エチルジモルホリノホスフェート（Ｆ８Ｃ２ＤＭＰ、Ｃ₈ Ｆ₁₇Ｃ₂Ｈ₄ＯＰ（Ｏ）［（Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₂）₂Ｏ］₂（0.15 g）をロゼット・セルに入れ、ＰＦＯＢ（23.75mL、45.6g）中に機械的撹拌（ウルトラ−タラックス、 2分間）によって分散させた。精製水（1.25mL）をフルオロカーボン相に加えた。次にこの混合物を音波処理（ブランソン(Branson)B30、チタンプローブ、３mm 径、出力４、パルスモード50％、10分間、0〜5℃）によって乳化した。その結果得られた逆エマルションは極めて流動性で、色はやや白く、平均粒径は0.3μmであった（遠心沈降法）。このエマルションの逆性はメチレンブルー添加後、位相差顕微鏡観察によって確認した。25℃で３ヶ月保存後のこのエマルションの平均小滴径は約１μmであった。実施例３ＰＦＯＢ（97体積／体積％）、水（3体積／体積％）、Ｆ８Ｃ１１ＤＭＰ（0.6重Ｆ８Ｃ１１ＤＭＰ（0.012 g）をＰＦＯＢ（1.94 mL）中に機械的撹拌（ウルトラ−タラックス T25 IKA、１分間）によって分散させた。精製水（0.06 mL）をフルオロカーボン相に滴下して撹拌しながら加えた。混合物を機械的撹拌（ウルトラ−タラックス、５分間）によって予備乳化した。こうして得られた予備エマルションを高圧下でホモジナイゼーションした（エマルシフレックス-B3、8000p si、3〜7回通過）。その結果得られた逆エマルションは流動性で乳光を放った。 25℃で１ヶ月保存後に相分離は見られなかった。実施例４ＰＦＯＢ（99.8体積／体積％）、水（0.2体積／体積％）、Ｆ８Ｃ２ＤＭＰ（0.6 重量／体積％）、機械的撹拌を行わない分散Ｆ８Ｃ２ＤＭＰ（0.15 g）を精製水（0.05 mL）で１時間水和させた。次にこの混合物をＰＦＯＢ（24.95mL、47.9 g）中に分散させてフルオロカーボン連続相を有する半透明の分散液を得た。機械的撹拌も音波処理も使用しなかった。エマルション調製後に測定した小滴の平均径は約100 nmであった（レーザ光散乱法）。25℃で１ヶ月保存後に粒径の変化は見られなかった。表Ｉに種々の配合を使用した逆エマルションの実施例を列挙する。実施例５〜９は実施例２に記載した音波処理によって調製した。実施例１０〜１７は実施例３に記載した高圧ホモジナイゼーション（エマルシフレックス−B3）によって調製した。実施例１８ＰＦＯＢ（97体積／体積％）、水（3体積／体積％）、Ｆ８Ｃ１１ＤＭＰ（0.6重量／体積％）、塩化アセチルコリン（0.125重量／体積％）、高圧ホモジナイゼーション実施例１１のように、ＰＦＯＢ（1.94 mL）中にＦ８Ｃ１１ＤＭＰ（0.012 g）を機械的撹拌によって分散させた。塩化アセチルコリン0.125％（重量／体積）を含む精製水（0.6 mL）をフルオロカーボン相に滴下して撹拌しなから加えた。次に、この混合物を実施例３のように予備乳化および乳化した。その結果得られた逆エマルションは流動性でやや青かった。25℃で少なくとも１ヶ月保存後には相分離は見られなかった。実施例１９ＰＦＯＢ（95体積／体積％）、水（5体積／体積％）、Ｆ８Ｃ１１ＤＭＰ（0.6重量／体積％）、およびピラジンアミド（0.05重量／体積％）、高圧ホモジナイゼーションピラジンアミド（0.05 g）を精製水（5 mL）に溶解した。次に、実施例１に記載した方法に従った。ＰＦＯＢおよびＦ８Ｃ１１ＤＭＰの量、ならびに乳化条件は実施例１と同一とした。その結果得られた逆エマルションは透明でやや青かった。調製直後に測定した平均小滴径は40±35 nmであった（レーザ光散乱法）。このエマルションは4℃または25℃で少なくとも１週間、粒径に測定可能な変化が無く安定であった。実施例２０ＰＦＯＥ（95体積／体積％）、水（5体積／体積％）、Ｆ８Ｃ２ＤＭＰ（0.6重量（0.02重量／体積％）Ｆ８Ｃ２ＤＭＰ（0.15 g）をＰＦＯＥ（23.75 mL、45.6 g）中に機械的撹拌（３分間）によって分散させた。次に、プルロニック-F68（0.25 g）とエピネフリン（5 mg）を精製水（1.25 mL）に機械的撹拌によって共分散させた。この分散液をフルオロカーボン相に添加した。この混合物を実施例２に記載したプロトコルに従って音波処理によって乳化した。その結果得られた逆エマルションは平均粒径が0.60μmであった（遠心沈降法）。25℃に３ヶ月間保存後の粒径は0.80μm であった。実施例２１ＰＦＯＥ（70体積／体積％）、Ｆ４Ｈ８Ｅ（20体積／体積％）、Ｆ６Ｈ１０（5 体積／体積％）、水（5体積／体積％）、Ｆ８Ｃ１１ＤＭＰ（1重量／体積％）、プレドニゾン（0.02重量／体積％）。ステロイド系副腎皮質抗炎症剤のプレドニゾン（0.02重量／体積％）をペルフルオロブチル−1−デセン（Ｃ₄Ｆ₉ＣＨ＝ＣＨＣ₈Ｈ₁₇、Ｆ４Ｈ８Ｅ、２mL）にゆるやかな加温撹拌によって溶解した。次に、ペルフルオロヘキシルデカン（Ｃ₆ Ｆ₁₃Ｃ₁₀Ｈ₂₁、Ｆ６Ｈ１０、0.5mL）を加えた後、室温でペルフルオロオクチルエタン（Ｃ₈Ｆ₁₇Ｃ₂Ｈ₅、ＰＦＯＥ、7 mL）を加え、さらにＦ８Ｃ１１ＤＭＰを加えた（0.5 g）。水（0.5 mL）をこの溶液にウルトラ−タラックスで撹拌しながら加えた。この混合物を実施例２に記載したプロトコルに従って音波処理によって乳化して、やや白いプレドニゾン含有逆エマルションを得た。実施例２２逆エマルションの生物学的許容性実施例７に記載した逆エマルションをマウス１０匹に腹腔内注入した（12.5mL /kg/匹）。１ヶ月後、すべてのマウスが生存していた。この期間中、行動や成長に異常は見られなかった。実施例２３および２４にフッ素化界面活性剤を含む水中フルオロカーボン中水型複エマルションについて記載する。実施例２３ＰＦＯＢ（45体積／体積％）／水（55体積／体積％）、Ｆ８Ｃ２ＤＭＰ（0.6重量／体積％）、および卵黄ホスホリピド（1重量／体積％）Ｆ８Ｃ２ＤＭＰ（0.3 g）をＰＦＯＢ（22.5 mL、43.2 g）中に機械的撹拌（５分間）によって分散させた。精製水（2.5 mL）をフルオロカーボン相に加えた。実施例２に記載したように、音波処理によって乳化を行った。フルオロカーボン中水型逆エマルションが得られた。この逆エマルション（10 mL）を卵黄ホスホリピド（精製水10 mL中に0.2 g）の水分散液に滴下して加えたところ、乳白色のエマルションが得られた。光学顕微鏡観察によって、連続相に分散したより大きい小胞中に微小滴が示された。メチレンブルー試験（微小滴と連続相の着色）によって、このエマルションが水中フルオロカーボン中水型三相エマルションであることが分かった。フルオロカーボン小胞の平均粒径は約8〜10μmであり、水滴の平均粒径は＜１μmであった。加熱滅菌（121℃、15分間、10⁵ Nm^-2）後と25℃ １ヶ月保存後のフルオロカーボン小胞の粒径に変化は見られなかった。実施例２４ＰＦＯＢ（47.5体積／体積％）／水（52.5体積／体積％）、Ｆ８Ｃ１１ＤＭＰ（ 0.3重量／体積％）、および卵黄ホスホリピド（１重量／体積％）実施例１に記載したように調製した逆エマルション（1 mL）を天然ホスホリピド10 mgを含む水分散液1 mLに機械的に撹拌しながら滴下して加えたところ、乳白色の水中フルオロカーボン中水型エマルションが得られた。メチレンブルー試験により連続相が水相であることが示された。

Claims

【特許請求の範囲】１． 70〜99.95％（体積／体積）を構成する少なくとも一種の高フッ素化または過フッ素化有機化合物の連続油相と、エマルションの0.05〜30％（体積／体積）である、前記連続相中に分散した不連続水相と、フッ素化界面活性剤または少なくとも一種のフッ素化界面活性剤を含む界面活性剤混合物とを含み、界面活性剤の全量がエマルションの0.01〜10％（重量／体積）であることを特徴とする安定な油中水型フルオロカーボンエマルション。２．連続油相を80〜99.95％（体積／体積）含む請求の範囲第１項に記載のエマルション。３．連続油相を90〜99.95％（体積／体積）含む請求の範囲第１項に記載のエマルション。４．少なくとも一つのヘテロ原子および／または臭素もしくは塩素原子を任意に含む、直鎖、枝分れ鎖、環式、飽和および不飽和のフッ化炭化水素から成るグループから選択される少なくとも一つの高フッ素化化合物を含み、前記炭化水素の水素原子の30％以上がフッ素原子で置換されている請求の範囲第１項、第２項または第３項に記載のエマルション。５．前記連続油相が、直鎖、環式および多環式のペルフルオロアルカン、ペロフルオロエーテル、ペロフルオロアミンおよびペロフルオロアルキルブロミドから成るグループから選択される少なくとも一つの過フッ素化有機化合物、または（ペルフルオロアルキル）アルカンおよび（ペルフルオロアルキル）アルケンのグループから選択される少なくとも一種のペルフルオロアルキル化化合物を含む請求の範囲第１項ないし第４項のいずれか一項に記載のエマルション。６．前記連続油相がフッ素化領域と水素化領域とを有する少なくとも一種の有機化合物をさらに含む請求の範囲第１項ないし第５項のいずれか一項に記載のエマルション。７．フッ素化および水素化化合物が式Ｒ_F−Ｗ−Ｒ_Hで表され、式中、Ｒ_Fは炭素原子２〜１４個を有する直鎖、枝分れ鎖または環式の高フッ素化基であって、少なくとも一つの酸素原子および／または少なくとも一つのハロゲン化置換基を任意に含み、Ｒ_Hは最高約１８個までの炭素原子を有する直鎖、枝分れ鎖、環式、飽和または不飽和の炭化水素基であって、−Ｏ−または−Ｓ−を任意に含み、Ｗは、単結合、酸素またはイオウである請求の範囲第６項に記載のエマルション。８．式Ｒ_F−Ｗ−Ｒ_Hで表される化合物を含み、式中、Ｒ_FはＣＦ₃−（ＣＦ₂）_tであり（１≦t≦１１）、Ｗは単結合、Ｒ_Hは炭素数１〜１８個の飽和または不飽和アルキル基である請求の範囲第７項に記載のエマルション。９．前記フッ素化界面活性剤が、式Ｒ_F−Ｒ₁−ＯＰ（Ｏ）［（Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₂ ）₂Ｏ］₂で表される（ペルフルオロアルキル）アルキレンジモルホリノホスフェートであり、式中、Ｒ_Fは、炭素原子２〜１２個を有する直鎖、枝分れ鎖または環式の高フッ素化基であって、少なくとも一つの酸素原子および／または塩素または臭素から選択される少なくとも一つのハロゲン原子を任意に含み、Ｒ₁は、少なくとも一つの酸素原子および／または少なくとも一つのイオウ原子を任意に含む飽和または不飽和の直鎖または枝分れ鎖炭化水素である上記請求の範囲各項のいずれか一項に記載のエマルション。１０．前記フッ素化界面活性剤が、ペルフルオロアルキルホスファチジルコリンおよびペルフルオロアルキルアミンオキシドから成るグループから選択される請求の範囲第１項ないし第８項のいずれか一項に記載のエマルション。１１．少なくとも一種のフッ素化界面活性剤と少なくとも一種の水素化界面活性剤を含む上記請求の範囲各項のいずれか一項に記載のエマルション。１２．前記水素化界面活性剤が、ホスホリピド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン型共重合体およびポリオキシエチレンのソルビタンエステルから成るグループから選択される請求の範囲第１１項に記載のエマルション。１３．前記フッ素化界面活性剤が（ペルフルオロアルキル）アルキレンモノ− またはジモルホリノホスフェートである請求の範囲第１項ないし第９項、第１１項および第１２項のいずれか一項に記載のエマルション。１４．前記フッ素化界面活性剤が11−（ペルフルオロオクチル）ウンデシルジモルホリノホスフェートである請求の範囲第１３項に記載のエマルション。１５．前記フッ素化界面活性剤が２−（ペルフルオロオクチル）エチルジモルホリノホスフェートである請求の範囲第１３項に記載のエマルション。１６．前記フッ素化界面活性剤が５−（ペルフルオロオクチル）ペンチルジモルホリノホスフェートである請求の範囲第１３項に記載のエマルション。１７．鉱物塩、緩衝剤、溶媒および分散剤、膨張剤および浸透剤、栄養剤、親水性または親油性薬理活性物質から成るグループから選択される一種または複数の添加剤をさらに含み、前記物質は、水相、油相、相の界面、またはこれらの相の両方に存在する上記請求の範囲各項のいずれか一項に記載のエマルション。１８．前記添加剤が親水性または親油性の薬理活性物質である請求の範囲第１７項に記載のエマルション。１９．前記薬理活性物質が、抗生物質、抗結核剤、抗ミコバクテリア剤、抗癌剤、肺血管作用薬、粘液溶解薬、抗ウイルス剤、遺伝物質、免疫活性剤または界面活性剤であることを特徴とする請求の範囲第１８項に記載のエマルション。２０．（ａ）フッ素化界面活性剤または少なくとも一種のフッ素化界面活性剤を含む界面活性剤混合物を高フッ素化または過フッ素化連続相に可溶化または分散する段階と、（ｂ）一種または複数の助溶媒、分散剤または添加剤を任意に含む水相を段階（ａ）の連続相生成物に添加してフルオロカーボンと水相の混合物を形成する段階と、（ｃ）段階（ｂ）の混合物を乳化してフルオロカーボン中水型逆エマルションを形成する段階とを含むフルオロカーボン中水型逆エマルションを製造する方法。２１．乳化段階（ｃ）が機械的ホモジナイゼーションによって実施される請求の範囲第２０項に記載の方法。２２．請求の範囲第１項ないし第１９項のいずれか一項に記載の逆エマルションを適当な高フッ素化または過フッ素化液体有機化合物で希釈することから成る活性添加剤の濃度を調整する方法。２３．内部水性区画は、ミセル、小胞、または他のコロイド状アグリゲートを含む請求の範囲第１項ないし第１９項のいずれか一項に記載の成分。２４．請求の範囲第１項ないし第１９項のいずれか一項に記載の逆エマルションと、少なくとも一つの界面活性剤を分散させた水相とを含む水中フルオロカーボン中水型複エマルション。２５．連続油相が、フッ素化領域と水素化領域を有する少なくとも一種の有機化合物をさらに含む請求の範囲第２４項に記載の複エマルション。２６．式Ｒ_F−Ｗ−Ｒ_Hで表される化合物を含み、式中、Ｒ_FはＣＦ₃−（ＣＦ₂ ）_t（１≦t≦１１）、Ｗは単結合、Ｒ_Hは炭素原子１〜１８個を有する飽和または不飽和アルキル基である請求の範囲第２５項に記載の複エマルション。２７．前記フッ素化界面活性剤が、式Ｒ_F−Ｒ₁−ＯＰ（Ｏ）［（Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₂）₂Ｏ］₂で表される（ペルフルオロアルキル）アルキレンジモルホリノホスフェートであり、式中、Ｒ_Fは、炭素原子２〜１２個を有する直鎖、枝分れ鎖または環式の高フッ素化基であって、少なくとも一つの酸素原子および／またはＣｌおよびＢｒから選ばれる少なくとも一つのハロゲン原子を任意に含み、Ｒ₁は、少なくとも一つの酸素原子および／または少なくとも一つのイオウ原子を任意に含む、飽和または不飽和の直鎖または枝分れ鎖炭化水素である請求の範囲第２４項、第２５項または第２６項に記載の水中フルオロカーボン中水型複エマルション。２８．少なくとも一種のフッ素化界面活性剤と少なくとも一種の水素化界面活性剤を含む請求の範囲第２４項ないし第２７項のいずれか一項に記載の複エマルション。２９．前記水素化界面活性剤が、ホスホリピド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン型共重合体およびポリオキシエチレンのソルビタンエステルから成るグループから選択される請求の範囲第２８項に記載の複エマルション。３０．前記フッ素化界面活性剤が、ペルフルオロアルキルホスファチジルコリンとペルフルオロアルキルアミンオキシドから成るグループから選択される請求の範囲第２４項、第２５項、第２６項、第２８項または第２９項に記載の複エマルション。３１．前記フッ素化界面活性剤が、（ペルフルオロアルキル）アルキルまたはアルキレンモノ−またはジモルホリノホスフェートである請求の範囲第２４項ないし第２９項のいずれか一項に記載の複エマルション。３２．前記フッ素化界面活性剤が11−（ペルフルオロオクチル）ウンデシルジモルホリノホスフェートである請求の範囲第３１項に記載の複エマルション。３３．前記フッ素化界面活性剤が２−（ペルフルオロオクチル）エチルジモルホリノホスフェートである請求の範囲第３１項に記載の複エマルション。３４．鉱物塩、溶媒および分散剤、緩衝剤、膨張剤および浸透剤、栄養剤、親水性または親油性薬理活性物質から成るグループから選択された一種または複数の添加剤をさらに含み、該物質が内部もしくは外部水相、油相、相の界面、またはこれらの相のいずれにも存在する請求の範囲第２４項ないし第３３項のいずれか一項に記載の複エマルション。３５．前記添加剤が親水性または親油性の薬理活性物質である請求の範囲第３４項に記載の複エマルション。３６．前記薬理活性物質が、抗生物質、抗結核剤、抗ミコバクテリア剤、抗癌剤、肺血管作用物質、粘液溶解剤、抗ウイルス剤、遺伝物質、免疫活性剤または界面活性剤である請求の範囲第３５項に記載の複エマルション。３７．（ａ）フッ素化界面活性剤または少なくとも一種のフッ素化界面活性剤を含む界面活性剤混合物を高フッ素化または過フッ素化連続相に可溶化または分散する段階と、（ｂ）一種または複数の助溶媒、分散剤および活性添加剤を任意に含む水相を段階（ａ）の連続相生成物に添加してフルオロカーボンと水相の混合物を形成する段階と、（ｃ）段階（ｂ）の混合物を乳化してフルオロカーボン中水型逆エマルションを形成する段階と、（ｄ）前記逆エマルションをフッ素化または非フッ素化界面活性剤と任意に活性物質を含めた他の添加剤を含む水溶液または分散液に添加する段階と、（ｅ）段階（ｄ）の混合物を乳化して水中フルオロカーボン中水型複エマルションを得る段階とを含む水中フルオロカーボン中水型複エマルションを製造する方法。３８．請求の範囲第２４項ないし第３６項のいずれか一項に記載の複エマルションを水または水性媒体または極性溶媒で希釈する段階から成る活性剤の濃度を調整する方法。３９．内部水性区画が、ミセル、小胞、または他のコロイド状アグリゲートを含む請求の範囲第２４項ないし第３６項のいずれか一項に記載の組成物。